INTRODUCCIN

La biotecnologa, juega un rol muy activo en la

produccin :
nuevas molculas, frmacos, qumica fina,
bioingredientes, energa, alimentos y
bioelectrnica



La biotecnologa involucra formas vivientes activas,
microorganismos, y otras entidades celulares animal
y vegetal, que en conjunto ofrecen una gran
biodiversidad de sistemas genmicos y metablicos




. Gracias a numerosos avances cientficos en la
actualidad es
posible efectuar mejora gentica y
molecular de microbios, plantas y
animales para generar biomolculas y proteinas
de importancia industrial y comercial.


















Biotecnologa proviene de dos vocablos:
Bio = vivo o viviente
Tecnologa = la aplicacin de la ciencia para
alcanzar objetivos industriales o comerciales.


Es el campo de la biologa aplicada que
utiliza organismos vivos y
procesos biolgicos en ingeniera,
tecnologa, medicina y otras reas que utilizan
procesos biolgicos.




La biotecnologa se refiere a toda
aplicacin
tecnolgica que utilice sistemas biolgicos y
organismos vivos o sus derivados para la
creacin o modificacin
de productos o procesos para
usos especficos
(Convenio sobre la Diversidad Biolgica,
Artculo 2. Uso de trminos, Naciones Unidas.
1992)













Un conjunto de tcnicas que modifican
organismos
vivos, transforman sustancias de origen
orgnico o utilizan procesos biolgicos
para producir un nuevo conocimiento o
desarrollar productos y servicios
(Organizacin para la Cooperacin y el
Desarrollo
Econmico)






El conjunto de tcnicas o procesos
que emplean
organismos vivos o sustancias que
provengan de ellos para producir o
modificar un alimento, mejorar las
plantas o animales de los que provienen
los alimentos, o desarrollar
microorganismos que intervengan
en los procesos de elaboracin de los
mismos (Sociedad Espaola de
Biotecnologa)






















CRONOLOGA DE

LA
BIOTECNOLOG
A


















CRONOLOGA DE LA BIOTECNOLOGA



1000
0
AC
En la antigua babilonia se usaban las plantas con fines anestsicos





8000
AC
Recoleccin de semillas para replantacin
Mesopotamia utiliz la crianza selectiva de ganado






6000
AC
En medio Oriente se elaboraba cerveza utilizando levaduras.






5000
AC
Los humanos descubren que pueden mejorar cultivos plantando las semillas de las
mejores plantas.






4000
AC
China elabor queso y yogur aplicando la fermentacin lctica.
























2300A
C
Egipto produce pan con levadura






323A
C
Aristteles especula sobre la
naturaleza de la reproduccin y la
herencia.




159
0
Zavaras Janssen inventa el
microscopio






166
5
Robert Hooke utiliza por primera
vez la palabra clula en su libro
Micrographia.






















185
6
Gregor Mendel, realiza experimentos de cruzamientos con guisantes
efectuados en el jardn del monasterio que le permiti descubrir las tres
leyes de la herencia o leyes de Mendel.







186
1
Louis Pasteur, descubri que la fermentacin, que es el proceso que se
usa para hacer cervezas y vinos que se lleva a cabo a travs de
diminutos animales. Pasteur llam a estos microorganismos "grmenes"
y descubri que estos tambin son responsables de esparcir
enfermedades contagiosas. De esta manera logr resolver el problema
de la rabia, y cre vacunas para sta y otras enfermedades mortales,
salvando as muchas vidas.







191
9
Karl Ereky, utiliz por primera vez la palabra Biotecnologa,
para ese tiempo, el termino significaba todas las lneas de trabajo
por las cuales aquellos productos eran producidos de las lneas de
materiales con la ayuda de organismos vivos.
























195
3
James Watson y Francis Crick describen la estructura de doble
hlice del ADN.





196
5
Robert Holley, determin que un gen de levadura estaba
compuesto por 77
bases nitrogenadas.





