Sade & Ambiente em Revista, Duque de Caxias, v.3, n.1, p.
16-33, jan-jun 2008
PROBITICOS, PREBITICOS E SIMBITICOS - ARTIGO DE REVISO
Camila de Araujo SteIe '; Mina Albuquerque Ribeiro Alves ; Ricardo Laino Ribeiro
Bacharelando em Nutrio UNIGRANRIO ', Docentes Instituto de Biocincias UNIGRANRIO
RESUMO O presente trabalho, atraves de uma reviso bibliograIica, Iala sobre probioticos, prebioticos e simbioticos, relatando novos conceitos, dose teraputica, os beneIicios que esses ingredientes alimenticios conIerem a saude humana e os possiveis mecanismos envolvidos, discutindo os eIeitos a eles atribuidos baseados em evidncias cientiIicas. A microbiota intestinal humana exerce um papel importante tanto na saude quanto na doena e a suplementao da dieta com probioticos, prebioticos e simbioticos podem assegurar o equilibrio dessa microbiota. Probioticos so microrganismos vivos, administrados em quantidades adequadas, que conIerem beneIicios a saude do hospedeiro. Prebioticos so carboidratos no- digeriveis, que aIetam beneIicamente o hospedeiro, por estimularem seletivamente a proliIerao e/ou atividade de populaes de bacterias desejaveis no colon. Um produto reIerido como simbiotico e aquele no qual um probiotico e um prebiotico esto combinados.
ABSTRACT The present work, through a bibliographical revision, tells about probiotics, prebiotics and simbiotics, reporting new concepts, as the therapeutical dose, the beneIits these Iood ingredients conIer to the health human and the possible mechanisms involved, arguing the eIIect based attributed they in scientiIic evidences. The gut microbiota plays an important role in both human health and disease, and the supplementation oI the diet with probiotics and prebiotics may ensure an appropriate equilibrium oI this microbiota. Probiotics are live microorganisms that, when administered in adequate amounts, conIer a health beneIit on the host. Prebiotics are nondigestible carbohydrates that beneIicially aIIect the host by selectively stimulating the growth and/or activity oI a limited number oI bacteria present in the colon. A product reIerred as symbiotic is one in which probiotics and prebiotics are combined.
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INTRODUO O papel da alimentao nutricionalmente equilibrada na manuteno da saude e preveno de doenas tm despertado interesse pela comunidade cientiIica que produz estudos com o intuito de comprovar a atuao de certos alimentos na preveno de doenas 1 . Em 1991, Ioi regulamentada uma categoria de alimentos denominada de "Foods Ior SpeciIied Health Use" (FOSHU). A traduo desta expresso para o portugus e ~Alimentos Funcionais ou Nutracuticos. Este conceito de alimento Iuncional Ioi desenvolvido pela primeira vez no Japo nos anos 80 2,3 . De acordo com a Resoluo n18 de 30/04/99, da Secretaria de Vigilncia Sanitaria do Ministerio da Saude no Brasil, a deIinio legal de alimento Iuncional e: 'todo aquele alimento ou ingrediente que, alem das Iunes nutricionais basicas, quando consumido como parte da dieta usual, produz eIeitos metabolicos e/ou Iisiologicos e/ou eIeitos beneIicos a saude, devendo ser seguro para consumo sem superviso medica 4 .
Entre esses alimentos Iuncionais esto os probioticos e os prebioticos. Tais alimentos tambem so vistos como promotores de saude e podem estar associados a reduo do risco de doenas crnico degenerativas e no transmissiveis 5 . O trato gastrointestinal alberga o maior numero e a maior diversidade de especies de bacterias dentre aquelas que colonizam o corpo humano. No estmago e no intestino delgado o ambiente e desIavoravel para a colonizao e proliIerao bacteriana, que e reduzida, por ao bactericida do suco gastrico, da bile e da secreo pancreatica, como pelo intenso peristaltismo do intestino delgado. O ileo e um sitio de transio bacteriana, entre a escassa populao bacteriana do jejuno e a densa microbiota do colon. Neste ultimo, as bacterias encontram condies Iavoraveis para sua proliIerao devido a ausncia de secrees intestinais, peristaltismo lento e abundante suprimento nutricional 6 . A populao microbiana do colon alcana 10 10 a 10 12 microorganismos por grama de conteudo luminal. Estima-se a existncia de cerca de 300 a 500 diIerentes especies de bacterias, com composio variada segundo o individuo 6 . Quaisquer modiIicaes no equilibrio populacional deste ecossistema microbiano resultam numa interIerncia nas suas Iunes. Fatores endogenos e exogenos como o uso de antibacterianos, as mudanas alimentares e o estresse podem perturbar a microbiota gastrointestinal, reduzindo suas Iunes, em particular protetoras 7 . Duas vertentes experimentais ou teraputicas podem ser seguidas na tentativa de compensar ou estimular essas Iunes beneIicas da microbiota intestinal: administrao oral de microorganismos viaveis (probioticos) ou ingesto de substratos estimuladores para grupos especiIicos da microbiota normal (prebioticos) 7, 8 .
