DETERMINACIN DE ALCOHOL EN UNA BEBIDA ALCOHLICA POR

REFRACTOMETRA Y DETERMINACIN DE SACAROSA EN AZCAR POR

POLARIMETRA

Ana C. Tacan Pinchao, Orley A. Vera.
anitapi1992@gmail.com, Orley.a.v.p@hotmail.com.

Presentado a: Diego Fernando Morales V.
Cali, Universidad del Valle, Facultad de Ciencias Naturales y Exactas, Departamento
de Qumica, Tecnologa qumica, abril 5 de 2012.

RESUMEN
En la prctica se realiz la determinacin de etanol a una bebida alcohlica mediante
refractometria, y de sacarosa en una muestra de azcar de mesa mediante
polarimetra, para la bebida alcohlica el procedimiento se llev a cabo realizando
una curva de calibracin de patrn externo y una curva de adicin de estndar. La
concentracin de la muestra de etanol hallado mediante curva de patrn externo fue
equivalente a

, teniendo como porcentaje de error -10,34%, mientras

que la concentracin de la muestra mediante una curva de adicin estndar equivali
a

y el porcentaje de error fue de . Para la determinacin de

sacarosa, en el procedimiento que se llev a cabo al realizar la curva de patrn
externo, la concentracin de azcar en la muestra fue equivalente a 84% p/v.

Palabras clave: ndice de refraccin, curva de calibracin, patrn externo, adicin
estndar.

DATOS CLCULOS Y RESULTADO
Pureza de alcohol etlico: 96%
Densidad =

Ec(1)

Determinacin de las
concentraciones de etanol en las
soluciones estndares mediante el
mtodo patrn externo en %p/v

De la misma manera se determin la
concentracin para alcuotas de 1, 2,
3, 4, 5mL como se muestra en la
siguiente tabla
Tabla 1.datos para una curva de calibracin
de patrn externo.
concentracin
%p/v
ndice de refraccin
analista
1
analista
2
promedio
1, 58073 1,3350 1,3349 1,33495
3,16147 1,3355 1,3360 1,33575
6,32294 1,3359 1,3370 1,33695
9,48441 1,3389 1,3392 1,33905
12,6468 1,3411 1,3412 1,34115
15,8078 1,3427 1,3431 1,34290
muestra 1,3390 1,3389 1,33895


Determinacin de las
concentraciones de etanol en las
soluciones estndares mediante el
adicin estndar %p/v
Se prepararon 6 estndares con
diferentes volmenes patrn el cual se
les adicionaron 3 mL de muestra, a
cada estndar se determinaron la
concentracin como se muestra a
continuacin

De la misma forma se determin para
los dems estndares como se
muestra en la siguiente tabla

Tabla 2. Preparacin de disoluciones estndar de alcohol a partir de una disolucin patrn 96 mg/L de alcohol
# estndar
Volumen de disolucin
(mL ) patrn
de concentracin 96 p/p
Concentracin
%p/v
ndice de refraccin
analista 1 analista 2 promedio
1 0,0 0 1,3339 1,3340 1,33395
2 0,5 1,58073 1,3345 1,3349 1,33470
3 1,0 3,16147 1,3361 1,3362 1,33615
4 2,0 6,32294 1,3381 1,3388 1,33845
5 3,0 9,48441 1,3409 1,3412 1,34105
6 4,0 12,6468 1,3430 1,3431 1,34305


Grafica 1. ndice de refraccin promedio vs concentracin. %p/v

Curva de calibracin por patrn
externo:
Dnde:
Correlacin lineal (r) = 0,99307182
Desviacin estndar de la regresin
S
r
=2,96x10
-4
Pendiente (b
1
) = 0,00056716

Desviacin estndar de la pendiente
S
b=
2,3686x10
-5
Intercepto (a) = 1,333
1,33
1,332
1,334
1,336
1,338
1,34
1,342
1,344
1,346
-2 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18
i
n
d
i
c
e

d
e

r
e
f
r
a
c
c
i
o
n

p
r
o
m
e
d
i
o

n
D

Concentracin Etanol %p/v
Calibracion Normal
Calibracion Estandar.
Lineal (Calibracion
Normal)
Lineal (Calibracion
Estandar.)
Desviacin estndar del intercepto
S
a
=0,00022724

S
xx=
152,02
Determinacin de la concentracin de
conocida del alcohol mediante la
ecuacin de la recata

[ ]

Ec (1)
Donde n= ndice de refraccin
Remplazando la ecuacin donde
n=1,33895 (b
1
) = 0,00056716 y (a) =
1,33 se determina la concentracin de
alcohol en la muestra.

