Veterinaria de San Marcos Autor: Jorge Guevara Universidad Nacional Mayor de San Marcos Facultad de Medicina Veterinaria PROBITICOS EN NUTRICIN ANIMAL
Autoi: }oige Einesto uuevaia vsquez Pgina 1
TABLA DE CONTENIDO 1. PRESENTACIN ...................................................................................................... 2 2. INTRODUCCIN ..................................................................................................... 2 3. PROPIEDADES DE LOS PROBITICOS EN LOS ANIMALES .......................... 3 4. CONCLUSIONES ..................................................................................................... 9 5. LITERATURA CITADA ........................................................................................... 9
Autoi: }oige Einesto uuevaia vsquez Pgina 2
1. PRESENTACIN Los probiticos han sido definidos como microorganismos vivos que ejercen un efecto benfico para el tracto intestinal del hospedero, manteniendo y reforzando los mecanismos de defensa ante patgenos sin perturbar las funciones fisiolgicas y bioqumicas normales. Este documento presenta una revisin de algunas investigaciones realizadas en diferentes especies y plantea sus propiedades, efectos de su uso en la salud, su mecanismo de accin y evaluacin del uso de cepas probioticas aisladas de microbiotas intestinales.
2. INTRODUCCIN El trmino "probitico" data de 1965, cuando se us para referirse a cualquier sustancia u organismo que contribuyera al balance microbiano intestinal, principalmente de los animales de granjas, luego lo consideraron un suplemento alimenticio microbiano vivo, ms que una sustancia, de modo que se hiciera ms relevante para los humanos. Los alimentos que contienen un probitico son considerados alimentos funcionales (Gibson y Roberfroid, 1995). Un alimento puede ser considerado funcional si logra demostrar satisfactoriamente que posee un efecto benfico sobre una o varias funciones especficas en el organismo, mejora el estado de salud y de bienestar o bien reduce el riesgo de una enfermedad, ms all de los efectos nutricionales habituales (Diplock et al. 1998). El inters en las terapias preventivas y suplementos nutricionales ha aumentado en los ltimos aos. Los probiticos que son organismos vivos, al ser ingeridos afectan benficamente al husped mejorando su balance intestinal. Los organismos ms estudiados son las bacterias cido-lcticas, sobre todo Lactobacillus spp y Bifidobacterium spp., consideradas seguras para uso. Los efectos benficos en la salud PROBITICOS EN NUTRICIN ANIMAL
incluyen tratamiento y prevencin de la diarrea por rotavirus y reduccin de la diarrea asociada con el uso de antibiticos. Los probiticos tambin contribuyen en la prevencin de infecciones urinarias, alergia a los alimentos y reacciones atpicas en nios y pueden mejorar la intolerancia a la lactosa. Se han informado resultados prometedores en personas con enfermedad inflamatoria del intestino, enterocolitis necrotizante y colon irritado. Por otro lado, se encuentra en investigacin el uso de bacterias cido-lcticas como antgenos para el desarrollo de vacunas que induzcan una respuesta humoral protectora. A pesar que los probiticos representan un avance teraputico importante, es necesario continuar investigando con el fin de, definir sus mecanismos de accin y determinar por qu sus diferentes respuestas en algunos eventos clnicos. En dcadas pasadas el mtodo ms comn para prevenir enfermedades y aumentar la eficiencia alimentaria, fue el uso de antibiticos como aditivo alimentario, pero se ha comprobado que este uso tiene influencia negativa en la eubiosis del sistema gastrointestinal, crea resistencia bacteriana a estos frmacos y causa presencia residual en las carnes, huevos, leche y otros productos de origen animal, es por ello que la aparicin de los probiticos es visto como una solucin alternativa promisoria. .
