Requerimientos tcnicos y ambientales de las instalaciones para el anlisis de 1
elementos traza 2 Recomendacin (2012) 3 4 Sociedad Espaola de Bioqumica Clnica y Patologa Molecular 5 Comit Cientfico 6 Comisin de Elementos traza 1 7 8 I.Palazn-Bru, M. Gonzlez-Estecha y J. Gonzlez-Revaldera 9 montse@cmpx.net, irene_pb@hotmail.es, jgonzalezr.hugf@salud.madrid.org 10 11 ndice 12 13 1. Introduccin 14 2. Objeto y campo de aplicacin 15 3. Requerimientos tcnicos y ambientales de las instalaciones 16 3.1. rea de trabajo 17 3.1.1. Salas blancas 18 3.1.2. Sistema de ventilacin 19 3.1.3. Refrigeracin 20 3.2. Materiales 21 3.2.1. De construccin 22 3.2.2. De laboratorio 23 3.2.3. Plsticos 24 3.2.4. Purificacin de reactivos 25 3.3. Factores humanos 26 3.4. Instalacin y manipulacin de gases 27 3.4.1. Contenedores de gases 28 3.4.2. Vlvulas, conducciones y reguladores de presin 29 3.5. Instalacin elctrica 30 4. Resumen 31 5. Bibliografa 32 33 34
1 Mara Teresa Llorente Ballesteros, ngel Garca de Jaln, Aranzazu Anadn Ruiz, Concepcin Pintos Virgs, Elena Trasobares Iglesias, Elisa Herrero Huerta, Jess Escanero Marcn, Joaqun Gonzlez Revalderia, Jos ngel Cocho de Juan, Jos Luis Lpez Coln, M ngeles Cesar Mrquez, M Dolores Fernandez Gonzlez, M Jess Gaspar Blzquez, M Luisa Calvo Reata, Merc Torra Santamara, Montserrat Gonzlez Estecha, Pilar Bermejo Barrera ,Silvia Izquierdo lvarez, Victoria Seijas Martinez-Echevarria e Irene Palazn Bru (Residente) 35
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1. INTRODUCCIN 36 37 La medicin exacta de elementos que se encuentran en muy baja concentracin es necesaria 38 en una gran variedad de anlisis relacionados con el medio ambiente, tejidos y fluidos 39 biolgicos, alimentos y materiales de alta tecnologa. La clave para obtener unos resultados 40 veraces se encuentra sobre todo en la seleccin de los mtodos de medida adecuados y en el 41 ambiente del laboratorio (1). Este ltimo punto es de gran importancia para laboratorios clnicos 42 que adems realicen mediciones de elementos traza, ya que las concentraciones de 43 determinados elementos en las diversas matrices biolgicas puede estar en el orden de 44 concentracin en que se encuentren esos elementos en el aire, polvo o en las superficies de 45 los utensilios empleados en la preparacin de las muestras para su examen (recipientes de 46 recogida de las muestras, puntas de pipeta, etc). As pues, el adecuado control de los factores 47 ambientales es imprescindible para la obtencin de resultados con una buena calidad 48 analtica. 49 50 2. OBJETO Y CAMPO DE APLICACIN 51 52 En este documento se revisan los requerimientos tcnicos y ambientales de las instalaciones 53 para el examen de elementos traza en muestras biolgicas con el fin de minimizar la influencia 54 de los factores ambientales en las concentraciones medidas de estos elementos, detallndose 55 su inters para aquellos laboratorios clnicos que realicen este tipo de exmenes por 56 espectroscopa de absorcin atmica o espectrometra de masas. 57 58 3. REQUERIMIENTOS TCNICOS Y AMBIENTALES DE LAS INSTALACIONES 59 60 Los requerimientos tcnicos y ambientales de las instalaciones para el examen de elementos 61 traza son necesarios para asegurar la calidad analtica. Los factores de mxima influencia en 62 sta son el rea de trabajo, incluyendo las salas blancas, el sistema de ventilacin y la 63 refrigeracin, los materiales, los factores humanos, la instalacin y manipulacin de gases y la 64 instalacin elctrica. A continuacin se detallan dichos requerimientos para que sean tenidos 65 en cuenta en el anlisis de estos elementos en especmenes biolgicos. 66 67 3.1. rea de trabajo 68 El laboratorio de elementos traza debe mantener las siguientes condiciones: 69 70 Existencia de una zona de trabajo entre el laboratorio general y el de elementos traza 71 que evite flujos de aire no deseados. 72 Ausencia de corrientes de aire. 73 Ausencia de vibraciones. 