Y DE SERVICIOS No. 39 Bachillerato Tecol!"ico e La#oratori$ta %&'(ico Componente de Formacin Profesional Mdulo 1 Fundamentos en el rea Qumico Industrial Submdulo SE)INARIO DE INVESTIGACIN * CONTA)INACIN )ICROBIOLGICA EN EL AGUA DE LA ESCUELA SECUNDARIA N+,-. Proyecto de Investigacin que presenta: _____ NOEMI GONZALEZ ROELO ______ Asesor de !rea: ______L"A"#"$"_Re%eca Mart&ne' Arriaga ______ (ireccin )etodo*gica (ra" Mart+a ,ristina G)e' Paredes Aguascalientes Ags., 2 de Junio de 2008 SUBSECRETARIA DE EDUCACIN MEDIA SUPERIOR DIRECCIN GENERAL DE EDUCACIN TECNOLGICA INDUSTRIAL COORDINACIN DE ENLACE OPERATIVO DE AGUASCALIENTES C.B.T.i.s. No. 39
I!"#S$I%&'()* !(#MI %(!+,-#+ )("#-(
*CONTA)INACIN )ICROBIOLGICA EN EL AGUA DE LA ESCUELA SECUNDARIA N+,-. I./ )#S0M#!..............................................................................................................................1 II. I!$)('0CCI2!..................................................................................................................3 III./ 40S$IFIC&CI2!.................................................................................................................5 I"./ P-&!$#&MI#!$( '#- P)(6-#M&.............................................................................7 "./ (64#$I"(S '# -& I!"#S$I%&CI2!..............................................................................8 "I./ M&)C( $#2)IC(.............................................................................................................9 "II./ :IP2$#SIS......................................................................................................................5 "III./ M#$('(-(%;&............................................................................................................7 VIII. I.-TIPO DE ESTUDIO Y DISEO GENERAL.............................................................8 VIII. II.- DEFINICIN OPERACIONAL DE LAS VARIABLES...........................................9 VIII. III.- UNIVERSO DE ESTUDIO, SELECCIN Y TAMAO DE LA MUESTRA, UNIDAD DE ANLISIS Y OBSERVACIN..........................................................................1< VIII. IV.- PROCEDIMIENTOS PARA LA RECOLECCIN DE INFORMACIN, INSTRUMENTOS A UTILIZAR Y MTODOS PARA EL CONTROL Y CALIDAD DE LOS DATOS...................................................................................................................................12 I=./ P-&! '# &!,-ISIS '# -(S )#S0-$&'(S...............................................................1 IX. I.- MTODO Y MODELOS DE ANLISIS DE LOS DATOS SEGN EL TIPO DE VARIABLES...........................................................................................................................1 IX. II.- PROGRAMAS A UTILIZAR PARA EL ANLISIS DE LOS DATOS..........................19 IX. III.- FOTOGRAFAS........................................................................................................3< IX. IV.- ANLISIS DE LOS RESULTADOS...........................................................................31 IX. V.- MANEO DE LA INFORMACIN.............................................................................31 =./ C(!C-0SI(!#S...............................................................................................................32 =I./ 6I6-I(%)&F;&................................................................................................................3 1 I./ RESU)EN #n esta in>esti?acin se le da respuesta a la pre?unta central* @Que microor?anismos estn presentes en el a?ua de la institucinAB entendiendo por institucin #scuela Secundaria %eneral !C18Bdado Due para poder establecer una solucin al problema de contaminacin del a?ua a ni>el microbiol?icoB es necesario saber de Due tipo de microor?anismos estamos EablandoB Fa Due es e>idente Due el consumo de a?ua en mal estadoB es decir contaminadaB puede lle?ar a tener ?randes efectosB Se piensa Due -a contaminacin del a?ua en los alGibes F depsitos de la escuela secundaria !C18 es propiciadaB por la falta de mantenimiento en ellos.B siendo esta la Eiptesis central de la in>esti?acinH por lo tanto el obGeti>o central de la in>esti?acin es* &naliIar la poblacin microbiana presente en el a?ua Due se emplea en la escuela secundaria !C18B para lle>ar a cabo este anlisis se utiliIaron tJcnicas F normas establecidasB Due dieron como resultado la presencia de coliformes en la muestra de a?ua tomada del tinaco de la institucin. II. INTRODUCCIN 3 -os efectos Due tiene el consumo de a?ua contaminada a ni>el microbiol?icoB son muF serios Fa Due pueden ir desde infecciones poco importantes en el estoma?oB Easta las producidas por la presencia de #scEericEia ColiB comKnmente llamada e L coli o coliforme. Por lo Due es importante conocer la procedencia F el estado de sanidad del a?ua Due consumimos. & lo lar?o de este documento el lector podr conocer temas relacionados con el a?uaB la microbiolo?aB procedimientos para el tratamiento del a?uaB etc. M conocer el procedimiento F resultados de una in>esti?acin de campoB realiIada con muestras de a?ua tomadas de instalaciones plu>iales de la #scuela secundaria %eneral !C18. Con los anlisis mencionados en esta in>esti?acinB se podr conocer Due tipo de microor?anismos estn presentes en el a?ua de la institucinB F de esta manera dar solucin al problema. III./ 0USTI1ICACIN 5 #sta in>esti?acin se realiIa con el fin deB eNaminar la poblacin microbiana presente en el a?ua de la institucinB Due lle>a por nombre #scuela Secundaria %eneral !C18 Con?reso de CEilpancin?oB Fa Due el consumo de a?ua contaminada por microor?anismos daOinosB como la e L Coli en bebederos o el uso de esta para rie?oB baOosB etc.B puede producir intoNicacinB enfermedades intestinales simples o compleGasB etc. Con estoB se Duiere pre>enir al alumnado F maestros de la institucin sobre el consumo del a?uaB as como concientiIar sobre el saneamiento de los depsitos F almacenamiento de las a?uas para consumo. & si mismo se pretende diseOar una solucinB para beneficio de la comunidad escolar. IV./ 2LANTEA)IENTO DEL 2ROBLE)A 7 #sta in>esti?acinB tiene como obGeti>o principal &naliIar la poblacin microbiana presente en el a?ua Due se emplea en la escuela secundaria !C18B Fa Due el consumo de a?ua contaminada en bebederos F lla>esB o el uso de esta en rie?oB baOosB la>abosB etc.B puede ocasionar ?ra>es consecuenciasB en el alumnado F maestros de la institucinB Due >an desde infecciones intestinales simples a las ocasionadas por la Fa mencionada #scEericEia Coli. Cabe mencionar Due para poder atacar el problemaB es necesario saber a Due tipo de microor?anismos nos estamos enfrentandoB por lo Due la in>esti?acin pretende responder a una pre?unta central* @Que microor?anismos estn presentes en el a?ua de la institucinAB al responder esta pre?unta se pretende plantear una solucin. Para responder a esta pre?unta se cuenta con tJcnicas de laboratorio establecidas F normati>iIadasB de i?ual manera se cuenta con tJcnicas de muestreo. Se sospecEa Due la consecuencia de -a contaminacin del a?ua en los alGibes F depsitos de la escuela secundaria !C18 es propiciadaB por la falta de mantenimiento en ellosB F esto trae como consecuencia la formacin de un Eabitad adecuado para el crecimiento microbiano. V./ OB0ETIVOS DE LA INVESTIGACIN 8 O!"#$%&' G#(#)*+, * &naliIar la poblacin microbiana presente en el a?ua Due se emplea en la escuela secundaria !C18. O!"#$%&'- E-.#/01%/'-, * "erificar la cantidad de microor?anismos presentes en el a?ua de esta institucin. * #stablecer Due consecuencias trae el consumo de a?ua contaminada. * 'efinir Due tipos de microor?anismos estn presentes en el a?ua de la institucin. VI./ )ARCO TERICO P)(%)&M& I* P)(%)&M& II* ,./El a"&a3 4ro4ie5a5e$ 6 caracter'$tica$. ,./ De7iici! 5e 5rea8e. 9 2.3.- T%.'- 4# *56*. 2.3.- T%.'- 4# 4)#(*"#. 2.7.- T8/(%/*- 4# M6#-$)#'. 2.3.2.- D)#(*"# S*(%$*)%'. 2.9.- A(:+%-%- 4#+ *56*. 2.3.3.- D)#(*"# P+6&%*+. 2.7.- F6(/%'(*;%#($'. 9./ Coce4to 5e )icro#iolo"'a. 2.9.- P#+%5)'-. 3.2.- C*)*/$#)0-$%/*- 4# +'- ;%/)'')5*(%-;'-. 2.<.- E-.#/%1%/*/%'(#- .*)* +* 3.3.- T*='(';0* 4# !*/$#)%*-. /'(-$)6//%>( 4# -%-$#;*- 4# 4)#(*"#. 3.3.2.- M')1'+'50* ? 1%-%'+'50* 4# !*/$#)%*-. 3./ )ae8o 5e Re$i5&o$ Biol!"ico$. 9./ De7iici! 5e Alcatarilla5o. 7.2.- M#4%4*- 4# -#56)%4*4 # @%5%#(#. 3.2.- C';.'(#($#- 4# 6(* )#4 4# 7.3.- EA6%.' 4# -#56)%4*4 .*)* #+ $)*!*"' #( #+ *+/*($*)%++*4' -*(%$*)%'. +*!')*$')%'. 3.7.- C';.'(#($#- 4# 6(* )#4 4# 7.7.- M*(#"' 4# )#-%46'- !%'+>5%/'- %(1#//%'-'-. *+/*($*)%++*4' .+6&%*+. 7.9.- M*$#)%*+#- M%/)'!%'+>5%/'- ? -6 #-$#)%+%B*/%>(. 7.<.- A(:+%-%- M%/)'!%'+>5%/' 4#+ *56*. :./ );to5o$ 5e i5eti7icaci!. 3./ Saea(ieto 6 a#a$teci(ieto 9.2.- M%/)'-/'.%*. 5el a"&a. 9.3.- M8$'4'- 4# $%(/%>(. 7.2.- C'($)'+ 4# /*+%4*4 4#+ *56*. 9.7.- T8/(%/*- 4# /6+$%&' # %4#($%1%/*/%>( 4# 7.3.- F6#($# 4# *!*-$#/%;%#($'. M%/)'')5*(%-;'-. <./ El a"&a co(o tra$(i$or 5e e7er(e5a5e$. <.2- B*/$#)%*- 4#+ *56*. <.2.3- C'+%1');#-. <.2.7.- B*/$#)%*- C$%+#- #( #+ *56*. <.3.- E(1#);#4*4#- /*6-*4*- .') #+ *56*. =./ 2&ri7icaci! 5e la$ a"&a$ 4ota#le$. D.2.- P'B*- 4# /'*56+*/%>( ? -#4%;#($*/%>(. D.3.- F%+$)'- 4# *)#(* +#($'-. D.3.2.- F%+$)'- 4# *)#(* ):.%4'-. D.7.- F%+$)'- A6# $)*!*"*( /'( .)#-%>(. D.9.- D#-%(1#//%>(. PROGRAMA I, ,./EL AGUA3 2RO2IEDADES Y CARACTER>STICAS 1< $al como menciona el autor 6*( S#($8, #( -6 '!)* EL* /'($*;%(*/%>(F G-#($8, 2HIHJB Se denomina &?uaB al estado lDuido del compuesto de Eidr?eno F oN?eno :2(. #l a?ua pura es un lDuido inodoro e inspidoB Due eNiste en los tres estados de la materiaB liDuidoB slido F ?aseoso. $iene un matiI aIulB Due slo puede detectarse en capas de ?ran profundidad. & la presin atmosfJrica P75< mm de mercurioQB el punto de con?elacin del a?ua es de < CC F su punto de ebullicin de 1<< CCB a ni>el del mar. #l a?ua alcanIa su densidad mNima a una temperatura de 1 CC F se eNpande al con?elarse. Como mucEos otros lDuidosB el a?ua puede eNistir en estado sobre enfriadoB es decirB Due puede permanecer en estado lDuido aunDue su temperatura estJ por debaGo de su punto de con?elacinH se puede enfriar fcilmente a unos /23 CC sin Due se con?ele. #l a?ua sobre enfriada se puede con?elar a?itndolaB descendiendo ms su temperatura o aOadiJndole un cristal u otra partcula de Eielo. Sus propiedades fsicas se utiliIan como patrones para definirB por eGemploB escalas de temperaturaB de PEB etc. #l a?ua es uno de los a?entes ioniIantes ms conocidos. Puesto Due todas las sustancias son de al?una manera solubles en a?uaB se le conoce frecuentemente como el disol>ente uni>ersal. #l a?ua combina con ciertas sales para formar EidratosB reacciona con los Nidos de los metales formando cidos F actKa como cataliIador en mucEas reacciones Dumicas importantes. $odas estas propiedades se deben al enlace Puente de :idro?enoB Due eNiste entre las molJculas del a?ua. 2.3.- TIPOS DE AGUA #Nisten di>ersos tipos de a?uaB dependiendo de su uso F de su composicinB a continuacin se enlistan distintos tipos de a?ua* * A"&a 4ota#le? Puede ser consumida por personas F animales sin ries?o de contraer enfermedades. * A"&a $ala5a? S& concentracin de sales es relati>amente alta Pms de 1< <<< m?RlQ. * A"&a $alo#re? Contiene sal en una proporcin si?nificati>amente menor Due el a?ua marina. -a concentracin del total de sales disueltas est ?eneralmente comprendida entre 1<<< / 1< <<< m?Rl. #ste tipo de a?ua no est contenida entre las cate?oras de a?ua salada F a?ua dulce. * A"&a 5&lce? !atural con una baGa concentracin de salesB o ?eneralmente considerada adecuadaB pre>io tratamientoB para producir a?ua potable. * A"&a 5&ra? Contiene un ?ran nKmero de iones positi>os. -a dureIa est determinada por el nKmero de tomos de calcio F ma?nesio presentes. 