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Pesquisas recentes nesta area avaliam a viabilidade da adio de substratos de crescimento, ingredientes com atividade prebiotica; desenvolvendo assim, um alimento simbiotico 9 . Esta combinao visa possibilitar a sobrevivncia da bacteria probiotica no alimento e nas condies do meio gastrico, possibilitando sua Iixao e atuao no intestino grosso, sendo que os eIeitos destes ingredientes podem ser adicionados ou sinergicos 4 . Uma microbiota intestinal saudavel e microbiologicamente equilibrada resulta em um desempenho normal das Iunes Iisiologicas do hospedeiro. Este resultado e de suma importncia nos dias de hoje, tendo em vista o crescente numero de individuos que se preocupam em melhorar seus habitos alimentares, assim como os que necessitam de cuidados clinicos nutricionais. Logo, e necessario que enquanto proIissionais de saude tenhamos o conhecimento dos eIeitos beneIicos dos alimentos Iuncionais e da aplicao destes na pratica alimentar, para que possamos de Iorma cientiIicamente embasada incorporar os prebioticos, probioticos e simbioticos no rol de Ierramentas da prescrio clinica e dietetica.
METODOLOGIA O presente trabalho consiste em uma reviso bibliograIica, na qual, sero relatados os eIeitos metabolicos e/ou Iisiologicos e/ou eIeitos beneIicos a saude, os conceitos, as caracteristicas e as aplicaes em alimentos dos prebioticos, probioticos e simbioticos. Foram utilizados como Ionte de pesquisa base de dados (ScientiIic Electronic Library Online - SCIELO e Google Acadmico), publicaes de orgos oIiciais, livros acadmicos da area de Nutrio Clinica e Tecnologia de Alimentos. Optou-se preIerencialmente pelos artigos dos ultimos quinze anos, de lingua portuguesa, inglesa e espanhola.
REVISO BIBLIOGRFICA
PROBITICOS O termo 'probiotico e de origem grega e signiIica 'para a vida. O termo Ioi inicialmente proposto para descrever compostos ou extratos de tecidos capazes de estimular o crescimento microbiano. Posteriormente, Parker deIiniu probiotico como relativo a organismos e substncias que contribuem para o equilibrio microbiano intestinal, esta deIinio era pouco satisIatoria uma vez que a palavra 'substncia poderia incluir suplementos tais como antibioticos 10 . Atualmente, de acordo com Legislao Brasileira, probiotico e deIinido como um suplemento alimentar microbiano vivo que aIeta de maneira beneIica o organismo pela melhora no seu balano microbiano 11 .
CARACTERISTICAS As exigncias que um microorganismo probiotico deve atender so: resistncia ao ambiente acido estomacal, a bile e as enzimas
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pancreaticas; adeso as celulas da mucosa intestinal; capacidade de colonizao; produo de substncias antimicrobianas contra as bacterias patognicas e ausncia de translocao 9 . Entre os probioticos, dois grandes grupos microbianos Ioram particularmente estudados em termos experimentais e clinicos e so comercializados: as bacterias lacticas e as leveduras 7 . No so conhecidos probioticos capazes de se instalarem no ecossistema digestivo, mesmo apos uma ingesto prolongada, ja que a microbiota local impede essa colonizao. Contudo, diversos bioteraputicos sobrevivem durante a sua passagem intestinal como nos casos de Lactobacillus acidophilus, Saccharomvces boulardii e Bifidobacterium 7 . A Tabela I lista as especies que integram os gneros Bifidobacterium e Lactobacillus.
Gnero Lactobacillus O Lactobacillus Ioi isolado pela primeira vez por Moro a partir das Iezes de lactentes amamentados ao peito materno, este investigador atribuiu-lhes o nome de Bacillus acidophilus. Estes microorganismos so geralmente caracterizados como gram-positivos, incapazes de Iormar esporos, desprovidos de Ilagelos, possuindo Iorma bacilar ou cocobacilar, e aerotolerantes ou anaerobios. O gnero compreende, neste momento, 56 especies oIicialmente reconhecidas. As mais utilizadas para Iins de aditivo dietetico so L. acidophilus, L. rhamnosus e L. casei 10 .
Gnero Bifidobacterium As biIidobacterias Ioram isoladas pela primeira vez no Iinal do seculo XIX por TISSIER, sendo, em geral, caracterizadas por serem microorganismos gram-positivos, no Iormadores de esporos, desprovidos de Ilagelos, catalase negativos e anaerobios. Atualmente, o gnero Bifidobacterium inclui 30 especies, 10 das quais so de origem humana, 17 de origem animal, 2 de aguas residuais e 1 de leite Iermentado; esta ultima tem a particularidade de apresentar uma boa tolerncia ao oxignio. Alem da glucose, todas as biIidobacterias de origem humana so capazes de utilizar a galactose, a lactose e a Irutose como Iontes de carbono 10 .
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Lactobacillus Bifidobacterium L. acetotolerans L. fermentum a L. minor B. adolescentis a B. indicum L. acidophilus a L. fructivorans L. murinus B. angulatum a B. infantis a
L. agilis L. fructosus L. oris a B. animalis B. lactis L. alimentarius L. gallinarum L. parabuchneri a B. asteroides B. longum a
L. amvlophilus L. gasseri a L. paracasei a B. bifidum a B. magnum L. amvlovorus L. graminis L. pentosus B. boum B. mervcicum L. avarius L. halotolerans L. pontis B. breve a B. minimum L. bifermentans L. hamsteri L. plantarum a B. catenulatum a B. pseudolongum L. brevis a L. helveticus L. reuteri a B. choerinum B. pullorum L. buchneri a L. hilgardii L. rhamnosus a B. corvneforme B. ruminantium L. casei subsp. L. homohiochii L. ruminis B. cuniculi B. saeculare casei a L. intestinalis L. sake B. dentium a B. subtile L. collinoides L. fensenii a L. salivarius a B. gallicum B. suis L. confusus L. fohnsonii L. sanfrancisco B. gallinarum B. thermohilum L. corvniformis L. kandleri L. sharpeae B. globosum a
L. crispatus a L. kefir L. suebicus B. pseudocatenulatum a
L. curvatus L. kefiranofaciens L. vaccinostercus L. delbrueckii L. malefermentans L. vaginalis a
L. farciminis L. mali L. viridescens 1abela 1 Especies que integram os gneros Lactobacillus e Bifidobacterium
a especies isoladas de Ionte humana 10 .
