B34 Parte1

: E M B R I O L O G I A
B A S I C A de Palien
BRUCE M. CARLSON 50. edicion
ACERCA
DEL AUTOR
Bruce M. Carlson es profesor delos departamentos deanatoma y biologa en la
Universidad deMichigan. Desde que obtuvo susgrados, deM.D. yPh.D. (doctor
en medicina y en ciencias) en la Universidad de Minnesota, hace unos 20 aos,
ha dedicado todo este tiempo a impartir cursos sobre biologa del desarrollo y
embriologa mdica. El Dr. Carlson mantiene unactivo programa deinvestigacin
del desarrollo y regeneracin de extremidades y msculos, adems de 15libros
y ms de 100artculos que ha escrito o revisado. La American Association for
theAdvancement of Scienceleotorg el premio Newcomb-Cleveland por susinves-
tigaciones sobre regeneracin. El Dr. Carlson tambin ha escrito varios artculos
para enciclopedias y revistas de pesca.
PREFACIO
Al preparar la quinta edicin de Fundamentos de Embriologfa, revis la edicin
anterior y realic algunos cambios importantes. Alrededor de 40070del texto es
nuevo en la presente edicin y se agregaron ms de 100 nuevas ilustraciones. No
obstante, el objetivo principal de la obra no ha cambiado y consiste en proporcio-
nar una descripcin coherente del desarrollo embrionario normal, de modo que
el estudiante adquiera un marco organizacional que le sirva de referencia para en-
tender conceptos ms avanzados sobre los mecanismos dedesarrollo, tanto norma-
les como anormales. I '
A pesar de lo dicho, la exposicin sobrella morfologa normal del desarrollo t
no constituye la nica meta del texto. La biologa del desarrollo tiene actualmente
como objetivo ideal integrar en su estudiolos puntos de vista morfolgico, experi-
mental, molecular y conceptual. Si uno presentara todos estos enfoques con cierto
detalle, el texto resultara demasiado extenso y no se podra cubrir en un curso
universitario normal. Por tanto, fue necesario establecer un orden de prioridad
con respecto a la profundidad con que se presentara el material. Igual que en las
ediciones anteriores, la "columna vertebral" del texto estriba en laexposicin lgi-
ca de la manera como un huevo fertilizado se desarrolla hasta convertirse en un
organismo vivo independiente. Sin embargo, en esta edicin se perfil el estudio
de la anatoma del desarrollo per se, a fin de que los estudiantes con un solo curso!
de biologa introductoria tambin pudieran seguir y entender el texto. Considero
que para los estudiantes es de importancia conocer las causas de las estructuras
que ellos ven forinarse en el laboratorio. Por tanto, he puesto mucho nfasis en
interacciones tisulares, migraciones, relaciones entre sustratos, etctera, que inter-
vienen en este proceso. Para el estudio de tales reas no bastan los datos sino se
requiere conocer las tcnicas empleadas para obtener nueva informacin. En esta
edicin tambin seincluyeron aquellos campos donde las investigaciones bioqumi-
cas y moleculares han logrado los ms importantes descubrimientos para la com-
prensin del desarrollo; no obstante, por economa d~espacio, no sedescribieron
con detalle las tcnicas aplicadas para obtener esos datos. Uno de los principales
objetivos de la presente edicin consiste en mostrar los aspectos en que se relacio-
nan el estudio sistemtico de la embriognesis y algunos de los mejor investigados
modelos de sistemas ms populares en biologa del desarrollo. Lo anterior fue pla-
neado para facilitar al estudiante que desarrolle la capacidad de relacionar entre
s distintos modos de abordar el tema.
Los ms importantes cambios especficos hechos al texto son:
VII
/
V III Prefacio
1. Seagreg el estudio defecundacin yprimeras etapas del desarrollo deratn
y erizo de mar (captulos 3 a 5),
2. Aument engran manera el nfasis sobre lafuncin delamatriz extracelular
y las molculas de adhesin celular, con respecto al desarrollo (captulo 6),
3. Se ampli el material sobre cresta neural y somitognesis (captulo 6),
4. Seincluy una seccin general sobre diferenciacin celular y seactualiz de
manera significativa el material sobrediferenciacin muscular ycartilaginosa
(captulo 9),
S. S~aadi un captulo ~uevo sobre epidermis (captulo 10),
6. Sediomayor nfasis al empleo demutantes genticos para estudiar el desarro-
llo (varios captulos),
7. Sereorden por completo el captulo sobre sistema nervioso (captulo 12),
8. Seagreg un buen nmero decuadros deresumen atodo lo largo del texto,
9. Se redujo el apndice del libro.
Como siempre sucede, un libro de este tipo es producto de la labor conjunta
devarias personas que apoyaron al autor. Margaret Croup realiz lasnuevas ilus-
traciones para esta edicin y volvi a transformar en arte los toscos esquemas e
ideas que selepresentaron; ellay el autor apreciamos mucho los sabios consejos
quenos dioWilliamBrudon, quien ilustr latercera edicin. Gracias al concienzu-
do y experto trabajo deJ ackie Rodgers, todo el texto seingres aun procesador
depalabras, lo cual nos ahorr mucho tiempo. Varios colegas cientficos fueron
muy gentiles al permitirnos emplear susilustraciones originales para aclarar el tex-
to. Expreso un agradecimiento especial a mi compaera en enseanza, Kathryn
Tosney, por todas susideas y comentarios, as como por varias micrografas elec-
trnicas deembriones. Los revisores del texto fueron muy valiosos por suscomen-
tarios ysugerencias. Por ltimo, quiero agradecer al equipo editorial ydeproduc-
cin de McGraw-Hill su trabajo profesional.
Bruce M. Carlson
CAPITULO 1
EMBRIOLOGIA: ALCANCE,
HISTORIA y AREAS ESPECIALES
ANTECEDENTES HISTORICOS
La forma en que nos desarrollamos siempre ha sido tema de gran inters. "De
dnde provengo?" es una de las primeras preguntas meditativas que hacen los
nios. Muchas sociedades primitivas mostraron intenso inters ennuestros orge-
nes prenatales, aunque su curiosidad con frecuencia llev aespeculaciones y misti-
cismo infundados. La obra de Aristteles sobre embriones tiene importancia para
nosotros; no por la informacin que recab, pese a la SOrprendente precisin que
parte de ella contiene, sino ms bien porque constituye un smbolo del inicio del
alejamiento de lasupersticin yconjetura en lamente humana, en un acercamiento
hacia laobservacin. Por desgracia, este tipo deenfoque no prevaleci, pues duran-
le gran parte de la Edad Media el prejuicio y autoritarismo opacaron la chispa
que los ms eminentes sabios griegos y romanos haban intentado encender.
o obstante, la naturaleza del enfoque no fue el nico motivo tras el rezago
en el progreso del conocimiento sobre embriologa. Las fases tempranas de desa-
rrollo comprenden estructuras en exceso diminutas y no bastaban la curiosidad
y la voluntad del aprendizaje por observacin. Si bien es cierto que Galeno haba
aprendido mucho acerca de la estructura de fetos relativamente avanzados, no fue
sino hasta finales del siglo XVII, cuando el microscopio lleg a ser un instrumento
eficaz, que lograron estudiarse competentemente las primeras etapas de la embrio-
gnesis.
En 1677, Hamm y Leeuwenhoek observaron por vez primera espermatozoides
3umanos, al poco tiempo que De Graaf (1672) describiera los folculos ovricos.
Aun en eseentonces no secomprenda la importancia de los gametos en el desarre-
1
2 Embriologa: alcance, historia y reas especiales
Fig. 1-1. Reproduccin del dibujo de Hartsoeker de un espermatozoide,
en el que muestra un individuo preformad(fiomnculo) en la cabeza es-
permtica. (Tomado de Essai de Dioptrique, Pars, 1694.)
llo. Surgieron dos posturas, una propona queel espermatozoide contena unindi-
viduo nuevo en miniatura (Fig. 1-1), al cual el vulo no haca ms que nutrir, y
laotra argumentaba que el vulo guardaba un cuerpo diminuto cuyo crecimiento
dealgn modo era estimulado por el lquido seminal. Durante algn tiempo, los
ovistas parecieron predominar, hasta queBonnet (1745) descubri quelos huevos
dealgunos insectospueden desarrollarse por partenognesis. Sinembargo, lasideas
preconcebidas son persistentes, ylaguerra entre animaculistas yovistas continu
siendo amarga y vituperadora. El ardor por la causa animaculista no disminuy
siquiera por el inevitable absurdo del concepto del encajonamiento -la implica-
cin de que cada miniatura deba a su vez contener la miniatura de la prxima
generacin, y as sucesivamente para toda generacin futura.
Estainfructuosa controversia seprolong hacia el siguiente siglo, hasta quepor
ltimo se abandon, gracias a los estudios de Spallanzani (1729-1799) y Wolff
(1733-1794). Laobra deLazzaro Spallanzani esdeespecial inters, yaqueconstiiu-
Embriologa: alcance, historia y reas especiales 3
_. un paso inicial para emplear el mtodo experimental como aplicacin en proble-
GJ .aS embriolgicos. Mediante una serie de experimentos de ingenioso diseo, de-
mostr que tanto los productos sexuales femeninos como masculinos eran necesarios
ara la iniciacin del desarrollo.
Kaspar Friedrich Wolff, contemporneo de Spallanzani, escribi a los 26 aos
deedad una brillante tesis enla que postulaba su concepto de epignesis. La hipte-
issustentaba que el desarrollo embriolgico selleva acabo mediante el crecimiento
y desarrollo paulatino. As, la diferenciacin rpidamente sustituy las antiguas
teoras del encajonamiento. A pesar de que ste fue un importante avance, sebasa-
ba en demasa en fundamentos puramente tericos como para proporcionarle un
mpetu perdurable al tema. Durante ms de medio siglo fue poco lo publicado
que pudiese ampliar el conocimiento de las etapas de desarrollo primarias, si bien
cada vez se tornaban ms comunes las observaciones y registros precisos.
La importante obra de Karl Ernst von Baer (1828) fue laprimera en hacer nfasis
en que las caractersticas bsicas ms generales de cualquier grupo extenso de ani-
males sepresentan en el desarrollo antes que los rasgos especficos, particulares a
diferentes miembros del grupo. A este concepto en ocasiones se le refiere como
laley de von Baer. Fue precisamente von Baer quien tambin demostr laexistencia
de capas germinales en el embrin, si bien la verdadera importancia de estas capas
no pudo comprenderse hasta que seconoci labase celular de laestructura animal.
Con la formulacin de lateora celular por Matthias Schleiden yTheodor Schwann
(1839) seasentaron al mismo tiempo los fundamentos delaembriologa ehistologa
modernas. El conocimiento de que el cuerpo adulto se constituye en su totalidad
por clulas y productos celulares, prepar el camino para la comprensin del con-
cepto bsico de la embriologai el cuerpo de un individuo se desarrolla a partir
deuna sola clula formada por launin, en la fecundacin, de dos clulas germina-
les aportadas una por el padre y otra por la madre. As, a pesar de que ya antes
del amanecer de la historia escrita sehaba despertado lacuriosidad ycon Aristte-
les sehaba iniciado laobservacin, no fue sino hasta laaparicin del microscopio,
el advenimiento del mtodo experimental y el descubrimiento dela estructura celu-
lar del cuerpo que .la embriologa se torn en una ciencia.
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EMBRIOLOGIA '\ [J i'
~--)
En esencia, todos los animales superiores comienzan sus vidas a partir de una sola
clula, el vulo fecundado (cigoto). Como su nombre lo indica, el cigoto tiene
un origen dual de dos gametos: un espermatozoide del padre y un vulo de la ma-
dre. El momento de fecundacin, cuando el espermatozoide se encuentra con el
vulo, representa el punto inicial en lahistoria de lavida uontogenia del individuo.
En su sentido ms amplio, la ontogenia se refiere a la d"uracion otal de vida de
"" ~)""'!ii!ll~~ ...,,~ ,*J $,1tlI J 1f'" ~_
un individuo.
Hacey;'un siglo, el gran bilogo alernn.August Weismann (1834-1914), realiz
la importante distincin entre el ~ll1!{_~cu~o) y la linea de cl~las germinales
(gam:~?s).Weismann consideraba que dicha lnea era por completo importante
.~
para laperpetuacin delasespeciesyqueel soma eraenesencia, un vehculo para
proteger yprolongar el plasma germinal. Enel pensamiento biolgico mscontem-
porneo, en particular con el siempre creciente nfasis en la sociobiologa, este
punto devistapuederesultar algo restrictivo, si bien proporciona unmarco conve-
niente para observar laperpetuacin delavida(Fig. 1-2). Unavezqueel individuo
pasa los aos reproductivos, el resto desu ontogenia no porporciona un ingreso
fsico directo asuproceso generativo. En trminos estrictos, laembriologa suele
considerarse como el periodo que seinicia con la fecundacin y finaliza con la
metamorfosis en los anfibios, la salida del cascarn en las aves y el nacimiento
entrelosmamferos. Sinembargo, loslibros sobreembriologa vertebrada tambin
tratan el desarrollo y maduracin delos gametos (gameto gnesis). As pues, este
texto cubre la mayor parte de las fases de la ontogenia que semuestran debajo
dela lnea derayas de' la figura 1-2. No obstante, cabe reconocer que la salida
del cascarn, el nacimiento ylametamorfosis no representan msqueconvenientes
puntos destacados deun proceso continuo yqueel desarrollo enrealidad consiste
en una serie ininterrumpida de acontecimientos correlacionados.
En la'actualidad el estudio dela embriologa comprende un perplejo conjunto
demtodos, datos, tcnicas yconceptos queseraimposible abordar ensutotalidad
enunsolocurso olibro. Enel transcurso delosaos, sehan creado varias especiali-
Muerte Muerte
~
;'
~
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/
Senectud Senectud
I ,
; I
_____~__---- -~Ii..------
ADULTO ADULTO
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+ + J uvenil
Ovulo Espermatozoide t
\ / " ,,,1'0 r~lml'",'
Crecimiento fetal
Fecundacin +
\ . Organognesis
\ G " t'" ~" "
Segmentacin I
al
" O
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" O
o
o
(5
Fig.J -2. Diagrama que ilustra las fases principales del ciclo de vida de un vertebrado tpico. La
continuidad del plasma germinal se indica con las flechas negras.
Embriologa: alcance" historia y reas especiales 5
zaciones dentro deladisciplina general delaembriologa, resultado lgico del pro-
greso, tanto conceptual como tcnico, de las ciencias naturales como un todo.
Los primeros estudios versaban principalmente sobre el aprendizaje del patrn
estructural bsico del cuerpo embrionario. Sinembargo, el inters sedesplaz poco
apoco delaconfiguracin 'corporal general aestudios msdetallados delaestructu-
ray disposicin delosdiminutos rganos internos del embrin. Lasinvestigaciones
de este tipo recibieron gran impulso y alcanzaron logros en la precisin a partir
delas tcnicas realizadas entre 1880y 1890: la obtencin de secciones seriadas y
el mtodo de placa de cera (His y Born) para efectuar reconstrucciones precisas
a partir de tales secciones. A finales del siglo, la atencin comenz a centrarse
en la estructura ms fina de los embriones. Sin embargo, an era relativamente
escaso el trabajo fisiolgico o experimental, y las publicaciones seocupaban ante
todo enpresentar dibujos yexplicaciones delascaractersticas estructurales deem-
briones dediversas edades. El trabajo deestetipo por lo general sedenomina em-
briologa descriptiva. "-'- ,
- Coii orgenes arraigados en el mismo tipo de trabajo descriptivo, el campo de
laembriologa comparada surgi a fines del siglo XIX. Un impulso determinante
enel desarrollo deestadisciplina fueel gran inters surgido enlaevolucin, elemen-
todominante delabiologa durante esteperiodo. Losprimeros estudios comparati-
vos serealizaron con las formas de mayor disponibilidad y a las que resultaba
msfcil abordar mediante tcnicas sencillas. Por ello, losembriones delos-inverte-
brados marinos eran, como ahora, objetos degranpopularidad enlainvestigacin.
Al mejorar lametodologa, sehalogrado recabar uncaudal de-informacin detalla-
daapartir del estudio demuchos tipos diferentes deembriones. Conforme el mate-
rial humano sehatornado ms accesible, sehan establecido asombrosamente bien
las relaciones entre las etapas dedesarrollo primarias delos seres humanos y las
de muchos otros animales.
Lapaulatina adquisicin deinformacin precisa y pormenorizada delas etapas
estructurales por lasqueatraviesa el embrin enel curso desudesarrollo, prepar
el terreno para el crecimiento delaembriologa experimental. Esta rama delaem-
briologa tienecomo objetivo precisar losfactores queactivan oregulan losproce-
sos del desarrollo. La embriologa descriptiva dicecundo ycmo sellevaacabo
unproceso, entanto quelaexperimental procura encontrar por quocurre el proce-
so enun momento dado y precisamente deesamanera particular. WilhelmRoux
(1850-1924), quien realizara el experimento queinicilaeradelaembriologa expe-
rimental, fueuno delos pioneros deesta disciplina. Con el fin decomprobar los
conceptos delapreforrnacin y epignesis, en 1888destruy una clula(blastme-
ra) deunembrin bicelular derana con una aguja caliente, enunintento por saber
si la clula restante dara lugar nada ms que a la mitad de un embrin (como
seesperara, segn ladoctrina dela preformacin) o si esa clula sera capaz, en
su desarrollo ulterior, derestaurar la deficiencia. Aunque sus resultados experi-
mentales resultaron ser algo engaosos, al poco tiempo otros investigadores, inspi- '
rados por su trabajo, mostraron que al separar por completo las clulas de un,
embrin deranabicelular, cadauna deellastienelacapacidad deoriginar unindivi-
nocompleto. Este procedimiento proporcion una demostracin experimental
de la imposibilidad de defender la doctrina preformista y sent los fundamentos
de una nueva disciplina, Roux acu la palabra alemana Entwicklungsmechanik
para describir este tipo de estudios experimentales; su traduccin literal al espaol
esmecnica del desarrollo. Waddington (1956) consider que dicho trmino conlle-
valadesafortunada implicacin deque los fenmenos incluidos son engran medida
fsicos y semejantes a una mquina. Por ello prefiri el trmino epigentica, que
expresa el concepto de que' 'el desarrollo sucede mediante una serie de interaccio-
nes causales entre diversas partes, y tambin recuerda que los factores genticos
estn entre las determinantes ms destacadas del desarrollo" (Waddington, 1956,
pg. lO).
Los recientes y espectaculares avances en biologa molecular han proporcionado
nuevo mpetu al campo de la embriologa qumica. A principio de este siglo, los
estudios qumicos con embriones eran fundamentalmente descriptivos (Needham,
Fig. 1-3. Dibujos antiguos que pretenden ilustrar casos de malformaciones humanas. A, El nio-
ave de Par (alrededor de 1520). B, Monstruos individuales, parte humanos yparte animales (Schwal-
be, 1906-1909).
1931). En laactualidad, lasinvestigaciones bioqumicas desempean unpapel pri-
rnordialen laampliacin denuestro conocimiento sobre lafisiologa del embrin.
Estas investigaciones ayudan acomprender laforma enlaquelainformacin con-
tenida en el material gentico del vulo fecundado, dirige la fabricacin de los
componentes qumicos yestructurales especficos del embrin, atravs delaaccin
del cido desoxirribonucleico (DNA) y el cido ribonucleico (RNA).
La teratologa eslarama delaembriologa que seocupa del estudio delasmal-
formaciones. Losdibujos eimgenes deindividuos anormales constituyen algunos
delos registros biolgicos ms antiguos. En laantigedad sesupona que el naci-
miento deun"monstruo" eraunpresagio. Dehecho, lapalabra monstruo sederiva
del verbo latino que significa mostrar y su uso se basaba en la creencia de que
el nacimiento deun nio malformado era una forma sobrenatural deindicar qu
acontecimientos futuros seanticipaban. Durante laEdad Media, losescritos sobre
teratologa parecieron degenerar enconcursos para descubrir quin poda recabar
las malformaciones ms extraas. Cuando un autor se rezagaba respecto a sus
competidores, recurra asuimaginacin, aparentemente sinremordimiento algu-
no, para confeccionar las monstruosidades ms fantsticas. Quien tenga inters
enesta fasedelateratologa podr encontrar fascinantes ilustraciones enAnoma-
hes and Curiosities of Medicine deGould yPyle(Fig. 1-3). El estudio delateratolo-
gaha adoptado por completo un nuevo aspecto en aos recientes. A medida que
losdefectos congnitos sehan colocado entrelas 10causas mscomunes demuerte
enlospasescon nivelesavanzados enmedicina, sehan invertido grandes esfuerzos
ycuantiosas sumas dedinero para identificar yeliminar los factores quelosocasio-
nan. Las investigaciones sobre los mecanismos mediante los cuales interfieren los
teratgenos (sustancias que causan defectos congnitos) en el desarrollo normal,
adquieren cada vez ms una orientacin bioqumica y farmacolgica.
El avance extremadamente acelerado enlos ltimos aos delas investigaciones
relativas aproblemas deconcepcin yanticoncepcin hallevado aqueseestablezca
una disciplina comnmente llamada biologa de la reproduccin. Adems de los
problemas deorientacin ms prctica, que comprenden tcnicas defecundacin
yanticoncepcin, estarama hacegran nfasis enlagametognesis normal, laendo-
crinologa delareproduccin, el transporte degametos yfecundacin, el desarrollo
embrionario temprano y la implantacin del embrin de los mamferos.
Una forma de percibir el desarrollo embrionario que en la actualidad goza de
gran popularidad esmediante el enfoque queseconoce como biologa del desarro-
llo. Amplio en su alcance, estecampo no slo incluye el desarrollo embrionario,
sino tambin los procesos posnatales como el crecimiento normal y neoplsico,
metamorfosis, regeneracin yreparacin tisular aniveles decomplejidad que van
delo molecular hasta considerar el organismo. El enfoque delabiologa del desa-
rrollo secentra en procesos y conceptos, ms que en estructuras morfolgicas,
ycontempla tanto lossistemas vegetales como losanimales. Idealmente, labiologa
del desarrollo y los mtodos de orientacin ms clsicos no deben considerarse
mtodos competitivos para estudiar al embrin, sinoantes biencomo aproximacio-
nes complementarias que ofrecen a nivel individual una incitante reflexin a la
forma en que se logra el desarrollo.
EMBRIOLOGIA EN LA SOCIEDAD CONTEMPORANEA
En los ltimos aos, la virtual explosin tecnolgica ha convertido en prctica
comn a las ideas que apenas hace algunas dcadas correspondan al campo .de
la ciencia ficcin. Gran parte de latecnologa moderna sebasa en resultados de
investigaciones delaboratorio quesedescribirn conmayor detalle enloscaptulos
subsiguientes.
El "nio deprobeta" no es nada ms una realidad en nuestros das, sino que
setrata deun acontecimiento relativamente comn en muchos centros mdicos.
Tuvieron que combinarse muchos avances en la investigacin y tecnologa para
permitir laaplicacin de estemtodo. Cabe destacar como dato interesante que
los criaderos deanimales contribuyeron engran medida aestos avances, slo con
fineslucrativos. Ensereshumanos, latcnica llamadafecundacin in vitro y trans-
ferencia embrionaria, hapermitido quealgunas parejas sinhijos lostengan apartir
de su propia herencia gentica. Esta tcnica seutiliza en casos en los que tanto
lamadre como el padre soncapaces deproducir vulos yespermatozoides viables,
peroexisteunbloqueo enlastrompas uterinas delamujer queimposibilita lafecun-
dacin del huevo y su subsecuente transporte al tero (Fig. 1-4).
El primer problema consiste en obtener vulos frtiles de la madre, y esto se
logra mediante dos avances tcnicos. Uno requiere que seadministre a la madre
un medicamento inductor deovulacin, lo cual ocasiona laproduccin devarios
vulos envez deuno solo. (Muchas mujeres que han dado aluz decuatro asiete
Trompa de
Falopio bloqueada
Estimulacin
hormonal de la
maduracin
del vulo
2
Extraccin de los vulos
3 por laparoscopia
Fecundacin v'
5
Reimplantacin
del embrin
4
Segmentacin
temprana
in vitro
6
Embriones
adicionales
congelados
Fig. 1-4. Dibujo esquemtico de la fecundacin humana in vitro y de la transferencia embrionaria.
nios alavezen aos recientes han ingerido con anterioridad medicamentos pro-
movedores de fecundacin.) J usto antes que los vulos se liberen normalmente
delosovarios, el mdico, atravs deuna tcnica queseconoce como ciruga lapa-
roscpica, inserta una sonda enlacavidad plvicadelapaciente ybajo observacin
directa extrae los vulos maduros del ovario sin necesidad de un procedimiento
quirrgico mayor. Los vulos secolocan sobre un portaobjetos devidrio (deah
el trmino in vitro, que significa en vidrio) ysemezcla con el espermatozoide del
padre. Tras muchos aos deintentos fracasados, losbilogos dedicados afenme-
nos reproductivos aprendieron las condiciones ambientales que serequieren para
que la fecundacin selleveacabo al exterior del cuerpo. El vulo fecundado se
deja entonces desarrollar durante algunos das en su incubadora artificial.
Mientras tanto, el cuerpo delamujer secondiciona hormonalmente con el fin
de que su tero pueda aceptar al embrin. En tanto el embrin apenas consiste
enuna pequea masa declulas, sesucciona hacia arriba por una sonda yaconti-
nuacin selibera al interior del tero, donde, si todo vabien, seadherir ydespus
secompletar unembarazo normal. Algunas mujeres quepueden producir vulos
frtiles pero que no tienen la posibilidad de llevar al embrin a trmino en sus
propios teros establecen convenios con otras mujeres para que funjan como ma-
dres sustitutas. Por unos 10000 dlares (el costo promedio en 1987en Estados
Unidos), lamadre sustituta acepta laimplantacin del embrin deotra pareja en
sutero para llevarlo atrmino. Cuando el nio nace, lamadre sustituta loentrega
asuspadres genticos. Al momento deescribir el presente texto yasehainformado
del primer caso en el que una madre sustituta rehus entregar asu hija. An no
es posible lograr en su totalidad el desarrollo de un embrin de mamfero desde
laconcepcin hasta lamadurez al exterior del cuerpo. Sinembargo, losobstculos
principales parecen ser ms tcnicos que conceptuales.
Es yaprctica comn fecundar al mismo tiempo ms deuno delosvulos. Una
vezquesehaimplantado el embrin enel tero, losrestantes secongelan. Mediante
latcnica adecuada, el embrin demamfero puedecongelarse, almacenarse ydes-
helarse, segn serequiera, para implantarse en el tero. Esta tcnica seemplea
demanera sistemtica en animales domsticos y seres humanos. As, si el primer
embrin implantado no logra sobrevivir, los congelados pueden deshelarse eim-
plantarse hasta que la provisin de embriones seagote. Por ello, los bancos de
embriones sonuna realidad en nuestros das. En laprctica, losembriones huma-
nosadicionalessedestruyencuando naceunnioproducto delaconcepcinartificial.
Lacapacidad demanipular embrionestempranos demamferos sehaincrementado
dramticamente enaos recientes y ahora esposible producir quimeras entre dos
oms individuos delamisma especieeincluso diferentes (Cap. 4). An no esposi-
bleproducir clonas devertebrados declulas nicas como puedehacerseenvegeta-
lessuperiores. Noobstante, puede obtenerse unaaproximacin del proceso declo-
nacin al trasplantar seel ncleo deuna clulasomtica aunhuevo enucleado (Fig.
1-27). Pese a que este procedimiento es ms comn en anfibios, tambin se ha
realizado conxito enratones (IlImenseeyHoppe, 1981)ycada vezesms comn
transferir genes de una especie al huevo de otra. Esta tcnica seusa sobre todo
para estudiar laaccin delos genes, aunque seha mostrado que los transferidos
Fig. 15. Pareja de ratones de 10
semanas de edad. El de la izquier-
! da, el ratn normal, pesa 21.2 g. El
de la derecha, compaero de cama-
da del ratn no.rmal, es portador de
un gen transferido de rata que codi-
fica una hormona de crecimiento;
pesa 41.2 g. (Microfotografa corte-
sa de R. Brinster. De Palmiter y col.,
1982. Nature, 300:611.)
pueden ejercer efectos importantes en el husped. Por ejemplo, la transferencia
del gendelahormona decrecimiento derata aunvulo fecundado deratn produ-
ceun ratn mucho ms grande delo normal (Fig. 1-5). Dichas tcnicas tienen el
potencial depoderse aplicar en el tratamiento deciertas enfermedades genticas.
Otras tcnicas recientes hacen posibleel diagnstico ytratamiento deenfermeda-
des genticas y defectos congnitos antes del nacimiento del nio. El anlisis de
una pequea cantidad del lquido amnitico (Cap. 7) querodea al embrin permite
descubrir el- sexodel nio antes denacer, as como detectar lapresencia detrastor-
nos genticos que podran ocasionar un nio con defectos. La aplicacin de las
tcnicas deultrasonido ylos nuevos procesamientos deimgenes con rayos X per-
miten diagnosticar gran cantidad dedefectos anatmicos enlos fetos, deloscuales
algunos pueden tratarse mediante cirugaintrauterina. Larevolucin enlabiologa
contempornea cada vez ms permite laaplicacin detcnicas quedejan manejar
lareproduccin humana yel desarrollo embrionario. Enlaactualidad el reto princi-
pal radica en cultivar la sabidura y prudencia para poder manejar la aplicacin
y consecuencias de estas tcnicas.
PROCESOS Y CONCEPTOS FUNDAMENTALES DEL DESARROLLO
Aunque estetexto sededicaengran partea lamorfologa del desarrollo embriona-
rio, es importante percatarse que los rganos y estructuras que seven de modo
macroscpico o en las preparaciones para ser observadas al microscopio, son los
productos finales deprocesos dinmicos que forman parte integral del desarrollo
como sonlasestructuras por s mismas. En estaseccin sedescribirn brevemente
algunos procesos yconceptos devital importancia para explicar por quel embrin
sedesarrolla delamanera como lohace. Despus sedescribirn ejemplos especfi-
- emuchos deestos procesos fundamentales conforme serelacionen con fen-
;;::; os morfolgicos caractersticos en la embriognesis .
. tesis intracelular y su regulacin
Desde el momento delafecundacin, el desarrollo embrionario acualquier nivel
esel resultado directo oindirecto deactividades sintticas enel interior delaclula.
El DNA dentro del ncleo es el depositario demucha delainformacin gentica
en la clula, y la transcripcin de esta informacin del DNA al RNA, as como
su subsecuente traduccin en protenas, son temas conocidos detodo estudiante
debiologa. Uno delosaspectos ms importantes del desarrollo embrionario estri-
baenlanaturaleza demecanismos reguladores querestringen opermiten lasntesis
deprotenas especficas ydeotras macromolculas. Si bien lacomplejidad delos
mecanismos quecontrolan lasntesisdeloscidos nucleicos yprotenas trascienden
el propsito del presente texto, cabehacer una revisin dealgunas vasintracelula-
ressintticas yreguladoras queserelacionan conel desarrollo. Lafigura 1-6mues-
ITael modelo generalizado de una clula; tan slo destaca las estructuras y vas
intracelulares que despus se referirn en el texto.
Enunaclula en interfase (laqueseencuentra entredivisiones mitticas), ciertas
porciones delamolcula deDNA nuclear estn libres derestringir alas protenas
que seenlazan al DNA y pueden dirigir la sntesis del RNA mensajero (mRNA).
Este paso seconoce como transcripcin (Fig. 1-6, uno). Las molculas del RNA
recin formado contienen regiones (exones) que codifican segmentos especficos
deunamolcula deprotena, adems deotras regiones (intrones osecuencias inter-
medias) que al parecer no poseen informacin que seincluya directamente en la
secuencia deaminocidos dela protena que habr de formarse. En una serie de
pasos, a menudo llamada procesamiento del mRNA (Fig. 1-6, dos) los intrones
se fraccionan de manera enzimtica y los exones restantes seunen para formar
lamolcula definitiva demRNA. Despus derealizarse el procesamiento, lasmol-
culas del mRNA recin formado emigran del ncleo al citoplasma de la clula,
atravs de los poros dela membrana nuclear, y una vez dentro del citoplasma,
pueden seguir cualquiera dedos vas, segn el tipo demolcula yel tipo declula.
Para laconstitucin demolculas deprotenas quetienen como objetivo funcionar
en el interior delaclula (las protenas estructurales y la mayor parte delas enzi-
mas), lasmolculas del mRNA seenlazan conlosribosomas para formar polirribo-
somas, cuyalongitud vara segn el tamao delaprotena que seestfabricando.
Sin embargo, si los mRNA seestn codificando para protenas que sesecretarn
delaclula(p. ej., colgena, inmunoglobulinas), el mRNA forma complejos con
el retculo endoplsmico rugoso. Las.cadenas polipeptdicas que seconstituyen
endicho retculo setransportan al aparato deGolgi, donde por logeneral seenlazan
con molculas polisacridas. A partir del complejo deGolgi, lasprotenas setrans-
portan a la membrana celular, dentro de las vesculas, y se vacan en el medio
que rodea a la clula.
Los mecanismos reguladores operan casi acualquier nivel delavadelasntesis
deprotenas. Algunos son estrictamente intracelulares, entanto que otros son in-
Fig. 1-6. Modelo generalizado de una clula, en el que se destaca la va de la sntesis de prote-
nas, en la cual el RNA mensajero inicialmente se sintetiza en la plantilla del DNA (1). Despus
de procesarse dentro del ncleo (2), el mRNA lo abandona a travs de los poros nucleares (3).
La sntesis de las protenas intracelulares (4) la llevan a cabo los polisomas, que consisten en
molculas de mRNA relacionadas con los ribosomas. La sntesis de las protenas que habrn
de exportarse a partir de las clulas se realiza en el retculo endoplsmico rugoso (5), de donde
son transportadas al aparato de Golgi (6), donde formarn complejos con los polisacridos recin
sintetizados (7). Las pequeas vesculas contenedoras de protenas que se dirigen a la membrana
abandonan el aparato de Golgi (8), y cuando llegan a la membrana celular (9), se fusionan con
ella y liberan las molculas de las protenas mediante un proceso que recibe el nombre de exocitosis.
fluencias extracelulares que serealizan a travs de vas intracelulares. Cada vez
es ms obvio que las molculas receptoras ubicadas en la superficie de la clula
fungen como mediadoras de muchas influencias extracelulares (Fig. 1-7).
Laadenilciclasa esuna enzima importante encontrada enel interior delaclula,
pues cataliza la reaccin del adenosintrifosfato en adenosinmonofosfato cclico
(ATP~cAMP). El AMP cclicodesempea el papel demensajero intracelular ge-
neral as como lavafinal para losefectos deunnmero decompuestos queactan
sobre la superficie de la clula. La enzima adenilciclasa controla la velocidad de
Lipido de Proteina receptora
mem~ \ I ~1J.................
z
.............
R
..... Aden.. i.... Ie'..... c..~a:r:ona
V f P ~ 1 t ,
~ ~ t a : n ~ ~ ~ T a ATP) A ~i i - X A
" ciclasa ~~ YR
cAMP ~~
Protein- /\.
crnasas ~
Flujo de
Ca"
Transcripcin gentica
Fig. 17. Diagrama de lamembra-
na celular y del sistema del AMP c-
clico al interior de una clula gene-
ralizada. La membrana celular es
una capa doble de lpidos con mol-
culas de protenas diseminadas en
distintas regiones y a diferentes ni-
veles. Cuando la hormona, oalguna
otra sustancia, se adhiere a un re-
ceptor especial (X-RX en este caso),
el complejo de la hormona y el re-
ceptor pueden entonces desplazar.
se ala molcula de adenilciclasa, la
cual se activa y cataza laformacin
del cAMP a partir del ATP. Aqu se
muestran varias actividades intrace-
lulares bajo la influencia del cAMPo
sntesi s del cA MP. Segn una hi ptesi s, cuando una sustanci a reacci ona con un
receptor especfi co de la superfi ci e dela clula, el complejo mi gra en torno a la
membrana celular hasta enlazarse con la molcula deadeni lci clasa, lacual acti va
la enzi ma, ocasi onando un aumento en lasntesi s del cA MP. Este lti mo, en su
papel de "segundo mensajero" , puede i nflui r en algunos procesos i ntracelulares
medi ante laacti vaci n, entre los cuales los ms promi nentes son los que acti van
lasprot ein cin a sa s (enzi masquefosfori li zan protenas), queasuvez pueden esti mu-
lar vas metabli cas, como la de la descomposi ci n de glucgeno. Otras de las
acti vi dades que seesti mulan por el i ncremento deconcentraci ones decA MP son
latranscri pci n genti ca, el metaboli smo deenerga yel flujo decalci o (Fi g. 1- 7).
A l parecer, las otras molculas que i nteractan con los receptores delasuperfi ci e
celular evi tan lavadel cA MP, entanto otros mecani smos i ntracelulares proyectan
su i nfluenci a al ncleo.
Superficie de la clula
Durante losprocesos dedesarrollo, lasuperficie celular puedepercibirse demuchas
maneras. Segnlafisiologa celular tradicional, lasuperficie serepresenta por una
membrana de dos capas lpidas, a travs de las cuales setransportan molculas
hacia el interior y el exterior dela clula. Sin embargo, la superficie de laclula
esmucho msqueesto; esel medio por el cual laclulaprueba oexamina suambien-
te externo, lo cual realizan en gran medida las molculas receptoras deprotenas
especficas incrustadas en la membrana plasmtica. La gran cantidad deprote-
nasrelacionadas conlasuperficie proporciona amuchas clulas unaidentidad mo-
lecular nica, lacual desempea unpapel importante enlasinteracciones celulares
durante el desarrollo. Las diferencias en la superficie dela clula constituyen la
base mediante la cual las clulas del sistema inmunitario detectan y seenfrentan
a las clulas y sustancias extraas al cuerpo.
Para poder apreciar el papel quedesempea lasuperficie delaclulaenel desa-
rrollo, es necesario percatarse dela forma en laque seconstituye. La membrana
plasmtica es en su mayor parte una capa doble de molculas fosfolpidas, con
los componentes lpidos hidrfobos (cadenas de hidrocarburo) concentrados en
laparte media y los grupos polares hidroflicos dispuestos en las partes externas
einternas dela membrana (Fig. 1-8). Las dos capas lpidas son semilquidas, de
modo queloscomponentes delamembrana plasmtica pueden concentrarse odis-
persarse sobreellaencuestin deminutos. Dentro delamembrana estincrustada
una diversidad demolculas de protenas, de las cuales algunas penetran ambas
capas de la membrana plasmtica; otras tan slo sedescubren en su superficie
interna o externa. Muchas de las protenas de membrana son receptoras de las
molculas especficas (p. ej., hormonas, factores decrecimiento) quellegaaencon-
trar la clula; otras funcionan como mediadoras para la adhesin de molculas
especficas en la superficie interna o externa dela clula y una gran cantidad de
ellascontiene cadenas laterales decarbohidratos queconfieren propiedades funcio-
nales o antignicas especficas a la clula.
. )
r
Capa doble de ~
fosfolpidos l
Fig. 1-8. Diagrama esquemtico de la membrana plasmtica en el que se muestran protenas'
intrnsecas incrustadas en la capa doble de lpidos.
~ -
":::1 importante aunque poco comprendido componente delasuperficie celular
=s.;._ lase de molculas glucoesfingoltpidas. Estas molculas, de las cuales hay
.e- ~. romenos 130variedades, constituyen alrededor del 5O J o delasmolculas lpidas
; ::. e: superficie externa de la membrana plasmtica. Poseen una cadena lateral
~ . 'do graso incrustada en tal membrana y una cadena libre decarbohidratos,
mpuesta por diversas combinaciones demolculas simples deazcar, quesepro-
delasuperficie externa delaclula. Las cadenas libres decarbohidrato sson
importantes en la regulacin de muchos aspectos relativos a las actividades que
sellevan acabo en la superficie celular y tambin pueden modificar actividades'
tanfundamentales como ladivisin celular (Hakomori, 1986). Muchas delaspro-
piedades antignicas ydelosfenmenos dereconocimiento declulas individuales
pueden atribuirse a sus glucoesfingolpidos superficiales.
Adems delos componentes moleculares especficos, la superficie de la clula
contiene unnmero decomplejos deunin queenlazan una clulacon otra. Entre
losmsdestacados estn lasdesmosomas, lascuales aglutinan alasclulas epitelia-
lesenpequeos puntos, deaspecto semejante al declavos remachados (Fig. 11-7),
y sirven tambin como puntos focales para laadhesin deprotenas intracelulares
fibrilares. O tra unin importante eslaqueseconoce como launin con hendidura
(Fig. 1-19), funciona como intermediario en la comunicacin entre dos clulas.
Sobrelasuperficie demuchos epitelios existen uniones estrechas queenlazan entre
s aclulas adyacentes, constituyendo una barrera impermeable hacia el exterior.
Estas uniones tambin evitan que las protenas demembrana seentremezclen en
ualquiera de los flancos de la unin.
La adherencia celular esuna propiedad importante delamayor parte delas es-
tructuras embrionarias. Algunos experimentos cruciales han mostrado quelasclu-
lassemejantes tienden aunirse y separarse delas dediferente tipo. H. V. Wilson
(1907) fueel primero endemostrar estefenmeno ainicios desiglo, al comprimir
aesponja atravs deuna malla deseda y disociarla en clulas individuales, las
uales luego volvieron a unirse y terminaron por constituir una nueva esponja.
En investigaciones ulteriores, cuando sesujet ados esponjas alasmismas condi-
iones, las clulas separadas seordenaron segn su especie y sereconstituyeron
losdostipos originales deesponja. Enunestudio realizado por Holtfreter (Townes
y Holtfreter, 1955)enembriones deanfibios, lasclulas dedistintas capas germina-
lesoderganos primordiales exhibieron propiedades semejantes. A partir deestos
primeros experimentos, sehan hecho grandes esfuerzos por comprender lanatura-
leza de las propiedades de la superficie celular con objeto de dar cuenta de los
fenmenos que describieran los primeros embrilogos. Una de las explicaciones
tentativas inicialespostulaba quelasclulastendan asepararse entres si seextraa
Ca2+ y Mg
2
+ de su medio circundante. Una de las posibles razones por la que se
aglutinan ms fcilmente quelasquenosonsemejantes, incluyelaadherencia dife-
rencial ylapresencia deuna diversidad defactores deasociacin intercelular mole-
cular (ligandos) que seenlazan a tipos especficos de clulas.
En aos recientes sehaidentificado una clasedemolculas de adherencia celular
II adhesion molecules, CAM) deglucoprotena especfica (Edelman, 1983), de
cuales dos desempean un papel importante en el desarrollo embrionario: las
N-CAM (aisladas a partir de neuronas) y las L-CAM (originalmente aisladas de
clulas embrionarias de hgado). Se ha relacionado una tercera CAM (Ng-CAM)
con neuronas y sus clulas gliales circundantes (Cap. 12), las cuales a pesar de
su nombre especfico, se encuentran en las clulas precursoras de muchos tipos
de tejidos, y pueden presentarse o estar ausentes, durante las diferentes etapas en
la historia de la vida de una clula (Fig. 6-18). Asimismo existen cambios de desa-
rrolIo importantes en una CAM dada. Las molculas de la N-CAM embrionaria
contienen gran cantidad de molculas de cido silico, en tanto que la forma adulta
slo encierra una tercera parte de ellas. En su carcter de molculas de adherencia,
las CAM al parecer participan en diversos fenmenos morfogenticos durante la
embriognesis. Ms adelante se ofrecern ejemplos especficos al respecto.
Adems de la adherencia celular, la superficie de la clula interviene en muchos
importantes procesos de desarrollo. Todos los agentes humorales (p. ej., hormo-
nas, factores de crecimiento, medicamentos) que afectan a las clulas deben inter-
actuar con la superficie celular, por lo regular atravs de las molculas receptoras.
En general seconsidera que el desarrollo de las diferentes propiedades de lasuperfi-
cie es la causa de los principales desplazamientos celulares (p. ej., los movimientos
morfogenticos que ocurren durante la gastrulacin; Cap. 5), tan importantes en
ciertas etapas del desarrollo. Se piensa que muchas de las interacciones celulares
comprendidas en la generacin de patrones y formas de las estructuras complejas
dependen en gran medida de las interacciones que se llevan a cabo en la superficie
de las clulas implicadas.
Es posible estudiar las propiedades de la membrana celular de muchas maneras.
La morfologa de la superficie delaclula puede examinarse mediante microscopia
electrnica de barrido (Fig. 1-24), o aun nivel ms detallado, mediante una tcnica
que se conoce como criofractura (Fig. 1-19B). Los anticuerpos de las molculas
especficas de la superficie celular constituyen valiosas herramientas para marcar
los componentes especficos de sta, as como las lectinas, familia en esencia de
glucoprotenas de plantas que seenlazan en forma especfica asecuencias definidas
de carbohidratos de lasuperficie de laclula (Etzler, 1985). Asimismo, varias tcni-
cas electroforticas han permitido identificar gran cantidad de protenas de mem-
brana especficas.
Matriz extracelular
Las clulas no existen ni funcionan en el vaco, yen la mayor parte de las situacio-
nes, tampoco entran en contacto directo entre s, aun en los tejidos aglutinados
con mayor densidad. Antes bien estn incrustadas en o sobre una matriz extracelu-
lar, una red macromolecular cuya composicin vara de un tejido a otro y de una
etapa de desarrollo a otra (Hay, 1981). Las capas de clulas epiteliales descansan
sobre la lmina basal, una especie de placa delgada de la matriz extracelular, Las
clulas de cartlago y de hueso se presentan inmersas en una matriz extracelular ,
diseada para soportar grandes pesos. Los espacios entre los diferentes tejidos es-
tn rellenos de fascia, una matriz extracelular que funciona tanto como material
'-~ogico deempaque como medio detransmisin detensin mecnica. El tendn
representa unejemplo deuna matriz extracelular diseada para transmitir podero-
fuerzas mecnicas del msculo al hueso.
arias clasesimportantes demacromolculas constituyen lamatriz extracelular.
Colgena esel trmino genrico para designar una familia deglucoprotenas que
secaracteriza por tener glicinacomo cada tercer aminocido ytambin por poseer
:.. 5aminocidos, hidroxiprolina ehidroxilisina, querara vezseencuentran enotras
~otenas. Launidad bsica delacolgena, latropocolgena, consta detres cade-
nas individuales depolipptidos (cadenas a), deunos 1000aminocidos cada una,
enrolladas enuna hlicezurda. Las molculas delatropocolgena sepolimerizan
enforma bamboleante para constituir lasconocidas fibras decolgena conbandas
que pueden observarse con el microscopio electrnico (Fig. 1-9). En laactualidad
resulta claro que lostejidos delos vertebrados contienen diversos tipos decolge-
nas, tal vez hasta 20, cuya determinacin depende en gran medida delas cadenas
a, y que tienen propiedades diferentes y seubican en distintos sitios del cuerpo.
Los demayor importancia en el desarrollo embrionario seresumen en el cuadro
1-1. La mayor parte de las colgenas constituyen fibras distintas, con excepcin
del tipo IV (la colgena que se encuentra en las lminas basales), distribuida a
manera de red holgada entre los dems componentes de la lmina basal.
680 A
1i
11111111111111111111111111111111111111111111111111111111111IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIII! IIIIIIIIIIIIIIII1111I11
I I
Fibrilla de
colgena
Fibrilla de colgena
esquemtica
--o
t
Autoconstitucin
de monmeros de
tropocolgena en fibrilla
I 68 I ~
Tropocolgena esquemtica
__ ------ 3000
Molcula de tropocolgena
. ) { / S ( 5 & ~ ? 5 S ; S & ' S < S & ~ C
t
Segmentacin de
campos no helicoidales
"/"'-:;:. G r.:
-J' b< Y -----' - " m' " ~ m- ' - " m- ' - " W
o
--~ -' ,
' - ' - , \)\/\ .' .(x../\ \ A.,,\ ' x" - ' \ - ,X,- - - - - - _.C~ / '_o
__;",.J /'-.' o.' . i' _. - 0'- X__.......__,...., ~
Molcula de procolgena ~ i._
__ -9. Representacin esquemtica de la autoconstitucin de la fibrilla de colgena a partir.
de molculas de procolgena. Adaptado de diversas fuentes.
Embriologa: alcance, historia y reas especiales
CUADRO 1-1. Tipos principales de colgena y su distribucin
Distribucin en el cuerpo Tipo Proteina de fijacin
Fibronectina
1I Condronectina
III Fibronectina
IV Laminina
V Fibronectina
X Condronectina (?)
Piel, hueso, tendones, dientes, crnea, ligamentos, tejido
conectivo intersticial (cerca de 90070de la colgena es de
tipo 1)
Cartlago, notocorda, cuerpo vtreo (ojo), crnea (pollo)
Piel, vasos sanguneos, esclertica, muchos rganos,
msculo esqueltico
Lmina basal
Placenta, vasos sanguneos, msculo liso
Cartlago hipertrofiante
Las glucoprotenas de insercin adhieren las clulas a otros componentes de la
matriz extracelular. En los procesos de desarrollo que secaracterizan por la migra-
cin o por laextensin declulas, estas glucoprotenas son un elemento importante
de los sustratos a travs de los cuales se desplazan las clulas.
Una de las glucoprotenas de insercin mejor comprendidas hasta ahora es la
fibronectina, dmero con unidades de polipptidos similares de 220 000 a 250 000
daltons. En uno de sus extremos, las subunidades estn unidas por enlaces de disul-
furo ycada subunidad sedivide en campos definidos con caractersticas funciona-
les especficas (Fig. 1-10). Los campos que se enlazan a las clulas y la colgena
son departicular importancia en laembriologa, ya que gracias aellos seha tornado
posible comprender el enlace de las clulas asus sustratos. Seha mostrado reciente-
mente (Pierschbacher y Rouslahti, 1984) que una secuencia de s610 cuatro amino-
cidos (arginina-glicina-asparagina-serina) en lamolcula de fibronectina es la en-
cargada de sus propiedades de enlace celular. En la actualidad es cada vez ms
evidente que estos aminocidos seenlazan aun grupo detres glucoprotenas (140 000
daltons), que se introducen en la membrana plasmtica de las clulas. Los sitios
deinsercin celular delafibronectina son tambin las regiones en las que convergen
conjuntos deactina, una importante protena contrctil intracelular. La fibronecti-
na se relaciona sobre todo con las clulas no epiteliales, as como con los tipos
de colgena I, III y IV (cuadro 1-1), y adems confiere estabilidad a las clulas
maduras. Resulta interesante destacar que las clulas de tumores malignos seenla-
zan de manera deficiente a la fibronectina, lo cual puede en parte explicar sus pro-
piedades invasoras.
La condronectina es una glucoprotena que funciona de manera anloga. Como
su nombre lo indica, sirve para mediar la insercin de los condrocitos (clulas de
cartlago) ala colgena tipo II en la matriz del cartlago. La condronectina consta
devarias subunidades vinculadas por enlaces dedisulfuro, pero an no secompren-
den bien sus propiedades funcionales.
La laminina esla otra glucoprotena de insercin importante (Fig. 1-11). Setrata
de una molcula cruciforme compuesta de tres cadenas A, de 200 000 daltons cada
Fig. 1-11. La molcula laminina
con sus regiones de fijacin.
Molculas de
fibronectina
i
eparina
\ \ \ \ \ \ \ \ \ \ \ \ \ I \ \ \ \ I I \ " " " " " I I / I I I " ' I I ' I ,v il~ ; ~ ; ' / I ! ! "
Fibrilla ~ / l$
de colgena
Fig. 1-10. Diagrama de una molcula de fibronectina y su enlace a clulas y componentes de
la matriz extracelular. Las marcas en la extremidad inferior de la molcula de fibronectina muestran
la ubicacin de sitios de enlace especficos. Inserto: El enlace celular de la fibronectina se lleva
a cabo mediante cuatro aminocidos, arginina (arg), glicina (gli), aspargina (asp) y serina (ser),
que se adhieren a la protena de enlace en la membrana plasmtica.
una, y una cadena B de 400 000 daltons. La laminina es uno de los principales
componentes delas lminas basales, pues esdonde seenlazan las clulas alacolge-
na tipo IV y a otras molculas de la matriz.
Fijacin de la hsparina
Fijacin de colgena
20 Embriologia: alcance, historia y reas especiales
CUADRO 1-2. Glucosaminoglucanos comunes y sus subunidades repetidoras de disacaridos
Glucosaminoglucano Subunidad repetidora
Acido hialurnico Acido D-glucurnico +N-acetilglucosamina
Dermatansulfato (condroitin
sulfato B)
Acido L-idurnico (o cido glucurnico)
Condroitin 4- o 6-sulfato
(condroitinsulfato A o C)
Acido D-glucurnico + N-acetilglucosamina 4- o 6-sulfato
Queratan sulfato Galactosa + N-acetilglucosaminsulfato
Heparansuelfato Acido D-glucurnico + cido idurnico
+ N-acetilglucosamina + glucosamina
Heparinsulfato Acido glucurnico +-glucosaminsulfuto
Los glucosaminoglucanos (GAG), que anteriormente reciban el nombre de mu-
copolisacridos, constituyen otro de los grupos fundamentales de molculas de
la matriz extracelular. Pese a que son molculas grandes, la mayor parte consta
deunidades repetidas dedisacridos (cuadro 1-2). Estas molculas enlazan cuantio-
sas cantidades de agua, un elemento de consideracin para conservar las propieda-
des fsicas y mecnicas de los diferentes tipos de matriz extracelular. Las propie-
dades de enlace de agua del cido hialurnico lo hacen en especial importante en
los procesos de desarrollo temprano (Toole, 1982).
Los proteoglucanos son molculas enormes de la matriz celular cuyo peso mole-
cular es de millones. Este tipo de molcula consta de un monmero semejante a
Protena de vinculacin _.---
Protena
esencial
Cadenas laterales
de carbohidratos
Fig. 1-12. Estructura de la molcula
proteoglucana. Los monmeros proteo-
glucanos, que constan de una protena
esencial y muchas cadenas laterales de
carbohidratos, se adhieren al filamento
central del cido hialurnico con la ayu-
da de una protena de vinculacin.
(Adaptado de Hascall y Hascall.)
Monmero
un cepillo, un centro protenico y ramificaciones de glucosaminoglucano. Los mo-
nmeros, a su vez, estn vinculados mediante una protena especial a la espina
dorsal del cido hialurnico, y los proteoglucanos estn entrelazados entre las fi-
bras decolgena de lamatriz extracelular. La mayor parte de las molculas glucosa-
minglucanos son componentes integrales de los proteoglucanos, y sus tipos y pro-
porciones varan de un tejido a otro.
Gracias al avance de las metodologas bioqumicas e inmunolgicas cada vez
es ms factible realizar descripciones precisas de la distribucin y tipos de matriz
extracelular en tejidos y rganos (Fig. 1-13). Comenzando con el papel que desem-
pea el cido hialurnico en la produccin de la membrana de fecundacin del
huevo (pg. 134), la matriz extracelular es un componente primordial de todos
los sistemas de desarrollo, y existen crecientes pruebas de que es la mediadora de
importantes interacciones entre las clulas en los periodos crticos del desarrollo.