3. PROPIEDADES DE LOS PROBITICOS EN LOS ANIMALES En la ltima mitad del siglo XX, se desarrollaron nuevos conceptos para promover la salud animal y asegurar el rendimiento en el crecimiento, eficiencia en la alimentacin, y calidad del producto (Zimmermann et al., 2001). Los antibiticos fueron primero aadidos a los alimentos para proteger a los animales contra infecciones, pero los antibiticos tambin promueven el crecimiento, esta doble funcin produjo el uso amplio como un aditivo en la alimentacin. Sin embargo, debido a preocupaciones de seguridad acerca de la transmisin de la resistencia a los antibiticos, el uso de los antibiticos en alimentacin animal ha ido gradualmente declinando desde 1990 y han sido prohibidos completamente desde enero del 2006. Esta situacin llev a la proposicin de alternativas, tales como los microorganismos probiticos (Brambilla y De Filippis, 2005).
Autoi: }oige Einesto uuevaia vsquez Pgina 4
Los probiticos son microorganismos viables que aumentan la ganancia de peso y los rangos de conversin alimenticia (propiedades zootcnicas) y disminuyen la incidencia de diarrea (Simon et al., 2001). Algunos estudios han sealado que los probiticos incrementan el crecimiento en situaciones de estrs, como las encontradas en granjas reales a diferencia de los que ocurre en ensayos ms controlados como los realizados en las universidades. Esto asume que los efectos en la salud y los efectos zootcnicos estn estrechamente relacionados. La suplementacin probitica ha sido recomendada para el tratamiento o prevencin de varias condiciones de estrs y enfermedades de un sinnmero de especies (Zimmermann et al., 2001)
3.1. Probiticos en la salud gastrointestinal Los probiticos pueden influir positivamente en la biodisponibilidad de nutrientes al facilitar un rompimiento de protenas de la leche entera, liberando calcio y magnesio en grandes cantidades, a diferencia de cuando no se utilizan probiticos. Los probiticos parecen estar involucrados tambin en la sntesis de vitaminas del complejo B, fosfatos y adems, algunas cepas, pueden ejercer un efecto estabilizador en la flora intestinal incrementando una resistencia a las infecciones, as como una prevencin y tratamiento de diversas formas de diarreas. Las cepas de lactobacilos como Lactobacillus GG, producen substancias antimicrobianas que son activas contra diversas bacterias presentes en la microflora normal del intestino, como E. coli, Streptococcus, Clostridium difficile, Bacteroides fragilis y Salmonella (Gorbach, 1996).
3.2. Mecanismo de accin de los probiticos El efecto benfico de los probiticos se atribuye en general a mecanismos diferentes que a su vez pueden deberse a varias causas; a saber: a) A la exclusin competitiva de bacterias nocivas, ya sea por: (i) competencia por nutrientes, (ii) competencia por sitios de fijacin en el intestino,o (iii) aumento de la respuesta immunolgica del hospedero y b) Por aportes benficos al proceso digestivo del hospedero, a travs de: (i) aporte de macro y micronutrientes para el hospedero o (ii) aporte de enzimas digestivas (Hassan y Frank, 2001).
Autoi: }oige Einesto uuevaia vsquez Pgina S
3.3. Influencia de probiticos en la digestin A principios de siglo XIX se empez a observar la influencia de determinados microorganismos sobre la digestin humana y animal, se atribua la larga vida de los habitantes de los Balcanes a las bacterias del yogurt que consuman. Supona que el consumo de las bacterias del yogurt alteraba el equilibrio de la microbiota intestinal y suprima las bacterias de la putrefaccin, paralelamente haba observado que los campesinos blgaros, grandes consumidores de leche fermentada, eran muy sanos y longevos (OSullivan et al., 1993).
