TEMA

CATEDRA : ANALISIS INSTRUMENTAL

PRESENTADO A : Ing. BENDEZU MONTES, Salvador


PRESENTADO POR :
DE LA CRUZ MONTAEZ, Josmel William
DUEAS PORRAS, Kevin
RIVEROS ARCE, Brayam


CICLO VERANO

HUANCAYO PER


EJERCICIOS DE ANALISIS INSTRUMENTAL
CAPITULOS 24, 25, 26


CAPTULO 24
24.1. Definir:
a) Elucin: es el transporte de una especie a travs de una columna por adicin continua
de nueva fase mvil.
b) Fase mvil: Puede ser un gas o un lquido u otro fluido supercrtico, el cual fluye a
travs de una mezcla.
c) Fase estacionaria: Puede ser papel, gel, etc. El cual se mantiene fijo en una columna o
sobre una superficie slida.
d) Constante de distribucin: se simboliza en la letra k y tambin se le conoce como
razn de distribucin, se define como:

e) Tiempo de retencin (te): Es el tiempo que transcurre despus de la inyeccin de la
muestra para que el pico de una analito alcance al detector.
f) Factor de capacidad: se utiliza para describir las velocidades de migracin de los
analitos en las columnas, para una especie A, el factor de capacidad se define como:

g) Factor de selectividad: Tambin llamado velocidad de migracin diferencial ; el
factor de selectividad para una columna:

h) Altura del plato: Es la longitud de la columna( al extremo de la columna) que contiene
una fraccin de analito comprendida entre L- y L

i) Difusin longitudinal: es una causa del ensanchamiento de banda por lo que los
analitos difunden de una parte ms concentrada en el centro de la banda hacia las
regiones ms diluidas por delante y por detrs de la banda (En el mismo sentido y en
sentido opuesto de la fase mvil)
j) Difusin aparente: Ocurre cuando hay un ensanchamiento de la fase mvil y las
molculas del analito alcanzan el extremo de la columna dentro de un corto intervalo
de tiempo, lo que conduce a una banda ensanchada.
k) Resolucin de la columna(RS): es la mediad cuantificada de separar dos analitos en una
columna

l) Eluyente o Absorbentes: se tiene en cuenta la polaridad de la sustancia.
24.2. Describir el problema de la elucin:
El problema de la elucin es cuando se inyecta una mezcla muchas veces se produce
ensanchamiento de banda por lo que el cromatograma no logra obtener una lectura adecuada
en el tiempo mnimo y con los picos esperados.
24.3. Enumerar las variables que originan el ensanchamiento de banda:
1. Velocidad lineal en la fase mvil (u)
2. Coeficiente de difusin en la fase mvil (Dn)
3. Coeficiente de difusin en la fase estacionaria (Ds)
4. Factor de capacidad (k)
5. Dimetro de la partcula de relleno (dp)
6. Grosor del recubrimiento liquido en fase estacionaria (df)
24.4. Cul es la diferencia entre cromatograma gas-lquido y liquido-liquido?
En la cromatografa gas-liquido la muestra es absorbida sobre una superficie solida porosa
sostenido en un tubo, o absorbido en la superficie interna de un tubo capilar.
En la cromatografa liquido-liquido la muestra queda sostenida en los poros del papel.
24.5. Cul es la diferencia entre cromatografa liquido-lquido y solido-liquido?
Cromatografa:
Liquido-liquido Solido-liquido
- De reparto
- La fase estacionaria es un lquido
absorbido por un solido
- El tipo de equilibrio es la distribucin
entre lquidos inmiscibles

- Adsorcin
- La fase estacionaria es un solido
- Equilibrio de adsorcin.