Levedura Saccharomyces boulardii Apenas duas leveduras so usadas como probioticos, a S. boulardii na medicina humana e a S. cerevisiae na medicina veterinaria. A vantagem de se trabalhar com levedura e que ela pode ser lioIilizada. A S. boulardii e uma levedura no patognica e termotolerante. A ingesto ocorre por via oral e, nestas condies, a levedura e insensivel a ao dos sucos digestivos e de antibacterianos. Esta ultima propriedade e importante, pois algumas terapias associam a administrao de probioticos com o uso de antibacterianos durante inIeces gastrointestinais. A administrao da levedura deve ser realizada de maneira repetida e regular, pois, a levedura no se implanta no tubo digestivo. Dois a cinco dias apos a descontinuao do seu uso, ela no e mais encontrada nas Iezes 12 .
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EFEITOS METABOLICOS, FISIOLOGICOS E/OU EFEITOS BENEFICOS A SAUDE Proteo ecolgica Dentro dos mecanismos de proteo ecologica podemos distinguir dois tipos: os que impedem a multiplicao dos alvos patognicos (antagonismo) e os que inibem a ao patognica (modulao de toxina) 7 . O antagonismo pode ser explicado pelas competies por nutrientes ou por sitios de adeso e pelas produes de metabolitos ou substncias toxicas 13 . Foi demonstrado que um Lactobacillus sp. compete com uma Escherichia coli enteropatognica por adeso no trato digestivo de suinos. O L. acidophilus impede tambem a adeso de microorganismos patognicos em cultura de celulas intestinais humanas. A produo de substncias antimicrobianas por varios probioticos ja Ioi demonstrada. Essas substncias podem ser metabolitos como acidos orgnicos (em particular o acido lactico, ao qual as Samonella sp. so particularmente sensiveis) ou H 2 O 2 7 . Apesar de algumas bacterias poderem tambem modular a produo de toxinas por microorganismos patognicos, essa capacidade e uma propriedade marcante do S. boulardii. Diversos trabalhos mostraram que esse agente e capaz de reduzir em modelos animais ou cultura de celulas intestinais os danos resultantes da ao de toxinas bacterianas de Jibrio cholerae, de Escherichia coli e de Clostridium difficile 7 . DiIerentes Lactobacillus e biIidobacterias tm demonstrado capacidade de unio e 'seqestro de potentes endotoxinas como aIlotoxina B e endotoxina de E. Coli. 14 .
Imunoestimulao Muitos eIeitos probioticos so mediados pela regulao imune, principalmente pelo controle do balano das citocinas pro e antiinIlamatorias e melhora das respostas de imunoglobulina A (IgA). Sabe-se que alguns componentes celulares das biIidobacterias agem como imunomoduladores 9 . Inumeros trabalhos experimentais conIirmaram essa capacidade imunoestimuladora que se traduz por aumento de anticorpos, da atividade de macroIagos, do numero de celulas killer, do numero de celulas T e de interIeron 7 . O uso crescente de antibiotico, como a Mezlocilina, eleva paralelamente o aumento da suscetibilidade a inIeces, pois esses antibioticos alteram a Iuno dos macroIagos. Esta alterao e reconstituida pelo aporte de peptideos de baixo peso molecular, obtidos da Ilora do trato gastrointestinal. Alguns estudos tm demonstrado que o suplemento com probioticos reconstitui os componentes da parede bacteriana, como o peptideoglicano, estimulando a Iuno dos macroIagos 14 .
Efeito trfico na mucosa intestinal As leveduras contm quantidades variaveis de poliaminas (espermidina e espermina), que so necessarias para a sua
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diviso celular, sintese de DNA e de proteinas. Estas seriam responsaveis pelos eIeitos troIicos na mucosa do intestino delgado com aumento da atividade das dissacaridases, do conteudo de DNA da mucosa, da concentrao celular de imunoglobulinas polimericas, de IgA secretora, alem do aumento do componente secretor de IgA nas celulas das vilosidades e criptas. Em estudo realizado no homem, administrou-se, por via oral, o Saccharomvces boulardii na dose de 1 grama diaria por 14 dias a sete voluntarios. Houve aumento da sacarase (82); lactase (77) e maltase (75), corroborando achados encontrados em animais 7 .
Efeito hipocolesterolmico Diversos autores descrevem os eIeitos hipocolesterolmico dos probioticos, tendo assim diIerentes abordagem para esse eIeito beneIico. Alguns probioticos podem exercer eIeitos hipocolesterolmicos, contribuindo para a diminuio do colesterol sanguineo de trs maneiras distintas: utilizando o colesterol no intestino e reduzindo a sua absoro; aumentando a excreo de sais biliares e produzindo acidos graxos volateis no colon que podem ser absorvidos e interIerir no metabolismo dos lipidios no Iigado 15 . Mital e Garg (1995), descrevem que o eIeito hipocolesterolmico e provavelmente exercido pela inibio da enzima 3-hidroxi 3-metilglutaril (HMG) CoA redutase. A HMG CoA redutase e uma enzima taxa-limitante que catalisa o passo principal na biossintese do colesterol endogeno.
