Tema 3: La fosforilacin oxidativa y la

fosforilacin
1. Bases bioenergticas:

Las clulas son sistemas abiertos que intercambian materia, energa e informacin
con el medio. Las membranas que estas posen son necesarias para el mantenimiento
de su identidad y para el intercambio de sustancias con el medio.
La energa que utiliza la Tierra procede del Sol. Esta energa solar es capturada
mediante la fotosntesis y la fosforilacin. La cantidad de energa que llega a la tierra es
de 3x10
31
. Solo el 1% es captado por los organismos.
Peter Mitchell y su teora quimiosmtica nos explica que la impermeabilidad de la
membrana tilacoidal a los H+ es uno de los factores ms importantes en la produccin
de ATP. Al igual que en la respiracin celular, una serie de complejos se disponen a
travs de la membrana. En estas, dos tipos de transportadores de protones, extruyen
protones desde el estroma hasta el lumen tilacoidal. En cuanto a las bacterias, el
espacio perimsmico (entre la membrana plasmtica y la pared celular) es el espacio
equivalente al espacio intermembrana. Un complejo comn, tanto para la
fotofosforilacin como para la respiracin celular es la ATP-sintasa. Ambos procesos se
resumen en tres caractersticas comunes. Ambos utilizan el transporte de electrones a
travs de transportadores de memrbana. La energa libre desprendida de las
reacciones oxidativas exergnicas entre los complejos es usada para produccin de un
gradiente H+. Este gradiente se canaliza atravs de un poro transmembrana donde se
se dispone la ATP-sintasa, un complejo que utiliza dicho gradiente para sintetizar ATP.
2. Fotofosforilacin:

2.1. Transduccin de la energa:

La fotosntesis del carbono ocurre en dos fases llamadas fase fotoqumica y fase no
fotoqumica. Ambas estn reguladas por la presencia de luz. En la primera el CO2 atmosfrico
se fija en forma de carbohidratos mientras que en la segunda , dicho CO2 fijado es degradado
hasta obtener ATP.
Reaccin de Van Niel
Los electrones no provenan del CO2 sino de la fotlisis del agua.
Reaccin de Hill
La fijacin de la energa solar
Reaccin de Severo Ochoa
La fotosntesis ocurre en los cloroplastos y en las membranas bioenergticamente
competentes de las bacterias capacitadas para ella. El cloroplasto se compone de una doble
membrana. Dentro de la segunda membrana, se disponen sobre el estroma una serie de
tilaocides, que pueden estar apilados (formando la grana) o no. Tres membranas en total
componen el cloroplasto, la externa, la interna y la tilacoidal. En el interior del tilacoide se
dispone un lumen. La permeabilidad selectivas de todas estas permiten que se realice la
fotosntesis.
Los cloroplastos y sus pigmentos solo pueden captar la energa solar comprendida dentro del
espectro visible (desde los 280 hasta los 750nm de ). Un cromforo es una molcula capaz de
captar la energa del espectro visible y la del ultravioleta. Cuando los fotones de la luz irradian
sobre los electrones de un atomo, el electron viaja a un orbital superior. As el atomo se escita
y se vuelve inestable. Para recuperar su estabilidad, libera energa en forma de luz
(fluorescencia) o calor o transmitir la energa a otra molcula (trasnferencia de excitn). Esta
energa liberada siempre es menor a la energa del fotn. Grupos como el grupo azo, el grupo
nitro y el sistema conjugado, son cromforos.
Cada pigmento absorbe una cantidad distinta de enrga dentro del espectro visible del a luz. La
clorofila absorbe la luz desde los 400 hasta los 700. El restoque no capata es llamada ventana
verde. Los pigmentos auxiliares recogen esta luz no aprovechable por la clorofila. Por ejemplo
la ficocianina (una ficobilina) es un pigmento azul que dota de un color verde azulado a las
cianobacterias que tambin albergan clorofila. Otros pigmentos auxiliares son lso carotenos y
las xantofials (rojas y anaranjadas).