24.6. Qu variables son los que probablemente afectan el valor de correspondiente a un
par de analitos?

Las variables que afectan son KB que es el factor de capacidad de la especie fuertemente
retenida B, y KA para la especie A (menos retenida o que eluye con ms rapidez)
24.7. Cmo puede modificarse el factor de selectividad?
Al vaciar la composicin de la fase mvil o estacionaria, cambiando la proporcin de volumen
de la fase estacionaria con respecto a la fase mvil.
K aumenta en la reduccin del tamao de partcula de soporte.
24.8. Describir un mtodo para determinar el nmero de platos en una columna.
La velocidad media a la cual se desplazan las partculas del soluto es L/TR. Entonces su relacin
con la est dada por

[]

24.9. Cules son los efectos de la variacin de temperatura en los cromatografos?
La temperatura es una variable importante ya que la resolucin ptima se asocia con una
menor temperatura; sin embargo la consecuencia de una reduccin de temperatura es un
aumento en el tiempo de elucin, y por tanto del tiempo que se necesita para completar un
anlisis. La temperatura ptima de la columna depende del punto de ebullicin de la muestra y
del grado de separacin requerido.
24.10 Por qu el mnimo en el grfico de la altura del plato versus el caudal se encuentra a
menores valores de caudal en cromatografa de lquidos que en cromatografa de gases?
En ambos casos la altura pasa por un valor mnimo en eficacia a bajos caudales. Los mnimos
para la cromatografa de lquidos generalmente se dan con caudales menores y mayores por
cromatografa de gases.
Las velocidades lineales de flujo en cromatografa de lquidos son significativos menores que
los que se utilizan en cromatografa de gases, esta ventaja se contrarresta porque en
cromatografa de lquidos resulta poco prctico emplear columnas ms largas de 25 a 50 cm
debido a que no se puede mantener a elevadas presiones. Para la cromatografa de gases las
columnas pueden tener 50 o menos y como consecuencia de eso el nmero de platos, y por
tanto la eficacia de la columna, es con frecuencia superior en cromatografa de gases.
24.11. Qu es la elucin con gradiente?
La elucin implica el transporte de una especie a travs de una columna por adicin continua
de una nueva fase mvil.
En la elucin por gradiente se inyecta una muestra en la columna dada, y la fase mvil cambia
su posicin de forma escalonada, lo que requiere una adecuada eleccin del adsorbente. Esto
es muy indicado en muestras complejas que representan bandas que eluyen del disolvente. Lo
que se hace es variar el tiempo e migracin de las bandas individuales durante la elucin.
24.12.- los siguientes corresponden a una columna para cromatografa de lquidos:
Longitud del relleno 24,7 cm
Caudal 0,317 mL/min
VM 1,37 mL
VS 0,164 mL

El cromatograma de una mezcla de especies A, B, C y D proporciona los siguientes datos:
Tiempo de retencin
min
Anchura de la base del
pico(W), min
No retenida 3,1 -
A 5,4 0,41
B 13,3 1,07
C 14,1 1,16
D 21,6 1,72

Calcular:
a) El nmero de platos para cada tipo
b) La media y la desviacin estndar
c) La altura del plato de la columna
Solucin
a) Empleando la ecuacin
(

b) La media

Desviacin estndar
(

()()
()

()()
()

()()
()

()()
()

Otra manera:

( )

( )

( )

( )

c) La altura del plato de la columna:

24.13.- Con los datos del problema 24.12, calcular para A, B, C y D
a) el factor de capacidad
b) el coeficiente de distribucin

a)

( )

( )

( )

( )

b) Coeficiente de distribucin

(

()()

()()

()()

()()

24.14.- con los datos del problema 24.12 para las especies B y C, calcular:
a) la resolucin
b) el factor de selectividad
c) la longitud de columna necesaria para tener una resolucin de 1,5
d) el tiempo necesario para separar B y C con una relacin de 1,5

a) Resolucin (Re)

(

( )


b) Factor de selectividad,

c) Longitud de la columna necesario para resolucin de RS2=1,5

()

Luego hallamos N2 reemplazando en (1):

Luego aplicando:

Se despeja en funcin de L:

d) Tiempo necesario para separar B y C con resolucin RS2=1,5

24.15. Con los datos del problema 24.12 para las especies C y D, calcular:
a) la resolucin
b) la longitud de la columna necesaria para tener una resolucin de 1,5

a)

(

( )



b)

Luego:

Finalmente:

()()




