I.

INTRODUCCION
Uno de los pioneros en la espectroscopia fue Isaac Newton, quien a
principios de 1600 observ y estudi el comportamiento de la luz solar cuando
esta atraviesa por un prisma. En 1831, J.F. Herschel demostr, que las sales
de diferentes metales producen distintas coloraciones a la flama cuando las
sales disueltas o en forma directa son puestas en contacto con sta. As por
ejemplo la sales de calcio dan a la flama un color naranja, las de sodio un color
amarillo, las de potasio un color violeta, las de cobre un verde azulado, las de
estroncio un color verde amarillo, etc. Estas observaciones fueron corroboradas
posteriormente por otros investigadores sugiriendo que de esta forma podra
identificarse el metal formador de la sal en un compuesto qumico especfico.
Kirschoff y Bunsen en 1859 ampliaron el conocimiento de la natura-
leza de este fenmeno, cuando la luz colorida producida por el metal en la fla-
ma la hicieron incidir en un depsito ptico que separa la radiacin emitida por
el metal, de la luz solar. En ste instrumento que fue llamado espectroscopio
(espectroscopio= observacin del espectro) se observa que cada metal que
emite radiacin de diferente color, presenta lneas que aparecen en diferentes
posiciones en la pantalla o campo de observacin, y esto es independiente-
mente de las condiciones en que se realiza el experimento as como de la natu-
raleza de la sal metlica y nicamente depende del metal.
Para realizar la determinacin de metales (Ca, Mg, Na, K, Zn, Cu, Ni,
Fe, Cr, Co, Ag, Mn, Pb, etc) por Absorcin Atmica de Llama, es necesario te-
ner los analitos en solucin, y libres de posibles interferentes, tales como mate-
ria orgnica, o particulado. Para lograr estas condiciones, y con el objeto de
reducir la interferencia por materia orgnica y liberar los metales de la matriz
mantenindolos en solucin, es necesario el tratamiento previo de las mues-
tras, y se debe realizar el procedimiento de preparacin, digestin y preserva-
cin. Estos tratamientos se realizan segn el tipo de matriz. Generalmente las
muestras provienen de diversos orgenes siendo las mas frecuentes las mues-
tras de aguas, efluentes, alimentos suelos, etc; como todas las matrices varan,
son diferentes en su composicin intrnseca y en su respuesta al tratamiento
previo de adecuacin a la medicin por llama.
El presente trabajo es parte del instructivo que utilizamos en nuestro
laboratorio para la preparacin de las muestras en el rea de servicios de an-
lisis de metales. Tiene como objeto definir las acciones y los responsables a los
efectos de preparar y preservar las muestras para el anlisis de los metales por
Absorcin Atmica, siendo el Coordinador del rea y los analistas quienes ve-
lan por la correcta aplicacin de los mtodos y los lineamientos tcnicos que
describe el mismo. Este instructivo, para aquellas muestras que lo requieran,
tambin establece los diferentes mtodos de digestin, su documentacin y los
registros relacionados.

II. MARCO TEORICO

2.1. Espectrometra de absorcin atmica
Para obtener espectros pticos atmicos y espectros de masa at-
micos, los constituyentes de una muestra se deben convertir en tomos o iones
gaseosos que puedan ser determinados por mediciones espectrales de emi-
sin, absorcin, fluorescencia o masa. La precisin y la exactitud de los mto-
dos atmicos dependen en gran medida del proceso de atomizacin y del m-
todo para introducir la muestra en la regin de atomizacin.
La introduccin de la muestra ha sido llamada el taln de Aquiles de
la espectroscopia atmica porque en muchos casos este paso limita la exacti-
tud, precisin y los lmites de deteccin de las mediciones espectromtricas
atmicas. El objetivo principal del sistema de introduccin de la muestra en la
espectroscopia atmica es transferir una porcin representativa y reproducible
de una muestra al atomizador.
CUADRO 1. Tipos de atomizadores usados para espectroscopa

