Qui Mica

i
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS

Instituto de Qumica

Departamento de Qumica Orgnica

TESE DE DOUTORADO

ESTERIFICAO SELETIVA PARA A
SEPARAO DE ESTERIS, CIDOS RESNICOS
E CIDOS GRAXOS DO RESDUO OLEOSO DE
MADEIRA (TALL OIL)

Henrique Jorge Sousa Sales

Orientador: Prof. Dr. Ulf F. Schuchardt

Campinas, SP
Fevereiro de 2007

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iv

Afluente (furo) Mdio Juru, estado do amazonas

O caminho mais claro at o Universo atravs de um bosque Selvagem
John Muir 1847/1916
v

Dedico este trabalho minha famlia e aos meus amigos,
sem os quais nada disto seria possvel.
vi

Agradecimentos

Agradeo

Ao Prof. Dr. Ulf F. Schuchardt, pela amizade e orientao.
A Oscar Marten e Setsuo Sato, da Cognis Brasil, pela amizade e orientao.
Ao apoio financeiro concedido pela Cognis Brasil Ltda., que possibilitou a
execuo deste trabalho.
Ao Dr. Peter Kempers e a Dra. Sabine Both, pela ajuda na parte experimental na
Alemanha.
A Hercules Peloggia, Carlos Moura e Pedro Henrique Bordo Moreira (Cognis
Brasil), pela ajuda na parte experimental no GDA-Cognis Brasil.
Ao Prof. Dr Dalmo Mandelli, pelas sugestes e a ajuda na reviso da redao final
da tese.
A Camila e ao Srgio (Jordan), pela ajuda na reviso da tese.
Aos meus amigos Emerson Dallan, Alfredo Luiz Ferreira, Alexander Swank,
Leonardo Salemi e Adriana Davila Couto, que sempre estiveram por perto.
Ao rio Juru, no estado do Amazonas, que aps um naufrgio me devolveu o meu
computador com a minha tese quase intacta.
Direo e aos funcionrios do Instituto de Qumica da UNICAMP.
Aos colegas do grupo de pesquisa do Prof. Ulf, Marcelo (Pinhal), Rose, Pedro,
Srgio (Jordan), Alessandra (Pipoca), caro, Jos Luis (Z Formol), Uli, Jorge,
Renato, Fbio, Camila, Marcelo, Vera e Valquria, que muito contriburam para
este trabalho.

vii

C U R R I C U L U M V I T A E
Henrique Jorge Sousa Sales

Rua Benedito Osvaldo Lecques, 200 apto 116 Brasileiro
PQ Res. Aqurius, So Jos dos Campos-SP Solteiro
CEP 12246-021 34 anos
Tel.: (0xx12) 3236-5928 hsalles@hotmail.com

I Formao Acadmica

1. Mestrado em Qumica
rea: Qumica Orgnica
Local: Laboratrio de Catlise, Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) -
Campinas SP. Orientador: Prof. Dr. Ulf F. Schuchardt.
Epoxidao de leo de Soja Catalisada por CH
3
ReO
3

Perodo: mar/1997 jun/2000.
2. Bacharelado em Qumica
Local: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Campinas - SP.
Perodo: mar/1993 - dez/1997.

II Experincia Profissional.

1. Cognis do Brasil Ltda.
Perodo: jul/03 atual.
Cargo: Gerente de Tecnologia para a Amrica Latina.

Responsvel, para a Amrica Latina, pelo planejamento e controle das
atividades de desenvolvimento e aplicao de novos produtos e processos na
rea de cosmticos e domisanitrios, suporte e assistncia tcnica a clientes,
produo e ao Depto. de Vendas, visando atender s necessidades do mercado.
Atuao no desenvolvimento de novas formulaes, avaliao da performance
de novos produtos e transferncia de tecnologia para a rea produtiva dos
novos produtos desenvolvidos.

2. Henkel S/A Indstrias Qumica / Cognis do Brasil Ltda.
Perodo: jan/97 jun/03.
Cargo: Qumico de Desenvolvimento e Aplicao II.
Co-Responsvel pela rea de desenvolvimento de novos produtos (R&D
Research & Development).
viii

Atuao no desenvolvimento de novos produtos e sntese de novas substncias
para as seguintes reas: Adesivos, Cosmticos, Txtil, Tintas, Plstico, Couro,
Agro e Minerao.
Responsvel pela implementao de novos produtos da escala laboratorial para
escala piloto e produo.
Responsvel pela otimizao de processo para os produtos existentes.

III Experincia Acadmica

1. Laboratrio de Calorimetria Instituto de Qumica - UNICAMP.
rea: Departamento de Fsico-Qumica.
Perodo: ago/96 jul/97.
Projeto: Estudo do Efeito da Adio de Antibiticos na Fermentao
Alcolica. Monitoramento do Processo Fermentativo por Calorimetria.
Bolsa de Iniciao Cientfica: PIBIC/CNPq/PRP

2. Laboratrio de Calorimetria Instituto de Qumica - UNICAMP.
rea: Departamento de Fsico-Qumica.
Perodo: ago/95 jul/96.
Projeto: Interfaceamento de um Microcalormetro de Fluxo a um
Microcomputador para Monitorar a Fermentao Alcolica.
Bolsa de Iniciao Cientfica: PIBIC/CNPq/PRP

3. Laboratrio de Produtos Naturais Instituto de Qumica - UNICAMP.
rea: Departamento de Qumica Orgnica.
Perodo: abr/95 jul/95.
Projeto: Transformao Qumica de Diterpenos Naturais Abundantes em
Substncias Biologicamente Ativas.
Bolsa de Iniciao Cientfica: SAE/UNICAMP

4. Laboratrio de Produtos Naturais Instituto de Qumica - UNICAMP.
rea: Departamento de Qumica Orgnica.
Perodo: abr/94 mar/95.
Projeto: Sntese e Estudo de RMN
13
C de Diterpenos da Classe Clerodanos.
Bolsa de Iniciao Cientfica: SAE/UNICAMP

5. All Qumica Empresa Jnior UNICAMP.
rea de Atuao: Consultoria na rea qumica.
Local: Instituto de Qumica - UNICAMP
Perodo: nov/95 nov/96.

6. Programa seu Colgio na UNICAMP.
rea de Atuao: Monitor.
Local: Instituto de Qumica - UNICAMP
Perodo: 18/08/1995 e 12/09/1997

ix

IV Publicaes

1. A. Nogueira, H. Sales, Performance of Cupuassu Products on Hair Care
Applications, 24
th
IFSCC Congress Osaka Japan Integration of Cosmetic
Sciences, 2006.
2. T. Costa, P. Hennies, A. Oliveira, T. Victorio, E. Lima, H. Sales, M. de
Paula, J. Alencastre, R. Biaggio; Novo Tensoativo Anftero Derivado de
Manteiga da Biodiversidade Brasileira, XVII Congresso Latino-Americano e
Ibrico de Qumicos Cosmticos, 2005.
3. T. Parreira, M. Ferreira, H. Sales, W. Almeida, Quantitative Determination
of Epoxidized Soybean Oil Using NEAR Infrared Spectroscopy and
Multivariate Calibration, Applied Spectroscopy, 2002.
4. H. Sales, R. Cesquini, S. Sato, D. Mandelli and U. Schuchardt,
Epoxidation of Soybean Oil Catalysed by CH
3
ReO
3
/H
2
O
2
, Stud. Surf. Sci.
Catal., 130-B, 2000, pg. 1661.

V Apresentao em Congressos Internacionais

1. A. Nogueira, H. Sales, Performance of Cupuassu Products on Hair Care
Applications, 24
th
IFSCC Congress Osaka - Japan Integration of Cosmetic
Sciences, 16-19 Outubro, 2006.
2. T. Costa, P. Hennies, A. Oliveira, T. Victorio, E. Lima, H. Sales, M. de
Paula, J. Alencastre, R. Biaggio; Novo Tensoativo Anftero Derivado de
Manteiga da Biodiversidade Brasileira, XVII Congresso Latino-Americano e
Ibrico de Qumicos Cosmticos, Cusco Peru, 4-7 Setembro, 2005.
3. H. Sales, R. Cesquini, S. Sato, D. Mandelli and U. Schuchardt, Epoxidation
of Soybean Oil Catalyzed by CH
3
ReO
3
/H
2
O
2
, 12
th
International Congress on
Catalysis, Granada - Espanha, 9-14 Julho 2000.
4. H. Sales, R. Cesquini, S. Sato, D. Mandelli and U. Schuchardt, Epoxidao
de leo de Soja Catalisada por CH
3
ReO
3
Heterogeneizado em Polmeros
Orgnicos, XVII Simpsio Ibero-Americano de Catlise, Porto - Portugal, 16-
21 Julho, 2000.

VI Apresentaes em Congressos Nacionais

1. T. F. Parreira, M. M. C. Ferreira, H. Sales e W. B. Almeida, Calibrao
Multivariada do leo de Soja Epoxidado a Partir de Espectros na Regio do
IV-Prximo, 10 Encontro Nacional de Qumica Analtica, Santa Maria RS
Brasil, 31/08 a 3/09, 1999.
2. M. M. C. Ferreira, L. C. Sabino, H. Sales e W. B. Almeida, Desenvolvimento
de Modelo de Calibrao Multivariada em Espectroscopia de Infravermelho,
10 Encontro Nacional de Qumica Analtica, Santa Maria RS Brasil,
31/08 a 3/09, 1999.
3. H. Sales, D. Mandelli e U. Schuchardt, Epoxidao e Caracterizao de
steres Metlicos de cidos Graxos Catalisada por CH
3
ReO
3
/H
2
O
2
, 22
x

Reunio Anual da Sociedade Brasileira de Qumica, Poos de Caldas SP -
Brasil, 25-28 de Maio, 1999.
4. H. Sales e P. L. O. Volpe, Construo e Informatizao de um
Microcalormetro de Batelada para o Monitoramento da Fermentao
Alcolica em Tempo Real, 20 Reunio Anual da Sociedade Brasileira de
Qumica, Poos de Caldas SP - Brasil, 24-27 de Maio, 1997.
5. H. Sales e P. L. O. Volpe, Interfaceamento de um Microcalormetro de Fluxo
a um Microcomputador para Monitorar a Fermentao Alcolica, IV
Congresso Interno de Iniciao Cientfica da Universidade Estadual de
Campinas, Campinas SP Brasil, 28/10 a 01/11, 1996.

VII Patentes

1. Ttulo: Processo de Epoxidao de leos Vegetais, com Perxido de
Hidrognio Aquoso catalisado por CH
3
ReO
3
, Homognio e Heterogeneizado,
na Presena e Ausncia de Solvente INPI N PI9905464-7.
Autores: Henrique Sales, Dalmo Mandelli e Ulf Friedrich Schuchardt.
2. Titulo: Plasticized poly vinyl chloride composition US 2006/0135666A1.
Autores: Henrique Sales, Wanderson Bueno e Katia Braga.
3. Ttulo: Plasticized compositions for nitrocellulose based resins WO
2004/052978A1.
Autores: Henrique Sales, Wanderson Bueno e Katia Braga.
4. Titulo: Methyldimerate and sulphonated, sulphated, sulphited methyldimerate
as raw material and intermediates for leather fat liquors compositions . C
2746, submitted.
Autores: Valter Graffunder, Henrique Sales, Sergio Ulyses e Setsuo Sato.
5. Ttulo: Process for obtaining fatty acid alkyl esters, rosin acids and sterols from
crude tall oil. WO 2004/074233A1.
Autores: Henrique Sales, Setsuo Sato, Hercules Peloggia, Sabine Both, Peter
Kempers, Urich Schorken e Thomas Wolf.
6. Ttulo: Process for obtaining fatty acid alkyl esters, rosin acids and sterols from
crude tall oil. WO 2004/080942A1.
Autores: Henrique Sales, Setsuo Sato, Hercules Peloggia, Sabine Both, Peter
Kempers, Urich Schorken e Thomas Wolf.
7. Ttulo: Use of Cupuassu Butter Based Amphoteric Surfactants PI0403781-2
(nacional); PCT/Br2005/000181 (internacional).
Autores Cognis Brasil: Rosa Maria Teixeira Pag Biaggio, Setsuo Sato, Juliana
Bucchi Alencastre, Carlos Moura e Henrique Jorge Sousa Sales, Autores Natura
Cosmticos S.A.: Tiago Costa Beber, Rosa Maria da Cunha Canto Friedlander,
Tereza Maria de Senne Peronovich Victorio e Edjane dos Santos Lima.

VIII Idiomas

1. Ingls: Fluente.
2. Espanhol: Fluente.
3. Alemo: Conhecimentos bsicos.
xi

ESTERIFICAO SELETIVA PARA A SEPARAO DE ESTERIS, CIDOS
RESNICOS E CIDOS GRAXOS DO RESDUO OLEOSO DE MADEIRA (TALL
OIL)

Autor: Henrique Jorge Sousa Sales
Orientador: Prof. Dr. Ulf Schuchardt
Instituto de Qumica - Universidade Estadual de Campinas
CP 6154, 13083-970, Campinas - SP

Resumo

Neste trabalho, estudamos a esterificao seletiva qumica e enzimtica
para a separao dos esteris, cidos resnicos e cidos graxos do resduo oleoso
de madeira, o Crude Tall Oil (CTO). A reao de esterificao enzimtica (Candida
antartica, lpase do tipo B) foi otimizada utilizando-se um planejamento fatorial 2
5
.
Os fatores estudados foram o tempo de reao (h), a temperatura da reao (
o
C),
o teor de catalisador (%), o teor de metanol (%) e o teor de gua (%). Com o
aumento da temperatura de 24 para 60
o
C observamos uma reduo mdia na
taxa de converso de 26,6 %. O aumento da percentagem de metanol de 5 para
15 % tambm apresentou um efeito negativo na taxa de converso de 13,1 %;
isso indica uma inativao trmica (com a aumento da temperatura) e uma
inativao do stio ativo da enzima pelo metanol. O aumento da porcentagem de
gua de 0 para 15 % e do tempo de reao de 6 para 24 h apresentou um
aumento de 31,2 e de 8,1 %, respectivamente, para a converso. A interao
entre a gua e o metanol apresentou um efeito positivo de 22,5 % sobre a
converso, sendo que a melhor condio foi a de efetuar a reao baixa
temperatura (24
o
C) com altos teores de gua (10-15%) e metanol (10-15%). A
adio do metanol em duas etapas tambm favoreceu a reao, devido ao efeito
de desativao que o metanol tem sobre a enzima. O processo foi implementado
em produo, onde 13,7 tons de CTO foram esterificadas em um tanque de 25 m
3

e, aps 166 h de reao, o ndice de acidez caiu de 153,5 para 57,4 mgKOH/g.
Atravs das anlises do teor de cidos resnicos livres, constatamos a total
esterificao dos cidos graxos presentes no CTO. O catalisador enzimtico foi
adsorvido em polipropileno e foram produzidos dois catalisadores heterogneos
com 0,2 g/g e 0,5 g/g; a relao 0,2 g/g foi a que apresentou a melhor relao
custo-benefcio para as reaes em batelada. O catalisador heterogneo foi
empacotado em uma coluna, e essa foi utilizada para os experimentos de
esterificao contnua. O catalisador se mostrou estvel por mais de 50 dias.
Comparando a performance do processo enzimtico x processo qumico, o
catalisador enzimtico apresentou melhor produtividade e seletividade. O resduo
obtido pelo fracionamento em um evaporador thin film apresentou um alto teor de
esteris livres (1,83%) e esteris esterificados (22,31%). A frao leve do CTO
esterificado foi fracionada em uma coluna de destilao piloto. Com este novo
processo, obtivemos steres metlicos com alto grau de pureza e isento de
contaminao por cidos resnicos. No processo de purificao por destilao,
obtivemos cidos resnicos com 72,3% de pureza. O processo de esterificao
seletiva e de fracionamento do CTO foi patenteado pela Cognis do Brasil.
xii

PROCESS FOR OBTAINING FATTY ACID ALKYL ESTERS, ROSIN ACIDS
AND STEROLS FROM CRUDE TALL OIL

Author: Henrique Jorge Sousa Sales
Supervisor: Prof. Dr. Ulf Schuchardt
Instituto de Qumica - Universidade Estadual de Campinas
CP 6154, 13083-970, Campinas - SP