La clorofila tiene una estructura cilndrica plana, parecida a la hemoglobina. Los atomos de
nitrgeno que estn orientados alrededor del Mg en lugar del Fe.10 dobles enlaces conjugados
estn presentes a lo largo de la estructura de la clorofila. Esta caracterstica es la que le
permite captar la amplitud de onda que capta. La clorofila desciende de la bacterioclorofila. En
el anillo 1 del grupo hemo de la bacterio clorofila posee una cadena diferente y en el anillo 2
desaparee un doble enlace.
Los pigmentos fotosintticos se agrupan en fotosistemas. Estos se organizan en una antena
encargada de captar la luz y en un centro activo que transduce la energa. La antena est
constituida por numerosas protenas y por pigmentos. Estas protenas van a disponer a los
pigmentos de tal modo que propicia a que la captacin de energa solar sea la ptima. La
energa del fotn necesita ser exactamente la misma energa para que esta sea transferida.
Esto no siempre es as, as que las antenas disponen.
Cuando la energa es demasiada, a veces liberan parte de esta en forma de calor o de luz. En
cambio, las antenas al estar inversas en el lumen, esto no es posible.
El mecanismo por el que suceden la fosforilacin oxidativa y la fotofosforilacin es muy similar.
L
La libneracion de oxigeno concominante es independiente de la del co2 atmosfrico.
Las reaccioens fotoqumicas tienen lugar en lso fotosistmeas donde la engia es captado pi la
entan y transducida por un sistamfotquimico
LA tranferencia de exciton entre los pig foto sucede en estadosolido virtual.
Solo las clorofilas son capace de tranducr la energa lumna en qumica.
La compleidad de un sistema biolgico no ivene determinada por los elementos que los
contituyen sino por la interaciones que se establecen entre ellos. Las cuales emergen de las
propiedads de la neuvas que no son explicabls desde la anlisis de los elementos por separado.
2.2. Revolucin del oxgeno:
La atmosfera estaba compuesta por nitrgeno, dixido de carbono y otras formas de nitrgeno
y carbono. De este modo, los procatiotas eran autrotofos quimiolitotrofos. LA maquinaria
necesaria para acoplar la sntesis de atp apareci muy temprano. Algunos procariotas
consguieron acoplar sus membranas a la produccin de atp. Las cianobacterias aparecen aprox
2.5 ma. Estas, proporcionarion una fuente casi ilimitada de O2 necesaria para la respiracin.
Sus descendientes evolutivos(las algas) heredaron esta cualidad. Una vez aparecen las
cianobaterias, la atm se va enriqueciendo en O. En esta poca, adems de existir las
cianobactrias existan otros procariotasque empleablan una fotosntesis anoxigenica. Unas
usasban el S. Lo acumulaban en el citoplasma (purpuras) o se liberan al espacio extracelular
(verdes S). Otros usaban compuestos inorgnicos como donadores de electrones (acido
lctico) entre 300 y 1000 ma para que el O recubriese toda la atm. Fue el mayor fenmeno de
contaminacin sobre la tierra. Esta, propicio lae xtincion de otros muchsimos procariotas
cuyos acoplamientos quimiosmoticos eran menos rentables.
El efecto toxico del O subproducto de la nueva modalidad fotositetica, ha determinado el
desarrollo del oranismos de proteccin con el-
La capacidad de las cianobacterias para obtener ato mediante pequeas molecuasl
rooganizacionde su candea transpordatora de elctrones refleja el origen comn de la
fosforilizacion y la fotofosforilacion
3. Fotosntesis del carbono:

4. Fotosntesis del nitrgeno:

5. Fotosntesis del azufre:

Solo la realizan las bacteras del S. Compuesto por:
Citocromo BC1 (parecido al complejo III de la mitocondria)
ATP sintasa
Centro de reaccin P870 (mximo de absorcin a una de 870nm)
Feoficina
Los electrones se transfieren desde P870 hasta BC1 y de BC1 a P870 (ccilo). En este
proceso participa una quinona desde el centro de reaccin hasta el BC1. Transporta los
electrones de uno en uno y es liposoluble. Proteina pequea de la cara citoplasmtica, el
citocromo C2.
