A cromatografia um mtodo ou tcnicas de separao de misturas que ocorre

atravs da passagem de uma mistura atravs de duas fases: uma estacionria (fixa)
e outra mvel. A interao dos componentes da mistura com estas duas fases
influenciado por diferentes foras intermoleculares, incluindo inica, !ipolar,
apolar, e espec"ficos efeitos de afinidade e solu!ilidade.
A Cromatografia um mtodo fsico-qumico de separao. Ela est fundamentada na
migrao diferencial dos componentes de uma mistura, que ocorre devido a diferentes
interaes, entre duas fases imiscveis, a fase mvel e a fase estacionria. A grande
variedade de cominaes entre fases m!veis e estacionrias a torna uma tcnica
e"tremamente verstil e de grande aplicao.
# termo cromatografia foi primeiramente empregado em $%&' e sua utili(ao
atriuda a um ot)nico russo ao descrever suas e"peri*ncias na separao dos
componentes de e"tratos de fol+as. ,esse estudo, a passagem de ter de petr!leo -fase
m!vel. atravs de uma coluna de vidro preenc+ida com caronato de clcio -fase
estacionria., / qual se adicionou o e"trato, levou / separao dos componentes em
fai"as coloridas. Este provavelmente o motivo pelo qual a tcnica con+ecida como
cromatografia -chrom 0 cor e graphie 0 escrita., podendo levar / err1nea idia de que o
processo se2a dependente da cor.
Apesar deste estudo e de outros anteriores, que tamm poderiam ser considerados
precursores do uso dessa tcnica, a cromatografia foi praticamente ignorada at a
dcada de 3&, quando foi redescoerta. A partir da, diversos traal+os na rea
possiilitaram seu aperfeioamento e, em con2unto com os avanos tecnol!gicos,
levaram-na a um elevado grau de sofisticao, o qual resultou no seu grande potencial
de aplicao em muitas reas.
A cromatografia pode ser utili(ada para a identificao de compostos, por comparao
com padres previamente e"istentes, para a purificao de compostos, separando-se as
sust)ncias indese2veis e para a separao dos componentes de uma mistura. As
diferentes formas de cromatografia podem ser classificadas considerando-se diversos
critrios, sendo alguns deles listados aai"o4
#. $lassificao pela forma f"sica do sistema cromatogrfico
Em relao / forma fsica do sistema, a cromatografia pode ser sudividida em
cromatografia em coluna e cromatografia planar. Enquanto a cromatografia planar
resume-se / cromatografia em papel -C5., / cromatografia por centrifugao
-C+romatotron. e / cromatografia em camada delgada -CC6., so diversos os tipos de
cromatografia em coluna, os quais sero mais em compreendidos quando classificados
por outro critrio.
%. $lassificao pela fase mvel empregada
Em se tratando da fase m!vel, so tr*s os tipos de cromatografia4 a cromatografia
gasosa, a cromatografia lquida e a cromatografia supercrtica -C7C., usando-se na
8ltima um vapor pressuri(ado, acima de sua temperatura crtica. A cromatografia lquida
apresenta uma importante sudiviso4 a cromatografia lquida clssica -C9C., na qual a
fase m!vel arrastada atravs da coluna apenas pela fora da gravidade, e a
cromatografia lquida de alta efici*ncia -C9AE., na qual se utili(am fases estacionrias
de partculas menores, sendo necessrio o uso de uma oma de alta presso para a
eluio da fase m!vel. A C9AE foi inicialmente denominada cromatografia lquida de
alta presso, mas sua atual designao mostra-se mais adequada. ,o caso de fases
m!veis gasosas, separaes podem ser otidas por cromatografia gasosa -C:. e por
cromatografia gasosa de alta resoluo -C:A;.. A diferena entre os dois tipos est na
coluna. Enquanto na C:A; so utili(adas colunas capilares, nas quais a fase
estacionria um filme depositado na mesma, a C: utili(a colunas de maior di)metro
empacotadas com a fase estacionria.
&. $lassificao pela fase estacionria utili'ada
<uanto / fase estacionria, distingue-se entre fases estacionrias s!lidas, lquidas e
quimicamente ligadas. ,o caso da fase estacionria ser constituda por um lquido, este
pode estar simplesmente adsorvido sore um suporte s!lido ou imoili(ado sore ele.