11 * A"&a #la5a? Sin dureIa si?nificati>a. * A"&a$ e"ra$? Pueden ser una combinacin de residuosB lDuidos o en suspensinB de tipo domJsticoB municipal e industrialB Gunto con las a?uas subterrneasB superficiales F de llu>ia Due puedan estar presentes. * A"&a$ "ri$e$? Compuestas por a?ua de la>ar procedente de la cocinaB cuarto de baOoB a?uas de los fre?aderosB F la>aderos. * A"&a$ re$i5&ale$? Fluidos residuales en un sistema de alcantarillado. #l ?asto o a?ua usada por di>ersas institucionesB Due contiene materia or?nica disuelta o suspendida. * A"&a #r&ta? &?ua Due no Ea recibido tratamiento de nin?Kn tipo. * A"&a$ (&erta$? &?uas en estado de escasa o nula circulacinB con dJficit de oN?eno. * A"&a alcalia? &?ua cuFo p: es superior a 7. * A"&a ca4ilar? Se mantienen en el suelo por encima del ni>el fretico debido a la capilaridad. * A"&a 5e a5he$i!? )etenida en el suelo por atraccin molecularB formando una pelcula en las paredes de la roca o en las partculas del suelo. * A"&a 5e "ra@e5a5? &?ua en la Iona no saturada Due se mue>e baGo la influencia de la fuerIa de ?ra>edad. * A"&a 5e $&elo? &?ua Due se encuentra en la Iona superior del suelo o en la Iona de aireacin cerca de la superficie del terrenoB de forma Due puede ser cedida a la atmsfera por e>apo/transpiracin. * A"&a 5i$7!rica? &?ua pobre en nutrientes F Due contiene altas concentraciones de cido EKmico. * A"&a 4ri(iti@a? Pro>eniente del interior de la tierraB Due no Ea eNistido antes en forma de a?ua atmosfJrica o superficial. * A"&a $&#terrAea? &?ua Due puede ser encontrada en la Iona saturada del sueloB Iona Due consiste principalmente en a?ua. Se mue>e lentamente desde lu?ares con alta ele>acin F presin Eacia lu?ares de baGa ele>acin F presinB como los ros F la?os. 0n &?ua dura contiene* carbonatosB bicarbonatosB fosfatosB sulfatos F nitratos de Ca F M?BB por lo tanto se puede definir como dureIa a la cantidad de estos elementos presentes en 12 el a?ua. -a dureIa del a?ua produce incrustaciones PsarroQ en tuberasB de acuerdo a la cantidad de dureIa presente en el a?uaB esta se puede clasificar como* * A"&a #la5a? Contiene 3< ppm. de dureIa. * A"&a (o5era5a? Contiene de 3< a 13< ppm. de dureIa. * A"&a 5&ra? Contiene de 13< a << ppm. de dureIa * A"&a (&6 5&ra? Contiene mas de << ppm. de dureIa. GD%//%'(*)%' E(/%/+'.#4%/', 2HIKJ 2.7.- TCNICAS DE MUESTREO Se debe de tomar en cuenta Due los resultados de los anlisis dependen en ?ran manera de la buena toma de muestrasB esta puede ser manualB es decir tomada por una persona o automticaB tomada por una maDuina pro?ramada. -as tJcnicas de muestreo >aran dependiendo del lu?ar de donde se >a a eNtraer la muestra* * Cuando se toma una muestra de un alGibe o tinaco se debe de enGua?ar el embase con el a?ua del tinaco o alGibe >eces F se debe de deGar una espacio entre la muestra F la tapa del embase. * #n poIosB se prende la bomba se deGa trabaGarB se apa?a F se toma la muestra. #n rosB se toma la muestra de la parte media de estosB lo mismo se realiIa en el caso de la?os F la?unas. * 'e la lla>eB Pde tuberasQ se deGa caer el a?ua unos se?undos F se toma la muestra. 'e i?ual manera eNisten di>ersos $IP(S '# M0#S$)&SB estas son* 1. 'e Sondeo* Se toman en un lu?arB F en un tiempo determinado. 2. Combinadas* Son >arias muestras de un mismo punto en diferentes momentos. . Inte?rada. Son >arias muestras de diferentes lu?ares en un mismo tiempo. -os embases donde se >a a colocar la muestraB pueden ser de >idrioB plstico Pde $etra flKor etilenoQ F al?unas >eces de metalB estos deben de cumplir con ciertos reDuisitos* Para anlisis microbiol?ico./ 'eben ser Frascos de >idrio con tapn esmeriladoB frascos estJriles desecEables o bolsas estJriles con cierre EermJtico F capacidad de 123 o 23< m-. 1 Para anlisis de metales./ 'eben ser #n>ases F tapas de plsticoB adicionados de 1 m- de cido ntrico concentrado por cada 1<< m- de muestra. Para anlisis de pla?uicidas./ #l #n>ase debe ser de >idrio color mbar o transparente cubierto de papel aluminio. Para la identificacin de las muestras deben etiDuetarse los frascos F en>ases con la si?uiente informacin* / !Kmero de control para identificar la muestraB independientemente del nKmero de re?istro del laboratorio. / FecEa F Eora de muestreo. Para el control de la muestra debe lle>arse un re?istro en formato establecido pre>iamente con los datos anotados en la etiDueta del frasco o en>aseB as como la si?uiente informacin* / Identificacin del punto o sitio de muestreo. / $emperatura del a?ua. / p:. / Cloro residual libre. / $ipo de anlisis a efectuar. / #n su casoB reacti>o empleado para la preser>acin. / !ombre de la persona Due realiI el muestreo. -os sellos de los embases deben de ser de plstico o adEeribles. #l muestrador debe de contar con una bitcoraB Due conten?a los datos de las etiDuetas. Cuando se reciben las muestras en el laboratorioB estas deben de ser re?istradasB indicando el tipo de anlisis Due se >a a lle>ar a caboB F se desi?na el lu?ar de almacenamientoB Fa sea en un refri?erador a 1CC o en un almacJn. GNOM-37K-SSAI-3KK3, 3KK3J 2.9.- ANLISIS DEL AGUA 'urante un anlisis se debe de tener en cuenta la calidad de los datosB esta se obtiene mediante indicadores Due miden el ses?o o ?rado de error F la precisin Due ten?a la tJcnica de anlisis por si sola. #l ses?o es el >alor real promedio del resultado del anlisisB la precisin es medida mediante el ?rado de concordancia entre los anlisis mKltiplesB esta se re?ula por un porcentaGe de >arios resultados en anlisis de ensaFos o muestras. #n forma resumida se puede decir Due * -a eNactitud es i?ual al Ses?o mas la PrecisinB para poder contar con mas precisin durante un anlisis se puede realiIar una prueba de colaboracinB esta consiste en realiIar la misma prueba en tres laboratorios distintosB con dos operadores por laboratorioB cada uno con una muestra e i?ual instrumental. -os resultados de los anlisis se eNpresan en m?Rlt Pmili?ramos por litroQB ppm Ppartes por millnQB ?rRlt Pmicro?ramos por litroQ F 0FC Punidades formadoras de coloniasQ. 11 9./ CONCE2TO DE )ICROBIOLOG>A -a Microbiolo?aB es la ciencia Due estudia los or?anismos de tamaOo microscpicoB entre los Due se incluFen las bacteriasB los protoIoos F los >irusB as como ciertos Eon?os Ple>adurasQ F al?as unicelulares de peDueOo tamaOo. Comprende un conGunto de disciplinas relacionadasB entre las Due destacan la bacteriolo?aB la >irolo?a F la parasitolo?a. #studiaB no slo la morfolo?a de los microor?anismosB sino tambiJn su modo de >idaB su metabolismoB su estructura molecularB sus propiedades pato?Jnicas F sus caractersticas anti?Jnicas PaDuellas Due pueden pro>ocar una respuesta del sistema inmunol?icoQ. GD%//%'(*)%' E(/%/+'.#4%/', 2HIKJ 3.2.- CARACTERSTICAS DE LOS MICROORGANISMOS. Se le llama Microor?anismoB a todo ser >i>o Due slo se puede obser>ar utiliIando microscopios pticos o electrnicos. -os microor?anismos se clasifican en tres de los cinco reinos* * -as bacterias F cianobacterias Po al?as >erde aIuladasQ pertenecen al reino Mneras. Son or?anismos con cJlulas procariticas F presentan una ?ran >ariedad de formas de >ida. :aF bacterias fotosintJticasB DuimiosintJticas F Eetertrofas. Sstas pueden ser saprofitasB descomponedoras o pat?enasB como las Due producen la tuberculosis o la sfilis. * #n el reino Protistas se incluFen a or?anismos eucariotas. Son microor?anismos protistas* los protoIoos unicelularesB las al?as unicelulares F al?unas pluricelulares. * Ciertos Eon?osB incluidas las le>adurasB son microor?anismos Due pertenecen al reino :on?os. #stos seres tienen una ?ran importancia econmica por el uso industrial en la fabricacin de antibiticos F productos alimenticios como el pan o el >inoB o por las pJrdidas Due producen al descomponer alimentos. -os >irus son un tipo de microor?anismo peculiar. !o tienen metabolismo F son parsitos intracelulares Due causan un ?ran nKmero de enfermedades en las personasB los animales F las plantas. GD%//%'(*)%' E(/%/+'.#4%/', 2HIKJ. 3.3.- TAXONOMA DE BACTERIAS 13 -a taNonoma es la ciencia Due se estudia de la clasificacin de los seres >i>osB las bacterias pertenecen al reino mneraB F al PEFllum S/@%B'.@?$* F C%*('.@?$*, al primer pEFllum pertenecen las bacteriasB F al se?undo las al?as >erdes. -as bacterias se suelen clasificar si?uiendo >arios criterios* por su formaB se?Kn la estructura de la pared celularH por el comportamiento Due presentan frente a la tincin de %ram.H en funcin de Due necesiten oN?eno para >i>ir o no Paerobias o anaerobiasB respecti>amenteQH se?Kn sus capacidades metablicas o fermentadorasH por su posibilidad de formar esporas resistentes cuando las condiciones son ad>ersasB F en funcin de la identificacin serol?ica de los componentes de su superficie F de sus cidos nucleicos. -a clasificacin taNonmica ms utiliIada di>ide a las bacterias en cuatro ?randes ?rupos se?Kn las caractersticas de la pared celular. -a di>isin %racilicutes incluFe a las bacterias con pared celular del?ada del tipo %ram. ne?ati>asH las bacterias de la di>isin Firmicutes tienen paredes celulares ?ruesas del tipo %ram. positi>asH las de la $enericutes carecen de pared celular F las de la cuarta di>isin Mendosicutes tienen paredes celulares poco comunesB formadas por materiales distintos a los tpicos peptido?lucanos bacterianos. G$';*4' 4#, LB*/$#)%*.L M%/)'-'1$M S$64#($ 3KKI NDVDO. M%/)'-'1$ C').')*$%'(, 3KKDJ 3.3.2.- MORFOLOGA Y FISIOLOGA DE BACTERIAS -as bacterias suelen ser unicelulares procariotasB es decir Due* no tienen membrana nuclearB poseen el &'! en el citoplasmaB carecen de la maFora de los or?anelos celularesB al?unas poseen >acuolasB al?unas son fotosintJticas F no producen oNi?enoB al?unas presentan fla?elos F tienen un tamaOo promedio de 3 a 1< micras. P&neNo IQ. 0na bacteria simplificada est formada por tres capas eNternas Due en>uel>en las estructuras internasH la capa pe?aGosa prote?e la pared celular r?idaB Due a su >eI cubre la membrana celular semipermeable. #l fla?elo es un medio de locomocin F los pelos Due se eNtienden por fuera de la cpsula aFudan a la bacteria a suGetarse a las superficies. Se?Kn la cantidad de fla?elos Due poseanB se denominan* MonotricaB -ofotrica F peritrica. P"er &neNo2Q. Presentan diferentes formasB las cuales pueden serB esfJricas PcocosQB cur>as PcomaB espiralesQ F bastones PbacilosQ. 3./ )ANE0O DE RESIDUOS BIOLGICOS #l maneGo de los residuos biol?icos en MJNico no es tan adecuado como es maneGado a ni>el internacional o en pases de primer mundoB se Ean creado normas para poder controlarlos Fa Due a partir de 1971 se tubo una conciencia de fortalecer el marco le?al Eacia los residuos biol?icos ?enerados en MJNico tanto por las empresas como los Eospitales F dems establecimientosB Fa Due estos residuos pueden ser peli?rosos. 15 Se debe de tener un control Eacia los residuos peli?rosos biol?icos infecciososB Fa Due si al?Kn residuo peli?rosoB lle?a atener contacto con al?una persona o animalB F si este residuo es infecciosoB puede conta?iarlo F producir un problema maFor como una epidemia. -as normas oficiales meNicanas* !(M/<32/#C(-/199 F la !(M/<87/#C(-/1993 indican un listado de los residuos peli?rososB definiendo los residuos Due se producen identificndolos F clasificndolos por especialidades practicas o en ser>icioB estableciendo un procedimiento para su maneGo adecuado a la normati>idad >i?ente. 7.2.- MEDIDAS DE SEGURIDAD E PIGIENE Con el fin de tener un buen funcionamiento en el laboratorioB se deben de establecer ciertas normas o medidas de se?uridad Ee Ei?ieneB para pre>enir accidentes en el laboratorio. -as re?las bsicas aDu enumeradas son un resumen de las normas de se?uridad Ee Ei?iene de al?unos laboratorios. 1. Conocer la ubicacin de los elementos de se?uridad en el lu?ar de trabaGoB tales como eNtin?uidoresB salidas de emer?encia F botiDun. 2. !o comerB beberB fumar o maDuillarse dentro del laboratorio. . !o ?uardar alimentos en nin?Kn mbito del laboratorio. 1. Mantener el orden F la limpieIa en la Iona asi?nada F en todos los lu?ares comunes. 3. !o bloDuear las rutas de escape o pasillos con elementos Due entorpeIcan la correcta circulacin. 5. !o instalar coneNiones elJctricas precarias o pro>isorias. 7. #n caso de eNistir filtraciones o ?oteras Due puedan afectar las instalaciones F eDuiposB o Due puedan pro>ocar incendios por cortocircuitosB se deber informar inmediatamente al personal de mantenimiento para su pronta atencin F se deber clausurar la Iona afectada para su pronta reparacin. 8. #n caso de derrames incidentales PDue no re>isten ries?o inmediatoQB se deber informar inmediatamente ala persona a car?o del laboratorio F se proceder a la limpieIa o a la adopcin de las medidas correspondientes. 9. #s necesario >estir con bata de al?odn para e>itar posibles salpicaduras de productos DumicosB as como contar con un calIado cerrado. #s necesario recalcar Due no eNiste una normati>idad estndar para el uso de los laboratorios. 