24.16.- con un cromatografo gas-lquido y con una columna de relleno de 40 cm se obtuvieron
los siguientes datos:
compuesto

Aire 1,9 -
metilciclohexano 10,0 0,76
meticiclohexeno 10,9 0,82
tolueno 13,4 1,06
Calcular:
a) Un numero de platos promedio a partir de los datos
b) La desviacin estndar para el promedio en (a)
c) Un altura de plato promedio para la columna
solucin
a) Numero de platos promedio a partir de los datos:
(

Luego hallamos la media:

b) Desviacin estndar

( )

( )

( )

c) Una altura de plato promedio para la columna:

24.17.- en relacin al problema 24.16 calcular la resolucin para:
a) metilciclohexeno y metilciclohexano
b) metilciclohexeno y tolueno
c) metilciclohexano y tolueno
a)

( )



b)

( )



c)

( )



24.18.- si Vs y VM para la columna del problema 24.16 fueron 19,6 62,6 mL, respectivamente,
y el pico del aire no retenido apareci a los 1,9 min, calcular el:
a) factor de capacidad para cada uno de los tres compuestos
b) constante de distribucin para cada uno de los tres compuestos
c) factor de selectividad para metilciclohexeno y metilciclohexano
d) factor de selectividad para metilciclohexano y tolueno

a) Factor de selectividad

( )

( )

( )


b) Constante de distribucin para c/u de los componentes:

()( )
( )

()( )
( )

()( )
( )

c) Factor de selectividad para metilciclohexeno y metilciclohexano

d) Factor de selectividad para metilciclohexeno y tolueno




24.19.- Enumerar las variables que conducen a un (a) ensanchamiento de banda y (b) a una
separacin de bandas
1. Tiempo de residencia
2. Movimiento descendente por la columna
3. La gravedad
4. Velocidad de elucin
5. Eficacia de la columna
24.20.- Cul sera el efecto sobre un pico cromatografico de la introduccin de la muestra a
una velocidad demasiado lenta?
A una velocidad demasiado lenta la anchura de la banda es mayor y por lo tanto el tiempo de
residencia aumenta.
24.21.- a partir de estudios de distribucin de las especies M y N se sabe que sus coeficientes
de distribucin en el sistema agua/hexano son 6,01 y 6,20 (
[]

[]

). Las dos
especies se separan por elucin con hexano en una columna empaquetada con gel de slice
conteniendo agua absorbida. La relacin

para el relleno resulta ser de 0,422.

a) calcular el factor de capacidad para cada uno de los solutos
b) calcular el factor de selectividad
c) Cuntos platos se necesitaran para tener una resolucin de 1,5?
d) Qu longitud de columna se necesita si la altura del plato del relleno es

cm?
e) si se utiliza una velocidad lnea de flujo de , que tiempo se necesitara
para eluir las dos especies?

Solucin

a) Factor de capacidad

()()

()()

b) Factor de selectividad

c) Platos necesarios para una resolucin de RS=1,5

) (

) (

d) Qu longitud de columna se necesita si la altura del plato del relleno es

cm?

)()

e) si se utiliza una velocidad lnea de flujo de , que tiempo se
necesitara para eluir las dos especies?

24.22.- repetir los clculos en el problema 24.21 asumiendo que

a)

()()

()()

b)

c)

()

d)

)()
e)

24.23.- las reas de picos obtenidas por cromatografa de gases para una mezcla de acetato de
metilo, propionato de metilo, y n-butirato de metilo 17,6, 44,7, 31,1, respectivamente. Calcular
el porcentaje de cada compuesto si las respectivas respuestas de deteccin relativas fueron
0,65, 0,83 y 0,92.
Acetato de metilo=17,6
Propionato de metilo= 47,7
n-butirato de metilo=31,1

rea Respuesta de deteccin producto
17,6 0,65 11,44
44,7 0,83 36,603
31,1 0,92 28,612
total 76,655




