8613 59 59 1 Proy-Nom-173-Scfi-2004

PROYECTO DE NORMA OFICIAL MEXICANA
PROY-NOM-173-SCFI-2004
ALIMENTOS - JUGOS Y NCTARES ENVASADOS. DENOMINACIONES,
ESPECIFICACIONES FISICOUIMICAS, INFORMACION COMERCIAL Y METODOS DE
PRUE!A.
0 INTRODUCCI"N
Las especificaciones que se sealan a continuacin slo pueden satisfacerse cuando en la
elaboracin del producto objeto de esta norma, se utilicen materias primas e ingredientes de
calidad sanitaria, se apliquen Buenas Prcticas de Higiene y Sanidad en el proceso de
fabricacin.
1. O!JETIVO Y CAMPO DE APLICACI"N
sta norma oficial me!icana establece las denominaciones, especificaciones fisicoqu"micas e
informacin comercial que deben cumplir los productos denominados jugos y n#ctares de
fruta procesados y preen$asados que se comercialicen en territorio nacional.
2. REFERENCIAS
sta norma me!icana se complementa con las siguientes normas oficiales me!icanas y
normas me!icanas $igentes%
&'()**+)S,-.)/001 Productos preen$asados. ,ontenido &eto, 2olerancias y
(#todos de $erificacin, publicada en el 3iario 'ficial de la
-ederacin el /1 de octubre de /001.
&'()*1*)S,-.)/001 .nformacin comercial) 3eclaracin de cantidad en la etiqueta)
specificaciones, publicada en el 3iario 'ficial de la -ederacin
el +0 de octubre de /001.
&'()*4/)S,-.)/005 specificaciones. 6enerales de etiquetado para alimentos y
bebidas no alco7licas preen$asados, publicada en el 3iario
'ficial de la -ederacin el +5 de enero de /008.
&'()*98)SS:.)/005 Bienes y Ser$icios. :limentos y bebidas no alco7licas con
modificaciones en su composicin. specificaciones
nutrimentales, publicada en el 3iario 'ficial de la -ederacin el
+8 de junio de /008.
&'()*0+)SS:/)/005 Bienes y Ser$icios. (#todo para la cuenta de bacterias
aerobias en placas, publicada en el 3iario 'ficial de la
-ederacin el /+ de diciembre de /004.
PAG# 1
&'()//*)SS:/)/005 Bienes y Ser$icios Preparacin y dilucin de muestras de
alimentos para su anlisis microbiolgico, publicada en el 3iario
'ficial de la -ederacin el /8 de octubre de /004.
&'()///)SS:/)/005 Bienes y Ser$icios (#todo para la cuenta de mo7os y
le$aduras en alimentos, publicada en el 3iario 'ficial de la
-ederacin el /1 de septiembre de /004.
&'()//;)SS:/)/004 Bienes y Ser$icios. (#todos de prueba para determinacin de
ars#nico, cadmio, ars#nico, plomo, estao, cobre, fierro, <inc y
mercurio en alimentos, agua potable y agua purificada por
espectrometr"a de absorcin atmica, publicada en el 3iario
'ficial de la -ederacin el /8 de agosto de /004.
.&'()/+*)SS:/)/005 Bienes y Ser$icios. Prcticas de 7igiene y sanidad para el
proceso de alimentos, bebidas no alco7licas y alco7licas,
publicada en el 3iario 'ficial de la -ederacin el +9 de agosto
de /004.
&'()/1*)SS:/)/004 Bienes y Ser$icios. :limentos en$asados en recipientes de
cierre 7erm#tico y sometidos a tratamiento t#rmico.
3isposiciones y especificaciones sanitarias, publicada en el
3iario 'ficial de la -ederacin el +/ de no$iembre de /00;.
&(=)>)/+)/)/09; (uestreo para la inspeccin de atributos ? Parte / ?
.nformacin 6eneral y aplicaciones. 3eclaratorio de $igencia
publicada en el 3iario 'ficial de la -ederacin el +9 de octubre
de /09;.
&(=)>)*/+@+)/09; (uestreo para la inspeccin por atributos ? Parte +% (#todo de
muestreo, tablas y grficas. 3eclaratoria de $igencia publicada
en el 3iario 'ficial de la -ederacin el +9 de octubre de /09;.
&(=)>)/+)1)/09; (uestreo para la inspeccin de atributos ? Parte 1 ? Aegla de
clculo para la determinacin de planes de muestreo.
3eclaratoria de $igencia publicada en el 3iario 'ficial de la
-ederacin el 1/ de julio de /09;.
&(=)B)14)S)/09/ Bebidas alco7licas. 3eterminacin de di!ido de a<ufre total.
-ederacin el /+ de febrero de /09+.
&(=)-)/*+)S)/0;9 3eterminacin de la acide< titulable en productos elaborados a
partir de frutas y 7ortali<as. 3eclaratoria de $igencia publicada
en el 3iario 'ficial de la -ederacin el +5 de octubre de /0;9.
PAG# 2
&(=)-)/*1)/0;9 :limentos) -rutas y 3eri$ados) determinacin de grados bri!.
-ederacin el /5 de octubre de /09+.
&(=)-)1*0)&'A(=)+**/ 3eterminacin de Ben<oatos, salicilatos y sorbatos en
alimentos. 3eclaratoria de $igencia publicada en el 3iario
'ficial de la -ederacin el +8 de julio de +**/.
3. DEFINICIONES
Para los efectos de esta norma se establecen las siguientes definiciones%
3.1 A$%&'%()(*+*
s el mantenimiento en el producto de las caracter"sticas f"sicas, qu"micas, organol#pticas y
nutricionales esenciales de la fruta o frutas de que se procede.
3.2 F,$%+- C.%,()+-
Son frutas tropicales o subtropicales de la familia Rutaceae que se daan con bajas
temperaturas, que se caracteri<an por que tienen aceites y pigmentos en su cscara, con alto
contenido en pectina y de alta acide<.
3.3 F,$%+- T,/0()+1&-
Son aquellas frutas que crecen en regiones tropicales en donde la temperatura $aria muy
poco durante todo el ao. Son muy perecederas, son ricas en $itaminas y carbo7idratos.
3.4 F,$%/ -+'/
-ruta libre de enfermedades, 7eridas, pudriciones, daos producidos por insectos u otras
plagas, libre de insectos $i$os o muertos o sus lar$as.
3.2 F,$%/ M+*$,/
-ruta que esta en su punto de sa<n o madure<.
3.3 G,+*/- !,(4
s el por ciento de slidos disueltos en un producto deri$ado de las frutas o de un l"quido
a<ucarado.
3.7 J$5/ *& 6,$%+
s el producto l"quido obtenido al e!primir frutos sanos y maduros de la $ariedad
correspondiente, sin diluir, clarificado o no, no fermentado y sometido al tratamiento
PAG# 3
adecuado que asegura su conser$acin en el en$ase. &o debe contener corte<a y semillas,
ni materia e!traa objetable.
ste producto puede elaborarse a partir de jugo de fruta congelado, y@o de jugo de fruta
concentrado reconstituido, as" mismo puede contener Cnicamente los aditi$os alimentarios
indicados en la presente norma oficial me!icana.
3.7 J$5/ *& 6,$%+ )/')&'%,+*/
1

s el jugo de fruta al cual se le 7a remo$ido cierta cantidad de agua suficiente para
incrementar por medios f"sicos los grados Bri! al menos el doble del $alor del producto
l"quido obtenido al e!primir frutos sanos y maduros, que 7a sido sometido al tratamiento
f"sico o a las condiciones de almacenamiento adecuadas que aseguren su conser$acin en
el en$ase. &o debe contener corte<a y semillas, ni materia e!traa objetable, as" mismo
puede contener Cnicamente los aditi$os alimentarios indicados en la presente norma oficial
me!icana.
3.8 J$5/ *& 6,$%+ )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:'
s el producto l"quido obtenido al e!primir frutos sanos y maduros de la $ariedad
correspondiente, sin diluir, clarificado o no, no fermentado y sometido al tratamiento
adecuado que asegura su conser$acin en el en$ase y que 7a sufrido cambios por adicin,
disminucin o eliminacin de uno o ms de sus nutrimentos, pudiendo contener Cnicamente
los aditi$os alimentarios indicados en la presente norma oficial me!icana y cumpliendo con lo
establecido en la &'()SS:/)*98)/005. &o debe contener corte<a y semillas, ni materia
e!traa objetable.
concentrado reconstituido.
3.10 J$5/ *& 6,$%+ )/')&'%,+*/ )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:'
1
s el jugo de fruta al cual se le 7a remo$ido cierta cantidad de agua suficiente para
incrementar por medios f"sicos los grados Bri! al menos el doble del $alor del producto
l"quido obtenido al e!primir frutos sanos y maduros, que 7a sido sometido al tratamiento
f"sico o a las condiciones de almacenamiento adecuadas que asegure su conser$acin en el
en$ase y que 7a sufrido cambios por adicin, disminucin o eliminacin de uno o ms de sus
nutrimentos, pudiendo contener Cnicamente los aditi$os alimentarios indicados en la presente
norma oficial me!icana y cumpliendo con lo establecido en la &'()SS:/)*98)/005. &o
debe contener corte<a y semillas, ni materia e!traa objetable.
3.11 J$5/ *& 6,$%+ &'*$1;+*/
1
ESTE PRODUCTO SE DESTINA AL CONSUMIDOR FINAL
1
PAG# 4
s el producto l"quido obtenido al e!primir frutos sanos que pueden ser frutos no maduros de
la $ariedad correspondiente, sin diluir, clarificado o no, no fermentado, al cual se le 7a
adicionado 7asta un m!imo del 4D de a<Ccares m@$ referidos al $olumen total en$asado y
sometido al tratamiento adecuado que asegura su conser$acin en el en$ase. &o debe
contener corte<a y semillas, ni materia e!traa objetable.
concentrado reconstituido, as" mismo puede contener Cnicamente los aditi$os alimentarios
indicados en la presente norma oficial me!icana.
3.12 J$5/ *& 6,$%+ )/')&'%,+*/ &'*$1;+*/
1
la $ariedad correspondiente, clarificado o no, no fermentado al cual se le 7a remo$ido cierta
cantidad de agua suficiente para incrementar por medios f"sicos los grados Bri! al menos el
doble del $alor del producto l"quido obtenido al e!primir frutos sanos, y al cual se le 7a
adicionado 7asta un m!imo de 4D de a<Ccares m@$ referido al $olumen final del producto
reconstituido de acuerdo a las instrucciones del fabricante, que 7a sido sometido al
tratamiento f"sico o a las condiciones de almacenamiento adecuadas que aseguren su
conser$acin en el en$ase. &o debe contener corte<a y semillas, ni materia e!traa
objetable, as" mismo puede contener Cnicamente los aditi$os alimentarios indicados en la
presente norma oficial me!icana.
3.13 J$5/ *& 6,$%+ &'*$1;+*/ )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:'
la $ariedad correspondiente, sin diluir, clarificado o no, no fermentado, al cual se le 7a
adicionado 7asta un m!imo del 4D de a<Ccares m@$ referidos al $olumen total en$asado y
sometido al tratamiento adecuado que asegura su conser$acin en el en$ase, que 7a sufrido
cambios por adicin, disminucin o eliminacin de uno o ms de sus nutrimentos, pudiendo
contener Cnicamente los aditi$os alimentarios indicados en la presente norma oficial
me!icana y cumpliendo con lo establecido en la &'()*98)SS:/)/005. &o debe contener
corte<a y semillas, ni materia e!traa objetable.
3.14 J$5/ *& 6,$%+ )/')&'%,+*/ &'*$1;+*/ )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:'
2
1
2
PAG# 2
doble del $alor del producto l"quido obtenido al e!primir frutos sanos, al cual se le 7a
reconstituido de acuerdo a las instrucciones del fabricante y que 7a sido sometido al
conser$acin en el en$ase y que 7a sufrido cambios por adicin, disminucin o eliminacin
de uno o ms de sus nutrimentos, pudiendo contener Cnicamente los aditi$os alimentarios
indicados en la presente norma oficial me!icana y cumpliendo con lo establecido en la &'()
)*98) SS:/)/005. &o debe contener corte<a y semillas, ni materia e!traa objetable.
3.12 J$5/ *& 6,$%+ &'*$1;+*/ ,&*$)(*/ &' )+1/,.+-
la $ariedad correspondiente, sin diluir, clarificado o no, no fermentado, que 7a sido sometido
al tratamiento adecuado que asegura su conser$acin en el en$ase, al cual se la 7an
sustituido parcial o totalmente los a<Ccares adicionados por edulcorantes no calricos y cuyo
contenido de calor"as es menor con relacin al contenido de calor"as del jugo de fruta
endul<ado, pudiendo contener Cnicamente los aditi$os alimentarios indicados en la presente
norma oficial me!icana y cumpliendo con lo establecido en la &'()*98)SS:/)/005. &o debe
3.13 J$5/ *& 6,$%+ )/')&'%,+*/ &'*$1;+*/ ,&*$)(*/ &' )+1/,.+-
1