Por otra parte, las migraciones celulares dependen en gran medida de la naturaleza
del sustrato a travs del cual se desplazan las clulas. Por ejemplo, las clulas de
la cresta neural migran a travs de una red de fibrillas de la matriz extracelular
(Fig. 1-14), einvestigaciones diversas (Fig. 6-18) hacen hincapi en la importancia
de la fibronectina como una de las determinantes de su comportamiento migrato-
rio. En algunos sistemas (p. ej., el de la crnea), las concentraciones elevadas de
Tejido conectivo
Cartlago
<~,~~5
,~~-
;;~i';<
<1 -- ~
(. ~~0=-
~ :,~~ -->
Colgena tipo 1 1
Condronectina
Clula madre
Fig. 1 -1 3. ModelO que muestra la influencia de las protenas de adhesin en la expresin fenotpi-
ca de las clulas. Los diferentes conjuntos de las protenas se acompaan de diferentes fenotipos
ulares. (Dibujo rediseado tomado de Hewitt y Martin a partir de Kleinman y col., 1 980 en Current
eseerch Trends in Prenatal Craniofacial Development, Elsevier.)
22 Embriologa: alcance. historia y reas especiales
Fig. 1-14. Micrografa elec-
trnica de barrido del endoder-
mo dorsal y matriz extracelular
subyacente de un embrin tem-
prano de pollo. El material fibri-
lar delgado es una matriz hol-
gada de fibrillas de colgena.
Los pequeos cuerpos redon-
dos son complejos de fi-
bronectina y glucosaminoglu-
canos. (Cortesa de K. Tosney.)
cido hialurnico serelacionan conlamigracin celular, entanto quesuextraccin
delahialuronidasa coincide conel findelaetapa migratoria. Los estudios indican
engran medida que, aun enlavidaposnatal, lafibronectina constituye un impor-
tante sustrato sobreel quelasclulasepidrmicas deunaherida frescadebenatrave-
sar. Cada vez son mayores las pruebas que sealan que la laminina es tambin
importante para promover la excrecencia delas fibras nerviosas, tanto en el em-
brin como en laregeneracin deheridas frescas en el adulto. En diversas partes
del texto sepresentarn otros ejemplos del papel de la matriz extracelular en el
desarrollo embrionario.
Divisin celular
Ladivisin celular constituye unadelaspropiedades fundamentales delossistemas
vivos y es deimportancia vital en -nuchos procesos dedesarrollo. El incremento
en el nmero declulas es una de las consecuencias obvias dela divisin celular
y representa uno delos mecanismos bsicos que contribuye al crecimiento en los
sistemas embrionaros y posembrionarios. No obstante, no es tan obvio el que
serequiera un cierto mnimo declulas para el desarrollo dealgunas estructuras
enel embrin. Enel brote embrionario delosmiembros, por ejemplo, una deficien-
ciacelular tpicamente tendr como consecuencia la formacin deuna mano con
un nmero menor de dgitos que lo normal, en vez deuna mano con el nmero
comn de dgitos pero ms pequeos.
El proceso mismo dela divisin celular parece ser crucial en otros fenmenos
del desarrollo. En la actualidad sepiensa que lamayor parte, si no es que todas,
las interacciones tisulares embrionarias, que incluyen un cambio cualitativo en el
estado estructural ofuncional delosgrupos declulas, sellevanacabo enpoblacio-
nes caracterizadas por un alto ndice dedivisin celular. La mitosis puede actuar
como un agente desestabilizador que permite la activacin de ciertos grupos de
genes que con anterioridad haban estado rigurosamente reprimidos.
La divisin celular esun componente del ciclo celular. La historia delavida de
una clulapuededividirseencuatro periodos (Fig. 4-5A). Inmediatamente despus
delamitosis ydelaseparacin delaclulaendivisin endos clulas hijas, comien-
za el periodo G
1
(intervalo 1), que con frecuencia recibe el nombre de interfase
y cuya duracin es en extremo variable. Durante la rpida segmentacin del em-
brin, justo despus delafecundacin, lafaseG
l
esmuy breveeincluso enocasio-
nes no existe. En el otro extremo la fase G, de las neuronas maduras persiste a
lo largo delavida restante delaclula, dado que no suceden divisiones celulares
ulteriores. Las clulas deestetipo seconocen como clulas posmitoticas. Durante
el periodo G, laclula realiza sus actividades normales, como sntesis, secrecin,
conduccin y contraccin especficas.
Si la clula seencuentra en una poblacin divisora sellevar acabo la sntesis
del DNA, proceso preliminar ala mitosis. Este periodo recibe el nombre de fase
S del ciclo y antecede a la fase G
2
(intervalo 2), que representa el periodo entre
el final delasntesis del DNA yel inicio delamitosis misma (fase M). El proceso
de la mitosis se ilustra en la figura 3-4.
Activacin gentica
Por logeneral losgenesestn inactivos enel cigoto, donde estn muy complicados
conlasprotenas bsicas quereciben el nombre dehistonas. El DNA cromosmico,
junto consushistonas envolventes, sedenomina cromatina, entanto quelacroma-
tina que setieintensamente (heterocromatina) yquepuede observarse enel inte-
rior del ncleo, tanto conel microscopio deluz como con el electrnico, representa
el material gentico inactivado oreprimido. Cuando seiniciael desarrollo, seacti-
vanodesreprimen ciertos grupos degenesal ser liberados desushistonas asociadas;
as, el DNA desreprimido representa genespotencialmente funcionales. Losprime-
ros genes que sedesreprimen son los que intervienen en laactividad proliferativa
ymetablica general delaclula. Conforme avanza lasegmentacin yel embrin
entra alaetapa degastrulacin, comienzan aactivarse losgenesdetejidos especfi-
cos. Despus, durante el periodo deorganognesis ehistognesis, intervendrn otros
genes para controlar las actividades ms especficas de las clulas diferenciadas
(Fig. 1-15).
Fig. 1-15. Esquema del desarrollo mamfero temprano, destacando las propiedades importantes
de los embriones y las variedades de regulacin gentica. (Adaptado de B. Konyukhov, 1976, The
Genetic Control of the Development of Organisms [del ruso). Znanie, Mosc.)
Secalcula que no ms de5a 1 0 O J o delos genes estn activos en cualquier etapa
dedesarrollo; losdems permanecen reprimidos. Los estudios encro mo so mas po -
liteno s gigantes delosinsectos han mostrado queenuna etapa dada del desarrollo
seactivan ciertos genes, que a su vez sern reprimidos en otra etapa en tanto se
activan otros (Fig. 1-16).
-:
.
,
DNA inicial
y sntesis de
protenas
Cigoto
Etapa
bicelular
Inicio de la sntesis
del m, t y rRNA
Gstrula .
Mrula
Clulas en
estado totipotente
Prdida de totipotencia.
Clulas destinadas a
formar estructuras
embrionarias o
extraembrionarias
Blastocisto
Organognesis
Formacin de rudimentos
de rganos a partir de
clonos de clulas;
algo de muerte celular
<f)
Q)
~
Q)
e
Q)
en
<f)
Q)
e
Q)
Cl
Q)
"C
e
'o
.;
Q)
a.
Q)
(
Q)
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Q)
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Cl
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.;
~
Q.
e
<f)
Q)
a
Embriologa: alcance, historia y rees especiales 25
A
Fig. 1-16. Segmento de un cromosoma politeno
gigante en la mosca Sarcophaga, que muestra el
patrn de bandas. A, Una de las bandas ha comen-
zado a hincharse. B, Dos das despus la hincha-
zn es mucho mayor, indicando la activacin de ma-
terial gentico en esa parte del cromosoma.
B
Restriccin y determinacin
Dentro del vulo fecundado reside lacapacidad deconstituir un organismo com-
pleto. En muchos vertebrados, estacapacidad laconservan lasclulas individuales
resultantes delas primeras divisiones posteriores ala fecundacin. En lajerga de
laembriologa estas clulassedescriben como totipotenciales. A medida queconti-
na el desarrollo, las clulas pierden poco a poco la capacidad de formar todos
los tipos de clulas que seencuentran en el cuerpo adulto; es como si sefuesen
encauzando atravs deuncanal cadavezmsestrecho. Ladisminucin deopciones
de desarrollo permitidas a una clula seconoce como restriccin. Se sabe muy
poco acerca del mecanismo queproduce estarestriccin, ylasecuencia yduracin
delarestriccin varan considerablemente deuna especieaotra. No obstante, un
ejemplo querepresenta unpatrn general derestriccin durante el desarrollo servi-
r para aclarar el concepto (Fig. 1-17).
Poco despus delafecundacin, el cigoto pasapor una seriededivisiones celula-
res, yesaloquesellamasegmentacin, encuyafasetemprana lasclulas general-
mente permanecen totipotenciales. El periodo de segmentacin finaliza cuando
ciertas clulas en el embrin emprenden extensas migraciones y sereordenan en
tres capas germinales primarias, durante un proceso conocido como gastrulacin.
Con baseensusposiciones relativas, lacapa ms externa recibeel nombre deecto-
dermo; la ms interna es el endodermo, y la intermedia es el mesodermo. Para
esteentonces por lo comn habr ocurrido al menos una etapa derestriccin, de
tal modo que las clulas de las tres capas germinales estn destinadas a canales
FENOMENOS DEL
DESARROLLO
CIGOTO rii! J
POTENCIAL D, DESARROLLO
DE LAS CE LULAS
--GASTRULACION--~----~:;~V;:o~todrmicoS~lndUlas ..
Mdula espinal piel
Nervios perifricos Cabello, escamas,
Clulas de pigmentacin plumas
Oido interno Epidermis
Mesodermo Ectodermo Retina Etc,
: : Iri s
i ~ Cristalino
.... Cornea
--------------------- ------------
Potencia ectodrmica
NEURULACION
Crnea
Glndulas de la piel
Cabellos, escamas, plumas
Epidermis
-----------+------------
INDUCCIONES
SECUNDARIAS
Crnea
Glndulas de la piel
Cabellos, escamas, plumas
_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ J EPide: _
INDUCCIONES rr
ULTERIORES ; - .,." "
COrnea
Glndulas de la piel
Cabello, escamas, plumas
SEGMENTACION
Formacin de la
capa germinal
Ectodermo
Mesodermo
Endodermo
(induccin primaria)
Sistema nervioso
central
Cresta neural
Odo interno
Cristalino
Clulas totipotentes
restante:
Cristalino
Potencia ectodrmica
restante:
Potencia ectodrmica
restante:
Eptdermis
Fig. 1-17. Diagrama que ilustra la restriccin durante el desarrollo embrionario. La columna
de la derecha de las figuras muestra la restriccin paulatina de la capacidad de desarrollo de las
clulas a lo largo de una va que finalmente conducir a la formacin de la epidermis. La columna
izquierda describe los principales fenmenos de desarrollo que eliminan a grupos de clulas del
curso de formacin de la epidermis.
dedesarrollo separados yhan dejado deser libremente intercambiables. Lasopcio-
n potenciales que tienen las clulas del conducto ectodrmico semuestran en
la figura 1-17. En el siguiente fenmeno importante del desarrollo, una parte del
todermo seengrosa y despus tendr a su cargo la constitucin del cerebro, la
mdula espinal yotras estructuras relacionadas; estaetapa del desarrollo seconoce
generalmente como neurulacin. Las clulas ectodrmicas restantes yano podrn
formar estas estructuras yhabrn sufrido por consiguiente otra fasederestriccin.
Al poco tiempo, como resultado delas interacciones delos tejidos con el cerebro
recin formado, los grupos de clulas ectodrmicas constituirn el cristalino y el
odo interno, en tanto que las dems acabarn por perder esta habilidad.
Los fenmenos subsecuentes del desarrollo presencian una subdivisin ulterior
del ectodermo engrupos declulas designados aconstituir lacrnea, cabello, esca-
masoplumas, glndulas cutneas, osencillamente laepidermis. Cuando larestric-
cinhallegado al punto enqueunconjunto declulas secompromete aundestino
de desarrollo nico (la formacin de la crnea, por ejemplo), se decide que ha
ocurrido ladeterminacin deestas clulas. Esta representa por tanto el paso final
del proceso de restriccin. Los mecanismos que ocasionan la determinacin de
varios grupos celulares sontema deprofundas investigaciones; pero, como sucede
con la restriccin, an queda mucho por aprender. Sin embargo, setiene casi la
certeza de que interacciones tisulares conocidas como inducciones (pg. 31) que
por logeneral anteceden al proceso dedeterminacin (yalgunas fases delarestric-
cin), estn implicadas de alguna manera.
Diferenciacin
Mientras larestriccin yladeterminacin significan lalimitacin paulatina delas
capacidades dedesarrollo delas clulas en el embrin, ladiferenciacin serefiere
alaexpresin morfolgica o funcional delaporcin del genoma que permanece
disponible aunaclulaenparticular ogrupo declulas. Ladiferenciacin realmen-
teesel proceso mediante el cual laclula seespecializa, yel producto final recibe
el nombre declula diferenciada. Aunque en muchos aspectos la diferenciacin
esun fenmeno celular, laclularara vez pasa por ladiferenciacin aisladamente.
Cada vez es ms evidente que la diferenciacin demuchos tejidos en el embrin
no selleva acabo a menos que est presente un mnimo crtico de clulas, dado
que la diferenciacin in vivo es tpicamente un proceso comunal que ocurre en
grupos declulas similares. Con todo, gran parte delos anlisis ms minuciosos
sehan realizado in vitro, aunque lacantidad deestudios dediferenciacin celular
a partir de una nica clula precursora clonal va en aumento.
Existen varias maneras deconsiderar ladiferenciacin. Desdeel punto devista
delabioqumica, puede percibirse como el proceso mediante el cual laclula selec-
ciona una o diversas vas sintticas especializadas; por ejemplo, la sntesis de la
hemoglobina por eritrocitos oladelasprotenas cristalinas especficas por el crista-
lino. Ladiferenciacin funcional puede considerarse como el desarrollo delacon-
tractilidad por parte delasfibras musculosas ocomo el desarrollo delaconductivi-
CUADRO 1-3. Caractersticas de las clulas morfolgicamente indiferenciadas en comparacin
con las diferenciadas
Caractertsticas Clulas indiferenciadas Clulas diferenciadas
Tamao del ncleo Ms grande Ms pequeo
Relacin nucleocitoplsmica Elevada Baja
Cromatina nuclear Dispersa Condensada
Nucleolo Prominente Menos prominente
Tincin citoplsmica Basfila Acidfila
Ribosomas Abundantes Menos abundantes
Sntesis de RNA Mayor Menor
Actividad mittica Mucha Reducida
Metabolismo Generalizado Especializado
dad a lo largo deun nervio. Desde la perspectiva morfolgica, la diferenciacin
final serepresenta atravs demiles deformas y estructuras celulares especficas.
En el cuadro 1-3sepresenta una comparacin entre las propiedades histolgicas
delas clulas morfolgicamente diferenciadas eindiferenciadas. Si bien pueden
darse excepciones para cada categora, la tabla resultar til como gua general.
Las definiciones dediferenciacin varan enormemente, demanera queel inten-
tar analizarlas en detalle trasciende el alcance deesta seccin. La definicin ms
restrictiva limitara ladiferenciacin alamaduracin delacluladurante un solo
ciclocelular: por logeneral, el cicloterminal. Otras definiciones msamplias inclui-
ran la maduracin de una clula y sus descendientes en el transcurso de varios
cicloscelulares. Independientemente deladefinicin pertinente, ladiferenciacin
puede seguir muchas vasgenerales. Una deellas, que sinlugar aduda eslatermi-
nal, ocasiona una poblacin de clulas muy especializadas que han perdido sus
ncleos. Ejemplos delo anterior son las plaquetas y los eritrocitos en el torrente
sanguneo delos vertebrados superiores, as como las clulas de la capa externa
delaepidermis. Para lasclulas que retienen sus ncleos, ladiferenciacin puede
expresarsepor lasntesisdemolculas intracelulares altamente. especializadas, como
lasprotenas contrctiles del msculo, opor lasecrecin desustancias extracelula-
res, como las hormonas y fibrillas de la colgena. En el captulo 9 seofrece un
anlisis ms detallado de la diferenciacin celular.
A nivel de los tejidos, la diferenciacin con frecuencia se reconoce como los
cambios morfolgicos caractersticos que ocurren engrupos declulas, enciertos
puntos y en determinados momentos. El proceso por el cual los tejidos adoptan
aspecto caracterstico por la diferenciacin desus componentes celulares recibe
el nombre dehistognesis, queaestenivel confrecuencia resulta difcil distinguirla
de la morfognesis.
MOrfognesis
Todos losprocesos quemoldean laconfiguracin externa ointerna deunembrin
seincluyen bajo el trmino general demorfognesis, uno delos principales miste-
rios que an prevalece en'labiologa. Nuestro conocimiento en estecampo estan
rudimentario quepodra compararse conel estado delagentica antes del redescu-
brimiento de las leyes de Mendel.
En el embrin vertebrado puede incluirse una serie asombrosa de fenmenos
bajo el rubro defenmenos morfogenticos. Considrese, por ejemplo, laramifi-
cacin de los pulmones, la constitucin de las extremidades, la forma del globo
ocular, el patrn delos vasos sanguneos en el trax, la intrincada estructura de
una pluma y los complejos rizos y torbellinos de las yemas de los dedos; todos
ellos resultado de procesos morfogenticos.
Cmo entonces abordar el estudio dela morfognesis? A falta deuna teora
general, primero esnecesario tener algunos hechos alamano. Esto seharealizado
muy eficazmente mediante la identificacin de los procesos morfogenticos que
sonrelativamente fciles decaracterizar ydespus sujetando esosprocesos aanli-
sis gentico o experimental. Los modelos clsicos para el anlisis morfogentico
han incluido mohos delimo, bacterifagos, as como laregeneracin demiembros
en anfibios. En el campo de la embriologa delos vertebrados, la formacin del
tubo neural, el desarrollo de las extremidades y la ramificacin de las glndulas
internas han estado sujetos aminuciosos anlisis. En tanto cada vez es mayor la
informacin morfogentica acerca deciertos sistemas, en la actualidad sehacen
intentos por caracterizar alosfenmenos morfogenticos yelaborar hiptesis para
explicarlos.
Muchos tipos deprocesos pueden contribuir alamorfognesis deunaestructura.
Uno delosmsfundamentales, aunque menos comprendidos, esel delaformacin
de patrones (Malacinski y Bryant, 1984). Existen datos deque muy al inicio del
desarrollo demuchas estructuras, previo al comienzo deladiferenciacin celular,
seestablece un patrn invisible mediante el cual seguiar el desarrollo ulterior.
El patrn nosiempreesfijoyfirme, porque enciertos periodos lasmanipulaciones
experimentales ofenmenos naturales pueden ocasionar quelaestructura del desa-
rrollo no sigapartes del plan. An queda por estudiar si los rganos internos en
desarrollo siguenel mismo tipo depatrones quelasestructuras externas oel cuerpo
ensutotalidad. Actualmente serealizan arduos esfuerzos con objeto dedescubrir
una basegentica para laformacin depatrones, especialmente enlaDrosophila.
Suponiendo que seha establecido algn tipo depatrn, la siguiente fase en la
morfognesis consiste en la realizacin deeste patrn, lo cual selogra al utilizar
procesos conocidos de maneras especiales, de los cuales semuestran algunos en
lafigura 1-18, yque pueden incluir laproliferacin declulas, migracin, agrega-
cin, secrecin de sustancias extracelulares, cambios en la forma de la clula e
incluso lamuerte celular localizada. Todava no secomprende cabalmente cmo
las clulas secomunican entre s al interior del primordio deuna estructura para
llevar a cabo las instrucciones inherentes de un patrn. Una forma popular en
nuestros dasdeconsiderar alacluladurante lamorfognesis sebasa enel concep-
Engrosamiento
local (plcoda)
Depresin para
formar la fosita
Ahondamiento para
formar la vescula
Vescula liberada
de la capa original
Pared
del
prosencfalo
Crecimiento
localmente
CONSTITUCION DEL PRIMORDIO POR EVAGINACION
CONSTITUCION DEL PRIMORDIO POR INVAGINACION
Somita
~ ",",' ~fl*,~Mesodermo
,,\~ '\ ~ esplcnico
Migracin ___,r """~
, ~
~------ Agregacin ~
~
Revestimiento endotelial
de los vasos sanguneos
CONSTITUCION DEL PRIMORDIO POR MIGRACION CELULAR
Fig. 1-18. Diagrama que ilustra algunas de las diferentes formas en las que pueden originarse
los grupos de clulas primordiales a partir de las capas celulares madre.
to de informacin posicional. Una explicacin simplificada de este concepto es
queuna cluladada escapaz de: 1)reconocer suposicin enunsistema decoorde-
nadas establecido dentro del primordio deun rgano, y 2) diferenciarse segn su
posicin. Para msdetalles, as como aplicaciones desistemas dedesarrollo espec-
ficos, serecomienda al lector consultar dos revisiones realizadas por Wolpert (1969,
1971).
--
- - ------~- ~~ ---- -~----~~~~
Induccin
na de las caractersticas ms notables de la embriologa es la precisin con la
que segeneran y transmiten las seales del desarrollo al receptor adecuado. Estos
indicios pueden ser de diversos tipos y su efectos pueden manifestarse en gran varie-
dad de formas. Uno delos sistemas ms importantes del sealamiento embrionario
es el proceso que recibe el nombre de induccin, mediante el cual nos referimos
al efecto de un tejido embrionario (el inductor) en otro, a fin de que el curso de
desarrollo del tejido receptor semodifique cualitativamente de lo que hubiese sido
en su ausencia. Un ejemplo clsico de la induccin embrionaria es la formacin
del cristalino, como resultado de la accin inductora de la cpula ptica en el ecto-
dermo y suprayacente (Spemann, 1901, 1912). Los detalles de este sistema inductor
sepresentarn en el captulo 13. Un fenmeno inductor fundamental en el embrin
selleva a cabo cuando las capas germinales seconstituyen durante la gastrulacin.
Parte de lacapa mesodrmica (especficamente el cordamesodermo, pg. 224) acta
sobre el ectodermo suprayacente, dando como resultado la aparicin de una placa
engrosada declulas que por ltimo formar el sistema nervioso central. La interac-
cin especfica seconoce como induccin embrionaria primaria. (Para una excelen-
terevisin, vase Saxn y Toivonen, 1962), mientras que los subsiguientes fenme-
nos inductores suelen llamarse inducciones secundarias.
La naturaleza del estmulo inductor y su modo de transmisin han sido tema
de investigaciones intensas y sehan sugerido diversos mecanismos inductores, uno
de los cuales es el de la difusin extracelular de las sustancias inductoras secretadas
por el tejido inductor. Existen pruebas considerables a favor de este mecanismo
en la induccin primaria embrionaria, que tiene como consecuencia la formacin
de los tejidos nerviosos (Saxn y Toivonen, 1962; Toivonen y col., 1975). Existen
otras formas de induccin aparentemente ms mediadas por contacto, sea por con-
tacto directo de clula a clula o a travs de la matriz extracelular que secretan
las clulas que participan en la interaccin (Lehtonen, 1976; Hay, 1977). En 1956
Grobstein inform que en el rin no es necesario el contacto directo entre los
tejidos inductores y receptores, pues al colocarse un filtro poroso entre ambos teji-
dos no se detuvo la induccin. Las reacciones inductoras no suceden a travs de
una membrana no porosa; sin embargo, investigaciones ms recientes muestran
que en gran parte delos procesos inductores transfiltrados hay un estrecho contacto
entre las clulas por medio de pequeos procesos celulares que crecen en los poros
del filtro a partir de ambas caras de la membrana (Lehtonen y Saxn, 1975).
Durante la dcada de 1930, varios grupos de investigadores intentaron definir
qumicamente la naturaleza del efecto inductor evocado por el labio dorsal del
blastoporo anfibio. Al poco tiempo se encontr que una amplia diversidad de
tejidos muertos poda duplicar el efecto de algunos de los inductores naturales.
Muchas clases de sustancias qumicas, desde las protenas y nucleoprotenas hasta
los esteroides, producan efectos similares alos provocados por las clulas del labio
dorsal del blastoporo. A medida que sedetectaron ms agentes que producan los
efectos inductores -incluyendo los iones inorgnicos y aun el dao ms tenue
alas clulas del tejido receptor=-, los embrilogos tornaron suatencin hacia los
tejidos receptores.
Existen algunos indicios dequeciertos inductores pueden ser especficos, enma-
yor o menor medida, al dirigir el destino de los tejidos receptores. Este tipo de
induccin sedenomina con frecuencia interaccin instructiva. Asimismo esobvio
que muchos inductores sencillamente actan como disparadores no especficos,
o evocadores, para generar una respuesta ya codificada en las clulas del tejido
receptor; estetipo deinduccin recibeel nombre deinteraccin permisiva. A pesar
de cuantiosas investigaciones, sesabe poco acerca de la manera en que el tejido
receptor recibe y procesa el estmulo inductor.
Comunicacin intracelular
Una delaspropiedades fundamentales delos seresvivos, seauna bandada deaves
olacoleccin deorganelos dentro delaclula, eslacapacidad deloscomponentes
deuna comunidad biolgica degenerar seales y responder asu vez alas seales
deotros miembros deesacomunidad. As, el embrin endesarrollo puedeconside-
rarse como una comunidad celular cuya integridad y actividades dependen deun
sistema bien desarrollado de comunicacin intracelular. Ya seha visto cmo un
tipo decomunicacin, lainduccin embrionaria, puede ocasionar profundos cam-
bioscualitativos enel desarrollo subsiguiente. Durante mucho tiempo seharecono-
cido que lacomunicacin extracelular debe existir en lainduccin y reagregacin
declulasembrionarias disasociadas. Sinembargo, nohasidosino hasta hacepoco
que los embrilogos han sido capaces deabordar estefenmeno con cierto grado
de comprensin real.
Enlaactualidad seestn tomando medidas para descubrir algunos delosmedios
por los cuales secomunican las clulas individuales entre s. Seha mostrado, por
ejemplo, queenciertas instancias pueden pasar corrientes elctricas muy pequeas,
iones inorgnicos y hasta molculas relativamente grandes apartir deuna clula
aotra (Lowenstein, 1970). Este tipo decomunicacin intracelular sellevaacabo
enregioneslocalizadas queseconocen como uniones conhendidura (Larsen, 1983),
en las que la membrana de una clula seencuentra en contacto ntimo con la de
otra (Fig. 1-19).
Movimientos celulares
Enmuchos periodos delavidaembrionaria, lasclulas, ogrupos deellas, sedespla-
zan deuna parte del embrin aotra (cuadro 5-1). Algunos movimientos consisten
enmigraciones cortas declulas individuales, entanto queotros implican ladislo-
cacin masiva degrupos o lminas declulas atravs dedistancias relativamente
extensas. Lasclulasindividuales enlosembriones por locomn emigran mediante
movimientos ameboides. Pese a su aspecto mesenquimatoso, pueden originarse
de cualquiera delas tres capas germinales. Durante el movimiento ameboide, la
-==:....-.;;;_ *_
(
\
Fig. 1-19. A, Micrografa de transmisin electrnica a travs del borde ectodrmico apical (Fig.
117) del brote de miembros en un embrin de pollo. Las uniones con hendidura entre clulas
adyacentes se indican con flechas. x 19000. Abreviaturas: N, ncleo; M, mitocondria. B, Rplica
de criofractura de una unin con hendidura en el borde apical ectodrmico de un embrin de codor-
niz, en una etapa comparable a la del polluelo en A. Al elaborarse la preparacin de la criofractura,
el tejido se congela a temperaturas muy bajas y a continuacin se segmenta mediante un aparato
especial. Este procedimiento separa a las membranas en sus componentes internos y externos
a lo largo de la zona interfacial, que se encuentra entre los extremos hidrfobos de las molculas
lpidas, las cuales constituyen las dos capas de la membrana. A continuacin se examinan las
membranas fracturadas con el microscopio electrnico. La cara P muestra la superficie de la por-
cin interna de la membrana celular fracturada, en tanto que la cara E indica la porcin externa.
la unin con hendidura en s es el conjunto grande de partculas que se observan en el centro
de la fotografa. (Tomado de J. F. Fallon y R. O. Kelly, 1977. J. Embryol. Exp. Morph., 41:223.
Cortesa de los autores y el editor.)
clula continuamente examina suentorno, y su actividad secaracteriza por la pre-
sencia deuna membrana ondulante alo largo del contorno desu superficie dirigente
(Fig. 1-20). En los embriones avcolas primarios se presenta una forma nica de
movimiento celular individual: las clulas germinales primordiales se desplazan
de la pared del saco vitelino hacia el torrente sanguneo y son transportadas por
lasangre hacia las gnadas (Cap. 3). Algunos ejemplos de clulas individuales que
se desplazan mediante el movimiento ameboide son la migracin de clulas lejos
de la cresta neural (ectodermo), la difusin de las clulas mesodrmicas durante
la formacin de lacapa germinal y la migracin de las clulas germinales primarias
Fig. 1-20. Dibujo del desplazamiento de una clula mesenquimatosa en un cultivo. El borde dirigen-
te (derecha) es ondulado, en tanto que el opuesto es trapezoidal.
(endodermo), del saco vitelino hacia las gnadas en el embrin mamfero. Estos
procesos seestudian con mayor detalle ms adelante. Cada vez semuestra en mayor
medida que los movimientos celulares estn ntimamente ligados a las relaciones
entre clulas y la matriz extracelular que las rodea (Fig. 6-18).
El movimiento amanera de lmina es principalmente una propiedad de las clu-
las epiteliales, en particular de las de la capa germinal ectodrmica. La migracin
de clulas durante lagastrulacin en los anfibios y su diseminacin en el saco viteli-
no en embriones de aves constituye un buen ejemplo de este fenmeno. Seconoce
poco acerca de lo que causa el movimiento de las lminas celulares en el embrin
(revisin de Gustafson y Wolpert, 1963; Trinkhaus, 1969), aunque se sabe que
no se limita a los embriones. Un corte sencillo en la piel de un vertebrado adulto
moviliza a la epidermis a cualquier lado del defecto, y en algunas horas la herida
se ver cubierta por una nueva capa de clulas epidrmicas.
Muerte celular
Parecera paradjico pensar que los procesos destructivos, incluso la muerte de
las clulas, desempearan un papel vital en el desarrollo del embrin. No obstante,
lamuerte celular esun componente necesario de muchas fases del desarrollo (Glck-
smann, 1951). Aunque quiz serepresente de manera ms espectacular en algunos
fenmenos posembrionarios, como el de la resorcin de la cola, intestino y mem-
brana opercular de renacuajos en metamorfosis, as como en la licuefaccin de
lamayor parte delos rganos internos delas larvas deinsectos durante lametarnor-
Iosis, la muerte celular tambin ocurre en muchas regiones de los embriones de
aves y mamferos. La separacin de los dgitos en la mano o pie embrionario, por
ejemplo, sucede a regiones bien definidas de muerte celular. Los detalles de la ma-
nera en que este proceso participa en el modelado de las alas del polluelo se vern
despus en el texto.
Aunque es poco comprendido el mecanismo exacto causal de la muerte celular,
el proceso al parecer es genticamente determinado. En el polluelo (Saunders y
col. 1962), la muerte de ciertos grupos de clulas se torna irreversiblemente fijo;
si setrasplantan aotro sitio, de cualquier forma mueren segn un plan predetermi-
nado.
Las hormonas en ocasiones desempean un papel importante en el estmulo de
la muerte celular. Los conductos genitales primitivos femeninos (o de Mller) en
el embrin se retrogradan ante la presencia de la gnada masculina y sus secrecio-
nes, en tanto que los conductos masculinos, que seencuentran asu lado, seestimu-
lan a un crecimiento ulterior. En el caso del sistema nervioso central, la muerte
constituye el destino de las clulas nerviosas motoras que no logran establecer con-
tacto funcional con la fibra de un msculo.
El modo clonal de desarrollo
Cada vez es ms claro que muchas estructuras en el embrin se originan a partir
de los descendientes de pequeas cantidades de clulas (Mintz, 1971). El grupo
de clulas que proviene de un solo precursor recibe el nombre de clono, concepto
que surgi de los estudios inmunolgicos en los que se mostr que despus de la
introduccin de un antgeno extrao en el cuerpo, una nica clula inmunolgica-
mente competente sufre una respuesta proliferativa masiva para a continuacin
producir un anticuerpo en contra del antgeno. Esto representa el fundamento de
la teora de la "seleccin clonal" de Burnet (1969). Muchos tumores tambin se
originan como clonos descendientes de una sola clula maligna. En cuanto al em-
brin, algunos ejemplos del desarrollo clonal en su formacin son el cuerpo del
embrin de mamferos, a partir de slo 3 de las 64 clulas de un embrin (pg.
179) Yel origen de grandes porciones del sistema nervioso central apartir de clulas
bien definidas en el embrin temprano (Fig. 12-1).
Una consecuencia importante de la seleccin clonal en el embrin estriba en que
muchas clulas del embrin temprano estn destinadas a no participar en el desa-
rrollo subsecuente. Sedesconoce por qu estas clulas no seseleccionan para proli-
ferar despus, a diferencia de las precursoras de los clonos. Se supone que acaban
por morir, aunque sudestino permanece oscuro. Tambin seignoran los momentos
especficos en que se seleccionan las clulas precursoras clonales de las estructuras
embrionarias, as como los mecanismos de seleccin.
Regulacin y regeneracin
Durante el desarrollo temprano del organismo total o de sus sistemas especficos,
la mayora de los embriones de vertebrados posee una misteriosa capacidad para
36 Embriotoqie: alcance, historia y reas especiales
reconocer si la estructura est intacta. Si se ha perdido parte de ella por accidente
o a causa de manipulaciones experimentales, se reconoce la prdida y entran en
accin procesos reparadores. Si esto ocurre antes que sehaya establecido ladiferen-
ciacin de la estructura, la restauracin del material faltante recibe el nombre de
regulacin.
La regulacin es labase para el desarrollo de gemelos idnticos. Entre los mam-
feros, incluyendo a los seres humanos, los gemelos por lo general resultan de la
Fig. 1-21. Modos de gemelacin monocigtica. A, Un embrin en segmentacin. puede dividirse
en una etapa temprana de la segmentacin, permitiendo que se desarrollen dos porciones como'
si se tratase de embriones completamente separados. S, En una etapa posterior del desarrollo,
la masa celular interna puede dividirse en dos masas separadas, encontrndose ambas al interior
de la misma cubierta del trofoblasto; este es el modo ms comn de desarrollo en gemelos huma-
nos. e, Si la masa celular interna no llega a subdividirse totalmente, puede dar Como resultado
_gemelos unidos.
'visin del embrin durante las primeras etapas de lasegmentacin (Fig. 1-21).
Cada mitad del embrin tiene lacapacidad de compensar los tejidos perdidos para
esarrollarse en un individuo perfectamente normal. Sin embargo, en ocasiones
eparacin de dos porciones del embrin esincompleta, yello da como resultado
gemelos unidos (Fig. 1-21). Comnmente, cuando seseparan de manera incomple-
- individuos enteros o partes de rganos, una estructura es la imagen en espejo
ela otra (regla de Bateson); sin embargo, sedesconoce la razn de esta inversin
en la simetra. En el desarrollo normal del armadillo, el embrin se divide en la
etapa de cuatro clulas, produciendo cuatrillizos idnticos.
Las zonas del cuerpo que tienen la capacidad de reconstituir porciones perdidas
algunas veces sellaman de campos morfogenticos (Gurwitsch, 1944; Weiss, 1939),
los cuales son regiones corporales, como la que rodea la yema apendicular, en
lacual las clulas de un grupo de algn modo tienen conocimiento de lanaturaleza
de la estructura que habr de formarse, As, si las clulas se extraen de alguna
forma de la regin, o bien, si se aaden clulas adicionales en ella, el primordio
como un todo se ajusta al cambio y las clulas establecen una relacin armoniosa
entre s, dando por resultado la formacin de una estructura normal. Los campos
morfogenticos tienen lmites que pueden definirse de manera experimental, aun-
que no anatmicamente, y cuando se eliminan todas las clulas de un campo, la
estructura no llega a formarse. En el captulo 11 sedescriben las propiedades regu-
ladoras del campo de los miembros.
Algunas veces en el embrin tardo o en la vida posnatal puede reemplazarse
la estructura ausente. Si ya se ha llevado a cabo la diferenciacin de estructuras
reconocibles, el proceso de reemplazo recibe el nombre de regeneracin. Una de
las principales caractersticas de un sistema de regeneracin es la formacin de
una masa de clulas de aspecto primitivo (el blastema de regeneracin) que tiene
muchas propiedades del primordio embrionario de la estructura. Uno de los pro-
blemas ms difciles en la regulacin, como en la regeneracin, estriba en saber
la manera como las clulas restantes son capaces de reconocer que algo falta. Las
actividades reguladoras en los campos morfogenticos en laactualidad seinterpre-
tan por logeneral con base en lainformacin posicional de las clulas componentes.
Crecimiento
Cuando se compara la masa de un vulo humano, clula esferoidal de.casi 0.15
mm de dimetro, con la de un ser humano adulto, resulta obvio que la cantidad
de crecimiento comprendida escuantitativamente astronmica, yan ms sorpren-
dente es.el ejemplo de laballena, pues apesar de que su vulo es del mismo tamao
que el vulo humano, produce un cuerpo adulto que alcanza un peso de varias
toneladas. El crecimiento puede definirse de muchas formas, pero quiz la defini-
cin ms sencilla eslade un aumento en masa, lo que implica un incremento conco-
mitante en el nmero de clulas. En los sistemas embrionarios, este es el caso.
Por lo general el aumento en masa seacompaa de un incremento en las dimensio-
nes lineales, pero en algunas circunstancias tambin implican cambios en la forma,
I
38 Embriologa. alcance, historia y reas especiales
motivo por el cual la longitud de una estructura pueoe aumentar en ausencia de
un incremento en su masa. De hecho la masa puede incrementarse en ausencia
de divisiones celulares si las clulas sufren hipertrofia. Podra esperarse, por la
diversidad decaractersticas de los tejidos mismos ydebido alas diferentes maneras
de su crecimiento, que no aumentaran a velocidad constante. Sin embargo, lo que
sequiere decir con crecimiento diferencial trasciende esta obviedad, ya que en em-
briologa este trmino seemplea para abarcar diversas tasas de crecimiento de teji-
dos del mismo tipo, en sitios y momentos diferentes. Una de las caractersticas
ms sorprendentes de los embriones jvenes es el rpido crecimiento de la regin
ceflica, lacual da como resultado la formacin de una cabeza desproporcionada-
mente grande en el embrin y en el feto. Despus, cuando el crecimiento de la
regin ceflica disminuye de manera relativa, el resto del cuerpo se empareja y
se establecen las proporciones del adulto (Fig. 1-22), manifestacin del efecto del
crecimiento diferencial en las proporciones del cuerpo. El trmino especfico para
el crecimiento desproporcionado de las partes del cuerpo durante la vida posem-
brionaria es el de crecimiento alomtrico.
Cmo se controla el crecimiento? Este es otro de los grandes misterios de la
biologa. Con respecto al crecimiento global del cuerpo, existen dos patrones prin-
cipales. En el crecimiento determinado, el cuerpo crece hasta un cierto punto que
es caracterstico de la especie y sexo, y despus cesa. Este es el patrn tpico de
crecimiento en aves y mamferos, pese aque an resulta imposible explicar laenor-
mediferencia enel potencial decrecimiento entre una musaraa pigmea ylaballena
azul. El patrn decrecimiento tpico en los vertebrados inferiores esun crecimiento
indeterminado, en el que el crecimiento contina durante el transcurso de toda
la vida del individuo, si bien reduce su velocidad posteriormente. Este hecho hace
posible estimar la edad de un pez con slo examinar los anillos de crecimiento
anual en sus escamas o en las secciones transversales de ciertos elementos esquelti-
Feto de Feto de Recin
dos meses cuatro meses nacido
Dos
aos
12
aos
25
aos
Seis
aos
Fig. 1-22. Dibujo de dos etapas fetales y cinco posnatales a la misma altura para mostrar los
cambios caractersticos de la edad en las proporciones de diversas partes del cuerpo. (Redibujado
segn Scammon.)
5.. A pesar de los dos patrones de crecimiento, el problema de los diferentes gra-
= - - = ecrecimiento potencial prevalece. La diferencia en tamao entre un guppy
Le istes reticulatus yun tiburn ballena constituye un ejemplo igualmente sorpren-
.:;,-, edel rango decrecimiento potencial que el delamusaraa ylaballena. Aunque
zzgunos aspectos del crecimiento sedeben obviamente a la hormona de crecimien-
o es claro que todas las hormonas de crecimiento en el mundo seran insuficientes
para producir una musaraa del tamao de una ballena.
Se han hecho algunos avances en la comprensin de ciertos componentes del
recimiento anivel delos tejidos, gracias al aislamiento yalacaracterizacin qumi-
ca de diversos factores especficos de estimulacin del crecimiento (Papaconstanti-
nou y Rutter, 1978). El factor de crecimiento neural (Cap. 12) acta de manera
especfica en los nervios sensoriales y simpticos. Las investigaciones acerca de
la naturaleza de este factor revelaron la existencia de un factor de crecimiento epi-
drmico (Carpenter y Cohen, 1978), en tanto que estudios posteriores descubrieron
unfactor de crecimiento fibroblstico (Gospodarowicz y col., 1978). La existencia
de una sustancia reguladora de la hemopoyesis (eritropoyetina) se ha reconocido
durante varios aos.
Tambin hay pruebas, si bien no se acepta universalmente, de la existencia de
inhibido res del crecimiento de tejidos especficos, conocidos como chalonas (Bu-
llough ycol., 1967), las cuales sepiensa que son glucoprotenas que actan al inhibir
o disminuir lavelocidad de las mitosis en los tejidos que las producen. Las chalonas
se caracterizan por: 1) formarse a partir de los mismos tejidos en los que actan,
2) ser clula-especfica (es decir, la chalona epidrmica nicamente afecta a la epi-
dermis) y 3) carecer de especificidad a nivel de especie y aun a nivel de clases (la
chalona epidrmica del bacalao, por ejemplo, tambin acta en la epidermis de
los mamferos).
An queda por verse si cada tipo de tejido y clula posee sus propios estimulado-
res einhibido res de crecimiento, yaque esta rea delabiologa todava seencuentra
en su infancia. Sin embargo, las ltimas investigaciones han revelado la existencia
de algunos sistemas de control muy interesantes que operan tanto en el embrin
como en el adulto.
Recapitulacin
La historia del desarrollo individual disea un resumen aproximado de los cambios
evolutivos por los que atravesaron nuestros antepasados. Este concepto seconoce
como laley biogentica deMller y Haeckel. Mller (1864) fue el primero en propo-
ner la idea general de la recapitulacin con base en sus estudios del desarrollo de
los invertebrados. Haeckel, a su vez, formul en 1868 los principios de esta idea
con mucho ms detalle y la bautiz como la ley biogentica, la cual en esencia
dice que un animal en su desarrollo individual atraviesa una serie de etapas cons-
tructivas similares a las del desarrollo evolutivo de la raza a la que pertenece. En
trminos tcnicos y ms concisos, la ontogenia es una recapitulacin abreviada
de la filogenia.
En aos recientes laleybiogentica ha sido objeto decrticas considerables. La
mayor parte de las objeciones secontraponen al intento de aplicarla demasiado
rgidamente enlosdetalles, dado queesevidente quelarecapitulacin no consiste
sencillamente en aadir ms rasgos filogenticos recientes a los antiguos. No se
esperara enparticular queel embrin atravesara por etapas que distinguen amu-
chas delascaractersticas estructurales yespecializadas delos cordados inferiores
actuales, en tanto gran parte de ellas son adaptaciones especficas que divergen
dela tendencia principal en su evolucin. La recapitulacin ontogentica es ms
bienunproceso conservador queretienelasetapas ontogenticas deformas ms pri-
mitivas. As, en un embrin de mamfero, slo se asemejaran las etapas ms
fundamentales del desarrollo yconstitucin tempranos delosprincipales sistemas
derganos (tal como el corazn ylos vasos sanguneos grandes), alas deun em-
brin depez. Habra mayor similitud entre embriones de mamferos y reptiles o
aves (Fig. 1-23), y esta semejanza sera obvia en una porcin mayor de la vida
embrionaria. Enmuchos casossedescartan odisminuyen engranmedida losproce-
sos ontogenticos que conducen a la formacin de estructuras especializadas en
especies inferiores, mientras que las nuevas se superponen.
No obstante, una estructura filogentica ms reciente con frecuencia har uso
dealgn componente delaantigua durante las fases tempranas desu desarrollo,
hecho que puede observarse en laplacenta humana, el rgano principal deinter-
cambio entre el embrin y la madre. Los vasos sanguneos ms importantes que
abastecen ydrenan alaplacenta sonhomlogos con losqueproveen laalantoides,
el cual ejerce una funcin similar en los embriones deaves y algunos mamferos
inferiores. En el ser humano, laalantoides misma permanece vestigial, si bien los
vasos sanguneos alantoicos sehan incorporado al filogenticamente ms nuevo
sistema circulatorio de la placenta.
Herencia y medio
Son deimportancia vital en el desarrollo, aunque en formas muy diferentes. La
herencia estableceel potencial inherente del sistemadedesarrollo odeunindividuo,
en tanto que el medio estima qu tan lejos puede ir el individuo para desarrollar
esta herencia plenamente.
A un nivel puramente biolgico, lasdiferencias enlatemperatura del agua pue-
den dar como resultado la formacin de uno o dos ms o menos vrtebras que
el nmero normal en embriones de trucha. En algunos peces, y entre la mayor
parte de las tortugas y cocodrilos, el sexo fenotpico depende de la temperatura
a la cual seincuben los huevos. En muchos tipos de tortugas, las temperaturas
bajas deincubacin (inferiores a28C) ocasionan quelamayora delosembriones
seanmachos, entanto quelastemperaturas mselevadas (superiores a30C) hacen
que la mayor parte o todos los individuos sean hembras.
Existen tambin condiciones enlasquelaherencia yel medio ambiente interac-
tan. Frazer ycolaboradores (1954, 1957)revelaron unejemplo interesante deesto,
al descubrir quecuando sealimentaba alashembras preadas deuna cepagentica
particular deratones con grandes dosis decortisona, prcticamente 100070desus
e D
Fig. 1-23. Embriones de (A) humano, (B) cerdo, (C) reptil y (O) ave en etapas correspondientes
de desarrollo. La asombrosa semejanza de los embriones entre s constituye un indicador de la
similitud fundamental de los procesos implicados en su desarrollo. (Tomado de William Patten,
1922, Evolution, Oartmouth College Press, Hanover, N. H.)
cras-presentaba paladar hendido, en tanto que cuando seadministr el mismo
tratamiento alosratones deuna cepagenticamente distinta slo 17O J o delascras
exhibi paladar hendido. Al aplicarse el mismo procedimiento experimental aani-
males resultantes delacruza entre estas dos cepas, un 40% de las cras present
el defecto.
A partir deestos impresionantes resultados, Frazer ycolaboradores estudiaron
el ndicedecrecimiento delabveda del paladar enembriones delacepaenlaque
la incidencia del defecto era elevada, adiferencia dela cepa en la que no lo era.
Los delacepa dealta incidencia mostraron un ndice decrecimiento lento delas
bvedas palatinas; apenas contaban con suficiente energa decrecimiento para en-
contrarse yunirseentres, cuando noselesperturbaba demodo alguno. Encontra-
posicin, los dela cepa debaja incidencia exhiban un alto ndice decrecimiento
enlasbvedas. Enotras palabras, haba suficientevigor dereservaensucrecimien-
to deforma tal queenmsde80<1,10 sefusionaban lasbvedas apesar dequereciban
el mismo tratamiento perturbador que ocasionaba el defecto en un 100% en la
otra cepa. Por consiguiente, seencuentra aqu una situacin en la que no puede
afirmarse que la herencia o el medio fueran las causas exclusivas del desarrollo
defectuoso. La interaccin de ambos valora el grado de vulnerabilidad.
METODOS QUE SE UTILIZAN EN EL ESTUDIO
DEL DESARROLLO EMBRIONARIO
Enel transcurso delosaos sehan ideado muchos mtodos para estudiar losdiver-
sos aspectos del desarrollo embrionario, los cuales abarcan desde el examen de
embriones completos asimplevistaoconlentessencillashasta el usodedispositivos
moleculares deextremada complejidad. Cada tcnica tienesuuso, yesimportante
destacar quelaseleccindetcnicas sevalora por lapregunta queseformule. Esta
seccin proporcionar una breve exposicin delos principales mtodos ytcnicas
que seutilizan en el estudio de la embriognesis devertebrados. Los mtodos se
describirn en mayor o menor medida segn el nfasis que sehaga en ellos a lo
largo del texto.
Observacin directa de embriones vivos
Latcnica ms antigua que seutiliz en laembriologa fue laobservacin directa
deembriones asimple vista o con lentes sencillas. Despus delaintroduccin del
microscopio, losgametos yembriones pequeos seexaminaron conmayor detalle.
Las observaciones directas, particularmente las deun embrin vivo, ofrecen una
buena visingeneral del embrin eimprimen enel observador loscambios dinmi-
cos, y con frecuencia extensos, que constituyen el desarrollo embrionario. Una
de las principales desventajas de la observacin directa es que por lo comn se
sacrifica la resolucin de los detalles ms pormenorizados en aras de la imagen
global. En el caso de estructuras pequeas, estas desventajas pueden resolverse
algunas vecesmediante tcnicas pticas especiales, como lamicroscopia decons-
traste de fases, o a travs de colorantes vitales, que permiten la identificacin o
el rastreo declulas ogrupos celulares especficos. Lamicrocinematografia esuna
poderosa herramienta para investigar el desarrollo deembriones ogrupos celulares
completos, pues setrata deuna tcnica que presenta una imagen en movimiento
cddesarrollo, generalmente acelerada en gran medida, que puede someterse des-
~ s aun anlisis cuantitativo. Quien haya observado pelculas filmadas ainterva-
s de procesos de desarrollo, como la segmentacin o excrecencia de una fibra
cerviosa, no dejar de sorprenderse ante la cantidad y precisin de cambios que
se llevan a cabo en dichos procesos.
Examen de material fijo
En un inicio sereconoci que la observacin directa de un embrin vivo resultaba
inadecuada para analizar muchos aspectos del desarrollo, ya que en ocasiones se
desea capturar un proceso en una fase crtica, de modo que pueda estudiarse el
material cuando se juzgue conveniente. Esto se logra normalmente mediante la
fijacin, proceso en el que setrata al embrin con varias sustancias qumicas, como
formalina o glutaraldehdo para preservar las estructuras lo ms fielmente posible
sin causar distorsiones indebidas u otras alteraciones en el tejido. Hace ms o me-
nos un siglo el material fijo se empleaba para preparar secciones microscpicas
seriadas de embriones completos; este fue uno de sus primeros usos. A partir de
estas secciones poda reconstruirse la estructura interna de un embrin completo.
Este mtodo de observacin an se utiliza con frecuencia en los laboratorios
para estudiantes, as como en investigaciones. Con laintroduccin del microscopio
electrnico, la atencin se ha desplazado a los detalles ms pormenorizados de
la estructura embrionaria, si bien prevalecen los principios bsicos, as como las
ventajas y desventajas. Con el microscopio electrnico de barrido se aadi una
nueva dimensin al estudio de los embriones. Esta tcnica permite la observacin
tridimensional del embrin completo o de sus partes con una claridad y resolucin
que antes eran irrealizables (Fig. 1-24) y que han resultado ser de inmenso valor
para discriminar las relaciones estructurales entre clulas y tejidos en el embrin.
Con la fcil disponibilidad de computadoras de laboratorio, las tcnicas de anlisis
Fig. 1-24. Micrografa electrnica de barrido de una
etapa de segmentacin de cuatro das (blastocisto) de
un embrin de criceto. Las clulas protuberantes en
la superficie (trofoblasto) constituirn las membranas
extraembrionarias, en lugar del embrin propiamente.
Las pequeas proyecciones en la superficie de las c-
lulas son microvellosidades. x 700. (Tomado de P.
Grant, B. O. Nilsson y S. Bergstr6m, 1977. Fert. and
Steril., 28:866. Cortesa de los autores y el editor.)
Vrtice
Fig. 1-25. Reconstruccin tridi-
mensional por computadora de un
miembro delantero en regenera-
cin de una salamandra. A partir
de secciones en serie de la parte
P regenerada es posible reconstruir
una imagen tridimensional del es-
queleto (gris), al interior de los bur-
dos contornos del miembro rege-
nerado (que en este caso an no
desarrolla las estructuras de la
mano). Mediante datos transversa-
les, la reconstruccin puede exhi-
birse en la computadora a partir de
diversos ngulos. (Cortesa de T.
Connelly.)
Proximal
de imgenes cada vez sonms comunes enel estudio delaestructura embrionaria.
En algunos casos, lasreconstrucciones por computadora realizadas apartir desec-
ciones seriadas deembriones estn sustituyendo los antiguos mtodos derecons-
truccin por placas decera. En otros casos, el potencial delacomputadora puede
utilizarse para proporcionar informacin que no es fcilmente obvia mediante la
mera observacin; por ejemplo, ladistribucin delaactividad mittica enunrga-
no en desarrollo (Fig. 1-25).
Mtodos histoqumicos
Lahistoquimica esel mtodo para localizar sustancias qumicas especficas ositios
deactividad qumica enlasestructuras morfolgicas quesehanperturbado lomni-
mo posible. Por logeneral secongela inmediatamente el tejido oembrin ennitr-
geno lquido y sesecciona con un microtomo especial de baja temperatura que
recibeel nombre decriostato. A continuacin secolocael tejido enunportaobjetos
devidrio ysesomete aunareaccin qumica especficaqueconduce aladeposicin
de un producto coloreado en el sitio de la actividad enzimtica o en el lugar en
donde seconcentran ciertas molculas. En algunos casos es posible obtener una
solucin muydetallada delasreacciones histoqumicas enlosmicroscopios electr-
nicos. Una desventaja de la histoqumica a nivel del microscopio de luz es que
los mtodos deteido no suelen mostrar con gran claridad los rasgos estructurales
especficos del embrin u rgano.
Autorradiografa
Uno delosproductos derivados delaeraatmica hasido laextensa disponibilidad
deistopos radiactivos como herramientas enlasinvestigaciones bioqumicas. Los
precursores delasmacromolculas quecontienen tomos marcados radiactivamente
ueden introducirse en un sistema biolgico y despus rastrearse a travs de un
ciclo metablico por diversos medios analticos, uno de los cuales es la llamada
aurorradiografia, mtodo que permite localizar un istopo radiactivo, al interior
de las clulas o tejidos, mediante mtodos semejantes a los que seutilizan en foto-
grafa (Baserga y Malamud, 1969).