24.24.- A continuacin se dan las reas relativas para los 5 picos de la figura 24.23 obtenidos
por cromatografa de gases. Tambin se indican las respuestas relativas del detector para los
cinco compuestos. Calcular el porcentaje de cada componente en la mezcla.
Compuesto rea de pico relativa Respuesta de detector
relativa
producto
1 27,6 0,70 19,32
2 32,4 0,72 23,328
3 47,1 0,75 35,325
4 40,6 0,73 29,638
5 27,3 0,78 21,294
total 128,905



CAPITULO 25
25.8.- describir el fundamento en el que se basan los detectores enumerados en el problema
25.7
a) el efluente de la columna se mezcla con hidrogeno y aire, para luego encenderse
elctricamente
b) se basa en los cambios en la conductividad trmica de la corriente de gas ocasionados por la
presencia de las molculas del analito
c) un detector termoinico tiene una configuracin similar al detector de llama, pero es mucho
ms sensible.
d) el detector de captura de electrones es de respuesta selectiva, siendo muy sensible a las
molculas que conforman grupos funcionales electronegativos tales como halgenos,
perxidos, etc.
25.9.- Cules son las principales ventajas y limitaciones de cada uno de los detectores
mencionados en el problema 25.7?
Los detectores de captura de electrones son altamente sensibles y tienen la ventaja de no
alterar la muestra de manera significativa.
Estos detectores termoinicos son sistemas muy tiles en la deteccin de pesticidas que
contienen fosforo.
Detector de ionizacin de llama, tiene la ventaja de que los cambios en el caudal de la fase
mvil tienen pocos efectos sobre la respuesta del detector, la desventaja es que destruye la
muestra.
25.10. Cul es el material de relleno en la mayora de las columnas de cromatografa de gases
empaquetadas?
El material de relleno ideal consiste en pequeas partculas, esfricas y uniformes, con una
buena resistencia mecnica, para tener una mxima superficie donde interaccionar la fase
estacionaria y el analito. La superficie especfica mnima ha de ser de 1 m/g. Como todos los
componentes de columnas para GC, debe ser inerte a altas temperaturas (~400 C) y
humectarse uniformemente con la fase lquida estacionaria durante el proceso de fabricacin.
El material preferido actualmente (2005) es la tierra de diatomeas natural, debido a su tamao
de poro natural. Estas especies, ya extinguidas, utilizaban un sistema de difusin molecular
para tomar nutrientes del medio y expulsar sus residuos. Por tanto, debido a que el sistema de
absorcin superficial del analito y la fase estacionaria es parecido, son materiales
especialmente tiles.

25.11. En qu se diferencian las siguientes columnas capilares?(a) PLOT (b) WCOT (c) SCOT
Columna PLOT Columna WCOT Columna SCOT
- Columnas tubulares
abiertas de capa
porosa.
- Utilizado en
cromatografa de
gases-solido
- Utiliza 2 absorbentes:
tamiz molecular y
polmeros porosos.
- Pared recubierta
- tubos capilares
donde la pared
interna se ha
recubierto con una
finsima capa de fase
estacionaria
- Son las columnas de
mayor eficacia
- baja reactividad,
resistencia fsica y
flexibilidad
- Soporte recubierto
- tienen en su parte
interna una fina capa
de material
absorbente como el
empleado en las
columnas de relleno
(tierra de diatomeas)
donde se ha adherido
la fase estacionaria
- mayor capacidad de
carga que WCOT