doble del $alor del producto l"quido obtenido al e!primir frutos sanos, que 7a sido sometido al
conser$acin en el en$ase, al cual se la 7an sustituido parcial o totalmente los a<Ccares
adicionados por edulcorantes no calricos y cuyo contenido de calor"as es menor con
relacin al contenido de calor"as del jugo de fruta concentrado endul<ado, pudiendo contener
Cnicamente los aditi$os alimentarios indicados en la presente norma oficial me!icana y
cumpliendo con lo establecido en la &'()*98)SS:/)/005. &o debe contener corte<a y
semillas, ni materia e!traa objetable.
3.17 J$5/ *& 6,$%+ &'*$1;+*/ ,&*$)(*/ &' )+1/,.+- )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$
)/90/-()(:'
la $ariedad correspondiente, sin diluir, clarificado o no, no fermentado, que 7a sido sometido
al tratamiento adecuado que asegura su conser$acin en el en$ase, al cual se la 7an
sustituido parcial o totalmente los a<Ccares adicionados por edulcorantes no calricos y cuyo
contenido de calor"as es menor con relacin al contenido de calor"as del jugo endul<ado y
1
PAG# 3
que 7a sufrido cambios por adicin, disminucin o eliminacin de uno o ms de sus
nutrimentos, pudiendo contener Cnicamente los aditi$os alimentarios indicados en la presente
3.17 J$5/ *& 6,$%+ )/')&'%,+*/ &'*$1;+*/ ,&*$)(*/ &' )+1/,.+- )/' 9/*(6()+)(/'&-
&' -$ )/90/-()(:'
1
doble del $alor del producto l"quido obtenido al e!primir frutos sanos, que 7a sido sometido al
conser$acin en el en$ase y al cual se la 7an sustituido parcial o totalmente los a<Ccares
adicionados por edulcorantes no calricos y cuyo contenido de calor"as es menor con
relacin al contenido de calor"as del jugo de fruta concentrado endul<ado y que 7a sufrido
cambios por adicin, disminucin o eliminacin de uno o ms de sus nutrimentos, pudiendo
contener Cnicamente los aditi$os alimentarios indicados en la presente norma oficial
me!icana y cumpliendo con lo establecido en la &'()*98)SS:/)/005. &o debe contener
corte<a y semillas, ni materia e!traa objetable.
3.18 J$5/ *& 6,$%+- 9<1%(01&
s la me<cla de dos o ms productos l"quidos obtenidos al e!primir frutos sanos y maduros
de la $ariedad correspondiente, sin diluir, clarificado o no, no fermentado y sometido al
tratamiento adecuado que asegura su conser$acin en el en$ase. &o debe contener corte<a
y semillas, ni materia e!traa objetable.
ste producto puede elaborarse a partir de la me<cla de jugos y@o pur#s congelados, y@o de
jugos y@o pur#s concentrados reconstituidos, as" mismo puede contener Cnicamente los
aditi$os alimentarios indicados en la presente norma oficial me!icana.
3.20 J$5/ *& 6,$%+- 9<1%(01& )/')&'%,+*/
3
s el producto resultante de la me<cla de dos o ms jugos a la cual se le 7a remo$ido cierta
cantidad de agua suficiente para incrementar por medios f"sicos los grados Bri! al menos al
doble del $alor del producto l"quido predominante obtenido al e!primir frutos sanos y
maduros y que 7a sido sometido al tratamiento f"sico o a las condiciones de almacenamiento
1
3
PAG# 7
adecuadas que aseguren su conser$acin en el en$ase. &o debe contener corte<a y
jugos y@o pur#s concentrados, as" mismo puede contener Cnicamente los aditi$os
alimentarios indicados en la presente norma oficial me!icana.
3.21 J$5/ *& 6,$%+- 9<1%(01& )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:'
s la me<cla de dos o ms productos l"quidos obtenidos al e!primir frutos sanos y maduros
de la $ariedad correspondiente, sin diluir clarificado o no, no fermentado y sometido al
tratamiento adecuado que asegura su conser$acin en el en$ase y que 7a sufrido cambios
por adicin, disminucin o eliminacin de uno o ms de sus nutrimentos, pudiendo contener
jugos y@o pur#s concentrados reconstituidos, as" mismo puede contener Cnicamente los
aditi$os alimentarios indicados en la presente norma oficial me!icana.
3.22 J$5/ *& 6,$%+- 9<1%(01& )/')&'%,+*/ )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:'
4
doble del $alor del producto l"quido predominante obtenido al e!primir frutos sanos y
maduros y que 7a sido sometido al tratamiento f"sico o a las condiciones de almacenamiento
adecuadas que asegure su conser$acin en el en$ase y que 7a sufrido cambios por adicin,
disminucin o eliminacin de uno o ms de sus nutrimentos, pudiendo contener Cnicamente
los aditi$os alimentarios indicados en la presente norma oficial me!icana y cumpliendo con lo
establecido en la &'()*98)SS:/)/005. &o debe contener corte<a y semillas, ni materia
e!traa objetable.
jugos y@o pur#s concentrados.
3.23 J$5/ *& 6,$%+- 9<1%(01& E'*$1;+*/
s la me<cla de dos o ms productos l"quidos obtenidos al e!primir frutos sanos que pueden
ser frutos no maduros de la $ariedad correspondiente, sin diluir clarificado o no, no
fermentado y al cual se le 7a adicionado 7asta un m!imo de 4D de a<Ccares m@$ referidos
con relacin al $olumen total en$asado y sometido al tratamiento adecuado que asegura su
objetable.
4
PAG# 7
3.24 J$5/ *& 6,$%+- 9<1%(01& )/')&'%,+*/ &'*$1;+*/
1
doble del $alor del producto l"quido predominante al e!primir frutos sanos y al cual se le 7a
reconstituido de acuerdo a las instrucciones del fabricante y que 7a sido sometido al
objetable.
3.22 J$5/ *& 6,$%+- 9<1%(01& &'*$1;+*/ )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:'
fermentado y al cual se le 7a adicionado 7asta un m!imo de 4D de a<Ccares m@$ referidos
con relacin al $olumen total en$asado y sometido al tratamiento adecuado que asegura su
*98)SS:/)/005. &o debe contener corte<a y semillas, ni materia e!traa objetable.
jugos y@o pur#s concentrados
3.23 J$5/ *& 6,$%+- 9<1%(01& )/')&'%,+*/ &'*$1;+*/ )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$
)/90/-()(:'
1
doble del $alor del producto l"quido predominante obtenido al e!primir frutos sanos y al cual
se le 7a adicionado 7asta un m!imo de 4D de a<Ccares m@$ referido al $olumen final del
producto reconstituido de acuerdo a las instrucciones del fabricante y que 7a sido sometido
al tratamiento f"sico o a las condiciones de almacenamiento adecuadas que aseguren su
*98)SS:/)/005. &o debe contener corte<a y semillas, ni materia e!traa objetable.
1
1
PAG# 8
3.27 J$5/ *& 6,$%+- 9<1%(01& &'*$1;+*/ ,&*$)(*/ &' )+1/,.+-
fermentado y sometido al tratamiento adecuado que asegura su conser$acin en el
en$ase, al cual se le 7an sustituido parcial o totalmente slo los a<Ccares adicionados
por edulcorantes no calricos y cuyo contenido de calor"as es menor en relacin al
contenido de calor"as del jugo de frutas mCltiple endul<ado, pudiendo contener
3.27 J$5/ *& 6,$%+- 9<1%(01& )/')&'%,+*/ &'*$1;+*/ ,&*$)(*/ &' )+1/,.+-
/
doble del $alor del producto l"quido predominante al e!primir frutos sanos, que 7a sido
sometido al tratamiento f"sico o a las condiciones de almacenamiento adecuadas que
aseguren su conser$acin en el en$ase, al cual se le 7an sustituido parcial o totalmente slo
los a<Ccares adicionados por edulcorantes no calricos y cuyo contenido de calor"as es
menor con relacin al contenido de calor"as del jugo de frutas mCltiple concentrado
endul<ado, pudiendo contener Cnicamente los aditi$os alimentarios indicados en la presente
1
PAG# 10
3.28 J$5/ *& 6,$%+- 9<1%(01& &'*$1;+*/ ,&*$)(*/ &' )+1/,.+- )/' 9/*(6()+)(/'&- &'
-$ )/90/-()(:'
fermentado y sometido al tratamiento adecuado que asegura su conser$acin en el
en$ase, al cual se le 7an sustituido parcial o totalmente slo los a<Ccares adicionados
por edulcorantes no calricos y cuyo contenido de calor"as es menor en relacin al
contenido de calor"as del jugo de frutas mCltiple endul<ado, y que 7a sufrido cambios por
adicin, disminucin o eliminacin de uno o ms de sus nutrimentos, pudiendo contener
3.30 J$5/ *& 6,$%+- 9<1%(01& )/')&'%,+*/ &'*$1;+*/ ,&*$)(*/ &' )+1/,.+- )/'
9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:'
2
doble del $alor del producto l"quido predominante al e!primir frutos sanos, que 7a sido
sometido al tratamiento f"sico o a las condiciones de almacenamiento adecuadas que
aseguren su conser$acin en el en$ase, al cual se le 7an sustituido parcial o totalmente slo
los a<Ccares adicionados por edulcorantes no calricos y cuyo contenido de calor"as es
menor con relacin al contenido de calor"as del jugo de frutas mCltiple concentrado
endul<ado y pudiendo contener Cnicamente los aditi$os alimentarios indicados en la presente
contener corte<a y semillas, ni materia e!traa objetable. ste producto puede elaborarse a
partir de la me<cla de jugos y@o pur#s congelados, y@o de jugos y@o pur#s concentrados.
3.31 J$5/ )/'5&1+*/
s el jugo de fruta que 7a sido sometido mediante un equipo apropiado a un proceso t#rmico,
7asta que el producto alcance una temperatura de )/4 E, en el centro t#rmico.
3.32 N=)%+, *& 6,$%+
s el producto alimenticio, l"quido, pulposo, elaborado con la pulpa y jugo de la fruta de la
$ariedad correspondiente, madura, sana, limpia, la$ada, finamente di$idida y tami<ada,
concentrada o no, congelada o no, que 7a sido sometido al tratamiento adecuado que
asegura su conser$acin en el en$ase, pudiendo ser adicionado de agua potable, a<Ccares
y aditi$os alimentarios indicados en la presente norma oficial me!icana
3.33 N=)%+, *& 6,$%+ )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:'
5
PAG# 11
s el producto alimenticio, l"quido, pulposo, elaborado con la pulpa y jugo de la fruta de la
asegura su conser$acin en el en$ase, que 7a sufrido cambios por adicin, disminucin o
eliminacin de uno o ms de sus nutrimentos, pudiendo ser adicionado de agua potable,
a<Ccares y aditi$os alimentarios indicados en la presente norma oficial me!icana,
cumpliendo con lo establecido en la &'()*98)SS:/)/005.
3.34 N=)%+, *& 6,$%+ >+?/ &' )+1/,.+-
s el producto alimenticio, l"quido, pulposo elaborado con la pulpa y jugo de la fruta de la
asegura su conser$acin en el en$ase, al cual se le 7an sustituido totalmente los a<Ccares
adicionados por edulcorantes no calricos, cuyo contenido de calor"as es menor a 5*
calor"as@porcin, pudiendo ser adicionada de agua potable y aditi$os alimentarios indicados
en la presente norma oficial me!icana, cumpliendo con lo establecido en la &'()*98)SS:/)
/005.
3.32 N=)%+, *& 6,$%+ >+?/ &' )+1/,.+- )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:'
asegura su conser$acin en el en$ase, al cual se le 7an sustituido totalmente los a<Ccares
adicionados por edulcorantes no calricos, cuyo contenido de calor"as es menor a 5*
calor"as@porcin y que 7a sufrido cambios por adicin, disminucin o eliminacin de uno o
ms de sus nutrimentos, pudiendo ser adicionada de agua potable y aditi$os alimentarios
indicados en la presente norma oficial me!icana, cumpliendo con lo establecido en la &'()
*98)SS:/)/005.
3.33 N=)%+, *& 6,$%+- ,&*$)(*/ &' )+1/,.+-
asegura su conser$acin en el en$ase, cuyo contenido de calor"as es al menos un +4D
menor con relacin al contenido de calor"as del n#ctar, pudiendo ser adicionada de agua
potable y aditi$os alimentarios indicados en la presente norma oficial me!icana, cumpliendo
con lo establecido en la &'()*98)SS:/)/005.
3.37 N=)%+, *& 6,$%+- ,&*$)(*/ &' )+1/,.+- )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:'
asegura su conser$acin en el en$ase, cuyo contenido de calor"as es al menos un +4D
menor con relacin al contenido de calor"as del n#ctar y que 7a sufrido cambios por adicin,
disminucin o eliminacin de uno o ms de sus nutrimentos, pudiendo ser adicionada de
PAG# 12
agua potable y aditi$os alimentarios indicados en la presente norma oficial me!icana,
cumpliendo con lo establecido en la &'()*98)SS:/)/005.
3.37 N=)%+, *& 6,$%+- 9<1%(01&
s el producto alimenticio, l"quido, pulposo, elaborado con la pulpa y jugo de dos o ms
frutas de las $ariedades correspondientes, maduras, sanas, limpias, la$adas, finamente
di$ididas y tami<adas, concentradas o no, congeladas o no, que 7a sido sometido al
tratamiento adecuado que asegura su conser$acin en el en$ase, pudiendo ser adicionado
de agua potable, a<Ccares y aditi$os alimentarios indicados en la presente norma oficial
me!icana.
3.41 N=)%+, *& 6,$%+- 9<1%(01& )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:'
tratamiento adecuado que asegura su conser$acin en el en$ase, que 7a sufrido cambios
por adicin, disminucin o eliminacin de uno o ms de sus nutrimentos, pudiendo ser
adicionado de agua potable, a<Ccares y aditi$os alimentarios indicados en la presente
norma oficial me!icana, cumpliendo con lo establecido en la &'()*98)SS:/)/005.
3.42 N=)%+, *& 6,$%+- 9<1%(01& >+?/ &' )+1/,.+-
tratamiento adecuado que asegura su conser$acin en el en$ase, al cual se le 7an sustituido
totalmente los a<Ccares adicionados por edulcorantes no calricos, cuyo contenido de
calor"as es menor a 5* calor"as@porcin, pudiendo ser adicionado de agua potable y aditi$os
alimentarios indicados en la presente norma oficial me!icana, cumpliendo con lo establecido
en la &'()*98)SS:/)/005.
3.43 N=)%+, *& 6,$%+- 9<1%(01& >+?/ &' )+1/,.+- )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:'
totalmente los a<Ccares adicionados por edulcorantes no calricos, cuyo contenido de
calor"as es menor a 5* calor"as@porcin y que 7a sufrido cambios por adicin, disminucin o
eliminacin de uno o ms de sus nutrimentos, pudiendo ser adicionado de agua potable y
aditi$os alimentarios indicados en la presente norma oficial me!icana, cumpliendo con lo
establecido en la &'()*98)SS:/)/005.
PAG# 13
3.43 N=)%+, *& 6,$%+- 9<1%(01& ,&*$)(*/ &' )+1/,.+-
parcialmente los a<Ccares adicionados por edulcorantes no calricos, cuyo contenido de
calor"as es al menos un +4D menor con relacin al contenido de calor"as del n#ctar
pudiendo ser adicionado de agua potable y aditi$os alimentarios indicados en la presente
3.44 N=)%+, *& 6,$%+- 9<1%(01& ,&*$)(*/ &' )+1/,.+- )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$
)/90/-()(:'
parcialmente los a<Ccares adicionados por edulcorantes no calricos, cuyo contenido de
calor"as es al menos un +4D menor con relacin al contenido de calor"as del n#ctar y que 7a
sufrido cambios por adicin, disminucin o eliminacin de uno o ms de sus nutrimentos,
pudiendo ser adicionado de agua potable y aditi$os alimentarios indicados en la presente
3.42 P,/*$)%/- P,&&'@+-+*/-
Son los alimentos y bebida no alco7lica, que cuando son colocados en un en$ase de
cualquier naturale<a, no se encuentra presente el consumidor, y la cantidad de producto
contenido en #l no puede ser alterada, a menos que el en$ase sea abierto o modificado
perceptiblemente.
3.43 P$10+ *& 6,$%+
s la parte slida comestible de las frutas Fslidos insolublesG que 7a sido separada del jugo
por la accin de moler, e!primir, des7uesar y tami<ar.
3.47 P$,= *& 6,$%+
s el producto obtenido por molienda o tami<ado de fruta, sometido o no a tratamiento
t#rmico compuesto de pulpa y jugo.
3.47 S:1(*/- *(-$&1%/- *& 6,$%+
Son los slidos solubles pro$enientes de fruta y que son cuantificados como grados Bri!.
4. SAM!OLOS Y A!REVIATURAS
EB! grado Bri!
PAG# 14
D por ciento
g gramo
mg miligramo
g microgramo
Hg Hilogramo
L litro
mL mililitro
IL microlitro
mm mil"metros
cm cent"metro
m
1
metro cCbico
B.P.-. buenas prcticas de fabricacin
pH potencial de 7idrgeno
m@$ Slidos@Bolumen 2otal
m@m masa@masa
/1
, &Cmero total de tomos de carbono /1
/+
, &Cmero total de tomos de carbono /+
/1
, 3elta de carbono /1
BP3B Bienna Pee dee Beelemnite
J Partes por mil
D Partes por ciento
6 aceleracin de la gra$edad
mol mol
rpm re$oluciones por minuto
7 7ora
min minuto
PAG# 12
seg segundo
E, grados ,elsius
K grados Kel$in
Pa Pascal
Kpa Kilo Pascal
mbar milibar
uma unidad de masa atmica
des$iacin estndar
2. CLASIFICACION Y DENOMINACI"N COMERCIAL
2.1 JUGOS
Los jugos objeto de esta norma se denominan de acuerdo a lo siguiente.
4././ Los ?$5/- *& 6,$%+ definidos en 1.9 se denominan de la siguiente forma%
LM6' 3 NNNNNNNNN
l nombre de la fruta correspondiente se colocar en el espacio en blanco
4./.+ L/- ?$5/- *& 6,$%+ )/')&'%,+*/- definidos en 1.0 se denominan de la siguiente
forma%
LM6' 3 NNNNNNNNN,'&,&2A:3'
l nombre de la fruta correspondiente se colocar en el espacio en blanco.
4./.1 Los ?$5/- *& 6,$%+ )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:' definidos en 1./* se
denominan de la siguiente forma%
LM6' 3 NNNNNNNNN
l nombre de la fruta correspondiente se colocar en el espacio en blanco seguido de la
descripcin del tipo de modificacin reali<ada conforme a lo dispuesto por lo &'()*98)
SS:/)/005.
4./.5 L/- ?$5/- *& 6,$%+ )/')&'%,+*/- )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:' definidos
en 1.// se denominan de la siguiente forma%
LM6' 3 NNNNNNNNN,'&,&2A:3' NNNNNNNNN
PAG# 13
l nombre de la fruta correspondiente se colocar en el primer espacio en blanco y en el
segundo espacio en blanco la descripcin del tipo de modificacin reali<ada conforme a lo
dispuesto por lo &'()*98)SS:/)/005.
4./.4 Los ?$5/- *& 6,$%+ &'*$1;+*/- definidos en 1./+ se denominan de la siguiente forma%
LM6' 3 NNNNNNNNN &3ML>:3'
4./.8 Los ?$5/- *& 6,$%+ )/')&'%,+*/- &'*$1;+*/- definidos en el inciso 1./1 se
LM6' 3 NNNNNNNNN,'&,&2A:3' &3ML>:3'
l nombre de la fruta correspondiente se coloca en el espacio en blanco.
4./.; Los ?$5/- *& 6,$%+ &'*$1;+*/- )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:' definidos en
1./5 se denominan de la siguiente forma%
LM6' 3 NNNNNNNNN &3ML>:3' NNNNNNNNNN
4./.9 Los ?$5/- *& 6,$%+ )/')&'%,+*/- &'*$1;+*/- )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$
)/90/-()(:' definidos en el inciso 1./4 se denominan de la siguiente forma%
LM6' 3 NNNNNNNNN,'&,&2A:3' &3ML>:3' NNNNNNNN
4./.0 Los ?$5/- *& 6,$%+ &'*$1;+*/- ,&*$)(*/- &' )+1/,.+- definidos en el inciso 1./8 se
LM6' 3 NNNNNNNNNNNNN&3ML>:3' A3M,.3' & ,:L'AO:S
4././* Los ?$5/- *& 6,$%+ )/')&'%,+*/- &'*$1;+*/- ,&*$)(*/- &' )+1/,.+- definidos en el
inciso 1./; se denominan de la siguiente forma
LM6' 3 NNNNNNNNNN ,'&,&2A:3' &3ML>:3' A3M,.3' & ,:L'AO:S
PAG# 17
4./.// Los ?$5/- *& 6,$%+ &'*$1;+*/- ,&*$)(*/- &' )+1/,.+- )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$
)/90/-()(:' definidos en el inciso 1./9 se denominan de la siguiente forma%
LM6' 3 NNNNNNNNNNN &3ML>:3' A3M,.3' & ,:L'AO:S NNNNNNNN
4././+ Los ?$5/- *& 6,$%+ )/')&'%,+*/- &'*$1;+*/- ,&*$)(*/- &' )+1/,.+- )/'
9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:' definidos en el inciso 1./0 se denominan de la
siguiente forma
LM6' 3 NNNNNN ,'&,&2A:3' &3ML>:3' A3M,.3' & ,:L'AO:S NNNNN
4././1 Los ?$5/- *& 6,$%+- 9<1%(01& definidos en el inciso 1.+* se denominan de la siguiente
forma%
4././1./ Si el jugo de frutas mCltiples consiste de la me<cla de dos jugos de fruta de
frutas, la denominacin debe ser%
LM6' 3NNNNNNNNN
,olocando en el espacio en blanco el nombre de las dos frutas, comen<ando con aquella de
mayor contenido.
4././1.+ Si la me<cla est compuesta por 1 o ms jugos de fruta y@o pur#s de frutas, la
denominacin debe ser
LM6' 3NNNNNNNNN
,olocando en el espacio en blanco el nombre de las frutas de acuerdo a su predominioP o se
podr indicar como jugo de frutas c"tricas, tropicales, etc. segCn corresponda.
4././5 Los ?$5/- *& 6,$%+- 9<1%(01& )/')&'%,+*/- definidos en el inciso 1.+/ se denominan
de la siguiente forma%
4././5./ Si el jugo de frutas mCltiple consiste en la me<cla de dos jugos de fruta de
LM6' 3NNNNNNNNN ,'&,&2A:3'
mayor contenido.
denominacin debe ser%
PAG# 17
LM6' 3NNNNNNNNN ,'&,&2A:3'
podr indicar como jugo de frutas c"tricas, tropicales, etc., segCn corresponda
4././4 Los ?$5/- *& 6,$%+- 9<1%(01& )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:' definidos en
el inciso 1.++ se denominan de la siguiente forma%
LM6' 3NNNNNNNNN
mayor contenido seguido de la descripcin del tipo de modificacin reali<ada conforme a lo
LM6' 3NNNNNNNNN
podr indicar como jugo de frutas c"tricas, tropicales, etc. segCn corresponda seguido de la
SS:/)/005.
4././8 Los ?$5/- *& 6,$%+- 9<1%(01& )/')&'%,+*/ )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:'
definidos en el inciso 1.+1 se denominan de la siguiente forma%
4././8./ Si el jugo de frutas mCltiple consiste en la me<cla de dos jugos de fruta de
LM6' 3NNNNNNNNN ,'&,&2A:3' NNNNNNNN
,olocando en el primer espacio en blanco el nombre de las dos frutas, comen<ando con
aquella de mayor contenido y en el segundo espacio en blanco la descripcin del tipo de
modificacin reali<ada conforme a lo dispuesto por lo &'()*98)SS:/)/005.
LM6' 3NNNNNNNNN ,'&,&2A:3' NNNNNNNN
,olocando en el primer espacio en blanco el nombre de las frutas de acuerdo a su
predominioP o se podr indicar como jugo de frutas c"tricas, tropicales, etc. segCn
corresponda y en el segundo espacio en blanco la descripcin del tipo de modificacin
reali<ada.
4././; Los ?$5/- *& 6,$%+- 9<1%(01& &'*$1;+*/- definidos en el inciso 1.+5 se denominan
de la siguiente forma%
PAG# 18
4././;./ Si el jugo de frutas mCltiples consiste de la me<cla de dos jugos de fruta de
LM6' 3NNNNNNNNN &3ML>:3'
mayor contenido.
4././;.+ Si la me<cla est compuesta por 1 o ms jugos de fruta y@o pur#s de frutas, la
LM6' 3NNNNNNNNN &3ML>:3'
podr indicar como jugo de frutas c"tricas, tropicales, etc. segCn corresponda.
4././9 Los ?$5/- *& 6,$%+- 9<1%(01& )/')&'%,+*/- &'*$1;+*/- definidos en 1.+4 se
denominarn de la siguiente forma%
4././9./ Si el jugo de frutas mCltiple consiste en la me<cla de dos jugos de fruta de frutas,
la denominacin debe ser%
LM6' 3NNNNNNNNN ,'&,&2A:3' &3ML>:3'
mayor contenido.
LM6' 3NNNNNNNNN ,'&,&2A:3' &3ML>:3'
podr indicar como jugo de frutas c"tricas, tropicales, etc., segCn corresponda.
4././0 Los ?$5/- *& 6,$%+- 9<1%(01& &'*$1;+*/- )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:'
LM6' 3NNNNNNNNN &3ML>:3' NNNNNNNN
PAG# 20
LM6' 3NNNNNNNNN &3ML>:3' NNNNNNNN
reali<ada conforme a lo dispuesto por lo &'()*98)SS:/)/005.
4./.+* Los ?$5/- *& 6,$%+- 9<1%(01& )/')&'%,+*/- &'*$1;+*/- )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$
)/90/-()(:' definidos en 1.+; se denominarn de la siguiente forma%
4./.+*./ Si el jugo de frutas mCltiple consiste en la me<cla de dos jugos de fruta de frutas,
LM6' 3NNNNNNNNN ,'&,&2A:3' &3ML>:3' NNNNNNN
4./.+*.+ Si la me<cla est compuesta por 1 o ms jugos de fruta y@o pur#s de frutas, la
LM6' 3NNNNNNNNN ,'&,&2A:3' &3ML>:3' NNNNNNNN
4./.+/ Los ?$5/- *& 6,$%+- 9<1%(01& &'*$1;+*/- ,&*$)(*/- &' )+1/,.+- definidos en el
inciso 1.+9 se denominan de la siguiente forma%
4./.+/./ Si el jugo de frutas mCltiple consiste en la me<cla de dos jugos de fruta de frutas,
LM6' 3NNNNNNNNN &3ML>:3' A3M,.3' & ,:L'A.:S
mayor contenido.
4./.+/.+ Si la me<cla est compuesta por 1 o ms jugos de fruta y@o pur#s de frutas, la
LM6' 3NNNNNNNNN &3ML>:3' A3M,.3' & ,:L'A.:S
4./.++ Los ?$5/- *& 6,$%+- 9<1%(01& )/')&'%,+*/- &'*$1;+*/- ,&*$)(*/- &' )+1/,.+-
PAG# 21
4./.++./ Si el jugo de frutas mCltiple consiste en la me<cla de dos jugos de fruta de frutas,
LM6' 3NNNNNNNNN ,'&,&2A:3' &3ML>:3' A3M,.3' & ,:L'A.:S
mayor contenido.
4./.++.+ Si la me<cla est compuesta por 1 o ms jugos de fruta y@o pur#s de frutas, la
LM6' 3NNNNNNNNN ,'&,&2A:3' &3ML>:3' A3M,.3' & ,:L'A.:S
4./.+1 Los ?$5/- *& 6,$%+- 9<1%(01& &'*$1;+*/- ,&*$)(*/- &' )+1/,.+- )/'
9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:' definidos en el inciso 1.1* se denominan de la
siguiente forma%
4./.+1./ Si el jugo de frutas mCltiple consiste en la me<cla de dos jugos de fruta de frutas,
LM6' 3NNNNNNNNN &3ML>:3' A3M,.3' & ,:L'A.:S NNNNNNNN
4./.+1.+ Si la me<cla est compuesta por 1 o ms jugos de fruta y@o pur#s de frutas, la
LM6' 3NNNNNNNNN &3ML>:3' A3M,.3' & ,:L'A.:S NNNNNNNN
4./.+5 Los ?$5/- *& 6,$%+- 9<1%(01& )/')&'%,+*/- &'*$1;+*/- ,&*$)(*/- &' )+1/,.+- )/'
9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:' definidos en el inciso 1.1/ se denominan de la
siguiente forma%
4./.+5./ Si el jugo de frutas mCltiple consiste en la me<cla de dos jugos de fruta de frutas,
LM6' 3NNNNNN ,'&,&2A:3' &3ML>:3' A3M,.3' & ,:L'A.:SNNNNNN
PAG# 22
4./.+5.+ Si la me<cla est compuesta por 1 o ms jugos de fruta y@o pur#s de frutas, la
LM6' 3NNNNNN ,'&,&2A:3' &3ML>:3' A3M,.3' & ,:L'A.:SNNNNNN
2.2 NECTARES
Los n#ctares objeto de esta norma se denominan de acuerdo a lo siguiente,
4.+./ Los '=)%+,&- definidos en 1.11 se denominan de la siguiente forma%
&,2:A 3NNNNNNN
l nombre de la fruta correspondiente se coloca en el espacio en blanco.
4.+.+ Los '=)%+,&- )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:' definidos en 1.15 se
&,2:A 3NNNNNNN
l nombre de la fruta correspondiente se colocar en el espacio en blanco seguido de la
SS:/)/005.
4.+.1 Los '=)%+,&- >+?/- &' )+1/,.+- definidos en el inciso 1.14 se denominan de la
siguiente forma%
&,2:A 3 NNNNNNNNNNN B:L' & ,:L'AO:S
4.+.5 Los '=)%+,&- *& 6,$%+ >+?/- &' )+1/,.+- )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:'
definidos en el inciso 1.18 se denominan de la siguiente forma%
&,2:A 3 NNNNNNNNNNN B:L' & ,:L'AO:S NNNNNNNN
4.+.4 Los '=)%+,&- ,&*$)(*/- &' )+1/,.+- definidos en el inciso 1.1; se denominan de la
siguiente forma%
&,2:A 3 NNNNNNNNNNN A3M,.3' & ,:L'AO:S
PAG# 23
4.+.8 Los '=)%+,&- *& 6,$%+ ,&*$)(*/- &' )+1/,.+- )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$
)/90/-()(:' definidos en el inciso 1.19 se denominan de la siguiente forma%
&,2:A 3 NNNNNNNNNNN A3M,.3' & ,:L'AO:S NNNNNNNN
4.+.; Los '=)%+,&- *& 6,$%+- 9<1%(01& definidos en el inciso 1.10 se denominan de la
siguiente forma%
4.+.;./ Si el n#ctar de frutas mCltiples consiste de la me<cla de dos frutas, la
&,2:A 3NNNNNNNNN
mayor contenido.
4.+.;.+ Si la me<cla est compuesta por 1 o ms frutas, la denominacin debe ser
&,2:A 3NNNNNNNNN
podr indicar como n#ctar de frutas c"tricas, tropicales, etc. segCn corresponda.
4.+.9 Los '=)%+,&- *& 6,$%+- 9<1%(01& )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$ )/90/-()(:' definidos
en el inciso 1.5* se denominan de la siguiente forma%
4.+.9./ Si el n#ctar de frutas mCltiples consiste de la me<cla de dos frutas, la
&,2:A 3NNNNNNNNN
mayor contenido seguido de la descripcin del tipo de modificacin reali<ada conforme a lo
4.+.9.+ Si la me<cla est compuesta por 1 o ms frutas, la denominacin debe ser
&,2:A 3NNNNNNNNN
podr indicar como jugo de frutas c"tricas, tropicales, etc. segCn corresponda seguido de la
SS:/)/005.
PAG# 24
4.+.0 Los '=)%+,&- *& 6,$%+- 9<1%(01& >+?/- &' )+1/,.+- definidos en el inciso 1.5/ se
4.+.0./ Si el n#ctar de frutas mCltiple bajo en calor"as consiste de la me<cla de dos
&,2:A 3NNNNNNNNN B:L' & ,:L'AO:S
mayor contenido.
4.+.0.+ Si la me<cla est compuesta por 1 o ms frutas, la denominacin debe ser
&,2:A 3NNNNNNNNN B:L' & ,:L'AO:S
4.+./* Los '=)%+,&- *& 6,$%+- 9<1%(01& >+?/- &' )+1/,.+- )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$
)/90/-()(:' definidos en el inciso 1.5+ se denominan de la siguiente forma%
4.+./*./ Si el n#ctar de frutas mCltiple bajo en calor"as consiste de la me<cla de dos
&,2:A 3NNNNNNNNN B:L' & ,:L'AO:S NNNNNNNN
4.+./*.+ Si la me<cla est compuesta por 1 o ms frutas, la denominacin debe ser
&,2:A 3NNNNNNNNN B:L' & ,:L'AO:S NNNNNNNN
4.+.// Los '=)%+,&- *& 6,$%+- 9<1%(01& ,&*$)(*/- &' )+1/,.+- definidos en el inciso 1.51 se
4.+.//./ Si el n#ctar de frutas mCltiple consiste de la me<cla de dos frutas, la
&,2:A 3NNNNNNNNN A3M,.3' & ,:L'AO:S
mayor contenido.
4.+.//.+ Si la me<cla est compuesta por 1 o ms frutas, la denominacin debe ser
PAG# 22
&,2:A 3NNNNNNNNN A3M,.3' & ,:L'AO:S
4.+./+ Los '=)%+,&- *& 6,$%+- 9<1%(01& ,&*$)(*/- &' )+1/,.+- )/' 9/*(6()+)(/'&- &' -$
)/90/-()(:' definidos en el inciso 1.55 se denominan de la siguiente forma%
4.+./+./ Si el n#ctar de frutas mCltiple consiste de la me<cla de dos frutas, la
&,2:A 3NNNNNNNNN A3M,.3' & ,:L'AO:S NNNNNNNN
4.+./+.+ Si la me<cla est compuesta por 1 o ms frutas, la denominacin debe ser
&,2:A 3NNNNNNNNN A3M,.3' & ,:L'AO:S NNNNNNNN
3. ESPECIFICACIONES
3.1 JUGOS
8././ ,aracter"sticas Sensoriales
,olor% ,aracter"stico semejante a la $ariedad empleada.
'lor% ,aracter"stico del jugo que se trate.
Sabor% ,aracter"stico del jugo de que se trate, sin sabores e!traos.
8./.+ -isicoqu"micas
Los jugos objeto de esta norma deben cumplir con las especificaciones f"sicas y qu"micas
que se muestran en las 2ablas &o. /, +, 1 y 5
TA!LA N/. 1 E-0&)(6()+)(/'&- F(-()/B$.9()+- *& J$5/-
Los jugos definidos en 1.9, 1./*, 1.+* y 1.++ deben cumplir con las siguientes
especificaciones%
PAG# 23
JUGO DE ..
P+,C9&%,/
N+,+'?+ M+';+'+ P(D+ T/,/'?+ U@+ M+'*+,('+ M<1%(01&- MTODOS DE PRUE!A
Slidos disueltos
m"nimos de la
fruta
correspondiente
FEBri!G
/*,* /*,* /*,* 0,* /5,* /*,* 0,* BA ,:P.2ML' 9
,uando un jugo proceda de una fruta no mencionada en esta tabla, el ni$el m"nimo de grados Bri! del jugo ser
el ni$el de grados Bri! del jugo e!primido de la fruta utili<ada.
TA!LA N/. 2 E-0&)(6()+)(/'&- F(-()/B$.9()+- *& J$5/- E'*$1;+*/-
Los jugos definidos en 1./+, 1./5, 1./8, 1./9, 1.+5, 1.+8, 1.+9 y 1.1* deben contener las
cantidades de slidos disueltos pro$enientes de la fruta de la $ariedad de acuerdo a las
siguientes especificaciones%
JUGO DE ..
P+,C9&%,/
Slidos disueltos
m"nimos de fruta
correspondiente
FEBri!G
9,* 9,* 9,* ;,* /*,* 9,* ;,* BA ,:P.2ML' 9
TA!LA N/. 3 E-0&)(6()+)(/'&- F(-()/B$.9()+- *& J$5/- C/')&'%,+*/- $'+ @&;
R&)/'-%(%$(*/-
Los jugos definidos en 1.0, 1.//, 1.+/ y 1.+1 al ser reconstituidos de acuerdo a las
instrucciones del fabricante, deben cumplir con las siguientes especificaciones%
JUGO DE ..
P+,C9&%,/
Slidos
disueltos
m"nimos de fruta
correspondiente
FEBri!G
/*,* /*,* /*,* 0,* /5,* /*,* 0,* BA ,:P.2ML' 9
,uando un jugo proceda de una fruta no mencionada en esta tabla, el ni$el m"nimo de grados Bri! del jugo ser
el ni$el de grados Bri! del jugo e!primido de la fruta utili<ada.
TA!LA N/. 4 E-0&)(6()+)(/'&- F(-()/B$.9()+- *& J$5/- C/')&'%,+*/- E'*$1;+*/-
$'+ @&; R&)/'-%(%$(*/-
Los jugos definidos en 1./1, 1./4, 1./;, 1./0, 1.+4, 1.+;, 1.+0 y 1.1/ al ser reconstituidos de
acuerdo a las instrucciones del fabricante, deben contener las cantidades de slidos
disueltos pro$enientes de la fruta de la $ariedad de acuerdo a las siguientes
especificaciones%
JUGO DE ..
P+,C9&%,/
Slidos
disueltos
m"nimos de fruta
correspondiente
9,* 9,* 9,* ;,* /*,* 9,* ;,* BA ,:P.2ML' 9
PAG# 27
FEBri!G
TA!LA N/. 2 E-0&)(6()+)(/'&- 0+,+ ?$5/- E ?$5/- )/')&'%,+*/- $'+ @&;
,&)/'-%(%$.*/-
Los jugos definidos en 3! " 3#$ %s& 'o(o )os jugos definidos en 31* " 311 %) se+ +e'ons,i,u&dos de
%'ue+do % )%s ins,+u''iones de) f%-+i'%n,e$ de-en 'u(.)i+ 'on )%s siguien,es es.e'ifi'%'iones
N+,+'?+ M+'*+,('+ M+';+'+ T/,/'?+ P(D+ U@+
PARAMETRO J$5/ J$5/ J$5/ J$5/ J$5/ J$5/
'ligosacaridos :usente :usente :usente :usente :usente :usente
,arbon S.A: Q)+5 a )+9 )+5 a )+9 )+5 a )+9 )+5 a )+9 )// a)/1 )+5 a )+9
-ormol
/4)+8
meq@/** mL
B&
1)/*
meq@/** mL
/5)1* meq@/**
mL
;.1)/5.1
meq@/** mL
/*)1*
meq@/** mL
Potasio
/1**)+4**
mg@L
/4;
mg@/**g
0**)/4**
mg@L
0**)+***
mg@L
5*)/1+
mg@/** ml
/50*)/15**
mg@L
:c. 3)isoc"trico
84)+**
mg@L
R4* ppm & : /5*)14* mg@L /8+ mg@L & :
&aringina Q+ ppm
2
Q+ ppm & : (!/+** mg@L & : & :
,onser$adores :usente :usente :usente :usente :usente :usente
Prolina
*.*55)*.*58
g@/** g
*.*1/
g@/**g
m! +*
mg@L
/.;5)/+.;
mg@L
*.*/1
g@/**g
/4*)/***
mg@L
Pulpa la$ada B& B& & : B& & : & :
Sorbitol
*./)/
g@/** ml
B&
+.4);
g@L
B&
Q*.*/
g@/** mL
*.+
g@/**g
Perfil de :<Ccares%
-ructosa
/.0
g@/** ml
+.55
g@/** ml
54)94 g@L +* ) 4* g@L
+./0)1.98
g@/** ml
//.5
g@/** ml
6lucosa
/.;4
g@/** ml
+.++
g@/** ml
/4)14
g@L
+* ) 4* g@L
+./9)1.4/
g@/** ml
0.;+
g@/** ml
Sacarosa
5.;/
g@/** ml
8./8
g@/** ml
4)1* g@L 4 ) 5* g@L
5./1)4.4/
g@/** ml
*.*1
g@/** ml
Pectina soluble (a! 4** mg B& & : (a! ;** mg@L & : & :
Perfil de ac. 'rgnicos
,"trico & : & : *.*4)*.+ g@L & :
*.1/;)/.985
g@/** ml
+**)4**
mg@L
Suinico & : & :
*.*19)*./19
D
& : ) )
-umrico & : & :
*.9)/0.9
ppm
& : ) )
:c. 3)mlico & : & :
(a! 1*
mg@/** ml
& :
*./8;)*.58/
g@/** ml
4 g@L
:ntocianinas & : & : & : & : & : -ruta t"pica
NA&o aplica el m#todo.
VNEBalor no encontrado en Bibliograf"a
PAG# 27
TA!LA N/. 3 E-0&)(6()+)(/'&- 0+,+ ?$5/- E ?$5/- )/')&'%,+*/- $'+ @&;
,&)/'-%(%$.*/-
Los jugos definidos en 312$ 314$ 31/ " 31!$ %s& 'o(o )os jugos definidos en 313$ 315$ 310 " 31#
%) se+ +e'ons,i,u&dos de %'ue+do % )%s ins,+u''iones de) f%-+i'%n,e$ de-en 'u(.)i+ 'on )%s siguien,es
es.e'ifi'%'iones
N+,+'?+ M+'*+,('+ M+';+'+ T/,/'?+ P(D+ U@+
PARAMETRO J. E'*$1;+*/ J. E'*$1;+*/ J. E'*$1;+*/ J. E'*$1;+*/ J. E'*$1;+*/ J. E'*$1;+*/
'ligosacaridos & : & : & : & : & : & :
,arbon S.A: B& B& B& B& B& B&
-ormol B& B& B& B& B& B&
Potasio B& B& B& B& B& B&
:c. 3)isoc"trico B& B& & : B& B& & :
&aringina B& B& & : B& & : & :
,onser$adores :usente :usente :usente :usente :usente :usente
Prolina B& B& B& B& B& B&
Pulpa la$ada B& B& & : B& & : & :
Sorbitol B& B& B& B& B& B&
Perfil de :<Ccares%
-ructosa & : & : & : & : & : & :
6lucosa & : & : & : & : & : & :
Sacarosa & : & : & : & : & : & :
Pectina soluble B& B& & : B& & : & :
Perfil de ac. 'rgnicos
,"trico & : & : B& & : B& B&
Suinico & : & : B& & : B& B&
-umrico & : & : B& & : B& B&
:c. 3)mlico & : & : B& & : B& B&
:ntocianinas & : & : & : & : & : -ruta t"pica
8./.1 ,ontaminantes Su"micos
Los jugos objeto de esta norma deben cumplir con los l"mites establecidos en la &'()/1*)
SS:/)/004 indicada en el apartado de referencias.
Para el caso de los Lugos M$a el di!ido de a<ufre FS'+G no deber ser mayor a 4*,* mg@Hg.
sta especificacin se debe de $erificar con el m#todo de la norma &(=)B)14)S)/09/
indicada en el apartado de referencias.
PAG# 28
8./.5 :diti$os
8./.5./ :cidulantes y amortiguadores de pH
Se permite el uso de cido c"trico, cido mlico, cido tartrico y citrato de sodio de acuerdo
a las B.P.-. a los jugos objeto de esta norma.
8./.5.+ :ntio!idantes
Se permite el uso de Tcido L)ascrbico y sus sales de sodio y calcio y cido eritrbico y su
sal de sodio de acuerdo a las B.P.-. a los jugos objeto de esta norma.
8./.5.1 ,olorantes
Se permite el uso de colorantes orgnicos naturales permitidos por la Secretar"a de Salud de
acuerdo a las B.P.-. a los jugos objeto de esta norma.
8./.5.5 ,onser$adores
Sueda pro7ibido el uso de conser$adores en los productos definidos en los jugos objeto de
esta norma.
8./.5.4 dulcorantes no calricos
Sueda pro7ibido el uso de edulcorantes no calricos a los productos definidos en 1.9, 1.0,
1./*, 1.//, 1./+, 1./1, 1./5, 1./4, 1.+*, 1.+/, 1.++, 1.+1, 1.+5, 1.+4, 1.+8 y 1.+;
Solamente se permite la adicin de edulcorantes no calricos a los productos definidos en
1./8, 1./;, 1./9, 1./0, 1.+9, 1.+0, 1.1* y 1.1/ de acuerdo a lo establecido en la &'()*98)
SS:/)/004.
8./.5.8 stabili<antes y espesantes
Sueda pro7ibido el uso de estabili<antes y espesantes en los jugos objeto de esta norma.
8./.5.; Sabori<antes o aromati<antes
Se permite la restitucin de los componentes $oltiles naturales del jugo a cualquier jugo
obtenido de los mismos tipos de fruta de la que se 7aya e!tra"do a los productos definidos
de acuerdo a las B.P.-. a los jugos objeto de esta norma.
8./.4 :<Ccares
8./.4./ &o se permite el uso de a<Ccares a los jugos definidos en los incisos 1.9, 1.0,
1./*, 1.//, 1.+*, 1.+/, 1.++ y 1.+1.
8./.4.+ Para los jugos definidos en los incisos 1./+, 1./1, 1./5, 1./4, 1./8, 1./;, 1./9,
1./0, 1.+5, 1.+4, 1.+8, 1.+;, 1.+9, 1.+0, 1.1* y 1.1/ se permite el uso de los siguientes
a<Ccares% sacarosa, glucosa, fructosa, a<Ccar in$ertido, miel en un l"mite m!imo de 4D de
slidos referidos al $olumen total Fm@$G.
PAG# 30
3.2 NCTARES
8.+./ ,aracter"sticas Sensoriales
,olor% ,aracter"stico semejante a la $ariedad empleada
'lor% ,aracter"stico del n#ctar que se trate.
Sabor% ,aracter"stico del n#ctar de que se trate, sin sabores e!traos.
8.+.+ -isicoqu"micas
Los n#ctares en$asados objeto de esta norma deben cumplir con las especificaciones f"sicas
y qu"micas que se muestran en las 2ablas &o. 4 y 8
TA!LA N/. 7 E-0&)(6()+)(/'&- F(-()/B$.9()+- *& 1/- N=)%+,&-
Los n#ctares definidos en 1.11 y 1.15 deben cumplir con las siguientes especificaciones%
ESPECIFICACIONES
M
A
N
G
O
P
E
R
A
D
U
R
A
F
N
O
M
A
N
F
A
N
A
C
G
A
!
A
C
A
N
O
C
I
R
U
E
L
A
G
U
A
Y
A
!
A
P
A
P
A
Y
A
G
U
A
N
A
!
A
N
A
F
R
E
S
A
T
A
M
A
R
I
N
D
O
MTODOS DE
PRUE!A
Slidos m"nimos
disueltos en
&#ctares F EBri!G
/+ /+ /+ /+ /+ /1 /+,+ /+ /+ /+,4 /+,4
&(=)-)/*1)/0;9
("nimo de pulpa y
jugo en el n#ctar
FDGU
+4 1* 1* 1* 1* +4 ++ +4 +* +4 4
BA ,:P.2ML' 9
:cide< e!presado
como cido c"trico
FDG
*,/4
?
*,44
*,/4
?
*,44
*,/4
?
*,44
*,/4
?
*,44
*,/4
?
*,44
*,/4
?
*,44
*,/4
?
*,44
*,/4
?
*,44
*,/4
?
*,44
*,/4
?
*,44
*,/4
?
*,44
&(=)-)/*+)S)/0;9
Slidos solubles
m"nimos de la
-ruta
correspondiente
FEBri!GUU
/*,* 0,* 9,* /*,* 9,4 9,4 9,* 8,4 0,4 4,* 9,*
BA ,:P.2ML' 9
FUG l D m"nimo de pulpa y jugo de la fruta correspondientes se refiere al $olumen total.
FUUG La pulpa y jugo de fruta deben tener m"nimo los slidos solubles de la fruta correspondiente
TA!LA N/. 7 E-0&)(6()+)(/'&- F(-()/B$.9()+- *& 1/- N=)%+,&- *& F,$%+- M<1%(01&-
Los n#ctares definidos en 1.10 y, 1.5*deben cumplir con las siguientes especificaciones%
ESPECIFICACIONES NCTAR DE FRUTAS
MHLTIPLES
MTODO DE
PRUE!A
Slidos m"nimos disueltos en &#ctares e!presado en F EBri!G /+,*
&(=)-)/*1)/0;9
("nimo de Pulpa y Lugo en &#ctares FDG +* BA ,:P.2ML' 9
PAG# 31
:cide< e!presado como cido c"trico FDG *,/4 ? *,44 &(=)-)/*+)S)/0;9
TA!LA N/. 8 E-0&)(6()+)(/'&- *& 1/- N=)%+,&-
Los n#ctares definidos en 1.11 y 1.15 deben cumplir con las siguientes especificaciones para
$erificar el cumplimiento de la especificacin del contenido de fruta%
PARAMETRO G$+E+>+ D$,+;'/ M+'5/ M+';+'+ P&,+
Potasio 8+ mg@/** g 40 mg@/** g 10 mg@/** g 15 mg@/** g 1; mg@/** g
,onser$adores :usente :usente :usente :usente :usente
Sorbitol & : /.5 g@Hg & : *.*8 g@/** g
1
;.4 g@L
:ntocianinas & : & : & : & : & :
-osforo 8 mg@/** g 5 mg@/** g 1 mg@/** g + mg@/** g 1.1 mg@/** g
:cidos orgnicos% B& B& B&
,"trico /./ g@Hg *.8 g@L
(lico /.8 g@Hg *.*8 g@/** g
Su"nico .5+ g@Hg
.soc"trico
PARAMETRO CI+>+)+'/ F,&-+ C(,$&1+ G$+'+>+'+ T+9+,('*/
Potasio +/* ) 5** mg@/** g /88 mg@/** g /;+ mg@/** g B& 8+9 mg@/* mg
,onser$adores :usente :usente :usente :usente :usente
Sorbitol /.4)/5 g@Hg & : 1); D B& & :
:ntocianinas & : -ruta t"pica -ruta at"pica & : & :
-osforo
15*)94* mg@Hg
Fcomo fosfatoG
/0 mg@/** mg /* mg@/** mg //1 mg@/** g
:cidos orgnicos% B& B& B&
,"trico /.4)/8 g@Hg ;.;5 g@Hg
(lico 1.4)/0 g@Hg +.+1 g@Hg
Su"nico
.soc"trico 50.1 mg@Hg
8.+.+./ &#ctares bajos en calor"as
Los productos definidos en 1.14 y 1.18 deben cumplir con el contenido de fruta especificado
en la tabla 4 , sal$o aquellos casos en los que la cantidad de fruta aporte ms de 5*
calor"as@porcin, en este caso el contenido de fruta puede ser menor para aportar 5*
calor"as@porcin de acuerdo a lo establecido en la &'()*98)SS:/)/005.
PAG# 32
Los productos definidos en 1.5/ y 1.5+ deben cumplir con el contenido de fruta especificado
en la tabla 8 , sal$o aquellos casos en los que la cantidad de fruta aporte ms de 5*
calor"as@porcin, en este caso el contenido de fruta deber ajustarse para aportar 5*
calor"as@porcin de acuerdo a lo establecido en la &'()*98)SS:/)/005.
Los productos definidos en 1.1; y 1.19 deben cumplir con lo establecido en la tabla 4 a
e!cepcin de los slidos solubles disueltos en n#ctares, cuyo $alor depender de la
reduccin de calor"as.
Los productos definidos en 1.51 y 1.55 deben cumplir con lo establecido en la tabla 8 a
e!cepcin de los slidos solubles disueltos en n#ctares, cuyo $alor depender de la
reduccin de calor"as.
8.+.1 ,ontaminantes Su"micos
Los n#ctares objeto de esta norma deben cumplir con los l"mites establecidos en la &'()
/1*)SS:/)/004 indicada en el apartado de referencias.
8.+.5 :diti$os
8.+.5./ :cidulantes y amortiguadores de pH
Se permite el uso de cido c"trico, cido mlico, cido lctico, cido tartrico y citrato de
sodio de acuerdo a las B.P.-. a los n#ctares objeto de esta norma.
8.+.5.+. :ntio!idantes
Se permite el uso de Tcido L)ascrbico y sus sales de sodio y calcio y cido eritrbico y su
sal de sod de acuerdo a las B.P.-. a los n#ctares objeto de esta norma.
8.+.5.1 ,olorantes
Se permite el uso de colorantes orgnicos naturales permitidos por la Secretar"a de Salud de
acuerdo a las B.P.-. a los n#ctares objeto de esta norma.
8.+.5.5 ,onser$adores
Sueda pro7ibido el uso de conser$adores en los n#ctares objeto de esta norma.
8.+.5.4 dulcorantes no calricos
Sueda pro7ibido el uso de edulcorantes no calricos a los productos definidos en 1.11, 1.15,
1.10 y 1.5*
Solamente se permite la adicin de edulcorantes no calricos a los productos definidos en
1.14, 1.18, 1.1;, 1.19, 1.5/, 1.5+, 1.51 y 1.55 de acuerdo a lo establecido en la &'()*98)
SS:/)/004.
8.+.5.8 stabili<antes y espesantes
PAG# 33
Sueda pro7ibido el uso de estabili<antes y de espesantes en los productos definidos en 1.11,
1.15, 1.10 y 1.5*. .
8.+.5.; Sabori<antes o aromati<antes
Se permite la restitucin de los componentes $oltiles naturales de la fruta a cualquier n#ctar
obtenido de los mismos tipos de fruta de la que se 7aya e!tra"do de acuerdo a las B.P.-. a
los n#ctares objeto de esta norma.
8.+.4 :<Ccares
8.+.4./ Para los n#ctares definidos en los incisos 1.11, 1.15, 1.1;, 1.19, 1.10, 1.5*,
1.51 y 1.55 se permite el uso de los siguientes a<Ccares% sacarosa, glucosa, fructosa, a<Ccar
in$ertido y miel en un l"mite m!imo de /1D de slidos $olumen total Fm@$G
7 MUESTREO
l muestreo puede ser reali<ado de acuerdo a las &ormas (e!icanas &(=)>)*/+@*/)S,-.)
/09;, &(=)>)*/+@*+)S,-.)/09; y &(=)>)*/+@*1)S,-.)/09; F$er cap"tulo + referenciasG
7 MTODOS DE PRUE!A .
Para $erificacin de las especificaciones establecidas en la presente norma se podrn aplicar
los siguientes m#todos, los cuales se clasifican en las tablas &o ; y 9
TA!LA N/. 7# M=%/*/- *& 0,$&>+ 0+,+ &@+1$+, J$5/-
M=%/*/- *& A'C1(-(-
JUGOS
NARANJA MANFANA MANDARINA TORONJA PIJA UVA
E B!