197
0
Har Gobind Khorana, obtuvo valiosas sntesis de polinucletidos
con secuencias
de bases conocidas y consigui construir en el Laboratorio un gen
completo.




197
3

Stanley
Cohen y
Herbert
Bayer
desarroll
an la
Tecnolo
ga de
recombi
nacin
del
ADN.

























197
6
Har Gobind Khorana, sintetiza una molcula de cido nucleico compuesta por 206
bases nitrogenadas
Robert Swuanson y Herbert Bayer crean Genentech, la primera compana de
Biotecnologa.





198
2
Se produce la insulina como la primera hormona sintetizada por biotecnologa, su
nombre comercial
Humalina de la compaa Eli - Lilly






198
3
Se
cre
la
prime
ra
plant
a
trans
gnic
a y en
1994
apare
ci el
tomat
e
Flavr
Svr, el
prime
r
alime
nto
modif
icado
genti
came
nte
produ
cido
para
el
consumo masivo, modificado para que resistiera ms tiempo despus de madurar.
Estos son plenamente aceptados en Estados Unidos (63%), Argentina (21%), China
(4%) y otros muchos pases.












198
7
Se aplic las huellas genticas (conjunto de mtodos para la
deteccin del
patrn gentico nico de un organismo) pus utilizando rastros de
tejido, sangre
o fludos corporales dejados en la escena de un crimen se us
para declarar
culpable a un violador en Inglaterra.









199
6










La
oveja
Dolly
(5 de
julio
de
1996
14 de
febrero
de
2003)
fue el
primer
mamf
ero
clonad
o a
partir
de una
clula
adulta.
La clula de
la que vena
Dolly era una
ya
diferenciada o
especializada,
procedente de
un tejido concreto, la glndula mamaria, de un animal adulto
(una oveja Fin Dorset de seis aos), lo cual supona una novedad.
Hasta ese momento se crea que slo se podan obtener clones de
una clula embrionaria,
es decir, no especializada





















200
3
Se completa la secuencia del genoma Humano. (Iinformacin contenida
en los
cromosomas, que hacen que el ser humano sea como es y que se pueda
diferenciar de
otros seres vivos. El genoma humano es lo que da identidad a cada uno
de nosotros y
tiene que ver con nuestra historia gentica as como tambin con rasgos
fsicos y
psicolgicos que puedan estar determinados de ante mano: 20.500







200
4
Se organiza el primer foro global de biotecnologa en la Cuidad de
Concepcin, organizado por Chile y la ONU.








2006
A finales
del mes de
octubre
2006la
industria del
sector se
reuni en
Marsella
(Francia)
en la
octava
edicin
de la
Conferen
cia
Europea
de
Biotecnol
oga,
salieron
iniciativas
muy
interesant
es.


















2000-2012
Arroz transgnico rico en -caroteno, podra evitar miles de
casos de ceguera y de otras enfermedades causadas por falta
de vitamina A en la dieta, pero todava no se ha aprobado su
comercializacin.









2009
En Noviembre la Revista Sciencie manifest que un grupo
de investigadores logr detener una enfermedad mortal
cerebral Adrenoleucodistrofia,












2012
Nano-patch, vacuna que prescinde de pinchazos, requiere una
menor dosis y no necesita refrigeracin.
En marzo del congreso Biotecnologa Habana 2012, dedicado
a aplicaciones mdicas, mostr los resultados de vacunas
contra el cncer que no revierten la enfermedad pero mejoran
la calidad de vida del paciente










CLASIFICACION DE LA BIOTECNOLOGA




1. BIOTECNOLOGA ROJA: se aplica a la utilizacin de
biotecnologa en
procesos mdicos. Algunos ejemplos son el diseo de
organismos para producir antibiticos, el desarrollo
de vacunas y nuevos frmacos, los
diagnsticos moleculares, las terapias regenerativas y
el desarrollo de la ingeniera gentica para curar enfermedades a
travs de la terapia gnica.