74 rea de trabajo aislada del paso de personal. 75 Medidas de limpieza especficas y ms estrictas que en el resto del laboratorio 76 (ausencia de polvo). 77 Evitar la presencia de elementos metlicos (2). 78 79 La puerta de acceso al laboratorio general debe tener la sealizacin de peligro biolgico 80 (3). 81 La puerta de acceso al laboratorio de elementos traza debe tener la sealizacin de aviso a 82 personas con implantes metlicos o marcapasos debido al campo electromagntico que se 83 produce en el horno de grafito de los equipos de espectroscopa de absorcin atmica. 84 Las superficies y suelos de las zonas de trabajo deben estar construidas con materiales 85 adecuados, impermeables, no resbaladizos, fciles de limpiar y resistentes a los reactivos de 86 trabajo y a los productos de limpieza y desinfeccin habituales (3). 87 La proteccin contra incendios debe revisarse peridicamente de forma escrupulosa. 88
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Se recomienda realizar la preparacin de las muestras en una zona de trabajo distinta a 89 donde se halla el equipo donde se van a llevar a cabo las mediciones de elementos traza (4). 90 Las mediciones realizadas por espectrometra de masas con plasma acoplado 91 inductivamente (ICP-MS) se han de de llevar a cabo en salas blancas, segn se detalla en el 92 subapartado 3.1.1., debido a que este mtodo de medida se emplea para elementos que se 93 encuentran en concentracin ultra traza. Es por ello que, en este caso, se requieren unas 94 condiciones de limpieza mucho ms estrictas que en el caso de mediciones por espectrometra 95 de absorcin atmica de llama (FAAS) y de horno de grafito (GFAAS). 96 La temperatura de trabajo y la humedad relativa son otras variables a tener en cuenta, pues 97 grandes variaciones en ellas pueden afectar a los resultados finales. En absorcin atmica de 98 FAAS y GFAAS el valor deseable de temperatura est comprendido entre los 10 y los 35 C 99 con una desviacin mxima de 2,8 C por hora. La humedad se debe encontrar entre el 20 y el 100 80%, sin condensacin (4). En ICP-MS la temperatura adecuada para un rendimiento ptimo 101 es de 20 2C con una velocidad mxima de cambio de 3C por hora. La humedad relativa se 102 debe encontrar entre el 35 y el 50%, sin condensacin (5). 103 En la medida de lo posible, el equipo de medida se debe instalar de forma que exista en la 104 parte posterior un espacio accesible de 60 cm. Si esto no es posible, la mesa de trabajo se 105 debe poder desplazar con relativa facilidad (3). 106 107 3.1.1. Salas blancas 108 Una de las principales fuentes de contaminacin de muestras es la presencia de partculas en 109 suspensin en el ambiente del laboratorio. El aire normalmente contiene partculas orgnicas e 110 inorgnicas en forma de aerosoles de origen natural o generados por el propio personal del 111 centro. El propsito de utilizar costosos sistemas de filtracin en los entornos del laboratorio es 112 controlar y mantener concentraciones bajas de partculas en el ambiente, tal y como se detalla 113 a continuacin. El nivel de limpieza en un laboratorio se define por la cantidad mxima 114 permitida de partculas de un determinado tamao por unidad de volumen de aire, existiendo 115 normas de clasificacin empleadas en todo el mundo, incluyendo las guas desarrolladas por 116 VDI-Richtlinien y el protocolo ISO 14644 desarrollado por la Organizacin Internacional de 117 Estandarizacin en Suiza. Este protocolo proporciona una descripcin detallada de la limpieza 118 del aire y de las medidas estadsticas asociadas a sta, tal y como se observa en la Tabla I. 119 Existen dos tipos de mecanismos para controlar las partculas en suspensin. El primero de 120 ellos consiste en implementar mdulos de flujo de aire laminar, y el segundo en el 121 mantenimiento de la diferencia de presiones entre el rea blanca (laboratorio) y el rea exterior, 122 considerndose como adecuada una diferencia de presiones de 10 Pascales (1). 