Perfil de oligosacaridos

,arbon S.A:

-ormol

:cido
3)isocitrico

&aringina

Potasio

,onser$adores

Prolina

VPulpa la$adaW
Sorbitol

PAG# 34
Perfil de a<Ccares

:cide< titulable

Pectina soluble en agua
sustitu"r por .nfrarrojo

:ntocianinas

Perfil de cidos orgnicos

:cido
3)mlico

TA!LA 7# M=%/*/- *& 0,$&>+ 0+,+ &@+1$+, N=)%+,&-
M=%/*/- *&
A'C1(-(-
NECTARES
GUAYA!A DURAFNO MANGO MANFANA PERA CGA!ACANO FRESA CIRUELA GUANA!ANA TAMARINDO
E B!

Potasio

,onser$adores

Sorbitol

:ntocianinas

-osforo

Perfil de cidos
orgnicos

7.1.1 T.%$1/
P&,6(1 *& +'%/)(+'('+-# M=%/*/ *& ),/9+%/5,+6.+ *& 1.B$(*/-

9./.+ -undamento
Se aade un estndar interno Fcalistepina X cloruro de pelargonidina 1)glicsidoG a una
muestra filtrada de jugo o n#ctar. Las antocianinas se separa por cromatograf"a de l"quidos
en una columna de fase re$ersa, con elucin por gradiente y deteccin fotom#trica a una
longitud de onda de 4/9 nm. l cromatograma obtenido F7uella digital de antocianinas o
perfil de antocianinasG se compara al cromatograma del jugo de frutas aut#ntico, obtenido por
e!presin directa de la fruta correspondiente.
9./.1 quipo y (ateriales
Balan<a anal"tica con sensibilidad de t *,/ mg.
,romatgrafo de l"quidos con opcin de reali<ar elucin por gradiente.
3etector de MB)B.S% a 4/9 nm.
PAG# 32
,olumna fase re$ersa ,/9.
Horno de columna.
Pipetas graduadas ,lase : de /, 4 y /* mL.
(icropipetas de /* y / *** IL.
Basos de precipitados de /*, 4* y /** mL.
-iltros de membrana de nylon de *,++ y de *,54 Im.
quipo para filtracin de sol$entes con membranas de *,54 Im.
,entr"fuga Fca. 5,4** ! gG.
Biales de + mL para muestras.
9./.5 Aeacti$os y soluciones
:gua desioni<ada FH+'G, grado cromatograf"a de l"quidos.
:cetonitrilo F,H1,&G, grado cromatograf"a de l"quidos.
:cido frmico FH,''HG, grado cromatograf"a de l"quidos.
(etanol F,H1'HG, grado anal"tico.
,alistepina Fcloruro de pelargonidina 1)glicsidoG.
Solucin patrn de calistepina 4 mg@mL en me<cla agua@metanol% 3isol$er 4 mg de
calistepina en *,+4 mL de metanol y *,;4 mL de agua desioni<ada. La solucin se puede
almacenar a ) +*, 7asta por dos meses, y se debe descongelar antes del anlisis.
Solucin estndar de calistepina% 3iluir /* IL de solucin patrn con / *** IL de agua
desioni<ada. La solucin se debe usar fresca, por lo que 7ay que prepararla cada d"a.
-ase m$il para cromatograf"a de l"quidos%
luente :% 0** mL de agua desioni<ada y /** mL de cido frmico.
luente B% 5** mL de agua, /** mL de cido frmico y 4** mL de acetonitrilo.
Las soluciones se filtran en membrana de nylon *,54 Im antes de inyectar al cromatgrafo
de l"quidos.
9./.4 Preparacin de la muestra
2omar +* mL de muestra Fjugo o n#ctarG y diluir con 5* mL de agua desioni<ada Fpara
cencentrados de jugo de frutas tomar / g de muestra y diluir con 4 mL de aguaG. (e<clar
bien, centrifugar si es necesario Fpara n#ctaresG y filtrar con membrana de *,+ Im a un $aso
de precipitados de tamao apropiado. 2ransferir / mL de la solucin filtrada a un $ial de + mL
y me<clar con /* IL de la solucin patrn de calistepina.
9./.8 Procedimiento
La corrida cromatogrfica de la muestra se lle$a a cabo slo despu#s de al menos dos
corridas del estndar, una para el acodicionamiento del equipo y la segunda para determinar
el tiempo de retencin y factor de respuesta del cloruro de callistep7in.
9./.8./ ,ondiciones instrumentales
,olumna -ase re$ersa ,/9
2emperatura de columna 5*t*,/,
Belocidad de flujo 3epende de la columna usada
Bolumen de inyeccin 3epende del instrumento
PAG# 33
3eteccin Bisible a 4/9 nm.
-ase m$il luente :% 0** mL de agua
desioni<ada y /** mL de cido
frmico.
luente B% 5** mL de agua, /** mL
de cido frmico y 4** mL de
acetonitrilo.
6radiente%
2iempo FminG D: DB
* 99 /+
/ 99 /+
+8 ;* 1*
14 * /**
19 * /**
51 99 /+
58 99 /+
9./.8.+ Secuencia de ensayo anal"tico
3espu#s del acondicionamiento del sistema cromatogrfico, inyectar por duplicado un
$olumen conocido F+* ILG de la muestra preparada. Las reas de los picos deben diferir
entre +,4D . n la secuencia de muestras, intercalar cada +* inyecciones, como m!imo,
una inyeccin del estndar. sta secuencia de ensayo es una gu"a para la $erificacin de la
confiabilidad de la cuantificacin de las reas de picos y los tiempos de retencin.
9./.; !presin de resultados
9./.;./ .dentificacin y determinacin semicuantitati$a.
Las reas y tiempos de retencin de los picos de antocianinas relati$os al del estndar
interno calistepina, se comparan a los datos cromatogrficos de la fruta aut#ntica.
9./.;.+ $aluacin.
Los resultados se e!presan como Yfruta t"picaZ o Yfruta at"picaZ. n este Cltimo caso, se indica
la posible adulteracin y se estima la cantidad en porcentaje relati$o, tanto como sea posible,
mediante el m#todo de normali<acin de reas.
7.2.1 T.%$1/
P&,6(1 *& C)(*/- /,5C'()/-

9.+.+ -undamento
PAG# 37
Se eliminan las interferencias de la muestra por medio de e!traccin en fase slida y se
inyecta en un cromatgrafo de l"quidos de alta resolucin F,L:AG. Los cidos c"trico, mlico y
qu"nico se separan usando dos columnas de fase re$ersa en secuencia FtandemG, se
detectan por MB a +/5 nanmetros y se cuantifican por comparacin con un estndar
e!terno.
9.+.1 quipo y (ateriales
,romatgrafo de l"quidos de alta resolucin con detector MB.
:rreglo de columnas propuesto para el m#todo% ,olumna F/G Supelcosil L,/9, 4 Im, +4* !
5,8 mm o equi$alente, en secuencias FtandemG con un cartuc7o F+G de fase re$ersa ,/9, /*
Im, +4* ! 5,8 mm. s recomendable usar una precolumna de fase re$ersa F'3S/*G antes
de la columna F/G.
Horno de columna.
(edidor de pH.
lectrodos para medir pH.
,artuc7os para e!traccin en fase slida Sep)PaH ,/9.
Pipetas graduadas ,lase : de /* mL.
Basos de precipitados de 4*, /** y / *** mL.
(atraces $olum#tricos ,lase : de /** y / *** mL.
-iltro de membrana de nylon de *,++ y *,54 Im.
sptula.
Bidrio de reloj.
Biales de 5 mL.
9.+.5 Aeacti$os y soluciones
:gua desioni<ada FH+'G, grado cromatogrfico.
:cido fosfrico FH1P'5G 94D, grado reacti$o.
:cetonitrilo F,H1,&G, grado cromatogrfico.
(etanol F,H1'HG, grado cromatogrfico.
-osfato monobsico de potasio FKH+P'5G, pure<a 00,4D.
:cido c"trico FH',F,'+HGF,H+,'+HGG, pure<a 00,4D.
:cido mlico F,5H8'4G, pure<a 0;D.
:cido qu"nico FFH'G5,8H;,'+HG, pure<a 09D.
Soluciones estndar de cidos% pesar *,+** gramos de cido c"trico, de cido mlico y de
cido qu"nico en un $aso de precipitados de 4* mL. 3iluir los cidos combinados con agua
desioni<ada, transferir a un matra< $olum#trico de /** mL y aforar a la marca con agua
desioni<ada. Mna al"cuota de + a 5 mL de la solucin estndar se filtra a tra$#s de una
membrana de nylon de *,54 Im, y se $ierte a un $ial de $olumen apropiado.
-ase m$il para cromatograf"a de l"quidos% :mortiguador de fosfatos *,+ (, pH +,5. 3isol$er
en un $aso de precipitados de / *** mL, +;,+ g de KH+P'5 con 04* mL de agua
desioni<ada y ajustar el pH de la solucin a +,5 con H1P'5. 2ransferir a un matra<
$olum#trico de / *** mL y aforar a la marca con agua desioni<ada. -iltran la solucin en
membrana de nylon *,54 Im y desgasificar.
PAG# 37
9.+.4 Preparacin de la muestra
l jugo de man<ana se limpian en cartuc7os Sep)PaH ,/9 sin tratamiento pre$io, para el
caso de jugo de pia y n#ctares, se centrifugan a + *** ! g durante /* minutos pre$io a la
limpie<a en los cartuc7os Sep)PaH ,/9.
l cartuc7o Sep)PaH ,/9 se acondiciona eluyendo /* mL de una me<cla 4* [ 4* de ,H1,&)
H+', posteriormente pasar /* mL de aire a tra$#s del cartuc7o. luir /* mL de muestra a
tra$#s del cartuc7o acondicionado, descartar los primeros 5 a 4 mL y colectar los siguientes 5
a 4 mL. -iltrar la muestra en membrana de *,54 Im antes de inyectar al cromatgrafo.
9.+.8 Procedimiento
corridas del estndar, una para el acondicionamiento del equipo y la segunda para
determinar el tiempo de retencin y factor de respuesta de los estndares.
9.+.8./ ,ondiciones instrumentales propuestas
,olumna Sepelcosil L,)/9, o equi$alente, F4Im,
+4* ! 5,8 mmG en secuencia con
columna ,/9 F/*Im, +4* ! 5,8 mmG.
Precolumna '3S/*.
2emperatura de columna 1*,
Belocidad de flujo *,9 mL@min
Bolumen de inyeccin 4 a +* IL
3eteccin MB a +/5 nm
-ase m$il :mortiguador de fosfatos pH+,5.
9.+.8.+ :condicionamiento del sistema
l sistema se acondiciona con metanol /**D Fo metanol)agua en relacin ;* [ 1*G seguido
por agua desioni<ada y finalmente con amortiguador de fosfatos pH+,5. .n$ertir el orden al
final del d"a% nunca dejar que entren en contacto el alcohol metlico con el amortiguador de
fosfatos.
9.+.8.1 Secuencia de ensayo anal"tico
.nyectar de 4 a +* IL de solucin estndar, despu#s de cada inyeccin de muestra para
c7ecar linearidad. .nyectar de 4 a +* IL de la solucin de muestra. Msar un promedio de dos
inyecciones para respuesta de estndar y de muestra. La secuencia de elucin, usando las
condiciones propuestas, es cido qu"nico, cido mlico y cido c"trico.
9.+.; !presin de resultados
9.+.;./ .dentificacin y determinacin cuantitati$a.
PAG# 38
Las reas y tiempos de retencin de los picos de cidos en la muestra, se comparan a los
datos cromatogrficos de la secuencia de cidos de la solucin estndar.
9.+.;.+ $aluacin.
%de cidoX
AP
muestra
AP
estndar