En el caso de las primeras cinco fuentes de atomizacin que se en-
listan en la tabla, las muestras son introducidas por lo general en forma de so-
luciones acuosas (en ocasiones se usan soluciones no acuosas) o, con menos
frecuencia, como lechadas (una lechada es una suspensin de un polvo fina-
mente dividido en un lquido). Sin embargo, para muestras que son difciles de
disolver, se han usado varios mtodos para introducirlas en el atomizador en
forma de slidos o polvos finamente dispersos. Por lo general, estas ltimas
tcnicas de introduccin de muestras son menos reproducibles y estn ms
sujetas a varios errores, como resultado, no se usan tanto como las tcnicas de
solucin acuosa.
Los dispositivos de atomizacin se clasifican en dos clases: atomizadores con-
tinuos y atomizadores discretos. Con los primeros como plasmas y llamas, las
muestras se introducen de manera constante. Con los atomizadores discretos,
las muestras se introducen de manera discontinua con un dispositivo como una
jeringa o un tomador de muestras automtico. El atomizador discreto ms co-
mn es el electrotrmico.
El mtodo de introduccin de muestra ms comn es la nebulizacin
directa, en este caso la muestra se introduce como una fina dispersin de pe-
queas gotas, llamada aerosol. La introduccin continua de muestra en una
flama o plasma produce una poblacin de tomos, molculas y iones en estado
estable.
En los atomizadores discretos la muestra se introduce transfiriendo
una alcuota de la muestra al atomizador. La nube de vapor que producen los
atomizadores electrotrmicos es transitoria debido a la cantidad limitada de
muestra disponible. Las muestras slidas pueden ser introducidas en plasmas
vaporizndolas con una chispa elctrica o con un haz lser.
En la siguiente tabla se enlistan los mtodos comunes de introduc-
cin de muestra para espectroscopia atmica y el tipo de muestras al cual es
aplicable cada mtodo.
TABLA 1. Mtodos de introduccin de muestra en espectroscopa atmico

2.2. Espectroscopia de tomos
La espectroscopa atmica se puede dividir en tres clases:
1. Espectroscopa de Emisin Atmica (EEA)
2. Espectroscopa de Absorcin Atmica (EAA)
3. Espectroscopa de Fluorescencia Atmica (EFA)
2.2.1. Espectroscopa de emisin en flama.- La espectroscopia de
emisin en tomos se basa en medir la intensidad de una lnea de emisin es-
pecfica del elemento que se desea determinar. Cuanto mayor sea la intensi-
dad de sta lnea mayor es su concentracin.

En los instrumentos de EEA, la flama atomiza y excita los compo-
nentes de la muestras.
Estos emiten radiacin electromagntica de diferentes longitudes de
onda que son separadas en el monocromador y la lnea de inters llega al de-
tector, al amplificador y finalmente al sistema de lectura.
Las relativamente bajas temperaturas de la flama, limitan la aplica-
cin prctica de la EEA en flama a los elementos ms fciles de excitar, o en
bajos potenciales de ionizacin, como son los elementos alcalinos (
Li,Na,K,Rb,Cs ) y los alcalinotrreos ( Ca,Mg,Sr, etc. ).
2.2.2. Espectroscopia de absorcin atmica en flama: La espec-
troscopia de absorcin atmica (EAA), tiene como fundamento la absorcin de
radiacin de una longitud de onda determinada. Esta radiacin es absorbida
selectivamente por tomos que tengan niveles energticos cuya diferencia en
energa corresponda en valor a la energa de los fotones incidentes. La canti-
dad de fotones absorbidos, est determinada por la ley de Beer, que relaciona
sta prdida de poder radiante, con la concentracin de la especie absorbente
y con el espesor de la celda o recipiente que contiene los tomos absorbentes.
Los componentes instrumentales de un equipo de espectrofotome-
tra de absorcin atmica son los similares a los de un fotmetro o espectrofo-
tmetro de flama, excepto que en EAA se requiere de una fuente de radiacin
necesaria para excitar los tomos del analito.




