Fundamentos laboratoriais prof Liane Sales Silva

Noes de Biossegurana laboratorial

Conceito de biossegurana
A biossegurana umconjunto de medidas necessrias para a manipulao adequada de
agentes biolgicos, qumicos, genticos, fsicos (elementos radioativos, eletricidade,
equipamentos quentes ou de presso, instrumentos de corte ou pontiagudos, vidrarias) dentre
outros, para prevenir a ocorrncia de acidentes e conseqentemente reduzir os riscos
inerentes s atividades desenvolvidas, bem como proteger a comunidade e o ambiente e os
experimentos.
Equipamentos de proteo individual
So quaisquer meios ou dispositivos destinados a ser utilizados por uma pessoa contra
possveis riscos ameaadores da sua sade ou segurana durante o exerccio de uma
determinada atividade.
Tipos de EPIs utilizados no laboratrio clnico
Luvas: As luvas protegem de sujidade grosseira. Elas devem ser usadas em procedimentos
que envolvam sangue, fluidos corporais, secrees, excrees (exceto suor), membranas
mucosas, pele no ntegra e durante a manipulao de artigos contaminados. As luvas devem
ser trocadas aps contato com material biolgico, entre as tarefas e procedimentos num
mesmo paciente, pois podem conter uma alta concentrao de microrganismos. Remova as
luvas logo aps us-las, antes de tocar em artigos e superfcies sem material biolgico e antes
de atender outro paciente, evitando a disperso de microrganismos ou material biolgico
aderido nas luvas. Lave as mos imediatamente aps a retirada das luvas para evitar a
transferncia de microrganismos a outros pacientes e materiais, pois h repasse de germes
para as mos mesmo com o uso de luvas.
Luvas de procedimento: so de ltex, no estreis, protegem o manipulador
Luvas domsticas: so de borracha e indicadas para limpeza de materiais e de ambiente
Luvas estreis: so utilizadas para procedimentos invasivos e asspticos (evitar a
contaminao por microrganismos), protegem o operador e o paciente.
Mscaras: servem para proteger a mucosa do nariz e da boca contra respingos gerada por
espirro, fala ou tosse de pacientes ou durante a realizao de procedimentos laboratoriais. So
de uso nico, devem ser trocadas quando midas ou submetidas a respingos visveis.
culos: protegem a mucosa dos olhos contra respingos, aerossis e da irritao provocada
por substancias volteis (lcool, acetona, reagentes). So reutilizveis, feito de material
plstico
Gorro: utilizado para proteger as amostras de contaminao, para no cair fios de cabelo na
amostra, para impedir a impregnao de algum odor nos cabelos. Tambm so teis durante a
realizao de procedimentos nos quais so produzidos aerossis, projeo de partculas e
proteo dos pacientes durante procedimentos cirrgicos. So descartveis.
Protetor facial: utilizado no lugar dos culos e da mscara, protege toda a face. utilzado
em procedimentos onde h a produo de muitos aerossis e de partculas solidas, de fascas,
etc.
Avental ou jaleco: O avental (limpo, no estril) serve para proteger a pele e prevenir sujidade
na roupa durante procedimentos que tenham probabilidade de gerar respingos ou contato de
sangue, fluidos corporais, secrees ou excrees. O avental ser selecionado de acordo com
a atividade e quantidade de fluido encontrado (plstico ou tecido). O avental de plstico est
indicado para lavagem de materiais em reas de expurgo. O avental sujo ser removido aps o
descarte das luvas e as mos devem ser lavadas para evitar a transferncia de
microrganismos para outros pacientes ou ambiente.
Calados: fechados e impermeveis, para impedir a penetrao de sujidade ou de amostras
derramadas no cho, vidros quebrados, etc.
Equipamentos de proteo coletiva
So utilizados na proteo coletiva de trabalhadores expostos ao risco
Tipos de EPCs
Dispositivos de pipetagem Nunca usar a boca para pipetar, porque alm do risco de
aspirao, torna mais fcil a inalao de aerossis. Utilizar um dos vrios tipos de bulbos, pra
ou pipetadores.
Extintores de incndios: equipamento que combate o fogo colocado no corredor do
laboratrio.
Lava olhos: tem o objetivo de livrar os olhos de contaminantes
Chuveiro de segurana: so aqueles especificamente projetados para fornecer um fluxo de
gua abundante e de baixa presso, suficiente para remover do corpo humano qualquer tipo de
contaminante ou calor, sem causar agravamento de possveis leses.
Sada de emergncia: facilitar o acesso para fora do laboratrio no caso de incndios ou
acidente com gazes explosivos ou txicos.
Capelas biolgicas: Equipamento imprescindvel onde se manuseia produtos qumicos ou
particulados, amostras biolgicas que podem apresentar microorganismos infectantes. As
capelas ajudam a proteger o operador, a amostra e o meio ambiente, pois possuem filtros que
purificam o ar que lanado para o interior ou para fora do laboratrio.
Descartes para materiais perfurocortantes: devem ter paredes firmes e rgidas, geralmente
so feitos de papelo, com revestimento interno que no permita vazamento ou perfuraes.
Aps o uso, so recolhidos e devem ser incinerados para destruir os matriais contaminantes.
Cuidados com materiais perfuro-cortantes:
Os matrias perfurocortantes so seringas, agulhas, escalpes, ampolas, vidros de um modo
em geral ou, qualquer material pontiagudo ou que contenham fios de corte capazes de causar
perfuraes ou cortes.
