VAL - 72 Validación DQO - Método Colorimétrico

XX/XX/2004
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VALIDACIN DE MTODOS ANALITICOS
DEMANDA QUMICA DE OXIGENO (DQO) MTODO REFLUJO CERRADO COLORIMTRICO
EL METODO: DEMANDA
Coordinador Area Aguas

Residuales
Luz Fuentes
Luis Benavides
Director Laboratorio
Cecilia Moreno
Subgerente de Produccin
Xenia Ibarra
Coordinador
Aseguramiento de Calidad
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XX/XX/2004
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XX/XX/2004
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XX/XX/2004
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VAL_72
QUMICA DE OXIGENO (DQO) - METODO REFLUJO CERRADO

COLORIMETRICO HA SIDO
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Resumen de los cambios

Creacin del documento.
VALIDACION DE METODOS ANALITICOS

LABORATORIO DE CONTROL DE
CALIDAD
TRIPLE A - BARRANQUILLA
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0.
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VAL_72
INDICE
0. INDICE................................................................................................................................................ 2
1. PREVALIDACIN................................................................................................................................ 4
1.1.OBJETIVOS.................................................................................................................................................4
1.2.FUNDAMENTO DEL MTODO...............................................................................................................4
1.3.METODOLOGA.........................................................................................................................................4
1.3.1REACTIVOS Y PATRONES DE REFERENCIA....................................................................................4
1.3.2APARATOS Y MATERIALES................................................................................................................5
1.3.3CONDICIONES INICIALES DE TRABAJO.........................................................................................5
1.4.PROPUESTA DE VARIABLES A ESTUDIAR.........................................................................................6
1.4.1ESTABILIDAD DE LA MUESTRA........................................................................................................6
1.4.2ESTABILIDAD DE LOS TIEMPOS DE LECTURA..............................................................................6
1.4.3CURVA DE CALIBRACION..................................................................................................................6
1.4.4DETERMINACION DEL ERROR INSTRUMENTAL...........................................................................6
1.4.5DETERMINACION DEL LIMITE DE DETECCION............................................................................6
1.4.6LINEALIDAD DEL METODO..............................................................................................................6
1.4.7ESPECIFICIDAD Y SELECTIVIDAD..................................................................................................6
1.4.8 PRECISION Y EXACTITUD................................................................................................................7
1.4.9REPRODUCIBILIDAD Y REPETIBILIDAD........................................................................................7
1.5.CALCULOS Y RESULTADOS..................................................................................................................7
4.1Estabilidad DE LA MUESTRA ................................................................................................................7
.......................................................................................................................................................................8
4.2ESTABILIDAD DE LOS TIEMPOS DE LECTURA.................................................................................8
4.3Curva de calibracin................................................................................................................................9
1.5.1.DETERMINACION DEL ERROR INSTRUMENTAL........................................................................12
1.5.2.DETERMINACION DEL LIMITE DE DETECCION.........................................................................13
1.5.3.LINEALIDAD DEL METODO...........................................................................................................14
1.5.4.ESPECIFICIDAD Y SELECTIVIDAD...............................................................................................15
1.5.5.PRECISION Y EXACTITUD..............................................................................................................15
1.5.6.REPETIBILIDAD Y REPRODUCIBILIDAD.....................................................................................16
1.6.ANLISIS DE RESULTADOS.................................................................................................................18
1.6.1.Estabilidad de lASMUESTRAS...........................................................................................................18
1.6.2.ESTABILIDAD DE LOS TIEMPOS DE LECTURA...........................................................................19
1.6.3.Curva de calibracin..........................................................................................................................19
1.6.4.DETERMINACION DEL ERROR INSTRUMENTAL........................................................................19
1.6.5.DETERMINACION DEL LIMITE DE DETECCION.........................................................................19
1.6.6.LINEALIDAD DEL METODO...........................................................................................................19
1.6.7.SELECTIVIDAD Y ESPECIFICIDAD...............................................................................................20
1.6.8. PRECISION Y EXACTITUD.............................................................................................................20
1.6.9.REPETIBILIDAD Y REPRODUCIBILIDAD.....................................................................................20

CALIDAD
XX/XX/2004
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VAL_72
1.7.CONCLUSIONES......................................................................................................................................20
1.8.PROPUESTA DE VALIDACIN.............................................................................................................21
2. VALIDACIN.................................................................................................................................... 22
2.1.OBJETIVOS...............................................................................................................................................22
2.2.CONDICIONES INICIALES DE TRABAJO...........................................................................................22
2.3.PROCEDIMIENTO...................................................................................................................................22
2.4.CALCULOS Y RESULTADOS................................................................................................................23
2.5.ANLISIS DE RESULTADOS.................................................................................................................23
2.6.CONCLUSIONES .....................................................................................................................................24
2.7.ANEXOS....................................................................................................................................................24
3. INCERTIDUMBRE............................................................................................................................ 25
3.1 OBJETIVOS..................................................................................................................................... 25
3.2 IDENTIFICACION DE FUENTES DE INCERTIDUMBRE............................................................... 25
3.3 ANLISIS DE LOS COMPONENTES Y CUANTIFICACION DE INCERTIDUMBRE....................25
3.2.1. INCERTIDUMBRE TIPO A......................................................................................................... 25
3.2.2. INCERTIDUMBRE TIPO B........................................................................................................ 26
3.2.3. INCERTIDUMBRE TOTAL (UT)................................................................................................ 32
3.2.4. INCERTIDUMBRE EXPANDIDA................................................................................................ 32
4. BIBLIOGRAFA................................................................................................................................. 32

CALIDAD
XX/XX/2004
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1.
PREVALIDACIN
1.1.
OBJETIVOS
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VAL_72
Establecer los parmetros analticos que se deben considerar en el desarrollo y puesta en

marcha del proceso de validacin para la determinacin de DQO por el mtodo de reflujo
cerrado utilizando una tcnica espectrofotomtrica.
Identificar las variables fisico-qumicas que determinan la estabilidad y optimizacin del mtodo.
1.2.
FUNDAMENTO DEL MTODO
Metodo Reflujo Cerrado

La muestra de agua se oxida con una solucin sulfrica caliente de dicromato de potasio y sulfato de
plata como catalizador. Los cloruros son enmascarados con sulfato de mercurio. A continuacin se
determina fotomtricamente la concentracin de los iones Cr +3 verdes.
Reacciones involucradas:
En la oxidacin de material orgnico por dicromato en presencia de cido sulfrico, la mayor parte
del carbono es convertido a CO 2 mientras que todo el oxgeno presente en el compuesto orgnico
es convertido a agua. Otros elementos tambin pueden ser oxidados.
Los resultados de la DQO son usualmente expresados por la cantidad de oxgeno consumido
durante la oxidacin de la materia orgnica. Cuando el oxgeno es usado como el oxidante primario
en la oxidacin del ftalato cido de potasio, la siguiente ecuacin describe la reaccin:
KC8H5O4 + 7SO2 8CO2 + 2H2O + KOH
1.3.
METODOLOGA
Se utilizar el mtodo espectrofotomtrico (Spectroquant) descrito en la IE_72 Determinacin de

Demanda Qumica de Oxgeno (DQO) - Mtodo reflujo cerrado Colorimtrico
1.3.1
REACTIVOS Y PATRONES DE REFERENCIA
1.3.1.1
REACTIVOS
Kit de DQO merck 14541.