7.3.- EQUIPO DE SEGURIDAD PARA EL TRABAO EN EL LABORATORIO 17 &s como se deben de contar con normas de se?uridad e Ei?iene en un laboratorioB de i?ual manera se debe de contar con un eDuipo de se?uridad para el trabaGoB a continuacin se enlistan al?unos artculos indispensables para la se?uridad en el laboratorio* 1. 6ata lar?a Pa la rodilla o pantorrillaQ de al?odn 1<<T F man?a lar?aB con botones o brocEes de presin. Se recomienda Due sea blanca. 2. Mono ?o?les incoloros sin >entilacin o con trampas. . &nteoGos neutros de se?uridad de poli carbonato o >idrio endurecido con proteccin lateral. 1. Protector facial transparente de 2< cm. de lar?o. 3. %uantes de lteN para maneGar cidos dJbiles F cetonas. 5. %uantes de P"C para maneGar cidos F bases dJbiles. 7. %uantes de neopreno para maneGar cidos F sol>entes alifticos. 8. %uantes de nitrilo para maneGar sol>entes F deri>ados or?nicos. 9. %uantes tJrmicos de al?odn ?rueso Ppara materiales calientes F frosQ. 1<. )espirador con filtros para* aQ "apores or?nicos F ?ases cidos Pcdi?o amarilloQ. bQ "apores or?nicos Pcdi?o ne?roQ. cQ &moniaco F alcalinos Pcdi?o >erde oscuroQ. dQ :umos Pcdi?o >ioletaQ. 11. CalIado antiderrapante F cerrado. 7.7.- MANEO DE RESIDUOS BIOLGICOS INFECCIOSOS -os residuos peli?rosos biol?icos infecciososB son producidos en los EospitalesB >eterinariasB centros de in>esti?acionesB laboratorios clnicosB etc.B de todos estos lu?ares son reco?idos F confinadosB por empresas especialiIadasB las cuales deben estar re?istradas F re?lamentadas por la S#M&)!&$. #n la cmara de diputados se Ean reformado las normas >i?entes Due tiene la S#M&)!&$ para poder adecuarse da con da a las necesidades Due se tienen de a cuerdo a los residuos ?enerados en distintos centrosB para cada uno se tiene las normas de confinamientoB de recoleccin de residuos peli?rososB as como para el diseOo F construccin de los confinamientos. #Nisten indicadores para cada tipo de residuosB por eGemplo* para los residuos punIo cortantes se tienen botes roGos con la leFenda de residuos peli?rosos biol?icos infecciososB al lle?ar estos botes a su capacidad mNimaB son mandados a otro depsito ms ?rande de donde son reco?idos todos los residuos por la empresa desi?nada. -as normas Due se deben de se?uir para la recoleccin de los residuos son* U!(M/<32/#C(-/9* establece la caracterstica de los residuos peli?rososB el listado de los mismos F los lmites Due Eacen aun residuo peli?roso por su toNicidad al ambiente. U!(M/<31/#C(-/9* es el procedimiento para determinar la incompatibilidad entre dos o ms residuos considerados peli?rosos por la !(M/<33. 18 U!(M/<33/#C(-/9* establece los reDuisitos Due debe reunir los sitios destinados al confinamiento controlado de residuosB eNcepto los radioacti>os. U!(M/<35/#C(-/9* establece los reDuisitos para el diseOo F construccin de las obras complementarias de un confinamiento controlado para residuos peli?rosos. U!(M/<37/#C(-/9* reDuisitos Due deben obser>arse en el diseOoB construccin F operacin de celdas de un confinamiento controlado para residuos peli?rosos. U!(M/<38/#C(-/9* los reDuisitos para la operacin de un confinamiento controlado de residuos peli?rosos. U!(M/<87/#C(-/93* los reDuisitos para la separacinB en>aseB almacenamientoB recoleccinB transporteB tratamiento F disposicin de residuos mJdicos peli?rosos. Para poder recolectar los )P6I es necesario clasificarlosB tomando en cuenta su procedenciaB en* * )esiduo de san?re Eumana * )esiduo de culti>os F cepas de a?entes infecciosos. * )esiduos patol?icos Pr?anoQ * )esiduos no anatmicos de unidades de pacientes PGerin?asB etc.Q * )esiduos infecciosos miscelneosB como material de curacin. -a unidad responsable desi?nar al personal Due maneGar estos residuos Duienes recibirn capacitacin del maneGo de residuos peli?rosos biol?icos infecciosos. #l Gefe del rea ?eneradora super>isar Due el maneGo de los residuos peli?rosos se ape?ue al re?lamento oficial en primera instancia. Si el residuo no se encuentra en listadoB antes mencionadoB el ?enerador determinar su peli?rosidad en un laboratorio acreditado por la secretaria de proteccin ambiental. Se le llama residuos biol?icos infecciosos a* * -a san?re F sus componentes* slo en su forma lDuidaB as como sus deri>ados no comercialesB incluFendo las cJlulas pro?enitorasB EematopoFecticas F las fracciones celulares de la san?re resultante PEemoderi>adosQ. * -os culti>os F cepas de a?entes biol?icos/infecciosos* los culti>os ?enerados en los procedimientos de dia?nostico e in>esti?acinB as como los ?enerados en la produccin F control de a?entes biol?icos/infecciosos. * 0tensilios desecEables* usados para contenerB transferirB inocular F meIclar culti>os de a?entes biol?icos/infecciosos * -os patol?icos 19 * -os teGidos r?anos F partes* Due se eNtirpan F remue>en durante una necropsiaB ciru?a o al?Kn otro tipo de inter>encin DuirKr?icaB Due no se encuentre en formol * -as muestras biol?icas* para anlisis DumicosB microbiol?icosB citol?icos e Eistol?icos incluFendo orina F eNcremento. * -os residuos no anatmicos * -os recipientes desecEables Due conten?an san?re lDuida. * -os materiales de curacin* empapadosB saturados o ?oteados de san?re o de los si?uientes lDuidos* lDuido pleuralB lDuido cJfalo/raDudeo o lDuido peritoneal. * CualDuier material desecEable* Due cualDuier secrecin Due sea considerada como infecciosa se?Kn la secretaria de salubridad. * -os obGetos punIo cortantes* Due estn en contacto con Eumanos o animales F Due EaFan estado en contacto con sus muestras biol?icas. #l personal Due recolecta los residuos peli?rosos debe de usar ?uantesB mascarilla lentes de proteccin F uniforme completo. #l carro recolector deber ser con tapa F permanecer cerrado todo el tiempoB no debern rebasar su capacidad mNima. Para la recoleccin de los residuos se deber tener marcado el camino Due deben de tener estos. #l en>asado F el etiDuetado de los residuos peli?rosos deber de ser como se menciona a continuacin* 1./ de acuerdo a su estado fsicoB se asi?naran recipientes de distintas dimensionesB para su maneGo F estos siempre debern de permanecer cerrados. 2./el en>ase deber de tener los rtulos de identificacin con los si?uientes datos* / !ombre de la empresa ?eneradora / !ombre de los residuos / Caractersticas de los residuos* estado fsicoB peli?rosidad Pcorrosi>oB eNplosi>oQB fecEa de ?eneracinB lu?ar de?eneracinB peso del residuo. ./si el ?enerador deber de en>asar dos o mas residuos peli?rosos en el mismo en>ase deber de consultar la !(M/<31/#C(-/9 Due establece el procedimiento para determinar la incompatibilidad dedos o ms residuos. 1./ el personal asi?nado al maneGo de residuos peli?rososB re?istra en la bitcora de ?eneracin mensual la cantidad de residuos ?enerada. -a bitcora de ?eneracin mensual de be de contener los si?uientes datos* fecEa de ?eneracinB lu?ar donde se ?enero el residuoB nombre del residuo Due se ?enerB clasificacin del residuo F el peso del residuo Due se ?ener. Se debe de lle>ar una bitcora de mo>imientoB de entrada F salida de almacJn temporal de residuos peli?rososB la cual se utiliIa con la finalidad de conocer los >olKmenes semestrales F 2< anuales de residuosB as como los tipos de residuos Due son almacenadosB esta debe de tener la si?uiente informacin* nombre del residuos F lu?ar de ?eneracinB entrada al almacJn temporal de residuosB raIn social de la empresa transportistaB re?istro ante la secretaria de comunicaciones F transporteB placas del transporteB nombre de la empresa destinatariaB B permiso de la S#M&)!&$B tipo de tratamiento Due recibe el residuoB transporte F recepcin de residuo peli?roso. 7.9.- MATERIALES MICROBIOLGICOS Y SU ESTERILIZACIN Se define como esteriliIacin al proceso Due se lle>a a cabo para la eliminacin o muerte de todos los microor?anismos Due contiene un obGeto o sustanciaB F Due se encuentran acondicionados de tal forma Due no pueden contaminarse nue>amenteB para lle>ar a cabo esta accin eNisten distintos procesos o mJtodosH a continuacin se mencionaran al?unos. / Calor* pro>oca desnaturaliIacin de protenasB fusin F desor?aniIacin de las membranas FRo procesos oNidati>os irre>ersibles en los microor?anismos. / Calor EKmedo* produce desnaturaliIacin F coa?ulacin de protenasB elimina todas las bacterias combinando adecuadamente factores como la temperatura a la Due se someten F el tiempo de eNposicin. Se puede esteriliIar por calor EKmedo en autocla>es a 12< CC durante 2< minutos F a presin superior a la atmosfJrica. / Calor seco* produce desecacin de la cJlulaB efectos tNicos por ni>eles ele>ados de electrolitosB procesos oNidati>os F fusin de membranas. Se puede esteriliIar por calor seco en estufas a ms de 15< CC durante media Eora. PVVV.microbiolo?ia.com.arB 2<<8Q 7.<.- ANLISIS MICROBIOLGICO DEL AGUA 0n EecEo muF lamentable es Due la maFora de los seres Eumanos ten?an Due beber a?ua Due Ea sido contaminada con a?uas ne?rasB por lo tantoB es muF importante probar la pureIa del a?ua Due se utiliIa para el consumo Eumano. !o eNiste una prueba Due sea enteramente satisfactoriaB pero eNisten >arias de ?ran importanciaB dicEas pruebas se denominan pruebas 6acteriol?icasB con estas se determina la pureIa del a?uaB eNaminando el tipo de bacterias Due conten?a. #n la practicaB esto Ea sido muF problemtico porDue es 21 difcil detectar la presencia de -*+;'(#++* T?.@% F otros or?anismos causales de las enfermedades entJricas. #Nisten >arias raIones Due Eacen pesada esta tarea* 1. -os meGores mJtodos conocidos a la fecEa son demasiado lentosB tediosos F antieconmicos para realiIarse en anlisis rutinarios del a?ua. 2. Siempre eNisten mucEo ms indi>iduos inoculos Due pat?enosB lo cual infiere en los resultados. . Por medio de los meGores mJtodos disponibles en la actualidadB los pat?enos se minimiIanB necesitaran abundar en cantidad para lo?rar ser destacadosB esto tambiJn se debe a Due las muestras de a?ua eNaminadas son muF peDueOas. 'e acuerdo con estas raIonesB el eNamen directo para detectar pat?enos no se utiliIa en el anlisis rutinario de a?uasB pero siB al?unas >ecesB en la in>esti?acin. & continuacin se citaran al?unos de los tipos de anlisis o pruebas bacteriol?icas* * Prueba para el ?rupo de coliformes* #l ?rupo de bacterias coliformes incluFe a las aerbicas F a las anaerbicas facultati>asB bacilos %ram ne?ati>os no esporulados Due fermentan la lactosa con formacin de ?as despuJs de 18Er de incubacin a 3CC. -a presencia de este ?rupo coniforme en el a?ua potable es ndice de contaminacin. -a E-/@#)%/@%* /'+%, un miembro de este ?rupoB es un Eabitante normal del tracto intestinal de todos los seres >i>osB sanos F enfermos. -a #.Coli pro>eniente de las personas podra ser considerada como ms peli?rosa en el a?ua Due si el mismo microor?anismo pro>iniese de al?Kn animalB dado Due estos no son considerados como portadores de nin?una enfermedad entJrica Due ataDue a los Eumanos. L* #($#)'!