REACCIONES FEBRILES:

Las reacciones febriles son un conjunto de pruebas que sirven como su nombre lo indica para
diagnosticar enfermedades que cursan con fiebre, como Fiebre tifoidea (Salmonella), Brucelosis
(fiebre ondulante, fiebre de Malta) y Rickettsiosis (Fiebre Q, fiebre manchada de las montaas
rocallosas).
Los antgenos febriles se usan para detectar anticuerpos en el suero del paciente contra la
Salmonella, Brucella y Rickettsias (reaccin cruzada con Proteus OX-19)
Estas reacciones se basan en el hecho de que cuando el organismo humano es invadido por
agentes infecciosos, responde produciendo anticuerpos aglutinantes contra ellos los cuales se
ponen de manifiesto al entrar en contacto el anticuerpo con el anticuerpo especfico. El ttulo
(valor) del anticuerpo depende del tipo y curso de la enfermedad. Para que los resultados tengan
un valor diagnstico el ttulo de ellos debe aumentar, por lo que se deben tomar 2 muestras
separadas por un periodo de tiempo de 4 semanas para ser comparadas.
El informe del resultado de la prueba se hace tomando en consideracin la dilucin ms alta que
se observe en la reaccin positiva.

FUNDAMENTO
La prueba se basa en una reaccin inmunolgica entre los anticuerpos sricos y el antgeno
correspondiente produciendo una reaccin de aglutinacin macroscpica.
CONTENIDO
Tfico O -Salmonella typhi; Antgeno somtico,pH: 6.51.0
Tfico H -Salmonella typhi; Antgeno flagelar, pH:6.51.0
Paratfico A - pH: 6.51.0
Paratfico B - pH: 6.51.0
Proteus OX-19 - pH: 6.51.0
Brucella abortus - pH: 6.51.0

Suero control negativo: Suero de conejo el cual no ha sido inmunizado contra ningn antgeno, por
lo que no muestra ninguna aglutinacin con los antgenos en suspensin.
Suero Control Positivo: Suero de conejo el cual ha sido inmunizado contra todos los antgenos
febriles en una suspensin.


RECOLECCIN Y PREPARACIN DE LA MUESTRA
Obtenga sangre venosa y separe el suero evitando la hemlisis.
MTODO DE PRUEBA RPIDA EN PLACA
Marcar en una placa de vidrio correctamente indicando el antgeno que se est usando.
NOTA: El reactivo as como los sueros, deben alcanzar la temperatura ambiente para comenzar la
prueba.
1.Depositar en sitios diferentes de la placa las siguientes cantidades del suero a analizar: 0.08 mL,
0.04 mL, 0.02mL, 0.01 mL y 0.005 mL (EL SUERO DEBE ESTARTOTALMENTE CLARO).
2.Agitar el antgeno a utilizar para tener una suspensin uniforme.
3. Aadir 30L de la suspensin de antgeno a cada una de las diferentes cantidades de suero. Se
recomienda utilizar pipetas automticas (el gotero incluido proporciona una gota de 30-40L).
4. Mezclar el antgeno y el suero utilizando un aplicador diferente para cada una de las cantidades
de suero.
5. Girar la placa manualmente o utilizando un agitador mecnico (120 rpm) durante 2 minutos.
6. Realizar la lectura utilizando una fuente de luz directa y observar la aglutinacin macroscpica.
7. Se recomienda incluir controles Positivo y Negativo.

INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS
El grado de aglutinacin se registra como sigue:
4+Aglutinacin del 100% de los organismos3+Aglutinacin del 75% de los organismos
2+Aglutinacin del 50% de los organismos
1+Aglutinacin del 25% de los organismos
-Aglutinacin del 0% de los organismos
El ttulo del suero ser la inversa de la dilucin ms alta en donde se observa una aglutinacin del
50% de microorganismos (2+)Las diluciones del suero en la prueba en placa son aproximadamente
equivalentes a las diluciones para prueba en tubo como se muestra a continuacin.


MTODO DE TITULACIN EN TUBO:
Mezcle bien la suspensin de antgeno mediante agitacin suave; prepare una dilucin 1:20 del
antgeno a utilizar en solucin salina.
1. Colocar 7 tubos de 13 x 100 mm en una gradilla para cada antgeno a probar, marcndolos del 1
al 6 y el tubo7 como control.
2. Aadir al tubo 1, 0.9 mL de solucin salina y 0.5 mL a los 6 tubos restantes.
3. Aadir 0.1 mL del suero a probar al tubo nmero 1, mezcle bien y transfiera 0.5 mL al tubo
nmero 2.
4. Contine esta operacin hasta el tubo nmero 6, eliminar0.5 mL de esta dilucin. El tubo 7
(Control negativo) tendr nicamente solucin salina.
5. Aadir 0.5 mL del antgeno diluido 1:20 a cada uno delos 7 tubos.
6. Agitar bien la gradilla para mezclar el antgeno y el suero e incubar en bao de agua. El tiempo y
temperatura recomendado es el siguiente.