Tpicamente se coloca un embrin o parte de l en una solucin que contiene
un aminocido radiactivamente marcado o un precursor de DNA o RNA. Despus
de un lapso dado, se extrae el embrin de la solucin radiactiva y se secciona para
analizarse en el microscopio, pero adems de los procedimientos histolgicos nor-
males, las secciones de tejido secubren con una emulsin fotogrfica, conservn-
dose en laoscuridad durante varias semanas. Las emisiones radiactivas del istopo,
las cuales sehan incorporado a las protenas o cidos nucleicos del embrin, impi-
den la emulsin durante el periodo de exposicin. A continuacin la emulsin se
revela, de manera muy semejante alas pelculas fotogrficas. Despus sedepositan
grnulos de plata en la emulsin sobre las clulas que contienen tomos marcados
para utilizarlos como gua, con objeto de localizar las estructuras marcadas en
el microscopio.
La autorradiografa en la actualidad seemplea de manera sistemtica tanto con
microscopios de luz como electrnicos. Con las tcnicas de procesamiento comn,
la autorradiografa est limitada a ubicar macromolculas marcadas que no sedi-
suelven al exterior de los tejidos. Se han desarrollado tcnicas autorradiogrficas
ms novedosas y minuciosas para la localizacin de sustancias solubles como las
hormonas esteroides, que requieren la congelacin inmediata de los tejidos para
a continuacin secarse de forma tal que no se lleve a cabo el desalojamiento de
los compuestos solubles marcados.
Las tcnicas autorradiogrficas son de gran utilidad para ubicar sitios de activi-
dad sinttica de cidos nucleicos y protenas en embriones (Fig. 1-26), as como
para rastrear el movimiento de las clulas, aunque no permiten el anlisis directo
de sus formas qumicas en los tejidos. Por ello, esmuy importante emplear molcu-
las precursoras correctamente marcadas y reconocer las trampas latentes que pue-
den conducir a la mala interpretacin de los resultados.
Una tcnica autorradiogrfica que promete acortar ladistancia entre lamorfolo-
ga y la biologa molecular es la hibridacin in situ. Ahora que ya es posible cons-
truir en el laboratorio DNA complementario (cONA) para RNA especficos, los
DNA radiactivos pueden aadirse asecciones detejidos que sesospeche contengan
el mRNA en cuestin. En caso de que ese RNA est presente, el DNA rnarcado
se hibridiza con los nucletidos correspondientes del RNA. Cuando el cONA se
enlaza estrechamente al RNA, laautorradiografa seprepara en la forma estndar,
y la presencia de grnulos de plata indica la ubicacin de las molculas del RNA
en la clula o el tejido (Fig. 9-2).
Mtodos de rastreo
Se han utilizado muchos tipos de marcadores para rastrear los movimientos de
las clulas en el embrin en crecimiento. Algunos de los estudios clsicos de movi-
Fig. 1-26. Ejemplo de una autorradiografa de un miembro de salamandra en proceso de regene-
racin. Se inyect al animal +-trndna y el miembro fue fijado una hora despus. La emulsin
fotogrfica se reviste sobre la transparencia y se revela despus de varias semanas de exposicin.
Las acumulaciones densas de grnulos de plata sobre el ncleo indican que la clula estaba en
proceso de sntesis del DNA cuando se administr el istopo. (Cortesa de T. Connelly.)
mientas celulares implican la aplicacin de marcadores no txicos apequeos gru-
pos de clulas. Los tipos de tintes que pueden aplicarse a las clulas vivientes sin
daarlas, como el sulfato azul de Nilo y el rojo neutro, reciben el nombre de colo-
rantes vitales. Los cambios de posicin de las clulas tratadas con estos colorantes
pueden seguirse durante el transcurso de un periodo extenso de crecimiento, antes
que el colorante setorne tan difuso que resulte imposible su identificacin. Tendre-
mos ocasin para considerar la aplicacin de dichas tcnicas con relacin a los
movimientos celulares en lagastrulacin de anfibios (Fig. 5-6). La marcacin tam-
bin puede llevarse a cabo al colocar en pequeos grupos de clulas partculas de
carbn fisiolgicamente inerte, finamente dividido, como las del carbn de sangre.
Las resultados de experimentos en los que participan las marcaciones de carbn
se utilizarn cuando se hable de los movimientos celulares en la vecindad de la
lnea primitiva del polluelo.
Una innovacin reciente en los mtodos de rastreo consiste en inyectar a las
clulas diminutas cantidades deperoxidasa de rbano picante (PRP), enzima distri-
buida por toda la clula y cuya presencia puede mostrarse por varias reacciones.
Cuando se divide una clula que contiene PRP inyectada, la enzima se distribuye
en las clulas hijas. Puesto que persiste en laprogenie celular, laPRP seha tornado
en a importante herramienta para mapear linajes celulares. La peroxidasa de
-. 2110 picante puede inyectarse en una de las'clulas del embrin temprano, al
elepermite desarrollarse por algn tiempo para despus seccionarse. Las
-: as quedescienden deuna clula marcada originalmente con PRP retienen la
a, en tanto que estar ausente en las dems clulas del embrin (Fig. 12-1).
Debido a que tiende adistribuirse por toda laclula, la PRP tambin seinyecta
al lulas neurales endesarrollo, donde sedifunde atravs desusprocesos largos,
_ rmitiendo al investigador valorar ladireccin que toman los procesos ycon qu
otras clulas se conectan.
Lasclulas enquesehamarcado el DNA sustancialmente conistopos radiacti-
osseutilizan para lalocalizacin en extremo precisa declulas emigrantes. Este
tipo demarcacin isotpica tiene ladesventaja dequecada divisin celular diluye
alamarca, lo cual lo hace un mtodo inadecuado para rastreos alargo plazo de
clulas que se dividen con rapidez.
Una categora importante de marcacin, en especial para el rastreo de clulas
a largo plazo, es la de los marcadores "naturales". Al introducir clulas en un
embrin quedifieren delasdel husped por sutamao, pigmentacin, tipos isoen-
zimticos, complementos cromosmicos o nmero de nucleolos, seproduce un
marcador estable. Lacromatina sexual (Fig. 3-40)sehaempleado concierto xito,
aunque los principales avances ms recientes en cuanto a los mtodos derastreo
implican lautilizacin declulas decodorniz japonesa como injertos marcadores
enembriones depollos (Fig. 9-9). Lasdiferencias enel tamao nuclear ylamorfolo-
ga, as como la facilidad para injertar los segmentos detejido decodorniz en los
sitios homlogos de los embriones de pollo, han permitido a los investigadores
solucionar una seriedeantiguos problemas relativos al origen celular yalacompo-
sicin de ciertos tejidos y rganos.
Mtodos inmunolgicos
Lasclulas dediferentes tipos, oaun lasdistintas etapas dedesarrollo deunmismo
tipo de clula, contienen diferentes protenas y polisacridos en el citoplasma o
en sus membranas desuperficie. Estas macromolculas son antignicas; es decir,
cuando seinyectan en otro animal, como el ratn o conejo, ocasionan que sus
clulas inmunes formen anticuerpos encontra deellas. Al prepararse losanticuer-
pos adecuadamente en contra deantgenos especficos, pueden ser degran valor
en los estudios dedesarrollo en tanto es posible emplearlos para descubrir en un
tejido u rgano la presencia o ausencia especfica de la molcula antignica en
cuestin. En lainvestigacin embriolgica escomn tomar una seccin detejido
que sesospecha contiene un antgeno, para cubrirlo con un lquido que contiene
un anticuerpo en contra deeseantgeno. Si el antgeno est presente en el tejido,
el anticuerpo secombina con l. Este complejo antgeno-anticuerpo no puede in-
vestigarse estticamente, por loqueacontinuacin sueleaadirse unsegundo anti-
cuerpo dirigido al primero. Sin embargo, el segundo forma un complejo con la
molcula marcadora, por lo general una que posee propiedades fluorescentes, de
modo que el marcador podr descubrirse con un microscopio de fluorescencia,
y as su localizacin en el tejido indicar la presencia del antgeno en cuestin.
Inmunocitoquimica es el nombre que suele recibir el proceso de ubicacin de mol-
culas especficas en tejidos mediante anticuerpos.
Existe una nueva y poderosa tcnica inmunolgica que implica la produccin
deanticuerpos monoe/onales, diseada para producir anticuerpos excepcionalmente
puros y especficos. Aunque Milstein (1980) ha compendiado bien los detalles de
esta tcnica, en pocas palabras consiste en inyectar primero un antgeno aun ratn.
Despus se extraen las clulas productoras de anticuerpos del bazo del ratn y se
fusionan con una clula del tipo de tumor conocido como mieloma. Las clulas
fusionadas (que ahora sellaman hibridomasi pueden conservarse en cultivo. Cuan-
do un hibridoma produce un anticuerpo de inters, se cultiva como un solo clono
y se p~rmite su multiplicacin. As, todos sus descendientes celulares producirn
la misma variedad, altamente especfica, del anticuerpo monoclonal, y mediante
una tcnica de cultivo adecuada, podrn preservarse casi indefinidamente como
fbricas de ese anticuerpo especfico.
Las tcnicas inmunocitoqumicas que se dirigen tanto a las clulas como a los
componentes de lamatriz extracelular han proporcionado valiosa informacin res-
pecto alalocalizacin decantidades diminutas de antgenos importantes en el desa-
rrollo, as como del momento de su aparicin a medida que avanza el desarrollo.
A lo largo del texto se presentarn ejemplos especficos del uso de estas tcnicas.
Tcnicas microquirrgicas
Mucha de la informacin fundamental sobre los mecanismos causales en el desa-
rrollo embrionario, sobre todo los que implican interacciones detejidos, seha obte-
nido a travs del uso de tcnicas microquirrgicas. El trabajar con embriones que
amenudo no miden ms de algunos milmetros ha requerido el desarrollo de herra-
mientas especiales, como las agujas de vidrio o tungsteno y las asas de cabello
de lactante, en vez de los bisturs y frceps que comnmente se relacionan con
la ciruga usual. Para el trabajo con embriones en extremo pequeos o con grupos
de clulas seutilizan micromanipuladores en lugar de manos para tomar los instru-
mentos.
Las tcnicas microquirrgicas se utilizan en muchos tipos de experimentos, y
una de las ms sencillas es la ablacin o extirpacin de la parte de un embrin
para valorar el efecto que tendr laausencia de esa estructura en el embrin restan-
te. El trasplante y explante son tcnicas quirrgicas muy comunes y tienen amplias
aplicaciones en la investigacin embriolgica.
El explante consiste en extraer una pequea muestra de tejido embrionario y
desarrollarlo en un medio artificial, si bien esta tcnica puede manejarse de diferen-
tes formas. Uno de los mtodos estriba en injertar el tejido extirpado en un organis-
mo husped al interior de un sitio especfico bien abastecido de nutrimentos, pero
que deber crecer y diferenciarse sin influencia de los otros tejidos de su propio
cuerpo que normalmente lo rodean. Al trabajar con embriones de aves es comn
Embriologia: alcance, historia y reas especiales 49
lantar un grupo pequeo de clulas de un individuo joven en la membrana co-
lantoica de un husped de mayor edad. Entre los embriones de mamfero, los
~.ios favorables son las cmaras anteriores del ojo y la regin vascular del perito-
-oo. Los experimentos con explantes han proporcionado mucha informacin acero
- e la forma en que el tejido se adapta y diferencia en un sitio nuevo. Por otra
e, algunos primordios embrionarios exhiben una asombrosa capacidad deauto-
di erenciacin, indicando que hay suficiente informacin al interior de los tejidos
- asplantados para dirigir el desarrollo del rgano.
En los estudios embriolgicos los tejidos algunas veces se trasplantan a otros
itios del mismo embrin (autoinjerto), aunque los tejidos urganos deun embrin
donante con frecuencia seinjertan en huspedes deespecies diferentes (heteroinjer-
to) o incluso de distinto orden (xenoinjerto). Algunos tipos de experimentos con
trasplantes implican cambios o rotaciones menores en los tejidos, si bien en otros
ti pos, laestructura embrionaria sedesplaza engran medida desuubicacin normal.
Se ha encontrado que los tejidos embrionarios trasplantados y los tejidos del hus-
ped no permanecen pasivamente lado a lado, ya que antes bien ejercen profundas
influencias en el curso de desarrollo de sus nuevos vecinos. Como sever, los ejem-
plos de este tipo de influencia han sido particularmente asombrosos en el campo
de la induccin embrionaria.
En una aplicacin reciente de trasplantes, no se implicaron tejidos u rganos
sino componentes de clulas individuales. Mediante latcnica detrasplante nuclear
desarrollada por Briggs yKing (1952), Gurdon (1962) trasplant el ncleo del epite-
lio intestinal de una rana (Xenopus) posmetamrfica, a un huevo cuyo ncleo se
haba inactivado con radiacin ultravioleta (UV) (Fig. 1-27), dando como resultado
el desarrollo de una rana adulta. Este experimento demostr que hasta el ncleo
deuna clula epitelial intestinal contiene suficiente dotacin deinformacin genti-
ca para guiar el desarrollo de un animal maduro completo desde el huevo.
Por lo menos en un caso seha empleado latcnica de trasplante con fines comer-
ciales. Un grupo de criadores sudafricanos de ganado lanar deseaba criar una cepa
especial de ovejas originarias de Escocia. El transporte de una cantidad suficiente
de borregos maduros a Sudfrica requera un largo y costoso viaje. El problema
se resolvi extrayendo vulos recin fecundados de las ovejas escocesas para tras-
plantar los embriones tempranos en teros de conejas, las cuales a continuacin
seenviaron por avin aSudfrica, donde seles extrajeron los embriones deborrego
y de nuevo setrasplantaron en los teros de las ovejas hembras locales. A su debido
tiempo, las ovejas sudafricanas parieron borregos normales de la cepa escocesa,
para as completar la transferencia a larga distancia del rebao de ovejas (Hunter
y col., 1962).
La aplicacin clnica delatcnica de transferencia embrionaria tuvo como conse-
cuencia el nacimiento del primer ser humano concebido al exterior del tero en
el caso de una mujer inglesa que no poda embarazarse debido a un bloqueo en
las trompas de Falopio que prevena que los huevos ovulados llegaran al tero.
Dos bilogos de la reproduccin, Robert Edwards y Patrick Steptoe, obtuvieron
un vulo delos ovarios deesta mujer y lo fecundaron in vitro con el espermatozoide
del esposo. Sepermiti que el embrin sedesarrollara hasta laetapa de ocho clulas
I
1
1
I
Renacuajo ~ :,;;~ U f~:~~~:;o
Clula J
int'lestinal ~ tJ I ' "
Succin U ";;' . . . .- - - nactlv,aclon
del ncleo " ~. :- del nucleo
intestinal con radiacin
a la pipeta \ / ultravioleta
I nsercin del ~.
ncleo en el ~
vulo receptor
+
rADesarrollo del
~ huevo en blstula
, Transferencia en
serie de los ncleos
de la blstula a
otros huevos (esto
t puede repetirse)
, _ B " " " , ,
/ \
Se desarrollan
algunos
embriones
anormales
renacuajos
normales
Se desarrollan
algunos
Fig. 1 - 27. Esquema de un procedimiento de trasplante nuclear en Amphibia (Xenopus), Se suc-
ciona el ncleo de una clula epitelial intestinal en una micropipeta y a continuacin se inyecta
en un vulo receptor cuyo ncleo se ha desactivado con luz ultravioleta, El huevo entonces se
desarrolla en blstula. Cuando se trasplantan los ncleos maduros, con frecuencia es necesario
realizar varias transferencias en serie de los ncleos hijos de la blstula hacia otros huevos con
objeto de crear condiciones adecuadas para el desarrollo completo, aunque es slo un pequeo
porcentaje el que se desarrolla normalmente. En los embriones restantes, el desarrollo es fuerte-
mente anormal y cesa, (Segn Gurdon. )
y a continuacin lo trasplantaron al tero de la mujer. El embrin seimplant
en el revestimiento uterino, dando como resultado un embarazo sin problemas
y el nacimiento de una nia normal.
Tcnicas de cultivo
Una delas formas ms interesantes einstructivas deestudiar el desarrollo embrio-
nario estriba encultivar componentes deembriones, y hasta embriones completos,
Embriologa:. alcance, historia y reas especiales 51
:::::;. un medio artificial. Segn la naturaleza del material explantado, las tcnicas
~ nocen como cultivos de clulas, tejidos, rganos eincluso de embriones com-
:;J ~,- os. Cada tipo de cultivo requiere mtodos ligeramente distintos, pero el princi-
io es el mismo. El material embrionario se coloca en platos o tubos de vidrio
eplstico y se rodea con un medio de cultivo artificial, diseado para asemejarse
el}la mayor medida posible al medio que circunda al material en su sitio normal
embrionario. El medio de cultivo ideal se define qumicamente en su totalidad;
inembargo, con frecuencia es necesario aadir factores biolgicos indefinidos
omo suero, y hasta extractos de embriones completos, para proveer los factores
de crecimiento necesarios. Existe cada vez mayor conocimiento de que lanaturale-
za del sustrato que se coloca a las clulas, sea el plstico del plato o el material
adicional de matriz extracelular, es una determinante considerable para el xito
del cultivo.
El mtodo de cultivo se desarroll en un experimento revolucionario realizado
por Ross G. Harrison (1907) en su intento por encontrar un mtodo que demostrara
el crecimiento nervioso (Fig. 12-18). A partir del tiempo transcurrido desde sus
investigaciones pioneras, los mtodos de cultivo han contribuido enormemente a
nuestra comprensin de los procesos de desarrollo. En la actualidad, el cultivo
de tejidos o de rudimentos de rganos es con frecuencia sistemtico, yen algunos
tipos de clulas como el corazn (Konigsberg, 1963) es posible producir clonos
diferenciados de clulas precursoras individuales. En aos recientes ha crecido el
inters por los cultivos de rganos complejos y deembriones de mamferos comple-
tos; sin embargo, los avances en el refinamiento de las tcnicas de este tipo suelen
ser lentas, y el trabajo, por ende, frustrante.
Una ventaja importante de las tcnicas de cultivo radica en que el medio circun-
dante o el tejido mismo puede alterarse a menudo en ciertas formas que seran
imposibles in vivo. Una desventaja, sobre todo en los cultivos de clulas y tejidos,
esque en ocasiones esdifcil distinguir entre los procesos que slo operan en condi-
ciones de cultivo y los que suceden naturalmente en el embrin.
Tcnicas bioqumicas y moleculares
El anlisis bioqumico de los tejidos embrionarios, en particular con el uso de las
tcnicas ms recientes de la biologa molecular, constituye una de las formas de
ms rpido crecimiento para estudiar el desarrollo. Las tcnicas bioqumicas que
se utilizan para investigar los sistemas embrionarios incluyen casi todas las que
hoy da seusan en labioqumica, motivo por el cual tan slo semencionarn catego-
ras generales en el espacio que se asigna a esta seccin. Entre los mtodos ms
antiguos estn las tcnicas puramente qumicas diseadas para investigar lapresen-
cia o ausencia de compuestos especficos y sus cantidades. El tratado de Needham
(1931) resume mucho de este material. El anlisis de la actividad enzimtica con
frecuencia seemplea en los estudios sobre las propiedades metablicas del embrin.
En estos experimentos se permite que se lleve a cabo una reaccin qumica que
implique lamediacin deuna enzima (como-sucede en lamayor parte delas reaccio-
nesbiolgicas) ya continuacin amenudo semideel producto delareaccin (por
logeneral por mediosespectrofotomtricos) ysecomparaconunacurvadereferencia.
Losmtodos deseparacin seutilizanampliamente enlosestudios deembriones.
Lasprimeras tcnicas deestetipo fueron lacromatografa depapel ylaelectrofore-
sis, lascuales hacen usodelaspropiedades fsicasdecompuestos, como losamino-
cidos o protenas, que les proporcionan diferentes propiedades migratorias en
soluciones ocampos elctricos. Entre lasmolculas quepueden separarse mediante
laelectroforesis seencuentran lasisoenzimas oisozimas (Markert, 1975), que son
formas diferentes demolculas conlamismaactividad enzimtica, peroconestruc-
turas ligeramente distintas quelespermiten separarse entres. Como lasdiferentes
formas delaisozima deunaenzima dada con frecuencia seconstituyen por pobla-
ciones individuales de tipos de clulas en diversos momentos, suelen ser buenos
marcadores del desarrollo (Fig. 9-11).
Otra familia de las tcnicas de separacin es la que implica la centrifugacin
desoluciones uhomogenados detejidos que contienen macromolculas. Despus
decentrifugarse prolongadamente aaltas velocidades, las fracciones subcelulares
odiferentes clasesdemacromolculas seestratifican segnsutamao odensidad.
Losmtodos decolumnas cromatogrficas sedesarrollaron para separar muchas
clases decompuestos, segn sus diversas caractersticas fsicas. En las tcnicas de
columna tpicas, secarga una columna con cuentas u otros materiales diseados
para permitir lamigracin diferencial delasmolculas yseaade al tubo una solu-
cinquecontenga unafamiliademacromolculas, por logeneral, cidos nucleicos.
Sepermite queel lquido delacolumna goteeenlaparte inferior hacia uncolector
de fracciones, un recipiente de algn tipo lleno de tubos. Los tubos semueven
en intervalos peridicos ysucontenido dematerial molecular refleja lavelocidad
del paso delasmolculas atravs delacolumna. A continuacin esposibleexami-
nar el lquido para observar el contenido de las molculas en cuestin. Si se ha
empleado tambin marcacin isotpica, como sucede por loregular, seanaliza
cada tubo para medir la radiactividad.
Sehadiseado asimismo una seriedetcnicas altamente especializadas para de-
mostrar especies particulares de cidos nucleicos contenedores de informacin.
Estas tcnicas aprovechan lasecuencianicadelasbasesqueconstituyen lacadena
del DNA o RNA eimplican la hibridacin de una cadena sencilla de DNA con
una deDNA oRNA, deforma tal quehay unemparejamiento deconjuntos com-
plementarios debases. Las tcnicas dehibridacin han resultado ser muy valiosas
para demostrar la presencia o ausencia de secuencias especficas de bases en los
cidos nucleicos de las clulas embrionarias.
Algunos delos avances recientes ms impresionantes en nuestro conocimiento
del desarrollo incluyen laaplicacin denuevas tecnologas genticas, entre lasque
seincluyen lapreparacin del DNA recombinante, laconstruccin degenessintti-
cos y la capacidad depreparar sondas moleculares especficas. La tecnologa de
recombinacin del DNA permite laproduccin degrandes cantidades deuna se-
cuencia dada deDNA, lo cual selogra mediante laayuda deplsmido, pequeas
molculas circulares de DNA que sereproducen de forma independiente en las
bacterias. Tanto el DNA de eucariote como el DNA del plsrnido sesometen a
~ . --
- ------- -~---------- ----- - --------~
rratamiento simultneo deuna familia deenzimas derestriccin quesegmentan
scadenas del DNA encombinaciones especficas depares debases. Ambos frag-
-entos sedividen en lamisma forma, y si estn juntos en una solucin, algunos
rragmentos que se desprenden del DNA del eucariote se adhieren nuevamente
- D A del plsmido yreconstituyen un nuevo crculo que incluyeun segmento del
DI A eucaritico, Cuando seintroducen estos plsmidos recombinantes enbacte-
'as como Eseheriehia eoli, el DNA plasmtico se replica y el DNA eucaritico
ambin setranscribe. Dado que las bacterias poseen un proceso casi ilimitado
demultiplicacin, laenzimadeDNA eucaritico puedeproducirse engrandes can-
tidades, ylainformacin gentica enel DNA puede entonces utilizarse para origi-
nar productos genticos, como lashormonas deprotena. Unadelasprimeras apli-
cacionesdelatecnologadeDNA recombinante fuelaproduccin deinsulinahumana
(Goeddel y col., 1979).
Una variedad muy til desondas moleculares es ladelamolcula cDNA, que
puede producirse al incubar una mezclademRNA definido, nucletidos ylaenzi-
ma transcriptasa reversa, que permite la sntesis de una sola cadena de DNA, a
partir del mRNA. Como semencion anteriormente, las cDNA con marcacin
radiactiva pueden aadirse asecciones detejidos prueba (hibridacin in situ) para
descubrir lapresencia del mRNA correspondiente enel tejido. Cuando estpresen-
te el RNA, el cDNA marcado sehibridiza con el mRNA, y el complejo sepuede
descubrir de manera autorradiogrfica.
Tcnicas de radiacin
Sehan utilizado varias formas deradiacin enlos estudios embriolgicos, princi-
palmente para causar algn dao enpartes del embrin. Para realizar ciertos expe-
rimentos, seenfocan rayos X enpequeas regiones del embrin conobjeto deobte-
ner un rea circunscrita de lesin al tejido, as como para inactivar un grupo de
clulas. En ocasiones seutilizan rayos ultravioleta para el mismo fin, pesea que
carezcan del poder depenetracin profunda delos rayos X. Los rayos lser han
resultado ser una valiosa herramienta para producir lesiones localizadas agudas
enel embrin (BernsySaleti, 1972).Estal suprecisin quepueden destruir peque-
as regiones de cromosomas individuales (Fig. 1-28).
Inhibidores y teratgenos
En el proceso deanlisis del desarrollo embrionario sehan utilizado muchos tipos
desustancias qumicas para inhibir losprocesos embrionarios normales. En algu-
nos casos, el mecanismo deactivacin deuninhibidor qumico est biendefinido,
y una alteracin en el desarrollo puede atribuirse a alteraciones especficas en la
vametablica. Por ejemplo, sesabe que el antibitico actinomicina D inhibe la
sntesis del RNA, demodo que si seadministra a un embrin muy temprano, el
desarrollo proceder por lo general durante un lapso breve, pero al poco tiemp r
Fig. 1-28. Efectos de radiar cromosomas de clulas de cultivo [lnea rata canguro (PTK,)] con
un rayo lser de argn. A, En la fase de micrografa de contraste, el rea radiada se presenta
como manchas plidas dentro del cromosoma (flechas). x 1 300. B, En una micrografa electrnica
del conjunto inferior de cromosomas, la regin radiada contiene agregados de material electrnica-
mente denso (flecha). J 3100. (TomadodeJ . B. Rattnery M. W. Berns, 1974. J. Cel/. Biol., 62:526.
Cortesa de los autores y el editor.)
seinhibir notoriamente (Gross y Cousineau, 1964). Puede inferirse por consi-
guientequelaetapa enqueseinhibi el desarrollo requera lasntesis demolculas
nuevas de RNA.
Enlamayor partedeloscasosan sedesconoce el mecanismo exacto delaactiva-
cin perturbadora que ocasiona una sustancia qumica o una radiacin (derayos
X o ultravioleta). Por ello, los efectos deestos agentes slo pueden interpretarse
a un nivel menos especfico, en ocasiones implicando el efecto intermediario de
un tejido sobre otro en vez de un trastorno en el proceso qumico.
Seha mostrado en aos recientes que ciertos medicamentos ocasionan muchos
tipos de desarrollo anormal. Sedice que dichos medicamentos tienen un efecto
teratgeno yselesconoce comnmente como teratgenos. A inicios deladcada
de 1960sepresent un ejemplo impresionante de la actuacin de un teratgeno
en el desarrollo humano en Alemania Occidental yvarios otros pases, donde un
gran nmero denios naci con un tipo inslito dedefecto en las extremidades.
En sus manifestaciones graves, faltaban los segmentos proximales de los brazos
ylaspiernas; las manos ypies parecan crecer directamente del cuerpo. Dado que
los miembros seasemejaban alas aletas deuna foca, estetrastorno secategoriz
comofocomelia (apndice defoca). Pronto sedescubri queestas deformaciones
eran ocasionadas por un sedante supuestamente seguro llamado talidomida, de
1: --~
" --------
omn entre las embarazadas deestos pases. El medicamento seha retirado
=:.c mercado, pero por susocasionales efectos trgicos, losprocedimientos deapro-
._, ein decualquier medicamento nuevo ahora incluyen rigurosos exmenes para
saber si ejercern efectos dainos en los embriones.
Gentica del desarrollo y el uso de mutantes
y marcadores genticos
Una delas herramientas verdaderamente poderosas para ladiseccin deprocesos
de desarrollo complejo es el enfoque de la gentica del desarrollo. Los estudios
sobre los mutantes genticos que afectan las etapas especficas del desarrollo han
proporcionado informacin acerca dealgunas especies (laDrosophila esun ejem-
plo sobresaliente), quepermite alosinvestigadores comenzar arelacionar laestruc-
tura genticaconcomplejos fenmenos morfogenticos. El usodemutan tes morta-
les haasumido crecienteimportancia enel anlisis del desarrollo embrionario, pues
la identificacin de dnde y cundo sepresenta en un principio un error en una
cepa mutante con frecuencia posibilita la deteccin de los efectos que producen
ciertos genesespecficos enlosprocesos dedesarrollo. El complejo Tdelosratones
constituye una seriedegran valor demutantes mortales. Los genes del complejo
[
' Trofectodermo
Mrula r' Masa celular.
: extraembnonana
,
Masa :
: celular:
interna: I
L+-.. Masa c~lular
: embrionaria , . Lnea
, 1 : rTprimitiva
L+-.. Masa c~lular
: embrionaria
, extendida r+:Ectodermo
1 : 1 :
L+-Masa cetular Tallo
embnonana f' b I
residual : cere ra
I : :
L.;-Ectodermo
neural
Lt-- Prosencfalo
,
t
w2
t 1 2 tO
T-complex mutation
Fig. 1-29. Representacin esquemtica de los efectos de mutaciones diferentes del complejo
Ten el desarrollo temprano del ratn. Los embriones homocigotos por las mutaciones enumeradas
en la parte inferior del diagrama muestran progreso deteriorado en las dicotoma.s de desarrol7\o
que se indican con las flechas desviadas en la parte superior del diagrama. (Adaptado de J . Klein \
1975, Biology of the Mouse Histocompatibility-2 Comptex. Springer Verlag, Nueva York.)
(
(
-
------- ----
T se ubican en el cromosoma 17, donde desempean la funcin de controlar la
variedad de interacciones celulares que implican fenmenos de reconocimiento in-
tercelular en el embrin temprano. As, los productos genticos de este complejo
son importantes en los espermatozoides y en las primeras etapas embrionarias.
De manera interesante, otra extensa familia gentica, la del complejo H-2, que
tambin se encuentra en el cromosoma 17, afecta el reconocimiento celular en el
sistema inmunolgico del ratn durante las etapas embrionarias tardas y en la
vida adulta. Los mutan tes de los diferentes alelos T son mortales y ocasionan la
cesacin del desarrollo en etapas especficas. Los puntos sensibles de algunas de
las principales mutaciones del complejo Tse ilustran en la figura 1-29. Los detalles
especficos delos efectos nocivos delos diferentes alelosTse exponen enel captulo 5.
Sin embargo, es claro que no todos los mutantes son mortales. Por regla general
puede decirse que mientras ms tarde comience a actuar un gen en el desarrollo,
menor ser la probabilidad de que el mutante sea mortal. En el albinismo, por
ejemplo, la carencia de color no se debe a la ausencia de clulas pigmentarias,
sino antes bien a la falta de una enzima especfica (tirosnasa) que se requiere en
la va sinttica del pigmento negro, la melanina. Por lo general, mientras ms se
estudie a un animal, se descubrir mayor cantidad de genes mutantes. Entre los
vertebrados, el ratn es1a especie que ms se ha estudiado, con cientos de genes
mutantes definidos, si bien las cepas mutantes en ajolotes, Xenopus y pollos tam-
bin han resultado de gran utilidad en la investigacin embrionaria.
Los marcadores genticos tambin son tiles en los estudios de desarrollo, gene-
ralmente como rastreadores. De particular valor han sido las cepas de ratones que
han desarrollado diferencias isoenzimticas en laforma deciertas enzimas. La iden-
tificacin mediante mtodos electroforticos de isoenzimas especficas ha mostra-
do ser de utilidad como un mtodo rastreador.
Los enfoques metodolgicos que se han mencionado en la presente seccin se
utilizan hoy da en investigaciones que nos aproximan al umbral de una nueva
era en la comprensin de los factores de control y regulacin en el desarrollo. Su
combinacin cada vez ms tiende a diluir las antiguas fronteras entre las varias
disciplinas delainvestigacin cientfica, dando como resultado un enfoque unifica-
do para abordar el estudio de problemas embriolgicos.
Desafortunadamente, algunos mtodos de investigacin ms recientes requieren
aparatos que resultan demasiado costosos para tener en cada laboratorio. Cual-
( quier falta de equipo especial no deber ms que indicar la conveniencia de canali-
zar los esfuerzos de investigacin a travs de vas que no lo requieran. No hay
que impresionarse indebidamente por la disponibilidad o ausencia del aparato;
antes bien, debemos percatarnos, como lo sealara Ebert (1966, p. 50), que muchos
de los avances ms importantes en el conocimiento de los mecanismos del desarro-
llo "se realizaron con tcnicas del todo simples. Las agujas de vidrio y las asas
de cabellos, la solucin salina fisiolgica y la capacidad de formular las preguntas
adecuadas eran lo nico indispensable". Es importante recordar tambin que "los
nuevos mtodos por lo general tan slo pueden aplicarse a antiguos materiales;
las ideas novedosas no surgen de repente ya conformadas como naci Afrodita
del caos del mar; deben estructurarse de manera laboriosa sobre los fundamentos
=~o-_-~
(' .~~
Embriologia: alcance, historia y reas especiales 57
-~ obras anteriores" (Waddington, 1956, p. 5). El conocimiento cabal y preciso
~ J osfenmenos que suceden durante el desarrollo normal constituyen la base de
zembriologa experimental, yaquesinellano hay una base slida para interpre-
:2I la importancia de los resultados experimentales.
CAPITULO 2
ORGANOS DE LA REPRODUCCION
y CICLO SEXUAL
ORGANOS DE LA REPRODUCCION
A manera de preludio al estudio de la fecundacin y desarrollo embrionario es
importante comprender cmo ydnde seproducen las clulas sexuales (gametos)
y, enel caso delosanimales queemplean estrategias reproductivas defecundacin
interna yqueprocrean cras vivientes, entender losprocesos anatmicos yfuncio-
nales diseados para unir los gametos y despus nutrir al embrin en desarrollo.
Este captulo se'concentrar en los rganos de la reproduccin en mamferos y
loscambios hormonales queson deimportancia crucial enlaproduccin degame-
tos ysuencuentro durante lafecundacin, as como enlapreservacin del embrin
al interior del tero.
Organos reproductores femeninos
Losrganos reproductores enlamujer ysurelacin con otras estructuras del cuer-
po semuestran enlas figuras 2-1y2-2. Los ovarios, el par degnadas localizado
enlacavidad plvica, seencuentran enlapelvis, cadauno prximo auna abertura
deaspecto semejante al deunembudo (ostium tubae), enel extremo deuna trompa
de Falopio. En torno al orificio abdominal de la trompa se presentan procesos
caractersticos, que reciben el nombre defimbrias, cuyo aspecto es similar a los
ribetes. El revestimiento de la trompa consta de una gran cantidad de pliegues
complejos ysusuperficie epitelial contiene muchas clulas ciliadas (Fig. 2-3), cuyo
latir ocasiona el flujo defuertes corrientes lquidas hacia lacavidad uterina. Cuan-
58
Organos de la reproduccin y ciclo sexual 59
.J gamento
Ovario
Extremo fimbriado de
la trompa de Falopio
Ligamento redondo
del tero
Diafragma urogenital
Esfnter anal externo
Fig. 2-1. Seccin sagital de la pelvis adulta femenina. (Redibujado, con algunas modificaciones,
de Sobotta, Atlas of Human Anatomy. Cortesa de G. L. Stechert & Company, Nueva York.)
Cuernos de la
cavidad uterina
Ostium tubae Ovario
Epoforo
""--"'--"_- Cavidad uterina
(parte fndica) ,
Trompa de Falopio
---+-+~,__-- Ligamento ancho
Cuello uterino
Fig. 2-2. Organos reproductores femeninos internos, vista ventral y extendida. La vagina, el
tero y la trompa de Falopio derecha se han abierto para mostrar su configuracin interna. (Redibu-
jado, con ligeras modificaciones, de Reuber-Kopsch, Lenrbuch und Atlas der Anatomie des Mens-
chen. Cortesa de la Georg Thieme Verlag KG, Stuttgart.)
r:
60 Organos de la reproduccin y ciclo sexual
Fig. 2-3. Micrografa electrnica
de barrido de la superficie mucosa
de la porcin ampulada de la trom-
pa de Falopio durante la fase mens-
truallutenica tarda. Las clulas que
exhiben mechones de cilios estn di-
seminadas entre clulas no ciliadas.
x 1 000. (Tomado de H. Ludwig y
H. Metzger, 1976. The Human Fe-
male Reproductive Tract. Springer-
Verlag, Berln. Cortesa de los auto-
res y el editor.)
do unvulo seliberadelasuperficie del ovario, seintroduce enel extremo fimbria-
do delatrompa y desciende lentamente hacia lacavidad uterina, donde, si seha
fecundado, seadhiere ala pared del tero para ser nutrido durante el desarrollo
prenatal.
El tero humano esun rgano piriforme que, en condiciones deno embarazo,
tiene gruesas paredes, bien provistas de msculo liso, y muy vascularizado. Su
cuerpo termina caudalmente en el cuello uterino, regin que se caracteriza por
una luz atenuada, gruesas paredes yglndulas dediferente tipo alasquesepresen-
tan en el cuerpo uterino. El cuello uterino seproyecta a la parte superior de la
vagina, lacual poseeladoble funcin dergano delacopulacin ycanal departo
durante el nacimiento.
Los rganos genitales femeninos forman uncomplejo deestructuras agrupadas
entorno al orificio vaginal, que enconjunto constituyen la vulva. Las estructuras
ms externas sellaman labios mayores, dos pliegues depiel contenedores degrasa
(Fig. 2-1), encuya hendidura hay un segundo par ms pequeo depliegues cut-
neos, altamente vascularizados y desprovistos de grasa, que se conocen como
loslabios menores. Parcialmente envuelto por loslabios menores, donde seencuen-
tran despus, estel cltoris, pequeo rgano erctil, homlogo del pene. Aproxi-
madamente auna distancia media enlavulva, entre el cltoris yel orificio vaginal,
estlauretra, entanto queel orificio vaginal asuvez seubicaenlaparte posterior
de la vulva (Fig. 2-1). En las mujeres que no han tenido relaciones sexuales, la
abertura delavagina est angostada por un delgado pliegue detejido que recibe
el nombre de himen ..
os reproductores masculinos
: : : : . . . = . . .. , - posicin general yrelaciones del sistema reproductor masculino semuestran
""'"'" asfiguras 2-4y2-5. Los testculos, adiferencia delosovarios, no seencuentran
~lacavidad abdominal, puesestn suspendidos enunabolsadepiel llamada escro-
to. Por suubicacin enel escroto ylaespecializada disposicin del abastecimiento
cular que reciben (un sistema deintercambio calorfico encontracorriente), la
zemperatura delostestculos permanece varios grados menores quelacavidad ab-
omina!. Esteesunrequerimiento para laproduccin normal deespermatozoides,
el producto degran cantidad detbulos seminferos muy enrollados. Lalongitud
total deestos tbulos esasombrosa; Bascom o Osterud (1925) estimaron que los
tbulos deun testculo dejabal maduro alcanzara los 3200msi seextendieran
depunta apunta. Los 360mdelostbulos seminferos delostestculos humanos,
por otraparte, explicanlaproduccin diariadeunos95millonesdeespermatozoides.
Los espermatozoides deben pasar por una larga y compleja seriedeconductos
para llegar al exterior. A partir delostbulos seminferos seabren camino atravs
deunos pequeos conductos, lostbu!os rectos, haciaunamallairregular dedelga-
dosconductos anastornticos queseconocecomo red testicular, donde losconduc-
tos eferentes recaban alos espermatozoides para asuvez conducirlos atravs del
Urter
Vescula seminal
!'u"!""~- - - T- Recto
~"'- __ Conducto eyaculador
--:77'------.f-- Prstata
-r---"-- Glndula de Cowper
Pene
Vena dorsal
A
Cuerpo
cavernoso
Tnica albugnea
B
Fig. 2-4. A, Vista lateral de los rganos reproductores masculinos. B, Corte transversal del pene,
para mostrar la disposicin de sus masas de tejido erctil (los dos cuerpos cavernosos) y el cuerpo
esponjoso impar.
Glndulas de Littr
Cordn
Testculo
seminfero
.~..-- . . . . . .
Fig. 2-5. Disposicin esquemtica de los rganos reproductores masculinos. Vista frontal yextendida.
extremadamente enrollado conducto del epididimo, rumbo al conducto deferente,
en cuyo extremo distal hay un ensanchamiento glandular que recibe el nombre
devescula seminal. Antiguamente \e creaquelasvesculas seminales servan, co-
mo su nombre lo implica, amanera~ receptores en los que sealmacenaban los
espermatozoides que iban aser eyaculados. En la actualidad sesabe que stos se
almacenan en el epiddimo y el conducto deferente y que las vesculas seminales
enrealidad son rganos glandulares productores deuna secrecin que sirvecomQ~;;
vehculo para los espermatozoides y que contribuye a su nutricin. 0-;
Los rganos genitales externos masculinos constan del escroto, contenedor de
ostestculos yel pene. Elpene poseetresmasas cilndricas detejido erctil, sosteni-
das por un denso tejido conectivo, ycubierto con piel libremente mvil. Las dos
estructuras situadas en el dorso del pene son los cuerpos cavernosos, y la masa
ubicada debajo deellosesel cuerpo esponjoso (Fig. 2-4B), el cual enlacara ventral
del peneesms reducido queloscuerpos cavernosos, pero queensuextremo distal
seexpande para formar el glande. Por otra parte, lauretra abarca lalongitud total
del cuerpo cavernoso, y en ella desemboca gran cantidad de pequeas glndulas
secretorias democo, losglndulas de Littr (Fig. 2-5), lascuales seactivan durante
la excitacin sexual y producen un lquido lubricante que facilita la penetracin.
Cuando sedescargan los espermatozoides durante el clmax coital (orgasmo),
ingresan alauretra atravs delos conductos eyaculadores (Fig. 2-5), y al mismo
iempo seevacuan violentamente loscontenidos delasvesculas seminales, laprs-
lata y las glndulas bulbouretrales (oglndulas de Cowper) hacia la uretra, para
as proporcionar un medio lquido enel que losespermatozoides seactiven mvil-
mente. Esta mezcla desecreciones con lasuspensin deespermatozoides (semen)
es expulsada a travs de la uretra por las contracciones musculares rtmicas que
ulminan en la eyaculacin.
CICLO SEXUAL EN LOS MAMIFEROS
Lareproduccin enlos mamferos esun proceso minuciosamente orquestado que
requiere lapreparacin coordinada demuchos tejidos en el cuerpo delahembra,
puesno slodebeliberarse unvulo del ovario; lostejidos del aparato reproductor
debern estar adems preparados para transportar tanto alosvuloscomo losesper-
matozoides aun sitio comn en el que pueda llevarse acabo la fecundacin. En
caso dequeas suceda, el embrin temprano deber llevarsealaporcin del tero
queestpreparada para recibirlo ysatisfacer susrequerimientos nutricionales du-
rante el transcurso del embarazo. Enel aspecto conductual, lahembra debeindicar
al macho su disposicin favorable a la copulacin, y el macho a su vez deber
estar dispuesto a responder.
La mayor -parte de las preparaciones para la reproduccin son de naturaleza
cclica. Las hormonas actan como mediadoras deloscambios enlascaractersti-
cas estructurales y funcionales de los tejidos reproductores masculinos y femeni- lo'
nos, con frecuencia interactuando en ciclos de retroalimentacin estrechamente
controlados. En laactualidad sereconoce que existeuna fuerte influencia neural
en la reproduccin y que las influencias ambientales y psquicas pueden ejercer
profundos efectos en los patrones reproductivos.
El ciclo del estro en los mamferos
Laperiodicidad sexual seencuentra por lo general mucho menos desarrollada en
el macho que en la hembra. Entre algunos animales, como los de la familia de
los ciervos, existeun breve periodo deintensa actividad sexual en una temporada
particular del ao, seguido deunlargo periodo durante el cual sepresenta laimpo-
tencia sexual y el cesede la espermatognesis. Sin embargo, es ms comn, de
manera especial entrelosprimates, queel macho seasexualmente potente durante
el transcurso desuvidaadulta. El breveperiodo deactividad sexual pronunciada,
si es que lo hay en los machos, seconoce como la "temporada de brama" entre
los criadores de animales, y siempre corresponde temporalmente con el periodo
deun fuerte impulso deapareamiento delashembras, al cual los criadores llaman
"el periodo de celo" y los bilogos lo llaman estro.
El trmino estro originalmente slo serefera a la existencia de un periodo de
fuerte deseosexual quesemanifestaba mediante laconducta. Sinembargo, confor-
mesehaadquirido msinformacin sobreloscambios concomitantes quesellevan
acabo dentro del cuerpo, sehacomprobado queel estro ocurre prximo al periodo
de ovulacin y quela conducta caracterstica tan slo representa una indicacin
externa dequetodos loscomplicados mecanismos internos delareproduccin es-
tn preparados para activarse funcionalmente. Si no sepresenta preez durante
eselapso, suceden cambios regresivos, yel siguienteperiodo depreparacin deber
sobrevenir antes quelascondiciones nuevamente seanfavorables para lareproduc-
Deseo
sexual
de msculo liso
Utero
Fig. 2-6. Grfica que muestra la correlacin de cambios que ocurren durante el ciclo del estro
en la marrana. Obsrvese la correlacin de los sucesos importantes que conducen a la preez
(coito, ovulacin, fecundacin, la migracin del vulo a travs del oviducto hacia el tero y por
ltimo, su adhesin a la mucosa) con la altura de la actividad local indicada por las curvas. (Compila-
cin de la obra de Comer, Seckinger y Keye.)
Orqenos de la reproduccin y ciclo sexual 65
-in, Esta serie de cambios iterativos seconoce como el ciclo sexual o estrual (Han-
_ yConvey, 1983) yafalta depreez, sus fases son: 1)unbreve lapso depreparacin
- zal para la reproduccin, acompaado de deseo sexual (estro); 2) un periodo
;:: ante el cual las preparaciones infructferas sufren una regresin (posestro o
metestroi, y 3) un periodo de descanso (diestro), seguido de 4) un periodo de cam-
ios preparatorios activos (proestro) que conducir al siguiente estro, cuando todo
est nuevamente dispuesto para la reproduccin (Fig. 2-6).
Existe gran diversidad entre los animales con respecto aladuracin de este ciclo.
En algunos slo ocurre una vez al ao, siendo el estro tan temporal, que cuando
nacen las cras las condiciones son favorables para su crianza. Sedice que las espe-
cies que slo tienen una temporada de reproduccin anual son monoestruales, en
tanto que los animales que presentan varios periodos sellaman poliestruales. Con
base enlos conocimientos actuales, parecera que el ritmo poliestrual generalmente
representa la condicin fundamental entre los mamferos. Aunque muchos facto-
res lo disfrazan o modifican en diferentes casos, se encuentra sin confusin en
las formas que ms se han estudiado. No resultara irrazonable suponer que el
estro anual, como en la familia de los ciervos, se haya constituido mediante la
supresin de otros periodos, sobre todo debido a la recurrencia continua de pree-
ces de larga duracin que suceda al que enun principio slo fuera el ms favorable
de muchos ciclos deestro. Sesabe asimismo que adems de lapreez, otros factores
pueden interrumpir este ciclo y que lainanicin, laexposicin extrema aelementos
de peligro o las enfermedades graves pueden incluso suprimirlo. Una causa que
quiz contribuy a la disminucin del ritmo poliestrual al monoestrual, operante
entre las hembras que no lograban prearse, fue la inclemencia de las condiciones
en las que viven muchos animales silvestres durante el invierno o en temporadas
ridas.
Muchos de los animales que slo tienen una temporada de reproduccin al ao
(las ovejas, por ejemplo) cuando viven en estado silvestre, desarrollan un ritmo
poliestrual cuando estn bajo domesticacin. Una preez prolongada posterior
a cada estro puede por tanto ocultar una condicin poliestrual, hecho que por
lo comn sucede entre gran cantidad de animales silvestres. Sin embargo, esto se
torna obvio cuando no sepermite que el animal sepree encondiciones de domesti-
cacin o bajo condiciones experimentales en el laboratorio. A continuacin, tras
un estro infructuoso, sepresenta un breve intervalo de regresin, descanso y prepa-
racin, seguido al poco tiempo por otro estro. Dado que las condiciones de vida
endomesticacin son relativamente uniformes, lasupresin del estro por inanicin
o exposicin a posibles elementos dainos no sucede.ty los periodos de reproduc-
cin continan recurriendo a intervalos medianamente constantes, hasta que uno
de ellos se ve consumado con el embarazo.
Otros mamferos que atraviesan por lapsos breves de gestacin, como el conejo,
pueden ser poliestruales, excepto eninvierno. La luz esal parecer un factor de inicia-
cin crtico entr~ estos animales, ya que su hipfisis nicamente activa la produc-
cin de suficientes hormonas estimulantes delfoliculo (FSH) para poner enmarcha
el ciclo reproductivo completo, cuando la cantidad diaria promedio de luz rebasa
cierto umbral (Fig. 2-7A).
1. Luz
Sistema
~~---"_--'\ __ hipotalamo-
hipofisario
3. FSH y
hormona
Hormona
estimulante
del folculo
(FSH)
Crecimiento
folicular
Utero
durante
el estro
1. Copulacin:
estimulacin cervical
Vagina
durante
el estro
A
B
Fig. 27. Diagramas que muestran la secuencia de fenmenos en el ciclo reproductivo del cone-
jo. A, Reacciones que conducen al estado de estro. B, Secuencia de fenmenos que suceden
a la copulacin. (Redibujado, con ligeras modificaciones, de Witschi, 1956, Development of Verte-
brates. Cortesa del autor y W. B. Saunders Company, Filadelfia.)
Ciclo menstrual en los primates
Entre los primates, el ciclo sexual femenino se caracteriza por la menstruacin,
secrecin uterina desangre, moco yresiduos celulares aintervalos peridicos (apro-
ximadamente de cuatro semanas en seres humanos). En la mujer la menstruacin
suele iniciarse (menarqua) alos 12a 14aos deedad, ycontina hasta lamenopau-
sia, que normalmente sepresenta en los aos finales de su cuarta dcada de vida.
La duracin de lamenstruacin suele ser de cuatro acinco das, si bien hay conside-
rable variabilidad individual tanto en la duracin del periodo como en el intervalo
en el que ocurre.
El ciclo menstrual puede dividirse en tres fases principales: 1) menstruacin;
2)fase proliferativa ofolicular, y 3) Jafase secretoria o lutenica. Ser ms sencillo
seguir los cambios si se comienza con las condiciones justo despus que finaliza
\ el periodo menstrual. La figura 2-8 representa muy esquemticamente los cambios
que se suscitan en el revestimiento mucoso del tero durante el ciclo. Las bandas
negras descendentes indican la abrupta disminucin de espesor que resulta de la
CICLO
OVARICO
Regresin del Fecundacin
cuerpo amarillo del vulo e
~.. implantacin del
~ cuerpo amarillo
Cuerpo amarillo
del embarazo
CICLO
UTERINO
OVULACION IMPLANTACION PLACENTACION
Rpido crecimiento del Migracin y muerte 1 (Cese de la ovulacin.
folculo que termina del vulo. Cuerpo FECUNDACION Contina el
en 1, ~I"i, ,m,,;no"~i",I OVULACION j ,""~o ,m"no)
Capa
funcional
de la
ucosa
Capa
basal
1
~- - ~- - ~~- - - - - - - - - - ~- - - - - - - - - - - - - - -
Menstrua- Fase Fase Ciclo Placentacin
cin proliferativa secretoria incompleto (retencin de la menstruacin)
CICLO MENSTRUAL
COMUN
CICLO MENSTRUAL QUE 'TERMINA
EN EMBARAZO
Fig. 2-8. Resumen grfico de los cambios que se llevan a cabo en el endometrio durante un
ciclo menstrual comn yel ciclo subsiguiente en el que ocurre el embarazo. Los cambios correlacio-
nados en el ovario se sugieren en la parte superior, relacionados en forma correspondiente a la
misma escala temporal. (Modificado de Schroder.)
esfacelacn menstrual. Las estructuras tubulares que se muestran al interior de
lamucosa representan a las glndulas uterinas. La parte inferior de sombreado
ims oscuro es la llamada capa basal, que est por abajo del nivel requerido para
'laesfacelacin ya partir deesta capa seinician los procesos dereparacin ycreci-
rentode la fase proliferativa. La restauracin del revestimiento epitelial selleva
a cabo con asombrosa rapidez por la proliferacin de clulas que se encuentran
en la parte profunda delas glndulas, que hasta ahora han permanecido sin altera-
ciones en la capa basal. Conforme aumenta el espesor de la mucosa, la longitud
delas glndulas seincrementa, aunque durante toda lafase proliferativa seconser-
varn delgadas y relativamente derechas. Sus luces son pequeas y desprovistas
de cualquier cantidad conspicua de secrecin.
Despus de la ovulacin, la fase proliferativa poco a poco se transforma en la
fasesecretoria. Las paredes delasglndulas setornan irregulares, aumenta el tama-
o de suluz ypuede observarse una cantidad considerable de secrecin al interior
de las glndulas. Tambin sepresenta un sorprendente incremento en el carcter
conspicuo delas pequeas arterias que abastecen laporcin superficial delamuco-
sa, las cuales tienden aseguir un curso espiral ycuyoenrollamiento setorna mucho
ms notorio enestaetapa. Una semana despus delaovulacin, el cuadro histolgi-
corefleja por completo el aumento deactividad. Las glndulas estn muy hincha-
das; los pequeos vasos sanguneos, congestionados, y el espesor de la mucosa
seha incrementado en unos 4o5mm, del milmetro omenos que haba inmediata-
mente despus del ltimo periodo. En estaetapa el tero estpor completo prepar,a-
do para el implante ylanutricin del joven embrin. (Vaselailustracin del ciclo
a la derecha de la figura 2-8.) I
Si no llegaaimplantarse el vulo fecundado, las actividades dela fase secretoria
cesan durante labreve faseisqumica que deinmediato precede alamenstruacin.
Sereduce el flujo sanguneo a la regin superficial de la mucosa uterina, a pesar
de que el flujo de los vasos que abastecen a las capas ms profundas permanece
ininterrumpido. En la regin superficial los corpsculos de glbulos blancos co-
mienzan aemigrar hacia el estroma, en tanto que los tejidos, al verse desprovistos
decirculacin activa, empiezan adeteriorarse. Cuando laduracin delafaseisqu-
micahasidodealgunas horas, las arterias espirales comienzan aabrirse por doquier
y la sangre sederrama en los capilares superficiales, desgarrando sus debilitadas
paredes, deforma tal que sepresenta una extravasacin desangre hacia lostejidos
subyacentes al revestimiento epitelial. Al poco tiempo, el ahora tejido superficial
necrtico, la sangre extravasada que permanece sin coagular, la sangre adicional
que rezume de la superficie recin desvestida y la secrecin de las bocas abiertas
de las glndulas seconjuntan para emerger como la hemorragia menstrual. Una
vez iniciado el proceso, procede a gran velocidad en una regin dada, si bien el
revestimiento uterino no est afectado demanera simultnea en sutotalidad. Du-
rante la fase temprana del periodo seva implicando una regin tras la otra, hasta
el tercer da, en que se habr desvestido esencialmente la superficie uterina. La
reparacin de las regiones que al principio fueron las primeras en ser afectadas
comienza deinmediato, ypoco antes del cesedelamenstruacin ya estar en mar-
cha una nueva fase proliferativa.