Recomendaes especificas devem ser seguidas durante a realizao de procedimentos que
envolvam a manipulao de material perfurocortante.a) Mxima ateno durante a realizao
dos procedimentos;b) Jamais utilizar os dedos como anteparo durante a realizao de
procedimentos que envolvam materiais perfurocortantes;c) As agulhas no devem ser
reencapadas, entortadas, quebradas ou retiradas da seringa com as mos;d) No utilizar
agulhas para fixar papis;e) Todo material perfuro-cortante (agulhas, seringas, scalp, laminas
de bisturi, vidrarias, entre outros), mesmo que esterilizados, devem ser desprezados em
recipientes resistentes perfurao e com tampa;f) Os recipientes especficos para descarte
de materiais no devem ser preenchidos acima do limite de 2/3 de sua capacidade total e
devem ser colocados sempre prximos do local onde realizado o procedimento.

Figura 1 chuveiro de segurana e lava-olhos
As Boas Prticas de Laboratrio exigem que se respeitem as seguintes diretrizes bsicas ao
utilizar os laboratrios da rea da Sade:
Utilizar proteo apropriada para os olhos quando necessrio.
Usar outros equipamentos de proteo conforme for necessrio.
No usar cabelo solto, quando for longo.
Jamais pipetar com a boca solventes ou reagentes volteis, txicos ou que apresentem
qualquer risco para a segurana. Usar sempre um pipetador.
Evitar a exposio a gases, vapores e aerossis. Utilizar sempre uma capela ou fluxo para
manusear estes materiais.
Lavar as mos ao final dos procedimentos de laboratrio e remover todo o equipamento de
proteo incluindo luvas e aventais.
Nunca consumir alimentos e bebidas no laboratrio. A separao de alimentos e bebidas dos
locais contendo materiais txicos, de risco ou potencialmente contaminados pode minimizar os
riscos de ingesto acidental desses materiais. Consumir alimentos e bebidas apenas nas reas
designadas para esta finalidade.
No guardar alimentos e utenslios utilizados para a alimentao nos laboratrios onde se
manuseiam materiais txicos e perigosos.
No utilizar os fornos de micro-ondas ou as estufas dos laboratrios para aquecer alimentos.
A colocao ou retirada de lentes de contato, a aplicao de cosmticos ou escovar os dentes
no laboratrio pode transferir material de risco para os olhos ou boca. Estes procedimentos
devem ser realizados fora do laboratrio com as mos limpas.
Aventais e luvas utilizados no laboratrio que possam estar contaminados com materiais
txicos ou patognicos no devem ser utilizados nas reas de caf, salas de aula ou salas de
reunies.
Antes de sair do laboratrio, lavar sempre as mos para minimizar os riscos de contaminaes
pessoais e em outras reas.
No laboratrio sempre devem existir locais para a lavagem das mos com sabonete ou
detergente apropriado e toalhas de papel descartveis.
14.Limpeza da Bancada de Trabalho
a) Deve ser feita com lcool a 70% no incio e no trmino das atividades ou
sempre que houver necessidade;
b) Quando houver derramamento de material biolgico, limpar imediatamente
com soluo de hipoclorito a 2% em preparao diria.
Procedimentos para controle de microorganismos no laboratrio
Conceitos
Limpeza: Consiste na remoo da sujidade da superfcie de artigos e equipamentos, atravs
da ao mecnica utilizando gua e detergente, com posterior enxge e secagem. A grande
carga microbiana est concentrada na matria orgnica, que conseqentemente, ser
removida de uma superfcie durante a remoo da sujidade. A limpeza deve ser sempre
realizada como primeira etapa de desinfeco ou esterilizao, pois vai garantir a qualidade
destes processos. O material orgnico aderido abriga os micrbios. Ao realizarmos a limpeza
de artigos estamos expostos fluidos contaminados e produtos qumicos, sendo imprescindvel
a utilizao de equipamentos de proteo como culos, mscara cirrgica, avental plstico,
braadeiras plsticas e luvas de borracha.
1. Produtos utilizados para limpeza
Detergente liquido e neutro
Modo de uso em superfcies: aplicar puro em um pano mido ou escova, ou diludo em gua
(soluo detergente). Aplicar pano umedecido em gua para o enxge.
Desinfeco: o processo de destruio de microrganismos como bactrias na
formavegetativa (no esporulada), fungos, vrus e protozorios. Este processo no destri
esporos bacterianos.
Produtos utilizados:
Cloro e compostos clorados: o composto clorado de uso mais comum o hipoclorito de sdio.
Por ser voltil, sua troca indicada a cada 24 horas. A concentrao recomendada de 1%
em dez minutos de contato ou 0,5% com trinta minutos de contato para desinfeco de nvel
mdio.
Modo de uso: a soluo deve ser solicitada na concentrao indicada. Se for usado alvejante
comercial, considerar a concentrao de 2% e preparar a soluo com uma parte de alvejante
e igual parte de gua para obter 1% ou uma parte de alvejante para trs de gua obtendo
0,5%.
lcool 70%: fechar o frasco imediatamente aps o uso para evitar a volatizao.
Modo de uso:
Em imerso: colocar em recipiente plstico com tampa. Por ser voltil, sua troca indicada a
cada 24 horas. Seu tempo de contato mnimo de 10 minutos. Deixar escorrer e secar
espontaneamente dispensa o enxge. Indicado para artigos metlicos como pinas, estantes
de laminas, tesouras e materiais de odontologia. No indicado para materiais de borracha,
ltex, silicone e acrlico pela sua possibilidade de ressecar e opacificar estes materiais.
Em superfcies: aplic-lo diretamente com compressas, friccionando at sua evaporao
repetindo por mais duas vezes. A superfcie deve estar limpa e seca, pois inativado na
presena de matria orgnica. Indicado para equipamentos como refletores de luz, mesas
ginecolgicas, mobilirio de atendimento direto ao paciente.