2.2.2.1. Componentes de un espectrofotmetro de absorcin
atmica
1) Una fuente de radiacin que emita una lnea especfica correspondiente a la
necesaria para efectuar una transicin en los tomos del elemento analizado.
2) Un nebulizador, que por aspiracin de la muestra lquida, forme pequeas
gotas para una atomizacin ms eficiente.
3) Un Quemador, en el cual por efecto de la temperatura alcanzada en la com-
bustin y por la reaccin de combustin misma, se favorezca la formacin de
tomos a partir de los componentes en solucin.
4) Un sistema ptico que separe la radiacin de longitud de onda de inters, de
todas las dems radiaciones que entran ha dicho sistema.
5) Un detector o transductor, que sea capaz de transformar, en relacin propor-
cional, las seales de intensidad de radiacin electromagnetica, en seales
elctricas o de intensidad de corriente.
6) Un amplificador o sistema electrnico, que como su nombre lo indica amplifi-
ca la seal elctrica producida, para que en el siguiente paso pueda ser proce-
sada con circuitos y sistemas electrnicos comunes.
7) Por ltimo, se requiere de un sistema de lectura en el cual la seal de inten-
sidad de corriente, sea convertida a una seal que el operario pueda interpretar
(ejemplo: transmitancia o absorbancia). Este sistema de lectura, puede ser una
escala de aguja, una escala de dgitos, un graficador, una serie de datos que
pueden ser procesados a su vez por una computadora, etc.
La EAA en flama es a la fecha la tcnica ms ampliamente utilizada
(aunque cada vez ms competida por la EEP) para determinar elementos me-
tlicos y metaloides. Esta tcnica tienen grandes convenientes y es de costo
relativamente bajo, pudindose aplicar tal tcnica a una gran variedad de
muestras.
Acoplado un instrumento de Absorcin Atmica a un horno de Grafi-
to y a un generador de hidruros se alcanzan lmites de deteccin hasta de ppb,
lo cual lo hace indispensable en reas como son: estudios de contaminacin
ambiental, anlisis de alimentos, anlisis de aguas potables y residuales, diag-
nstico clnico, etc.
2.2.2.2. Descripcin de la tcnica de eaa.- La tcnica de absorcin
atmica en flama en una forma concisa consta de lo siguiente: la muestra en
forma lquida es aspirada a travs de un tubo capilar y conducida a un nebuli-
zador donde sta se desintegra y forma un roco o pequeas gotas de lquido.
Las gotas formadas son conducidas a una flama, donde se produce
una serie de eventos que originan la formacin de tomos. Estos tomos ab-
sorben cualitativamente la radiacin emitida por la lmpara y la cantidad de
radiacin absorbida est en funcin de su concentracin.
La seal de la lmpara una vez que pasa por la flama llega a un mo-
nocromador, que tiene como finalidad el discriminar todas las seales que
acompaan la lnea de inters.
Esta seal de radiacin electromagntica llega a un detector o transductor y
pasa a un amplificador y por ltimo a un sistema de lectura.
2.2.2.3. Fuentes de radiacin
Una vez que han sido formados los tomos, la flama tiene la misma
funcin que una celda en espectroscopia visible o Ultravioleta. Los tomos de
la flama absorben radiacin de acuerdo a la Ley de Beer si esta corresponde a
la diferencia en energa entre los niveles energticos de algunos de los tomos
presentes, del contrario, la radiacin pasa por la flama sin disminuir la potencia
de haz como efecto de los tomos contenidos en ella.
El desarrollo de un equipo comercial de absorcin atmica fue hasta
principio de los cincuentas, ya que aunque su potencial se vislumbra desde
fines del siglo pasado, no se saba an como tener una fuente de radiacin pa-
ra este tipo de espectroscopia.
2.2.2.4. Niveles cuanticos en atomos.- Como ya ha sido mencio-
nado con anterioridad, los tomos de los diferentes elementos tienen lneas
bien definidas que corresponden a transiciones entre diferentes niveles atmi-
cos.
Estas transiciones tienen anchos espectrales de dcimas o hasta
centsimas de nanmetro.
Cada elemento va a responder a la excitacin de una radiacin de
longitud de onda muy especfica ya que solo este elemento absorbe o emite tal
tipo de radiacin, porque esta corresponde a la diferencia en energa entre dos
niveles particulares de ese tomo.
La idea de Alan Walsh, el creador de la Espectroscopia de Absor-
cin Atmica fue la siguiente: los tomos absorben y emiten radiacin de exac-
tamente la misma frecuencia o longitud de onda, ya que absorben radiacin al
pasar del estado basal a un estado excitado y tericamente emiten la misma
frecuencia de radiacin en el proceso inverso; por lo tanto si se tiene una fuen-
te de excitacin en donde el elemento excitado es el mismo que se va a anali-
zar, la radiacin emitida va a ser captada nicamente por el elemento que es
idntico al de la fuente luminosa. Por ejemplo: si se desea cuantificar Zn en
una flama, se hace irradiar sta con radiacin emitida por tomos de Zn; sta
va a ser absorbida nicamente por los tomos de Zn que se encuentran en la
flama y no por lo tomos de cobre, cadmio, o nquel o algn otro elemento pre-
sente, ya que la radiacin que pasa por la flama corresponde nicamente a los
niveles energticos del Zn.
2.2.2.5. Lmpara de ctodo hueco.- Este tipo de fuente de radia-
cin es de las ampliamente difundidas en la EAA. Las lmparas de ctodo hue-
co (LCH o HCL [Hollow Cathode Lamp] consisten de un cilindro de vidrio sella-
do al vaco y con un gas inerte en su interior. Dentro de este mismo cilindro se
encuentran dos filamentos; uno de ellos es el ctodo y el otro el nodo. El no-
do generalmente es un alambre grueso hecho de nquel o tungsteno, el ctodo
es en forma de un cilindro hueco, en el interior del cual se, encuentra deposita-
do en forma de una capa el elemento metlico que se va a excitar.
Tambin regularmente y cuando esto es posible el ctodo est enteramente
hecho del metal a analizar.

