Sobre el crecimiento de mltiples nutrientes limitado de microorganismos,
Con especial referencia a la doble limitacin por sustratos de carbono y nitrgeno
Thomas Egli Instituto Suizo Federal de Recursos Hdricos y Control de la Contaminacin del Agua (EAWAG), berlandstrasse 133, CH-8600 Diibendorf, Suiza Palabras clave: quimiostato, el rendimiento del crecimiento, la limitacin del crecimiento, la limitacin de nutrientes mltiples, carbono, nitrgeno Resumen: Limitacin simultnea del crecimiento microbiano por dos o ms nutrientes se analiza para la doble carbon/nitrogen- crecimiento limitado en cultivo continuo. Los lmites de la zona en la que se produce un crecimiento de dos limitados pueden ser claramente definidas a partir de datos de cultivo y la composicin celular y pueden ser tambin predecir a partir de datos de rendimiento de crecimiento medidos en condiciones slo o en sustrato limitado. Se demuestra que para los dos nutrientes de carbono y nitrgeno de la zona de la limitacin de nutrientes doble depende tanto de la relacin C: N de tasa (dilucin) el medio de crecimiento y el crecimiento. El concepto de doble (carbono / nitrgeno) crecimiento limitado que aqu se presenta se puede extender a otras combinaciones binarias y mltiples de nutrientes. Introduccin El uso de los medios de comunicacin mineral definido para el crecimiento de los microorganismos fue un acontecimiento importante en microbiologa. En combinacin con los avances en las tcnicas de cultivo, por ejemplo, la cultura quimiostato, se permitido el crecimiento reproducible de microbios en ambientes seleccionados bajo condiciones definidas y para estudiar los efectos de nutrientes especficos en varios fenmenos fisiolgicos. Como general regla general, los medios de comunicacin minerales definidos se han formulado a fin de permitir que los microbios de sintetizar su celular componentes procedentes de fuentes individuales de carbono, nitrgeno, fsforo, etc Adems, se hizo una prctica comn para las concentraciones relativas de los nutrientes individuales que se ajusta de manera que, como formulado en la "ley del mnimo" por Justus von Liebig (1840), slo uno de ellos, por lo general el fuente de carbono, limita la cantidad mxima de biomasa que se podra producir, con todos los dems nutrientes en exceso (Monod 1942; Stephenson 1949) En contraste con las condiciones que son microbios expuesto a en cultivos de laboratorio , los ambientes se encuentran en la naturaleza son completamente diferentes . All, los microbios tienen que hacer frente a tanto la presencia simultnea y bajas concentraciones de una multiplicidad de nutrientes homlogas , es decir , compuestos que puede satisfacer la misma funcin fisiolgica . Esto es especialmente cierto para el carbono , el nitrgeno y el fuentes de fsforo . De hecho , se ha sealado que la presuncin de que la limitacin del crecimiento de la Naturaleza est limitada por un nico sustrato o nutrientes es probablemente una suposicin errnea ( Veldkamp y Jannasch 1972 ; Perla 1977 ) . Aunque se han logrado progresos considerables en los ltimos aos con respecto a la comprensin de la crecimiento simultneo en cualquiera de dos fuentes de carbono o dos receptores de electrones ( Harder & Dijkhuizen 1976 ; Harder & Dijkhuizen 1982 ; Egli et al . 1986 ; Robertson y Kuenen 1990 ) , ha habido pocos informes relativos a la limitacin simultnea pormltiples nutrientes no homlogas , como se discutepor Harrison ( 1972 ) y Baltzis y Fredrickson (1988). En consecuencia, la mayora de los microbilogos siguen apoyar la opinin de que slo un compuesto puede ser que limita el crecimiento en un momento determinado. En esta prueba la contribucin de apoyo al ex existencia de bien definida de mltiples sustrato limitado-Se evaluarn los regmenes de crecimiento. Debido a la escasez de datos, ejemplos de la limitacin simultnea de crecimiento por dos macro-nutrientes, carbono y nitrgeno, se destac, pero se convertir en claro que el principio de mltiples nutrientes limitados- crecimiento es igualmente aplicable a una amplia gama de otras limitaciones de nutrientes. La influencia que la limitacin del crecimiento simultneo de carbono y nitrgeno tiene sobre la composicin celular y la fisiologa de las clulas se ser examinada y una hiptesis de trabajo para el crecimiento de mltiples