Esterilizao por processos fsicos
A esterilizao por processos fsicos pode ser atravs de calor mido, calor seco ou radiao.
A esterilizao por radiao tem sido utilizada em nvel industrial, para artigos mdicos-
hospitalares. Ela permite uma esterilizao a baixa temperatura, mas um mtodo de alto
custo. Para materiais que resistam a altas temperaturas a esterilizao por calor o mtodo de
escolha, pois no forma produtos txicos, seguro e de baixo custo.
Esterilizao por Calor mido: o equipamento utilizado autoclave. o mtodo de 1
escolha tratando-se de esterilizao por calor. Esta preferncia se justifica por preservar a
estrutura dos instrumentos metlicos e de corte, por permitir a esterilizao de tecidos, vidros e
lquidos, desde que observados diferentes tempos de exposio e invlucros. O mecanismo de
ao biocida feito pela transferncia do calor latente do vapor para os artigos, e este calor
age coagulando protenas celulares e inativando os microrganismos. Os artigos
termossensveis no devem sofrer autoclavagem, pois a temperatura mnima do processo de
121 C, bem como os leos que no permitem a penetrao do vapor.
Etapas para processamento:
Invlucros: aps limpeza, secagem e separao, os artigos devero ser acondicionados para
serem submetidos ao ciclo de esterilizao. Os instrumentos articulados, tipo tesoura, porta-
agulha, devem ser embalados abertos no interior do pacote. Como invlucros para este
processo, existem: papel grau cirrgico, filme plstico de polipropileno, algodo cru duplo com
56 fios, papel crepado, caixas metlicas forradas internamente com campos simples e com
orifcios para permitir a entrada do vapor.
Os invlucrosdevero ser identificados quanto ao contedo, e todos devero ter escrito a data
de validade da esterilizao. Todas as embalagens devero portar um pedao de fita de
indicao qumica externa para diferenciar e certificar que os pacotes passaram pelo processo.
Os invlucros de papel crepado, papel kraft ou tecido devero obedecer a um mtodo de
dobradura para possibilitar abertura assptica do pacote.
Colocao da carga na autoclave: os artigos embalados em papel, dos diferentes tipos, e
artigos embalados em tecido no podem ter contato entre si, pois retm umidade. Se tiverem
de ser colocados na mesma carga, devem ser colocados em prateleiras diferentes da
autoclave. Quanto a posio na prateleira, os invlucros devem ficar dispostos no sentido
vertical, e nunca camada sobre camada na mesma prateleira, para permitir a exausto do ar e
a circulao do vapor no interior de cada pacote. As cargas de tecidos (gazes e campos)
devem ser processados em cargas diferentes dos metais, caso contrrio os txteis devem ficar
na prateleira superior para facilitar a penetrao do calor. Os pacotes no podem encostar nas
paredes internas da cmara, assim como a carga no pode ultrapassar 70% da capacidade
interna. A fita indicadora qumica de processo dever ser colocada em todos os pacotes ou
caixas em local visvel, em pequenos pedaos
Estocagem e validade do material esterilizado: para papel Kraft a durabilidade do processo
de 7 dias de estocagem.
Esterilizao por Calor Seco: o equipamento utilizado o Forno de Pasteur, usualmente
conhecido como estufa. A esterilizao gerada atravs do aquecimento e irradiao do calor,
que menos penetrante e uniforme que o calor mido. Desta forma requer um tempo de
exposio mais prolongado e maiores temperaturas, sendo inadequado para tecidos, plsticos,
borrachas e papel. Este processo mais indicado para vidros, metais, ps (talco), ceras e
lquidos no aquosos ( vaselina, parafina e bases de pomadas).
Etapas para processamento
Invlucros: aps limpeza, secagem e separao, os artigos devero ser acondicionados para
serem submetidos ao ciclo de esterilizao. Os instrumentos articulados, tipo tesoura, porta-
agulha, devem ser acondicionados abertos no interior da caixa metlica. Como invlucros para
este processo, existem: caixas metlicas, vidros temperados (tubo de ensaio, placas de Petri) e
lminas de papel alumnio. Utilizando-se caixas metlicas, estas devem ser fechadas com
tampa. Os artigos contidos no interior das caixas devem ter um limite de volume que
proporcione a circulao do calor. Preferentemente as caixas devem conter kits de
instrumentos a serem usados integralmente em cada procedimento. Se utilizadas caixas
maiores, contendo grande volume de artigos, recomenda-se envolver cada instrumento ou kits
em papel alumnio para reduzir a possibilidade de contaminao na retirada dos instrumentos.
Neste momento deve-se ter o cuidado de evitar o rompimento do papel alumnio. Os ps e
lquidos devem ser colocados em vidros fechados com alumnio. Todos os invlucros devero
conter um pedao de fita indicadora qumica do processo de esterilizao, bem como a
indicao de validade e o nome do kit ou instrumento.
Colocao da carga na estufa: os principais pontos a observar so a no sobrecarga de
materiais, deixando espao suficiente entre eles para haver uma adequada circulao de calor.
No permitido o empilhamento de caixas em cada prateleira da estufa.
Controle de qualidade no laboratrio clnico
O resultado de um exame laboratorial confivel e de qualidade depende do preparo do
paciente, da colheita do material e do manuseio e armazenamento da amostra colhida.
O controle de qualidade o conjunto de atividades planejadas e sistemticas do laboratrio
para garantir que os seus servios atendam ao requisito de qualidade.
A garantia de qualidade engloba os processos pr-analticos, analticos e ps-analticos.
Portanto, o seu objetivo assegurar resultados laboratoriais corretos que satisfaam as
necessidades do cliente ou paciente.
