L1-ML-002 Manual de Laboratorio de Bioquimica Basica

Universidad Autnoma de Baja California
Facultad de Medicina y Psicologa

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ML Manual de Laboratorio de Bioqumica bsica Pgina 1 de 53

GC-FR-012 Rev. 4

Manual de Laboratorio de Bioqumica Bsica

Clave de la materia: 11274

Plan de estudios 2010-1

Laboratorio 1

Autor o autores:
M.C. Raquel Cortez Talabera.
M.C. Mara Ruth Vsquez Herrera
Q.F.B. Mayra Lilly Martnez Cruz

Elabor Revis Autoriz
Q.F.B. Mayra Lilly Martnez Cruz MC. Cristian Rodrguez Arroyo Dr. Alfredo Renn Gonzlez Ramrez


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NDICE

1. Sesin No. 1: Encuadre, clasificacin y Separacin de Residuos Peligrosos Biolgico-
Infecciosos (RPBI) generados en el Laboratorio y bioseguridad en la prctica mdica.......... 5
1. Sesin No. 2: Introduccin al laboratorio de bioqumica .............................................. 13
1. Sesin No.3: Toma y manejo de muestras por el laboratorio 1 ..................................... 19
1. Sesin No.4: Toma y manejo de muestra por el laboratorio 2 ...................................... 23
1. Sesin No.5: Determinacin de protenas .................................................................... 26
1. Sesin No.6: Determinacin de albmina .................................................................... 29
1. Sesin No.7: Cintica enzimtica ................................................................................ 31
1. SesinNo.8 y 9: Determinacin de glucosa .................................................................. 33
1.-Sesin No. 10: Determinacin de Colesterol total y HDL colesterol ................................ 36
1.-Sesin No. 11: Determinacin de Triacilglicridos .......................................................... 39
1.-Sesin No. 12: Determinacin de cuerpos cetnicos en orina .......................................... 41
1.-Sesin No. 13: Determinacin de cido rico .................................................................. 44
1.-Sesin No. 14: Determinacin de creatinina srica .......................................................... 46
1.-Sesin No. 15: Determinacin de nitrgeno ureico ......................................................... 48
1.-Sesin No. 16: Diagnstico clnico de laboratorio ........................................................... 50


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PRLOGO

Los autores de este manual de bioqumica muestran una serie de procedimientos sobre actividades que se
realizaran durante el transcurso del semestre, contiene una series de practicas que se evalan a travs de
normas y procedimientos de cada una relacionado con la materia. El manual sigue el nuevo mtodo de
enseanza basado en competencias, con el fin de orientar a los alumnos sobre las actividades programadas.
Es importante tener un manual impreso a fin que el estudiante tenga una orientacin sobre las tareas ha realizar
en el laboratorio de bioqumica. El contenido de esta manual muestra las actividades del laboratorio y se
evalan a travs de normas de bioseguridad y los procedimientos con base a los Reglamentos Generales de la
UABC.

I. Introduccin

La Bioqumica es la ciencia que estudia los procesos qumicos de los seres vivos desde dos puntos de vista:
estructural y funcional. Mediante el primero conocemos la distribucin espacial de la materia viva; con el
segundo, su devenir en el tiempo.

La aproximacin morfolgica conduce al estudio de las formas propias del ser vivo; la aproximacin funcional
estudia funciones, es decir, variaciones temporales que se dan en el mismo con el fin de mantener su organismo
en un estado estacionario y de reproducir en otro ser vivo su material gentico. De todas las funciones, ninguna
hay ms generalizada que la que llamamos Metabolismo, es decir, el conjunto de reacciones qumicas que un
organismo es capaz de llevar a cabo.

Para comprender la influencia de la Bioqumica sobre la Biologa, es preciso conocer los elementos qumicos de
la materia viva y las estructuras completas de muchos compuestos biolgicos (protenas, azcares, lpidos,
nucletidos, vitaminas y hormonas) y su comportamiento durante las reacciones metablicas. Ser preciso
conocer la estequiometria y los mecanismos de un gran nmero de reacciones. Adems el conocimiento de los
principios bsicos de la termodinmica es esencial para entender de qu manera obtienen los seres vivos la
energa de los alimentos.

El propsito de este manual es proporcionar al alumno los recursos necesarios para un buen desarrollo de las
prcticas, as como brindarle informacin bsica que utilizar durante el proceso de las mismas. Este manual
consta, de diecisis prcticas de laboratorio, se enfocan a temas que estn ntimamente relacionados con
procesos metablicos que realiza la clula dentro del organismo, lo cual le permite al alumno conocer y
comprender de una mejor manera el funcionamiento del cuerpo humano.

II. COMPETENCIA GENERAL DE LA ASIGNATURA.

Adquirir la habilidad para la obtencin de especmenes de calidad, con calidez y tica profesional. Aplicar las
tcnicas del laboratorio para la interpretacin clnica de trastorno de la salud y relacionar los resultados de los
distintos exmenes con posibles patologas, utilizando los avances tecnolgicos y la bibliografa cientfica, con
confidencialidad y actitud de servicio.


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III. REGLAMENTO DE LABORATORIO.

Para lograr las competencias de las prcticas de laboratorio es necesario que el usuario respete el reglamento
general de los laboratorios, mismo que puede consultar en la pgina electrnica de la facultad.

IV. PROGRAMACION DE PRCTICAS


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1. Sesin No. 1: Encuadre, clasificacin y Separacin de Residuos Peligrosos Biolgico-
Infecciosos (RPBI) generados en el Laboratorio y bioseguridad en la prctica mdica.

2. Competencia a desarrollar en la sesin.
Manejar los RPBI, identificndolos, separndolos, disponindolos en los recipientes adecuados y
anotando en la bitcora correspondiente, para mantener el sitio de trabajo como est consignado en la
NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002 y la gua de cumplimiento de la Norma Oficial Mexicana y evitar la
contaminacin y los accidentes, con responsabilidad, disciplina y honradez.

3. Mecanismos de evaluacin y Evidencia de desempeo.
a) Que el alumno identifique y disponga los residuos peligrosos biolgico-infecciosos (RPBI) en la estacin
de destreza y evaluacin de RPBI con una eficiencia del 100%.(Solo para la prctica #1)

Instrumento de evaluacin general: Reporte de prcticas de laboratorio.

Desarrollo en sesiones del laboratorio 20 %
Reporte de prcticas 30 %
Exposicin de tema PPT 20 %
Examen de toma de muestra sangunea 30%

70 %
Departamental 30%

Requiere 80% mnimo de asistencias para tener derecho a calificacin de laboratorio.
No existen prcticas de reposicin
Desarrollo en sesiones del laboratorio implica: (lista de cotejo)
Cumplir las normas establecidas para el buen funcionamiento del laboratorio.
Conducta, actitud y destreza en las prcticas.
Conocimiento y manejo del material y equipo del laboratorio.
Asistencia participativa en las sesiones de laboratorio.
Obtencin y conservacin de muestras.
Interpretacin de los resultados de la(s) prueba(s) realizada(s).
Elaboracin de un argumento que justifique los resultados obtenidos
Aplicacin de los conocimientos adquiridos durante todas las prcticas del semestre.
Discusin de las sesiones de laboratorio, en un ambiente de cordialidad, respeto y
compaerismo.

Reporte de prcticas y exposicin de tema.

Reporte
Portada ( Incluye integrantes del equipo y datos de cada alumno)
Resultados de las pruebas (Datos del paciente)
Observaciones
Conclusiones
Tareas extras que les deje su profesor

Calidad, contenido y conocimiento de la presentacin.
Inclusin de caso clnico


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Exposicin Anlisis, discusin y conclusiones

Examen de toma de muestra:
Presentacin con el paciente
Limpieza de la zona
Colocacin del torniquete
Numero de punciones
Eleccin del tubo
Rotulacin del tubo
Desecho de RPBI

Nota: este examen se realizar en la sesin 16.

4. Fundamento terico e informacin de apoyo.
En la realizacin de las prcticas del Laboratorio de Biologa Celular, se generan RPBI por lo que es
importante conocer y aplicar las Normas Oficiales Mexicanas en especial la NOM-087-SEMARNAT-SSA1-
2002 y la gua de cumplimiento de la Norma Oficial Mexicana. Los generadores de RPBI son los lugares
pblicos, sociales o privados, fijos o mviles cualquiera que sea su denominacin, que estn relacionados
con servicios de salud y que presten servicios de atencin mdica ya sea ambulatoria o para internamiento
de seres humanos y utilizacin de animales de bioterio o zooterio. En las reas de generacin de los
establecimientos generadores, se debern separar y envasar todos los residuos peligrosos biolgico-
infecciosos, de acuerdo con sus caractersticas fsicas y biolgicas infecciosas, conforme a la Norma Oficial
Mexicana. Durante el envasado, los residuos peligrosos biolgico-infecciosos no debern mezclarse con
ningn otro tipo de residuos municipales o peligrosos.

Los generadores y prestadores de servicios, adems de cumplir con las disposiciones legales aplicables
deben: cumplir con las disposiciones correspondientes a las siguientes fases de manejo, segn el caso:
a) Identificacin de los residuos.
b) Envasado de los residuos generados.
c) Almacenamiento temporal.
d) Recoleccin y transporte externo.
e) Tratamiento.
f) Disposicin final.
El laboratorio debe contar con sealamientos y letreros alusivos a la peligrosidad de los mismos, en lugares y
formas visibles, el acceso a esta rea slo se permitir al personal responsable de estas actividades. Algo
importante para considerar es minimizar la generacin de RPBI identificando y segregando los materiales
que NO los contengan, por ejemplo: papel de envoltura de gasa estril, envoltura de la jeringa, protector de
las agujas, etc. En el desarrollo de las actividades se deber separar adecuadamente los materiales que son
reciclables, depositndolos en los recipientes destinados para su posterior tratamiento y recuperacin


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(Ejemplo: tubos de ensayo, matraces, etc.). En el manejo de RPBI se debern utilizar los implementos de
proteccin personal para su manejo e identificar los sitios designados en el laboratorio para depositarlos.
En esta prctica se envasaran los residuos biolgicos peligrosos basndonos en la clasificacin de estos, por
sus caractersticas como lo menciona la NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002 segn corresponda al tipo de
contenedor y color. Los RPBI que se genera en el desarrollo de una prctica en el laboratorio de Anlisis
Clnicos (Microbiologa, Parasitologa, Biologa Celular, Patologa, Histologa) pueden ser los siguientes: En
el desarrollo de la prctica se generan tubos con sangre, jeringas, algodones, como se realiza el envasado
de los residuos segn la clasificacin.

Los tubos con las muestras de sangre en recipientes hermticos Rojo, si los tubos son de plstico se
pueden envasar en una bolsa Roja y depositar en el rea de almacn temporal dentro del laboratorio para
que posteriormente pase al rea de almacn temporal general de la Facultad.