Ftalato cido de potasio
1.3.1.2
PATRONES DE REFERENCIA
No aplica.
CALIDAD
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1.3.2
1.3.2.1
VAL_72
APARATOS Y MATERIALES
APARATOS
Espectrofotmetro UV-VIS Genesys 2 serie 3N 28837007 localizado en el rea de FsicoQumica.

Balanza analtica digital Sartorius serie 50706338.
Ultrapurificador de agua Millipore Q Plus Brand Lote H9NM63006, localizado en el rea FsicoQumica.
Reactor DQO Hach modelo 45600, localizado en el rea de aguas residuales.
Agitador magntico.
Barras magnticas.
1.3.2.2
Pag. 5 /31
MATERIALES
Pipetas volumtricas AS de 1 mL, 2 mLl, 3 mL, 4 mL, 5 mL, 10 mL y 20 mL.

Viales de 16 mm x 100 mm con tapas.
Balones aforados de 50 mL, 100 mL, 500 mL, 1000 mL)
Gradilla para tubos de 16 mm x 100 mm
1.3.3
CONDICIONES INICIALES DE TRABAJO
Las condiciones iniciales de trabajo se establecieron con base en fuentes bibliogrficas como el
protocolo para estandarizacin de mtodos analticos del IDEAM, el manual del espectrofotmetro
Genesys 2 y estndar methods edicin 21.
Blanco: Se trabajar con el blanco reactivo suministrado por la casa fabricante. Rango de estudio:
Se trabajar un rango que va de 25 mg/L a 1500 mg/L.
El volumen de muestra: ser de 3 mL.
El tiempo de lectura: ser mnimo de 30 minutos.
Condiciones ambientales: Las muestras y los estndares se trabajaran en el laboratorio bajo las
condiciones ambientales de este (25C + 5C de temperatura y 40% -90% de humedad).
Materiales: Todo el material de vidrio utilizado debe estar preparado segn

Instruccin de Trabajo nmero 64 (ITL_64Lavado de Material de Vidrio).
Longitud de onda: Se escoger haciendo un barrido con un estndar intermedio y a la
bibliografa suministrada por el fabricante.
Solucin patrn de DQO de 1 500 mg/L y 500 mg/L: Preparada con ftalato cido de
potasio (KHP) agua ultrapura y preservada a aproximadamente 4C.
Volumen de muestra: 3 mL.
Cubetas de vidrio: Para medir en espectrofotmetro de 16 mm x 10 mm.

CALIDAD
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1.4.
PROPUESTA DE VARIABLES A ESTUDIAR
1.4.1
ESTABILIDAD DE LA MUESTRA
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VAL_72
Se trabajar un estndar, una muestra y una muestra adicionada y se leer despus de la adicin
de los reactivos y digestin de 2 horas durante 7 das.
1.4.2
ESTABILIDAD DE LOS TIEMPOS DE LECTURA
La tcnica sugiere un tiempo de enfriamiento mnimo de 30 minutos antes de realizar las lecturas y
que estas son estables por un tiempo prolongado.
Se medirn estndares de diferentes concentraciones a diferentes tiempos despus de ser enfriadas
las muestras.
1.4.3
CURVA DE CALIBRACION
Preparar soluciones estndar en el intervalo de 25 mg/L y 1 500 mg/L a partir de la solucin patrn
de 1 500 mg/L y 500 mg/L de ftalato cido de potasio, leer contra blanco de reactivo. Estas curvas
se deben hacer por triplicado.
A partir de estas se determina la curva Ringbom, de la cual se obtiene el intervalo ptimo de
concentracin, la curva de trabajo y la sensibilidad del mtodo. A partir de la curva de calibracin
tambin se construye la curva de Crawford, la cual permite el clculo del intervalo mnimo de error
analtico.
1.4.4
DETERMINACION DEL ERROR INSTRUMENTAL
Preparar una solucin estndar de concentracin que sea aproximadamente 36% T y leer 10 veces.
1.4.5
DETERMINACION DEL LIMITE DE DETECCION
Para determinar los limites de deteccin se realizaran los siguientes ensayos:

a) Preparar un blanco de reactivo y leer en absorbancia 10 veces, para calcular el LDI
b) Preparar el patrn de concentracin mnima detectable distinguible del blanco de reactivos. (25
mg/L) y leer 10 veces contra el blanco de reactivos para determinar el LDM
1.4.6
LINEALIDAD DEL METODO
A partir de una curva de calibracin seleccionada calcular la linealidad del mtodo a partir de la
relacin Seal/concentracin.
1.4.7
ESPECIFICIDAD Y SELECTIVIDAD
Especificidad y selectividad evaluando curvas de calibrado en la matriz natural de la muestra.

CALIDAD
XX/XX/2004
Revisin: 00
1.4.8
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VAL_72
PRECISION Y EXACTITUD
Precisin expresado como %CV. Exactitud como porcentaje de recuperacin de estndares en la

matriz del sistema (agua ultrapurificada) y en la matriz natural de la muestra.
1.4.9
REPRODUCIBILIDAD Y REPETIBILIDAD
La repetibilidad es una medida de precisin de datos o mediciones obtenidas por un solo analista,
que usa la misma tcnica y los mismos equipos y materiales de anlisis. Esta expresado por el R.C
95%, basado en la desviacin estndar en relacin con los grados de libertad.
La reproducibilidad es una medida de precisin de datos o mediciones obtenidos entre dos analistas
que usan la misma tcnica y similares materiales y equipos. Esta expresado por el R.C 95%, basado
en la desviacin estndar en relacin con los grados de libertad.
1.5.
CALCULOS Y RESULTADOS
Todos los resultados son expresados en mg O2/L.
4.1
ESTABILIDAD DE LA MUESTRA
Se determin la estabilidad de la muestra en un tiempo de 8 das no consecutivos. Se utiliz u

estndar de 500 mg/L, una muestra de agua residual y un adicionado de 50 mg/L.
TABLA 1. ESTABILIDAD DE LAS MUESTRAS
Estndar
DIA
Muestra
Adicionado
mg/L
501,58
104,28
158,15
507,31
107,65
153,96
515,35
106,12
156,37
499,01
105,85
156,47
484,75
110,2
158,05
501,3
119,43
162,2

CALIDAD
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VAL_72
Gr fico I - ESTAB ILIDAD DE LAS M UESTR AS

