RESUMEN

Las orqudeas han sido apreciadas por su belleza desde la antigedad. Hoy
en da, el gnero Phalaenopsis representa el 60% de las orqudeas comercializadas
en el mundo. Para los mejoradores genticos como para los productores de flores de
corte, resulta muy importante reducir la mortalidad de plantas jvenes obtenidas in
vitro y acortar los tiempos de espera para alcanzar su madurez y floracin. Adems,
planear la produccin y la cosecha de Phalaenopsis es estratgico para ser
competitivos en el mercado. Se ha evidenciado que las bacterias promotoras del
crecimiento, Nostoc y Pseudomonas entre otras, establecen relaciones de simbiosis
con las races de orqudeas, facilitando la aclimatacin de las plantas jvenes. En
orqudeas, los reguladores del crecimiento se utilizan para aumentar la capacidad de
adaptacin de las plantas jvenes obtenidas in vitro; en particular, con AG
3
se ha
logrado reducir la mortalidad y promover el desarrollo. Para inducir la floracin se ha
utilizado 6-BAP en orqudeas monopodiales y AG
3
en orqudeas simpodiales con
efectos positivos. En particular, en Phalaenopsis, se ha evidenciado que el uso de 6-
BAP promueve la floracin en condiciones de baja temperatura, mientras que el AG
3

es ms apropiado en temperaturas altas.

El presente trabajo engloba los siguientes objetivos: reducir la mortalidad y
promover el desarrollo vegetativo en plantas jvenes, inducir la floracin en plantas
maduras y regular el desarrollo de la inflorescencia a fin de programar las cosechas.
El material vegetal utilizado fue compuesto por hbridos comerciales de
Phalaenopsis, cultivados en un invernadero comercial, en Texcoco, Estado de
Mxico. Para el desarrollo vegetativo se utilizaron tres lotes seleccionados por edad y
tamao de plantas. Se evaluaron los efectos de la solucin Steiner a dos
concentraciones diferentes, de la inoculacin de A. brasilense UAP154 y P.
fluorescens AVM y de la aspersin de una solucin de AG
3
y una de 6-BAP, ambas
10
-5
M. Para el estudio de induccin de la floracin se evaluaron los efectos de la
aspersin de AG
3
y 6-BAP ambas 1.4435847110
-4
M. Para el estudio de la
regulacin del desarrollo de la inflorescencia, se utilizaron plantas con una pequea
inflorescencia, y se evaluaron los efectos de la aspersin de tres concentraciones de
solucin de 6-BAP, respectivamente 2.510
-6
, 510
-6
y 10
-5
M, para regular el
desarrollo de la inflorescencia.

La inoculacin de clulas de Pseudomonas redujo la mortalidad en plantas
pequeas e intermedias. Adems, en plantas pequeas esta bacteria promovi un
mayor desarrollo vegetativo. La inoculacin con clulas de Azospirillum y de
aspersin de la solucin con AG
3
, tuvieron resultados positivos al reducir la
mortalidad en plantas intermedias. En plantas grandes, la aspersin con la solucin
de 6-BAP promovi un desarrollo ms elevado. No se evidenciaron tratamientos
tiles para inducir la floracin durante el periodo considerado en la etapa de
induccin de la floracin. Respecto al estudio de la regulacin del desarrollo de la
inflorescencia, se constat que los tratamientos utilizados son eficientes para incidir
en el desarrollo de la misma, retrasando o anticipando la apertura de las primeras
flores.
viii
ABSTRACT

Orchids have been appreciated for their beauty since ancient times. Nowadays, the
Phalaenopsis gender makes up 60% of the worlds commercialized orchids. For genetic
improvers as well as for flower producers, it is very important to reduce mortality in young
plants obtained in vitro and to shorten waiting periods to reach maturity and flowering.
Moreover, planning production and harvest of Phalaenopsis is strategic in order to be
competitive in the market. It has been shown that growth promoting bacteria, Nostoc and
Pseudomonas among others, establish symbiotic relations with orchid roots, facilitating
the acclimatization of young plants. In orchids, growth regulators are used to increase
adaptation abilities of young plants obtained in vitro; particularly, with AG
3
there has been
a decrease in mortality and positive encouragement of development. To induce flowering,
6-BAP has been used in monopodial orchids and AG
3
in simpodial orchids with positive
effects. Particularly, in Phalaenopsis, it has been seen that the use of 6-BAP promotes
flowering in low temperature conditions, while AG
3
is more appropriate for high
temperatures.

