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Nutrio e Metabolismo
microbiano
Nutrio e metabolismo
microbiano
1. Introduo
2. Necessidades nutricionais e meios de
cultivo bacteriolgicos
3. Cultivo e crescimento bacteriano
Nutrio e metabolismo
microbiano
1. Introduo
O que contm uma clula bacteriana?
De que compostos qumicos ela se constitui?
Origem dos seus precursores
retirados do meio
sintetizados a partir de compostos mais
simples
Atlas, 1997
Que estrutura
qumica tm os
compostos
precursores das
macromolculas?
Nutrio e metabolismo
microbiano
Que componentes qumicos esto combinados para
formar protenas e cidos nucleicos (DNA e RNA)?
2
Nutrio e metabolismo
microbiano
Que componentes qumicos esto combinados para
formar protenas e cidos nucleicos (DNA e RNA)?
Que componentes qumicos esto combinados para
formar protenas e cidos nucleicos (DNA e RNA)?
Nutrio e metabolismo
microbiano
De onde as bactrias captam estes elementos?
Do seu habitat - grande diversidade de
nichos onde bactrias podem ser encontradas
Dos meios de cultura laboratoriais quando se
quer estud-las em ambiente controlado
O QUE PRECISO
CONTER?
COM FORMULAR?
Nutrio e crescimento
microbiano
2. Necessidades nutricionais e meios de
cultivo bacteriolgicos
Elementos qumicos como nutrientes
Fonte de carbono
Nitrognio
H, O, S, P
Outros elementos
Material plstico
Blocos construtores
da estrutura celular
2. Necessidades nutricionais e meios de
cultivo bacteriolgicos
Elementos qumicos como nutrientes
Fonte de carbono
Heterotrficos
Autotrficos
Orgnico oxidao e gerao de energia
Inorgnico reduo e gasto de energia
CO
2
2. Necessidades nutricionais e meios de
cultivo bacteriolgicos
Elementos qumicos como nutrientes
Nitrognio
Uso de compostos nitrogenados
inorgnicos - NO
3
-
, NO
2
-
, NH
4
+
orgnicos- aminocidos e peptdeos
Fixao de nitrognio atmosfrico
3
2. Necessidades nutricionais e meios de
cultivo bacteriolgicos
Elementos qumicos como nutrientes
H, O, S, P
H e O - necessrios aos compostos
orgnicos
S - aminocidos (cistena, cistina e
metionina)
P - sntese de cidos nucleicos e
ATP
2. Necessidades nutricionais e meios de
cultivo bacteriolgicos
Elementos qumicos como nutrientes
Outros elementos - necessrios em
quantidades menores
Cofatores de enzimas, facilitao de
transporte intermembranas (Na
+
)
Fe : citocromos, catalase e outras
enzimas
Elementos-traos - Co
++
, Mn
++
, Zn
++
(oligonutrientes, micronutrientes)
K
+
, Ca
++
Cu
++
, Mo
6+
2. Necessidades nutricionais e meios de
cultivo bacteriolgicos
Elementos qumicos como nutrientes
Outros elementos
GUA
Fatores (orgnicos) de crescimento
Ex. vitaminas para humanos
Bactrias em geral sintetizam,
Vitaminas, aminocidos,
purinas e pirimidinas -
fatores de crescimento
para algumas espcies
Classificao nutricional
Quimioautotrficos
Quimioheterotrficos
Fotoautotrficos
Fotoheterotrficos
Nutrio e metabolismo
microbiano
Condies fsicas para o cultivo de bactrias
Temperatura Temperatura
pH pH
Atmosfera gasosa Atmosfera gasosa
Presso osmtica Presso osmtica
Presso hidrosttica Presso hidrosttica
Luz Luz
Os nutrientes apresentados at agora, seriam suficientes
para permitir que uma cultura bacteriana crescesse?