7.Despus de la incubacin, saque la gradilla que contiene los tubos del bao y observe la
aglutinacin. La utilizacin de una fuente de luz directa contra un fondo negro dar mejores
condiciones para la lectura.

8. Registrar los resultados como sigue :
4+Todos los organismos 100% aparecen sedimentados en el fondo del tubo y el sobrenadante es
totalmente claro.
3+Aproximadamente el 75% de los organismos se encuentran sedimentados y el sobrenadante es
ligeramente turbio.
2+Aproximadamente el 50% de los organismos se encuentran sedimentados y el sobrenadante es
moderadamente turbio.
1+Aproximadamente el 25% de los organismos se encuentran sedimentados y el sobrenadante es
turbio.
Negativo No se observa aglutinacin y la suspensin es turbia.
9. Registrar el ttulo del suero en el cual la ltima dilucin de una aglutinacin sea 2+.

PRECAUCIONES
1. Todos los sueros por probar debern estar totalmente claros y libres de contaminacin
bacteriana.
2. No caliente el suero antes de probarlo.
3. Agite bien el antgeno antes de utilizarlo para asegurar una suspensin uniforme.
4. El antgeno se debe mantener en refrigeracin a 2-8Ccuando no se utilice.
5. No congelar.
Se recomienda la utilizacin de sueros control Positivo y Negativo probados en paralelo con la
muestra de suero para asegurar al analista que el antgeno bacteriano en uso es capaz de
reaccionar con su anticuerpo homlogo y mostrar cmo sern los resultados esperados en
muestras de suero positivas y negativas






En las reacciones febriles se incluye:
Fiebre tifoidea (Salmonella). La reaccin de Widal en un mtodo serolgico usado comnmente
en el diagnstico de las fiebres tifoideas, entrica y ondulante, la reaccin mide el ttulo del suero
contra una suspensin de microorganismo conocidos.
La reaccin de Widal es un test basado en os principios de aglutinacin antgeno-anticuerpo,
donde se determina la presencia de anticuerpos contra el antgeno O y H de la Salmonella Typhi
para el serodiagnstico de fiebre tifoidea, sin embargo debido a su falta de especificidad, debe ser
interpretado en el cntexto clnico del paciente. Para considerar el diagnostico de fiebre tifoidea
con titulo Anti-O y Anti-H aislado, se debe conocer su prevalencia en una determinada comunidad,
en trminos generales se acepta ttulos Anti-O y Anti-H 1:160 -200 y 1:50 -100 en zonas
endmicas y no endmicas, respectivamente.
La fiebre tifoidea es una enfermedad infectocontagiosa de alta prevalencia a nivel mundial, deriva
su nombre del latn tyvphos, que significa oscurecimiento de los sentidos o mente turbia; es
causada por la bacteria Salmonella typhi, nombrada as en honor del bacterilogo estadounidense
David Salmon.
Cuadro clnico: La fiebre tifoidea est caracterizada por fiebre alta constante (40), sudoracin
profusa, gastroenteritis y diarrea. Menos comnmente puede aparecer un sarpullido de manchas
aplanadas de color rosceo (roseola).Tradicionalmente se divide en cuatro fases, durando cada
una de ellas una semana aproximadamente.
Primera semana: Durante esta fase sube lentamente la temperatura con una bradicardia relativa,
malestar general, dolor de cabeza y tos. Se ha observado Epistaxis en una cuarta parte de los
casos. Hay leucopenia con eosinopenia y linfocitosis relativa.
Segunda semana: Durante esta fase se produce la postracin. Llegando la fiebre a los 40 C. Hay
bradicardia con un pulso dicrtico. El delirio es frecuente (este delirio le da a la Fiebre Tifoidea el
nombre de fiebre nerviosa). En un tercio de los pacientes se han observado puntos rojos en la
parte inferior del pecho y abdomen. Hay respiracin agitada. El abdomen est distendido y
dolorido en cuadrante derecho inferior. La diarrea puede tambin ocurrir en esta fase, de
apariencia verde y olor caracterstico con apariencia de pur de guisantes. No obstante el
estreimiento tambin es frecuente. El Bazo e hgado estn inflamados con un aumento del nivel
de transaminasas.
Tercera semana: En esta semana si la fiebre tifoidea no se trata, las complicaciones son
frecuentes: Hemorragias Intestinales debidas a la congestin de las Placas de Peyer (serias pero no
necesariamente mortales); Perforacin intestinal en el leon que puede dar lugar a peritonitis;
abscesos que pueden derivar en encefalitis, colecistitis, endocarditis y osteitis; y fallo renal.[La
fiebre es alta.
Finales de Tercera semana/Principios de la cuarta: La temperatura corporal se va restableciendo,
pero el debilitamiento an persiste.
El gnero Salmonella tiene una estructura con tres tipos de antgenos:
1. Antgeno somtico (O)
2. Antgeno flagelar (H) o (d)
3. Antgeno capsular o de envoltura (Vi) o (K)
La prueba que se realiza en las reacciones febriles para deteccin de fiebre tifoidea es la reaccin
de Widal. La reaccin de Widal radica es un mtodo serolgico, rpido, barato, y ampliamente
conocido para el diagnstico de la fiebre tifoidea; sin embargo, tiene grandes limitaciones por
reacciones antignicas cruzadas con otras bacterias (principalmente enterobacterias, incluyendo
Salmonellas no typhi), parsitos, virus y hongos, llevando con frecuencia al clnico a sobre
diagnosticar sndromes febriles como fiebre tifoidea.
Los falsos positivos de la reaccin de Widal tambin han sido descritos en procesos no infecciosos,
como enfermedades autoinmunes (artritis reumatoide- lupus eritematoso sistmico) y
hepatopatas crnicas, lo cual contribuye aun ms a su baja especificidad
En la reaccin de Widal, tambin hay que considerar los falsos negativos como toda prueba de
laboratorio, entre sus causas tenemos
1. Antibioticoterapia temprana, la cual, retrasa la aparicin de anticuerpos (descrito
principalmente con cloranfenicol)
2. Utilizacin de corticosteroides
3. Medicin temprana de anticuerpos (primera semana)
4. Inmunodeficiencias adquiridas y congnitas.
5. Portadores crnicos de Salmonella typhi.
6. Relacionadas a estandarizacin de la prueba