3.4. Bacterias productoras de cido lctico (BAL) Las BAL son un grupo grande de bacterias con la caracterstica comn de producir cido lctico como el principal producto final del metabolismo; se encuentran en la leche y en otros ambientes naturales. Las bacterias lcticas son gram positivas, cido tolerantes, soportan rangos de pH entre 4.8 y 9.6, lo que les permite sobrevivir naturalmente en medios donde otras bacterias no sobreviviran. Las bacterias lcticas tienen formas de cocos o de bastoncitos y son catalasa negativa. Las BAL sintetizan su ATP en la fermentacin lctica de los glcidos, el cido lctico es en algunos casos el nico producto final (homofermentacin) y en otras ocasiones se produce adems etanol, acetato y CO 2 (heterofermentacin). Las bacterias lcticas son generalmente aerotolerantes, aunque algunas especie, como las que se encuentran en el intestino de los animales, son anaerobias estrictas. Incluso en presencia de O 2 no son capaces de llevar a cabo las fosforilaciones oxidativas, lo que est muy relacionado con su incapacidad para sintetizar citocromo y enzimas con grupo hemo (Bourgeois y Larpent, 1995). Las BAL requieren aminocidos especficos, vitamina B y otros factores de crecimiento y son incapaces de utilizar hidratos de carbono complejos (Hassan y Frank, 2001). Se demostr que las BAL reducan el crecimiento de grmenes indeseables en el tracto intestinal. Esta reduccin sera consecuencia tanto de la produccin de compuestos antibacterianos, como la acidez intestinal originada o del antagonismo competitivo.
Autoi: }oige Einesto uuevaia vsquez Pgina 6
3.5. Produccin de compuestos antibacterianos Diversos autores han comprobado la reduccin del nmero de grmenes patgenos por las BAL mediante la produccin de compuestos antibacterianos los cuales han sido denominados de muy diversas formas: Lactobacillin, Lactolin, Lactobrevin, Acidolin y Acidophilin. Las BAL pueden tambin producir sustancias que neutralizan los efectos adversos de un microorganismo al modificar su metabolismo, sin necesidad de destruirlo, pero si disminuyendo su poblacin. Por ejemplo cambios en la actividad enzimtica no asociados con cambios en la composicin de la flora intestinal.
3.6. Productos finales de la fermentacin y la acidez intestinal Las BAL poseen gran capacidad fermentativa, produciendo cantidades significativas de cidos orgnicos (cido actico, frmico y lctico) a partir de carbohidratos simples, lo cual determina una acidez intestinal que limita el crecimiento especialmente de los grmenes patgenos gram negativos (Ten Brink et al. 1987). Fuller en 1989, demostr que puede detenerse el crecimiento de E. coli ajustando el pH de un medio de cultivo a 4.5 mediante la adicin de acido lctico o clorhdrico. Aos ms tarde este mismo autor administrando yogurt (leche fermentada por L. bulgaricus y S. termophilus) a lechones destetados observ como descenda el recuento de E. coli en el estmago y duodeno afirmando que el efecto por el yogurt podra ser reproducido por leche acidificada por cido lctico a un pH de 4.2.
3.7. Antagonismo competitivo La importancia de la microflora indgena en el intestino como factor de resistencia natural frente a los microorganismos potencialmente patgenos, fue reconocida a finales del siglo XIX por Metchnikoff. Esta microflora indgena es muy estable. La penetracin y colonizacin de microorganismos no indgenas o del medio y/o de otras especies animales es impedida por las BAL, las cuales compiten con otras bacterias en la colonizacin de zonas intestinales y en la utilizacin de sustancias nutritivas (Bibel, 1988). La competencia directa de los grmenes bacterianos por los lugares de adherencia en la superficie epitelial del intestino, es un factor importante en la reduccin de los
Autoi: }oige Einesto uuevaia vsquez Pgina 7
microorganismos al inducir la exclusin de grmenes patgenos (Scheleifer, 1985; Schneitz et al., 1993).