600
500
mg/L
400
30 0
20 0
10 0
0
Est ndar
4.2
DIAS
Adicionado
Muest ra
En la tabla 2 se encuentran los datos obtenidos al realizar las lecturas a diferentes intervalos de
tiempo.
TABLA 2. ESTABILIDAD DE LOS TIEMPOS DE LECTURA
Datos
TIEMPO
0 min.
20 min.
30 min.
60 min.
4 horas
24 horas
Est. 200 mg/L
198
194
195
194
192
190
Est. 400 mg/L
395
385
388
386
384
378
Est. 500 mg/L
488
485
483
483
480
475
Muestra 1
632
631
629
629
624
620
Muestra 2
264
264
261
262
260
258
Muestra 3
227
227
222
220
217
213

CALIDAD
XX/XX/2004
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VAL_72
Grfico 2 - E s tabilidad del tiem p o de lectu ra

70 0
60 0
50 0
400
30 0
20 0
10 0
0 min.
20 min.
30 min.
Est. 20 0 mg/ L
Muestra 1
4.3
60 min
tiempo
Est. 4 0 0 mg/ L
Muestra 2
4 horas
24 horas
Est. 50 0 mg/ L
Muestra 3
CURVA DE CALIBRACIN
En la tabla 3 se representan los resultados obtenido al realizar la curva de calibracin en el intervalo

de concentracin entre 25 mg/L y 1 500 mg/L A partir de los datos de absorbancia en funcin de la
concentracin se construyen las curvas de trabajo, de Ringbom y de Crawford.
TABLA 3. CURVA DE CALIBRACIN
CONCENTRACIN
ABSORBANCI
A
%T
LOG C
ABSORTANCIA
(C/C)/T
25
50
70
100
150
200
400
500
750
1 000
1 200
1 500
0,012
0,034
0,043
0,064
0,092
0,127
0,232
0,305
0,485
0,61
0,726
0,936
97,27
92,47
90,57
86,30
80,91
74,64
58,61
49,55
32,73
24,55
18,79
11,59
1,398
1,699
1,845
2,000
2,176
2,301
2,602
2,699
2,875
3,000
3,079
3,176
2,725
7,530
9,427
13,702
19,090
25,355
41,386
50,455
67,266
75,453
81,207
88,412
0,9727
0,9247
0,9057
0,8630
0,8091
0,7464
0,5861
0,4955
0,3273
0,2455
0,1879
0,1159
37,18
13,8
11,14
7,86
5,83
4,58
3,19
2,87
2,73
2,9
3,18
4
%T = 10((2-ABS)
Absort = 100 - %T
T = %T
(C/C)/ T = 0,434
CALIDAD
XX/XX/2004
Revisin: 00
100
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VAL_72
T LogT
Grfico 3 - CURV A DE TRABAJO DQO - R EFLUJO

CER RADO METODO COLORIMETRICO
1
0 ,8
ABS
0 ,6
0 ,4
0 ,2
0
50 0
10 0 0
15 0 0
mg/ L
20 0 0
Grfico 4 - CURV A DE RINGBOM - DQO

10 0
ABSORTANCIA
80
60
40
20
0
25
175
325
4 75
625
775
925
CONCENTRACION mg O2/ L
10 75
1225
1375

CALIDAD
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Revisin: 00
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VAL_72
Grfico 5 - CUR V A DE CR AWFOR D
(DC/C)/T
40
35
30
25
20
15
10
5
0
10
20
30
40
50
60
70
% Transmitancia
80
90
10 0
Para el estudio de sensibilidad se trabaj con las 3 curvas de calibracin para tomar los datos de
pendiente y coeficiente de correlacin lineal para cada una.
Tabla 4
FECHA
PENDIENTE
15/06/2004
16/06/2004
17/06/2004
Promedio
Desv. Estndar
0,000618
0,000578
0,000584
0,000593
0,000022
COEFICIENTE
DE CORRELACION
0,999471
0,999173
0,998783
Si se asume la sensibilidad como la pendiente promedio de las curvas de trabajo (m), el valor es
0,000593 mg/L. Si se calcula la sensibilidad como S = 0,0044/m entonces tenemos que
S = 0,0044/0,000 593
S= 7,42 mg/L.
El valor de la pendiente promedio es menor que la seal ruido (<0,0044) y si asumimos el valor de
s= 0,044/m obtenemos un valor alto. Se debe determinar si experimentalmente la curva es capaz de
determinar un cambio mnimo de concentracin.

CALIDAD
XX/XX/2004
Revisin: 00
1.5.1.
Pag. 12 /31
VAL_72
Los grficos que se encuentran a continuacin se elaboraron con base a la curva de calibracin. El
grfico 7 es una ampliacin donde se observa que a 36% de transmitancia, corresponde una
concentracin de estndar de aproximadamente 750 mg/L.
Gr fico 6 - CONCENTR ACION VS TR ANSM ITANCIA
% Transmitancia
110 ,0 0
10 0 ,0 0
90 ,0 0
8 0 ,0 0
70 ,0 0
60 ,0 0
50 ,0 0
4 0 ,0 0
30 ,0 0
20 ,0 0
10 ,0 0
% Transmitancia
25
175
325
4 75
625
775
925
Concentracin mg O2/ L
10 75
1225
1375
36 ,0 0
0 ,0 0
50 0
75 0
Concent racin mg O2/ L
10 0 0

CALIDAD
XX/XX/2004
Revisin: 00
Pag. 13 /31
VAL_72
Tabla 5 - ERROR INSTRUMENTAL

Estndar de 750 mg O2/L
No de lectura
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
Promedio
Desv. Estndar
Desv. Promedio
Valor mnimo
Valor mximo
t bajo
t alto
t 95%
DT
1.5.2.
Concentracin Absorbancia Transmitancia

743
0,454
0,352
741
0,453
0,352
738
0,451
0,354
736
0,45
0,355
730
0,446
0,358
746
0,456
0,350
739
0,452
0,353
748
0,457
0,349
737
0,45
0,355
749
0,448
0,356
740,70
0,4517
0,353
5,62
0,003
0,003
4,70
0,0027
0,002
0,35
0,358
1,96
2,12
2,18
0,01

Tabla 6 Determinacin del LDM
N Ensayo
mg/L
Blanco
st. 25 mg/L
25
*st. 25 mg/L
25
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
Promedio
Desv Estndar
-3,58
25,22
25,22
-6,45
25,52
25,52
-1,9
26,12
26,12
-2,72
28,84
-3,58
24,41
24,41
-8,13
25,84
25,84
Desv Promedio
-1,95
25,2
25,2
-6,96
24,33
24,33
-2,84
23,2
23,2
-7,21
25,18
25,18
-4,53
25,39
25,00
2,39
1,48
0,89
2,12
0,96
0,68