123 124 3.1.2. Sistemas de ventilacin 125 Es importante que el laboratorio disponga un sistema de ventilacin que incluya 126 deshumidificadores, controladores de presin, filtros de aire, sensores de deteccin de humos y 127 enfriadores/calentadores de aire (1). La necesidad de este sistema se debe a varios motivos: 128 129 Proteger al analista de los vapores txicos. 130 Eliminar el calor generado por la llama, el horno de grafito o el plasma. 131 Proteger los equipos e instrumentos de medida del laboratorio de los humos y vapores 132 txicos que generan las muestras. 133 Eliminar las oscilaciones y vibraciones que pueden producirse en la llama por 134 corrientes externas de aire (3). 135 136 En caso de trabajar con ICP-MS es necesario que el sistema de ventilacin est diseado 137 para permitir la recirculacin continua de aire a travs de los filtros HEPA (Hight Efficiency 138 Particulate Air). stos presentan dos beneficios. En primer lugar el aire es continuamente 139 recirculado, y en segundo lugar la distribucin de aire requerida se reduce en proporcin 140 directa a la cantidad de aire que es recirculado. De este modo el volumen total de aire 141
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introducido por los filtros HEPA es el adecuado para presurizar el laboratorio a la presin 142 requerida y reemplazar los humos y vapores txicos por aire limpio (1). En resumen, se 143 proporciona aire de reposicin en la misma cantidad que ha sido agotado por el sistema. 144 El ventilador ha de ubicarse tan cerca como sea posible de la salida de escape, situndose 145 sta lejos de las ventanas abiertas y extendindose por encima del techo del edificio para la 146 correcta dispersin de los gases de escape. Adems es recomendable equipar el ventilador 147 con un indicador luminoso situado cerca del instrumento para indicar al analista cuando el 148 ventilador se encuentra encendido (5). 149 El flujo total de salida ptimo para el sistema de extraccin de vapores y humos debe ser de 150 7000 a 8500 litros/minuto. 151 El extractor empleado para espectrofotmetros de absorcin atmica debe colocarse en una 152 pared que tenga salida al exterior a una distancia mnima de 4 metros y a una mxima de 6,5 153 metros de la llama (4). El sistema de ventilacin requerido en ICP-MS ha de constar de una 154 tubera lisa de acero inoxidable con el fin de evitar la prdida por friccin o arrastre. Adems, 155 deben utilizarse el menor nmero de codos posible para reducir dichas prdidas (5). 156 Los materiales de construccin del sistema extractor han de ser compatibles con la 157 naturaleza corrosiva de los humos (1), siendo para ICP-MS de materiales adecuados para 158 temperaturas de hasta 70C (5). Estas recomendaciones sern ms ampliamente detalladas en 159 el subapartado 3.2.1. 160 161 3.1.3. Refrigeracin 162 El espectrmetro de masas con plasma acoplado inductivamente requiere una fuente 163 refrigerante. La presin de recirculacin debe ser de 413 13 kPa y el flujo mnimo de 164 refrigerante de al menos 3,8 litros/minuto. 165 El refrigerante ha de contener un inhibidor de la corrosin con el fin de proteger los 166 componentes de aluminio que lleva incorporados el propio sistema de refrigeracin. 167 Si la temperatura del aire en el sistema de refrigeracin se encuentra por debajo de los 30C 168 se puede utilizar un intercambiador de calor en lugar de un sistema de refrigeracin. El 169 intercambiador de calor se debe situar en un rea ventilada donde la temperatura del aire no 170 exceda las 30C. Por encima de dicha temperatura la refrigeradora no se puede reemplazar 171 por un intercambiador de calor (5). 172 173 3.2. Materiales 174 175 3.2.1. De construccin 176 177 Es crucial la eleccin de los materiales de construccin de un laboratorio de elementos traza 178 para proporcionar unos resultados fiables. 179 Es importante asegurar que los materiales a utilizar no contengan el analito de inters 180 debido a que de esta forma no se planteara ningn problema de contaminacin a dicha escala. 