25.12.- En qu consisten las columnas macro capilares? Para qu se utilizan?
Las columnas macrocapilares son columnas con dimetro de 530 um de dimetro interior, y
permiten volmenes de muestra semejante a las de las columnas empaquetadas. Sus
caractersticas de funcionamiento no son tan buenas como las columnas de dimetro ms
pequeo, pero son significativamente mejores que las columnas empaquetadas
25.13.- cules son las ventajas de las columnas capilares de slice fundida en comparacin
con las columnas de vidrio las metlicas?
Las columnas de slice fundida o tambin llamadas columnas FSOT, ofrecen la ventaja de tener
las paredes ms lisas y un mnimo contenido de xido metlicos.
Otra de sus ventajas son la mayor resistencia fsica, menor reactividad con componentes de la
muestra, y tienen mayor flexibilidad.
25.14 Qu propiedades debe tener una fase estacionaria liquida e cromatografa de gases?
Las propiedades de una fase liquida inmovilizada incluye:
- baja volatilidad
- estabilidad trmica
- caractersticas de disolvente tales que los valores de K y K de los solutos estn dentro
de un intervalo conveniente.
25.15.- Por qu la fase estacionaria en cromatografa de gases estn con frecuencia enlazadas
o polimerizadas? Qu significados tienen esto smbolos?
Enlazadas: implica unin mediante una reaccin qumica de una capa monomolecular de la
fase estacionaria a la superficie de slice de la columna.
Entrecruzamiento: llevada a cabo in situ despus de que la columna haya sido recubierta con
uno de los polmeros.
25.16. Qu efecto tiene el grosor de la pelcula de la fase estacionaria en cromatografa de
gases sobre los cromatogramas?
El grosor de la pelcula afecta principalmente a las caractersticas de retencin y capacidad de
la columna. Las pelculas gruesas utilizadas para analitos muy voltiles, y las delgadas separan
especies de menor volatilidad en un tiempo razonable.
25.17. Qu son los ndices de retencin? Describir como se determinan
Se define como el parmetro para identificar solutos a partir de los cromatogramas. Definido
para un alcano normal, como 100 veces el nmero de carbonos del compuesto sin considerar
el relleno de la columna, la temperatura u otras condiciones cromatograficas.
El ndice de retencin para un soluto dado, puede deducirse del cromatograma de una mezcla
del soluto con al menos dos alcanos normales (de cadena lineal) que tengan unos tiempos de
retencin tope. Esto es que los alcanos normales son los patrones en los que se basa la escala
de ndice de retencin. Normalmente no se requiere un procedimiento grafico para
determinar los ndices de retencin, en su lugar los datos de retencin ajustndose reducen
por interpretacin a partir de un cromatograma de una mezcla de soluto de inters y 20 ms
alcanos patrn.
25.18. Cmo es normalmente un cromatograma en GC/MS? y en GC/IR?
El cromatograma en GC/MS, representado en una pantalla de una computadora sirve para
identificar componentes presentes en sistemas naturales y biolgicos, muestra la intensidad
total de los iones y el tiempo de retencin.
Cromatograma en GC/IR: es mucho ms potente que el cromatograma GC/MS, sirve para la
separacin e identificacin de componentes de mezclas complejas.
25.19. El mismo compuesto polar se analiza por cromatografa de gases con una columna SE-
30(muy poco polar) y luego con una columna carbomax 20M (muy polar). Cmo variara
K=CS/CM entre las dos columnas?
En el caso de la columna SE-30, como es poco polar retiene mucho menos, mediante este se
sabr si es que K ser o no satisfactorio que lo que se tendra en una columna Carbomax 20m,
en donde K sera ms imparcial.
25.20. Utilizar los datos que se dan a continuacin para calcular el ndice de retencin del 1-
hexeno.
Muestra Tiempo de retencin (min)-TM
Aire 0,571
n-pentano 2,16
n-hexano 4,23
1-hexeno 3,15


Muestra (

)
n-pentano

n-hexano

1-hexeno

25.21. Se utiliz una columna GLC en las siguientes condiciones:
Columna: 1,10m X 2,0 mm empaquetada con Chromosorb P; peso de fase estacionaria liquida
aadida, 1,02 g/mL
Presiones: entrada, 25,1 psi por encima de la atmosfrica; atmosfrica, 748 torr.
Caudal de salida medido: 24,3 mL/min
Temperatura: ambiente, 21,2 C
Columna, 102 C
Tiempo de retencin: aire, 18 s; acetato de metilo, 1,98 min; propionato de metilo, 4,16 min;
n-butirato de metilo, 7,93 min
Anchura de picos en su base: 0,19, 0,39, 0,79 min, respectivamente
Calcular:
a) el caudal promedio de la columna
b) Los volmenes de retencin corregidos para el aire y para los tres esteres.
c) Los volmenes de retencin especficos para los tres componentes.
d) Las constantes de distribucin de cada uno de los esteres.
e) Un volumen de retencin corregido y el tiempo de retencin para el n-hexanoato de
metilo.
Solucin:
a) Caudal promedio (F)