Efeito anticarcinognico Varios mecanismos de atuao so sugeridos, incluindo o estimulo da resposta imune do hospedeiro, a ligao e a degradao de compostos com potencial carcinognico, alteraes qualitativas e/ou quantitativas na microbiota intestinal envolvidas na produo de carcinogenos e de promotores (ex: degradao de acidos biliares), produo de compostos antitumorigenos ou antimutagnicos no colon, alterao da atividade metabolica da microbiota intestinal, alterao das condies Iisicoquimicas do colon e eIeitos sobre a Iisiologia do hospedeiro. As biIidobacterias, que colonizam o colon em detrimento dos enteropatogenos, podem ligar-se ao carcinogeno Iinal, promovendo sua remoo atraves das Iezes 16, 13 . Outras evidncias apoiam o papel dos probioticos na reduo do risco de cncer. Esta observao pode ser devido ao Iato de que culturas de acido lactico podem alterar a atividade de enzimas Iecais (por ex.: beta- glicuronidase, azorreductase, nitrorreductase) as quais desempenham um papel no desenvolvimento do cncer de colon 17 . Com o desequilibrio na Ilora intestinal, as bacterias patognicas, exogenas e endogenas podem se desenvolver. A atividade beta-glicuronidase deste tipo de Ilora pode aumentar resultando na liberao de substncias potencialmente carcinognicas. Isto tambem e valido para
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algumas enzimas envolvidas no metabolismo do nitrognio, que podem resultar na degradao do triptoIano, indol, nitratos e aminas secundarias, para derivativos com potencial carcinognico 22 .
Tratamento e preveno de diarria A diarreia modiIica a Iuno normal do trato gastrointestinal como: a digesto, absoro e imunomodulao, para combater as diarreias se usam estrategias como as antibioterapias, que
levam a diminuio da microbiota intestinal no patognica. Os eIeitos dos probioticos na diarreia aguda incluem: produo de substncias antibacterianas (bacteriocinas, lactocinas, biIidinas); produo de acidos graxos que acidiIicam o lumen intestinal, inibindo bacterias e mantendo o bom Iuncionamento da mucosa intestinal; diminuio da permeabilidade intestinal; ao competitiva e imunomodulao com aumento de IgA, regulao de citocinas e da resposta imune 15 . Estudos mostram que a diarreia provocada por antobioticoterapia pode ser prevenida com a ingesto de probioticos contendo Bifidobacterium longum e ainda em associao, de culturas probioticas de Bifidobacterium longum e Saccharomvces boulardii 9 . Na sindrome do intestino irritavel para diminuir o tempo de diarreia, o uso de Lactobacillus acidophillus e biIidobacterias mostrou-se eIiciente 18 .
Melhora da digesto da lactose em humano A boa digestibilidade da lactose no iogurte Ioi extensivamente investigada, e trs hipoteses so geralmente propostas: estimulao da atividade da lactase da mucosa intestinal; tempo de trnsito intestinal reduzido para o iogurte quando comparado com o leite e devido a ao da -galactosidade que aumenta a digesto da lactose e assim reduzem os sintomas da intolerncia a este aucar. Essas Iunes so atribuidas a algumas bacterias probioticas principalmente a Lactobacillus acidophillus 7, 9, 18
Inibio do crescimento de Helicobacter pylori Experimentalmente tem-se demonstrado que o acido latico produzido por L. acidophilus inibe o crescimento in vitro de H. pvlori. Para se comprovar este eIeito em humanos Ioi estudado um grupo de 120 pacientes inIectados por H. pvlori aos quais Ioram administrados uma tripla terapia (rabeprazol amoxicilina claritomicina) durante uma semana e de maneira aleatoria se administrou um cultivo lioIilizado de L. acidophilus. Demonstrou-se uma diIerena signiIicativa nas taxas de erradicao a Iavor do grupo de ensaio (88 no grupo que Iez o uso de L. acidophilus. e 72 no grupo que Iez somente o uso da tripla terapia) 14 .
Produo de vitaminas As biIidobacterias, que tm o crescimento estimulado pelos FOS, so capazes de produzir as vitaminas B1, B2, B6, B12 e
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acidos nicotinico e Iolico 2 .
APLICAO EM ALIMENTOS Os diIerentes probioticos so estudados e comercializados na Iorma de preparaes contendo um unico ou uma combinao de microorganismos. O probiotico deve se apresentar viavel na preparao e manter essa viabilidade no ecossistema digestivo, condio indispensavel para a sua atuao. Os probioticos so comercializados na Iorma de preparaes Iarmacuticas (capsula ou sachet) ou naturais (leite Iermentado ou iogurte). No primeiro caso, a lioIilizao do produto permite manter a viabilidade durante longo periodo de armazenamento na temperatura ambiente 7 . O merito das bacterias do gnero Lactobacillus, em relao aos alimentos, decorre dos resultados de seu comportamento, dos quais se assinalam: sua capacidade de Iermentar aucares, Iormando acido latico abundantemente; sua qualidade termodurica, tornando-a resistente a tratamentos termicos mais baixos; sua alta elaborao de acido latico, elimina de seus substratos, microrganismos competitivos; sua capacidade de Iormar substncias volateis (bacterias heteroIermentativas), altera valores sensoriais de certos alimentos e sua incapacidade de sintetizar a maioria das vitaminas exigidas, impedem seu crescimento, em meios carentes desses nutrientes reguladores 19 . Atualmente os alimentos probioticos existentes so sobremesas a base de leite, leite Iermentado, leite em po, sorvete, iogurte e diversos tipos de queijo, alem de produtos na Iormula de capsulas ou produtos em po para serem dissolvidos em bebidas Irias, sucos IortiIicados, alimentos de origem vegetal Iermentados e maionese 9, 16 .