2. BIOTECNOLOGA BLANCA: conocida como
biotecnologa industrial, es
aquella aplicada a procesos industriales. Un ejemplo de ello
es el diseo de microorganismos para producir un producto
qumico o el uso de enzimas como catalizadores industriales,
ya sea para producir productos qumicos valiosos o destruir
contaminantes qumicos peligrosos (por
ejemplo utilizando oxidorreductasas). Tambin se
aplica a los usos de la biotecnologa en la industria textil, en la
creacin de nuevos materiales, como plsticos biodegradables y en
la produccin de biocombustibles. Su principal objetivo es la
creacin de productos fcilmente degradables, que consuman
menos energa y generen menos deshechos durante su produccin.
La biotecnologa blanca tiende a consumir menos recursos que
los procesos tradicionales utilizados para producir bienes
industriales.










3. BIOTECNOLOGA VERDE, es la biotecnologa
aplicada a
procesos agrcolas. Un ejemplo de
ello es el diseo de plantas transgnicas
capaces de crecer en condiciones
ambientales desfavorables o plantas resistentes
a plagas y enfermedades. Se espera que la
biotecnologa verde produzca soluciones
ms amigables con el medio ambiente que los
mtodos tradicionales de la agricultura industrial.
Un ejemplo es el maz Bt , un maz transgnico
o genticamente modificado que produce en
sus flores protena Cry (Bacillus thuringiensis).
As, cuando las larvas de los insectos
comnmente denominados "barrenadores del tallo"
intentan alimentarse de la hoja o del tallo
del maz Bt, mueren.





4. BIOTECNOLOGA AZUL, tambin llamada
biotecnologa
marina, es un trmino utilizado para describir las
aplicaciones de la biotecnologa en ambientes
marinos y acuticos.
















MULTIDISCIPLINARIDAD DE LA BIOTECNOLOGA




BIOLOGA
CELULAR
BIOLOGA
MOLECULAR
GENTICA
MOLECULAR












INDUSTRIAS:
FARMACEUTICAS,
ALIMENTARIA Y
FORRAJERA, DE
LA
FERMENTACINQ
U MICA


BIOTECNOLOG
A
INGENIERA
DE
PROCESOS

DIAGNSTICO
S MDICOS











QUMIC
A
BIOLOGA
MICROBIOLOG
A BIOQUMICA











IMPACTO DE LA BIOTECNOLOGA APLICADA EN
DIVERSOS SECTORES





1. La biotecnologa y los alimentos
2. La biotecnologa y la industria textil
3. La biotecnologa y la salud

4. La biotecnologa y la industria
del
pape
l
5. La biotecnologa y el medio ambiente
6. La biotecnologa y la energa
7. La biotecnologa y la qumica
8. La biotecnologa y el agro
9. La biotecnologa y los animales







POSIBLES APLICACIONES EN OTROS
SECTORE
S


Desarrollo de diversos tipos de enzimas y microorganismos
genticamente modificados que pueden producir productos
qumicos en
un solo paso, algunos de ellos identificados a travs de
modernos mtodos de bioprospeccin.

Biosensores para el monitoreo en tiempo real de
contaminantes ambientales y tcnicas biomtricas para
identificacin de personas.

Biocombustibles de alta densidad de energa producidos a
partir de la caa de azcar y fuentes celulsicas de biomasa.

Mayor proporcin de mercado para biomateriales como los
bioplsticos, especialmente en nichos en los que pueden
ofrecer algunas ventajas .





MARCO NORMATIVO DE LA BIOTECNOLOGA.