Para se obter a qualidade nos exames realizados, preciso que se faa uma padronizao dos
processos envolvidos desde a solicitao mdica dos exames at a liberao do laudo.
Portanto, a padronizao em laboratrio clinico tem a finalidade de prevenir, detectar,
identificar e corrigir erros ou variaes que possam ocorrer em todas as fases da realizao
dos testes.
Padronizao dos processos pr-analticos:
Os fatores pr-analticos so difceis de monitorar e controlar porque grande parte deles pode
ocorrer fora do laboratrio.
Identificao: muito importante que o paciente, a solicitao de exames e as amostra sejam
devidamente identificadas: nome do paciente,data e hora da coleta,tipo de material (soro,
plasma, sangue total, urina, fezes, secreo vaginal, escarro, etc.
Preparao do paciente: todos os profissionais do laboratrio devem saber da importncia da
correta preparao do paciente e saber como ela pode afetar os resultados. Na preparao dos
pacientes para a realizao do exame deve-se observar alguns fatores como: necessidade de
jejum, estado nutricional, uso de lcool; estresse, fumo, exerccios fsicos, postura (sentado,
deitado, em p).
Coleta da amostra: na coleta da amostra importante que os profissionais tenham
conhecimentos necessrios dos erros e variaes que podem ocorrer antes, durante e aps a
obteno da mesma.
1. Variaes devido obteno, preparao e armazenamento da amostra: identificao
incorreta do paciente, troca do material, contaminao da amostra, erro por hemlise, estase
prolongada, homogeneizao, centrifugao, conservao inadequada, erro no emprego de
anticoagulantes, etc.
Erros potenciais na etapa pr-analtica
1. Erros na solicitao dos exames: escrita ilegvel, interpretao errada do exame, erro na
identificao do paciente, falta de orientao por parte do mdico ou do laboratrio para
determinados exames
1. Erros na coleta da amostra:
2. Identificao errada do paciente, troca das amostras
3. Paciente no preparado corretamente: falta de jejum, horrio da coleta incorreto, tempo de
coleta de amostra de urina incorreto
4. Uso de anticoagulante errado
5. Volume da amostra inadequado para o exame
6. Hemlise e lipemia intensas
7. Estase prolongada
8. Transporte e armazenamento da amostra incorreto
9. Contaminao de tubos, frascos e tampas.
Padronizao dos processos analticos
As diversas variveis analticas na realizao de um exame laboratorial devem ser muito bem
controladas para assegurar que os resultados sejam precisos e exatos.
Confiabilidade :preciso, exatido , sensibilidade, especificidade, linearidade
Praticidade: volume e tipo de amostra, durao do ensaio, necessidade de equipamentos,
segurana pessoal
Outras variveis: qualidade da gua, limpeza de vidrarias
Calibrao dos dispositivos de medio e ensaio: pipetas e vidrarias, equipamentos
Erros potenciais na etapa analtica
1. Troca de amostras
2. Erros de pipetagem; pipetas no aferidas, molhadas, volume incorreto
3. Vidraria e recipientes mal lavados
4. Presena de interferncias das amostras: medicamentos, lipemia, hemlise, ictercia
5. Temperatura ambiente e da reao no adequadas
6. Erros nos clculos das diluies, nas unidades, na concentrao
Padronizao na etapa ps-analtica
Os processos ps-analticos consistem nas etapas executadas aps a realizao do exame.
Incluem:
1. Clculo dos resultados
2. Analise de consistncia dos resultados
3. Liberao dos laudos
4. Armazenamento de material ou amostra do paciente
5. Transmisso e arquivamento dos resultados
6. Consultoria tcnica
A direo do laboratrio responsvel por assegurar que os laudos sejam entregues ao
usurio adequado
Os laudos devem ser legveis e sem rasuras de transcrio
Os dados dos laudos so confidenciais, devendo-se respeitar a privacidade do paciente e
manter sigilo sobre os resultados
Os resultados devem ser liberados em prazos especificados e expressos preferencialmente
nas unidade do sistema internacional de medidas (mg/ l; g/l; mg/cm ; etc.).
No laboratrio devem permanecer copias ou arquivos de laudos para posterior recuperao.
Contedo de um laudo
Do laboratrio clinico: nome, endereo completo, nmero do registro no conselho
profissional, responsvel tcnico com seu registro no conselho profissional.
Do paciente: nome, nmero de registro do laboratrio
Do medico solicitante: nome, numero do registro do conselho profissional
Do material ou amostra do paciente: tipo, data, hora da coleta ou do recebimento, quando
aplicvel
Do resultado do exame: nome do analito, resultado, unidade, nome do mtodo, intervalos de
referencia, data da liberao
Do responsvel tcnico: nome, nmero do registro profissional, assinatura
Erros potenciais na etapa ps-analtica
1. Identificao errada do paciente
2. Transcrio de dados incorreta
3. Resultado ilegvel
4. Unidades erradas
5. No identificao de substancias interferentes
6. Erros na interpretao dos resultados
Acondicionamento para transporte de amostras
1 - Para transporte de curta distncia
Para transporte rpido, de curta distncia, os tubos com amostras (geralmente sangue total,
soro ou plasma) podem vir em estantes e transportados em caixas trmicas.