Todo el gradiente de protones est impulsado por la luz. Por cada dos electrones se
bombena cuatro protones hasta el espacio periplsmico. La fuerza protn motriz asociada a
todo esto, pone en marcha a la ATP-sintasa. Los H+ a traviesan el poro transmembrana
concreto donde se encuentra la ATP-sintasa.
Centro de reaccin feoritina-quinona. Se descrubri cristalizndola. Se compone de dos
dominios (subunida M y L que son lipofilicas) y las subunidades H y citocromo C que se situan
en el lado periplsmico. Las unidades L y M forman un cilindro casi perfecto donde se situa una
quinona en una posicin casi simtrica junto a otra. Un atomo de Fe se situa tambin en esta
cara. Se situa en una posicin equidistante entre las dos quinonas. Los distintos estados redox
del Fe facilitaran la trasferencia de electrones.
Tambin alberga feofitina como antena del fotosistema para excitar al complejo en
presencia de luz. La bacterioclorofila del centro de reaccin en estado excitado va a transferir
un electron a la feofitina de una forma muy rpida (nseg) la transferencia del eletron desde la
feofitina hasta la quinona tambin es muy rpida. En el orden de mcirosegundos esta quinona
le cede al hierro a (pasa de hierro 2 a hierro 3) para que lo acepte la siguiente quinona. La
transferencia ocurre a lo largo de L (donde se encuentra el fotosistema y la primera quinona) y
M (donde est la quinona que va a viajar) es quien recibe el electron. Como la quinona es
liposoluble llegara hasta el citocromo BC1.
Por cada 2 electrones que mueve la quinana, 4 protones se desplazan al espacio
periplsmico. Una vez son trasnferidos hasta BC1, se restaura la cantidad de electrones del
fotosistema. Las bacterioclorofilas y la feofitina se encuentran en una posicon tal que hace que
la transferenia de exciton y de electron ocurren ne un estado solido-virtual (es como si no
pudieran moverse) propiciando as que la tranferencia del electron sea optima. Esto permite
que el proceso sea sumamente rpido e irreversible (eficiencia muy elevada).
En las bacterias verdes del S la reduccin del NAD+ sucede atraves de la transferencia no
cclica de elctrones. La cadena transpordadora consta de ferrodoxina. Es otra protena
transmembranal que transporta electrones de 1 en 1. Mientras que un fujo de electrones sigue
un transporte ccilo, otros van a unirse a la ferredoxina. La ferrodoxina forma un complejo con
el NAD para transferir los electrones.
Cuando el fujo es lineal, el que devuelve los electrones es el sulfuro de hidrogeno a la
bacterioclorofila.
En el caso de las cianobacterias, de las algas verdes y de los vegetales superiores, el
rpoceso es mas complejo. Consta de dos fotosistemas. En el II ocurre la fotolisis de agua y en le
I se oxida el NAD. As, los dos fotosistemas se excitan de forma separada pero actan de forma
conjunta. El gradiente electroqumico almacenado en le lumen del tilacoide es el que se utiliza
para sintetizar ATP.
En la membrana tilacoidal, consta de tres complejos.
Fotosistema II PSH: centro de reaccin P680
Fotosistema I: centro de reaccin P700
Citocromo B6F
Los electrones se transfieren a travs de plastoquinona (de II a I) y plastocianina (desde
Citocromo hasta I) y la ferrodoxina (protena pequea que transfiere los electrones de I en I
hasta la ferrodoxina-NADP-reductasa)
2H2O + 2NADP + 8 fotones + 4e- -> O2 +2NADH + 2H+
Para que estos cuatro electrones sean transferidos, se necesitan 8 fototones, cuatro de ellos
absorbidos por el fotosistema I y otros cuatro abosrbidos por el fotosistema II.
Desde el punto de vista funcional y estructural B6F es muy parecido al complejo III
mitocontrial. El fotosistema I y II parecido al de las bacterias.