Interpretacin
Un diagnstico de fiebre tifoidea puede considerarse si los ttulos inciales se cuadruplican entre
una y cuatro semanas.Sin embargo, el clnico no puede esperar este tiempo para establecer un
tratamiento, por lo cual se debe considerar la posibilidad de esta entidad con un ttulo aislado
determinado.
Este punto de corte depende de la prevalencia de salmonelosis en la comunidad estudiada, siendo
as, se han establecido protocolos diagnsticos en varios pases, teniendo en cuenta los estudios
realizados en sus regiones.
Adems, debemos saber que una reaccin negativa no excluye el diagnstico de fiebre tifoidea en
el contexto de un cuadro clnico compatible.
El diagnstico definitivo de Fiebre tifoidea se establece mediante el aislamiento de Salmonella en
cultivo (hemocultivo, mielocultivo) de un paciente con cuadro clnico compatible

Brucelosis (Brucella abortus). La Brucelosis (conocida tambin como fiebre de Malta, fiebre
ondulante, enfermedad de Bang o fiebre del Mediterrneo) es una Zoonosis es decir una
enfermedad que es transmitida de los animales al humano causada por bacterias del genero
Brucella. La enfermedad se adquiere por ingerir alimentos contaminados o mantener un estrecho
contacto con el ganado. La incidencia y prevalencia de la brucelosis tienen importantes variaciones
geogrficas. Las zonas de mayor prevalencia corresponden a la regin del Mediterrneo, Asia
occidental, algunas partes de frica y Amrica (Estados Unidos, Mxico, Brasil, Per, Colombia y
Argentina).
La brucelosis en el hombre se transmite por la ingesta de leche, sus productos y derivados
contaminados, no pasteurizados, por contacto con productos, subproductos y desechos como
tejidos o excreciones de animales enfermos, y por inoculacin de brucelas o inhalacin del polvo
de corrales o mataderos, donde stas se encuentran; de ah que atender animales que se
sospeche que han estado en contacto con el agente, manipular carne y vsceras de animales
infectados y trabajar en laboratorios, se consideren actividades ocupacionales de alto riesgo.
Cuadro clnico:
Es una enfermedad que se autolimita o se vuelve crnica. Muchos pacientes padecen infecciones
asintomticas.
La forma aguda de la brucelosis se caracteriza por fiebre que en la mayora de los casos es alta e
intermitente (ondulante), presentndose generalmente por la tarde/noche acompaada de
cefalea intensa frontal y occipital, y diaforesis. En bazo, hgado, ganglios linfticos aparecen
ndulos granulomatosos que pueden evolucionar hasta convertirse en abscesos.
En la forma crnica, las manifestaciones ms comunes son:
1. Sndrome febril: habitualmente de poca intensidad en la mayora de los casos;
2. Osteoarticulares: poli o monoartritis, grnulos seos, abscesos.
3. Psquicas: sndrome depresivo, nerviosismo, irritabilidad.
4. Digestivas: esplenopahetomegala, hepatitis.
5. Neurolgicas: meningobrucelosis, polineuritis, sndrome citico, sndrome radicular.
6. Hematolgicas: anemia hemoltica, anemia ferropriva.
7. Respiratorias: bronquitis, neumona. Diagnstico:
El diagnstico de certeza se establece aislando al microorganismo a partir de cultivos de sangre,
mdula sea u otros tejidos. Los mtodos serolgicos como las reacciones febriles slo aportan un
diagnstico presuntivo.
Existen varios metodos serologicos para el diagnstico de Brucelosis como el Rosa de Bengala, 2-
mercapto-etanol, y la reaccin de Huddleson, esta ultima es la utilizada en la prueba de reacciones
febriles.Reaccin de Huddleson: es una reaccin de aglutinacin rpida en placa donde se
enfrentan cantidades decrecientes del suero a investigar con cantidades constantes de antgeno y
se observa la presencia o no de aglutinacin. Existe una escala de ttulos, establecida por
convencin, que permite la expresin de resultados. Se utiliza una suspensin Antgenos de B.
abortus al 3-10% de grmenes en fenol, con verde brillante y cristal violeta para la busqueda de
anticuerpos.
Interpretacin:
En la interpretacin de estos resultados, se deben tomar en consideracin los aspectos clnico-
epidemiolgicos de cada caso, hay que considerar los falsos positivos y falsos negativos.
El tratamiento del paciente sospechoso o confirmado debe indicarse bajo vigilancia mdica, o por
personal debidamente capacitado.