2. Para transporte de longa distncia
Quando as amostras de sangue total, soro, plasma e outras similares so procedentes de
locais mais distantes, sugere-se o seguinte procedimento:
a) Colocar o(s) tubos(s) com as amostra(s), devidamente identificada(s) e etiquetado(s), em um
saco plstico e fechar;
b) Colocar o saco com os tubos em p, protegido com papel, dentro de uma garrafa plstica
cortada (pode ser de lcool, gua sanitria, refrigerante, etc);
c) Colocar uma fita adesiva por cima para fixar o saco com tubos na embalagem plstica;
d) Colocar dentro de uma caixa trmica;
e) Colocar o gelo reciclvel dentro da caixa;
f) Colocar papel amassado por cima, de maneira que as amostras e o gelo no se batam;
g) Colocar as requisies correspondentes, devidamente preenchidas, dentro de um saco
plstico;
h) Vedar bem o saco e fixa-lo na parte interna da tampa da caixa trmica;
i) Fechar e vedar bem a caixa;
j) Identificar com destinatrio, remetente;
k) Enviar ao laboratrio.
1. Gelo: o gelo deve ser preferencialmente reciclvel, para no haver risco de perda da amostra.
1. Caixa Trmica: a caixa para transporte de amostra que deve ser de polietileno ou similares
(tipo geladeira porttil). Deve ser lavvel, resistir a desinfeco e portar a identificao de
Infectante ou Risco Biolgico, juntamente com o nome, telefone e endereo da pessoa que
deve ser avisada em caso de acidente com a(s) amostra(s).
Coleta de amostras biolgicas
As amostras utilizadas para anlises laboratoriais so:
1. Sangue
2. Urina
3. Fezes
4. Lquor
5. Esperma
6. Secreo vaginal
7. Liquido sinovial
8. Saliva
9. Escarro
10. Lavado broncoalveolar
Coleta de fezes EPF (Exame parasitolgico de fezes)
1. Finalidade: O exame de rotina de fezes compreende as anlises macroscpicas, microscpicas
e bioqumicas para a deteco precoce de sangramento gastrintestinal, distrbios hepticos e
dos ductos biliares e sndromes de m absoro.
2. Pesquisa de helmintos e protozorios nas fezes.
3. Preparo do paciente:
4. Evacuar em recipiente limpo e seco e transferir uma poro das fezes recm emitidas para o
frasco coletor, tendo o cuidado para no ultrapassar a metade do frasco.
5. No utilizar laxantes ou supositrio.
6. Material: Fezes em frasco coletor de polipropileno com tampa de rosca de aproximadamente
80 ml.
7. Interferentes: Contaminao com urina.
8. Observaes: o paciente para evitar misturar fezes com urina ou contamin-las com gua
usada para limpar banheiros, que podem conter desinfetantes qumicos.
9. Armazenamento:
10. Conservar refrigerada
11. - No congelar
12. - Material dever ser colhido mesmo apresentando-se diarrico, muco, pus ou sangue.
Coleta de urina
1. de fcil obteno
2. Deve ser colhida em recipiente descartvel limpo, seco e, no caso das uroculturas, tambm
deve ser estril.
3. O recipiente deve ser devidamente etiquetado com o nome do paciente, data e hora da coleta
alm da identificao comum utilizada para os demais exames. importante lembrar que
amostras no etiquetadas colocadas sobre suas respectivas requisies podem ser movidas
facilmente e trocadas.
4. A amostra deve ser entregue imediatamente ao laboratrio e analisada dentro de 1 hora. Caso
isso no seja possvel a amostra deve ser mantida refrigerada para prevenir a decomposio
da urina e a proliferao bacteriana na amostra
5. A amostra no deve ser congelada, pois o congelamento destri os elementos figurados e
ocorre turvao ao descongelar.
Orientaes especficas de coleta - Amostra de urina de jato mdio
Sempre que possvel, as amostras de urina devem ser colhidas pela manh.
a) Como orientar pacientes do sexo feminino:
A paciente deve lavar bem as mos com gua e sabo neutro e sec-las com toalha de papel
limpa e descartvel. Deve despir-se em sala adequada, afastar os lbios vaginais e lavar bem
a vulva e os lbios vaginais, usando chumaos de algodo e gazes estreis em gua morna
com sabo, esfregando de frente para trs. Deve enxaguar bem com gua morna e secar com
gazes esterilizadas. Durante todo este processo a paciente deve manter os lbios vaginais
separados, e no tocar a rea limpa com os dedos. Urinar, desprezando a primeira parte do
jato urinrio. Colher cerca de 30ml (aproximadamente a metade do frasco) de urina em um
recipiente estril, fechando assim que a urina for colhida. Em seguida a amostra colhida,
contida no recipiente fechado, deve ser entregue a pessoa responsvel para ser encaminhada
ao laboratrio.
b) Como orientar pacientes do sexo masculino:
O paciente deve lavar bem as mos. Afastar o prepcio e desprezar no vaso uma pequena
quantidade de urina. Sempre segurando para trs o prepcio colher cerca de 30ml de urina no
frasco estril. Em seguida, a amostra colhida, contida no recipiente fechado, deve ser entregue
a pessoa responsvel para ser encaminhado ao laboratrio.
1. TIPOS DE AMOSTRAS:
2. PRIMEIRA AMOSTRA DA MANH (JATO MDIO): a amostra ideal para o exame de
rotina Urina tipo I.Tambm essencial para evitar o resultado falso negativos nos testes de
gravidez. A primeira amostra da manh uma amostra concentrada, o que garante a deteco
de substncias que podem no estar presentes nas amostras aleatrias mais diludas. Deve-se
instruir o usurio para colher a amostra logo que se levantar e entreg-la ao laboratrio o mais
rpido possvel.
3. AMOSTRA ALEATRIA: Esse tipo de coleta til nos exames de triagem, para detectar
anormalidades bem evidentes. Contudo tambm pode produzir resultados errados, devido
ingesto de alimentos ou atividade fsica realizada pouco antes da coleta da amostra.
4. AMOSTRA COLHIDA 2 HORAS APS A REFEIO: Orienta-se o paciente para urinar pouco
antes de se alimentar e colher a urina 2 horas depois de comer. Este tipo de coleta utilizado
para controlar a terapia com insulina.