Abstract

A process for obtaining fatty acid alkyl esters, rosin acids an sterols from
Crude Tall Oil was developed. As first process step, a chemical or enzymatic
esterification has been proposed. It has been shown that the enzymatic
esterification of crude tall oil is technically and economically feasible. A 2
5

experimental design, to optimize the enzymatic process, was done. The factors
studied were; reaction time (h), temperature (
o
C), catalyst (%), methanol (%) and
water (%). Increasing the temperature to 60
o
C, the conversion decreased 26.6%.
The use of high amount of methanol resulted on a conversion of 13.1%. The
increase of reaction time and amount of water improved the conversion in 8.1 %
and 31.2 %. The best conditions found were reaction time (24 h), temperature (25
o
C), water (10-15 %) and methanol (10-15 %). Dosage of methanol must be used
because with higher amount of alcohol occurs deactivation of the enzyme. The
laboratorial scale experiments were successfully, transferred to a 25 m
3
pumped
reactor in the industrial plant. An acid value reduction from 153.5 to 57.4 in 166 hrs
could be achieved. Using an immobilized biocatalyst, 0.2 g/g and 0.5 g/g,
experiments in a stirred reactor have been performed. The best results were
obtained with the 0.2 g/g catalyst system. The biocatalyst was used for successive
batches. A continuous process in a column was successfully performed in
laboratorial scale. The column was stable for more then 50 days in continuous
operation. We compared the performance of enzymatic and chemical esterification.
The enzymatic process has better productivity than the chemical process. The
separation of the methyl esters and rosin acids from the sterol borates by thin film
distillation produced a pitch with (1.83 %) of free sterols and (22.31 %) of total
sterols. The separation of the methyl esters from the rosinic acids by distillation
produced a high purity methyl ester free of resinic acids and a resinic acid with
72.3 % of purity.
The process consists of five steps: 1- Enzymatic and chemical esterification
of the tall oil fatty acids with methanol to convert the TOFA in methyl esters; 2-
Stripping of water/methanol; 3- Esterification of the free sterols with boric acid. 4-
Separation of the methyl esters and rosinic acids from the sterol borates by
distillation and 5- Separation of the methyl esters from the rosinic acids by
distillation.
The process was patented by Cognis Brasil.

xiii

ndice Geral

Glossrio
xvi

ndice de Tabelas
xvii

ndice de Figuras
xviii

Captulo 1: Introduo
1

Captulo 2: Reviso Bibliogrfica
3

2.1 Tall Oil 3
2.1.1 Composio Qumica do Crude Tall Oil 4
2.1.2 Recuperao dos Sabes de Tall Oil do Licor Negro 6
2.1.3 Processo de Acidulao para a Recuperao do CTO Bruto 6
2.1.4 Aplicaes para o CTO 7
2.2 Principais Componentes do CTO 8
2.2.1 cidos Graxos de Tall Oil (Tall Oil Fatty Acid TOFA) 8
2.2.1.1 Contribuio do Grupo Carboxlico 11
2.2.1.2 - Contribuio do hidrognio ativo - Figura 5. 12
2.2.1.3 - Contribuio da Olefina 13
2.2.2 cidos Resnicos 14
2.2.2.1 - Contribuio do Grupo Carboxlico 18
2.2.2.2 - Contribuio da Olefina 19
2.2.3 Esteris 20
2.3 Histrico para o processamento do CTO 23
2.4 Processos de Separao 26
2.4.1 Destilao 26
2.4.2 Evaporador Thin Film 28
2.5 Obteno de Concentrados de Esteris 29
2.6 Esterificao 31
2.6.1 Esterificao Qumica 32
2.6.2 Esterificao Enzimtica 33
2.6.2.1 Reaes hidrolticas 34
2.6.2.2 Lipases 36
2.6.2.3 Catlise Enzimtica Homognea (Batelada) 37
2.6.2.4 Catlise Enzimtica Heterognea (Processo Contnuo) 38
2.6.2.5 Biotransformaes na Indstria 40
2.7 Planejamento Fatorial, Anlise de Varincia e Mtodo de Superfcie de
Resposta
41

Captulo 3: Objetivos
44

Captulo 4: Parte Experimental
45
xiv

4.1 Reagentes e Solventes Utilizados 45
4.2 Esterificao do CTO Utilizando Catlise Enzimtica Homognea 45
4.2.1 Planejamento de Experimentos Fatorial 2
5
45
4.2.2 Esterificao do CTO com a Adio de Metanol em Duas Etapas 49
4.2.3 Esterificao do CTO em Larga Escala 49
4.3 Esterificao do CTO Utilizando Catlise Enzimtica Heterognea 50
4.3.1 Sntese do Catalisador Heterogneo 50
4.3.2 Esterificao em Batelada, Utilizando Catalisador Enzimtico
Imobilizado

51
4.3.3 Esterificao Contnua com Catalisador Enzimtico Suportado 51
4.4 Esterificao do CTO com Catlise Qumica Homognea 51
4.5 Reao dos Esteris Presentes no CTO com cido Brico 52
4.6 Cristalizao dos Esterois Presentes no CTO 52
4.7 Fracionamento do CTO 53
4.8 Metilao dos cidos Resnicos e Graxos com Diazometano 54
4.9 Mtodos Analticos 54
4.9.1 Anlise do ndice de Acidez (I.A.) por Volumetria 55
4.9.2 Teor de cidos Resnicos por Volumetria 56
4.9.3 Teor de Esteris Livres e Totais (CG-FID) 57
4.9.3.1 Anlise de Esteris Totais 57
4.9.3.2 Anlise de Esteris Livres 58
4.10 Caracterizao e Quantificao dos Produtos 59
4.10.1 Caracterizao por Espectrometria de Massas Acoplado um
Cromatografo a Gs (CG-EM).
59
4.10.2 Anlise do Teor de cidos Graxos (CG-FID) 60
4.10.3 Quantificao dos esteris livres e totais por cromatografia em fase
gasosa
60

Captulo 5: Resultados e Discusso:
61

5.1 Composio Mdia Para os cidos Graxos, Resnicos e Substncias
Neutras Presentes no CTO

61
5.2 Esterificao Seletiva Para os cidos Graxos Presentes no CTO 63
5.2.1 Otimizao da Reao de Esterificao Enzimtica Homognea 63
5.2.2 Esterificao Homognea em Larga Escala Para o CTO 74
5.2.3 Catlise Enzimtica Heterognea 76
5.2.4 Catlise Qumica Homognea 78
5.3 Reao dos Esteris Presentes no CTO com cido Brico 79
5.4 Fracionamento do CTO 80
5.4.1 Diagrama Proposto Para o Processo de Fracionamento do CTO 80
5.4.2 Estudo do Efeito da Temperatura no Teor dos Esteris livres e na
degradao Trmica Destes em uma Amostra de CTO

82
5.4.3 Fracionamento dos steres Metlicos do CTO em um Evaporador do
Tipo Thin film

83
5.4.4 Fracionamento dos steres Metlicos do CTO em uma Coluna de
Destilao
88
xv

5.4.5 Caracterizao dos cidos Resnicos Concentrados (amostra 2),
Obtidos do Processo de Fracionamento do CTO

92
5.4.6 Concentrao dos fitoesteris aps reao com cido brico
utilizando-se um evaporador do tipo Thin film

92
5.4.6.1 Etapa 1 Destilao Thin film 190
o
C 93
5.4.6.2 Etapa 1 Destilao Thin Film 240
o
C 94
5.4.6.3 Caracterizao dos Esteris concentrados, obtidos do processo de
fracionamento do CTO

95

Captulo 6: Concluses
98

Anexo 1: Cromatogramas dos steres metlicos provenientes da
destilao do CTO a diferentes temperaturas
100

Anexo 2: Caracterizao dos cidos resnicos concentrados (por CG-EM),
obtidos do processo de fracionamento do CTO
106

Anexo 3: Caracterizao dos esteris concentrados (por CG-EM), obtidos
do processo de fracionamento do CTO
115

Anexo 4: Patente Processo CTO
124

xvi

Glossrio

BREU cidos Resnicos
CG Cromatografia em Fase Gasosa
CG-EM Cromatografia em Fase Gasosa acoplada Espectrometria de
Massas
Conv Converso
CTO Crude Tall Oil
DDOS Destilado de desodorizao do leo de soja
DTO Distilled Tall Oil
HP Hewlett Packard
HP-5 Coluna cromatogrfica apolar; fase estacionria de metil-
siloxano contendo 5% de fenil-siloxano.
I.A. ndice de Acidez
I.I. ndice de Iodo
IR ndice de Refrao
I.S. ndice de Saponificao
IV Infravermelho (FTIR)
MeOH Metanol
Pitch Resduo de destilao do CTO
AGP cidos Graxos Polinsaturados
TOFA Tall Oil Fatty Acids
TOP Tall oil pitch

xvii

ndice de Tabelas

Tabela 1: Composio Tpica para o Crude Tall Oil. .................................................. - 4 -
Tabela 2: Variao na composio do CTO entre diferentes rvores. ................... - 5 -
Tabela 3: Composio fsico-qumica tpica para os cidos resnicos provenientes de goma,
CTO e madeira. ............................................................................................................ - 15 -
Tabela 4: Composio tpica para os principais cidos resnicos presentes em
diversas espcies de Pinus. ................................................................................... - 17 -
Tabela 5: Composio tpica para os principais cidos resnicos provenientes de
Pinus de diversos pases
.
........................................................................................ - 17 -
Tabela 6: Composio de cidos resnicos em madeira de Pinus, sabo e Tall Oil. -
18 -
Tabela 7: Composio da frao de esteris (%) de leos vegetais. ................... - 22 -
Tabela 8: Comparao entre os pontos de ebulio de alguns cidos graxos e os
seus respectivos steres metlicos. ...................................................................... - 31 -
Tabela 9: Fatores do Experimento. ............................................................................... - 46 -
Tabela 10: Resultados obtidos para o planejamento fatorial 2
5
............................. - 47 -
Tabela 11: Clculo do Peso Molecular mdio para o TOFA............................................. - 48 -
Tabela 12: Composio e caractersticas principais para o CTO. ......................... - 61 -
Tabela 13: Composio obtida para as fraes do CTO......................................... - 62 -
Tabela 14: Efeitos encontrados no estudo da esterificao enzimtica homognea
utilizando-se um planejamento fatorial 2
5
............................................................ - 64 -
Tabela 15: Fatorial em duplicata obtido pela eliminao do fator C...................... - 65 -
Tabela 16: Efeitos estimados das variveis independentes para um modelo de 1
a

ordem. .......................................................................................................................... - 69 -
Tabela 17: Comparao entre a esterificao qumica e enzimtica para o CTO.....-
78 -
Tabela 18: Resultados para a esterificao dos esteris presentes no CTO. .... - 80 -
Tabela 19: Resultados (rea %) para os compostos presentes no CTO, caracterizados por
CG-EM. ........................................................................................................................ - 85 -
Tabela 20: Resultado do fracionamento do CTO em uma coluna de destilao
piloto............................................................................................................................. - 89 -
Tabela 21: Resultados analticos obtidos para a amostra 3, proveniente do
fracionamento do CTO em uma coluna de destilao. .................................... - 91 -
Tabela 22: Resultados analticos para a esterificao enzimtica do CTO. ...... - 93 -
Tabela 23: Destilao do CTO-Me em um evaporador do tipo Thin film a 190
o
C....-
94 -
Tabela 24: Destilao do CTO-R em um evaporador do tipo Thin film a 240
o
C. - 95
-

xviii

ndice de Figuras

Figura 1: Estruturas para alguns materiais graxos, presentes no CTO de Pinus. .- 8
-
Figura 2: Estruturas para os cidos graxos mais abundantes presentes no Crude
Tall Oil americano.........................................................................................- 9 -
Figura 3: Fracionamento do CTO. .....................................................................- 10 -
Figura 4: Hidrogenao de cidos graxos para a produo de lcool graxo. ....- 12 -
Figura 5: Hidrognios ativos para o cido linolico. ........................................- 12 -
Figura 6: Sulfonao do oleato de metila. .........................................................- 13 -
Figura 7: Dimerizao de cidos graxos para a produo de cidos dimricos. .- 14
-
Figura 8: Classes de esqueletos bsicos para os cidos resnicos. ..................- 15 -
Figura 9: Principais cidos resnicos constituintes da frao cida do CTO......- 16 -
Figura 10: Sntese de steres de glicernicos de cidos resnicos provenientes do
CTO. ...........................................................................................................- 19 -
Figura 11: Desidrogenao do cido abitico....................................................- 20 -
Figura 12: Estrutura do colesterol e sua numerao. ........................................- 20 -
Figura 13: Estrutura de vrios esteris e triterpenos. ........................................- 21 -
Figura 14: Materiais de enchimento interno de colunas de destilao.
()
............- 27 -
Figura 15: Evaporador Thin Film. ......................................................................- 28 -
Figura 16: Mecanismo de Esterificao Qumica...............................................- 32 -
Figura 17: Ao cataltica das enzimas (modelo chave-fechadura)...................- 34 -
Figura 18: Mecanismo de atuao da Serina Hidrolase. .................................- 35 -
Figura 19: Tanque de 25 m
3
com sistema de recirculao. ...............................- 50 -
Figura 20: Autoclave de 2 L BEP 280................................................................- 52 -
Figura 21: Evaporador thin film. ......................................................................- 53 -
Figura 22: Sistema reacional para a esterificao com diazometano................- 54 -
Figura 23: Grfico normal dos efeitos, obtidos no planejamento fatorial 2
5
. ......- 64 -
Figura 24: Efeito na interao entre a gua e o metanol na converso.............- 66 -
Figura 25: Ciclo cataltico para a catlise enzimtica. .......................................- 67 -
Figura 26: Mecanismo proposto para a desativao do catalisador enzimtico pelo
metanol. ......................................................................................................- 67 -
Figura 27: Grfico das respostas mdias em funo dos fatores metanol, gua e
temperatura. ...............................................................................................- 70 -
Figura 28: Grfico da superfcie de resposta para o metanol x gua. ...............- 70 -
Figura 29: Grfico da superfcie de resposta para o temperatura x metanol. ...- 71 -
Figura 30: Esterificao do CTO a 24
o
C em 24h com diferentes teores (%) de
enzima/metanol/gua. ................................................................................- 72 -
Figura 31: CTO esterificado com 10 % de metanol, 0,05 % de enzima a 45
o
C,
com diferentes teores de gua. ..................................................................- 73 -
Figura 32: Esterificao do CTO com 15 a 20 % de metanol, 0,05 % de enzima, 45
o
C e 10 % de gua......................................................................................- 74 -
Figura 33: Esterificao contnua do CTO em um tanque de 25 m
3
com 0,05 % de
enzima, 15 % de metanol, 15 % de gua a 24
o
C. .....................................- 75 -
xix

Figura 34: Ciclos reacionais consecutivos para a enzima imobilizada (cada ciclo =
1 dia), com diferentes teores de gua e catalisador (a - 5% de catalisador
0,5g/g e 0% de gua; b - 5% de catalisador 0,5g/g e 5% gua; c - 5% de
catalisador 0,5g/g e 10% gua; d - 5% de catalisador 0,5g/g e 15% gua; e
5% de catalisador 0,5 g/g e 10% gua/etanol; f 10% de catalisador 0,2 g/g e
10% gua), 10% de metanol, 24h de reao a 30
o
C. .................................- 76 -
Figura 35: Esterificao contnua do CTO a 35
o
C com 10 % de gua e 10 % de
metanol (cada ciclo = 1 dia)........................................................................- 77 -
Figura 36: Sntese do tri-esterol ster de boro...................................................- 79 -
Figura 37: Descrio do processo de separao...............................................- 81 -
Figura 38: Efeito da temperatura no teor de esterol livre em uma amostra de CTO,
aquecida em um balo volumtrico de 2 L por 3h. .....................................- 82 -
Figura 39: Cromatograma tpico para o CTO metilado. .....................................- 84 -
Figura 40: Estruturas para os compostos presentes no CTO caracterizados por
CG-EM........................................................................................................- 86 -
Figura 41: Destilao do CTO esterificado (CTO-Me) em um evaporador do tipo
thin film sob vcuo a diferentes temperaturas. MP = Matria Prima, CTO-Me
antes da destilao.....................................................................................- 87 -
Figura 42: Comparao entre metodologias analticas para o clculo do teor
relativo de cidos resnicos por cromatografia de fase gasosa (CG-FID) e por
titulao (mtodo O-67a Cognis)................................................................- 88 -
Figura 43: Cromatograma para a destilao dos cidos resnicos do CTO -
amostra 1....................................................................................................- 89 -
Figura 44: Cromatograma para a destilao dos cidos resnicos do CTO -
amostra 2....................................................................................................- 90 -
Figura 45: Cromatograma para a destilao dos steres metlicos do CTO -
amostra 3....................................................................................................- 91 -
Figura 46: Cromatograma para o pitch purificado do CTO. ...............................- 96 -
Figura 47: Cromatograma fitoesterol cristalizado. .............................................- 96 -
Figura 48: Cromatograma dos steres metlicos provenientes da destilao do
CTO a 140
o
C. ...........................................................................................- 101 -
CTO a 150
o
C............................................................................................- 102 -
CTO a 160
o
C............................................................................................- 103 -
CTO a 170
o
C............................................................................................- 104 -
CTO a 190
o
C............................................................................................- 105 -
Figura 53: Cromatograma para uma amostra com alto teor de cidos resnicos......-
107 -
Figura 54: Espectro de massa do metil pimarato proveniente do fracionamento e
posterior metilao dos cidos resnicos presentes no CTO....................- 108 -
Figura 55: Espectro de massa do metil sandaracopimarato proveniente do
fracionamento e posterior metilao dos cidos resnicos presentes no CTO. .-
109 -
xx