[

Desviacin estndar de la
concentracin:

Ec (2)
Donde
m = 1 Numero de lecturas de la
muestra

y
o
= 1,33895 Seal de la solucin
problema

1,33852 Promedio
[

]
Calculo concentracin alcohol etlico
en la muestra.

El contenido de alcohol etlico en el ron
es del
Densidad del etanol puro:
Calculo concentracin alcohol
etlico:

La botella de licor reporta como
contenido de alcohol

El porcentaje de error es:

Ec (3)

Curva de calibracin por adicin de
estndar.
Dnde:
(r) = 0,9592 S
r
=0,00020
(b
2
)=

S
b
=2,58x10
-5

(a) = 1,33373 S
a
=0.0001831
[

] = concentracin alcohol
etlico

Calculo concentracin alcohol etlico
en la muestra.

[ ]

Ec (4)
Se resta el ndice de refraccin del
agua al intercepto:

Se calcula la concentracin de la
muestra:

La incertidumbre de la concentracin
de la muestra se calcula mediante la
siguiente ecuacin:

Ec (5)
Promedio

[

]
Calculo concentracin alcohol etlico en
la solucin.

Densidad del etanol puro:
Calculo concentracin alcohol etlico

La botella de licor reporta como
contenido de alcohol

El porcentaje de error es:

CALIBRACIN SIMPLE VS ADICIN
DE ESTNDAR.
Evidencia de efectos de matriz.
Pruebas de significacin:
1.

2.

De la ecuacin se obtiene:

Dnde:

3.

5,676
4.

? Si
5. se rechaza

se acoge la

6. la pendiente (sensibilidad) de la
curva de adicin de estndar es
estadsticamente diferente a la del
mtodo de calibracin normal,
obteniendo efecto de matriz
Clculo del lmite de cuantificacin
del mtodo.

Ec (6)

=seal del blanco

=desviacin estndar de la seal del

blanco
Entonces

S
r

Se obtiene

Ec (7)
Reemplazando en la ecuacin 7

El uso de la ecuacin de regresin
conduce a un lmite de cuantificacin

Lmite de cuantificacin del mtodo

Determinacin de sacarosa de mesa
por polarimetra
Se prepararon 6 estndares de 25 mL
de un patrn estndar de 96 % a
diferentes concentraciones, para asi
determinar su rotacin como se
muestra a continuacin
Tabla 3. Datos experimentales de la curva
de patrn externo
concentracin
rotacin
medida
3,615 5,150
7,251 9,500
9,038 12,50
10,84 17,55
14,40 26,25
18,00 25,85
muestra 16,95


Grfica 2. Curva de calibracin
rotacin observada vs concentracin.

Dnde:
(r) = 0,9668 S
r
=2,4782
(b)=

S
b
=0,2159
(a) = -1.0747 S
a
=2,4879

Ecuacin de la recta

[]

Al remplazar los siguientes valores se
obtiene la siguiente ecuacin

[]

Dnde:

[]

Numero de lecturas de la
muestra
Seal (promedio) de la solucin
problema

[]

Porcentaje de sacarosa en la
muestra

(Calculo rotacin especfica ([]) de
la sacarosa?)
Utilizando la ecuacin de la recta se
obtiene:
[]

Ec (8)
Dnde:
Espesor de la celda en decmetros

Al remplazar los valores en la ecuacin
3 se obtiene que:
0
5
10
15
20
25
30
0 10 20
[

]

concentracin de sacarosa % (p/v)
Rotacion observada vs
Concentracion
[]
Se conoce la rotacin especifica de la
sacarosa (66.5) se calcula el
porcentaje de error.

Clculo del lmite de cuantificacin
del mtodo.