Cultivos y cepas que se generan en diferentes prcticas se envasaran en bolsa de plstico roja, cumpliendo
las especificaciones que marca la NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002.

Patolgicos en este laboratorio se pueden generar lquidos patolgicos, los que se envasaran en
recipientes rgidos amarillos y cuando fuesen slidos patolgicos se envasaran en bolsa amarilla, para
depositarlo en el almacn temporal del laboratorio.

Los punzocortantes se envasan en contenedor rgido rojo como los portaobjetos, cubreobjetos, agujas,
lancetas, estos se depositan en el rea de almacn temporal del laboratorio. En caso de tener algn
incidente respecto a los RPBI se debe de seguir el manual de contingencia donde se cuenta con las
instrucciones dependiendo del incidente que se trate y se soluciona con el material para esta contingencia
que se encuentra en el laboratorio.

Residuos no anatmicos se generan guantes gasas, abate lenguas, cubre bocas, etc., los cuales se
envasan en bolsa roja en la rea de almacn temporal del laboratorio.

TABLA No. 1: ENVASADO DE RPBI

Denominacin Estado fsico Envasado Descripcin

Sangre

Liquido

Envase Rojo Hermtico

La sangre y sus componentes, slo en su forma
lquida, as como sus derivados no comerciales,
incluyendo las clulas progenitoras,
hematopoyticas y las fracciones celulares o
acelulares de la sangre resultante
(hemoderivados),
Suero y plasma tubo de vidrio.

Slido y
lquidos en
recipientes
con tapa
Bolsa roja
Cogulo, suero y plasma en tubo de plstico con
tapadera.


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Cultivos y
cepas de
agentes
infecciosos

Solid

Bolsa roja
Cultivos en caja y placas de Microescan
Solid
Recipiente hermtico
Cultivos en Tubos de vidrio
Slidos

Bolsa roja
Guantes contaminados, medios de transporte, asas
de plstico.
Liquido

Recipiente hermtico
Colorantes y lquido de enjuague de tinciones.

Patolgicos

Slido/liquido

Bolsa Amarilla / Envase
amarillo
Biopsias, rganos, animales, tejidos.

Residuos no
anatmicos

Slido
Bolsa Roja
Gasas, hisopos, papel, guantes, algodn que se
encuentre empapado de sangre u otro
contaminante,
Tiras reactivas, asas de plstico, placas de
reaccin, cubetas de plstico para el espectro,
jeringas, pipetas transfer de plstico, abatelenguas

Residuos
punzocortantes

Slido

Envase rojo hermtico
para punzocortantes

Lancetas, agujas, agujas de bolsa de sangra,
capilares de hematocrito, aplicadores, tubos rotos,
portaobjetos y cubreobjetos, puntillas, jeringas de
insulina.


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El rea de residuos peligrosos en trnsito se encuentra previamente sealada en el Laboratorio con el
smbolo universal que lo identifica, todos los recipientes que contienen RPBI deben ser colocados en estos
sitios.
Ejemplos de reas temporales (RPBI) previamente sealadas en el laboratorio como se muestra en las
siguientes imgenes:

De acuerdo a la NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002 el personal responsable del manejo de los RPBI(sangre,
cultivos y cepas de agentes infecciosos, patolgicos, residuos no anatmicos y objetos punzocortantes ),
realiza otras actividades como es: recoleccin y transporte al almacn general (por el personal de
mantenimiento), almacenamiento y entrega a la empresa tratadora (Tcnicas medioambientales WINCO),
elaboracin de registros, bitcoras, reportes, capacitacin, monitoreo, disposicin y tratamiento interno y
externo.

Cules son las recomendaciones para llevar a cabo la recoleccin y el transporte interno de los
RPBI?

1.- Recoleccin y Transporte Interno: Consiste en la recoleccin y el traslado de los desechos desde los
sitios de generacin hasta el almacenamiento temporal y final.

2. Cules son los requisitos para el almacenamiento temporal?

Una vez realizada la recoleccin interna por el personal encargado, se debern transportar los residuos al
rea especfica denominada almacn temporal, (menos los generadores de RPBI clasificados en el nivel I de
acuerdo con la NOM-087-SEMARNATSSA1-2002). Esta rea sirve para el acopio y almacenamiento de los
residuos, mismos que sern almacenados dentro de los carros de recoleccin y debern estar rotulados con


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el smbolo universal de riesgo biolgico, con la leyenda RESIDUOS PELIGROSOS BIOLGICO-
INFECCIOSOS.

3. Cul es el periodo de almacenamiento temporal mximo de acuerdo al nivel del establecimiento
generador?

Existen tres niveles de generacin de residuos segn la Norma Oficial Mexicana NOM-087-SEMARNAT-
SSA1-2002 y los periodos de almacenamiento temporal estn sujetos al nivel de generacin de los R.P.B.I.
como se muestra a continuacin.

TABLA No. 2: NIVELES DE GENERACIN DE RESIDUOS

NIVEL I NIVEL II NIVEL III
Unidades hospitalarias de 1 a
5 camas e instituciones de
investigacin con excepcin
de los sealados en el Nivel
III.

Laboratorios clnicos y bancos
de sangre que realicen
anlisis de 1 a 50 muestras al
da.

Unidades hospitalarias
psiquitricas.

Centros de toma de muestras
para anlisis clnicos.
Unidades hospitalarias de 6
hasta 60 camas;

Laboratorios clnicos y bancos
de sangre que realicen
anlisis de 51 a 200 muestras
al da;

Bioterios que se dediquen a la
investigacin con agentes
biolgico-infecciosos, o

Establecimientos que generen
de 25 a 100 kilogramos al
mes de RPBI.
Unidades hospitalarias de
ms de 60 camas;

Centros de produccin e
investigacin
experimental en
enfermedades
infecciosas;

Laboratorios clnicos y
bancos de sangre que
realicen anlisis a ms de
200 muestras al da, o

Establecimientos que
generen ms de 100
kilogramos al mes de
RPBI.

4. Qu se debe hacer para realizar la recoleccin y transporte externo de los RPBI?

La recoleccin y el transporte externo de los RPBI, deber realizarse conforme a lo dispuesto en los
ordenamientos jurdicos aplicables y adems cumplir con lo siguiente:

1. Slo podrn recolectarse los residuos que cumplan con el envasado, embalado y etiquetado o rotulado
como se establece en la Norma.

2. Los residuos peligrosos biolgico-infecciosos no debern ser compactados durante su recoleccin y
transporte.

3. Los contenedores deben ser desinfectados y lavados despus de cada ciclo de recoleccin.


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4. Los vehculos recolectores deben ser de caja cerrada y hermtica, contar con sistemas de captacin de
escurrimientos, y debern contar con sistemas de refrigeracin para mantener los residuos a una
temperatura mxima de 4 C.

5. Adems los vehculos con capacidad de carga til de 1,000 kg o ms debern operar con sistemas
mecanizados de carga y descarga.

6. Durante su transporte, los RPBI sin tratamiento no debern mezclarse con ningn otro tipo de residuos.

5. En qu consiste el tratamiento de RPBI?

Los RPBI sern tratados por mtodos fsicos o qumicos que garanticen la eliminacin de microorganismos
patgenos y deben hacerse irreconocibles para su disposicin final en los sitios autorizados.

Cuando un objeto tiene agentes biolgico-infecciosos se dice que es un objeto sptico. Cuando una cosa
est libre de estos agentes se dice que es un material asptico, es decir, que hay asepsia. Cuando se
aplican medidas para eliminar a estos agentes se dice que se aplica antisepsia. Estas medidas pueden ir
desde el aseo o limpieza, la higiene, la desinfeccin, o la esterilizacin.

Los mtodos de tratamiento que apliquen tanto a establecimientos generadores como a prestadores de
servicio dentro o fuera de la instalacin del generador, requieren autorizacin previa de la SEMARNAT, sin
perjuicio de lo establecido por la Secretara de Salud de conformidad a las disposiciones aplicables a la
materia.

Norma Oficial Mexicana NOM-003-SSA2-1993, Para la disposicin de sangre humana y sus componentes
con fines teraputicos.

Norma Oficial Mexicana NOM-010-SSA2-1993, Para la prevencin y control de la infeccin por Virus de la
Inmunodeficiencia Humana.

Norma Oficial Mexicana NOM-013-SSA2-1994, Para la prevencin y control de las enfermedades bucales.

Norma Oficial Mexicana NOM-036-SSA2-2002, Prevencin y control de enfermedades. Aplicacin de
vacunas, toxoides, sueros, antitoxinas e inmunoglobulinas en el humano.

6. Equipo, Instrumental, Material e insumos.

a) Recipientes y bolsas especiales para depsito de RPBI
b) Jeringas, tubos, gasas, asas de inoculacin, caja petri y todo el material que potencialmente pueda
generarse en los diferentes laboratorios. (Kit de simulacin RPBI)

7. Metodologa de la sesin.

a) Identifique y separe los materiales de acuerdo a la tabla 1.


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b) Identifique y los diferentes niveles de generacin de residuos segn la Norma Oficial Mexicana NOM-087-
SEMARNAT-SSA1-2002 y los periodos de almacenamiento temporal en la Facultad de Medicina y
Psicologa de la UABC

C) Identifique el rea de depsito de los RPBI en el Laboratorio y construir una estacin para evaluacin la
destreza del alumno, clasificando el conjunto de materiales generados en el laboratorio con los recipientes y
bolsas para su adecuado almacenamiento.

8. Bibliografa.

Exposure to Blood, What Healthcare Personnel Need to Know. Disease Control and Prevention
National Center for Infectious Diseases Divison of Healthcare Quality Promotion and Division of Viral
Hepatitis. Junio del 2003. http://www.cdc.gov/ncidod/dhqp/pdf/bbp/Exp_to_Blood.pdf

NORMA Oficial Mexicana NOM-087-ECOL-SSA1-2002, Proteccin ambiental Salud
ambiental - Residuos peligrosos biolgico-infecciosos - Clasificacin y especificaciones de
manejo. Secretara de Medio Ambiente y Recursos Naturales [en lnea]. [Fecha de acceso 20 de enero de
2003]. http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/087ecolssa.html

La gua de cumplimiento de la Norma Oficial Mexicana NOM-087. Colaboracin entre la Secretara de
Medio Ambiente y Recursos Naturales, la Procuradura Federal de Proteccin al Ambiente, la Secretara de
Salud, y la Comisin Federal para la Proteccin contra Riesgos Sanitarios. [Fecha de acceso martes 14 de
abril del 2009]. http://www.cofepris.gob.mx/work/sites/cfp/resources/LocalContent/1909/5/GuiaNOM087.pdf

Norma Oficial Mexicana NOM-003-SSA2-1993, Para la disposicin de sangre humana y sus componentes
con fines teraputicos. Secretara de Salud. [Fecha de acceso 18 de julio de 1994].
http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/003ssa23.html
Norma Oficial Mexicana NOM-010-SSA2-1993, Para la prevencin y control de la infeccin por Virus de la
Inmunodeficiencia Humana. Secretara de Salud. [Fecha de acceso 18 de julio de 1994].
http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/010ssa23.html
Norma Oficial Mexicana NOM-013-SSA2-1994, Para la prevencin y control de las enfermedades bucales.
Secretara de Salud. [Fecha de acceso 11 de enero de 1999].
http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/m013ssa24.html

NORMA Oficial Mexicana NOM-036-SSA2-2002, Prevencin y control de enfermedades. Aplicacin de
vacunas, toxoides, sueros, antitoxinas e inmunoglobulinas en el humano. Secretara de Salud. [Fecha de
acceso 17 de julio de 2003]. http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/036ssa202.html


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1. Sesin No. 2: Introduccin al laboratorio de bioqumica

2. Competencia a desarrollar en la sesin
Revisar las normas de orden, organizacin y biotica en el laboratorio, utilizando el material y equipo de
laboratorio de forma adecuada, con respeto y comunicacin con el grupo e instructor.


