Epistemologa y evolucin del pensamiento cientfico.

Texto de ctedra
Traduccin del artculo: Orange rust effects on leaf photosynthesis and related charecters of
sugarcane.
Resumen
La roya de la caa de azcar !accharum spp. "#rido$% causada por &uccinia 'uehnii% es una
enfermedad relativamente nueva en el hemisferio occidental (ue reduce sustancialmente el
rendimiento en genotipos suscepti#les de caa de azcar. El o#)etivo de este estudio fue determinar
los mecanismos fisiolgicos de accin de la roya por los cuales se producen reducciones en el
crecimiento de la caa y en su rendimiento% mediante la cuantificacin de los efectos de la
enfermedad en la ho)a a trav*s del ndice !&+, una indicacin del contenido de clorofila$% la tasa
de fotosntesis neta% respiracin oscura% el m-.imo rendimiento cu-ntico de asimilacin de /O0% la
eficiencia de fi)acin de car#ono% y las relaciones entre estos componentes fotosint*ticos de la ho)a
y la gravedad de la enfermedad. Las plantas para el e.perimento se inocularon con el patgeno
utilizando un m*todo de inoculacin en espiral. !e cuantific la enfermedad utilizando una escala
de 1 a 2 con intervalos de 1%3. En clasificaciones de la enfermedad 4 0% las porciones de las ho)as
infectadas de las plantas inoculadas mostraron reducciones significativas en el ndice !&+,% el
m-.imo rendimiento cu-ntico% la eficiencia de fi)acin de car#ono% la conductancia estom-tica% la
tasa de transpiracin de la ho)a y la tasa de fotosntesis neta5 por otro lado% las porciones con roya de
las ho)as infectadas aumentaron la concentracin intercelular de /O0 y la tasa de respiracin
oscura. +un(ue el ndice !&+,% la tasa fotosint*tica% la conductancia estom-tica y la tasa de
transpiracin en la porcin infectada con roya disminuy linealmente con el aumento de la cantidad
de roya% el efecto de la roya en la tasa fotosint*tica fue mucho mayor (ue el de la conductancia
estom-tica y la transpiracin. + diferencia de informes anteriores #asados en otros cultivos% la
reduccin de la fotosntesis de la ho)a de#ida a la roya en condiciones de poca luz fue mayor (ue
a(uella #a)o condiciones de mucha luz. Estos resultados ayudan a me)orar la comprensin de la
etiologa de la roya y de las #ases fisiolgicas (ue ocasionan la p*rdida de rendimiento de la caa de
azcar infectada por *sta enfermedad.
Introduccin
La caa de azcar !accharum spp. "#ridos$ es un importante cultivo a nivel mundial tanto para la
o#tencin de azcar como de #iocom#usti#les de#ido a su alto contenido de sacarosa y su gran
produccin de #iomasa gracias a la fotosntesis de /2 (ue realiza. 6-s de 738111 ha de caa de
azcar fueron sem#radas en 9lorida en 011: ;2$% cerca del 2:< de la produccin de EE==. En
nuestros das% la enfermedad por roya acecha a la produccin de caa de azcar en EE== 21$. La
roya de la caa &uccinia 'uehnii >. ?r@ger% E.A. Butler$ ha causado una importante p*rdida
econmica en +ustralia 71% 03$. Esta enfermedad fue advertida en 9lorida por primera vez en 0118
72$. ,esde entonces la roya ha causado sustanciales p*rdidas en el rendimiento de la caa en
9lorida ;;$% de#ido a (ue muchas de las variedades utilizadas para su cultivo son suscepti#les a
esta enfermedad A. /. /omstoc'% comunicacin personal$. La roya tam#i*n se ha encontrado en
plantaciones de caa de +m*rica /entral: Cuatemala ;1$% /osta Dica 7;$% Eicaragua 7;$% 6*.ico
78$% El !alvador 78$% &anam- 78$5 recientemente tam#i*n se detect en Brasil 0$ y /u#a ;7$.
El rendimiento del cultivo est- ntimamente relacionado a la captura de radiaciones en el dosel de
las ho)as ndice de -rea verde de la ho)a$% a la asimilacin del car#ono tasa de fotosntesis$% y a la
asimilacin fotnica translocacin y particin 7:$. Estudios previos sugieren (ue la clorosis y la
necrosis son sntomas comunes de infecciones causadas por patgenos foliares. La clorosis derivada
de dicha infeccin se vincula con la p*rdida de clorofila 22% 2:$. Los hongos (ue causan reacciones
foliares de necrosis afectan generalmente la fotosntesis 77% 0:% ;F% ;8% 27% 22$. La reduccin de
ciertas caractersticas fisiolgicas% tales como la reduccin en el ndice de -rea verde de la ho)a y el
decaimiento funcional de los cloroplastos con su consiguiente reduccin en la tasa de fotosntesis%
han sido asociadas con la p*rdida en el rendimiento de los cultivos 7% 3$.