The current work encompasses the following objectives: to reduce mortality and
encourage vegetative development in young plants, to induce flowering in mature plants,
and to regulate the development of the flowers in order to program harvests. The plant
material used was made up by commercial hybrids of Phalaenopsis, grown in a
commercial greenhouse in Texcoco, in the State of Mexico. For vegetative development
three lots were used, selected by age and size of the plants. The effects of the Steiner
solution at two different concentrations, inoculation of A. brasilense UAP154 and P.
fluorescens AVM, and the aspersion of an AG
3
solution and a 6-BAP solution, both at 10
-
5
M, were evaluated. To study the induction of flowering, the effects of aspersions of AG
3

and 6-BAP, both at 1.4435847110
-4
M, were evaluated. To study the regulation of the
development of flowering, plants with small flowerings were used, and the effects of
aspersion with three concentrations of 6-BAP, 2.510
-6
, 510
-6
, and 10
-5
M respectively, to
regulate development of flowering, were evaluated.

The inoculation of Pseudomonas cells reduced mortality in small and intermediate plants.
Moreover, this bacterium promoted a greater vegetative growth in small plants. The
inoculation with Azospirillum and aspersion with the AG
3
solution had positive results by
reducing mortality in intermediate plants. In bigger plants, the aspersion with the 6-BAP
solution produced the greatest development. No treatments were found useful to induce
flowering during the considered period in the flowering induction stage. With regard to the
study of regulation of flowering development, it was seen that the used treatments are
efficient in affecting its development, delaying or anticipating the opening of the first
flowers.





ix
I INTRODUCCIN

La produccin de orqudeas a partir de semillas requiere de tres hasta siete
aos (Goh y Arditti, 1985 y Niemann, 2001). En el caso de produccin de
Phalaenopsis in vitro a partir de semilla o de yemas de la inflorescencia este periodo,
en promedio, es de tres aos. Por lo tanto, en la produccin comercial de nuevos
hbridos o de propagacin clonal de plantas de Phalaenopsis, resulta primordial
reducir este tiempo. Adems, obtener un bajo porcentaje de mortalidad, es
igualmente importante para reducir lo costos de produccin. En el caso de empresas
que se dedican a la produccin de nuevos hbridos comerciales, obtener un
desarrollo vegetativo rpido de las plantas, significa evaluar los resultados de las
cruzas en menor tiempo para elegir ms rpidamente los individuos sobresalientes,
reduciendo por lo tanto los gastos. Adems, reducir la mortalidad permite tener
mayor posibilidad de evaluar ms individuos. De la misma manera, en el caso de la
produccin de plantas clonadas, resulta ser igualmente ventajoso reducir la
mortalidad y promover el rpido desarrollo vegetativo para desminuir los costos de
produccin.
La capacidad de programar las cosechas, en el caso de la produccin de flor
de corte, es muy importante para mantener la competitividad en el mercado.
Dependiendo de los objetivos de la empresa, pueden cambiar las exigencias, pero se
mantiene invariante la importancia de la programacin de la produccin.
La fertilizacin mineral, la inoculacin de races con clulas de bacterias
promotoras del crecimiento y la aspersin de soluciones de reguladores del
1
crecimiento, pueden ser aplicados al cultivo de Phalaenopsis como prcticas
agronmicas para hacer efectivas estas exigencias productivas.
Existen evidencias que muestran que la fertilizacin mineral en orqudeas, ha
promovido el desarrollo vegetativo, obtenindose plantas ms vigorosas y sanas
(Hands, 2002a y 2002b). Tambin ha sido demostrado como en la naturaleza las
orqudeas instauran relaciones de simbiosis con hongos micorrizicos y bacterias que
pueden promover el crecimiento, beneficindose de las acciones biofertilizantes y
bioprotectores de estos microorganismos (Wilkinson et al., 1989 y 1993). A nivel
prctico, ha sido demostrado como la inoculacin de bacterias promotoras del
crecimiento, se logra aumentar la produccin y desminuir el impacto ambiental en
numerosos cultivos de inters agrcola (Tenuta 2003).
Tambin se ha evidenciado como el empleo de AG
3
y 6-BAP, pueda resultar
eficaz para promover el desarrollo vegetativo e inducir la diferenciaron floral en
plantas de Phalaenopsis (Brasch, 1999 y Goh y Arditti, 1985).
Por lo que reducir la mortalidad, promover el rpido desarrollo vegetativo de
plantas jvenes, inducir la floracin y regular el desarrollo de la inflorescencia en
plantas adultas de Phalaenopsis, han sido los objetivos principales de este estudio.
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II REVISIN DE LITERATURA
2.1 ORQUDEAS