Reporte de laboratorio, que incluya fotografas de los equipos utilizados en la prctica de laboratorio.


Para la realizacin de las prcticas de laboratorio se requiere que el equipo este en optimas condiciones y
que el operador los utilice de forma correcta, de lo contrario se corre el riesgo de accidentes y daos a los
aparatos que estn manejando. Para prevenir y disminuir accidentes es importante identificar los riesgos
existentes en el rea de trabajo y las medidas a tomar en el momento en que lleguen a presentarse.

BAO MARIA:

Los baos Mara, son equipos de uso frecuente en el Laboratorio Clnico, ya que en las reacciones
qumicas la temperatura es un factor importante. Tienen la funcin de llevar y mantener una muestra a
una temperatura especfica, para activar procesos enzimticos o proporcionar condiciones ptimas en
serologa.

Los baos Mara, incluyen termostatos desde 25C hasta 100C, los ms recientes traen incorporados,
bombas de circulacin de agua que permiten mantener la temperatura uniforme. Por lo general su
construccin es de acero inoxidable.

Los baos Mara secos, son bloques de calentamiento a temperaturas prefijadas.

Operacin del Equipo

Verificar que el aparato est conectado.


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Tener cuidado que el agua cubra la resistencia en forma completa, especialmente en los
baos que utilizan bombas de circulacin.
Utilizar siempre agua destilada, el agua comn forma dentro de los baos y sobre las
resistencias capas de carbonato, que con el tiempo sirven de aislante, dando como resultado
inestabilidad en la temperatura.
Encender el equipo y ajustar a la temperatura deseada, por medio del regulador termosttico
Al utilizar termmetros en un Bao de Mara, este debe estar suspendido dentro del agua,
NUNCA descansando en el fondo del bao.
El agua del bao Mara, debe cambiarse semanalmente.
Los alumnos deben reportar de inmediato cualesquier problema con el equipo al instructor o al
auxiliar de laboratorio.
Llenar el registro correspondiente.

Evitar utilizar el bao Mara con las siguientes sustancias:

a) Blanqueadores.
b) Lquidos con alto contenido de cloro.
c) Soluciones salinas dbiles como cloruro de sodio, cloruro de calcio o compuestos de cromo.
d) Concentraciones fuertes de cualquier cido.
e) Concentraciones fuertes de cualquier sal.
f) Concentraciones dbiles de cidos hidroclrico, hidrobrmico, hidroidico, sulfrico o crmico.
g) Agua desionizada, pues causa corrosin y tambin perforaciones en el acero inoxidable.

Solucin de problemas:

No hay energa elctrica.
o Revisar si el bao mara esta desconectado.
Interruptor defectuoso.
o Cambiar interruptor.
Fusible defectuoso.
o Sustituir fusible.
La temperatura es superior a la seleccionada.
o Control de temperatura defectuoso.
o Cambiar control de temperatura.
o Verificar seleccin de parmetros.
El bao de Mara no calienta.
o Control de temperatura desgraduado.
o Graduar control de temperatura.
o Resistencia(s) defectuosa(s).
o Cambiar resistencia(s).
o Control lmite desgraduado.
o Graduar control lmite.
Las muestras se calientan lentamente.
o Tanque vaco o con muy poco fluido.
o Llenar tanque hasta el nivel recomendado.
La temperatura aumenta muy lentamente.
o Resistencia(s) defectuosa(s).
o Cambiar resistencia(s).
o Control de temperatura defectuoso.


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o Sustituir control de temperatura.

Advertencia:

Antes de efectuar cualquier actividad de mantenimiento, desconectar el equipo de la toma de alimentacin
elctrica.

CENTRFUGA

Las centrfugas son equipos utilizados en los laboratorios clnicos, para separar el plasma de los otros
componentes y poder ser analizado.

Las partes principales de este equipo son:
Tapadera. Impide el acceso a las muestras, mientras estas
estn en movimiento.
Cmara o gabinete. Espacio fsico donde se realiza el
proceso de centrifugacin.
Base. Est construida de materiales pesados, y con
sistemas de fijacin a las superficies, para brindar
estabilidad al equipo.
Interruptor. Permite controlar el suministro de energa (encendido y apagado).
Control de Tiempo. Permite controlar el tiempo de centrifugacin.
Tacmetro. Muestra la velocidad de centrifugacin (revoluciones por minuto, RPM).
Freno. Permite detenerla en situaciones de emergencia, utilice con precaucin.
Porta-muestras. Son recipientes donde se colocan las muestras.

Operacin del equipo
Cargar la centrfuga correctamente.
Asegurarse que la centrfuga est bien cerrada.
Accionar el interruptor de encendido, fijando previamente la velocidad y el tiempo de
centrifugacin (s el equipo cuenta con estos controles).
Observar el funcionamiento; si no existiese ningn problema contine con su trabajo
Si existen problemas de vibracin, detener y balancear correctamente los portamuestras.
Colocar las cargas que tienen el mismo peso de forma opuesta en el rotor.
Si tiene un nmero impar de muestras, utilizar un tubo con agua de igual peso
Nunca colocar un nmero impar de muestras dentro de la centrfuga.
Limpiar la centrfuga de restos de muestras, vidrio o polvo.
Cuando est centrifugando mantener cerrada la tapadera.
Si algo se rompe apagar inmediatamente el equipo y no abrir hasta que se detenga.

ESPECTROFOTMETRO

Son equipos utilizados en el Laboratorio Clnico para el anlisis de muestras fisiolgicas, basndose
en el principio que cada compuesto qumico absorbe o emite energa lumnica de diferente longitud de


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onda. Esta longitud puede estar en el espectro de luz visible, o en otra parte del espectro
electromagntico.
La diferencia fundamental entre un
espectrofotmetro y fotocolormetro, consiste en
que el fotocolormetro trabaja nicamente en el
espectro de luz visible y selecciona una longitud
de onda determinada mediante filtros fijos.

En cambio, un Espectrofotmetro es capaz de
trabajar, no solo con la luz visible sino que en
otras regiones del espectro electromagntico
(ultravioleta e infrarroja). Adems posee un
monocromador para seleccionar la longitud de
onda deseada.

Antes de utilizar el espectrofotmetro o fotocolormetro es indispensable realizar rutinas bsicas de
calibracin para asegurarnos que el aparato proporcione datos y lecturas confiables.

Operacin del equipo
Encender el equipo y dejar que se caliente por lo menos 15 minutos (en aparatos
automticos, dar una seal cuando est listo para funcionar).
Seleccionar la longitud de onda deseada (depende de la muestra a ser leda y del reactivo
utilizado).
Elegir la funcin de absorbancia o transmitancia.
Ajustar el aparato a cero con agua destilada.
Si el aparato que se va a utilizar tiene las dos escalas (absorbancia y transmitancia) ajustar
las lecturas a cero de absorbancia y 100% de transmitancia utilizando los controles grueso y
fino.
Leer un estndar de concentracin conocida y ajustar el aparato a esa concentracin.
Si el aparato que se va a utilizar no tiene control estndar, ste se utiliza para obtener el factor
de calibracin, dividiendo la concentracin del estndar entre su lectura.

Clinitek 50

Operacin del equipo

1. Conectar a la energa elctrica
2. Seleccione la tira reactiva de acuerdo a la prueba.
3. Verifique la caducidad de los Reactivos.
4. Mezcle la muestra de orina (12 ml) y sumerja completamente la tira
reactiva Bayer Multistix 10 SG o Micro albmina (segn sea el caso).
Asegrese de que todas las reas reactivas (pad) se hayan humedecido.
5. Retire inmediatamente la tira reactiva de la muestra de orina deslizando su borde por el canto del
recipiente para eliminar el exceso de orina.


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6. Saque la tira para eliminar el exceso de orina tocando el borde de la misma con una toalla de papel o
papel secante. No arrastre la tira contra el papel; ste solo debe tocar el borde de la tira.
7. Inmediatamente pulse cualquiera de las dos teclas verdes (iniciar), aparece en la pantalla el tiempo
que dispone para colocar la tira. Usted dispone de 10 segundos para que se inicie la lectura de la tira.
8. Coloque la tira reactiva en parte central de la bandeja de tiras de anlisis con las reas reactivas (pad)
hacia arriba. Deslice la tira a lo largo de la bandeja hasta que toque el extremo del canal. (La tira de
anlisis debe colocarse mientras la pantalla muestra el mensaje de tiempo disponible, que se
visualizar durante 10 segundos.
9. La bandeja es introducida automticamente en el instrumento para efectuar la lectura de las tiras. Los
resultados se visualizan en un minuto. Asegrese de no mover la bandeja.
10. Retire la tira reactiva usada y deschela en una bolsa de RPBI roja
11. Para prevenir la acumulacin de orina, limpie la bandeja de tiras de anlisis con un pao kimwipes tan
frecuentemente como sea necesario. Igualmente limpie la bandeja despus de analizar una orina con
muestras visibles de hematuria o que haya dado un resultado muy positivo en cualquier rea reactiva
(pad).

Operacin de las Pipetas Serolgicas.

Colocar en la abertura superior de la pipeta el
aspirador de pipetas.
Introducir la pipeta en el lquido, cuidando de no
aspirar aire.
Sujetar la pipeta con la mano izquierda y manipular el
bulbo con los dedos pulgar e ndice de la mano
derecha.
Subir el adaptador hasta la marca deseada.
Transferir la pipeta al tubo en el que depositar el
lquido
Presionar el botn blanco para transferir el lquido, lentamente por las paredes del tubo.
Quitar el bulbo con cuidado y colocar la pipeta en el zinc.

Operacin de pipetas automticas o micropipetas.

