GUIA DE PRACTICAS DE

LABORATORIO








RESPONSABLE DEL CURSO:
Dra. Luz Maria Huaroto Valdivia






















Practica N 1

FASES DEL PROCESO DIAGNSTICO POR EL LABORATORIO

Fase Pre-analtica:
o Preparacin del paciente
o Recoleccin de la muestra
Fase Analtica:
o Manejo de muestra y
o Control de calidad
Fase Post analtica
o Reporte de resultados: Unidades SI y otras
o Valores normales


EXAMEN DE ORINA

INTRODUCCIN

En 1827 Richard Bright introdujo el anlisis de orina como parte del examen
mdico de rutina.
Dos caractersticas nicas hacen que la muestra de orina sea un examen
importante para la evaluacin del paciente:
1.-La orina es una muestra fcil de recolectar.
2.-La orina contiene informacin sobre muchas de las funciones metablicas,
el equilibrio acido-bsico, hidratacin adems de enfermedades renales.

OBJETIVOS
Al finalizar la prctica el alumno podr realizar un examen completo de
orina en sus tres partes: Macroscpico, Bioqumico y Microscpico
siguiendo el protocolo establecido por el laboratorio.
El alumno interpretar el resultado y podr realizar la correlacin clnica
adecuada..

PROCEDIMIENTO PRCTICO

1. OBTENCIN DE LA MUESTRA DE ORINA:

La muestra se obtiene por Miccin espontnea: Volumen apropiado
50-80 ml.

Es importante transportar rpidamente al Laboratorio antes de las dos
primeras horas de tomado la muestra, de lo contrario refrigerar a 2-8 C.

2. PROTOCOLO DE TRABAJO:

Examen Macroscpico de la Orina:

Color
Aspecto
Densidad
Olor


Examen Bioqumico de la Orina:

Materiales:
1.-Frasco de tira reactiva de orina
2.-Equipo lector de tira reactiva de ser lo posible, de no ser as se leer
manualmente.

Fundamento:

En un soporte slido (Qumica seca), se encuentran reactivos que
reaccionaran con las sustancias presentes en la orina, mediante una
escala cromtica.
La lectura es vertical comparado con los parmetros normales que
indica el frasco.
El resultado se obtiene antes de los 2 minutos.
Su uso es prctico y de alta bioseguridad.
Materiales:
Tubos de ensayo
Tira Reactiva

Procedimiento tcnico:

1.- Embeber la tira reactiva a la muestra por 2- 4 segundos, escurrir, dejar
reaccionar y transcurrido UN minuto realizar la lectura.














2.- Proceder a leer comparando la escala de valores como sigue:



Examen Microscpico de la Orina.

Fundamento:
El propsito de este procedimiento se identifica y cuantifica los elementos
celulares y cristales presentes en la orina.

Materiales:
*Tubos de ensayo de vidrio 13 x 100 15 x 100
*Centrfuga
*Lminas y laminillas
*Microscopio

Procedimiento tcnico:
1.-Mezclar por rotacin el frasco de orina
2.-Vertemos en un tubo de ensayo 10-15 ml de la orina.
3.-Luego de forma inmediata centrifugar a 2,500-2,800 rpm por 5 minutos.
4.-Decantar el sobrenadante de la orina centrifugada.
5.-Agitar de forma suave por rotacin el tubo para el sedimento forme una
nueva suspensin.
6.-Extraemos una gota de esta suspensin en la lmina portaobjeto y cubrir
con la laminilla.
7.-Luego examinar en el Microscopio en aumento: Primero con 10X y Luego
en 40X.
8.-Los resultados se informan como un promedio de los campos observados.
9.-Los resultados microscpicos se deben correlacionar con los hallazgos
fsicos y qumicos para asegurar la precisin del informe.

Los Elementos Microscpicos de la Orina son:

LEUCOCITOS: Normalmente se observan menos de 5 x campo en una orina
normal.

HEMATIES: Normalmente se Observan menos de 4 x campo en una orina
normal.
CELULAS EPITELIALES: Clulas de epitelio plano, de transicin epitelio
tubular o renal.
CILINDROS: Hialinos, epiteliales, granulosos, leucocitarios, hemticos, creos.
CRISTALES: amorfos, acido rico, fosfatos, uratos, oxalatos, colesterol, etc.
OTROS: Parsitos: Trichomonas, Hongos: Levaduras, espermatozoides.
















Practica N 2


HEMOGRAMA

INTRODUCCIN

El Hemograma es el anlisis de una muestra sangunea obtenida por
venipuncin que mide en forma global y en porcentajes las tres series bsicas
de la sangre que son: Hemates, leucocitos y plaquetas evaluando numero,
morfologa, tamao,
Los parmetros a estudiar de un Hemograma completo son: Hemates,
Leucocitos, hemoglobina, hematocrito, VCM, HCM, RDW-CV %, Plaquetas, y
el recuento diferencial en 100 clulas en lmina de la serie blanca como
tambin la observacin de la serie roja y plaquetaria.
El xito de la calidad del resultado y su correccin clnica depender del
cumplimiento de los protocolos como: En la fase pre-analtica, fase analtica y
post-analtica.