181 Los conductos galvanizados de hierro suelen corroerse rpidamente, por ello no es 182 recomendable su uso. Para solucionar este problema puede emplearse aluminio recubierto con 183 una capa protectora de pintura epoxi. Se trata de un metal que no se corroe tan rpido, pero 184 slo es recomendable su uso si no se va a llevar a cabo el anli sis de aluminio, ya que de lo 185 contrario supondra la introduccin de una nueva fuente de contaminacin. Dicho metal, 186 adems de su uso en la fabricacin de conductos, se puede emplear para la construccin de 187 paneles, puertas, etc. Si el abanico de metales que van a ser medidos incluye el aluminio, y 188 sobre todo en el caso de medidas a nivel ultra traza, entonces deben utilizarse materiales no 189 metlicos que, adems de que no se corroen tan fcilmente como los metlicos, no causan un 190 problema mayor que las partculas de polvo. Si por motivos ajenos al laboratorio solamente 191 pueden emplearse metales en su construccin, se debern recubrir con pintura epoxi, con 192 tefln o con polietileno de alta densidad (1). Las pinturas epoxi son un grupo de pinturas de alta 193 resistencia a diferentes ataques (cidos, agua, etc.) que no se ven afectadas por disolventes ni 194
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aceites o grasas. El tefln es el politetrafluoroetileno, el cual pertenece a la familia de los 195 polmeros denominados fluorocarburos. Se obtiene de reemplazar todos los tomos de 196 hidrgeno del polietileno por tomos de flor (6). Es capaz de resistir altas temperaturas, 197 adems del ataque de cidos y bases, disolventes, etc. Los tomos de flor de este plstico 198 crean una barrera que impide ataques externos a su estructura carbonada. El polietileno de alta 199 densidad es un material empleado para la fabricacin de tuberas a nivel mundial debido a sus 200 excelentes propiedades fsicoqumicas. 201 Los anteriormente mencionados filtros HEPA no se deben construir con separadores de 202 aluminio. Se prefieren separadores de plstico o que no tengan separadores. 203 Los grifos de agua y accesorios se deben fabricar de PVC o polietileno, adems de que slo 204 se pueden utilizar con agua desionizada (1). 205 La unin entre la campana y el extractor se puede hacer con un tubo de acero inoxidable 206 flexible. Las aspas del extractor tienen que ser metlicas debido a las altas temperaturas 207 alcanzadas por la llama y/o el horno de grafito (3). 208 3.2.2. De laboratorio 209 Las pipetas y buretas de vidrio de borosilicato (vidrio Pyrex) que son tan ampliamente utilizadas 210 en los laboratorios convencionales no son adecuadas para la medida de elementos trazas. 211 Esto se debe a que el vidrio Pyrex desprende metales (sodio, aluminio y boro), especialmente a 212 valores de pH extremos. Si el pH es elevado (soluciones altamente alcalinas) la propia 213 superficie del vidrio se disuelve en la disolucin de trabajo. En disoluciones de pH muy bajo 214 (extremadamente cidas) lo que ocurre es la disolucin del metal adems de la desorci n de la 215 superficie del vidrio. El vidrio est compuesto de slice (dixido de silicio), de modo que en su 216 superficie se encuentran grupos Si-OH. stos son altamente reactivos pudindose intercambiar 217 protones por cationes metlicos. Todo ello implicara la incorporacin de metales a la superficie 218 del vidrio y en consecuencia la existencia de un error sistemtico por defecto. 219 Como solucin se propone emplear la slice vtrea preparada a partir de la fase vapor 220 procedente de la hidrlisis de tetracloruro o tetrafluoruro de silicio (1). La slice vtrea es la 221 slice, que fundida a alta temperatura, posee una gran viscosidad, y enfrindola mantiene su 222 naturaleza amorfa, producindose el vidrio de slice. Debido a su bajo coeficiente de dilatacin 223 (casi cero) puede soportar elevadas temperaturas sin que se generen fracturas en ella (7). En 224 la tabla II se observan los constituyentes qumicos del vidrio. 