Revisar la pipeta, si es de volumen variado, ajustar al
volumen que requiera.
Colocar la puntilla de plstico en el extremo inferior de la
pipeta.
Cargar la pipeta apretando el mbolo hasta la posicin
intermedia.
Aflojar la presin que ejerce con el dedo para llenar la
puntilla.
Eliminar el exceso en el exterior de la puntilla con una
toallita kimwipes limpia.
Descargar oprimiendo nuevamente el mbolo hasta el
punto medio
Esperar 10 segundos y colocar la puntilla en el extremo
opuesto del tubo oprimiendo
hasta el fondo.


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Colocar la puntilla en un vaso de precipitado de plstico.
Al terminar el procedimiento, desechar adecuadamente los RPBI.


Ver Anexo. 1


a) Al inicio de la sesin se evala el conocimiento sobre la prctica a realizar.
b) Se realiza exposicin del funcionamiento, operacin, mantenimiento y precauciones del equipo y
material usado en el laboratorio.
c) Se procede al uso adecuado del equipo y material a utilizar para el desarrollo de las prcticas.

7. Bibliografa

Bennington. Diccionario enciclopdico del laboratorio. Panamericana. 2006
Manual de Operacin de Centrfuga, marca International Equipment Company, modelo Clinical. 1999.
Manual de mantenimiento preventivo para equipo de laboratorio. Organizacin Panamericana de la Salud
2005.
Edward R. Ashwood y Carl A. Burtis: Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 5a. Edicin, EUA, W.B.
Saunders Company. 2000.


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1. Sesin No.3: Toma y manejo de muestras por el laboratorio 1

Desarrollar y aplicar habilidades para su desempeo profesional, dar indicaciones al paciente para extraer una
adecuada toma de muestra sangunea y utilizar la tcnica de flebotoma del para obtener muestras de calidad.

Los revisados en la prctica #1 del presente manual


La utilidad de un resultado de una prueba de laboratorio, para el pronstico, corroboracin, investigacin,
deteccin, seguimiento y diagnstico de un problema de un paciente, depende de que sea confiable y preciso; para
lo cual es necesario trabajar con garanta de calidad. La garanta de calidad de un resultado de una prueba de
laboratorio, depende de que se realicen adecuadamente las tres etapas fundamentales que se requieren para su
obtencin. Estas tres etapas comprenden: 1. La etapa pre-analtica, 2. la etapa analtica y 3. La etapa post-
analtica. El qumico clnico desempea un papel fundamental en todas ellas, sin embargo el mdico tambin juega
un papel muy importante en ellas, sobre todo en la primera y la tercera. La garanta de calidad estriba en controlar
los factores o fuentes de error que en cada una de esas etapas pueden intervenir. Las fuentes de error no
controladas provocan variaciones en cada una de ellas.

Variaciones pre-analticas.

Estas variaciones estn determinadas, por todos aquellos factores ajenos a la propia determinacin analtica,
incluyendo desde la toma de la muestra, el itinerario de sta, hasta llegar al laboratorio. las variaciones analticas
pueden conducir a imprecisin e inexactitud. Las variaciones post-analticas, involucran todas aquellas acciones
que se realizan posteriores a la fase analtica. Estas variaciones son de una gran diversidad, y aquellas en las que
el mdico debe tener un especial cuidado.

Datos elementales que deben anotarse en la solicitud de los exmenes
En la etapa pre-analticas, debe anotar adecuadamente todos los datos, requirindose los siguientes:
1. Datos del paciente en la solicitud de examen.
2. Nombre del paciente.
3. Fecha de nacimiento.
4. Gnero
5. Fecha de la solicitud de la prueba.
6. Nombre y nmero de la cedula profesional del mdico.
7. Diagnstico presuntivo
8. Nmero de cama en el caso de paciente hospitalizado.
9. Observaciones generales, que incluyan el uso de medicamentos y/o enfermedades
infecto-contagiosas que el paciente padezca.
10. Identificacin de la muestra: Todas las muestras deben ser identificadas con datos claros, los
Que incluyen: nmero o clave, nombre del paciente, edad, y lugar de procesamiento anotado


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Directamente en el tubo o en una etiqueta bien fija a l, o identificada adecuadamente con su
Respectivo cdigo de barras.

De realizar adecuadamente la anotacin de datos, paso inicial en la fase preanaltica, se minimizan las variaciones
que se pudiesen dar. Los datos elementales, que se mencionan, con frecuencia se manejan inapropiadamente y
pueden conducir a errores en esta fase.

Tcnica de extraccin, sealando ventajas, desventajas y riesgos de la misma:

1. Presentacin con el paciente y explicacin de lo que se le va a realizar.
2. Colocarse guantes desechables.
3. Preparar el material a utilizar: tubos de recoleccin, torniquete, sistema vacutainer (mariposa o aguja,
sujetador vacutainer), torundas con alcohol, plumn indeleble para la rotulacin de tubos.
4. Rotular los tubos.
5. Pedir al paciente que se siente en la silla de toma de muestra, para tener un acceso fcil y cmodo al
hacer la extraccin.
6. Pedir al paciente que abra y cierre su mano por unos segundos y que la mantenga cerrada para hacer
que sus venas dilaten. Colocar el torniquete 8 cm por arriba del lugar que se eligi para hacer la
puncin. No dejar el torniquete puesto por ms de 1 minuto.
7. Elegir la vena. Las venas de la fosa ante cubital, en particular la mediana cubital y la ceflica son las
preferidas ya que estas venas por lo regular se encuentra rectas y son apropiada para la puncin. En
caso necesario se pueden utilizar las venas de la mueca, tobillos y manos.
8. Limpiar el sitio de puncin con una torunda con alcohol.
9. Exprimir el exceso de alcohol si es que tiene en el bote de basura comn.
10. Permitir que se evapore el alcohol, cuidando de no tocar el rea desinfectada.
11. Realizar la puncin, penetrando la piel con el bisel de la aguja hacia arriba, en un ngulo aproximado
de 15, procurando minimizar la incomodidad al paciente.
12. Colocar los tubos en el sistema vacutainer y llenar hasta la marca.
13. Quitar el torniquete en cuanto la sangre empiece a fluir.
14. Despus de haber llenado los tubos necesarios para la extraccin pedir al paciente que abra su mano.
15. Coloque una torunda de algodn sobre el sitio de puncin, retire la aguja y aplique presin sobre el
sitio.
16. Mezclar el tubo con sangre cuando utilice anticoagulante.
17. Si es necesario puede colocar una banda adherible. No se recomienda para nios y ancianos ya que le
puede causar daos a su piel al momento de quitar.
18. Desechar los residuos generados apropiadamente.
19. Asegrese que el paciente se encuentre en buenas condiciones (que no est sangrando ni mareado)
antes de permitir que se retire.

FACTORES QUE INFLUYEN EN LA TOMA DE MUESTRA:

Debemos considerar todos los factores desde las condiciones previas, hasta la toma misma. El mdico debe
recomendar una serie de condiciones a su paciente cuando acuda al laboratorio; los diferentes cambios en la
concentracin de los constituyentes del suero, se pueden dar, por cambios fisiolgicos originados por la postura,
hospitalizacin e inmovilizacin, ejercicio, variaciones circadianas, viajes, etc.


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El alcohol (incrementa la glucosa entre 20 a 50 % por ingestas recientes y a largo plazo puede originar
hipoglucemia, cetonemia, incremento del lactato, cido rico, GGT, ICDH, ALT y AST; las drogas, edad
(en recin nacidos los estados de hiperbilirrubinemia pueden interferir con otras lecturas).), genero (son
diferentes la concentracin de cortisol, aldosterona y estrgenos la mujer y el varn),. condiciones de salud
del paciente, transfusiones, shock y trauma, raza y ciclos circadianos; influencia del medio ambiente,
obesidad, dieta, desnutricin y ayuno son factores que influye en las condiciones preanalticas.

Medicamentos, en caso contrario debe verificar si el frmaco altera la prueba a realizar, causas de la
interferencia a nivel del mtodo utilizado y evaluar el resultado de la prueba tomando en cuenta estas
interferencias.

Tiempo de alimento previo a la toma de muestra, puede influir en el resultado de la determinacin. Las
comidas ricas en fibra pueden impedir la absorcin de colesterol, triacilglicridos y calcio. La nicotina del
cigarro estimula la secrecin del jugo gstrico e incrementa las catecolaminas, lactato, hormona de
crecimiento, colesterol, lipoprotenas, triacilglicridos, cortisol y el recuento de glbulos blancos y rojos.

En nios y adolescentes se incrementan creatinina y fosfatasa alcalina sricas y algunas enzimas
disminuyen.

Fiebre provoca respuesta hormonal, incrementa la secrecin de insulina, guagn, corticotropina (ACTH);
reduce la secrecin de tiroxina.

En adultos, los valores de referencia empleados deben ser de acuerdo a las caractersticas de la poblacin
y tomando en cuenta el adulto joven y el adulto mayor.

Despus de la pubertad, las concentraciones de algunos analitos son ms altas en hombres que en
mujeres.

ESTABILIDAD DE LAS MUESTRAS

La estabilidad de las muestras obtenidas y en trnsito, representa un reto importante. Si el periodo es muy
largo, variable, poco atendido, afecta los especmenes (sangre, lquidos biolgicos, etc.), sus caractersticas
fisicoqumicas (evaporacin, sedimentacin, precipitacin, etc.), la flora bacteriana presente (aumento o
disminucin de grmenes) y la concentracin de sus constituyentes qumicos.

Ver anexo. 1

a) Explicacin de las tcnicas de extraccin
b) Extraccin en el modelo anatmico


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c) Extraccin en el paciente

7. Bibliografa

Moran. Obtencin de muestras sanguneas de calidad analtica. Panamericana. 2001
Prieto. La Clnica y el Laboratorio. Elsevier Espaa.2010. 21. Edicin.
John Bernard Henry. Clinical Diagnostics and Management by Laboratory Methods 20. Edition. EUA, W.B.
Ed. Mad. Laboratorio de bioqumica. Espaa. 1. Edicin 2006
Flores Alvarado. Manual de prcticas de bioqumica. 2. Edicin 2008.


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1. Sesin No.4: Toma y manejo de muestra por el laboratorio 2

Desarrollar y aplicar habilidades para extraccin de toma de muestra y aprender los tipos de tubos que existen
para la recoleccin de sangre para las qumicas sanguneas, par obtener muestras de calidad para los anlisis
bioqumicos, separando y conservando adecuadamente las muestras obtenidas con responsabilidad y calidez.