DOSE TERAPUTICA A utilizao de probioticos se recomenda a qualquer pessoa que queira Iavorecer o equilibrio da microbiota intestinal 15 . Os niveis populacionais do bioteraputico devem ser suIicientemente elevados para ter um impacto no local onde se espera que ele desenvolva a sua Iuno. Em ecologia microbiana, considera-se que um microorganismo inIlui no ecossistema onde ele se encontra, somente quando a sua populao e igual ou superior a 107 unidades Iormadoras de colnias/g ou ml (UFC/g ou UFC/ml) do conteudo. A concentrao em celulas viaveis do probiotico deve ser, portanto, ajustada na preparao inicial, levando-se em conta a capacidade de sobrevivncia do microorganismo, sem se multiplicar no tubo digestivo, e o eIeito de diluio intestinal, de maneira a atingir no minimo 107 UFC/g do conteudo intestinal 7 . Segundo Oliveira e Damin, para a obteno dos eIeitos desejados, as bacterias probioticas devem estar presentes em quantidades adequadas nos produtos; porem, este numero no esta, ainda, bem estabelecido. Em
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geral, dependendo da cepa empregada e do eIeito beneIico desejado, um consumo de bacterias probioticas entre 108 e 1011 UFC dia e recomendado. Segundo Shah, a concentrao de bacterias probioticas sugerida e de 106 UFC/g de produto 9 . Uma dose diaria recomendada e de duas vezes ao dia de 1010 Lactobacillus GG cada dose corresponde (em alimentos comercializados) aproximadamente 80 ml de leite Iermentado 18 .
EFEITOS ADVERSOS A maior parte dos estudos com Lactobacillus, no documentou nenhuma ocorrncia de problemas ou bacteremia por translocao com alimentos suplementados com probioticos. Estudos realizados com a administrao de Lactobacillus e biIidobacterias, na dose de 106-109 UFC/dia por aproximadamente um ano, no apresentaram nenhum eIeito adverso. Markowitz e Bengmark (2002) ressaltam a seguridade de algumas cepas (como Lactobacillus plantarum) mesmo em crianas imunossuprimidas 18 .
PREBITICOS O desenvolvimento dos prebioticos veio da descoberta dos Iatores bifidus, oligossacaridios presentes apenas no leite humano, que Iavorecem a multiplicao de biIidobacterias do recem-nascidos amamentados ao seio 2 . De acordo com legislao brasileira, prebioticos podem ser deIinidos como todo ingrediente alimentar no digerivel que aIeta de maneira beneIica o organismo por estimular seletivamente o crescimento e ou atividade de um ou um numero limitado de bacterias do colon. E uma substncia que modiIica a composio da microbiota colnica de tal Iorma que as bacterias com potencial de promoo de saude tornam-se a maioria predominante 9 .
CARACTERISTICAS Dentre as caracteristicas de um prebiotico temos: resistncia as enzimas salivares, pancreaticas e intestinais, bem como ao acido estomacal; no deve soIrer hidrolise enzimatica ou absoro no intestino delgado; quando atingir o colon deve ser metabolizado seletivamente por numero limitado de bacterias beneIicas; deve ser capaz de alterar a microbiota colnica para uma microbiota bacteriana saudavel e ser capaz de induzir eIeito Iisiologico que seja importante para a saude 2 . Podemos citar entre as substncias prebioticas: lactulose, lactitol, xilitol, inulina e alguns oligossacarideos no digestiveis (ex.: Irutooligossacarideos FOS) 2 . A inulina contem cadeias de duas a 60 unidades de Irutose, enquanto os FOS contem de duas a nove unidades de Irutose que so, as vezes, ligadas a uma unidade de glicose terminal. A Iermentao de FOS e inulina necessita de enzimas especiIicas. BiIidobacterias Iermentam FOS atraves da enzima -Iructosidase e sintetizam as
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inulinases para a degradao da inulina 20 . As Iibras da dieta podem ser classiIicadas como soluveis, insoluveis ou mistas, podendo ser Iermentaveis ou no-Iermentaveis. A nova deIinio de Iibra da dieta sugere a incluso de oligossacarideos e de outros carboidratos no- digeriveis. A inulina e a oligoIrutose, so denominadas de Irutanos. Frutano e um termo generico empregado para descrever todos os oligo ou polissacarideos de origem vegetal e reIere-se a qualquer carboidrato em que uma ou mais ligaes Irutosil-Irutose predominam dentre as ligaes glicosidicas. Os Irutanos do tipo inulina dividem-se em dois grupos gerais: a inulina e os compostos a ela relacionados a oligoIrutose e os FOS A inulina, a oligoIrutose e os FOS so entidades quimicamente similares, com as mesmas propriedades nutricionais. A unica diIerena entre a inulina, a oligoIrutose e os FOS sinteticos e o grau de polimerizao, ou seja, o numero de unidades individuais de monossacarideos que compem a molecula 16 . A inulina e a oligoIrutose so Iibras soluveis e Iermentaveis, as quais no so digeriveis pela u-amilase e por enzimas hidroliticas, como a sacarase, a maltase e a isomaltase, na parte superior do trato gastrointestinal. Como os componentes da Iibra da dieta no so absorvidos, eles penetram no intestino grosso e Iornecem substrato para as bacterias intestinais. As Iibras soluveis so normalmente Iermentadas rapidamente, enquanto as insoluveis so lentamente ou apenas parcialmente Iermentadas. A extenso da Iermentao das Iibras soluveis depende de sua estrutura Iisica e quimica. A Iermentao e realizada por bacterias anaerobicas do colon, levando a produo de acido latico, acidos graxos de cadeia curta e gases. Conseqentemente, ha reduo do pH do lumen e estimulao da proliIerao de celulas epiteliais do colon 16 .