nutrientes limitado de microbios ser presentado. El fenmeno de mltiples nutrientes limitados- crecimiento Primeros indicios de que el crecimiento del fitoplancton puede ser limitado por varios factores eran simultneamente re - portado para los sistemas de agua dulce oligotrfico (suma - mirse en Pearl 1977 ) . Con respecto a los microorganismos - nismos , los datos experimentales preliminares sugieren la ocurrencia de limitacin simultnea de crecimiento por dos nutrientes heterlogas se inform por Cooney et al . ( 1976 ) para el nitrgeno y fosfato rus , Hueting y Tempest ( 1979 ) para el carbono y de nitrgeno y de carbono y de potasio , Harrison ( 1972 ) y Hamer et al . ( 1975 ) para la nutricin gaseosa padres , y por Egli ( 1982 ) para el carbono y el nitrgeno . Sin embargo , fue slo recientemente , que la existencia de un / rgimen de crecimiento limitado en nitrgeno doble carbono bajo condiciones de cultivo chemostat era claramente demostrado tanto para bacterias y levaduras en la base tanto de los parmetros de la cultura y la fsica - caractersticas metodolgicas de las clulas en crecimiento ( Egli y Quayle 1984 ; Egli y Quayle , 1986; Gr ~ izer Lampert et al . 1986 ; Minkevich et al . 1988 ; Duchars y Att- madera de 1989 ; Rutgers et al . 1990 ) . Un ejemplo tpico de la respuesta generalmente observada como una funcin de la relacin C: N en el alimento medio se ilustra en la figura . 1 para una cultura de Hyphomicrobium ZV620 creciendo a una di constante tasa lucin de 0,054 h -1 en un quimiostato con metadonanol/NH4 como las fuentes de carbono / nitrgeno . En este experimentar la concentracin del nitrgeno fuente ( NH4 + ) en el depsito de medio se mantuvo constante a 223 mg l -l NH4 + - N, mientras que el con- concentracin de metanol se incrementa de forma gradual de 0.95gl -1 ( C : N = 1,6 ) a 12,4 g de 1 - L ( C : N = 20,85 ) . A juzgar por las concentraciones residuales de metanol y NH4 la composicin celular y la sntesis de enzimas + NH4 - asimilar , tres regmenes de crecimiento distintas fueron reconocidos : - Limitacin de metanol con presencia de amoniaco estaba enexceso ( C: N < 7.1 ) - Limitacin de amonaco eran metanol era en exceso ( C: N> 12.6 ) - Un rgimen de transicin donde ambos metanol y NH4 + se encontraban por debajo del lmite de deteccin ( 7.1 < C: N < 12,6 ) Llama la atencin que , aunque aparentemente creciente nitrogeno limitado en C: N> 7.1 , donde hay residual nitrgeno era detectable , el peso seco de la calle tura todava aument linealmente cuando el carbono adicional sustrato se aadi al medio de crecimiento (Fig. 1A ) . Cuando el crecimiento se vio limitado por un solo nutriente slo , las clulas mostraron esencialmente una constante a lo largo - toda la composicin celular con respecto a N , la protena y el contenido de productos de almacenamiento (Fig. 1B ) . dentro de la composicin celular rgimen de crecimiento transicin fue ex - depende extremadamente de la relacin de los dos limitar sustratos y que se ajust de acuerdo a la disponibilidad real de los dos nutrientes que re - restringida la sntesis de material celular . Se calcula que el material de almacenamiento de poli - 13 - hydroxybu - tyrate ( PHB ) sintetizado en estas condiciones representado hasta el 90 % de la biomasa adicional producida ( Grfizer - Lampert et al . 1986 ) . generalizar - cin , se puede concluir a partir de los datos de que durante crecimiento limitado en carbono , el contenido de protena y probablemente tambin de los cidos nucleicos es alta y el alma- contenido de los productos de edad es baja, mientras que lo contrario es cierto para las clulas cultivadas bajo limitacin de nitrgeno . este hallazgo no es nuevo y se ha informado de muchos Aunque los microbios , por lo que el autor es consciente , composicin general de la celda siempre estaba implcito en lugar
La figura. 1. Composicin celular y enzimtica de Hyphomicrobium ZV620 crecido con metanol y NH4 en una quimiostato a una temperatura constante tasa de dilucin, D = 0,054 h ~, como una funcin de la relacin carbono: nitrgeno en la alimentacin [S0 (NH4 + - N) se mantuvo constante, S0 (metanol) fue aumento]. Abreviaturas: GS, la glutamina sintetasa, GOGAT, glutamato sintasa; GDH, glutamato deshidrogenasa; PHB, poli-[~ - hidroxibutirato. Los datos de Grazer-Lampert et al. (1986).