CALIDAD
XX/XX/2004
Revisin: 00
% CV (Precisin)
% Error
Numero datos
Valor Mnimo
Valor Mximo
Intervalo
T bajo
T alto
T teorico 95%
2 valor mnimo
2 valor mximo
Q bajo
Q alto
Q critico
t 95 (n-1)**
t (n-1) 99%
LDI( 1.645s)
LID (3.29*s)
LDM Estimado
LDM (prom+st)
LDC (10s+blanco)
-52,65
5,82
3,57
10
10
-8,13
23,2
23,2
-1,9
28,84
26,12
6,23
5,64
2,92
1,69
1,48
2,02
1,24
2,34
1,25
2,18
2,18
2,11
-7,2
24,33
24,33
-1,95
26,12
25,84
0,15
0,20
0,39
0,01
0,48
0,10
0,41
0,41
0,44
2,26
2,26
2,31
2,82
2,82
2,9
3,925
2,430
1,470
7,85
4,86
2,94
7,49
4,64
2,81
2,20
29,55
27,59
Pag. 14 /31
VAL_72
4,40
* Los valores de est columna corresponden a los clculos despus de aplicar los criterios de
rechazo de datos.
1.5.3.

Tabla 7 Linealidad del mtodo
concentracin
absorbancia
mg O2/L
Relacin
seal/conc.
25
0,012
0,0005
50
0,034
0,0007
70
0,043
0,0006
100
0,064
0,0006
150
0,092
0,0006
200
0,127
0,0006
400
0,232
0,0006
500
0,305
0,0006
750
0,485
0,0006
1000
0,61
0,0006
1200
0,726
0,0006

CALIDAD
XX/XX/2004
Revisin: 00
Pag. 15 /31
VAL_72
Tabla 7 Linealidad del mtodo

concentracin
Relacin
absorbancia
mg O2/L
seal/conc.
1500
1.5.4.
0,936
0,0006
ESPECIFICIDAD Y SELECTIVIDAD
Tabla 8. Resultados estadstico de las cuatro (4) curvas de Calibracin montadas
Curva
1
4*
25 - 1500
25 - 1500
25 - 1500
25 - 1500
Desv. St. Mtodo
17,21
21,53
26,12
18,9
%CV del mtodo
3,47
4,35
5,27
5,98
Pendiente m
0,00062
0,000578
0,000584
0,00076
Intercepto b
0,00063
0,0032
0,0024
0,045
No de puntos
12
12
11
Coeficiente de
correl.
0,999
0,999
0,998
0,998
Rango
* Curva montada en la matriz en estudio

Estos atributos se calculan evaluando si hay o no variaciones del valor de la pendiente de una curva
de calibracin montada en la matriz de la muestra con respecto al valor medio de la pendiente de la
matriz del sistema (agua ultrapurificada).
1.5.5.
La precisin es determinada a partir de diez lecturas de una muestra, un estndar de 25 mg/L,

estndar de 100 mg/L, un estndar de 500 mg/L, una muestra de agua residual tomada en la EDAR
el Pueblo y un adicionado de 100 mg/L.

CALIDAD
XX/XX/2004
Revisin: 00
st. 25 mg/L
n
xm
s
%CV
1.5.6.
25,22
25,52
26,12
28,84
24,41
25,84
25,2
24,33
23,2
25,18
10
25,39
1,477
5,82
Tabla 9. Resultados Coeficiente de Variacin

% de
st. 100
% de
% de
st. 500 mg/L
recup
mg/L
recup
recup.
100,9
102,1
104,5
115,4
97,6
103,4
100,8
97,3
92,8
100,7
10
101,54
5,910
5,82
90,6
100,0
113,2
95,5
103,8
107,5
103,6
107,1
98,8
100,6
10
102,06
6,461
6,33
90,6
100,0
113,2
95,5
103,8
107,5
103,6
107,1
98,8
100,6
10
102,06
6,461
6,33
483,1
517,7
490,5
505,0
479,4
489,3
478,0
499,0
476,3
522,0
10
494,03
16,430
3,33
Pag. 16 /31
VAL_72
muestra
adicionad
o
% de
recup
79,26
74,21
70,86
70,86
73,68
74,22
72
72,53
74,21
70,86
10
73,27
2,545
3,47
173,37
170,01
164,97
166,65
163,29
167,74
175,05
176,73
168,33
172,78
10
169,89
4,462
2,63
94,11
95,8
94,11
95,79
89,61
93,52
103,05
104,2
94,12
101,92
10
96,62
4,783
4,95
96,6
103,5
98,1
101,0
95,9
97,9
95,6
99,8
95,3
104,4
10
98,81
3,286
3,33
REPETIBILIDAD Y REPRODUCIBILIDAD
Se realiz con dos muestras de diferentes concentraciones las cuales se leyeron diez veces y por 2
analistas. Se utiliz la metodologa descrita en la IE_72.
Tabla 10. Estudios de Repetibilidad y Reproducibilidad
ANALISTA 1
No. de ensayo Muestra 1
Muestra 2
1
36,8
350,0
2
36,4
351,0
3
35,2
411,0
4
45,3
403,4
5
46,9
393,5
6
45,3
383,4
7
43,8
403,4
8
45,5
403,5
9
38,1
403,5
10
38,6
402,1
Promedio
41
390,5
ANALISTA 2
Muestra 1
Muestra 2
44,2
359,0
35,2
369,0
43,8
387,0
35,2
386,0
45,3
413,7
43,0
402,1
45,5
393,4
42,8
383,1
39,2
390,5
36,6
403,8
41,1
388,8

CALIDAD
XX/XX/2004
Revisin: 00
Pag. 17 /31
VAL_72
REPETIBILIDAD
Dif
-4
5
-6
4
-6
4
3
-4
-3
3
-40
39
-21
13
3
7
13
13
13
12
-3,1
5,9
-2,7
5,9
4,2
1,9
4,4
-1,7
-1,9
-4,5
30
20
-2
3
25
13
5
6
-2
15
19
23
36
17
33
17
7
18
9
7
186
1638,8
1558,8
421,0
166,9
9,2
50,7
166,9
169,5
169,7
135,9
4487,4
10
35
8
34
18
4
19
3
4
20
153
885,7
390,5
3,1
7,6
622,0
177,9
21,5
32,3
3,0
227,4
2371,0
(Dif)2
Suma de (Dif)2
suma total de
(Dif)2
GL
Suma de GL
Variacin
Desviacin
Rechazo de datos:
F'
LC 99%
Rango 95%
F'
RC 95%
4673
9
2524
9
18
260
16
9
18
140
12
2,88
46,40
2,88
34,11
2,97
47,85
2,97
35,17

CALIDAD
XX/XX/2004
Revisin: 00
REPETIBILIDAD DE LOS
ANALISTAS
ANALISTA
Variancia Desv. Estndar Suma de (Dif)2
1
260
16
4673
2
140
12
2524
Comparacin de los resultados de los analistas