2.1.1 Orqudeas en la antigedad
Las noticias ms antiguas sobre las orqudeas, como plantas de ornamento,
nos llegan a travs de Confucio (551 479 a.C.) quien menciona en sus escritos de
las fragancias de estas flores, promovindolas como reinas de las flores perfumadas,
dndonos prueba del conocimiento y aprecio por parte de los chinos (Larson, 1992).
Los primeros textos en relacin al cultivo de las orqudeas resultan ser tambin
chinos y publicados por Zhang Shi Geng en el ao 1233 d.C., donde el autor
describe sus cualidades, tipos, as como el cario, el cuidado y el riego que se debe
proporcionar para cultivar estas especies (Sin Hew, 2001).
En Grecia fue donde por primera vez se describen las plantas que pertenecen
a esta familia. Teofrasto (370 285 a.C.) le da el nombre de orchis a estas plantas
que tienen un tbero en forma de testculo (lo que esta palabra significa en griego) y
describe las propiedades que supuestamente tienen para curar enfermedades
debidas a los problemas relacionados con estos rganos masculinos. Dioscorides
utiliza el mismo nombre para describir las orqudeas mediterrneas en su herbario y
ya en el ao 1753, Linneo hace propio el trmino en su obra Specie Plantarum. De
aqu en adelante el trmino se aplicar a todas las especies de la familia
Orquidaceae (Abraham et al., 1985).
En el continente americano las orqudeas tambin fueron conocidas y
utilizadas en tiempos pre-hispnicos. Testigo de los conocimientos de los aztecas
sobre estas plantas es el herbario azteca (segn el Codigo Barberini, Latn
3
241, en la biblioteca vaticana). Este texto fue escrito por el espaol Martnez de la
Cruz y traducido al latn por otro nativo llamado Badianus. Ambos fueron profesores
en el Colegio de Santa Cruz en Tlaltilulco, una de las escuelas ms prestigiadas que
surgieron despus de la colonizacin espaola en Mxico.
El Herbario Azteca da muestra del conocimiento que los aztecas tenan de la
medicina y del empleo de algunas orqudeas como la Vanilla fragrans, Bletia
campanulada y Catasetum maculatum como remedio para el cansancio o como
aromatizante (Ospina, 1997). Francisco Hernndez en el ao 1651 describe en su
manuscrito la Vainilla, la Stanophea tigrina FROST, una especie de Laelia y dos
especies de Epidendrum (Abraham et al., 1985).
Los europeos iniciaron casi por azar el cultivo de las orqudeas, se menciona
que en el comercio de plantas exticas como helechos, lquenes y musgos tropicales
se sola utilizar como material de empaque los pseudobulbos de orqudeas. Fue as
como en el ao 1818 le llegaron a William Cattley un horticultor ingles, los primeros
ejemplares de cattleya que en lugar de ser desechados fueron inteligentemente
plantados por l y dieron su primera y magnifica floracin seis aos despus
(Underwood et al., 1974). Esto permiti el nacimiento de la industria de las orqudeas
en la ciudad de Hackney cerca de Londres en el ao 1821 (Larson, 1992).