Un aspecto muy importante del negocio de la biotecnologa lo
constituyen
los procesos de regulacin que rigen la industria para maximizar la
seguridad
la mayora de los productos deben examinarse cuidadosamente ,
antes de aprobar su uso. El proceso de regulacin conlleva dos
aspectos importantes:







1. El control de calidad y
2. Aseguramiento de la Calidad






Los productos biotecnolgico estn regulados por:
a. FDA (Food and Drug Administration)
b. EPA (Environmental Protection Agency)
c. USDA (U.S. Department of Agriculture)

















TECNOLOGIAS APLICADAS




1. PCR
2. FINGERPRINT
3. CLONACIN
4. BACTERIAS
GENETICAMENTE
MODIFICADAS
5. GENMINA
6. PROTEMICA







TCNICAS BASE DE LA BIOTECNOLOGA



Proceso de bioseparacin




Definicin: Recuperacin,
aislamiento, purificacin y
refinamiento de productos
sintetizados por procesos
biotecnolgicos.




Definicin extendida: Etapas de
refinamiento final de procesos tales
como tratamiento de efluentes y
purificacin de agua por
biotecnologa.










Necesitamos aplicar mtodos de bioseparacin para:




Enriquecimiento del producto objetivo.
Reduccin de volumen.
Remocin de impurezas especficas.
Mejoramiento de la estabilidad del producto.
Alcanzar las especificaciones del producto.
Prevencin de la degradacin del producto.
Prevencin de otras catlisis diferentes a las deseadas.
Prevencin de envenenamiento del catalizador.







RETOS EN INGENIERA DE BIOSEPARACIONES




Bajas concentraciones de producto.
Gran nmero de impurezas.
Termolabilidad de bioproductos.
Estrecho margen de operacin de pH y fuerza inica.
Baja solubilidad de bioproductos en solventes orgnicos.
Inestabilidad de bioproductos en solventes orgnicos.
Estrictos requerimientos de calidad.
Porcentaje de pureza.
Ausencia de impurezas especficas




Un proceso ideal de bioseparacin debe combinar alta
capacidad con
alta selectividad, y debe asegurar estabilidad del producto.



PRODUCTOS BIOLGICOS


Produc
to

Naturaleza de la
bioseparacin requerida
Bebidas
alcohlicas:
Cerveza, vino,
licores

Clarificacin, destilacin.

cidos orgnicos:
cido actico, cido ctrico

Precipitacin, filtracin,
adsorcin, extraccin con
solventes

Vitaminas:
Vitamina C, vitamina B12,
riboflavina

Precipitacin, filtracin,
adsorcin, extraccin con
solventes

Amino cidos:
Lisina, glicina, fenilalanina

Precipitacin, filtracin,
adsorcin, extraccin con
solventes

Antibiticos:
Penicilinas, Noemicita, Bacitacina

Precipitacin, filtracin,
adsorcin, extraccin con
solventes

Carbohidratos:
Almidn, azcares, dextrinas

Precipitacin, filtracin, adsorcin

Lpidos:
Glicerol, grasas, cidos grasos

Precipitacin, filtracin,
adsorcin, extraccin con
solventes



PRODUCTOS BIOLGICOS


Produc
to

Naturaleza de la
bioseparacin requerida
Protenas:
Alimentos y sus aditivos
Nutracuticos
Enzimas
industriales
Hormonas
Enzimas farmacuticas
Productos derivados de
plasma Anticuerpos
monoclonales Factores de
crecimiento Trombolticos
Protenas derivadas de r-
DNA Protenas de
diagnstico Vacunas

Filtracin, precipitacin,
centrifugacin,
adsorcin,
cromatografa,
separaciones basadas en
membranas





PRODUCTOS BIOLGICOS





Produc
to

Naturaleza de la
bioseparacin requerida
Productos basados en
DNA: Pruebas de DNA,
plsmidos,
nucletidos,
oligonucletidos

Filtracin, precipitacin,
centrifugacin,
adsorcin,
cromatografa,
separaciones basadas en
membranas




Un buen proceso de separacin:
Asegura la pureza deseada del producto.
Asegura la estabilidad del producto.
Mantiene costos bajos.
Es reproducible.
Es escalable.
Cumple con las regulaciones establecidas.