3.8. Principales bacterias con uso probitico 3.8.1. Bacillus Las especies de Bacillus son los principales componentes de la microflora termoresistentes de la leche pasteurizada. Los bacilos producen enzimas hidroflicas extracelulares que descomponen polisacridos, cidos nucleicos y lpidos, permitiendo que el organismo emplee estos productos como fuentes de carbono y donadores de electrones. Los bacilos producen antibiticos y son ejemplos de estos la bacitracina, polimixina, tirocidina, gramicidina y circulina. El Bacillus subtilis es uno de los microorganismos ms usados como probitico. En 1941 el ejrcito alemn en frica del Norte descubri que los rabes se automedicaban la disentera ingiriendo excremento fresco de camello y verificaron que la ingestin de B. subtilis era la causa de esta mejora aplicando luego este tratamiento (sin el excremento) con xito a sus propias tropas. El Bacillus subtilis, realiza una fermentacin 2,3 butanediol, cuyos productos principales son butanediol, etanol, CO 2 , y H 2 0. Estos microorganismos tambin producen glicerol como un producto de la fermentacin. Las caractersticas principales de Bacillus subtilis son: Gram positivas, mesfilas, producen esporas ovales o cilndricas, fermentativas, usualmente hidrolizan caseina y almidn, los esporangios no son hinchados, la pared de la espora es delgada y catalasa positiva (Bioland). B. subtilis se encuentra en todo el ambiente sobre todo en el suelo (Konigs et al., 2000). No muestra toxicidad hacia vertebrados, muestra una marcada accin bactericida y fungicida por lo que se ha aprobado su uso como biopesticida en plantas. B. subtilis es un ingrediente comn en las mezclas de probiticos recomendadas para el uso en animales acuticos. Tiene la habilidad para formar una resistente endospora protectora, lo cual le permite al organismo soportar condiciones ambientales extremas. A diferencia de varias especies bien conocidas, el B. subtilis ha sido clasificada histricamente como un aerobio obligado, aunque recientes investigaciones han demostrado que esto no
Autoi: }oige Einesto uuevaia vsquez Pgina 8
es estrictamente correcto. B. subtilis, libera compuestos con propiedades antifngicas como la subtilina y otros antibiticos de la familia de las Iturinas. Estas ltimas son polipptidos que actan sobre la pared celular de los hongos (Farnworth, 2001).
3.8.2. Lactobacillus Bacterias del gnero Lactobacillus son organismos benficos de inters particular por su larga historia de uso (Holzapfel, 2002). Los Lactobacillus fueron entre los primeros organismos usados por el hombre para la produccin de alimentos (Konigs et al., 2000) y para la preservacin de estos al inhibir la invasin por otros microorganismos que causan la descomposicin de la comida (Adams, 1999). Las industrias lcteas y de auto cuidado de la salud estn activamente promocionando el uso de Lactobacillus en la comida, y estos son usados cada vez ms en la alimentacin animal por su potencial de reemplazar los promotores antibiticos de crecimiento (Farnworth, 2001). El L. acidophilus es una bacteria intestinal tpica, que se encuentra en las heces fecales del hombre (casi siempre de los nios y muy escasamente en los adultos) y tambin de algunos mamferos. A partir de las heces de nios se puede aislar mediante el mtodo de enriquecimiento (Barbosa y Vega, 2000). En Lactobacillus acidophilus, la denominacin "acidfilo" conduce a errores, pues esta bacteria no tolera ms el cido que otros lactobacilos. Los bacilos miden unas 2 6 de largo, y a veces estn algo redondeados en los extremos. Se encuentran aislados o en cadenas cortas. La temperatura ptima para su desarrollo es de unos 37 C, la mxima de unos 43 a 48 C. Por debajo de los 20 C no se registra crecimiento alguno. Los Lactobacillus acidophilus son usados tambin para producir lcteos fermentados. Estos organismos generalmente resisten la acidez gstrica y sales biliares. Su tasa de supervivencia en el tracto gastrointestinal se estima entre un 2 y 5% y logran concentraciones suficientes en el colon (106-108 ufc/ml). Dependiendo de la cepa vara su capacidad de adhesin intestinal, los efectos favorables sobre la digestibilidad de lactosa y su habilidad para prevenir diarrea.