2.1.2 Caractersticas generales de la familia Orchidaceae
La familia Orchidaceae cuenta con cerca de 600 gneros y entre 20,000 y
30,000 especies, dato aproximado, debido a las nuevas especies botnicas que son
descubiertas y registradas cada ao y tambin a los nuevos hbridos intergenricos,
interespecficos e intraespecficos producidos anualmente por los especialistas y lo
aficionados (Courtright, 1993). Desde el punto de vista botnico pertenecen a la
clase Monocotiledoneae, orden Microspermales, familia Orchidaceae.

4
Su estructura vegetativa puede ser distinguida segn tres tipos:
1. El llamado simpodial describe un tallo que se desarrolla segn
diferentes ejes horizontales (Cattleya, Cymbidium, Dendrobium, etc.) (figura 1),
produciendo rganos de reserva llamados pseudobulbos que sirven al mismo tiempo
de soporte para las hojas y las flores.
2. El llamado monopodial, donde la planta presenta un nico eje de
desarrollo vertical que produce un crecimiento en altura (Angraecum, Phalaenopsis,
Vanda etc.) (figura 2). En este caso la funcin de reserva es papel propio de las
hojas y de la races.
3. Por ltimo el tipo de orqudeas de clima templado donde no existen
estas dos formas de desarrollo, en cuanto las plantas presentan un rgano como
tbero o bulbo, que tiene la funcin de reserva de lquidos en las estaciones
adversas (Cypripedium, Ophrys, Orchis etc).




Figura 1. Ejemplos de orqudeas con desarrollo simpodial y pseudobulbos
5




Figura 2. Ejemplos de orqudeas con desarrollo monopodial y sin pseudobulbos
Tambin se pueden distinguir las orqudeas segn el hbitat que colonizan.
Podemos hablar de orqudeas terrestres, epfitas y litfitas. En los ambientes
mediterrneos se encuentran la mayora de las orqudeas terrestres y es muy
improbable encontrar epifitas por la escasez de humedad relativa. En los climas
tropicales podemos encontrar los tres tipos, aunque las ms abundantes y
fascinantes son las epifitas, viviendo pegadas a los rboles para proveerse de
energa lumnica (Abraham et al., 1985).
Se pueden hacer cinco diferencias bsicas entre esta familia del reino vegetal
y las otras, en orden:
Tienen flores zigomorfas con simetra bilateral.
El polen esta almacenado en polinios de nmero de dos a ocho dependiendo
del gnero y la especie.
Los rganos femenino y masculino estn agrupados en un nico rgano
llamado columna.
Tienen un rgano llamado rostlo el cual separa los polinios desde el pistilo.
6
La semilla, llamada semilla desnuda, no presenta endospermo, solamente
un embrin inmaduro, que necesita de la simbiosis con hongos micorrizicos
para lograr la germinacin (Larson, 1992).

Considerando en detalle, la flor de las orqudeas podemos decir que se
compone de tres estructuras: spalos ptaloideos, ptalos y columna. Podemos
adems dividir las flores de orqudeas en dos clases: Diandrae y Monandrae. Las
primeras (por ejemplo Cypripedium, Paphyopedilum, Phragmypedium) tienen dos
estambres frtiles separados uno para cada lado de una estructura que se compone
de un staminoide en el frente y un estigma atrs, al interior. El spalo dorsal es muy
colorido y grande, los spalos inferiores son poco desarrollados y poco visibles
(figura 3). Las Monadrae (flores de la mayora de las orqudeas) presentan los
rganos sexuales fundidos en la columna, poseen un solo estambre frtil, el estigma
est modificado para formar el rostelo. Adems estas flores cumplen una vuelta de
180 al abrirse (Goh y Arditti, 1985) (figura 4).
Los rganos radicales de las orqudeas epifitas presentan una pelcula
epidrmica externa llamada velamen a travs de la cual se oxigenan los tejidos
internos de la misma raz. Adems, en las epifitas el cortex radical siempre presenta
fotosntesis dada la presencia de cloroplastos (Boodley, 1998).








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A

B
D
C

Figura 3. Ejemplo de flor de orqudea Diandrae. A:
spalo dorsal; B: ptalo; C: staminoide; D: labellum


A
B
C
E

D

EL GENERO PHALAENOPSIS
Figura 4. Ejemplo de flor de orqudea Monoandrae. A:
spalo dorsal; B: ptalo; C: columna; D: labellum; E:
spalo inferior.

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