Analista 1 con 18 GL
260
Analista 2 con 18 GL
140
1,85
Pag. 18 /31
VAL_72
GL
9
9
<2,34
REPRODUCIBILIDAD
Gtan promedio
Dif Analista 1
Dif Analista 2
(Dif)2 Analista 1
(Dif)2 Analista 2
Suma de (Dif)2
Total GL
suma total de
(Dif)2
Variacin
Desviacin
F'
LC 99%
F' 95%
LC 95%
MUESTRAS
1
2
41,129
389,622
-0,054
-0,860
0,054
0,861
0,003
0,740
0,003
0,740
0,006
1,481
2
2
1,49
0,74
0,86
9,93
8,6
3,64
3,14
1.6. ANLISIS DE RESULTADOS
1.6.1.
ESTABILIDAD DE LASMUESTRAS
Cmo se observa en la tabla 1 y el grfico 1 no hay diferencias significativas por lo que las muestras
pueden ser ledas hasta 7 das despus de haberlas preservadas con cido sulfrico a un pH < 2 U
y refrigeradas.

CALIDAD
XX/XX/2004
Revisin: 00
1.6.2.
Pag. 19 /31
VAL_72
En la tabla 2 y el grfico 2 se observa que las lecturas son estables durante un tiempo bastante
prolongado, incluso hasta por 24 horas.
1.6.3.
CURVA DE CALIBRACIN
En el grfico 3 y en la tabla 3 se representan los resultados obtenidos al realizar la curva de

calibracin en un intervalo entre 25 mg/L y 1 500 mg/L. A partir de los datos de absorbancia en
funcin de la concentracin se construyen las curvas de Ringbom (grfico 4), de trabajo (grfico 3) y
de Crawford (grfico 5).
El grfico 2 es la representacin de la absorbancia en funcin de la concentracin, muestra un
segmento recto en el intervalo de 25 mg/L A 1500 mg/L.
El grfico 4 es la representacin de la absortancia en funcin de la concentracin y se obtiene una
curva de forma sigmoidal (curva de Ringbom), en la cual se puede observar una tendencia lineal
para 8 puntos correspondientes al ciclo logartmico entre concentraciones de 25 mg/L a 750 mg/L.
La curva de calibracin presenta un coeficiente de correlacin de 0,9994 y pendiente 0,000618
mg/L. Se considera la sensibilidad como la pendiente de la curva de trabajo, obtenidas del promedio
de las curvas de calibracin la cual es 0,00059.
1.6.4.
Segn el grfico 5, curva de Crawford, se obtiene un intervalo amplio de transmitancia del 10 al 80%
en el cual se encuentra el mnimo error fotomtrico. El grfico 6, transmitancia contra concentracin
establece la concentracin de DQO que produce una transmitancia cercana al 36% y la grfica 6a
es una ampliacin donde se puede observar que la concentracin equivale a aproximadamente 730
mg/L, por lo que se prepar un estndar de concentracin cercana a ese valor 750 mg/L y se ley
10 veces. El error fotomtrico obtenido es de 0,01 (Tabla No 5).
1.6.5.
La tabla 6 resume los datos obtenidos, teniendo en cuenta los diferentes criterios para rechazo de
datos. El LDI obtenido es de 1,470. Se elige este valor ya que la lectura de los blancos dieron
valores negativos y la desviacin es mayor a la del estndar. El LDM es de 27,6 mg/L
1.6.6.
Determinado por la relacin seal/concentracin. Como se observa en la tabla 7 el valor de la

relacin seal /concentracin es de 0,0006 con una desviacin estndar de 0,00005 lo que nos da
una buena linealidad del mtodo en el rango de 25 mg/L a 1 500 mg/L.

CALIDAD
XX/XX/2004
Revisin: 00
1.6.7.
Pag. 20 /31
VAL_72
SELECTIVIDAD Y ESPECIFICIDAD
Se puede observar que no hay diferencia significativa entre los valores de las pendientes, lo que
puede decirse que el mtodo es especfico y selectivo para la determinacin de DQO en agua.
1.6.8.
El CV no super el 10%. El CV promedio ms alto entre los estndares medidos fue de 6,33%. La
exactitud calculada como porcentaje de recuperacin de los estndares estuvo entre 98,81% y
102,06. Para los adicionados el porcentaje de recuperacin promedio fue de 96,62%
1.6.9.
REPETIBILIDAD Y REPRODUCIBILIDAD
En la tabla 10 se observan los resultados obtenidos por dos analistas al realizar cada uno anlisis a
dos muestras. Cada uno realiz 10 rplicas de cada muestra. Al realizar el anlisis estadstico
encontramos que no hay una variacin significativa y al hacer la comparacin entre ellos se obtuvo
un valor menor a 2,34 obtenido de la tabla relacin crtica para el 95% de confianza y los datos
pueden ser incluidos en el clculo de desviacin estndar de reproducibilidad.
Individualmente los analistas trabajan con las siguientes precisiones:
Analista 1: Desviacin estndar de 16
Analista 2: Desviacin estndar de 12
Los analistas 1 y 2 trabajaron con la siguiente precisin 0,86 y un rango de 95% de confianza de
3,14.
Los resultados para los analistas 1 y 2 para una misma muestra no debern diferir por ms de
ese rango.
1.7. CONCLUSIONES
Las muestras son estables y pueden ser analizadas hasta 7 das despus de la toma de muestra
previamente preservadas. El tiempo mnimo de enfriamiento de las muestras debe ser de 30
minutos. El valor de medicin es estable durante un tiempo prolongado sin embargo, se sugiere
hacer las lecturas en un tiempo inferior de 2 horas.
El error fotomtrico es de 0,01 %T, con lo que no se podran diferenciar muestras con un delta de T
menor a este valor.
Sensibilidad del mtodo: 0,00059 mg/L.
El error fotomtrico: 0,01
El LDM: 27,59 mg O2/L.
El LDI 1,47 mg/L
La linealidad del mtodo: 0,0006
% Coeficiente de variacin ms alto obtenido fue de: 6,33
El mtodo es especfico y selectivo para la determinacin de DQO en agua.

CALIDAD
XX/XX/2004
Revisin: 00
Pag. 21 /31
VAL_72
1.8. PROPUESTA DE VALIDACIN

El siguiente es el grupo bsico de muestras que se leer por duplicado y que se plantea valorar en
la validacin de la demanda qumica de oxgeno (DQO) en agua, por reflujo cerrado mtodo
fotomtrico preparando y analizando lote a lote cada da, por siete das que consta el proceso:
Bk: Blanco: Agua ultrapurificada obtenida del MilliQplus.
Eb: Estndar de concentracin baja: 100 mg/L
Em: Estndar de concentracin media : 500 mg/L
Ea: Estndar de concentracin alta: 1 000 mg/L
M1: Agua residual de concentracin baja
M2: Agua residual de concentracin media
M1Ab: Muestra adicionada de 100 mg/L.
M1Aa: Muestra adicionada de 200 mg/L
El proceso de validacin se inici el mismo da en que se mezclaron las muestras. El blanco de
reactivo se prepar diariamente. Las muestras de aguas residuales fueron preservadas con cido
sulfrico concentrado hasta obtener un valor de pH <2 U.
Se utiliz para el estndar de 1 000 mg/L una solucin certificada marca Hach Lote xxx con fecha de
vencimiento de xxxx. Se prepar un estndar de 500 mg/L con Ftalato cido de potasio y a partir de
este se prepar uno de 100 mg/L. Los adicionados fueron preparados con la solucin estndar de
500 mg/L.