Fotositema II:
Al igual que en las bacterias purpuras, los electrones se transfieren atraves de la subunidad D1.
Unicamente interviene la plastoquinona en la transferencia de los electrones. El par especial
esta compuesto por clorofila. Cuando lellega un exciton de la antenba y se excita, transfieren
su electron a la feofitina. La feofitina la trsfiere a la plastoquinona de la subunidad D1. Esta se
lo transfiere a otra plastoquinona a travs de un atomo de hierro que pasa pro distintos
estados redox. Los electrones son repuestos por los que se liberan en la fotolisis del agua. La
clorofila oslo acepta electrones de uno. Por eso, un complejo encimatio (complejo de excisin
del agua). Este adopa cinco estados redox diferentes en el que intervienen cuatro atomos de
manganeso. Este complejo pasa a estadso cada vez ms oxidados conforme pierde
manganeso. Esto esta asiociado a la absorcin de un foton (capatado por FII). Al final, el estado
de oxidacin que posee es tal que capata 4 electrones del tiron (gracias aun residi de tiroxina
que actuacomo mediador para devolver de uno en uno los electrones al FII).
Cuando la plastoquinona recibe los electrones del FII y se reduce, transfiere los electrones a
B6F. A este proceso se le asocia la transferencia de 4H al lumen tilacoidal. La plastocianina solo
transporta electrones de uno en uno. Es un homodimero (dos protenas idnticas) una con un
citocromo b6 con un grupo hemob6 yotra con hemo bh. El citocromo f
Hace una caverna para albergar el paso de los electrones.
Como el volumen del tilacoide es muy reducido, el transporte de H hace que el cambio del pH
del lumen sea bestial. Tiene un pH de 2. Es una fuerza electron motriz enorme.
Fotosistema I:
Es un complejo supramolecular ocmpuesto por tres complejos idnticos. Consta de 11
polipetidos, de clorofila y de carotenos. La disposiscion de estos elementos es tal que la
transferencia de electrones es ptima. Solo las sub A y B van a participar en la transferencia
electrnica, aunque se piensa que algunos integrantes de C juegan algn papel-.
Llega un excito al centro y el electron es liberado a una molecula llamada ELEMENTO A
0
. Se
piensa que su estructura es parecida a la clorofila A y que actua como una feofcina. Trasnfiere
el elctron a una filoquinona. LA filoquinona se lo da a la ferrodoxina a tra ves de otros
transportadores tmabien desconocidos. A la paraece ocurre a taves de complejos
ferrosulfurados. Tampoco se conoce si las dos sub unidades del FI son activas o si solo una de
ellas funciona y por la otra solo viajan electrones. Una vez que son capatados por la
ferrodoxina, los electrones son trasnferidos al NADP por el complejo ferrodoxina-NADP-
reductasa.
REGULACION
El fujo de electgrones desde los fotosistemas hasta NADP. Bajo ciertas condiciones, el FII se
inactiva y solo funciona el FI propiciando un fujo cclico de electrones en el que no se expulsa
oxigeno a la atm. Inteviene la feocianana, la ferrodoxina y la quina Todo el transporte va a
compaado del bombeo de H a trave de la membrana para sintetizar ATP. Pero, no se
sintetiza NADH. Las plantas potencian el fujo de electrones con solo el FI activo para favorecer
la produccin de ATP cuando precisan de l.
Estados de transicin de los cloroplastos:
Una membrana regula la transferencia de exitones a travs de procesoso de regulacin. Los
grana, bien aisladas o conectadas, precisan de una serie de enzimas para regular este proceso.
El fotositema II solo esta en la grana mientras que el FI y la aTP esta en las lamelas y el
complejo citocromo por todas partes. Una proten-quinasa y una proten-desfosfotasa regulan
el proceso. Si un fotositema II (mucho azul) recibe mucha luz, la velocidad de la plastoquinona
reducida empieza a aumentar mucho progresivamente. Cuando supera un determinado
umbral, la protein qinasa fosforila la antena del fII para inactivar la antena. Ocurre un cambio
conformacional que propicia su disociacin del fotosistema. La plastoquinona reducida
disminuye y cuando llega a un umbral se activa la proten-desfosfatasa que desfosforila a la
antena del FII-P680 para que vuelva a unirse a l.