7uportes modificados so considerados separadamente, como fases quimicamente
ligadas, por normalmente diferirem dos outros dois em seus mecanismos de separao.
(. $lassificao pelo modo de separao
5or este critrio, separaes cromatogrficas se devem / adsoro, partio, troca
i1nica, e"cluso ou misturas desses mecanismos. 6entre os vrios tipos de
cromatografia, especial *nfase ser dada / cromatografia em camada delgada -CC6., /
cromatografia lquida clssica e de alta efici*ncia -C9AE. e / cromatografia gasosa de
alta resoluo -C:A;..
)). $*+,A-+.*A/)A 01A2A
,a cromatografia plana, a fase estacionria suportada sore uma placa plana ou nos
poros de um papel. ,esse caso, a fase m!vel desloca-se atravs da fase estacionria por
ao da capilaridade ou so a influ*ncia da gravidade. =til em separao de compostos
polares. Encontra-se astante difundida devido / sua facilidade e"perimental e ao seu
ai"o custo.
#. $romatografia em 0apel
Esta tcnica assim c+amada porque utili(a para a separao e identificao das
sust)ncias ou componentes da mistura a migrao diferencial sore a superfcie de um
papel de filtro de qualidade especial -fase estacionria.. A fase m!vel pode ser um
solvente puro ou uma mistura de solventes. Este mtodo muito 8til para separar
sust)ncias muito polares, como a8cares e aminocidos. 5ossui o inconveniente de
poder-se cromatografar poucas quantidades de sust)ncia de cada ve(.
>anipula-se o papel com cuidado e pelas pontas, e cortam-se tiras em taman+os que
possam ser contidos nas cuas. ? importante cortar o papel seguindo o ei"o das firas,
pois a celulose est orientada neste sentido, o que facilitar a passagem da fase m!vel.
#s lquidos polares tero grande afinidade pelas +idro"ilas da molcula de celulose,
formando pontes de +idrog*nio, ficando retido e funcionando como fase estacionria, e
os lquidos menos polares sero repelidos por esta estrutura, funcionado como fase
m!vel.
As cuas devero ser perfeitamente fec+adas para permitir a saturao interna. A
cromatografia pode ser ascendente ou descendente, sendo que esta 8ltima mais rpida
e consome menos eluente. @cm de altura de eluente na cua suficiente para a
cromatografia ascendente.
Coloca-se a amostra a ser analisada um pouco acima da e"tremidade inferior do papel
seco, que ap!s ter esta e"tremidade inferior mergul+ada numa mistura de solventes,
tero os seus constituintes arrastados, 2untamente com esta mistura que tende a suir por
capilaridade. #s diferentes constituintes apresentaro variao na velocidade de
deslocamento, de acordo com os seus coeficientes de partio. #s componentes menos
sol8veis na fase estacionria -gua. tero uma movimentao mais rpida. 5ode ser
utili(ado para anlise de mistura de aminocidos ou misturas de a8cares. A
cromatografia em papel pode ser tamm no sentido descendente e idimensional, este
8ltimo reali(ado em duas etapas com solventes apresentando diferentes propriedades.
%. $romatografia em $amada 3elgada
A cromatografia em camada fina -ou delgada. uma tcnica simples, arata e muito
importante para a separao rpida e anlise quantitativa de pequenas quantidades de
material. Ela usada para determinar a pure(a do composto, identificar componentes
em uma mistura comparando-os com padresA acompan+ar o curso de uma reao pelo
aparecimento dos produtos e desaparecimento dos reagentes e ainda para isolar
componentes puros de uma mistura.
,a cromatografia de camada delgada a fase lquida ascende por uma camada fina do
adsorvente estendida sore um suporte. # suporte mais tpico uma placa de vidro
-outros materiais podem ser usados..
7ore a placa espal+a-se uma camada fina de adsorvente suspenso em gua -ou outro
solvente. e dei"a-se secar. A placa coerta e seca c+ama-se Bplaca de camada finaB.
<uando a placa de camada fina colocada verticalmente em um recipiente fec+ado
-cua cromatogrfica. que contm uma pequena quantidade de solvente, este eluir pela
camada do adsorvente por ao capilar.

Cromatografia em camada delgada.