*/$#) *#)'5#(#-, otro miembro del ?rupo coliforme se encuentra ?eneralmente en las plantas F ?ranos pero tambiJn puede aloGarse en el intestino del Eombre F de al?unos animales. #stos dos microor?anismos son muF similaresB F ambos pueden ser asociados con materiales fecalesB el meGor mJtodo disponible para discernir el ori?en intestinal de los coliformes es mediante el tubo mKltiple o el procedimiento del filtro de membrana con incubacin a 11.3CC <.2CC. Con esta tJcnicaB se selecciona a los coliformes fecales. #sta tJcnica consiste en tres pruebas Due sonB Presunti>aB confirmati>a F complementaria. U Prueba Presunti>a* Se realiIa inoculando una serie de caldo L lactosa o caldo de lauriltriptosa en tubos de fermentacin con cantidades di>ersas de a?uaB dependiendo del lu?ar donde EaFa sido obtenida la muestra. #n el eNamen rutinario de las a?uas potablesB se emplean muestras de 3 a 1< ml. CualDuier ?as Due apareIca dentro del matraI despuJs de 18Er de incubacin a 3CC indica una Prueba Presunti>a Positi>a F la ausencia de produccin de ?as Eacia el final de este periodo constituFe una Prueba !e?ati>a F por lo tanto se considera el a?ua como potable. Se debe realiIar una UPrueba Confirmati>aB plantendose dos alternati>as. "arios tubos de fermentacin con caldo >erde L brillante L lactosa L bilis pueden ser inoculados a partir del inoculo primario en donde se obser>o 22 produccin de ?as. -a nue>a aparicin de ?as dentro de las 18Er si?uientes constituFe una prueba Confirmati>a positi>aB Fa Due los in?redientes del medio inEiben el desarrollo de los or?anismos ?rampositi>osB permitiendo el crecimiento del ?rupo coliforme. $ambiJn se puede inocular por estra >arias caGas de Petri conteniendo medio de #ndo o a?ar eosina L aIul de metileno con lactosa o caldo de lauriltriptosa como a?entes de la produccin de ?as. -a aparicin de colonias nucleadas tpicasB Due a menudo presentan un brillo metlico dentro de las 21Er si?uientesB tambiJn indica una Prueba confirmati>a positi>a. #n al?unos casos se realiIa una UPrueba ComplementariaB las colonias discretas aparecidas sobre las placas de a?ar confirmati>asB se aslan en caldo L lactosa F se inoculan por estra en tubos con a?ar. -a formacin de ?as F la presencia de bacilos ?ramne?ati>os no esporuladosB se interpretan como e>idencia de Due las bacterias coliformes estaban en la muestra ori?inal. *MJtodos de filtros de membrana* #sta tJcnica ofrece >arias >entaGas sobre la prueba para coliformes reciJn discutida. Proporciona una cuenta mas rpida F mas precisa de los or?anismos coliformes pro>enientes de un >olumen maFor de a?uaB en comparacin con el >ieGo F rutinario procedimiento. #l aparato filtrador se construFe de >idrioB plstico o de un embudo de acero inoNidable F un matraI de succin. #l filtro de membrana es un disco del?adoB fabricado de un deri>ado de la celulosa. $iene poros eNtremadamente peDueOos Due detienen el paso de las bacterias. -os filtradores se esteriliIan por medio de la autocla>e o por eNposicin al oNido de etilenoB despuJs de esteriliIado el aparato porta filtrosB se arma F se Eace pasar una muestra representati>a de 3< a 2<< mlB dependiendo de la masa bacteriana en el a?ua. #l tamaOo de la muestra no debe ser de un >olumen Due produIca ms de << colonias por disco. $odas las bacterias contenidas en la muestra son retenidas en el filtro de membrana. #l embudo se desarma F la membrana se transfiereB por medio de unas pinIas estJriles a una caGa de petri estJril Due contiene una compresa saturada con 2ml de medio de #ndo. #ste medio se difunde a tra>Js de los poros de la membrana lle>ando nutrientes Eacia la superficie con el fin de mantener el crecimiento de las bacterias retenidas en el filtrado. -as caGas se incuban a 3CC durante 13 a 2< Er. -as colonias de los or?anismos coliformes muestran un tpico brillo dorado metlico F pueden contarse fcilmente. * Prueba para detectar estreptococos fecales* -os or?anismos de este ?rupo son* S$)##.$'/'//6- 1*#/*+%-, S. 1*#/*+%- &*)+%A6#1*/%#(-, S. 1*#/*+%- &*). Z?;'5#(#-, S. 1*#/%6;, S. 46)*(-, S. B')%- ? S. #A6%(6-. #stos microor?anismos se encuentran ?eneralmente en el tracto intestinal del Eombre F de los animalesB de aE Due se consideren como indicadores de la contaminacin. -a prueba para determinar los estreptococos fecales es muF similar a la de los coliformesB eNcepto Due se emplean diferentes medios selecti>osB Fa Due los estreptococos son %ram positi>os. Por lo cualB se realiIan pruebas mKltiples en donde se emplea caldo de ?lucosa con aIida a la Due despuJs de adicionarle >olKmenes >ariables de a?ua e inocularlosB pueden desarrollar crecimiento en el fondo del tuboB indicando muF probablemente una prueba positi>a. -a inoculacin posterior F el crecimiento en tubos 2 conteniendo caldo de aIida etil>ioleta proporciona la e>idencia confirmati>a de los estreptococos fecales. -as tinciones de %ram de los residuos del sedimento deben mostrar estreptococos ?rampositi>os. Si se empleara la prueba del filtro de membranaB el filtro deber colocarse sobre la superficie de a?ar W L F para estreptococosB en donde los nutrientes se difunden Easta el fondo del filtroB de tal manera Due el or?anismo ataGado en la superficie lo?ra desarrollarse en coloniasB las cuales pueden contarse. * Cuenta #stndar en placa* Se efectKan cuentas de colonias despuJs de Eaber sembrado en placa cantidades alcuotas PproporcionalesQ de la muestra. -a cuenta estndar en placa no se recomienda para el caso del a?ua porDue la Due contiene pocas bacterias pat?enasB ob>iamente es mas peli?rosa Due la Due contiene mucEas saprfitas. Sin embar?oB lo usual es Due el a?ua de buena calidad ten?a cuentas baGasB menos de 1<< colonias por mililitro. -as cuentas en placas son Ktiles para determinar la eficiencia de las operaciones para eliminar microor?anismosB como la sedimentacinB filtracin F cloracin. -as cuentas se deben Eacer antes F despuJs del tratamiento especifico. -os resultados indicaran la medida en Due Ea sido reducida la poblacin microbiana. P$empleB 198<Q :./ )BTODOS DE IDENTI1ICACIN MucEas especies bacterianas son tan parecidas morfol?icamente Due es imposible diferenciarlas slo con el uso del microscopioH en este casoB para identificar cada tipo de bacteriaB se estudian sus caractersticas bioDumicas sembrndolas en medios de culti>o especiales. &sB al?unos medios contienen un producto Due inEibe el crecimiento de la maFora de las especies bacterianasB pero no la de un tipo Due deseamos a>eri?uar si est presente. (tras >eces el medio de culti>o contiene determinados aIKcares especiales Due slo pueden utiliIar al?unas bacterias. #n al?unos medios se aOaden indicadores de p: Due cambian de color cuando uno de los nutrientes del medio es fermentado F se ?eneran catabolitos cidos. Si las bacterias son capaces de producir fermentacinB ?eneran ?ases Due pueden ser apreciados cuando el culti>o se realiIa en un tubo cerrado. Con otros medios de culti>o se identifica si las bacterias producen determinadas enIimas Due di?ieren los nutrientes* asB al?unas bacterias con enIimas Eemolticas Pcapaces de romper los ?lbulos roGosQ producen Eemlisis F cambios apreciables macroscpicamente en las placas de a?ar/san?re. -os diferentes medios F tJcnicas de culti>o son esenciales en el laboratorio de microbiolo?a de un EospitalB pues sir>en para identificar las bacterias causantes de las enfermedades infecciosas F los antibiticos a los Due son sensibles esas bacterias. 9.2.- MICROSCOPIA Se conoce como MicroscopioB a cualDuiera de los distintos tipos de instrumentos Due se utiliIan para obtener una ima?en aumentada de obGetos minKsculos o detalles muF peDueOos de los mismos. #Nisten diferentes tipos de microscopiosB por lo Due solo se citaran al?unosB 21 Due se consideran los mas usadosH #l tipo de microscopio ms utiliIado es el microscopio pticoB Due se sir>e de la luI >isible para crear una ima?en aumentada del obGeto. #l microscopio ptico ms simple es la lente con>eNa doble con una distancia focal corta. #stas lentes pueden aumentar un obGeto Easta 13 >eces. Por lo ?eneralB se utiliIan microscopios compuestosB Due disponen de >arias lentes con las Due se consi?uen aumentos maFores. &l?unos microscopios pticos pueden aumentar un obGeto por encima de las 2.<<< >eces. #l microscopio compuesto consiste en dos sistemas de lentesB el obGeti>o F el ocularB montados en eNtremos opuestos de un tubo cerrado. #l obGeti>o est compuesto de >arias lentes Due crean una ima?en real aumentada del obGeto eNaminado. -as lentes de los microscopios estn dispuestas de forma Due el obGeti>o se encuentre en el punto focal del ocular. Cuando se mira a tra>Js del ocular se >e una ima?en >irtual aumentada de la ima?en real. #l aumento total del microscopio depende de las distancias focales de los dos sistemas de lentes. :aF di>ersos microscopios pticos para funciones especiales. 0no de ellos es el microscopio estereoscpicoB Due no es sino un par de microscopios de baGa potencia colocados de forma Due con>er?en en el espJcimen. #stos instrumentos producen una ima?en tridimensional. #l microscopio de luI ultra>ioleta utiliIa el ran?o ultra>ioleta del espectro luminoso en lu?ar del ran?o >isibleB bien para aumentar la resolucin con una lon?itud de onda menor o para meGorar el detalle absorbiendo selecti>amente distintas lon?itudes de onda de la banda ultra>ioleta. #l microscopio petro?rfico o de polariIacin se utiliIa para identificar F estimar cuantitati>amente los componentes minerales de las rocas ?neas F las rocas metamrficas. #l microscopio electrnico utiliIa electrones para iluminar un obGeto. 'ado Due los electrones tienen una lon?itud de onda mucEo menor Due la de la luIB pueden mostrar estructuras mucEo ms peDueOas. -a lon?itud de onda ms corta de la luI >isible es de alrededor de 1.<<< an?stroms P1 n?strom eDui>ale a <B<<<<<<<<<1 metrosQ. -a lon?itud de onda de los electrones Due se utiliIan en los microscopios electrnicos es de alrededor de <B3 an?stroms. 9.3.- MTODOS DE TINCIN -a $incin de %ramB es un mJtodo de identificacin de bacterias mediante una tincin especfica. 'esarrollado por el mJdico danJs :ans CEristian 4oacEim %ramB es un procedimiento utiliIado uni>ersalmente. #n un primer momento las bacterias se tiOen con >ioleta de ?enciana Pderi>ado metilado anilnicoQ F despuJs se tratan con la solucin de %ram P1 parte de FodoB 2 partes de Foduro potsico F << partes de a?uaQH por Kltimo se la>an con alcoEol etlicoB F unas bacterias retienen el fuerte color aIul de la >ioleta de ?enciana F otras se 23 decoloran por completo. & >eces se aOade una contra tincin con fucsina o eosina para teOir las bacterias decoloradas de color roGo F Eacerlas ms >isibles. Se denominan bacterias %ram positi>as a aDuellas Due retienen la tincin aIul F bacterias %ram ne?ati>as a las Due Duedan decoloradas. &l?unas bacterias presentan capacidad >ariable de tincin de %ram F se llaman %ram >ariables. 6acterias %ram positi>as tpicas son los estafilococos Due producen forKnculosH %ram ne?ati>as representati>as son la #scEericEia coli de la flora intestinal o los bacilos de la tos ferinaH %ram >ariables son los bacilos de WocE de la tuberculosis. 9.7.- TCNICAS DE CULTIVO E IDENTIFICACIN DE MICROORGANISMOS 0n mJtodo fundamental para estudiar las bacterias es culti>arlas en un medio lDuido o en la superficie de un medio slido de a?ar. -os medios de culti>o contienen distintos nutrientes Due >anB desde aIKcares simples Easta sustancias compleGas como la san?re o el eNtracto de caldo de carne. Para aislar o purificar una especie bacteriana a partir de una muestra formada por mucEos tipos de bacteriasB se siembra en un medio de culti>o slido donde las cJlulas Due se multiplican no cambian de localiIacinH tras mucEos ciclos reproducti>osB cada bacteria indi>idual ?enera por escisin binaria una colonia macroscpica compuesta por decenas de millones de cJlulas similares a la ori?inal. Si esta colonia indi>idual se siembra a su >eI en un nue>o medio crecer como culti>o puro de un solo tipo de bacteria. -as tJcnicas de culti>o >aran se?Kn el tipo de anlisisH se conoce como inoculo a una porcin de muestraB Due se lle>a o acarrea al medio de culti>oB este crece F se desarrolla formando una coloniaB Due es producida por una sola bacteriaH -a tJcnica de estra es utiliIada en culti>os clnicos F alimentosB se utiliIa en caGas de petri o tubosB en un medio slidoB la finalidad de esta tJcnica es separar coloniasB la siembra se realiIa con un asa bacteriol?ica circularB F entre cada estra se esteriliIa el asa bacteriol?ica. -a tJcnica de picaduraB se realiIa con un asa de a?uGaB en un tubo de ensaFe con un medio solid o semislidoB consiste en introducir el a?uGa para picar el a?arB mas o menos 2cm antes del fondo. -a tJcnica de ?otaB se realiIa en una caGa de petri con un medio slidoB consiste en tomar con una pipeta estJril una muestraB de entre .23 a .3mlB esta se coloca en el centro de la caGa de petri F se esparce con una >arilla de >idrio pre>iamente doblada en escuadraB sobre el a?ar. <./ EL AGUA CO)O TRANS)ISOR DE EN1ER)EDADES Como menciona el autor 6our?eois en su obra M%/)'!%'+'50* A+%;#($*)0* V'+.2 eNisten mucEas bacterias F Eon?os asociados con plantas F animales acuticos. &l?unos de los cuales 25 son pat?enos para los peces F anfibios. Por eGemploB M?/'!