+l estimar la p*rdida en el rendimiento de#ido a una enfermedad determinada% es aconse)a#le
entrecruzar la informacin fisiolgica con la proveniente de los estudios so#re p*rdidas del cultivo
2% 3% ;0$. Biemelt y !onneGald H$ revisaron la informacin so#re interacciones entre plantas y
micro#ios para conocer la regulacin del meta#olismo del car#ono a partir de la relacin sueloIagua
de las plantas. &*rdidas en el rendimiento de la caa a causa de la roya ha sido verificada en
+ustralia 71% 03$ y en EE== ;;$. !in em#argo% los mecanismos fisiolgicos de la roya por los
cuales se afecta el rendimiento de la caa an no son claros. La determinacin cuantitativa de los
efectos de una enfermedad especfica en la fisiologa de ho)as individuales es el primer paso para
comprender me)or los orgenes de las p*rdidas en el rendimiento de los cultivos 3$.
Estudios en otros cultivos como los fri)oles &haseolus vulgaris$% el trigo Triticum aestivum$% las
uvas Jitis vinifera$% y el arroz Oryza sativa$% mostraron (ue las infecciones por hongos pueden
reducir la productividad del cultivo a trav*s de la reduccin de la eficiencia fotosint*tica del -rea
verde restante ;% F% 08% ;3$. !in em#argo% la fotosntesis en las ho)as del puerro +llium porrum$
infectado por roya no difirieron de los controles sin la enfermedad en las regiones entre las pstulas%
aun(ue se encontr una disminucin significativa de la fotosntesis en las regiones de las pstulas
;F$. Tra#a)os anteriores 0;$ encontraron (ue la inhi#icin de la fotosntesis en el te)ido infectado
puede compensarse parcialmente por estimulacin de rganos a distancia de la ho)a infectada. En un
cultivo de ha#a verde Jicia fa#a$% a continuacin de la inoculacin con la enfermedad de las ho)as
inferiores la tasa de fotosntesis en este sector se redu)o sustancialmente% pero la fotosntesis de las
ho)as superiores se increment significativamente en comparacin con las ho)as de los controles no
inoculados. 0:$.
Los efectos de la roya en la fotosntesis de la ho)a vara con los tipos de patgenos% la gravedad de
la enfermedad% y las especies de plantas hospedadoras y I o genotipos de los cultivos. ,e#ido a (ue
la roya de la caa de azcar es una enfermedad relativamente nueva en el hemisferio occidental% no
e.iste un informe acerca del comportamiento de la caa infectada con roya en relacin a la
eficiencia en el intercam#io de car#ono en la ho)a y al uso de la radiacin en la fotosntesis. !e
plante la hiptesis de (ue la roya causa una reduccin en la fotosntesis de la ho)a de caa de
azcar no slo en las zonas afectadas de las ho)as% sino tam#i*n en las porciones verdes restantes y
en la copa de las ho)as no infectadas. =n e.perimento en macetas al aire li#re se llev a ca#o para
poner a prue#a esta hiptesis. Los o#)etivos especficos del estudio fueron identificar los
mecanismos fisiolgicos implicados en la reduccin en el crecimiento y el rendimiento de la caa
de azcar infectada con roya% a trav*s de la cuantificacin de los efectos de la enfermedad en el
nivel de clorofila en las ho)as ndice !&+,$% la fotosntesis% y a caractersticas relacionadas.
Tam#i*n se #usc determinar la relacin entre estos componentes fotosint*ticos de las ho)as y el
grado de la enfermedad.
Materiales y Mtodos
Cultivo de plantas y tratamiento
=n estudio con macetas se realiz en la Estacin de /ampo de /aa de azcar =!,+K+D! 0F.H7L
E% :1.F7L >$% /anal &oint% 9lorida% en 011H. &lantas no inoculadas control$ y plantas inoculadas
con &. 'uehnii fueron comparadas utilizando cuatro genotipos de caa de azcar. Los genotipos% M/&
80K01:FM 0F$% M/& ::K78F0M 2;$% M/& :HK072;M 7H$% y N/&/L HHK2233N 73$% son variedades
comerciales en 9lorida y varan en suscepti#ilidad a la roya. Tallos individuales de cada genotipo se
plantaron en macetas de 2%F litros 7: cm de di-metro y altura$ llenos de tierra mezclada con tur#a y
corteza de pino vol I vol O H:7$ y 3< en peso$ de arena fina 9lorida macetas y suelos% Orlando%
9L$ el 02 de )ulio de 011H. + fin de garantizar condiciones homog*neas de suelo% agua y nutrientes
para los cultivos inoculados y sin inocular control$% dos secciones del tallo del mismo genotipo se
sem#raron en cada maceta. "a#a dos plantas por maceta una inoculada y otra no$. Las macetas se
dispusieron en los #ancos e.teriores #a)o condiciones am#ientales. =n fertilizante com#inado
E&0O3K?0O O 71I71I715 9ric' !ervices% Pnc.% en !ugar Crove% PL$ de 2 g Imaceta se aplic ;1 das
despu*s de la siem#ra. ,urante el e.perimento% todas las macetas se regaron diariamente.
La roya para la inoculacin se e.tra)o de pstulas (ue produ)eron urediniosporas en la cara a#a.ial
de las ho)as sintom-ticas de diferentes cultivares de caa de azcar en varios campos de produccin
y se mezclaron en cantidades iguales el da antes de la inoculacin de acuerdo a !ood et al. 21$.