Ec (6)

=seal del blanco

=desviacin estndar de la seal del

blanco
Entonces

S
r

Se obtiene

Ec (7)
Reemplazando en la ecuacin 7



El uso de la ecuacin de regresin
conduce a un lmite de cuantificacin

Lmite de cuantificacin del mtodo

DISCUSIN
En la prctica se determin el
porcentaje de etanol a una muestra de
ron viejo de caldas por el mtodo
refractometra y se determin sacarosa
a una muestra de azcar de mesa
mediante polarimetra.
En primer lugar se determin etanol
mediante dos curvas de calibracin,
patrn externo y adicin estndar con
un refractmetro, la refractometra es
un mtodo ptico de determinar la
velocidad de propagacin de la luz en
un medio, compuesto, substancia,
cuerpo, la cual se relaciona
directamente con la densidad de este
medio

compuesto, substancia,
cuerpo, para emplear este principio se
utiliza la refraccin de la luz, (la cual es
una propiedad fsica fundamental de
cualquier sustancia), y la escala de
medicin de este principio se
llama ndice de refraccin
[1]
, en este
caso al medir el ndice de refraccin
para la curva de calibracin de patrn
externo se observa que al aumentar la
concentracin de los patrones aumenta
el ndice de refraccin del etanol,
indicando que hay mayor cantidad de
molculas de etanol en el disolvente
agua, generando una demarcacin
mayor en la densidad del patrn a
analizar y por lo tanto aumentando la
refraccin de la luz.
El ndice de refraccin de un medio
determinado (n) es la relacin entre la
velocidad de la luz en el vaco (C) y la
velocidad de la luz en el medio (v)
como se muestra en la siguiente
ecuacin:

Para esto se trabaj con una luz
monocromtica de sodio a una longitud
de onda (389.3 nm), y una
temperatura 25,7. C, la determinacin
del ndice de Refraccin se ve
influenciada por la temperatura y la
longitud de onda de la luz emitida, bajo
condiciones controladas de medida,
esto es una propiedad constante para
un medio y permite determinar la
pureza de una sustancia o
cuantificacin
[2]
.
Durante el procedimiento experimental
se pudo observar que el ndice de
refraccin de la solucin no vara
mucho con respecto al del agua, esto
se puede explicar, en el momento en
que se iniciaron concentraciones
diluidas de etanol hay ms agua en el
medio que en el analito a analizar y la
formacin de puentes de hidrgenos
entre ellos, pero cuando se aument
las concentraciones aumenta el ndice
de refraccin acercndose al del
etanol puro, el cual tiene un valor de
1,361indice de refraccin.
La grafica 1, muestra un
comportamiento lineal por el mtodo de
calibracin de patrn externo este
mtodo consiste en realizar
estndares, que son soluciones del
analito a las cuales se les conoce
exactamente su concentracin, para
as mediante mnimos cuadrados se
obtuvo una concentracin de etanol en
el ron equivalente a 31,38 %(v/v)
(0,56) con un error del -10 % error por
defecto, este puede estar asociado a
las diferencias que existen entre los
patrones de etanol puro con respecto a
la muestra, ya que esta puede tener
ciertos compuestos adicionales que
pueden generar cierta variacin en los
ngulos de refraccin de la luz; otra
posible causa de error posiblemente es
debida a que el etanol es un
compuesto voltil y que al poseer
interacciones tan grandes con el agua
forman puentes de hidrogeno, otro
factor puede ser el cambio de
temperatura ya que este al incrementar
un grado centgrado causa una
disminucin del ndice de refraccin
dificultando al momento de cuantificar,
una forma de corregir es adecuando al
refractmetro una chaqueta de manera
que circule agua a tal temperatura
proveniente de un bao termostatizado.
Mientras que para la calibracin de
adicin estndar se utiliza el mismo
procedimiento y con las mismas
dificultades del equipo de
refractometra, solo que aqu la
diferencia est al momento de medir ya
que para una calibracin de patrn
externo solo se media a los patrones
con concentracin conocida, mientras
que en adicin estndar se mide
soluciones de patrones que contienen 3
mL de muestra, como se muestra en la
tabla 2, los ndice de refraccin son
muchos mayores que los de patrn
externo, obteniendo una concentracin
de etanol del 3,32 %(v/v) con un
porcentaje de error de -94 %, error por
defecto, este error es muy grande
comparado con el de calibracin de
patrn externo esto debido a que la
adicin estndar es un mtodo de
extrapolacin, el resultado es menos
preciso que el que se obtiene por una
interpolacin que es de la calibracin
normal.
La curva de calibracin estndar usa
mayores cantidades de muestra,
comparado con el mtodo de
calibracin por patrn externo y es
poco prctico y tedioso en el caso de
anlisis de numerosas muestras, la
curva de adicin de estndar slo se
usa cuando hay evidencia de efectos
de matriz, para verificar se realiz una
prueba t, si los efectos de matriz son
despreciables, la pendiente
(sensibilidad) de la curva de adicin
estndar no debe ser estadsticamente
diferente a la del mtodo de calibracin
normal, para este caso se encontr
efecto de matriz esto quiere decir que
sera recomendable utilizar el mtodo
de adicin estndar pero los valores de
concentracin dicen lo contrario.
La presencia de este efecto de matriz,
en la muestra de ron se puede explicar
mediante el procesamiento de este, en
donde pueden quedar molculas que
al final afecten el anlisis realizado. En
la fabricacin del ron la parte en donde
pueden quedar molculas que afecten
el anlisis de refractometra es la
destilacin, la cual se realiza con el fin
de depurar el jugo de los residuos
que quedan de la fermentacin.
(4)