CALIDAD
XX/XX/2004
Revisin: 00
2.
VALIDACIN
2.1.
OBJETIVOS
Pag. 22 /31
VAL_72
Determinar de manera experimental y para las condiciones del laboratorio de control de calidad de la
empresa Triple A, los valores de los parmetros que servirn como criterio de confianza para la
determinacin de la DEMANDA QUMICA DE OXIGENO (DQO) por reflujo cerrado utilizando el
mtodo fotomtrico.
2.2.
CONDICIONES INICIALES DE TRABAJO

Tiempo de enfriamiento de las muestras mnimo 30 minutos.
Matriz: se utilizar agua residual domstica procedentes del EDAR El Pueblo y de la EDAR
Puerto Colombia.
Las otras condiciones iniciales de trabajo son iguales a las de prevalidacin.
2.3.
PROCEDIMIENTO
El fundamento, los reactivos, los materiales y los equipos son los mismos que los utilizados en las
prevalidacin.
Grupo de muestras a estudiar:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
Bk: Blanco de agua ultrapurificada obtenida del MilliQplus.

Eb: Estndar de 100 mg/L
Em: estndar de 500 mg/L
Ea: estndar de 1 000 mg/L
M1: Muestra de agua residual tratada
M2: Muestra de agua residual domstica
M1A1: Muestra 1 adicionada de 100 mg/L
M1A2: Muestra 1 adicionada de 200 mg/L
La validacin se inici el mismo da en que se prepararon las muestras.

CALIDAD
XX/XX/2004
Revisin: 00
2.4.
Pag. 23 /31
VAL_72
CALCULOS Y RESULTADOS
Para las condiciones de trabajo establecidas en el proceso de Validacin para la determinacin de

DQO reflujo cerrado mtodo fotomtrico en el Laboratorio de Control de Calidad se determinaron
los siguientes parmetros estadsticos como criterio de confiabilidad del mtodo:
2.5.
ANLISIS DE RESULTADOS
El clculo de la concentracin de Demanda Qumica de Oxgeno, DQO expresado en mg/L, es leda

directamente de la pantalla del equipo Gnesis 2.
Tabla 1. Parmetros estadsticos de los resultados analticos
No. De Ensayos
mg/L
bk
Eb
Em
Ea
M1
M2
M1Ab
M1Aa
100
500
1000
77
607
177
277
-9,44
93,9
507
1008
79,4
616
174
263
-5,94
90,4
505
1013
71,6
617
175
257
-4,22
91,2
505
1000
87,2
604
179
272
-1,77
104
506
1007
76,3
615
176
282
-6,45
107
512
1003
89,6
621
175
270
-8,67
106
511
1013
82,4
624
183
267
0,21
102
501
1004
73,9
600
163
262
0,1
95,5
497
997
75,4
603
166
260
-8,4
86,7
481
1000
70,1
585
168
250
-9,4
83,5
485
1018
75,5
604
169
269
1
2
3
6
7
promedio
desviacin estndar
%CV
-1,7
94,2
506
999
80,9
605
185
269
-2,72
105
496
997
74,2
610
185
284
-3,7
94,1
487
993
72
597
163
255
-3,97
97,1
497
1011
74,3
595
160
260
-5
96
500
1005
77
607
173
266
3,39
7,384
9,707
7,367
5,838
10,932
8,325
9,627
-71,74
7,65
1,94
0,73
7,55
1,80
4,81
3,62
% Error
-3,53
-0,06
0,45
0,45
-0,02
-2,30
-4,07
% de recuperacin
96,5
99,9
100,5
95,59
94,19
nmero de datos
14
14
14
14
14
14
14
14
Mnimo
-9,44
83,5
481
993
70,1
585
160
250
Mximo
0,21
107
512
1018
89,6
624
185
284
Intervalo
9,65
23,5
31
25
19,5
39
25
34
Talto
1,46
1,43
1,27
1,83
2,10
1,57
1,45
1,90
T bajo
1,39
1,76
1,93
1,56
1,24
2,00
1,55
1,63
T terico
2,29
2,37
2,37
2,29
2,37
2,29
2,29
2,37

CALIDAD
XX/XX/2004
Revisin: 00
Pag. 24 /31
VAL_72
Al realizar una evaluacin de los resultados experimentales se observa que no se presenta ningn
sesgo en el ensayo. Como tampoco se evidencian posibles errores sistemticos en el proceso de la
determinacin de demanda qumica de oxgeno por reflujo cerrado mtodo fotomtrico.
Exactitud del mtodo: evaluada por la Prueba de la recuperacin de la adicin y expresada como
% recuperacin, es satisfactoria para las dos adiciones utilizadas M1A1 y M1A2 en la matriz de agua
a ensayar respectivamente con valores correspondientes de 95,59% y 94,19% respectivamente.
El porcentaje de error relativo para los estndares estuvo por debajo del 1%.
La Precisin del mtodo est evaluada en trminos del coeficiente de variacin. Para los
estndares, muestras y adicionados fue menor del 10%, lo cual indica una buena precisin del
mtodo.
Sensibilidad: qued determinada en la prevalidacin como la media del valor de la pendiente de las
curvas de calibracin instauradas previamente.
2.6.
CONCLUSIONES
El mtodo fotomtrico para determinar la concentracin de demanda qumica de oxgeno en agua

es apto para utilizar en el Laboratorio de Control de Calidad de Triple A para obtener resultados con
un alto grado de confiabilidad bajo las condiciones de trabajo establecidas.
2.7.
ANEXOS
Certificado de la solucin estndar de DQO Hach de 1 000 mg/L Lote A4089 exp. Abril/2005.
Certificado del reactivo Ftalato cido de potasio Merck lote A474374.