_
,

V
estndar
V
muestra

_
,

C
X
,
en donde%
APmuestra y APestndar son las reas de los picos de la muestra y del estndar,
respecti$amenteP
Vmuestra y Vestndar son los $olumenes de la muestra y del estndar, respecti$amenteP y
CX es la concentracin del estndar = Fcido c"trico, cido mlico o cido qu"nicoG en D.
&ota% Los estndares de cido mlico FL)mlico o 3L)mlicoG producen dos picos, el segundo
de los cuales es cido fumrico. La cantidad de cido fumrico presente en el cido mlico
estndar es tan pequea que el estndar es 00,0D libre de cido fumrico. Las impure<as
no afectan el anlisis.
7.3.1 T.%$1/
D&%&,9('+)(:' *& )/'-&,@+*/,&-. A)(*/ >&';:()/, C)(*/ -:,>()/ E 1/- =-%&,&- 9&%(1-,
&%(1- E 0,/0(1- *&1 C)(*/ para-I(*,/4(>&';:()/. M=%/*/ 0/, ),/9+%/5,+6.+ *& 1.B$(*/-.
9.1.+ -undamento
Los conser$adores son e!tra"dos de la muestra con disol$ente en condiciones cidas y
cuantificados por cromatograf"a de l"quidos de alta resolucin F,L:AG usando una columna
de fase re$ersa.
9.1.1 quipo y (ateriales
l material de $idrio que se requiera para la preparacin de soluciones, contenedores de
fases m$iles y $iales para muestras. l material $olum#trico debe ser ,lase :.
Bao ultrasnico o equi$alente para agitacin de las muestras.
-iltros de membrana de *,54 Im.
,artuc7os de limpie<a ,/9.
,olumna de separacin de -ase Ae$ersa ,/9 F4Im, +4* ! 5,8 mm /4* ! 5,8 mm o
equi$alenteG.
quipo de cromatgrafo de l"quidos con detector MB y 7orno para la columna.
9.1.5 Aeacti$os y soluciones
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:cido ac#tico glacial F,H1,''HG, grado cromatograf"a de l"quidos.
:gua desioni<ada FH+'G, 2ipo ..
-errocianuro de potasio FK5\-eF,&G8]^1H+'G, pure<a 00,*D.
(etanol F,H1'HG, pure<a 00,*D.
(etanol F,H1'HG, grado cromatograf"a de l"quidos.
Sulfato de cinc 7epta7idratado F>nS'5^;H+'G, pure<a 00,*D.
Solucin de acetato de amonio F,H1,''&H5G *,*/ (. Pesar *,;;t*,*/g de acetato de
amonio en un $aso de precipitados de /** mL y disol$er con 4* mL de agua desioni<ada.
2ransferir cuantitati$amente a un matra< aforado de / *** mL y lle$ar a $olumen con agua
desioni<ada.
Solucin amortiguadora% acetato de amonio@cido ac#tico glacial. (e<cle / *** partes en
$olumen de solucin de acetato de amonio *,*/ ( con /,+ partes en $olumen de cido
ac#tico glacial.
Solucin de e!traccin% Facetato de amonio@cido ac#tico glacialG%metanol. (e<cle 8* partes
en $olumen de solucin amortiguadora acetato de amonio@cido ac#tico glacial con 5*
partes en $olumen de metanol grado anal"tico.
Solucin de ,arre< . FS,.G. Pesar /4,*t*,/ g de ferrocianuro de potasio en un $aso de
precipitados de /** mL y disol$er con 4* mL de agua desioni<ada. 2ransferir
cuantitati$amente a un matra< aforado de /** mL y lle$ar a $olumen con agua
desioni<ada. La solucin tiene una densidad X /4* g@L.
Solucin de ,arre< .. FS,..G. Pesar 1*,*t*./ g de sulfato de cinc 7epta7idratado en un $aso
de precipitados de /** mL y disol$er con 4* mL de agua desioni<ada. 2ransferir
cuantitati$amente a un matra< $olum#trico de /** mL y lle$ar a $olumen con agua
desioni<ada. La solucin tiene una densidad X 1** g@L.
stndares de cido ben<ico F,8H4,''HG, #steres del cido para)7idro!iben<ico
FH',8H5,''A, A X ),H1, ),+H4, ),1H;G, cido srbico F,H1F,HG5,''HG, y sorbato
de potasio F,H1F,HG5,''KG, pure<a 00,4D.
-ase m$il para cromatograf"a de l"quidos. (e<clar 4* partes en $olumen de la solucin de
acetato de amonio *,*/ ( con 5* partes en $olumen de metanol grado cromatograf"a de
l"quidos y ajuste el pH a 5,4)5,8 con cido ac#tico glacial. -iltrar a tra$#s de una
membrana de *,54 Im antes de usar.
9.1.4 Preparacin de la muestra y de los estndares
n el caso de concentrados, una muestra representati$a F/* g o /* mLG se me<cla con agua
desioni<ada 7asta que los EB! de la muestra igualen a los del jugo simple. (e<clar
cuidadosamente la muestra.
9.1.4./ Procedimiento de !traccin
PAG# 41
n el caso de soluciones traslCcidas% :gitar $igorosamente /* mL de jugo con ;4 mL de la
solucin de e!traccin. -iltrar la me<cla a tra$#s de una membrana de *,54 Im e inyectar
directamente al cromatgrafo de l"quidos.
n el caso de muestras opacas o turbias% 3iluir de 4 a /* mL de muestra en
apro!imadamente ;4 mL de solucin de e!traccin en un matra< aforado de /** mL. Poner a
agitar la solucin en un bao ultrasnico o equi$alente por al menos /* min, despu#s aadir
/,* mL de cada solucin de ,arre< . y .. para clarificar la muestra. (e<clar la solucin
cuidadosamente despu#s de cada adicin y lle$ar al $olumen con solucin de e!traccin.
Feste procedimiento define el $olumen de solucin de muestra B/G.
9.1.4.+ Preparacin de estndares
9.1.4.+./ Soluciones patrn de / *** mg@L F/ *** partes por milln% ppmG.
3isol$er /** mg de cada conser$ador en 5* mL de metanol en un matra< aforado de /** mL
y lle$ar al $olumen con agua desioni<ada. ,ada una de estas soluciones tiene una
concentracin de /*** mg@L F/*** ppmG del conser$ador correspondiente.
9.1.4.+.+ Solucin patrn de /** mg@L F/** ppmG en cada conser$ador.
:adir a temperatura ambiente / mL de cada solucin F9.1.4.+./G a un matra< aforado de /*
mL y lle$ar al $olumen con una me<cla agua@metanol F8*[5* partes en $olumenG para
obtener una solucin estndar que contiene /** mg@L F/** ppmG de cada uno de los
conser$adores.
9.1.4.+.1 Soluciones estndar de concentracin conocida.
3iluir la solucin patrn F9.1.4.+.+G con una me<cla agua@metanol F8*[5* partes en $olumenG
para obtener soluciones estndar con 4, /*, +4 y 4* mg@L de cada conser$ador, como se
muestra a continuacin.
Msando pipetas $olum#tricas de 4 y de / mL y matraces aforados de /* mL, preparar las
soluciones estndar de concentracin conocida por diluciones sucesi$as de acuerdo a la
tabla siguiente%
Solucin
&o.
\estndar]
mg@L
Se usa la
solucin
mL que
se
toman
Bolumen FmLG
final de aforar
/ /** ) ) )
+ 4* / 4 /*
PAG# 42
1 +4 + 4 /*
5 /* / / /*
4 4 5 4 /*
2odas las soluciones se filtran a tra$#s de una membrana de *,54 Im antes de inyectarla al
cromatgrafo de l"quidos.
9.1.8 Procedimiento
9.1.8./ ,ondiciones instrumentales
,olumna -ase re$ersa F,/9G% 4Im, +4*!5,8 mm,
/4* ! 5,8 mm, o equi$alente
2emperatura 1*t*,/,
-ase m$il :cetato de amonio@metanol F4*[5*$@$G
[ cido ac#tico glacial FpH5,4G
Belocidad de flujo / a /,4 mL@min, dependiendo de la
columna empleada
Bolumen de inyeccin /* o +* IL
3eteccin MB +14 nm
9.1.8.+ Secuencia de ensayo anal"tico
3espu#s del acondicionamiento del sistema cromatogrfico, inyectar las muestras. ,ada +*
inyecciones de muestras, como m!imo, reinyectar la me<cla de estndares F9.1.4.+.1G. sta
secuencia de ensayo es una gu"a para $erificar confiabilidad, reas de pico y tiempos de
retencin.
La $elocidad de flujo se debe ajustar entre / y /,4 mL@min Fdependiendo de la columna
empleadaG a fin de minimi<ar el tiempo de anlisis, tomando precauciones de no sobrepasar
el l"mite de presin de operacin de la columna.
9.1.8.1 &otas a considerar
9.1.8.1./ Para acortar los tiempos de retencin de los #steres etil) y propil) del cido
para)7idro!iben<ico se puede cambiar la composicin de la fase m$il% incrementar el
metanol a 4* partes en $olumen y disminuir el acetato de amonio a 5* partes en
$olumen. 2omar en cuenta, sin embargo, que en este caso la separacin del cido
ben<ico y del cido srbico y del #ster met"lico del cido para)7idro!iben<ico podr"a
no ser completa y dificultar la deteccin y cuantificacin de estos conser$adores.
9.1.8.1.+ Los picos de la matri< de la muestra o de la solucin de e!traccin pueden
causar interferencias en la separacin, en especial en jugo de naranja, en cuyo caso
se debe lle$ar a cabo un procedimiento de limpie<a de la solucin pre$io a su anlisis
cromatogrfico. Para esto Cltimo se puede utili<ar un procedimiento de limpie<a
7aciendo pasar la muestra a tra$#s de un cartuc7o ,/9 o equi$alente.
PAG# 43
9.1.; !presin de resultados
La identificacin de los conser$adores sujetos de anlisis se lle$ar a cabo por comparacin
de los tiempos de retencin respecti$os de las muestras, con aquellos establecidos
pre$iamente para los estndares. 'pciones alternas de identificacin pueden ser%
fortalecimiento de las muestras con estndares indi$iduales, comparacin de espectros de
absorcin a la longitud de onda requerida, y medicin de la absorbancia a diferentes
longitudes de onda.
La cuantificacin se lle$a a cabo mediante el m#todo de calibracin del estndar e!terno, por
integracin del rea de pico o por medida de la altura del mismo. s necesario $erificar la
linealidad de la funcin de calibracin, con una de las soluciones estndar que este dentro
del inter$alo de medida.
l contenido del conser$ador sujeto a anlisis, se calcula de acuerdo a la siguiente
ecuacin Fm#todo del estndar e!ternoG%
A
1
V
1
m
1
A
2
V
2
m
0
F/G
en donde,
A1 X rea del pico de respuesta Fo alturaG del conser$ador en la solucin de anlisis
FmuestraG, e!presada en cuentas de rea o longitud del picoP
A2 X rea del pico de respuesta Fo alturaG del conser$ador en la solucin estndar,
e!presada en cuentas de rea o longitud del picoP
V1 X $olumen total de la solucin de anlisis FmuestraG, e!presada en mLP
V2 X $olumen total de la solucin estndar, e!presada en mLP
m1 X masa del conser$ador contenida en el $olumen V2 Fsolucin estndarG, e!presada en
mgP
m0 X peso de la muestra, e!presada en gP
Los resultados se e!presan en unidades de g@Hg con dos cifras despu#s del punto decimal.
9.1.;./ Aepetibilidad
3eterminar repetibilidad en reas y tiempos de retencin a partir de la inyeccin, por
quintuplicado, de la solucin estndar de +4 mg@L de cada compuesto. La des$iacin
estndar relati$a F3AG o coeficiente de $ariacin F,BG de las reas de picos y tiempos de
retencin para los conser$adores debe ser del +,**D o menor. 3e lo contrario, repetir las
PAG# 44
inyecciones por triplicado 7asta que las reas de picos y tiempos de retencin de las Ctimas
cinco inyecciones sean repetibles. Si el D 3A para las reas de pico y los tiempos de
retencin son mayores a +,** D, re$isar por problemas instrumentales y tomar acciones
correcti$as. l clculo del D 3A se lle$a a cabo de acuerdo al siguiente procedimiento.
%DER
muestra
Media
100
F+G
en donde%
3es$iacin estndar de la muestra X
muestra
XX
( )
2
N1
, F1G
(edia X
X
X
1
+X
2
+X
3
+...+X
N
( )
N
, F5G
y
X X rea de pico o tiempo de retencin del conser$ador, obtenida de cada una de las
inyecciones de la muestra,
N X nCmero de inyecciones de donde se cuantifican las reas de pico o los tiempos de
retencin de los conser$adores en la muestra.
l coeficiente de correlacin para las cur$as de calibracin de los conser$adores es
aceptable si es *,004*. Si este criterio de aceptacin no se obtiene, in$estigar la causa del
problema, corregir y reiniciar el procedimiento de estandari<acin.
,alcular el porcentaje de recuperacin estndar de acuerdo a la ecuacin,
%RecuperacinEstndar
Concentracincalculadadelacurva
ConcentracinTerica
100
. F4G
7.4.1 T.%$1/
I'*()& *& 6/,9/1# M=%/*/ 0/, @+1/,+)(:' 0/%&')(/9=%,()+

9.5.+ -undamento
Baloracin de la acide< de los compuestos formados por la reaccin del formalde7"do con los
alfa)aminocidos, la cual es una apro!imacin de la concentracin de aminocidos libres en
un jugo.
Baso de precipitados de /** mL
PAG# 42
Baso de precipitados de +4* mL
Probeta de 4* mL
Bureta graduada ,lase : de +4 mL
:gitador magn#tico con barra magn#tica de tamao apropiado
pH)metro
lectrodos para pH)metro
Pipeta $olum#trica ,lase : de /* mL
Pipeta graduada ,lase : de /* mL
(atra< $olum#trico ,lase : de +4* mL
Balan<a anal"tica con sensibilidad de t *,/ mg
stufa de laboratorio Fpara secado de materialG
sptulas plana y de cuc7arilla en acero ino!idable
:gua desioni<ada, 2ipo .
Per!ido de 7idrgeno FH+'+G al 1*D
Solucin de 7idr!ido de sodio F&a'HG *,/ &. 3isol$er /,* g de &a'H en agua desioni<ada
y lle$ar la solucin a +4* mL en un matra< aforado del $olumen correspondiente.
Solucin de formalde7"do FH,H'G. :justar una solucin de formalde7"do F14D, m"nimoG a pH
9,/, con la solucin de &a'H *,/ &, utili<ando el pH)metro. ,omprobar el pH de esta
solucin cada 7ora.
9.5.4 Preparacin de la muestra
l jugo de frutas se utili<a tal como se presenta en su en$ase original. Para jugos
concentrados de fruta, 7acer una dilucin /%4.
9.5.8 Procedimiento
9.5.8./ Poner +4 mL de muestra en un $aso de precipitados, neutrali<ar con solucin de
7idr!ido de sodio *,/ & 7asta pH 9,/, utili<ando el medidor de pH.
9.5.8.+ :adir /* mL de la solucin de formalde7"do y me<clar. :l cabo de un minuto,
efectuar la $aloracin potenciom#trica de la solucin problema con la solucin de
7idr!ido de sodio *,/ & 7asta pH 9,/.
9.5.8.1 Si se 7ubieran utili<ado ms de +* mL de la solucin de &a'H, deber reali<arse de
nue$o la $aloracin empleando /4 mL de solucin de formalde7"do, en lugar de /*
mL.
9.5.8.5 Si la muestra contiene di!ido de a<ufre, aadir algunas gotas de agua o!igenada al
1*D antes de la neutrali<acin.
l "ndice de formol de la muestra anali<ada es igual a la cantidad de solucin alcalina
utili<ada en la $aloracin, e!presada en mililitros de la solucin de 7idr!ido de sodio *,/ &
Fcon una cifra decimalG y que corresponden a /** mL de muestra%
PAG# 43
I.F.
V f100
V'
Siendo
V X $olumen de solucin de 7idr!ido de sodio *,/ & empleado en la determinacin
f X concentracin normal F&G de 7idr!ido de sodio empleado
V X $olumen de muestra empleado en la determinacin
l "ndice de formol se e!presa en meq@/** mL
9.5.;./ 'bser$aciones
n jugo de limn diluir con agua desioni<ada F/%4G antes de efectuar la $aloracin
9.5.;.+. Aepetibilidad
l coeficiente de $ariacin entre dos resultados indi$iduales obtenidos con la misma muestra,
bajo las mismas condiciones, no debe e!ceder +D de la media.
7.2.1 T.%$1/
D&%&,9('+)(:' *& 6:-6/,/# M=%/*/ 0/, @+1/,+)(:' 0/%&')(/9=%,()+

9.4.+ -undamento
2ransformacin de los compuestos fosforados en ortofosfatos y posterior $aloracin
espectrofotom#trica en forma de fosfo$anadomolibdatos.
,risol de platino, cuar<o o similar de apro!imadamente 9* mm de dimetro.
Bao de agua y bao de arena.
Horno o mufla el#ctrica.
Balan<a anal"tica con sensibilidad de t *,/ miligramo.
spectrofotmetro o color"metro capa< de efectuar lecturas a 5** nm.
,elda de /* mm de paso de lu< o tubo de $idrio.
Probetas de +4 y 4* mL.
Pipetas graduadas 2ipo : de + y 4 mL.
Baso de precipitados de /*, 4* y /** mL.
(atraces $olum#tricos 2ipo : de 4*, /** y / *** mL.
sptula
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:cido clor7"drico FH,lG 18D, X /,/9 g@mL.
:cido n"trico FH&'1G ;*D, X /,5+ g@mL.
:cido sulfCrico FH+S'5G concentrado 08D, X /,95 g@mL.
:ceite de oli$a
Solucin de molibdato amnico FF&H5G8(o;'+^5H+'G% disol$er +* g de 7eptamolibdato de
amonio tetra7idratado en +** mL de agua caliente.
Solucin de meta$anadato amnico FF&H5GB'1G% disol$er /,* g de meta$anadato amnico en
1** mL de agua destilada caliente, enfriar y aadir /5* mL de cido n"trico.
Solucin de metamolibdo$anadato% $erter lentamente y agitando la solucin de molibdato
amnico sobre la solucin de meta$anadato amnico y aforar con agua destilada a / L.
Solucin patrn de fsforo% disol$er 5,1994 g de fosfato de potasio di7idrogenado FKH+P'5G,
pre$iamente desecado dos 7oras a /*4,, en agua destilada, aadir + mL de cido sulfCrico
concentrado y diluir a / L F/ mL contiene / mg de PG.
9.4.4./ ,alcinacin de la muestra a ceni<as
9.4.4././ Poner un $olumen adecuado de muestra F+4 mLG bien 7omogenei<ado en un
crisol tarado a peso constante.
9.4.4./.+ $aporar a sequedad con precaucin en un bao (ar"a de agua. :adir al
residuo seco unas gotas de aceite de oli$a, calentar lentamente en el bao de arena 7asta
que la mayor parte de la sustancia orgnica est# calcinada. .ntroducir el crisol en la mufla a
4+4,, e incinerar por 8 u 9 7oras 7asta que las ceni<as sean blanco grisceas.
9.4.4./.1 n caso de que la carboni<acin no fuese completa, ya que se pueden obser$ar
pequeos puntos de carbn, 7umedecer las ceni<as con agua destilada, destruirlos con una
$arilla de $idrio, e$aporar de nue$o y $ol$er a calcinar. Aepetir esta operacin tantas $eces
como sea necesario 7asta la obtencin de ceni<as blancas.
9.4.4./.5 nfriar el crisol en un desecador por 1* minutos y pesar.
9.4.4.+ Preparacin de la muestra
9.4.4.+./ 3isol$er las ceni<as obtenidas en el apartado 9.4.4./ en 4 mL de H,l 18D y +
mL de H&'1 ;*D. Her$ir sua$emente durante /4 minutos en bao de arena. nfriar y
tras$asar a un matra< $olum#trico de 4* mL y aforar con agua destilada.
9.4.4.+.+ Aeali<ar paralelamente un ensayo en blanco.
9.4.8 Procedimiento
9.4.8./ ,ur$a de calibracin% diluir /* mL de la solucin patrn de fosfato de potasio
di7idrogenado en +4* mL de agua destilada F/ mL de esta solucin contiene 5* Ig de PG.
2omar *, +, 1, 5, 4 y /* mL de la solucin de 5*Ig@mL Fcon un contenido de *,9*, /+*, /8*,
+** y 5** IgG. ,ontinuar como en el apartado 9.4.8./ y tra<ar la cur$a de calibracin.
PAG# 47
9.4.8.+ 3esarrollo de color% tomar 4 mL de las soluciones obtenidas en el apartado
9.4.4.+ en un matra< $olum#trico de 4* mL. Lle$ar 7asta /* mL con agua destilada. :adir
/* mL de la solucin de meta$anadomolibdato y aforar a 4* mL con agua destilada. 3espu#s
de 1* minutos, leer las absorbancias a 5** nm.
9.4.;./ ,eni<as
l contenido en ceni<as e!presado en g@/** mL $endr dado por la siguiente frmula%
Cenizas (g/100mLmuestra) =
P
2
P
1
( )
100
V
.
n donde%
P1 X peso en gramos del crisol $acio.
P2 X peso en gramos de las ceni<as ms el crisol.
V X $olumen de la muestra en mL.
9.4.;.+ -sforo
l contenido en peso total e!presado en mg de P@/** mL de muestra, se obtiene
comparando las absorbancias de la muestra con la cur$a patrn, teniendo en cuenta el
blanco y el factor de dilucin.
mgdeP/100mL
A
V
en donde%
A X Ig de P le"dos en la cur$a patrn.
V X $olumen de la muestra en mL.
9.4.;.1 Aepetibilidad
La diferencia entre dos resultados indi$iduales obtenidos con la misma muestra para anlisis,
en las mismas condiciones Fanalista, aparato, laboratorioG en un corto inter$alo de tiempo, no
debe e!ceder +D de la media entre ambos resultados.
7.3.1 T.%$1/
D&%&,9('+)(:' *& C)(*/ D-(-/).%,()/. M=%/*/ &';(9C%()/

9.8.+ -undamento
PAG# 48
l cido 3)isoc"trico se separa de los jugos de frutas con cloruro de bario y se determina
en<imaticamente. n presencia de la en<ima isocitrato des7idrogenasa F.,3HG el cido
isoc"trico F3)isocitratoG se descarbo!ila o!idati$amente a cetoglutarato por el fosfato del
dinucletido de la nicotinamida)adenina F&:3PG.
D-isocitrato+NADP
-

ICDH
-cetoglutarato+NADPH+CO
2
+H
+
La cantidad de &:3PH formada en esta reaccin es estequiom#trica en relacin a la
cantidad de 3)isocitrato presente. l incremento de &:3PH se determina por la $ariacin de
la absorbancia a 15* nm.
Bao (ar"a de agua.
spectrofotmetro capa< de efectuar lecturas a 15* nm.
,elda de /* mm de paso de lu<.
Probeta de +4 mL.
Pipetas graduadas ,lase : de 4 y /* mL.
Pipetas graduadas para medidas en<imticas.
Baso de precipitados de /** mL.
(atra< $olum#tricos ,lase : de 4* mL.
2ubos graduados de centr"fuga de /** mL.
Barilla de $idrio.
(atra< rlenmeyer de +4* mL.
Papel filtro &o. de poro /.
Soporte y arillo.
:gua desioni<ada, 2ipo ..
:cetona F,H1,',H1G, pure<a 00,*D.
,arbn acti$ado de /** mallas
Solucin de cido clor7"drico FH,lG 5(% me<clar /+1,; mililitros de H,l 18D F X /,/9 g@mLG
con 4** mL de agua desioni<ada y lle$ar a / L en un matra< $olum#trico del $olumen
correspondiente.
Solucin de 7idr!ido de sodio F&a'HG 5(% disol$er lentamente /8* g de &a'H en 4** mL
de agua desioni<ada, enfriar la solucin y lle$ar a / L en un matra< $olum#trico del $olumen
correspondiente.
Solucin de amoniaco F&H1G al +4D p@p, X *,0/ g@mililitro.
Solucin de cloruro de bario FBa,l+G 1* g@/** mL% disol$er 1* g de Ba,l+^+H+' en agua
desioni<ada y aforar la solucin a /** mL.
Solucin de sulfato de sodio F&a+S'5G ;/ g@litro% disol$er ;/ g de &a+S'5 en agua
desioni<ada y aforar a / L.
Solucin de sulfato de manganeso F(nS'5G *,*;4(% disol$er /+4 miligramos de (nS'5
^H+' en /* mL de agua desioni<ada. La solucin es estable seis meses a temperatura
ambiente.
PAG# 20
Solucin amortiguadora pH ;,*% disol$er +,5+ g de 2ris F7idro!imetilG aminometano y 14 mg
de 32:)&a+^+H+' en 9* mL de agua desioni<ada, acidificar 7asta pH ; con H,l 5( y
aforar 7asta /** mL con agua desioni<ada.
Solucin amortiguadora pH ;,5% disol$er +,5+ g de 2ris F7idro!imetilG aminometano y 14 mg
de 32:)&a+^+H+' en 9* mL de agua desioni<ada, acidificar 7asta pH ;,5 con H,l 5( y
aforar 7asta /** mL con agua desioni<ada. sta solucin es estable por lo menos un ao a
5t/,.
Solucin &:3P% disol$er 4* mg de beta)nicotinamida)adenina)dinucletido fosfato disdico
F)&:3P)&a+G en 4 mL de agua desioni<ada. sta solucin es estable por lo menos cuatro
semanas a 5t/,.
Solucin de la en<ima isocitrato des7idrogenasa F.,3HG /* mg@mL Fequi$alente a +* M@mLG%
disol$er /* mg de la en<ima liofili<ada en un mL de solucin de glicerina F4*D $@$ con agua
desioni<adaG. sta solucin es estable durante cuatro semanas a 5t/,.
9.8.4./ :dicionar a /* mL de jugo de fruta, 4 mL de &a'H 5( en un tubo de centr"fuga
graduado de /** mL y dejar reposar durante /* minutos a temperatura ambiente
Fapro!imadamente, +*t/,G.
9.8.4.+ :dicionar 4 mL de H,l 5( y diluir la solucin 7asta +4 mL. :adir + mL de
solucin de amoniaco, 1 mL de solucin de Ba,l+ y +* mL de acetona.
9.8.4.1 (e<clar perfectamente con una $arilla de $idrio. 3ejar reposar durante /*
minutos y entonces centrifugar 4 minutos a 1 *** re$oluciones por minuto FrpmG.
9.8.4.5 3ecantar cuidadosamente el sobrenadante y adicionar +* mL de solucin de
&aS'5 al precipitado en el tubo de centr"fuga y agitar con la $arilla de $idrio.
9.8.4.4 3isol$er el precipitado en bao (ar"a con agua 7ir$iendo agitando
frecuentemente durante /* minutosP enfriar y transferir cuantitati$amente a un matra< aforado
de 4* mL lle$ando a $olumen con solucin amortiguadora pH;,*.
9.8.4.8 2ransferir el contenido del matra< a otro conteniendo / g de carbn acti$ado,
dejar reposar 4 minutos y filtrar.
9.8.4.; l l"quido filtrado incoloro y transparente se usa para la determinacin del cido
3)isoc"trico en la muestra.
9.8.8 Procedimiento
La determinacin se reali<a a una temperatura apro!imada de +*t/,. La absorcin m!ima
de &:3PH es a 15* nm.
Las pipetas de transferencia Fen<imticasG de graduacin slo se usarn para pipetear los
e!tractos de muestra. Las soluciones de en<ima, coen<ima y amortiguadores pueden ser
aadidas mediante micropipetas automticas. l cuadro siguiente esquemati<a el
procedimiento de me<clado de muestras y blancos anal"ticos.
Pipetear en la celda Blanco (uestra
:mortiguador pH X ;,5
Solucin de (nS'5
*,*;4(
Solucin &:3P
1,** mL
*,/* mL
*,/* mL
)))
+,** mL
*,/* mL
*,/* mL
/,** mL
PAG# 21
Solucin de muestra
(e<clar, esperar 1 minutos y leer las absorbancias F:/G tanto la del blanco como
de la muestra frente a aire Fninguna celda en el paso de lu<G, a una longitud de
onda de 15* nm.
Solucin en<ima F.,3HG *,*/ mL *,*/ mL
(e<clar y esperar a que la reaccin se detenga F5?/* minutosG, leer las
absorbancias F:+G frente a aire a una longitud de onda de 15* nm. ,ontinuar
leyendo las absorbancias a a una longitud de onda de 15* nm a inter$alos de +
minutos 7asta que la lectura se incremente de forma constante. 2omar como :+
el primer $alor de absorbancia a partir del cual se 7an obser$ado incrementos
constantes.