Figura 56: Espectro de massa do metil isopimarato proveniente do fracionamento
e posterior metilao dos cidos resnicos presentes no CTO.................- 110 -
Figura 57: Espectro de massa do C
21
H
32
0
2
proveniente do fracionamento e
Figura 58: Espectro de massa do metil dehidroabietato proveniente do
fracionamento e posterior metilao dos cidos resnicos presentes no CTO. .-
112 -
Figura 59: Espectro de massa do metil abietato proveniente do fracionamento e
Figura 60: Espectro de massa do metil neoabietato proveniente do fracionamento
e posterior metilao dos cidos resnicos presentes no CTO.................- 114 -
Figura 61: Cromatograma ampliado dos fitoesteris obtidos por cristalizao. .- 116
-
Figura 62: Espectro de massa do campesterol proveniente da cristalizao dos
esteris presentes no CTO.......................................................................- 117 -
Figura 63: Espectro de massa do campestanol proveniente da cristalizao dos
Figura 64: Espectro de massa do estigmaesterol proveniente da cristalizao dos
Figura 65: Espectro de massa do sitoesterol proveniente da cristalizao dos
Figura 66: Espectro de massa do sitoestenol proveniente da cristalizao dos
Figura 67: Espectro de massa do fucosterol proveniente da cristalizao dos
Figura 68: Espectro de massa do stigmast-7-en-3-ol proveniente da cristalizao
dos esteris presentes no CTO. ...............................................................- 123 -

- 1 -

Captulo 1: Introduo

A utilizao de esteris na nutrio humana, devido sua capacidade
hipocolesterolmica,
(1)
tem aumentado muito a demanda por esteris naturais
provenientes de plantas no geneticamente modificadas. O desenvolvimento de
um processo de separao comercial de esteris provenientes do resduo oleoso
de madeira, ou Crude Tall Oil (CTO), tem muito interesse para a indstria, j que o
CTO uma das maiores fontes inexploradas de esteris.
O CTO o principal subproduto do processo kraft de polpao de madeira
de Pinus e trata-se de uma mistura de cidos graxos, cidos resnicos, esteris e
substncias insaponificveis. obtido pela acidificao dos sabes de cidos
graxos e cidos resnicos recuperados do licor negro concentrado.
(2)
O mercado
global para o CTO estimado em mais de 1.500.000 ton/ano. O maior produtor
so os Estados Unidos, com 840.000 ton/ano, seguido pela Escandinvia, com
315.000 ton/ano.
(3)
A tecnologia atual para o refino do CTO baseada na destilao a vcuo,
atravs da qual sua frao cida separada por meio de vrias colunas de
destilao. Normalmente, utiliza-se uma primeira coluna de destilao para a
separao da frao mais voltil (cidos graxos e resnicos) da mais pesada
(denominada pitch), que contm esteris, hidrocarbonetos, lcoois de cadeia
longa e ceras de alta massa molar. Uma segunda coluna normalmente usada na
frao voltil para separar os cidos graxos (Tall Oil Fatty Acid TOFA) dos
cidos resnicos (BREU),
(4)
sendo estas duas fraes as de maior valor comercial.
Por outro lado, atualmente o pitch no possui valor comercial, sendo utilizado
apenas como combustvel.
Devido s altas temperaturas durante as etapas de destilao, uma grande
parte dos esteris sofre degradao trmica. Algumas variaes do processo
industrial, como a separao das substncias neutras utilizando evaporadores de
filme ou pelcula antes da acidificao do sabo de tall oil, so mencionadas na

1
W.H. Ling, P.J.H. Jones, Atherosclerosis, 118 (1995) 319.
2
R. E. Hughes, US Patent 4 524 024 (1985).
3
L. H. Norlin, B. Kemi, Ullmanns Encyclopaedia of Technical Chemistry, A 26 (1995) p. 57.
4
D. T. A. Hulbers, A. M. Robbins, D. H. Sullivan, US Patent 6 414 111 (2002).
- 2 -

literatura.
(5)
Processos utilizando a saponificao dos cidos carboxlicos e a
extrao por solventes para a separao das substncias neutras, so tambm
mencionados em patentes.
(6,7)
No entanto, ainda existem poucos processos
economicamente viveis para a extrao dos esteris presentes no CTO e no
pitch.
O processo desenvolvido neste trabalho baseia-se na utilizao de um
catalisador qumico ou enzimtico que promove a esterificao seletiva dos cidos
graxos, para aumentar a diferena de volatilidade com relao aos cidos
resnicos, conseguindo com isso uma separao mais eficiente sem a
necessidade de colunas de fracionamento de alta performance e altas
temperaturas. O CTO esterificado com metanol, utilizando-se uma lpase do tipo
B Candida antartica (catlise enzimtica) ou cido metanosulfnico (catlise
qumica) como catalisador, sendo que nessa condio somente os cidos graxos
se transformam em steres. Aps a metilao da frao graxa, os esteris livres
presentes no CTO so esterificados com cido brico. Com isto, consegue-se
aumentar a diferena do ponto de ebulio entre os steres graxos, os cidos
resnicos e os esteris. A separao pode ento ser feita em colunas de recheio
comum, destilao tipo batelada ou utilizando evaporadores tipo filme (Thin film)
ou de pelculas raspadas. A menor temperatura do processo diminui as reaes
indesejveis, como a degradao dos esteris e a decomposio e
descarboxilao dos cidos resnicos.

5
P. Knoer, G. Pieh, US Patent 3 644 179 (1972).
6
R. Rohr, J.A.T. Quijano, US Patent 6 344 573 (2002).
7
T.J. Bander, W.B. Bedwell, S.P. Johnson, US Patent 4 977 243 (1990).
- 3 -

Captulo 2: Reviso Bibliogrfica

2.1 - Tall Oil

As madeiras de conferas, especialmente Pinus, contm aproximadamente
3 % de uma frao de baixa massa molecular constituda por cidos resnicos
livres, cidos graxos de cadeia longa (primariamente na forma de glicerdeos),
esteris, terpenos volteis e outros materiais insaponificveis.
Esses materiais, que so a maior parte do extrato proveniente da madeira,
constituem o principal subproduto do processo de polpao kraft, ou processo
sulfato, em uma indstria de papel e celulose que utiliza a madeira de Pinus como
matria-prima. Os glicerdeos e os cidos resnicos so saponificados durante o
processo de digesto alcalina, e o sabo resultante dissolvido no licor do
processo de polpao.
O CTO obtido pela acidificao dos sabes de cidos graxos e resnicos
recuperados do licor negro concentrado.
(8)

A indstria sueca de celulose fez a primeira contribuio para o nome "tall
oil". Do processo sulfato, eles obtinham um subproduto oleoso que chamaram
"talloja", da palavra sueca "tall" que significa Pinus, e do sufixo "oja" que significa
leo. Ento, a traduo literal seria "leo de Pinus". Como o leo de Pinus j era
um produto comercial conhecido nos Estados Unidos e Europa, isso causou
confuso visto que o novo "leo de Pinus" era um produto completamente
diferente. Os alemes esclareceram a questo dando ao material o nome de
"talll", combinando a palavra sueca para Pinus e a palavra alem "l", que
significa leo. Por similaridade, nos Estados Unidos adotou-se o nome "tall oil".
(9)

Em 1893, descobriu-se que o licor negro continha cidos graxos e sabes
resnicos; contudo, somente em 1901 ocorreu a primeira produo do CTO na
Sucia.
(10)

8
J. Drew, Naval Stores Production Chemistry and Utilization, Ed. D. F. Zinkel e J. Russel, Pulp Chemicals
Association Inc., 1989, p. 29.
9
J.M.F. Nogueira, Separao entre cidos gordos e resnicos do Crude Tall-Oil, Tese de Doutoramento em
Qumica Orgnica, FCUL, 1995.
10
A. Linder, Tall Oil Refining, ACTA Polytechnica, 95 (1952) 4.
- 4 -

No Brasil, no havia produo de derivados de Pinus em larga escala, at
recentemente com a implementao do P. elliotti.
De acordo com Critchfiel e Little,
(11)
o gnero Pinus constitudo por 54
espcies, sendo que o P. elliotti foi a que melhor se adaptou s condies
climticas locais.

2.1.1 - Composio Qumica do Crude Tall Oil

Os principais componentes do crude tall oil so os cidos graxos, cidos
resnicos e os materiais insaponificveis, que compreendem esteris, lcoois e
hidrocarbonetos. A composio depende da variedade, localizao geogrfica,
tipo de processamento e perodo do ano em que a coleta foi realizada, (Tabela 1).

Tabela 1: Composio Tpica para o Crude Tall Oil.
(3)
Caracteristica Escandinvia Estados Unidos Canad Frana
ndice de Acidez mgKOH/g 145,0 165,0 140,0 165,0
ndice de Saponificao mgKOH/g 160,0 172,0 165,0 172,0
cidos Graxos % 45,0 45,0 42,0 40,0
Palmtico (C16:0)* 1,5 3,0 2,0 2,0
Esterico (C18:0) 0,5 1,0 1,0 1,0
Olico (C18:1) 10,0 20,0 10,0 15,0
Linolico (C18:2) 17,0 13,0 15,0 11,0
Linolnico (C18:3) 5,0 1,0 3,0 1,0
Araqudico (C20:0) 1,0 0,5 1,0 0,5
Outros 10,0 6,5 10,0 9,5
cidos Resnicos % 30,0 42,0 30,0 50,0
Pimrico 2,0 3,0 2,0 5,0
Palstrico 4,0 7,0 5,0 7,0
Isopimrico 2,0 4,0 4,0 4,0
Abitico 12,0 15,0 10,0 18,0
De-hidroabitico 5,0 4,0 4,0 5,0
Neoabitico 4,0 6,0 3,0 6,0
Outros 1,0 3,0 2,0 5,0
Neutros % 25,0 13,0 28,0 10,0
Umidade
Cinzas
dido mineral (H2SO4)
Enxofre
* O termo entre parnteses indica o nmero de carbonos e o nmero de duplas ligaes.
< 2%
< 0,2%
< 0,02%
< 0,3%

11
W.B. Critchfiel, E.L. Little, Geographic distribuition of the pines of the world.USDA for. Sev. Misc. Publ.
991 (1996), p. 87.
- 5 -

O CTO produzido nos Estados Unidos, Canad, Frana e Escandinvia
apresenta uma grande variao nos teores de cidos resnicos e neutros
(materiais insaponificveis).
O CTO proveniente da Nova Zelndia apresenta composio similar ao
produzido nos Estados Unidos, mesmo sendo proveniente de espcies diferentes
de Pinus. O CTO chins apresenta altos teores de cidos resnicos, e portanto
mais cristalino.
Boyette
(12)
estudou os efeitos sazonais para o rendimento e a composio
do CTO, em madeira de Pinus (de plantas de mesma origem) pr-processada,
entre 1966 e 1976, e os rendimentos mais altos foram encontrados em fevereiro e
maro, e os mais baixos rendimentos, em julho e agosto. Tambm foram
observadas variaes nos teores e na composio dos cidos resnicos, cidos
graxos e material insaponificvel.
Impurezas como lignina, resduo de sabo, emulso gua-leo, sais
sdicos e cido sulfrico tambm so encontradas. O teor dessas impurezas
depende da eficincia do processo de lavagem e secagem do produto.
Zinkel
(13,14)
estudou a variao, entre diferentes rvores em relao ao
rendimento de CTO e composio em cidos resnicos, cidos graxos e material
insaponificvel, que se encontra apresentada na Tabela 2.

Tabela 2: Variao na composio do CTO entre diferentes rvores.
rvore Nmero 1 2 3 Mdia
CTO lbs/ton 49,6 49,0 41,0 46,5
cidos Resnicos % 38,2 41,2 26,3 35,3
cidos Graxos % 54,4 51,0 66,3 57,2
Insaponificveis % 7,2 7,7 7,3 7,4

12
S.R. Jr Boyette, Pulp and Paper, 51 (1977) 78.
13
D.F. Zinkel, Tappi (2) 58 (1975) 118.
14
D.F. Zinkel, Tappi (5) 63 (1980) 137.
- 6 -

2.1.2 - Recuperao dos Sabes de Tall Oil do Licor Negro

No processo kraft ou sulfato, a madeira picada digerida com uma soluo
de sulfeto de sdio (Na
2
S), hidrxido de sdio (NaOH), carbonato de sdio
(Na
2
CO
3
) ou Na
2
O.
O processo de polpao ocorre a altas temperaturas e presso em um vaso
chamado digestor. O processo de digesto pode ser contnuo ou em batelada.
Durante a digesto, as fibras de celulose so separadas dos outros constituintes
da madeira.
A soluo altamente alcalina usada no processo de digesto, ou "licor
branco", forma sais solveis de sdio da lignina, cidos resnicos e cidos graxos.
Os sabes e o licor de cozimento so separados da polpa da madeira por meio de
uma lavagem com gua.
O licor, contendo esses sabes e a gua de lavagem, segue para os
evaporadores, onde concentradon (temperatura: aprox. 100
o
C). Com o aumento
da concentrao do licor, os sabes de tall oil sobem para a superfcie do mesmo,
de onde podem ser removidos por meio de raspagem mecnica.
(9,15)

O sabo obtido contm aproximadamente 55 % de sais de sdio de cidos
graxos e resnicos, 35 % de gua e 10 % de licor negro.
O rendimento do CTO obtido do processo kraft tambm afetado pelo tipo
de digestor utilizado. Os digestores do tipo batelada apresentam rendimentos
superiores aos digestores contnuos.
(16,17)

2.1.3 - Processo de Acidulao para a Recuperao do CTO Bruto

Na acidulao do sabo de CTO, o sabo reage com cido sulfrico diludo
(30 %) a 98
o
C, produzindo o CTO e o sulfato de sdio como subproduto.

15
J. M. Drew (Ed.), Tall Oil Pulp Chem. Assoc., New York, 1981.
16
S. Jr McSweeney, The New Pulping Process and Wood Chemical Production, Pulp Chemicals Assoc.
Meetings, Point Clear, 1987.
17
R. Aurell, D.D. Thireault, D.D. Curti, R.G. Seefeldt, Tappi 65 (1980) 123.
- 7 -

2 RCOONa + H
2
SO
4
Na
2
SO
4
+ 2RCOOH

A reao controlada at valores de pH entre 2,5 e 3,5, quando se assume
a total acidulao do CTO.
A acidulao converte os sabes sdicos em cidos resnicos e cidos
graxos. A mistura reacional, contendo o CTO liberado, sedimentada ou
centrifugada dependendo do processo utilizado.
Atualmente, existem quatro processos bsicos de acidulao de sabo do
CTO
(18)
:

-Acidulao e decantao por batelada;
-Acidulao por batelada seguida de separao contnua;
-Acidulao contnua seguida por separao centrfuga;
-Acidulao contnua seguida por separao gravimtrica contnua.

Os primeiros processos implementados foram em batelada, porm
atualmente, os processos semi-contnuos e contnuos ganharam maior
popularidade, devido a sua maior produtividade.

2.1.4 Aplicaes para o CTO

Nas dcadas de 1950 e 1960, o principal uso do CTO era em coberturas de
superfcies, devido aos cidos graxos nele contidos. Atualmente, ele
amplamente utilizado principalmente devido a disponibilidade e seu baixo custo.
Diferentemente dos leos vegetais, a produo do CTO no est relacionada a
leos comestveis ou produtos agrcolas que sofrem flutuao de mercado, sendo
mais usado como um produto qumico.
So listados a seguir os seus principais campos de aplicao: revestimento
de superfcies; diluentes de plastificantes e estabilizantes; produtos de asfalto;

18
E.E. McSweeney, Naval Stores Production, Chemistry and Utilization, D. F. Zinkel e J. Russel (Eds.), Pulp
Chemicals Association Inc., New York, 1989, p. 158-195.
- 8 -

sabes lquidos; desinfetantes; detergentes sintticos; flotao de minrios;
produo de espuma de borracha; fabricao de cola para papel; fabricao de
adesivos industriais; fabricao de resinas alqudicas; fabricao de poliamidas;
emulsificante; plastificante; cosmticos e medicina.
Dentre as indstrias brasileiras que utilizam os derivados do CTO,
destacam-se as indstrias qumicas, principalmente as de tintas, resinas,
minerao e fertilizantes.

2.2 Principais componentes do CTO

2.2.1 cidos Graxos de Tall Oil (Tall Oil Fatty Acid TOFA)

Os compostos graxos do CTO esto presentes na madeira de Pinus,
inicialmente na forma de steres de glicerol e cidos graxos de cadeias lineares,
com quatorze ou mais tomos de carbono, como mostrado na Figura 1.

triglicerdeo
(TG)
H
2
H OCOR''
H
2
C OCOR'
C
C OCOR'''
diglicerdeo
(DG)
H
2
H OCOR''
H
2
C OH
C
C OCOR'''
monoglicerdeo
(MG)
H
2
H OH
H
2
C OH
C
C OCOR'''
glicerol

H
2
H OH
H
2
C OH
C
C OH
cido graxo
(cido esterico)
OH
O

Figura 1: Estruturas para alguns materiais graxos, presentes no CTO de Pinus.
O material graxo convertido em sabo durante o processo de digesto
alcalina.
Os diversos cidos graxos presentes no TOFA diferem entre si pelo nmero
de tomos de carbono em suas cadeias e pela forma de ligao desses tomos
- 9 -

entre si. As cadeias carbnicas so sempre lineares, contendo na maioria das
vezes um nmero par de carbonos.
Os tomos de carbono na formao das cadeias lineares podem achar-se
ligados unicamente por ligaes simples, nos chamados cidos graxos saturados
(ex. cido palmtico), ou terem uma ligao dupla, nos cidos graxos mono-
insaturados (ex. cido olico), ou ainda terem diversas ligaes duplas, cidos
graxos poli-insaturados, (ex. cido linolnico), como j mostrado na Tabela 1.
As estruturas para os cidos graxos mais comuns presentes no CTO esto
descritas na Figura 2.

