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CICLO DE KREBS: CATABOLISMO DEL ACETILCoA
Adaptado de Murray R., Granner D., Mayes P., Rodwell V., “Bioquímica de Harper”, 15º edición, El Manual Moderno, 2001.
COMPLEJO DE LA PIRUVATO DESHIDROGENASA
(SU REGULACION)
Ca 2+ NADH
Fosfatasa Quinasa
Mg 2+
Acetil CoA
Piruvato deshidrogenasa
Inactiva ADP
Fosforilada
H 2O
E1 b
E2
Fosfatasa
Quinasa
2+
Mg
E3
OH E1 a 2Ca 2+
l
Ser
HOPO32-
(Paso 1)
Relaci (Paso 3)
ATP E1 b
E2
Relación
Relación
NADH/NA- elevada
NADH/NAD- elevada
Ac-CoA/CoA-SH elevada elevada
Ac- CoA/CoA-SH
Quinasa Fosfatasa
Mg2+ Ca 2+Ca 2+ E3
2-
OPO3 E1 a
l
E1a Subunidad de la piruvato descarboxilasa
ADP Ser E1b Subunidad de la piruvato descarboxilasa
Relación
E2 Dihidrolipoamida aciltransferasa
NADH/NAD- baja
Ac-CoA/CoA-SH baja E3 Dihidrolipoamida deshidrogenasa
E1 b
E2 (Paso 2) Fosfatasa
2+
2 Ca
Quinasa
Mg2+
E3
E1 a E3
2- Adaptado de Rawn J., “Bioquímica”. Ed. Patterson (1989)
OPO 3
l
Ser
Acetil-CoA
* *
* CICLO DE KREBS
SCoA *
H2O *
1HSCoA 2 *
Aconitasa
*Citrato sintasa
Citrato
Cis-aconitato
Oxalacetato H2O
3
Aconitasa
+
NADH +H Malato
9 Malato
deshidrogenasa
deshidrogenasa
*
NAD +
*
Malato +
Isocitrato NAD
H2O 8Fumarasa
* Isocitrato
deshidrogenasa
4 CO2 + NADH+H
+
*
*
Fumarato
Succinil
a -Cetoglutarato
A
deshidrogenasa
+
7 NAD + CoA-SH
Enzimas
* Enzimas alostéricas
La actividad de la succinato deshidrogenasa está modulada por
la concentración de oxalacetato, un inhibidor competitivo de la
enzima.
RELACION DEL CICLO DE KREBS CON OTRAS VIAS METABOLICAS
Lactato
Aminoácidos
Piruvato
Transaminasa deshidrogenasa
Aminoácidos Alanina Piruvato Acetil-CoA
Piruvato
carboxilasa
Fosfoenol
Fosfoenol
Glucosa Oxalacetato
piruvato
piruvato
Aspartato
Citrato Ácidos grasos
Oxalacetato
( - ) ATP
Succinato a - cetoglutarato
(-) Succinil- CoA
NADH, ATP
(+) ADP
Succinil-CoA
SISTEMAS DE LANZADERA
SISTEMAS DE LANZADERA
Membrana Membrana
externa interna
A
Citosol Matriz
Mitocondrial
G3P : Glicerol 3-fosfato
DHAP: Dihidroxiacetona fosfato
FADH2
NADH + H+
DHAP DHAP
Glicerol
Glicerol 3-fosfato
3-fosfato
deshidrogenasa
deshidrogenasa
NAD+ G3P G3P
FAD +
B Membrana Membrana
externa interna
NADH + H+ Oxalacetato Glu
Glu Glu Oxalacetato NADH + H+
Glu: glutamato
Asp: Aspartato
a- KG: a- cetoglutarato
B - Lanzadera malato-aspartato
(Hígado, riñón, corazón)
Adaptado de Lehninger A., Nelson DL., Cox M., “Principios de Bioquímica”, 2º edición, Worth Publishers, 1997.