*/$#)%6; ;*)%(6; es un pat?eno de pecesB pero ocasionalmenteB causa lesiones en la piel de los nadadores. Con el a?ua dulceB las enfermedades lle?an de manera diferenteB Fa se a por contacto con un contaminante o desecEo or?nico. Por eGemploB las bacterias se multiplican en el tracto intestinal F son descar?adas en los sistemas de a?uas ne?rasB siendo estas las Due tienen maFor posibilidad de infectar a otra persona por medio del a?ua dulce. Para Due esto se realiceB las bacterias deben de ser capaces de sobre>i>ir en el a?ua por lo menos durante un mnimo de tiempo. #s por esto Due se dice Due el a?ua actKa como transmisor de enfermedadesB Fa Due inter>iene como medio de transporte de las mismasB esto ocurre principalmente en comunidades de escasos recursosB en las Due no se cuenta con sistema de drenaGe F alcantarillado. GM#-/+# R C.M, 2HSKJ <.2- BACTERIAS DEL AGUA $odas las a?uas dulcesB naturales o saladasB tienen una poblacin especifica de bacterias adaptadas al medio ambienteB >i>iendo F reproduciJndose. -as bacterias del a?ua incluFen a mucEos ?JnerosB >arios de ellos muF interesantes tanto morfol?ica como fisiol?icamente. -a cantidad de bacterias Due >i>e suspendida en el a?ua es mucEo menor Due la Due Eabita en los lodos sedimentariosB arena o piedrasB partculas de limo suspendidasB F en las superficies sumer?idas de las plantas acuticas. #n ?eneralB el nKmero de bacterias del a?ua es suficientemente peDueOo para ser inconspicuo F ms aunB la maFora de ellas no crecer en los medios utiliIados para eNaminar la calidad sanitaria del a?ua. #l nKmero de bacterias oscila desde unas cuantas por mililitro Easta un orden de ele>ada ma?nitud. -as cuentas altas son el resultado de la presencia de otro tipo de materia or?nicaB como los florecimientos masi>os de al?as sobre un la?oB ?ranos de polen esparcidos por el >ientoB la descar?a de a?uas ne?rasB etc. -a accin de >arios tipos de bacterias del a?uaB se puede manifestar en la corrosin de atarGeas de concretoB tuberas F coneNiones de las lneas de conduccinB en el metal de los barcos F en los tanDues de deposito. &unDue de cualDuier maneraB las bacterias del a?ua son importantes en la desaparicin o en la reduccin de la materia or?nica. GM#-/+# R C.M, 2HSKJ <.2.3 COLIFORMES Como Fa se menciono anteriormenteB los coliformes son una familia de bacterias Due se encuentran comKnmente en las plantasB el suelo F los animalesB incluFendo a los Eumanos. #l ?rupo de bacterias coliformes incluFe a las aerbicas F a las anaerbicas facultati>asB bacilos %ram ne?ati>os no esporulados Due fermentan la lactosa con formacin de ?as despuJs 27 de 18Er de incubacin a 3CC. -a presencia de bacterias coliformes en el suministro de a?ua es un indicio de Due el suministro de a?ua puede estar contaminado con a?uas ne?ras u otro tipo de desecEos en descomposicin. %eneralmenteB las bacterias coliformes se encuentran en maFor abundancia en la capa superficial del a?ua o en los sedimentos del fondo. -os /'+%1');#- 1#/*+#-B Due se encuentran en los intestinos de los Eumanos F otros animales de san?re calienteB son un tipo de bacterias coliformes. -a presencia de coliformes fecales en un suministro de a?ua es un buen indicador de Due las a?uas ne?ras Ean contaminado el a?ua. Se pueden Eacer pruebas especficamente para coliformes fecales o para el total de bacterias coliformes Due incluFe todos los tipos de bacterias coliformes F Due puede indicar contaminacin fecal. -os ni>eles recomendados de bacterias coliformes fecales son* o &?ua Potable* menos de < colonias por 1<< ml de la muestra de a?ua o !atacin* menos de 2<< colonias por 1<< ml de la muestra de a?ua o !a>e?arRPescar* menos de 1B<<< colonias por 1<< ml de la muestra de a?ua P'iaIB 1977Q <.2.7.- BACTERIAS TILES EN EL AGUA -as bacterias del a?ua forman una parte esencial del ecosistema total de la $ierraB as como en los ciclos ms peDueOos Due se >erifican en las poIas o los arroFos. 'ebemos tener en cuenta Due la maFor parte de la superficie terrestre esta cubierta por a?uaH la maFora de los animalesB con eNcepcin de los insectosB >i>en en el a?uaH una ?ran parte de los >e?etales >i>en en el a?uaH F la maFor proporcin de la acti>idad fotosintJtica se realiIa en el a?ua. 'e estos EecEosB es claro F ob>io Due el ?rueso de los procesos de?radati>os Due in>olucran a los ciclos de los principales elementosB tambiJn se lle>an a cabo en los ambientes acuticos. 0n eGemplo de la accin de las bacterias Ktiles en el a?uaB es el si?uiente* #l petrleoB Due se escapa de los poIos defectuosos situados cerca de las plaFas o de los barcos EundidosB se oNidar a diNido de carbono F a?ua por accin de las bacterias. #s por esto por lo Due se debe de tener en cuenta Due no todas las bacterias Due se encuentran en el a?ua son daOinas. GM#-/+# R B'6)5#'%-, 2HSKJ <.3 ENFERMEDADES CAUSADAS POR EL AGUA. #n la actualidad eNisten pocas enfermedades Due se transmiten a tra>Js del a?ua. -as principales son* * -a Fiebre $ifoidea* Causada por la S*+;'(#++* $@?.@%. 28 * -as Fiebres Paratifoideas* Que pueden resultar de infecciones producidas por S.-/@'$$;6#++#)%B u otras especies de este ?eneroB estos atacan principalmente al tracto intestinalB pero tambiJn pueden in>adir la corriente san?unea F esparcirse Eacia otras partes de l cuerpo. * -as 'isenteras 6acilares* Producido por la S@%5#++* 4?-#($#)%*#, Due pro>oca una inflamacin intestinal. * -as 'isenteras &mibianas* Producidas por la E($*;'#!* @%-$'+?$%/*B un protoIoario pat?enoB Due se encuentra rara >eI en este pas. * Clera &sitico* Causado por el V%!)%' /@'+#)*#B la enfermedad es el resultado de una falta de sanidad F ocasiona una diarrea muF fuerte as como un daOo en la mucosa intestinal. * $ularemia* Causada por F)*(/%-#++* $6+*)#(-%-B es transmitido al Eombre por la picadura de al?unas moscasB mosDuitos o ?arrapatasB o al maneGar animales infectados como coneGos o ardillas. Sin embar?oB este microor?anismo Ea sido aislado de corrientes de a?ua Due contenan cad>eres de castores o de ratones almiIcleros. * :epatitis* #s la inflamacin a?uda del E?adoB F puede ser producida por una infeccinB Eabitualmente >iral. GM#-/+# R B'6)5#'%-, 2HSKJ =./ 2URI1ICACIN DE LAS AGUAS 2OTABLES #n la actualidad se Ean desarrollado >arios mJtodos para purificar el a?uaH los de eleccin dependern de la clase de fuente de abastecimiento Due se trate. #n al?unas localidadesB el a?ua puede tener tan buena calidad Due tan solo la desinfeccin es suficienteB mientras Due en otras comunidadesB el a?ua debe de pasar por >arios procesos antes de Due su apariencia F su sabor sean a?radables F se le considere como potable. & continuacin se describirn solo al?unos de los mJtodos. GY'T6(, 2HIHJ D.2.- POZAS DE COAGULACIN Y SEDIMENTACIN 29 #ste proceso es obli?atorioB en especialB en donde el apro>isionamiento de a?ua pro>iene de ros muF lar?os Due atra>iesan reas muF contaminadas. -os detalles del proceso son >ariablesB de acuerdo con las condiciones locales. #l a?ua fluFe Eacia un ?ran estanDue o poIa en donde se localiIan los retenes colocados en sitios estratJ?icosB es decirB en la entradaB con el fin de disminuir la >elocidad del fluGo F en otros puntos cla>e para pre>enir una anomala. &l lle?ar el a?ua a la poIaB se a?re?a un a?ente coa?ulante con el fin de Duitar el material fino Due se encuentra suspendidoB con el obGeto de aclarar el a?ua. #l coa?ulante F el a?ua se a?itan >iolentamente F entonces se a?re?a el floculante para sedimentar. -os coa?ulantes inor?nicos Due se utiliIan son el alumbreB aluminato de sodioB silicato coloidal F bentonita. #n reas donde el a?ua tiene un color F sabor desa?radableB se puede utiliIar el carbn acti>ado con el fin de adsorber dicEas propiedades. D.3.- FILTROS DE ARENA LENTOS 'es de el punto de >ista EistricoB dicEos filtros Ean ser>ido para propsitos KtilesB pero en la actualidad muF pocos se encuentran operandoB fundamentalmente porDue se reDuieren ?randes reas F el promedio de >arios millones de ?alones por acre por da es muF lenta en relacin con la demanda de mucEas comunidades. D.3.2.- FILTROS DE ARENA RPIDOS 'epende de la ?ra>edad F se construFe sobre un piso de concretoB consiste en tuberas cubiertas con capas de ?ra>a ?ruesaB ?ra>a ms finaB arena ?ruesa F despuJs una capa de arena fina. 'urante la operacinB el a?ua a la cual se le Ea a?re?ado un coa?ulanteB se bombea Easta el filtroB formndose rpidamente una del?ada pelcula ?elatinosa de este material flocKlate sobre la superficie F en las 2 o pul?adas eNteriores en la capa de arena. -as bacterias F otras partculas peDueOas Duedan atrapadas en esta capa. #l filtro termina por taparse con la acumulacin del material F por lo tanto pierde eficiencia. #sto se arre?la in>irtiendo el fluGo de del a?uaB de tal manera Due esta sobresal?a a tra>Js del filtro F se la>e el material acumulado. & continuacin de este proceso de limpieIaB el filtro esta listo para >ol>er a usarse. D.7.- FILTROS QUE TRABAAN CON PRESIN Son similares a los filtros rpidos Due accionan por medio de la ?ra>edadB en su estructura ?eneralB solo Due trabaGan en donde el abastecimiento de a?ua se realiIa a presin. 0n filtro de presin es un cilindro de acero sellado Due contiene material ?ranuloso. #l a?ua por filtrar penetra en la parte superior del tanDueB se difunde Eacia abaGo a tra>Js de una capa de filtro F drena en la porcin baGa. < (casionalmente se in>ierte el fluGo para la>ar el filtro F Duitar los residuos acumulados en el. #n al?unas condiciones se debe meIclar el a?ua con un coa?ulante antes de filtrarla. #ste tipo de filtro se utiliIa para tratar el a?ua de las piscinasB as como para separar impureIas como tierraB turbideIB EierroB aceite F colorantes. D.9.- DESINFECCIN 'espuJs Due las a?uas ne?ras Ean sido tratadas Dumicamente F filtradasB se almacenan en tanDues o reser>orios F se desinfectan antes Due se destinen al consumidor. #ste paso es necesario para ser de uso aceptable o para acarrearse a tra>Js de los estados. -as soluciones a base de calcio o Eipoclorito de sodio Ean mostrado ser efecti>as para el tratamiento de las a?uas en los pueblos peDueOosB en cisternas de abastecimiento F en piscinas. #n la actualidadB el cloro F las cloraminas son las Due mas se usanB este debe de maneGarse con cuidadoB Fa Due es eNtremadamente tNico en ?randes dosisB debe de ser meIclado rpidamente con el a?uaB F debe de estar en contacto con esta por lo menos durante 2< minutos. -a dosis adecuada de cloro aplicable al a?ua >aria de acuerdo con la naturaleIa de la mismaB el p: F la temperaturaB un mnimo deseable de cloro libre residual de <.<3 a <.1< m?RltB debe encontrarse en los puntos distantes del sistema de distribucinH se recomienda Due eNista una concentracin de 1.< a 2.< m?Rlt de cloramina residual en las a?uas tratadas. #l Eer>ir el a?ua puede ser un tratamiento muF efecti>o si solo se reDuiere de un peDueOo >olumen. PROGRAMA II, ,./ DE1INICIN DE DRENA0E Se define como drenaGeB cloacas o red de saneamientoB en in?eniera F urbanismoB al sistema de tuberasB sumideros o trampasB con sus coneNionesB Due permiten el desaloGo de lDuidosB ?eneralmente plu>ialesB de una poblacin. GU%T%.#4%* +* #(/%/+'.#4%* +%!)#, 3KKIJ 2.3.- TIPOS DE DRENAE 1 Para la elaboracin de un drenaGe se debe de tener en cuenta DueB eNisten dos tipos diferentes de drenaGeB los cualesB cumplen con distintas necesidades F ser>icios. & continuacin se Eablara de estos dos tipos de drenaGes de manera bre>e. 2.3.2.- DRENAE SANITARIO Se llama drenaGe sanitario al Due transporta los desecEos lDuidos de casasB comercios F fbricas no contaminantes. #n al?unas ciudades son diri?idos a plantas depuradoras para su potabiliIacin F reutiliIacin. 2.3.3.- DRENAE PLUVIAL Se conoce como drenaGe plu>ial al Due conduce el a?ua de llu>ia a lu?ares donde se or?aniIa su apro>ecEamiento. #n mucEas localidades no se realiIa la diferenciacin entre drenaGe sanitario F plu>ial F todo el material recolectado es concentrado al mismo destino. 2.7.- FUNCIONAMIENTO #l drenaGe funciona ?racias a la ?ra>edad. -as tuberas se conectan en n?ulo descendenteB desde el interior de los predios a la red municipalB desde el centro de la comunidad Eacia el eNterior de la misma. Cada cierta distancia se perforan poIos de re?istro >erticales para permitir el acceso a la red con fines de mantenimiento. #n el caso del drenaGe plu>ialB en el pa>imento de las calles se establecen alcantarillasB conectadas directamente a la tubera principalB para captar el a?ua de llu>ia. 2.9.- PELIGROS Puesto Due los sistemas de drenaGe permiten el desaloGo de desecEos domJsticos F comerciales sin controlB es posible Due se contaminen con materiales peli?rosos F Easta tNicos. !ormalmente en peDueOas cantidadesB no representan un peli?ro a corto plaIo. 2.<.- ESPECIFICACIONES PARA LA CONSTRUCCIN DE SISTEMAS DE DRENAE