A amostra colocada na parte inferior da placa, atravs de aplicaes sucessivas de uma
soluo da amostra com um pequeno capilar. 6eve-se formar uma pequena manc+a
circular. C medida que o solvente soe pela placa, a amostra compartil+ada entre a
fase lquida m!vel e a fase s!lida estacionria. 6urante este processo, os diversos
componentes da mistura so separados. Como na cromatografia de coluna, as
sust)ncias menos polares avanam mais rapidamente que as sust)ncias mais polares.
Esta diferena na velocidade resultar em uma separao dos componentes da amostra.
<uando estiverem presentes vrias sust)ncias, cada uma se comportar segundo suas
propriedades de soluilidade e adsoro, dependendo dos grupos funcionais presentes
na sua estrutura.
6epois que o solvente ascendeu pela placa, esta retirada da cua e seca at que este2a
livre do solvente. Cada manc+a corresponde a um componente separado na mistura
original. 7e os componentes so sust)ncias coloridas, as diversas manc+as sero
claramente visveis. Contudo, astante comum que as manc+as se2am invisveis
porque correspondem a compostos incolores. 5ara a visuali(ao deve-se Brevelar a
placaB. Dm mtodo astante comum o uso de vapores de iodo, que reage com muitos
compostos org)nicos formando comple"os de cor caf ou amarela. #utros reagentes
para visuali(ao so4 nitrato de prata -para derivados +alogenados., @,E-
dinitrofenilidra(ina -para cetonas e aldedos., verde de romocresol -para cidos.,
nin+idrina -para aminocidos., etc.
&. $romatografia $entr"fuga
A cromatografia centrifuga uma cromatografia em camada delgada preparativa e
acelerada centrifugamente. Faseia-se no principio da operao onde a amostra a ser
separada aplicada como uma soluo no centro do disco girat!rio umedecido com o
solvente.
A eluio com solvente gera andas circulares de separao dos componentes que so
removidos 2untamente com o solvente para um tuo de recepo.
? compatvel com todos os solventes comumente usados nas outras tcnicas
cromatogrficas, inclusive cido actico, no apropriada para uso com cidos
minerais.
Gem como vantagens, a no aplicao de HspotI ou raspagem de andas, as separaes
so rpidas, cerca de @& min, permite a oservao direta por DJ ou de compostos
coloridos durante a eluio, suas camadas finas de $, a E mm apresentam alta
capacidade,permite a utili(ao de pouco solvente e a eluio por gradiente fcil, o
solvente regenerado in situ, podendo ser re-utili(ado, a atmosfera de nitrog*nio
previne o"idao das amostras, compacta -facilmente removida de um laorat!rio para
outro., poucos controles e no necessita altas presses, possui ai"o preo e assim a
C+romatotrons custa menos que um simples K59C preparativo.
))). $*+,A-+.*A/)A 4, $+152A
A cromatografia em coluna costuma ser citada como o mais antigo procedimento
cromatogrfico. Loi utili(ada primeiramente para o isolamento dos pigmentos e"istentes
nas fol+as verdes dos vegetais.
Consiste em uma coluna de vidro, metal ou plstico, preenc+ida com um adsorvente
adequado. ? uma tcnica de partio entre duas fases, s!lida e lquida, aseada na
capacidade de adsoro e soluilidade. # s!lido deve ser um material insol8vel na fase
lquida associada, sendo que os mais utili(ados so a slica gel -7i#
@
. e alumina -Al
@
#
3
.,
geralmente na forma de p!.
A mistura a ser separada colocada na coluna com um eluente -fase m!velA solvente.
menos polar e vai-se aumentando gradativamente a polaridade do eluente e
consequentemente o seu poder de arraste de sust)ncias mais polares. Dma seqM*ncia
de eluentes normalmente utili(ada a seguinte4 ter de petr!leo, +e"ano, ter etlico,
tetracloreto de carono, acetato de etila, etanol, metanol, gua e cido actico.
Colunas cromatogrficas. -a. 7olvente adicionado / colunaA -. suporte s!lido sendo
introdu(ido na coluna.
# flu"o de solvente deve ser contnuo. #s diferentes componentes da mistura mover-se-
o com velocidade distintas dependendo de sua afinidade relativa pelo adsorvente
-grupos polares interagem mel+or com o adsorvente. e tamm pelo eluente. Assim, a
capacidade de um determinado eluente em arrastar um composto adsorvido na coluna
depende quase diretamente da polaridade do solvente com relao ao composto.