DIAGRAMA MITOCONDRIAL
Membrana externa
Membrana externa
Membrana interna
Crestas
Crestas Matriz
Gliceraldehído a-cetoglutarato
3-fosfato deshidrogenasa
deshidrogenasa
Piruvato Malato
deshidrogenasa
NADH
deshidrogenasa
Isocitrato 3-hidroxil-CoA
deshidrogenasa deshidrogenasa
Succinato Acil-CoA
deshidrogenasa FADH
deshidrogenasa
1 2 3 4 8 11 F1
[S-Fe--S]2
FMN FAD OSCP
[S-F--S]8
[S Fe]4 [S-Fe]3 +
a
3 F0 T
S S b b c
K T 1
a
5 6 c 10
40
7
9
Topografía de la membrana interna mitocondrial. 1. NADH-deshidrogenasa; 2. hierro-azufre-proteínas del complejo I; 3. ubiquinona
(las barras negras); 4. succinato-deshidrogenasa, azufre-hierro-proteínas; 5. citocromo bK ; 6. citocromo bT; 7. citocromo c1; 8. hierro
-azufre-proteínas del complejo III; 9. citocromo c; 10. citocromo-oxidasa; 11. complejo F1-ATP-sintasa, indicando el canal para
protones. Los círculos blancos representan al grupo polar de los fosfolípidos y las colas la cadena de ácidos grasos.
NAD -320
380 - 17.5
+ 60
Ubiquinona
Citocromo bT -30
285 - 12.9
Citocromo c +255
Citocromo a33
+385
Oxígeno
435 - 19.6
+820
* Para que sea posible la síntesis de ATP, el valor de D G0´ debe exceder de 7,3 kcal/mol.
COMPLEJOS Y VIAS DE TRANSFERENCIA DE ELECTRONES
EN LA CADENA RESPIRATORIA MITOCONDRIAL
Complejo I
NADH deshidrogenasa ½ O2 H 2O
FMN
Centros S-Fe Complejo III Complejo IV
Adaptado de Devlin TM, “Biochemistry”, 5th edition, A John Wiley and Sons Eds, 2002.
COMPLEJOS Y TRANSPORTE DE ELECTRONES EN
LA MEMBRANA INTERNA MITOCONDRIAL
Complejo de
Espacio NADH-CoQ
Intermenbrana reductasa
Cit c
+ +
4H+ 2H 2H 2e- +
2H
Cit c
Cit c
+++
SFe CoQ CoQH2 SFe Cit c1 Cu
Membrana FMN
interna 2e- SFe CoQH2 Cit a
Cit b 566
-
2e Cit b 562 Cu-Cit a3
+
2H
+
NADH H + NAD+ Complejo de
+ CoQH2 -cit c ½ O2 + 2H+ HO +
4H reductasa 2 2H
Matriz
Complejo de succinato-
CoQ reductasa +
2H
CoQ CoQH2
SFe SFe
FAD CoQH Cit b566
2 Cit b562
SFe
+
2H
+
Succinato Fumarato + 2H Complejo de
CoQH2 -cit c
reductasa
Adaptado de Devlin TM, “Biochemistry”, 5th edition, A John Wiley and Sons Eds, 2002.
CADENA DE TRANSPORTE DE ELECTRONES MITOCONDRIAL
VIAS DE TRANSFERENCIA DE ELECTRONES Y
SITIOS DE UNIÓN PARA INHIBIDORES ESPECÍFICOS
Malato
a-cetoglutarato
Isocitrato
FMN NADH Piruvato
Complejo I 1 Succinato
S-Fe (4)
a-Glicerolfosfato (FAD)
FAD
Complejo II
S-Fe
Oxidación de ácidos grasos y
cuerpos cetónicos
Coenzima
Q
b-hidroxibutirato
b-hidroxiacil-CoA
FAD
Acetil-CoA
Citocromo b
Complejo III 2
S-Fe
Citocromo
c1
Ascorbato
Tetrametilen-fenilen- Citocromo
diaminia Rotenona
c 1 Amital
2 Antimicina A
Citocromo
Complejo IV 3 a a3
(Cu)
Monóxido de carbono
3 Azida sódico
Cianuro de potasio
Adaptado de Devlin TM, “Biochemistry”, 5th edition, A John Wiley and Sons Eds, 2002.