El ctodo es la terminal negativa y el nodo es la positiva, cuando se aplica
una diferencia de potencial entre las dos terminales ocurre una serie de even-
tos que se muestra en la Figura 3 y que son descritos a continuacin:
















1. Por efecto del voltaje aplicado entre los dos electrodos ocurre una descarga
elctrica. Si el ctodo consiste de dos electrodos paralelos o de un cilindro
hueco, bajo circunstancias adecuadas la mayor parte de la descarga ocurre
dentro del ctodo.
2. Estas descargas elctricas aumentan la energa cintica y favorecen la ioni-
zacin de las molculas de gas inerte. Estas especies ionizadas requieren car-
ga positiva, por lo cual son atradas hacia el ctodo.
3. Al chocar los iones de gas inerte (Ar+ en este caso) con las paredes del c-
todo, son desprendidos tomos del metal de que est el ctodo o depositado
sobre la superficie del mismo.
4. Despus de desprenderse del ctodo, los tomos producidos son excitados
por choques moleculares con los iones y tomos de argn.
5. Los tomos excitados no pueden permanecer indefinidamente en un estado
de energa superior y procede el paso de emisin electromagntica.
A travs de esta serie de procesos se obtiene un haz de radiacin bien concen-
trado, ya que casi la totalidad de los eventos ocurren dentro del ctodo de la
lmpara. Tambin el resultado final es la obtencin de un espectro caractersti-
co del elemento del que est hecho el ctodo de la lmpara.
2.2.2.6. Lmparas individuales y de multielementos.- En el caso
de las lmparas de ctodo hueco, es posible tener lmpara individual de multi-
elementos. Cuando existe la seguridad de que no hay interferencias espectra-
les inter elementos y cuando las propiedades metalrgicas son adecuadas para
hacer la aleacin necesaria se pueden construir ctodos con ms de un ele-
mento metlico. De esta forma una lmpara puede servir para determinar uno,
dos, tres o hasta seis elementos. El costo de una lmpara de multi elementos,
es menor a la suma del costo de cada una de las diferentes lmparas indivi-
duales, desafortunadamente este tipo de lmparas tienen grandes inconvenien-
tes, entre ellos principalmente el que el haz de radiacin producido no tiene la
intensidad ni la pureza espectral que proporciona una lmpara individual.
Otra gran desventaja que tienen, es que an y cuando se emplee la
lmpara para determinar un solo elemento, los elementos concomitantes tam-
bin se estn gastando sin obtener provecho de ellos.
Para elegir entre una lmpara de ctodo hueco individual y una de
multielementos deben considerarse factores como: frecuencia de uso, grado de
exactitud requerida en los resultados, presupuesto de laboratorio, etc.
2.2.2.7. LMPARA DE DESCARGA SIN ELECTRODOS.- Las fuen-
tes de radiacin de este tipo tienen la misma finalidad que las lmparas de c-
todo hueco, solo que la forma de excitacin de los tomos emisores de radia-
cin es diferente.
La lmpara de descarga sin electrodos se construyen colocando una
pequea cantidad de sal del elemento metlico (generalmente un yoduro), o el
elemento metlico mismo si as es ms conveniente, en un recipiente de cuar-
zo, el cual previamente se ha sometido al vaco antes de sellarse. Posterior-
mente, esta ampolleta de cuarzo se coloca dentro de un cilindro de cermica el
cual est acoplado a un generador de radiofrecuencia.
Cuando la lmpara se enciende se forma un campo de microondas
el cual causa la volatilizacin y la excitacin de algunos tomos del elemento
depositado en la cpsula de cuarzo de la lmpara y as se forma el haz de ra-
diacin del elemento especfico a determinar. La Figura 4 es esquemtica de
una lmpara de este tipo.