+gua destilada est*ril con 1%110< vol I vol$ 7Knonanol se aadi a las urediniosporas de roya por
lo (ue la concentracin de urediniosporas en la solucin fue de apro.imadamente 711.111
urediniosporas por ml. /uando las plantas de caa de azcar alcanzaron las cinco ho)as en el tallo
primario ;3 das despu*s de la siem#ra$% comenzaron las inoculaciones mediante la colocacin de
1%3 ml de la suspensin de esporas en el cogollo de las ho)as de cada planta con una pipeta. La
inoculacin se realiz a ltima hora de la tarde. La temperatura media fue de 08 L /% y la humedad
relativa fue del :H< en la fecha de la inoculacin 0H de agosto de 011H$ en el lugar de
e.perimentacin. Las plantas de control reci#ieron la misma cantidad de agua destilada con 7K
nonanol pero sin las urediniosporas de la roya. ,espu*s de 2 semanas de evaluaciones del avance de
la roya y mensuras de las caractersticas de la fotosntesis de las ho)as% las ho)as vie)as% incluyendo
las infectadas% por de#a)o de la ho)a superior totalmente e.pandida es decir% la parte superior
visi#le QTJ,R$ fueron cortadas de todas las plantas para proporcionar condiciones adecuadas para
una segunda inoculacin de la enfermedad y para la determinacin de la actividad fotost*tica en
relacin a la luz y las curvas de respuesta al /O0. La segunda inoculacin se aplic un da despu*s
del recorte. Las respuestas de la fotosntesis a la intensidad de la luz y la concentracin de /O0 se
evaluaron apro.imadamente 2 semanas despu*s de la segunda inoculacin.
Medidas.
,espu*s de la emergencia de la ho)a% los sntomas de roya en las plantas sensi#les apareci como
#andas de pstulas en las porciones de ho)as (ue se inocularon con urediniosporas 9ig. 7$.
La evaluacin de la enfermedad comenz una semana despu*s de cada inoculacin y continu
apro.imadamente cada semana durante 2 semanas. La reaccin a la enfermedad se clasific en una
escala modificada de 1 a 2 con intervalos de 1%3 segn !ood et al. 21$. En general% las plantas
inoculadas se consideran resistentes a la roya si su puntuacin se encuentra entre 1 y 7%
moderadamente resistente con calificacin 0% y suscepti#le con calificacin de al menos ; 9ig. 7$.
En las mismas fechas (ue las evaluaciones de la enfermedad% despu*s de la primera inoculacin% se
midieron: el ndice !&+, indica el contenido de clorofila en la ho)a$% los componentes
fotosint*ticos de las ho)as% la tasa de fotosntesis neta &n$% conductancia estom-tica gs$% tasa de
transpiracin de la ho)a Tr$% la concentracin de /O0 intercelular /i$% as como la temperatura de
la ho)a y el d*ficit en la presin de vapor en la ho)a J&,$. Las mediciones se efectuaron entre las
1H;1 y 7211 h E,!T$ de las ho)as TJ, es decir% no inoculado y de la ho)a superior
completamente e.pandida$ para determinar si la roya inoculada afect las propiedades de
fotosntesis de las ho)as no infectadas de plantas inoculadas. El ndice !&+, se midi con un
medidor de !&+, 6inolta 10 6inolta /o.% LT,.% Aapn$. =n sistema LPKF211ST port-til LPK/OD
Pnc.% Lincoln% EE$ se utiliz para medir la actividad fotosint*tica de las ho)as de acuerdo con Thao
et al. 2F$. +l medir la fotosntesis de la ho)a% la radiacin fotosint*tica activa &+D$ en la c-mara de
la ho)a% proporcionada por la fuente LE, F211K10% se esta#leci en 7311 mmolI m0 s% y la humedad
relativa se a)ust a nivel del am#iente cercano apro.imadamente el 81 <$% y la concentracin de
/O0 en la c-mara de la ho)a se fi) a ;:1 mmmlI l.
En la ltima evaluacin de la enfermedad% 2 semanas despu*s de la primera inoculacin% los
sntomas de roya aparecieron como #andas de pstula en las ho)as inoculadas de las plantas
sensi#les% pero no hu#o sntomas visi#les de la enfermedad en las porciones superior e inferior de la
#andas de pstula de todas las ho)as inoculadas 9ig. 7$. El ndice !&+, y los componentes de la
fotosntesis se midieron en la #anda superior% inferior% y en las porciones de pstulas infectada$ de
las ho)as inoculadas para identificar diferencias entre las clasificaciones de la roya dentro y entre las
tres partes de las mismas ho)as 9ig. 7$.
+pro.imadamente 2 semanas despu*s de la segunda inoculacin% se midieron las curvas de
respuesta fotosint*tica a la luz y al /O0 en las porciones de las ho)as inoculadas con clasificaciones
de la enfermedad de 1% ;% y 2 utilizando el N&rograma +utoN del dispositivo LPKF211ST port-til.