9.8.;./ ,lculos
: partir de la reaccin fundamental para la determinacin, 7ay una relacin lineal entre la
cantidad formada de &:3PH Fy por tanto en la diferencia de absorbanciasG y la
concentracin de cido 3)isoc"trico.
_: X F:+ ? :/Gmuestra ? F:+ ? :/Gblanco F/G
l clculo de la concentracin de cido 3)isoc"trico a partir de medidas de absorbancia esta
basado en la aplicacin de la Ley de Beer. Por tanto, el contenido en mg@L de cido 3)
isoc"trico $endr dado por la e!presin%
C
Disoctrico
(miligramos/litro)
MV
1
F
bV
2
A
. F+G
n donde%
! X Peso molecular del cido 3)isoc"trico F/0+,/ g@molG
V1 X $olumen introducido en la celda, en mL.
V2 X $olumen de la muestra utili<ada para la determinacin, en mL.
X coeficiente de e!tincin del &:3PH a 15* nm F8,1 L^mmol)/.cm)/G.
" X espesor de la celda, en cm.
# X -actor de dilucin de la muestra Fapartado 9.8.4G
Si los datos de la ecuacin F+G se ajustan a los $alores del apartado 9.8.8, la ecuacin queda
igual a%
C
Disoctrico
(mg/L)489,36A
. F1G
Los resultados se e!presan en mg@L de cido 3)isoc"trico sin decimales.
7.7.1 T.%$1/
PAG# 22
D&%&,9('+)(:' *&1 )/'%&'(*/ *& '+,('5('+ &' ?$5/- *& '+,+'?+, 9+'*+,('+ E %/,/'?+

9.;.+ -undamento
l fla$onoide naringina presente de manera caracter"stica en c"tricos como la naranja y la
toronja se e!trae de la muestra de inter#s mediante la adicin de dimetilformamida F3(-G.
Mna al"cuota filtrada del e!tracto es anali<ada por cromatograf"a de l"quidos con deteccin
MB.
9.;.1 quipo y (ateriales
Bao (ar"a de agua.
,romatgrafo de l"quidos de alta resolucin con detector de MB y 7orno para columna.
,olumna ,/9.
Pipetas graduadas ,lase : de /* mL.
(atraces $olum#tricos ,lase : de 4*, /** y /*** mL.
Leringas de 4 mL.
Barilla de $idrio.
-iltro de nylon de *,54 Im con prefiltro de fibra de $idrio.
-iltro de nylon de *,+ Im o en su caso filtros de membrana de acetato de celulosa de la
misma medida.
9.;.5 Aeacti$os y soluciones
:cido ac#tico glacial F,H1,''HG, grado cromatograf"a de l"quidos.
3imetilformamida FH,'&F,H1G+G, grado anal"tico.
'!alato de amonio mono7idratado F,''&H5G+^H+'G, grado anal"tico.
Sorbato de potasio F,H1F,HG5,''KG, pure<a 00,*D.
Ben<oato de sodio F,8H4,''&aG, pure<a 00,*D.
&aringina F,+;H1+'/5G, pure<a 04,*D.
Solucin patrn de naringina 4** Ig@mL F:G% disol$er *,*4 g de naringina en /* mL de
dimetilformamida y lle$ar la solucin a /** mL con fase m$il. La solucin es estable por 1*
d"as a temperatura ambiente.
Solucin patrn de ben<oato de sodio y sorbato de potasio 4** Ig@mL FBG% Pesar *,*4 g de
sorbato de potasio y *,*4 g de ben<oato de sodio, transferir a un matra< $olum#trico de /**
mL y diluir a la marca con fase m$il.
Soluciones de naringina para calibracin% 7acer cinco diluciones F/%4, /%/*, /%+*, /%4* y
/%/**G de la solucin patrn con fase m$il, las cuales tendrn una composicin de /**, 4*,
+4, /* y 4 Ig de naringina@L de solucin. (e<clar /* mL de la solucin patrn F:G y /* mL de
la solucin patrn FBG en un matra< $olum#trico de /** mL y diluir a la marca con fase m$il.
sta solucin proporciona un estndar para $erificar la estabilidad, limpie<a y eficiencia del
sistema cromatogrfico.
PAG# 23
Solucin de o!alato de amonio F,''&H5G+ *,*+4 (% disol$er 1,44 g de o!alato de amonio en
agua desioni<ada y aforar a / *** mL en un matra< $olum#trico del $olumen
correspondiente.
-ase m$il para cromatgrafo de l"quidos% acetonitrilo@agua@cido ac#tico, +**@9**@*.4 $@$@$.
-iltrar a tra$#s de una membrana de *,54 Im antes de usar. F&ota. l cido ac#tico puede
minimi<ar la altura del pico y mejorar la eficiencia de la columna. La cantidad de cido ac#tico
necesaria depende de la columna usada, y su adicin a la fase m$il incrementa la
probabilidad de interferencias por la presencia de ben<oato de sodio y sorbato de potasio
sobre el pico de inter#sG.
9.;.4 Preparacin de la muestra
9.;.4./ l jugo de frutas se debe mantener a temperatura ambiente por toda la noc7e.
l en$ase se debe agitar $igorosamente antes de abrirlo, se abre y se toma de inmediato una
muestra de /* a +* mL. ,entrifugar la muestra a /* *** ! g durante /* minutos y filtrar a
tra$#s de un filtro de membrana de *,+ Im. o en su caso de acetato de celulosa de la misma
medida para remo$er part"culas de la muestra centrifugada.
9.;.4.+ :lternati$amente, si no se dispone de una centr"fuga, me<clar la muestra con
acetonitrilo acuoso F5* [ 8*G en relacin /%/. -iltrar la muestra a tra$#s de un filtro de nylon
de *,54 Im con prefiltro de fibra de $idrio. La adsorcin de fla$onoides por el nylon en
muestras acuosas se e$ita por la presencia del acetonitrilo. &o usar filtros de acetato de
celulosa o membranas polisulfonadas ya que no resisten el acetonitrilo. &o usar filtros con
membranas de PB3- o P2- ya que estos materiales absorben fla$onoides de la muestra,
afectando esto el resultado final.
9.;.4.1 (e<clar /*,* mL de la muestra filtrada con /*,* mL de la solucin de o!alato de
amonio *,*+4 ( en un matra< $olum#trico de 4* mL. :adir /*,* mL de dimetilformamida,
agitar bien y lle$ar la solucin a la marca con agua desioni<ada.
9.;.4.5 2ransferir la solucin a un $aso de precipitados de /** mL, calentar durante /*
minutos a 0*, en un bao de agua, enfriar y filtrar una al"cuota de + mL a tra$#s de una
membrana de nylon de *,54 Im.
9.;.8 Procedimiento
9.;.8./ ,ondiciones instrumentales
,olumna -ase re$ersa ,)/9
2emperatura 1*t*,/,
-ase m$il :cetonitrilo@agua@cido ac#tico,
+**@9**@ *,4 $@$@$.
Belocidad de flujo 3epende de la columna
3eteccin MB a +9* nm si es de longitud
de onda fija, o a +9; nm si es de
longitud de onda $ariable.
PAG# 24
9.;.8.+ Secuencia de ensayo anal"tico
3espu#s del acondicionamiento del sistema, inyectar por duplicado un $olumen conocido F+*
ILG de la muestra preparada. Las reas de los picos deben diferir en +,4D. Aomper la
secuencia de muestras despu#s de cada +* inyecciones, como m!imo, y reinyectar el
estndar de naringina. sta secuencia de ensayo es slo una guia para $erificacin de
confiabilidad de medidas de reas de pico y tiempos de retencin, y se puede modificar como
sea necesario.
9.;.; !presin de resultados
9.;.;./ La e$aluacin se lle$a a cabo de acuerdo al m#todo del estndar e!terno, por
integracin de las reas de los picos tomando en consideracin el tiempo de retencin y la
linealidad de la cur$a de calibracin.
9.;.;.+ Si la respuesta del instrumento no es lineal, es necesaria una calibracin
multipuntos cada $e< que se analice un lote de muestra. Si la respuesta del instrumento es
lineal, la inyeccin duplicada de la solucin patrn de naringina F:G para calibracin ser
suficiente para todos los lotes anali<ados.
9.;.;.1 Si la respuesta del detector es lineal, el factor de respuesta F-AG y la
concentracin F,G de la naringina se calculan como%
FR
naringina
reapromediodenaringina
concentracinestndardenaringina(g/mL)
, F/G
Cdenaringinaenlamuestra
readenaringina ( ) factordedilucin ( )
FR
naringina
. F+G
9.;.;.5 Los resultados se e!presan en Ig de naringina@L.
7.7.1 T.%$1/
D&%&,9('+)(:' *& 0/%+-(/ KLM# M=%/*/ *& &-0&)%,/9&%,.+ *& +>-/,)(:' +%:9()+.

9.9.+ -undamento
l potasio se determina por espectrometr"a de absorcin atmica, pre$ia adicin de cloruro
de cesio, para e$itar la ioni<acin parcial de los metales en la flama.
Balan<a anal"tica con sensibilidad de t *,/ mg
,entr"fuga, 9 *** rpm
2ubos para centr"fuga de +* y 4* mL
PAG# 22
stufa de laboratorio Fpara secado de materialG
sptulas plana y de cuc7arilla en acero ino!idable
(atraces aforados 2ipo : con tapn de $idrio esmerilado de 4* mL y / *** mL
Basos de precipitados de 5** mL
Pipetas graduadas ,lase : de 4 mL
(icropipeta de $olumen $ariable F* a / *** ILG
Parrilla con agitacin magn#tica
spectrmetro de absorcin atmica con aditamento de flama
Lampara de ctodo 7ueco de potasio
stndar certificado de K de / *** mg@L
,loruro de cesio F,s,lG, 6.A.
Solucin de cloruro de cesio, 5* g@L. 3isol$er 5* g de ,s,l en agua desioni<ada y lle$ar la
solucin a / L en un matra< aforado del $olumen correspondiente.
Solucin de blanco anal"tico. Preparar una solucin de *,/ ? *,5 D de ,s,l F*,*4 a *.+* mL
de solucin de ,s,l para un $olumen de aforo de 4* mLG.
Soluciones estndar de potasio. 3e acuerdo al contenido de potasio esperado, preparar
diluciones adecuadas a partir de la solucin estndar certificada y use #stas para
estandari<ar el m#todo. Puede comen<ar a probar con estndares de / a 8 mg@L y acotar
o $ariar de acuerdo a lo obtenido en la muestra de jugo aut#ntico. :dicionar solucin de
,s,l F5* g@LG en la cantidad correspondiente al $olumen de aforo para que quede en un
porcentaje de *,/ ? *,5 D.
9.9.4./ (e<clar bien el producto Fjugo o n#ctarG antes de abrir el en$ase, y tras$asar el
contenido a un recipiente de $idrio o plstico descontaminado. Si la muestra no $a a ser
anali<ada de manera inmediata guardar en el refrigerador Fapro!. 5t/,G, de lo
contrario tomar una cantidad representati$a del jugo o n#ctar a anali<ar.
9.9.4.+ ,entrifugar /* mL de jugo o de n#ctar a $elocidad media F 1 *** rpmG durante
/* min. 2omar *,4 mL del sobrenadante y $ertir a un matra< aforado de 4* mL,
adicionar de *,*4 a *,+* mL de solucin de ,s,l Flo cual proporciona un contenido en
,s,l de *,/ ? *,5DG, y aforar al $olumen con agua desioni<ada.
9.9.4.1 Si el procedimiento de centrifugado no separa totalmente los slidos no
disueltos o la muestra presenta condiciones de alta densidad, se recomienda lle$ar a
cabo un pretratamiento de digestin cida de la misma.
9.9.8 Procedimiento
9.9.8./ ,onsideraciones y sealamientos preliminares
9.9.8././ s particularmente importante que todo el material de $idrio y plstico que se
use este perfectamente limpio y claro.
PAG# 23
9.9.8./.+ 2odos los reacti$os y soluciones deben prepararse con agua desioni<ada.
9.9.8./.1 Para la preparacin de soluciones estndares y de muestras, debern usarse
micropipetas y material de $idrio que brinden e!actitud en la medicin de $olCmenes
pequeos.
9.9.8./.5 ,uando se requiera diluir jugos turbios, se debern tomar muestras de al menos
/ mL.
9.9.8./.4 Se debern anali<ar soluciones estndares apropiadas F/ a 8 mg@LG junto con
cada lote de muestras.
9.9.8./.8 Se deber tener especial cuidado en ajustar la longitud de onda ptima F X ;;*
nmG del espectrmetro de absorcin atmica.
9.9.8./.; s esencial que se use el mismos lote de agua desioni<ada para preparar tanto
las muestras como los estndares.
9.9.8.+ 3escontaminacin del material
9.9.8.+./ n una cubeta de polietileno F$olumen apro!imado de /4 LG introducir /* L de
una me<cla /%/ de H&'1%H+'.
9.9.8.+.+ n este bao descontaminar durante una noc7e todos los matraces aforados,
tapones, recipientes de polietileno o de polipropileno, as" como todo el material de $idrio
necesario. njuagar con agua destilada, y secar.
9.9.8.1 nsayo anal"tico
9.9.8.1./ :justar el espectrofotmetro de acuerdo a las recomendaciones del fabricante
usando un estndar certificado.
Longitud de onda% ;;* nm
-lama aire)acetileno, o!idante
9.9.8.1.+ Preparar una cur$a de calibracin de K, en el inter$alo de / a 8 mg@L.
9.9.8.1.1 Se prepara una solucin de la muestra de acuerdo al apartado 4 y se leen las
muestras por duplicado.
9.9.;./ l contenido de potasio se calcula a partir del $alor obtenido, por comparacin
con la cur$a estndar, teniendo en cuenta la dilucin efectuada.
9.9.;.+ Los resultados se e!presan en miligramos de potasio@/** mililitros de muestra.
9.9.;.1 Aepetibilidad
PAG# 27
l coeficiente de $ariacin de dos resultados indi$iduales obtenidos con la misma muestra
para anlisis, en las mismas condiciones en un corto inter$alo de tiempo, no debe e!ceder el
+D.
7.8.1 T.%$1/
D&%&,9('+)(:' *& -/,>(%/1# M=%/*/ *& ),/9+%/5,+6.+ *& 1.B$(*/-
9.0.+ -undamento
l sorbitol F/,+,1,5,4,8)He!ano7e!ol% ,8H/5'8G contenido en el jugo o n#ctar de frutas es
determinado, luego de un tratamiento m"nimo de la muestra, por cromatograf"a de l"quidos de
alta resolucin F,L:AG en una columna espec"fica para carbo7idratos por elucin isocrtica
usando una me<cla de acetonitrilo%agua como fase m$il y un detector de "ndice de
refraccin.
9.0.1 (ateriales y quipo
Balan<a de precisin con sensibilidad de *,*/ g.
,entr"fuga con capacidad para rotar a 9 *** re$oluciones por minuto FrpmG.
2ubos para centr"fuga de +* y 4* mL.
stufa de laboratorio Fpara secado de materialG.
sptulas plana y de cuc7arilla en acero ino!idable.
(atraces aforados ,lase : con tapn de $idrio esmerilado de /* y /** mL.
Basos de precipitados de /** mL.
Pipetas graduadas ,lase : de 1 y 4 mL.
Parrilla con agitacin magn#tica.
Probetas de +4*, 4** y / *** mL.
Leringas de 4 y /* mL.
(icrojeringa para cromatgrafo de l"quidos para inyeccin manual.
-iltros de membrana de nylon de *,54 micrometros.
:parato de filtracin con membrana para sol$entes.
Bao de agua con agitacin por ultrasonido o similar para degasificacin de sol$entes y fase
m$il.
$aporador rotati$o Frota$aporG con bomba de $ac"o de apoyo.
quipo bsico para reflujo con condensador.
,romatgrafo de l"quidos con detector de "ndice de refraccin.
,olumna para separacin de carbo7idratos Fs"lice con grupos amino unidosG.
Biales de 5 mL para muestras y estndares.
(e<cladora a alta $elocidad.
Papel filtro &o. 5+ y &o. 45.
,artuc7os de e!traccin en fase slida ,/9.
PAG# 27
:gua desioni<ada, grado cromatograf"a de l"quidos.
(etanol F,H1'HG, grado cromatograf"a de l"quidos.
Sorbitol F/,+,1,5,4,8)He!ano7e!ol% ,8H/5'8G, pure<a 00,4D.
-ase m$il para cromatograf"a de l"quidos% acetonitrilo%agua, ;4%+4 F$%$G. (e<clar ;4* mL de
acetonitrilo con +4* mL de agua desioni<ada, filtrar a tra$#s de una membrana de nylon de
*,54 Im y desgasificar durante /4 minutos.
La preparacin de la muestra depende de su presentacin% como jugo o como n#ctar.
9.0.4./ Preparacin de la muestra de jugo de frutas
Se diluyen en proporcin /%4, + mL de jugo con agua desioni<ada, se centrifuga a alta
$elocidad F 9 *** rpmG durante /* minutos y el sobrenadante se filtra a tra$#s de una
membrana de *,54 Im Fse puede utili<ar un acrodisco colocado al final de una jeringa de /*
mLG. l filtrado se recoge directamente en un $ial de muestra. Si el anlisis cromatogrfico no
se lle$a a cabo de inmediato, la muestra en el $ial se puede conser$ar en refrigeracin
F5t/,G 7asta por 59 7oras.
9.0.4.+ Preparacin de la muestra de n#ctar de frutas
9.0.4.+./ !traccin de sorbitol
Se me<clan en proporcin /%5, +* mL de n#ctar con alco7ol et"lico absoluto. La me<cla se
agita $igorosamente a alta $elocidad por + a 1 minutos. La me<cla resultante se refluja con
agitacin por + 7oras, luego de lo cual se filtra bajo presin reducida a tra$#s de un papel
filtro &o. 45. l filtrado y los restos contenidos en el matra< de reflujo se la$an con etanol al
9*D F +** mLG. sta Cltima solucin de la$ado se me<cla con el e!tracto de la primera
filtracin, y se reduce a un $olumen menor de +4 mL mediante un rota$apor. La muestra se
concentra 7asta que el olor a alco7ol desapare<ca completamente. -inalmente, el
concentrado de n#ctar de fruta se reconstituye con +4 mL de agua desioni<ada y se filtra a
tra$#s de un papel filtro &o. 5+.
9.0.4.+.+ Limpie<a del e!tracto
3ebido a que la mayor"a de concentrados de fruta presentan color, es importante limpiar la
muestra de pigmentos pre$io al anlisis cromatogrfico, de otra manera el tiempo de $ida de
la columna cromatogrfica se reducir sensiblemente. Para ello, se lle$a a cabo una limpie<a
del concentrado mediante un cartuc7o de e!traccin en fase slida ,/9 7asta que la solucin
resultante sea traslCcida, preferentemente incolora.
l cartuc7o de e!traccin en fase slida se acondiciona 7umedeci#ndolo con + mL de
acetonitrilo y luego 7aciendo fluir 4 mL de agua desioni<ada, finalmente se 7acen fluir tres
$olCmenes de aire antes de pasar la muestra. 3escartar los primeros + mL de muestra eluida
y colectar los + mL siguientes para anlisis cromatogrfico. -iltrar la solucin colectada a
tra$#s de una membrana de *,54 Im para asegurar que cualquier part"cula sea remo$ida. l
filtrado se recoge directamente en un $ial de muestra. Si el anlisis cromatogrfico no se
PAG# 28
lle$a a cabo de inmediato, la muestra en el $ial se puede conser$ar en refrigeracin F5t/,G
7asta por 59 7oras.
9.0.4.1 Solucin estndar de sorbitol
9.0.4.1./ Preparacin de una solucin patrn% /8 mg@mL
Se prepara una solucin de sorbitol en agua desioni<ada de acuerdo a la concentracin
esperada en la muestra de fruta F 9** a /1 *** ppmG. Pesar /,8** g de sorbitol en un $aso
de precipitados de /** mL y disol$er con 4* mL de agua desioni<ada. 2ransferir
cuantitati$amente la solucin a un matra< aforado de /** mL, agitar perfectamente y lle$ar al
$olumen con agua desioni<ada. sta solucin /, contiene /8 mg de sorbitol por mL de
solucin Fo, equi$alentemente a /8 *** ppmG.
9.0.4.1.+ Preparacin de soluciones estndar de concentracin conocida% 4** a 9 ***
ppm
3iluir la solucion patrn con agua desioni<ada a +*t/, para obtener soluciones estndar
con 4**, / ***, + ***, 5 *** y 9 *** mg@L de sorbitol FppmG.
Msando una pipeta $olum#trica de 4 mL y matraces aforados de /* mL, preparar soluciones
estndar de sorbitol por diluciones sucesi$as de acuerdo a la tabla siguiente%
2odas las soluciones se filtran a tra$#s de una membrana de *,54 Im antes de inyectarlas al
cromatgrafo de l"quidos.
2ra<ar la cur$a de calibracin de la respuesta cromatogrfica Frea del picoG en funcin de la
concentracin de sorbitol Fmg@mLG, de acuerdo al inter$alo definido en la tabla anterior.
9.0.8 Procedimiento
PAG# 30
Solucin
&o.
\sorbitol]
mg@mL
Se usa la
solucin &o.
mL que se
toman
:foro
final
/ /8 ) ) )
+ 9 / 4 /*
1 5 + 4 /*
5 + 1 4 /*
4 / 5 4 /*
8 *,4 4 4 /*
9.0.8./ ,ondiciones instrumentales
,olumna Para anlisis de carbo7idratos
2emperatura 1*t*,/,
-ase m$il :cetonitrilo@agua, ;4%+4 F$@$G
Belocidad de flujo 3e acuerdo a la columna usada
Bolumen de inyeccin 3e acuerdo al inyector del equipo
3eteccin .ndice de refraccin a 1*,
9.0.8.+ Secuencia de ensayo anal"tico
3espu#s del acondicionamiento del sistema cromatogrfico, inyectar +* IL de la muestra
obtenida segCn 9.0.4./ 9.0.4.+.+. Si el cromatograma es consistente con el cromatograma
del estndar, continCe con el resto de muestras.
,ada +* inyecciones de muestra, como m!imo, reinyectar el estndar. sta secuencia de
ensayo es una gu"a para $erificar la confiabilidad en la cuantificacin de reas de pico y
tiempos de retencin.
9.0.8.1 Porcentaje de recuperacin
l porcentaje de recuperacin se obtiene adicionando una muestra de jugo o n#ctar con una
cantidad conocida del estndar y anali<ando dic7a muestra antes y despu#s de la adicin del
estndar. Se recomienda lle$ar a cabo el mismo procedimiento de recuperacin con alguna
de las soluciones estndar de la tabla del punto 9.0.4.1.+.
9.0.; !presin de los resultados
.dentificar el pico de sorbitol en el cromatograma de la muestra mediante el tiempo de
retencin establecido por cromatograf"a del estndar.
La concentracin de sorbitol en la solucin, e!presada en mg@mL, se calcula usando la cur$a
de calibracin 9.0.4.1.+ Fm#todo de calibracin de estndar e!ternoG.
l contenido de sorbitol en muestras de jugo o n#ctar, e!presado en mg de sorbitol por mL
de muestra, es igual a%
C
mg
sorbitol
mL
muestra