4
Nutrio e metabolismo
microbiano
Condies fsicas para o cultivo de bactrias
Temperatura
temperatura tima de crescimento
Psicrfilos Mesfilos Termfilos
Resposta tpica de crescimento bacteriano a diferentes
temperaturas Pelczar et al., 1993
Condies fsicas
para o cultivo de
bactrias
Temperatura Temperatura
Faixas de temperauras
de crescimento de
vrios grupos
fisiolgicos,
excetuando-se os
termoflicos extremos
(archaebactrias
Nutrio e metabolismo
microbiano
Condies fsicas para o cultivo de bactrias
Temperatura Temperaturaa a
pH
pH timo para cada bactria
pH prximo do neutro para a maioria
Valores extremos so restritos a alguns grupos
Nutrio e metabolismo
microbiano
Condies fsicas para o cultivo de bactrias
Temperatura Temperaturaa a
pH
Classificao geral
Acidfilos Neutrfilos Alcalfilos
pH 1,8-5 5-9 9-11
Nutrio e metabolismo
microbiano
Condies fsicas para o cultivo de bactrias
Temperatura Temperatura a a
pH pH a a
Atmosfera gasosa
Nutrio e metabolismo
microbiano
Condies fsicas para o cultivo de bactrias
Temperatura Temperatura a a
pH pH a a
Atmosfera gasosa
Bactrias aerbias
facultativas
anaerbias
microaerfilas
Black, 1999
5
Nutrio e metabolismo
microbiano
Condies fsicas para o cultivo de bactrias
Temperatura Temperatura a a
pH pH a a
Atmosfera gasosa
Pelczar1993
O oxignio pode ser txico
Efeito da presso osmtica sobre
a clula bacteriana
Crescimento influenciado pelas
condies de presso
Solues isotnicas
solues hipertnicas
Solues hipotnicas
Nutrio e metabolismo
microbiano
Condies fsicas para o cultivo de bactrias
Temperatura Temperatura a a
pH pH a a
Atmosfera gasosa Atmosfera gasosa a a
Presso osmtica Presso osmtica a a
Presso hidrosttica
Pelczar, 1993
Nutrio e metabolismo
microbiano
Presso hidrosttica
Exercida pelo peso da gua existente sobre eles
microrganismos isolados das profundezas
ocenicas
no cultivveis nas condies normais de
laboratrio
Microrganismos barfilos
Nutrio e metabolismo
microbiano
Temperatura Temperatura a a
pH pH a a
Atmosfera gasosa Atmosfera gasosa a a
Presso osmtica Presso osmtica a a
Presso hidrost Presso hidrost tica tica a a
Luz
Nutrio e metabolismo
microbiano
Luz
Bactrias fotossintetizantes
Bactrias inibidas pela luz
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Nutrio e metabolismo
microbiano
Temperatura Temperatura a a
pH pH a a
Atmosfera gasosa Atmosfera gasosa a a
Presso osmtica Presso osmtica a a
Presso hidrost Presso hidrost tica tica a a
Luz Luz a a
Nutrio e metabolismo
microbiano
3. Cultivo e crescimento bacteriano
Meios para cultivo de bactrias
Mistura dos nutrientes necessrios ao
crescimento
Nutrio e metabolismo
microbiano
3. Cultivo e crescimento bacteriano
Meios para cultivo de bactrias
Quimicamente definidos
Complexos - quimicamente no definidos
Slidos
Lquidos
Semi-slidos
A composio do meio de cultura deve ser compatvel com a
bactria a ser cultivada
Exemplos de meios para cultivo
de bactrias
Meio de cultura quimicamente definido para bactrias quimioautotrficas
Componente Funo Quantidade
(NH4)2SO4 Fonte de nitrognio e
energia
0,5 g
NaHCO3 Fonte de carbono na forma
de CO2 em soluo aquosa
0,5 g
Na2HPO4 Tampo e on essencial 13,5 g
KH2PO4 Tampo e on essencial 0,7 g
MgSO4.7H2O on essencial 0,1 g
FeCl3.6H2O on essencial 0,014 g
CaCl2.2H2O on essencial 0,18 g
gua Solvente 1000 ml (q.s.p.)
Exemplos de meios para cultivo
de bactrias
Meio de cultura quimicamente definido para bactrias heterotrficas
Componente Funo Quantidade
Glicose Fonte de carbono e
energia
1 g
NH4H2PO4 Fonte de nitrognio, tampo
e on essencial
5 g
K2HPO4 Tampo e on essencial 1 g
NaCl on essencial 5 g
MgSO4.7H2O on essencial 0,2 g
gua Solvente 1000 ml (q.s.p.)
Os componentes acima representam a composio mnima de um meio para bactrias no fastidiosas como
uma Escherichia coli selvagem. Para espcies fastidiosas, tais como Lactobacillus acidophilus , outras
substncias como amino cidos e vitaminas tm que ser adicionadas ao meio.
Exemplos de meios para cultivo
de bactrias
Composio do Caldo Nutriente, um meio complexo para o crescimento de bactrias heterotrficas
Componente Funo Quantidade
Extrato de carne Substncias de tecido animal
solveis em gua: carboidratos,
compostos orgnicos nitrogenados,
vitaminas e sais
3 g
Peptona Nitrognio orgnico e algumas
vitaminas
5 g
Cloreto de sdio Necessidades osmtica e inica 8 g
gua Solvente 1000 ml (q.s.p.)
Se o meio slido for necessrio, 18 g de gar adicionado e o meio denominado gar Nutriente.
7
Meios para cultivo de bactrias
Meios para fins especiais - anaerbios
Meios seletivos
Meios diferenciais
Meios para cultivo de bactrias
Estratgias:
inibir do desenvolvimento de
determinados grupos bacterianos
anaerbios
evidenciar atividades metablicas
diferentes
diferenciar colnias
Metabolismo
Diversidade metablica
Ocupao microbiana em diferentes nichos
Necessidade de sintetizar os mesmos componentes
celulares
independente das condies de cultivo x oferta de
substratos x capacidade metablica
40 41
8
COMO A CLULA OBTM
OS 12 METABLITOS PRECURSORES,
ATP E
PODER REDUTOR?
Observar as questes sobre tipos
metablicos bacterianos
Independente da condio de cultivo e do
tipo metablico
42 43
44 45
46 47
9
48
Vias metablicas
Catabolismo e anabolismo
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http://www.genome.ad.jp/kegg
Etapas principais da gliclise:
P representa o grupo PO
4
-
C
6
representa hexose
C
3
representa triose
Gliclise
http://biocyc.org/ECOLI/
Regulao
10
Ciclo de Krebs
(Ciclo dos cidos tricarboxlicos)
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Cadeia de transporte de eltrons
Teoria quimiosmtica de Mitchell e gerao de energia
57
Biossntese
Macromolculas
Gliconeognese
Aminocidos protenas
cidos nucleicos DNA RNA
Lipdeos
11
Precursores para biossntese
Ciclo de Calvin Benson