Rickettsiosis (Proteus 0X-19): Las Rickettsias son bacterias cocobacilares, muchas de ellas son
transmitidas por vectores como pulgas, garrapatas y piojos. En general la Rickettsiosis se
considera una zoonosis, siendo el humano un huesped accidental excepto por el tifo epidemico
(transmitido por piojos)
Son parsitos intracelulares estrictos, por eso existieron dudas mucho tiempo sobre si pertenecan
a los virus o a las bacterias. Son muy sensibles y raramente sobreviven fuera del husped
(reservorio o vector), a excepcin de Coxiella burnetii (productora de la fiebre Q) que es resistente
a la desecacin, al calor y la luz solar y se transmite fundamentalmente por va area. El resto es
inoculado al husped directamente a travs de una picadura (indolora) en la dermis producida por
el vector, por contaminacin de la picadura con las heces del insecto o bien por inoculacin de las
mucosas con las heces contaminadas del mismo.

La Rickettsiosis se puede dividir en 3 grandes grupos
1. Grupo Tifus: tifo epidmico, por Rickettsia prowazekii, transmitido por piojos (Poulex ivitans) y
tifo clsico endmico, por Rickettsia typha por la pulga.
2. Grupo de Fiebre manchada: Rickettsia rickettsii, que implica ms de 30 especies, transmitido
principalmente por caros y pulgas (Fiebre manchada de las montaas rocallosas).
3. Tifus Scrub: Orientia tsutsugamushi, tambin llamado tifo de los matorrales, transmitido por
caros.
Cuadro clnico: El periodo de incubacin es de aproximadamente 7 das y varia de 2 a 14 das. Los
sntomas en general, se caracterizan por fiebre, cefalea (dolor de cabeza), rash (erupciones
cutneas), dolor abdominal, hepatomegalia, esplenomegalia y sntomasrespiratorios como tos,
entre otros sntomas, acompaados de anormalidades en las muestras de laboratorios como:
anemia, neutrofilia, elevacin de las enzimas hepticas, trombocitosis e hipoalbuminemia, que se
pueden confundir con leptospirosis, otras Rickettsiosis.
Diagnstico: es fundamental para el diagnstico considerar el contexto epidemiolgico: zona
geogrfica, viajes a zonas endmicas, contacto con animales reservorio, antecedentes de
acampadas y medio profesional.
La confirmacin del diagnstico de una enfermedad por Rickettsias requiere estudios serolgicos
ya que cultivar la bacteria slo es posible en laboratorios especializados y adems se precisan
cultivos celulares (parecidos a los cultivos virales)
En las reacciones febriles se utiliza la reaccin de Weil-Felix, esta prueba en si no busca Rickettsias,
se basa en la capacidad del suero del paciente infectado por Rickettsias para aglutinar ciertas
cepas de Proteus (Reaccin cruzada) por lo que es poco sensible y especfica y siempre deber
seguirse de pruebas confirmatorias (fijacin del complemento, hemaglutinacin indirecta,
inmunofluorescencia directa e indirecta y otras). La reaccin de Weil Felix siempre es negativa en
la fiebre Q.
Tratamiento: Como la evidencia serolgica de la infeccin no aparece antes de la segunda semana,
el tratamiento siempre se instaurar empricamente.El tratamiento antibitico consiste en
tetraciclinas como la doxiciclina, y como alternativa el cloranfenicol