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Prctica 6: recuento de plaquetas

PRACTICA: 6
RECUENTO DE PLAQUETAS
Objetivo:
Realizar correctamente el conteo de plaquetas e interpretar correctamente los clculos de
la suma total de plaquetas o tambin llamadas trombocitos.
Fundamento:
Las plaquetas constituyen pequeos segmentos celulares anucleados desarrollados con el
fin de adherirse a los vasos sanguineos daados, agregarse unas con otras y facilitar la
generacion de trombina. Estas acciones contribuyen a la hemostacia durante la formacion
de un tapn plaquetario que repara el dao endotelial.
Las plaquetas tambin derivan de una celula pluripotencial de la mdula sea y circulan en
la sangre periferica en el numero relativamente consta de 150 a 400 x 103/l, con una
amplia variabilidad interindividual. La llamada masa total de plaquetas incluye a las
plaquetas circulantes y a aquellas que forman parte del pool esplenico (aproximadamente
un tercio del total) entre la circulacin y el pool esplnico, las plaquetas se intercambian
consatantemente.
Las plaquetas no son ms que pequeos fragmentos celulares, por lo tanto carecen de
ncleo. Su diametro varia promedio varia de de 1,5 a 3 mcm, cerca de un tercio a un
cuarto del tamao del eritrocito.
Las plaquetas o trombocitos constituyen el elemento forme ms pequeo de la sangre; su
evaluacin en el hemograma manual usualmente slo se realiza en los extendidos
coloreados. En el electrnico, su estudio aporta, adems del valor numrico, otros
parmetros de importancia diagnstica, tales como promedio del volumen plaquetario e
histograma plaquetario. A esta valoracin la llamamos plaquetograma.
Existen dos mtodos para el conteo de plaquetas: manual y electrnico.
Algunos tendrn recuentos de plaquetas estadsticamente anormales sin tener ninguna
anormalidad demostrable. Sin embargo, si el recuento es muy alto o muy bajo la probabilidad
de que una anormalidad este presente es ms alta.
Tanto la trombocitopenia como la trombocitosis pueden manifestarse como problemas de
coagulacin. En general, los recuentos bajos de plaquetas incrementan el riesgo de sangrado;
sin embargo existen excepciones. Por ejemplo la trombocitopenia inmune inducida por
heparina. En la trombocitosis se puede producir trombosis, sin embargo esto sucede
principalmente cuando el recuento elevado es debido a desordenes mieloproliferativos.
Las plaquetas son destruidas por fagocitosis en el bazo y por las clulas de Kupffer en el
hgado. Una reserva de plaquetas es almacenada en el bazo y son liberadas cuando se
necesitan por medio de contraccin esplnica mediada por el sistema nervioso simptico.
Material y Equipo:
Pipeta de Thoma para glbulos rojos.
Cmara de Neubauer con cubrehematmetro (Hemocitmetro).
Agitador para Pipeta de Thoma.
Cajas de Petri.
Microscopio.
Papel filtro
Material para venopuncin.
Reactivos:
Sangre venosa con EDTA.
Tcnica:
1.- Obtener 10 ml de sangre venosa, extrada por el procedimiento habitual, utilizando
como anticoagulante EDTA.
2.- Se agita la sangre colocada en un tubo de ensaye y se procede a la cuenta de plaquetas
de la siguiente manera:
3.- Llevar la sangre hasta la marca 1.0 de una pipeta de Thoma para glbulos rojos,
aforando con la solucin diluyente de plaquetas hasta la marca de 101 (Dilucin 1: 100).
4.- Colocar la pipeta en el agitador y mezclar durante 1 minuto.
5.- Colocar la Cmara de Neubauer sobre una superficie horizontal y poner el
cubrehematmetro sobre las mesetas.
6.- Descartar las primeras 4 gotas de la pipeta de Thoma. Con la quinta gota cargar la
Cmara, depositndola entre la meseta y el cubrehematmetro y dejarla difundir por
capilaridad, teniendo cuidado de que no se formen burbujas o se derrame el lquido hacia
los surcos.
7.- Colocar la Cmara ya montada en el interior de una caja de Petri, con papel filtro y
absorbente humedecido en agua para evitar la evaporacin, dejar en reposo de 10 a 15
minutos.
8.- Observar al microscopio contando en la cuadrcula central (para glbulos rojos) las
plaquetas que aparecen mucho ms pequeas que los hemates, redondas, alargadas u
ovales, altamente refringentes.
9.- Realiza los clculos siguientes para obtener la cantidad de plaquetas por mm
3
.
10.- El cuadro central de la cuadricula mide 1.0 mm por lado y est dividido en 16
cuadritos ms pequeos, de tal manera que el nmero total de stos ltimos es de 400,
mismos en los que se lleva a cabo el recuento de plaquetas.