que se muestra a ser independiente del medio de C: N relacin. Como respuesta a las condiciones de crecimiento descritos anteriormente, la composicin de protenas de las clulas de Hy-phomicrobium ZV620 no slo se vio afectada quan-cuantitativamente, sino tambin cualitativamente. Los datos de la figura. 1C demuestran que en esta bacteria, amoniaco fue asimilado principalmente a travs de la baja afinidad de glutamato sistema de deshidrogenasa bajo el exceso de nitrgeno condiciones de crecimiento, mientras que, en cuanto la disponibilidad capacidad de amoniaco se convirti restringido, el alto af- sistema sintetasa glutamina sintetasa finity / glutamato se hizo cargo. Fue sorprendente ver lo diferente que era la sntesis de las tres enzimas implicadas regulada. Gdizer-Lampert et al. (1986) tambin mostraron que no slo la concentracin del total protena de la glutamina sintetasa aument durante el cambiar de condiciones de C a N-limitados, pero tambin la fraccin de deadenylated, es decir, glutamina activa sintetasa aument. Un comportamiento muy similar con respecto a la celda composicin y regulacin de la enzima ha sido re-portado por la levadura Hansenula methylotrophic po -lymorpha durante su crecimiento quimiostato a una temperatura constantetasa de dilucin de 0,10 h -1 con medios que contienen dife -rentes C: N , donde una transicin de C / N - limitadoSe observ rgimen de crecimiento entre 12 < C: N <31 ( Egli y Quayle 1986 ) . Recientemente, Minkevich etal. ( 1988 ) , utilizando el mismo enfoque experimental ,informado de la existencia de una doble carbon/nitro-rgimen de crecimiento limitado - gen de la levadura Candidavalidacin , Duchars y Attwood (1989) para Hypho -microbium X , A1 - Awadhi et al . ( 1990 ) para la el crecimiento de un metilotrfica termotolerantes Bacil - lus sp. , y Rutgers et al. ( 1990 ) para Klebsiella pneumoniae . Todos estos autores observaron una virtualmente patrn idntico de comportamiento para el com celular posicin de estos organismos que la descrita anteriormentepara Hyphomicrobium . De todo esto experimentalpruebas para diferentes microorganismos , se puedeconcluir que la existencia de una transicin , es decir , unade doble sustrato limitado - , rgimen de crecimiento entredos zonas de un solo nutriente limitado distintas, para lascrecimiento es un fenmeno general . Prediccin de la gama de doble sustrato limitado- crecimiento La aceptacin de la existencia del fenmeno surge la pregunta de si el rango donde crecimiento est limitado por las restricciones en la disponibilidad de dos (o ms) los nutrientes al mismo tiempo puede ser predicho. De sus datos experimentales, Egli y Quayle (1986) demostr que los bounderies de los tres regmenes de crecimiento en un cierto crecimiento fijo tasa podra predecir cuando los rendimientos de crecimiento para se conocen los sustratos individuales. La ecuacin emprica para la concentracin de biomasa en el cultivo (x), como primera propuesta por Egli Y Quayle (1986) para el carbono dos y nutrientes nitrgeno, se puede deducir de lo conceptual esquema que se muestra en la figura. 2, es decir, x = (Co- c)" Yx/c = (no- n). YX/N (I) donde CO y NO son las concentraciones de carbono y nitrgeno en la alimentacin quimiostato, c y n son el correspondiente concentraciones residuales de los dos
La figura. 2. Diagrama conceptual que muestra la dependencia de la rendimiento de crecimiento de carbono (Yx / c) y nitrgeno (Yx / N) en el auto-Bon: la proporcin de nitrgeno en el medio de crecimiento suministrado. Es como-Sumed que el crecimiento se lleva a cabo en un quimiostato en una constante tasa de dilucin. Las concentraciones residuales de carbono (C) y el nitrgeno (N) fuente, respectivamente, en la cultura se muestran. El rendimiento se da como biomasa seca formada por g de elemento (Y ~, E). nutrientes y Yx / C y Yx / N son el crecimiento de la biomasa coeficientes de rendimiento sobre la base de carbono y nitrgeno. Debido a que tanto cyn aproximarse a cero en virtud de carbono / crecimiento limitado en nitrgeno, la ecuacin (1) puede ser re-escrito en trminos de la relacin C: N en el flujo de entrada de medio, es decir, c (/ n0 = Yx / N / Yx / c
Suponiendo coeficientes de rendimiento constante bajo una sola las condiciones de crecimiento de sustrato limitada, el lmite entre la limitacin de carbono y carbono / nitrgeno limitacin puede calcularse por los valores sustituyendo para YX / N y los valores Yx / c mediciones realizadas en carbono las condiciones de crecimiento limitadas en la ecuacin (2). Simi-cialmente, YX sustituyendo / N y Yx / c miden para nitro- Tabla 1. Pronosticado y los lmites observados experimentalmente para crecimiento de una y de dos sustrato (carbono / nitrgeno) limitado de Hyphomicrobium ZV620 con metanol y NH4 + en una constante tasa de dilucin de 0.054 h ~ de la ehemostat.
Aplicacion de La Termografia Infrarroja en Tableros Electricos de Distrucion para Mejorar La Seguridad y La Calidad de La Energia Electrica - UNIVERSIDAD DEL SANTA PDF