C medida que os compostos da mistura so separados, andas ou (onas m!veis
comeam a ser formadas, sendo que cada anda contem somente um composto. Em
geral, os compostos apolares passam atravs da coluna com uma velocidade maior do
que os compostos polares, porque os primeiros t*m menor afinidade com a fase
estacionria. 7e o adsorvente escol+ido interagir fortemente com todos os compostos da
mistura, ela no se mover. 5or outro lado, se for escol+ido um solvente muito polar,
todos os solutos podem ser eludos sem serem separados. 5or uma escol+a cuidadosa
das condies, praticamente qualquer mistura pode ser separada.
Coluna cromatogrfica acoplada a um funil de separao
para manter o nvel do solvente na superfcie superior.
# *"ito de uma coluna depender ento da escol+a de um suporte e solvente adequados
para a sua reali(ao. Em alguns casos possvel visuali(ar a separao dos
componentes de uma mistura oservando o desenvolvimento de manc+as diferentes na
coluna ou acompan+ando cm uma lu( ultravioleta. Entretanto, na maioria das ve(es,
torna-se necessrio o acompan+amento da separao dos componentes pela tcnica de
cromatografia em camada delgada -ccd..
)6. $*+,A-+.*A/)A .A7+7A
Cromatografia data de $%&3 no traal+o do cientista russo>iN+ail 7emenovic+ GsOett.
# estudante graduado alemoLrit( 5rior desenvolveu a cromatografia gasosa de estado
s!lido em $%EP. Arc+er Qo+n 5orter >artin, quem foi vencedor do 5r*mio ,oel por
seu traal+o no desenvolvimento das cromatografias lquido-lquido -$%E$. e em papel
-$%EE., estaeleceu os fundamentos para o desenvolvimento da cromatografia gasosa e
posteriormente produ(iu a cromatografia gs-lquido -$%R&.. Gcnica de separao e
anlise de misturas por interao dos seus componentes entre uma fase estacionria e
uma fase m!vel.
-cnica utili'ada na $romatografia .asosa:
Dma cromatografia gasosa uma tcnica que se aseia na anlise qumica instrumental
por separao de compostos qumicos e uma amostra comple"a. Dma cromatografia
gasosa usa um tuo estreito atravs do qual se d o flu"o con+ecido como coluna,
atravs do qual diferentes constituintes de uma amostra passam em uma corrente de gs
-gs condutor, ou transportador, a fase mvel. em diferentes ta"as dependendo de vrias
propriedades fsicas e qumicas e suas interaes com um especfico rec+eio da coluna,
c+amada fase estacionria. Como os composto qumicos saem no final da coluna, so
detectados e identificados eletronicamente.
A funo da fase estacionria na coluna seperar componentes diferentes, causando a
cada um sada da coluna em um tempo diferente -tempo de reteno.. #utros
par)metros que podem ser usados para alterar a ordem ou tempo de reteno so a ta"a
de flu"o do gs condutor e a temperatura.
Em uma anlise C:, um volume con+ecido de analito gasoso ou lquido in2etado na
entrada da coluna, geralmente com o uso de uma microseringa -ou com firas de
microe"trao de fase s!lida, ou .. Conforme o gs carreador leva as molculas do
analito atravs da coluna, essa movimentao iniida pela adsoro das molculas do
analito nas paredes da coluna ou no material do empacotamento da mesma.
A ta"a com que as molculas progridem ao longo da coluna depende da fora da
adsoro que, por sua ve(, depende do tipo de molcula e do material da fase
estacionria. Dma ve( que cada tipo de molcula tem uma ta"a de progresso diferente,
os vrios componentes da mistura de analito so separados conforme progridem ao
longo da coluna, c+egado ao fim dela em momentos diferentes -tempos de reteno..
Dm detector empregado para monitorar o flu"o de sada da coluna.
Assim, o momento em que cada componente sai da coluna, e a quantidade deles, pode
ser determinada. :eralmente, as sust)ncias so identificadas -qualitativamente. pela
ordem com que emerger -eluem. da coluna e pelo tempo de reteno do analito na
coluna.
Aplica8es prticas da $romatografia .asosa:
9u"mica:
6eterminao de antio"idantes, nutrientes ou contaminantes em alimentos.
)nd:stria:
>onotori(ao de processos industriais.
7a:de:
- Anlises dos constituintes do sangue.
- Anlise forense.
Am!iente:
- 6eterminao de resduos de pesticidas em produtos alimentares, guas ou esgotos.