225 226 3.2.3. Plsticos 227 Se han utilizado una gran variedad de plsticos en la construccin de equipos de laboratorio. 228 Es necesario realizar una cuidadosa seleccin de los materiales plsticos empleados en la 229 medida de elementos traza. Para ello se deben tener en cuenta los siguientes factores: 230 231 Propiedades de adsorcin de los analitos por parte del polmero. 232 Aditivos utilizados en la fabricacin de los plsticos. 233 Posible contaminacin resultante de los catalizadores empleados en la sntesis de 234 plsticos. 235 236 En la Tabla III se observa el contenido en elementos traza de algunos plsticos. 237 En la mayora de aplicaciones se buscan materiales de baja permeabilidad, siendo sta 238 derivada de la migracin de las molculas a travs de huecos microscpicos entre las cadenas 239 de polmero. La absorcin de material por parte de los polmeros se debe a su migracin en la 240 estructura de stos. De igual manera, la decoloracin de los plsticos est asociada a dicho 241 fenmeno. Todo ello ocasiona dos problemas importantes a tener en cuenta, el primero de 242 ellos es el almacenamiento de disoluciones a largo plazo en recipientes inadecuados, ya que 243 puede ocurrir una prdida de agua a travs de la difusin. En este caso la concentracin del 244 analito se ver aumentada. Slo se va a detectar este fenmeno si se toma una muestra antes 245 de su almacenamiento. El segundo problema a tener en cuenta es que los analitos pueden 246
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encontrase en equilibrio con algunas especies voltiles, como los sulfuros y las sales de 247 amonio. 248 Otras consideraciones a tener en cuenta son de tipo fsico, como es el caso del secado de 249 los recipientes a temperaturas elevadas. 250 Teniendo en cuenta todas estas consideraciones se recomienda el uso de materiales 251 contenedores de slice vtrea y tefln para el anlisis de elementos a nivel de traza (1). 252 253 3.2.4. Purificacin de reactivos 254 El agua empleada en un laboratorio de elementos traza debe tener una resistividad igual a 18 255 megaohmios/centmetro. Para ello debe purificarse empleando un sistema de purificacin de 256 miliporo o equivalente. 257 Los reactivos analticos se deben purificar adicionalmente por destilacin en subebullicin 258 empleando sistemas de los materiales anteriormente mentados. La validacin de los reactivos 259 orgnicos es, a priori, obligatoria. Los disolventes orgnicos y otros reactivos que van a ser 260 empleados para llevar a cabo una preconcentracin o una separacin se deben purificar 261 previamente mediante mtodos pertinentes. Hoy en da los reactivos purificados por destilacin 262 en sub-ebullicin se encuentran disponibles en el mercado con certificado de anlisis (1). 263 264 3.3. Factores humanos 265 Es muy probable que las personas introduzcan, de forma inadvertida, factores que puedan 266 influir en las mediciones de elementos traza y ultra traza, como es el caso de algunos tejidos y 267 secreciones. Tambin puede influir la deposicin de la grasa de los dedos o los cosmticos. 268 stos ltimos son fuente de xidos metlicos entre otras sustancias, tal y como se observa 269 en la Tabla IV. La tos y los estornudos pueden producir unas 6 10 5 partculas de 0,5 270 micrmetros de dimetro. La piel humana va renovndose de forma continua de tal forma que 271 se arrojan clulas muertas y fragmentos de clulas de unos 20-40 m de dimetro. La actividad 272 humana incrementa la emisin de partculas, por ello los analistas deben cubrir su cuerpo con 273 una indumentaria especial, tal y como se detalla a continuacin. 274 Es necesaria una actitud activa de los analistas con el fin de prevenir los factores humanos; 275 en caso contrario pueden llegar a afectar constantemente a las medidas realizadas. En cuanto 276 se detectan, deben solucionarse antes de que acarreen consecuencias graves. Por ello es muy 277 importante impartir la formacin adecuada sobre las medidas de control de la contaminacin de 278 todos los trabajadores del laboratorio de elementos traza (8). 