MANEJO DE MUESTRAS SANGUINEAS:

Segn el anlisis de pruebas que se van a realizar se elige el tubo para la recoleccin de muestras existen
tubos con anticoagulante y sin anticoagulante:
Color Aditivo Muestra Anlisis Requerimiento
Rojo Sin aditivo Suero
Qumica
sangunea,
serologa

No se mezcla
Amarillo
Con gel
separador
Suero
Qumica
sangunea,
serologa

No se mezcla
Lavanda o Lila EDTA Plasma

Hematologa

Se mezcla y se
llena hasta la
marca
Azul celeste Citrato de Na Plasma
Tiempos de
coagulacin

Se mezcla y se
llena hasta la
marca


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rea Pruebas
Qumica sangunea Glucosa, urea, creatinina, colesterol, triglicridos,
ac. rico
Hematologa Biometra Hemtica, plaquetas
Tiempos de coagulacin TP,TPT
Serologa VDRL,HIV,R Febriles, Factor reumatoide,
hormonas,

Toma de muestras sanguneas capilares:

1. Preparar el material a utilizar (microtubo o tubo de recoleccin, lanceta estril, torundas con
alcohol, para los tubos y curitas o tela adhesiva).
2. Colocar al paciente apropiadamente.
3. Seleccionar el rea (dedo de la mano que utilice menos, oreja o taln).
4. Limpiar el sitio de puncin con una torunda impregnada con alcohol.
5. Permitir que se evapore el alcohol, cuidando de no tocar el rea desinfectada.
6. Abrir el empaque tomar la lanceta y descartar el empaque a la basura comn
7. Realizar la puncin, procurando minimizar la incomodidad al paciente.
8. Recolectar la sangre en cuanto empiece a gotear.
9. Coloque una torunda de algodn sobre el sitio de puncin y aplique presin.
10. Si es necesario coloque una banda adherible (curita)
11. Los microtubos que contienen anticoagulante deben mezclarse constantemente.
12. Descartar el material contaminado de forma apropiada.
13. Asegrese que el paciente se encuentre en buenas condiciones, antes que se retire


Ver anexo. 1

a) Explicacin de la sesin.


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b) Toma de muestra sangunea en paciente usando tubo rojo o amarillo.
c) Separacin de suero.
d) Congelamiento de muestras.

7. Bibliografa.
- Edward R. Ashwood y Carl A. Burtis: Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 5a. Edicin,
EUA, W.B. Saunders Company. 2000.
Moran. Obtencin de muestras sanguneas de calidad analtica. Panamericana. 2001
Prieto. La Clnica y el Laboratorio. Elsevier Espaa.2010. 21. Edicin.
John Bernard Henry. Clinical Diagnostics and Management by Laboratory Methods 20. Edition. EUA,
W.B. Saunders Company. 2001.
Flores Alvarado. Manual de prcticas de bioqumica. 2. Edicin 2008.
- Manual BD, toma de muestras sanguineas.


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1. Sesin No.5: Determinacin de protenas

Conocer la importancia de determinar protenas sricas, correlacionando las variaciones del analito con las
posibles patologas para la integracin de diagnsticos de laboratorio.




Las protenas dirigen casi todos los procesos vitales, sus funciones son especficas de cada tipo de protena y
permiten a las clulas defenderse de agentes externos, mantener su integridad, controlar y regular funciones
as como reparar daos.
El hgado es el rgano ms importante para regular la sntesis de protenas mediante ciclos de sustratos y
reaccin catalizada por activacin simultnea de varias enzimas, las cuales producen protenas de manera
rpida a concentraciones elevadas, an en forma intermitente, dependiendo de las necesidades El hgado es el
rgano ms importante para regular la sntesis de protenas mediante ciclos de sustratos y reaccin catalizada
por activacin simultnea de varias enzimas, las cuales producen protenas de manera rpida a
concentraciones elevadas, an en forma intermitente, dependiendo de las necesidades
Todas las protenas realizan su funcin por unin selectiva a molculas.

Funciones de las protenas en el organismo.

Son parte estructural de las clulas.
Participan en la movilidad celular.
Muchas hormonas son de naturaleza proteica.
La mayora de las enzimas son protenas.
Son indispensables para la accin que realizan las vitaminas.
Forman parte de los receptores hormonales.
Algunas son segundos mensajeros para la accin hormonal.
Forman complejos con glcidos y lpidos. Glucoprotenas y Lipoprotenas.
Participan en la defensa inmunolgica. Ej.: inmunoglobulinas y sistema de complemento.
Participan en la contraccin muscular.
Protenas asociadas a sistemas buffer.
Protenas transportadoras. Ej.: albmina, hemoglobina y transferrina.
Protenas de coagulacin.
Protenas reguladoras. Ej.: citoquinas
Protenas de sostn. Ej. : colgeno.

Las disproteinemias se clasifican en policlonales, monoclonales y oligoclonales. En algunos casos puede
confundirse con una gammapata oligoclonal con una monoclonal

HIPERPROTEINEMIA


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Gammapatas:
Policlonales: enfermedades inflamatorias crnicas, enfermedades hepticas (cirrosis), Enfermedades
autoinmunes (lupus eritematoso sistmico (LES)), infecciones parasitarias (Kala-Azar) y enfermedades
malignas.
Monoclonales: mieloma mltiple, Macroglobulinemia de Waldenstrm, gammapatas monoclonales de
significado indeterminado y amiloidosis primaria.
Oligoclonales: Se relaciona con la presencia de inmunocomplejos, infecciones crnicas, enfermedades
autoinmunes, hepatitis crnicas y alguno de los estadios de los pacientes HIV positivos.
Hemoconcentracin (deshidratacin)
Pseudo-hiperproteinemia (desecacin parcial de muestras sricas mal tapados)

Causas de hipoproteinemia:

Disminucin en la ingesta de protenas
Absorcin intestinal deficiente
Disminucin en la sntesis proteica (enfermedades hepticas)
Prdidas renales y gastrointestinales
Gammapatas de cadenas ligeras (mieloma de Bence-Jones) que cursa con hipogammaglobulinemia.

En algunos casos, una disminucin de una fraccin de las protenas totales est acompaada por el
incremento de otras fracciones. Por consiguiente, la determinacin de las protenas totales no refleja por s sola
la naturaleza o la extensin de la anormalidad existente.

Valor de referencia:

Protenas plasmticas: 6.0 a 8.0 g/dl
Las protenas totales de un paciente ambulatorio ser de 0.5 g/dL ms grande que el paciente encamado.


Ver anexo 1.


a) Toma de muestras sanguneas 1 por equipo
b) Explicacin de la practica
c) Realizacin de la prueba siguiendo las indicaciones del inserto
d) Interpretacin de resultados

PROCEDIMIENTO:

Procedimiento para la determinacin de la actividad enzimtica de protenas totales.
Realizacin de la prueba siguiendo estrictamente las instrucciones del inserto del reactivo proporcionado.


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7. Bibliografia.

J.M. Prieto. La Clnica y el Laboratorio. Elsevier Espaa.2010. 21. Edicin.
Lawrence Kaplan. Clinical Chemistry, Theory, Analysis, Correlation. 4a. Edicin EUA Mosy, 2003
Nelson. Leninger Principios de Bioqumica. 5. Edicin. 2009


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1. Sesin No.6: Determinacin de albmina

Valorar la importancia de cuantificar aminocidos sricos mediante exmenes clnicos, correlacionando los
resultados con las posibles patologas que permitan integrar un diagnostico por laboratorio.




Los aminocidos participan en muchas reacciones en las cuales intervienen las funciones - amino, carboxilo y
los diversos grupos R. Los mtodos para determinar cuantitativamente los aminocidos son: por cromatografa,
electroforesis y en el que participan tanto las cromatografas como reacciones con dinitrofluorobenceno y
fenilisotiocianato

ALBMINA SRICA.

La albmina es la protena ms abundante del plasma sanguneo. Sirve como deposito mvil de aminocidos,
es la principal protena de la sangre. El hgado sintetizada de 10 a 15 g diariamente, se almacena en el espacio
intersticial de la piel, msculos y vsceras donde tiene una vida media de 20 das. Representa el 75% de las
protenas del suero y el 11% de las protenas totales.

FUNCIONES DE LA ALBMINA

Mantenimiento de la presin onctica.
Transporte de hormonas tiroideas.
Transporte de hormonas liposolubles.
Transporte de cidos grasos libres. (Esto es, no esterificados)
Transporte de bilirrubina no conjugada.
Transporte de muchos frmacos y drogas.
Unin competitiva con iones de calcio.
Control del pH.
Funciona como un transportador de la sangre y lo contiene el plasma

CAUSAS DE LA DEFICIENCIA DE ALBMINA.
Cirrosis heptica: Por disminucin en su sntesis heptica.
Desnutricin.
Sndrome nefrtico: Por aumento en su excrecin.
Trastornos intestinales: Prdida en la absorcin de aminocidos durante la digestin y prdida por las
diarreas.
Enfermedades genticas que provocan hipoalbuminemia, que son muy raras.

VALORES ELEVADOS EN:


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Deshidratacin
Proteinuria glomerular
Quiluria

VALORES ELEVADOS EN:

Quemaduras
Sndrome nefrtico
Enfermedad de Cushing
Malabsorcin
Obstruccin intestinal
Enfermedad heptica difusa (cirrosis, hepatitis crnica activa)
Fiebre reumtica
Malnutricin
Ascitis
Analbuminemia.

Valores de referencia para albumina:

Suero: 3-5 gr / 100ml
Orina: menor de 10 mg/l
LCR: 10-30 mg / dl.


Ver anexo 1.



PROCEDIMIENTO:

Realizacin de la prueba siguiendo estrictamente las instrucciones del fabricante

7. Bibliografa

John Bernard Henry. Clinical Diagnostics and Management by Laboratory Methods 20. Edicin. EUA, W.B.
Lawrence Kaplan. Clinical Chemintry, Theory, Analysis, Correlation. 4a. edicin EUA Mosy, 2003


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1. Sesin No.7: Cintica enzimtica

Analizar las variaciones que sufre una enzima en su actividad al modificar las condiciones de temperatura a las
que se expone un analito, y asimilar la interpretacin de los resultados obtenidos e integrar un diagnostico por
laboratorio.




Una enzima (catalizador), es una sustancia que aumenta la rapidez o velocidad de una reaccin qumica, sin
verse alterada ella misma en el proceso global. La sustancia sobre la que acta una enzima se denomina
sustrato de esa enzima, por lo que los polipptidos son sustratos apropiados de la tripsina. En esta sesin se
realizarn las determinaciones de FA y ALT.
Aminotransferasa:
Las aminotransferasas, antes llamadas transaminasas, son las indicadoras que se usan ms frecuentemente
como, marcadores de enfermedad heptica. Estas enzimas catalizan la transferencia reversible de sus
respectivos aminocidos (cido asprtico y alanina) hacia el grupo alfa-ceto del cido cetoglutrico
obtenindose as cido oxalactico y cido pirvico de esos aminocidos respectivos y cido glutmico.