,e#ido a (ue las mediciones de las curvas de respuesta a la luz y al /O0 llevaron mucho tiempo% no
se pudo medir todas las plantas tratadas. Tres plantas tpicas id*nticas para cada calificacin de la
roya fueron seleccionados de /& 80K01:F y /& ::K78F0 para determinar las relaciones entre las
medidas de &n en la ho)a y &+D o la concentracin de /O0 en tanto efectos de la infeccin por
roya. Estos dos genotipos se utilizaron por(ue tenan valores compara#les de &n en las ho)as% segn
mediciones previas Ta#la 7$ y eran suficientemente generales para efectuar las mediciones de las
curvas de respuesta fotosint*tica segn la luz y el /O0. Estas mediciones se hicieron so#re
porciones infectadas de ho)as inoculadas 9ig. 7$ desde las 7111 y hasta las 7211 h en cinco das
consecutivos.
/uando se midi la curva de respuesta fotosint*tica a la luz% la temperatura del aire dentro de la
c-mara de la ho)a se fi) en ;0 L /% la humedad relativa se esta#leci en apro.imadamente el 81<% y
la concentracin de /O0 se fi) a ;:1 mmml Ilitro so#re la #ase de las condiciones am#ientales. El
&+D se redu)o gradualmente desde 7:11 a 1 mmolI m0 s en nueve pasos 7.:11% 7.311% 7.111% 311%
011% 711% 31% 01 y 1 molI m0 s7$. La conductancia estom-tica Cs% /i% Tr% temperatura de la ho)a% y
J&, se registraron durante la medicin de las curvas de respuesta fotosint*tica a la luz. Los valores
de la tasa de respiracion oscura de la ho)a Dd$% el punto de compensacin lumnica L/&$% y el
m-.imo rendimiento cu-ntico de asimilacin de /O0 6UV$ fueron o#tenidos por la regresin
lineal inicial de los ltimos cuatro niveles de intensidad de luz &+D: 1% 01% 31 y 711 mmolI m0 s7$
y las tasas de intercam#ios gaseosos respectivos 20%28$. !o#re la #ase de una regresin lineal% el
valor a#soluto de la tasa de intercam#io de gases% cuando &+D O 1% se define como tasa Dd.5 el valor
de &+D% cuando la tasa de intercam#io de gases O 1% se defini como L/& 28$% y la pendiente de la
lnea de regresin se defini como 6UV 20$.
+l medir las curvas de respuesta fotosint*tica a la concentracin de /O0% la temperatura del aire
dentro de la c-mara de la ho)a se fi) en ;0 L /% la humedad relativa en apro.imadamente 81<% y el
&+D a 7.311 mmolI m0 s7. La concentracin de /O0 en la c-mara de la ho)a se cam#i en ocho
pasos 211% F11% ;11% 011% 711% 31% 21 y 211 mmmlitrosI l$% y el valor de &n de la ho)a se determin
a)ustando lentamente en cada paso la concentracin de /O0. La pendiente de la lnea recta de la
actividad fotosint*tica en funcin del /O0 se defini como la eficiencia de fi)acin de car#ono
/9E$ de la fotosntesis en las ho)as. Los valores de /9E se o#tuvieron por regresin lineal de las
primeras cuatro concentraciones de /O0 del nivel m-s #a)o de /O0 es decir% 21% 31% 711 y 011
mmmlI litro$ y a las tasas respectivas de intercam#ios gaseosos.
,espu*s de todas las mediciones fisiolgicas% el +,E fue e.trado de las lesiones de la roya de las
plantas /& 80K01:F y /& ::K78F0% de acuerdo a Clynn et al. 01$ para asegurarse de (ue la
enfermedad fue causada por &. 'uehnii. !e verific (ue en los e.tractos estuviera presente el
patgeno de la roya y el de la roya parda &. melanocephala utilizando ensayos de &/D en tiempo
real 01$. La prue#a produ)o resultados positivos para &. 'uehnii y negativos para &. melanocephala
confirmando (ue &. 'uehnii era el nico patgeno presente.
Diseo experimental y anlisis de datos.
El diseo e.perimental fue en #lo(ues completos al azar con un arreglo de parcelas divididas de las
macetas con 70 replicaciones macetas$ para cada genotipo. El genotipo de la planta fue el
argumento principal y el tratamiento de inoculacin de roya el secundario. &ara pro#ar las
diferencias de respuesta de las plantas con distinto genotipo a la roya y para comparar los
componentes fotosint*ticos de las ho)as inoculadas y sin inocular% se utiliz el procedimeinto
6PSE, del !+! ;:$ para medir la significacin. La replicacin se consider como un efecto
aleatorio y el genotipo y la inoculacin se consideraron como efectos fi)os. Las fechas de medicin
para el valor de &n de las ho)as TJ, se consideran repetidas. !i la hiptesis de medias iguales para
una varia#le (ue se mide entre los tratamientos se rechaza por la prue#a 9% entonces las medias de
los datos se separan con el L!, a & O 1%13. Los valores de L!, se calcularon con los valores del !E
generados por la opcin ,iff en el procedimiento 6PSE,.