"
Regulacin hormonal del ciclo sexual femenino
A partir delas primeras investigaciones acerca delanaturaleza del proceso repro-
ductivo secomprob el estrecho entrelazamiento en las funciones yrespuestas de
los componentes del aparato reproductor femenino. Aun cuando al poco tiempo
sereconoci quelashormonas funcionan como coordinadoras, hatomado dcadas
de'~smerado trabajo comprender lascomplejas interacciones implicadas enlaregu-
lacin hormonal de los fenmenos reproductivos. El florecimiento inicial de la
disciplina de la endocrinologa reproductiva sucedi entre 1920y 1940, cuando
un grupo de inteligentes investigadores delimit las hormonas fundamentales y
las vas decontrol entre la glndula hipofisaria y los rganos dela reproduccin
durante varias fasesdel ciclosexual. Estetrabajo seharesumido bienenuntratado
dirigido por Young en 1961. Los siguientes avances principales radicaron en el
reconocimiento delaimportante relacin entreel cerebro ylahipfisis ylaelabora-
cin de radioinmunovaloraciones que permitan estimar los valores hormonales
enlquidos corporales en forma muy precisa. Con lareciente identificacin delas
molculas celulares receptoras dehormonas, enlaactualidad esposible formular
preguntas importantes sobre los mecanismos hormonales a nivel molecular.
Existen varios niveles deregulacin hormonal delareproduccin (cuadro 2~1;
Fig. 2-9). El primero es el propio cerebro, el cual recibe y procesa muchos tipos
deestmulos, de los cuales los ms relevantes para la reproduccin secanalizan
atravs deuna regin prxima alabase del cerebro, conocida como hipotlamo.
Por ejemplo, laoveja esestimulada hormonalmente por unfotoperiodo decrecien-
te, en tanto que en otros. animales, como el conejo (Fig. 2-7), la copulacin es
unestmulo importante que por ltimo conduce alaovulacin. Existen otros est-
mulos sensoriales, como las sensaciones olfativas, que tambin pueden influir en
las funciones endocrinas. Hoy da esobvio que lamayor parte deestos estmulos
exgenos setraducen en cambios dela actividad endocrina por la influencia que
ejerceel hipotlamo enlahipfisis. Lasclulasdel hipotlamo asimismo sonsensi-
blesanivelesdeciertas hormonas sexuales queestn enlasangre. Como respuesta
aestadiversidad deestmulos, el hipotlamo produce una seriedejactores libera-
dores, adems de factores inhibidores, que setransportan al lbulo anterior de
la hipfisis por un conjunto devasos sanguneos especializados llamado sistema
portal hipotalamohipofisario, que la estimulan a secretar sus hormonas.
Lahipfisis representa el segundo nivel decontrol hormonal (Fig. 2-9). Al esti-
mularse mediante los factores liberadores hipotalmicos y al responder directa-
mentealashormonas sexualesenlasangre, lahipfisis anterior liberadoshormonas
gonadotrpicas: lahormona luteinizante (LH) ylaFSH, glucoprotenas con pesos
moleculares aproximados de28000y35000, respectivamente. Un solo factor de-
capeptdico deliberacin del hipotlamo promueve laliberacin delas LH yFSH
apartir delahipfisis. Laprolactina esotra hormona hipofisaria queantiguamente
reciba el nombre de hormona luteotrpica. Setrata de una protena cuyo peso
molecular esdeunos 30000yqueparticipa engran diversidad defunciones regula-
doras que con frecuencia difieren en gran medida entre los vertebrados.
_-_-====----------~-=---=----------------
Hormona Naturaleza quimica
CUADRO 2-1. Principales hormonas participantes en la reproduccin mamfera
Funcin
Hipotlamo
Hormona liberadora de Decapptido
gonadotropina (GnRH o
lHRH)
Factor inhibidor de prolactina Dopamina
Estimula la liberacin de lH y
FSH por la hipfisis anterior
Inhibe la liberacin de
prolactina por la hipfisis
anterior
Hormona estimulante del
folculo (FSH)
Hormona luteinizante (lH)
Hipfisis anterior
Glucoprotena (subunidades alfa Estimula las clulas foliculares
y beta) MW - 35 000 a producir estrgeno
Glucoprotena (subunidades alfa
y beta) MW - 28 000
Prolactina Polipptido de cadena nica
Hipfisis posterior
Oligopptido (MW -1100) Oxitocina
Ovario
Estrgenos Esteroide
Progesterona Esteroide
Testosterona Esteroide
Testculos
Testosterona Esteroide
Placenta
Estrgenos
Progesterona
Gonadotropina corinica
humana (HCG)
Esteroide
Esteroide
Glucoprotena (MW - 30 000)
Lactgeno placentario humano Polipptido (MW - 20000)
arn: estimula las clulas
de leyding a secretar
testosterona. Mujer:
estimula las clulas
foliculares y cuerpo amarillo
a producir progesterona.
Promocin de la lactancia
Estimula la glndula mamaria a
expeler leche
Efectos mltiples sobre el
aparato reproductor, senos,
grasa del cuerpo, crecimiento
seo, etc.
aparato reproductor,
desarrollo de los senos
Precursor para la biosntesis de
estrgeno. Induce la atresia
folicular
aparato reproductor,
crecimiento de cabello y
otras caractersticas sexuales
secundarias
Como los estrgenos ovricos
Como la progesterona ovrica
Conserva la actividad del
cuerpo amarillo durante
el embarazo
Promueve el desarrollo de las
mamas y el cuerpo amarillo
durante el embarazo
I
I
I
I
I
/ //
I /
I /
I /
r /
1 I
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I I
I I
\ I
\1
11
I
\
\
Estr geno, \
inhibina \
\
,
,
,
,
"
"
Glndula mamar ia
pr epar ada por la
actividad del
estr geno y la
pr ogester ona
dur ante el
embar azo
Epitelio
vaginal
Mucosa uter ina
Fig. 2-9. Diagr ama que indica la inter accin de las hor monas del lbulo anter ior de la hipfisis
el ovar io con r especto a los fenmenos pr incipales que ocur r en dur ante el ciclo r epr oductivo humano.
Los ovarios representan el tercer nivel decontrol hormonal, el cual asume los
tejidos placentarios durante el embarazo. Los folculos ovricos producen lashor-
monas esteroides, 173-estradiol' y progesterona, secretadas en la sangre.
El cuarto nivel deregulacin hormonal implica losefectos delashormonas este-
roides ovricas sobre una extensa variedad detejidos entodo el cuerpo (Fig. 2-9).
El estrgeno circulatorio, por ejemplo, queseproduce enel folculo preovulatorio,
'.'- -- --- -
El estradiol es uno de los miembros de lafamilia de esteroides estrechamente relacionados que
_=mpean actividades fisiolgicas similares yqueseconocen enconjunto como estrgenos. Laestro-
- y el estriol tambin son estrgenos naturales. Por su conducta semejante, el producto sinttico,
etilestilbestrol, se incluye en la misma categora.
acta sobre los tejidos reproductivos con objeto de prepararlos para el transporte
degametos. Como sever con mayor detalle en el captulo 3, tambin seincrementa
laformacin decilios en el epitelio de las trompas deFalopio yaumenta laactividad
del msculo liso de la trompa. La mucosa uterina inicia la estructuracin que se.
requiere para la implantacin del huevo fecundado, y el moco cervical se torna
menos vi coso para facilitar el paso de los espermatozoides de la vagina hacia el
tero. Despus de la ovulacin, la progesterona (producto del cuerpo amarillo o
lteo) prepara an ms al endornetrio para recibir el embrin implantado. Adems
de los tejidos reproductivos primarios, los senos se tornan altamente receptivos
al estrgeno y la progesterona (Cap. 10), en tanto que otros caracteres sexuales
secundarios, como el de la distribucin de grasa corporal, e deben a los efectos
de las hormonas esteroides ovricas.
Durante el ciclo sexual normal, justo antes de empezar el periodo menstrual,
comienza a madurar un grupo de folculos ovricos (Figs. 3-19 y 3-20), tal vez
debido a un ligero incremento en la FSH de la hipfisis. Como resultado de la
estimulacin de las FSH y LH, los folculos comienzan aproducir estradiol, y por
ltimo, todos ellos, excepto uno, sedegeneran. El folculo preovrico restante se-
creta cantidades crecientes de estradiol en la fase folicular tarda del ciclo (Fig.
2-10), Este drstico aumento de estradiol acta sobre el eje hipotalarnohipofisario,
y un da despus de presentarse la concentracin pico en la sangre, la hipfisis,
quiz como respuesta al incremento del factor liberador hipotalmico, despliega
un pico agudo de LH yFSH (Fig. 2-10). El pico de laLH esel estmulo final requeri-
do para la maduracin folicular y a continuacin se lleva a cabo la ovulacin en
las siguientes 24 horas. Aun antes de la ovulacin, la produccin de estrgeno
por parte de los folculos decae, tal vez debido alamenor sensibilidad de las clulas
foliculares hacia las gonadotropinas.
Poco tiempo- despus de la ovulacin, sobre todo mediante la actividad de la
LH, los restos del folculo setransforman en el cuerpo amarillo (Fig. 3-19), el cual
acontinuacin secreta poco apoco estradiol yen especial progesterona, en cantida-
des crecientes, hasta que su concentracin enla sangre alcanza un pico elevado
que se presenta a mediados de la fase lutenica (Fig. 2-10). Gracias a la mayor
produccin de hormonas esteroides y una sustancia inhibidora, inhibina, la cual
es liberada err la sangre, la inhibicin de retroalimentacin que acta sobre el eje
hipotalamohipofisario disminuye en gran medida las concentraciones de gonado-
tropinas, FSH y LH. Despus, en la fase lutenica, el cuerpo amarillo comienza
a retrogradarse. Si bien no seha definido por completo la causa de esta regresin,
existen datos de una alteracin en la sensibilidad de las clulas lutenicas ante la
LH. Con laregresin del cuerpo amarillo decae la produccin ovrica de estradiol
y progesterona, estimulando as la produccin del factor liberador por parte del
hipotlamo, y la de gonadotropinas por parte de la hipfisis. El ciclo entonces
sereanuda, poco antes del inicio de la siguiente menstruacin, con la estimulacin
gonadotrpica de una nueva cosecha de folculos.
En prrafos anteriores sehizo nfasis en las interacciones que llevan a cabo las
ormd~s.de la hipfisis y de los ovarios. Sin embargo, esta interaccin carecera
e sent~ sin los efectos que producen los esteroides ovricos en otras regiones
\
_-=-__ -Z__ -=-_=== _
-~~~~-~~~~~-
Temperatura basal
del cuerpo
98.3 ]
'F 97.9 J ---
97.5
20j '
]
c: n 10
c:
O
l: : 1
Progesterona
/-
1 7 {3Estradiol
50
E
40
'i i i
ro
.~ 30
15
(;
20
<Il
Q)
'O
ro
'O
10
e
:::J
O
Da del ciclo
~ LH
t \
, '
, '
, '
, "
, ,
' 1 "._:; .
FSH
10 5 15 20 25 5
Flujo
menstrual
Fase
secretoria
Fig. 2-10. Diagrama de las curvas representativas de la membrana corporal basal y las concen-
ciones diarias de suero de las gonadotropinas y los estero ides sexuales con relacin al ciclo
enstrual humano normal de 28 das. (Redibujado de A. R. Midgley y col., 1 973, en Hafez y Evans,
irs., Human Reproduction, Harper & Row, Nueva York.)
del aparato reproductor femeni no. Durante lafaseproli ferati va del ci clo, el estr-
geno (estradi ol) eslahormona domi nante, ysuacti vi dad enlosteji dos reproducti -
os parece haberse di seado para faci li tar el transporte degametos, as como la
fecundaci n. En las trompas de Falopi o, el estrgeno ocasi ona un aumento en
el nmero declulas ci li adas y en los cambi os que sepresentan en el lqui do del
ovi ducto. El rpi do descenso en las concentraci ones de estradi ol, justo antes de
laovulaci n, esti mula mayor movi li dad enel msculo li so delatrompa, adaptaci n
que permi te que el huevo ovulado sea transportado con mayor veloci dad.
El estradiol e: timula lamitosis de las clulas del endometrio en el tero ytambin
promueve el recimiento temprano de las glndulas uterinas. En caso de que hubie-
ra fecundacin, la progesterona prepara al revestimiento del tero, tornndolo
ms e pe o yricamente vascularizado para laimplantacin del embrin. Unos siete
das despus de la ovulacin, lapso en el cual ocurre la implantacin despus de
la fecundacin del vulo, el endometrio uterino est en su fase ms receptiva.
Tambin el cuello uterino y la vagina responden ala estimulacin de las hormo-
nas, y cerca del momento en que habr de ocurrir la ovulacin, el pH de la parte
superior de la vagina aumenta su concentracin normalmente baja a un nivel que
en cierto modo resulta menos hostil a los espermatozoides. Durante gran parte
del ciclo menstrual, las propiedades fsicas del moco cervical actan como una
barrera al paso de los espermatozoides. No obstante, al momento de la ovulacin,
disminuye laviscosidad del moco para permitir el paso de mayor cantidad deesper-
matozoides a travs del cuello uterino.
Si el huevo ovulado se fecunda, se desencadena una nueva serie de fenmenos
hormonales, de los cuales el de principal inters en este punto es la preservacin
continua del cuerpo amarillo por parte de la gonadotropina corinica, hormona
gonadotrpica que producen los tejidos extraembrionarios relacionados con el em-
brin. As, el cuerpo amarillo contina creciendo y secretando cantidades conside-
rables de estrgeno y progesterona, las cuales no slo ayudarn a conservar el
revestimiento uterino, sino que adems comenzarn a preparar a la glndula ma-
maria para lasecrecin eventual de leche. En lapgina 284 seexponen ms detalles
de las relaciones hormonales durante el embarazo.
Regulacin hormonal de la reproduccin masculina
La hormona princi pal comprendida en lapreparacin sexual masculina esla testos-
terona, hormona esteroide que producen y secretan las clulas intersticiales (o de
Leydig), las cuales se ubican en pequeos grupos entre los tbulos seminferos de
los testculos. Fawcett (1985, p. 832) ha estimado que la clula de Leydig promedio
puede producir en el caso del ratn unas 10 000 molculas de testosterona por
segundo. Esta produce un efecto local al conservar la espermatognesis, aunque
tambin se secreta en la sangre, a travs de la cual acta sobre algunos rganos
especficos, como el cerebro. En muchos tejidos blanco, esta hormona adquiere
localmente una forma ms potente, la de dihidrotestosterona.
La LH de la gonadotropina hipofisaria, que en el varn recibe comnmente
el nombre de hormona estimulante de clulas intersticiales (lCSH), incita a este
tipo de clulas aproducir testosterona. La LH es secretada por lahipfisis humana
en pulsos de unos 90 intervalos por minuto, y por lo general durante la noche.
Las clulas deSertoli del interior de los tbulos seminferos (Fig. 3-9) toman espec-
icarnente a la FSH, si bien se desconoce la funcin de esta hormona durante la
esperrnatognesis. Bajo la influencia de la FSH, las clulas de Sertoli sintetizan
une proteina fijadora de andrgeno que contribuye aconservar una concentracin
elevada-de testosterona en el tbulo seminfero. A nivel del cuerpo, la testosterona
a sobre el eje hipotalamohipofisario para preservar un equilibrio constante
entre los niveles de sangre de esta hormona y la produccin y liberacin de las
gonadotropinas de lahipfisis, las FSH y LH (ICSH). La regulacin de estas gona-
dotropinas est mediada por los efectos de la inhibina, sustancia que producen
las clulas de Sertoli en los testculos y que liberan en el torrente sanguneo. As
como sucede en el caso femenino, la inhibina reduce la actividad del eje hipotala-
mohipofisario. En general, las concentraciones elevadas de testosterona guardan
relacin con una secrecin disminuida de gonadotropinas, en tanto que las cifras
bajas estimulan la secrecin de gonadotropinas.
CAPITULO 3
GAMETOGENESIS
y FECUNDACION
GAMETOGENESIS
Lasclulas reproductoras queseunen para iniciar el desarrollo deunnuevo indivi-
duo reciben el nombre degametos, trmino quecomprende los vulos ylosesper-
matozoides. Los propios gametos ylasclulas quelosoriginan constituyen elplas-
ma germinal del individuo, entanto quelasdemsclulasdel cuerpoquenoparticipan
directamente enlaproduccin delos gametos seconocen como clulas somticas
o, enconjunto, somatoplasma. Desdelaperspectiva filogentica, el plasma germi-
nal es de capital importancia en tanto conforma la dotacin hereditaria que se
transmite d,elageneracin deunaespeciealasiguiente(Fig. 1-2). Por ello, el soma-
toplasma puedeconsiderarsecomoel material queprotegeynutreal plasmagerminal.
Enespeciescomo ladelasranas yalgunas formas deinvertebrados puederecono-
cerse el plasma germinal en fases muy tempranas de la vida del individuo -en
ocasiones como regiones enel polo vegetal del citoplasma del cigoto ocomo clulas
especficas durante las etapas de segmentacin. Cuando seradia esta regin del
embrin derana conluzultravioleta, el embrin sedesarrolla sinclulas germinales
(Smith, 1966). Aunque todava no sedemuestra la segregacin temprana de un
plasma germinal fcilmente reconocible en la mayor parte de los embriones de
vertebrados, las clulas de la lnea germinal s son obvias en las etapas tardas.
Gametognesis (oognesis en la hembra yespermatognesis en el macho) es un
trmino amplio queserefierealosprocesos mediante loscuales el plasma germinal
setransforma enclulas sexuales altamente especializadas quetienen lacapacidad
de unirse durante la fecundacin para producir un nuevo ser. Sesuele dividir a
lagametognesis encuatro fases principales: 1)el origen delas clulas germinales
76
Gametognesis y fecundacin 77
y su migracin a las gnadas; 2) la multiplicacin de las clulas germinales en las
gnadas a travs del proceso de la mitosis; 3) la divisin a la mitad del nmero
decromosomas, y4) las etapas finales de maduracin ydiferenciacin de los game-
tos en espermatozoides u vulos capaces de fecundar o ser fecundados.
Origen de las clulas germinales primordiales y su migracin
a las gnadas
Aun cuando sedesconoce gran parte de la historia temprana del plasma germinal,
las clulas destinadas aoriginar los gametos son reconocibles durante etapas asom-
brosamente tempranas del desarrollo. En especies con plasmas gerrninalesrecono-
cibles ~p. ej.cIos anfibios anuros), es posible rastrear de manera continua el linaje
de desarrollo de este material a partir de una zona circunscrita en el huevo que
no ha sido fecundado, a travs de la segmentacin (en clulas prximas al polo
vegetal), ypor ltimo al interior de ciertas clulas del endodermo durante lagastru-
lacin (Fig. 3-1). Si bien an no esfactible identificar el plasma germinal en embrio-
nes tempranos de amniotas (aves, reptiles y mamferos), en todas estas formas,
as como entre los anuros, sepueden identificar los gametos futuros entre las clulas
A
B
Clulas germinales
primordiales
Clulas germinales
!primordiales
e
Fig. 3-1. El origen de las clulas germinales primordiales en (A) anfibios anuros (B) un embrin
de pollo (segn Swift) y (e) un embrin humano de 16 somitas (segn ~itschi).
78 Gametognesis y fecundacin
A
B
Fig. 3-2. Clulas germinales primordiales en embriones humanos. (Segn Witschi, 1948, Carne-
gie Cont, lo emb., vol. 32). A, Corte transversal en un embrin humano de 16 somitas (Coleccin
Carnegie, 8005), que muestra clulas primordiales germinales (las clulas grandes se indican con
flechas) en la esplacnopleura del saco vitelino. B, Clula germinal primordial (clula grande con
citoplasma transparente) en la esplacnopleura en el ngulo celmico de un embrin de 32 somitas
(Coleccin Carnegie, 7889; fotomicrografa x 1 100).
endodrmicas de la yema o el saco vitelino. Estas clulas, que reciben el nombre
de clulas germinales primordiales, pueden reconocerse por su gran tamao y cito-
plasma trasparente (Fig. 3-2), as como por ciertas caractersticas histoqumicas,
como un elevado ndice de actividad por parte de la fosfatasa alcalina en los mam-
feros y un alto contenido de glucgeno entre las aves.
Las investigaciones de aos recientes han mostrado que aun cuando las clulas
germinales primordiales por lo general serelacionan con el endodermo, no seorigi-
nan necesariamente dentro de su capa germinal. Seha observado que en los urode-
, los (salamandras), las clulas germinales primordiales provienen de las clulas me-
sodrmicas, que se constituyen por la influencia inductora de la masa vitelina
endodrmica ventral en la superficie suprayacente de las clulas. Este modo de
origen resulta tan sorprendentemente distinto del de los anuros yvertebrados supe-
riores, que Nieuwkoop y Sutasurya (1976) lo utilizaron como principio bsico
para proponer que el origen filogentico delos urodelos esdistinto al delos anfibios
anuros. En fechas ms recientes, Eyal-Giladi y colaboradores (1981) presentaron
pruebas que sugieren que antes de ingresar a la capa germinal endodrmica, las
clulas germinales primordiales de las aves tal vez se originen en la capa germinal
ectodrmica (epiblasto). Si bien existen algunos indicios deque los mamferos quiz
sigan el mismo patrn, la pregunta contina sin respuesta (Eddy y col., 1981).
Queda an mucho por aprender sobre la forma en que las clulas germinales
seoriginan y relacionan con las clulas germinales y somticas; si bien se sabe que
entre los animales que exhiben un plasma germinal reconocible (muchos inverte-
brados y anfibios anuros), slo setransforman en clulas germinales aquellas que
contienen plasma germinal. No obstante, los trasplantes de clulas germinales pri-
zaordialesdeXenopus ablstulas tempranas han mostrado quelasclulas contene-
coras de plasma germinal no estn irrevocablemente determinadas a ser clu-
c-e germinales, en tanto tienen la capacidad de diferenciarse en algunos tipos de
.:ulas provenientes delas tres capas germinales (Wylieycol., 1985). Aunque no
y pruebas deque las clulas somticas setransformen en clulas germinales en
_'-enopus, sehamostrado quelasclulas deunteratocarcinoma (untumor derivado
~ lulas germinales malignas), tienen lacapacidad deconstituir clulas germina-
- funcionales (Gardner, 1978; Mintz e Illmensee, 1975).
Cuando las clulas germinales primordiales al principio sereconocen en el ern-
.::rin, las gnadas estn pobremente desarrolladas o ni siquiera han comenzado
adesarrollarse (Fig. 3-1). Existen tres medios para saber si estas clulas enunmo-
:::::entodado colonizan a las gnadas. Uno de los primeros mtodos consista en
enirpar laregin endodrmica enlaqueseencontraban lasclulas germinales pri-
ordiales. Cuando Willier (1937) lopuso enprctica enpollos, seformaron gna-
::.as singametos. Lasegunda manera estribaba enrastrear el curso deestas clulas
:mante el desarrollo, locual erafactible por sugran tamao ycaractersticas histo-
.;llimicas distintivas. Los estudios realizados en un cierto nmero deespecies de-
zaostraron que las clulas emigraban a los primordios de las gnadas. El tercer
zatodo empleaba una cepa mutante de ratones estriles. Mintz y Russell (1957)
zrostraron mediante tincin histoqumica para la fosfatasa alcalina que tan slo
-~presentaban algunas cuantas clulas germinales primordiales en los embriones
:::::utantes.
Por quseoriginan lasclulasgerminales primordiales tan lejosdelasgnadas?
:Cmo llegan a ellas? A pesar de que an no setiene respuesta para la primera
:;:;:regunta, cabe notar que las clulas germinales no son las nicas que derivan su
origenapartir delaregin del saco vitelina, yaquedurante el desarrollo posterior
s primeros glbulos rojos tambin provienen de l. Sin embargo, a diferencia
::elas clulas germinales, estos glbulos surgen del mesodermo del saco vitelina
no del endodermo.
Enlaactualidad sehadeterminado satisfactoriamente quelasclulas germinales
?rirnordiales toman doscaminos principales por loscuales sedirigen alasgnadas.
Enlos mamferos, estas clulas adquieren la capacidad de desplazarse mediante
movimientos ameboides yemigrar demanera ascendente por el mesenterio dorsal
?ara llegar alas gnadas. Las aves, por su parte, siguen una ruta diferente (Fig. e
."3). Casi en el momento en que seconstituye la circulacin ms temprana del
sacovitelina, lasclulasgerminales primordiales seabren paso atravs delosvasos
sanguneos para dejarse llevar pasivamente al cuerpo. En un principio las clulas
sedistribuyen al azar por todo el cuerpo, pero enperiodos tardos, lamayor parte
de ellas selocaliza en las gnadas. Existen algunas pruebas experimentales que
indican lapresencia deatrayentes qumicos queestimulan lamigracin delasclu-
lasgerminales primordiales alas gnadas; sinembargo, serequieren todava ms
investigaciones para confirmar estos resultados. Asimismo hay datos de que la
orientacin y las caractersticas fsicas del sustrato ayudan a guiar a las clulas
germinales delos anfibios ymamferos ensurumbo hacia lasgnadas. Al parecer,
lasclulasgerminales primordiales quesedepositan enregiones externas alasgna-
Fig. 33. Migracin de las clulas germinales primordiales (crculos oscuros) en el embrin de
ave. Cuatro horas: no se muestran clulas germinales primordiales antes que se constituya la
lnea primitiva; 18y23 horas: acumulacin pasiva de clulas germinales primordiales en la crecien-
te germinal anterior; 33 horas: penetracin activa en la sangre e ingreso en la circulacin; 48 horas:
circulacin de las clulas germinales y su egreso temprano a los primordios de las gnadas: 72
horas: colonizacin de las gnadas. (Dibujo rediseado de Nieuwkoop y Sutasurya, 1979.)
das mueren, aunque sepiensa que las clulas germinales que seencuentran fuera
delugar en ocasiones setransforman en teratomas, extraos tumores que suelen
contener mezclas revueltas detejidos altamente diferenciados y que algunas veces
incluyen cabellos y dientes.
Estudios minuciosos cuantitativos hanmostrado queel nmero declulasgermi-
nales primordiales aumentan durante sumigracin alasgnadas. En el ratn, por
ejemplo, el nmero seincrementa de menos de 100acasi 5 000 durante este periodo
intz y Russell, 1957). No obstante, el aumento de mayor importancia ocurre
en las gnadas.
Proliferacin de las clulas germinales por mitosis
En un inicio las gnadas embrionarias estn pobladas por un nmero relativamente
pequeo de clulas germinales primordiales migratorias. Sin embargo, una vez que
se han asentado en las gnadas, estas clulas entran en una fase proliferativa en
la que su nmero aumenta en gran medida por la mitosis. (Para una revisin de
la mitosis, vase la figura 3-4.) Las clulas germinales femeninas mitticamente
activas reciben el nombre de oogonios, en tanto que las masculinas sellaman esper-
matogonios.
El patrn de actividad mittica de las clulas germinales en las gnadas difiere
entre macho y hembra. En la mujer, la intensa actividad mittica que se lleva a
cabo entre el segundo y quinto mes de embarazo incrementa la poblacin de oogo-
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Fig. 3-4. Resumen esquemtico de las etapas principales de la divisin celular mlttca.
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5 Nacimiento
Meses posteriores a la
concepcin
Aos posteriores al
nacimiento
10 20 40
Fig. 3-5. Cambios en la poblacin de clulas germinales en el ovario humano respecto al aumen-
to de edad. (Modificado de T. G. Baker, 1970. E n Austin y Short, dirs., Reproduction in Mammals,
vol. 1, p. 20.)
niosdeunos cuantos milesa unos sietemillones (Fig. 3-5); a continuacin sereduce
drsticamenteel nmero deoocitos, debido sobretodo a la atresia (degeneracin
natural), ypara el sptimo mes, la mayor partedeelloshabr ingresado a la profase
desuprimera divisinmeitica, finalizando as la faseproliferativa delagametog-
nesis femenina. A diferencia del ser humano, las poblaciones deoogonios en la
mayor partedelos vertebrados inferiores son capaces dedividirsea lo largo del
ciclo reproductivo. Cuando seconsidera quealgunos peces liberan varios cientos
demilesdehuevos enundesove, resulta comprensiblela necesidad dela capacidad
mittica delos oogonios en el transcurso dela vida.
Las clulas germinales masculinas siguen un patrn deproliferacin mittica
muydiferenteal delahembra. La mitosis seinicia enlagnada del embrin tempra-
no, pero por lo comn persistedurantetodo el transcurso devida del macho y
los testculos siempreretienen una poblacin germinadora deespermatogonios.
Cuando seinicia la pubertad, sepresentan olas peridicas demitosis queproducen
subpoblaciones deespermatocito squeentran a la meiosis engrupos sincronizados.
Esta actividad perdura en tanto el macho posea la capacidad dereproduccin.
Meiosis
Uno delos requerimientos fundamentales dela reproduccin sexual en cualquier
especieesconservar el nmero normal decromosomas deuna generacin a otra.
Esto se logra mediante la disminucin de la condicin diploide (2n) a la haploide
In), en el complemento cromosmico de los gametos durante la gametognesis.
Dado que desde el punto de vista gentico, la meiosis es esencialmente la misma
en los gametos masculinos y femeninos, se abordar primero el proceso general
delameiosis y despus seexpondrn sus caractersticas especficas segn el gnero.
Una condicin importante para que selleve acabo lameiosis esque cada gameto
haploide adquiera un conjunto completo de cromosomas. Aun as, la meiosis re-
presenta la fase en la que secongregan combinaciones nuevas de material gentico,
algunas provenientes de los genes materns y otras de los genes paternos. (Recur-
ese que cada clula del cuerpo contiene un conjunto de cromosomas del lado
materno y otro ms del lado paterno.) La recombinacin gentica se debe a: 1)
ladistribucin contingente decromosomas maternos opaternos en las clulas hijas,
y2) el intercambio por sobrecruzamiento de porciones de cromosomas homlogos
urante fases especficas de la meiosis.
En trminos rigurosos, la meiosis no implica la sntesis de DNA, pues cuando
comienza la profase meitica ya ha ocurrido lareplicacin de DNA en el gameto.
_ o obstante, an se sabe poco acerca de la seal que indica a la clula que haga
el cambio de una divisin mittica comn auna divisin meitica. La clula puede
por consiguiente describirse al inicio de la meiosis como 2n, 4c; es decir, contiene
el nmero normal de cromosomas (2n), pero debido a la replicacin, su contenido
eDNA (4c) es ya el doble de la cantidad normal (2c). La meiosis tiene por objeto
producir gametos haploides con un complemento de material gentico In, le, La
isminucin del material gentico implica dos divisiones de maduracin en las que
no se presenta una nueva sntesis de DNA. De la primera divisin meitica, que
en ocasiones recibe el nombre de divisin reductiva, resulta la formacin de dos
lulas hijas genticamente dismiles (in, 2c). En la segunda divisin meitica (o
ecuacional), cada una de las dos clulas anteriores produce dos clulas hijas genti-
amente idnticas (in, l c) que ya pueden llamarse propiamente gametos. A dife-
encia de la mitosis, la que por lo comn semide en trminos de minutos u horas,
la meiosis puede prolongarse de varios das hasta tanto tiempo como 45 a 50 aos
en la mujer).
Primera divisin meitica. Laprofese 1es una etapa que por lo general sedivide
en cinco subetapas: leptotena, cigotena, paquitena, diplotena y diacinesis. Muchos
delos fenmenos de importancia en el desarrollo general como en el gentico trans-
curren durante la primera profase meitica.
En la etapa leptotena (Fig, 3-6), los cromosomas aparecen como filamentos lar-
gos y finos que apenas comienzan a enrollarse. Cada filamento cromosmico en
realidad consta de dos cromtides hermanas idnticas, unidas en algn punto de
su extensin por un centrmero comn. Una de las cromtides es un filamento
original de DNA, en tanto que la otra recin sesintetiz antes del inicio de la meio-
sisoPor lo general no es posible resolver cromtides individuales mediante micros-
copia de luz estndar.
La etapa cigotena es el periodo durante el cual los cromosomas homlogos apa-
reados (un grupo decromtides hermanas del lado materno yotro del lado paterno)
se unen y se yuxtaponen estrechamente en toda su extensin, punto por punto.
Etapa leptotena
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B Metafase 1
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Diacinesis
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E Profase 1I
e Anafase I D Telofase 1
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--'--~--::~':~--;~'~ ~_/'~
F Metafase II
G Anafase 1I H Telotase ]!
Fig. 3-6. Resumen esquemtico de las etapas principales de la meiosis en una clula germinal
generalizada.
Gametognesis y fecundaci~'-. 85
Esta precisa alineacin recibe el nombre de sinapsis, y constituye la base para el
::: brecruzamiento de material gentico que ocurre despus en la primera divisin
eitica. La zona de contacto entre los cromosomas apareados cuenta con una
zltraestructura especializada que seconoce como el complejo sinaptinmico (M0-
ses, 1968), el cual participa en el apareamiento y, tal vez, en el sobrecruzamiento
;::elos cromosomas.
Durante la fase temprana de la etapa paquitena se ha completado la sinapsis;
.lO pares d:cromosomas alineados ahora sellaman colectivamente bivalentes. Una
:aracterstica prominente de esta etapa es el engrosamiento de los cromosomas
;::ebido a su enrollamiento. Al interior de un solo cromosoma, las cromtides her-
zaanas parecen estar unidas por un centrmero.
Ms tarde en lapaquitena y durante laetapa diplotena setraslapan los segmentos
:'e los cromosomas entre s, y las regiones en las que entran en contacto reciben
~ nombre de quiasmas, las cuales se piensa que son sitios en donde se rompen
porciones homlogas de los filamentos cromosmicos paternos y maternos y
:: las que se intercambian mutuamente durante el proceso de sobrecruzamiento.
Esta es una de las dos formas principales para la produccin de las diferencias
genticas entre los individuos. Una caracterstica preponderante de la etapa diplo-
tena es la separacin de los dos cromosomas apareados mediante la divisin qu
se lleva a cabo a lo largo del complejo sinaptinmico. La divisin transcurre en
1 mayor parte de la extensin del cromosoma, y no en los quiasmas, los cuales
a se han definido de manera satisfactoria. Las cromtides individuales tambin
ueden distinguirse con claridad para entonces y sepuede observar que cada biva-
ente consta de cuatro cromtides distintas que ya en este punto recibe el nombre
dettrada. Durante esta etapa sedesenrollan ligeramente las cromtides y, al menos
enlos huevos, selleva acabo lasntesis del RNA en las regiones dedesenrollamiento.
En la etapa de diacinesis los cromosomas se acortan an ms, pues contina
divisin de los pares de cromosomas. El desplazamiento del quiasma hacia los
extremos de los cromosomas es un componente caracterstico del proceso de divi-
sin, el cual se conoce como terminalizacin. El ncleo desaparece en este punto,
se rompe la membrana nuclear, y las fibras del huso comienzan a manifestarse.
Metafase 1. Las ttradas se alinean sobre la placa ecuatorial, de modo que por
cada par de cromosomas, el cromosoma materno seencuentra aun lado de laplaca
ecuatorial, y el paterno, del otro. El alineamiento de los cromosomas se realiza
etal forma que sepresenta una distribucin aleatoria de los cromosomas de deri-
vaciones materna y paterna ambos flancos de la placa. El ordenamiento contin-
gente por el que pasan los cromosomas es el fundamento para la segunda ley de
Mendel y constituye el medio ms importante para asegurar la presencia de las
diferencias genticas entre los individuos. Con base en los 23 pares de cromosomas
en el ser humano, esto significa que hay 2
23
(8, 337, 408) combinaciones posibles
diferentes en las clulas haploides a partir de la ordenacin al azar de un solo cro-
mosoma.
Anafase I. En este punto los pares de cromosomas individuales comienzan a
desplazarse hacia los polos opuestos del huso, aunque las cromtides hermanas
de cada cromosoma continan unidas por el centrmero. Conforme los crornoso-
{
mas homlogos seseparan entres, losquiasmas, queyaseencuentran enlosextre-
mos de los cromosomas, seseparan, yfinaliza el sobrecruzamiento. Los sucesos
realizados enlaanafase I soncruciales para comprender ladiferencia entre lapri-
meradivisinmeiticayunadivisinmittica comn. Unavezqueloscromosomas
estn alineados sobre laplaca dela metafase en la mitosis, el centrmero que se
hallaentrelascromtides hermanas decada cromosoma sedivide, y unacromtide
sedirigeacada polo del huso mittico, dando como resultado clulas hijas genti-
camente iguales. Enlameiosis, por otra parte, lamigracin del cromosoma mater-
no total hacia un polo, yel del paterno hacia el polo opuesto, da como resultado
clulas hijas genticamente desiguales.
Telofase 1einterfase. Durante la telofase 1, los dos ncleos hijos se separan
entre s y puede reconstituirse la membrana nuclear. Aunque cada ncleo ahora
contiene el nmero haploide decromosomas (ln), cada uno de los cromosomas
todava contiene doscromtides hermanas (2c)unidas por uncentrmero. Entanto
loscromosomas individuales delasclulas hijas haploides anestn enreplicacin,
no habr nueva replicacin del DNA cromosmico durante la interfase entre la
divisin meitica I y la segunda divisin meitica.
Segunda divisin meitica. Si no fuese porque la clula es haploide (In, 2c),
la segunda divisin meitica secomportara en gran medida como una divisin
rnittica comn. Despus de una profase atpica, durante la metafase 11el huso
mittico sedispone yloscromosomas sealinean sobre laplaca ecuatorial. Enton-
ces, adiferencia delaprimera divisinmeitica y demanera semejante aladivisin
mittica, sedivideel centrmero queuna alacromtide hermana decada cromo-
soma, permitiendo as laseparacin mutua delas cromtides durante laanafase.
Al terminar latelofase 11,secompleta lameiosisylaclulagerminal diploide origi-
nal ha producido cuatro clulas hijas haploides (ln, lc). En el caso del macho,
lascuatro clulas haploides procedern aconstituir gametos viables. Sinembargo,
debido aladivisin meitica asimtrica quesellevaacabo enlahembra, lameiosis
nicamente producir unvulo viable, pues lastres clulas hijas restantes tendrn
un tamao mucho ms reducido yslo fungirn al parecer como cuerpos polares
desprovistos de funcin.
Poliploidia
Son pocas las instancias en las que los animales pueden iniciar su desarrollo con
cromosomas en mltiplos del nmero normal correspondiente a su especie. Esta
condicin recibe el nombre depoliploidia, ycuando sucede, el individuo puede,
por ejemplo, exhibir tres veces el nmero haploide de cromosomas en lugar del
nmero diploide usual queresulta delaunin dedos gametos haploides. Lacondi-
cin triploide no siempre sepresenta de la misma forma, aunque sesabe que se
establece cuando no llegaa ocurrir la divisin reductiva en el oocito que est en
proceso demaduracin. Las instancias detriploidia que sehan estudiado ms mi-
nuciosamente sonlasquesuceden enanfibios. Laexposicin dehuevos detritones
o salamandras atemperaturas extremas o presiones deOa3C durante 20horas
o a37C por tan slo 10minutos puede inhibir larealizacin dela segunda divisin
meitica. Una vez que se completa la fecundacin en dicho vulo, la unin de
su nmero cromosmico diploide no disminuido con el nmero normal de esper-
matozoides, trae como consecuencia una triploidia.
La poliploidia no siempre implica una triploidia, aun cuando es el tipo ms co-
mn. La cuenta total, aunque con menor frecuencia, tambin puede ser un tetra-
ploide; esdecir, cuatro veces el nmero haploide correspondiente alaespecie. Pare-
ceprobable que esta condicin surja durante las etapas tempranas delasegmentacin
como resultado deuna divisin cromosmica alaque no ha sucedido lareorganiza-
cin de los ncleos hijos y la divisin citoplsmica. No obstante, la poliploidia
puede ocurrir cuando las clulas que cuentan con un nmero decromosomas mayor
que el normal son proporcionalmente ms grandes en tamao que lo general. Sin
embargo, resulta sorprendente que el tamao del cuerpo del embrin permanezca
esencialmente normal. Esto sedebe por lo visto al nmero reducido de sus grandes
clulas.
Comparacin entre la espermatognesis y la oognesis
A pesar delas similitudes desus aspectos genticos, existen diferencias prominentes
al compararse la esperrnatognesis y la oognesis. Las figuras 3-7 y 3-8 resumen
algunos puntos paralelos entre ambos procesos yen esta seccin sedestacarn algu-
nas de las principales diferencias entre la espermatognesis y la oognesis humana.
A diferencia delos espermatogonios, cada uno de los cuales origina cuatro esper-
matozoides funcionales como consecuencia delas dos divisiones meiticas, eloogonio
nicamente produce un vulo viable. Despus dela primera divisin meitica, una
clula' queda con la mayor parte del material citoplsmico, en tanto que la otra,
que recibe el nombre deprimer cuerpo polar, permanece con muy poco citoplasma.
El cuerpo polar con. frecuencia se degenera sin tomar parte en la segunda divisin
meitica, durante la cual tambin sepresenta una distribucin desigual de citoplas-
ma entre las clulas hijas, en tanto el vulo retiene la mayor parte, dejando a la
otra clula perderse en el camino como el segundo cuerpo polar.
En la mujer, la primera divisin meitica comienza en el embrin y la meiosis
no se completa sino hasta el inicio de la pubertad o justo antes de la menopausia
a ms tardar. Aunque la espermatognesis no comienza sino hasta la pubertad,
setrata de un proceso que contina durante todo el transcurso de vida del indivi-
duo, pues no sepresentan interrupciones meiticas prolongadas y el proceso total
se completa en algo ms de dos meses.
Durante la oognesis se destacan las interrupciones en el proceso de meiosis.
Si bien existe considerable variacin interespecfica, de manera particular entre
los invertebrados, escomn que el huevo sufra dos perodos deinterrupcin meiti-
ca. La primera ocurre durante la profase 1, sobre todo en la fase diplotena. Esta
pausa por lo visto es necesaria para permitir que el huevo constituya sus reservas
de yema, as como para prepararse para la actividad sinttica que necesariamente
sellevar acabo despus de la fecundacin. La interrupcin diplotena en lameiosis
EDAD HISTOLOGIA
FENOMENOS
MEIOTICOS
COMPLEMENTO
CROMOSOMICO
Despus
de la
pubertad
l N, 2C
Finalizacin de la
replicacin de DNA
Espermatogonio
2N, 4C
Un espermatocito
. primario
Primera divisin
meitica
en proceso
(Primera divisin
meitica
completada)
2N, 4C
Dos espermatocitos
secundarios
Segunda di ... n
meitica en proceso
/ \ Segunda d' . in
, meitica co pletada
espe~~~~~~es'~ ~:;~::
\ . \ \ \ inmaduros
1\
l N, l C
Cuerpos
residuales
(Espermiognesis) 1N, 1C
Gametos haploides 1N, 1C
Cuatro
espermatozoid_:ce_s ....... _:------...
Fig. 3-7. Resumen de los ,principales fenmenos durante la espermatognesis humana.
puede ser muy prolongada -hasta 40aos enalgunos vulos humanos. Los cam-
bios hormonales con frecuencia descontinan la primera pausa meitica, reanu-
dndose la meiosis, slo para cesar de nuevo (con frecuencia en la metafase 11
entre los vertebrados), La segunda pausa se libera al fecundarse o activarse de
modo artificial el vulo. Algunos huevos, como los del erizo de mar, finalizan
la segunda divisin meitica antes deser esparcidos. Aunque no sellevenacabo
en forma simultnea todas las fases de la meiosis durante la espermatognesis,
losperiodos prolongados deinterrupcin meitica no soncomunes. Sinembargo,
por reglageneral, si llegaacompletarse lasegunda divisin meitica deloshuevos
(oespermatozoides) antes delafecundacin, no habr ms sntesis deDNA hasta
que el huevo o espermatozoide seencuentren.
_---_- --
FENOMENOS
MEIOTICOS EN EL
OVULO
HISTOLOGIA
FOLICULAR
COMPLEMENTO
CROMOSOMICO EDAD
Sin folculo C E ) Oogonio
+ (Mitosis)
~ Oocito primario
'(Meiosis en proceso)
+
Periodo fetal 2N, 2C
Antes o despus del
nacimiento
Folculo
primordial
2N, 4C
Folculo
primario.
Oocito primario Despus del nacimiento 2N,4C
(Interrumpido en la etapa
diplotena de la primera
divisin meitica)
Folculo
secundario
Despus de la pubertad Oocito primario 2N, 4C
Primera divisin meitica
completada, inicio de la
segunda divisin
meitica)
Oocito secundario
+
cuerpo polar I
Folculo
terciario
1N,2C
+
(Ovulacin)
Oocito secundario
Ovulo
ovulado '
1N,2C
cuerpo polar I
,- '-(Interrumpido en la metafase 11)
, (Fecundacin - segunda
_ei\ic,.:",.divisin meitica completada)
,'ii-;'!}i~~,)~
Ovulo J ;4 t" ~. " ~ Ovulo fecundado 1N, 1C
fecundado i,~t ',..~) cuerpo + pOlar II + Espermatozoide
Fig. 3-8. Resumen de los principales fenmenos durante la oognesis humana,
La espermatognesis es muy similar entre los vertebrados. E l espermatozoide
maduro es distintivamente ms pequeo que el espermatogonio y es muy mvil.
Debido alas amplias diferencias en lacantidad deyema, as como en los hbitos
reproductivos, losaspectos estructurales delaoognesis difieren demanera consi-
derable. Auncuando losvulos maduros lleganaser msgrandes queiosoogonios,
su relacin con respecto al cuerpo de la madre vara conforme a la cantidad de
yema producida. Durante ladeposicin delayema, los huevos absorben grandes
cantidades delosmateriales queproduce el hgado atravs delasclulas foliculares.
Adems dela posible contribucin que realizan las clulas de Sertoli, las clulas
espermticas que estn en desarrollo reciben poco material formado. Durante el
desarrollo, el huevo almacena fuentes energticas, precursoras de protenas y ci-
dos nucleicos. Por el contrario, las clulas espermticas se deshacen de la mayor
parte de su citoplasma y deben depender del lquido seminal como abastecedor
de energia. En anticipacin de futuros requerimientos, el huevo produce yalmace-
na mucho RNA, en tanto que en las etapas tardas de la esperrnatognesis, hay
poca o ninguna sntesis de R A.
ESPERMATOGENESIS
La transicin de las clulas germinales primordiales mitticamente activas aesper-
matozoides maduros recibe el nombre de espermatognesis, proceso que implica
una extensa serie de transformaciones estructuradas. A pesar de que existe gran
variedad morfolgica entre los espermatozoides maduros, el proceso global de la
esperrnatognesis es similar entre las clases de vertebrado- y pueden dividirse en
tres fases principales: 1)lamultiplicacin mittica; 2) lameiosis, y3) laespermiog-
nesis.
La mitosis de las clulas formadoras de espermatozoides ocurre durante todo
el transcurso de la vida. Las clulas mitticamente acti as al interior de los tubos
seminferos se conocen como espermatogonios, y se concentran cerca de la pared
externa de los tubos (Fig. 3-9). Se ha subdividido a los espermatogonios en dos
poblaciones principales. El tipo A representa la poblacin de clulas madre, en
la cual hay un grupo de clulas oscuras, no cclicas (Ad) que pueden ser clulas
de reserva a largo plazo, de las cuales algunas se transforman en clulas plidas
mitticamente activas (Ap) que por ltimo originan los espermatogonios tipo B.
Estas clulas estn destinadas a abandonar el ciclo mittico y que se diferencian
para completar el proceso de espermatognesis.
Despus del ltimo ciclo de duplicacin del DNA, las clulas tipo B reciben el
nombre de espermatocitos preleptotenos y estn preparados para pasar por la fase
meitica de laespermatognesis. Durante laprimera divisin meitica, cada esper-
matocito primario se divide en dos clulas hijas iguales, las cuales, al iniciarse la
segunda divisin meitica, reciben el nombre de espermatocitos secundarios. En
el ser humano, la primera divisin dura varias semanas, en tanto que la segunda
secompleta en unas ocho horas. De lafase meitica delaespermatognesis resultan
cuatro espermtides haploides.
Pese aque las espermtides dejan de dividirse, sufren una profunda transforma-
cin, pues de clulas de aspecto relativamente comn llegan aconvertirse en esper-
matozoides en extremo especializados. La tercera fase de la espermatognesis se
conoce como espermiognesis o metamorfosis espermtida.
Durante el proceso de metamorfosis de la espermtide ocurren muchos cambios
radicales. Al finalizar la segunda divisin de maduracin, el ncleo se encuentra
en estado tpico de interfase, con una cromatina dispersada, finamente granulada,
y una membrana nuclear reconstituida (Fig. 3-10A). El ncleo comienza casi de
inmediato a perder lquido, dando lugar a una disminucin en su tamao y a la con-
Cuerpo residual
, ,
i!
:::5permatocitos
secundarios
Clula
de Sertoli
Esperr'natogonio A
plido
Fig. 3-9. Dibujo de una seccin de epitelio seminfero que muestra la relacin entre las clulas
ae Sertoli y clulas espermticas en desarrollo, (Cortesia de y, Clermont, tomado de Dym, 1977 .
.81 Weiss y Greep, dirs., Histology, 4a. ed., McGraw-Hill Book Ca., Nueva York, p. 984.)
eentracn de su cromatina (Fig. 3-lOC yD). Este cambio prevalece hasta que la
omatina consolidada llegaaconstituir lamayor parte delacabeza del espermato-
zoide (Fig. 3-10D a 3-10F).
A nivel delaorganizacin celular sepresentan cambios concurrentes. El citoplas-
ma sealeja del ncleo para convertirse en la cabeza espermtica, dejando tras de
s slo una pequea capa sobre el ncleo (Fig. 3-10D YE). La parte del citoplasma
que contiene el complejo de Golgi seconcentra en el extremo apical de la cabeza
espermtica en desarrollo, ycomienza atomar forma el acrosoma (Fig. 3-11). Los
centriolos que seencuentran enel interior del citoplasma setornan msconspicuos
_ se presentan como punto de anclaje de losflagelos en desarrollo (Fig. 3-lOB y
C). Elcentriolo posterior se aleja del anterior y adquiere la forma de un anillo
~e circunda al flagelo (Fig. 3-10D a F), y las mitocondrias comienzan a consti-
mir una investidura espiral en torno a la seccin proximal del flagelo (Fig. 3-12).
A medida que contina la espermatognesis, se desintegra el citoplasma restante
v
Ncleo
de la
espermtide
o E
A B
Segmento ,'.'
principal
Capa
de la
cola
Cubierta de la
mitocondria
citoplsmico
cola
Extremo
de la cola
G H
Fig. 310. Etapas en la maduracin de las esperrntides, (Modificado de las figuras de Gatenby
y Beams, 1935. Quart. J. Micr. Sci., vol. 78.)
(Fig. 3-1OEy F), dejando al espermatozoide maduro desprovisto decualquier parte
queno leseaesencial, yque ahora consta de: 1)una cabeza quecontiene el ncleo
y el acrosoma; 2) una pieza media que contiene la seccin proximal del flagelo,
loscentriolos apartir delosqueseorigin ylahlice mitocndrica queacta como
fuente de energa, y 3) la cola (Fig. 3-12), un flagelo altamente especializado.
Tan pronto comienzan las divisiones mitticas delos espermatogonios tipo A,
lasclulashijas seconectan entres mediante finospuentes intercelulares decitoplas-
ma, resultado deuna citocinesis (divisin celular) incompleta despus delamitosis
y quetal vezfacilitan ladiferenciacin ydivisin sincrnica delasclulas producto-
ras deespermatozoide. Aunque hay docenas declulas que estn interconectadas
de esta manera en cualquier etapa, no es sino hasta la ltima etapa espermtida
delaespermatognesis queesposible descubrir agregados declulas interconecta-
das (Fig. 3-7).
Fig. 311. Micrografa electrnica de una espermtide tarda de gato. Fijacin de cido smico
: ortiguado. (Tomado de Bloom y Fawcett, Textbook of Histology, segn M. H. Burgos y D. W.
=awcett, 1955. J. Biophys. and Biochem. cytot., vol. 1. Cortesa de los autores y W. B. Saunders
.,;ompany, Filadelfia.)
Durante laespermatognesis, lasclulastambin estnestrechamente vinculadas
nlasclulas de Sertoli, lascuales seencuentran enintervalos regulares alo largo
-"-el tbulo seminfero (Fig. 3-9) y constituyen cerca de50 7 0 delas clulas delos t-
mas seminferos. Hasta hacealgunos aos sesabapoco acerca del funcionamien-
rodelasclulas deSertoli, pero enlaactualidad sehadescubierto quedesempean
una extensa variedad de funciones (TindaIl y col., 1985), entre las que seinclu-
yen: 1)supapel declulas receptoras delaFSH; 2) sucapacidad desintetizar una
_rotena fijadora de andrgeno, la cual conserva una concentracin elevada de
testosterona al interior de los tbulos seminferos; 3) preservar la barrera entre
asangre y los testculos; 4) crear un entorno importante en la diferenciacin de
las clulas espermticas; 5) facilitar laliberacin deespermatozoides maduros, y
6) degradar el citoplasma residual que se desecha durante la espermiognesis.
Labarrera entre la sangre y los testculos esnecesaria para prevenir queel sistema
inmunitario del cuerpo destruya las clulas espermticas en proceso de madura-
in, en tanto son antignicamente diferentes del resto del cuerpo. Esta barrera
onsta deuna lmina entrecruzada continua deprocesos declulas deSertoli (Fig.
Cabeza-
cuello~{
Pieza -
intermedia
Cola
(parte
superior)
Capa de la cabeza
/."'~'-- Material nuclear
concentrado
axiles
Cola
(parte-
inferior)
Borde
de la
E-::i:?""~~~,,=,~~;:-- capa
de la
cabeza
Filamentos
-aXiles~
.
Cubierta
E
A
8
e
H
Extremo-
G
- o
Fig. 3-12. Diagramas que muestran la estructura del espermatozoide humano como aparece
en micrografas electrnicas. A, Seccin longitudinal de la cabeza, cuello, segmento medio y parte
superior de la cola. B, La cabeza vista a partir de su superficie aplanada, junto con el cuello y
parte del segmento medio. e, Segmento terminal de la cola propia yextremo. Entre los segmentos
que se ilustran en B y e, se ha omitido una parte considerable de la cola. O-H, Ms secciones
transversales ampliadas del segmento medio y la cola, a los niveles indicados por las flechas.
(Esquematizado a partir de Anberg, 1957, y Fawcett, 1958.)
3-9), las cuales se adhieren entre s por uniones ceidas, en tanto que al exterior
delabarrera hay espermatogonios yespermatocitos que apenas inician lameiosis.