279 Todas las instalaciones limpias requieren el uso de una indumentaria que reduzca al 280 mximo la liberacin de partculas contaminantes al medio por parte de los analistas. La ropa 281 utilizada en el mbito extra-laboral genera un gran nmero de partculas adems de que 282 pueden liberar partculas provenientes de fuera del laboratorio, i ncluso del rea exterior 283 circundante. Por todo ello se hace necesario el uso de guantes, bata y calzas, as como el 284 cubrimiento del pelo. El cambio de indumentaria se debe realizar en otra zona de trabajo 285 distinta al laboratorio, as como el almacenamiento de las ropas especiales de laboratorio se 286 debe realizar en un lugar aparte de la ropa utilizada fuera del laboratorio (1). 287 288 3.4. Instalacin y manipulacin de gases 289 La instalacin de gases con los reguladores, vlvulas y conectores adecuados debe revisarse 290 peridicamente de forma escrupulosa. 291 292 3.4.1. Contenedores de gases 293 Las bombonas de gases han de indicar, sin emplear cdigos de colores, su contenido y su 294 estado (lleno, vaco, etc), as como ubicarse en posicin vertical cerca de una pared y cogidas 295 a una brida de seguridad para evitar su cada. 296 Se deben situar en una zona ventilada donde la temperatura no exceda de los 52 C, ya que 297 los cilindros disponen de un dispositivo que libera su contenido cuando la temperatura excede 298 de dicho valor. 299
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Los contenedores que contengan gases inflamables se debern situar lejos de cualquier 300 fuente de ignicin. 301 Su traslado no se ha de realizar rodando ni arrastrando sino empleando carretillas manuales 302 que garanticen una buena sujecin de la botella. 303 Se debe comprobar peridicamente la existencia de posibles fugas mediante la aplicacin 304 de jabn a todas las juntas y selladuras (5). 305 Nunca se deben emplear llamas para detectar fugas. En caso de que exista una fuga y sta 306 no se pueda contener, se deben tomar las medidas indicadas por el suministrador (9). 307 Cuando los cilindros de gas se encuentren en el exterior se deben almacenar de forma que 308 estn protegidos de las temperaturas extremas (como los rayos directos del sol). 309 Cuando la bala quede vaca no se ha de rellenar (5). 310 Los cilindros vacos debern sealizarse y almacenarse tambin en posicin vertical y bien 311 tapados. Se recomienda devolverlos al fabricante tan pronto como sea posible (9). 312 3.4.2. Vlvulas, conducciones y reguladores de presin 313 El gas que se halla en los contenedores se debe utilizar a travs de un medio de regulacin de 314 presiones. 315 De acuerdo al Real Decreto 379/2001 (BOE 10.5.2001), de 6 de abril, por el que se aprueba 316 el Reglamento de almacenamiento de productos qumicos y sus instrucciones tcnicas 317 complementarias MIE APQ-1, MIE APQ-2, MIE APQ-3, MIE APQ-4, MIE APQ-5, MIE APQ-6 y 318 MIE APQ-7, las vlvulas y reguladores de presin de gases han de cumplir los requisitos de las 319 normas vigentes (10). 320 Las cubiertas de las vlvulas de seguridad se deben dejar puestas hasta que los 321 reguladores de presin hayan sido instalados. 322 Las vlvulas deben estar completamente cerradas hasta el uso del gas. 323 En el momento de apertura de las vlvulas el operador se ha de encontrar en la posicin 324 contraria a la salida del gas en las vlvulas, reguladores y conexiones elctricas. 325 Antes de desconectar los reguladores se ha de cerrar la vlvula y eliminar la presin. 326 Cuando el contenedor quede vaco se debe cerrar la vlvula y colocar el protector de la 327 misma. 