OH
O
OH
O
OH
O
c. Oleico C-18:1
c. Linoleico C-18:2
c. Linolnico C-18:3
OH
O
c. Esterico C-18:0
OH
O
c. Palmtico C-16:0

Figura 2: Estruturas para os cidos graxos mais abundantes presentes no Crude Tall Oil
americano.
(19)

Os cidos graxos insaturados podem apresentar-se em 2 formas
isomricas, de geometria diferenciada pela configurao em torno dos carbonos
insaturados: cis ou trans.
Somente o ismero cis produzido na natureza, enquanto que o ismero
trans proveniente do stress trmico ocorrido durante o processo de destilao
do CTO, que tambm leva conjugao das duplas de alguns cidos graxos poli-

19
D.P. Duncan, Naval Stores Production Chemistry and Utilization, D. F. Zinkel e J. Russel (Eds.) Pulp
Chemicals Association Inc., 1989, p. 349.
- 10 -

insaturados.
(20)
Assim, o processo de fracionamento do CTO para a produo do
TOFA resulta em um produto com vrios graus de pureza, como indicado na
Figura 3.

CTO
Topo CTO - alto teor de insaponificveis
cidos graxos de Tall Oil (TOFA)
Tall Oil destilado
cidos Resnicos de Tall Oil (BREU)
Pitch
aprox. 160
o
C
aprox. 200
o
C
aprox. 240
o
C
aprox. 280
o
C
> 300
o
C

Figura 3: Fracionamento do CTO.
(19)

Com a implementao de novas tcnicas de separao, foi possvel
produzir em 1942 e 1943 uma mistura de cidos graxos de CTO, contendo apenas
6 % de cidos resnicos como impureza. Essas melhorias na qualidade
possibilitaram inmeras novas aplicaes para o produto.
(21)

Atualmente, o TOFA considerado altamente puro quando apresenta de 0
a 1% de cidos resnicos como impureza.
A seguir esto descritas as derivatizaes mais comuns para os cidos
graxos provenientes do CTO e suas aplicaes.

20
R.W. Johnson, H. Pryde, Fatty Acids, E.h. Pryde (Ed.), Am. Oil Chem. Soc., Champaign III (1979), p. 319.
21
W. Haynes (Ed), History of American chemical Industry, Vol. V, D. Van Nostrand Co. Inc., Toronto, 1949,
p. 236-237.
- 11 -

2.2.1.1 - Contribuio do Grupo Carboxlico

- Saponificao
Sal sdico: utilizado para flotao de minrios.
(22,23,24)

Sal de alcanolamidas: utilizado como emulsionante.
(25,26)

Sal de clcio: estabilizante para PVC e impermeabilizante para papel.
(27)

Sal de metais pesados: lubrificantes e estabilizantes para PVC.
(28)

- Esterificao: plastificantes, solubilizantes, biodiesel.
(29)

- Etoxilao: tensoativo de baixo custo.
(30)

- Derivados Nitrogenados
Alcanolamidas: agente de consistncia para formulaes cosmticas e
produtos de limpeza.
(31)

Bisisteramida: aditivo para tintas.
(32)

Dimetilamida: aditivo para tintas.
(33)

Aminas Graxas: produo de tensoativo catinico.
(34)

Imidazolinas: inibidor de corroso.
(33)

- Descarboxilao: lubrificantes.
(35)

- Hidrogenao: produo de lcool graxo.
(36)
(Mostrado na Figura 4).

22
E.S. Pattison (Ed), Fatty Acids and their Industrial Applications, Marcel Dekker, New York, 1968.
23
E. Jungermann, Baileys Industrial Oil and Fat Producst, Vol. 1, D. Swern (Ed), Wiley-Interscience, New
York, 1979, p. 511.
24
R.A. Grimm, Fatty Acids, E. H. Pryde (Ed.), Am. Oil Chem. Soc., Champaign III, 1979, p. 78.
25
B.M.Vanderbilt, US Patent 2 247 106, (1941).
26
B.M. Vanderbilt, US Patent 2 281 177, (1942).
27
K.S. Markley, Fatty Acids Part 2, K.S. Markley (Ed.), Interscience, New York, 1961, p. 715.
28
E.R. Booser, Kirk-Othmer Encyclopedia of Chemical Technology Vol. 14, Wiley-Interscience, New York,
1981, p. 501.
29
S. Patai (Ed.), The Chemistry of Carboxylic Acids and Esters Interscience, London, 1969.
30
Henkel and Cie, GmgH., Brit.Patent 1 147 482, (1969).
31
Dow Chemical Co., The Alkanolamines Handbook, Dow Chemical Co., 1980.
32
W. Umbach, W. Stein, Fette Seifen Anstrichm., 71 (1969) 938.
33
S.H. Shapiro, Fatty Acids and Their Industrial Applications, E.S. Patison (Ed.), Marcel Dekker, 1968, p. 78.
34
R.A. Reck, J. Am. Oil Chem. Soc., A 796 (1979) 56.
35
J. March, J. Chem. Ed., 40 (1963) 212.
36
J.A. Monick, J. Am. Oil Chem. Soc., A 853 (1979) 56.
- 12 -

OH
O
O
O
OH
CH
3
OH
NaOH
H
2
Pd

Figura 4: Hidrogenao de cidos graxos para a produo de lcool graxo.

2.2.1.2 - Contribuio do hidrognio ativo - Figura 5.

CH
3
(CH
2
)
3
-C-CH CH-C-CH
H*
H*
CH-C-(CH
2
)
5
-C-COOH
H*
H*
H*
H*
H*
H*

Figura 5: Hidrognios ativos para o cido linolico.

Estes hidrognios so mais reativos, pois esto mais deficientes de
densidade eletrnica, j que se encontram prximos a grupos que deslocam esta
densidade eletrnica.

- Sulfonao: Tensoativos de baixo custo.
(37)
Figura 6.

37
A.J. Stirton, J.K. Weil, Anionic Surfactants Part 2, W.M. Linfield (Ed.), Marcel Dekker, New York, 1976,
p. 381.
- 13 -

C H
3
O
O
CH
3
SO
3
C H
3
O
O
SO
3
H
CH
3

Figura 6: Sulfonao do oleato de metila.

- Conjugao: produo de suplementos alimentares.
(38)

2.2.1.3 - Contribuio da Olefina

- Halogenao: metodologia analtica, para a determinao do ndice de
iodo.
(39)

- Sulfatao: aditivo para couro.
(40)

-
Oxidao: aditivo para couro.
(38)
-
Epoxidao: plastificante e co-estabilizante para PVC.
(41)
-
Hidrogenao: produo de cidos graxos saturados.
(42)
-
Hidroformilao: produo de resinas alqudicas.
(43)
-
Mettese: produo de di-cidos e hidrocarbonetos insaturados.
(44)
-
Reaes de cicloadio-dimerizao: produo de cidos dimricos
utilizado para a produo de poliamidas.
(45)
(Apresentado na

Figura 7).

38
E.N. Frankel, Fatty Acids, E.H. Pryde (Ed.), Am. Oil Chem. Soc., Champaing, III, (1979), p. 246.
39
W.E Link (Ed), Official and Tentative Methods of the Am. Oil Chem. Soc., Champaing, III, (1973).
40
B.A. Dombrow, Anionic Surfactants Part 1, W.M. Linfield (Ed), Marcel Dekker Inc., New York, 1976, p.
233.
41
M. Hirata, M. Uchida, Shinku Kagaku, 7 (1959) 97.
42
H. Bliss, W.C. Sursky, US Patent 2 451 377 (1948).
43
E.N. Frankel, F.L. Thomas, J. Am. Oil Chem. Soc., 50 (1973) 39.
44
H.J. Ivin, Olefin Metathesis, Academic Press, London, 1983.
45
C.J. Leonard, J. Am. Oil Chem. Soc., A 782 (1979) 56.
- 14 -

OH
O
OH
O
OH
OH
O
O
Argila Montmorilonita
+

Figura 7: Dimerizao de cidos graxos para a produo de cidos dimricos.

2.2.2 cidos Resnicos

A utilizao dos cidos resnicos e monoterpenos provenientes de Pinus
(Pinus sylvestris) remonta a um passado distante da histria humana. Na bblia
(Gnesis 6:14), esta descrito a utilizao do leo resina de Pinus.
Pesquisas arqueolgicas demonstram que, nos sculos 2 e 4 a.C. o leo
resina era um importante commodity para as civilizaes grega, macednica, da
sia menor e do Egito. Essas utilizavam a resina de Pinus como
impermeabilizante, como combustvel e em inmeras aplicaes associadas
indstria naval.
(46)

Comercialmente, os cidos resnicos so definidos pela sua fonte: resnicos
de goma, obtidos pelo processamento de leo resnico exudado de rvores vivas;
resnicos de madeira, obtidos pela extrao por solventes de lascas de madeira
virgem; e o resnico de Crude Tall Oil, obtido pela destilao do Crude Tall Oil. Na
Tabela 3, apresentada a composio fsico-qumica dos cidos resnicos para
esses trs tipos de fontes.

46
C.D. Dyer, Tese de Mestrado, The physiology and management of naval stores pines and the history of the
naval stores industry. University of Georgia, Athens, Ga, 1960, p. 10-32.
- 15 -

Tabela 3: Composio fsico-qumica tpica para os cidos resnicos provenientes de goma, CTO e
madeira.
(47)

ndice de Acidez mgKOH/g 164 167 166
ndice de Saponificao
mgKOH/g
172 174 172
cidos Graxos % - <5,0 -
Insaponificveis % 8 7 6
ndice de Refrao 1,541 1,54 1,545
Densidade g/cm3 1,07 1,07 1,07
Resnicos de Goma Resnicos de Madeira Resnicos de CTO

Todos os trs tipos consistem primariamente de cidos C
20
diterpeno
monocarboxlicos. Estes materiais so compostos por quatro classes de
esqueletos bsicos: pimarano, isopimarano, abietano e labdano,
(48,49)

apresentados na Figura 8.

20
19 18
17
16
15
14
13
12
11
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1
Pimarano
17
20
16
15 14
13
12
11
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1
19 18
Isopimarano
18
1
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
20
2
3
19
17
17
19
3
2
20
16
15
14
13
12
11
10
9
8
7
6
5
4
1
18
Abietano
Labdano

Figura 8: Classes de esqueletos bsicos para os cidos resnicos.

Os cidos resnicos mais comuns derivados desses quatro esqueletos
bsicos encontrados no CTO so do tipo abietano, conforme mostrado na Figura
9.
(49,50,51,52)

47
E. Strazdins, Paper Sizes and Sizing, Naval Stores Production Chemistry and Utilization, D. F. Zinkel e J.
Russel (Eds.), Pulp Chemicals Association Inc., 1989, p. 575-615.
48
E.J. Soltes e D.F. Zinkel, Chemistry of Rosin, Naval Stores Production Chemistry and Utilization, D. F.
Zinkel e J. Russel (Eds.), Pulp Chemicals Association Inc., 1989, p. 262-331.
49
J.W. Rowe, et al., Common and systematic nomenclature of cyclic diterpenes. Forest Products Laboratory,
Forest Service, USDA, Madison, Wis., 57 (1969), p. 57.
50
J. Rigaudy, S.P. Klesney, Nomeclature of Organic Chemistry, Sections A,B,C,D,E,F,; and H, Pergamon
Press, New York, 1970.
51
G. Weissman, Hozforchung 28 (1974) 186.
52
D.F. Zinkel, J.K. Toda, J.W. Rowe, Phytochem, 10 (1971) 1161.
- 16 -

O
HO
O
HO
O
HO
cido Neoabitico
C
20
H
30
O
2
cido Abitico
C
20
H
30
O
2
cido Dehidroabitico
C
20
H
28
O
2
O
HO
cido Palstrico
C
20
H
30
O
2
O
HO
cido Levopimrico
C
20
H
30
O
2
O
HO
cido Pimrico
C
20
H
30
O
2
O
HO
cido Isopimrico
C
20
H
30
O
2
O
HO
cido Sandaracopimrico
C
20
H
30
O
2
O
HO
cido Comunico
C
20
H
30
O
2

Figura 9: Principais cidos resnicos constituintes da frao cida do CTO.

Na Tabela 4, encontramos a composio tpica para os principais cidos
resnicos presentes em diversas espcies de Pinus.
(53)

53
D.F. Zinkel, Pine resin acids as chemotoxonomic and genetic indicators, Tappi Press, Atlanta Ga, 1977.
- 17 -

Tabela 4: Composio tpica para os principais cidos resnicos presentes em diversas espcies
de Pinus.
(54)

cido
Resnico
Pimrico Sandaracopi
mrico
Elliotinico Levopimrico Isopimrico Abitico De-hidroabitico Neoabitico
Espcies de
Pinus
P.elliotti var.
elliotti
5,1 1,8 3,1 37,0 21,0 9,7 3,7 16,0
P.elliotti var.
densa
3,8 1,9 3,1 38,0 21,0 12,0 3,7 16,0
P.palustris 5,4 1,1 0,0 52,0 10,0 9,4 8,3 13,0
P.taeda 8,7 2,2 0,0 64,0 8,6 6,3 9,5
P.ponderosa 7,6 2,9 0,0 40,0 15,0 11,0 8,2 11,0
P.halepensis 0,0 1,2 0,0 39,0 10,0 37,0 1,5 9,7
P.brutia 0,0 1,2 0,0 44,0 10,0 32,0 2,5 10,0
P.pinaster 8,0 2,0 0,0 39,0 12,0 14,0 4,2 18,0
P.caribaea 4,2 2,2 0,0 49,0 8,0 10,0 8,6 16,0
P.peuce 1,8 1,0 0,0 12,0 32,0 35,0 0,8 14,0
Porcentagem de cido Resnico na Frao cida

Na Tabela 5, encontramos os cidos resnicos obtidos em diferentes
regies.

Tabela 5: Composio tpica para os principais cidos resnicos provenientes de Pinus de diversos
pases
.(54)
Origem Pimrico Sandaracopi
mrico
Elliotinico Levopimrico Isopimrico Abitico Dehidroabitico Neoabitico
Americano 5,1 1,8 2,8 25,0 17,0 22,0 5,7 20,0
Brasileiro 4,7 1,7 3,2 11,4 18,2 36,3 5,4 15,3
Burmese 7,9 3,0 0,0 44,0 8,3 30,0 6,0 2,2
Chins 9,2 2,7 0,0 22,0 1,5 44,0 4,3 15,0
Francs 10,0 2,2 0,3 22,0 7,0 36,0 4,9 17,0
Grego 0,0 1,9 0,0 14,0 11,0 50,0 4,5 13,0
Hondurenho 9,6 2,2 0,0 21,0 17,0 22,0 12,0 15,0
Indiano 9,2 1,5 0,0 11,0 20,0 38,0 2,0 18,0
Mexicano 6,8 1,2 0,0 9,8 12,9 53,3 7,8 6,1
Portugus 8,3 1,4 0,0 20,4 4,5 27,7 5,8 17,2
Russo 7,8 2,4 0,0 27,0 5,6 35,0 5,3 17,0
Espanhol 8,7 1,5 0,0 27,0 0,0 36,0 1,9 24,0
Turco 0,0 1,3 0,0 24,0 13,0 41,0 5,1 15,0
cido Resnico

Podemos observar pelos dados das Tabelas 4 e 5 que a composio de
terpenos varia de acordo com a espcie de Pinus utilizada. O produto mais
desejado o cido abitico, por suas propriedades de cristalizao, sendo muito
utilizado na produo de adesivos indstriais.
Outros cidos resnicos encontrados so, em sua grande maioria, produtos
de isomerizao induzida pelas altas temperaturas de processamento. Na Tabela

54
R.V. Lawrence, Naval Stores Production Chemistry and Utilization, D. F. Zinkel e J. Russel (Eds), Pulp
Chemicals Association Inc., 1989, p. 136-137.
- 18 -

6, encontramos a composio de cidos resnicos em madeira de Pinus, sabo e
CTO.

Tabela 6: Composio de cidos resnicos em madeira de Pinus, sabo e Tall Oil.
(55)
cido Resnico Madeira de Pinus Sabo CTO Sabo CTO1 CTO2
Pimrico 8,1 8,4 9,7-11,7 9,5-10,5
Sandaracopimrico 1,6 1,7 1,6-2,0 1,9-2,5
Isopimrico 3,5 3,3 6,0-9,3 5,4-7,8
Levopimrico 30,1 14,3 6,8-9,6 -
Palstrico 15,1 16,8 9,1-14,8 8,1-13,2
Dehidroabitico 14,5 16,3 13,8-20,5 12,8-15,3
Abitico 15,9 27,4 25,2-32,2 39,9-50,4
Neoabitico 11,2 11,9 8,3-16,5 10,2-13,4

1- Resultado referente a seis fbricas escandinavas.
2- Resultado referente a cinco plantas de destilao europias.

Como no caso dos cidos graxos, a maioria das transformaes qumicas
para os cidos resnicos ocorre no grupo carboxlico e na olefina.
A seguir esto descritas as derivatizaes mais comuns para os cidos
resnicos provenientes do CTO e suas aplicaes:

2.2.2.1 - Contribuio do Grupo Carboxlico

- Esterificao: Preparao de steres de pentaeritritol e glicerina para a
aplicao como adesivos e vernizes para uso geral, base para
nitrocelulose, tintas de impresso, preparao de resinas malicas e
esmaltes brancos de baixo custo
(56,57)
(Figura 10).