_
,

C
observada
mg
sorbitol
mL
solucin

_
,

V
inyectado
(mL
solucin
)
V
muestra
(mL
muestra
)
. F/G
en donde%
Co"ser$ada X concentracin de la solucin inyectada y obtenida de la cur$a de
calibracin, en unidades de mg de sorbitol por mL de solucin.
Vin%ectado X $olumen, en mL, de la solucin inyectada FIL X /*)1 mLG.
Vmuestra X $olumen, en mL, de jugo o n#ctar utili<ado para el anlisis.
PAG# 31
Para e!presar el contenido de sorbitol en unidades de gramos de sorbitol por porcin, el
resultado de la ecuacin F/G debe multiplicarse por el $olumen total, en mL, de la porcin y
di$idirse entre / ***.
9.0.;./ Aepetibilidad
l coeficiente de $ariacin de dos resultados indi$iduales obtenidos con la misma muestra
para anlisis, en las mismas condiciones e!perimentales en un corto inter$alo de tiempo, no
debe e!ceder el +D.
7.10.1 T.%$1/
D&%&,9('+)(:' *& +;<)+,&-# F,$)%/-+, G1$)/-+ E S+)+,/-+
9./*.+ -undamento
Los a<Ccares se separan por cromatograf"a de l"quidos de alta resolucin F,L:AG con elucin
isocrtica y se detectan con un detector de "ndice de refraccin. La columna est basada en
una fase estacionaria de s"lice con grupos amino unidos. l m#todo requiere, por lo general,
una m"nima preparacin de la muestra, y el cromatograma e!7ibe picos simples para cada
carbo7idrato.
9./*.1 quipo y (ateriales
l material de $idrio que se requiera para la preparacin de soluciones, contenedores de
fases m$iles y $iales para muestras.
,olumna para separacin de carbo7idratos Fs"lice con grupos amino unidosG.
,romatgrafo de l"quidos con detector de "ndice de refraccin y 7orno de columna.
9./*.5 Aeacti$os y soluciones
:cetonitrilo F,H1,&G , grado cromatogrfico.
stndares de fructosa, glucosa y sacarosa en certificado de pure<a
-ase m$il para cromatograf"a de l"quidos% acetonitrilo@agua, ;4%+4, $@$% me<clar ;4* mL de
acetonitrilo con +4* mL de agua desioni<ada. -iltrar a tra$#s de una membrana de nylon de
*,54 Im y desgasificar.
9./*.4 Preparacin de la muestra
s recomendable limpiar la muestra antes de anali<arla a fin de garanti<ar un mayor tiempo
de $ida de la columna cromatogrfica. Se debern tomar cuidados para remo$er l"pidos
Felucin a tra$#s de cartuc7os Sep)PaH ,/9, o equi$alenteG y contaminantes inicos Felucin
a tra$#s de resina inica :mberlite (B1, 3oè! :6)=9, o equi$alenteG de la muestra antes
de inyectarse a la columna.
PAG# 32
9./*.4./ (uestras de jugo y de n#ctar de frutas
9./*.4././ 3os mL de jugo o n#ctar se diluyen con agua desioni<ada F/%4G, se centrifugan
a apro!imadamente / 5** ! g durante /4 minutos y el sobrenadante se filtra a tra$#s de una
membrana de *,54 Im.
9./*.4./.+ La solucin se transfiere a un $ial de $olumen adecuado.
9./*.4./.1 Si la muestra no se anali<a inmediatamente, se puede conser$ar en
refrigeracin a 5t/, 7asta por 59 7oras.
9./*.4.+ Preparacin de estndares
9./*.4.+./ Soluciones estndares de fructosa, glucosa y sacarosa.
9./*.4.+././ Solucin estndar de fructosa /,* g@/** mL.
n un matra< aforado de /** mL, disol$er /,* g de fructosa con 4* mL de agua desioni<ada
y aforar a la marca con acetonitrilo. (e<clar bien.
9./*.4.+./.+ Soluciones estndar de fructosa de concentracin conocida
Msando una pipeta $olum#trica de 4 mL y matraces $olum#tricos de /* mL, preparar
soluciones estndar de fructosa por diluciones sucesi$as de acuerdo a la tabla siguiente%
Solucin
&o.
\fructosa]
mg@mL
Se usa la
solucin
mL que
se
toman
:foro
total
/ /* ) ) )
+ 4 / 4 /*
1 +,4 + 4 /*
5 /,+4 1 4 /*
4 *,8+4 5 4 /*
2odas las soluciones se filtran a tra$#s de una membrana de *,54 Im antes de inyectarla al
cromatgrafo de l"quidos. Los estndares deben prepararse frescos con cada corrida.
9./*.4.+./.1 Los estndares de glucosa y sacarosa se preparan de manera similar.
9./*.4.+.+ (e<cla de estndares de fructosa, glucosa y sacarosa
Preparar una me<cla de estndares de fructosa, glucosa y sacarosa, preparada como sigue%
pesar /,* g de fructosa, /,* g de glucosa y /,* g de sacarosa y poner en un matra<
$olum#trico de /** mL. 3isol$er la me<cla de a<Ccares con 4* mL de agua desioni<ada y
aforar a la marca con acetonitrilo.
9./*.8 Procedimiento
PAG# 33
9./*.8./ ,ondiciones instrumentales
,olumna Para anlisis de carbo7idratos
Fs"lice con grupos amino unidosG
2emperatura 1*t*,/,
-ase m$il acetonitrilo%agua, en relacin ;4%+4
Bolumen de inyeccin 3epende del instrumento usado
3eteccin .ndice de refraccin a 1*,
'rden de elucin 3epende de la columna usada
9./*.8.+ Secuencia de ensayo anal"tico
9./*.8.+./ 2ra<ar las cur$as de calibracin para fructosa, glucosa y sacarosa a partir de
las soluciones estndar preparadas de acuerdo al apartado 9./*.4.+./.
9./*.8.+.+ La separacin se debe optimi<ar primero usando la me<cla de a<Ccares del
apartado 9./*.4.+.+.
9./*.8.+.1 3espu#s del acondicionamiento del sistema, inyectar las muestras. Aeinyecte el
estndar despu#s de un m!imo de +* inyecciones de muestra. sta secuencia de ensayo
es una gu"a para $erificacin de confiabilidad de medidas de reas de pico y tiempos de
retencin, y se puede modificar como sea necesario.
9./*.8.+.5 2omar en cuenta que conforme se incrementa el contenido de acetonitrilo en la
fase m$il se mejora la resolucin de los a<Ccares, pero tambi#n se incrementa el tiempo de
anlisis. Mn incremento en el contenido de agua mejora la solubilidad de los a<Ccares, pero
origina una disminucin en la resolucin. Para anlisis de a<Ccares, el contenido adecuado
de acetonitrilo debe ubicarse entre 8* y ;4D. l tiempo de retencin de los a<Ccares puede
disminuir al usar columnas e!tendidas Fp.ej. +4* mmG, pero un incremento de acetonitrilo
puede permitir un ajuste en la retencin a los tiempos apropiados.
9./*.8.+.5 3ependiendo de la columna usada, la $elocidad de flujo se debe ajusta entre /
y /,4 mL@min, a fin de minimi<ar el tiempo de anlisis, tomando precauciones de no
sobrepasar el l"mite de presin de operacin de la columna.
9./*.8.1 Procedimiento de Limpie<a de la ,olumna y del Sistema
9./*.8.1./ Limpiar la columna por al menos /4 min con acetonitrilo%agua en relacin /*%0*,
continuar otros /4 min con acetonitrilo%agua en relacin 4*%4*, y finali<ar con /4 min ms
usando acetonitrilo al /**D. 6uardar la columna en acetonitrilo al /**D.
9./*.8.1.+ La celda del detector de "ndice de refraccin se debe la$ar escrupulosamente
despu#s de su uso, a fin de e$itar que queden residuos de a<Ccares que pueden daar
irre$ersiblemente la celda. Mse abundante flujo de agua y refi#rase a las instrucciones del
fabricante.
PAG# 34
9./*.; !presin de resultados
9./*.;./ La identificacin de los a<Ccares sujetos de anlisis se lle$ar a cabo por
comparacin de los tiempos de retencin respecti$os, con aquellos pre$iamente establecidos
para los estndares.
9./*.;.+ La cuantificacin se lle$a a cabo por el m#todo del estndar e!terno, por
integracin del rea de pico o por medida de la altura del mismo. s necesario $erificar la
linealidad de la funcin de calibracin, con las soluciones estndar de cada a<Ccar del
m#todo.
7.11.1 T.%$1/
D&%&,9('+)(:' *& C)(*/ D-9C1()/

9.//.+ -undamento
Mna muestra de jugo se inyecta en una columna de l"quidos de fase re$ersa. Los cidos L) y
3)mlico, que son cidos )7idro!i enantiom#ricos, se pueden separar eficientemente por
intercambio de ligando mediante una fase m$il quiral que consiste de un complejo de ,u F..G
y el aminocido L)$alina. 3espu#s de la separacin cromatogrfica, el cido 3)mlico es
detectado por un detector MB a 11* nanmetros, y cuantificado mediante el m#todo de
estndar e!terno.
9.//.1 quipo y (ateriales
,romatgrafo de l"quidos de alta resolucin con detector MB)B.S a 11* nm y 7orno para
columna.
,olumna de l"quidos de fase re$ersa tipo PLAP)S.
PH)metro.
lectrodos para medir pH.
,entr"fuga F / *** rpmG
,artuc7os para e!traccin en fase slida ,/9.
Basos de precipitados de / *** mL.
(atrace $olum#tricos ,lase : de /** y / *** mL.
-iltro de membrana de nylon de *,54 Im.
sptula.
Bidrio de reloj.
Biales de 5 mL.
9.//.5 Aeacti$os y soluciones
PAG# 32
Solucin de 7idr!ido de sodio F&a'HG / (% disol$er 5* g de &a'H en 4** mL de agua
desioni<ada en un matra< $olum#trico de / *** mL y lle$ar con agua desioni<ada.
L)$alina F,4H//&'+G, pure<a 00,4 D.
:cetato de cobre F..G mono7idratado FF,H1,''G+,u^H+'G, 00,4 D.
:cidos 3) y L)mlico F,5H8'4G, 00 D
Soluciones estndar de cido 3L)mlico% Preparar soluciones estndar con *, /*, +4, 4*, /**
y +** mg de cido 3L)mlico@/** mL de solucin.
-ase m$il para cromatogrf"a de l"quidos% L)$alina /8 m( F/,9; gramos@litroG y acetato de
cobre F..G 9 m( F/,8* gramos@litroG ajustada a pH 4,4 con solucin / & de &a'H. 3isol$er
completamente el acetato de cobre F..G en agua antes de aadir la L)$alina. 3espu#s de
disol$er completamente todos los reacti$os, ajustar el pH a 4,4 y filtrar la fase m$il a tra$#s
de una membrana de *,54 micrometros.
9.//.4 Preparacin de la muestra
Los jugo de man<ana y de u$a se filtran a tra$#s de membranas de *,54 Im sin mayor
tratamiento, pero el jugo de pia se centrifugan a + *** ! g durante /* minutos pre$io a la
filtracin. Las muestras filtradas se inyectan directamente al cromatgrafo de l"quidos.
9.//.8 Procedimiento
corridas del estndar, una para el acondicionamiento del equipo y la segunda para
determinar el tiempo de retencin y factor de respuesta del cido 3)mlico.
9.//.8./ ,ondiciones instrumentales
,olumna -ase re$ersa tipo PLAP)S o
equi$alente
2emperatura de columna 1*t*,/,
3eteccin MB)B.S a 11* nm.
-ase m$il L)$alina /8 m( [ acetato de cobre F..G
9 m( en &a'H /(, ajustada a pH 4,4
9.//.8.+ stabili<acin de la columna cromatogrfica
quilibrar la columna con la fase m$il de +* a 1* minutos antes de su uso.
9.//.8.1 :condicionamiento del sistema
Preparar una cur$a de calibracin tra<ando el rea del pico de absorbancia del cido 3)
mlico en funcin del contenido de cido 3)mlico en las soluciones estndar. ,alcular el
factor de correlacin lineal F-,LG usando un anlisis de m"nimos cuadrados. Si el -,L es
Q*,004, re$isar el procedimiento de dilucin de la solucin estndar y los clculos
PAG# 33
correspondientes, y entonces $ol$er a reinyectar las soluciones estndar a fin de preparar
una nue$a cur$a de calibracin.
9.//.8.5 Secuencia de ensayo anal"tico
.nyectar /* IL de la solucin de muestra y determinar la concentracin de cido 3)mlico a
partir de la cur$a de calibracin. fectuar el anlisis por duplicado.
9.//.; !presin de resultados
9.//.;./ .dentificacin y determinacin semicuantitati$a.
Las reas y tiempos de retencin del pico del cido 3)mlico en la muestra, se comparan a
los datos cromatogrficos de la solucin estndar.
9.//.;.+ $aluacin.
: partir de la cur$a de calibracin, reportando la concentracin como el promedio del anlisis
por duplicado. Para este propsito, la des$iacin estndar relati$a F3AG o coeficiente de
$ariacin F,BG de las reas de picos y tiempos de retencin debe ser del +.**D o menor.
7.12.1 T.%$1/
P&,6(1 *& /1(5/-+)C,(*/-# M=%/*/ *& ),/9+%/5,+6.+ *& 5+-&-
9./+.+ -undamento
l m#todo se basa en comparar los cromatogramas de la muestra con los cromatogramas de
muestras aut#nticas de la fruta anali<ada que 7an sido adulteradas intencionalmente con
a<Ccares in$ertidos y con jarabes de alta fructosa. Se usan picos cromatogrficos espec"ficos
de cada endul<ante Fperfil de oligosacridosG como tra<adores para detectar adulteracin en
las muestras de jugo anali<adas. l m#todo in$olucra la dilucin de la muestra, su
deri$ati<acin con reacti$o 2ri)Sil > y su anlisis por cromatograf"a de gases usando una
columna capilar 3B)4.
9./+.1 quipo y (ateriales
l material de $idrio que se requiera para la preparacin de soluciones.
Biales para muestras F/+!1+ mmG.
Aefractmetro para grados Bri!.
,romatgrafo de gases con detector de ioni<acin de flama.
,olumna cromatogrfica% capilar 3B)4, *,+4 mm ! 1* m, o equi$alente.
Leringa cromatogrfica de 4 IL.
Bao de agua con control de temperatura.
(icropipeta automtica F/** y 4** ILG.
PAG# 37
9./+.5 Aeacti$os
Aeacti$o para deri$ati<ar disponible comercialmente% me<cla /%5 de trimetilsilano)imidasol en
piridina, F2ri)Sil >%Pierce ,7emical ,o.G.
Larabe de a<Ccar in$ertido clarificado.
Larabe de alta fructosa.
9./+.4 Preparacin de la muestra
9./+.4./ 3iluir la cantidad de jugo necesaria para preparar /** IL de solucin a 4,4Bri!.
9./+.4.+ 2ransferir la solucin a un $ial de $idrio de /+ ! 1+ mm.
9./+.4.1 :adir al $ial *,4 mL de reacti$o 2ri)Sil > para deri$ati<ar los carbo7idratos.
9./+.4.5 ,alentar la solucin resultante a ;*, durante 1* minutos.
9./+.4.4 nfriar a temperatura ambiente.
9./+.4.8 (uestras aut#nticas de jugo de fruta se preparan de manera similar.
9./+.4.; (uestras aut#nticas de jugo de fruta se adulteran de manera intencional
aadiendo /*D de endul<ante, y se tratan de manera similar.
9./+.8 Procedimiento
Las muestras preparadas F9./+.4G se deben anali<ar dentro de las +5 7 siguientes a la
preparacin, bajo las siguientes condiciones cromatogrficas propuestas.
6as de arrastre% 7idrgeno F/** HPa a la $l$ula de entrada del cromatgrafoG.
Belocidad de flujo% 1* mL@min.
Bolumen de inyeccin% /,4 mL.
2iempo de $enteo FsplitlessG% /+* segundos.
2emperatura de inyector% +4*,.
,olumna% capilar 3B)4 F4D difenilo@04Ddimetilsilo!anoG, *,+4 mm ! 1* m y *,+4 Im de
espesor de pel"cula l"quida.
2emperatura de columna% programada
.sot#rmica a +/*, por /* minutos
Aampa de +/*, a +59, a /,@min
.sot#rmica a +59, por / minuto
Aampa de +59, a +04, a +*,@min
.sot#rmica a +04, por /4 minuto
3etector% ioni<acin de flama.
2emperatura del detector% 1**,.
-lujo de 7idrgeno al detector% 1* mL@min.
-lujo de aire al detector% 1** mL@min.
2iempo de anlisis% 8* minutos Fbajo las condiciones propuestasG.
9./+.; !presin de resultados
PAG# 37
9./+.;./ ,alcular los tiempos de retencin y alturas de los picos tra<adores de cada uno
de los endul<antes aadidos a las muestras aut#nticas de jugo de fruta.
9./+.;.+ :nali<ar los cromatogramas de las muestras de jugo para $erificar la ausencia o
presencia de picos marcadores de oligosacridos de los endul<antes.
9./+.;.1 La presencia de picos tra<adores de oligosacridos en la muestra de jugo
anali<ada, es e$idencia suficiente para declarar la muestra como jugo de fruta adulterado.
9./+.;.5 Los tiempos de retencin de los picos tra<adores de oligosacridos, espec"ficos
para cada endul<ante, permiten identificar el endul<ante aadido al jugo de fruta.
9./+.;.4 l l"mite de deteccin para cada uno de los endul<antes mencionados es 4D.
7.13.1 T.%$1/
D&%&,9('+)(:' *& 0&)%('+ -/1$>1& &' +5$+

9./1.+ -undamento
Las sustancias pecticas se precipitan juntas con alco7ol. l residuo total sir$e para
determinar las pectinas totales, o bien las pectinas solubles en agua despu#s de la
e!traccin apropiada. La adicin de carba<ol y cido sulfCrico al e!tracto producen una
coloracin roja cuya intensidad se mide espectrofotom#tricamente.
9./1.1 quipo y (ateriales
spectrofotmetro para medir absorbancia en la regin $isible
Bao de agua de temperatura constante
,eldas de $idrio o plstico de /* mm de paso de lu<
,entrifuga Fapro!. 1 *** rpmP apro! + *** ! gG
2ubos graduados para centr"guga de fondo cnico de 4* mL
Barilla de $idrio para agitacin
:gitador magn#tico con barra magn#tica apropiada
+ tubos de ensayo F+*!+** mmG
6radilla para bao de agua
Bureta graduada ,lase : de 4* mL
3esecador para $ac"o
mbudos para filtracin de 8,4 cm de dimetro
Papel filtro &o. poro +
+ probetas de +4 mL
Baso de precipitados de /** mL
(atraces $olum#tricos ,lase : de /** y / *** mL
Bidrio de reloj de 84 mm de dimetro
sptula
8 pipetas graduadas ,lase : de / mL
stufa de secado al $ac"o
Bomba de $ac"o
PAG# 38
:gitador $orte!
9./1.5 Aeacti$os y soluciones
:lco7ol et"lico F,+H4'HG, grado espectro al 08D F$@$G
:lco7ol et"lico F,+H4'HG al 81D% se me<clan /** mL de agua desioni<ada con +** mL. de
alco7ol et"lico al 08D.
Solucin de 7idr!ido de sodio F&a'HG /,* (% se disuel$en poco a poco 5* g de &a'H en
4** mL de agua desioni<ada contenida en un matra< $olum#trico de / *** mL y se afora a la
marca con agua desioni<ada.
:cido sulfCrico concentrado FH+S'5G, 04)0;D Berificar que con el blanco anal"tico que no d#
color rosado con la solucin de carba<ol.
Solucin alco7lica de carba<ol al *,/D% se disuel$e *,/ g de carba<ol en alco7ol et"lico al
04D y se lle$a a /** mL. Blanco anal"tico% se prepara me<clando / mL de agua desioni<ada
[ *,4 mL de solucin alco7lica de carba<ol [ 8 mL de cido sulfCrico concentrado.
:cido galacturnico mono7idratado Fsu pure<a se controla por titulacin de *,4 g con &a'H /
( a pH 9. Peso molecular terico X +/+ g@molG.
9./1.4 Preparacin de la muestra
Las muestras de jugo no requieren pretratamiento
9./1.8 Procedimiento
9./1.8./ Precipitacin de las sustancias pectinicas.
La cantidad de muestra a usar depende del contenido de pectina esperado. Sin embargo, por
lo general se ponen 5 g de concentrado con /+ mL de agua desioni<ada o /4 mL de jugo en
un tubo de centr"fuga graduado de 4* mL con fondo cnico, ajustando el $olumen a 5* mL
con alco7ol et"lico caliente F04D, ;4t/,G y calentando por /* minutos en un bao de agua a
94t/,, agitando ocasionalmente con una $arilla de $idrio. La $arilla de $idrio se enjuaga con
alco7ol et"lico F04DG y el $olumen de la me<cla se lle$a a 4* mililitros con alco7ol et"lico
F04DG. l tubo con la me<cla se centrifuga por /4 minutos a apro!imadamente 1 *** rpm, y
despu#s de decantar el sobrenadante se desec7a. l precipitado se la$a con alco7ol F81DG
por /* minutos en un bao de agua a 94t/,, se centrifuga de nue$o en las mismas
condiciones y el sobrenadante se $uel$e a desec7ar.
9./1.8.+ !traccin de las sustancias pectinicas solubles en agua.
Se adiciona / mL de agua desioni<ada al tubo de centrifuga con el precipitado, y la me<cla
se agita $igorosamente en un agitador $orte!. Se aade agua desioni<ada 7asta un $olumen
de 14 mL y se agita nue$amente en un agitador $orte!, la me<cla se centrifuga por /4
minutos a apro!imadamente 1 *** rpm y el l"quido sobrenadante se decanta en un matra<
$olum#trico de /** mL. Aepetir el procedimiento de e!traccin con agua y el segundo
sobrenadante se aada al mismo matra< $olum#trico. Se aaden entonces 4 mL de solucin
de &a'H F/ (G y se lle$a el $olumen a la marca con agua desioni<ada.
PAG# 70
9./1.8.1 3eterminacin colorim#trica
Se pone / mL de e!tracto en cada uno de dos tubos de ensayo largos F+4!+** mmG, uno
como muestra y el otro como blanco. :l tubo de muestra se aaden *,4 mL de la solucin
alco7olica de carba<ol F*,/DG, y al tubo del blanco se aaden *,4 mL de alco7ol F04DG. n el
tubo de muestra flocula un precipitado blanco. : cada tubo se aaden 8 mL de cido
sulfCrico concentrado con agitacin continua. Para este propsito se recomienda usar una
bureta, de tal manera que los 8 mL de cido se $iertan en un lapso de ; segundos, lo cual
garanti<a que la temperatura alcance una temperatura de 94t/,. l tubo de muestra es
inmediatamente sumergido en un bao de agua a 94t/, por 4 minutos. l tubo de muestra
se retira del bao de agua, se le deja enfriar por /4 minutos a temperatura ambiente, y se
mide inmediatamente la absorbancia a 4+4 nm frente al blanco anal"tico.
: fin de eliminar posibles errores asociados con la solucin de carba<ol, el blanco anal"tico
debe ser tratado de la misma manera. Para ello, se preparan cuatro soluciones midiendo una
contra otra de la forma siguiente%
aG / mL de e!tracto [ *,4 mL de solucin de carba<ol [ 8 mL de H+S'5
bG / mL de e!tracto [ *,4 mL de alco7ol [ 8 mL de H+S'5
cG / mL de agua [ *,4 mL de solucin de carba<ol [ 8 mL de H+S'5
dG / mL de agua [ *,4 mL de alco7ol [ 8 mL de H+S'5
la absorbancia de la solucin FaG es medido frente a la de la solucin FbG \_:/ X &] y la
absorbancia de la solucin FcG frente a la de la solucin FdG \_:+ X %]. La diferencia & ? % se
e$alua a partir de la cur$a de calibracin.
9./1.8.5 ,alibracin
Se pesan /+*,4 mg de cido galacturnico mono7idratado Fsecado por 4 7oras a presin
reducida F4 a +* mmHgG a t 1*, o a t +*, sobre P+'4G y se transfieren a un matr<
$olum#trico de / L. Se aaden *,4 mL de &a'H F/ (G y se afora a la marca con agua
desioni<ada. (e<clar bien y dejar reposar la solucin toda la noc7e. sta solucin estndar
contiene /** Ig de cido galacturnico an7idro F:6G por mililitro. : partir de esta solucin se
toman al"cuotas de /* a ;* mL que se aforan a /** mL con agua desioni<ada. Las
soluciones resultantes contienen de /* a ;* Ig :6@mLP la cur$a de calibracin se prepara a
partir de estas soluciones estndar de acuerdo a las instrucciones del apartado anterior.
9./1.8.4 'bser$aciones
l tiempo de adicin de cido sulfCrico concentrado es muy cr"tico. Si los 8 mL se aaden en
; segundos la temperatura de la solucin alcan<ar los 94t/,, la cual se mantendr
sumergiendo de inmediato el tubo correspondiente en el bao de agua a 94t/,. 3e lo
contrario, la intensidad de color $ariar y las lecturas sern incorrectas.
9./1.; !presin de resultados
l contenido de :6 se puede calcular a partir de las cantidades en Ig de :6 por / mL de
e!tracto obtenidas de la cur$a de calibracin.
PAG# 71
en jugo%
mgAG/litro
gAG100
15
F/G
en concentrado%
mgAG/kg
gAG100
4
F+G
Siendo
'g A( X cantidad de :6 del e!tracto obtenida a partir de la cur$a de calibracin
/4 o 5 X $olumen de jugo o masa de concentrado usado para el anlisis
l contenido de pectina es e!presado en mg de :6 por litro Fmg@LG o en mg de :6 por
Hilogramo Fmg@HgG sin decimales.
7.14.1 T.%$1/
D&%&,9('+)(:' *& 0,/1('+