5. AMOSTRA DE 24 HORAS OU COM TEMPO MARCADO: Quando necessrio medir a
quantidade exata de determinada substncia qumica na urina e quando esta quantidade varia
segundo as atividades do dia, como exerccios, refeies e metabolismo orgnico, necessrio
a coleta de 24 horas. Para conseguir uma amostra precisamente cronometrada, necessrio
iniciar o perodo de coleta com a bexiga vazia e termin-la tambm com a bexiga vazia. Estas
orientaes aplicam-se para qualquer coleia com tempo determinado.
6. EXEMPLO DE COLETA DE AMOSTRA DE 24 HORAS:
7. 1 dia -7 da manh: o paciente urina e descarta a amostra. O paciente colhe toda a urina nas
prximas 24 horas.
8. 2 dia 7 da manh: o paciente urina e junta esta urina com aquela previamente colhida e
envia ao laboratrio todo o volume coletado.
Coleta peditrica / urina com saco coletor
1. Realizar assepsia da regio genital. Retirar o papel que recobre a parte adesiva e fixar o orifcio
do saco coletor na regio genital em torno da uretra. Aguardar que a criana urine. Se a
criana no urinar em um perodo de 30 minutos, repetir a higiene e trocar o saco coletor a
cada 30 minutos. Assim que a criana urinar, retirar o saco coletor e fech-lo, colando as
bordas do orifcio. Verificar se est vedado.
2. Enviar imediatamente ao laboratrio sob refrigerao.
3. Colocar a identificao do usurio no saco coletor.
Coleta de lquor
1. Lquor normalmente colhido por puno suboccipital ou lombar entre a terceira, quarta ou
quinta vrtebra. Embora no se trate de um procedimento complicado, requer certas
precaues, que compreendem a medida da presso intracraniana e o emprego de tcnicas
cuidadosas para evitar a infeco ou leso no tecido neural.
As amostras devem ser colhidas em TRS tubos estreis, marcados 1,2,3 na ordem em que
so obtidos. O tubo 1 (UM) usado para as anlises bioqumicas e sorolgicas: o tubo 2
usado para a microbiologia: o tubo 3 usado para a contagem celular, por apresentar menor
probabilidade de conter clulas introduzidas acidentalmente pelo procedimento de puno
espinhal
1. As amostras destinadas a testes bioqumicos, sorolgicos e de hematologia so refrigeradas e
as de microbiologia so mantidos temperatura ambiente.
2. A coleta do liquor s poder ser feita por um mdico
Secrees Genitais
Coleta da secreo uretral masculina para exame a fresco
1. Solicitar ao paciente para retrair o prepcio;
2. Limpar a secreo emergente com gaze estril;
3. Certificar-se de que a uretra esteja reta;
4. Introduzir o swab cerca de 2 centmetros no canal uretral;
5. Gire o swab delicadamente de 8 a 10 vezes para absorver a secreo;
6. Retirar o swab, introduzir em um tubo com 1,0 ml de salina estril e encaminhar para
7. O laboratrio imediatamente.
Coleta de secreo vaginal para exame a fresco
1. Introduzir o espculo;
2. Coletar a amostra do saco vaginal com auxlio de um swab;
3. Retirar o swab e introduzir em tubo de ensaio contendo 1,0 ml de salina estril, previamente
identificado;
4. Encaminhar ao laboratrio imediatamente.
Coleta de esperma
1. MATERIAL: Esperma.
2. EXAMES: Espermograma, Cultura de esperma, Bacterioscopia
3. FORMA DE COLETA:
4. Fazer abstinncia sexual de no mnimo 3 dias e no mximo 5 dias, para posterior coleta de
esperma.
5. A coleta dever ser realizada pela manh (entre 7:00 e 8:30 hs), de segunda a sexta-feira, de
preferncia no laboratrio. Se no for possvel, seguir rigorosamente o tempo de envio ao
laboratrio. Lavar o pnis com gua e sabonete. Deve-se urinar previamente e depois coletar
por masturbao, todo o volume de esperma de uma ejaculao, diretamente no frasco
fornecido pelo laboratrio. No coletar o esperma em preservativo, pois o ltex interfere com a
viabilidade dos espermatozides.
6. Anotar o horrio da coleta e enviar o esperma ao laboratrio no mximo 30 minutos aps a
coleta. O material deve ser protegido contra extremos de temperatura (menos de 20 C e mais
de 40 C) durante o transporte at o laboratrio. Comunicar ao laboratrio se fez vasectomia e
a quanto tempo.
7. A realizao do espermograma tem como aplicaes, principalmente, a avaliao das
glndulas seminais, da fertilidade e monitoramento ps-vasectomia. Alm de esclarecer
infeces neste local.
8. Antes da coleta, realizar higiene das mos e pnis;
9. A amostra deve ser coletada por masturbao em frascos limpo, de vidro ou plstico, de boca
larga, fornecido, pelo laboratrio;
10. No utilizar mtodos alternativos para obteno do smen (em caso de coleta em casa) como,
por exemplo, relao sexual interrompida (interrompe a relao quando vai ejacular e colhe o
material);
11. Evitar perda do material durante a coleta. Fechar imediatamente o frasco aps a coleta, para
evitar alcalinizao;
12. Recomendar ao paciente a no utilizao de preservativos de ltex durante a coleta;
13. indispensvel informar o horrio da coleta;
14. O jejum no obrigatrio, exceto quando solicitado a dosagem de frutose, pois nveis elevados
de glicose podem interferir na dosagem.