328 Se deben verificar e identificar las conducciones de forma correcta: 329 330 Acetileno: es un gas inflamable, txico y con posibilidad de combustin espontnea. No 331 se deben utilizar conducciones de cobre ya que puede reaccionar con ste. Dado que 332 este gas viene disuelto en acetona es imprescindible cambiar la botella cuando la 333 presin sea inferior a 6 bares. Es conveniente intercalar en la lnea un filtro de acetileno 334 y una vlvula antirretorno. El tipo de acetileno empleado en Absorcin Atmica debe 335 tener un mnimo de pureza de 99,6 %, aunque es aconsejable que sea del 99,8%. Una 336 botella normal contiene 8500 litros y tiene una duracin de aproximadamente 30 horas. 337 El suministro de acetileno debe ser capaz de proporcionar un flujo mximo de 15 338 litros/minuto a una presin de 0,9 bares (3). 339 Aire comprimido: es imprescindible intercalar un filtro en la lnea de aire para suprimir 340 las partculas slidas, el agua y el aceite. Nunca se tiene que utilizar oxgeno en lugar 341 de aire debido a que se pueden producir explosiones. El conteni do de oxgeno en las 342 botellas debe ser menor del 20% (aire sinttico). El suministro de este gas se puede 343 realizar mediante una botella de aire comprimido o de un compresor, cualquiera de los 344 dos debe proporcionar un flujo mximo de 28 litros/minuto a una presin de trabajo de 345 4,5 bares. Una botella normal contiene aproximadamente 6200 litros, que suponiendo 346 un flujo de 20 litros/min, durara unas 5 horas de trabajo (3) 347 Argn: este gas se utiliza en la cmara de grafito como gas portador y en el plasma 348 como generador de ste. La pureza como mnimo ha de ser de 99,996% y con las 349 mximas impurezas siguientes: 350 351 a) Oxgeno menor de 5 g/g. 352
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b) Hidrgeno menor de 1 g/g. 353 c) Nitrgeno menor de 20 g/g. 354 d) Agua menor de 4 g/g. 355 356 El consumo aproximado de gas para las cmaras de grafito es de 1,5 litros/minuto, para las 357 cmaras con correccin Zeeman de 0,7 litros/minuto y para ICP-MS de 14-20 litros/minuto 358 (3,5). 359 Para ICP-MS la eleccin de argn lquido o gaseoso viene determinada por la disponibilidad 360 de cada una y la frecuencia de su uso. El argn lquido es ms barato pero no se puede 361 almacenar durante periodos prolongados. En caso de usar argn lquido el tanque se debe 362 equipar con un sobre regulador de presin el cual purgar el tanque cuando sea necesario con 363 el fin de evitar un peligro para la seguridad (5). 364 Por ejemplo, las presiones recomendadas para acetileno, aire y argn pueden oscilar entre 365 0,8 y 1,3 bares, 3 y 4,2 bares y 4,6 y 6,9 bares, respectivamente. Las presiones especficas 366 para cada tcnica instrumental que requiera el uso de gases las indican las distintas casas 367 comerciales de los equipos que adquiera el laboratorio. 368 369 3.5. Instalacin elctrica 370 El laboratorio de elementos traza debe cumplir los requisitos necesarios para una instalacin 371 elctrica correcta. Todas las tomas de suministro elctrico a los equipos y accesorios tienen 372 que llevar imprescindiblemente una toma de tierra y la lnea debe estar libre de picos que 373 excedan de 50 Voltios. Es necesario que sea de tipo fase-neutro-tierra y, en caso de no ser 374 posible obtenerlo debido a la antigedad de la instalacin, es imprescindible utilizar un 375 transformador separador de red. Por ejemplo, algunos equipos de cmara de grafito requieren 376 un suministro elctrico monofsico de 220 voltios con una potencia de 3600 vatios. Se 377 aconseja intercalar en la lnea un circuito protector de tipo lento de 20 amperios (3). 378 Otros equipos ms antiguos con mdulo Zeeman requieren un suministro elctrico trifsico 379 tipo Y (tres fases y neutro), con 220 voltios entre cada fase y el neutro. La potencia necesaria 380 por cada fase es de 3600 vatios. Requieren de una base de enchufe tipo CEEKON de 32 381 amperios y 5 polos (3 fases + un neutro + una tierra). 382 Adems, los equipos con mdulo Zeeman tienen que llevar un circuito protector de tipo lento 383 en la lnea elctrica capaz de manejar el 300% de la corriente nominal durante periodos de 5 384 segundos (3). 