La reaccin que se lleva a cabo en laboratorio es la siguiente:
L alanina + oxo-glutarato ALT Piruvato + L-glutamato

Fosfatasa alcalina
Es un grupo de enzimas que hidrolizan los enlaces ster de los fosfatos orgnicos e inorgnicos en las clulas,
se encuentra en la mayora de los rganos de nuestro cuerpo incluyendo hgado, hueso, intestino delgado,
rin, placenta y leucocitos. La que se encuentra en suero la mayora proviene del hgado y en menor
proporcin de intestino. Los niveles en suero varan con la edad y sexo. El substrato empleado en este
procedimiento es p-nitrofenil fosfato (4-NPP) que es hidrolizado por la fosfatasa alcalina a fsforo inorgnico
ligado a p-nitrofenol. La formacin de color es proporcional a la actividad de la fosfatasa alcalina.

VALORES DE REFERENCIA DE ALT: 7 33 U/L

VALORES DE REFERENCIA DE FOSFATASA ALCALINA
En adultos 40 a 140 U/L
En nios menores de 2 aos 85-235 U/L
En nios entre 2 y 8 aos 65-120 U/L
En nios entre 9 y 15 aos 60- 300 U/L
En adolescentes entre 16 y 21 aos 30- 200 U/L


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Ver anexo 1.



7. Bibliografa.

Lawrence Kaplan. Clinical Chemintry, Theory, Analysis, Correlation. 4a. edicin EUA Mosy, 2003.
Mathews/Van Holde. BIOQUMICA. Segunda edicin. Editorial McGraw-Hill * Interamericana 2000.


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1. SesinNo.8 y 9: Determinacin de glucosa

Determinar la glucosa en un paciente aparentemente sano para poder comprender la absorcin y digestin de
los carbohidratos.




La glucosa se forma en la hidrlisis de numerosos hidratos de carbono, como la sacarosa, maltosa, celulosa,
almidn y glucgenos. Se emplea en medicina para el tratamiento de la deshidratacin y alimentacin
intravenosa.
La concentracin de la glucosa es variable de acuerdo a las condiciones en que se encuentre el sujeto; con un
ayuno de 8 a12 horas el valor oscila entre 65 y 100 mg/dL, el valor de referencia puede variar dependiendo del
mtodo que se emplee para su cuantificacin. Se considera hipoglucemia cuando los niveles de glucosa son
menores de 65 mg/dL, y, a valores mayores de 100 mg/dL se le denomina hiperglucemia.

Se define como glucosa postprandial los niveles de glucosa en sangre a las dos horas de la ingesta de un
alimento. La determinacin de este parmetro se utiliza para el diagnostico de la diabetes y otras
enfermedades del metabolismo de la glucosa.
El ndice glucmico (IG) es una clasificacin de los alimentos, basada en la respuesta postprandial de la
glucosa sangunea, comparados con un alimento de referencia. Mide el incremento de glucosa en la sangre,
luego de ingerir un alimento comida.

Cuando ingerimos alimentos ricos en carbohidratos, los niveles de
glucosa en sangre aumentan progresivamente segn se digieren.
La velocidad a la que se digieren los alimentos se valoran a travs
del ndice glucmico de un alimento. Este ndice es la relacin entre
el rea de la curva de la absorcin de la ingesta 75g de glucosa a lo
largo del tiempo, con la obtenida al ingerir la misma cantidad de ese
alimento.

Los ndices elevados indican una rpida absorcin y los ndices bajos
indican una absorcin retardada.


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Valores de referencia:
Valores de referencia
Glucosa: 65-100 mg/dL
Glucosa postprandial: <110 mg/dL
Glucosa postprandial: >140 mg/dL Puede ser indicativo para diabetes mellitus.
Tabla 1: Alimentos que debe de ingerir el paciente semana 1
Cantidad Alimento Carbohidratos Fibra
Carbohidratos
disponibles
taza o 85g Frijoles de la olla 22.42g 7.70g 14.72g
(1 tortilla o 24g)
4
Tortillas de maz 10.7g 1.5g 9.2g
TOTAL: 51.52

Tabla 2: Alimentos que debe de ingerir el paciente la semana 2

Cantidad Alimento Carbohidratos Fibra
Carbohidratos
disponibles
1 taza 170g Frijoles de la olla 44.84g 15.4g 29.44g
1
Tortilla de harina
(mediana)
23.1g 1.35g 21.75g
Total: 51.19


Ver anexo 1.


Primera semana
a) Toma de muestras sanguneas 1 por equipo en ayunas
b) Inmediatamente despus ingerir los alimentos de la tabla 1 equivalente a 50g de carbohidratos
c) Tomar muestra sangunea despus de transcurrir 2 horas despus de la ingesta de alimento
d) Explicacin de la prctica.
e) Realizacin de las muestras siguiendo las indicaciones del inserto y de su profesor
f) Conclusin con respecto a resultados

Segunda semana:
a) Toma de muestras sanguneas 1 por equipo en ayunas, se recomienda que sea el mismo paciente de la
semana anterior
b) Inmediatamente despus ingerir los alimentos de la tabla 2.
c) Continuar con los pasos c-f de la semana anterior.

7. Bibliografa


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Mathews/Van Holde. BIOQUMICA. Segunda edicin. Editorial McGraw-Hill * Interamericana 2000.

American Diabetes Association Clinical Practice Recommendations 2002, Evidence-Based Nutrition Principles
and Recommendations for the Treatment and Prevention of Diabetes and Related Complications, Diabetes
Care, January 2002, Supplement 1, vol.25, p S50.

http://www.nutrinfo.com/pagina/gyt/graficos/glyctabl.pdf

http://www.uned.es/pea-nutricion-y-dietetica-I/guia/enfermedades/diabetes/manual_el_indice_glucemi.htm


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1.-Sesin No. 10: Determinacin de Colesterol total y HDL colesterol

2.-Competencia a desarrollar en la sesin
Relacionar la importancia que tiene determinar los niveles de colesterol y HDL colesterol, correlacionando las
posibles patologas en la obtencin de concentraciones fuera del valor de referencia de ambos analitos, a fin de
integrar diagnsticos de laboratorio.

3.-Mecanismos de evaluacin y Evidencia de desempeo.


4.-Fundamento terico e informacin de apoyo.

COLESTEROL.

Es un componente lipdico esencial del cuerpo humano, se encuentra en membranas celulares en forma libre,
en algunas clulas capaces de almacenar Colesterol, esterificndolo reversiblemente en cidos grasos y
convirtindolo en partculas de depsito identificables; y una tercera parte de Colesterol se encuentra en las
Lipoprotenas circulantes en plasma sanguneo, las cuales transportan Colesterol esterificado en el centro de la
clula y Colesterol libre en su capa externa.

El Colesterol es necesario para que las clulas eucariticas formen nuevas membranas y adems juega un
papel imprescindible en el organismo como precursor de sales biliares, hormonas esteroides y Vitamina D.

Se encuentra en piel, hgado y suprarrenales, as como en algunos fluidos corporales como plasma sanguneo,
bilis y orina. En la mayora de los tejidos el Colesterol se encuentra no esterificado.

La capacidad de absorcin del Colesterol en la dieta es limitada, con un promedio de 0.3 g/da, no excede de 1
g/da, excretndose en las heces fecales el resto del Colesterol ingerido en la dieta.

El procedimiento de colesterol involucra reacciones enzimticas secuenciales. La enzima colesterol esterasa
hidroliza los esteres de colesterol a colesterol y cidos grasos. El colesterol producido por esta reaccin junto
con el colesterol libre presente en la muestra es oxidado por colesterol oxidasa formando colesterol 4 en -3
ona y perxido de hidrgeno, la oxidacin del perxido de hidrgeno en 4 aminoantipirina se cataliza la
peroxidasa. Obtenindose una quinoenimina.

VALOR DE REFERENCA.

Colesterol total: de 35 a 200 mg/dL

COLESTEROL HDL

El colesterol de alta densidad (HDLc) es un tipo de lipoprotenas que se producen en el
hgado y los intestinos. Est formado de fosfolpidos y una o dos apolipoprotenas; son
importante en el metabolismo de otras lipoprotenas y en el transporte del colesterol de


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los tejidos perifricos al hgado.

El colesterol, junto con el resto de lpidos como los triacilgliceroles (o triglicridos) y los
fosfolpidos, circulan en la sangre asociado a protenas especficas (apolipoprotenas)
formando complejos macromoleculares denominados lipoprotenas.

Las HDL estn compuestas por 45-55% de protenas, 3-5% de colesterol libre, 15-20%
de colesterol esterificado, 2-7% de triglicridos, 26-32% de fosfolpidos.

Los niveles reducidos de HDL son iatrognicos, mientras que la elevacin protege contra la
aterosclerosis al eliminar el colesterol de las paredes vasculares y trasportarlo hasta el hgado
donde es eliminado del organismo

REQUERIMIENTOS:
Ayuno de 12 horas
No consumir alcohol por lo menos 24 horas antes del examen.
De preferencia debe suspender medicamentos 24 hrs antes de la prueba.

El colesterol HDL se eleva en:
Hiperlipoproteinemia alfa familiar.
Hepatopatas crnicas (cirrosis, alcoholismo, hepatitis).
Ejercicio aerbico o vigoroso prolongado.

El colesterol HDL reducido se relaciona con:
Mayor riesgo de CDH y CDH precoz.
Hipolipoproteinemia alfa familiar (enfermedad de Tangier).
Deficiencia de Apo C-III.
Hipertrigliceridemia.
Diabetes sacarina mal controlada.
Enfermedad hepatocelular.
Sndrome nefrtico.
Insuficiencia renal crnica

VALOR DE REFERENCA DE COLESTEROL HDL:

Varones: 37-70 mg/ml
Mujeres: 40-85 mg/ml

Menos de 25 mg / 100 ml de HDL Riesgo de que el CDH sea peligroso.
26-35 mg/ 100 ml de HDL Riesgo de sufrir CDH elevado.
36-44 mg/ 100 ml de HDL Riesgo de sufrir CDH moderado.
45-59 mg / 100 ml de HDL Riesgo de sufrir CDH promedio.
60-74 mg / 100 ml de HDL Riesgo de sufrir CDH menor del promedio
Ms de 75 mg / 100 ml de HDL Probable proteccin. Se relaciona con la longevidad.


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5.-Equipo, Instrumental, Material e insumos.

Ver anexo 1.

6.-Metodologa de la sesin.


7.-Bibliografia
-Mathews/Van Holde. BIOQUMICA. Segunda edicin. Editorial McGraw-Hill * Interamericana 2000
M.J.Lynch/S.S. Raphael/L. D. Mellor/P.D. Spare/M.J.H.Inwood. Mtodos de Laboratorio Segunda edicin/
Tomo I. Editorial Interamerica.1
Murray, Mayes, Granner, Rodwell. Bioqumica de Harper, Editorial Manual Moderno, 15ava. Edicin, 2001.
-Govantes, B.J DR, Lorenzo V.P Dr, Manual normon, 8 edicin, Espaa, Editorial Laboratorios
Normon S.A, Departamento de publicaciones cientficas, 2007.
-Suardaz Jorge, Celso Cruz, Ariel Colina, Laboratrio clnico, La Habana: Editorial Ciencias Mdicas; 2004.