CALIDAD
XX/XX/2004
Revisin: 00
3.
INCERTIDUMBRE
3.1
OBJETIVOS
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VAL_72
Identificar de las fuentes de incertidumbre en la determinacin de demanda qumica de oxgeno

por reflujo cerrado, mtodo fotomtrico.
Calcular el valor de incertidumbre del mtodo Fotocolorimtrico para la determinacin de
demanda qumica de oxgeno en agua.
3.2
IDENTIFICACION DE FUENTES DE INCERTIDUMBRE
INCERTIDUMBRE TIPO A
UA : Incertidumbre de Repetibilidad
INCERTIDUMBRE TIPO B
Incertidumbre de la solucin estndar
Incertidumbre en la curva de calibrado.
3.3
ANLISIS DE LOS COMPONENTES Y CUANTIFICACION DE INCERTIDUMBRE
3.2.1.
INCERTIDUMBRE TIPO A
Para el clculo de la incertidumbre de repeticin se trabaj con la desviacin estndar de una

solucin de KHP (Ftalato hidrgeno potasio) de concentracin = 750 mg/L usado en la validacin.
UA =
xW
S = 5,62
W= 1
N= 10 datos
UA =
5 ,62
10
x1
U A = 1,78

CALIDAD
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3.2.2.
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VAL_72
INCERTIDUMBRE TIPO B
1. UE : proporcionada por el equipo

2. Uc : De concentracin
a.
2: UP : Incertidumbre del patrn
b.
2b: Upc : Incertidumbre del proceso de calibrado
3.3.2.1 Incertidumbre proporcionada por el equipo (U E)

La incertidumbre proporcionada por el equipo est dada por la resolucin de este equipo es 0,001.
UE =
UE =
Resolucin
2 3
0 ,001
2 3
U E = 0 ,000 3
3.3.2.2 Incertidumbre de concentracin (U C)

Para conocer la incertidumbre de concentracin tomamos los datos de la curva de calibracin.
La incertidumbre de concentracin tiene las siguientes contribuciones:
a. Contribucin del patrn empleado
b. Contribucin debida al proceso de calibracin
UC = U 2 patrn +U 2 proceso
a. Incertidumbre del patrn

Las soluciones estndares se preparan a partir de un estndar certificado de 1 000 mg/L. El
certificado del estndar reporta el valor en % de fraccin masa de 99,9911 + 0,0054. Este estndar
mediante diluciones sucesivas aportan otras incertidumbres. Se tienen en cuenta la incertidumbre de
preparacin y de la solucin final.
CPatron = CMR
2
UP = UCMR
Vinicial
VFINAL
Vi2
VF2
+ U 2VI
2
CMR
VF2
+ U 2VF
2
CMR
V12
VF4

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VAL_72
Donde:
UCMR = Valor declarado por el fabricante en el certificado. Para el estndar de DQO es de 1000 mg/L
Expresado en masa equivale a 0,999911 + 0,000054
Como est expresado como incertidumbre expandida dividimos por 1,96
UP =
0 ,00054
1,96
UP =
0 ,00054
1,96
VI= Volumen de alcuota tomada para preparar el estndar de 750 mg/L (75 mL)
VF= Volumen de la preparacin final del estndar (100 mL)
El volumen contenido en la pipeta volumtrica est sujeto a tres fuentes de incertidumbre.
a.
b.
c.
Incertidumbre del volumen de la pipeta reportada por el fabricante.

Incertidumbre por llenado y calibracin de la pipeta.
Incertidumbre debido a que la temperatura de la solucin y del recipiente contenedor
difieren de la temperatura a la cual se hizo la calibracin del mismo.
a.
Incertidumbre del volumen de la pipeta reportada por el fabricante (U FAB)
Debido a que la cifra esta dada sin un nivel de confianza, se asume una distribucin rectangular y la
desviacin estndar es:
UFab =
0 ,03
3
UFab = 0 ,017 mL
b.
Incertidumbre por llenado y calibracin de la pipeta (U CAL)
El informe de calibracin de la pipeta de 25 mL reporta una incertidumbre de 0,0258 con un nivel de

confianza del 95%. Para expresarla como incertidumbre estndar dividimos por 2.
UCal =
0 ,0258
2
UCal = 0 ,0129 mL

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c.
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VAL_72
Incertidumbre debido a la variacin de temperatura (UVT)
Tomando como una posible variacin de la temperatura de + 3C (con un 95% de confianza), y

tomando como un coeficiente de expansin de volumen para el agua de 2,1x10-4C-1 y dividiendo
por 1,96 para obtener la desviacin estndar da:
U VT =
25 mLx3 Cx2 ,1x104 C1

1,96
Combinando las tres contribuciones tenemos que:

U VI = ( UFAB ) 2 +( U CAL ) 2 +( U VT ) 2
U VI = ( 0 ,017mL) 2 + ( 0 ,0129mL) 2 + ( 0 ,008 mL) 2
U VI = 0 ,023 mL
Como el procedimiento se toman 3 alcuotas de 25 mL y las fuentes de incertidumbre son las

mismas se suman as:
U VI = (U V 1) 2 + (U V 2 ) 2 + ( U V 3 ) 2
U VI = ( 0 ,023 mL) 2 + ( 0 ,023 mL) 2 + ( 0 ,023 mL) 2
U VI = 0 ,04 mL
0 ,04
= 0 ,0005
75
El mismo procedimiento se sigue para calcular la incertidumbre del volumen final (matraz de 100
mL).
Donde:
El fabricante reporta 100 mL + 0,1 mL
0 ,1
UFab =
3
UFab = 0 ,06 mL

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VAL_72
El informe reporta una incertidumbre con un nivel de confianza del 95% igual a 0,0795 mL. Para
obtener este dato como incertidumbre estndar se divide por 2.
Incertidumbre de calibracin del matraz.
UCal =
0 ,0795
2
UCal = 0 ,0397
Incertidumbre debido a que la temperatura de la solucin y del recipiente contenedor difieren de la
temperatura a la cual se hizo la calibracin del mismo.
Tomando como rango mximo de variacin experimental de temperatura 3C, con un nivel de
confianza del 95% y un coeficiente de expansin de volumen para el agua de 2 ,1104 C1 ,
nos da una variacin de volumen de:
100 mLx3 Cx2 ,1x104
= 0 ,032 mL
1,96
Combinando tenemos:
2
2
2
U (Vf) = UFAB.
int. +UCAL +U VT
U(Vf) = (0,06)
+ (0,0397)
+ (0,032)
U (Vf) = 0 ,078 mL
Expresada como incertidumbre estndar relativa:
0 ,078
= 0 ,000 78 mL
100
CMR= Concentracin del estndar = 1 000 mg/L

Reemplazando los valores tenemos que la incertidumbre del patrn es:
UP = ( 0 ,000 027 6 ) 2
UP = 6 ,26
( 75 ) 2
(100) 2
+ ( 0 ,000 533 ) 2
(1000 ) 2
(100) 2
+ ( 0 ,000 78 ) 2
(1000 ) 2 ( 75 ) 2
(100) 4

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VAL_72
UP = 0 ,007 9 mg / L
b.
Incertidumbre de la Curva de Calibracin (Uproceso de calibrado).
Teniendo en cuenta que:
y b
x
y: absorbancia
b: ordenada
m: pendiente
x: variable
x=
Proceso
Uy2
m2
Ub2
m2
2
+ Um
(y b) 2
m4
Se distingue aqu tres componentes de incertidumbre:

1. Incertidumbre en la seal de Absorbancia (y).
Sy
Uy = W
n
2. Incertidumbre del intercepto de la Curva de calibrado.
Ub = W
Sb
3. Incertidumbre en la pendiente de la Curva de calibrado
Um = W
Donde:
Sm
n
W = factor de correccin cuando n < 10.