385 Algunos equipos de ICP-MS requieren una intensidad de 30-32 amperios y un voltaje de 386 200-240 voltios. Si la lnea de alimentacin es inestable, flucta o est sujeta a subidas de 387 tensin se requerir un control adicional de la alimentacin de entrada. La bomba de vaco est 388 provista de una red de alimentacin y se debe conectar a una toma de corriente de 15 389 amperios monofsica y de 200-240 voltios de salida (5). 390 391 4. RESUMEN 392 393 Las caractersticas especiales de los elementos traza hacen que sea necesario adoptar unos 394 requisitos estrictos en el laboratorio, debido a las pequeas concentraciones que se miden y a 395 la posible contaminacin por la presencia de estos elementos, muchos de ellos txicos, en 396 muchos materiales y en el aire. Es por ello que se debe emplear el tipo de material adecuado y 397 mantener unas medidas de limpieza ms estrictas. 398 1. Absorcin atmica de llama: se debe prestar especial atencin a la ausencia de 399 vibraciones externas y corrientes de aire que produzcan oscilaciones en la llama. 400 2. Atomizacin electrotrmica: hay que tener en cuenta que, al medirse concentraciones 401 ms bajas que en FAAS, las mediciones se deben realizar evitando cualquier posible 402 contaminacin proveniente del ambiente o de los materiales empleados. Por ello la 403 preparacin de muestras se debe hacer lo ms alejado posible del equipo. 404
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3. GFAAS e ICP-MS: se emplean campos magnticos intensos por lo que es necesario 405 sealizar la puerta de acceso informando del riesgo presente para personas que 406 presenten implantes metlicos o marcapasos. 407 Adems, las mediciones por ICP-MS es recomendable que se lleven a cabo en un 408 ambiente de sala blanca, debido a la mayor sensibilidad y los menores lmites de 409 deteccin que presenta esta tcnica respecto, por ejemplo, a FAASS 410 411 5. BIBLIOGRAFA 412 413 1. International Atomic Energy Agency. Clean laboratories and clean rooms for analysis of 414 radionuclides and trace elements. Vienna: IAEA; 2003. 415 2. Gonzlez Revaldera J. Toma y Preparacin de Especmes. En: Elementos traza: Aspectos 416 analticos, bioqumicos y clnicos. Dirigido por: J.A. Cocho, J.F. Escanero, J.M. Gonzlez de 417 Buitrago. Editorial: Publicaciones de la S. E. de Bioqumica Clnica y Patologa Molecular; 1998. 418 p: 101-12. 419 3. Organizacin Mundial de la Salud. Manual de bioseguridad en el laboratorio. 3 ed. 420 Ginebra: Organizacin Mundial de la Salud; 2005. 421 4. Perkin Elmer. Preparing Your Laboratory for Perkin Elmer Atomic Absorption 422 Spectroeters[http://www.perkinelmer.com/]. Waltham: Perkin Elmer [citado 11 Jul 2012]. 423 Disponible en 424 http://shop.perkinelmer.com/content/relatedmaterials/productnotes/pyl_atomicabsorptionspe 425 ctrometr.pdf. 426 5. PerkinElmer. NexION 300 ICP-MS. ICP- Mass 427 Spectrometry[http://www.perkinelmer.com/]. Waltham: Perkin Elmer [citado 11 Jul 2012]. 428 Disponible en: http://www.perkinelmer.com/CMSResources/Images/44- 429 74553GDE_PrepareYourLabforNexION300.pdf. 430 6. William D, Callister JR. Introduccin a la Ciencia e Ingeniera de los Materiales 2. 431 Barcelona: Revert; 2007. 432 7. Morales Geto J. Tecnologa de los materiales cermicos. Madrid: Daz de Santos; 2005. 433 8. Mahalingam TR. Metal free clean room for ultra trace analysis. India: Indira Ghandhi 434 Centre for Atomic Research; 2003. 435 9. Orden de 21 de julio de 1992 (BOE n 195 de 14.8.1992). Almacn de gases 436 comprimidos, licuados y disueltos a presin. 437 10. Ministerio de Ciencia y Tecnologa. R.D. 379/2001 de 6 de abril, por el que se aprueba el 438 Reglamento de almacenamiento de productos qumicos y sus instrucciones tcnicas 439 complementarias MIE APQ-1, MIE APQ-2, MIE APQ-3, MIE APQ-4, MIE APQ-5, MIE APQ-6 440 y MIE APQ-7. BOE n 112 jueves 10 de mayo de 2001. 441