EFEITOS METABOLICOS, FISIOLOGICOS E/OU EFEITOS BENEFICOS A SAUDE Efeito bifidognico A inulina e os FOS apresentam eIeito biIidognico isto e, estimulam o crescimento intestinal das biIidobacterias. As biIidobacterias por eIeito antagonista suprimem a atividade de outras bacterias putreIativas: Escherichia coli; Streptococos faecales; Proteus e outros. Essas bacterias putreIativas com suas enzimas azoredutase e beta-glucoronidase, podem levar a Iormao de substncias toxicas: amnia; aminas; substncias que podem provocar o cncer como as nitrosaminas; estrognios; acidos biliares secundarios; Ienois e cresois 8 . Em pesquisa realizada por Gibson e RoberIroid, voluntarios Ioram mantidos sob dietas estritamente controladas nas quais acrescentaram-se 15 g/dia de inulina ou oligoIrutose durante 15 dias, tendo sacarose como placebo. Os resultados demonstraram que o consumo de inulina e o de oligoIrutose modiIicaram signiIicativamente a composio da
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microbiota Iecal. Foi observado que apos 24 horas de consumo destas dietas o total de biIidobacterias aumentou cerca de cinco vezes para o grupo que consumiu oligoIrutose e oito vezes para o que consumiu inulina. O eIeito biIidognico da inulina Ioi estudado por Kleessen et al. cujos trabalhos demonstraram que o consumo de 20 e 40g/dia de inulina causa signiIicante aumento da contagem de biIidobacterias nas Iezes de crianas (de 107.9 para 108.8 e 109.2, respectivamente). RoberIroid mostra que a relao dose-resposta parece ser dependente do numero de biIidobacterias iniciais e que doses de 4-5g de Irutanos diarias so eIicientes na estimulao do crescimento deste tipo de bacteria 9 . O crescimento de biIidobacterias, estimulado pelos FOS, leva a reduo do pH em virtude da produo de acidos, tendo, como conseqncia, a diminuio no numero de bacterias patognicas ou nocivas, diminuindo conseqentemente a Iormao de metabolitos toxicos 2 .
Aumento da absoro de clcio As substncias prebioticas so Iermentadas no colon pela microbiota local, especialmente biIidobacterias e bacteroides, produzindo alguns gases (CH 4 , H 2 , CO 2 ), acidos orgnicos (como Iumarico e lactico) e acidos graxos de cadeia curta (como acido propinico, acetico e butirico). Esses acidos graxos de cadeia curta so responsaveis pela diminuio do pH do lumen intestinal, o que ocasiona aumento da concentrao de minerais ionizados, como conseqncia ha aumento na solubilidade do calcio e um subseqente estimulo a sua diIuso passiva e ativa 9 . Atraves da produo de acido butirico, que leva ao aumento do crescimento e da proliIerao celular, os FOS podem inIluenciar indiretamente o aumento da absoro de calcio; alem de tambem poderem inIluenciar o transporte ativo de calcio, pois este acido graxo aumenta a atividade do receptor 9 . Coudray et al. demonstraram o eIeito da inulina e da oligoIrutose na absoro de calcio dietetico. Nove homens jovens ingeriram diariamente 850mg de calcio e receberam suplemento de 40 g/dia de inulina; Ioi observado aumento de cerca de 12 na absoro de calcio, medido por tecnica de isotopo duplo, sem nenhuma alterao signiIicativa na excreo urinaria. Abrams e GriIIin analisaram a absoro de calcio pela aplicao de uma mistura de 8g de inulina oligoIrutose ou placebo (sacarose) em suco de laranja IortiIicado com calcio, em 29 meninas adolescentes, entre 11 e 14 anos. A ingesto de calcio correspondia a 1500 mg/dia, durante 3 semanas. O consumo de prebiotico resultou em um aumento relativo de 18 na absoro de calcio e absoluto de 90mg/dia, medidos atraves do metodo de isotopo estavel duplo 2 .
Diminuio da translocao bacteriana
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A translocao bacteriana e de suas endotoxinas pode ocorrer a partir do intestino, atraves das celulas M, por via paracelular, entre os enterocitos quando ocorrem injurias que causam ruptura nas junes de ocluso ou por via transcelular, atraves dos enterocitos. No colon as bacterias probioticas degradam as Iibras e produzem uma serie de nutrientes incluindo os acidos graxos de cadeia curta, que estimulam o crescimento da mucosa, reduzem a translocao e estimulam a deIesa intestinal 20 .