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1.-Sesin No. 11: Determinacin de Triacilglicridos

Realizar la determinacin de triglicridos comprobando el efecto del ayuno en este examen, correlacionando
las patologas relacionadas con concentraciones fuera del valor de referencia asi como su relacin con el
colesterol. Conocer el papel que juega la lipasa pancretica en la digestin de los triglicridos, en un ambiente
de respeto y trabajo en equipo.




Los triglicridos son molculas grasas de triple cadena, se almacenan en el tejido graso. Son las grasas ms
abundantes de la dieta, existen normalmente en los tejidos animales y vegetales como una mezcla de grasas
puras y cidos grasos libres; adems de servir como fuente de energa y ser las principales formas de
almacenaje de las clulas.
Los sntomas de triglicridos altos son prcticamente inexistentes hasta que se manifiesta un dao significativo,
por lo que puede avanzar sin que lo percatemos; siendo particularmente importante para quienes tienen
antecedentes familiares de triglicridos altos.
Hipertrigliceridemia: Concentraciones altas de triacilglicridos en la sangre, se asocia con un mayor riesgo
de desarrollar enfermedades cardiovasculares. A este trastorno tambin se denomina en ocasiones como
hipertrigliceridemia familiar, el incremento de triacilglicridos en los padres, ocasiona que sus hijos esten
ms propensos a la enfermedad.

Aumento de triglicridos por periodos prolongados ocasionan:
Enfermedades en el pncreas, el hgado y el bazo.
Provocar depsitos de grasa en la piel
Ataque al corazn
Acidente cerebro-vascular.

El anlisis conjunto de triglicridos y colesterol total es importante en el diagnstico de lipoproteinemia,
arterioesclerosis y enfermedades hepticas y de la tiroides.

Patologas que elevan an ms los niveles de triglicridos:
La obesidad
El hipotiroidismo
La diabetes.
VALORES DE REFERENCIA

Esperado: menos de 150 mg/dl
Lmite alto: 150 a 199 mg/dl
Alto: 200 a 499 mg/dl
Muy alto: 500 mg/dl o superior


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Ver anexo 1.


a) Para esta prctica se tomaran dos muestras sanguneas, la basal en ayuno y otra despus de
haber ingerido una dieta rica en grasas.
b) Toma de muestras sanguneas
c) Exposicin del tema, discusin de la exposicin e investigacin bibliogrfica.
d) Realizacin de la prueba siguiendo estrictamente las instrucciones del inserto
e) Interpretacin de resultados

7.-Bibliografia

Lawrence Kaplan, Amadeo Pesce y Steven Kazmierczak: Clinical Chemistry, Theory, Analysis, Correlation, 4a.
Edicin, EUA, Mosby, 2003.
Mathews/Van Holde. BIOQUMICA. Segunda edicin. Editorial McGraw-Hill * Interamericana 2000


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1.-Sesin No. 12: Determinacin de cuerpos cetnicos en orina


Valorar la importancia de la determinacin de los cuerpos cetnicos en orina, analizando su origen y funcin,
comprobando el efecto del ayuno prolongado, el cambio de dieta y otros factores, en los resultados obtenidos,
con colaboracin y respeto.




La citognesis es el proceso mediante el cual se originan los cuerpos cetnicos en el organismo.

En condiciones normales pueden ser rpidamente metabolizados y no se acumulan en la sangre, sino que se
incorporan al ciclo de cido ctrico, para proporcionar energa.

En situaciones anormales, (diabetes descompensada, inanicin) los cuerpos cetnicos se acumulan en la
sangre porque la velocidad de su produccin excede la capacidad del organismo para utilizarlos. La
acumulacin excesiva de cuerpos cetnicos se conoce como cetosis y se acompaa de un exceso de estos
compuestos en sangre (cetonemia) y en orina (cetonuria). Las cetosis muy intensas causan disminucin del pH
sanguneo; trastorno conocido como cetoacidosis, y es considerada como sumamente grave.

Aunque en el hgado se generan los cuerpos cetnicos, no tiene la capacidad de utilizarlos con fines
energticos, por lo que pasan a la sangre y se metabolizan en los tejidos extrahepticos.

Los cuerpos cetnicos generados en el hgado son intermediarios entre el metabolismo de lpidos y
carbohidratos. La degradacin de los cidos grasos originan tres compuestos conocidos como cuerpos
cetnicos, el acetoacetato, el hidroxibutirrato y la acetona.

La presencia de cuerpos cetnicos indica que puede haber una alteracin del metabolismo de la glucosa, una
persona con hipoglucemia presenta cuerpos cetnicos.

Un anlisis de orina proporciona datos importantes ya que podemos detectar la presencia de elementos no
habituales en ella como lo son: cetonas, glucosa, nitritos, leucocitos, bacterias, cilindros, cristales, protenas,
sangre, etc.

Cetonas

Su presencia refleja alteracin en el uso de los carbohidratos como principal fuente energtica, requirindo de
la utilizacin de grasas corporales.

Principales causas de cetonuria
a. Diabetes mellitus
b. Vmitos
c. Inadecuado consumo de carbohidratos


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a. Desnutricin
b. Reduccin de peso
d. Ayuno.
a. Causa ms frecuente

De los tres compuestos cetnicos presentes en la orina, slo el cido acetoactico es adecuadamente
detectado por la tira reactiva.

Glucosa
De la glucosa normalmente filtrada por el glomrulo, en la orina aparece menos de 0.1%.

En condiciones patolgicas, la glucosa aparece elevada al supera el umbral renal (> a 127 mg/dl), apareciendo
en la orina y siendo detectada en la tira reactiva mediante la reaccin de glucosa oxidasa, reaccin especfica
para glucosa (no detecta galactosa ni fructosa).

Este examen es til en el diagnstico y/o control de pacientes con diabetes mellitus. Pero en presencia de una
glucosuria importante, debe descartar que pueda NO asociarse a cuadros hiperglucmicos sino a patologas
como:
a. Tubulopatas
b. Alteraciones tiroideas
c. Dao del S.N.C

Nitritos
Su presencia nos indica una probable infeccin o bacteriuria.

Leucocitos.
Son indicativos de una posible infeccin urinaria de vas altas o bajas. Requerimos del anlisis microscpico
para saber la cantidad de leucocitos. Si sospecha de una infeccin la realizacin de un urocultivo con
antibiograma nos ayuda a saber si hay bacterias o no, que tipo de bacterias y la sensibilidad o resistencia de
estas a los antibiticos.

Protenas.
Las protenas son filtradas en el rin y su presencia en orina pueden ser indicativos de dos casos distintos.

Las protenas grandes sugieren dao del glomrulo, que es el encargado del filtrado, y deja pasar protenas
que debera retener. Por otra parte, protenas de tamao mediano, reflejan fallo en los tbulos, que son los
encargados de absorber las protenas ms pequeas.

Sangre
Es importante ver si la orina contiene sangre o no. Los riones son los encargados de filtrar la orina, en
condiciones normales no debe haber presencia de sangre. En casos patolgicos se debe investigar si la sangre
es renal, de vas bajas o de vejiga.

Densidad
Densidad o capacidad de concentracin de los riones. La orina se va concentrando en los tbulos para que el
organismo no pierda toda la cantidad de agua. El primer filtrado de los riones tiene la misma densidad que la
sangre. La densidad indica la capacidad concentradora del rin.

Cristales de oxalato de calcio, cido rico, etc.


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La presencia de abundantes cristales tanto de oxalato clcico o cido rico puede ser sugestivo de un
problema de litiasis, como el rin no est eliminando estos componentes, se depositan en el rin,
produciendo clicos renales. Suele recomendarse la ingestin de abundantes lquidos y modificacin de la
dieta para evitar la formacin de acmulos o clculos renales (piedras)

Importancia clnica
a. En cetoacidosis diabtica
b. La inanicin
c. Intoxicacin alcohlica
d. En dietas bajas en carbohidratos


Ver anexo 1.


a) Obtener o traer dos muestras de orina de chorro medio (consiste en desechar la primera y la
ltima parte de la orina para quedarnos con la parte de la mitad de la miccin), recogida a primera
hora de la maana, o una muestra de orina al azar recogida a cualesquier hora con una retencin
mnima de 4 horas en vejiga. La primera muestra (basal) una semana antes de la prctica, para la
segunda muestra de orina deber haber modificado su dieta por espacio de una semana o tener
un ayuno prolongado y recolectar su espcimen el da de la sesin.
Valorar la importancia de la determinacin de los cuerpos cetnicos en orina, analizando su
origen y funcin, comprobando el efecto del ayuno prolongado, el cambio de dieta y otros
factores, en los resultados obtenidos, con colaboracin y respeto.
b) Exposicin del tema, discusin de la exposicin e investigacin bibliogrfica.
c) Realizacin de la prueba siguiendo estrictamente las instrucciones del inserto

7.-Bibliografia

Lawrence Kaplan, Amadeo Pesce Y Steven Kazmierczak: Clinical Chemistry, Theory, Analysis, Correlation, 4a.
Edition, EUA, Mosby, 2003.
Mathews/Van Holde. Bioqumica. Segunda edicin. Editorial McGraw-Hill * Interamericana 2000
J.M. Gonzalez de Buitrago, E. Arilla Ferreiro, M. Rodrguez -Segade, A. Snchez Pozo. Bioqumica Clinica.
Editorial McGraw-Hill 2.reimpresion 1999.
J.M. Prieto Valduena. La Clnica y el Laboratorio. Editorial Elsevier Espaa.2010. 21. Edicin.