.
2.3. Atomizacin de muestras
Los dos mtodos ms comunes de atomizacin de muestra que se
utilizan en espectrometra de absorcin atmica y espectrometra de fluores-
cencia atmica son la atomizacin de llama y la atomizacin electrotrmica.
Atomizacin de llama. En un atomizador de llama, una solucin de
la muestra se nebuliza mediante un flujo de oxidante gaseoso mezclado con un
combustible tambin gaseoso y se lleva hacia una llama donde ocurre la ato-
mizacin. En la llama ocurre un conjunto complejo de procesos interconecta-
dos. El primero es la desviacin, en la que el disolvente se evapora para pro-
ducir un aerosol molecular finamente dividido. Luego, ste se volatiliza para
formar molculas de gas. La disociacin de la mayor parte de dichas molculas
produce un gas atmico. Algunos de los tomos del gas se ionizan para formar
cationes y electrones. Una fraccin de las molculas, tomos e iones se excitan
tambin por el calor de la llama para producir espectros de emisin atmicos,
inicos y moleculares. Con tantos procesos complejos que ocurren, no es sor-
prendente que la atomizacin sea el paso ms decisivo en la espectroscopia
de llama y el nico que limita la precisin de tales mtodos.
Tipos de llamas. En la siguiente tabla se enlistan los combustibles y
oxidantes comunes en la espectroscopia de llama y el intervalo aproximado de
temperaturas que se logran con estas mezclas.
TABLA 2. Propiedades de las llamas.


Se observa que cuando el aire es el oxidante, se logran temperatu-
ras de 1700C a 2400C con varios combustibles. A estas temperaturas slo se
atomizan las muestras que se descomponen con facilidad, as que se debe
usar oxgeno u xido nitroso como oxidante para muestras ms refractarias.
Las velocidades de combustin que se enlistan en la cuarta columna son im-
portantes porque las llamas son estables slo en ciertos intervalos de flujos de
gas. Si el flujo de gas no excede la velocidad de combustin, la llama se pro-
paga de regreso hacia el quemador y produce un retroceso de la llama. Cuan-
do se incrementa el flujo, la llama sube hasta que alcanza un ponto arriba del
quemador donde la velocidad del flujo y la velocidad de combustin son igua-
les; es en esta regin donde la llama es estable. A velocidades ms altas, la
llama sube y alcanza con el tiempo un punto en el que se desprende del que-
mador y lo apaga. Con estos hechos en mente, es fcil ver por qu es tan im-
portante controlar el flujo de la mezcla combustible-oxidante, el cual depende
mucho de los tipos de combustible y oxidante que se utilicen.
Estructura de la llama. Las regiones importantes de la llama incluyen
la zona de combustin primaria, la regin inter zona y la zona de combustin
secundaria, las cuales dependen de la velocidad de flujo del gas. La zona de
combustin primaria en una llama de hidrocarburo es reconocible por la lumi-
niscencia azul que surge de la emisin de banda de C2, CH y otros radicales.
El equilibrio trmico no se alcanza por lo general en esta regin y por lo tanto,
rara vez se usa en la espectroscopia de llama. El rea inter zona, que es relati-
vamente estrecha en las llamas de hidrocarburo estequiomtricas, puede al-
canzar varios centmetros de altura en fuentes de acetileno-oxgeno o de aceti-
leno-xido nitroso ricas en combustible. Debido a que en la regin inter zona
predominan tomos libres, es la parte de la llama que ms se usa para la es-
pectroscopia. En la zona de reaccin secundaria los productos de ncleo in-
terno se convierten en xidos moleculares estables que son dispersados des-
pus hacia los alrededores. Un perfil de llama proporciona informacin til
acerca de los procesos que suceden en diferentes partes de una llama; es una
grfica de contorno que revela regiones que tienen valores similares para una
variable de inters. Algunas de las variables son: temperatura, composicin
qumica, absorbencia e intensidad radiante o fluorescencia. Debido a la forma-
cin de xidos diferentes metales pueden ser cuantificados con mayor o menor
sensibilidad en funcin de la zona que se muestra dentro de la llama del atomi-
zador. El Cr forma xidos muy estables por lo tanto es preferible muestrear en
la parte ms pequea de la llama. La plata no se oxida fcilmente por lo tanto
su absorbencia aumenta al subir en la altura de llama y nunca decae. Los ins-
trumentos ms complejos para la espectroscopa de llama estn equipados con
monocromadores que toman muestras de la radiacin desde una regin relati-
vamente pequea de la llama y, por lo tanto, para mejorar la seal de salida se
ajusta la llama respecto a la rendija de entrada.