Diminuio do risco de cncer de clon Estudos com ratos mostraram que a administrao de oligoIrutose e inulina na dieta suprimiu signiIicativamente o numero de Iocos de criptas aberrantes no colon, quando comparado a dieta controle. Criptas aberrantes so leses precursoras putreIativas, a partir das quais os adenomas e carcinomas podem se desenvolver no colon. Essa inibio era mais pronunciada em ratos alimentados com inulina do que naqueles que recebiam oligoIrutose. O papel desempenhado pela inulina e a oligoIrutose na reduo da Iormao das criptas aberrantes, um marcador pre-neoplasico precoce do potencial maligno no processo de carcinognese do colon, sugere que eles tm potencial para suprimir a carcinognese no colon. Essa preveno provavelmente ocorre atraves da modiIicao da microbiota do colon. Entretanto, no ha evidencias em humanos de que os prebioticos sejam capazes de prevenir a iniciao do cncer de colon 16 .
Efeito fibra A inulina e a oligoIrutose so Iibras alimentes soluveis. Fibras soluveis so carboidratos no digeriveis pelo organismo humano, que ocasionam reduo da glicemia pos-prandial e da concentrao de acidos graxos livres e dos niveis de colesterol plasmatico. Fibras soluveis tambem seqestram sais biliares e desta Iorma contribuem para reduo dos niveis de colesterol 9 . Como resultado do consumo de FOS existe uma melhora da Iuno intestinal, devido ao eIeito de Iibra alimentar, conseqentemente ha um aumento da massa Iecal, da Ireqncia de evacuao e diminuio da constipao 2 .
Outros efeitos Por no serem Iermentados, os prebioticos, auxiliam na preveno de caries dentarias e podem ter eIeito laxativo devido a estimulao do crescimento microbiano, com conseqente aumento do peristaltismo 9 .
APLICAO EM ALIMENTOS Os prebioticos podem incluir Ieculas, Iibras dieteticas, outros aucares no absorviveis, alcoois do aucar e oligossacarideos. Os oligossacarideos so encontrados como componentes naturais de varios alimentos, como Irutas, vegetais, leite e mel 9 . Os Irutanos so os polissacarideos no-
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estruturais mais abundantes na natureza, apos o amido. Eles esto presentes em grande variedade de vegetais e, tambem, em algumas bacterias e Iungos 16 . Entre os oligossacaridios de ocorrncia natural, os FOS so os principais compostos reconhecidos e utilizados em alimentos, aos quais atribuem-se propriedades prebioticas. Os FOS esto presentes como compostos de reserva energetica em mais de 36 mil especies de vegetais, muitos dos quais utilizados na alimentao humana. As principais Iontes naturais de FOS incluem trigo, cebola, banana, alcachoIra, alho e raizes de chicoria 2 . Os FOS possuem caracteristicas que permitem sua aplicao tecnologica na Iabricao de diversos tipos de alimentos. Apresentam cerca de um tero do poder adoante da sacarose, maior solubilidade que a sacarose, no cristalizam, no precipitam, e nem deixam sensao de secura ou areia na boca 21 . Devido a essas caracteristicas, os FOS podem ser usados em Iormulaes de sorvetes e sobremesas lacteas, em Iormulaes para diabeticos, em produtos Iuncionais que promovam eIeito nutricional adicional nas areas de prebioticos, simbioticos, Iibras dieteticas, em iogurtes, promovendo eIeito simbiotico (alem do proprio eIeito probiotico do iogurte), em biscoitos e produtos de paniIicao, substituindo carboidratos e gerando produtos de teor reduzido de aucar, produtos para diabeticos, etc., em barras de cereais, sucos e nectares Irescos, produtos de conIeitaria, molhos, etc. 21 .
DOSE TERAPUTICA O aumento da contagem de biIidobacterias ocasionado pela ingesto de FOS em estudos realizados com humanos variou com doses diarias de 4 a 40 g. E importante, entretanto, que seja utilizada a dose minima, para que eIeitos colaterais indesejaveis como Ilatulncia e desarranjos intestinais sejam reduzidos. A ingesto de 20-30g de inulina por dia geralmente desencadeia o inicio de um desconIorto severo no individuo. Foi observado aumento do desconIorto intestinal em mulheres que ingeriam 14g/dia de inulina 9 . Achados recentes sugerem que 10g/dia constitui uma dose ideal e tem sido bem tolerada. RoberIroid et al., sugeriram que o minimo de 4g/dia de inulina ou FOS pode ser necessario para observar o aumento de biIidobacterias 20 . EFEITOS ADVERSOS Testes padres de toxicidade, conduzidos com Irutanos do tipo inulina em doses bastante superiores as recomendadas, no detectaram evidncias de toxicidade, carcinogenicidade ou genotoxicidade. Assim como no caso dos demais tipos de Iibra, o consumo de quantidades excessivas de prebioticos pode resultar em diarreia, Ilatulncia, colicas, inchao e distenso abdominal, estado este reversivel com a interrupo da ingesto. Entretanto, a dose de intolerncia e bastante alta, permitindo uma Iaixa de dose teraputica bastante ampla. Por
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apresentarem estes possiveis riscos so pouco tolerados por pacientes com sindrome do intestino irritavel 16 . Em geral, a ingesto de oligossacarideos Ioi considerada segura, no havendo nenhuma alterao gastrointestinal como Ilatulncia, desconIorto abdominal ou aumento de evacuaes em estudos com crianas 9 .