La regresin lineal se utiliz para determinar relaciones entre la calificacin de la enfermedad y el
ndice !&+, o con cada componente de la fotosntesis de la ho)a &n% Cs% Tr% y /i$% medido en las
partes inferior% superior% e infectada de las ho)as inoculadas 2 semanas despu*s de la primera
inoculacin como as tam#i*n la tasa de Dd de la ho)a% L/&% 6UV% y la /9E de las curvas de
respuesta fotosint*ticas en funcin de la luz y la concentracin de /O0 (ue se descri#ieron
anteriormente. /uando el ndice !&+, y la fotosntesis se midieron en las ho)as inoculadas 2
semanas despu*s de la inoculacin% no hu#o diferencias significativas en estas varia#les entre los
genotipos. &or lo tanto% los datos se agruparon en los genotipos y se promediaron segn la
clasificacin de la enfermedad para determinar las relaciones entre la gravedad de la enfermedad y
la actividad fotosint*tica de las ho)as. Las curvas de respuesta fotosint*tica a la luz se a)ustaron
utilizando una solucin de mnimos cuadrados a una hip*r#ola no rectangular de acuerdo a Ogren y
Even 0H$. /on el programa !+!% se utiliz el me)or a)uste no lineal o las regresiones cuadr-ticas
para determinar las relaciones entre otras varia#les fisiolgicas Cs% /i% y Tr$ y &+D% y entre las
tasas de intercam#io de /O0 y la concentracin de /O0.
Resultados
Fotosntesis de las mejores ojas T!D
Las tasas netas de fotosntesis &n$ de las ho)as TJ, sin inocular control$ y de las plantas
inoculadas se midieron 8% 72% y 7: das despu*s de la inoculacin Ta#la 7$. En general% el genotipo
afect significativamente el valor de &n de la ho)a & W1%17$% aun(ue la fecha de medicin o el
tratamiento de inoculacin no afect este valor. La interaccin genotipo X fecha fue significativa &
O 1%13$% pero las interacciones de dos o tres vas no fueron significativas datos no mostrados$. El
test L!, indic (ue slo el /& ::K78F0 tuvo un valor de &n significativamente mayor (ue la
variedad /& :HK072; en todas las fechas de medicin. Estos dos genotipos no difieren de /& 80K
01:F o HHK2233 /&/L en cuanto al valor de &n a e.cepcin de la /& 80K01:F inoculado% medido 72
das despu*s de la inoculacin cuyo valor de &n es menor (ue el medido para /& ::K78F0 Ta#la 7$.
"ndice #$%D y &otosntesis de las ojas in&ectadas con roya
El ndice !&+, medido en la zona infectada de las ho)as inoculadas decrece de manera lineal y
significativa a medida (ue aumenta la gravedad de la enfermedad r0 O 1%8:3 y & W1%117$. El ndice
!&+, descendi 2%2 unidades por cada unidad de incremento en la categorizacin de la roya 9ig.
0$. La porcin de ho)a infectada para un grado de enfermedad 2 o#tuvo una medida de !&+, 22<
menor comparado con el control. /uando las mediciones se realizaron en las porciones superior e
inferior ver fig. 7$ de las ho)as infectadas% los ndices de !&+, se redu)eron ligeramente con el
aumento de la clasificacin de la roya% pero ello no se correlacion significativamente para la
porcin inferior r0 O 1%0;F y & O 1%73:$ o superior r0 O 1%;87 y & O 1%1:0$ de la ho)a fig. 0$.
El valor de &n no se correlacion con el grado de enfermedad cuando las mediciones se realizaron
tanto en las porciones superiores como inferiores de las ho)as infectadas 9ig. ;$. !in em#argo% &n
en la porcin infectada disminuy linealmente con una pendiente de K0.:0 a medida (ue la gravedad
de la roya se incrementa#a & W1%117$. El valor de &n disminuy desde 03%1 hasta 7;%8 mmolI m0 s
disminuy en un 23<$ cuando la calificacin de la enfermedad aument de 1 a 2 9ig. ;$. /uando
la calificacin de la enfermedad alcanz un valor de 0% &n disminuy un 0;< & W1%13$ comparado
con el control Enfermedad O 1$.
La relacin entre Cs y la gravedad de la enfermedad depende tam#i*n de la porcin de la ho)a
donde se tomaron las medidas. /uando las mediciones se hicieron en las partes superiores o
directamente en las zonas infectadas% Cs disminuy linealmente a medida (ue aument la
calificacin de la enfermedad r0 O 1%310 y & W1%13 para la parte superior y r0 O 1%872 y & W1%17
para la parte infectada$. En la parte inferior de la ho)a infectada% la relacin no fue significativa 9ig.
;B$. La medida de Tr en la ho)a fue m-s sensi#le a la enfermedad en comparacin con Cs y se
redu)o significativamente en las tres porciones de la ho)a conforme la gravedad de la enfermedad
aument fig. ;/$. En comparacin con el control% la porcin infectada con roya de las plantas
inoculadas (ue alcanzaron una calificacin de 2 para la enfermedad% o#tuvieron una medida de Cs
0F< inferior y un ;1< menos para la medida de Tr. &or el contrario% el valor de /i aument
linealmente con el aumento de la enfermedad% y esta relacin slo se detect en las porciones
enfermas de las ho)as inoculadas 9ig. ;,$. La gravedad de la enfermedad tuvo poco efecto so#re la
temperatura de la ho)a y el J&, datos no presentados$.