OBJETIVOS

Al finalizar la prctica el alumno podr analizar e interpretar los
diferentes parmetros del hemograma completo y correlacionarlo
clnicamente.

PROCEDIMIENTO PRCTICO

OBTENCIN DE LA MUESTRA DE SANGRE:

La muestra de sangre para este examen se coleccionara en un tubo
con anticoagulante ( EDTA K2 K3 y Heparina).



3. PROTOCOLO DE TRABAJ O:

Colocar el tubo en el equipo automatizado.
Tomar una lamina portaobjeto limpia colocar 20 40 ul de la muestra
y con otra lmina biselada realizar la extensin en ngulo de 45
El grosor del extendido vara segn el ngulo de extensin, si es
mayor ser ms gruesa y si es menor, mas delgada lo que
interferir en la lectura.
La coloracin ms usada es la coloracin Wright.

4. Realizar la observacin microscpica, inicindose de menor aumento
(40X) y luego con objetivo de inmersin (100X).




RECUENTO DIFERENCIAL

SERIE BLANCA LEUCOCITOS

Hay cinco tipos principales que se diferencian por el tamao,
forma del ncleo y el color de los grnulos del citoplasma.
La proporcin o porcentaje de cada tipo de leucocitos es
importante para el diagnstico la se denomina: Frmula
leucocitaria.
Para trabajar esta frmula se cuentan 100 clulas y se anota el
nmero que se ha encontrado de cada tipo de clulas.
Los valores normales de los distintos leucocitos en su
proporcin relativa ser el resultado porcentual y convertidos a
cifras absolutas por mm3 como:


FORMULA LEUCOCITARIA

Porcentual Absoluto
Neutrofilos segmentados 55 - 65 % 1.800 7.500
Neutrofilos cayado 3 - 5 % 150 - 400
Eosinofilos 0,5 - 4 % <500
Basofilos 0,5 - 1 % <200
Monocitos 4 - 8 % 100 - 800
Linfocitos 25 - 35 % 1.500 - 4.000


SERIE ROJA ERITROCITOS

En las anemias, los eritrocitos pueden sufrir alteraciones:
Estructurales en Forma ( Poiquilocitosis)
Estructurales en Tamao ( Anisocitosis)
Cromticas: Hipocroma, Hipercroma y policromatoflia).
Inclusiones anormales:
Anillos de Cabot
Hemoparasitos
Punteado basofilo


Observacin de la Lmina: La observacin se debe realizar en la parte
final del cuerpo y comienzos de la cola.

GRUPO SANGUNEO


INTRODUCCIN

Desde que el Patlogo viens, Premio Nobel; Karl Landsteiner (1868-
1943) estableciera que los hemates sanguneos contienen aglutingenos y
aglutininas, se pudo determinar los grupos sanguneos de acuerdo a la
presencia o ausencia de antgenos presentes en las superficies de los
hemates y en el suero de la sangre. En base a estas caractersticas se han
determinado dos clasificaciones para describir grupos sanguneos en humanos
son ABO y el factor Rh.
La distribucin porcentual de los diferentes grupos sanguneos y del factor Rh
en la poblacin general, corresponde al grupo sanguneo O con un 47%,
seguido por el A 41%, B 9% y AB 3%, en diferentes estudios, cabe
aclarar que el estudio fue realizado en poblacin de raza blanca.
El grupo sanguneo depende del patrn gentico que ha heredado de sus
padres
Las transfusiones de sangre entre grupos incompatibles pueden
provocar una reaccin inmunolgica que puede desembocar en hemlisis,
anemia, fallo renal, shock y muerte.

El mtodo que realizaremos a continuacin es determinar qu tipo de
sangre tiene una persona; determinando el antgeno y antocuerpos.

La sangre a menudo se clasifica de acuerdo con el sistema ABO. Este
mtodo separa los tipos de sangre en cuatro categoras:

Tipo A
Tipo B
Tipo AB
Tipo O

.OBJETIVOS

Al finalizar la prctica el alumno podr realizar la determinacin del
grupo sanguneo siguiendo un protocolo de prueba de laboratorio.

El alumno podr diferenciar los tipos de sangre segn el Sistema ABO
y Rh.


PROCEDIMIENTO PRCTICO

5. OBTENCIN DE LA MUESTRA DE SANGRE:

Puede utilizarse sangre con anticoagulante o sin anticoagulante.

6. PROTOCOLO DE TRABAJO:

Colocar en una lamina portaobjetos tres gotas de sangre de forma
equidistantes.

Dejar caer una gota de reactivo en cada gota de sangre; tener en
cuenta que los reactivos a utilizar tiene que estar a temperatura
ambiente ( 37C ); empezar por el reactivo ANTI-A; luego el ANTI-B
y por ultimo el ANTI-D

Homogenizar cada gota de sangre con su respectivo reactivo por
un periodo de un minuto.

Observar si hay presencia de aglutinacin o no aglutinacin al
momento de homogenizar la sangre con el reactivo.

Determinar el grupo sanguneo de la muestra de sangre con la cual
a trabajado.

Grafique el resultado obtenido del protocolo de trabajo.