Coleta de escarro
1. Colher, de preferncia, a primeira amostra da manh;
2. Orientar o paciente para enxaguar previamente vrias vezes a boca com gua para remover a
flora bacteriana superficial dessa regio e colher a amostra obtida aps tosse profunda,
diretamente em um frasco de boca larga;
3. Explicar ao paciente a diferena de uma amostra obtida aps tosse profunda e saliva, para se
obter um material de melhor qualidade;
4. Paciente incapaz de expectorar colher escarro induzido aps nebulizao com soluo
fisiolgica estril de 3 a 10%.

Figura 2 pote para coleta de escarro
Coleta de sangue digital para exame gota espessa - Malria
a) Coletar sempre uma lmina com duas gotas espessas e uma lmina com esfregao;
b) No utilizar sangue com anticoagulante para preparao da lmina.
c) Aps secagem das lminas, transportar em caixas ou frascos , com paredes rgidas e com
ranhuras prprias para fixao das lminas.
d) A solicitao do exame deve acompanhar os frascos de transporte.
Tcnica de Coleta e Preparao da Gota Espessa

a) Trabalhar sobre superfcie plana horizontal.
b) Preencher completamente os dados do paciente.
c) Usar duas lminas, colocar uma lmina sobre a superfcie plana ou sobre o padro, sendo
o manuseio pelas extremidades sem tocar as superfcies. De preferncia, a lmina deve estar
com etiqueta auto-adesiva para o registro da identificao ou usar lmina com extremidade
esmerilhada.
d) Limpar vigorosamente a pele do local de puno (parte lateral do segundo ou terceiro dedo
esquerdo, lbulo da orelha ou em lactentes o dedo grande do p ou o calcanhar) com gaze ou
algodo embebido em lcool e enxugar com gaze ou algodo.
e) Retirar o estilete do envoltrio estril, segurando-o com a mo direita. Mantendo firmemente
o dedo a ser puncionado entre o polegar e o indicador da mo esquerda, puncionar o local de
maneira firme e leve.
f) Remover a primeira gota de sangue com gaze ou algodo seco.
g) Comprimir o dedo suavemente (como uma ordenha) para obter outra gota de sangue
esfrica sobre a pele seca. No tocar o ponto de sada do sangue.
h) Segurando a lmina firmemente pelas bordas numa das extremidades contra o indicador
(que est comprimindo o dedo do paciente) baixa-se lentamente a lmina at tocar o alto da
gota de sangue (sem entrar em contato com a
i) Colocar a lmina com a face para cima na superfcie de trabalho. Com o canto e os primeiros
5mm da borda longa da segunda lmina, espalhar o sangue formando um retngulo de
tamanho e espessura adequados. Tomar outra amostra, colocar ao lado da primeira e espalhar
da mesma maneira. As gotas espessas devem ser localizadas na parte central da lmina.
j) Em lugar da segunda gota espessa pode-se colocar uma gota de sangue e fazer um
esfregao (distendido ou extenso).
k) Limpar o local puncionado com gaze ou algodo secos, se necessrio pressionar.
l) Secar abanando com um pedao de carto, ar morno, caixa com lmpada, estufa, ou sobre o
prprio quebra-luz com suporte para secagem de lminas recm-colhidas ou coradas.
m) No recomendvel o registro do nmero da lmina na prpria amostra de sangue.
n) A melhor preparao para o diagnstico de malria obtida com amostra de sangue colhida
diretamente por puno digital ou venosa sem anticoagulante. O sangue com anticoagulante
fixa menos na lmina de vidro, podendo ocorrer o desprendimento do sangue no ato da
colorao pelo
Coleta de sangue
Coleta de sangue venoso
1. Coleta de sangue Venoso
o sangue que circula da periferia para o centro do sistema circulatrio, que o corao.
conseguido pela puno venosa que fornece quantidade aprecivel de sangue usado nos
exames hematolgicos e bioqumicos.
Locais de puno: fossa cbita (dobra do cotovelo), dorso da mo e dorso do p.

Figura 1:Veias da fossa cbital indicadas para venopuno
Procedimento:
- Preparar a seringa, agulha, algodo e o tubo apropriado.
- Colocar o brao do paciente no suporte
- Garrotear o brao quatro dedos acima da fossa antecubital
- Sentir com as digitais a veia do paciente
- Introduzir a agulha com o bisel voltado pra baixo
- Retirar a quantidade de sangue desejado
- Desgarrotear o brao e retirar a agulha
- Pressionado o algodo para o estancamento do sangue
- Importante no deixar o paciente dobrar o brao.
- Retirar a seringa e colocar o sangue no tubo de maneira que escorra pelas paredes do tubo,
para evitar a hemlise.
- Homogeneizar
1. Coleta de sangue capilar
conseguido pela puno no calcanhar em crianas, na margem livre do lbulo da orelha e na
face palmar do dedo da mo.
Procedimento:
- Fazer assepsia do local com lcool;
- Esperar secar e introduzir no local da puno uma lanceta (descartvel e estril);
- Permitir o escoamento livre do sangue e no espremer para que no haja diluio do sangue
com a linfa (liquido tissular) e sempre desprezar a primeira gota, pois contendo liquido tissular e
material exgeno;
- Realizar a coleta com tubo capilar com ou sem anticoagulante apenas tocando na gota de
sangue;
- Pressionar o local da puno com um pedao de algodo embebido com lcool at cessar o
sangramento.
1. Coleta de sangue vcuo
O sistema de coleta a vcuo consiste de uma agulha, um adaptador tubo-agulha e o tubo de
coleta.
Os tubos de coleta com vcuo so produzidos para determinados volumes de sangue, que
determinado pelo tamanho do tubo e seu vcuo. Tubos com vrias capacidades esto
disponveis desde 2 mL at acima de 20 mL.