Losespermatocitos enlaetapa cigotena atraviesan labarrera mediante losprocesos
"!Rensoresdelasclulas deSertoli, formando al mismo tiempo unacapa permeable
enlaparte externa delosespermatocito sleptotenos, entanto quelabarrera original
eclulas de Sertoli que seencuentra en la cara interior de las clulas, serompe
simultneamente cuando estas clulas se retiran del proceso.
La espermatognesis no sucede al azar, pues en los tbulos seminferos es un
proceso altamente sincronizado con respecto atiempo y ubicacin. Las primeras
etapas delaespermatognesis sellevanacabo enlaperiferia del tbulo, ylasetapas
paulatinamente posteriores se realizan ms cerca de la luz. Sin embargo, no es
posible observar todas las etapas delaespermatognesis en las mismas secciones
del tbulo seminfero, ya que por lo comn sepresentan varias generaciones de
clulas espermticas endesarrollo alo largo decualquier lnea radial que setrace
en una seccin transversal del tubo, y todas las clulas de una generacin dada
seencontrarn en la misma etapa. Entre los mamferos, como la rata, es posible
elinear ondas de espermatognesis a lo largo del tubo seminfero, en tanto que
ladistribucin deasociaciones declulasenlostestculos humanos exhibeunaspec-
oms parchado que ondulatorio (Clermont, 1972). El tiempo requerido enel ser
humano para el desarrollo del espermatogonio enespermatozoide esdeunos 64das.
Expresin gentica durante la espermatognesis
Para lograr lasreorganizaciones estructurales queserealizan durante laesperrnio-
gnesisdeben formarse nuevas protenas. Cada vez esms claro que por lomenos
enel caso dealgunas deestas protenas, lasclulas espermticas endesarrollo utili-
zanuna estrategia similar aladel huevo; asaber, laproduccin apropiada deRNA
mensajeros enunaetapa temprana para almacenarlos enforma inactiva y, despus,
cuando senecesite, liberar lasmolculas demRNA queseutilizarn para constituir
lasprotenas requeridas. Esta estrategia implica lo quecomnmente sellama con-
trol postranscripcional.
La trucha representa un buen ejemplo de la sntesis deprotaminas, las cuales
sonpequeas protenas, ricasenarginina, quedesplazan alashistonas yparticipan
enel alto grado decondensacin delacromatina nuclear durante lasetapas finales
delaespermatognesis. Los estudios dehibridacin in situ decDNA con mRNA
deprotamina han mostrado queaunque esteltimo seasintetizado durante laetapa
primaria del espermatocito, no es sino hasta la etapa espermtida, casi un mes
despus, que sellevaacabo latraduccin del mensaje delaprotamina aprotena
(J atrou y Dixon, 1978). Durante el periodo entre su sntesis y su traduccin, la
protamina demRNA forma complejos conlasprotenas queseencuentran enesta-
do inactivo.
Existen tambin datos que algunos genes deratn setranscriben en momentos
tan tardos como la etapa espermtida (Palmiter y col., 1984). Este fenmeno,
querecibeel nombre deexpresin gentica haploide, sehademostrado enlasinves-
tigaciones sobre lapresencia deantgenos enlasuperficie celular durante laesper-
matognesis de ratones heterocigotos con la mutacin t
12
Maduracin del espermatozoide
A pesar deque el esperma que seobtiene directamente delos testculos es capaz
de fecundar huevos entre muchos invertebrados y en vertebrados que dependen
dela fecundacin externa, este no es el caso delos mamferos, pues no obstante
su aspecto demadurez morfolgica, los espermatozoides recin formados en los
mamferos sonmnimamente funcionales. Durante supausado trnsito delostbu-
los seminferos alacola del epiddimo, donde seconservan hasta laeyaculacin,
los espermatozoides estn expuestos auna seriedediferentes entornos humorales
al interior del sistema deconductos genitales masculinos. Aunque no seconocen
bien los mecanismos de este proceso, sesabe que el complejo metablico de los
espermatozoides adquiere ms capacidad para traducir laenerga qumica acierto
grado demovilidad. Lacabeza del espermatozoide serevisteadems con una capa
deglucoprotena que debe desecharse en el aparato reproductor femenino, antes
quepueda llevarseacabo lafecundacin. Resultara ms adecuado llamar activa-
cin auna delas fases finales delamaduracin del espermatozoide enel aparato
reproductor masculino, una vez que los espermatozoides eyaculados han entrado
en contacto con el lquido seminal que secretan lavescula seminal y la prstata,
dado que el lquido seminal proporciona a los espermatozoides funcionalmente
maduros una fuente externa deenerga que lespermite alcanzar movilidad total.
Enlaseccinsobrefecundacin sedescribirn otros cambios por losqueatraviesan
las clulas espermticas en el aparato reproductor femenino.
OOGENESIS
Laoognesis vara enmayor medida quelaespermatognesis conforme aloshabi-
tos reproductivos del animal. Enlasespeciesquedependen delafecundacin exter-
na en el agua, el nmero dehuevos maduros que selibera durante un solo desove
oscilaentreloscientos alosmilesdecientos. Enlosanimales enlosquelafecunda-
cin es interna, hay ms parsimonia en la produccin de huevos; por lo comn
nada ms madura un vulo enun momento dado, yenraras ocasiones hasta ms
de 15. La enorme variacin no slo sepresenta en cantidad, sino tambin en la
dimensin delos huevos. El tamao depende sobre todo si el huevo fecundado se
desarrolla al interior oexterior del cuerpo delamadre. Los vulos delosmamferos
sonmuypequeos porque noesnecesario almacenar anticipadamente grandes canti-
dades deyemayotros materiales que serequieren para el desarrollo del embrin,
en tanto que los huevos delos animales que sedesarrollan al exterior del cuerpo
suelenser msgrandes, puescontienen ensuinterior losmateriales yemosos necesa-
rios para el desarrollo del embrin. Por locomn loshuevos delosanimales acuti-
cos son considerablemente ms pequeos que los de reptil y ave. Las diferencias
ambientales tambin precisan distintas cubiertas para circundar al huevo. Lapre-
paracin es otro aspecto importante de la oognesis. Cada vez es ms evidente
enmuchas especies hasta qupunto esnecesaria lacontribucin que realiza lama-
dreenel control yconservacin del desarrollo embrionario temprano. Lamanera
enque seanticipan los requerimientos futuros durante la oognesis es otro tema
importante deestaseccin, enlaquetambin sehablar sobrelostrestipos diferen-
res de huevos (de anfibio, ave y mamfero).
Oognesis en los anfibios
Los patrones reproductivos de los anfibios, como en casi todos los vertebrados
inferiores, estnadaptados para producir grandes cantidades dehuevos queselibe-
rarn en un momento dado durante el ao. Por lo general, los anfibios liberan
cientos dehuevos encada desove, entanto quelospecespor regladesovan cientos
o cientos de miles de huevos. Debido tanto al nmero masivo de huevos como
asudesove anual, el patrn deoognesis en los vertebrados inferiores difiere en
algunos aspectos del de muchas aves y mamferos.
En anfibios, la fase mittica dela oognesis no seinterrumpe tempranamente
como enlos mamferos. Cada ao segeneran nuevas cosechas dehuevos atravs
::elaproliferacin mittica procedente deuna poblacin declulas madre gameto-
gnicas. La maduracin dela rana (Rana pipiens) requiere tres aos (Fig. 3-13).
El primer lote de huevos comienza amadurar poco despus dela metamorfosis.
2.0
1.5
Fase vitelognica
E
S
e
a; 1.0
E
'ro
i:5
Fase previteloqruca
Fig. 3-13. Crecimiento de oocitos de rana durante los tres primeros aos de vida. Al final se
encuentran tres generaciones de oocitos en el ovario. Los dibujos muestran el desarrollo de los
oocitos en la primera generacin. (Modificado de P. Gran!, 1953. J. Exp. Zool., 124:513.)
I
Durante losdos primeros aos, lamaduracin esunproceso relativamente pausa-
do, pero enel verano del tercer ao, los huevos maduran rpidamente yenotoo
llegan a alcanzar un dimetro de unos 1500ILm. La hembra entonces entra en
hibernacin y al inicio dela siguiente primavera deposita los huevos, protegidos
por una cubierta de jalea, en el agua. Debido al ciclo detres aos que toma la
oognesis, el ovario deuna rana madura contiene tres rotesdehuevos encualquier
momento.
Los huevos dentro del ovario anfibio estn dispuestos enfolculos individuales,
rodeados primero por una capa deepitelio folicular, acontinuacin por una teca
(unadelgada membrana detejido conectivo ovrico quecontiene vasossanguneos)
y por ltimo, por una capa de epitelio ovrico.
Maduracin del huevo de anfibio
Durante lamaduracin del huevo deanfibio deben anticiparse los requerimientos
del embrin, yaqueno essinohasta quecomience aser alimentado queel embrin
sedesarrollar como unsistemaesencialmente cerrado; esdecir, el huevo fecunda-
dodebecontener todo loqueprecisapara el desarrollo temprano. Por consiguiente,
uno de los principales requerimientos, es un abastecimiento de yema suficiente
para proveer los sustratos necesarios para laactividad sinttica del embrin. Ade-
msdeacumular yema, el huevo queseencuentra enproceso demaduracin sinteti-
zagrandes cantidades deRNA -material suficiente para satisfacer lamayor parte
de los requerimientos del embrin durante el periodo de segmentacin.
El proceso demaduracin del huevo deanfibio puede dividirse en dos amplias
fases: laprevitelognica (antes dela deposicin de la yema) y la vitelognica (el
periodo principal dedeposicin delayema). Lafaseprevitelognica por logeneral
comprende el intervalo que incluye el periodo diploteno temprano dela meiosis.
El huevo inmaduro (prediploteno) esunaclularelativamente no especializada (Fig.
3-14A). Entre losprimeros cambios demaduracin hay unaumento enlacantidad
demitocondrias yel comienzo demayor sntesis del RNA, RNA detransferencia
(tRNA) inicial y pequeas (SS) molculas de RNA ribosmicas (rRNA).
Cuando el oocito ingresa alaprolongada fasediplotena delameiosis, los cam-
bios enlamaduracin comienzan enserio. El ncleo setorna encentro deintensa
actividad sinttica, y debido aello, su dimetro aumenta por un factor dehasta
7u 8, hasta que alcanza cerca de 350ILmal finalizar la fase diplotena. Durante
muchos aossehallamado vesculagerminal al ncleoagrandado del huevoanfibio.
Loscromosomas queseencuentran dentro del ncleo han comenzado adesenro-
llarseapartir delaestrecha configuracin espiral queexhiban enlaetapa meitica
anterior (paquitena), ypronto comenzarn aconstituir grandes cantidades delazos
simtricos (hasta 20000enel tritn); estohadado lugar aqueselesllamecromoso-
mas plumosos olampbrush (Fig. 3-15). Loslazosdeestos cromosomas representan
regiones en las que el DNA seha extendido a una longitud equivalente a la de
muchos genesindividuales yesalolargo decada lazo quesellevaacabo lasntesis
polarizada de RNA (Gall y Callan, 1962). Seha estimado que durante la etapa
Epitelio superficial
A 3011m
B
Fig. 314. Cambios estructurales en el oocito anfibio durante la oognesis. A, Etapa leptotena.
B, Etapa diplotena muy temprana. e, Etapa diplotena. O, Oocito en proceso de maduracin durante
la profase I tarda.
plumosa estexpuesto aproximadamente 50/0 del genoma del oocito, el cual acta
como plantilla para la sntesis del RNA.
El ncleo diploteno temprano tambin secaracteriza por laformacin degran-
descantidades denucleolos (hasta 1500enXenopus) , queal poco tiempo sedistri-
buyen bajo lamembrana nuclear y que constituyen laexpresin morfolgica del
fenmeno deamplificacin gentica especifica (Brown yDavid, 1968). Laamplifi-
cacingenticaesunarespuesta adaptativa para satisfacer losrequerimientos sint-
ticos del huevo; enestecaso, laformacin deuna poblacin deribosomas losufi-
cientemente grandepara durar alolargodel periodo desegmentacin enel embrin.
El nucleolo eslaestructura principal que participa en la sntesis derRNA dealto
peso molecular yenlacongregacin deribosomas. Sehacalculado queserequeri-
ran cientos deaos para producir lacantidad deribosomas presentes enunhuevo
Vescula
germinal
Polo
animal
Regin
pigmentada
Mitocondria
Meml;lrana
vitelina
Nube mitocndrica
(ncleo de la yema)
Zona radiada
750J,lm
e
Epitelio folicular
Yema densa
Polo vegetativo
1500J,lm
o
maduro deanfibio con base solamente en el nmero de nucleolos que por lo general
existe en las clulas. Sin embargo, lareplicacin selectiva de las porciones del geno-
ma que tiene asucargo laformacin de ribo somas reduce aalgunos meses el tiempo
requerido para satisfacer las necesidades productivas del ooeito.
Mientras se lleva a cabo la sntesis en el ncleo, el citoplasma tambin pasa por
cambios importantes (Fig. 3-14D), que en esencia son relativos a la formacin de
Procesamiento
Eje principal no
transcrito
B
Fig. 3-15. A, Fotomicrografa que muestra los cromosomas en cepillo (o plumosos) del oocito
e un tritn. (Cortesa de J. G. Gall.) B, Dibujo esquematizado de un lazo de un cromosoma en
cepillo que muestra la transcripcin de ANA sobre el lazo, en el cual se transcribe una secuencia
e histonas. A medida que procede la sntesis en torno al lazo (en sentido de las manecillas del
eloj) , se lleva a cabo el procesamiento y se separan las porciones de las molculas de ANA que
contienen a las histonas transcritas. (Modificado de R. W. Olds, H. G. Callan y K. W. Gross, 1977.
J. Cell Sci., 27:57-80.)
layema; por ello puede decirse que seha iniciado la fase vitelognica de la oogne-
siso La yema no es una sustancia qumica especfica, sino un trmino colectivo
que comprende varias clases de sustancias qumicas que sealmacenan en el citoplas-
ma para nutrir al embrin durante su desarrollo. En el huevo anfibio, el material
protenico se almacena en la forma de plaquetas de yema unidas a la membrana;
los lpidos, en inclusiones llamadas lipocondrias, y los carbohidratos se acumulan
como agregados de grnulos de glucgeno.
Lasplaquetas delayemaconstituyen lasinclusiones ms prominentes enel cito-
plasma del huevo anfibio. Durante muchos aos, suorigen ymodo deformacin
fueron unmisterio, peroenlaactualidad sesabequelasclulasdel hgado producen
la mayor parte delaprotena delayema (Fig. 3-16) y que lasangre latransporta
al ovario (revisin de Wallace, 1985). La precursora de la yema en la sangre es
unaprotena, lavitelogenina, queenrealidad representa auna familiadeprotenas.
Estematerial seeliminadelasangreenel ovario ydebepasar por el epitelio folicular
para llegar al huevo. Puesto quelavitelogenina esdemasiado grande para atravesar
la membrana plasmtica del oocito por difusin, seincorpora en l mediante el
proceso demicropinocitosis, durante el cual seforma en la superficie del huevo
una vescula unida a la membrana que contiene la precursora de la yema y que
acontinuacin sesucciona al interior delaclula. Lavitelogenina no puededescu-
brirse dentro del oocito maduro; est representada en cambio por dos molculas:
lafosfovitina, unaprotena (MW35000) conalto contenido defsforo, ylalipovi-
telina, una lipoprotena (MW - 400000). Ambas protenas estn apiadas enfor-
ma cristalina al interior de la membrana para formar las plaquetas de la yema.
Si bienunporcentaje reducido deellasconsta deprotenas deyemaenforma crista-
lizadaal interior delasmembranas mitocondriales, lamayor parte delasplaquetas
CRECIMIENTO y VITELOGENESIS
DEL OOCITO MADURACION DEL HUEVO
Secrecin de
viteloqeruna -
vescula
germinal
Clulas
foliculares
Fig. 3-16. Esquema del crecimiento (izquierda) y maduracin final del oocito anfibio. (Adaptado
de Browder, Developmental Biology (1984), Saunders, yde Gilbert, Developmental Biology (1985),
I Sinauer.)
parecer seorigina apartir delaconglutinacin entre las vesculas pinocitticas
ms pequeas quecontienen vitelogenina.
Antes que secomprendiera el origen delas protenas dela yema en el hgado,
..... urante muchos aos sepens quelaformacin delayemaerauna delasfunciones
del ncleo de layema (cuerpo de Balbianii, el cual esmuyprominente-en loshuevos
51desarrollo de la rana. A pesar de que ya no seconsidera que esta estructura,
q_ueenlaactualidad seha determinado ser una nube densa demitocondrias, pro-
cuzca cantidades importantes de yema, secontina desconociendo su funcin.
Aproximadamente al mismo tiempo que las plaquetas dela yema, tambin co-
mienzan a formarse grnulos corticales (Fig. 3-14D) en el citoplasma, los cuales
:: n inclusiones unidas alamembrana, compuestos principalmente deprotena y
aterial polisacrido. Estas estructuras exhiben una distribucin irregular entodo
=i reino animal. Por ejemplo, seencuentran enlos huevos deerizos demar, ranas
" seres humanos, mas no en los de salamandras. Al parecer seoriginan a partir
_;el aparato de Golgi y terminan por dispersarse en torno a la capa exterior del
:itoplasma (la corteza) del huevo, justo bajo la membrana plasmtica. Como se
er ms adelante en este captulo, los grnulos corticales desempean un papel
portante en la reaccin del vulo ante la penetracin de un espermatozoide.
Al finalizar laetapa diplotena, oiniciarse ladiacinesis, el oocito estya, enmu-
:hos aspectos, maduro. Los cromosomas pierden suconfiguracin plumosa yco-
zaienzan acondensarse cerca del centro del ncleo. Los nucleolos tambin sedes-
lazan delaregin adyacente hacia lamembrana nuclear interna ysedistribuyen
;: ededor del agregado cromosmico. Estos cambios intranucleares auguran ladi-
- lucin final delamembrana nuclear (el colapso delavescula germinal), produ-
ziendo la mezcla de los contenidos nucleares con el citoplasma, proceso que en
ranchas especies constituye un preludio esencial dela segmentacin del huevo fe-
cnndado.
El citoplasma del huevo maduro contiene diversos organitos einclusiones, as
mo ms de un milln de mitocondrias, a diferencia delos centenares de stas
..,_eseencuentran enlamayora delasclulas somticas. Lagran cantidad demito-
:ondrias sedebealadivisin autnoma querealizan entres, asuvezconsecuencia
celareplicacin deun DNA mitocondrial circular deuna sola fibra. Entre estos
rganitos citoplsmicos seincluyen los centriolos, el complejo de Golgi (el cual
participa enlacondensacin final del carbohidrato ylas molculas deprotenas),
_ una forma especializada deretculo endoplsmico (laminilla anillada) queconsta
eun acopio demembranas porosas contenedoras dealgo deRNA. Hasta ahora
se desconoce la funcin de la laminilla anillada (revisin de Kessel, 1985).
Adems de las inclusiones de yema, el oocito maduro contiene gran cantidad
<le grnulos depigmento, los cuales surgen ms tardamente durante laoognesis
mecualquier otra inclusin yestn concentrados enlamitad del huevo, el hemisfe-
rio animal. La otra mitad, menos pigmentada aunque ms cargada de yema, se
llama hemisferio vegetal (Fig. 3-14D), y la regin de transicin entre estos dos-
aemisferios generalmente sedenomina zona marginal. Cuando el huevo presenta
una pigmentacin asimtrica seconstituye una forma tentativa de polaridad. Si
enel huevo desalamandra setraza unejeaproximado apartir del picedel hemisfe-
rio animal hacia el punto opuesto desumitad vegetal, el polo animal corresponde
en cierta medida a la ubicacin de la futura boca, en tanto que el polo vegetal
indicar la del ano.
Las etapas finales demaduracin del oocito consisten enlaliberacin inducida
del huevo apartir desuprimer bloque meitico; laterminacin delaprimera divi-
sin meitica, con laconstitucin del primer cuerpo polar, y ladesintegracin de
lavesculaseminal (el ncleo). Lamaduracin tarda comienza cuando lasclulas
foliculares querodean al oocito secretan progesterona por induccin delasgonado-
tropinas (Fig. 3-16). A diferencia de las dems hormonas esteroides, que por lo
comn interactan con los receptores citoplsmicos, la progesterona acta en la
superficie del oocito, ocasionando una despolarizacin elctrica delamembrana
plasmtica y provocando as unaumento en el Ca2+y una disminucin decAMP
enel huevo. Laactividad delaprogesterona enlasuperficie del huevo sedemostr
al inyectar esta hormona directamente en el huevo. Si bien no hubo maduracin,
seestimul lamaduracin delos mismos oocitos al sumergirlos en esta hormona
(Smith y Ecker, 1977).
Los pasos intermedios que conducen ala liberacin del Ca2+y la disminucin
del cAMP soncomplejos yno sehan comprendido completamente (Maller, 1985);
por ello no seabordarn aqu. No obstante, sesabeque estos pasos implementan
laconstitucin deunfactor promotor de la maduracin (Masui yMarkert, 1971),
el cual produce lamaduracin del huevo y lasntesis deun nuevo abastecimiento
del factor al inyectarse enpequeas cantidades aunhuevo inmaduro. Al transcurrir
y-ariospasos posteriores sesuspende la sntesis del RNA en el huevo en proceso
de maduracin (Fig. 4-26), y tras un da de exponer el huevo a la progesterona,
sellevaacabo ladesintegracin de la vescula germinal, permitiendo as lacombi-
nacin denucleoplasma ycitoplasma queserequiere para queel huevo pueda seg-
mentarse.
Laaparicin deunfactor citoplsmico ms, elfactor citosttico, representa otro
desarrollo tardo en el proceso de maduracin (Meyerhof y Masui, 1979). Seha
propuesto queestefactor acasiona lasegunda interrupcin meitica del huevo du-
rante la metafase 11. Cuando seinyecta a la blastmera deun embrin bicelular
unacantidad minscula decitoplasma deoocito quecontenga estefactor, el ncleo
de la clula se detendr en la metafase correspondiente a la siguiente mitosis.
Expresin gentica y otros sucesos preparatorios
durante l a oognesis
Al abordar el tema delaexpresin gentica durante laoognesis, el lector deber
tener enmenteel problema fundamental al queseenfrentan losembriones demu-
chasespecies. Todo sucedecontal rapidez durante el desarrollo temprano (segmen-
tacin), quelasactividadessintticasdel embrinpor s solasnobastan parasatisfacer
susnecesidades. Laestrategia quepor locomn adopta lamayor parte delasespe-
ciesdel reino animal estribaenadelantarse alosrequerimientos futuros, producien-
do con anticipacin molculas uorganitos, afindealmacenarlos enel huevo para
CUADRO 3-1. Almacenamiento de componentes en el oocito de Xenopus para
uso futuro durante el desarrollo
Componente
Exceso aproximado en cantidad
respecto a las clulas larvarias
Mitocondrias 100000
Polimerasas del RNA 60000 a 100000
Polimerasas del DNA 100000
Ribosomas 200000
tRNA 10000
Histonas 15000
Trifosfatos desoxirribonuclesidos 2500
Fuente: Tomado de Gilbert (1981), segn Bul!.
uando senecesiten. La consecuencia deesta estrategia radica en que mucho de
lo quesucede enel embrin temprano est bajo control delos productos creados
enel huevo prefecundado, lo que significa que el genoma materno efectivamente
ontrola gran cantidad delossucesostempranos deposfecundacin enel embrin.
El cuadro 3-1presenta un ejemplo grfico cuantitativo de la sntesis anticipada
que selleva a cabo durante la oognesis en Xenopus.
'Aunque lasntesis deprotenas constituye uno delosprincipales requerimientos
futuros del embrin, resultara muy poco prctico depositar muchas protenas es-
tructurales y enzimticas en el huevo. Por ello, el huevo seprepara para recibir
unaumento desntesis deprotenas despus delafecundacin mediante laforma-
in del complejo de sntesis de protenas; a saber, ribosomas, mRNA, tRNA y
enzimas polimerasas de RNA.
Losribosomas sonestructuras complejas queconstan deRNA yprotenas estre-
chamente conglomeradas. Por suspropiedades desedimentacin sehan clasificado
tresclasesdeRNA como RNA 5S, l8S y28S. Laamplificacin gentica especfica
ylaconstitucin demuchos nucleolos (anteriormente descritos) durante laetapa
diplotena de la meiosis hacen posible la sntesis de grandes cantidades de RNA
l8Sy28S. Auncuando selleveacabo conmayor anterioridad lasntesisdecantida-
des considerables del RNA 5S, en estecaso esposible por la presencia delagran
cantidad de genes repetidos en tndem que ya se encuentran en el RNA. Cada
uno deloscuatro filamentos cromosmicos enel huevo durante laprofase 1meiti-
cacontiene 24000genesdeRNA 5S, sumando untotal de96000(BrownySugimo-
to, 1973). Por otra parte, lasntesis deprotenas ribosmicas secorrelaciona con
losRNA l8S y28S, demodo quedurante lavitelognesisintermedia, de20a30070
de la protena producida en el oocito es del tipo ribosmico.
As como el RNA 5S, las molculas del tRNA tambin sesintetizan al inicio
de la oognesis (Fig. 4-26). Mientras no seutilicen, se almacenan en partculas
grandes junto conalgunas molculas deRNA 5S, para ser liberadas despus duran-
telaoognesis. LosRNA mensajeros, asuvez, sesintetizan encantidades distintas.
/
Por lo general forman complejos con las molculas de protena y sealmacenan
enel citoplasma del huevo. Laestrategia deinactivacin delosmRNA quesecons-
tituyen en el huevo ha sido objeto degran atencin, especialmente en el caso del
erizo de mar (p. ej., la hiptesis del "mensajero disfrazado" [Spirin, 1966]).
El problema relativo alasatisfaccin derequerimientos para lasntesisdel DNA
en el embrin temprano debe resolverse de diferente forma, porque el DNA no
puede sintetizarse conanticipacin. Por ello, el huevo estpreparado para proveer
los nucletidos indispensables, adems desintetizar por adelantado un exceso de
polimerasas deDNA, superior asus necesidades del momento (cuadro 3-1). Otra
preparacin anticipada queserealiza para cubrir lanecesidad del rpido aumento
enlacantidad dematerial gentico funcional durante lasegmentacin consiste en
un periodo importante de sntesis de histonas durante la fase vitelognica de la
oognesis.
Sehan presentado en forma resumida algunos delos hechos ms relevantes de
las estrategias bioqumicas que utiliza el huevo para adaptarse a las necesidades
del embrin temprano. Para mayores detalles, as como para las pruebas experi-
mentales tras muchas delas generalizaciones antes mencionadas, el lector podr
consultar gran diversidad delibros detexto sobrebiologa del desarrollo dereciente
publicacin.
Oognesis en aves
-,
La parte del huevo degallina que comnmente seconoce como yema esuna sola
clula, laclula sexual femenina o el vulo. Suenorme tamao, en comparacin
con el deotras clulas, sedebeal material alimenticio que contiene. Este alimento
almacenado, que el embrin habr deutilizar durante sucrecimiento, seacumula
poco a poco en el citoplasma del vulo antes de ser liberado por el ovario. Los
dems componentes del huevo (la clara, la membrana del cascarn y el propio
cascarn) sonsecreciones no celulares quedotan al vulo decapas para protegerlo
en su recorrido descendente por el sistema reproductor de la gallina.
El vulo temprano mide unas 50,um de dimetro ycrece demanera paulatina
hasta quealcanza los6mm. Despus seaceleraenormemente el ndicedecrecimien-
to, aumentando el dimetro encercade2.5mmdiarios, demodo quecuando ocu-
rrelaovulacin, el vulo puedellegar atener undimetro de35mm. Estecuantioso
aumento en tamao sedebe sobre todo a la acumulacin delos materiales de la
yema. Como en el anfibio, estos materiales no sesintetizan en el vulo sino en
el hgado, para sertransportados por lasangre alasclulas foliculares querodean
al vulo, las cuales entonces los transfieren al vulo, donde sellevar acabo la
estructuracin morfolgica final delosmateriales transferidos delayema(Bellairs,
1964, 1965).
Cuando seobserva al microscopio, layema presenta aspecto delquido viscoso
donde estn suspendidos grnulos yglbulos dediversos tamaos. En los huevos
deaves (Romanoff yRomanoff, 1949), layema contiene casi 50070deagua, 33%
dematerial graso, 16%deprotena yslo 1%decarbohidratos. El aguatransporta
::";:ctrlitoscomo cloruro desodio ylassales decalcio que seutilizan enlaforma-
.ndeloshuesos. Layemacontiene diversas clasesdeprotenas quetambin estn
~ el suero delagallina yentrelascuales lasprincipales sonlavitelina (lipovitelina)
_ la lipovitelenina, protenas que enlazan gran parte de los lpidos que hay en la
_ema, lajosvitina, queenlaza lamayor parte del fsforo, yuna clasedeprotenas
solubleenaguallamada livetina, lacual comprende lasprotenas quesonidnticas
zmuchas delasprotenas normales del suero. Las sustancias adiposas estn princi-
:;;;almeniebajo laforma degrasas neutras, ylasdems son fosftidos, fosfolpidos
7 olesterol. Adems hay vitaminas A, B B
2
, D y E. Conforme seincrementan
.;DS materiales almacenados queconstituyen layema, el ncleo yel citoplasma son
:::npulsados hacia la superficie. As, con el tiempo, la yema llegaaocupar casi
rodo el espacio de la clula.
En la figura 3-17 semuestra una seccin del ovario de una gallina, en el que
seobservan varios vulos jvenes, as como uno queyaestprcticamente dispues-
to para ser liberado. Los vulos jvenes estn incrustados muy profundo en la
- 'culo joven ------
"F sanguineo _ _ _ _ :c
-ejido conectivo
Epitelio germinal del
ovario
cleo
Yema blanca
Yema amarilla
Vaso
sanguneo
'----- Folculo de la teca
Fig. 3-17. Diagrama que muestra la constitucin ae un vulo de ave que todava se encuentra
en el ovario. La seccin muestra un folculo que contiene un vulo ya casi maduro, junto con una
pequea regin de tejido ovrico adyacente. (Modificado de Lillie, segn Patterson.)
joven
sustancia del ovario y a medida que se acumula cada vez ms yema, seapian
hacia lasuperficie para proyectarse por ltimo deella, conservndose conectados
atravs deun tallo constreido detejido ovrico. La protuberancia quecontiene
al vulo seconoce comofolculo ovrico. La mayor parte del vulo maduro est
constituido por yema. Con excepcin delavecindad del ncleo, el citoplasma acti-
vo no esms que una pelcula delgada que envuelve alayema. Lazona del vulo
enlaquesehallan el ncleo ylamayor parte del citoplasma activo recibeel nombre
depolo animal, yesel sitiodonde sellevaacabo lafecundacin. Laregin opuesta
al polo animal se conoce como polo vegetativo o vegetal.
As como los vulos de muchas clases de vertebrados, los huevos de las aves
exhiben una membrana plasmtica de gran irregularidad que con frecuencia se
designa zona radiada. Estetrmino seutiliza para describirla por las delicadas es-
tras radiadas quepresenta al observarsebajo un microscopio deluz aalta potencia.
Gracias alos estudios realizados con microscopio electrnico, en laactualidad se
sabequelasestras deben suaspecto amicrovellosidades estrechamente apiadas.
La importancia funcional dela membrana irregular estriba, como en los oocitos
anfibios (Fig. 3-24), en el gran aumento de superficie que puede permitirse para
as intensificar losintercambios metablicos quepueden llevarseacabo enlasuper-
ficie celular.
Cuando secompara el folculo deavescon el demamferos, resulta difcil pasar
por alto las similitudes existentes en las estructuras que servirn como inversin
ysus relaciones bsicas. En ambos casos, el vulo estcircundado por una regin
declulas foliculares queasuvez estn cubiertas por una teca detejido conectivo
vascular dedos capas. La asombrosa diferencia esque, mientras el vulo grande
cargado deyema del ave ocupa por completo el folculo (Fig. 3-17), el pequeo
huevo del mamfero apenas lo llena. La zona desocupada al interior del folculo
demamfero es el antro, en cuyo interior sedescubren folculos contenedores de
lquido (Fig. 3-19).
Al acumularse totalmente la cuota de yema que requiere el vulo del ave, se
llevaacabo laovulacin atravs delarotura deuna banda avascular (el estigma)
que rodea al folculo (Fig. 3-18). Las bandas de msculo liso, que seextienden
del tallo hacia el interior del folculo, secontraen, para as liberar el vulo fuera
del folculo. Como sucedeconel vulo demamferos, lafinalizacin delaprimera
divisin de la maduracin coincide casi exactamente con la ovulacin, en tanto
quelasegunda divisin no serealiza, amenos que una clulaespermtica penetre
en el huevo.
Oognesis en mamferos
A diferencia delosvertebrados inferiores, losmamferos no abastecen lasreservas
de los oocitos que se presentan en el ovario durante el nacimiento, pues en ese
momento los ovarios humanos contienen casi dos millones de oocitos (muchos
deloscualesyaestn enproceso dedegeneracin) quefueron interrumpidos duran-
telaetapa diplotena delaprimera divisin meitica. Losoocitos yaestn rodeados
Fig. 3-18. Dibujo del aparato ge-
nital de una gallina. Tras la rotura
del folculo a travs del estigma, el
vulo pasa hacia el oviducto izquisr-
do. Cuando desciende por el conduc-
to genital, es cubierto sucesivamente
con albmina, las membranas del
cascarn y finalmente, por este lti-
mo. Entre las aves, el oviducto dere-
cho es rudimentario. (Modificado de
Bellairs, segn Romanoff y Roma-
noff.)
"',Jll~_ Tallo del ovario
Ovulos pequeos
vaco
Se lleva a cabo la
fecundacin
Secrecin
de albmina
Asentamiento de las
membranas del cascarn
Asentamiento del
cascarn
rudimentario
por una capa declulasfoliculares ogranulosas. Elcomplejo del vulo y susinver-
siones celulares circundantes reciben el nombre defottculo, De todas las clulas
germinales presentes enel ovario, slo cerca de400(una porcada ciclomenstrual)
llegarn a madurar y sern ovuladas. Las restantes sedesarrollarn en diversos
grados y acontinuacin pasarn por el proceso deatresia (degeneracin). Elporqu
seproducen tantos oocitos cuando tan pocos abandonan efectivamente el ovario
contina siendo un misterio.
En un inicio, los oocitos seacompaan declulas foliculares que seencuentran
en el periodo fetal tardo, intervalo durante el cual atraviesan por las primeras
etapas delaprofase delaprimera divisinmeitica. Enlossereshumanos, lameio-
sis llega ainiciarse en algunos ooci tos tan temprano como el cuarto mes de vida
embrionaria. El 00cito primario (que recibe este nombre por encontrarse en la
primera divisin meitica), ms sucubierta incompleta declulas foliculares apla-
nadas, seconocecomofolculo primordial. Despus, durante el periodo fetal, cuando
estas clulas han constituido una capa completa en torno al oocito primario, el
complejo recibe el nombre defolculo primario (Fig. 3-19). Para este entonces,
el oocito haentrado al primero desus dos periodos deinterrupcin dedesarrollo,
la etapa diplotena delameiosis. Bsicamente todos los oocitos permanecen inte-
rrumpidos en esta etapa hasta la pubertad entre los seres humanos, amenos que
sedegeneren, aunque es posible que algunas deestas clulas no trasciendan ms
all dela etapa diplotena sino hasta el ltimo ciclo reproductivo femenino (entre
los 45y 50aos deedad). Sesabe an menos acerca delo que sucedeenel oocito
humano durante la etapa diplotena en comparacin con los oocitos de algunos
vertebrados inferiores; sinembargo, sesabequeloscromosomas enel oocito huma-
no pasan por la fase plumosa, durante la cual, tanto el oocito como las clulas
foliculares desarrollan gran cantidad demicrovellosidades, conectadas mediante
Inicio
de la
Folculo
atrsico
Folculo
en va de
maouracin
Folculo primario
Folculo atrsico
FoliculO maduro
Epitelio
germinal
Cuerpo amarillo
completamente formado
ovario
')
Fig. 3-19. Diagrama esquemtico del ovario que muestra la secuencia de fenmenos de origen,
crecimiento y rotura del folculo ovrico (o de De Graaf), as como la formacin y retrogresin de
cuerpo amarillo. Comincese por el mesovario, siguiendo el sentido de las manecillas del reloj
en torno al ovario.
o
lo
do
len,
del
eloj
Gametognesis y fecundacin 1 1 1 -
nna unin intersticial para permitir el paso de sustancias debajo peso molecular
ce un tipo declula aotra. La zona pelcida, membrana no celular translcida,
zambin comienza a constituirse alrededor del oocito despus de completarse la
~rimera capa de clulas foliculares.
Durante losaos queanteceden alapubertad, muchos delos folculos seagran-
an como resultado de: 1) un aumento en el tamao del oocito; 2) la formacin
elazona pelcida, y 3) un incremento en la dimensin y nmero delas clulas
foliculares. Adems, seconstituye una delgada membrana basal alrededor delas
clulasgranulosas del folculo que recibeel nombre demembrana granulosa (Fig.
-20F), encuyointerior nohay vasos sanguneos, motivo por el cual tanto el oocito
comolasclulasgranulosas debendepender deladifusin paranutrirseyoxigenarse.
Las etapas mstempranas dedesarrollo delos folculos primarios (hasta varias
capas de clulas foliculares) al parecer sellevan a cabo sin la mediacin de las
ormonas sexuales. Sin embargo, despus de esta fase, la diferenciacin de los
olculos demamferos implicalaminuciosa interaccin dediversas hormonas dife-
rentes que actan sobre las clulas foliculares. El siguiente paso en el desarrollo
fulicular estriba en la formacin al interior delas capas declulas granulosas de
una cavidad con lquido, llamada antro (Figs. 3-20 y 3-21). Este paso depende
ela presencia delas hormonas gonadotrpicas dela hipfisis, sobre todo dela
FSH (hormona estimulante del folculo), y delaprobable mediacin por parte de
los estrgenosque seproducen dentro del folculo. Una vez que seha formado el
antro, el folculoseconocecomofolculo secundario, si bienel oocitoqueseencuen-
tra ensuinterior contina siendounoocito primario quepermanece interrumpido
enlaetapa diplotena. El lquido del antro sellamafolculo de lquido yseconstituye
al principio por las secreciones de las clulas granulosas, aunque despus surge
enmayor parte como un trasudado apartir delos capilares que estn en el lado
opuesto de la membrana granulosa.
El folculosecundario llegaacubrirse an mspor una capa declulas (estrom-
ricas) detejido conectivo modificado ovrico. Cuando seconstituye inicialmente,
esta capa seconoce comofolculo de la teca (Figs. 3-20E y 3-21); sin embargo,
contina diferencindose en dos capas, de las cuales la interior, o teca interna,
esdenaturaleza glandular ymuyvascularizada, entanto quelateca externa conser-
va las caractersticas de una cubierta de tejido conectivo.
El control hormonal de maduracin del folculo secundario preparatorio a la
ovulacin escomplejo (Richards, 1979)'.Lasclulas delatecadel folculo secunda-
riotemprano contienen receptores para laLH (hormona luteinizante). Al ser esti-
muladas por esta hormona, las clulas de la teca producen testosterona, la cual
atraviesalamembrana granulosa hacialasclulasgranulosas (Erickson ycol., 1985),
encuyointerior hay protenas receptoras para laFSH as como un sistema activo
generador decAMP. Esteltimo, enparticular, pareceser importante enlaestimu-
lacin de la conversin enzimtica de la testosterona en estradiol, un estrgeno
potente, queadems desusefectos sistmicos, acta sobrelosncleos delasclulas
foliculares y tambin estimula la formacin delos receptores de LH en las clu-
lasgranulosas. Deestamanera coordina lareceptividad del folculo ovrico, junto
con la actividad de la LH en la sangre, justo antes de la ovulacin.
112 Gametog esis y fecundacin
Teca interna
B
Corona radiada
G
Membrana granulosa
Tamao natural del
ovario
H
Fig. 3-20. Dibujo que muestra las etapas de desarrollo del oocito humano y el folculo ovrico.
A-O, Folculos primarios. E-F, Folculos secundarios, con la formacin del antro. G-H, Folculos
maduros. (Dibujos de proyeccin en A-F, x 150; en G el folculo se ampli x 15, pero el dibujo
interno del oocito se ampli x 150.)
Tras ser estimulado hormonalmente, el folculo comienza aincrementar dema-
nera rpida sutamao y setorna eniui foliculo terciario (deDeGraaf) ,1queahora
, Antiguamente, los folculos terciarios reciban el nombre de foltculos de De Graaf, en honor al
anatomista holands Reijnier de Graaf (1641-1673), quien fue el primero en describirlos. Este trmino
se sola utilizar en la literatura mdica antigua y en la actualdad an se observa en informes clnicos.
Ftg. 3-21. Microscopia electrnica de barrido de un folculo maduro de rata que muestra el oocito
=""3rico (centro), rodeado por las clulas ms pequeas de la corona radiada, la cual se proyecta
-:=.' el antro. x 840. (Cortesa de P. Bagavandoss.)
:~' desplaza hacia la superficie del ovario (Fig. 3-19), aunque el cada vez mayor
=::!liculode lquido ser el que acabe por impulsarlo hacia el exterior del contorno
_:::neral de la superficie (Fig. 3-200 y H). Cuando el ovario se expone quirrgica-
:::;'ffite, el folculo casi maduro exhibe un aspecto similar al de una ampolla acuosa;
",'o significa que el folculo ya est de hecho preparado para romperse y liberar
;vulo que contiene, el cual sale del folculo rodeado por varias capas de clulas
~ulosas para prorrumpir en el antro como el cumulus oophorus (Fig. 3-20E
_ F). J usto antes de la ovulacin, el folculo produce grandes cantidades de estra-
-'01, y como los receptores de la LH cuentan con abundantes clulas tecales y gra-
zmlosas, estas ltimas tambin contienen una alta concentracin de receptores de
.:=sH. En este momento el vulo ha sido liberado de su primer bloque meitico
- la etapa diplotena y procede a dar trmino a su primera divisin meitica, libe-
rando de modo simultneo el primer cuerpo polar. El folculo ya est dispuesto
lEC responder a la oleada preovulatoria de LH y FSH y completar la primera etapa
aesu ciclo al liberar el vulo. A diferencia de los oocitos anfibios, cuya maduracin
es producto de la estimulacin por progesterona, la maduracin de Ios oocitos
114 Game Dg3--~ tecundecion
mamferos '" -:~ .r- influencia por parte de las hormonas esteroides, pues es
lahormona 1 '~me, junto con otras influencias, la que representa un estmulo
irnportanze ec :S-~proceso.
AIr . . Tan slo un diminuto porcentaje de vulos y folculos alcanza
la etapa ..f~ ~"'::urez, pues los dems sufren varios grados de cambios relativos
alam , aci ya continuacin comienzan adegenerarse, Este proceso seconoce
como resj . olicutar, por lo cual sedice que un folculo en proceso de degenera-
in eserrsfro Fig. 3-19). No sehan definido completamente los factores regula-
dores encargados de laatresia folicular; no obstante, hay cada vez mayores pruebas
que in ican que los folculos atrsicos exhiben una deficiencia de receptores para
las ganado ropinas o el estradiol.
O -ulaciu. El pico de LH en la sangre, conjuntamente con la FSH, y quiz con
el es rgeno pone en marcha las etapas finales demaduracin folicular que condu-
irn a la ovulacin. El folculo contina hinchndose como resultado del incre-
memo uantirativo del lquido folicular y el crecimiento del folculo mismo. El
pice de la proyeccin folicular se llama estigma, y un da despus de surgir la
oleada de LH se llevarn a cabo algunos cambios caractersticos en esta regin.
Los sucesos finales de la preovulacin se inician con una hemos tasia en la zona
que circunda al estigma. Una hora despus se desintegra su pared folicular para
expulsar del folculo al lquido del antro, junto con el vulo, el cual est rodeado
por las clulas del cumulus oophorus (Fig. 3-22).
No se ha logrado comprender del todo el mecanismo preciso que precipita la
rotura del folculo ovrico; sin embargo, lo ms probable es que se lleve a cabo
por la participacin de varios factores. Una de las primeras hiptesis sustentaba
que la presin creciente del lquido del antro dentro del folculo ocasiona el rompi-
miento delapared folicular, pero las mediciones no han logrado mostrar laexisten-
cia de tal aumento en la presin. Las hiptesis ms recientes plantean que la pared
folicular se debilita debido a una isquemia, o quiz a la actividad que ejerce la
enzima ltica local, esta ltima por estimulacinde las hormonas hipofisarias (LH).
La demostracin de que las clulas estromticas ovricas exhiben propiedades se-
mejantes a las del msculo liso ha hecho pensar que su actividad contrctil puede
participar en laexpulsin del huevo apartir del folculo (Schroeder yTalbot, 1985).
No obstante; ninguna hiptesis parece describir de manera adecuada todos los fe-
nmenos que se sabe ocurren durante la ovulacin. Ello es en particular evidente
cuando se considera la ovulacin en una gama amplia de animales, algunos de
los cuales (p. ej., los insectvoros) no poseen antros con lquido al momento de
la ovulacin.
Cuerpo amarillo. La historia del folculo ovrico de ninguna manera termina
cuando libera el vulo que contiene. Tanto las clulas del estrato granuloso como
lateca interna participan en laformacin del cuerpo amarillo o lteo, cuyo nombre
sedebe al color amarillo que presenta en material fresco. El cuerpo amarillo crece
rpidamente y setransforma en un rgano endocrino que secreta estrgeno y pro-
gesterona.
Cuando sedesgarra el folculo ovrico, laexpulsin de lamayor parte del lquido
que contiene y la contraccin del estroma del ovario reducen el tamao de su luz
Ag. 3-22. Amplificaciones de cuadros solos de una pelcula cinematogrfica de intervalos que
estra la ovulacin en el conejo. A, Vista lateral de dos folculos aproximadamente 11/2 horas des-
:;;.;:s de la rotura. B, Los mismos folculos alrededor de media hora despus de la rotura, e, Exudacin
-- lquido transparente durante las fases tempranas de la rotura. D, En la flecha 1, el nuevo folculo
=- uiere forma cnica conforme se aproxima el momento de su rotura. En la flecha 2, el exudado
- folculo, cuyo inicio de rotura se mostr en e, se ha tornado ms abundante y contiene algo
-'" sangre (oscura). E, El folculo que indica la flecha 1 en D comienza ahora a desgarrarse. Los
=- dados con manchas de sangre del folculo cuya rotura se inici en e, y que mostr una exuda-
.n ms vigorosa en D (flecha 2) puede observarse en forma parcial tras el folculo que se desgarr
-' recientemente. F, La rotura del folculo que se indica por la flecha en E. El tiempo transcurrido
=:: elas fotografas E yF es de ocho segundos. Este chorro final del folculo desgarrado transporta-
~ al vulo hacia afuera. (Tomado de Hill, Allen y Kramer, 1935. Anat. Rec., vol. 63.)
Fig. 3-19). Es posible que el sangrado que producen los pequeos vasos, por el
::rterioro que sufren con la rotura del folculo, llene el antro con sangre coagulada.
Durante la transformacin del folculo desgarrado a cuerpo amarillo ocurren va-
zios cambios concomitantes. Las clulas granulosas se hinchan y desarrollan las
zaractersticas citolgicas de las clulas que secretan grandes cantidades de hormo-
zas esteroides. El cogulo central decrece por intervencin de los fagocitos, al tiem-
_ ;J O que los vasos sanguneos invaden de manera extensa a la que anteriormente
;uera la capa granulosa avascular. Estos vasos traen consigo pequeas clulas de
origen tecal, las cuales se apian entre las clulas ms conspicuas provenientes del
estrato granuloso.
La formacin y conservacin del cuerpo amarillo en el ser humano requiere la
presencia continua de LH de la hipfisis. Las relaciones hormonales difieren entre
los mamferos; por ejemplo, entre las ratas y ovejas se requiere tanto LH como
prolactina. El cuerpo amarillo produce grandes cantidades de progesterona y algo
de estrgeno. Una de las principales funciones de laprogesterona estriba en prepa-
rar el revestimiento del tero para recibir e implantar el vulo fecundado. Si no
ocurre el embarazo, se reduce poco a poco la sensibilidad del cuerpo amarillo a
las gonadotropinas de la hipfisis, tal vez al perder los receptores de LH y FSH
en sus clulas, yentonces comienza aretrogradarse. Sin embargo, si hay embarazo,
el cuerpo amarillo atraviesa por un periodo muy prolongado decrecimiento ypuede
llegar a alcanzar de 2 a 3 cm en los seres humanos. La gonadotropina corinica
que secretan las clulas del embrin y sus membranas circundantes tiene a su cargo
la conservacin del cuerpo amarillo del embarazo (Fig. 2-8).
Cuando cualquiera de los dos tipos de cuerpo amarillo comienza a degenerarse,
laparte celular del rgano sedesintegra yessustituida por tejido conectivo fibroso,
el cual, a medida que crece y setorna ms compacto, adopta el aspecto blancuzco
caracterstico del tejido cicatrizado yrecibe el nombre decorpus albicans (Fig. 3-19).
CUBIERT AS ACCESORIAS DE LOS HUEVOS
/
Despus d laovulacin, los huevos son liberados en diversos medios tanto al inte-
rior como al exterior del cuerpo. La mayor parte de los peces y anfibios efecta
el.desove en agua dulce o salada, donde los huevos debern encontrarse protegidos
de predadores, enfermedades y factores ambientales como presiones osmticas y
pH extremos. Los animales que depositan sus huevos sobre-tierra firme (reptiles,
aves, mamferos primitivos), deben evitar su desecacin, adems de conservarlos
yprotegerlos. Todas las especies mencionadas aqu protegen asus huevos mediante
capas de secreciones que producen cuando los vulos descienden por los conductos
genitales de las hembras. Los huevos de los mamferos superiores y formas vivpa-
ras de las otras clases de vertebrados permanecen en un entorno fisiolgico; no
obstante, tambin estn cubiertos por lo comn por uno o ms revestimientos acce-
sorios, algunos de los cuales no se ecupan tanto de la proteccin sino de otros
factores. En ciertos casos, los propios vulos secretan-las cubiertas del huevo; en
otros, son las clulas foliculares las que tienen a su cargo esta funcin, en tanto
que en otros ms, esto lo realiza el aparato reproductor femenino una vez que
el huevo ha abandonado el ovario. En esta seccin nos referiremos a las cubiertas
accesorias de cuatro tipos generales de huevos: los de los erizos de mar, anfibios,
aves y mamferos.
....----- -,-,-- I
Cubiertas de los huevos de erizos de mar,'
'---
Los huevos de los erizos de mar estn cubiertos por d~~~ares (Fig.
3-23): laenY_Q/Lura.JLiteli!JfJ. una membrana resistente constituida por diversas varie-
Gametognesis y fecundacin "\"\ 7
dades de glucoprotenas..,_entre las cuales estn intercalados receptores especficos
de laespecie para espermatozoides, y lacubierta gelatinosa que rodea alaenvoltura
vitelina y que contiene concentraciones elevadas de poIisacridos desulfato fucoso,
as como glucoprotenas y pequeos pptidos. Durante el desove, lacubierta gelati-
nosa se hidrata y expande y se torna virtualmente transparente. La fecundacin
del erizo de mar se expondr en detalle ms adelante en este captulo.
Membranas.que circundan al huevo anfibio
Durante su periodo de desarrollo en el ovario, el huevo anfibio est circundado
por un epitelio folicular que consta declulas ovricas. En el oocito muy temprano,
tanto su membrana plasmtica como las membranas celulares internas de las clu-
las foliculares 'son bastante lisas y se yuxtaponen en gran medida. Conforme el
oocito crece durante su primer ao, la membrana plasmtica y las clulas folicula-
res comienzan a formar muchas proyecciones diminutas que reciben el nombre
demicro vellosidades y macrovellosidades, respectivamente. La prominencia de es-
tas estructuras seincrementa, y el angosto espacio entre el oocito y su epitelio foli-
Membrana vitelina
Envoltura
Membrana interna del
Espacio de aire
Zona pelcida
Corona radiada
Fig. 3-23. Comparacin de las cubiertas de huevos en (A) el erizo de mar, (B) anfibios, (C) aves
y (O) mamferos.
cular serellenaconunmaterial homogneo, nocelular y semejante al delamembra-
na basal que al parecer secretan tanto el huevo como las clulas foliculares. Esta
membrana, equivalente alazonapelcida delosmamferos (Fig. 3-201'), seconoce
comnmente enlos anfibios como laenvoltura vitelina (Fig. 3-23). A medida que
el oocito seaproxima a la fase diplotena de la meiosis, aumenta el nmero y el
tamao delas microvellosidades, y laenvoltura vitelina setorna ms espesa (Fig.
3-24). Estas especializaciones extremadas delas membranas celulares, junto con
lasuniones intersticiales queconectan alosprocesos vellosos, dan lugar auninter-
Fig. 3-24. La regin citoplsmica exterior ede un oocito de Rana pipiens se arrolla en interval -
frecuentes (la flecha indica la parte inferior del pliegue). Tambin extiende las microvellosidade:o
mv hacia la sustancia de la membrana vitelina V. En el citoplasma se exhiben grnulos corticales
cg, algunos cuerpos lpidos /, muchas vesculas pequeas ve y abundantes ribosomas libres
Las clulas foliculares del epitelio f empujan descendentemente a los procesos fp hacia la memora-
na vitelina. La porcin de la clula folicular que aqu se muestra contiene mitocondrias m, retc
endoplsmico esparcido ery agrupaciones de ribosomas r. (Micrografa electrnica por N. E. Kemp
zambio activo entre el epitelio folicular y el huevo. Una vez que se ha asentado
yema en el huevo y ste seaproxima a la ovulacin, las microvellosidades dismi-
zuyen de tamao (Fig. 3-14D). En el momento de la ovulacin se constituye el
..lalIlado espacio perivitelino, un espacio lleno de lquido, entre la cubierta vitelina
:- la membrana plasmtica de los huevos.
Cuando los huevos ovulados entran a los oviductos, la cubierta vitelina' recibe
aterial y adems sufre algunos cambios, los cuales facilitarn la penetracin del
espermatozoide en esta capa, En su paso por los oviductos, los huevos se revisten
:on tres o ms capas gelatinosas que constan en su mayor parte de polisacridos.
As como sucede en el erizo de mar, lacapa gelatinosa sehincha al entrar en contac-
con el agua y as permitir que los huevos seadhieran entre s, aplantas acuticas
_ a otros objetos sumergidos.
Formacin de las cubiertas accesorias en los huevos de aves
Durante laovulacin, el vulo est cubierto por una membrana vitelina que contie-
-e una red entretejida de fibrillas de protenas, que no son de colgena, y cuya
.extura es relativamente spera. La fecundacin por lo general selleva acabo justo
:uando el vulo ingresa al oviducto (Fig. 3-18), y las cubiertas accesorias restantes,
trmino que seutiliza para describir los dems componentes del huevo, son secreta-
cas por el vulo durante su subsecuente travesa hacia la cloaca.