Estadsticos pertenecientes a la curva de calibrado seleccionada para el estudio:
Intercepto b = -0,000603
desv. std Sb = 0,004398
Pendiente m = 0,000618
desv. std Sm = 0,000006
El estndar de 750 mg /L se ley 10 veces en Absorbancia con una desviacin estndar Sy = 0,003.
W=1para 10 datos
0 ,003
y =
= 0 ,00095 ; donde, y = Abs media de las lecturas del patrn preparado a partir de la
10
solucin estndar.
W = 1 para 12 datos
CALIDAD
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VAL_72
Sb
Ub = Wx
0 ,004 398
Ub = 1x
12
Ub = 0 ,0013
Um = Wx
Um = 1x
Sm
n
0 ,000 006
12
Um = 0 ,000 0017
La incertidumbre del proceso de calibrado es entonces:
U2
Proceso
Uy2
m2
Ub2
m2
2
+ Um
( y b) 2
m4
Reemplazando tenemos:
( 0 ,001 95 ) 2
( 0 ,001 3 ) 2
U2
U2
= 2 ,37 + 4 ,44 + 3 ,96
Proceso
Proceso
(0,000 618) 2
(0,000 618) 2
+ ( 0 ,000 0017 ) 2
[ 0 ,4517 (-0 ,000
603 ) ]
(0,000 618 ) 4
U Proceso = 10,77
U Proceso = 3 ,28 mg/ L

Combinando las incertidumbres tenemos:
2
2
UCProceso medicin = Uproceso
+Upatrn
UC =
( 0 ,0079 ) 2 + ( 3 ,28 ) 2
U C = 3 ,28 mg / L

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VAL_72
3.3.2.3 INCERTIDUMBRE COMBINADA TIPO B (U B)

UB = ( U E ) 2 + ( U C ) 2
UB = ( 0 ,0003 ) 2 + ( 3 ,28 ) 2
UB = 10,8
UB = 3 ,3 mg / L
3.2.3. INCERTIDUMBRE TOTAL (U T)

U T = ( U A ) 2 + ( UB ) 2
U T = (1,78 ) 2 + ( 3 ,3 ) 2
U T = 3 ,74 mg / L
3.2.4. INCERTIDUMBRE EXPANDIDA

U Exp = 3 ,74 1,96
U Exp = 7 ,33
Redondeando, tenemos:
U Exp = 7 mg / L
4.
BIBLIOGRAFA
Protocolos para la estandarizacin de los mtodos analticos, IDEAM.
Quantifying Uncertainty in Analitical Measurement, ed. 2a., EURACHEM and CITAC. Editores
SRL Ellison (IGC, UK); Rossiein 8EMPA, Switzerland) ; A Williams (UK).

CALIDAD

VAL - 72 Validación DQO - Método Colorimétrico

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XX/XX/2004

Coordinador Area Aguas

QUMICA DE OXIGENO (DQO) - METODO REFLUJO CERRADO

Resumen de los cambios

VALIDACION DE METODOS ANALITICOS

VALIDACION DE METODOS ANALITICOS

VALIDACION DE METODOS ANALITICOS

Establecer los parmetros analticos que se deben considerar en el desarrollo y puesta en

FUNDAMENTO DEL MTODO

Metodo Reflujo Cerrado

Se utilizar el mtodo espectrofotomtrico (Spectroquant) descrito en la IE_72 Determinacin de

REACTIVOS Y PATRONES DE REFERENCIA

Kit de DQO merck 14541.

Espectrofotmetro UV-VIS Genesys 2 serie 3N 28837007 localizado en el rea de FsicoQumica.

Pipetas volumtricas AS de 1 mL, 2 mLl, 3 mL, 4 mL, 5 mL, 10 mL y 20 mL.

CONDICIONES INICIALES DE TRABAJO

Materiales: Todo el material de vidrio utilizado debe estar preparado segn

VALIDACION DE METODOS ANALITICOS

PROPUESTA DE VARIABLES A ESTUDIAR

ESTABILIDAD DE LOS TIEMPOS DE LECTURA

DETERMINACION DEL ERROR INSTRUMENTAL

DETERMINACION DEL LIMITE DE DETECCION

Para determinar los limites de deteccin se realizaran los siguientes ensayos:

LINEALIDAD DEL METODO

Especificidad y selectividad evaluando curvas de calibrado en la matriz natural de la muestra.

VALIDACION DE METODOS ANALITICOS

Precisin expresado como %CV. Exactitud como porcentaje de recuperacin de estndares en la

Todos los resultados son expresados en mg O2/L.

Se determin la estabilidad de la muestra en un tiempo de 8 das no consecutivos. Se utiliz u

VALIDACION DE METODOS ANALITICOS

Gr fico I - ESTAB ILIDAD DE LAS M UESTR AS

ESTABILIDAD DE LOS TIEMPOS DE LECTURA

Est. 200 mg/L

Est. 400 mg/L

Est. 500 mg/L

VALIDACION DE METODOS ANALITICOS

Grfico 2 - E s tabilidad del tiem p o de lectu ra

En la tabla 3 se representan los resultados obtenido al realizar la curva de calibracin en el intervalo

Grfico 3 - CURV A DE TRABAJO DQO - R EFLUJO

Grfico 4 - CURV A DE RINGBOM - DQO

VALIDACION DE METODOS ANALITICOS

Grfico 5 - CUR V A DE CR AWFOR D

VALIDACION DE METODOS ANALITICOS

DETERMINACION DEL ERROR INSTRUMENTAL

Concent racin mg O2/ L

VALIDACION DE METODOS ANALITICOS

Tabla 5 - ERROR INSTRUMENTAL

Concentracin Absorbancia Transmitancia

DETERMINACION DEL LIMITE DE DETECCION

VALIDACION DE METODOS ANALITICOS

LINEALIDAD DEL METODO

VALIDACION DE METODOS ANALITICOS

Tabla 7 Linealidad del mtodo

Desv. St. Mtodo

%CV del mtodo

* Curva montada en la matriz en estudio

La precisin es determinada a partir de diez lecturas de una muestra, un estndar de 25 mg/L,

VALIDACION DE METODOS ANALITICOS

Tabla 9. Resultados Coeficiente de Variacin

VALIDACION DE METODOS ANALITICOS

VALIDACION DE METODOS ANALITICOS

Comparacin de los resultados de los analistas