Respuesta &otosinttica a $%R
El valor de &n en relacin a la cantidad de luz respondi de manera cuadr-tica a los incrementos en
la medida del &+D y se a)ustaron #ien con una hip*r#ola rectangular en todos los tratamientos 9ig.
2+$. + medida (ue el valor de &+D aument de 711 a 7.111 mmolI m0 s7% el valor de &n en la ho)a
aument r-pidamente% para luego hacerlo lentamente. El valor de &n no parece alcanzar un m-.imo%
incluso para un valor de &+D O 7.:11 molI m0 s7 9ig. 2+$.
/alificaciones de la roya de ; y 2 redu)eron significativamente los valores de &n% y la magnitud de
la reduccin &n se asoci con la calificacin de la enfermedad y la intensidad de luz 9ig. 2+$. &ara
una misma calificacin de la enfermedad% el efecto de la roya en el valor de &n fue mayor para
valores menores de &+D (ue para valores elevados. /uando el valor de &+D estuvo entre 711 y 311
mmolI m0 s% las ho)as cuya calificacin de la enfermedad fue de ; y 2 o#tuvieron un valor de &n un
23 y un H0< menores & W1.117 a 1.1117$% respectivamente% en comparacin con los controles. /on
un valor de &+D de 7.:11 molI m0 s% &n% para las mismas calificaciones de la enfermedad% fue un ;;
y un 3F< inferior% respectivamente% (ue los valores o#tenidos en las ho)as no infectadas p W1%17 a
1%117$ 9ig. 2+$.
Las respuestas de Cs fig. 2B$ y el valor de Tr 9ig. 2/$ en funcin de la intensidad de luz fueron
similares al comportamiento de &n 9ig. 2+$. !in em#argo% la roya tuvo un efecto menor so#re los
valores de Cs y Tr (ue so#re &n. Las ho)as con un nivel de roya de ; no se diferenciaron de los
controles para Cs ni para Tr cuando los valores de &+D eran inferiores a 311 mmolI m0 s. &ara
valores de &+D de 7.:11 molI m0 s% los valores de Cs y Tr de las ho)as con enfermedad grado ; no
difirieron significativamente de los de las ho)as no infectadas% no as para los valores de Cs y Tr
cuando la gravedad de la enfermedad fue de 2% donde disminuyeron un 22 y un 2;<
respectivamente & W1%117$ en relacin al control. La concentracin intercelular de /O0 disminuy
marcadamente a medida (ue los valores de &+D aumentaron y alcanz su valor m-s #a)o para un
valor de &+D de apro.imadamente 7.111 molI m0 s% tanto para las ho)as infectadas como las (ue no
lo esta#an 9ig. 2,$. Eo hu#o diferencias entre las calificaciones de la enfermedad de ; y 2 en
cuanto a los valores de /i para la mayora de los niveles &+D% pero los valores de /i fueron
significativamente m-s elevados (ue los de las ho)as control en todos los niveles de &+D &
W1%117$. Las ho)as infectadas con roya grado ; y 2 o#tuvieron valores de /i 0: a ;2< y ;8 a 2F<
mayores (ue las ho)as de control cuando los valores de &+D se mantuvieron entre 311 y 7:11
mmolI m0 s 9ig. 2,$. ,urante la medicin de la respuesta de &n a los valores de &+D% ni la
temperatura de las ho)as ni los valores de J&, difirieron entre los tratamientos datos no
mostrados$. /uando los valores de &+D disminuyeron de 7.:11 a 1 mmolI m0 s% la temperatura de
la ho)a se increment ligeramente desde ;7%3 hasta ;0%1 L / y el valor de J&, de 0%7H a 0%;2 '&a%
en promedio entre los tratamientos.
Respuesta &otosinttica a C'(
El valor de &n en las ho)as de la caa de azcar se increment r-pidamente a medida (ue la
concentracin de /O0 aumenta#a% comportamiento #ien descripto por una regresin cuadr-tica
9ig. 3$. ,e manera similar a la relacin de &n con la intensidad de la luz% la roya redu)o
significativamente los valores de &n para todas las concentraciones de /O0. +l aumentar la
concentracin de /O0 en la c-mara de la ho)a de 21 a F11 mmlIl% los valores de &n en las ho)as sin
infectar se incrementaron de 2%0 a 2:%1 mmmolIm0 s pero slo lo hicieron de 7%: a 0F%3 en las ho)as
infectadas con una calificacin de ; y de 1%3 a 78%; para las (ue o#tuvieron una calificacin de la
enfermedad de 2 9ig. 3$. +l promediar las concentraciones de /O0% las ho)as con una enfermedad
de ; y 2 redu)eron el valor de &n en un 37 y un 80< respecto a las ho)as de control.