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1.-Sesin No. 13: Determinacin de cido rico

Valorar la importancia de la determinacin del cido rico, analizando el origen y funcin de dicha sustancia,
juzgando el valor clnico de los valores obtenidos al compararlos con los de referencia y correlacionarlos con
las diferentes patologas que pueden presentarse.




cido rico

El cido rico es el resultado final del metabolismo de las purinas (parte del ADN y ARN). La mayor parte se
excreta en el rin y otra porcin en el sistema intestinal. Cuando aumenta la destruccin de los tejidos (como
diversos tipos de cncer) y el acido rico empieza aparecer con niveles altos en la sangre. Aunque es muy
comn que se eleve en gota. Puede existe un aumento de niveles sricos:

Se incrementa en:
El estrs puede modificar los niveles de cido rico de forma elevada
Algunos medios de contraste utilizados en estudios radiolgicos
La teofilina, cafena y el alcohol
Frmacos que pueden aumentar el nivel de cido rico:
Alcohol
cido ascrbico
cido acetilsaliclico (aspirina)
Cafena
Cisplatino
Diazxido
Diurticos
Epinefrina
Etambutol
Levodopa
Metildopa
cido nicotnico
Fenotiazinas
Teofilina
Frmacos que pueden disminuir el nivel de cido rico:
Alopurinol
Azatioprina
Clofibrato
Corticoesteroides
Estrgenos
Guayafenesina
Manitol
Probenecida
Warfarina
Hiperuricemia pueden deberse a:
Acidosis
Alcoholismo
Diabetes
Gota
Hipoparatiroidismo
Intoxicacin con plomo


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Leucemia
Nefrolitiasis
Policitemia vera
Insuficiencia renal
Toxemia del embarazo
Dieta rica en purinas
Ejercicio excesivo
Efectos secundarios relacionados con
la quimioterapia
Niveles disminuidos de cido rico pueden deberse a:
Sndrome de fanconi
Enfermedad de Wilson
Sndrome de secrecin inadecuada de hormona anti diurtica
Dieta baja en purinas

Valores de referencia:

cido rico: 3.0 7.0 mg/dl


Ver anexo 1.


7.-Bibliografia

.J.M. Prieto Valduena. La Clnica y el Laboratorio. Elsevier Espaa.2010. 21. Edicin.
Mathews/Van Holde. Bioqumica. Segunda edicin. Editorial McGraw-Hill * Interamericana 2000
Lawrence Kaplan, Amadeo Pesce Y Steven Kazmierczak: Clinical Chemistry, Theory, Analysis, Correlation, 4a.
Edition, EUA, Mosby, 2003.


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1.-Sesin No. 14: Determinacin de creatinina srica

Valorar la importancia de la determinacin de creatinina en suero, considerando su origen y funcin para
realizar una adecuada interpretacin de los resultados y correlacionar con las diferentes patologas para
integrar un diagnstico de laboratorio.




Creatinina:

La creatinina es un exmen til para valorar funcin renal y para seguir los progresos de enfermedad renal
evolutiva.

Es subproducto de la degradacin de la creatinfosfato del musculo, se produce a una velocidad constante y
depende de la masa muscular de la persona, se excreta por va renal y es retirada del plasma por filtracin
glomerular.

Se incrementa en:

alteraciones de la funcin renal (97% de las veces)
Nefritis crnica
Obstruccin de vas urinarias
Enfermedades musculares
Insuficiencia cardiaca congestiva
Choque
Embarazo
Eclampsia
Hipertiroidismo
Ejercicio fsico agotador

Disminuye en:

Personas con poca masa muscular
Ingesta inadecuada de protenas
Atrofia de tejido muscular.
Necrosis tubular aguda
Glomerulonefritis aguda o crnica
Pielonefritis bilateral avanzada y crnica
Deshidratacin intensa
Enfermedad poliquistica
Tuberculosis
Cncer o nefrosclerosis


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Valores muy disminuidos en:

Lesin renal en un 50%

Alteran los resultados:

Sueros hemolisados
Ictricos y lactescente.
Drogas:
Piridium, anfotericina B, clorotiacidas, furosemida, gentamicina, fenacetina.

Valores de referencia

Hombres: 0.6 1.25 mg/dL
Mujeres: 0.6 - 1.10 mg/dL
Nios: 0.2 1.0 mg/dL


Ver anexo 1.



7.-Bibliografia

Mathews/Van Holde. Bioqumica. 2 edicin. Editorial McGraw-Hill * Interamericana 2000
Lawrence Kaplan, Amadeo Pesce Y Steven Kazmierczak: Clinical Chemistry, Theory, Analysis, Correlation,
4th. Edition, EUA, Mosby, 2003.


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1.-Sesin No. 15: Determinacin de nitrgeno ureico

Valorar la importancia de la determinacin de nitrgeno ureico sanguneo, para su integracin en datos que
permitan integrar un diagnstico de laboratorio, analizando los cambios bioqumicos que se presentan en el
organismo.




Nitrgeno urico:

La urea se sintetiza en el hgado y es un producto final nitrogenado no proteico del metabolismo de las
protenas y es transportado a los riones para su excrecin.

Debe ser eliminada del organismo para garantizar el mantenimiento del metabolismo proteico normal de las
clulas. Tiene la ventaja de ser una molcula muy hidrosoluble e inocua, con una elevada proporcin de
nitrgeno en su composicin, que permite su eliminacin con escasa inversin de energa del organismo al ser
concentrada en la orina y eliminada al exterior.

Es til como ndice macroscpico de la funcin glomerular y de la produccin y excrecin de urea. El nitrgeno
ureico sanguneo vara directamente con la ingestin de protenas e inversamente con la tasa de excrecin de
la urea.

VALORES DE REFERENCIA DE UREA EN SANGRE

Adultos son entre 7 y 20 mg/dL.
Nios pequeos de 5 a 18 mg/dL.


Ver anexo 1.



7.-Bibliografia

John Bernard Henry. Clinical Diagnostics and Management by Laboratory Methods 20. Edicion. EUA, W.B.


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1.-Sesin No. 16: Diagnstico clnico de laboratorio

Analiza e Interpreta y evala los datos obtenidos para proceder a elaborar hiptesis inicial, procediendo a
confrmalas o descrtalas mediante la bsqueda bibliogrfica, o bien, del uso racional de los estudios del
laboratorio, con responsabilidad en los resultados de su diagnostico.


Se realiza el examen de toma de muestra indicado en el encuadre de la practica 1.

La solucin de muchos problemas clnicos requiere de la participacin de un equipo multidisciplinario
capacitado, tico e interesado en llegar a un diagnstico clnico certero. sin embargo las tcnicas de
laboratorio con tecnologa de punta o el uso de los ltimos tratamientos, no bastan por s solas para lograr un
buen diagnstico clnico que ayude a recuperar la salud, si no se cuenta con la participacin de un mdico que
tome decisiones, ate cabos sueltos y desarrolle su habilidad para, a partir de un conjunto de signos, sntomas y
datos de laboratorio, sea capaz de determinar cundo un caso clnico amerita someterlo a tratamiento, o en su
defecto, mantenerlo en observacin.
El diagnstico y la eficacia del tratamiento dependen en gran medida de la relacin que exista entre mdico-
enfermo. La fe y confianza que el paciente pueda tener hacia al mdico, su sentido de humanidad, las palabras
reconfortantes y sobre todo el inters por l, constituyen el mejor tratamiento.
Ver anexo 1.


a. Arman su propio caso clnico con todos los resultados obtenidos en sus prcticas.
b. Se exponen y discuten los temas investigados.
c. Se seleccionan los casos ms relevantes, enfatizando su importancia clnica.
d. Se realiza el examen de toma de muestra.

7.-Bibliografia

John Bernard Henry. Clinical Diagnostics and Management by Laboratory Methods 20. Edicion. EUA, W.B.


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V. Anexos
Anexo 1.

Anexo 1. Lista de Material, Reactivos, instrumentos y equipo para las prcticas de laboratorio

R
P
B
I

I
L
A
B

T
M
1

T
M
2

P
T

A
L
B

E
N
Z

G
L
U

p
r
e

G
L
U

P
o
s
t

C
O
L

T
r
i
g

C
E
T

A
U

C
R
E
A

U
R
E
A

D
x

Material 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
Kit de simulacin RPBI x
Contenedor hermtico
rojo, contenedor
hermtico amarillo,
contenedor
punzocortantes, bolsa
roja, recipiente basura
comn.
x x x x x x x x X x x x x x x x
Torniquete, torundas con
alcohol, Bandas
adhesivas redondas
x x x x x x X x x x x x X
Kit demostracin toma de
muestra
x x
Mariposa Vacutainer
x x x x x x X x x x
x x x
Aguja Vacutainer Verde
x x x x x x X x x x
x x X
Aguja Vacutainer negro
x x x x x x X x x x
x x X
Sujetador/Holder
Vacutainer
x x x x x x X x x x
x x X
Jeringa con aguja 21
x x x x x x X x x x
x x X
Tubos rojos
x x x x x x X x x x
x x X
Tubos amarillos
x x x x x x X x x x
x x X
Tubos azules
X

Tubos lavanda ( morado)
X

Puntillas todas las
medidas
x x x x x X x x x
x x
Celdas
x x x x x X x x x
x x
Aplicadores de madera
x x x x x X x x x
x x
papel parafilm
x x x x x x X x x x x
x x
Vasos para recoleccion
de orina
x

Inserto del reactivo
correspondiente
x x x x X x x x x
x x


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Inserto de los controles
correspondientes
x x x x X x x x x
x x
Pipetas transfer
x x x x x X x x x x
x x
Reactivo
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
Controles
correspondientes
x x x x X x x x x x x
Calibrador
correspondiente
x x x X x x x x x
Proteinas Totales
x

Albumina
x

ALT
x

Fosfatasa Alcalina
x

Glucosa x x
Colesterol total x
Colesterol HDL x
Trigliceridos
x

Acido rico
x

Creatinina

x
Tiras reactivas multistix
10 SG
x

Urea

x
Instrumental
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
Gradillas
x x x x x x x x x
x x
Pizetas
x x x x x x x x x x
x x
Micropipeta 20-200 uL
x x x x x x x x x
x x
Micropipeta 100-1000 uL
x x x x x x x x x
x x
Micropipetas
10,20,50,100 uL
x x x x x x x x x
x x
Pipetas serologicas 1,5,10
mL
x x x x x x x x x
x x
Equipo
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
Bao Maria
x x x x x x x x x
x x
Centrfuga
x x x x x x x x x x x
x x
Espectrofometro
x x x x x x x x x x
x x
Clinitek 50
x x

Caon multimedia
x
x x x x x x x x x x x x
Modelo Anatmico Brazo x


Cdigo
L1-ML-002

Revisin
5

GC-FR-012 Rev. 4

VI.- Tabla de cambios

Tabla de Cambios

Revisin Fecha Descripcin
3 22/12/2011
Actualizacin de manual, se incorpora la segunda parte de toma de
muestras, se modifican competencias de las prcticas 3, 4, 10, 12 y 13.
Se agrega la seccin V.
4 26/07/2012
Se incorpora la lista de cotejo para la evaluacin del examen de toma de
muestra en el encuadre de la practica 1. Se cambia el nombre de la
practica determinacin de aminocidos por determinacin de albumina.
Se elimina la prctica 9 curva de tolerancia a la Glucosa. La prctica 8
se adecua para determinar glucosa en 2 sesiones mediante alimentos
con alto y bajo ndice glucmico y se redacta la competencia de esta
prctica. Se adecua al formato GC-FR-012 Rev.3
5 19/06/2013
Se modifican las prcticas 8-9, se modifica la tabla 1 y se agrega la tabla
2. Se adecua al formato GC-FR-012 Rev.4.

L1-ML-002 Manual de Laboratorio de Bioquimica Basica

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