55
B. Holmbon, E. Avela, E., Alteration of Components during Technical Recorery ad Refining of Crude Tall
Oil, Am. Chem. Soc. Meeting, New Orleans, 1977.
56
G.J. Gibs, Tall oil rosin esters report, No. 1: Glycerol and pentaerythitol esters of unmodified rosins. St.
Regis Paper Co. Technical Report 031-69, 31 (1969), p. 31.
57
Catlogo de produtos Socer Brasil, Estrada do Guaruj, 3150, bloco I Salto So Paulo.
- 19 -

COOH
OH
OH
OH
+
2
O O
H
2
C
H
2
C O
OH
O
+
H
2
O 2

Figura 10: Sntese de steres de glicernicos de cidos resnicos provenientes do CTO.

- Formao de Sais: emulsificante para borracha sinttica, nitrlica, resinas
ABS e impermeabilizante para papel.
(58)

- Preparao de derivados nitrogenados: estabilizantes e plastificantes.
(59)

- Alcoxilao: produo de tensoativos no-inicos.
(60)

- Reduo para lcoois: produo de adesivos e aditivos para leos.
(61)

- Descarboxilao: lubrificantes e aditivos para tintas.
(62)

2.2.2.2 - Contribuio da Olefina

- Desidrogenao/Desproporcionalizao: estabilizao da cor dos cidos
resnicos para a produo de adesivos e base para emulsificantes de
borracha sinttica
(63,64,65)
(Figura 11).

58
J.R, Merino, M.L. Selas, S. Jimenez Gomez, Anal. Quim. 82 (1986) 292.
59
S.T. Putnam, US Patent 2 787 637 (1957).
60
W.A. Rohde, G.W. Hedrick, J. Am. Oil Chem. Soc. 47 (1970) 3.
61
H. I. Jr Enos, G.C. Harris, G.W. Hedrick, Rosin and rosin derivatives, in Kirk-Othmer Encyclopedia of
Chemical Technology, 2
nd
ed., 17 (1968) p. 475-508.
62
H.I. Waterman, J. Clausen, A.J. Tulleners, Rec. Trav. Chim., 54 (1935) 701.
63
G.C. Harris, Resin and Resin Derivatives in ECT 1
st
ed., Hercules Powder Company, 11 (1952), p. 779-810.
64
J. Soltes, Naval Stores Production Chemistry and Utilization, D. F. Zinkel e J. Russel (Eds.), Pulp
Chemicals Association Inc., 1989, p. 262-331.
65
Catlogo de produtos Resitec Indstria Qumica Ltda., Rio de Janeiro RJ.
- 20 -

cido De-hidroabitico
C
20
H
28
O
2
cido Abitico
C
20
H
30
O
2
O
HO
O
HO
200-300
o
C
Pd
+
H
2

Figura 11: Desidrogenao do cido abitico.

- Isomerizao: preparao de intermedirios para sntese.
(66)

- Hidrogenao: estabilizao da cor dos cidos resnicos para a produo
de adesivos Hot-Melt.
(67)

- Dimerizao: produo de poliamidas, polmeros de alta performance,
adesivos, aditivos para resinas e vernizes.
(68)

- Polimerizao: produo de polmeros de alta performance e blendas para
plsticos.
(69)

2.2.3 Esteris

Os esteris so triterpenos modificados, contendo quatro anis e sem as
metilas nos carbonos 4 e 14, em relao ao lanosterol (Figura 12).

HO
H
H H
Colesterol
27
26
25
24
23
22
21
20
19
18
17
16
15
14
13
12
11
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1
HO
H
H
Lanosterol

Figura 12: Estrutura do colesterol e sua numerao.

66
D.E. Baldwin, D.E. Loeblich, R.V. Lawrence, J. Am. Chem. Soc., 78 (1955) 2015.
67
B.T. Brooks, US Patent 2 094 117 (1937).
68
B.A. Parkin, W.H. Schuller, Ind. Eng. Chem. Prod. Res. Develop, 12 (1973) 328.
69
A.L. Rummelsburg,, US Patent 2 124 675 (1938).
- 21 -

O lanosterol obtido pela ciclizao do xido de esqualeno, que um
triterpeno. Na Figura 13, so apresentados as estruturas para vrios esteris e
triterpenos tetracclicos.
(70)

HO
R
R
2
R
1
HO
R
HO
HO
R
R
HO
R
HO
Serratenediol (R=alfa-OH)
Episerratenediol (R=beta-OH)
3beta-hidrxi-14-serraten-21-ona (R=O)
24
Cicloartenol (R
1
=CH
3
, R
2
=H,=24)
24-Metilenocicloartanol (R
1
=CH
3
, R
2
=CH
2
Cicloeucalenol (R
1
=H, R
2
=CH
2
)
Colesterol (R=H, =5)
Campesterol (R=CH
3
, =5)
Campestanol (R=CH
3
)
Sitoesterol (R=C
2
H
5
, =5)
Estigmastanol (R=C
2
H
5
)
Estigmaesterol (R=C
2
H
5
, =5,=22)
4
5
6
7
22
24
7
8
9
3
4
10
13
14
24-Metilenelopenol (R=H, =7)
Citroestadienol (R=CH
3
, =7)
Obtusifoliol (R=H,=8)
Lupeol (R=CH
3
)
Betulinol (R=CH
2
OH)
Lanosterol (R=H)

Figura 13: Estrutura de vrios esteris e triterpenos.

O principal produto da sntese de esteris o colesterol, que modula a
fluidez e um componente essencial da membrana citoplasmtica das clulas
animais. O colesterol o precursor de sais biliares, que facilitam a digesto de
gorduras, da vitamina D, que estimula a captao de clcio pelos intestinos, e

70
A.H. Conner, Chemistry of Other Components in Naval Stores, Naval Stores Production Chemistry and
Utilization, D. F. Zinkel e J. Russel (Eds.), Pulp Chemicals Association Inc., 1989, p. 440-473.
- 22 -

hormnios esterides, tais como testosterona, estradiol e esteris, que controlam
o equilbrio salino.
(71)

O colesterol muito comum em clulas animais. J nas clulas vegetais, os
esteris mais comuns (fitoesteris) so o sitosterol, o estigmasterol e o
campesterol. O fitoesterol mais abundante nas espcies de Pinus o -
sitoesterol.
(72)

Atualmente, a maior fonte de fitoesteris so os leos vegetais que contm
entre 100 e 500 mg de esteris por 100g
(73)
, sendo os componentes mais comuns
o -sitosterol, estigmasterol e campesterol. A Tabela 7 mostra a composio em
fitoesteris de alguns leos vegetais.

Tabela 7: Composio da frao de esteris (%) de leos vegetais.
(73)
Algodo 0,35 Traos 9,2 2,5 88,2 Traos
Amendoim 0,25 - 12,8 10,8 74,6 -
Milho 0,9 - 22,1 7,2 62,2 3,5
Colza 0,84 0,8 29,4 - 54,9 5,7
Oliva 0,16 Traos 3,9 2,1 85,4 8,6
Soja 0,37 Traos 21,3 19,1 53,5 2,4
Beta-Sitoesterol
(%)
Colesterol
(%)
Avenasterol
(%)
leo Frao Esterlica
(%)
Campesterol
(%)
Estigmaesterol
(%)

Atualmente, a maior fonte natural de fitoesterol no mundo o destilado de
desodorizao do leo de soja (DDOS). Este produto natural bruto constitudo
de uma mistura de fitoesteris, tocoferol e cidos graxos.
Os fitoesteris tm sido utilizados em cosmticos, na sntese de
espirolactona, hidrocortisona e hormnios,
(74)
na sntese da 4-hidroxiandrosteno-
3,17-diona para o tratamento de cncer,
(75)
etc. Contudo, a sua maior demanda

71
H.D. Belitz, W. Grosch, Unsaponifiable constituents Food Chemistry, Berlin: Springer-Veriag, 1987, p.
182-197.
72
A.H. Conner, J.W. Rowe, J. Am. Oil Chem. Soc., 52 (1975) 334.
73
N.L. Facioli, Tese de Doutorado do Departamento de Tecnologia de Alimentos da Faculdade de Engenharia
de Alimentos da Universidade Estadual de Campinas, Dezembro (2000).
74
F. Zinkel, Turpentine, rosin, and fatty acids from conifers. In Organic Chemicals from Biomass, I.S
Goldestein (Ed.). CRC press, Boca Raton, Florida, 1981, p. 163-187.
75
R.C. Coobes, P.E. Gross, M. Dowssett, G. Hutchinson, D. Cunningham, M. Jarnan. e A.M.H. Brodie,
Steroids, 50 (1987), p. 245-252.
- 23 -

atual para tratar casos de hipercoloesterolemia.
(76)
Tm-se observado em
inmeros trabalhos de investigao que os fitoesteris, como o -sitoesterol e a
sua forma saturada -sitoestanol, diminuem o nvel de colesterol no sangue
atravs da reduo da absoro do colesterol endgeno e do colesterol absorvido
atravs da dieta alimentar. Aparentemente, os fitoesteris atuam como inibidores
da absoro intestinal do colesterol,
(77)
diminuindo os teores desses na corrente
sangnea.
O -sitostanol mais eficiente na reduo do colesterol total e LDL-
colesterol que o -sitosterol
(78)
. Os fitoesteris cclicos saturados aparentemente
no so absorvidos no intestino.
Os fitoesteris tambm so teis em estudos clnicos, por serem
endgenos (no sintetizados por humanos) e indicadores da absoro e sntese
de colesterol.
(79)

Os fitoesteris so os maiores constituintes da frao insaponificvel do
CTO,
(80)
e se apresentam principalmente como esteris livres e como steres de
esteris com cidos graxos.

2.3 - Histrico para o processamento do CTO

O refino do CTO teve incio, na Europa, no comeo do sculo XX, nos
Estados Unidos, na dcada de 1930 e no Brasil, na dcada de 1970. Vrios
processos rudimentares de destilao foram implementados e somente
sobrevivem quando o produtor processa quantidades limitadas de produto.
Esse desenvolvimento inicial para o refino do CTO foi bem documentado
por Drew
(81,82,83)
, e uma descrio bem detalhada destes processos foi efetuada
por Sandermann.
(84)

76
A.M. Lees, H.Y.J. Mok, R.S. Lees, M.A. Mccluskey, S.M. Grundy, Atherosclerosis, 28 (3) (1977), p. 325-
327.
77
B.J. Kudghodkar, L. Horlich, H.S. Sodhi, Atherosclerosis, 21 (1) (1976), p. 29-21.
78
T. Heinemann, G. Axtmann, K. Von Bergamann, Europ. J. of Clin. Invest., 23 (8) (1993), p. 827-830.
79
C.J. Glueck, J. Speirs, T. Tracy, P. Streicher, E. Illig, J. Vandergrift, Metabolism, 40 (8) (1991), p. 842-848.
80
A.H. Conner, J.W. Rpwe, J. Am. Oil Chem. Soc., 52 (1975) 334.
81
J. Drew, Naval Stores Rev., 94 (3), (1983) 4.
82
J. Drew, M. Propst (Eds.), Tall Oil, Pulp Chemicals Assoc., New York, 1981.
- 24 -

O primeiro processo de destilao para o CTO foi patenteado por Bergstron
e Lindquist, na Sucia, e por Hellstrom, na Finlndia. O processo em batelada foi
colocado em operao, em 1920, por Enzo-Gutzeit.
Bjorkgren patenteou o primeiro processo de separao contnuo para o
CTO, em 1927,
(81)
no qual os materiais volteis do CTO eram separados do pitch
na presena de vapor superaquecido, sendo esse fracionado em uma ou mais
colunas sem prvia condensao.
Um grande nmero de processos contnuos e semi-contnuos de
fracionamento do CTO foram patenteados na dcada de 1930 e incio da dcada
de 1940.
Uma compilao bibliogrfica efetuada pela American Pulp Chemicals
Association, em 1959, lista mais de 1600 referncias relacionadas ao CTO e aos
seus processos de separao/purificao.
(85)

Na maioria dos processos descritos, o refino feito atravs de outros
mtodos, alm da destilao. Esses mtodos incluem o refino cido, extrao por
solventes, adsoro, esterificao seletiva, saponificao seletiva, tratamento
qumicos, tratamento trmico e craqueamento parcial dos compostos presentes no
CTO. Contudo, a destilao demonstrou ser o nico processo com significado
comercial para o refino do CTO.
Em 1936, Westvaco e Covinton foram os primeiros a implementar o
processo contnuo para a destilao do CTO nos Estados Unidos.
Neste processo, o CTO aquecido de 300 a 350
o
C e a matria vaporizada
centrifugada e destilada em um Thin film, ocorrendo a separao da frao
voltil (DTO) da no-voltil (Pitch); posteriormente o meterial e condensado em
condensadores em srie. O destilado resfriado cristalizado e a gua-me re-
destilada da mesma maneira que o CTO.
Em 1942, Amour Co. iniciou sua planta de fracionamento em Chicago,
utilizando o processo Potts e obtendo no topo da coluna a frao graxa do CTO

83
J. Drew, Tall Oil Processing, Am. Oil Chem. Soc. Tall Oil Symposium, 1977.
84
W. Sanderman, Naturharze Terpentinol Tallol Chemie und Technologie, Springer Verlag,
Berlin/Gottingen/Heidelberg, 1960, 316-344.
85
J. Weiner, Tall Oil, Bibliographic series number 133-135, The institute of paper chemistry, 1959.
- 25 -

(TOFA), contendo aproximadamente 6 a 12% de cidos resnicos como
contaminante.
General Mills Co. iniciou o funcionamento de sua planta de separao para
o CTO em 1948, utilizando o mesmo princpio da planta Armour (destilao
contnua). Essa planta produzia uma frao de cidos graxos com apenas 1 a 3%
de cidos resnicos e 1 a 2% de material insaponificvel; contudo, no conseguia
produzir uma frao de cidos resnicos contendo menos de 20% de cidos
graxos.
Em 1949, Arizona Chemical Co. implementou, na cidade do Panam, o
primeiro processo bem-sucedido para a produo de cidos graxos e cidos
resnicos com alta pureza.
(8)
Nesse processo foi possvel obter TOFA e Breu com
menos de 2% de contaminantes. Nesse processo, o CTO pr-tratado vaporizado
na presena de vapor superaquecido e os produtos volteis so separados do
Pitch com evaporador do tipo Thin film. Os cidos graxos brutos so purificados
em uma segunda coluna de destilao. Esta separao (two-pass-system), com
pequenas modificaes, tipo utilizado atualmente por inmeras plantas de
processamento de CTO.
Um novo processo foi desenvolvido, em 1969, por Luwa et all
(81)
, onde o
CTO fracionado em um evaporador do tipo Thin Film. O sistema trabalha a baixa
presso e alta temperatura (360
o
C). O CTO adicionado primeiramente ao
evaporador, sem pr-aquecimento, e a gua e os compostos mais leves so
destilados em um pr-corte. O leo seco bombeado para um outro evaporador,
onde um pitch com baixo ndice de acidez separado dos cidos graxos e cidos
resnicos. Posteriormente, a mistura de cidos graxos e resnicos separada e
purificada em vrias colunas de destilao.
A utilizao do evaporador do tipo Thin Film aumentou consideravelmente
os rendimentos e a qualidade dos produtos.
Nos ltimos 25 anos, o processamento do CTO, nos EUA, passou de
25.000 ton/ano, provenientes da planta da Arizona Chemicals, para mais de 15
plantas e aproximadamente 1 milho de ton/ano em 1989.
(85)
- 26 -

2.4 Processos de Separao

Nas etapas de purificao e/ou concentrao de compostos, os processos
mais comumente utilizados so: extrao lquido-lquido, cristalizao, adsoro,
extrao slido-lquido, destilao e fracionamento com uria
(86)
Atualmente, a
destilao convencional um dos processos de separao mais utilizados na
indstria.

2.4.1 - Destilao

A destilao a tcnica de separao mais utilizada para a purificao e o
fracionamento dos cidos graxos, cidos resnicos e material insaponificvel
presentes no CTO.
Na destilao, diferentemente do processo de evaporao, o vapor
formado no seio do lquido em forma de bolhas, pelo calor cedido atravs do
aquecimento. Esse aquecimento pode ser efetuado atravs de vapor
superaquecido ou de leo trmico aquecido. Aps a vaporizao, o material
fracionado sob vcuo (2-5 mbar) em uma coluna de destilao, que pode conter
bandejas (pratos) ou ser empacotadas, como descritos na Figura 14.