Respiracin oscura) *C$) M+, y CF-
La roya increment significativamente la tasa de Dd pero redu)o el 6UV fotosint*tico y el /9E
ta#la 0$. Las ho)as con enfermedades de ; y 2 puntos o#tuvieron tasas de Dd 7; y 30< mayores
(ue las ho)as de control. El punto de compensacin fotosint*tica de la luz L/&$ de las ho)as con
una enfermedad grado ; no difiri significativamente del control. &ara una enfermedad grado 2%
L/& se increment un 77H< &W1.17$ respecto al control. Los ndices 6UV y /9E disminuyeron
significativamente conforme se increment la gravedad de la enfermedad. /omparados con el
control% 6UV y /9E disminuyeron un 7H y un 37< para un grado ; de la enfermedad y un 0H y
81< para un grado 2.
Discusin
!e ha mostrado por primera vez (ue los componentes fotosint*ticos de las ho)as de la caa de
azcar responden a la infeccin con roya. Los resultados de este estudio indican (ue los valores de
&n% Cs y Tr% medidos en las porciones infectadas de las ho)as inoculadas% disminuyen linealmente% a
diferencia de /i (ue aumenta conforme aumenta el grado de la enfermedad. La disminucin en el
valor de &n causado por la roya est- de acuerdo con tra#a)os previos en ce#ada "ordeum vulgare$
infectada con roya 7$% puerro ;F$% trigo 8% 27$% arroz F$% fri)oles 02$ y so)a Clycine ma.$ 00$. +
pesar de (ue las relaciones entre el grado de enfermedad y los valores del ndice !&+,% &n% Cs% Tr y
/i medidos en las porciones infectadas de las ho)as puede descri#irse utilizando modelos lineales% la
sensi#ilidad difiere sustancialmente entre estas varia#les fisiolgicas% siendo el ndice !&+, y &n
los m-s sensi#les a la roya. El incremento de /i de#ido a la accin de la roya sugiere (ue #a)os
valores de &n en las regiones infectadas pueden asociarse con factores no estom-ticos como un
menor contenido de clorofila 22% 2:$ y actividades de enzimas fotosint*ticas ;F% 22$. Est- #ien
esta#lecido (ue la fotosntesis es sensi#le a los valores de J&, 70$ o al estr*s hdrico 7F% 23$% y
(ue el cierre no homog*neo de los estomas inducido por el estr*s hdrico puede ser causa de la
inhi#icin no estom-tica de la fotosntesis 70% 7F$. El estr*s hdrico no fue un factor estudiado en
este tra#a)o% por(ue todas las plantas fueron regadas antes de hacer las mediciones y tanto J&,
como la temperatura de las ho)as fueron similares entre los tratamientos y no se modificaron
sustancialmente a lo largo del e.perimento.
Las tasas de actividad fotosint*tica medidas en las ho)as sin roya pero (ue fueron inoculadas o en
las regiones verdes de las ho)as con roya% varan significativamente en otros cultivos. Pnfecciones
con hongos reducen la eficiencia de la fotosntesis en las porciones verdes del as ho)as del arroz F$%
fri)ol ;$% uva 08$% y trigo 8% ;3$5 pero el valor de &n medido en el te)ido verde de las ho)as
infectadas en el puerro no difieren de los controles ;F$. En contraste% la fotosntesis total de las
ho)as de la ce#ada infectadas con la roya &uccina hordei se incrementa dentro de las -reas invadidas
por el hongo% en comparacin al control ;H$. La tasa neta de fotosntesis de las ho)as verdes en la
parte superior de la #veda de plantas de fri)oles es tam#i*n significativamente superior (ue la de
los controles 0:$. Las diferentes respuestas en los valores de &n a las infecciones por roya en esos
estudios se de#i pro#a#lemente a los patgenos de la roya% las especies hospedadoras% la gravedad
de la enfermedad% la edad de la planta yIo las condiciones e.perimentales. En nuestro estudio% el
valor de &n medido en el te)ido verde de ho)as TJ, de plantas inoculadas no difiri de los controles
no inoculados en los genotipos de caa utilizados% indicando (ue no hay un efecto sistem-tico de
una pe(uea porcin infectada con roya so#re el valor de &n en las ho)as no infectadas de plantas
inoculadas Ta#la 7$. +s mismo% al medir el valor de &n so#re las porciones inferiores o superiores
de ho)as infectadas% en las cuales no se o#serv sntomas de la enfermedad% no hu#o correlacin
entre &n el grado de la enfermedad ver fig. ;$. La ausencia de correlacin entre el grado de la
enfermedad y el valor de &n en la parte superiorIinferior de las ho)as infectadas de la caa es
consistente con lo reportado para el puerro ;F$. Euestros resultados no avalan la hiptesis (ue la
infeccin por roya reduce el valor de &n en las porciones verdes de las ho)as infectadas. Uuiz-s la
razn de esto sea (ue solamente pe(ueas porciones de las ho)as est*n realmente infectadas luego
de la inoculacin.