Cuando el vulo se encuentra en la seccin del oviducto adyacente al ovario,
::rimero se establece una membrana vitelina externa a su alrededor, compuesta
:.efibrillas de protena ms finas que las de la membrana-vitelina interna original,
_-las que se proyectan a lo largo del oviducto, a partir de los extremos opuestos
.:.elvulo, entre los polos animal yvegetal, ydespus verse envueltas en laalbmina
.." e secreta el oviducto superior. Conforme se desplaza hacia la cloaca y debido
a los pliegues espirales dispuestos en las paredes del oviducto, el huevo sufre una
rotacin que hace que la albmina adherente seenrosque y adquiera la forma de fi-
.amentos espirales que se proyectan hacia cualquier extremo de la yema. Estos
filamentos llamados chalazas (Fig. 3-25) tienen la funcin de atrapar la albmina
adicional que el revestimiento glandular del oviducto ha secretado anticipada y
undantemente en el vulo, y adems envuelven al huevo en capas concntricas
::urante su descenso posterior. La regin secretoria de albmina del oviducto con-
forma casi la mitad de su longitud total.
Una delas principales protenas albuminosas de laclara del huevo eslaovalbmi-
a (MW 43 000), cuya sntesis, junto con otras secreciones del oviducto, constitu-
=-enun ejemplo sorprendente derespuesta especfica alaactividad delas hormonas.
El oviducto del pollo por lo general no es capaz de secretar los componentes de
clara de huevo sino hasta que el ave adquiere su madurez sexual. Sin embargo,
~ se trata al pollo con estrgeno al poco tiempo de su nacimiento, el oviducto
inmaduro sufre una serie de rpidos y profundos cambios en su maduracin. El
primero estriba en un aumento de cinco a seis veces durante la mitosis, la cual
canza un pico a las 18 horas de inyectarse estrgeno. Cuando las inyecciones
120 Getnetoq: ecundacin
Blastodermo
exterior de la
albmina delgada
Capa fibrosa
Chalaza
Capa chalazfera Membrana interna de la
albmina delgada
2
13
12 ~
E
11 ~
c::
10 ' "
~
9 E
ID
8 "O
ro
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>-
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0..'
4
3
Curva de
crecimiento
de la yema
del huevo
-------------------
~1~8==1~7~1~6==1~5~1~4=- ~13- - ~12- - ~1- 1- - 1~0- - 9~- 8~~7- - ~6- - ~5- - ~4- - - 3~- 2~~~, 0
Das despus de la postura
Fig. 3-25. Diagrama que muestra la configuracin de un huevo de gallina al momento de la
postura. La grfica indica el ndice de crecimiento del huevo durante los 18 das que anteceden
asu postura. Las lneas que se dirigen de las diversas capas de la yema hacia la curva de crecimien-
to destacan el momento en que se formaron estas capas. (Dibujo rediseado, con ligeras modifica-
ciones, segn Witschi, 1956, Development of Vertebrates. Cortesa del autor y de W. B. Saunders
Company, Filadelfia.)
secontinan, lasglndulas tubulares sediferencian del epitelio aproximadamente
cuatro das posteriores al inicio del tratamiento hormonal. Unpar dedas despus,
estas glndulas sintetizan cantidades sustanciales deovalbmina ylisozima, agent~
bacteriosttico queseaade alaclaradehuevo para proteger al embrin. Al mism
tiempo, las clulas ciliadas setornan prominentes en el epitelio del oviducto y el
siguientecambio consisteenladiferenciacin dealgunas clulas epiteliales enclu-
las caliciformes las cuales, enrespuesta auna sola inyeccin deprogesterona, co-
mienzan deinmediato asecretar grandes cantidades deavidina, unimportante com-
ponente protenico de la clara de huevo (Fig. 3-26).
Las membranas del cascarn, que consisten en dos lminas defibras orgnicas
enmaraadas, seaaden ms adelante enel oviducto, y el cascarn sesecretacuan-
do el huevo pasa por laporcin cascarn-glndula del oviducto (tero). Secalcula
que la transicin total del vulo, desde el momento de su descarga en el ovario
hasta el punto enque est preparado para ser depositado, toma de25a26horas.
Progesterona
t Peso del oviducto
Protena total
Ovalbmina
Lisozima
Fig. 3-26. Representacin esque-
mtica de las respuestas y patrones
de sntesis molecular en el oviducto
del pollo. tras la administracin de
hormonas estero ides sexuales. (Mo-
dificado de B. W. Q'Malley y. col.,
1969. Ree. Progr. Hormone Res.,
25:105.)
Avidina
o 5 10
Das
15
Si el huevo completamente formado llegaal extremo cloacal del oviducto amedio-
da, selesueleponer deinmediato; en caso contrario es posible que searetenido
hasta el da siguiente. Esta retencin nocturna esuno delos factores que explican
variabilidad existente enlaetapa dedesarrollo al momento deponerse el huevo.
Estructura del huevo de gallina al momento de su postura. En la figura 3-25se
muestra ladisposicin deestructuras del huevo al momento desupostura. Lama-
yor parte delas relaciones voluminosas resultan conocidas por suaspecto tan evi-
dente enlos huevos cocidos. Cuando sepermite que un huevo recin puesto flote
hbremente en el agua, hasta que seasiente, y acontinuacin seabre quitando la
artedel cascarn queseencuentra enel punto ms elevado, seobserva una regin
circular blanquecina que parece cubrir a la yema. En los huevos fecundados, el
aspecto deesta regin es algo distinto y perceptiblemente mayor que en la delos
uevosque no sehan fecundado. Las diferencias seoriginan por el desarrollo de
unagregado declulas enloshuevos fecundados, el blastodermo, del cual sehabla-
r con mayor detalle en el captulo 4.
Un examen detenido de la yema mostrar que no es uniforme en cuanto a su
color o textura; por ello esposible diferenciarla enyema blanca yyema amarilla.
la acumulacin principal deyema blanca reside' en una regin central s~ejante
a lade un matraz, la ltebra, la cual seextiende hacia el blastodermo y fulgura
por debajo de l hacia una masa conocida como ncleo de Pander. Adems de
[altebra yel ncleo dePander, existendelgadas capas concntricas deyemablanca
entrelascuales sepresentan capas mucho ms espesas deyemaamarilla. Las capas
oncntricas de ambos tipos de yema indican las acumulaciones diarias durante
los sieteuocho dasfinales antes dela ovulacin. En esteperiodo sellevaacabo
laformacin delayema durante el da yla'noche, pero durante las ltimas horas
delanoche, layema constituida nicamente poseepequeas cantidades degrasa,
si bien cuenta con un contenido elevado deprotenas, en tanto que la depositada
I
enel daexhibeunalto contenido graso ysucolor sedebealoscarotenoides amari-
llos que en ella seconcentran. As, durante la ltima semana que antecede a la
ovulacin, seaaden todos losdas una delgada capa deyemablanca yuna gruesa
deyemaamarilla. Layemamsexterna queestpor debajo delamembrana viteli-
na siempre es blanca.
Laalbmina, con excepcin delaschalazas, esprcticamente deaspecto homo-
gneo, aunque cuando se encuentra cerca de la yema es algo ms densa que lo
que es perifricamente. Las chalazas tienen la funcin de suspender la yema en
la albmina.
Las dos capas delamembrana del cascarn seencuentran en contacto por do-
quier, salvo enel extremo mayor del huevo, donde seseparan lasmembranas inte-
riores yexteriores para formar una cmara de aire, lacual tan slo surgedespus
que se ha puesto y enfriado el huevo, de la temperatura normal corporal de la
gallina [alrededor de41C] atemperaturas comunes. En el caso delos huevos que
sehan retenido durante cualquier intervalo detiempo, el tamao del espacio de
aireseincrementa por laevaporacin departe del contenido acutico deloshuevos.
El conocido mtodo de hacer "flotar" el huevo para comprobar si es fresco se
realiza con base en el reconocimiento de este hecho.
El cascarn del huevo secompone en su mayor parte por sales calcreas, que
seencuentran principalmente como calcitas, una forma cristalina del carbonato
de calcio (Fig. 3-27). Aunque el calcio a final de cuentas proviene del alimento
delamadre, esteelemento seimplicaenunacuriosa adaptacin estructural durante
su trayecto por el conducto intestinal dela hembra, que nicamente exhiben las
avesqueestn activas enlapostura dehuevos. El calcio seincorpora enunas masas
huesudas especializadas, conocidas como hueso medular, quesesitan enlascavi-
dades medulares deloshuesos largos. Cuando el cascarn del huevoestenproceso
Fig. 3-27. Diagrama de una pe-
quea porcin del cascarn de hue-
vo de aves y sus membranas subya-
centes, destacndose las I
estructuras cristalinas en el casca-
rn. (Dibujo reelaborado de Dumont
y Brumett (1985) en Browder, Ooge-
nesis, Plenum Press, segn Bec-
king.)
Capa
palisada
~~~":;(F~:::;:;", Capa
cristalina
Conos
y capas
basales
}
Membrana
del
cascarn
- - - -- - ~---- ._
deformacin, lasmasas del hueso medular sedesintegran rpidamente para fungir
como lafuente principal decalcio durante laformacin del cascarn. En ausencia
deestos depsitos, el calcio del cascarn provendra deotras estructuras esquelti-
casdel ave, ysi esto sucediera, el esqueleto sedebilitara gravemente. Sehapropor-
cionado undispositivo deseguridad interesante para evitar estaposibilidad. Cuan-
do el alimento delamadre no contiene sustancias concal, deja deproducir huevos
alospocos das (Taylor, 1970).Al parecer estosedebealainhibicin quesepresen-
taenlaproduccin dehormonas gonadotrpicas por parte delaglndula hipofisa-
ria. El cascarn normal esporoso (cercade7000poros por huevo), para permitir
queel embrin contine el intercambio degases con el airedel exterior, mediante
membranas vasculares especializadas quesurgenconrelacin al embrin, pero que
se encuentran fuera de l, directamente debajo del cascarn (Fig. A-42).
I
Cubiertas de huevos de los mamfero~
Mientras los huevos delos mamferos sehallan en el ovario, estn cubiertos por
una membrana n~~!~ que seforma eQ1ruJ ..QL~fi.l_~l.~IIl_~_clel. vulo ylas.clulas
foliculares circundantes. Esta membrana, que tambin seconoce como la zona
p_~;--eStconformada por algunos componentes, entre los que se incliiy~
tres clases distintas degl!lcopro~enas (80070desumasa total), mucopolisacridos
sulfatados, cido hialurnico ycido silico. Lasgl~.o.teIL<!i.. designadas como
ZP':1, ZP-2yZP-3 (Bliel yWassarman, 19,80b),poseen cuatro propiedades funcio-
ilTesdurante lafecundacin. Laprotena~.,1que seencuentra enmilesdemillo-
nesdecopias enuna solaz~--p-elcida deratn, acta como res:ep.t..2L~mru:n!ico
ytambin participa enlainduccilL!ie.J _I~accin a~rgsmica (Wassarman ycol.,
1986). Estas funciones see~ciin c~a;;_do'sehable dela fecundacin. La zona
pelcida comienza aconstituirse cuando el vulo est rodeado por una sola capa
declulas foliculares cuboidales. Las pruebas actuales (Bliel yWassarman, 1980a)
indican queel propio oocito sintetiza lamayor parte delazona pelcida. Durante
la ovulacin, el vulo delos mamferos permanece circundado por varias capas
declulas foliculares conocidas como corona radiada. Aun cuando sedesconoce
si sta desempea un papel protector, en algunos mamferos, como el conejo, se
requiere para transportar el huevo en su descenso por el oviducto. Las clulas de
lacorona radiada continan secretando esteroides y prostaglandinas en el huevo
ovulado, ysehasugerido (Schuetz yDubin, 1981)queestashormonas quizconser-
ven el desarrollo del huevo o el embrin hasta que el cuerpo amarillo comienza
a funcionar plenamente.
ia
Quiznoexistaotro fenmeno enel campo delabiologa quealuda atantos problemas
fundamentales como la unin de las clulas germinales en el acto de fecundacin.
En este supremo suceso seconvocan todas las hebras del tejido de dos vidas en un
solonudo, apartir del cual divergen y seentretejen una vezms enuna nueva historia
devidaindividual ... Loselementos queseunensonclulasnicas, cadaunaal borde
de la muerte; mas con su unin secrea un individuo rejuvenecido, que constituye
un vnculo enel proceso eterno delaVida. (F. R. Lillie, Problems of Fertilization.)
Previo a que se realice la unin efectiva de los gametos masculinos y femeninos
deben concertarse muchos fa tores biolgicos, pues el ciclo de crecimiento de
las clulas sexuales debe llevarse a cabo de tal forma que tanto los vulos como
los espermatozoides maduren ysean liberados de las gnadas en un intervalo estre-
chamente coordinado. Ya seha isto cmo el acto de lacopulacin misma estimula
la ovulacin en algunos animales, en tanto que en otros, los cambios en la duracin
de la luz del da sirven para coordinar el desarrollo de los gametos y el periodo
de actividad sexual. La conducta caracterstica de un animal en estro ("celo") re-
presenta otro mecanismo que incrementa laposibilidad deque laclula espermtica
funcional se encuentre con un vulo maduro.
Una vez que el macho ha eyaculado los espermatozoides, participan otros facto-
res para garantizar la aproximacin de stos y los vulos. El mecanismo ms senci-
llo es el de los invertebrados marinos y la mayor parte de los peces: la hembra
simplemente expulsa los huevos en el agua y el macho los "inunda" con millones
de espermatozoides. El nmero de huevos que habrn de fecundarse es por consi-
guiente cuestin del azar y las corrientes de agua. Otros vertebrados acuticos,
como las salamandras, han adoptado un complejo ritual de apareamiento, durante
el cual el macho deposita una cantidad de clulas espermticas (espermatforos)
en el fondo de un estanque, y la hembra las recoge, en el transcurso del cortejo,
con los labios de su cloaca. Un mecanismo ms eficiente es el de fecundacin inter-
na, caracterstico de los mamferos. En este proceso, el macho deposita sus esper-
matozoides directamente en el aparato genital de la hembra durante el coito. No
obstante, aun en este caso intervienen muchos factores crticos antes que se lleve
a cabo lafusin de los gametos masculinos y femeninos, y algunos de ellos requie-
ren consideracin especial por su importancia en la reproduccin humana .
.. La fecundacin es un proceso, y no un solo fenmeno, que comienza cuando
la clula espermtica entra inicialmente en contacto con la membrana plasmtica
del huevo y finaliza con la entremezcla de los cromosomas maternos y paternos
en el estadio de la metafase que antecede a la primera divisin de la segmentacin.
Sin embargo, para comprender labiologa delafecundacin, deben tenerse conoci- \
miento sde los diversos sucesos preparatorios que sellevan a cabo, entre los cuales
seincluyen laliberacin de los gametos de las gnadas, su acarreo para que puedan
encontrarse los huevos y el esperma, las alteraciones que sufren los espermatozoi-
des para poder fecundar el huevo (capacitacin yreaccin acrosmica) ylapenetra-
cin de los espermatozoides atravs de las capas protectoras que rodean al huevo.
El proceso de la fecundacin mismo tiene una cantidad de componentes impor-
tantes. Incluyen: 1) contacto inicial de la membrana entre el huevo y el espermato-
zoide; 2) entrada delaclula espermtica en el huevo; 3) prevencin de lapoliesper-
mia (ingreso dems deuna clula espermtica enel huevo) por el huevo; 4) activacin
metablica del huevo; 5) terminacin de la meiosis por el huevo, y 6) formacin
y fusin de los proncleos masculino y femenino, que llevan a la divisin final
de la segmentacin.
--- --- - ~-~-==-
En esta seccin se expondrn con detalle los acontecimientos que acompaan
e la fecundacin en dos formas, la del erizo de mar y los mamferos, las cuales
-~han seleccionado no slo porque secomprenden bien, sino porque ejemplifican
gunas diferencias importantes que serealizan en la estrategia de la fecundacin.
Los erizos demar son invertebrados tpicos que participan en un juego de nmeros.
Por su uso de la fecundacin externa, han tenido que desarrollar un medio eficaz
ara lograr que los huevos y espermatozoides seunan amar abierto. A nivel celular,
sus huevos estn revestidos deuna capa gelatinosa no celular, y los vulos finalizan
_ segunda divisin meitica previo al ingreso de los espermatozoides. Por otra
'J arte, los mamferos utilizan la fecundacin interna, la cual somete a los huevos
y esperma adiferentes obligaciones. Los vulos estn rodeados por una capa celu-
, y no una capa gelatinosa, y es necesario que se complete la segunda divisin
eitica antes que pueda consumarse la unin del material gentico materno y
terno.
ERIZO DE MAR
lberacln y transporte de los gametos
:3modo de fecundacin externa del erizo de mar esenormemente costoso entrmi-
os de la inversin metablica que se requiere para producir suficientes gametos
queaseguren lasupervivencia delaespecie. Secalcula que una sola hembra Arbacia
era cuatro millones de huevos, en tanto que el macho expulsa hasta 100 mil
zaillones de espermatozoides en un solo desove. Adems de producir cantidades
mmensas de gametos, los erizos de mar adultos mejoran las posibilidades de que
_ esperma se encuentre con el huevo al reunirse en agregados densos antes del
aesove. Despus de esto, el xito de la fecundacin depende en gran medida de
.ograr lacoordinacin acertada durante laliberacin de los gametos y de las condi-
ziones del agua en ese momento.
Penetracin del espermatozoide en el huevo en los invertebrados
'1 la reaccin acrosmica
El huevo del erizo de mar est cubierto por una capa que en su mayor parte es
material carbohidrato que se hidrata y expande al entrar en contacto con el agua
e mar. La investidura externa, que recibe el nombre de cubierta gelatinosa, est
constituida por una mezcla depequeos pptidos, glucoprotenas yun polisacrido
que contiene unidades de sulfato fucoso (Fig. 3-23). Cuando los espermatozoides
se topan con la capa gelatinosa, sufren una serie de importantes cambios. Ante
lapresencia de una gran cantidad de huevos, tienden aapiarse y aumenta su movi-
lidad.
El contacto directo con la capa gelatinosa estimula la reaccin acrosmica del
espermatozoide. Esta reaccin laprovoca el contacto con el polisacrido de sulfato
126 Gametogness y fecundacin
fucoso de la capa gelatinosa. Un pptido bioqumicamente, el esperacto, que seen-
cuentra en lagelatina del huevo, causa, al menos en parte, el aumento en movilidad
ylaactivacin respiratoria que ocurre cuando el espermatozoide sehalla con la capa
gelatinosa (Hansbrough yGarbers, 1981; Suzuki ycol., 1981). Lacea cin inmediata
esun incremento enlapermeabilidad delamembrana plasmtica del espermatozoide
al Ca2+,as como un aumento enlaconcentracin deCa2+intracelular, locual permite
la fusin localizada de lamembrana acrosmica externa con lamembrana plasmti-
ca y su eventual desintegracin. De manera simultnea, el flujo de Na", aunado
a la efusin de H+, ocasiona una elevacin en el pH intracelular del esperma, la
cual estimula la polimerizacin de la g-actina (una forma globular) a f-actina (la
forma filamentosa). Esta ltima constituye la base del proceso acrosmico que se
Fosa subacrosmica con
actina globular
Descomposicin del plasma y de las
Membrana membra;x~:r~~~ossmicas
plasmtica
liberacin de las
enzi as acrosmicas
e
I
)
acrosmico
Polimerizacin
de los
de actina
E
Fig. 3-28. Reaccin acrosmica del espermatozoide del erizo de mar. Tras la fusin de la memo
brana acrosmica y la membrana plasmtica, y su subsecuente desintegracin (B), se liberan las
enzimas, (C). A continuacin la actina globular se polimeriza en actina filamentosa (D)y se constitu-
ye el proceso acrosmico (E).
yecta de la cabeza del espermatozoide (Fig. 3-28), y el cual est cubierto por
- capa de bindina, protena que se deriva del contenido del acrosoma.
A medida c}uelOseSpermatozoides pasan por la cubiertagclatinosa, se encuen-
.::3.I1 con la cubiertavitelina, una capa resistente no celular, interpuesta entre la
- a gelatinosa y la membrana plasmtica del huevo, que consta en gran parte
= -= molculas de gl~Q.Ilr.otena, una de las cuales funciona como sitio de fijacin
_ ecfico de la especie para los espermatozoides. De esta forma, el revestimiento
__elino desempea el papel de discriminador principal que nicamente permite
--:.eel espermatozoide delamisma especie fecunde al huevo. Los enlaces que vincu-
- a los receptores que se encuentran en la cubierta vitelina con las molculas
::ebindina que revisten al proceso acrosmico consolidan launin entre el esperma-
zazoide y la envoltura vitelina (Fig. 3-29). Al parecer existen de 1500 a 6 000 sitios
::e fijacin del esperma en la cubierta (membrana) vitelina del erizo de mar.
Una vez que ha finalizado la reaccin acrosmica y se han fijado a la envoltura
itelina, los espermatozoides adheridos seabren paso por la cubierta con la ayuda
:.elas enzimas acrosmicas, que genricamente se conocen como lisinas. Aunque
= '5 grande el nmero de espermatozoides que se adhieren a la c~bieita vitelina,
_:nnpocos los que logran penetrarla.
Fig.3-29 Micrografa electrnca de barrido de los espermatozoides del erizo de mar en proceso
de adhesin perpendicular a la membrana vitelina que rodea al huevo. (Cortesa de G. Schatten,
de Schatten y Mazia, 1976. J Supra mol. Struct., 5:343.).
Contacto inicial entre el esperma y el huevo
Tras adentrarse en la cubierta itelina, la clula espermtica establece contacto
con la membrana plasmtica del huevo. El contacto inicial se lleva a cabo entre
el proceso acrosmico y las microvellosidades que se proyectan de la superficie
del huevo. En el caso del erizo de mar no parece haber un sitio especfico al que
seadhieran los espermatozoides preferentemente. Con el auxilio de sus movimien-
tos natatorios, el espermatozoide se oprime con fuerza al huevo hasta lograr la
fusin de su membrana plasmtica con la del vulo. En tanto el espermatozoide
y el huevo estn preparados para fusionarse, la unin se realiza sin problemas.
Durante las primeras etapas, el grupo de microvellosidades cercano a la cabeza
espermtica parece absorber al espermatozoide, ocasionando la formacin de una
pequea protuberancia en la zona de fusin conocida como cono de fecundacin
(Fig. 3-30). A nivel del huevo y el espermatozoide hay relativamente poca discrimi-
nacin interespecfica, ya que se ha observado que al quitar la envoltura vitelina
de los huevos ocurren fusiones hbridas sin dificultades. No obstante, este tipo
de experimento recalca laimportancia del papel que desempea esta envoltura para
preservar laespecificidad de laespecie durante el proceso de fecundacin. La mem-
brana plasmtica de la clula espermtica es antignicamente diferente a la del
. huevo. Las investigaciones inmunocitoqumicas sealan que despus que ha trans-
currido algn tiempo desde el contacto inicial del espermatozoide es posible descu-
brir en lamembrana plasmtica del huevo alos antgenos que sehallan en la superfi-
cieespermtica. Ello ha conducido alainterpretacin deque lamembrana plasmtica
del cigoto es una membrana mosaica que exhibe aportaciones del huevo y el esper-
matozoide. Adems, lamarcacin fluorescente directa delasuperficie delas clulas
Fig. 3-30. A, Espermatozoide de erizo de mar con la cabeza incorporada a medias en el huevo.
Las microvellosidades del vulo se alargan hacia la cabeza espermtica, en tanto que las que
se encuentran en las dems regiones de la superficie del huevo son cortas y muestran aspecto
de botones. B, La cabeza y segmento medio del espermatozoide estn completamente absorbidos
por el huevo, dejando tan slo la cola al exterior de la superficie. (Cortesa de G. Schatten, de
Sachtten y Mazia, 1976. J. Supramol. Struct., 5:343.)
Fig. 3-31. Preservacin de los componentes de espermatozoides cuyos componentes superfi-
es se han marcado en forma fluorescente durante la embriognesis temprana del erizo de mar.
_:J S puntos blancos en los cuadros oscuros-muestran los componentes fluorescentes de las clulas
=spermticas. Las fotomicrografas a la izquierda se muestran como referencia. Las puntas de
- flechas indican el lugar en que se localiza la mancha fluorescente en el embrin. A y B, Cigoto
- elular; C y D, embrin de dos clulas; E y F, embrin de cuatro clulas; G y H, embrin de
o clulas; I y J, embrin de 16 clulas; K y L, gstrula. (Tomado de Gabel y col., 1979. Cell,
o :207. Cortesa de B. M. Shapiro.)
espermticas muestra quejustodespus dela fecundacin y al iniciodel periodo
:.esegmentacin es fcil discernir en la superficie del cigotoun parche discreto
-: elleva la marca (Shapiroy col., 1980; Fig. 3-31).
Obstruccin de la poliespermia
--------
Cuandoel primer espermatozoide haentradoencontactocon el huevo, esimpor-
:ante que ste prevenga que cualquier otra clula espermtica se fusione con l,
dadoque la consecuencia normal de lapoliespermia (la fecundacin del huevo
por ms deun espermatozoide) estriba enlai~terrupcin temprana del desarrollo
el embrin y sumuerte. Muchas especiesr entre lasque secuenta el erizodel mar,
an desarrolladodos obstrucciones ala poliespermia (revisin de Schuel, 1984).
El primeroconsisteen'una despolarizacin exin;~ac~menterpida, aunque tem-
poral, delamembrana plasmtica, procesoquepuedeconsiderarse cmounaadap-
zacin para evitar el accesoinmediatoal huevodel esperma que noseencuentra
Uno de los pasos finales en la obstruccin lenta de la poliespermia requiere la
~ eracin delaenzima ovoperoxidasa por parte delos grnulos corticales. Durante
~momento de la reaccin cortical, el huevo libera perxido de hidrgeno (H
2
0
2
),
anpoderoso agente oxidante cuya descomposicin qumica, por medio de laovope-
roxidasa, en la membrana de fecundacin ocasiona el intercruzamiento de los gru-
J ?O S detirosin1pe las protenas, lo cual produce un endurecimiento en lamembrana
e fecundacin que la transforma en una envoltura resistente que cubrir al em-
:"rin temprano. O tro efecto posible del H
2
0
2
que desprende el huevo esel dedesha-
cerse de cualquier espermatozoide que haya penetrado la envoltura vitelina. Aun-
que estas clulas espermticas debieron haber quedado fuera por la obstruccin
rpida de la poliesperrnia, los espermatozoides podran ingresar al huevo una vez
ue se diluyera el efecto del bloqueo (aproximadamente despus de un minuto),
_ ocasionar la poliespermia. Por ello, la reaccin espermicida del H
2
0
2
lepropor-
ziona un margen de seguridad adicional al huevo para el proceso de fecundacin.
~esulta interesante destacar que el mecanismo mediante el cual el H20
2
inactiva
espermatozoide es muy similar a la forma en la que las clulas fagocticas del
_ erpo del vertebrado maduro eliminan los patgenos invasores como las bacterias.
Las obstrucciones de la poliespermia constituyen una forma eficaz para preser-
laintegridad gentica del huevo fecundado; Aunque esen el erizo de mar donde
ejor secrnprenden, hay buenos motivos para creer que en otras especies operan
tambin mecanismos similares, si bien una excepcin importante es la que se en-
_ entra en ciertos grupos de vertebrados, como los anfibios urodelos y las aves.
en estas especies, la poliespermia es normal, razn por la cual sehan creado otros
edios para desactivar y eliminar el exceso de espermatozoides en el huevo fecun-
::ado.
ctivacin metablica del huevo
Lafuncin principal del espermatozoide durante las primeras etapas del proceso
aefecundacin radica en activar un programa de fenmenos que ya sehan estable-
cido en el huevo. El que esto sea verdadero puede mostrarse sin dificultades por
.aactivacin de estos mismos sucesos a travs de medios artificiales, como el pin-
zhazo (vase laseccin sobre partenognesis). Aunque sehan establecido de mane-
rasatisfactoria los principales pasos de laactivacin metablica (Epel, 1980; Shapi-
;0y col., 1981), an no logran comprenderse del todo las relaciones entre ellos
'ig. 3-15).
La activacin del huevo comienza con el flujo de Na+que se relaciona con la
iespolarizacin de lamembrana durante la obstruccin rpida de la poliesperrnia,
~roceso que conduce a la liberacin del Ca2+intracelular, la cual al parecer es el
rincipal estmulo para la siguiente serie de fenmenos importantes. Adems de
as reacciones corticales (sobre las ya estudiadas), se presenta un incremento de
es a cincoweces en el consumo de oxgeno (tal vez relacionado con la formacin
el H
2
0
2
); la activacin de laenzima NAD cinasa, que puede facilitar labiosntesis
\
enuevos lpidos de membrana, y una segunda afluencia interna de Na+en sincro-
liberacin de cido (Na' - independiente)
30 AO a NADP
- Fijacin del espermatozoide al receptor
2 - Flujo menor de iones solO cambio
potencial de la e - :'la
18
calcio de los depsitos
(/)
O
o
Z
:J
o
UJ
(/)
60- Libelacifl de cido Na' -r- dependiente
100
} Incremento en e pH intracelular (acidez reducida)
_ Incremento en la sintesis de proteinas
~ Activacin de los sistemas de transporte
300
400
1000 Fusin de los ncleos del huevo y el
_./ espermatozoide
~ Inicio de la sntesis de DNA
6000 - Primera divisin celular
Fig. 3-35. Evolucin temporal de
los fenmenos que se llevan a cabo
durante lafecundacin del huevo del
erizo de mar. (Segn Epel, 1980. En-
deavour, 4:29)
na con un flujo de H+apartir de la clula, que conduce a un aumento en el pH .
intracelular uno acinco minutos despus de realizarse.el contacto inicial entre el
espermatozoide y el huevo. El incremento de pH a su vez ocasiona un aumento
en la sntesis 'de protenas, la activacin de los sistemas de acarreo al interior de
laclula y, por ltimo, al inicio de lasntesis de DNA en anticipacin alaprimera
divisin de lasegmentacin. Todos estos pasos metablicos preparan al huevo para
el principal acontecimiento de la fecundacin: la fusin del material gentico del
vulo y el espermatozoide.
Penetracin del espermatozoide en el huevo y la fusin
de material gentico
Cuando lacabeza del espermatozoide seincorpora al cono de fecundacin del hue-
vo, lamembrana nuclear comienza adesintegrarse. El material nuclear interacta
con el citoplasma de huevo, y la cromatina empieza a dispersarse de su previo
al de
cabo
o del
),En-
pH,
reel
ento
,r de
nera
para
) del
hue-
icta
revio
estado deelevadacondensacin. A medida quelafasededispersin delacromatina
se aproxima a su fin, se constituye una nueva membrana en torno a lo que ya
puede llamarse propiamente el proncleo masculino. Delos dems componentes
citoplsmicos que llegan con el espermatozoide, es posible que la mitocondria y -
la cola no desempeen ningn otro papel durante el desarrollo, si bien persisten
loscentriolos yproporcionan labasepara laformacin del ster del espermatozoi-
de, el cual tienegran importancia enlograr launin delosproncleos masculinos
y femeninos (revisin de Schatten, 1982; Longo, 1984).
El ster del espermatozoide, un racimo de filamentos radiales que emanan de
los centriolos originales del esperma, desempea un papel importante como gua
delasmigraciones delos proncleos. Segn una interpretacin, los filamentos en
expansin del ster seimpulsan hacialasuperficie interna delamembrana plasm-
tica del huevo y ayudan a desplazar al proncleo masculino hacia el centro del
huevo. Cuando los rayos del ster espermtico llegan al proncleo femenino, esta
estructura setraslada rpidamente sobre los rayos hacia el proncleo masculino.
(En estepunto esimportante recordar que enel erizo secompleta lasegunda divi-
sin meitica antes que el espermatozoide entre en contacto con el huevo, lo cual
simplifica lareaccin del proncleo femenino en comparacin con lo que sucede
en esta etapa delameiosis entre los mamferos, en lacual no selleva acabo por
completo la segunda divisin sino hasta que el espermatozoide ha penetrado en
el huevo.) Cuando el proncleo femenino haalcanzado el centro del ster esperm-
tico, su expansin continua empuja a ambos proncleos al centro del huevo, y
conforme establecen contacto entre s, susmembranas sefusionan, yas una sola
membrana envuelve a los cromosomas maternos y paternos durante el proceso
que recibeel nombre defusin pronuclear. Al poco tiempo dellevarseacabo esta
fusin, loscromosomas replican suDNA conobjeto deprepararse para suprimera
divisin desegmentacin. Mientras sedisponen aalinearse enlaplaca delametafa-
se, anticipando la primera divisin de segmentacin, secompleta el proceso de
fecundacin, y el periodo de segmentacin est a punto de iniciarse.
FECUNDACION MAMIFERA
Transporte del espermatozoide a travs del aparato reproductor femenino
de los mamferos
Resta an mucho por aprender sobre laforma enquelosespermatozoides seabren
paso desde la vagina hacia el tero y las trompas de Falopio. En la mayora de
losmamferos comunes, entrelosquesecuentan loshumanos, losespermatozoides
sedepositan en la parte superior de la vagina durante la inseminacin, aunque
entrelosroedores el tero esel sitiodefecundacin. Desdelaperspectiva del esper-
matozoide individual, el recorrido desdeel punto deinseminacin hacia latrompa
deFalopio superior, donde seefecta la fecundacin, representa un trayecto ar-
duo, eh el cual slo una fraccin diminuta de ellos podr alcanzar la vecindad
I
136 GametognesJs yfecundacin
del huevo ovulado. En comparacin asutamao, ladistancia queel espermatozoi-
dedebe recorrer esenorme, yel camino puede estar sitiado con peligros qumicos
bajo laforma decopiosas secreciones decido uobstculos mecnicos, como con-
ducto cervical torcido ycomprimido o trompas deFalopio angostas uobstruidas
por enfermedad. Noobstante, dada laenorme cantidad deespermatozoides conte-
nida en una eyaculacin desemen (de200a 300millones en los seres humanos),
es probable que, en condiciones normales, algunos de ellos lleguen a la trompa
sin perder su capacidad de penetrar y fecundar al vulo.
El primer obstculo al que deben enfrentarse los espermatozoides es la acidez
natural delavagina superior. Lafuncin deestaacidez esobviamente ladeactuar
como unmedio bacteriosttico. Empero, el lquido seminal sirvecomo uneficiente
amortiguador dela acidez y en los ocho segundos posteriores ala inseminacin,
el pH vaginal puede elevarse de 4.3 a7.2 (Fox y col.', 1973). En los roedores, el
semen secoagula al poco tiempo derealizarse lainseminacin yforma un obtura-
dor caracterstico queprevieneel contraflujo delosespermatozoides. Los estudios
embriolgicos quesehan realizado enroedores muestran quelapresencia del obtu-
rador por lo general establece el momento del embarazo.
A partir delavagina superior, algunos espermatozoides sonacarreados extrema-
damente rpido por el aparato reproductor femenino y, en muchos mamferos,
incluyendo los seres humanos, llegan auna de las trompas deFalopio en menos
de30minutos. Esta forma dedesplazamiento esdemasiado veloz como para expli-
carse atravs delos movimientos natatorios delos propios espermatozoides (los
ndices estimados oscilan entre2y4mmpor minuto). Dehecho, lasinvestigaciones
experimentales han mostrado quedurante lafasetemprana yrpida detransporte
del espermatozoide, losespermatozoides quecarecendemotilidad lleganalatrom-
paconlamismavelocidad quelosmviles. Hay indicios dequealgunos componen-
tes del lquido seminal estimulan a que la vagina superior se contraiga, lo cual
pudiera ayudar aimpulsar alosespermatozoides al conducto cervical para surpi-
do acarreo.
Al parecer tambin existeuna fasedetransporte mslentaenlacual losesperma-
tozoides entran al cuello uterino, posiblemente con la ayuda desus movimientos
natatorios, ysealojan enlas abundantes criptas irregulares que flanquean el con-
ducto cervical. Aunque stesueleestar relleno democo espeso, loscambios hormo-
nalesinducidos al momento delaovulacin reducen laviscosidad del moco ypermi-
tenquelosespermatozoides penetren conmsfacilidad, para serliberados enforma
paulatina dentro dela cavidad uterina, una vez que seencuentran en las criptas
cervicales.
Aun cuando secomprende an menos el recorrido delosespermatozoides atra-
vsdel tero, sesabequeenmuchos mamferos el msculo lisodel tero presenta
contracciones espasmdicas durante el clmax del orgasmo, quetal vezatraen algo
del semen recindepositado delavagina hacia el tero. Aunque las contracciones
uterinas pueden ser un factor deaceleracin enel transporte delos espermatozoi-
des, deninguna manera son un elemento indispensable, yaquehay innumerables
casosprovenientes defuentes autorizadas clnicasyexperimentales quecorroboran
laincidencia deembarazos que han ocurrido en ausencia del orgasmo femenino.
)
En estas instancias la travesa por el tero debe depender bsicamente de la propia
actividad de los espermatozoides.
La siguiente barrera enel camino de los espermatozoides seencuentra en laentra-
da a las trompas de Falopio. En las especies que slo ovulan un huevo, uno de
los obstculos es puramente estadstico. Para los espermatozoides que ingresan
auna trompa que no contiene hue o, no es ms que el azar el que evita que logren
el cometido de suviaje, si bien esposible que launin del tero ylatrompa funcione
omo una vlvula que permita o evite el paso de los espermatozoides hacia latrom-
pa. Esta funcin se expresa con ms vehemencia en algunas especies (p. ej., los
ratones) que en otras. Una vez dentro de latrompa de Falopio, los espermatozoides
continan su ascenso gracias a la combinacin de las contracciones musculares
y las corrientes ciliares de la trompa, con el movimiento natatorio de los mismos.
Ya se ha mencionado el incremento en la actividad muscular de las trompas
deFalopio al momento delaovulacin. Es probable que tal aumento sea importan-
te en el transporte de los espermatozoides as como en el recorrido de los vulos
hacia el tero. Las observaciones detenidas de la actividad que exhiben las trompas
uterinas quirrgicamente expuestas en animales experimentales ~ivos indican que
los anillos temporales de contracciones tienden a dividir a la trompa en una: serie
de compartimientos. En cualquier momento dado, el pulsar descendente de los
cilios sobre lapared externa tambin tiende acrear contracorrientes en cualesquiera
delos compartimientos. Es posible que en estos flujos ycontraflujos los espermato-
zoides que seencuentran en la luz de la trompa se dispersen rpidamente por toda
laregin entre los dos anillos adyacentes de contracciones. Si se relajaran estas
zonas aun nivel y seformaran en otro, algunos espermatozoides estaran apiados
en retroceso hacia el tero, y otros en un compartimiento ms prximo al ovario.
La formacin reiterada de dichos compartimientos por la intervencin de los ani-
nos temporales de contraccin a niveles cambiantes dispersa los espermatozoides
por toda la extensin de la trompa.
Es nicamente en el extremo superior de la trompa que adquiere importancia
distintiva la actividad natatoria del espermatozoide. Existen datos que indican que
los espermatozoides seorientan de tal forma que sedesplazan contra un flujo sua-
ve, exhibiendo as lo que se conoce como una respuesta reosttica positiva. Las
orrientes descendentes ciliares de la trompa de Falopio tambin sirven como un
estmulo eficaz de orientacin.
e Durante su travesa por las vas genitales, los espermatozoides estn sujetos a
la influencia poco comprendida de los tejidos maternos, los cuales les permiten
penetrar ms fcilmente las membranas que rodean al huevo. Este fenmeno recibe
el nombre de capacitacin de los espermatozoides, y en su ausencia, no se logra
la fecundacin entre muchas especies de animales. La necesidad de esta capacita-
cin seha demostrado asombrosamente en los intentos de fecundar huevos de ma-
mferos in vitro, dado que la capacidad de fecundacin de los espermatozoides
recin obtenidos con frecuencia es deficiente. No obstante, si primero seles incuba
durante varias horas cerca de los tejidos reproductores femeninos, su ndice de
xito mejora de manera notable. El tiempo requerido para dicha capacitacin osci-
la de menos de una hora en el ratn a cinco o seis horas en los primates y seres
j
I
, ,
humanos. An sedesconocen loscambios queocasiona lacapacitacin; sinembar-
go, existenpruebas dequeimplica laeliminacin delasglucoprotenas querevisten
al espermatozoide mientras est almacenado enlos rganos genitales masculinos.
Tambin hay ciertos indicios dequeseefectan cambios enlamembrana plasmti-
ca del espermatozoide.
Losespermatozoides queno participan directamente enlafecundacin terminan
por ser eliminados del aparato genital femenino, en tanto que los que sehallan
en la cavidad uterina son transportados por el cuello uterino hacia la vagina, y
los que quedan en las trompas de Falopio son ingeridos por clulas fagocticas.
Transporte del huevo
El huevo recin ovulado seencuentra libreenlacavidad del peritoneo, circundado
por la corona radiada. Con el fin de aumentar las posibilidades de que entre a
una delastrompas deFalopio, los cambios hormonales que anteceden alaovula-
cin ocasionan un aumento en la actividad muscular del orificio fimbriado dela
trompa, as como un incremento en la corriente ciliar que conduce descendente-
mente haciaella. Esta combinacin produce fuertes corrientes delquidos entorno
al ovario, en direccin del orificio, y en la mayor parte de los casos el vulo es
transportado demanera eficiente alatrompa. Esta fasesehafilmado conclaridad
enuna pelcula realizada por Blandau (Audiovisuales delaUniversity ofWashing-
ton). Lascorrientes ciliares al interior delatrompa al parecer constituyen laprinci-
pal fuerza impulsora querecibeel vulo, yaquesi sebloquea laactividad muscular
de latrompa conagentes farmacolgicos, el descenso del huevo prosigue asupaso
normal (Halbert ycol., 1976). La corona radiada (clulas del cumulus oophorus)
querodea al vulo esmuyimportante para sutransporte, entanto nopuededescen-
der en forma satisfactoria sinesta capa. En gran medida setrata deuna funcin
demasa, ms quedemovilidad intrnseca, puescualquier objeto inerte delamisma
dimensin tambin puede bajar demanera eficiente haciala trompa. En los seres
humanos toma unos tres das para que el huevo no fecundado recorra la trompa
de Falopio.
Viabilidad de los vulos y espermatozoides
Tanto el vulo como el espermatozoide poseen una viabilidad limitada una vez
libres enel aparato reproductor femenino. Cuando selelibera del ovario, el vulo
comienza de inmediato a sufrir ciertos cambios que pueden caracterizarse como
envejecimiento o deterioro. Entre otras alteraciones, su citoplasma cada vez se
torna ms granuloso, acompaado deuna depresin general delaactividad meta-
blica, cuya evolucin tan slo seinvierte si selleva a cabo la fecundacin. En
la mayora delos mamferos, incluyendo alos seres humanos, el huevo ovulado
debeser fecundado enel transcurso de24horas, delocontrario "madura enexce-
so" y pierde su viabilidad.
ibar-
'isten
inos.
mti-
unan
alIan
na, y
ticas.
dado
itre a
vula-
de la
ente-
.orno
110 es
ridad
hing-
rinci-
cular
paso
orus)
seen-
ncin
usma
seres
ompa
!avez
vulo
como
fez se
meta-
n. En
ulado
exce-
Gametognesis y tecundecion 139
Prevalece an mucha informacin errnea acerca de las proezas de los esperma-
tozoides durante su recorrido yduracin de vida. Sesola pensar que lapersistencia
desu motilidad equivala asu capacidad de fecundacin. Sin embargo, en laactua-
lidad se sabe que la movilidad perdura mucho ms que su capacidad de fecunda-
in. Por ejemplo, los espermatozoides del conejo, pierden su capacidad de fecun-
dacin despus de unas 30 horas en el aparato genital femenino, en tanto que su
movilidad puede durar hasta ms de dos das. Los clculos actuales estiman que
el potencial de fecundacin de los espermatozoides de seres humanos en el aparato
reproductor femenino es de uno o dos das, en tanto que su movilidad persiste
quiz durante el doble detiempo. En algunas especies, lasupervivencia delos esper-
matozoides en los rganos genitales internos delahembra seprolonga extraordina-
riamente. En algunos murcilagos, la ipseminacin ocurre en otoo y los esperma-
tozoides permanecen latentes durante lahibernacin, yno essino hasta laprimavera
siguiente, varios meses despus, que se lleva a cabo la ovulacin y fecundacin.
En el pollo, los espermatozoides se almacenan en criptas en la pared del oviducto
y se liberan poco a poco cuando los huevos pasan por l en el transcurso de tres
semanas.
Debe recalcarse que las aseveraciones anteriores son aplicables a los espermato-
zoides eyaculados en el aparato reproductor femenino. Su viabilidad difiere exten-
samente en condiciones ambientales distintas. En el epiddimo y el conducto defe-
rente, donde permanecen inmviles, los espermatozoides de seres humanos retienen
su capacidad plenamente por varios das, y su movilidad tan slo seestimula cuan-
do se mezclan, al momento de la eyaculacin, con las secreciones de las vesculas
seminales, la prstata y las glndulas bulbouretrales. Gran parte del aumento en
el metabolismo de los espermatozoides activados sedebe alos sustratos que provee
el lquido seminal, como la fructosa, producida por las vesculas seminales (Mann,
1964).
El que la vida de los espermatozoides despus de su activacin dependa en gran
medida del ritmo con que consumen su abastecimiento limitado de energa poten-
cial seha mostrado claramente en las investigaciones experimentales de insemina-
cin artificial. La movilidad de los espermatozoides en semen recin eyaculado
puede verificarse al enfriarlo. En estas condiciones, los espermatozoides no disipan
de inmediato su suministro energtico, lo que permite el envo areo de semen de
ganado de raza pura a miles de kilmetros de distancia, el cual se introduce en
la hembra mediante una jeringa, para producir con xito descendientes del animal
en cuestin. El rpido avance de las tcnicas en criobiologa han hecho realidad
los bancos de espermatozoides de seres humanos almacenados, incluso es factible
congelar embriones tempranos de mamferos, por periodos prolongados, para per-
mitir la continuacin de su desarrollo normal tras su descongelacin.
Unin de los gametos
(
Hasta ahora, la mayor parte de los estudios sobre fecundacin mamfera se han
llevado a cabo en huevos de ratn fecundados in vitro (Wassarman, 1987). A la
I
140 Gametogn . dacin
fecha, losresultados han mostrado notables paralelismos conlosprincipales fen-
menos queocurren enel proceso defecundacin del erizo demar. An queda por
ver si operan fa ores adicionales en la fecundacin que serealiza al interior del
aparato reproductor femenino, adems delosquesehandescubierto enlosestudios
in vi/ro.
Enlosmamferos, lafecundacin sellevaacabo enlaparte superior delastrom-
pasdeFalopio (Fig. 3-36). Antes deentrar encontacto conlamembrana plasmtica
del hue o, los espermatozoides primero deben penetrar las clulas de la corona
radiada, y acontinuacin lazona pelcida. Para llegar aestaltima, deben sufrir
lareaccin acrosmica. Esta reaccin, para lacual esunrequisito lacapacitacin,
esel medio por el cual seliberan las enzimas lticas, almacenadas en el acrosoma
del espermatozoide (Fig. 3-37), para facilitar el paso destos atravs delascubier-
a tas del huevos El paso inicial delareaccin acrosmica estriba enlafusin localiza-
dadelasporciones delamembrana acrosmica externa conlamembrana plasmti-
casuprayacente del espermatozoide. Estas regiones sedesintegran al poco tiempo,
para permitir la liberacin de las enzimas solubles que contiene el acrosoma.
Los datos obtenidos deinvestigaciones in vitro sugieren que launin del esper-
matozoide yel inicio delareaccin acrosrnica serelacionan con el contacto entre
lamembrana plasmtica del espermatozoide ylasdiversas decenas demilesdeglu-
coprotenas ZP-3 que seencuentran enel margen externo delazona pelcida. To-
dava sedebate hasta qupunto puede iniciarse lareaccin acrosmica mamfera
antes que el espermatozoide se adhiera a la zona pelcida.
Durante el proceso in vivo, losespermatozoides deben atravesar lacorona radia-
dacelular antes quelleguenalazona pelcida y esindudable quelosmovimientos
flagelatorios de sus colas desempean una funcin importante durante esta fase
de aproximacin al huevo. De manera tradicional seha pensado que la enzima
hialuronidasa, que libera el acrosoma, facilita lapenetracin del espermatozoide
atravs dela corona radiada al disolver el material dela matriz extracelular que
circunda lasclulasdelacorona radiada. Sinembargo, si nohaocurrido lareaccin
acrosmica cuando el espermatozoide llega alazona pelcida, no debiera haber
obvia necesidad deque el espermatozoide liberara hialuronidasa en esemomento
si lafuncin principal deestaenzimaesladepermitir queel espermatozoide penetre
la corona radiada.
Una vez realizada la reaccin acrosmica, el espermatozoide seabre paso por
unestrecho camino atravs delazona pelcida, gracias alaactividad delaprotei-
nasasemejante alatripsina, laacrosina, lacual estunida alamembrana acrosmi-
cainterna. Al terminarse lareaccin acrosmica, esta membrana queda expuesta
alasuperficie delacabeza del espermatozoide. Esterecorrido qumico por lovisto
funciona mano amano conlaactividad quedesempea lacoladel espermatozoide
para impulsarlo a travs de la zona pelcida.
Una vez que ha salido dela zona pelcida, el espermatozoide entra al espacio
perivitelino relleno delquido entre lazona ylamembrana plasmtica del vulo.
Lareaccin acrosmica al parecer ocasiona uncambio enlamembrana plasmtica
del espermatozoide que permite su fusin con la de otras membranas celulares.
El contacto entre lasmembranas del espermatozoide yel huevo serealiza deinme-
diato y es posible que sefacilite por la intervencin delas microvellosidades que
seproyectan en el vulo. En muchas especies aparece un abultamiento en el sitio
en que establecen contacto el espermatozoide yel vulo, el cono de fecundacin.
Cuando se fusionan las membranas plasmticas del huevo y el espermatozoide,
el cono seretrae, ylacabezadel espermatozoide esacarreada al vulo para comple-
tar/ la fase de penetracin (Fig. 3-38).
As como sucede en el erizo de mar, es importante que el huevo prevenga la
poliespermia una vezquehapenetrado laprimera clulaespermtica, locual logra
mediante obstrucciones similares alas mencionadas antes en estecaptulo. Dado
queresulta mucho msdifcil estudiar muchos aspectos delafecundacin enmam-
feros queenloserizos demar, lamayor parte delasinvestigaciones sobrerespuestas
intercelulares durante la fecundacin secontinan realizando en este mamfero
roedor. Noobstante, losestudios recientesrealizados enhuevosdemamferos mues-
tran una similitud notable entre ambos tipos (Fig. 3-39). La obstruccin lenta de
lapoliespermia definitivamente sellevaacabo, pero el que ocurra laobstruccin
permanece an como una pregunta sin respuesta.
Desarrollo y fusin de los proncleos
Tras la fusin del espermatozoide y el huevo, una secuencia ordinaria de pasos
conduce por ltimo alaunin delosproncleos masculinos yfemeninos. Al entrar
el espermatozoide, seinterrumpe rpidamente laobstruccin delasegunda divisin
meitica del vulo yselibera el segundo cuerpo polar, dejando tras des unncleo
haploide femenino. Poco despus deingresar al huevo sedesintegra lamembrana
nuclear del espermatozoide, para as permitir lainteraccin desus contenidos nu-
cleares con el citoplasma del huevo, lo cual resulta en la descondensacin dela
estrechamente apiada cromatina nuclear ylasustitucin por histonas, tal vezderi-
vadas del oocito, de las protenas semejantes a las protaminas que estaban fijas
al DNA espermtico condensado. Entre los mamferos, como en la trucha (pg.
92), hay datos considerables de esta sustitucin durante la espermiognesis. Las
protaminas al parecer facilitan lacondensacin extremadamente elevada delacro-
matina nuclear que serequiere para el empaquetamiento adecuado del ncleo de
laclulaespermtica madura, aunque ladescondensacin delacabeza espermtica
es ms compleja que el simple intercambio deprotaminas por histonas. Durante
las primeras etapas deladescondensacin, tambin sellevaacabo ladescomposi-
cinenzimtica delosmuchos enlaces dedisulfuro queconservan lacondensacin
de la cromatina espermtica.
Al poco tiempo seforma una nueva membrana pronuclear en torno al ahora
material nuclear descondensado del espermatozoide. A medida quelosproncleos
masculinos y femeninos seaproximan entre s, selleva acabo la sntesis deDNA
enel DNA delos cromosomas haploides, loscuales, adiferencia del erizo demar,
secondensan en los proncleos dtal modo que al desintegrarse las membranas
delos proncleos masculinos y femeninos, los cromosomas seordenan en forma
inmediata durante la metafase del huso mittico en desarrollo.
Membrana acrosmica
interna
Ncleo
,Fig. 3-38. Diagrama de las etapas de ingreso de un espermatozoide de criceto al vulo. A, B,
Fusin de la cabeza espermtica con el citoplasma del huevo. e, Hinchamiento del ncleo esper-
tico. O, E, Formacin de la envoltura nuclear en torno al ncleo espermtico abultado. (Modifica-
de Yanagimachi y Noda, 1970. Am. J. Anat., 128:429.)
Fecundacin in vitro
Muchos delos principales avances realizados para comprender los fenmenos de
lafecundacin mamfera y delaembriologa temprana sedeben alarelativa senci-
r:
Fig. 3-39. Diagrama que ilustra elproceso de fecundaciny constitucin de los cuerpos polares.
A, Paso del espermatozoide a travs de la zona pelcida. B, Inicio de la reaccin cortical (desapari-
cin de los puntos negros) y comienzo de los cambios de fecundacin (sombreado) en la zona
pelcida. e, Ingreso del espermatozoide al huevo. O, Liberacin del segundo cuerpo polar yforma-
cin de los proncleos masculinos y femeninos. E, Aproximacin de los proncleos. F, Metafase
de la primera divisin de la segmentacin.

I
Gametognesis y fecundacin
Hezcon la que es posible en la actualidad lograr la fecundacin in vitro, la cual
presenta tres requerimientos bsicos: 1)suministro adecuado deespermatozoides;
_) un huevo maduro por lo menos, y 3) condiciones adecuadas para que el esperma-
tozoide penetre al huevo.
La obtencin de una reserva adecuada de espermatozoides representa el requeri-
miento ms sencillo de satisfacer, pues en los mamferos, incluyendo a los seres
humanos, es preferible utilizar espermatozoide eyaculado que el obtenido directa-
mente delos testculos, por lamaduracin que ocurre en el epiddimo. En laactuali-
ad es posible obtener mayor cantidad de huevos que antes, gracias a las tcnicas
que permiten la superovulacin, proceso que puede lograrse mediante manipula-
iones hormonales o administracin de ciertos frmacos promotores de la fecundi-
dad. Si sepermite que los huevos sean ovulados, es posible recolectarIos al limpiar
el aparato genital femenino poco despus de la ovulacin. En los seres humanos,
pueden recabarse los vulos maduros prximos a ser ovulados directamente del
ovario mediante laparoscopia, tcnica que permite lavisualizacin directa del ova-
rio. Asimismo es comn utilizar imgenes ultrasnicas para estimar cundo habr
de llevarse a cabo la ovulacin.
