PROLOGO

El presente libro tiene la finalidad de dar apoyo a las asignaturas relacionadas con el cultivo,
manejo, aislamiento, conservacin e identificacin de microorganismos para los estudiantes de
educacin media y superior del rea biolgica.
Se presentan algunas tcnicas bsicas microbiolgicas el cual tiene como principal objetivo
poner en prctica el mtodo cientfico para despertar el inters y seguir estimulando en algunos
casos al estudiante por esta rama de la ciencia.

Como una aportacin a las estructuras didcticas de este libro, colocamos una serie de
imgenes de lo que esperamos en el experimento y de lo que no esperamos para poderlos
comparar.

NOMBRE DEL ALUMNO: ___________________________________________

PROFESOR DE TEORA: ___________________________________________

PROFESORES DE LABORATORIO: _________________________________

GRUPO: _______________________________________________________

PERIODO LECTIVO: _____________________________________________

CARRERA: _____________________________________________________

ESCUELA: _____________________________________________________

NDICE

Pasos a seguir para trabajo diario de un laboratorio de microbiologa _________________________________ 4

Procedimiento para la realizacin de un medio de cultivo___________________________________________ 13
Realizacin de una preparacin en fresco y fija___________________________________________________ 19
Tcnicas de tincin _________________________________________________________________________ 22
Microscopia_______________________________________________________________________________

27

Preparacin de material utilizado en microbiologa ________________________________________________ 35

Diluciones y diluyentes _____________________________________________________________________ 43

Aislamiento por estra cruzada y vaciado en placa________________________________________________ 47
Cultivo de microorganismos _________________________________________________________________ 52
Microcultivo_______________________________________________________________________________ 59
Conservacin de cepas _____________________________________________________________________ 67
Pruebas bioqumicas _______________________________________________________________________ 72
Toma de muestras _________________________________________________________________________ 88
Determinacin de OMA ____________________________________________________________________

97

Determinacin de OCT _____________________________________________________________________ 100

Determinacin de mohos y levaduras _________________________________________________________

106

Aplicaciones de la temperatura (pasteurizacin de leche y control de calidad) __________________________ 109

Preparacin de reactivos __________________________________________________________________

114

Medidas de seguridad _____________________________________________________________________

120

PASOS A SEGUIR PARA TRABAJO DIARIO DE UN LABORATORIO DE MICROBIOLOGA

La calidad en nuestro trabajo en un laboratorio de Microbiologa depende de una secuencia de pasos a seguir
estrictamente por todo el personal que labora el, para ello sugerimos seguir los siguientes pasos para tratar de
uniformar criterios.
PASOS A SEGUIR:
1.- Preparacin del rea de trabajo
2.- Preparacin de medios de cultivo
3.- Preparacin de reactivos
4.- Preparacin de material
5.- Procedimiento para la toma, manejo y transporte de muestras para su anlisis microbiolgico
6.- Realizacin de la tcnica
7.- Incubacin de la muestra
8.- Recuento
9.- Realizacin de los clculos
10.- Presentacin del informe.
El personal de nuevo ingreso al laboratorio de Microbiologa deber de leer el manual de aseguramiento de la
calidad y pondr ms inters en su rea de trabajo.
PREPARACIN DEL REA DE TRABAJO
Las caractersticas del rea de trabajo son las siguientes:
1.- La mesa debe ser de acero inoxidable con instalaciones de agua, luz, drenaje y gas, cada una de estas
instalaciones deber de tener los siguientes cdigos de colores segn la NOM-026-STPS, Colores y seales de
seguridad e higiene e identificacin de riesgos por fluidos conducidos en tuberas.
LUZ

ROJO

IDENTIFICACIN DE TUBERAS CONTRA INCENDIO

AGUA

VERDE

IDENTIFICACIN DE FLUIDOS DE BAJO RIESGO

GAS

AMARILLO

IDENTIFICACIN DE FLUIDOS PELIGROSOS

2.- El rea de trabajo cuenta con luz natural principalmente y/o luz artificial.
3.- Una campana de flujo laminar para la realizacin del sembrado con instalaciones de luz.
4.- Siempre al inicio y al final de nuestras actividades la mesa se limpiar con una solucin de benzal al 10 % para
desinfectarla, para ello siempre se debe tener una esponja y un atomizador con benzal, adems se debe de tener
un frasco de con benzal para cuando se necesite, este reactivo hay que prepararlo frecuentemente para evitar que
se contamine.
5.- La mesa debe tener dos mecheros con manguera en buen estado y una balanza granataria de 600 g de
capacidad para el pesado de las muestras.
6.- En el cajn de la mesa se debe tener papel aluminio, cucharas de plstico nuevas, esptulas, frasco con
torundas de algodn, hisopos, cuchillos, tijeras, pinzas, tenedores, ligas, (algunos estriles y otros no porque se
pueden esterilizar con alcohol cuando se requieran)

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