La fotosntesis de las ho)as est- ntimamente relacionada al valor de &+D hasta (ue &n alcance su
tasa m-.ima. El valor de &+D vara constantemente a lo largo de los das (ue dura el proceso de
crecimiento de la planta y tam#i*n de un momento a otro en un mismo da. Este es el primer reporte
acerca del efecto de la roya en la actividad fotosint*tica de plantas /2 a diferentes intesidades de la
luz. &ara determinar si la roya afecta consistentemente el valor de &n en la caa en un amplio rango
de valores &+D% se tomaron medidas de los valores &n en funcin de los valores &+D para las ho)as
infectadas y de control en plantas con grados de roya de ; y 2. El valor de &n de las ho)as con roya
disminuy m-s para valores #a)os de &+D 23< para una enfermedad grado ; y H0< para la 2$ (ue
para valores elevados ;; y 38< respectivamente$ respecto al control. Este hallazgo contradice
reportes so#re el comportamiento de plantas /; como el arroz F$ o la so)a 00$. El valor de &n en
las ho)as del arroz se ve afectado mayormente cuando hay mucha luz (ue cuando hay poca F$. La
reduccin en el valor de &n en las ho)as de la so)a infectadas con roya de la so)a &ha'opsora
pachyrhizi$ es similar para un amplio rango de valores &+D 00$.
,atos acerca de la curva de respuesta del valor de &n en funcin de la luz% confirman (ue la roya
tiene un efecto menor en Cs y Tr (ue en &n% para la mayora de los niveles de &+D 9ig. 2$ y
tam#i*n (ue los factores no estom-ticos% como el contenido de clorofila yIo la actividad de encimas
relevantes ;F% 22% 2:$ contri#uyen a la reduccin en el valor de &n en las porciones de las ho)as
infectadas con roya. La conduccin estom-tica se utiliz previamente como un indicador del estr*s
hdrico de las plantas 7:% 07% 23$. Los resultados de la relacin entre Cs y el valor de &+D
indicaron (ue (ue Cs es sensi#le a la cantidad de luz% an en condiciones de #uena hidratacin. +l
medir Cs% tanto para la deteccin del genotipo como para la comparacin de los tratamientos% las
condiciones meteorolgicas% especialmente las relacionadas con la intensidad de la luz% de#en
considerarse.
El incremento del valor de Dd en las ho)as de la caa infectadas con roya concuerda con los reportes
so#re otros cultivos F% 8% 02% ;F% ;H$. La tasa de respiracin oscura de las ho)as del arroz se ve
incrementada con el aumento en el grado de la enfermedad F$% y la tasa de Dd dentro de las
pstulas de roya parda en las ho)as del fri)ol es cuatro veces mayor (ue los valores medidos en las
plantas control ;H$. Las ho)as del puerro infectadas con roya aumentan la tasa de Dd en las pstulas
seis veces en relacin con el control 07 das despu*s de la inoculacin ;F$. +un(ue el incremento
en la tasa de Dd o#tenido en este estudio no fue tan grande como los mostrados en el fri)ol ;H$ y el
puerro ;F$% se detectaron diferencias significativas en la tasa de Dd entre las porciones infectadas
de las ho)as y las de control. La tasa de Dd contri#uye significativamente al intercam#io total de
/O0 en las ho)as iluminadas 02$. El incremento en el valor de Dd fue parcialmente responsa#le de
la reduccin o#servada en los valores de &n de las ho)as infectadas con roya% de#ido a (ue el valor
&n es un producto de la fotosntesis general entrada de /O0$ y la respiracin oscura salida de
/O0$. El incremento del valor Dd en las ho)as de la caa infectadas por roya (uiz-s de#a asociarse
mayoritariamente a las demandas energ*ticas de la planta originadas en su autodefensa o respuesta a
la enfermedad y a la produccin de las urediniospores durante la fase de esporulacin. La
respiracin del hongo de#e contri#uir tam#i*n al incremento de Dd en las ho)as con roya% pero
nuestro instrumental LPK/OD F211$ no nos permiti separar esta respiracin de la de la ho)a.
!umado a esto% la roya redu)o significativamente el valor 6UV de la asimilacin de /O0 y el valor
/9E en las porciones infectadas Ta#la 0$% resultando un valor menor de &n para las mismas
condiciones am#ientales en comparacin con las plantas sin roya. La reduccin en el -rea verde de
las ho)as y en el valor de &n de#ido a la roya resultan en una p*rdida en el rendimiento de la caa
71% 03% ;;$.
La identificacin y la determinacin cuantitativa de los efectos de una enfermedad especfica en la
fisiologa de ho)as individuales% son los primeros pasos para una comprensin m-s amplia de los
daos (ue origina la enfermedad y las p*rdidas en el rendimiento de los cultivos 3$. Este estudio
mostr los procesos fisiolgicos (ue conducen a una p*rdida en el rendimiento de la caa de azcar
de#ido a la roya% midiendo los componentes de la fotosntesis en las ho)as. Euestros resultados
contri#uyen al conocimiento de la etiologa de la roya y a las #ases fisiolgicas (ue generan la
p*rdida de rendimiento de la caa infectada con esta enfermedad. La relacin cuantitativa entre la
gravedad de la enfermedad de la planta y los componentes fotosint*ticos podra utilizarse para
modelar el impacto de la roya en la fotosntesis de las ho)as :$ y el crecimiento de las plantas de
caa de azcar.