---
El flujo cclico de electrones impulsado por la luz proporciona la energa necesaria para
generar la ferza proton motriz que dirge la sntesis de ato.
Elgradiente electroqumico de protones atraves de la mmbana bateriana se genera gracias al
ciclo q asociado al transporte de electrones a trav es del complejo cit bc1
Las bacterias purpura empelan la produccin de nad catalizada por la nad desih parte de
engergia alamcianad e ene gracientre electroqumico de protones.
Las intesis del nadh po el complejo ferredoxina nadh reductasa de las bacterias verdes dela S
un dfujo no ciclio de e

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Los e procedentes del centro de reaccin del P700 pueden emplearse en la reduccin de nadp
(flujo lineal) o alternativamente regresalal pool de plastoquinona (flujo cclico)
La luz regula las trascicione de stado ce cloroplasto determan el tipo de flujo electro el cual asu
vez austa las necesidad metabolicas celulares las canitades relativas de atp y nadh producidos.
Fotofos: reaciones redox exergonicas acopladas en las que la luz activa dichas reacciones
redox.
Dado que la membrana del tilacoide es impermeable alos protones, estos para regresar al
estroma no tienen mas camino que atravesar un poro especifico de membrana. Este paso
proporciona la energa necesaria para que la atpsintasa acople la energa de la fosforilacion
con la energa luminca.
La atp sintasa cloroplastidica es muy similar a la atp sintasa de la mitocondria. Es un claro
ejemplo de como las estructura de una molecula ejerce su funcin. Es una atpasa tipo F con
una caracteritica de cabeza tallo. PRoteian de membrna. La cabeza apolar es el domino
actalitico enzimtico. Sub alfa y beta y psilon. Hemo= centros catalticos.

Durante la fosforilazin del ADP, solo las subunidades beta de F1 son las que participan en
dicha reaccin. F1 contiene tres sitios catalticos, dispuestos entre gajo de naranja beta y alfa
(interfases beta-alfa). Las subunidades beta aisladas no poseen la misma afinidad por el atp
que cuando se encuentran formando F1 con las subunidades alfa y con la subunidad gamma.
Asimiliacion del carbono atm:
Los organismos fotosintticos solo utilizan el CO2 como fuente de carbono. Las molculas
encargadas de la fijacin del carbono se encuentran en el estroma cloroplastidico. Al final de
este proceso, una triosa fosfato puede es sintetizada. Puede usarse como almacenacen de
carbono, como nutriente para zonas no fotosintticas Las diferentes vas que componen esta
ruta estn controladas y reguladas.
La glucolisis vegetal es distinta a la glucolisis animal. Los organismos fotosisnteticos realizan la
luz va a influir en la regulaucin a travs de la reduccin de enlaces disulfuro por electrones
que fluyen desde el PSI, por cambios de pH y de la concentracin de Mg2+ por captacin de
energia solar, por regulacin alostrica por uno o mas intermediarios metablicos y por
modificacin covalente por fosforilacin.
La asimilacin del carbono atm se realiza atraves del ciclo de clavin. Se puede dividir en tres
estapas:
Fijacin del carbono atm atravs de la ribulosa 15bifosfato.
Reduccin del carbono por ATP y NADPH (en plantas) y NAD (en microbios) utilizado para
convertirlas en triosas fosfatos
Generacin de la rubisco usando parte de estas triosas se utilizan para regenerar a la rubisco.
El rendimiento neto de este ciclo suma un total de 6 triosias fostatos, 5 de ellas destinadas a la
regeneracin de la rubisco.
La reaccin catalizada por la ribulosa es muy exergnica (-51KJ/mol). Tambin se denomina
oxigenasa, debido a que la ribulosa, tambin puede actuar sobre el O2 atmosfrico.