( )

b)

[(

]
[(

]


()

[()

]
[()

]


Luego:

Aire

()()()

Acetato de metilo

()(()()

Propionato de metilo

()()()

N-butinato de metilo

()()()

c)

Acetato de metilo

Propionato de metilo

N-butirato de metilo

d) Constantes de distribucin

Acetato de metilo

()()()

Propionato de metilo

()()()

N-butirato de metilo

()()()

25.22.- con los datos del problema 25.21, calcular:
a) k para cada compuesto
b) los valores de para cada par de compuestos adyacentes
c) el nmero de platos tericos y la altura del plato de la columna
d) la resolucin para cada par de compuestos adyacentes.
Solucin:
a) Factor de capacidad

Acetato de metilo

( )

Propionato de metilo

( )

N-butinato de metilo

( )

b) Factor de selectividad

N-pentanato de metilo

( )

N-hexanato de metilo

( )

25.23.- el lquido estacionario en la columna descrita en el problema 25.21 era didecilftalato,
un disolvente de polaridad intermedia. si se hubiera utilizado un disolvente no polar como un
aceite silicona, los tiempos de retencin de los tres compuestos seran mayores o menores?
Se sabe que los compuestos acetato de metilo, propionato de metilo y n-butirato de metilo no
son polares.
Una cromatografa en fase normal se produce cuando el disolvente de la fase estacionaria es
polar y la fase mvil es no polar, un aumento en la polaridad de la fase mvil provocara una
disminucin en el tiempo de retencin. En cambio en una cromatografa en fase inversa, la
fase estacionaria es no polar y una disminucin en la polaridad de la fase mvil produce una
disminucin del tiempo de retencin.
En conclusin si usamos un disolvente no polar, como el aceite de silicona con una fase mvil
tambin no polar el tiempo de retencin ser menor debido a que la fase mvil ser ahora ms
soluble.
25.24.- los tiempos de retencin ajustados para los alcoholes etlicos, n-propilico y n-butilico
empleando una columna con relleno recubierto de aceite de silicona son 0,69, 1,51 y 3,57.
Predecir los tiempos de retencin para los dos miembros siguientes de la serie homologa.
N C componente tR-tM
2 Alcohol etlico 0,69
3 Alcohol n-propilico 1,51
4 Alcohol n-butilico 3,57
Del grfico:

25.25.- Cul sera en los siguientes casos el efecto sobre la altura de pato de una columna?
Justifica la respuesta
a) al aumentar el peso de la fase estacionaria en relacin al peso del relleno
b) al disminuir la velocidad de inyeccin de la muestra
c) al aumentar la temperatura del bloque de inyeccin.
d) al aumentar el caudal
e) al reducir el tamao de partcula del relleno
f) al disminuir la temperatura de la columna

a) Al incrementar el peso se produce un mayor ensanchamiento de zona, provocando
que se incremente la altura del plato.
b) La altura del plato es directamente proporcional a la velocidad, por esta razn al
disminuir la velocidad, es menor la altura del plato.
c) Al aumentar la temperatura del bloque de inyeccin se incrementa la altura del
plato.
d) La altura del plato vara directamente proporcional al caudal, por esta razn al
aumentar caudal, tiene que aumentarse altura del plato.
e) El dimetro de la partcula de relleno es directamente proporcional a la
transferencia de masa de la fase mvil, adems un aumento de este ltimo
provocara que se incremente la altura del plato.
f) A bajas temperaturas se tienen unas alturas de plato significativamente menores,
debido a que la incidencia de la difusin longitudinal se reduce de forma
apreciable al disminuir la temperatura.
25.26.- calcular los ndices de retencin para cada uno de los siguientes compuestos:
Compuesto (

) ndice de retencin (I)