Para Due se lle>e a cabo la construccin de un sistema de drenaGeB este debe de cumplir con ciertas especificacionesB las cuales se describirn a continuacinB de manera bre>e* 2 * Perodo de Planeamiento* #l )e?lamento de a?ua potable F saneamiento bsicoB recomienda periodos de diseOo de acuerdo con el !i>el de CompleGidad de la Iona donde se planea construir el sistema de drenaGeB es decir si el ni>el de compleGidad es 6aGo F medio se lle>ara 13 aOos su planeamientoB si el ni>el de compleGidad es medio alto se lle>ara 2< aOos F si el ni>el es alto se lle>ara 23 aOos su planeamiento. * 'imetros de las tuberas* #n cuanto a los dimetros mnimos de tuberasB el lmite mnimo debe ser de 2<<mm. P8XXQB aunDue en sistemas de compleGidad baGos se pueden utiliIar Easta 13<mm. P5XXQ. * "elocidades mnimas* 'eben ser superiores a los <.13 mRs para e>itar la acumulacin de sedimentos en las tuberasB aunDue puede lle?ar a ser <.1mRs en sistemas simplificados. * #sfuerIos mNimos en tuberas* !o deben ser superiores a 1.3Pa F 1Pa en sistemas simplificados. * %eneracin de sulfuros* &l descomponerseB la materia or?nica produce entre otrosB acido sulfEdrico P:2SQ F acido sulfKrico P:2S(1Q. -a accin corrosi>a de ambos compuestosB deteriora las paredes de las tuberasB causando infiltraciones F fu?as. Z Y PDBO3QP1.<7Q P T Z [ 2<QS P [ <.3QQ P [ 1 R QPP R PQ 'onde '6(3 es la demanda biol?ica de oNi?eno a los 3 dasB es decirB la cantidad de oNi?eno Due se necesita para descomponer la materia or?nica. GY'T6(, 2HIHJ 9./ DE1INICIN DE ALCANTARILLADO Se denomina alcantarillado o red de alcantarillado al sistema de estructuras F tuberas usados para el transporte de a?uas ser>idas Palcantarillado sanitarioQB o a?uas de llu>iaB Palcantarillado plu>ialQ desde el lu?ar en Due se ?eneran Easta el sitio en Due se disponen o tratan. $oda>a eNisten en funcionamiento redes de alcantarillado miNtoB es decirB Due Guntan las a?uas ne?ras F las a?uas de llu>ia Psistemas unitariosQ. #ste tipo de alcantarillado es necesario en Ionas secas F con Jpocas de escasa plu>iosidadB puesto Due los sistemas de
plu>iales no usadosB pueden con>ertirse en un foco de infecciones. Cierto Due eNiste la
posibilidad de poner en las cabeceras de los arcas de descar?aB DueB cada cierto tiempoB descar?an una cierta cantidad de a?ua para limpiar los conductosB pero es un ?asto Due mucEas Ionas no se pueden permitir precisamente por falta de a?ua F por ser ms necesario en las estaciones secas. -as redes de alcantarillado son estructuras Eidrulicas Due funcionan a presin atmosfJrica. Slo muF raramenteB F por tramos bre>esB estn constituidos por tuberas Due trabaGan baGo presin. !ormalmente son canales de seccin circularB o>alB o compuestaB enterrados la maFora de las >eces baGo las >as pKblicas. -a red de alcantarillado es considerada un ser>icio bsicoB sin embar?o la cobertura de estas redes en las ciudades de pases en desarrollo es nfima en relacin con la cobertura de las redes de a?ua potable. #sto ?enera importantes problemas sanitarios. 'urante mucEo tiempoB la preocupacin de las autoridades municipales o departamentales estaba ms ocupada en construir redes de a?ua potableB deGando para un futuro indefinido la construccin de las redes de alcantarillado. &ctualmente las redes de alcantarillado son un reDuisito para aprobar la construccin de nue>as urbaniIaciones. GU%T%.#4%* +* #(/%/+'.#4%* +%!)#, 3KKSJ 3.2.- COMPONENTES DE UNA RED DE ALCANTARILLADO SANITARIO -os componentes de una red de alcantarillado sanitario son* * Colectores terciarios* Son tuberas de peDueOo dimetro P13< a 23< mm de dimetro internoB Due pueden estar colocados debaGo de las >eredasB a los cuales se conectan las acometidas domiciliares. * Colectores secundarios* Son las tuberas Due reco?en las a?uas de los terciarios F los conducen a los colectores principales. Se sitKan enterradasB en las >as pKblicas. * Colectores principales* Son tuberas de ?ran dimetroB situadas ?eneralmente en las partes ms baGas de las ciudadesB F transportan las a?uas ser>idas Easta su destino final. * PoIos de inspeccin* Son cmaras >erticales Due permiten el acceso a los colectoresB para facilitar su mantenimiento. * ConeNiones domiciliares* Son peDueOas cmarasB de Eormi?nB ladrillo o plstico Due conectan el alcantarillado pri>adoB interior a la propiedadB con el pKblicoB en las >as. * #staciones de bombeo* Como la red de alcantarillado trabaGa por ?ra>edadB para funcionar correctamente las tuberas deben tener una cierta pendienteB calculada para ?arantiIar al a?ua una >elocidad mnima Due no permita la sedimentacin de los materiales slidos 1 transportados. #n ciudades con topo?rafa planaB los colectores pueden lle?ar a tener profundidades superiores a 1 / 5 mB lo Due Eace difcil F costosa su construccin F complicado su mantenimiento. #n estos casos puede ser con>eniente intercalar en la red estaciones de bombeoB Due permiten ele>ar el a?ua ser>ida a una cota prNima a la cota de la >a. * -neas de impulsin* $ubera en presin Due se inicia en una estacin de bombeo F se concluFe en otro colector o en la estacin de tratamiento. * #stacin de tratamiento de las a?uas usadas o #stacin 'epuradora de &?uas )esiduales P#'&)Q* #Nisten >arios tipos de estaciones de tratamientoB Due por la calidad del a?ua a la salida de la misma se clasifican en* estaciones de tratamiento primarioB secundario o terciario. * "ertido final de las a?uas tratadas* el >ertido final del a?ua tratada puede ser* -le>ada a un ro o arroFoH "ertida al mar en proNimidad de la costaH "ertida al mar mediante un emisario submarinoB lle>ndola a >arias centenas de metros de la costaH )eutiliIada para rie?o F otros menesteres apropiados. 3.7.- COMPONENTES DE UNA RED DE ALCANTARILLADO PLUVIAL -os componentes de una red de alcantarillado plu>ial son* * Cunetas* -as cunetas reco?en F concentran las a?uas plu>iales de las >as F de los terrenos colindantes. * 6ocas de tormenta Pimbornales o tra?antesQ* Son estructuras >erticales Due permiten la entrada del a?ua de llu>ia a los colectoresB reteniendo parte importante del material slido transportado. * Colectores secundarios* Son las tuberas Due reco?en las a?uas de llu>ia desde las bocas de tormenta Pimbornales o tra?antesQ F las conducen a los colectores principales. Se sitKan enterradasB baGo las >as pKblicas. * Colectores principales* Son tuberas de ?ran dimetroB conductos de seccin rectan?ular o canales abiertosB situados ?eneralmente en las partes ms baGas de las ciudadesB F transportan las a?uas ser>idas Easta su destino final. * PoIos de inspeccin Pde re?istroB Cmaras de inspeccinQ* Son cmaras >erticales Due permiten el acceso a los colectoresB para facilitar su mantenimiento. 3 * ,reas de eNpansin* #stas estructuras se utiliIan raramenteB en casos crticosB donde es necesario laminar las ondas de a>enidas. * "ertido final de las a?uas de llu>ia* Son estructuras destinadas a e>itar la erosin en los puntos en Due las a?uas de llu>ia reco?idas se >ierten en cauces naturales de rosB arroFos o mares. & >eces se utiliIan poIos de tormentas. Son ?randes depsitos pre>istos para cuando llue>e abundantemente. 3./ SANEA)IENTO Y ABASTECI)IENTO DEL AGUA Para llenar los reDuerimientos modernos de calidadB los abastecimientos deben ser saludables F de buen saborB atributos Due >an entrelaIados. Si el a?ua no atrae los a los sentidos de la >istaB ?usto F olfatoB la ?ente e>itar F beber cantidades insuficientes para satisfacer las necesidades fisiol?icas. Para ser saludableB el a?ua debe de estar libre de or?anismos causantes de enfermedadesB sustancias >enenosas F cantidades eNcesi>as de materia mineral F or?nica. Para tener un sabor a?radableB debe de carecer en especial de colorB turbideIB sabor F olorH poseer una temperatura moderada en >erano e in>ierno F estar bien aireada. GY'T6(, 2HIHJ 7.2.- CONTROL DE CALIDAD DEL AGUA #l control de calidad del a?ua inter>iene en todas las fases de la administracin tJcnica de las obras Eidrulicas. Se inicia con la preparacinB super>isin F mantenimiento de las reas de captacin de las fuentes abastecedorasB continua a tra>Js de los ductosB plantas de purificacin F sistemas de distribucinH alcanIa Easta los accesorios domJsticos F eDuipos de manufactura a los Due se suministra el a?ua. Cada seccin de las obras tiene sus problemas de control propiosH para todas ellasB el precio de la se?uridad es una >i?ilancia permanente. 7.3.- FUENTE DE ABASTECIMIENTO 0n a?ua limpia por naturaleIaB pro>iene eNclusi>amente de una fuente o cuenca limpia. Por lo Due los diri?entes de las obras Eidrulicas deben de conocer profundamente el rea de 5 captacin de su abastecimientoB as como si eNisten corrientes F la?os eNtensos u obras subterrneas de suministroB con alcance de la cuenca. -as cuencas debern >isitarse en todas las estaciones del aOo F baGo todas las condiciones de clima. Solo de esta manera se puede tener un control sobre la calidad del a?ua. VII./ HI2TESIS & continuacin se enuncian las EiptesisB las cuales se eNaminaran con esta in>esti?acinB as como el tipo de conGetura de la Due se Eabla* :1* -a contaminacin del a?ua en los alGibes F depsitos de a?ua de la escuela secundaria !C18 es propiciadaB por la falta de mantenimiento en ellos. U #sta Eiptesis es de causalidadB Fa Due establece relacin de causa F efectoB entre las >ariables. :2* & maFor falta de mantenimiento en alGibes F tinacosB maFor poblacin microbiana. U #sta Eiptesis es correlacionalB Fa Due especifica las relaciones entre las >ariables. :* -os alumnos de la secundaria !C18B Due consumen a?ua de los bebederos de la institucinB tienen mas probabilidad de presentar enfermedades intestinales debido a la presencia de coliformes totales FRo fecales. U #sta Eiptesis es de causalidadB Fa Due establece relacin de causa F efectoB entre las >ariables. 7 VIII./ )ETODOLOG>A Para lo?rar raIonar meGor esta in>esti?acin es necesario deGar bien definidas e identificas las >ariables* I4#($%1%/*/%>( 4# +*- &*)%*!+#-,
Independiente* -os Microor?anismosB Fa Due estos se pueden cuantificar PmedirQ F los resultados de los anlisis Due indican su presenciaB influFen en la >ariable dependiente. 'ependiente* #l a?uaB puesto Due los resultados de los anlisis Due indican la presencia de los microor?anismos PDue son la >ariable independienteQB influFen en la calidad del a?ua. &Eora Due se Ean identificado las >ariables dependiente e independienteB es con>eniente definir las >ariables de manera operacional* * &%0&* Se determinaran sus propiedades mediante anlisis Due se realiIaran en el laboratorio F se comparan los resultados con los establecidos en la !(M/18</ SS&1/1998 Due Eabla sobre la Salud ambiental* &?ua para uso F consumo EumanoB )eDuisitos sanitarios. * MIC)(()%&!ISM(* Se realiIaran anlisis microbiol?icosB para identificar bacterias en el a?uaB F los resultados se confrontaran con los establecidos en la !(M/127/ SS&1/1991B Due Eabla sobre la Salud ambientalB a?ua para uso F consumo Eumano/-mites permisibles de calidad F tratamientos a Due debe someterse el a?ua para su potabiliIacin. Para poder lo?rar los obGeti>os de esta in>esti?acinB se utiliIaran tJcnicas establecidas en la NOM-37K-SSA2-3KK3B PSalud ambiental. &?ua para uso F consumo Eumano. )eDuisitos sanitarios Due se deben cumplir en los sistemas de abastecimiento pKblicos F pri>ados durante el maneGo del a?ua. Procedimientos sanitarios para el muestreoQ para la toma de muestrasB as colmo las tJcnicas establecidas en la NOM-223-SSA2-2HH9 P6ienes F ser>icios.'eterminacion de bacterias coliformesQ para la identificacin de coliformes totales F fecalesB F la !(M/127/ SS&1/1991PSalud ambientalB a?ua para uso F consumo Eumano/-mites permisibles de calidad F tratamientos a Due debe someterse el a?ua para su potabiliIacin.Q la cual contiene los ndices permisibles de contaminantes en a?ua. 8 VIII. I.-TIPO DE ESTUDIO Y DISEO GENERAL Se considera Due esta in>esti?acin es de naturaleIa* #Nperimental* Ma Due se conto con la manipulacin intencional de una accin para analiIar sus posibles resultadosB dado Due al realiIar los &nlisis Microbiol?icos en el laboratorio del C6$is 9B se compararon los resultados obtenidos con los ran?os permisibles de contaminantes establecidos en la !