Los primerosintentos que serealizaron para fecundar huevos in vitro no tuvieron
xito. Esto se debi en gran medida a que en ese entonces no se tenan suficientes
conocimientos acerca del fenmeno de la capacitacin. Cuando result evidente
ueel espermatozoide delamayor parte de las especies de mamferos deba estable-
oer contacto con los tejidos reproductores femeninos durante algn tiempo para
ue sufriera la reaccin acrosmica, seaadieron segmentos del oviducto al medio
e cultivo en el plato, junto con los vulos y los espermatozoides, dando como
resultado una asombrosa mejora en el xito de la fecundacin en "probeta".
Partenognesis
L '0todos los huevos requieren ser penetrados por el espermatozoide para iniciar
~desarrollo embrionario. En algunos grupos de invertebrados, as como en ciertas
especies dispersas de vertebrados (algunos peces, unas cuantas lagartijas eincluso
guajolotes), los huevos que no han sido fecundados pueden activarse y desarrollar-
seen individuos viables como parte del ciclo normal de vida, mediante el proceso
:;.uese conoce como partenognesis. La partenognesis artificial de los huevos
uede estimularse en el laboratorio por una diversidad de medios; por ejemplo,
51el caso de la rana la forma clsica de producirla consiste en pinchar sus vulos
ron una aguja que se ha sumergido en sangre. Sin embargo, una gran proporcin
fe los huevos a los que se estimula para llevar a cabo la partenognesis no logra
:::esarrollarse normalmente, y es muy probable que esto sedeba aque sedescubren
os genes recesivos nocivos en embriones haploides. Los embriones partenogenti-
:os que s sobreviven suelen ser diploides, tal vez por haber conservado el segundo
cuerpo polar. Entre los mamferos, los individuos partenogenticos son gentica-
zaente femeninos, dado el complemento cromosmico XX de la hembra. Por otra
;arte, el que la hembra en las aves y los reptiles sea heterogamtica permite el
~esarrollo tanto de machos como de hembras por medio de la partenognesis.
146 Gametoge-
DETERM'lNAo. O DEL SEXO
Precisamen e an es de finalizar el siglo, a Henking (1891), mientras estudiaba el
patrn romosmico de ciertos insectos, lellam la atencin el que un par de cro-
mosomas se ezagaba respecto a los dems cuando sedesplazaban al huso durante
las divisiones orrespondientes a la maduracin. Si bien resultaba interesante, en
un prin ipio u importancia no fue obvia. A la manera de los matemticos, quienes
suelen usar las ltimas letras del alfabeto para designar con cierta reserva las incg-
nitas esus problemas, sebautiz a los miembros de este par de cromosomas con
X e . _ luches aos despus, McClung (1902) y Wilson (1905) llegaron alaconclu-
sin de que esta pareja de cromosomas participaba en la determinacin del sexo.
r -. Casi todos los animales estudiados crticamente desde eseentonces presentan dife-
rencias sexuales que consisten en uno de los pares de cromosomas, tanto en las
clulas somticas como en las germinales. En un sexo, todos los pares de cromoso-
mas estn simtricamente apareados (X-X), en tanto que en el sexo opuesto, los
miembros de los pares cromosrnicos son bastante diferentes entre s en tamao
y forma (X-Y). En la actualidad es obvio que hay algo en el cromosoma Y, mas
no en el X, que explica la masculinidad. En algunos grupos de vertebrados (p.
ej., aves), los pares cromosmicos del macho son semejantes, en tanto que los
de la hembra presentan diferencias sexuales.
La unin de los gametos yladeterminacin gentica del sexo tan slo constituyen
el inicio de un largo proceso de diferenciacin sexual, de los cuales apenas empie-
zan acomprenderse muchos aspectos. En el captulo 17setratan los pasos existen-
tes en latraduccin del sexo genotpico al fenotipo sexual. Los datos experimentales
recientes muestran que esprobable que el sexo fenotpico no est tan completamen-
te fijo al momento de lafecundacin como alguna vez sepens. Sin duda la recom-
binacin cromosmica proporciona la pauta de desarrollo hacia un sexo o el otro,
si bien las dosis masivas de hormonas o la ausencia de receptores hormonales ade-
cuados puede inhibir o modificar esta pauta. Nuestro conocimiento de las discre-
pancias ocasionales entre el sexo genotpico y fenotpico proviene en gran medida
de la presencia o ausencia de cromatina sexual en las clulas.
En 1949Barr yBertram fueron los primeros en ofrecer pruebas de las diferencias
sexuales en los ncleos fijos yteidos de clulas somticas sin-divisin. Estos inves-
tigadores descubrieron que en los ncleos de las clulas femeninas por lo general
hay una masa de cromatina conspicua, de localizacin caracterstica, ausente en
el ncleo de las clulas tomadas del macho (Fig. 3-40). Esta masa de cromatina
recibe el nombre de cromatina sexual y en la actualidad se piensa que representa
uno de los cromosomas X, el cual permanece muy condensado en el ncleo de
la interfase (G,). Lyon (1961) postul que la masa de cromatina sexual indica la
inactivacin de uno de los cromosomas X, pues para el desarrollo normal de ma-
chos y hembras <slo se requierela actividad de un cromosoma X, dado que la
actividad cromosmica del X adicional seelimina demanera eficiente al condensar-
lo. Por consiguiente, la cromatina sexual representa la expresin morfolgica de
un mecanismo de control gentico. /
/
/
Gametognesis v fecundacin 147
Nucleolo
A B e
Fig. 3-40. Dibujo de los ncleos de clulas epiteliales humanas para mostrar la cromatina sexual
echas). A, Ncleo de una membrana XX normal, con un cromosoma X inactivado. B, Ncleo
ce un macho XY normal, sin inactivacin del cromosoma X. e, Ncleo de una membrana con
trisornla XXX, con dos cromosomas X inactivados.
Durante lasegmentacin embrionaria temprana no suelendetectarse loscuerpos
de las cromatinas sexuales. Las pruebas actuales sugieren que dos cromosomas
X funcionan de modo activo durante la segmentacin temprana, pero a medida
que se constituye el trofectodermo, y despus el endodermo primitivo, durante
laetapa del blastocisto temprano (Cap. 4), el cromosoma X paterno se inactiva
enforma selectivaencada uno de estos tejidos embrionarios (Fig. 3-41). Cuando
lamasacelular interna (que seconstituir apartir del propio embrin) toma forma
casi al final delaetapa blastocstica, seinactiva un cromosoma X por clula, aun-
queal azar; esdecir, el materno opaterno enunacluladada. Estemismo cromoso-
ma se har inactivo en todas las clulas que desciendan de la primera en la cual
se llev a cabo la inactivacin del cromosoma X. Aunque resulta obvio que la
diferenciacin de la clula requiere la inactivacin de uno de los cromosomas X,
el mecanismo ylarazn subyacentes continan sinexplicarse. Deigual importan-
cia, pero todava sin respuesta, son las preguntas acerca de: 1) la forma en que
uno de los cromosomas X permanece inactivado durante las divisiones mitticas
sucesivas, y2) lamanera enque los cromosomas X condensados de los oogonios
se reactivan durante la oognesis (Gartler y Riggs, 1983).
CONSTITUCION DE LA POLARIDAD EN EL EMBRION
El cuerpo delosvertebrados esbilateralmente simtrico ypuede observarse respec-
to a tres ejes polares: el eje craneocauda/, el dorsoventra/ y el medio/atera/. La
manera enque seimprimen enel huevo esfrico contina siendo uno delosprinci-
pales misterios de la embriologa.
El vulo en proceso de desarrollo dentro del ovario anfibio ya est altamente
polarizado, anivel morfolgico, enmitades animales yvegetales (lapolaridad pri-
maria del huevo). Esto esevidente asimple vistapor lasconcentraciones demayor
densidad de los grnulos de pigmento en la mitad animal, aunque tambin hay
gradientes de otras estructuras, El ncleo (la vescula germinal) se localiza cerca
del polo animal, yhayungradiente dedensidad creciente por parte delosribosomas
Cigoto
Espermatozolde x
P
~/ X
M
x"
Oocito x
M
Cuerpo polar
Ambas X
___ activas
~I
Mrula de
XM XP
~
Blastocisto temprano
TE XM~
Inactivacin de la X en x
P
del trofectodermo
(Ambas X Oocitos
activas)
~
Blastocisto tardo medio
TE XM-XI'
PE XM~
~. . Etapa muy tarda delblastoclsto

Meiosis a la etapa del cilindro del huevo
R
... ~, TE XM
eactivacion Oogonio
Inactivacin _, ~ PE XM
aleatoria ~ ICM XM
de la X
Inactivacin de la X en x"
del endodermo primitivo
(Inactivacin aleatoria de
la X en la masa celular
interna)
)tM XP
/
Patrones de inactivacin
permanente de la X en
clulas somticas
Fig. 3-41. Representacin esquemtica del ciclo de inactivacin y reactivacin del cromosoma
X en el ciclo de la vida humana. X'", cromosoma X materno; X P, cromosoma X paterno; ICM, ma-
sa celular interna; PE, ectodermo primitivo; TE, trofectodermo. Los cromosomas (X" o X P) en los
crculos grises estn inactivados. Adaptado de Gartler y Riggs [1983].)
y los grnulos de glucgeno hacia este mismo polo. A su vez, tanto el tamao
y la concentracin de las plaquetas de la yema aumentan notablemente hacia el
polo vegetal. En los urodelos, el eje craneocaudal del futuro embrin coincide casi
con una lnea trazada por los polos animal y vegetal, si bien estos ejes no son exacta-
mente los mismos en el caso de los anuros. No obstante, una generalizacin til
que puede hacerse con respecto a los anfibios es que la regin del polo animal
acabar por constituir la cabeza, en tanto que el vegetal dar lugar a la cola. Aun
cuando el eje craneocaudal se constituye por lo visto antes de la fecundacin, se
desconocen los factores que ocasionan su establecimiento en el ovario.
O La fecundacin es el siguiente acontecimiento importante en la constitucin de
los ejes polares en el huevo anfibio. Poco despus de la fusin del espermatozoide
y el huevo comienzan algunas de las principales reordenaciones que se llevan a
cabo en las regiones citoplsmicas del huevo, entre las cuales una implica laconver-
gencia general del citoplasma que se encuentra bajo la delgada regin cortical (<
10 Lm) hacia el punto de entrada del espermatozoide; otra, la traslacin de 30!)
entre el citoplasma subcortical y la corteza suprayacente y, la consecuencia ms
obvia de estas reordenaciones citoplsmicas, lareduccin dedensidad en los grnu-
la
<l-
OS
ho
el
asi
ta-
itil
nal
.un
, se
,de
.ide
na
ver-
30
ms
mu-
depigmento oscuro que seencuentran en la regin del hemisferio animal, sobre
;:,zona ecuatorial, en contraposicin al punto de entrada del espermatozoide. En
zzuchas especies deanfibios, como laRana, esta zona de menor pigmentacin toma
;::forma de media luna, y por ello se conoce como la creciente gris (Fig. 3-42).
Su ubicacin depende del sitio de entrada del espermatozoide dado que aparece
en el lugar opuesto del huevo.
Las investigaciones descriptivas yexperimentales (Gerhart ycol., 1986) han mos-
trado que el punto medio de la creciente gris equivale al punto dorsal intermedio
del cuerpo, lo cual determinar el eje dorsoventral del futuro embrin. Cuando
=eje dorsoventral se sobreimpone en el que fuera el eje cefalocaudal, tambin
:econstituye el eje mediolateral restante, sencillamente por consideraciones geom-
- icas. As, aun antes del inicio de la segmentacin quedan establecidos los ejes
rincipales del embrin anfibio y finaliza la polarizacin secundaria.
La creciente gris ha cautivado durante mucho tiempo el inters de los bilogos
~el desarrollo (Brachet, 1977), no slo por tratarse de un acontecimiento importan-
:esino porque representa el sitio futuro de la formacin del labio dorsal del blasto-
oro (Fig. 5-8C), el cual ha recibido el nombre de organizador embrionario por
Polo animal
Polo animal
/ Ncleo del huevo
Trayectoria del
espermatozoide
IProncleos
A B
Polo vegetativo Polo vegetativo
Polo animal
Trayectoria del
espermatozoide
Ventral
Creciente gris
e
Polo vegetativo
Fig. 3-42. Diagrama que ilustra la fecundacin y formacin de la creciente gris en el huevo anfi-
bio. A, El espermatozoide entra en contacto con el huevo. B, Aproximacin de los proncleos del
huevo y espermatozoide y desplazamiento cortical temprano. e, Formaci6n de la creciente gris
como resultado del desplazamiento cortical.
el trascendental papel quedesempea enlaregulacin del desarrollo. Varios experi-
mentos (Fig. 3-43A a C) han sugerido que la polarizacin secundaria y el desa-
rrollo normal subsecuente en los embriones jvenes no puede llevarse acabo en
ausencia de la creciente gris.
Los experimentos querealiz Curtis (1960,1962) con elegantes tcnicas parecie-
ron proporcionar una comprobacin definitiva del papel central de la creciente
grisenla onstitucin del ejedorsoventral, as como enlageneracin del organiza-
dor embrionario. Curts injert pequeos segmentos delacorteza delacreciente
gris en la regin ventral anticipada de un embrin por segmentarse y obtuvo la
formacin de un nue o labio dorsal y eje embrionario secundario (Fig. 3-43E).
Sinembargo, losexperimentos subsecuentes (Kirschner ycol., 1980)indicaron que
esposible disociar el sitio delacreciente gris del futuro labio dorsal del blastoporo
-de hecho reacomodar lafijacin del ejedorsoventral, para que lacreciente gris
original selocalice en el lado ventral del embrin. Esto selogr sencillamente al
conservar al embrin por segmentarse ental posicin quelacreciente grisseencon-
trara hacia abajo, con respecto alagravedad (Fig. 3-44). En los experimentos de
trasplante cortical deCurtis, los embriones huspedes quiz sehubieran ladeado
deforma similar alaquesemuestra enlafigura 3-44. Por consiguiente, esposible
quebastara el posicionamiento del husped, yno el injerto cortical, para ocasionar
la formacin del embrin secundario que se ilustra en la figura 3-43E.
Cmo, entonces, explicar laconstitucin del ejedorsoventral? Segn-los estu-
dios recientes efectuados en el laboratorio deGerhart (Gerhart y col., 1986), los
pasos posiblemente sesucedan delasiguienteforma: laentrada del espermatozoide
ofrece una gua que sirvepara estimular y orientar el desplazamiento de 30 de
lacorteza, conrespecto al citoplasma subcortical, quepor ltimo dacomo resulta-
do laformacin delacreciente gris. Los factores claveenlafijacin del ejedorso-
ventral son: 1) la activacin deuna regin especfica del citoplasma vegetal y su
desplazamiento hacia lacorteza del polo vegetal; 2) amedida que sellevaacabo
lasegmentacin, lainclusin del citoplasma vegetal activado enlasclulas tblasto-
meras) queseubican cercadelaregin delacreciente gris (futura regin dorsome-
dial), y3)unefecto inductor deestasclulasenlasclulasvecinas queseencuentran
en la regin ecuatorial (entre los hemisferios animales y vegetales), demodo que
sepreparan para los movimientos gastrulatorios y la formacin del labio dorsal
del blastoporo.
Gimlich yGerhart (1984) han demostrado endos formas lapoderosa influencia
que ejercen las blastmeras contenedoras del citoplasma activado. Sesabe que a;
irradiar el hemisferio vegetal dehuevos en proceso deposfecundacin temprana
con rayos ultravioleta, seobstruye laconstitucin delos ejes del cuerpo (aparen-
temente al prevenir las reordenaciones citoplsmicas internas) y seforma un em-
brin "ventral" desprovisto derasgos caractersticos (Fig. 3-45). Cuando seinjer-
tan blastmeras vegetales activadas deundonador normal aunembrin irradiado.
el proceso deestablecimiento delos ejes seiniciayprocede un desarrollo normal
Demanera anloga, el injerto deuna blastmera ventral activada en la que se
laregin ventral del embrin normal provoca laformacin del ejedorsal secunda-
rio y un embrin duplicado (Fig. 3-45).
Punto de entrada del
esperma- espermatozoide inclinado
tozoide en la parte ms elevada
(en la etapa temprana)
Gstrula
con dos
blastoporos
Embrin
doble
Punto de entrada del espermatozoide
inclinado en la parte ms elevada normal
(en la etapa tarda)
Fig. 3-44. Experimentos que demuestran que no existe necesariamente una conexin directa
entre la creciente gris y la ubicacin del blastoporo, en el embrin anfibiQ,. (Primera lnea) En un
embrin normal, el labio dorsal del blastoporo emerge en la regin de la creciente gris. (Segunda
lnea) Si se inclina un huevo recin fecundado 90, de manera que el punto de entrada del esperma-
tozoide se encuentre en la parte superior extrema, el blastoporo se forma en ese lugar, a 180
de la creciente gris. (Tercera lnea) Si se inclina un huevo recin fecundado 90 durante la etapa
crtica, se forman dos blastoporos: uno en la creciente gris y el otro en el polo superior ms extremo
del huevo, constituyndose un embrin doble. (Cuarta lnea). Despus del periodo crtico, un em-
brin inclinado 90 forma un blastoporo en la ubicacin normal, desarrollndose en embrin nor-
mal. (Segn experimentos de Kirschner y Gerhart, 1981. Bioscience, 31:381.)
El anlisis del mecanismo quevalora lapolaridad enembriones deavesseinicia
con una antigua observacin hecha por van Baer (1828) que plantea que cuando
los huevos deaves seencuentran con su extremo en punta hacia la derecha, y su
extremo chato hacia la izquierda, el embrin seorienta en forma perpendicular
Receptor irradiado con
rayos UV
Desarrollo normal ,.......... ~.: ... < J . " . :. .' : . : . . :
....----. '?'l.'
,.' ,.:< :,-
.t _ '
Receptor normal
/
Sin
trasplante
o
Embrin @
"ventralizado"
Sin eles
corporales
Embrin
normal
trasplantada
trasplantada
Fig. 3-45. Experimentos que muestran el papel que desempean las clulas vegetales bajo
uturo labio dorsal del blastoporo al estimular el inicio de la gastrulacin./zquierda, al irradiarse
hemisferio vegetal de un embrin anfibio con rayos ultravioleta, no se lleva acabo la gastrulacin,
ando como resultado un embrin "ventralizado". Centro, al trasplantarse una blastmera vegetal
rmal en un embrin irradiado con rayos UV, se "rescata" al embrin y se lleva a cabo un desarro-
lonormal. Derecha, al injertarse una blastmera vegetal a un recipiente normal, se forma un segun-
o labio dorsal del blastoporo, dando como resultado un embrin normal. (Adaptado de los experi-
entos de Gimlich y Gerhart, 1984.)
sobreel ejelargo, conlacabeza alejada del observador yconlacola hacia l (Fig.
3-46A). Aunque enunprincipio sepens queladeterminacin axil sellevaacabo
enel ovario, investigaciones posteriores mostraron queocurre durante lasegmenta-
in temprana, cuando el huevo fecundado seencuentra enel tero (Fig. 3-18).
El embrin enproceso desegmentacin est representado por un disco plano de
lulas enlasuperficie delayema (Fig. 4-10) ylas clulas delasuperficie externa
154 Gametognesis yfecundacin
setransforman en la parte dorsal del embrin, en tanto que las ms cercanas a
layema llegan aser laseccin ventral. As, esposible predecir el ejedorsoventral
mediante la posicin de las clulas o capas de clulas con respecto a la yema.
La valoracin del ejecraneocaudal (anteroposterior) es un suceso crtico en la
estimacin de polaridad del ave. Vintemberger y Clavert (1960) mostraron que
esteejesefijauna vez queel huevo fecundado haestado 14a 16horas enel tero.
Cules son las circunstancias relativas ala fijacin dela polaridad en el tero?
Enlas25horas enquetranscurre laovulacin ylapostura del huevo enlagallina,
quesehafecundado enel orificio del oviducto (Fig. 3-18), permanece cinco horas
descendiendo en l, mientras sesecreta la albmina que rodea a la yema en esa
regin. En lassiguientes 20horas, el huevo estar enel tero, donde, con suextre-
mo puntiagudo generalmente en direccin de la cloaca, segirar a casi 10a 15
revoluciones por hora, mientras seforma el cascarn. Aunque la albmina gira
Clulas desprendidas
Direccin de rotacin del
huevo
e Embrin> de '6 horas D Embrin ms joven
Fig. 3-46. I?fecto de la gravedad en la polaridad del embrin de pollo. A, En el huevo normal,
el eje anteroposterior (A-P) del embrin se forma perpendicularmenfe al eje entre las dos chalazas.
B, Seccin transversal de un huevo girando en el tero (flecha exterior). A medida que el huevo
tiende a enderezarse, el blastodermo se inclina de manera ligera. Las clulas desprendidas debajo
de la superficie de la parte superior ms elevada del blastodermo ladeado delimita el futuro extremo
posterior del embrin. e, Al suspenderse un embrin mayor por una de las chalazas, su eje A-P
se constituye en el ngulo recto usual con respecto a la chalaza. D, Si la yema se suspende de
forma similar, antes de la fijacin del eje A-P, ste se fijar de modo paralelo a las chalazas,
con el extremo posterior en la parte superior ms elevada. (Adaptado de Kochav yEyal-Giladi, 1971.)
al interior delamembrana deste, layemanolohace, explicndose as el torcimien-
to en espiral dela chalaza que seexhibe en cualquiera delos dos extremos de la
yema (Fig. 3-25). Aun cuando la yema no gira, est ligeramente inclinada por el
tirn queejercelaalbmina, locual ocasiona queel embrin propio (el blastoder-
mo) seinclineconrespecto alasuperficie gravitacional plana (Fig. 3-46B). Durante
el periodo de 14a 16horas en el tero, intervalo en el que se determina el eje
craneocaudal del embrin, el blastodermo sedeshace delasclulas que seencuen-
tran en la parte ms superior con respecto a la fuente de gravedad, y la regin
delacual caen estas clulas setransforma enel extremo caudal del embrin (Fig.
3-46B) ..
Kochav y Eyal-Giladi (1971) demostraron que la orientacin del blastodermo
con respecto alagravedad esun factor importante que serelaciona con lavalora-
cindel ejecraneocaudal. Al extraer huevos uterinos tempranos yhacerlos pender
por lachalaza en orientaciones anormales (Fig. 3-46C), el extremo caudal del eje
embrionario invariablemente apareca enel extremo mssuperior del blastodermo.
Losresultados deesteexperimento ydel desarrollo normal concluyen quelaorien-
tacin del blastodermo con relacin al campo gravitacional terrestre constituye
un factor crtico en ladeterminacin dela direccin del ejecraneocaudal del em-
brin. A estasazn, parece quelanica forma decorroborar definitivamente esta
posibilidad -en particular en lo que respecta al papel que desempea laelimina-
cin de clulas de la regin ms superior del blastodermo- sera la de permitir
queloshuevos deavespasaran por lafaseintrauterina dedesarrollo enlamicrogra-
vedad del espacio.
Sesabeanpoco del establecimiento delapolaridad enlosembriones demamfe-
ros, lacual no parece ser fija sino hasta fases relativamente tardas del desarrollo
(alrededor del momento dela implantacin) y la que quiz seauna consecuencia
ms que una causa, de la diferenciacin.
CAPITULO 4
SEGMENT ACION y FORMACION
DE LA BLASTULA
La fecundacin transforma el estado metablicamente deprimido de un huevo a
uno deextremo vigor, quesecaracteriza por undrstico aumento ensusactividades-
respiratorias ysintticas. Sinembargo, unadelasconsecuencias msespectaculares
einmediatas es el inicio dela segmentacin, durante la cual sesucede en forma
continua un oleaje dedivisiones celulares, sinpausas intermedias, para subdividir
al inmanejable cigoto degran tamao en unidades celulares paulatinamente ms
pequeas, hasta formar una muy compacta masa celular dedimensiones ms nor-
males (Fig. 4-1). Las clulas resultantes delas primeras divisiones delasegmenta-
cinnosonespecializadas ensumayor parteypermanecen por igual sinespecializa-
cin metablica, dado que su actividad sinttica est adaptada, antes que para
actividades moleculares especializadas, para laproduccin del DNA ydelasprote-
nas requeridas para la divisin celular.
Despus dealgunas divisiones celulares sincrnicas, durante lascuales seduplica
el nmero declulasdel embrin encadaciclo, el embrin seasemeja aunapequea
mora (de ah la utilizacin comn del trmino mrula) y las divisiones celulares
comienzan a perder su carcter sincrnico. Como sever ms adelante, muchos
deloscambios enel patrn desegmentacin deunembrin dado, as como muchas
delasdiferencias enestos patrones entreembriones dediversas clasesdevertebra-
dos, serelacionan con lacantidad deyemaqueenunprincipio estaba enel huevo.
Con el tiempo, el embrin enproceso desegmentacin desarrolla una cavidad cen-
/ tral (el blastocele) y entra ala etapa de la blstula, durante la cual comienzan a
llevarse a cabo importantes cambios bajo su poco impresionante y homogneo
exterior. La sntesis deRNA que codifican para protenas especializadas sepone
enmarcha enmuchas especies, ylasclulas del embrin comienzan acomunicarse
156
Segmentacin y formacin de la blstula 157
Segmentacin
6 I
1
1
I
1
I
Gastrulacin
e
:g 5
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E
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~ 4
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~ 3
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Ol
_Q 2
2
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.:; 1
z
50 1 00
Horas a 15' e
1 50 200
Ag. 4-1. Cambios en el nmero de ceunas en embriones de la Rana pipiens. (Segn Sze, 1953.
J. Exp. Zool., 122:594.)
entres ennuevas ydiferentes formas. Las clulas mismas empiezan a asumir pro-
piedades distintas ynoequivalentes, aunquesuaspecto nomuestra estos cambios
edesarrollo. En muchas especies, el citoplasma del huevo no es homogneo, y
segn una hiptesis delargos aos, las diferentes regiones citoplsmicas del em-
rin temprano ectan sobreel ncleo desegmentacin individual dediferentes
maneras, iniciando as el desarrollo por distintas vas. A nivel del embrin como
na todo, lapolaridad final sefija firmementeyseestablecen losprincipios invisibles
edesarrollo queconservan bajo riguroso control los reemplazamiento sdetejido
masivodelagastrulacin. Todos estoscambios conducen a una mayor integracin
el embrin en conjunto, as como a la disminucin dela capacidad queposeen
sus partes correspondientes para compensar daos odefectos producidos por la
experimentacin.
CELULA DURANTE LA SEGMENT ACION
En el embrin normal, la segmentacin consisteen la divisin nuclear (cariocine-
sis), seguida por ladivisincelular (citocinesis). La segmentacin ponedemanifies-
toenprimer plano varios factores deimportancia dela biologa celular, entrelos
uales los ms prominentes son los mecanismos dela citocinesis y la formacin
denuevas estructuras membranosas enlasclulas enproceso dedivisin (Fig. 4-2).
Gran partedenuestro conocimiento enesta disciplina ha surgido delasinvestiga-
iones queserealizan enformas invertebradas, aunqueel huevoanfibio ensegmen-
acin ha sidotambin un objeto favorecido deestudio. Aun cuando muchas de
las preguntas y respuestas fundamentales deestecampo seformularon haceya
algunas dcadas, los mtodos modernos deinvestigacin en citologa y biofsica
hanpermitido identificar algunos delosmecanismos concretos medianteloscuales
serealizan estos procesos.
158 Segmentacin y formacin de la blstula
Fig. 4-2. A, Micrografa electrnica de barrido (x 92) de un embrin de rana durante la primera
divisin de la segmentacin. B, Mayor potencia de observacin (x 805) del surco de segmentacin,
que muestra los pliegues de las paredes del surco. (Cortesa de H. W. Beams y R. G. Kessel,
1976. Tomado de Am. Sci., 64:279.)
Lacitocinesis ocurre despus delacariocinesis, yel plano del surco delasegmen-
tacin esel mismo queel deplaca delametafase delafigura mittica precedente.
La existencia dealguna relacin causal entre el complejo mittico y laformacin
del surco seha demostrado mediante observaciones en huevos normales y experi-
mentalmente alterados, de los que se ha extrado el aparato mittico. El surco
delasegmentacin seconstituye al principio enlaregin delacorteza ms prxima
al huso mittico, para despus desplazarse entorno alaclula(Fig. 4-3). Al despla-
zar de manera mecnica el complejo mittico de un cigoto hacia la membrana
celular, el surco comienza a constituirse en la regin ms prxima al complejo
mittico. Segn Rappaport (1974), laposicin del surco desegmentacin seesta-
blece poco antes dela anafase, despus dela cual el complejo puede extraerse o
destruirse sin alterar la ubicacin o la evolucin de la formacin del surco.
Lossteres sonlasestructuras queinteractan conlacorteza celular para estimu-
lar laformacin del surco desegmentacin. Aun cuando sedesconoce lanaturaleza
del estmulo, sesabequepuedeser transmitido encuestin deminutos, del comple-
jo mittico ala superficie del huevo. El Ca
2
+ parece ser un factor importante en
latransmisin del estmulo dela segmentacin delos steres ala corteza celular.
En el sitio del surco de segmentacin, la corteza celular contiene una banda
demicrofilament'os quellegaadefinirsemejor amedidaqueseforma el surco. Estos
microfilamentos pertenecen lafamilia actina deprotenas contrctiles, yen unin
delas molculas demiosina en lamisma regin, suconducta contrctil al parecer
constituye el fundamento de la constriccin celular durante la segmentacin.
Cuando una clula esfrica sedivide en dos, lanecesidad geomtrica dicta que
la superficie total de ambas clulas hijas sea mayor. A manera de confirmacin
de hiptesis anteriores, las investigaciones recientes en embriones tempranos de
Ag. 4-3. Experimemos sobre la relacin entre el complejo mittico y la formacin del surco
- segmentacin. A, En el desarrollo normal, el surco se forma paralelamente a la placa de la
tatase en la regin ms prxima al complejo mittico. B, Al empujar el complejo mittico hacia
do opuesto del huevo, el surco de segmentacin se inicia ah. C, Si se extrae el ncleo en
_ tase del huevo, no llega a constituirse el surco de segmentacin. D, Cuando se elimina el cam-
- "'jo mittico tardo del huevo, contina formndose el surco de segmentacin en su sitio normal.
=Si se interrumpe el surco de segmentacin por una pequea bola de cristal, se crea una clula
arma de herradura con un ncleo en cada extremo, y cuando stos se dividen de nuevo, los
s no slose forman entre los dos pares de ncleos hijos, sino entre los dos ncleos en proceso
=edivisin (asteriscos), donde no hay complejo mittico. Esto comprueba que los agentes eficaces
-- a iniciar la formacin del surco de segmentacin son los steres y no los husos mitticos. (E,
base en el experimento de Rappaport, 1971.)
anfibios han mostrado que alos sieteuocho minutos deformarse el surco deseg-
raentacin, seforman regiones dematerial membranoso nuevo alolargo deambos
osdel anillo contrctil. Lanuevamembrana estersa, plida y altamente perrnea-
~e a iones; al parecer nicamente sedeposita en el surco de segmentacin.
160 Segmentacin y formacin de la blstu/a
DISTRIBUCION DE LA YEMA Y SU EFECTO EN LA SEGMENT-P,.CION
La morfologa de la segmentacin difiere en forma considerable entre algunos de
los principales grupos de animales. Un factor importante que causa estas diferen-
cias es la cantidad y distribucin de la yema contenida en los nuevos. En el cuadro
4-1 se resumen algunos tipos de huevos (clasificados por su contenido de yema)
y los patrones de segmentacin.
Las clulas que seoriginan delasegmentacin reciben el nombre. de blastmeras.
En los huevos con poca yema toligolecitosi, las.divisiones de la segmentacin pro-
ducen blastmeras de aproximadamente el mismo tamao, en tanto que las canti-
dades moderadas de yema de los huevos mesolcitos tienden a concentrarse en
direccin del polo vegetal; desplazando as al.ncleo hacia el hemisferio animal.
Como se observ en la seccin anterior, el ncleo excntrico da lugar al inicio del
primer surco de segmentacin cerca del ncleo, en el polo animal (Fig. 4-9). A
medida que el surco seextiende hacia el polo vegetal, su ritmo de formacin decrece
como consecuencia de los efectos dilatorios de la yema. El resultado neto de este
proceso es la aparicin de blastmeras ms grandes y tardas en el polo vegetal
que en el animal.
Los huevos telolcitos poseen grandes cantidades de yema, las cualessuelen des-
plazar aLcitoplasma que forma el embrin hacLa_unpequeo disco que ~~.!lcue[lJ ra
en__1l~rde del vulo, Al iniciarse la segmentacin, aparece material membranoso
sobre las superficies laterales de las blastmeras recin formadas, el cual en un
principio no deslinda sus lmites de la yema subyacente. Este es el motivo por el
que dicho tipo de segmentacin se designa como meroblstica o incompleta.
La amplia- variedad de cantidades y tipos de yema se correlaciona de manera
estrecha con latemprana historia devida delos embriones ylas larvas. Los animales
relativainente pequeos que deben producir inmensas cantidades de huevo para
asegurar lapropagacin de laespecie (p. ej., el erizo de mar), por razones de tama-
o deben producir huevos pequeos que contienen poca yema porque el nmero
, requerido sencillamente no cabra en el cuerpo de la madre. Sin embargo, para
: sobrevivir, los embriones requieren desarrollarse en forma rpida para alcanzar
la etapa alimenticia antes de agotar sus escuetos abastecimientos de yema. Entre
los anfibios con huevos mesolcitos, las especies con huevos ms pequeos (p. ej.,
Xenopus), setransforman en larvas alimenticias ms rpidamente que los que pro-
ducen huevos ms grandes (p. ej., la mayor parte de las salamandras).
Entre los vertebrados terrestres que ponen huevos (p. ej., las aves y lbs reptiles),
la correlaci~ entre la cantidad de yema y el tamao del individuo que sale del
huevo es mayor que la que existe entre la duracin de la gestacin y la cantidad
de yema. Tanto la marcha pausada de desarrollo como la posibilidad de nutrirse
por difusin, mediante los lquidos maternos, permite que selleve acabo el desarro-
llo temprano en huevos que contienen muy poca yema, si bien no es sino hasta
que desarrollan la circulacin funcional y los rudimentos de la placenta que puede
iniciarse la fase de crecimiento acelerado del embrin.
B
E
SEGMENT ANCION y FORMACION DE LA BLASTULA EN
Amphioxus
Los huevos oligolcitos deAmphioxus (Branchiostoma) pasan por una forma muy-
constante yhomognea desegmentacin holoblstica, durante lacual hay relativa-
mentepocadiferencia enel tamao delasblastmeras. El patrn bsico desegmen-
tacin del Amphioxus selle aacabo con algunas variaciones en muchos grupos
animales. Laprimera divisin parte el huevo alamitad, del polo animal al vegetal,
enel plano delaplaca delametafase del ncleo enproceso dedivisin (Fig. 4-4B).
Los ncleos delas dos blastmeras resultantes forman husos mitticos en ngulo
recto con respecto al plano delaprimera divisin, ydenuevo procede la segunda
divisin dela segmentacin del polo animal al vegetal, dando como resultado la
formacin deun embrin decuatro clulas (Fig. 4-4C). La tercera divisin, que
algunas vecesrecibeel nombre dedivisin ecuatorial, parte cada una delascuatro
blastmeras por lamitad, aproximadamente' en medio del polo animal y vegetal
(Fig. 4-4D). Lasiguientedivisinproduce planos verticales simultneos desegmen-
tacin que ocasionan que el embrin duplique el nmero desus clulas de 8a 16
(Fig. 4-4E). Esta etapa y la de32clulas, resultado dela siguiente segmentacin,
conforman laetapa delamrula. A continuacin seforma una cavidad, y entonces
el embrin multicelular recibe en nombre de blstula (Fig. 4-4F).
SEGMENT ACION y FORMACION DE LA BLASTULA EN ERIZOS DE MAR
La segmentacin en el erizo demar es tan rpida, que antes que finalice un cid
delamisma, sehainiciado yael siguiente. Demanera especfica, lafase sintti
del DNA (S) del ciclo de segmentacin comienza antes que setermine la mitosis
A
D
e
Fig. 4-4. Segmentacin en Amphioxus.
F
Un ciclo
B Forma lineal del ciclo .celular del adulto
Siguiente ciclo
Fecundacin
s M M M
s s
Primer ciclo
Segundo ciclo
e Forma lineal de ciclos de segmentacin temprana
Fig. 4-5. Ciclo celular en clulas maduras y en proceso de segmentacin. A, Representacin
- cular del ciclo celular en una clula madura. M, mitosis; G" intervalo 1; S, sntesis del DNA;
U" intervalo 2. B, Representacin lineal del ciclo celular en una clula adulta tpica. e, Primeros
. los tras la fecundacin del erizo de mar. La fase S del primer ciclo celular es muy breve y la
- se S de los ciclos sucesivos comienza antes que concluya la mitosis (fase M), as eliminando
fase G, de estos ciclos. (Segn Wessels, 1977, Tissue Interactions and Development. Benja-
in/Cummings.)
) del ciclo celular anterior (Fig. 4-5), lo cual elimina el componente G
1
(interfase)
el ciclocelular, que puede ser muy prolongado en muchas poblaciones de clulas.
Aunque los huevos del erizo de mar son oligolcitos, su patrn de segmentacin
es ms complejo que el del Amphioxus (Czihak, 1975). Las dos primeras divisiones
on meridionales (del polo animal al vegetal), en tanto que la tercera es ecuatorial,
produciendo un embrin deocho clulas con blastmeras que exhiben casi el mismo
tamao. No obstante, la cuarta segmentacin ocasiona laproduccin de tres tipos
distintos de blastmeras (Fig. 4-6). Las cuatro blastmeras de la hilera animal su-
fren una segmentacin meridional, que da como consecuencia una sola hilera ani-
mal de ocho clulas que se conocen como mesmeras. Mientras tanto, las cuatro
blastmeras vegetales se dividen de modo asimtrico, constituyendo una fila de
cuatro macrmeras grandes, y, debajo de ellas, un grupo de cuatro micrmeras,
cuya formacin al parecer depende delapresencia del citoplasma que seencontraba
en el polo vegetal del huevo. Si se extrae el citoplasma vegetal, no se forman las
micrmeras. Durante el desarrollo normal los tres tipos de blastmeras sufren des-
tinos diferentes, de los cuales se hablar despus en este captulo, as como en el
captulo 5.
En el transcurso del periodo de segmentacin total, el embrin est cubierto
por lamembrana defecundacin. Lassuperficies externas delasblastmeras estn
estrechamente vinculadas alacapa hialina, la cual seform durante la fecunda-
cin, al vaciarse loscontenidos delosgrnulos corticales enel espacio perivitelino.
A medida que el embrin entra en el sptimo y octavo ciclos delasegmentacin,
la cavidad central (el blastocele) seafirma y el embrin ha ingresado ala fase de
la blstula. La pared de sta 110 tiene ms que una capa de clulas de espesor y
todas ellas cuentan con una superficie apical expuesta a la capa hialina externa,
y una superficie basal expuesta al blastocele, aunque una lmina basal cubre toda
lasuperficie interna delapared delablstula. Lablstula temprana escasi esfrica,
y durante algn tiempo puede ser dedifcil ubicacin enlos polos animal y vegetal
originales. Para el dcimo ciclo, lablastmera forma cilios mviles que penetran
lacapahialina yseextienden haciael espacio perivitelino. Con el pulsar coordinado
de los cilios, la blstula gira al interior de la membrana de fecundacin.
Fig. 4-6. Segmentacin en el embrin de erizo de mar. La cuarta divisin de la segmentacin
ocasiona una organizacin asimtrica en el embrin, con un hemisferio animal de ocho clulas
y dos filas vegetales que contienen una hilera de cuatro macrmeras. En las divisiones ulteriores
(F, G), se subdividen las filas animales y vegetales. (H-J ) Secciones transversales de las, blstulas.
Los circulos negros en I y J son clulas mesenquimatosas primarias.
Polo animal
Polo vegetal
Mitad
D
Macrmeras
Mesmeras
EG,
Micrmeras
Al poco tiempo, las clulas de la blstula secretan una enzima incubadora que
:...giereala membr~na de fecundacin, yen este punto, lablstula ciliada seencon-
zrar nadando libremente en el mar. El siguiente cambio morfolgico es el de la
: rmacin de un mchn de cilios largos inmviles en el polo animal de lablstula,
=- tanto que, casi demanera simultnea, laregin en torno al polo vegetal seaplana
::- a formar la placa vegetal, cuyo interior contiene a las micrmeras (Fig. 4-6).
El principal acontecimiento final durante la fase de la blstula augura los exten-
= scambios que ocurrirn en lagastrulacin. Las antiguas micrmeras, densamen-
-3 integradas en la placa vegetal, pierden su afinidad ala capa hialina y alas clulas
=ecinas, pasan por la lmina basal y se abren paso hacia el blastocele (Solursh,
6; Fink y McClay, 1985). Estas clulas, que formarn el mesnquimaprimario,
:=alargan primero por la elaboracin de paquetes paralelos de microtbulos y,
_ nforme se extienden an ms, sus superficies apicales se desprenden de la capa
::ialina; con la desaparicin de los desmosomas, sus superficies laterales seseparan
:::elas clulas adyacentes de la placa vegetalf A continuacin pasan por la lmina
_ al al blastocele, donde permanecen alo largo de la superficie interna de la lmi-
- basal y setornan fcilmente reconocibles como el mesnquima primario (Figs.
-7y 4-8). Con este movimiento pregastrulatorio de las clulas, el embrin suele
recibir el nombre de blstula del mesnquima.
EGMENT ACION y FORMACION DE LA BLASTULA EN ANFIBIOS
~~dQ de.segmentacn y formacin de la blstula,en. anfibios es rpido, y
__ele.f_omQletar~ en eltranscurso de 24 horas. Laprimera divisin deja segmenta-
"!l comienza ~Il el-polo animal, bisecando a la:__crecIentegris (Figs. 4-2 y 4-9).
-:: el ajolote, el surco de segmentacin se alarga a un ritmo de 1mm/minuto en
hemisferio animal, pero disminuye de0.02 a0.03 mm/minuto, conforme seapro-
zima al polo vegetal (Hara, 1977). La segunda divisin tambin comienza en el
-: 10animal, con su plano perpendicular al del primer plano de la segmentacin,
- tanto que el tercero es horizontal y pasa ms cerca del polo animal, dividiendo
~embrin en cuatro blastmeras pequeas en el hemisferio animal, y cuatro.blas-
: meras ms grandes enel polo vegetal. Las divisiones posteriores sesuceden rpida
:- sincrnicamente. En los anfibios suele conocerse como mrula al embrin que
-=encuentra entre las etapas de 16y 64 clulas. En los ciclos subsecuentes, el oleaje
:'elasegmentacin comienza aperder su sincrona debido al alargamiento del ciclo
celular de las .clulas del hemisferio vegetal. Para el quinceavo ciclo de segmenta-
::in del ajolote, la segmentacin en el polo vegetal, con respecto a la del animal,
se retrasa unos dos ciclos (Hara, 1977).
Despus de la etapa de la mrula aparece una cavidad prominente (blastocele)
en el hemisferio animal, sobre la masa de yema (Fig. 4-10). Aun cuando la forma-
cin del blastocele ha cautivado durante mucho tiempo el inters de los embrilo-
gos, no ha sido sino hasta fechas recientes que se han comprendido realmente los
ecanismos en cuestin. Kalt (1971) ha deducido el origen de la formacin del
lastocele enXenopus ala primera divisin de lasegmentacin. La especializacin
E
166 Segmentacin y formacin de la blslula
Fig. 4-7. Ingreso de clulas mesenquimatosas primarias en el embrin de erizde mar.A, Pared
de la blstula antes de iniciarse el prensado. B, Las clulas mesenquimatosas primarias (P) comien-
zan a extenderse hacia el blastocele, a travs de la lmina basal incompleta (BL). e, La superficie
apical de las clulas mesenquimatosas primarias se desprende de la capa hialina (H). D, Separa-
cin de las clulas mesenquimatosas primarias de la pared del blastocele.E, Recoleccin de la
clula mesenquimatosa primaria separada (P). (Adaptado de Katow y Solursh, 1980.)
que exhibe el surco de segmentacin en el hemisferio animal deja tras de s una
pequea cavidad intercelular, la cual se encuentra sellada del exterior mediante
uniones cerradas especializadas entre las dos blastmeras, y la que se preserva y
alarga durante los ciclos de segmentacin subsecuentes. La conservacin y la acu-
mulacin delquido al parecer sedebe al bombeo deNa+que efectan las blastme-
Ag. 4-8. Micrografa electrnica de barrido de la gstrula temprana del erizo de mar, Lytechnius
s. El embrin que aparece en primer plano se ha fracturado con objeto de que sea visible
_ zona de invaginacin. Obsrvese la masa de clulas mesenquimatosas primarias invaginadas
=_s estn en la parte ventral del blastocele en este embrin. Se puede percibir la invaginacin
=- la superficie del embrin que aparece en segundo plano. (Cortesa de M. Solursh: tomado de
atow y M. Solursh, datos no publicados.)
_=:5 en el blastocele emergente. En tanto la pared de la blstula acta como una
_embrana semiperrneable, 'el- aguapenetra al blastocele para conservar un equili-
_'- o.inico, ocasionando as su expansin (Slack y col., 1973).
Cuando el embrin ha completado el ciclo desegmentacin que lo hatransfor-
zaado deuna mrula de64clulas ala etapa de1".28clulas, recibe comnmente,
~nombre deblstula, fase en la que permanecer hasta que los ciclos sucesivos
~ lasegmentacin aumenten el nmero declulas deentre 10000a15000 blast-
:::!.cras,y en esemomento comenzarn los masivos movimientos ~~rfogen~ticos
- :_ cecaracterizan alagastrulacin. Por conveniencia, lablstula anfibia puede sub-
_- ridirse en tres regiones principales:
1. Una regin querodea al polo animal, queincluyegrandes rasgos alasclulas
aeconstituyen laparte superior externa del blastocele, lascuales correspondern
~ ierta medida a la futura capa germinal del ectodermo .
.2. Una regin en torno al polo vegetal, que comprende las clulas grandes del
zrerior queconforman lamasa deyema, lascuales darn origen alas futuras clu-
- - del endodermo.
3. Unanillo marginal declulasenlaregin subecuatorial del embrin, incluyen-
;:;:laregin delacreciente gris. Las clulas deestazona normalmente constituyen
= mesodermo embrionario.
1 1
1 1 1
1 1
B
Creciente gris
o E F
Fig. 49. Segmentacin en el huevo de rana. La oscuridad que se observa en el hemisferio supe-
rior se debe a la presencia de pigmento en el casco citoplsmico, en tanto que el aspecto ms
claro del hemisferio inferior resulta de la acumulacin de masa de yema en esa parte del huevo.
Los surcos de segmentacin se indican con nmeros romanos, en orden de aparicin. Obsrvese
en A y B el efecto retrasador de la yema en la extensin de los surcos de segmentacin hacia
el polo vegetativo; en eel alejamiento del tercer surco de segmentacin del polo cargado de yema,
en direccin hacia el centro de la masa del citoplasma activo. El desplazamiento del centro de
actividad, a partir del centro geomtrico de huevo, y el retraso mecnico de la segmentacin en
el polo vegetativo (ambos debidos a la masa de yema), ocasionan la formacin de una mrula
con muchas blastmeras en el hemisferio animal y algunas blastmeras grandes en el vegetativo.
Desdeel punto devista filogentico, la blstula del pez dpneo (as como las
etapas posteriores hastala formacin larvaria del brote dela cola) muestra una
asombrosa similitud morfolgica a la del anfibio. Por otra parte, los embriones
tempranos del celocanto, un candidato popular para laforma detransicin entre
pecesyanfibios, seasemejan alosembriones tpicos depez. El queestas caracters-
ticasembriolgicas seansuficientes para queel pezdpneo recobresupreeminencia
devnculo entre peces y anfibios queda an por determinarse,
Durante mucho tiempo seconsider quelapregastrulacin enel embrin anfibio
era un periodo relativamente sin trascendencia durante el cual el aumento en su
nmero declulas era el suceso principal. Si embargo, en la actualidad sesabe
quedurante el periodo desegmentacin tardo sellevan acabo importantes cam-
bios organizacionales. Nieuwkoop (1 973) realiz experimentos derecombinacin
enlos queyuxtapuso en forma directa alas clulas queseencuentran enlamitad
animal del embrin, sobreel blastocele, enlamasadelayemadel hemisferio vege-
tativo. Bajo lainfluencia inductora delamasadelayema, lasclulasdel hemisferio
animal formaron estructuras mesodrmicas. Por lo general, el mesodermo provie-
nedeuna zona declulas superficiales delocalizacin ms prxima alamasa de
layema(Fig. 4-1 1 ), Nieuwkoop hapostulado queunade lasfunciones del blastoce-
e
Posterior Anterior
Blastocele
Ag. 410. Secciones esquemticas mediante las cuales se comparan las blstulas deA, Amphio-
xus, B, un anfibio y e, D un pollo.
lepuede ser la derestringir la interaccin entre las futuras clulas endodrmicas
'!I ectodrmicas al anillo marginal que circunda los bordes del blastocele.
Un factor que facilita lacomunicacin entre las clulas del embrin enproceso
desegmentacin estriba enlaextensadistribucin deuniones intercelulares debaja
resistencia que favorecen el paso decorrientes elctricas ydepequeas molculas
deuna clulaaotra (Warner, 1985).A pesar dequelasinyecciones deanticuerpos
que atacan alas protenas delas uniones intersticiales pueden ocasionar defectos
morfolgicos, no seha logrado establecer la relacin especfica entre el aparea-
miento celular yel fenmeno demostrado por las tcnicas experimentales clsicas
de la embriologa.
Polo vegetal
Fig. 4-11. Subdivisin de la blstula de un anfibio urodelo en zonas formativas. Las zonas I
y II del hemisferio animal constituyen el ectodermo al ser aislado. La zona IV, a partir del polo
vegetativo, contiene clulas endodrmicas cargadas de yema. Las clulas de lazona subecuatorial
en forma de anillo (111) forman clulas mesodrmicas al ser aisladas. (Modificado de P. Nieuwkoop,
1973. Adv. Morphogen., 10:1.)
SEGMENTACION y FORMACION DE LA BLASTULA EN AVES
La segmentacin en el huevo avcola ha recibido menos atencin qu~la del anfibio
porque el periodo total de segmentacin selleva acabo conforme el ~uevo descien-
de por el oviducto (Eyal-Giladi, 1984). As, para cuando se ponga el huevo, se
habr iniciado la gastrulacin temprana. . -
El huevo recin fecundado, que seencuentra apunto de iniciar la segmentacin,
I contiene en el polo animal un disco blanquecino (el blastodisco o disco germinal)
de protoplasma activo, cuyo dimetro es de unos 3 mm. En torno al disco hay
una regin marginal ms oscura, el periblasto, si bien no hay una lnea distintiva
de demarcacin entre ambos.
Durante la anafasetarda de la primera divisin mittica despus de la fecunda-
cin comienza a presentarse el primer surco de segmentacin cerca del centro del
blastodisco. As como en el embrin de anfibio, el surco se encuentra en el plano
de la placa cromosmica durante la metafase y exhibe micro filamentos en la base
del surco. La secuencia de la segmentacin en aves no es siempre constante y, des-
pus de latercera divisin, deja de ser sincrnica. No obstante, los husos mitticos
sealinean detal forma que el surco de segmentacin subsecuente seforma en ngu-
lo recto respecto al anterior (Fig. 4-12), en tanto que el cuarto es una circunferencia
que corta una hilera central a partir de una fila perifrica de blastmeras.
Segmen(acin y formacin de la blstula 171
F'ig. 4-12. Aspecto de la superficie del blastodermo de un huevo de ave en varias etapas de
xgmentacin. El blastodermo y la yema circundante inmediata se presentan en forma directa
3Sde el polo animal; se han extrado el cascarn y la albmina. El orden en que aparecen los
== cos de segmentacin se indican con nmeros romanos. A, Primera segmentacin. B, Segunda
;:;;egmentacin. e, Tercera segmentacin. D, Cuarta segmentacin. E, Quinta segmentacin. F,
. rula temprana. (Con base en las fotomicrografas de Blount de huevos de paloma.)
Las blastmeras que seforman apartir delas primeras y escasas divisiones de
lasegmentacin sonpoco comunes entanto suparte superior Xlateral estn limita-
':'aspor membranas plasmticas, pero sus superficies basales estn abiertas a la
yema subyacente. La segmentacin ulterior en el disco temprano de las clulas
embrionarias, que en :_stepnto reciben el.nombre de blas_t~o, ocasiona la
extensin radial del embrin hacialaregin del periblasto. Yaquerara vezseobser-
van ncleos en las clulas abiertas que seencuentran enlaperiferia en expansin
del blastodermo, se ha sugerido que la presencia de los "ncleos espermticos
accesorios";' durante lasegmentacin temprana, puede provocar ladivisin cito-
plsmica en esta regin (Bellairs y col., 1978).
Adems delas segmentaciones superficiales, el embrin de 32 clulas muestra
planos desegmentacin decarcter completamente distinto. Dichas segmentacio-
nessepresentan bajo lasuperficie yparalelos aella, constituyendo unacapa super-
ficial de clulas nucleadas, totalmente delimitadas por membranas plasmticas.
Las clulas superficiales descansan sobre una ca adeclulas qu~en su cara ms
pr.9f_1,!nga son continuas con la yema. Las divisiones sucesivas del mismo tipo al
final constituyen varios es ra os eclulas superficiales. Ladivisin avanza encen-
trfuga conforme aumenta el tamao del blastodermo, si bien no se extiende a
sumargen extremo. El margen perifrico, donde el blastodermo linda con el peri-
blasto, permanece con el espesor de una sola clula, y las clulas seencuentran
enl sinestar separadas delayema. Para cuando el embrin cuenta con 100clulas,
una cavidad subgerminal sostiene al blastd~rrl!.o (Fig. 4-1OC).
DespuS eagunos ciclosaesegnie~tacin, comienza laeliminacin dealgunas
<;lulasindividuales apartir dela superficie inferior delaregin del blastodermo
queseencuentra msalejddelafuente degravedad (Fig. 3-46B). Como sedescri-
bi en el captulo 3, la regin en la cual sedesp-rendeninicialmente J as clulas se
transforma lL~.L~xtremo osterior (~--lJ ..dJ Ld.e.Lembrin. Este proceso sedifunde
hacia su futuro extremo anterior. La porcin central del bTa~todermo, aclarada
por la reduccin en el nmero declulas y en cuya parte inferior est la cavidad
subgerminal, re~nomhre-de_ZQna.p_el.cidg, acuyo derredor sehal~
2P---.ca.,-regin donde lasclulas del blastodermo continmlJ ingllndo direc amente,
gm_la_yem,a.