Resultados:
Total: 428
Clculos: 428 X 100 X 10 = 428 000 plaquetas/ mm3.
Rengo: normal
Clculos:
No. de plaquetas / mm
3
= No. de Plaquetas contadas X Dilucin X 10
Dilucin: 1:100 = 100
Este factor corresponde, para obtener los resultados por mm
3
ya que el volumen de la
Cmara es de 0.1 mm
3
.
Ejemplo:
No. de plaquetas = 375 X 100 X 10 = 375 000 plaquetas / mm
3
.
Valores normales:
Hombres 150 000 450 000
Mujeres 150 000 450 000
Observaciones:
Para hacer el recuento de plaquetas se utilizaron los dos diluyentes que fue el de hayem y
el de turk de hecho fue ms fcil identificarlas con el de turk ya que estas se coloraron un
poco y en el de hayem estas se tena que buscar bien ya que no se podan encontrar
fcilmente, este recuento es muy importante ya que el resultado de este depende a que
factor es el causante de una enfermedad ya que a continuacin hablaremos ms
detalladamente del valor de estos. (si esta elevado o esta bajo).
Las plaquetas se cuentan ms fcilmente utilizando microscopio de contraste de fase,
pero si el microscopio de luz se adeca correctamente y el conteo se hace con un estricto
control de calidad el resultado ser igualmente confiable. Especial atencin debe tenerse
con las soluciones diluyentes.
Estas no deben estar contaminadas, pues tanto las partculas como las bacterias pueden
similares plaquetas. Los lquidos diluentes se deben mantener refrigerados y filtrar antes
de su uso. La limpieza de la cmara de Neubauer y de las pipetas es importante en este
procedimiento,
Si se observan agregados en el recuento, el procedimiento debe repetirse. El uso de EDTA
como anticoagulante ayuda a disminuir la agregacin plaquetaria. El rango de error para el
recuento de plaquetas en el microscopio de luz es de 16 25%. No se debe informar el
recuento de plaquetas sin confrontarlo con el extendido de sangre perifrica, coloreado
con Wright.
Conclusiones:
Los recuentos de plaquetas en general, no son corregidos con transfusin a menos que el
paciente est sangrando o el recuento haya cado por debajo 5 x 10
9
/L. La transfusin esta
contraindicada en la prpura trombocitopnica idioptica (PTI), puesto que estimula la
coagulopata. En los pacientes sometidos a ciruga, niveles inferiores a 50 x 10
9
/L estn
asociados a sangrado quirrgico anormal, y procedimientos anestsicos regionales como
la anestesia epidural son evitados para niveles inferiores a 80-100 x 10
9
/L. El recuento
normal de plaquetas no es garanta de funcin adecuada. En algunos estados, las
plaquetas, siendo normales en nmero, son disfuncionales.
El hemograma tambin realiza un recuento de las plaquetas. Las plaquetas son pequeas
clulas que se agrupan entre s en las zonas de los vasos sanguneos que han sufrido un
dao. Son la base de la coagulacin de la sangre, al ayudar a detener las hemorragias ya
que son las primeras en acudir ante una lesin, en donde se agregan, adhieren y forman el
tapn primario.
Trombopenia (disminucin de plaquetas)
Enfermedades autoinmunitarias (el organismo produce anticuerpos contra sus
propias plaquetas)
Aplasia medular
Radioterapia y quimioterapia por cncer
Leucemia aguda
Coagulacin intravascular diseminada
Anemia hemoltica microangioptica
Hiperesplenismo
Prpura trombocitopnica idioptica
Prtesis de vlvula coronaria
Transfusin de sangre
Choque anafilctico
Algunas infecciones vricas
Algunos frmacos
Desordenes que provocan disfuncin o recuento reducido:
Sndrome HELLP
Sndrome urmico hemoltico
Quimioterapia
Dengue
Deficiencia del almacenamiento en grnulos Alfa-Delta; es un desorden hemorrgico
hereditario disorder.
Trombocitosis (aumento de plaquetas)
Anemia por dficit de hierro
Traumatismos
Tumores
Trombocitosis esencial
Policitemia vera
Leucemia mieloide crnica
Tras esplenectoma
Enfermedad de Kawasaki
Referencias:
http://www.americalab.net/acerca-de-las-pruebas/recuento-de-plaquetas.html
http://es.wikipedia.org/wiki/Plaqueta
Hematologa: fundamentos y aplicaciones clnicas
Escrito por Bernadette F. Rodak
Pag.696-703
Hematologa: Medicina de laboratorio
Escrito por J Miale
Pag.1035-1036