(M/127/SS&1/ 1991PSalud ambientalB a?ua para uso F consumo Eumano/-mites permisibles de calidad F tratamientos a Due debe someterse el a?ua para su potabiliIacinQ mencionada anteriormente. M ala >eI al ser de naturaleIa eNperimentalB es de tipo* #Nperimental Puro* PorDue reKne los dos reDuisitos para lo?rar el control F la >alideI interna. P1./ %rupos de comparacinB 2./ #Dui>alencia de los ?rupos.Q Se considera Due esta in>esti?acin es >iableB puesto Due se dispuso con los recursos necesarios para lle>arla a caboB la realiIacin de los anlisis del a?ua no reDuiri de mucEo tiempoB es factibleB porDue se conto con un laboratorioB material F reacti>os necesariosB los conocimientos para realiIar el muestreo F las pruebas en el laboratorioB as mismo se conto con el permiso del subdirector de la institucinB Due tiene por nombre* #scuela Secundaria %eneral !C18 Con?reso de CEilpancin?oB antes mencionadaB para realiIar la toma de muestras. #sta in>esti?acin se consi?ui realiIarB Fa Due se conto con el conocimiento a fondo de los fundamentos F utensilios de laboratorioB F se >erifico Due en la institucin antes mencionada no se EaFan lle>ado a cabo in>esti?aciones de esta ndole. 9 VIII. II.- DEFINICIN OPERACIONAL DE LAS VARIABLES Para poder definir de manera operacional las >ariables antes mencionadasB se considera necesario puntualiIarlas de manera conceptualB para poder comprender meGor la operacionaliIacion de las >ariables* * &%0&* & ?randes ras?os es una sustancia cuFas molJculas estn formadas por la combinacin de un tomo de oN?eno F dos de Eidr?enoB lDuidaB inodoraB inspida e incolora. #s el componente ms abundante de la superficie terrestre FB ms o menos puroB forma la llu>iaB las fuentesB los ros F los maresH es parte constituFente de todos los or?anismos >i>os F aparece en compuestos naturales. * MIC)(()%&!ISM(* ser >i>o Due slo se puede obser>ar utiliIando microscopios pticos o electrnicos. -os microor?anismos se clasifican en tres de los cinco reinos. -as bacterias F cianobacterias Po al?as >erdeaIuladasQ pertenecen al reino Mneras. Son or?anismos con cJlulas procariticasB presentan una ?ran >ariedad de formas de >idaB EaF bacterias fotosintJticasB DuimiosintJticas F Eetertrofas. Sstas pueden ser saprofitasB descomponedoras o pat?enasB #n el reino Protistas se incluFen a or?anismos eucariotas. Son microor?anismos protistas* los protoIoos unicelularesB las al?as unicelulares F al?unas pluricelulares. Ciertos Eon?osB incluidas las le>adurasB son microor?anismos Due pertenecen al reino :on?os. -os >irus son un tipo de microor?anismo peculiar. !o tienen metabolismo F son parsitos intracelulares Due causan un ?ran nKmero de enfermedades. Ma Due se tiene un concepto claro F conciso de las >ariablesB es Ktil definirlas de manera operacionalB para indicar la manera en Due se cuantificara cada >ariable* * &%0&* Se determinaran sus propiedades mediante anlisis Due se realiIaran en el laboratorio F se comparan los resultados con los establecidos en la !(M/18</ SS&1/1998 Due Eabla sobre la Salud ambiental* &?ua para uso F consumo EumanoB )eDuisitos sanitarios. * MIC)(()%&!ISM(* Se realiIaran anlisis microbiol?icosB para identificar bacterias en el a?uaB F los resultados se confrontaran con los establecidos en la !(M/127/ SS&1/1991B Due Eabla sobre la Salud ambientalB a?ua para uso F consumo Eumano/-mites permisibles de calidad F tratamientos a Due debe someterse el a?ua para su potabiliIacin. 1< VIII. III.- UNIVERSO DE ESTUDIO, SELECCIN Y TAMAO DE LA MUESTRA, UNIDAD DE ANLISIS Y OBSERVACIN Criterios de inclusin F eNclusin* -a muestra Due se utiliIo en esta in>esti?acin fue !( P)(6&6I-;S$IC& ( 'I)I%I'&B Fa Due se tomo una muestra de a?ua de la institucin Due lle>a por nombre* #scuela Secundaria %eneral !C18 Con?reso de CEilpancin?oB la cual cumpli con las si?uientes especificaciones* #l a?ua fue tomada de tinacosB bebederosB ?rifos F de las lla>es de los la>abos. 'e cada lu?arB se tomaron 2<<ml de a?uaB F de esta se tomaron 1<<ml de a?ua para aplicar la tJcnica para la deteccin de coliformes totales F fecales en el laboratorio. #l tipo de la muestraB de a?ua fue de sondeoB es decir fue tomada en un lu?ar F en un tiempo determinado. #stos criterios Ean sido establecidos baGo la decisin F criterios del in>esti?ador F se conto con las tJcnicas bacteriol?icas de laboratorio establecidas para el anlisis de las muestras de a?ua de la escuela secundaria !C18B las cuales son* $Jcnica bacteriol?ica para la determinacin de coliformes totales. $Jcnica bacteriol?ica para la determinacin de coliformes fecales. Para cada tJcnica se utiliIaran 1<<ml de la muestra de a?ua. &l realiIar la toma de la muestra de a?uaB se tomo en cuenta lo si?uiente* &l tomar la muestra a?ua del tinaco se enGua?o el embase con el a?ua del tinaco >eces F se deGo una espacio entre la muestra de a?ua de 2<<mlB F la tapa del embase. &l tomar la muestra de a?ua de la lla>e de los la>abos F de los ?rifos se deGo caer el a?ua unos se?undos F se tomo la muestra de a?uaB la cual fue de 2<<ml. -os embases donde se coloco la muestra de a?uaB fueron de >idrio con tapn esmeriladoB estJriles con capacidad de un litro. Para la identificacin de las muestras de a?uaB se etiDuetaron los frascos con la si?uiente informacin* 11 !Kmero de control para identificar la muestra de a?uaB independientemente del nKmero de re?istro del laboratorio. *FecEa F Eora del muestreo en tinacosB lla>es de la>abosB ?rifos F bebederos. Para el control de la muestra de a?ua debe lle>arse un re?istro en formato establecido pre>iamente con los datos anotados en la etiDueta del frasco o en>aseB as como la si?uiente informacin* Identificacin del punto o sitio del muestreoB es decir se deber de especificar si pro>iene de la lla>e de los la>abosB ?rifoB bebedero o tinaco. $emperatura de la muestra de a?ua. p: de la muestra de a?ua. $ipo de anlisis o tJcnica a efectuar en la muestra de a?uaB la cual puede ser* tJcnica bacteriol?ica para la deteccin de coliformes totales en el a?ua o tJcnica bacteriol?ica para la deteccin de coliformes fecales. !ombre de la persona Due realiI el muestreo. -os sellos de los embases deben de ser de plstico o adEeribles. #l muestreador deber de contar con una bitcoraB Due conten?a los datos de las etiDuetas !0M#)( '# C(!$)(- M0#S$)& C&!$I'&' <<1 $inaco 2<<ml <<2 -la>e de la>abo 2<<ml << 6ebedero 2<<ml <<1 %rifo 2<<ml F#C:& M :()& '#- M0#S$)#( 1 de MaFo del 2<<8 R 11*13am 12 VIII. IV.- PROCEDIMIENTOS PARA LA RECOLECCIN DE INFORMACIN, INSTRUMENTOS A UTILIZAR Y MTODOS PARA EL CONTROL Y CALIDAD DE LOS DATOS Para lle>ar a cabo la recoleccin de datos de esta in>esti?acinB se realiIaran tJcnicas bacteriol?icas de laboratorio para el anlisis de las poblaciones microbianas presentes en el a?ua de la escuela secundaria !C18. & continuacin se citaran estas tJcnicas con el fin de dar a conocer los obGeti>osB fundamentos F materiales de las tJcnicasB indicados en la NOM-223-SSA2-2HH9. *$Jcnica bacteriol?ica para la determinacin de coliformes totales F fecales* OBETIVO, 'eterminar si EaF presencia coliformes fecales F totales en el a?ua para el consumo Eumano. FUNDAMENTO, #l mJtodo se basa en Due las bacterias coliformesB fermentan la lactosa incubadas a 3 \ 1CC durante 21 a 18 EorasB resultando una produccin de cidos F ?as el cual se manifiesta en las campanas de fermentacin. MATERIAL, Pipetas bacteriol?icas para distribuir 2<mlB con tapn de al?odn. -as pipetas pueden ser ?raduadas en >olKmenes i?uales a una dJcima de su >olumen total. Frascos de >idrio de 23< ml con tapn de rosca. 0tensilios esteriliIables para la obtencin de muestras* cucEillosB pinIasB tiGerasB cucEarasB esptulasB etc. $ubos de culti>o 2< N 2<< mm F de 15 N 15< mm con tapones metlicos o de rosca. Campanas de fermentacin Ptubos de 'urEamQ. Pipetas bacteriol?icas ?raduadas de 1< F 1 ml. %radillas. &sa de platino o nicromel de aproNimadamente mm de dimetro. !C C(!$)(- M0#S$)& C&!$I'&' CC p: $SC!IC& <<1 $inaco 2<<ml 22CC 7.< Coliformes totales F fecales <<2 -la>e de la>abo 2<<ml 2<CC 7.2 Coliformes totales F fecales << 6ebedero 2<<ml 2CC 7.1 Coliformes totales F fecales <<1 %rifo 2<<ml 21CC 7. Coliformes totales F fecales M0#S$)#&'()* !oemi %onIaleI )o>elo. 1 $odo el material Due ten?a contacto con las muestras baGo estudio debe esteriliIarse mediante EornoB durante 2 Eoras a 17< a 173 CC o 1 E a 18< CC o autocla>eB durante 13 minutos como mnimo a 121 \ 1B< CC. #l material de >idrio puede sustituirse por material desecEable Due cumpla con las especificaciones deseadas. !o debe usarse material de >idrio daOado por las esteriliIaciones repetidas F Jste debe ser Dumicamente inerte.
MEDIOS DE CULTIVO, Caldo lauril/triptosa Pmedio de enriDuecimiento selecti>oQ. Caldo lactosa bilis >erde brillante Pmedio de confirmacinQ. Medio #C.Pdeterminacin de coliformes fecalesQ. IC./ 2LAN DE ANDLISIS DE LOS RESULTADOS IX. I.- MTODO Y MODELOS DE ANLISIS DE LOS DATOS SEGN EL TIPO DE VARIABLES & continuacin se indicaran las tJcnicas bacteriol?icas Due se utiliIaran para la determinacin de coliformes totales F fecales en las muestras de a?ua tomadas de la #scuela Secundaria %eneral !C 18 $SC!IC& 6&C$#)I(-2%IC& P&)& -& '#$#CCI2! '#- %)0P( C(-IF()M# #! #- &%0&B F#C&-#S M $($&-#S INTRODUCCIN, -os coliformes son una familia de bacterias Due se encuentran comKnmente en las plantasB el suelo F los animalesB incluFendo a los Eumanos. #l ?rupo de bacterias coliformes incluFe a las aerbicas F a las anaerbicas facultati>asB bacilos %ram ne?ati>os no esporulados Due fermentan la lactosa con formacin de ?as despuJs de 18Er de incubacin a 3CC. -a presencia de bacterias coliformes en el suministro de a?ua es un indicio de Due el suministro de a?ua puede estar contaminado con a?uas ne?ras u otro tipo de desecEos en descomposicin. %eneralmenteB las bacterias coliformes se encuentran en maFor abundancia en la capa superficial del a?ua o en los sedimentos del fondo. 11 -os /'+%1');#- 1#/*+#-B Due se encuentran en los intestinos de los Eumanos F otros animales de san?re calienteB son un tipo de bacterias coliformes. -a presencia de coliformes fecales en un suministro de a?ua es un buen indicador de Due las a?uas ne?ras Ean contaminado el a?ua. Se pueden Eacer pruebas especficamente para coliformes fecales o para el total de bacterias coliformes Due incluFe todos los tipos de bacterias coliformes F Due puede indicar contaminacin fecal. -os ni>eles recomendados de bacterias coliformes fecales son* o &?ua Potable* menos de < colonias por 1<< ml de la muestra de a?ua o !atacin* menos de 2<< colonias por 1<< ml de la muestra de a?ua o !a>e?arRPescar* menos de 1B<<< colonias por 1<< ml de la muestra de a?ua -a E-/@#)%/@%* /'+%, un miembro de este ?rupoB es un Eabitante normal del tracto intestinal de todos los seres >i>osB sanos F enfermos. OBETIVO, 'eterminar si EaF presencia de microor?anismos aerobios o coliformes fecales en el a?ua para el consumo Eumano. FUNDAMENTO, #l mJtodo se basa en Due las bacterias coliformesB fermentan la lactosa incubadas a 3 \ 1CC durante 21 a 18 EorasB resultando una produccin de cidos F ?as el cual se manifiesta en las campanas de fermentacin. MATERIAL, Pipetas bacteriol?icas para distribuir 1< mlB con tapn de al?odn. -as pipetas pueden ser ?raduadas en >olKmenes i?uales a una dJcima de su >olumen total. Frascos de >idrio de 23< ml con tapn de rosca. 0tensilios esteriliIables para la obtencin de muestras* cucEillosB pinIasB tiGerasB cucEarasB esptulasB etc. $ubos de culti>o 2< N 2<< mm F de 15 N 15< mm con tapones metlicos o de rosca. Campanas de fermentacin Ptubos de 'urEamQ. Pipetas bacteriol?icas ?raduadas de 1< F 1 ml. %radillas. &sa de platino o nicromel de aproNimadamente mm de dimetro.
13 $odo el material Due ten?a contacto con las muestras baGo estudio debe esteriliIarse mediante EornoB durante 2 Eoras a 17< a 173 CC o 1 E a 18< CC o autocla>eB durante 13 minutos como mnimo a 121 \ 1B< CC. #l material de >idrio puede sustituirse por material desecEable Due cumpla con las especificaciones deseadas. !o debe usarse material de >idrio daOado por las esteriliIaciones repetidas F Jste debe ser Dumicamente inerte.