Para confirma esto es necesario
realizar el anlisis pero se debe tener
un mayor cuidado posible para que
as no se presenten diferencias en lo
realizado con lo terico.
Por ltimo se determin sacarosa a
azcar casera mediante un polarmetro
o sacarmetro, este mide la rotacin
angular de las sustancias pticamente
activas en un plano de luz polarizada,
(luz polarizada, a las ondas
electromagnticas del espectro
luminoso que oscilan en slo un
plano)
[3]
Las sustancias pticamente activas
giran el plano de polarizacin de la luz
linealmente polarizada, en este caso la
solucin de azcar puede ser
pticamente activa; si se coloca la
solucin de azcar entre un polarizador
y un analizador cruzados, parte de la
luz puede atravesar el sistema. El
ngulo que debe girarse el analizador
para que no pase nada de luz, y c9on
esto permita conocer la concentracin
de la solucin; se ha observado que la
rotacin es directamente proporcional
a la concentracin y el espesor de la
celda
{5]
.
La luz polarizada atraviesa una
muestra constituida por una disolucin
de la sustancia qumica sacarosa esta
es soluble en agua y ligeramente
soluble en alcohol y ter, cristaliza en
agujas largas y delgadas y es
dextrgira, es decir, desva el plano de
polarizacin de la luz hacia la derecha.
Por hidrlisis rinde una mezcla de
glucosa y fructosa, que son levgiras,
pues desvan el plano de polarizacin
hacia la izquierda, por ello, esta mezcla
se llama azcar inversa

Imagen 1
Para realizar la medicin se utiliz
como fuente una luz monocromtica de
sodio (lnea D) a una determinada
temperatura, una vez determinada la
lectura se aplica la siguiente formula:
[]

En donde:
[]

T
es la rotacin especfica.
T es la temperatura.
es la longitud de onda de la luz.
es el ngulo de rotacin.
l es la longitud del tubo del
polarmetro.
c es la concentracin de la
disolucin.

La sacarosa tiene un ngulo rotacional
del 76,90 con un porcentaje de error
relativo del 15,64% error por defecto;
sabiendo que el ngulo de rotacin es
directamente proporcional a la
concentracin y al camino ptico, al
calcular la concentracin de la
sacarosa se obtuvo un valor de
p/v en la muestra lo cual es un
porcentaje poco menor al esperado.

Estos sesgos se deban que al
momento de observar los datos que
arrojaba el instrumento no se poda
asegurar que era el valor verdadero, ya
que al observar la lnea negra en el
crculo naranja era imperceptible a la
vista, y al ser una tcnica sensorial se
ve afectado el anlisis, adems la
sacarosa como se mencion
anteriormente tiene la propiedad de
formar complejos con el agua (figura 1)
y permanecer hidratada, debido a esta
propiedad se pueden presentar
lecturas que contengan cierto grado de
error, ya que a esta disociacin el
polarmetro puede detectar otro ngulo
diferente al de la sacarosa, de igual
forma esta comparada con otros
disacridos, tiene un conjunto de
propiedades nicas, no presenta
mutorrotacin y no es un azcar
reductor.