Autoi: }oige Einesto uuevaia vsquez Pgina 9
4. CONCLUSIONES Los probiticos tienen la capacidad de modificar la composicin de la microflora intestinal de una potencialmente daina a otra beneficiosa para el hospedero; los estudios sobre el mejor conocimiento de estos microorganismos ha permitido establecer las diferentes acciones a travs de los cuales ejercen sus efectos beneficiosos. La utilizacin de probiticos se ha intensificado en los ltimos diez aos, siendo una de las causas la extensin de su uso en humanos a su uso en monogstricos y mascotas. Entre los microorganismos utilizados como probiticos, los Bacillus y Lactobacillus ocupan el lugar ms destacado, los primeros producen enzimas hidrfilas y los segundos producen cido lctico
5. LITERATURA CITADA
1. Adams M. 1999. Safety of industrial lactic acid bacteria. J Biotechnol 68: 171 178. 2. Barbosa G, Vega H. 2000. Deshidratacin de alimentos. Editorial Acribia. Zaragoza. 3. Bibel D. 1988. Bacillus of long life. American Society for Microbiology News, 54:661 665. 4. Bourgeois C, Larpent J. 1995. Microbiologa alimentaria. Editorial Acribia. S.A. Volumen II. Zaragoza Espaa. 5. Brambilla G, De Filippis S. 2005. Trends in animal feed composition and the possible consequences on residue tests. Analytica Chimica Acta 529: 713. 6. Diplock A, Aggett P, Ashwell M, Bornet F, Fern E, Roberfroid M. 1998. Scientific concepts of functional foods in Europe, consensus document. Bruxelles : ILSI Europe, p. 17. 7. Farnworth E. 2001. Probiotics and prebiotics. En Handbook of Nutraceutical and functional foods [RE Wildman] Ed. CRC Press. Cap. 25: 407 422. 8. Fuller R. 1989. A review: Probiotics in man and animals. J. Appl. Bacteriol. 66, 365-378.
Autoi: }oige Einesto uuevaia vsquez Pgina 1u
9. Gibson G, Roberfroid M. 1995. Dietary modulation of the human colonic microbiota: introducing the concept of prebiotics. J. Nutr. 125, 1401-1412. 10. Gorbach S. 1996. The discovery of Lactobacillus GG. Nutrition Today; 31 (suppl 1):2S-4S. 11. Hassan A, Frank J. 2001. Srarter cultures and their use. En H.E. Marth y L. Steele; Applied dairy microbilogy. Second edition. Revised and expansed. Ed. Marcel Dekker, INC, New York, EEUU. 12. Konigs W, Kok J, Kuipers O, Poolman B. 2000. Lactic acid bacteria: the bug of the new millennium. Curr Opin Microbiol3: 276282. 13. OSullivan M, Thornton G, Sulliva G, Collins J. 1993. Probiotic bacteria: myth or reality? Trends Food Sci, Technol. 21: 309 313. 14. Schleifer J. 1985. Areview of the efficacy and mechanism of competitive exclusin for the control of Salmonella in poultry. Word Poultry Science Journal, 41: 72 83. 15. Schneitz C, Nuotio L, Lounatma K. 1993. Adhesion of Lactobacillus acidophilus to avian intestinal epitelial cells mediated by the crystalline bacterialcell surface layer (S layer). Journal of applied Bacteriology, 74: 290 294. 16. Simon O, Jadamus A, Vahjen W. 2001. Probiotic feed additives effectiveness and expected modes of action. J Anim Feed Sci 10: 51 67. 17. Ten Brink B, Minekus M, Bol J, Veld J. 1987. Production of antibacterial compounds by Lactobacilli. Nicrobiology Reviews, 46: 64. 18. Zimmermann B, Bauer E, Mosenthin R. 2001. Pro and prebiotics in pig nutrition potential modulators of gut health? J Anim Feed Sci 10: 4756.