SIMBITICOS Alimentos simbioticos so aqueles resultantes da combinao de culturas probioticas com ingredientes prebioticos. Esta combinao deve possibilitar a sobrevivncia da bacteria probiotica no alimento e nas condies do meio gastrico, possibilitando sua ao no intestino grosso, sendo que os eIeitos destes ingredientes podem ser adicionados ou sinergicos 9 .
EFEITOS FISIOLOGICOS Os simbioticos proporcionam a ao conjunta de prebioticos e probioticos, podendo ser classiIicados como componentes dieteticos Iuncionais que podem aumentar a sobrevivncia dos probioticos durante a passagem pelo trato digestorio superior, pelo Iato de seu substrato especiIico estar disponivel para Iermentao 2 . Esse eIeito simbiotico pode ser direcionado as diIerentes regies 'alvo do trato gastrointestinal, os intestinos delgado e grosso. O consumo de probioticos e de prebioticos selecionados apropriadamente pode aumentar os eIeitos beneIicos de cada um deles, uma vez que o estimulo de cepas probioticas conhecidas leva a escolha dos pares simbioticos substrato- microrganismo ideais 16 . Bouhnik et al. avaliaram o eIeito do consumo prolongado de leite Iermentado com Bifidobacterium sp. com ou sem inulina (18g/dia) na contagem de biIidobacterias Iecais de homens saudaveis. Os resultados demonstraram que o leite Iermentado ocasionou aumento signiIicativo da proporo de biIidobacterias na microbiota colnica, mas a administrao concomitante de inulina no aumentou esse eIeito, entretanto, apos duas semanas de interrompimento do consumo destes produtos, os voluntarios que receberam inulina tiveram um numero signiIicativamente maior de biIidobacterias comparados aos que no receberam 9 . Individuos portadores da Sindrome do Intestino Curto, geralmente so mal nutridos e possuem intestino dilatado, resultando em um crescimento exagerado de certas bacterias maleIicas. A combinao de Bifidobacterium brevis, Lactobacillus casei e Galactooligossacarideos (terapia simbiotica), durante 2 anos de tratamento, mostrou melhorar satisIatoriamente a motilidade e Iuno absortiva intestinal 22 .
APLICAO EM ALIMENTOS Na aplicao em alimentos, o ideal e que o ingrediente selecionado seja um substrato
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metabolizavel pelo microorganismo probiotico no intestino. Isso possibilitaria um aumento na capacidade de sobrevivncia do probiotico. Um exemplo dessa mistura seria o probiotico biIidobacteria, associado ao prebiotico galactooligossacaridio 2 .Alguns outros exemplos de alimentos simbioticos so: biIidobacterias com Irutooligossacarideos e Lactobacillus com lactitol 23 . Burti et al. desenvolveram e observaram maior preIerncia sensorial pelo queijo cremoso simbiotico (S. thermophilus L. paracasei inulina) em relao ao probiotico (S. thermophilus inulina) e o padro (S. thermophilus). Em reviso bibliograIica Rastall e Maitin apontam para as seguintes novidades: um simbiotico que une a combinao de amido resistente com biIidobacteria, especialmente B. latis que sobrevive a passagem pelo estmago e intestino delgado, vem sendo utilizada por Iabricantes de iogurte 9 .
CONSIDERAES FINAIS Presentes na alimentao, os probioticos, prebioticos e simbioticos, atuam na manuteno da composio da microbiota intestinal produzindo eIeitos beneIicos. Algumas expectativas com relao ao uso desses alimentos Iuncionais incluem o estabelecimento de uma ingesto maxima, segura e permitida; estudo dos eIeitos transitorios e permanentes; estudos relacionados ao uso dos mesmos a longo prazo; investigar novas cepas de probioticos e estudo de novos alimentos Iuncionais, assim como sua normalizao de acordo com a legislao para sua comercializao. Dentre os eIeitos beneIicos dos probioticos ao organismo podemos citar o equilibrio bacteriano intestinal, melhora dos niveis de colesterol, ao em diarreias, reduo do risco de desenvolvimento de cncer, produo de vitaminas, aumento da resposta imune, aumento da absoro de minerais, alivio da constipao, melhor utilizao de lactose e conseqentemente melhora dos sintomas de intolerncia a esse aucar. Numerosos beneIicios a saude tambem so atribuidos aos prebioticos. Dentre esses eIeitos beneIicos tem-se o estimulo ao crescimento das biIidobacterias no intestino e estas parecem intensiIicar o sistema imunologico do hospedeiro, melhora da Ilora intestinal, prevenindo a diarreia ou a obstipao por alterao da microIlora colnica; reduo do desenvolvimento de cncer; melhora dos niveis de lipideos sericos; controle da tolerncia a glicose; alem de suprimir a produo de produtos de putreIao. Por se tratar de uma area de estudos recentes, um maior numero de pesquisas sobre os prebioticos e probioticos so necessarias para que se possa determinar seus eIeitos beneIicos com mais exatido. Assim como o desenvolvimento de pesquisas para certiIicar a dose teraputica para cada patologia.
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Recebido em / Received: Maro de 2008 Aceito em / Accepted: 1unho de 2008