2.4. Quemador de flujo laminar.

Los atomizadores de llama se usan para las espectroscopias
atmicas de absorcin, de fluorescencia y de emisin. El aerosol, forma-
do por el flujo de oxidante a travs de la muestra, se mezcla con com-
bustible y pasa por una serie de deflectores que eliminan todo excepto
las gotas de solucin ms finas. Los deflectores ocasionan que la mayor
parte de la muestra se rena en el fondo de la cmara de mezcla donde
se drena hacia un recipiente de desechos. El aerosol, el oxidante y el
combustible arden entonces en un quemador ranurado que proporciona
una llama de 5 a 10 cm de alto.

Los quemadores de flujo laminar producen una llama relativamen-
te esttica y una longitud de trayecto larga para llevar al mximo la ab-
sorcin. Estas propiedades tienden a incrementar la sensibilidad y re-
productibilidad en la espectrometra de absorcin atmica.
Reguladores de combustible y oxidante. Una variable importante que re-
quiere un control riguroso en la espectroscopia de llama es el flujo de
oxidante y combustible. Es deseable variar cada uno en un amplio inter-
valo de modo que se puedan determinar de manera experimental las
condiciones de atomizacin ptimas. El combustible y el oxidante se
suelen combinar en cantidades estequiomtricas.
Sin embargo, para la identificacin de metales que forman xidos esta-
bles es deseable una llama que contenga un exceso de combustible. De
ordinario, los flujos son controlados por medio de reguladores de presin
de doble diafragma seguidos de vlvulas de aguja en la carcasa del ins-
trumento.
Hasta la fecha, la atomizacin de llama es el ms reproducible de
todos los mtodos de introduccin de muestra lquida que han sido per-
feccionados para la espectrometria de absorcin y fluorescencia. Sin
embargo, la eficiencia de toma de muestras de otros mtodos de atomi-
zacin y, por lo tanto, su sensibilidad son notablemente mejores. Hay
dos razones principales de la menor eficiencia de muestreo de llama.
Primero, una gran porcin de la muestra fluye hacia el drenaje. Segun-
do, el tiempo de residencia de cada uno de los tomos en la trayectoria
ptica es breve (~10-4s).

III. REFERENCIAS BIBLIOGRAFIAS

- D. A. Skoog, F. J. Holler, S. R. Crouch, Principios de anlisis instrumenta
l, 6ta edicin, Cengage Learning, Mxico, 2008.

- NMX-AA-051-SFCI-2001. Anlisis de agua- Determinacin de metales
por absorcin atmica en aguas naturales, potables y residuales trata-
das- Mtodo de prueba.

- Sotelo, M.; Palomino, H. 1995. Niveles de acumulacin de metales pe-
sados en agua, suelo y productos agrcolas y la importancia de sus efec-
tos en la proliferacin de Allium cepa en el Valle de moche. Tesis para
Optar el Ttulo de ingeniero Ambiental. Universidad nacional Santiago
Antunes de Mayolo. Huaraz, Per. 84 pp.

- Southern Per Copper Corporation. 1986. La Ecologa y las operacio-
nes minero metalrgicas en Toquepala, Cuajone e Ilo. Southern Per
Co. Corporation. 30 pp.

- NMX-EC-17025-IMNC-2006: Requisitos generales para la competencia
de los laboratorios de ensayo y de calibracin