La economa del proceso est determinada por:



Capital invertido

Costos de operacin


Otros factores

Eficiencia de las operaciones unitarias individuales


Prdidas en cada etapa


Destruccin o degradacin del producto
durante el proceso

Estado fsico del producto al final de cada etapa.


Costo del tratamiento del efluente



ESTRATEGIAS PARA BIOSEPARACIN



La estrategia est basada en como estos mtodos pueden ser
mejor
utilizados para una separacin dada.




Se necesita tomar en cuenta lo siguiente:


El volumen de la corriente de proceso


La abundancia relativa del producto en esta
corriente de proceso.

El uso que se le intenta dar al producto, esto es,
requerimientos
de pureza.


El costo del producto.

Requerimientos de estabilidad.









ESTRATEGIA CONVENCIONAL


Recuperacin, aislamiento, purificacin y refinamiento.



Las tcnicas de baja resolucin, alta capacidad (por ejemplo,
precipitacin,
filtracin, centrifugacin, cristalizacin) se usan primero para
recuperacin y aislamiento










Las tcnicas de alta resolucin (por
ejemplo,
adsorcin, cromatografa, electroforesis) son
entonces usadas para purificacin y
aislamiento

MTODOS DE BIOSEPARACIN





BAJA RESOLUCIN

ALTA CAPACIDAD
ALTA RESOLUCIN
BAJA CAPACIDAD





Ruptura celular
Precipitacin
Centrifugacin
Extraccin lquido-
lquido
Percolacin
Filtracin
Extraccin con
fludos
supercrticos
Microfiltracin
Dilisis










Ultracentrifugacin
Adsorcin

Cromatograf
a de lecho
empacado
Separacin por
afinidad
Electroforesis
















MTODOS DE BIOSEPARACIN









ALTA RESOLUCIN-ALTA CAPACIDAD

Ultrafiltraci
n
Cromatografa de lecho fluidizado
Cromatografa de membrana
Cromatografa de columna inica


PROPIEDADES DE LAS TCNICAS DE
PURIFICACIN COMNMENTE
USADAS

Tcnica Propieda
d
explotad
a
Capacidad Resoluci
n
Rendimien
to
promedio
Costo Composici
n muestra
Composici
n
producto
Precipitaci
n por pH
Carga alta MUY BAJA MEDIA BAJO >1 mg/ml Volumen
pequeo
Concentraci
n alta
Precipitaci
n con
(NH4)2SO4
Hidrofobicida
d
ALTA MUY BAJA ALTO BAJO >1 mg/ml I alto
Volume
n
peque
o
Concentraci
n alta
Extraccin
en dos
fases
acuosas
MEZCLA
BIOAFINIDA
D
ALT
A
ALT
A
MUY
BAJA
ALTA
ALTO
VARIABL
E
BAJO
ALT
O
Puede
conten
er
slidos
Concentraci
n de
polmero
alta
Cromatograf
a de
intercam
bio inico
CARGA MEDIO MEDIO MEDIO MEDIO I Bajo
pH correcto
I alto
pH diferente
Cromatograf
a de
interacci
n
hidrofbi
ca
Hidrofobicida
d
MEDIO MEDIO MEDIO MEDIO I alto I Bajo
pH diferente




PROPIEDADES DE LAS TCNICAS DE PURIFICACIN COMNMENTE USADAS



Tcnica Propieda
d
explotad
a
Capacidad Resolucin Rendimien
to
promedio
Costo Composici
n muestra
Composici
n
producto
Cromat
o-
enfoque
Carga / pI BAJA ALTO MEDIO ALTO I BAJO Presencia
de
anfolitos
Cromatogr
a- fa de
afinidad de
teido
Mezcla MEDIA ALTO MEDIO MEDIO


pH neutral


pH diferente
Cromatogr
a- fa de
afinidad de
ligando
Bioactivida
d
MEDIA-
BAJA
MUY ALTA BAJO ALTO Dependien
te sobre el
ligando
Condicione
s de
desnaturali
za cin
potencial
Cromatogr
a- fa de
permeaci
n en gel
Tamao MUY BAJA BAJA ALTO MEDIO Volumen
bajo
Diluido







MANEJO DE MICROORGANISMOS


Todos los paquetes que contengan cepas microbianas deben ser
abiertos en un
laboratorio equipado para trabajar con microorganismos.
Por tanto, los cultivos han de ser manejados por personal
entrenado y competente en tcnicas microbiolgicas o hacerlo
bajo supervisin del mismo.