- 6eterminao de gases e solventes org)nicos na atmosfera, solos ou rios.
As partes de um $romatgrafo .asoso:
A cromatografia um mtodo fsico de separao, no qual componentes a serem
separados so distriudos entre duas fases4 a fase estacionria, e a fase m!vel. A
amostra transportada por uma corrente de gs atravs de uma coluna empacotada com
um s!lido recoerta com uma pelcula de um lquido. 6evido a sua simplicidade,
sensiilidade e efetividade para separar os componentes de misturas, a cromatografia de
gs uma das ferramentas mais importantes em qumica. ? amplamente usada para
anlises quantitativos e qualitativos de espcies qumicas e para a determinar constantes
termoqumicas tais como calores de soluo e vapori(ao, presso de vapor e
coeficientes de atividade. A cromatografia de gs tamm usada para monitorar os
processos industriais de forma automtica4 analisam-se as correntes de gs
periodicamente e reali(am-se reaes de forma manual ou automtica para compensar
variaes no dese2adas.
>uitas anlises de rotina so reali(adas rapidamente no campo medicinal e outros. 5or
e"emplo, por meio do uso de apenas &.$ centmetros c8icos -&.&&3 onas. de sangue,
pode-se determinar as porcentagens de o"ig*nio dissolvido, nitrog*nio, di!"ido de
carono e mon!"ido de carono. A cromatografia de gs 8til tamm na anlise de
contaminantes do ar, lcool no sangue, !leos essenciais e produtos alimentcios.
# mtodo consiste primeiramente na introduo da mistura de prova ou amostra em
uma corrente de gs inerte, normalmente +idrog*nio, +lio, nitrog*nio ou arg1nio, que
atuaro como gs de arrastre. As amostras lquidas vapori(am-se antes da in2eo no gs
de arrastre. # flu"o de gs passa pela coluna empacotada atravs da qual os
componentes da amostra se deslocam a velocidades influenciadas pelo grau de interao
de cada componente com a fase estacionria no voltil. As sust)ncias que t*m a maior
interao com a fase estacionria so retidas por mais tempo e, por tanto, separadas
daquelas de menor interao. C medida que as sust)ncias eluem da coluna, podem ser
quantificadas por um detector eSou tomadas para outra anlise.
E"istem dois tipos de cromatografia de gs4 cromatografia :s - 7!lido -C:7. e
cromatografia :s - 9quida -C:9.. A cromatografia :s - 7!lida se aseia na ase
s!lida estacionria, na qual a reteno das sust)ncias analisveis a consequ*ncia da
asoro fsica. A cromatografia :as -9quida 8til para separar ons ou molculas
dissolvidas em um solvente. 7e a soluo de amostra estiver em contato com um
segundo s!lido ou fase lquida, os diferentes solutos interagem com a outra fase em
diferentes graus, devido a diferenas de adsoro, interc)mio de ons, partio, ou
taman+o. Estas diferenas permitem que os componentes da mistura se separem usando
estas diferenas para determinar o tempo de reteno dos solutos atravs da coluna.
6. $*+,A-+.*A/)A 1;95)3A
A cromatografia lquida -<01$. um processo de anlise de separao fsico cu2a
aplicao permite a anlise qualitativa mais comumente e quantitativa de uma amostra.
Esse mtodo analtico vem sendo amplamente empregado graas ao rpido tempo de
anlise. 5ermite separar constituintes de uma mistura atravs de sua distriuio em
duas fases4 fase m!vel um lquido e a fase estacionria um s!lido.
A cromatografia liquida utili(ada em vrias reas da ci*ncia, no acompan+amento de
snteses, em anlises de pesticidas, ferom1nios, no isolamento de produtos naturais e
sintticos e na produo e controle de qualidade de medicamentos, dentre tantas outras
aplicaes.
A cromatografia a lquido permite, entre outras, a anlise das seguintes classes dos
principais compostos4 protenas, cidos nuclicos, aminocidos, corantes,
polissacardeos, pigmentos de plantas, compostos i1nicos, ons metlicos, ctions,
lipdeos polares, e"plosivos, polmeros sintticos, surfatantes, farmac*uticos,
meta!licos de plantas, )nions, comple"os de metais pesados, etc.