Muitos tubos de coleta com vcuo contm aditivos ou anticoagulantes utilizados para coletar
amostras para diferentes anlises. A cor da tampa do tubo de coleta codificada para definir
se existe algum aditivo ou anticoagulante ou no. As cores usadas em geral so:
- Tampa vermelha: Sem anticoagulantes utilizado na coleta de sangue para a obteno de
soro para bioqumica e sorologia.
- Lavanda: Adicionado de anticoagulante EDTA sdico ou potssio. Obtm-se sangue total
para a hematologia.
- Azul: Adicionado de anticoagulante citrato de sdio para obteno de plasma para provas de
coagulao
- Verde: Adicionado de heparina para a obteno de plasma para testes bioqumicos.
- Cinza: Adicionado fluoreto de potssio (inibe a gliclise) para a obteno de plasma para a
determinao da glicose.
Procedimento:
- Preparar a o suporte para tubos a vcuo com o tubo apropriado.
- Fazer a assepsia unidirecionalmente do local desejado utilizado um algodo emedecido com
lcool 70%.
- Colocar o garrote com fora moderada a uma distncia de mais ou menos 4 dedos da fossa
antecubital.
- Introduzir a agulha na veia desejada utilizando o suporte de tubo a vcuo
- Introduzir o tubo a vcuo, quando atingir a quantidade desejada, retirar o tubo a vcuo do
suporte, soltar o garrote assim que o sangue comear a entrar no tubo a vcuo do suporte.
- Quando atingir a quantidade desejada, retirar o tubo a vcuo do suporte, e em seguida retirar
a agulha e colocar um algodo seco no local puncionado, pressionando levemente e evitando
dobrar o brao.
- Tampar a agulha retirando-a do suporte e descart-la.
Tubos de Coleta e Anticoagulantes
ANTICOAGULANTES - So substncias que evitam a coagulao do sangue.
Os tubos esto disponveis em uma variedade de tipos e tamanhos. Os tubos podem ser
estreis ou no. As tampas coloridas demonstram claramente qual o anticoagulante contido no
tubo, ou se no h anticoagulante.
Cor da Tampa Anticoagulante Exemplos de Uso
Vermelha Nenhum Exames que requerem soro. Ex: (bioqumica e sorologia.
Lils EDTA hematologia e Tipagem sanguinea.
Azul Claro Citrato de Sdio Exames de coagulao (TAP, TTPa, Fibrinognio)
Cinza Fluoreto de Sdio Glicose (impede a gliclise)
Verde Heparina Alguns exames especiais.
ANTICOAGULANTES
Como j foi citado antes, os anticoagulantes so substncias usadas para prevenir a
coagulao e retardar a deteriorao do sangue. A escolha do anticoagulante e da sua
quantidade importante. Escolhido impropriamente interfere com as investigaes bioqumicas
como o EDTA potssico na dosagem do potssio e o oxalato de amnio na dosagem da uria.
O excesso de anticoagulante lquido dilui o sangue interferindo nas determinaes
quantitativas.
Alguns anticoagulantes se prestam melhor hematologia pelas suas propriedades
conservadoras da morfologia celular e dos componentes do plasma, especialmente os fatores
da coagulao.
1. O EDTA apresenta propriedade conservadora das clulas sanguineas. Impede a aglutinao
das plaquetas no sangue. No deve ser usado para o tempo de protrombina e testes de funo
plaquetria. O EDTA impede a coagulao ao formar quelatos com o clcio.
2. A Heparina inibe a formao de trombina, impedindo a converso de fibrinognio em fibrina.
No altera a morfologia e o tamanho celular.
3. O citrato de sdio utilizado como anticoagulante nas transfuses de sangue e no estudo da
coagulao quando em soluo aquosa a 3,8% ( Atividade de protrombina, PTT e fibrinognio).
4. Para as transfuses sanguneas o citrato combinado com outras substncias formando o
ACDF (cido ctrico, citrato de sdio, dextrose e fosfato monossdico)
Confeco do esfregao sanguneo
A confeco de um bom esfregao sangneo indispensvel a obteno de corretos
resultados e pode ser feita com sangue com anticoagulante ou sem anticoagulante. Considera-
se como esfregao erradamente confeccionado os curtos demais, os finos demais, os com
parte de gota sangunea deixada na cabea sem estirar, os com paradas e recomeo e
aqueles que no deixam margem lateral. As lminas para o esfregao devem estar
perfeitamente limpas, sem gordura e polidas.

Tcnica de Preparao de Esfregao (Distendido)
a) Trabalhar sobre superfcie plana e horizontal.
b) Colocar uma pequena gota de sangue na parte central da lmina de vidro a 1,5 cm da
extremidade fosca ou da etiqueta.
c) Colocar a Lmina com a face para cima sobre a superfcie plana.
d) Com a borda estreita da lmina em contato com a gota de sangue, formando um ngulo de
50, espalhar o sangue com um movimento rpido, para formar uma camada delgada de
sangue sem atingir a extremidade da lmina.
e) Deixar secar na mesma posio horizontal.
f) Usar etiqueta adesiva para identificao.
g) O sangue pode ser espalhado tambm da seguinte maneira: Retirar com a extremidade da
prpria lmina espalhadora a gota de sangue. Colocar a extremidade que contm o sangue em
contato com a parte central da lmina em posio horizontal e antes que o sangue, por
capilaridade, atinja as bordas laterais da lmina espalhadora formando um ngulo de 50, faz-
se o deslocamento rpido para formar a camada fina de sangue sem atingir a extremidade da
lmina.

Figura 3 Esfregao de sangue distendido Figura 4 frasco para transporte de amostras