REACTIVOS, Muestras de a?ua. MEDIOS DE CULTIVO, Caldo lauril/triptosa Pmedio de enriDuecimiento selecti>oQ. Caldo lactosa bilis >erde brillante Pmedio de confirmacinQ. Medio #C. FORMULA DE LOS MEDIOS DE CULTIVO, Caldo lauril/triptosa Pmedio de enriDuecimiento selecti>oQ* 6ase para la deteccin de or?anismos coliformes totales. Formula aproNimada para 1lt* $riptosa peptona]]]]]]]]] 2<? Fosfato di potsico]]]]]]]]. 2.73? -actosa]]]]]]]]]]]]... 3? Fosfato mono potsico]]]]]]] 2.73? Cloruro de sodio]]]]]]]]].. 3? -auril sulfato de sodio]]]]]]].. <.1? Instrucciones* / Suspenda 3.5?r del pol>o en 1lt de a?ua purificada. MeIcle bien. Caliente un poco para disol>er por completo. 'ispJnselo en tubos Due conten?an >iales de fermentacin in>ertidos Pcampanas de fermentacinQ. &utocla>e a 121CC durante 13min. #nfriJ el caldo tan pronto como sea posible. &Guste el p: final 5 \ <.2. Caldo lactosa bilis >erde brillante Pmedio de confirmacinQ P6%-6Q* 15 'eterminacin de coliformes totales de importancia sanitaria. Formula aproNimada para 1lt* Peptona de ?elatina]]]]]]]]].. 1< ? -actosa]]]]]]]]]]]]]]. 1< ? 6ilis de bueF desEidratada]]]]]]... 2< ? "erde brillante]]]]]]]]]......... <.<1 ? Instrucciones* / 'isol>er 1<?r del pol>o en 1lt de a?ua purificada. 'istribuir en tubos en porciones de 1<ml con campanas de fermentacin cuando la muestra sea de 1ml o menosB si la muestra a probar es de 1<mlB disol>er 5<? de pol>o en 1lt de a?ua purificada F distribuir en porciones de 2<ml en ambos casos esteriliIar a 121CC durante 12min. &Guste el p: final 7.2 \ <.2. Medio #C* 'eteccin de Coliformes Fecales. Formula aproNimada para 1lt* 'i?erido pancretico de casena]]]]]]].12 ? -actosa]]]]]]]]]]]]]]]]].3 ? Peptona de proteosa !]]]]]]]]]]....8 ? Sales biliares !]]]]]]]]]]]]]...1.3 ? Fosfato 'ipotasico]]]]]]]]]]]]]1.3 ? Fosfato monopotasico]]]]]]]]]]]...1.3 ? Cloruro de sodio]]]]]]]]]]]]]]3 ? Instrucciones* / Suspenda 7? del pol>o en 1lt de a?ua purificada F caliente li?eramente para disol>er completamente. 'ispJnselo en tubos Due conten?an campanas de fermentacin. &utocla>e a 121CC durante 13min. &Guste el p: final 5.9 \ <.2. APARATOS E INSTRUMENTOS, 17 :orno para esteriliIar Due alcance una temperatura mnima de 17< CC. Incubadora con termostato Due e>ite >ariaciones maFores de \ 1B< CCB pro>ista con termmetro calibrado. $ermmetro de mNimas F mnimas. &utocla>e Due alcance una temperatura mnima de 121 \ 1B< CC. Potencimetro con una escala mnima de <B1 unidades de p: a 23 CC.
PROCEDIMIENTO, 1. Prueba Presunti>a. $Jcnica a se?uir* aQ Inocular 2<ml de la muestra de a?ua en 3 tubos Due conten?an campana de fermentacin in>ertida F 1<ml de caldo de lauril/ triptosa. bQ Incubar por 18Er a 3CC \ 2CC. cQ Si al transcurrir el tiempo de incubacin se obser>a la presencia de ?as dentro de los tubosB esto indicara una prueba presunti>a Positi>a. 2. Prueba Confirmati>a. $Jcnica a se?uir* aQ Inocular 3 tubosB a partir del inoculo primario en donde se obser>o produccin de ?asB Due conten?an 1<ml de caldo lactosa bilis >erde brillante P6%-6Q por asada. dQ Incubar por 18Er a 3CC \ 2CC. bQ -a nue>a aparicin de ?as dentro de las 18Er si?uientes constituFe una prueba confirmati>a positi>a en coliformes totales. . Prueba Final. $Jcnica a se?uir* aQ Se realiIa una resiembra por asada en 3 tubosB con 1<ml de Medio #CB del inoculo secundario en donde se obser>o la presencia de ?as. bQ Incubar por 18Er a baOo mara a 11.3CC \ 2CC. 18 cQ -a reaparicin de ?as dentro de las 18Er si?uientes indica una prueba final positi>a para coliformes fecales. CONCLUSIN, Si al realiIar las tres pruebasB estas son positi>asB eNiste la presencia de coliformes en el a?uaB F por lo tanto el a?ua estar contaminada F a su >eI esto indica Due el a?ua no contiene la cloracin indicada. ESQUEMA GENERAL DE LAS PRUEBAS DE LABORATORIO PARA LA DETECCIN DE COLIFORMES TOTALES EN EL AGUA, P)0#6& P)#S0!$I"& Inoculacin de caldo lauril/triptosa Produccin de ?as Y prueba presunti>a de coliformes !o ?as Y no EaF coliformes Continuacin del eNamen #l eNamen se detiene aDu C(!FI)M&CI2! '# -& P)0#6& )esiembra a partir de los tubos de caldo lauril/triptosa a* o Caldo con 6%-6B la formacin de ?as &?ar #M6 la presencia de las colonias en el medio 6%-6 constituFe la confirmacin tpicas constituFe la confirmacin de la de la pruebaB es decir Due EaF coliformes totales. pruebaB es decir Due EaF coliformes. totales. 19 ESQUEMA PARA LA REALIZACIN DE LA PRUEBA DE LABORATORIO PARA LA DETECCIN DE COLIFORMES FECALES EN EL AGUA, #sta prueba inicia al salir positi>a la prueba confirmati>a para coliformes totales* P)0#6& P&)& C(-IF()M#S F#C&-#S )esiembra a partir de los tubos de caldo 6%-6 a*
Caldo #CB la formacin de ?as -a ausencia de ?as indica una prueba en el medio #C constituFe una prueba ne?ati>a para coliformes fecales. positi>a B es decir Due EaF coliformes fecales. EXPRESIN DE LOS RESULTADOS, $&6-& 1 C&)&C$#);S$IC& -IMI$# P#)MISI6-# (r?anismos coliformes totales 2 !MPR1<< ml 2 0FCR1<< ml (r?anismos coliformes fecales !o detectable !MPR1<< ml Cero 0FCR1<< ml -os resultados de los eNmenes bacteriol?icos se deben reportar en unidades de !MPR1<< ml PnKmero ms probable por 1<< mlQB si se utiliIa la tJcnica del nKmero ms probable o 0FCR1<< ml Punidades formadoras de colonias por 1<< mlQB si se utiliIa la tJcnica de filtracin por membrana. REFERENCIAS, 3< 'iaIB Q. (. P1977Q. M*(6*+ 4# P)*/$%/*- 4# M%/)'!%'+'5%*. MeNico '.F* !acional. NOM-223-SSA2-2HH9 B%#(#- ? -#)&%/%'-. D#$#);%(*/%'( 4# !*/$#)%*- /'+%1');#-. P2<<8Q. MeNicoB '.F. NOM-37K-SSAI-3KK3 P)'/#4%;%#($'- -*(%$*)%'- .*)* #+ ;6#-$)#'. P2<<2Q. MeNicoB 'F. $empleB ^. M. P198<Q. I($)'46//%'( * +* ;%/)'!%'+'5%*. #.0.&.* Ma %rauV :ill. VVV.;%/)'!%'+'5%*./';.*). P9 de &bril de 2<<8Q. )ecuperado el 9 de &bril de 2<<8B de Ettp*RRVVV.microbiolo?ia.com.arR IX. II.- PROGRAMAS A UTILIZAR PARA EL ANLISIS DE LOS DATOS Ma Due esta in>esti?acin se realiIo con pruebas establecidas en la norma !(M/112/ SS&1/1991 P6ienes F ser>iciosQ para la determinacion de bacterias coliformesB no fue necesario el uso de softVares para el anlisis de los resultados. IX. III.- FOTOGRAFAS P)0#6& P)#S0!$I"& Inoculacin de caldo lauril/triptosa !#%&$I"& P)0#6& P)#S0!$I"& Inoculacin de caldo lauril/triptosa P(SI$I"& P)0#6& C(!FI)M&$I"& Inoculacin en caldo >erde brillante P(SI$I"&
$ubos inoculados con las muestras* 31
IX. IV.- ANLISIS DE LOS RESULTADOS &l aplicar las tJcnicas establecidasB en la !(M/112/SS&1/1991 P6ienes F ser>iciosQ para la determinacion de bacterias coliformes totales F fecales en las muestras de a?uaB antes mencionadasB se obtu>ieron los si?uientes resultados* DATOS DE LA MUESTRA COLIFORMES RESULTAD O NCONTR OL MUESTRA CANTID AD TOTALES FECALES DE LA TCNICA OO Ti!"#o $%%&' M"s () *.% NMP+%%&' M"s () *.% NMP+%%&' , - . OO$ L'"/) () '"/"0o $%%&' No ()1)#1"0') No ()1)#1"0') , 2 . OO3 B)0)()3o $%%&' No ()1)#1"0') No ()1)#1"0') , 2 . OO4 G3i5o $%%&' No ()1)#1"0') No ()1)#1"0') , 2 . &l aplicar las tJcnicas para la determinacin de coliformes totales F fecalesB se realiIo una inoculacin de 2<ml de la muestraB en 3 tubos con campanas de fermentacin in>ertidas PtambiJn llamadas >iales de fermentacin o tubos de 'urEamQBcon 1<ml de caldo lauril PQ preparado con a?ua destiladaB los tubos se colocaron en la incubadora a 3CC \ 2CC durante 32 18ErB al obser>ar la presencia de ?as pasadas las 18ErB se resembro en 3 tubos con campanas de fermentacin con 1<ml de caldo >erde brillante por asadaB F se colocaron los tubos en la incubadora a 3CC \ 2CC durante 18ErB al obser>ar la presencia de ?as pasadas las 18Er la prueba es positi>a para coliformes totalesB F se resembro en 3 tubos con campanas de fermentacin con 1<ml de caldo #.C por asada F incubaron los tubos 18Er a una temperatura de 11.3CC \ 2CCB si pasado el tiempo de incubacin EaF presencia de ?as la prueba es positi>a para coliformes fecales. #ste procedimiento se aplico a las cuatro muestras de a?uaB resultando solo positi>a en la muestra de a?ua tomada del tinaco de la #scuela Secundaria %eneral !C18B ubicado a un lado del patio principal de la institucin. IX. V.- MANEO DE LA INFORMACIN -os resultados de esta in>esti?acin se tabularon F presentaron con el empleo de tablas realiIadas en #Ncel. & si mismo se consideraron positi>as o ne?ati>asB se?Kn la presencia de ?as o la ausencia de este en las campanas de fermentacin. C./ CONCLUSIONES &l analiIar los resultados de las tJcnicas aplicadas a las muestras de a?ua tomadas de la #scuela Secundaria %eneral !C18B se puede concluir Due* -a cloracin del a?ua del tinaco de la institucinB no es la adecuadaB Fa Due solo en la muestra de a?ua del tinaco resulto positi>a la tJcnica para la determinacin de Coliformes $otales F Fecales. Se pudo comprobar la Eiptesis planteada P-a contaminacin del a?ua en los alGibes F depsitos de la escuela secundaria !C18 es propiciadaB por la falta de mantenimiento en ellosQB Fa Due el mantenimiento F el saneamiento del tinaco de la institucin no es el adecuadoB lo cual propicia un medio ambiente fa>orable para la formacin de coliformes Fecales F totales. 3 #l a?ua de los bebederosB ?rifos F lla>es de los la>abos cuentan con la cloracin adecuadaB Fa Due en las muestras tomadas de estos lu?aresB las tJcnicas para la determinacin de Coliformes totales F fecalesB resultaron ne?ati>as. )esulto positi>a la se?unda Eiptesis planteada P& maFor falta de mantenimiento en alGibes F tinacosB maFor poblacin microbianaQB Fa Due en el tinaco se poda obser>ar maFor falta de mantenimiento Due en los bebederosB F solo resultaron positi>as las tJcnicas para la determinacin de coliformes fecales F totales en el a?ua del tinaco. -a tercera Eiptesis planteada P-os alumnos de la secundaria !C18B Due consumen a?ua de los bebederos de la institucinB tienen mas probabilidad de presentar enfermedades intestinales debido a la presencia de coliformes totales FRo fecales.QB resulto errneaB Fa Due en la muestra de a?ua tomada de los bebederos de la institucinB la prueba para la determinacin de coliformes totales F fecales resulto ne?ati>a. CI./ BIBLIOGRA1>A 'iaIB Q. (. P1977Q. M*(6*+ 4# P)*/$%/*- 4# M%/)'!%'+'5%*. MeNico '.F* !acional. D%//%'(*)%' E(/%/+'.#4%/'. P197<Q. 6arcelona* Sl>at. MescleB 0.B _ 6our?eoisB C. P198<Q. Microbiolo?ia &limentaria. &cribiaB S.&. NOM-KH3-SSA2-2HH9 M#$'4' .*)* +* /6#($* 4# !*/$#)%*- *#)'!%*- #( .+*/*. P2<<8Q. MeNico '.F. NOM-2KH-SSA2-2HH9 P)'/#4%;%#($'- .*)* +* $';*, ;*(#"' ? $)*(-.')$# 4# ;6#-$)*- 4# *+%;#($'- .*)* -6 *(*+%-%- ;%/)'!%'+'5%/'. P1991Q. MeNico '.F. NOM-22K-SSA2-2HH9 P)#.*)*/%'( ? 4%+6/%'( 4# ;6#-$)*- 4# *+%;#($'- .*)* -6 *(*+%-%- ;%/)'!%'+'5%/'. P1991Q. MeNico '.F. 31 NOM-223-SSA2-2HH9 B%#(#- ? -#)&%/%'-. D#$#);%(*/%'( 4# !*/$#)%*- /'+%1');#-. P2<<8Q. MeNicoB '.F. NOM-37K-SSAI-3KK3 P)'/#4%;%#($'- -*(%$*)%'- .*)* #+ ;6#-$)#'. P2<<2Q. MeNicoB 'F. S#!$SB 4. P1979Q. LA CONTAMINACION. 6&)C#-(!&* S&-"&$. $.B 4. -. P1< de &bril de 2<<8Q. 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