Ko2e a cromatografia lquida de alta efici*ncia tem as seguintes caractersticas4
alto poder de resoluoA
separaes rpidasA
monitoramento contnuo do eluenteA
medidas quantitativas acuradasA
anlises repetitivas e reprodutveis com a mesma colunaA
automao do procedimento analtico e do manuseio dos dados
7o alguns aspectos, a cromatografia lquida de alta efici*ncia mais verstil que a
cromatografia com fase gasosa porque ela no est limitada a amostras volteis e
termicamente estveis e porque a escol+a de fases estacionrias e m!veis mais ampla
->end+am et al, @&&@..
# emprego da cromatografia a lquido para solucionar prolemas analticos ou
preparativos necessita, alm da instrumentao adequada, da cominao correta das
condies e"perimentais tais como4
tipo de coluna -fase estacionria.A
fase m!vel, sua composio e va(oA
temperaturaA
quantidade de amostra in2etada, etc.
A seleo correta dessas variveis necessita do con+ecimento sico dos fatores que
controlam a separao na cromatografia a lquido -Ciola,$%%T..
$romatografia a l"quido de alto desempen=o (<01$)
A cromatografia a lquido de alto desempen+o um tipo de cromatografia que emprega
uma fase m!vel lquida e uma fase estacionria finamente dividida e que, para ter um
flu"o ra(ovel, opera a presses elevadas. #riginalmente c+amava-se cromatografia
lquida de alta presso e esta terminologia foi aandonada quando se constatou que o
diferencial de comportamento desta para as demais cromatografias lquidas no era a
maior presso, mas sim o mel+or desempen+o cromatogrfico. 6entre as principais
caractersticas e vantagens do mtodo K59C esto4
coluna rec+eada com partculas de pequeno taman+o - 3 - $& mm.A
alta resoluoA
anlise no destrutivaA
velocidade de separaoA
monitorao contnua do efluente da colunaA
medio quantitativa e"ataA
anlises repetitivas e reprodutivas com a mesma colunaA
automao do procedimento analtico e do tratamento dos dados.
#s componentes essenciais da K59C so4
>om!a de alta presso: dispositivo importante pois est relacionado ao tempo
de reteno, a reprodutiilidade e a sensiilidade do detector. Este sistema
composto por oma e controladores de presso e va(o. 6e uma maneira geral,
a oma deve ter a capacidade de impulsionar a fase m!vel. E"istem dois tipos
de oma, com presso constante e com volume constante.
7istema de in?eo da amostra: a introduo da amostra pode ser reali(ada por
meio de uma vlvula de amostragem ou por meio de uma seringa de in2eo. #
efluente desses dispositivos preenc+e uma serpentina de volume con+ecido e o
acionamento da vlvula transfere, integralmente, esse volume para a corrente de
fase m!vel.
$oluna: so feitas de ao ino"idvel polido, com comprimentos de $& a 3& cm,
com calire de preciso. 6i)metros internos tpicos variam de menor ou igual a
$ mm para colunas capilaresA @, 3, E, R e ' mm para colunas analticas rec+eadas
e maior ou igual a $& mm para colunas preparativas. #s rec+eios usados so
constitudos por partculas pequenas, rgidas comum a distriuio
granulomtrica estreita. #s tipos de rec+eio podem ser divididos em tr*s
categorias4
$- gr)nulos porosos, polimricos, aseados em copolmeros de estireno-
divinilen(eno e so utili(ados na troca de ons e na cromatografia por
permeao em gelA
@- gr)nulos de camada porosa , constitudos por uma camada delgada de slica
modificada, estes rec+eios peculiares so usados em alguma aplicaes de troca de ons
e muito usados em cromatografia de fase reversa para anlise de compostos org)nicosA
3- partculas de slica totalmente porosas que proporcionam considervel mel+oria da
efici*ncia da coluna, da capacidade de analisar as amostras e da velocidade de anlise.
3etector: monitora a fase m!vel / medida que elui da coluna. 7o duas
principais classes em que podem ser divididos4 detectores de propriedades
macrosc!picas e detectores de propriedades de soluto, que medem a diferena
entre uma propriedade fsica do soluto na fase m!vel e a mesma propriedade na
fase m!vel pura. Esse monitoramento efetuado pela deteco propriamente
dita, associada a uma transduo para um sinal eltrico que pode ser registrado
ou arquivado eletronicamente na fase m!vel pura. Esse monitoramento
efetuado pela deteco propriamente dita, associada a uma transduo para um
sinal eltrico que pode ser registrado ou arquivado eletronicamente.