86
F.D. Gustone, M. Kates, J.L., Harwood, The Lipid Handbook, Chapman & Hall, 2
ed
, London, 1994, p.225.
- 27 -

Figura 14: Materiais de enchimento interno de colunas de destilao.
(87)

A performance da coluna de fracionamento depende da presso interna da
coluna, do nmero e do tipo de bandejas/pratos ou do tipo de material de
enchimento.
Alm de promover uma melhora considervel na capacidade de
fracionamento da coluna, estes materiais permitem manter baixa presso interna
na coluna. Isso facilita o processo de fracionamento e diminui o tempo de
residncia do material na base da coluna alta temperatura, evitando a sua
degradao trmica.
A tecnologia para o fracionamento de materiais graxos avanou
rapidamente aps a Segunda Guerra Mundial. Algumas empresas, como a
Henkel, desenvolveram os seus prprios processos de separao. Nos Estados

87
G. Dieckelmann, H.J. Heinz, The Basics of Industrial Oleochemistry, Peter Pomp (Ed.) GmbH, D-4300
Essen, 1988.

- 28 -

Unidos, R.A Potts e P.B. White
(88)
, e na Alemanha, H. Stage,
(89)
foram os
pioneiros nestes processo de otimizao.
A destilao dos materiais pode ocorrer atravs de reatores em batelada ou
processo contnuo, sendo que, atualmente, o processo contnuo o mais
utilizado.
(87)

2.4.2 Evaporador Thin Film

O evaporador do tipo Thin Film composto por um rotor, que distribui o
material a ser fracionado em uma tnue camada dentro de um tubo com uma
jaqueta de aquecimento, como descrito na Figura 15.

Figura 15: Evaporador Thin Film.
(87)

88
R.A. Potts e F.b. White, J. Am. Oil Chem. Soc., 30 (1953) 49.
89
H. Stage, J.Am. Oil Chem. Soc., 61 (1984) 204.
- 29 -

Os compostos mais volteis so condensados no topo do sistema, e os
compostos mais pesados so separados no fundo.
A vantagem deste tipo de sistema o baixo tempo de residncia dos
compostos alta temperatura. Desta maneira, possvel evitar a degradao
trmica das substncias desejadas (como os fitoesteris).
(87)

2.5 - Obteno de Concentrados de Esteris

Uma patente para a recuperao de sitoesteris provenientes do CTO foi
desenvolvida por Harada e Yumato
(90)
. Nessa patente, o sabo de Tall Oil
processado utilizando-se dois evaporadores do tipo Thin-Film. Um outro processo
para a produo de sitoesterol proveniente do CTO foi patenteado na Finlndia,
em 1976.
(91)

A Badger Company Inc. patenteou, em 1985, um processo para a obteno
de cidos graxos e esteris provenientes do pitch do Tall Oil. O processo se
baseia em uma hidrlise dos cidos graxos e dos steres de esterol presentes no
pitch e o seu posterior fracionamento e purificao por destilao.
(92)

A Westvaco desenvolveu um processo para o isolamento e a purificao
dos esteris presentes no pitch do Tall Oil, atravs de uma extrao por solventes
(heptano e metanol); contudo, o rendimento obtido para o processo no foi
satisfatrio.
(93)

Barder patenteou um processo para a concentrao de esteris
provenientes de resduos contento baixo teor de cidos carboxlicos livres. O
sistema se baseia na separao por adsoro dos esteris em silicato de
magnsio, utilizando-se o metil-tertc-butil ter como solvente. A desvantagem
desse mtodo que o mesmo s aplicvel para compostos que apresentem
baixo teor de cidos carboxlicos livres.
(94)

90
T. Harada, T. Yumato, US Patent 3 887 537 (1975), 4 076 700 (1978).
91
B. Holmbom, E. Avel, US Patent 3 965 085 (1976).
92
R.E. Hughes, US Patent 4 524 024 (1985).
93
R.S. Vicente, Patent Cooperation Treaty, PCT/US99/14134, (1999).
94
T.J. Barder, A.W. Bedwell e S.P Johnson, US Patent 4 977 243 (1990).
- 30 -

Nogueira estudou a separao dos cidos graxos e cidos resnicos
presentes no CTO, utilizando um mtodo por extrao com n-heptano; contudo,
este mtodo tem como desvantagem a utilizao de altos volumes de solvente
orgnico no processo.
(95,96)

A Arizona Chemical Corporation (Estados Unidos) patenteou, em 2000, um
processo para a separao de esteris provenientes do CTO. Nesse processo, o
CTO destilado baixa temperatura (abaixo de 290
o
C), minimizando a
degradao trmica e a esterificao dos esteris e aumentando em 50 % o teor
de esterol no pitch. O resduo de destilao posteriormente saponificado com
hidrxido de sdio e hidrxido de potssio, e o material insaponificvel contendo
os esteris destilado. Contudo, mesmo baixa temperatura de destilao, uma
grande parte dos esteris sofre degradao trmica.
(97)

A Resitec Indstria Qumica Ltda. (Resende-Rio de Janeiro-Brasil)
patenteou, em 2002, um processo para a purificao e extrao de esteris e
vitaminas provenientes de resduos de processos industriais, dentre eles o pitch
de Tall Oil. Nesse processo, o material graxo transformado em sabo de clcio e
magnsio, sendo o material insaponificvel posteriormente destilado.
(98)
A
desvantagem desse processo a grande quantidade de sais de clcio e
magnsio, produzidos como subprodutos.
Recentemente, um novo processo para a separao de esteris
provenientes do CTO foi patenteado pela Arizona Chemical Company (Estados
Unidos). Nesse novo processo, o sistema de destilao foi modificado, utilizando-
se colunas de alta eficincia para concentrar e minimizar a degradao dos
esteris.
(99)

Hunt e Schwarzer
(100)
desenvolveram um processo de esterificao
qumica para a concentrao dos esteris e tocoferis presentes no destilado de
desodorizao do leo de soja (DDOS). O mtodo baseado na produo de

95
J.M.F. Nogueira, Sep. Scien. and Tech., 31 (19), (1996), p. 2685-2703.
96
J.M.F. Nogueira, Sep. Scien. and Tech., 32 (17), (1997), p. 2807-2820.
97
D.T.A. Hulbers, A.M. Robbins e D.H. Sullivan, US Patent 6 107 456 (2000).
98
R. Rohr e J.A. Trujillo-Quijano, US Patent 6 344 573 (2002).
99
D.T.A. Hulbers, A.M. Robbins e D.H. Sullivan, US Patent 6 414 111 (2002).
100
T.K. Hunt, J. Schwarzer, US Patent 5 703 252 (1997).
- 31 -

steres metlicos a partir da transesterificao e esterificao do material graxo
presente no DDOS.
Ghosh & Bhattacharyya
(101)
isolaram tocoferis e esteris como um
concentrado a partir do destilado de desodorizao do leo de girassol. A
tecnologia empregada envolvia bio-hidrlise, bioesterificao e destilao
fracionada convencional. Os glicerdeos neutros do material (46,3 %) foram
hidrolisados pela lipase da Candida cylindracea e, em seguida, os cidos graxos
livres totais foram esterificados e convertidos a steres butlicos, em reao
catalisada pela lipase do Mucor miehei. O produto esterificado foi ento fracionado
por destilao simples a vcuo.
Nenhum dos processos anteriormente citados prev a esterificao seletiva
dos cidos graxos presentes no CTO para a separao dos cidos resnicos e a
obteno de concentrados de esterol.

2.6 Esterificao

Os steres metlicos apresentam pontos de ebulio mais baixos do que os
seus respectivos cidos, necessitando de uma energia menor para serem
destilados, como mostrado na Tabela 8.

Tabela 8: Comparao entre os pontos de ebulio de alguns cidos graxos e os seus respectivos
steres metlicos.
Grupo Alquil cido Graxo ster Metlico
Caprico C-10 150 108
Laurico C-12 172 133
Miristico C-14 192 161
Palmtico C-16 212 184
Esterico C-18 227 205
Behnico C-22 263 240
Oleico C-18:1 223 201
Linolico C-18:2 224 200
Linonico C-18:3 224 202
Ponto de Ebulio a 10mmHg

101
S. Ghosh e D.K Bhattacharyya, J. Am. Chem. Soc., 73 (10), (1996) p. 1271-1274.
- 32 -

Assim, empregando esterificao qumica ou enzimtica, torna-se possvel
utilizar condies mais brandas de temperatura e presso para a destilao do
CTO, preservando melhor os compostos de interesse, alm de se facilitar a
separao dos esteris.

2.6.1 - Esterificao Qumica

O processo clssico para a produo de steres atravs da catlise
cida, na qual normalmente utiliza-se um cido de Brnsted como catalisador (ex.
cido clordrico, sulfrico ou p-toluenosulfnico). No caso dos lcoois com baixo
ponto de ebulio, ocorre a dissoluo de parte da gua produzida no meio
reacional, sendo necessria a remoo dessa e a realizao de uma segunda
adio de lcool, pois a reao entrar em equilbrio. O resduo de cido graxo e
do catalisador pode ser removido atravs de um tratamento alcalino. O
mecanismo para esse processo cataltico apresentado na Figura 16.

RCOH
O
+ RCOH
OH
+
+ H
+
RCOH
OH
R' OH +
RCOH
OH
OH R'
+
+
R'
RCOH
OH
OH
RCOH
2
OH
O R'
+
+
R'
RCOH
2
OH
O
RCOR'
O
+
H
2
O
+ H+

Figura 16: Mecanismo de Esterificao Qumica.
102

102
F. A. Carey e R. J. Sunberg, Advanced Organic Chemistry, Fourth Edition, Part A: Struture and
Mechanisms, 2000, p.475.
- 33 -

Na preparao de steres via catlise qumica so necessrias condies
drsticas de presso e temperatura. Tambm necessrio utilizar um grande
excesso estequiomtrico do lcool em relao ao cido.

2.6.2 - Esterificao enzimtica

Apesar da ao das enzimas ter sido reconhecida e os biocatalisadores
terem sido empiricamente utilizados pelo homem h milnios, o interesse cientfico
que conduziu sua identificao relativamente recente, tendo se iniciado em
meados do sculo passado. No mesmo perodo, aprofundaram-se os
conhecimentos sobre o metabolismo, a qumica orgnica e a qumica das
protenas, que contriburam para o desenvolvimento da enzimologia e da
tecnologia enzimtica.
(103)

As enzimas, conhecidas industrialmente como biocatalisadores, so
protenas, isto , macromolculas (com massa molecular elevada, entre 15.000 e
20.000.000 g/mol) formadas a partir de aminocidos. Elas esto presentes em
todas as clulas vivas, onde exercem as funes vitais de controle de processos
de transformao dos nutrientes em energia e em material celular. Algumas das
enzimas mais conhecidas so encontradas no sistema digestivo, como a pepsina
e a tripsina, que convertem protenas em aminocidos, as lipases, que degradam
gorduras a glicerol e cidos graxos; e as amilases, que quebram o amido, da
farinha e da batata, por exemplo a acares mais simples.
(103)
As enzimas so catalisadores altamente seletivos e esta seletividade
decorrncia da interao da enzima com o substrato. Esta interao seletiva
explicada atravs do modelo chave-fechadura, esquematizado na Figura 17.

103
E.P.S. Bon e N. Pereira (Ed.), Tecnologia Enzimtica, Universidade Federal do Rio de Janeiro, 1999.
- 34 -

Figura 17: Ao cataltica das enzimas (modelo chave-fechadura).

Neste modelo, a ligao do substrato ao centro ativo da enzima se d
preferencialmente por uma das faces do substrato, o que explica a alta
seletividade da catlise enzimtica.
(104)

A descoberta de que as lipases e outras enzimas podem ser utilizadas em
meio a solventes orgnicos,
(105,106)
e tambm em catlise em fase slida
(107)
,
abriu uma gama enorme de novas aplicaes para estes biocatalisadores.

2.6.2.1 Reaes hidrolticas

Dentre todos os tipos de reaes catalisadas por enzimas, as
transformaes hidrolticas (hidrlise, amonlise e alcolise), envolvendo
proteases, estearases ou lipases como catalisador, so as mais difundidas.
Aproximadamente, 2/3 de toda a pesquisa feita at o momento em
biotransformaes catalisadas por enzimas envolve esta classe de reaes.
(2)

O mecanismo para a hidrlise enzimtica de steres e amidas muito
similar ao mecanismo qumico. Um grupo nuclefilo proveniente do stio ativo da
enzima ataca a carbonila do substrato, formando um intermedirio acil-enzima,
que posteriormente sofre um ataque de um outro nuclefilo, como gua, metanol,
amina, etc.
(108)

104
E. Fisccher, Ber. Dtsch. Chem. Ges., 27 (1894) 359.
105
P.J. Halling, Curr. Opin. Chem. Biolo., 4 (2000) 74.
106
A. Zaks, A.M. Klibanov, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82 (1985) 3192.
107
R.V. Ulijn, Biotechnol. Bioeng., 80 (2002) 509.
108
K. Faber, Biotransformations in Organic Chemistry, Fourth Completely Revised e Extended Edition,
Springer, 2000, p. 30-159.
- 35 -

O grupo nuclefilo proveniente do stio ativo da enzima pode ser a hidroxila
do aminocido serina, o grupo carboxlico do cido asprtico ou o tiol da cistena.
O mecanismo que foi at o momento elucidado em detalhes foi o da serina
hidrolase, que tem a serina como nuclefilo da enzima.
(108,109,110)
Este mecanismo
est monstrado na Figura 18.

O O
Asp
N N H
O
H
O
R
1
OR
2
His
Ser
Etapa 1
Etapa 2
R
2
-OH
Asp
O O H
-
His
N N H
R
1
O O
Ser
O
Nu R
1
Nu
Intermedirio
Acetil-Enzima
O
R
1
OH
O
R
1
HN-R
3
O
R
1
O-OH
O
R
1
OR
4
H
2
O
H
2
O
2
R
4
-OH
R
3
-NH
2
Intermedirio
Acetil-Enzima
cido Carboxlico
Percido
Ester
Amida
Nu = H
2
O,R
4
-OH,R
3
-NH
2
,H
2
O
2
R
3
= H,Alquil, Aril,-NR
5
2
R
4
= Alquil,Aril, -N=CR
5
2
Ser
R
1
O O
R
1
O O
Ser
+

Figura 18: Mecanismo de atuao da Serina Hidrolase.
(108)

Dois outros aminocidos presentes no stio ativo da enzima, o cido
asprtico e a histidina, formam junto com a serina o assim denominado trio
cataltico nas hidrolases.
(111,112)

109
R.J. Kazlauskas, H.K. Weber, Curr. Opin.. Chem. Biol., 2 (1998) 121.
110
J.B. Jones, J.F. Beck, Asymmetric Syntheses and Resolutions using Enzimes, Wiley, New York, part I,
(1976), p. 107.
- 36 -

O arranjo especial destes trs grupos de aminocidos diminui o valor do
pK
a
do grupo hidroxila da serina, o que facilita a formao do alcxido, que
promove o ataque cataltico carbonila do substrato, formando o intermedirio
acetil-enzima (Etapa 1). Esses intermedirios sofrem ataque nucleoflico,
regenerando a enzima e formando o produto final da catlise enzimtica, como
cido, steres ou amidas.

2.6.2.2 Lipases

As lpases esto presentes em diversos organismos, incluindo animais
evoludos, plantas, fungos e bactrias, so enzimas cuja funo biolgica a de
catalisar a hidrlise de lipdeos, com a subsequente liberao de cidos graxos
livres, diacilglicerdeos, monoacilglicerdeos e glicerol livre.
A sua atividade muito aumentada quando situada na interface
polar/apolar e apresenta maior afinidade por cidos graxos de cadeia longa. A
teoria atualmente mais aceita para este fenmeno diz que uma parte da superfcie
da enzima se encontra em melhor equilbrio termondinmico quando inserida na
interface polar/apolare que esta conformao coloca o stio ativo da enzima em
posio favorvel para a catlise.
(113)
Estas enzimas podem tambm atuar como catalisadores de reaes de
acidlise, aminlise, interesterificao e, principalmente, de esterificao e
transesterificao, quando o teor de gua no meio reacional reduzido.
As lipases podem ser encontradas em clulas de tecidos animais e vegetais
e podem ainda ser produzidas por microrganismos. Do ponto de vista industrial, a
produo por microrganismos consideradas de maior importncia devido ao seu
maior potencial de produo em larga escala.
Como biocatalisadores, apresentam vantagens importantes sobre os
catalisadores clssicos, como a especificidade, a regiosseletividade e a

111
L. Brady, A.M. Brzozowski, Z.S. Derewenda, E. Dodson, G. Dodson, S. Tolley, J.P. Turkenburg, L.
Christiansen, B. Huge-Jensen, L. Norskov, L. Thim, U. Menge, Nature, 343 (1990) 767.
112
J.D. Schrag, Y. Li, S. Wu, M. Cygler, Nature, 353 (1991) 761.
113
B. Borgston e H.L. Brockman, Lipases, Elsevier. Amsterdam (1984).
- 37 -

enantiosseletividade, que permitem reduzir o nmero de co-produtos, a reduo
de custo no tratamento de resduos e a operao sob condies mais brandas de
temperatura e presso.
(114)

2.6.2.3 Catlise Enzimtica Homognea (Batelada)

Existem inmeros trabalhos na literatura que descrevem a catlise
enzimtica homognea para a produo de steres de material graxo.
Trabalhos recentes reportam a sntese de steres terpnicos de cidos
monocarboxlicos, envolvendo catlise enzimtica como a transesterificao
(115,116)
e a esterificao direta
(117,118)
.
Foi recentemente reportado por Myojo et al
(119)
a preparao de steres de
esterol com cidos graxos de cadeia longa. Em outro trabalho recente, Shimada et
al
(120)
associaram as propriedades dos esteris com cidos graxos polinsaturados
(AGP), que tm sido muito utilizados devido a suas atividades benfica em
organismos vivos.
Observou-se tambm que a atividade cataltica e a seletividade dependem
fortemente da temperatura, do tamanho da cadeia do cido graxo e do tipo de
solvente utilizado.
Recentemente, Ramamurthi et al
(121)
e Facioli
(73)
estudaram a obteno de
concentrado de tocoferis/esteris a partir do destilado de desodorizao do leo
de canola e do destilado de desodorizao do leo de soja, empregando um
processo enzimtico, no qual os cidos graxos livres foram convertidos a steres
metlicos pela ao de lipases. Em seguida, os tocoferis e esteris foram
concentrados na frao residual, por destilao molecular dos steres metlicos e
de outras fraes volteis.