FOSFORILACION OXIDATIVA
+
+
NADH + H
H
+
[H ] [H+]
[OH-] [OH - ]
+ R
H
- +
H+ D DY R
1 O2 ATP
2
ATP
+
H
ADP + Pi
Esquema que ilustra el funcionamiento de la cadena respiratoria como mecanismo productor de protones y
de la ATPasa como enzima vectorial que utiliza según la teoría quimiosmótica, protones para la síntesis de ATP. Los
tamaños de las letras correspondientes a H y OH - dentro y fuera de la mitocondria representan las respectivas concentraciones
+
Exterior
Afuera Interior
Adentro
+
[H+] ext = C 2 [H ]int =C 1
-
H+ OH
H++ -
OH -
H OH
+
H -
+ H+ OH
H -
+ OH-
H+ OH -
H OH
+
H -
+ OH
H -
Bomba OH
de
protones
D G = RT In (C2/C1) + Z F D y
D G = 2.3 RT DpH + F D y
La membrana interna mitocondrial separa dos compartimentos de diferente pH produciendo diferencias en la concentración química
( D pH) y en la distribución de cargas creando una diferencia en el potencial eléctrico ( D y). El efecto neto de esas diferencias es la
fuerza del potencial de protones ( D G).
Adaptado de Lehninger A., Nelson DL., Cox M., “Principios de Bioquímica”, 2º edición, Worth Publishers, 1997.
TRANSPORTE DE ELECTRONES Y TRANSLOCACION DE
PROTONES EN LA MEMBRANA INTERNA MITOCONDRIAL
H+
+
+ H Espacio
H
Cit c intermembrana
+ + + + +
+ +
+ + +
+
+
+ +
- - - - - +
- - +
Fumarato
+
H2O -
+
+
NADH + H
NAD
+ Succinato
1/2O2+2H - +
ADP + P i +
H 2O -
Matriz H+
+ -
ATP - -
- -
- -
- - -
Adaptado de Lehninger A., Nelson DL., Cox M., “Principios de Bioquímica”, 2º edición, Worth Publishers, 1997.
ACCION DEL DESACOPLANTE 2-4 DINITROFENOL
2,4-Dinitrofenol
Alto pH Bajo pH
NO2
O- HO
O- NO2
HO
HO
Matriz Espacio
mitocondrial intermembrana
El hipotálamo es
detector del frío
Triacilglicéridos
Adaptado de Devlin TM, “Biochemistry”, 5th edition, A John Wiley and Sons Eds, 2002.
CONSUMO
CONSUMODE
DEOXIGENO
OXIGENOMITOCONDRIAL
MITOCONDRIAL
Mitocondrias de
Mitocondrias
hígado
de hígado
Succinato Concentración de oxígeno Succinato
ADP ADP
Concentración de oxígeno
Oligomicina
D ADP
ADP
PA 0
Estado 4
2-4 Dinitrofenol
ADP 0
Estado 4
O2 = O
O2 = O
Demostración de
Demostración de acoplamiento
acoplamiento delde
Inhibición y desacoplamiento de la
electrones a la fosforilación oxida-
transporte de electrones a la fosfori-
fosforilación oxidativa en mitocon-
tiva enoxidativa
lación mitocondrias de hígado. de
en mitocondrias
drias de hígado.
hígado.
Adaptado de Devlin TM, “Biochemistry”, 5th edition, A John Wiley and Sons Eds, 2002.