9./5.+ -undamento
La prolina forma un complejo coloreado con nin7idrina. l complejo es e!traido con acetato
de n)butilo y la intensidad de color medida espectrofotom#tricamente. l m!imo de
absorcin es a 4*0 nm.
spectrofotmetro para medir absorbancia en la regin $isible
Bao de agua
,eldas de $idrio o plstico de /* mm de paso de lu<
2ubos de ensayo de +4 mL con agitador
mbudos para filtracin de 8,4 cm de dimetro
Papel filtro 7idrofbico F/+,4 cm de dimetro% p.ej. (ac7erey)&agel 8/; à /@5 * a7atman
&o / para separacin de fasesG
,ronmetro de laboratorio
Pipetas graduadas ,lase : de /, 4 y /* mL
sptula de cuc7arilla de acero ino!idable
9./5.5 Aeacti$os y soluciones
&in7idrina F,0H8'5G, pure<a 09,*D.
:cetato de n)butilo F,H1,''F,H+G1,H1G, pure<a 00,;D.
:cido frmico FH,''HG, pure<a 08D.
Sulfato de sodio an7idro F&a+S'5G, pure<a 00D.
L)prolina F,4H0&'+G, pure<a 00,*D.
PAG# 72
Solucin estndar de L)prolina /** mg@L.
Solucin de nin7idrina 1 g@/** mL de #ter monometil etilenglicol.
Las muestras de jugo con un contenido de prolina mayor o igual 4* mg@L se debern diluir
como sigue%
4* a 500 mg@L diluir / [ 0
4** a / *** mg@L diluir / [ /0
Productos muy coloreados Fcomo jugo de man<ana y de u$aG con menos de 4* mg de
prolina@litro se debern diluir / [ / o bien / [ 5, de acuerdo a su intensidad de color.
9./5.8./ (edida del coeficiente de e!tincin FG
Partiendo de una solucin patrn de prolina F/** mg@LG, preparar soluciones diluidas de
prolina de concentracin conocida% C) X 4, /*, +4, 5* y 4* mg@L.
Porciones de / mL de las soluciones anteriores son tratadas de acuerdo al procedimiento
descrito en el apartado 9./5.8.+.
(edir la absorbancia F:G de cada solucin estndar y tra<ar una grfica de : en funcin de la
concentracin de prolina, C). La grfica ser una l"nea recta que pasa por el origen, y cuya
pendiente ser igual al coeficiente de e!tincin FG para una celda de / cm de espesor%
: X ^ b ^ ,S F/G
Siendo
: X absorbancia medida FadimensionalG
X coeficiente de e!tincin en L@mg^cm
b X espesor de la celda de medida, /,* cm
C) X concentracin de la solucin estndar medida, en mg de prolina@litro
La linealidad de la grfica y la constancia del $alor de deber confirmarse, o en su caso
ree$aluarse, con cada lote de muestras.
9./5.8.+ 3eterminacin de prolina.
Se $ierte / mL de solucin de jugo en un tubo de ensayo y se aaden / mL de cido frmico
y + mL de solucin de nin7idrina, agitando bien la me<cla despu#s de cada adicin. l tubo
de ensayo con la muestra se introduce en un bao de agua en ebullicin cuyo ni$el de agua
est# por encima del ni$el de l"quido en el tubo de ensayo. Berificar que el agua del bao se
mantenga siempre en ebullicin. (antener el tubo con la muestra en el bao de agua por /4
minutos, y luego enfr"ar el tubo por 4 a /* minutos a temperatura ambiente F+*t/,G.
PAG# 73
:dicionar al tubo /* mL de acetato de n)butilo e insertar el agitador, agitar $igorosamente
7asta que el color 7aya sido e!tra"do 7acia la fase orgnica.
La solucin completa se $ierte sobre un papel filtro 7idrofbico doblado al cual se le 7a
puesto pre$iamente el contenido de una esptula de sulfato de sodio an7idro. La fase
orgnica coloreada se filtra, mientras que la fase acuosa es retenida. Pasados unos /4
minutos de la filtracin, se mide la absorbancia de la fase orgnica en una celda de /,* cm a
una longitud de onda de 4*0 nm frente a un blanco anal"tico preparado de la misma forma
que la muestra, slo que en lugar de usar solucin de ninidrina se usa el mismo $olumen de
#ter monometil etilenglicol.
l contenido de prolina se calcula de acuerdo a la ecuacin / e!presada como%
Prolinaenmg/litro
A
muestra
A
blanco
( )
b
F+G
Siendo
Amuestra X absorbancia de la muestra
A"lanco X absorbancia del blanco anal"tico
X coeficiente de e!tincin FL@mg^cmG determinado en 9./5.8./
" X espesor de la celda F/,* cmG usada para todas las medidas de absorbancia
9./5.;./ 'bser$aciones
9./5.;././ ,ualquier dilucin de la muestra original deber considerarse en el clculo.
9./5.;./.+ Los tubos de ensayo con agitador deben tener un espesor de pared similar.
9./5.;./.1 l bao de agua en ebullicin no puede ser reempla<ado por otra fuete de calor
Fp.ej., un termoposoG.
9./5.;./.5 Si se utili<a suficiente cantidad de sulfato de sodio an7idro F+ a 1 gG, se puede
utili<ar un papel filtro normal F&o. + o &o.5G en lugar del 7idrofbico.
7.12.1 T.%$1/
D&%&,9('+)(:' *& 0$10+ )&'%,(6$5+>1&

9./4.+ -undamento
La muestra para anali<ar se centrifuga y el contenido de pulpa se determina como porcentaje
del $olumen de n#ctar.
PAG# 74
,entrifuga con control de $elocidad.
2ubos de centrifuga con base cnica de /* mL con grauacin en *,/ mL.
9./4.5 Aeacti$os
:gua desioni<ada, 2ipo ..
l jugo de frutas se utili<a tal como se presenta en su en$ase original, o como cencentrado
diluido /%4 con agua desioni<ada.
Se $ierten /* mL de jugo en un tubo de centrifuga y se centrifuga a 1;* ! g durante /*
minutos.
9./4.;./ ,lculo
La pulpa centrifugada puede depositarse en el tubo de manera desigual. Por tanto, se miden
el punto ms alto y el punto ms bajo de la pulpa en cada tubo, se registra el $alor medio y
se calcula el $olumen de pulpa en porcentaje.
9./4.;.+ !presin del resultado
l resultado se e!presa en porcentaje del jugo por $olumen, con una sola cifra decimal.
9./4.;.1 Belocidad de rotacin
Para calcular las gra$edades desarrolladas por una centr"fuga con escala en re$oluciones
por minuto FrpmG debe usarse la siguiente ecuacin%
g X radio de rotacin FcmG ! rpm
+
! /,//9!/*
)4
F/G
de la cual
rpm
g
radio1,1110
5
F+G
donde el radio de rotacin es la distancia del centro del eje al centro del tubo o base.
7.13.1 T.%$1/
PAG# 72
J$5/- *& F,$%+-N D&%&,9('+)(:' *& 1+ ,&1+)(:' I-/%:0()+ *& C+,>/'/ K
13
CO
12
CM &' 1/-
+;<)+,&- *(-$&1%/- E &' 1+ 0$10+ 0,/@&'(&'%& *& J$5/- N E-0&)%,/9&%,.+ *& M+-+- *&
I-:%/0/- E-%+>1&-
9./8.+ 'bjeti$o y campo de aplicacin.
sta metodolog"a es aplicable a los diferentes tipos de jugos para la cuantificacin de a<Ccar
de caa o jarabe de ma"< con alto contenido de fructosa me<clado con a<Ccares
pro$enientes frutas pro$enientes de frutos maduros de la $ariedad correspondiente o
preparados a partir de concentrados o en concentrados de fruta obtenidos por proceso
industrial de eliminacin del agua contenida en los jugos. ste m#todo no es aplicable para el
caso de jugo de pia.
9./8.1 S"mbolos y Mnidades
La determinacin de las relaciones isotpicas de ,arbono F
/1
,@
/+
,G por spectrometr"a de
(asas de .stopos stables se e!presa por los cocientes de las abundancias de los tomos
estables de carbono /+ y /1 como F
/1
,@
/+
,G mediante el empleo de unidades
/1
,BP3B FJG,
los cuales estn referidos a un patrn internacional de el cual es f"sicamente un carbonato de
calcio F,a,'1G de origen marino pro$eniente de la formacin cretcica Peedee de ,arolina
del Sur, conocido como P3B FPee 3ee Belemnite LimestoneG. La unidad de reporte es en
partes por mil FJG. 3e acuerdo a la siguiente ecuacin F,raig, /04;G%
[ ]
1*
1 1 2 C 3
3
4 C
5
C 6
4 C
5
C 6 13
7PD8
12 13
Mues,+%
12 13
La comisin de pesos atmicos y abundancias isotpicas de la Mnin .nternacional de

Su"mica y :plicada F.MP:,G public sus recomendaciones en su reunin de agosto de /004
para el reporte de datos isotpicos de H, , y '. Para reportar los anlisis isotpicos de
carbono)/1 deben ser relati$os a BP3B FBienna Pee dee BeelemniteG es cual est referido
en t#rminos de la calcita &BS)/0.
9./8.5 Principio.
2odos los compuestos orgnicos que forman a los seres $i$os contienen el elemento qu"mico
llamado carbono. n la naturale<a e!isten dos tomos de carbono estables cuya Cnica
diferencia entre ellos es su masa atmica, todas las dems propiedades qu"micas en su
mayor"a son id#nticas. : estos tomos se les conoce con el nombre de istopos y se
representan como carbono)/1 Fbc,G y carbono)/+ Fbd,G.
La proporcin de istopos estables F
/1
,@
/+
,G contenidos en los alimentos, son t"picos de su
origen o de su procedencia y en muc7o menor escala de los posteriores procesos
industriales que sufren. n general la proporcin isotpica de origen se mantiene, por lo cual
nos permite identificar su fuente.
La base del m#todo consiste en relacionar la cantidad de istopos estables e!presada en
unidades delta de un producto determinado con el correspondiente ciclo fotosint#tico de la
PAG# 73
planta origen de la materia prima. Lo anterior es debido a que los mecanismos fotosint#ticos
de la fijacin del ,'+ atmosf#rico por las plantas se reali<a principalmente a tra$#s de dos
procesos.
3escripcin de los diferentes tipos de origen. ,on respecto al origen de jugos de frutas, las
plantas se clasifican en tres grandes grupos dependiendo del proceso fotosint#tico que
utili<an para fijar el ,'+ atmosf#rico. Plantas tipo ,1 utili<an el ciclo de ,al$in, las plantas tipo
,5 siguen el ciclo de Hatc7 SlacH y las plantas denominadas ,:( F,rasulacean :cid
(etabolismG.
l ciclo de ,al$in es empleado por plantas tipo ,1, a este ciclo pertenecen los frutales, entre
otros, man<ana, pera, dura<no, pltano, u$a, mango, guayaba, c"tricos como naranja,
toronja, mandarina y limn las cuales son las frutas de donde se e!traen los jugo y se
fabrican los n#ctares objeto de esta norma.
l ciclo de Hatc7 SlacH es empleado por plantas ,5, a este ciclo pertenecen plantas como%
caa de a<Ccar y ma"<. 3e este tipo de plantas se deri$an edulcorantes 7ec7os por el
7ombre como son el a<Ccar de caa y el jarabe de ma"< con alto contenido en fructuosa.,
este tipo de a<Ccares son los ms empleados como a<Ccares e!genos al jugo, los cuales
mediante esta norma se cuantificar su adicin.
l tercer grupo de las plantas es denominado ,:( F,rasulacean :cid (etabolismG. : este
grupo pertenecen plantas como la pia.
ntre los grupos de plantas ,1 y ,5 e!iste una diferencia considerable en la proporcin de
istopos estables F
/1
,@
/+
,G contenidos en las plantas. Por lo que midiendo la
/1
, en jugos o
jugos concentrados es posible reconocer el proceso fotosint#tico de la planta que les dio
origen y cuantificar su me<cla.
l grado de me<cla entre a<Ccares pro$enientes de las plantas ,1 con las plantas ,5
Fa<Ccares e!genos caa de a<Ccar ma"<G se puede estimar mediante una proporcin
lineal construida tomando como e!tremos la composicin isotpica de
/1
, de los
edulcorantes e!genos y la composicin isotpica de
/1
, de la $ariedad en estudio.
9./8.4 3escripcin del m#todo de prueba.
La
/1
,BP3B se determina en un spectrmetro de (asas de .stopos stables utili<ando el
,'+ obtenido de la combustin de la muestra FBgr. slidos disueltos o pulpa ambos
pro$enientes de los jugosG. Los resultados se reportan como
/1
,BP3B e!presado en J
calculado de acuerdo a la ecuacin /.
Para reali<ar el anlisis, se toma una al"cuota del material orgnico de inter#s el cual se
o!ida cuantitati$amente para formar principalmente ,'+ y H+'. l ,'+ obtenido de la
reaccin de o!idacin es purificado mediante un proceso de separacin criog#nica y
empleando sistemas de $ac"o Fnumeral 9./8.8.+.+G o mediante un proceso de separacin
utili<ando una columna cromatogrfica como es el caso del anali<ador elemental al separar el
&+ del ,'+ Fnumeral 9./8.8.+.1G.
PAG# 77
n la literatura internacional se reportan bsicamente tres m#todos de combustin. Mno que
utili< una combustin dinmica a7ora en desuso, el ms preciso es el que la combustin se
lle$a a cabo en tubo de cuar<o sellado utili<ando el sistema de introduccin dual de gases del
espectrmetro y nue$os m#todos de espectrmetros modernos que utili<an un sistema
compuesto de :nali<ador lemental ? interfase ) un espectrmetro de masas de istopos
estables.
7.13.3 I'-%,$9&'%/-
spectrmetro de masas para la determinacin de relaciones de istopos estables con la
capacidad anal"tica para determinar la
/1
,BP3B en el inter$alo de abundancias naturales en ,'+
con una precisin interna de *,*4 J o mejor Fe!presada en $alores delta eq /G. La precisin
interna es definida aqu" como la diferencia entre dos medidas consecuti$as de una muestra de
,'+
l espectrmetro deber ser capa< de reali<ar las determinaciones mediante lecturas
simultneas de las masas moleculares 55,54,58 uma. l espectrmetro debe tener un sistema
de introduccin dual para determinaciones simultneas entre el gas muestra y el gas de
referencia. Mn metodolog"a alterna consiste en emplear un sistema de combustin en l"nea,
seguido de una separacin por columna con objeto de reali<ar la separacin de gases producto
de la combustin pre$io a la determinacin en el espectrmetro de masas. l m#todo
empleando la de introduccin dual es intr"nsicamente ms preciso, sin embargo los resultados
obtenidos empleando un anali<ador elemental pueden alcan<ar resultado igualmente confiables
empleando un conjunto de estndares secundarios
La precisin interna del spectrmetro de (asas de .stopos stables para medir istopos
estables deber ser de *,*/ J y la precisin e!terna de *,*4 J. La linearidad debe ser Q
*,*4 J por nanoamper de corriente de iones. 3urante la operacin del espectrmetro, las
mesetas de los picos para colector uni$ersal ,&'S debe ser m@m X 04 F/*D $alleG.
:nali<ador elemental F:G en l"nea con el espectrmetro de masas de istopos estables el cual
es acoplado al espectrmetro mediante una interfase diseada para el efecto, que tiene el
objeto el manejo de los gases pro$enientes de la muestra y los gases utili<ados como patrones
de trabajo. l : debe tener la capacidad de con$ertir cuantitati$amente todo el carbono de la
muestra en di!ido de carbono y debe ser capa< de eliminar los dems productos de la
combustin de la muestra principalmente el agua.
,entr"fuga con rotor de 54E para seis tubos de centr"fuga de 4* ml con una fuer<a de /5** 6.
Parrilla el#ctrica con control de temperatura capa< de alcan<ar y controlar 0*E,
Horno para secado con una temperatura entre 4* a 8*E,
Aefractmetro de mano para determinacin de EBri!.
La preparacin que se describe en el numeral 9./8.8 es aplicable a todos los tipos de jugos
en sus presentaciones comerciales. n el caso de jugos concentrados, estos se diluyen al
4*D con agua destilada y se sigue el procedimiento siguiente.
9./8.8.; Procedimiento
PAG# 77
9./8.8.;./ Preparacin de la muestra
9./8.8.;././ Aeacti$os y (ateriales
Para la reali<acin la preparacin de la muestra se debern emplearse e!clusi$amente
reacti$os de grado anal"tico reconocido
Hidr!ido de ,alcio F,aF'HG+G grado reacti$o. Se prepara una solucin al +4D con agua
grado ....
:cido SulfCrico FH+S'5G 04)0;D grado reacti$o. 3ilucin /(, tomar /1.0 ml de H+S'5 y
aforar a +4* ml
:gua al menos grado ... de acuerdo con & .S' 1808%/004
Papel pH
2ubos de centr"fuga de 5* )4* ml.
Pipetas de /* ml
Propipeta.
Basos de precipitados de /** ml
Baso de precipitados de /*** L
(ortero de gata
9./8.8.;./.+ Separacin y preparacin de los slidos solubles Fa<CcaresG y slidos no
solubles FpulpaG para anlisis isotpico.
Para separar los constituyentes slidos de la muestra, se toman 4* ml de jugo de cualquier
especificacin y se coloca en tubo de centr"fuga y se somete a centrifugacin a /5** 6 por
/* minuto.
aG Preparacin de los slidos solubles Fa<CcaresG para anlisis isotpico.
Los slidos solubles despu#s de la centrifugacin anterior estn contenidos en el
sobrenadante, por lo que se decanta este sobrenadante y se colocan /* ml de
sobrenadante en un $aso de precipitados de /** mL.
:dicionar una solucin de 7idr!ido de calcio al +4D se ajusta el pH entre 9,4 y 0.
,alentar la me<cla en un bao a 0*E, por 1 min.
Tcidos orgnicos, aminocidos y otros componentes se precipitan en este paso y para
separarlos, centrifugar 4 min a /5** 6.
3ecantar el sobrenadante y colocarlo en un $aso de precipitados de /** mL, acidificar
con H+S'5 /( 7asta pH 4 cuando la solucin cambie de color y $erificar el pH colocando
una gota en papel pH, cuidar de no introducir el papel en la muestra.
6uardar en un refrigerador a 5E, durante toda la noc7e, decantar el sobrenadante l"quido.
2omar una al"cuota del sobrenadante para el anlisis isotpico de
/1
,. La concentracin en
EBri! de los slidos disueltos que contiene principalmente los a<Ccares puede medirse con un
refractmetro de mano.
bG Preparacin para slidos no solubles
Los slidos no solubles FpulpaG de la centrifugacin anterior estn precipitados en el fondo
del tubo de centrifugacin, se separan y se preparan de la siguiente forma%
PAG# 78
La pulpa se la$a con agua destilada caliente a 0*E, en el tubo de centr"fuga, y se $uel$e a
centr"fugar por /* min. a /5**6, se decanta el sobrenadante y se des7ec7a, este paso se
debe repetir cinco $eces.
La pulpa se la$a con 5* ml de acetona, se centr"fuga por /* min a /5** g, se decanta el
sobrenadante y se des7ec7a Feste paso se debe repetir dos $ecesG. Mna $e< la$ada la pulpa
con agua y acetona, #sta se liofili<a se puede secar en un 7orno entre 8* ) 9*E, durante
toda la noc7e.
La pulpa seca se 7omogeni<a, pul$eri<ndola en un mortero de gata.
2omar una al"cuota de la pulpa para determinar la
/1
,.
9./8.8.;.+ 2#cnicas para la combustin de las muestras a<Ccares o de pulpa de las
muestras de jugo para su posterior determinacin la
/1
,BP3B
9./8.8.;.+./ 'bjeti$o de la combustin.
l objeti$o es transformar cuantitati$amente el carbono pro$eniente de la materia orgnica
Fa<Ccares o pulpaG preparados de acuerdo 9./8.8././ y 9./8.8./.+ de la muestra original de
los jugos mediante la combustin en bi!ido de carbono F,'+ puroG, para medir su
/1
,BP3B
en el spectrmetro de (asas de .stopos stables.
Para reali<ar la combustin se pueden emplear dos m#todos, el primer m#todo de
combustin utili<a un tubo de combustin de cuar<o sellado, reali<ando la introduccin del
,'+ puro al sistema de doble introduccin de gases del spectrmetro de (asas de .stopos
estables. l segundo m#todo de combustin utili<a un :nali<ador lemental acoplado en
l"nea al espectrmetro de masas.
: continuacin se 7ace la descripcin detallada de cada uno de los m#todos
9./8.8.;.+.+ (#todo de combustin en tubo de cuar<o
9./8.8.;.+.+./ Aeacti$os y (ateriales para la combustin en tubo de cuar<o.
(ateriales de referencia $er numeral 9./8.8.4
2anque de ,'+ de 00.004D m"nimo de pure<a en un cilindro de ; L, contenido en un
tanque metlico a una presin m!ima de 498* KPa a +05
o
K F+/
o
,G con un regulador de
dos pasos con una presin de entrega de 4l@min para trabajar con cilindros con una
presin m!ima de /** KPa. Para ser utili<ado como patrn interno de trabajo en el
espectrmetro de masas de relaciones isotpicas.
'!ido ,Cprico en alambre grado A:. l !ido cCprico es pasado por una malla del &o. 5*
para retirar el pol$o. Posteriormente es quemado en una mufla a 94*
o
, durante tres 7oras
para o!idar toda la materia orgnica que contenga.
Plata 00.0005D de pure<a. s laminada con un grosor entre *,/ y *,5 mm y cortada en
secciones de / mm de anc7o por ; mm de largo. Las cuales son limpiadas con una
solucin de cido n"trico al /D, posteriormente son la$ados con agua destilada y son
calentados en una mufla a 5**
o
, durante una 7ora. La plata es usada como catali<ador
en el tubo de combustin.
PAG# 70
,obre metlico acti$ado FgranallaG grado A:. F:lp7a Aesources .nc. P.'. B'= /00
Ste$ens$ille, (ic7igan 50/+;, M.S.:G.
Mn soplete Fantorc7aG de gas ) o!"geno capa< de alcan<ar la temperatura de fusin del
cuar<o, para sellar los tubos de cuar<o.
2anque de o!"geno industrial, con regulador y mangueras para operacin del soplete.
6as Butano para uso dom#stico entubado para la operacin del soplete.
Hielo seco.
tanol :bsoluto .ndustrial al 04D :lc Bol)
&itrgeno l"quido.
6rasa para alto $ac"o marca :pie<on & o (.
Pin<as de punta y esptula de acero ino!idable para el manejo de muestras de /* mg.
Secadora de aire caliente tipo industrial con capacidad de alcan<ar 4**E, con $entilador
tipo jaula de ardilla de /4** rpm.
6atos mecnicos de laboratorio de diferentes tamaos.
6enerador tesla para deteccin de fugas en sistemas al $ac"o de $idrio.
2ubo de cuar<o de 0 mm de dimetro e!terno, ; mm de dimetro interno y +* cm de
largo, sellado por un lado con soplete. l cual se utili<a como tubo de combustin.
2ubo de cuar<o de 8 mm de dimetro e!terno, 5 mm de dimetro interno y
apro!imadamente + cm de largo, sellado por un lado con soplete. l cual se utili<a para
mantener separado el !ido cCprico del cobre metlico y como contenedor para muestras
orgnicas slidas.
2ubo de cuar<o de 1,+ mm de dimetro e!terno, + mm de dimetro interno y
apro!imadamente + cm de largo terminado en punta para ser utili<ado como tubo capilar
como contenedor de muestras orgnicas l"quidas.
2ubo de cuar<o de 1,+ mm de dimetro e!terno, + mm de dimetro interno y
apro!imadamente + cm de largo se coloca un filamento de plata de /mm ! ;mm de largo
y se sella por ambos lados dejando un pequeo orificio para sostener el filamento de
plata.
2odo el material de cuar<o se purifica en una mufla a 8**E, durante / 7ora para eliminar
cualquier part"cula de materia orgnica, una $e< purificado se guarda en recipiente que
debe se mantenido en un 7orno de secado a 5*)8*E, para e$itar 7umedad.
-rascos contenedores de pyre! con $l$ula para alto $ac"o con pistn de tefln o de
$idrio. stos frascos se utili<an para transportar el ,'+ de la l"nea de preparacin de
muestras sistema de introduccin del espectrmetro de masas de relaciones isotpicas.
2ermos de pyre! de diferentes tamaos F/, /@+ y /@5 ltG para nitrgeno l"quido.
2ermo de 4* litros de acero ino!idable para guardar nitrgeno l"quido.
Mniones cajn ultra torr de 1@9 &o. SS)8)M2)8 y filtro para gases SS5B,A+4(.
Se requiere un sistema para romper el tubo de cuar<o que contiene el gas ,'+
pro$eniente de la muestra, este sistema se encuentra formado por las siguientes partes%
aG una unin reductora cajn de e a f ultra torr, &o. SS)9)M2)8)5, bG tubo fle!ible cajn
de e, &o. 1+/)9=)/, cG dos conos de acero ino!idable 1*5)9)=': dG una unin reductora
cajn ultra torr de e a 1@9 y un filtro para gases SS5B,A+4(. l material de este inciso
es para un solo rompedor. FMniones ,ajn. SàgeloH ,ompaniesG 3escrito en el art"culo
3es(aris y Hayes /0;8.
(icropipeta de $olumen $ariable de * a 4* l. y de * a /* l con puntas de plstico
des7ec7ables.
PAG# 71
9./8.8.;.+.+.+ quipos necesarios para la combustin en tubo de cuar<o.
(ufla. La combustin de la materia orgnica en tubo de cuar<o sellado se reali<a en una
mufla que puede operar a una temperatura m!ima de //**
o
, equipada con control
digital de temperatura con un error no mayor de g 4
o
, y un control de tiempo con una
resolucin de / min.
L"nea de Bac"o. Para la desgasificacin de las muestras. quipada con dos bombas de
$ac"o con una capacidad de bombeo de 5 mc@7r y una bomba difusora con trampa para
nitrgeno l"quido con una $elocidad de bombeo de /** l@seg capa< de alcan<ar una
presin de *,/ Pa o /*
)5
mbar
L"nea de $ac"o. Para la purificacin criog#nica de las muestras. quipada con dos
bombas de $ac"o con una capacidad de bombeo de 5 mc@7r y una bomba difusora con
trampa para nitrgeno l"quido con una $elocidad de bombeo de /** l@seg, capa< de
alcan<ar una presin de *,/ Pa o /*
)5
mbar
Mna balan<a anal"tica con capacidad de +** g y una precisin de *,/ mg.
Horno de secado. Sue mantenga una temperatura entre 4* ? 8*E,
9./8.8.;.+.+.1 Preparacin y :condicionamiento del (aterial y de la (uestra para la
combustin en tubo de cuar<o sellado.
aG Preparacin del tubo de combustin. :l tubo de cuar<o quemado a 8**E, se le adicionan
alrededor de 1 g de !ido cCprico y el capilar con filamento de plata. l conjunto es
calentado una 7ora a 8**
o
, en una mufla para eliminar cualquier resto de materia
orgnica. Los tubos as" preparados son almacenados en un recipiente de $idrio con tapa
en un 7orno a 5*)8*
o
,.
bG Preparacin de muestras de a<Ccares disueltos o pulpa pro$eniente de jugos, n#ctares y
concentrados de jugos para anlisis isotpico. Se reali<a la preparacin siguiendo
9./8.8./ y 9./8.8.+
cG Se toman entre 5* a 0* l del sobrenadante de acuerdo a 9./8.8./ en el caso de
a<Ccares preparado segCn 9./8.8./, o de 9 a /* miligramos de pulpa seca separada
segCn 9./8.8.+ y se coloca un tubo pequeo de 8mm de dimetro e!terno de cuar<o y se
deposita in$ertido dentro del tubo de combustin de cuar<o de 0 mm de dimetro e!terno
que contiene ,u', el filamento de plata y la muestra, finalmente se colocan alrededor 1 g
de cobre metlico con un embudo. La combustin de la muestra se reali<a utili<ando el
o!"geno liberado por el !ido cCprico, siendo la plata el catali<ador de la reaccin y el
cobre metlico sir$e para poder con$ertir los !idos de nitrgeno en &+ a una temperatura
de 84*E,.
dG Los tubos de combustin preparados como en el inciso, se colocan en la l"nea de $ac"o
mediante una unin ultra torr de 1@9h. Las muestras se liofili<an a una presin de /.11 Pa
y finalmente se e$acuan 7asta alcan<ar una presin de *./11 Pa, una $e< alcan<ada esta
presin, el tubo de cuar<o es sellado con soplete de alta temperatura.
eG ,ada $e< que se prepara un conjunto de muestras para anlisis isotpico de
/1
,,
simultneamente se preparan al menos tres materiales de referencia de distribucin
internacional F9410% &BS)++ F4lG, 945*% P-/ F5 mgG o 9+5+% Sucrose, :&M F9 mgG. Para
,alibrar el espectrmetro de masas.
9./8.8.;.+.+.5 ,ombustin.
PAG# 72
Las muestras en sus correspondientes tubos de cuar<o sellados son calentadas 7asta
alcan<ar una temperatura de 0**
o
, la cual se mantiene durante dos 7oras en una mufla, al
t#rmino de este per"odo se baja la temperatura a 84*
o
, y se mantienen a7" durante / 7ora. :
partir de esto los tubos se dejan enfriar lentamente 7asta alcan<ar la temperatura ambiente.
9./8.8.;.+.+.4 Purificacin criog#nica de ,'+.
l ,'+ producto de la combustin de la muestra es separado y purificado criog#nicamente,
iniciando con la separacin del agua mediante una me<cla frigor"fica Fme<cla de 7ielo seco
con alco7ol o acetona a )9*
o
,G, para la purificacin se utili<a otra trampa enfriada con
nitrgeno l"quido F)/0*
o
,G que captura el ,'+ y se eliminan los gases no condensables a
tra$#s de una l"nea de $ac"o.
Los frascos con el ,'+ purificado se colocan en el sistema automtico de introduccin dual
de gases del espectrmetro de masas de istopos estables para determinar la
/1
, de las
muestras.
9./8.8.;.+.1 (#todo de ,ombustin de las muestras de a<Ccares o pulpa utili<ando un
:nali<ador lemental acoplado a un espectrmetro de masas de istopos estables.
9./8.8.;.+.1./ Aeacti$os y (ateriales
,psulas de estao de 4 = 0mm
(icroesptula
Pin<as
(icropipeta de $olumen $ariable de * a /* l. con puntas de plstico des7ec7ables.
(ateriales de referencia $er numeral 9./8.8,4
Los materiales empleados para la operacin correcta del anali<ador elemental se describen
en los manuales de los respecti$os fabricantes de estos equipos.
Helio 00.000D pure<a
'!"geno 00.008D pure<a
,'+ 00.004D pure<a
&+ 00.000D pure<a
9./8.8.;.+.1.+ quipo.
(icrobalan<a con capacidad de 4g sensibilidad de /,* Im
:nali<ador lemental e interfase $er numeral 4./.+ instrumentacin
spectrmetro de (asas de istopos estables $er numeral 4././ instrumentacin
9./8.8.;.1 'btencin de resultados de
/1
,BP3B para el ,'+ obtenido por cualquier de los
m#todos de combustin.
l ,'+ producto de la combustin de las muestras tanto de a<Ccar como pulpa descrito en
los numerales 9./8.8.+.+ y 9./8.8.+.1, es empleado para la determinacin de las relaciones
isotpicas de
/1
,@
/+
, mediante un espectrmetro de masas con caracter"sticas definidas en el
numeral 9./8.4./
PAG# 73
La determinacin de las relaciones isotpicas se reali<a con las especies isotpicas
/1
,
/8
'
/8
'@
/+
,
/8
'
/8
' pro$eniente de las correspondientes intensidades de los 7aces de iones
moleculares masa 55 y 54 uma.
'btencin de los resultados de /4&:.A para el &+ pro$eniente de materia orgnica
obtenido por cualquier de los m#todos de combustin y reduccin con cobre metlico. l &+
producto de la pulpa descrito en los numerales 9./8.8.+.+ y 9./8.8.+.1, es empleado para la
determinacin de las relaciones isotpicas de /5&@/4& mediante un espectrmetro de masas
con caracter"sticas definidas en el numeral 9./8.4./
La determinacin de las relaciones isotpicas se reali<a con las especies isotpicas
/5&/5&@/5&/4& pro$eniente de las correspondientes intensidades de los 7aces de iones
moleculares masa +9 y +0 uma.
9./8.8.;.5 ,lculos
La unidad de reporte es el sistema de unidades ms empleado para indicar el contenido
isotpico. Los $alores son usados para indicar las $ariaciones en la abundancia isotpica.
La
/1
, de un compuesto est e!presada mediante las relaciones isotpicas de la muestra
con la relacin isotpica del patrn de acuerdo a la ecuacin / en partes por mil FJG.
Fc /G
3onde la
/1
, est e!presada por los cocientes de los istopos estables F
/1
,@
/+
,G de la
muestra contra el patrn internacional BP3B FPee 3ee Belemnite LimestoneG el cual es un
carbonato de origen marino de la formacin cretcica Peedee en ,arolina del Sur F,raig,
/04;G. ,uya relacin isotpica absoluta de F
/1
,@
/+
,GP3B X *,*//+1;+. ste $alor es el punto de
referencia comCn en la escala de P3B de que se calculan con la ecuacin /.
l espectrmetro de masas de istopos estables da el resultado de cada anlisis
directamente en unidades de
/1
, con las correcciones por efecto de presin, de masas
parsitas, efecto de memoria, gas residual, me<cla de gases por cambio de $l$ulas y por
abundancia isotpica, F(ooH, a.6. y 6rootes P.(. /0;1G.
La /4& de un compuesto est e!presada mediante las relaciones isotpicas de la muestra
con la relacin isotpica del patrn de acuerdo a la ecuacin + en partes por mil FJG.
1 5
1 5 1 4
1 5 1 4
1 1 * * * N
N N
N N
M u e s t r a
A I R