114
B.E. Saad, M.L. Fernandes, N. Krieger, D.A. Michell e L.P. Ramos, Biodiesel, (2005).
115
C.J. Gray, J.S. Narang, S.A. Barker, Enz. Microb. Technol., 12 (1990) 800.
116
P.A. Claon e C.C. Akoh, J. Agric. Food Chem., 42 (1994) 2349.
117
P.A. Claon e C.C. Akoh, Biotechnol. Lett., 15 (1993) 1216.
118
S. Okumura, M. Iwai e Y. Tsujisaka, Biochim. Biophys, Acta, 575 (1979) 156.
119
K. Myojo e Y. Matsufune, Yukagaku, 44 (1995) 883.
120
Y. Shimada, Y. Hirota, T. Baba, A. Sugihara, S. Moriyama, Y. Tominaga e T. Terai, J. Am. Oil Chem.
Soc., 76 (1999) 713.
121
S. Ramamurthi, P.R. Bhirud e A.R. McCurdy, J. Am. Oil Chem. Soc., 68 (1991) 970.
- 38 -

Taylor e King
(122)
desenvolveram uma nova metodologia analtica para o
CTO, utilizando uma extrao por fluido supercrtico e a esterificao seletiva dos
cidos graxos presentes no Tall Oil.

2.6.2.4 Catlise Enzimtica Heterognea (Processo Contnuo).

A catlise enzimtica heterognea comeou a ser estudada no incio do
sculo XX, ao se observar que o carvo ativo ao qual havia sido adicionada uma
preparao biolgica com atividade invertsica mantinha a capacidade de
hidrolisar sacarose mesmo aps ser lavada. Aps essa observao da
imobilizao de enzimas em suportes insolveis, o assunto s foi novamente
retomado aps a Segunda Guerra Mundial.
(103)

Em 1948, o bioqumico americano James Batcheller Sumner (1887-1955),
ganhador do Prmio Nobel de Qumica em 1946, reportou a imobilizao de uma
enzima. Na continuao dos estudos, pesquisadores alemes, demonstraram em
1954, que polmeros sintticos como resinas diazotadas de poliaminoestireno,
poderiam ser usados para imobilizar protenas com atividade biolgica,
imobilizando as enzimas pepsina, distase, ribonuclease e carboxipeptidase.
(103)

Outros trabalhos pioneiros subseqentes incluram a imobilizao de
catalase por ligao inica em DEAE-celulose, tripsina, papana, amilase e
ribonuclease em gel de polacrilamida, e a demonstrao do mtodo de ligaes
cruzadas, utilizando-se carboxipeptidade com glutaraldedo.
(103)
A microencapsulao da anidrase carbnica foi descrita em 1964, e a
preparao de lipossomas contendo glicoamilase, em 1971, sendo essas duas
ltimas preparaes usadas com fins teraputicos.
A partir de 1960, houve um aumento muito grande no nmero de
publicaes sobre imobilizao enzimtica, tendo em vista as potenciais
vantagens econmicas e operacionais que a tcnica oferece. Estes esforos
resultaram no desenvolvimento, em 1969, por Chibata et all
(103)
da companhia
japonesa Tanabe Seiyaku Co. (Japo), de um processo para a produo de L-

122
S.L. Taylor e J.W. King, J. Chrom. Sci, 39,(2001).
- 39 -

aminocidos, a partir de misturas racmicas, usando L-aminoacilase imobilizada
em DEAE-Sephadex.
Quase simultaneamente, foi colocado em operao, nos EUA, o processo
de produo de xaropes de frutose a partir de amido de milho, utilizando glicose
isomerase imobilizada.
Em trabalho recente, Kurokawa et al
(123)
descreveram o desenvolvimento
de um novo suporte, base de uma fibra de acetato de celulose e TiO
2
para a
lipase proveniente da Candida antartica utilizada na sntese de acetatos de
geraniol.
Em outro trabalho, Chen et al
124
descrevem o desenvolvimento de um outro
tipo de suporte base de Sol-Gel para a mesma enzima, utilizado na sntese do
mesmo composto. Abbas et al
(125)
imobilizaram a mesma enzima em um suporte
orgnico, uma resina comercial AMBERLIT 1RC 50. Aps a heterogeneizao da
lipase, a mesma foi testada na esterificao do geraniol e do citronelol.
A importncia de processos industriais com enzimas imobilizadas motivou a
organizao, em 1971, da Primeira Conferncia em Engenharia Enzimtica. Nela,
estabeleceu-se o uso da terminologia enzima imobilizada para os biocatalisadores
ligados a suportes insolveis ou confinados a espaos fsicos definidos, em
contraposio ao uso de enzimas fixadas ou insolubilizadas ou ligadas a
matrizes.
Os principais usos em escala industrial incluem a produo de milhes de
toneladas de xaropes de frutose (HFCS) em bio-reatores, que operam por 1000 a
2000 horas seguidas com um rendimento de 2000 a 4000 kg/kg de enzima.
Milhares de toneladas dessa enzima imobilizada so produzidas por quase uma
dezena de empresas espalhadas pelo mundo.
As aplicaes mais recentes de biocatalisadores imobilizados incluem a
produo de substncias de alto valor agregado por bioconverso regioespecfica
ou estereoespecfica, o tratamento seletivo de poluentes especficos para resolver
problemas ambientais, a anlise contnua com alta sensibilidade e especificidade

123
Y. Ikeda, e Y. Kurokawa, Y., J. Am. Oil Chem. Soc., 78 (2001) 1099.
124
J.P. Chen, W.S. Lin e M.F. Chang, J. Am. Oil Chem. Soc., 79 (3), (2002), 309.
125
H. Abbas e L. Comeau, Enz. and Micr. Techn., 32 (2003) 589.
- 40 -

de compostos de interesse, a converso de energia em sistemas biolgicos e,
finalmente, em medicina, a confeco de rgos artificiais e a formulao de
drogas base de enzimas.
A heterogeneizao das enzimas muito importante industrialmente, pois
possibilita que aps a reao, as enzimas sejam reutilizadas, o que diminui os
custos de fabricao. Isso justifica as inmeras publicaes na rea de catlise
enzimtica heterognea.

2.6.2.5 Biotransformaes na Indstria

Uma alternativa aos processos tradicionais da indstria qumica so os
processos tecnolgicos que se baseiam em biotransformaes, levadas a efeito
por clulas vivas, e na biocatlise, efetuada por enzimas.
Com o desenvolvimento de novas tcnicas de produo e purificao de
enzimas, inmeras novas aplicaes de biocatalisadores surgiram na indstria.
(126)

Enzimas conhecidas h mais de 150 anos e utilizadas industrialmente h
mais de 50 anos vm, de forma consistente, ultrapassando as barreiras do seu
nicho tecnolgico tradicional - a indstria de alimentos e bebidas, sendo usadas na
formulao de biodetergentes, em diagnsticos clnicos, como agentes
teraputicos, em procedimentos de engenharia gentica, no processamento de
couros e fibras naturais e em qumica fina, para a produo de frmacos e
vitaminas. Essas aplicaes suportam um mercado mundial de enzimas que
avaliado em cerca de US$ 1,5 bilho por ano.
(103)

Nos ltimos anos, mais de 13.000 artigos foram publicados, tendo como
foco o uso de catalisadores naturais (enzimas) para a transformao de
compostos orgnicos.
(103)

A biotransformao dos materiais graxos tem sido intensamente estudada
devido importncia destes na indstria farmacutica, qumica e alimentcia. A
companhia japonesa Miyoshi Oil and Fat Co. tem utilizado em escala industrial

126
H.E. Schoemaker,D. Mink e M.G. Wubbolts, Science, 299 (2003) 1694.
- 41 -

uma lipase fngica na etapa de hidrlise de leo, para a manufatura posterior de
sabes.
Um outro exemplo de aplicao na indstria o processo Ezumax,
desenvolvido pela empresa alem Lurgi, para a degomagem de leos vegetais.
As lipases tambm vm sendo utilizadas na mudana das propriedades
naturais de leos e para a obteno de margarinas ou gorduras com baixo teor
calrico.
Os processos enzimticos so uma alternativa aos processos
convencionais, apresentando vantagens significativas. O consumo energtico
menor porque a operao feita em condies mais brandas, o que tambm
minimiza a degradao trmica dos produtos. Alm disso, a especificidade das
enzimas previne a ocorrncia de reaes secundrias, sendo obtidos produtos
mais puros e limpos. Por estes motivos, e com a reduo dos custos de produo
das enzimas, inmeras novas aplicaes esto sendo implementadas na indstria.

2.7 - Planejamento Fatorial, Anlise de Varincia e Mtodo de Superfcie de
Resposta

A importncia das variveis (ex. temperatura, % de catalisador, etc) em um
processo pode ser determinada atravs da utilizao de mtodos de planejamento
experimental. Atravs desta tcnica, possvel a verificao dos efeitos
individuais e de interao de todas as variveis sobre as respostas (ex.
rendimento da reao), a definio das variveis mais importantes para o
processo, a avaliao dos erros experimentais, a modelagem emprica dos
resultados em funo das variveis escolhidas, e conseqentemente a definio
das faixas timas de operao do processo.
Os mtodos de planejamento experimental e anlise de superfcie de
resposta tm como base o planejamento fatorial. Para executar um planejamento
fatorial, necessrio especificar os nveis em que cada fator deve ser estudado,
isto , os valores dos fatores (ou as classes, nos casos qualitativos) que sero
- 42 -

utilizados para os experimentos. Se houver n
1
nveis de fator 1, n
2
de fator 2, ..., e
n
k
do fator k, o planejamento ser um fatorial n
1
x n
2
x ...x n
k
.
Para estudar o efeito de qualquer fator sobre uma dada resposta,
precisamos faz-lo variar de nvel e observar o resultado que essa variao
produz sobre a resposta. Para isso, precisamos ter o fator em, pelo menos, dois
nveis diferentes, logo para k fatores, isto , k variveis controladas pelo
experimentador; assim um planejamento completo de dois nveis exigir a
realizao de 2 x 2 x ...x 2 = 2
k
ensaios diferentes.
(127)

Com os dados obtidos aps a execuo dos ensaios, possvel calcular os
efeitos principais e de interao das variveis sobre as respostas, determinar
quais so os efeitos mais significativos, comparando o valor do efeito com o do
erro experimental estimado, e at ajustar um modelo de 1
a
ou 2
a
ordem para
correlacionar variveis e respostas.
Para avaliar se os modelos empricos obtidos atravs de regresso
multilinear ou no-linear apresentam um grau de ajuste adequado aos dados
experimentais, necessrio realizar uma anlise estatstica, utilizando alguns
parmetros descritos a seguir:
(128)

O coeficiente de correlao (R) um parmetro estatstico que compara a
varincia dos pontos experimentais em relao ao modelo proposto com a
varincia da prpria populao de pontos experimentais. Quando o valor do
coeficiente for 1, a correlao entre os valores previstos pelo modelo e os valores
experimentais ser perfeita.
As somas quadrticas dos desvios tambm um parmetro importante,
pois o percentual de variao explicada em torno da mdia (R
2
) est relacionado
com os resduos do modelo, sendo;

R
2
= (Soma quadrtica dos resduos)/(Soma quadrtica total).

127
B. Barros Neto, I.S. Scarminio e R.E. Bruns, Como fazer experimentos, 2
a
ed. Campinas, SP: Editora
Unicamp, 2003. cap. 3 e 5.
128
D.C. Montgomery, Design and Analysis of Experiments, 6
th
edition, New York: John Wiley & Sons, Inc.,
2005.
- 43 -

Se no houver resduos, o R
2
ser igual unidade e quanto maior for a
frao descrita pela regresso, melhor ser o ajuste do modelo experimental.
A avaliao da significncia estatstica do modelo verificada atravs do
teste F, onde comparado o valor estimado para F a partir dos dados
experimentais com um valor tabelado de F. Se o F calculado for maior do que o F
tabelado, pode-se afirmar que a equao (modelo) estatisticamente significativa
e que os dados experimentais so representados pelo modelo proposto. Para que
uma regresso seja til para fins preditivos, o F calculado deve ser no mnimo 4 a
5 vezes o valor de F tabelado.
(127)
A anlise dos resultados de varincia obtidos da Tabela ANOVA
(metodologia estatstica utilizada para validar o modelo proposto) permite a
verificao da significncia dos efeitos estudados sobre a resposta e a validao
do modelo estatstico utilizado.
Um modelo ideal deve ter boa significncia (p<0,05), alta confiabilidade
(dados dentro do intervalo de confiana de 95%, ou seja, resduo irrelevante) e
baixa variabilidade (R
2
>70%).

- 44 -

Captulo 3: Objetivos

Este trabalho tem como objetivos:

- Transformar de forma seletiva a matria graxa do CTO em steres
metlicos, atravs da catlise homognea enzimtica ou qumica.
- Otimizar o processo de catlise enzimtica homognea, atravs de um
planejamento de experimentos fatorial completo e das anlises de
superfcie de resposta.
- Heterogeneizar o catalisador enzimtico em um polmero orgnico.
- Otimizar o processo de catlise enzimtica heterognea atravs de
experimentos em reatores do tipo batelada e em processo contnuo.
- Otimizar os processos de separao para os steres metlicos, cidos
resnicos e os esteris presentes no CTO.

- 45 -

Captulo 4: Parte Experimental

4.1 Reagentes e Solventes Utilizados

Crude Tall Oil (fornecido pela RESITEC Indstrias Qumicas LTDA.),
enzima - Candida antartica B (lpase proveniente do micro-organismo Aspergillus
oryzae - Novozym CALB L - Novozymes S/A), polipropileno (MP 100 - Membrana
S/A), KH
2
PO
4
(Merck), cido metanossulfnico (Merck), hexano (Aldrich), KOH
(Fluka), metanol 99,0 % (Resana; grau tcnico e Merck; grau HPLC), lcool etlico
98,0 % (Merck), fenolftalena (Fluka), xilol (Merck), H
2
SO
4
(Merck), pirogalol 99,0
% (Merck), ter etlico (Aldrich), oleato de metila (Aldrich), linoleato de metila
(Fluka), linolenato de metila (Fluka), ciclo-hexano (Fluka), isovalerato de colesterol
(Merck), piridina (Merck), anidrido butlico (Fluka), beta-sitoesterol (99,0 % padro
- Aldrich), campesterol (99,0 % padro - Aldrich), estigmaesterol (99,0 % padro -
Aldrich), Diazald (N-metil-N-nitroso-p-toluenosulfonamida), diclorometano (Merck)
e acetona (Merck). Todos estes compostos foram utilizados sem tratamento
prvio.

4.2 Esterificao do CTO Utilizando Catlise enzimtica homognea

4.2.1 - Planejamento de Experimentos fatorial 2
5

A reao de esterificao enzimtica homognea foi estudada, utilizando-se
um planejamento fatorial 2
5
com um ensaio em triplicata no ponto central. Os
fatores avaliados foram o tempo de reao (h), a temperatura da reao (
o
C), o
teor de catalisador (%), o teor de metanol (%) e o teor de gua (%), como
mostrado na Tabela 9.

- 46 -

Tabela 9: Fatores do Experimento.
Fator -1 0 1
A:Tempo
(h) 6 15 24
B:Temperatura
(C) 24 45 60
C:Enzima (%) 0,5 0,75 1
D:Metanol
(%) 5 10 15
E:Agua
(%) 0 7,5 15
Nvel de Variao

O CTO, o metanol, a gua destilada e o catalisador homogneo (lipase
Novozym CALB L) foram pesados em um reator de 100 mL, seguindo os dados do
planejamento de experimentos indicados na Tabela 10.