6).
*4/4*@2$)A7 >)>1)+.*A/)$A7
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+ttp4SSOOO.setor$.com.rSanalisesScromatografiaSclaYsse.+tm
-ipos de $romatografia
As tcnicas de laorat!rio diferentes usados na separao de misturas esto agrupados
so um termo arangente, a cromatografia. 5ara alm dos critrios de classificao de
cromatografia discutido aai"o, o critrio sico de cromatografia categori(ar o
prop!sito para o qual o processo reali(ado. Com ase neste critrio, o processo de
cromatografia classificado como analtico e cromatografia preparativa. # primeiro
reali(ado a fim de medir a quantidade de um analito particular na mistura.
Cromatografia preparativa, por outro lado utili(ado para separar os componentes de
uma mistura para a sua posterior utili(ao.
Gipos de Cromatografia
Com ase nas tcnicas usadas em cromatografia, amplamente classificados como
cromatografia de adsoro e de partio. Dma tentativa para e"plicar os diferentes tipos
de cromatografia feita atravs deste artigo. Jamos entender mais sore os
procedimentos de cromatografia diferentes atravs deste artigo.
Cromatografia de adsoro
,este tipo de cromatografia, as misturas qumicas em questo so passados sore um
leito de adsorvente. Compostos diferentes presentes nesta mistura ficar adsorvido sore
a cama em ta"as diferentes. # processo essencialmente reali(ado para fora para a
separao analtica. Cromatografia de adsoro dividida em tipos como BafinidadeB e
cromatografia de Btroca i1nicaB.
Cromatografia de troca i1nica
# mecanismo de permuta i!nica usado neste mtodo de cromatografia para a
separao dos analitos. Ela pode ser reali(ada em @ modos diferentes, ou se2a, o quadro
planar e coluna. 7eparao de compostos carregados como os pptidos, aminocidos,
protenas, etc levada a cao por meio de uma fase estacionria carregada.
Cromatografia de afinidade
Unteraco no-covalente que ocorre entre o analito em questo, e certas molculas a
ase de traal+o de cromatografia de afinidade. A purificao de protenas que esto
ligados a etiquetas reali(ada com a a2uda de cromatografia de afinidade.
5artition Cromatografia
,este tipo de tcnica de separao, uma mistura separada atravs da utili(ao de
partio de um soluto entre dois solventes. ,o processo, um dos solventes imoili(ada
com a a2uda de uma sust)ncia presente no papel de filtro ou de coluna.
Cromatografia de filtrao em gel
Esta tcnica tamm con+ecido como permeao em gel ou cromatografia de e"cluso
de taman+o. >olculas de a mistura em questo so separadas com ase no seu
taman+o. Gecnicamente, o processo de separao reali(ada com ase no di)metro
+idrodin)mico -taman+o. das molculas. >olculas maiores da mistura so impedidos
de entrar nos poros dos meios de comunicao, por isso, estas molculas so lavados
para fora rapidamente. >olculas mais pequenas, por outro lado levar mais tempo para
eluir uma ve( que eles so capa(es de entrar nos poros dos meios de comunicao.
Cromatografia 9quida de Alta Efici*ncia
,este tipo de cromatografia, a separao de compostos reali(ada na ase das suas
polaridades idiossincrticos. Unteraco destes compostos com a fase estacionria da
coluna tamm considerado. # equipamento necessrio para a reali(ao de
cromatografia lquida de alta performance incluem uma oma -usado para mover a
fase m!vel e do analito atravs da coluna., fase estacionria e um detector. Gempo de
reteno para o analito tamm fornecido pelo detector. 6ependendo da fora das
interaces que ocorrem entre a fase de analito e estacionrio, o tempo de reteno pode
variar.
9eia mais em4
\ Cromatografia em papel
\ Cromatografia em Camada 6elgada
A informao sore diferentes tipos de tcnicas de cromatografia fornecido em curto
no artigo acima. Cromatografia, a tcnica significou para a separao de compostos a
partir de misturas, assim, tem imensa import)ncia em reas como iotecnologia,
ioqumica e muitos outros.
+ttp4SSintegridadeveu.logspot.com.rS@&$@S&%Stipos-de-cromatografia.+tml
+ttp4SSOOO.slides+are.netS.corte(Scromatografia-princpios-cg