Aproximdamente al momento delapostura sedesprenden clulas individuales
o agre ados deellas d~periidejnfeL.QLdel...hlg_oderillQ.l!lediante el roceso
dedelaminancin) para conglutinarse yformar unadelgada capadeaspecto similar
ala deun disco que recibe el nombre dehipobla~!!lJJLjQ2 (Fig. 4-lOD). Este
proceso ocurre inicialmente, yen gran medida, enel extremo posterior del embrin.
Adems, las clulas que provienen del margen posterior del blastodermo pueden
desempear el papel de"rellenadoras" del hipoblasto primario, el cual seencuen-
tra separado de la capa externa del blastodrmo, -el epiblasto, por una cavidad
delgada, el blastocele. El hipoblasto primario, quepor ltimo constituye el endo-
dermo extraembrionario, poseeuna polaridad inherente que confiere al embrin,
IAunque enlas aves nicamente participa un solo espermatozoide enla fecundacin, en ocasiones
sedepositan otros en el citoplasma del blastodisco, de los cuales sus ncleos emigran a la periferia,
donde son reconocibles durante algn tiempo, antes que comiencen a degenerarse.
2 En laliteratura contempornea descriptiva y experimental seutilizan casi universalmente lostrrni-
nos epiblasto e}]jf22blasto J L~ capas in~as ~xte~n!l.~9~Lblastod.e.ImQJ j.e las aves.~
Esta convencin seadoptar aqu para referirnos a as capas de los embriones tempranos de aves.
as
la
r-
in
)5
}-
l.
15
tI
l-
a
i-
n
s
)
=!' cual en esta etapa est representado por eL~iblasto teml2@!lo. La polaridad
bicacin del hiRoblasto primario determinan la localizacin direccin de la
----..,
~__ ra lnea primitiva (Fig. 5-12), mediante una nreraccin.nductora.
e fiaCmparado el blastodermo de dos capas del ave con la blstula aplanada
:~ anfibio. El epiblasto se considera como eleguivalente del hemisferio animal,
- tanto que el!!iRoblasto Rrimario comparte mu~h_~.propiedades con elpolo_~g~-
~ del embrin anfibio, de manera particular en cuanto a su polaridad intrnseca
_la capacidad deinducir la formacin del mesodermo a partir del epiblasto tempra-
- . Por otra parte, el epiblasto conserva su c.a~acic!ad de!9cs.on~a la iIlf!~encia
:.el hipob~o al constituir el m~oder~E. ~m_.esoblq_!o) ..1/
.... EGMENTACION y FORMACION DE LA BLASTULA EN MAMIFEROS
A pesar de su supuesto origen evolutivo a partir de especies que ponan huevos
~n grandes cantidades de yema, losmamferos _producen huevos pequeos casi
.::esQrovistos de ella., Al liberarse del impedimento de la yema, os huevos de mam-
::5"OS sehan revertido a un tipo sencillo de segmentacin que seobserva enmuchas
:ormas primitivas. Las divisiones de segmentacin primarias son prcticamente
.:::;titosissin modificaciones o, tcnicamente hablando, lasegme_fltgrin holoblstica
:"]Ual de un /-uevo isolecito, Slo es en el desarrollo ms tardo que elpatrn de
zaovimientos morfogenticos del embrin de mamfero revela la persistencia de
_ gos caractersticos de los embriones de yema grande.
Histricamente, los primeros estudios descriptivos sobre la segmentacin secon-
:::ucan en su mayor parte en embriones de cerdo, pues eran de fcil obtencin
::'clos mataderos. Sin embargo, en aos recientes, se ha dirigido la atencin a los
embriones de primates y ratn. A los primeros, por la importancia de las tcnicas
ce fecundacin in vitro en seres humanos, y a los segundos, por el desarrollo de
mtodos que permiten investigar linajes de clulas y determinacin celular. Por
desgracia para el estudiante, algunos aspectos de la segmentacin y gastrulacin
enratones son topogrficamente diferentes delos deotros mamferos; no obstante,
dada su gran importancia en los estudiosacerca del desarrollo temprano en mam-
feros, se presentarn aqu las primeras fases de desarrollo tanto en ratones como
en mamferos ms tpicos.
La segmentacin entre los mamferos es mucho mslenta que en la mayor parte
e los dems vertebrados. Por lo comn, la primera divisinde la segmentacin
no s~termina sino hasta transcurridas 24horas, ycada una delas divisiones tempra-
nas subsecuentes toma unas 10a 12 horas. El momento en que se detectan los
uerpos polares ofrece, al menos, un punto de referencia, y el plano de la primera
divisin los incluye (Fig. 4-13A). En ocasiones, la segunda divisin no ocurre de
manera simultnea en ambas blastmeras, lo cual da como resultado la aparicin
temporal de una etapa de tres clulas. En muchos mamferos, el huso mittico
de una de las blastmeras gira 90 durante la segunda divisin (Gulyas, 1975),
lo que se traduce en un ordenamiento transversal de la blastmera en la etapa de
cuatro clulas (Fig. 4-14). Los estudios in vitro de embriones de simios y seres hu-
Cuerpos polares
A
Zona pelcida
Zonapelcida
Fig. 4-13. Segmentacin del vulo de un cerdo. A. Etapa de dos clulas. Las muestras obtenicas
del oviducto de una cerda que se sacrific dos das y 3112horas despus de la copulacin. B
Etapa de cuatro clulas. Edad probable: unos dos das. e, Mrula de alrededor de 16 clulas
obtenida de una muestra no seccionada de casi 3112das de edad. D, Etapa de la blstula, obtenida
de una muestra del tero de una cerda sacrificada 4
3
/.1 das despus de la copulacin. Obsrvese
la regin central de mayor ciaridad, que indica el inicio de la formacin de la cavidad de segmenta-
cin (blastocele) por reordenacin celular (Fig. 4-15). (A, B YD, obtenidos de preparaciones presta-
das por Streeter y Heuser; e, segn Assheton. Todas las figuras x 400.)
manos han mostrado que la segmentacin temprana en los primates seajusta a:
patrn general de los mamferos.
En la~tap_age_o.Qhoclulas tienelugar una fasecrtica, lacompresin,durante
la cual la~blastc)meras seaplanan y seunen densamente., ~ .!nodo q-ue-yaRe es
posible distinguirlas entres por medio deun microscopio ptico. Las conexiones
- -- ,,--
intercelulares, caracterstica dominante de la compresin (Fig. 4-16), tienen dos
propsitos. Las uniones ceidas previenen el intercgmbio libre de liquido entre
el interior yel exterior del embrin, permitiendo que seacumule- e?,l un liquide
con.propiedades especiales (Ducibella yAnderson, 1975), entanto quelasuniones
intersticiales renen todas las blastmeras del embrin comprimido y permite
el intercambio de iones y molculas pequeas entre una clula y otra.
Cuando alcanza laetapa de 16clulas, todava en lazona pelcida, sediceque
el embrin sehalla enlaetapa delamrula (Fig. 4-13C). Aunque el trmino seg-
mentacin no sueleaplicarse alasdivisiones celulares quesellevanacabo despus
Plano de
segmentacin .IIA
A B
19.4-14. Comparacin esquemtica de segmentacin temprana en A, erizo de mar y B, conejo.
(Modificado de B. J. Gulyas, 1975. J. Exp. Zool . 193:235.)
ae la etapa de la mrula, la divisin ocurre a menor ritmo. D.!!!EJ}~lIlrula,
~ blastmeras secretan internamente Uf!lquido que conduce a la formacin de
nna cavidad central bien' defiiiida, lacual seconoce como blastocele o, ms adecua-
amenle,~cavidad del blastoclsto (Denker, 1983) (Fig. 4-15). La transicin demru-
la! ablstula se denota po-i dos cambios obvios: el primero es un rpido ensancha-
miento de la cavidad del blastocisto; el segundo consiste en la aparicin de tipos
e clulas distintivamente diferentes en el embrin.
Ellquidosecretado en-la cavidad delblastoisto, como se llama a la blstula
mamfera, sederiva delas v~i.CJllas_citpl.~s_micq_s._illl~se a.G.!,lJIl_ulajl~nills blastme-
ras, Los estudios acerca de la composicin del lquido revelan diferencias en las
Concentraciones de muchos iones inorgnicos yotras sustancias que seencuentran
entre el lquido interior yexterior del embrin, lo cual indica la presencia de proce-
sos detransporte activos (Borland ycol., 1977). Asimismo sehan encontrado utero-
globina y otras protenas uterinas en el lquido del blastocisto de embriones de
onejo (Beier y Maurer, 1975). Aunque el blastocisto mamfero temprano perma-
nece circundado en la zona pelcida, el tamao global del embrin se incrementa
en cierto grado por la acumulacin del lquido.
A medida que el blastocisto se llena de lquido, es muy obvio que el embrin
onsta de dos poblaciones distintas de clulas. Las que constituyen lapared externa
del blastocisto reciben colectivamente el nombre de !!2Mjq_tQ_y asurnen]a E<mfi-
guracin ymuchas de las propiedades delas.clulas.epteliales, En trminos funcio-
nales, las clulas del trofoblasto pueden bombear lquido einducir cambios especia-
les en el revestimiento uterino cuando son implantadas. Una caracterstica poco
comn de estas clulas es que los genes maternos se expresan de preferencia, en
tanto que los paternos se inactivan (Fig. 3-41). En [asuperficie interna del trofo-
blasto hay un pequeo grupo de clulas que recibe el nombre de masa celnlar-inter-
- ._- -- - . - ---- ---_
176 Segme
-- y formacin de la blstula
Zona pelciaa
Masa celular --i--M;-~
interna
Cavidad del -...:.:.,;""""0::----
blastocisto
Trofoblasto Masa celular interna
Cavidad ael btastocisto
e
Fig. 4-15. Tres etapas de la vescula blastodrmica (blastocisto) de un cerdo, obtenida de seccio-
nes para mostrar la formacin de la masa celular interna. A, Extrada del tero de una cerda, 4
3
. 1 . 1
das despus de la copulacin (Fig. 4-130). B, Edad de copulacin: seis das, 1% horas. e, Edad
de copulacin: seis das, 20 horas. (A, B, de embriones de la Carnegie Collectin; e, segn Comer,
todos x 375.)
na(Fig. 4-15). Lasclulas estn conectadas entre s mediante uniones intersticiales
(c-nhendidura) comunicantes (Fig. 4-16), preservando lacapacidad dereagregarse
al separarse odemezclarse con clulas deotros embriones. Lau;lulas delamasa
interna no pueden bombear lquido ni evocar lareaccin decidual-(Cap'-7f: corno
eslcasodelasqueseencuentran enlamembrana trofoblstica, puesestn destina-
das aconstituir el embrin, adems dealgunas membranas que con l seasocian,
entanto quelasclulasdel trofoblasto forman gran parte delaplacenta (Fig. 5-24).
Los resultados delasinvestigaciones experimentales han permitido quemuchos
embrilogos concluyan que la posicin delablastmera en la mrula determina
si llegar aser parte del trofoblasto odelamasacelular interna. Segnlahiptesi
"adentro-afuera" (Tarkowski yWrblewska, 1967), las clulas dela;&tla "que
ndtienencontacto conel exterior sedesarrollan enunmicroambiente nico confor-
o-
~r
le
o
1-
1,
l.
a
s
e
A
Espacio intercelular
grande
Uniones estrechas y
microfilamentos
Unin intersticial
uesmosoma
-g. 4-16. Uniones celulares durante la segmentacin del embrin de ratn. (Adaptado de Denker,
1983.)
ado por las clulas externas (Fig. 4-17) y llegan a constituir la masa celular inter-
na, en tanto que las que se localizan en la superficie de la mrula, tal vez por las
funciones fisiolgicas requeridas por su posicin superficial, se canalizan para de-
sarrollarse en el epitelio trofoblstico. Se piensa que las uniones ceidas entre las
clulas del exterior preservan las diferencias ambientales entre las clulas internas
y externas (Fig. 4-16). Segn una hiptesis alternativa, la polarizacin o segrega-
in citoplsmica, existe una relacin- eiltrlidiferenciacin de ambos tipos de
clulas con los gradientes de los determinantes citoplsmicos que se segregan en
blastmeras internas o externas a medida que proceden las divisiones de la seg-
zaentacin (Gardner, 1983).
De conformidad con la relacin entre mamferos y aves, los embriones de los
:;::rimeros forman una capa de clulas bajo la masa celular interna que parece ser
uivalente al hipoblasto primario de los embriones de aves. Esta capa, que recibe
el nombre de endodermo primitivo (Fig. 4-18), no contribuye propiamente al ern-
-
A B
Fig. 4-17. Experimentos que muestran la importancia de la posicin en la valoracin del destino
celular del embrin temprano de ratn. A, Si se rodea a un embrin completo de 16 clulas (gris
oscuro) por 14 embriones (gris claro), el embrin aislado marcado llega a formar parte de la masa
celular interna del blastocisto gigante que resulta. B, Al colocar dos blastmeras marcadas (gris
oscuro), en la periferia de otro embrin, las clulas donadoras normalmente llegan a ser parte
del trofoblasto, no as de la masa celular interna. (Adaptado de Denker, 1983.)
brin; sinembargo, las clulas del endodermo primitivo en el ratn participan en
la formacin del saco vitelino (Fig. 5-31).
ORGANIZACION y PROPIEDADES DEL EMBRION DURANTE
LA SEGMENT ACION y LA BLASTULACION
Durante la segmentacin y la blastulacin, la estructura del embrin es sencilla
y lasalteraciones enel ordenamiento desusclulas sondirectas. No obstante, mu-
Zona pelcida
Probable masa celular
interna
Trotoblasto polar
Ectodermo primitivo
Ectodermo
extraembrionario
Trotoblasto mural
Trotoblasto mural
Endodermo primitivo
Ectodermo primitivo
g. 4-18. Desarrollo temprano en el ratn. A, Mrula. B, Etapa del blastocisto. e, Etapa de
E_- era aparicin del endodermo primitivo (hipoblasto). D, Presencia temprana del ectodermo
- aembrionarlo.
=as de las propiedades del embrin y sus clulas componentes cambian durante
eperiodo, si bien estos cambios no pueden descubrirse en su mayor parte por
pie observacin. Para comprender la organizacin del embrin temprano, el
~ 'estigador debe ser capaz de formular preguntas incisivas y realizar delicados
:::;.anipuleos.
Tras los memorables experimentos de Roux (Cap. 1), otros cientficos investiga-
~D experimentalmente la capacidad de desarrollo de blastmeras aisladas de em-
iones, Uno de los anlisis iniciales ms instructivos fue el realizado a principios
-~este siglo por el bilogo alemn Hans Driesch, quien aisl blastmeras deembrio-
de dos y cuatro clulas de erizo de mar y encontr que de cada blastmera
~ formaba una larva pltea perfecta (Fig. 4-19). A partir de estas observaciones,
::J :;ieschformul el importante principio de desarrollo que postula que el potencial
ssperado de las blastmeras tempranas es mayor que el de su destino esperado;
51otras palabras, una blastmera dada posee el potencial dedesarroIlo para consti-
. un ordenamiento ms extenso de estructuras que lo que lograra si se dejase
180 Segmentacin y formacin de la bJstula
A Erizo de mar
Larva pltea normal
B Molusco
Blastmeras aisladas de
cuatro clulas
Fig. 4-19. A, Propiedades reguladoras del embrin de erizo de mar de cuatro clulas. Izquierda ,
Desarrollo normal. Derecha, Cada una de lasblastmeras aisladas del embrin de cuatro clulas
origina una larva pltea normal. (Tomado de Hirstadius, 1939.) B, Propiedades mosaicas del mo-
lusco Dentalium. Izquierda, Desarrollo normal. Derecha, Las blastrneras aisladas de embriones
de dos a cuatro clulas originan el embrin incompleto. (Tomado de Wilson, 1904.)
en su lugar normal en el embrin. Aun en los estudios contemporneos de linajes
de clulas en embriones de mamferos, el investigador debe considerar este princi-
pio al momento de interpretar sus resultados. La propiedad que posee una parte
para poder formar un todo es un buen ejemplo de la regulacin embrionaria, y
Driesch llam sistemas equipotenciales armoniosos alos que presentaban esta pro-
piedad. Intentar explicar los fundamentos de la regulacin en trminos mecnicos
lo frustr de tal modo que recurri al vitalismo (el control de los procesos de la
vida por fuerzas intangibles) para explicar el fenmeno. Aun cuando acab por
Segmentacin y formacin de /a b/stu/a 181
-=' andonar labiologa experimental para ejercer como profesor defilosofa, Driesch
ntina siendo uno de los gigantes de la embriologa experimental inicial.
Otros investigadores que trabajaron con embriones de gran diversidad de inver-
-~radas descubrieron que no todos los tipos tenan la capacidad de compensar
::zfectos a travs de la regulacin. Algunos grupos, como los moluscos, exhiben
a respuesta bastante diferente ante los defectos, en tanto sus blastmeras aisla-
.:.as se forman poco ms de lo que lo hubieran hecho al dejarse in situ (Fig. 4-19).
:::stetipo de desarrollo se conoce como mosaico y aunque al principio resultaba
zentador categorizar alos embriones como reguladores o mosaicos, al poco tiempo
- e obvio que el mismo embrin poda exhibir ambas propiedades. El erizo de
ziar es un ejemplo excelente, pues sencillamente al dividir el huevo o el embrin
- dos partes, atravs deun plano que incluya los polos vegetal yanimal, seobtiene
mo resultado que ambas partes desempeen en forma satisfactoria sus funciones
reguladoras, produciendo larvas normales (Fig. 4-20). Sin embargo, si se biseca
zlos huevos o al embrin atravs del plano ecuatorial, la progenie de ambas mita-
Polo animal
Polo vegetal
Fig. 4-20. Propiedades mosaicas y reguladoras demostradas en el embrin del erizo de mar.
uierda, La divisin ecuatorial del huevo o de un embrin de ocho clulas en mitades animales
egetales da como resultado la formacin de progenie desigual (propiedades mosaicas). La mitad
= imal (extremo izquierdo) constituye una Dauerb/astu/a ciliada (blstula permanente), en tanto
- e la mitad vegetal constituye un embrin ligeramente anormal. Derecha, La divisin meridional
::_ huevo o de un embrin de ocho clulas en mitades iguales ocasiona un proceso de regulacin
pleta y dos progenies normales. (Modificado de Gilbert, Deve/opment Bi%gy, Sinauer, 1985,
segn H6rstadius.)
des es diferente y muestra propiedades mosaicas (Fig. 4-20), lo cual sugiere que
existen importantes diferencias enel ambiente intracelular delos hemisferios ani-
mal y vegetal.
Los anlisis ulteriores de la organizacin de la etapa de 64 clulas en el erizo
demar (Hrstadius, 1939)revelaron algunas interrelaciones fascinantes al interior
del embrin. Cuando seseparan lasclulas del hemisferio animal delasdel vegetal
ysepermite quesedesarrollen, forman una "Dauerblastula" (blstula permanen-
te) altamente ciliada que no llega a desarrollarse por completo. Sin embargo, si
secombina el hemisferio animal con anillos aislados demesmeras omicrmeras,
el desarrollo setorna poco a poco ms completo a medida que el origen de las
clulas vegetalesseencuentre mscercano al polo vegetal (Fig. 4-21). Lacombina-
cinmsextrema, ladel hemisferio animal conmicrmeras, ocasiona el desarrollo
deuna larva pltea deaspecto asombrosamente normal (Fig. 4-21). Estos yotros
experimentos similares se interpretaron como indicadores de la presencia de un
sistema de gradiente doble al interior del embrin en proceso de segmentacin.
Un gradiente animalizador que contenga laconcentracin ms elevada en el polo
animal induce al sistema aformar estructuras "animales", entanto que, por otra
parte, cuando el gradiente devegetalizacin es el ms fuerte en las macrmeras,
seproduce el efecto contrario. Al recombinarse varias hileras deblastmeras, la
morfologa delalarva resultante sebasa en las fuerzas proporcionales delosgra-
dientes animalizadores que renen las blastmeras recombinadas.
Las blastmeras de embriones vertebrados jvenes, as como las del erizo de
mar temprano, secaracterizan por la sorprendente plasticidad que poseen en s
destino dedesarrollo. Algunas investigaciones experimentales ms ingeniosas que
lo demuestran sehan concentrado en las propiedades del ncleo, ms que en las
declulas completas. Enuno delosprimeros intentos para investigar si losncleo:
delas blastmeras retenan el potencial para guiar laevolucin completa dedesa-
rrollo o si sus capacidades llegaban arestringirse, Spemann (1928) at un huev
deanfibio con un lazo decabello, demodo que un lbulo del huevo contuviere
al ncleo yunpoco decitoplasma yel otro tan slo citoplasma. Cuando laporcin
nucleada alcanz laetapa de16clulas, el investigador afloj laligadura conobjet
deque un ncleo pasara hacia el lbulo que contena al citoplasma no nuclead
(Fig. 4-22). El lbulo nucleado secundariamente del citoplasma procedi entonces
adesarrollarse, demostrando as que el ncleo del embrin de 16clulas no haba
perdido an sucapacidad dedirigir el desarrollo embrionario apartir delaeta
deuna solaclula. Los estudios ms recientes (BriggsyKing, 1952)contrasplantes
dencleos tomados deblastmeras durante lasegmentacin enhuevos enuclead -
confirman esteresultado. La extensin ms amplia deesteenfoque seencuen _
en el trabajo deGurdon (1974), quien obtuvo ranas viables de ncleos de ranas
adultas que fueron trasplantados aJ lUeVQSenucleados (Fig. 1-27).
Lacapacidad queposenlas blastmeras ntegras yaisladas decontinuar el desa-
rrollo y regularse en individuos completos seha demostrado dediversas formas
Unresultado deregulacin ydel desarrollo normal deblastmeras quesehan se --
rado durante lasegmentacin temprana laconstituyen los gemelos idnticos.
blastmeras aisladas deembriones demamferos muestran una constante capa
que
mi-
rae
rior
e ~
lea-
l, si
r a s ,
l a s
ma-
olla
tros
: UD
in,
1010
otra
ras
s, la
gra-
) de
n su
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das
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esa-
levo
riera
cin
.jeto
eado
nces
aba
tapa
mtes
ados
.ntra
anas
lesa-
mas.
iepa-
. Las
paci-
Segmentacin y formacin de la blstula 1 63
Hemisferio
animal .,_""t'"'IUIII!~
d'>"- l- ~~
- - - - Vegetal 1
A Normal
-e-o
B Solamente el hemisferio animal Daverblastula
e Hemisferio animal y vegetal 1
o Hemisferio animal y vegetal 2
Fig. 4-21. Experimentos que muestran la importancia de la influencia vegetal para que se lleve
a cabo completamente la regulacin de los componentes en embriones de erizo de mar. B, El
hemisferio animal solo forma una bola ciliada; laDauerblastula. e-E, Al aadir de manera paulatina
ms anillos vegetales al hemisferio animal, el desarrol!o llega aser paulatinamente ms completo.
(Adaptado de Horstadlus, 1939.)
dad decreciente para formar individuos completos a partir de la etapa de dos a
ocho clulas (Pederson, 1986). En el caso del ratn, lasblastmeras deembriones
decuatro clulas han mostrado ser totipotentes en experimentos en los cuales se
combinan blastmeras individuales, oparesdeclulas derivados deuna sola blast-
mera, con blastmeras de huspedes genticamente diferentes (Kelly, 1977). En
esta instancia la totipotencia significa que estas clulas han mostrado ser capaces
de ingresar al linaje trofoblstico o de la masa celular interna. Aunque algunas
o
Fig. 4-22. Resumen del experimento de la constriccin de Spemann en huevos de tritn. Poco
despus de la fecundacin, el huevo se aprieta con un lazo de cabello, de modo que un segmento
del citoplasma contenga un ncleo y el otro no. A, Durante la segmentacin temprana, el segmento
nucleado se divide. B, Si despus de varias divisiones se permite que el ncleo erniqre.al segmento
no nucleado del citoplasma e, esa mitad del huevo apretado tambin comienza aformar un embrin
esencialmente normal (O, izquierda), el cual, sin embargo, es menos maduro que el embrin que
se produjo en el segmento nucleado al principio del huevo apretado (O, derecha). (Partes B-O,
segn Spemann, 1938. Embryonic Oevelopment and Induction, Yale University Press, New Haven.)
clulas de la masa celular interna permanezcan totipotentes, no ha sido posible
descubrir, por razones tcnicas, si las clulas trofoblsticas (o del trofectodermo,
como seles llama en el caso,del ratn) son capaces deconstituir derivados dela
masa celular interna.
A unnivel diferentedeorganizacin, lossegmentos demuchos embriones deverte-
brados poseenlacapacidad dereconstruir individuos completos mediante laregula-
cin. Spratt y Haas (1964) bisecaron blastodermos de pollo que contenan hasta
30000 clulas(Fig. 4-23). Cadamitad paspor el proceso deregulacinyconstituy
unembrin completo depollo (Fig. 4-23). Unavezqueel blastocisto del mamfero
seha subdividido entrofoblasto ymasa celular interna, ambas regiones dejan de
ser equivalentes, pero la separacin parcial o total de las porciones de la masa
celular interna dan gemelos como resultado (Fig. 1-21).El armadillo denueveban-
daspor lo regular produce cudruples deunsolo embrin temprano; esto es, duran-
o
o
o
o
n
e
"
.)
e
1,
a
l-
a
o
le
a
1-
l~
A B
-Ig. 4-23. Regulacin en el blastodermo temprano de pollo. Si no sana la parte posterior del
- stoderrno al segmentarse A, se forman dos embriones parcialmente unidos B. (Dibujo tomado
::E ~pratt y Haas, 1967. J. Exp. Zool., 164:31.)
~la etapa del blastocisto, lamasa celular interna forma cuatro brotes, cada uno
-=los cuales se organiza en un embrin individual (Patterson, 1913).
Existe un modelo experimental degran valor para los estudios embriolgicos
genticos queutiliza una propiedad reguladora ms delosembriones demamfe-
. Tarkowski y Mintz han logrado producir ratones tetrapaternos (alofnicos)
z, quitar lazona pelcida deembriones enproceso desegmentacin y luego combi-
-::;- stos. Las clulas se reorganizan en una sola esfera, que a continuacin se
_EllSfiereal tero delamadre" adoptiva" . El resto del embarazo procede normal-
@ @-@9-.-~-O-eJ
A B e
Fig. 4-24. Diagrama del procedimiento experimental para producir ratones tetrapaternos (alof-
~ s). Se obtienen dos embriones en etapa de segmentacin A. Una vez que se extrae la zona
~cida B, se permite la fusin de los embriones e, los cuales a continuacin se implantan en
- ero de una madre "adoptiva" D, la que ms tarde pare progenie quimrica E. (Modificado
:.a B. Mintz, 1962. Proc. Na ti. Aead. Sei., 58:334.)
mente, produciendo embriones mosaico quecontienen material gentico decuatro
progenitores (Fig. 4-24). Enestecaso, laspropiedades reguladoras delosembriones
permitieron laarmoniosa integracin dedos individuos potencialmente separados
en un solo embrin. En experimentos ms recientes sehan producido quimeras
deoveja ycabra adultas (Fig. 4-25) al combinar blastmeras deembriones tefnpra-
nos deovejas ycabras einyectarlas enel cascarn trofoblstico (del cual sehaba
extrado lamasa celular interna) deotro individuo -incluso del deun cerdo (Fe-
hilly y col., 1984; Meinecke-Tillmann, 1984).
En la etapa de 64 clulas, la masa celular interna del blastocisto de un ratn
contiene cerca de 15clulas. Los estudios estadsticos que se fundamentan en la
frecuencia deaparicin decaractersticas mosaicas en el ratn tienden aindicar,
en su mayor parte, que el cuerpo deeste mamfero surge detan slo tres clulas
delamasa celular.interna. Estas inferencias cuentan con el apoyo deotros experi-
mentos enloscuales sehan producido ratones quimricos al inyectar clulas aisla-
das deun embrin en el blastocisto deotro. Las clulas inyectadas con frecuencia
Fig. 425. Quimera de oveja ycabra producida al combinar blastmeras de embriones tempranos
de oveja y cabra. Cuando se rodean las blastmeras de la cabra con los trofocetodermos de =
oveja antes de introducir el embrin mosaico en el tero de una oveja husped, se reduce la incide
cia de aborto espontneo (rechazo por parte del husped del feto mosaico.) (Cortesa de C. Fehilly-
Willadsen, tomado de Fehilly y col., 1984.)
se fusionan con la masa celular interna y llegan a integrarse al cuerpo del embrin
usped. El uso detcnicas como las que sehan mencionado enesta seccin propor-
dona una cantidad inmensa de nueva informacin cerca de la organizacin de em-
riones tempranos de mamferos (Rossant y Pederson, 1986).
Otro aspecto invisible, aunque importante, de la organizacin embrionaria du-
rante la segmentacin y la etapa de la blstula es el de la polaridad, de los cuales
seintrodujeron factores iniciales de su desarrollo en embriones de aves y anfibios
en el captulo 3. El control inicial de lapolaridad en ambos grupos al parecer reside
en las regiones vegetativas de los embriones (Nieuwkoop, 1977). En las aves, el
control primario se encuentra en el hipoblasto primario, el cual al reorientarse
en forma experimental con respecto al epiblasto suprayacente da como resultado
zna orientacin en el embrin que corresponde a la posicin del hipoblasto. A
. erencia de los anfibios y aves, el embrin del mamfero no muestra indicios
e polaridad (a no ser por la posicin del cuerpo polar) sino hasta avanzada la
'!'tapa del blastocisto. Las circunstancias y mecanismos de fijacin de la polaridad
aleste tipo de embriones ha recibido relativamente poca atencin.
FENOMENOS MOLECULARES DURANTE LA SEGMENT ACION
LA BLASTULACION
_ lucho saos antes delaera delabiologa molecular lleg aser obvio que lasegmen-
racin puede llevarse a cabo en ausencia de la expresin del genoma embrionario,
aecho que fue demostrado de manera ms definitiva mediante experimentos en
os que seprodujeron fragmentos enucleados de huevos de erizos de mar (Harvey,
936). Cuando estos fragmentos de huevos, las mergonias, seactivaron parteno-
genticamente, ocurrieron divisiones de la segmentacin que exhibieron un asom-
roso grado de regularidad, desarrollando estructuras que mostraban las caracte-
rsticas externas de las blstulas, sin el blastocele. Asimismo se han realizado
experimentos similares en huevos de ranas, obtenindose resultados semejantes.
El siguientepaso importante en lacomprensin deladinmica molecular general
ocurri a inicios de la dcada de 1960 cuando seobtuvo un nmero de inhibidores
moleculares especficos a partir de organismos de aspecto semejante al de un hon-
go. Cuando seadministr ahuevos de erizos de mar actinomicina D, que en ciertas
osis acta como un inhibidor general de la sntesis del RNA, la segmentacin
rocedi normalmente, hasta que el embrin alcanz la etapa temprana de la bls-
rula (Gross y Cousineau, 1964), en tanto que cuando seexpusieron embriones anfi-
ios o erizos de mar apuromicina u otros inhibidores de la sntesis de protenas,
lasegmentacin ces de inmediato. La conclusin general que pudo derivarse de
estos experimentos era que no se requiere la sntesis de RNA para que se lleven
acabo las divisiones iniciales de lasegmentacin, pero que en ausencia delasntesis
eprotenas, el desarrollo ulterior seinterrumpe rpidamente. La inferencia lgica
apartir de estos primeros resultados estriba en que debe existir un abastecimiento
preformado de RNA en los huevos fecundados, con suficiente informacin para
conducir el desarrollo durante las etapas iniciales de la segmentacin.
Esta conclusin general fue sustentada mediante los estudios realizados en un
mutante anucleolado deXenopus. Como sunombre loimplica, losembriones ho-
mocigotos carecendenucleolos ysonpor consiguiente incapaces desintetizar RNA
ribosmico. A pesar deestaincapacidad, los embriones anucleados sedesarrollan
normalmente hasta la etapa en que salen del cascarn y exhiben lacapacidad de
iniciar movimientos natatorios, momento enel cual comienzan amorir. Estos em-
briones sobreviven tanto por el enorme abastecimiento de ribosomas de origen
materno generado en el huevo antes de la fecundacin.
Laspruebas que, antes quelosRNA embrionarios, sonlosdederivacin materna
los que dirigen lasegmentacin sehan obtenido deestudios genticos en algunos
grupos deinvertebrados. Unejemplo clsicodelainfluencia materna sobrelaorien-
tacin del huso mittico durante la segmentacin es el del caracol (Limnea), el
cual en mutantes por ltimo ocasiona laformacin deconchas enrolladas alaiz-
quierda (Siniestras) envezdelavariedad usual deconchas enrolladas hacia ladere-
cha (diestras) Boycott y col., 1930. Ms de 30mutantes deDrosophila muestran
los efectos que desempea el genoma materno en la segmentacin temprana.
Un nmero deinvestigaciones acerca del desarrollo temprano en embriones h-
bridos, enparticular enlosdeerizo demar, muestra quemuchas delascaractersti-
cas, como el ritmo desegmentacin, siguen instrucciones del genoma materno y
no del paterno (revisin de Davidson, 1976). En los hbridos de equinodermos,
hay pocos datos delaexpresin del genoma paterno hasta lagastrulacin tempra-
na, una vez que seha formado el mesnquima primario.
RNA 288 Y 1BS
:~
al
-g
;>
ID
288 Y 188 RNA

tRNA
ONA
Efecto de la Fecundacin Inicio de la acumulacin
de yema
Amplificacin
del rDNA
hormona
hlpofisaria
Blstula
Gstrula la cola Latido
del coraz
- Crecimiento del oocito tres meses - ------ 100 h
---
Maduracin
16 h
Fig. 4-26. Diagrama de las velocidades relativas de sntesis de cidos nucleicos durante el desa-
rrollo anfibio. Las ANA 5s, 18s y 28s son formas del rANA. Los diferentes patrones de sntesis
del ANA durante el desarrollo sonilatos afavor de controles que operan al nivel de latranscripcin.
(Modificado de J. B. Gurdon, 1974. The Control of Gene Expression in Animal Development, Har-
vard University Press; Cambridge.)
Los estudios directos desntesis deRNA enanfibios parecen confirmar lascon-
lusiones derivadas de las investigaciones indirectas resumidas aqu (revisin de
Gurdon, 1974). En el momento cuando hay una explosin desntesis de mRNA
: tRNA, justo antes delaetapa delablstula, seproduce muy poco RNA decual-
uier tipo (Fig. 4-27), entanto que, cuando seinicia lagastrulacin, sesintetizan
los miembros de la familia del RNA ribosmico en cantidades crecientes. Estos
escubrimientos secorrelacionan estrechamente con los resultados deestudios so-
, re inhibidores y el mutante anucleolado que seobtiene de los anfibios.
Noobstante, losestudios directos desntesisdeRNA enembriones deequinoder-
mos revelan un conjunto deacontecimientos bastante diferente, pues enfases tan
.empranas como latercera ocuarta divisin delasegmentacin seinicialasntesis
'::emRNA y RNA nuclear heterogneo. Los rRNA y tRNA nuevos sepresentan
:::momento delablstula. Engeneral, existeunincremento constante enlasntesis
::el RNA embrionario hasta la etapa dela blstula, punto en el cual comienza a
~elarse.
A pesar delasntesis relativamente temprana del RNA embrionario en el erizo
=-emar, los mRNA maternos son los que seexpresan durante la segmentacin,
J ado quesedescubren alos30minutos despus delafecundacin, yal poco tiempo
=~unen alosribosomas almacenados para formar polisomas sobre lasquepueden
. tetizarse las protenas que se.requieren para lasegmentacin. Las ciclinas son
zaa clasededichas protenas (Evans ycol., 1983), las cuales son codificadas por
5RNA maternos, sintetizadas despus decada divisin delasegmentacin yacu-
_._ladas aaltas concentraciones aproximadamente alamitad del ciclocelular, slo
:maser destruidas enlasiguiente ronda dedivisiones. A medida que seaproxima
momento delablastulacin, disminuye laimportancia delasciclinas. Las histo-
- representan otra clase prominente de protenas que sesintetiza con base en
. mensajes maternos durante la segmentacin temprana.
Enla etapa de la blstula, tanto en el erizo de mar como en los anfibios, se
ucelaactividad delos RNA maternos y principia latraduccin apartir delos
A embrionarios. Aunque no sehalogrado comprender por completo los fac-
zres que regulan la traduccin de los mRNA en estos embriones, existen varias
ibilidades bajo investigacin. Una deellas, lallamada hiptesis del mensajero
zsfrazado, propone que los mRNA secombinan con las protenas detal forma
_...2 el mensaje se bloquea fsicamente. Otra posibilidad ms es que los mRNA
sribosomas lleganasegregarsedetal modo queyano lesesposiblecombinarse
constituir polisomas. Latercera posibilidad esque los cambios que sellevan
zaoo al interior de la clula, como el pH o la composicin inica, afecten la
- encia del mecanismo de traduccin.
:":nmutante deinters en los anfibios, el mutante o del ajolote, representa una
erramienta para investigar latransicin entre el control materno y embrionario
= ocurre durante el desarrollo inicial. En este mutante de efecto materno, las
bras queposeen el genotipo % producen huevos quepasan por lasegmenta-
yblastulacin normales, si bienlaprimera disminuyeenvelocidad yel desarro-
seinterrumpe al poco tiempo dequeseobservan losprimeros indicios del labio
sal del blastoporo durante lagastrulacin (Fig. 4-27). No obstante, si seinyecta
190 Segmentacin y formacin, de la blstula
+/0 9 +/06
+/+
Normal
% 9 +/06
Efecto materno X normal
+/0
Normal
% 6
Estril
+/0
Gstrula
interrumpida
Gstrula
interrumpida
Fig. 4-27. Gentica del efecto materno recesivo del mutanteo en el ajolote, A pesar de su propio
genotipo (% o +/0), los huevos de hembras % (f;) son interrumpidos durante la gastrulacin,
en tanto que todos los derivados de hembras +/0se desarrollan en adultos (f,), aunque los embrio-
nes mismos puedan tener un genotipo oro. Los machos % son estriles, (Adaptado de Brothers, 1979.)
una pequea cantidad de citoplasma proveniente de una blastmera normal en
un huevo mutante, seevitalaobstruccin del desarrollo y procede uncontrol em-
brionario normal. Ello sugiere que algo del producto gentico materno participa
enlaestimulacin opermite el cambio decontrol del desarrollo materno al embrio-
nario.
El patrn deactividades moleculares durante el desarrollo temprano enlosma-
mferos difiere del erizo de-mar y otros vertebrados objeto de estudio (Schultz,
1986). Amado degeneralizacin puede decirsequeenlosmamferos existemenos
almacenamiento anticipado demacromolculas durante laoognesis y una activa-
cinms temprana correspondiente del genama embrionario queenotras formas.
Este patrn puede acomodarse debido al ritmo pausado dela segmentacin tem-
prana enlos mamferos. Mientras los embriones deXenopus desarrollan una gs-
trula que contiene unas 10000clulas durante las primeras 24 horas posteriores
alafecundacin y el embrin del erizodemar esuna blstula de500clulasdispues-
taasalir del cascarn, el embrin deratn apenas hapasado delaprimera divisin
dela segmentacin ala etapa dedos clulas. Con tal ritmo desegmentacin, las
blastmeras demamferos cuentan contiempo suficiente para sintetizar loscompo-
nentes que requieren para la siguiente divisin a partir del genoma embrionario,
hecho que resulta imposible enlos embriones enproceso desegmentacin rpido.
En el ratn seacumulan suficientes macromolculas informativas en el oocito
endesarrollo para guiar al cigoto atravs delaprimera divisin-de lasegmentacin,
si bien principia un cambio inmediato decontrol por parte del genoma materno
al embrionario enlaetapa dedos clulas. Esta conclusin seobtuvo por lasdemos-
traciones de: 1)una tasa elevada dedegradacin deRNA maternos; 2) una explo-
sindesntesis deRNA nu~vos; 3) laobstruccin del desarrollo una veztranscurri-
dalaetapa dedosclulaspor parte delosinhibidores transcripcionales actinomicina
D y alfa-amanitina; 4) los patrones cambiantes de la sntesis de polipptidos, y
5) los resultados de cruzas de padres con variantes diferente-s de enzimas clave.
Con correlacin aestepatrn desntesis embrionaria temprana hay nucleolos du-
rante el periodo temprano de segmentacin.
Los patrones desntesis deprotenas en el embrin demamfero temprano son
omplejos. Existen datos de que durante la primera divisin de la segmentacin
sellevaacabo lasntesis deprotenas que ocurra en forma independiente deque
sucediera o no la fecundacin, as como la sntesis de otras protenas que ocurre
slocomo consecuencia delafecundacin. Lamayor parte deestas protenas pri-
marias est constituida por RNA maternos y, como sera deesperarse, lasntesis
dehistonas desempea unpapel importante durante lasegmentacin. Hay pruebas
escasas deque los mRNA maternos dirigen la sntesis de protenas despus dela
etapa decuatro clulas, lo que significa que el proceso decavitacin, compresin
yformacin del blastocisto estbajo el control del genoma embrionario. En gene-
ral, lastasas desntesis deprotenas sonbajas hasta alrededor delaetapa deocho
clulas, yaque apartir deesemomento sepresenta un incremento drstico en la
sntesis y produccin de ribosomas.
Los embriones demamferos difieren delos anfibios en sus requerimientos de
energa. El embrin del anfibio debe ser por necesidad una unidad independiente
encuanto asusfuentes deenerga, entanto quelosembriones demamferos depen-
endeun abastecimiento continuo deenerga apartir desuentorno, tanto enlas
rrompas de Falopio cmo en la cavidad uterina.
QUE SE LOGRA A TRAVES DE LA SEGMENT ACION
LA BLASTULACION?
:i{e;ultasencilloconsiderar al periodo desegmentacin como una faserelativamen-
tesencilla del desarrollo, durante lacual el embrin no hacems queincrementar
el nmero desusclulas. Sinduda esteaumento representa lamanifestacin domi-
nante delasegmentacin, pues en ausencia deuna cantidad crtica declulas no
odran llevarse aefecto normalmente los movimientos morfogenticos que con-
:-ormanlabasedelagastrulacin, el siguiente periodo importante enel desarrollo
embrionario. Implcito en el incremento del nmero de clulas est el hecho de
queexisteunaumento correspondiente dematerial gentico (DNA) queel embrin
tiene a su disposicin. Asimismo, la formacin de una gran cantidad de clulas
individuales permite lasegregacin delosdiferentes tipos decitoplasma quepudie-
ron haber estado presentes en el huevo (p. ej., el plasma germinal en las ranas;
Fig. 3-1). Lasinfluencias citoplsmicas pueden ser importantes al evocar opermitir
diferencias enlaexpresin del contenido gentico del embrin. Sinembargo, esto
nopuedelograrse sinohasta queel embrin hayapasado por latransicin dedepen-
der de los mRNA de derivacin materna a producir transcripciones a partir de
su propio genoma. La citodiferenciacin que sucede a la formacin de mRNA
19.2 Segmentacin y formacin de la blstula
embrionario sefacilita por lareduccin enel tamao delaclulaaunradio nucleo-
citoplsmico ms tpico para permitir mayor control sobre los fenmenos intrace-
lulares.
A unnivel decomplejidad superior, los.l?J iD_cipales ejesembrionarios delamayor
parte delosembriones sefljan enforma_4efinitjy para Laetapa tar_c:l_c!e l ~!_~~-
la, si bien los ejes delos embriones demamferos permanecen ms tiempo lbiles
que los de la mayor parte de los dems embriones de vertebrados. Por ltimo,
durante esteperiodo, las.clulas de~<:'.s em~rulecisiQJ l~~_imp,-!:!an-
te~~ecto asu futuro destino. El ejemplo ms asombroso esel del embrin
de mamfero, en el cual muy tempranamente se segregan las clulas en las que
constituirn al embrin propio yproducirn estructuras extraembrionarias. Con-
formemadura lablstula, susactividades seorientan cadavezmsarealizar prepa-
rativos para lagastrulacin, loscuales no slo sereflejan enlospatrones cambian-
tes dela sntesis, sino tambin en las propiedades einteracciones superficiales de
las clulas. En algunos casos llegan incluso areflejarse enlos movimientos delas
clulas con respecto aotras. As, como sucede en lamayor parte delas fases del
desarrollo, no existeunaa demarcacin clara entrelasltimas etapas delablstula
y el inicio de la gastrulacin.
CAPITULO 5
GASTRULACION y CONSTITUCION
DE LAS CAPAS GERMINALES
GASTRULACION COMO PROCESO
J espus del periodo de segmentacin y formacin de la blstula, el embrin inicia
o delos periodos ms crticos de sudesarrollo: laetapa degastrulacion (gstrula,
=minutivo de la palabra griega gaster, estmago). Hasta este momento, la evolu-
:ron de desarrollo de la mayor parte de los animales seha encontrado bajo ladirec-
zin de las instrucciones de derivacin materna y de los procesos que se llevaron
::.cabo en el huevo antes je la fecundacin.(Aunque el nmero de clulas del em-
:rin en proceso de segmentacin ha aumentado enormemente, en su mayora no
zan comenzado a expresar propiedades especficas nicas o irreemplazables. An
_~desconoce en gran medida los mecanismos que activan las reservas genticas
:e la clula durante el periodo de la blastulacin, los cuales dirigen la sntesis de
zantidades sustanciales de RNA y protenas nuevas; sin embargo, en este momento
~inicia la transicin del control del genoma materno al del genorna embrionario
aproximadamente al mismo tiempo disminuye en forma considerable el ritmo
:.elas divisiones de lasegmentacin (Fig. 4-1). Conforme principia lagastrulacin,
zala mayor parte de los embriones muestran poco crecimiento o cambio en sumasa.
Lagastrulacin secaracteriza por profundos rearreglos .aunque bienordenados,
-~las clulas en elembrin. Uno de los principales cambios durante la gastrulacin
zmprana eslaadquisicin que realizan las clulas para experimentar movimientos
zorfogeneticos dmgaos,rosc~ales c~n_fucuenda_ producen reorganizacin __ del
=.:::illi_n-comp-Ieto o en regiones ms pequeas en suinterior. El trmino movimien-
;;]S morfogeneticos abarca una diversidad de patrones conductuales especficos
==las clulas, de los cuales se presentan los tipos ms comunes en el cuadro 5-1.
193
/'
I
194 Gastrulacin y constitucin de las capas germinales
Tipo de movimiento Descripcin
CUADRO 5-1. Principales tipos de movimientos morfogenticos que se observan en los embriones
tempranos
Ejemplo
Invaginacin Embolsamiento de una lmina
de clulas
Evaginacin Exbolsamiento de una lmina
de clulas
Involucin Desenvoltura en torno a un ngulo
de la capa externa de clulas
extendida y expansin sobre la
superficie interna
Epibolia Expansin de una lmina de clulas
Ingreso Hundimiento de clulas individuales
de una superficie en la zona
Delaminacin Separacin de una segunda lmina a
partir de una sola lmina original
Movimiento ameboide Migracin de clulas individuales
aisladas mediante su propia
movilidad
Formacin del arquenteron en
Aphioxus (Fig. 5-IA-D)
Exogastrulacin (Fig. 6-3)
Movimientos celulares a travs
del blastoporo de anfibio
(Fig. 5-9)
Expansin de las clulas
externas hacia el blastoporo
de anfibio (Fig. S-8B)
Formacin del mesnquima
primario en la blstula
del erizo de mar (Fig. 4-7)
Formacin del hipoblasto
primario en embriones de
aves (Fig. 4-IOC y D)
Migracin de clulas de
la cresta neural (Fig. 6-16)
Los principales movimientos morfogenticos durante la gastrulacin ocasionan
la reordenaci'n delembrin, a-partir de la blstula, a una etapa que secaracteriza
por la presencia de tres capas germinales, si bien en etapas posteriores continan
presentndose otros movimientos morfogenticos. Una de las consecuencias prin-
cipales de esta reorganizacin estriba en que los grupos de clulas que pudieron
encontrarse alejados entre s ahora se aproxinn lo suficiente para sufrir interac-
ciones.inductoras que toman parte en la constitucin de los principales sistemas
orgnicos.
Los embriones han adoptado dos estrategias importantes para enfrentarse ala
gastrulacin. La primera consiste en llevar a cabo los movimientos gastrulatorios
dentro del contexto de una esfera. Este modo de gastrulacin se observa en los
embriones de vertebrados muy primitivos, como el Amphioxus, los cuales contie-
nen poca yema, as como en los anfibios, dotados de cantidades moderadas de
yema. En el A mph ioxus , lagastrulacin consiste en una invaginacin delablstula,
constituyendo un recipiente de capa doble apartir de una esfera hueca de una SOl
capa, demanera muy similar alo que sucede cuando sepresiona una bola decaucho
hueca con el pulgar (Fig. 5-lA a 5-ID). La nueva cavidad en el recipiente de capa
doble recibe el nombre de gastrocele o arquenteron.
La abertura del exterior hacia el interior del gastrocele seha denominado tradi-
cionalmente blastoporo. As, durante la gastrulacin sereordena la capa origina'
nica de la blstula para formar (los capas. La exterior seconoce como ectoderm
ylainterior delagstrula temprana secompone bsicamente declulas pertenecien-
tes al endodermo, aunque su superficie superior tambin posee clulas destinadas
a constituir la capa germinal media o mesodermo.
Gastrulacin y constitucin de las capas germinales 195
Futuro
notocordio
Ectodermo
Futuro
Blastodermo
F
Fig. 5-1. Esquemas que muestran el efecto de layema en lagastrulacin.A-D, Amphioxus. E-G, Rana.
La gran cantidad de yema que contienen los huevos grandes, como los de los
reptiles y aves, dirige lasegunda manera importante en la que el embrin seadapta
a la gastrulacin. En los embriones de este tipo, la mayor parte de la f!1asa de
yema inerte basta para impedir el sencillo mecanismo de invaginacin que utiliza
el Amphioxus. Su gastrulacin ocurre, en cambio, mediante la elaboracin de las
tres capas germinales como dos lminas bidimensionales sobre un sector de laenor-
me esfera que representa la yema completamente pasiva. Conviene destacar que
los embriones de mamferos, al preservar el tipo de movimientos gastrulatorios
comunes a las aves y a los reptiles, traicionan su origen ancestral filogentico de
antepasados que ponan huevos con alto contenido de yema.
GASTRUlACION EN lOS EMBRIONES DE ERIZO DE MAR
Los movimientos morfogenticos que caracterizan a la gastrulacin comienzan en
la etapa de la blstula tarda con la separacin del mesnquima primario de las
paredes delablstula (Fig. 4-7). Las aproximadamente 50clulas mesenquimatosas
primarias desarrollan proyecciones prominentes llamadas filopodios; y al exten-
derlas y retraerlas, sedesplazan alo largo de lalmina basal que flanquea al blasto-
cele, hasta que se detienen y forman una estructura holgada en forma de anillo
cerca de la base del arquentern, en proceso de invaginacin (Fig. 5-2). El cornpor-
196 Gastrulacin y constitucin de las capas germinales
tamiento deestas clulas migratorias sugiereradicalmente que con sus filopodios
examinan laspropiedades especficas del sustrato sobre el queemigran (Gustafson
y Wolpert, 1967). Las investigaciones sobre trasplantes muestran que al inyectar
clulas mesenquimatosas primarias enblastoceles dehuspedes de.diferentes espe-
cies o edades, sedirigen hacia laubicacin adecuada, amenos deque el husped
seademasiado viejo odeuna especiedistinta (Fig. 5-3). Los estudios con anticuer-
pos monoclonales indican queconforme estas clulas desarrollan suspatrones de
conducta especficos, aparecen antgenos nicosensusuperficie (McClay yWessel,
1985). Durante su fase migratoria, las clulas exhiben poca afinidad entre s: sin
embargo, despus que sehan trasladado al anillo ecuatorial, suslargos filopodios
se unen en estructuras de aspecto semejante al de un cable. En estos cables se
forman espculas calcificadas que sirven como base para el esqueleto interno del
erizo de mar (Fig. 5-2).
Lacaracterstica principal delagastrulacin en el erizo demar esla formacin
del arquenteron ointestino primitivo (Fig. 5-2), lacual sellevaacabo endos fases
que pueden reconocerse fcilmente. La primera est dominada por el embolsa-
miento oinvaginacin delasclulasenel polovegetal para constituir el arquenteron
temprano (Fig. 5-2). Lamuesca queocasiona esteembolsamiento recibeel nombre
deblastoporo. Por lo general sesuelen atribuir las primeras etapas delainvagina-
cinaloscambios intrnsecos enlaforma delaclulayal cierto grado demotilidad
delasclulas participantes. Despusdeuna pausa, lasegunda fasedelaformaci::
del arquenteron secaracteriza por lapresencia deuna poblacin declulas mesen
quimatosas secundarias que pueden distinguirse en la punta ms interna del ar-
Mesnquima
secundario
Mesnquima
primario
A B
Fig. 5-2. Gastrulacin en el erizo
de mar. A, B, Gstrulas; e, Etapa
del prisma; D, Larva pltea.
Gastrulacin y constitucin de las capas germinales 197
Clulas mesenquimatosas
4 horas
~
B
/
19.5-3. Experimentos de trasplantes en blstulas de erizo de mar. A, Se inyectaron clulas
+esenqutmatosas primarias y secundarias y cuentas de ltex en el blastocele. Despus de cuatro
, las clulas mesenquimatosas primarias se establecieron en su ubicacin normal en el polo
='!;etal; las cuentas de ltex permanecieron inmviles y las clulas mesenquimatosas secundarias
IZaron movimientos no especficos. B, Las clulas mesenquimatosas primarias que fueron in-
;-- . as en una blstula tarda emigran rpidamente para unirse al mesnquima primario del hus-
(hilera superior). Cuando las clulas mesenquimatosas primarias se inyectan a una blstula
- prana, emigran hacia el polo vegetal, donde permanecen hasta que se forma el mesnquima '
-' ario y a continuacin se integran los dos mesnquimas primarios en una estructura normal
- era inferior). (Adaptado de D. McClay y C. Ettensohn, 1987. Cell recognition during sea urchin
.;astrulation. En W. Loomis, ed. Genetic Regulation of Development. A. R. Liss.)
;:;_uenteron(Fig. 5-2), las cuales extienden sus largos filopodios hacia lapared opues-
:adelablstula. Sesabe desde hace tiempo que los filopodios examinan lasuperficie
- terna de la pared del blastocele y por ltimo realizan contactos estables en una
egin dada cerca del polo animal (Fig. 5-2). Los filopodios entonces secontraen,
al parecer jalando al arquenteron tras ellos. Un estudio reciente de Hardin y Cheng
1986) ha puesto en duda la suposicin de que el acortamiento de los filopodios
epresenta la principal fuerza motora para completar la segunda fase de alarga-
miento del arquenteron. Mediante el modelado biomecnico y la produccin de

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~. . Etapa muy tarda delblastoclsto

288 Y 188 RNA

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