V Rubisco: 3moleculas de CO2/s Es una velocidad muy baja, por eso las plantas albergan esta
enzima en abundacia en sus clulas. Las plantas superiores constituyen a la rubisco por 8
subunidades pequeas y por skdjfks grandes.
El genoma nuclear y el cloroplastidico colaboran en la formacin de rubisco. Las grandes por el
genoma cloroplastdico y las pequeas por el genoma nuclear.
Se piensa que las sub peq ayudan a la integridad de la molecula mientras que las grandes
calatizan la fijacin del carbono.
La concentracin de rubisco es muy superior a la de CO2 (milimolar) de dos a cinco mmolar. El
CO2 se encuentra a una concentracin de micromolar. La eficiencia tan baja de esta enzima,
necesita ser compensada por una alta concentracin (superando incluso la del mismo sutrato
cuando esto normalmente, en otras reacciones no es asi).
La enzima nicamente es activa cuando la lisina forma un carbamato. Esto genera un cambio
estrural en la sub grande que es estabilizada por iones mg2+. Conforme entran H al lumen,
entran cloros y salen magnesios hacia el estroma. De este modo, se favorece la integridad y la
formacin de la rubisco.
El segundo sustrato de la enzima, es un sutrato enodiol que mediante un ataque nucleofilico al
CO2, se forma un segundo intermediario un beta cetoacido. Esta molcula es el resultado de la
fijacin del carbono a un esqueleto molecular propio de la planta. <- Mecanismo de activacin
Otro mtodo de activacin es que cuando no esta carbamilada, se une una ribulosa bifosfato.
El mecanismo redox estimulada por la luz, con el consumo de atp, libera la ribulosa bifosfato
del centro activo para que pueda ser carbamilada.
Por las noches se sintetiza un inhibidor nocturno anlogo a la estructura del betacetoacido
para unirse a la rubisco (Tambien estabilizado por mg2+). Una enzima rubisco activasa, desune
estos dos compuestos en presencia de luz.
El tres fosfoglicerato, con gasto de atp de la fosforilacion se transforma en tres bifosfoglicerato
y este por la actuacin de nadhp en griceraldehido tres fosfato, y este en
dihidroxicetonafosfato o gliceraldehido (3%).
La fructosa 6 fosfato es el compuesto por el que se sintetiza el inhibidor nocturno.
Gran parte del carbono fijado se utiliza para formar pared celular (celulosa) otra parte en
sintetizar almidon y otra parte en usar la triosa fosfato para degradarla en la glucolisis.
Gliceraldehido y acetonabifosfato > fructosa -> desfosforilada hasta fructosa 6 fosfato ->
transferasa transfiere dos atomos hasta la f6P para dar celulosa 5 fosfato (y a eritrosa y
Al final del proceso se forman tres PENTOSAS fosfato.
La nitrato reductasa se encuentra altamente regulada en las clulas del mesfilo. Cambios
conformacionales, uniones covalentes o variancion en la cantidad de sustrato. Le enzima tiene
una tasa de vida muy corta. Expresin de un gen por luz. La transcripcin regulada por amonio
(nacido de la accin de la nitrato) y por glutamato (la inhiben). Estricto control de la actividad
enzimtica. Proteina adaptadora 1433. Equilibrio dinmico de la nitrato. La luz tambin activa
otra enzima.
Regulacion
Fosforilacion reversible e intercacion con otra enzima que induce un cambio conf
Reductato quinasa nitrato
Dominio de calmodulina de la enzima (centro alostrico)
La quinasa actua en oscuridad
Fosforila serina entre el domnio hemo y el molibdeno.
Inacitivacion reversible
Protein fosfatasa en presencia de luz.
En oscuridad 1433 inactiva la enzima. Solo actua cuando hay iones mg
1433 tambien inactiva la sacarosa sintasa.
Esto permite que los esqueletos C se encuentre en furctosa o glucosa.
Regulacion coordinada tambin por la accin del Ca
1433 tambien regula la ctividad de la atpasa de membrana
Regula la entrada de nitrato (simporte)
1433:
Importancia en la reduccin de la nitrato
De la sacarosa sintasa
En rutas anabolizas