1
]
1
6 5 4
6 5 4
Fc +G
3onde la /4& est e!presada por los cocientes de los istopos estables F
/4
&@
/5
&G de la
muestra contra el patrn internacional que es aire.
PAG# 74
9./8.8.;.4 (ateriales de Aeferencia
Los materiales de referencia internacionales no son de competencia del ,&:( por lo que
se tienen que adquirir en el 'rganismos .nternacional de nerg"a :tmica o a tra$#s del
&ational .nstitute of Standards and 2ec7nology &.S2.
Para determinar la
/1
,BP3B en materia orgnica se recomienda utili<ar los siguientes
materiales de referencia del &.S2 9410% &BS)++ aceite, 945*% P-/ poliuretano, 945/%
MS6S+5 grafito 9+5+% Sucrose, :&M.
Para determinar la /4&:.A se recomienda utili<ar los siguientes materiales de referencia
.::)&/, .::)&+, .::)&1,MS6S)+4 y MS6S)+8
Los materiales de referencia para calibrar el ,'+ que se utili<ar como patrn de trabajo y
determinar
/1
,BP3B y la
/9
'BP3B son el &BS)/0 y el &BS)/9 que se preparan utili<ando la
t#cnica de L. (. (c,rea F/04*G y normali<ados de acuerdo a 2yler ,oplen, /099. ' puede
utili<arse un tanque de ,'+ calibrado. :s" mismo puede utili<arse un tanque de &+ calibrado
para calibrar el &+ que se utili<ar como patrn de trabajo.
(ateriales de Aeferencia /1,BP3B. FJG g /9'BP3B FJG g /4&:.A FJG g
9410% &BS)++ aceite )+0,;5 g *,/+
945*% P-/ poliuretano )1/,91 g *,//
945/% MS6S+5 grafito )/4,00 g *,//
9+5+% Sucrose, :&M )/*,51 g *,/1
9451. &BS)/9 calcita )4,*/ g *,*8 )+1,*4 g *,/0
9455. &BS)/0 calcita [/,04 )+,+*
945;. .::)&/ [*,51 g *,*;
9459. .::)&+ [+*,1+ g *,*0
9450. .::)&1 [5,80 g *,*0
944*. MS6S+4 )1*,+4 g *,19
944/. MS6S +8 [41,8+ g *,+4
9./8.8.;.8 Precisin
La precisin de este m#todo para un analito en particular se puede deri$ar de los resultados
generales obtenidos a tra$#s de pruebas interlaboratorio.
9./8.8.;.8 Aepetibilidad Fde los resultados de medicionesG.
Se e!presa como la pro!imidad de la concordancia entre los resultados de las mediciones
sucesi$as del mismo mesurando, con las mediciones reali<adas con la aplicacin de la
totalidad de las siguientes condiciones, esto es en dos anlisis para la misma muestra, el
mismo instrumento de medicin utili<ado en las mismas condicionesP el mismo lugarP la
repeticin dentro de un per"odo corto de tiempo.
PAG# 72
Para el anlisis isotpico de
/1
,BP3B en materia orgnica se debe tener una repetibilidad
menor a *,+; J.
9./8.8.;.8./ Aeproducibilidad Fde los resultados de las medicionesG.
Se e!presa como la pro!imidad de la concordancia entre los resultados de las mediciones
del mismo mesurando, con las mediciones reali<adas 7aciendo $ariar las condiciones de
medicin por diferentes laboratorios.
Para el anlisis isotpico de
/1
,BP3B en materia orgnica se debe alcan<ar una
reproducibilidad menor de *,8 J.
9./8.8.9 Aeporte de resultados
Para el reporte de resultados se emplear el formato sugerido en la &(=i,)/;*+4).(&,)
+*** YAequisitos generales para la competencia de los laboratorios de ensayo y calibracinZ
numeral 9./8.4./*.
9./8.8.0 !presin de Aesultados
Las plantas ,1 Fnaranja, man<ana, toronja, u$a, mandarina, mango, pera, ciruela, dura<no,
c7abacano, guayaba, papaya, guanbana, fresa, tamarindoG tienen un inter$alo de slidos
disueltos de ?+5 a )+9J, en pulpa de ?+5 a )+9J y en etanol de ?+4,4 a )+9J, estos $alores
de
/1
,BP3B no aplican para el caso de la pia por ser una planta ,:(, ra<n por la que se
tratar aparte.
Para determinar con mayor precisin el por ciento de fruta contenida en un jugo, se debern
de tomar que 7ay que determinar en la misma muestra, la
/1
,BP3B en los slidos disueltos
as" como la
/1
,BP3B en pulpaP donde este Cltimo parmetro se utili<a como patrn interno con
el objeto de corregir por, la $ariacin en el tipo de fruta y por la $ariacin de las diferentes
condiciones ambientales en las que crecieron las frutas, esto es debido a que los
carbo7idratos solubles contenidos en el jugo y las diferentes mol#culas orgnicas que forman
la pulpa se generan simultneamente durante el proceso del crecimiento de un tipo de fruta
dada y por lo tanto tienen un $alor de
/1
,BP3B casi id#ntico.
Por otro lado, el $alor num#rico de ?//J en las formulas 1 y 5 la
/1
,promedioF:<ucar ,aa @(ai<
representan el promedio num#rico de los tipos de carbo7idratos pro$enientes de plantas ,5
Fcaa de a<Ccar y edulcorantes pro$enientes de ma"<G que ms comCnmente se pueden
adicionar a los jugos. La
/1
,BP3B de slidos disueltos se toma como la
/1
,:<ucarjugo
-inalmente la la
/1
,BP3B de la pulpa se representa como
/1
,Pulparjugo Los parmetros
anteriores se utili<an en la ecuacin 1 de la siguiente manera%
1**
4 1 6
9
4 5 6 P+
13
:
13
4 5 6 P+
13
: :
13
Maz AzcarCaa omedio Jugo Pulpa

Maz AzcarCaa omedio jugo disueltos Slidos
C C
C C
Fruta

PAG# 73
1**
11 4 1 6
11
9
13
13
+ +
+
PulpaJugo
ueltosjugo SlidosDis
C
C
Fruta
KE). 3M
n la aplicacin de esta ecuacin 1 con la metodolog"a descrita, estudios de $alidacin 7an
mostrado que se tiene un error probable m!imo 7asta del 4D en la determinacin del D
-ruta.
Para el caso especial de los Lugos clarificados y que por elaboracin no contienen pulpa
como son el jugo de man<ana y el jugo de u$a, el por ciento de slidos disueltos fruta se
puede calcular por medio de la ecuacin 5%
1**
15
11
9
13
ueltosJugo SlidosDis
C
Fruta
KE). 4M
n la aplicacin de la ecuacin 5 con la metodolog"a descrita, estudios de $alidacin 7an
mostrado que se tiene un error probable m!imo 7asta del /*D en la determinacin del D
slidos disueltos -ruta.
Los ,riterios para interpretar los resultados
Los ,riterios para interpretar los resultados al aplicar las ecuaciones 1 y 5 de D slidos
disueltos fruta son los siguientes%
La aplicacin de la ecuacin 1 para jugos que contienen pulpa, se requiere de la calificacin
como un patrn interno a la pulpa para lo cual se aplican las siguientes condiciones%
La
/1
,BP3B en pulpa se debe encontrar en el inter$alo de plantas ,1 F)+9 a ?+5JG
l anlisis de la
/4
&:.A en pulpa debe ser detectable y tener un $alor mayor a cero.
Mna $e< que se acepta a la pulpa como patrn interno se siguen las siguientes
consideraciones%
Si la diferencia num#rica de
/1
,BP3B en pulpa )
/1
,BP3B en los slidos disueltos es menor
que /, y los $alores de la
/1
,BP3B en slidos disueltos y la pulpa se encuentran en los
inter$alos de las plantas ,1 se puede considerar como un producto en el cual los slidos
disueltos pro$ienen /**D de la fruta y se puede considerar como aut#ntico. n este
caso, al aplicar la ecuacin 1 puede resultar un $alor de 0;D o inclusi$e un poco mayor a
/**D.
Si la diferencia num#rica de
/1
,BP3B en pulpa )
/1
,BP3B en slidos disueltos es mayor que
/, se aplica la ecuacin 1 para determinar el D slidos disueltos de la fruta el cual podr
tener un error del 4D.
Si la
/1
,BP3B en pulpa no se encuentra en el inter$alo de plantas ,1 y@o no 7ay el $alor
/4
&:.A de la presencia de nitrgeno entonces la pulpa no se puede utili<ar como patrn
interno y no se podr emplear la ecuacin 1. Sin embargo, aCn es posible empleando la
PAG# 77
ecuacin 5 para determinar el D slidos disueltos de la fruta el cual podr tener un error
del /* D. n este caso implica adicin de espesantes o celulosa, que en principio de
acuerdo al numeral 8.+.5.8 stabili<antes y espesantes de la presente norma no se deben
de agregar.
Para el clculo del contenido de EBri! de slidos disueltos la fruta se puede aplicar la
ecuacin 4, %
1**
9
P+
Fruta
ri! a ri!deFrut
oducto
KE). 2M
EBri!Producto son determinados mediante una medicin directa de los EBri! del producto que se
est anali<ando.
8 ENVASE
Los productos objeto de esta norma se deben en$asar en recipientes limpios elaborados con
materiales inocuos. Aesistentes a las condiciones de en$asado, almacenaje y manejo de tal
manera que no cedan al producto sustancias t!icas u otras, que alteren las propiedades
f"sicas, qu"micas y sensoriales del producto.
10 INFORMACION COMERCIAL
Las etiquetas de los productos objeto de esta norma deben cumplir con las disposiciones de
etiquetado establecidas en la &'()*4/)S,-.)/005, indicada en el apartado de referencias.
l tamao de la letra de la denominacin comercial debe ser de al menos el +*D del tamao
del panel principal de la etiqueta.
La letra de la denominacin comercial deber ser del mismo tipo y tamao.
11 EVALUACI"N DE LA CONFORMIDAD
//./ La e$aluacin de la conformidad de los productos objeto de esta norma se lle$a a cabo
conforme a lo dispuesto en la Ley -ederal de (etrolog"a y &ormali<acin y su Aeglamento.
12 VIGILANCIA
La $igilancia de la presente norma oficial me!icana, una $e< que sea publicado en el 3iario
'ficial de la -ederacin como norma definiti$a, estar a cargo por la Secretar"a de conom"a
y la Procuradur"a -ederal del ,onsumidor, conforme a sus respecti$as atribuciones.
13 !I!LIOGRAFAA
PAG# 77
/1./ :.'.:.,., Y2otal Sulfurous :cidP (odified (onier)ailliams (et7odZ, /5
t7
. ed., Sections
+*./+1)+*./+4, pp 10/)10+.
/1.+ -.3.:., ,ode of -ederal Aegulations. Aef. /*/./**, :ppendi! :, Luly /098.
/1.1 -.3.:. ,ode of -ederal Aegulations. ,7apter / F5)/)0/ ditionG Aef. /*+.11 3iluted
fruit or $egetable juice be$erages ot7er t7an diluted orange juice be$erages.
/1.5 -.3.:., ,ode of -ederal Aegulations. ,7apter / F5)/)08 ditionG Aef. /58./9; ,anned
prune juice.
/1.4 Secretar"a de Salud, Ley 6eneral de Salud, /*j. ed., ditorial PorrCa, S.:., (#!ico,
3.-., /001.
/1.8 &(=)-)*/9)/089 ,alidad para Lugo de 2oronja.
/1.; &(=)-)*55)/091 :limentos. -rutas y 3eri$ados. Lugo de u$a. -oods. -ruits and
3eri$ati$es. 6rape Luice.
/1.9 &(=)-)*54)/09+ :limentos. -rutas y 3eri$ados. Lugo de (an<ana. -oods. -ruits and
3eri$ati$es. :pple Luice.
/1.0. &(=)-)//;)/089 Lugo de Pia F,alidadG. Pineaple Luice FSualityG.
/1./* &(=)-)//9)/095 :limentos. Bebidas &o alco7licas. Lugo de &aranja en$asado.
-oods. Soft 3rinHs. ,anned 'range Luice.
/1.// PA'k)&'()/*0)SS:/)/005.Bienes y Ser$icios. Procedimientos para la toma, manejo
y trasporte de muestras de alimentos para su anlisis microbiolgico.
/1./+ ,ienfuegos dit7, ,asar .sabel y (orales Pedro, F/009G. Y,arbon isotopic composition
of me!ican 7oneyZ. Lournal of :picultural Aeseac7 18F1@5G% /80 ) /;0
/1./1 ,raig Harmon. F/041G. 27e geoc7emistry of stable carbon isotopes. 6eoc7imica et
,osmoc7imica :cta, 1% 41 ? 0+.
/1./5 ,raig Harmon F/04;G. .sotopic standards for carbon and o!ygen and correction factors
for mass ? spectrometric analysis of carbon dio!ide. 6eoc7imica et ,osmoc7imica :cta,
/+%/11 ? /50.
/1./4 3es(aris, 3.L. and Hayes L.(. F/0;8G. 2ube cracHer for opening glass Sealed
ampoules under $acuum. :nalytical ,7em. 59% /84/ ? /84+.
/1./8 (ooH, a.6. and 6rootes P.(. F/0;1G. 27e measuring procedure and corrections for
t7e 7ig7 precision mass ? spectrometric analysis of isotopic abundance ratios, especially
referring to carbon, o!ygen and nitrogen. .nternational Lournal of (ass Spectrometry and .on
P7ysics. Bol /+, +;1 ? +09.
PAG# 78
/1./; :.'.:.,. 'fficial (et7od 09/.*0 ,orn Syrup in :pple Luice ,arbon Aatio (ass
Spectrometric (et7od. ,7apter 1;, P. /0, -ruit and -ruit Products. :.'.:.,. /8t7 dition,
Bol. ... /004.
/1./9 :.'.:.,. 'fficial (et7od 09+.+/ ,orn Syrup in 'range Luice ,arbon Aatio (ass
Spectrometric (et7od. ,7apter 1;, P. +*, -ruit and -ruit Products. :.'.:.,. /8t7 dition,
Bol. ... /004.
/1./0 L. Bricout l L. Ko<iet F/09;G. ,ontrol of t7e :ut7enticity of 'range Luices by .sotopic
:nalysis. L. :gric. -ood ,7em. 14, ;49);9*
/1.+* 3oner Landis l Bills 3onald. F/09+G. (ass Spectrometric /1,@/+, 3eterminations to
detect Hig7 -ructose ,orn Syrup in 'range Luice% ,ollaborati$e StudyZ. L. :ssoc. '--. :nal.
,7em 84 F1G% 8*9 ? 8/*.
/1.+/ L. Ko<iet, :.Aossmann, 6.L. (artin l P.A. :s7urst F/001G. 3etermination of carbon)/1
content of sugar of fruit and $egetable juices. :nalytica ,7imica :cta, +;/, 1/)19
/1.++ 6.6. (artin, B. Hanote, (. Lees, k.L. (artin F/008G .nterpretation of combined dH
S&.-@&(A and bc, S.A:@(S analyses of fruit juices to detec added sugar, Lournal of :':,
.nternational, Bol. ;0, &o. / 8+);+.
/1.+1 (. 6ensler l H. L. Sc7midt. F/005G. .solation of t7e main organic acid from fruit juices
and nectars for carbon isotope ratio measurements. :nalytica ,7imica :cta, +00, +1/)+1;.
/1.+5 . Lamin, L. 6on<le<, 6. Aemaud, &. &aulet l 6. (artin. F/00;G. 3etection of
!ogenous Sugar or 'rganic :cid :ddition in Pineapple Luices and concentrates by bc,
.A(S :nalysis. L. :gric. -ood ,7em. 54, 108/)108;.
/1.+4 L. Ko<iet, :. Aossmann, 6.L. (artin, P. Lo7nson. F/004G. 3etermination of t7e o!ygen)
/9 and deuterium content of fruit and $egetable juice àter an uropean inter)laboratory
comparison study, :nalytica ,7imica :cta 1*+ F/G pp. +0)1;. :nal. ,7im. :cta. F/004G, 1*+,
+0)1;.
/1.+8 M&)&)/+/5*%/00; >umos de frutas y 7ortali<as. 3eterminacin de la relacin de los
istopos estables del carbono Fbc,@bd,G en los a<Ccares de los <umos de fruta. (#todo por
spectrometr"a de (asas de Aelaciones .sotpicas.
/1.+; P&)&B)/1*;* >umos de fruta y 7ortali<as. 3eterminacin de la relacin de los
istopos estables de carbono Fbc,@bd,G en la pulpa de los <umos de fruta. (#todo por
espectrometr"a de masas de relaciones isotpicas.
/1.+9 ,ode of Practice publicado por la :.&L :ssociation of t7e Luice and &ectar producing
.ndustry.
/1.+0 HandbooH of indices of -ood Suality and :ut7enticity. aood7ead Publis7ing, /00;
14 CONCORDANCIA CON NORMAS INTERNACIONALES
sta norma oficial me!icana concuerda parcialmente con las siguientes normas
internacionales del ,ode! :limentarius%
PAG# 80
&orma del ,ode! para el <umo FjugoG de naranja conser$ado por medios f"sicos
e!clusi$amente, ,'3= S2:& 54)/09/P
&orma del ,ode! para el <umo FjugoG de pomelo conser$ado por medios f"sicos
&orma del ,ode! para el <umo FjugoG de limn conser$ado por medios f"sicos
e!clusi$amente, ,'3= S2:& 5;)/09/P
&orma del ,ode! para el <umo FjugoG de man<ana conser$ado por medios f"sicos
&orma del ,ode! para el <umo FjugoG concentrado de man<ana conser$ado por
medios f"sicos e!clusi$amente, ,'3= S2:& 81)/09/P
&orma del ,ode! para el <umo FjugoG concentrado de naranja conser$ado por medios
f"sicos e!clusi$amente, ,'3= S2:& 85)/09/P
&orma del ,ode! para el <umo FjugoG de u$a conser$ado por medios f"sicos
e!clusi$amente, ,'3= S2:& 9+)/09/P
&orma del ,ode! para el <umo FjugoG concentrado de u$a conser$ado por medios
f"sicos e!clusi$amente, ,'3= S2:& 91)/09/P
&orma del ,ode! para el <umo FjugoG concentrado y a<ucarado de u$a tipo labrusca
conser$ado por medios f"sicos e!clusi$amente, ,'3= S2:& 95)/09/P
&orma del ,ode! para el <umo FjugoG de pia conser$ado por medios f"sicos
&orma del ,ode! para n#ctares pulposos de algunas frutas pequeas, conser$ados
por medios f"sicos e!clusi$amente, ,'3= S2:& /++)/09/P
&orma del ,ode! para n#ctares de algunos frutos c"tricos conser$ados por medios
f"sicos e!clusi$amente, ,'3= S2:& /15)/09/P
&orma del ,ode! para el <umo FjugoG concentrado de pia conser$ado por medios
f"sicos e!clusi$amente, ,'3= S2:& /19)/09/P
&orma del ,ode! para el n#ctar de guayaba conser$ado por medios f"sicos
e!clusi$amente, ,'3= S2:& /59)/09/P
&orma 6eneral para n#ctares de frutas conser$ados por medios f"sicos
e!clusi$amente, no regulados por normas indi$iduales, ,'3= S2:& /8/)/090P
&orma 6eneral para <umos FjugosG de frutas conser$ados por medios f"sicos
e!clusi$amente, no regulados por normas indi$iduales, ,'3= S2:& /85)/090P
PAG# 81
(#!ico, 3. -. a
M(5$&1 A5$(1+, R/9/
3irector 6eneral de &ormas
PAG# 82

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PROYECTO DE NORMA OFICIAL MEXICANA

La comisin de pesos atmicos y abundancias isotpicas de la Mnin .nternacional de

Maz AzcarCaa omedio Jugo Pulpa

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