Propano 1,29 300
n-butano 2,21 400
n-pentano 4,10 500
n-hexano 7,61 600
n-heptano 14,08 700
n-octano 25,11 800
Tolueno 16,32 732
2-buteno 2,67 351
n-propanol 7,60 624
Metietilcetona 8,40 641
Ciclohexano 6,94 604
n-butanol 9,83 661

CAPITULO 26
26-2. Describir tres mtodos generales para mejorar la resolucin en la cromatografa de
reparto.
La mejora de la resolucin en la cromatografa, se basa en la variacin de unos de los
tres parmetros:


La manera ms fcil de modificar

es variando la temperatura a la composicin de la
fase mvil; tambin puede conseguirse utilizando una columna de relleno distinto.
En cromatografa de lquidos, el factor de capacidad

es el que ms fcil se puede manipular,
debido a que depende considerablemente de la composicin de la fase mvil. Para una
eficiencia optima

, deber estar en un intervalo comprendido entre 2 y 5.
En cromatografa de lquidos la forma ms simple de producir variaciones en es modificando
la composicin de la fase mvil, procurando mantener

dentro de un intervalo razonable.
Tambin se puede cambiar , eligiendo un relleno de columna distinto.
Es posible cambiar , variando la longitud de la columna y H por alteracin del caudal de la
fase mvil.
El tamao de la partcula de relleno, la viscosidad de la fase mvil y el grosor de la pelcula del
lquido adsorbido que constituye la fase estacionaria tambin pueden variar N.
26-3. Describir una forma de controlar el factor de capacidad de un soluto en la cromatografa
de reparto.
La forma ms fcil de mejorar la resolucin es optimizando

, con fases mviles
gaseosas,

puede mejorarse a menudo aumentando la temperatura. Con fases mviles
liquidas, el cambiar la composicin del disolvente muchas veces permite la manipulacin de

de tal manera que se obtienen mejores separaciones, con el fin de presentar una resolucin
adecuada en un tiempo mnimo.
26-4. Cmo se puede controlar el factor de selectividad en a) la cromatografa de gases y en
b) la cromatografa de lquidos?
a) Cambiar la composicin de la fase mvil incluyendo los cambios en el pH, en las
separaciones que implican a cidos o bases ionizables, muchas veces los cambios
en el pH de la fase mvil permiten la manipulacin de valores de .
Un mtodo menos conveniente, pero efectivo, de mejorar consiste en cambiar
la composicin qumica de la fase estacionaria. Por esto la mayora de laboratorios
que realizan separaciones cromatografas, disponen de varias columnas, las cuales
pueden intercambiar fcilmente.
b) En la cromatografa de intercambio inico, puede tener efectos lo suficientemente
grandes como para hacer que merezca la pena explorar esta opcin antes de
recurrir al cambio del relleno de la columna, el aumento de la temperatura, de tal
manera se mejora .
26-5. Al preparar una gradiente con benceno/acetona para una columna de HPLC de almina,
y al eluir la columna. es deseable aumentar o disminuir la proporcin de benceno?
Es deseable aumentar la proporcin de benceno, la introduccin de la fase mvil
adicional hace que la fase mvil que contiene una parte de la muestra se mueva hacia abajo.
26-6. Definir los siguientes trminos.
a) DIFUSOR: Vlvula que cambia su seccin de paso cuando se modifican las propiedades
del fluido que las cruza.
b) ELUCION ISOCRATICA: Composicin constante de la fase mvil.
c) ELUCION CON GRADIENTE: Los distintos analitos son eluidos con incremento de la
composicin de la fase mvil en la fase orgnica.
d) INYECCION CON PARADA DE FLUJO: Lo que se hace es dividir la muestra despus de la
inyeccin, reduciendo as la masa total analito/solvente que entra efectivamente a la
columna.
e) RELLENO PECULIAR: Se utilizan bolitas de vidrio o polmero no porosas esfricas de
dimetro entre 30 40 um. Sobre su superficie se deposita una capa delgada de
partculas muy pequeas gel de slice, almina o un cambiador inico que actan como
fase estacionaria.
f) ENSANCHAMIENTO EXTRACOLUMNA: Tiene lugar cuando se transporta el soluto a
travs de tubos como los que se utilizan en los sistemas de inyeccin, en los detectores
y en los tubos que conectan los distintos componentes del sistema en las pre
columnas.
g) RELLENO DE FASE INVERSA: Los rellenos de fase inversa se utilizan cuando el
recubrimiento unido qumicamente tiene un carcter no polar.
h) RELLENO DE FASE NORMAL: Los rellenos de fase normal se utilizan cuando el
recubrimiento contiene grupos funcionales polares.
i) DETECTOR DE PROPIEDADES DE LA DISOLUCION: Los detectores basados en una
propiedad de disolucin responden a una propiedad de la fase mvil, tal como el
ndice de refraccin, la constante dielctrica, o la densidad, que se modifica por la
presencia de los analitos.
j) DETECTOR DE PROPIEDADES DEL SOLUTO: Los detectores basados en una propiedad
del soluto responden a una de las propiedades del soluto, como la absorbancia UV,
fluorescencia, intensidad de difusin, que no son propias de la fase mvil.
26-7. Qu se entiende por intervalo lineal de un detector?
En un detector para cromatografa de lquidos no es necesario que sea sensible en un
intervalo tan grande de temperatura. Adems, un detector de HPLC debe tener un volumen
interno mnimo a fin de reducir el ensanchamiento de banda.
26-8. Qu es la pre columna en la cromatografa de reparto?
Para aumentar la vida de la columna analtica, se coloca delante una pre columna que
elimina la materia en suspensin y los contaminantes de los disolventes. Adems la pre
columna sirve para saturar la fase mvil con la fase estacionaria y as minimizar las prdidas de
esta columna analtica. El composicin del relleno de la pre columna debe ser semejante al de
la columna analtica; sin embargo, el tamao de la partcula es por lo comn mayor para
minimizar la cada de presin.
26-9. En que se parecen la cromatografa de reparto en fase normal y la cromatografa de
adsorcin?
En la cromatografa de adsorcin, la nica variable que se puede utilizar para optimizar