Antes de manejar material microbiolgico, el usuario ha de ser
consciente de
las regulaciones existentes a nivel
nacional para el trabajo con microorganismos y
cumplirlas.
El cultivo y el manejo de microorganismos estn restringidos a
laboratorios que cumplan los requerimientos de contencin
establecidos por la autoridad
nacional para evitar el escape o dispersin del agente biolgico.










1. IDENTIFICACIN DEL AGENTE BIOLGICO























El material proporcionado es de uso exclusivo de
laboratorio y viene
identificado con el nombre cientfico de la cepa, el nmero de
catlogo
de la coleccin y la forma de presentacin (lifilo, cultivo
activo u otras).







2. IDENTIFICACIN DE LA PELIGROSIDAD


Cada microorganismo suministrado est clasificado de
acuerdo con la legislacin. Cualquier
microorganismo, independientemente
del grupo de riesgo al que
pertenezca, puede ser patgeno en
determinadas condiciones.




Conocer que microorganismos tienen la capacidad de
producir Toxinas.





Se debe evitar cualquier contacto directo con el
microorganismo o sus aerosoles, en
especial la inhalacin o el contacto con
piel y ojos.








3. PRIMEROS AUXILIOS



En caso de contacto, lavar bien
la piel contaminada con
jabn antisptico y agua
abundante. Si se sospecha la
contaminacin de heridas, o
se ha
producido una ingestin o
inhalacin fortuita, se
deber buscar
inmediatamente atencin
mdica, y se
informar al facultativo del
nombre del
microorganismo.






4. MEDIDAS EN CASO DE VERTIDO O DERRAME DEL CONTENIDO DEL
ENVASE
SUMINISTRADO. PRECAUCIONES AMBIENTALES



Descontaminar/esterilizar/autoclavar todo el
material que haya podido estar en contacto con
el cultivo microbiano.





Mantener los cultivos alejados de desages,
agua superficial o subterrnea y suelo.





Si se rompe accidentalmente el lifilo/envase
que contiene los microorganismos,
empapar el rea contaminada con un
desinfectante apropiado. Los fragmentos
de vidrio han de ser eliminados con
pinzas, para evitar cortes accidentales.









5. MANEJO Y ALMACENAMIENTO





Los lifilos o envases
conteniendo los
cultivos han de
ser abiertos y
manejados por
personal
entrenado en un
laboratorio del nivel
adecuado de
seguridad.










6. CONTROLES DE EXPOSICIN. PROTECCIN DEL
PERSONAL






Depende del grupo de riesgo al
que pertenezca el
microorganismo y est
regulado por la
legislacin nacional. Se
minimiza la exposicin de
los trabajadores
combinando por ejemplo
el uso de recintos
controlados, tales como
cabinas de seguridad
biolgica, con otras
medidas de precaucin,
como guantes
protectores, gafas y batas
de laboratorio.







7. ELIMINACIN DEL MATERIAL







Todos los recipientes que contienen cultivos
deben esterilizarse una vez utilizados.
La esterilizacin se llevar a cabo
mediante tratamiento por calor
hmedo en autoclave a
121C durante 20 minutos. Esto es
aplicable tambin a las batas de
laboratorio u otros materiales
resistentes al calor. El material inerte
(vidrio, metal) puede ser esterilizado
tambin en estufa de calor seco a 170-180C
durante 2 horas.