PREGUNTAS
1. Se presenta alguna
diferencia entre las
concentraciones de etanol
encontradas por ambos
mtodos?

Si se presentan una gran diferencia
entre las concentraciones de
etanol, ya que en la calibracin de
patrn externo se realiz una
interpolacin donde el valor se
acerca al centroide siendo ms
preciso el dato; mientras que para
adicin estndar se hacer una
extrapolacin donde el rango de
error es mucho mayor debido a que
este anlisis se realiza a los datos
de lo extremos de la calibracin.

2. Con las pendientes de las dos
curvas establecer
estadsticamente si se
presentan efectos de matriz.

De acuerdo con las dos cuervas
establecidas si se presenta efecto
de matriz.

3. Hay diferencias en las
lecturas antes y despus de
la inversin? Explique.

Si hay diferencia, debido a que la
sacarosa presenta una rotacin
diferente antes y despus de la
inversin, ya que este es un
disacrido, compuesto que est
constituido por dos monosacridos
tales como: la fructosa y la glucosa.
Tambin son pticamente activos ,
uno de ellos es levgiro y el otro es
dextrgiro, por tanto la medida es
la sumatoria de los dos y
generalmente cuando una
molcula se invierte cambia la
direccin hacia donde se desva la
luz del plano polarizado, la
sacarosa es una sustancia
dextrgira y si se invierte ser
levgira
[6]
.
4. Se presentan diferencias en
el contenido de sacarosa
aplicando la frmula de
Clerget con el obtenido
mediante la curva de
calibracin? De algunas
razones que expliquen este
hecho.
Si, se presentan diferencias, esto
se puede dar debido a que la
ecuacin de clerget tiene en
cuenta los ngulos de rotacin,
cuando la mezcla hidrolizada y se
elimina las interferencias de las
sustancias pticamente activas
presentes en la muestra, mientras
que en la curva de calibracin no
se tiene en cuenta otros ngulos
diferentes al de la sustancia a
analizar. Esto tambin se puede dar
por los efectos de matriz, en lo que
no se tiene en cuenta al momento
de analizar.
CONCLUSIONES
1. El etanol es una sustancia
muy voltil, que posee
grandes fuerzas
intermoleculares (muy
soluble) al interaccionar con
el agua, que ocasionan
desviaciones en los
volmenes y pueden afectar
la determinacin de la
concentracin de cada patrn
en las curvas de calibracin
realizadas.
2. La determinacin del ndice
de refraccin para el etanol
se ve directamente afectada
por factores como la
temperatura, la pureza de la
sustancia y por ende en los
cambios de concentracin y
densidad.
3. La determinacin de
sacarosa mediante
polarimetra depende de
factores como la temperatura
y de los cambios rotacionales
de la sustancia al estar en
contacto con el agua
(hidrolisis).
4. La concentracin de etanol
en la muestra analizada, no
fue la esperada debido al
efecto de matriz o
interferencias de moleculares
dentro de la solucin.


REFERENCIAS
[1]http://www.uned.es/094258/contenid
o/tcnicas/refractometria/refractometria3.
htm. Citado Abril 06 del 2013.
[2] http://www.metas.com.mx/guias
metas/la-Guia-Meta-08-
12refraccion.pdf/. Citado Abril 06 del
2013.
[3] skoog.,Holler J , Y Nieman T.,
principios de anlisis instrumental ,
quinta edicin, McGraw-Hill,
Interamericana de Espaa, 2001.
Citado Abril 07 del 2013.
[4] http://www.conalcohol.com/ron-
historia-y-elaboracion. Citado Abril 07
del 2013.
[5]http://es.wikipedia.org/wiki/Polarimetr
%C3%ADa. Citado Abril 08 del 2013.
[6]http://www.almeriastella.es/imagenes
/noticias/documentos/534.pdf citado
Abril 08 del 2013.