y es la composicin de la fase mvil. Del mismo modo, una modificacin (aumento de la

polaridad) de la fase mvil provoca una disminucin del tiempo de elucin.
26-10. Enumerar las caractersticas deseables para un detector de HPLC.
1. Adecuada sensibilidad.
2. Buena estabilidad y reproducibilidad.
3. Una respuesta lineal para los analitos que se extiende a varios ordenes de magnitud.
4. Un intervalo de temperaturas de trabajo comprendido desde la temperatura de
ambiente hasta al menos 400C.
5. Un tiempo de respuesta corto que lo haga independiente del caudal.
6. Alta fiabilidad y manejo sencillo. Hasta el punto de estar a prueba de la impericia de
operadores inexpertos.
7. Respuesta semejante para todos los analitos, o por el contrario, una respuesta
selectiva y altamente predecible para una o ms clases de analitos.
8. No destructivo de la muestra.
26-11. Describir algunas de las tcnicas que se utilizan para aceptar un cromatgrafo de
lquidos con un espectrmetro de masas.
Tenemos diferentes interfaces para el acoplamiento de la cromatografa de lquidos
con la espectrometra de masas. En una de ellas, que esta comercializada, el efluente de la
columna se divide y solo una minscula fraccin se introduce directamente en el
espectrmetro de masas, el segundo tipo de interfaz, que tambin se puede adquirir en el
comercio, el efluente de la columna se deposita sobre una cinta o alambre que se mueve
concntricamente y que transporta el disolvente y el analito hacia una cmara calorfica para
la eliminacin del primero por volatilizacin.
26-12. Enumerar las distintas propiedades y funciones de la fase mvil en la cromatografa de
gases, la de lquidos, Cmo influyen esas diferencias en la caracterstica de los mtodos?
En la cromatografa de lquidos, el establecimiento del mtodo tiende a ser ms
complejo que en la cromatografa de gases , debi a que la fase mvil es lquido, los
componentes de la muestra interactan con ambas fases, la estacionaria y la mvil. Por lo
contrario en la cromatografa de gases; la fase mvil se comporta como un gas ideal.