- 47 -

Tabela 10: Resultados obtidos para o planejamento fatorial 2
5

Tempo (h) Temperatura ( C ) Enzima (%) Metanol (%) Agua (%) Converso (%)
Ensaio A B C D E
35 6 24 0,5 5 0 72,82
12 24 24 0,5 5 0 74,73
17 6 60 0,5 5 0 38,45
30 24 60 0,5 5 0 39,92
33 6 24 1 5 0 79,14
11 24 24 1 5 0 80,98
13 6 60 1 5 0 47,24
23 24 60 1 5 0 71,76
10 6 24 0,5 15 0 25,12
3 24 24 0,5 15 0 55,10
4 6 60 0,5 15 0 4,24
27 24 60 0,5 15 0 32,32
5 6 24 1 15 0 30,70
21 24 24 1 15 0 54,14
8 6 60 1 15 0 9,36
16 24 60 1 15 0 8,84
34 6 24 0,5 5 15 91,82
7 24 24 0,5 5 15 79,22
31 6 60 0,5 5 15 50,69
9 24 60 0,5 5 15 68,28
32 6 24 1 5 15 85,80
18 24 24 1 5 15 87,39
6 6 60 1 5 15 48,37
24 24 60 1 5 15 62,59
19 6 24 0,5 15 15 85,07
14 24 24 0,5 15 15 99,23
15 6 60 0,5 15 15 76,42
2 24 60 0,5 15 15 65,87
26 6 24 1 15 15 86,42
28 24 24 1 15 15 99,22
22 6 60 1 15 15 77,53
1 24 60 1 15 15 59,94
25 15 42 0,75 10 7,5 90,05
29 15 42 0,75 10 7,5 89,07
20 15 42 0,75 10 7,5 91,24

As reaes foram mantidas sob agitao magntica de 24
o
C a 60
o
C por 6
a 24 h, sendo retiradas alquotas a cada hora para a anlise do ndice de Acidez
(I.A.). Posteriormente, a umidade e o excesso de metanol foram eliminados em
estufa a vcuo.
O grau de converso dos cidos graxos livres em steres metlicos foi
determinado medindo-se o valor cido inicial e final.

- 48 -

% Converso = (I.A. inicial do CTO I.A. mistura de reao no tempo t) x 100
I.A. dos cidos graxos presentes no CTO

O I.A. dos cidos graxos presentes no CTO foi calculado atravs da anlise
do teor de cidos graxos (por cromatografia de fase gasosa utilizando-se o CTO
metilado; ver condies cromatogrficas item 4.10) e do teor de cidos resnicos
presentes no CTO.

Exemplo:

Tabela 11: Clculo do Peso Molecular mdio para o TOFA.
TOFA-ME GC/MS % PM (g/mol)
C14 0,4 228,4 0,9
C15 0,1 242,4 0,3
C16 10,3 256,4 26,4
C17 0,2 270,5 0,4
C18 2,4 284,5 6,7
C18:1 50,6 282,5 142,9
C18:2 32,7 280,5 91,7
C18:3 2,1 278,4 5,8
C20 0,4 312,5 1,1
C20:2 0,7 308,5 2,2
C22 0,2 340,6 0,5
PM (mdio TOFA) = 279,1

A: I.A. TOFA Terico = PM (KOH) x 1000 / PM (mdio TOFA)
A: I.A. TOFA Terico = 201,36 mgKOH/g
B: Teor de cidos Graxos = 53,2%
I.A. dos cidos graxos presentes no CTO = A x B
I.A. dos cidos graxos presentes no CTO = 107,1

Foi utilizado o programa Design-Expert verso 4.0, comercializado pela
Stat-Ease Inc, para o tratamento dos dados do planejamento de experimentos.

- 49 -

4.2.2 Esterificao do CTO com a adio de metanol em duas etapas

Diferentes quantidades de metanol, 6,0 g (187,5 mmol) ou 8,0 g (250
mmol), foram pesadas com 40,0 g (76,62 mmol de cidos graxos livres) de CTO,
4,0 g de gua destilada, 20 mg da lipase nativa comercial (Novozym CALB L) em
um reator de 45 mL. As amostras foram agitadas por 70 h a 45
o
C. O metanol foi
adicionado em duas etapas, 0 h (incio da reao) e aps 24 h de reao. Foram
retiradas alquotas para a anlise do I.A.

4.2.3 Esterificao do CTO catalisado por lipases em larga escala

A reao de esterificao do CTO em larga escala foi efetuada utilizando-se
as condies otimizadas do sub item 4.2.1.
Em um tanque de 25 m
3
(Figura 19) foram adicionados 13.750 kg (26,34
kmol) de CTO, 2.060 kg (15%, 64,37 kmol) de metanol, 2.060 kg (15 %) de gua e
7,0 kg (0,05 %) de lipase nativa (Novozym CALB L). O tanque foi re-circulado com
uma bomba centrfuga de 20 m
3
por uma semana (168 h), e foram retiradas
alquotas de 2 em 2 horas para a anlise do I.A.

- 50 -

Figura 19: Tanque de 25 m
3
com sistema de recirculao.

4.3 Esterificao do CTO utilizando catlise enzimtica heterognea

4.3.1 Sntese do Catalisador Heterogneo

Em um balo volumtrico de 50 mL foram pesados 4,0 ou 10,0 g de uma
lpase, obtida a partir da Candida antartica B (Novozym CALB L) e 20,0 g de
polipropileno (MP 100). Foram sintetizados dois catalisadores heterogneos com
uma relao de 0,2 g/g e 0,5 g/g de lipase para o polipropileno. A mistura foi
tamponada para pH 7,0 com 20,0 mL (100 mmol) de uma soluo aquosa de
KH
2
PO
4
. O sistema foi mantido sob agitao magntica temperatura ambiente
por 12 h, sendo posteriormente filtrado, e o slido, lavado com 20,0 mL de gua e
20,0 mL de hexano.

- 51 -

4.3.2 Esterificao em batelada, utilizando catalisador enzimtico
imobilizado.

Em um reator de 45 mL, foram adicionados 40,0 g (76,61 mmol) de CTO,
4,0 g (125 mmol) de metanol, 4,0 g de gua e 2,0 ou 3,0 g da lipase imobilizada
em polmero orgnico. A mistura reacional foi mantida sob agitao temperatura
de 30 a 45
o
C por 24 h. Foram retiradas alquotas a diferentes tempos de reao,
para a anlise do ndice de acidez.
Aps 24 h de reao, o catalisador foi lavado com gua e hexano e re-
utilizado em outros experimentos.

4.3.3 Esterificao Contnua com catalisador enzimtico suportado

Uma coluna de 170 mm de altura e 25 mm de dimetro foi utilizada para os
experimentos de esterificao contnua. O CTO com 10 % de gua e 10 % de
metanol foi previamente misturado em um reator a 40
o
C, a coluna foi operada a
35
o
C. O fluxo da coluna utilizado foi de 0,33 g/min, utilizando-se uma bomba
perstltica, e a coluna foi empacotada com 15,8 g da lipase suportada em
polipropileno. Foram retiradas alquotas durante a reao para a anlise do ndice
de acidez. A relao de lipase para o polipropileno utilizada para a preparao do
catalisador heterogneo foi de 1 g/g.

4.4 Esterificao do CTO com catlise qumica homognea

Em uma autoclave de 2 L BEP 280 (Figura 20), foram adicionados 1,0 kg
(1,91 mol de cidos graxos livres) de CTO, 0,5 kg (15,62 mol) de metanol e 5,0 g
(52 mmol) de cido metanossulfnico. O sistema foi mantido por 2 h sob agitao
mecnica, a 140
o
C e 6,0 bar de presso. Aps duas horas de reao, a autoclave
foi despressurizada. O produto foi lavado com 500 mL de gua para eliminar o
residual de cido metanossulfnico, e o excesso de gua foi destilado.

- 52 -

Figura 20: Autoclave de 2 L BEP 280.

4.5 Reao dos esteris presentes no CTO com cido brico

Em um balo volumtrico de 2 L, foram adicionados 1,0 kg (0,1 mol de
esteris livres) de CTO-Me (onde os cidos graxos foram previamente
esterificados com metanol) e 5,0 g (0,03 mol) de cido brico. O sistema foi
mantido por 4 h sob agitao mecnica a 220
o
C. Posteriormente, o teor de
esteris livre e total foi analisado por cromatografia de fase gasosa (ver condies
cromatogrficas item 4.10).

4.6 Cristalizao dos esteris presentes no CTO

Em um bquer de 1 L, foram adicionados 200 g de CTO concentrado
(contendo 22,31% de esterol livre) e 800 mL de uma mistura de solventes (94 %
heptano:2% metanol:2% gua). O sistema foi resfriado a 0
o
C; aps a cristalizao
dos esteris (30 min), os mesmos foram filtrados e caracterizados.

- 53 -

4.7 Fracionamento do CTO

O CTO foi fracionado em um evaporador tipo thin film (WFE Figura 21),
sendo operado a 1 mbar de vcuo, entre 140
o
C e 240
o
C, em um fluxo contnuo
de CTO de 600 mL/h.

Figura 21: Evaporador thin film.

O CTO tambm foi fracionado em uma coluna de destilao piloto, com
aproximadamente 18 pratos tericos, sem refluxo e sob vcuo de 1 mbar. A
temperatura do reator que alimentou a coluna foi de 220
o
C, e a temperatura do
topo da coluna foi de 140 a 150
o
C.

- 54 -

4.8 Metilao dos cidos resnicos e graxos com diazometano

Em um reator de 50 mL (Figura 22) com junta esfrica, foram adicionadas
duas gotas de CTO ou CTO-Me (proveniente da esterificao enzimtica ou
qumica) e 2 mL de uma soluo 10 % de metanol anidro em ter. No gerador de
diazometano, foram adicionados 100 mg do reagente de Diazald (N-metil-N-
nitroso-p-toluenosulfonamida), 1,7 mL de ter e 1 mL de uma soluo 35 % de
KOH em gua. Um fluxo lento de N
2
foi utilizado para borbulhar o gs produzido
no tubo esterificador. Quando a soluo do tubo esterificador ficou amarela, o
fluxo de N
2
foi interrompido
,
pois isto indica que todos os cidos carboxlicos foram
esterificados e que o excesso de gs foi neutralizado no tubo neutralizador.

Figura 22: Sistema reacional para a esterificao com diazometano.

4.9 Mtodos Analticos

- ndice de Acidez mtodo ISO 660,1996.
- Teor de cidos Resnicos mtodo AOCS - Ts 1a-64, 1998.
- cidos Graxos Livres mtodo AOCS Ca 5
a
-40, 1993.
- Teor de Matria Insaponificvel mtodo AOCS Ca 6b-53, 1993.
- ndice de Saponificao mtodo ISO 3657, 2002.
- 55 -

- Teor de gua mtodo AOCS Tb 2-64, 1995.
- ndice de Iodo mtodo Collection Henkel KGaA Duesseldorf O-
3,1987.
- Teor de esteris livres e totais mtodo Cognis O-101b, 2004.

4.9.1 Anlise do ndice de Acidez (I.A.) por Volumetria.

O ndice de acidez determinado pela dosagem dos cidos graxos livres
ou minerais com soluo alcolica de hidrxido de potssio ou hidrxido de
sdio, at a viragem do indicador fenolftalena. O resultado expresso em mg de
KOH necessrios para neutralizar os cidos graxos livres presentes em 1 g de
amostra.
Em um erlenmeyer de 250 mL, foi pesada a amostra numa massa conforme
clculo abaixo:

Peso da amostra = 380 a 420 (Fazer uma interpolao)
IAT

Sendo :

IAT = ndice de acidez terico (massa molecular do hidrxido de
potssiox1000/massa molecular do composto).

a) Para IAT 20 a 40, pesar 10 g.
b) Para IAT abaixo de 20, aplicar o mtodo AOCS - Te 2a 64 (89).

A amostra foi dissolvida em 50 mL de lcool etlico PA absoluto,
neutralizado (rosa plido sob gotas do titulante KOH 0,5 mol/L, em presena de
fenolftalena).
Foram adicionadas 5 a 6 gotas do indicador fenolftalena sob constante
agitao. A amostra foi ento titulada com KOH - 0,5 mol/L, at a primeira
colorao rosa plido persistente por 30 segundos.
- 56 -

O volume gasto na titulao (mL) foi registrado e empregada para o clculo
do ndice de acidez (mg KOH/g), conforme a Equao 1.

I.A. = V x f x M x 56,10 = V x f x 28,05 (Equao 1)
MA MA

Onde:

M = Molaridade nominal do titulante = 0,5 mol/L
V = Volume gasto mL
F = Fator de correo respectivamente
MA = Massa da amostra.

4.9.2 Teor de cidos Resnicos por Volumetria

O teor de cidos resnicos determinado atravs da metilao do material
graxo em meio cido; nessa condio (meio cido), os cidos resnicos no so
esterificados. Com uma soluo de KOH 0,5 mol/L neutraliza-se a acidez mineral
(da metilao) at pH 4. Os cidos resnicos so titulados entre pH 4 a 10,8 e
ento calculado o teor em porcentagem, considerando-se a massa molecular
mdia de 302 (ver Figura 9, pg. 17).
Em um erlenmeyer de 250 mL, foram pesados 4,95 a 5,05 g da amostra.
Adicionaram-se 5 mL de xilol, 100 mL de metanol, 5 mL de soluo 4:1
H
2
SO
4
/CH
3
OH e 3 a 4 esferas de vidro, para evitar ebulio violenta. O
erlenmeyer foi acoplado a um condensador e aquecido. Aps 30 min sob
aquecimento, o sistema foi resfriado e o seu contedo transferido para um bker
de 250 mL. O erlenmeyer foi ainda lavado duas vezes com 20 mL de etanol e o
contedo adicionado ao anterior.
Em seguida, foi acoplado um eletrodo, e sob agitao magntica o material
foi titulado com KOH 0,5 mol/L padronizado, anotando os volumes gastos nas
- 57 -

viragens em pH = 4,0 (A, mL) e pH = 10,5 (B, mL). O teor de cidos resnicos foi
ento determinado pela Equao 2.

% cidos Resnicos = (B - A) x f x 0,5 x 30,2 (Equao 2)
PA

Onde:

B = volume gasto de KOH 0,5 mol/L em pH 10,5 (mL)
A = volume gasto de KOH 0,5 mol/L em pH 4,0 (mL).
f = fator de correo do KOH 0,5 mol/L.
PA = massa da amostra (g)
302 = massa molecular mdia dos cidos resnicos.

4.9.3 Teor de esteris livres e totais (CG-FID).

O teor de esteris livres e totais foi determinado por cromatografia de fase
gasosa pelo mtodo de padronizao interna. Na determinao do teor de esteris
livres, a amostra foi diluda e refluxada com uma soluo do padro interno
(isovalerato de colesterol), sendo posteriormente injetada no cromatgrafo gasoso.
Na determinao do teor de esteris totais, a amostra foi submetida
saponificao e posterior extrao (com ter etlico) na presena de um oxidante,
para depois ser analisado por CG (ver condies cromatogrficas item 4.10).

4.9.3.1 Anlise de esterois totais:

Para o processo de saponificao, as amostras foram pesadas em um
erlenmeyer de 125 mL, conforme os seguintes critrios:

Para teores at 5 %, 200 mg;
Para teores de 5 a 15 %, 100 mg;
Para teores de acima de 15 % pesar 65 mg;
- 58 -

Foram acrescentados 5 mL da soluo etlica de pirogalol (0,5 g/L), como
padro interno, acoplado o condensador e adicionado 4 mL da soluo de KOH
(28,5 mol/L). O material foi mantido sob refluxo por 30 min a 110 C. O contedo
foi transferido quantitativamente do frasco ao extrator, usando-se um total de 50
mL de gua destilada. Foram acrescentados 50 mL de ter etlico ao frasco, o qual
foi agitado e transferido ao extrator. As amostras foram agitadas por 2 minutos. O
ter etlico foi separado e o processo repetido num total de 3 vezes.
O ter foi evaporado em banho de glicerina sob nitrognio, sendo
acrescentado 5 mL da soluo 10% de lcool em cicloexano. Os solventes foram
evaporados e quando observou-se a evidncia de gua, repetiu-se a adio da
soluo cicloexano/lcool.
Foram acrescentados 10 mL da soluo de CIV (padro interno =
isovalerato de colesterol 1,5 mg/mL em soluo 3:1 piridina/anidrido butlico), e
refluxou-se por 10 minutos.
A amostra foi transferida para frasco auto-injetor e analisada por
cromatografia de fase gasosa (ver condies cromatogrficas item 4.10).

4.9.3.2 Anlise do esterol livre:

As amostras foram pesadas em um erlenmeyer de 125 mL, conforme os
seguintes critrios:

Para teores at 5 %, 200 mg;
Para teores de 5 a 15 %, 100 mg;
Para teores acima de 15 % pesar 65 mg;

Foram acrescentados 10 mL da soluo de CIV (padro interno =
isovalerato de colesterol 1,5 mg/mL em soluo 3:1 piridina/anidrido butlico) e
refluxou-se por 10 minutos.
A amostra foi transferida para frasco auto-injetor e analisada por
cromatografia de fase gasosa (ver condies cromatogrficas item 4.10).
- 59 -

O teor de esterol foi ento determinado pela Equao 3, Equao 4 e
Equao 5..

% do Esterol
% Beta Sitosterol = A !-sitoesterol x mpi x RF x 100 (Equao 3)
Api x mam
% Campesterol = A campesterol x mpi x RF x 100 (Equao 4)
Api x mam

% Stigmasterol = A estigmasterol x mpi x RF x 100 (Equao 5)
Api x mam
Onde :

A !-Sitosterol = rea do pico do -Sitosterol.
A Campesterol = rea do pico do Campesterol
A Estigmasterol = rea do pico do Estigmasterol.
mpi = massa do padro interno (CIV em piridina/anidrido butrico) (mg)
RF = fator de referncia calculado no sub-item 11.6
Api = rea do padro interno (CIV em piridina / anidrido butrico)
mam = massa da amostra (mg)

4.10 Caracterizao e Quantificao dos Produtos

4.10.1 Caracterizao por Espectrometria de Massas Acoplado a um
Cromatgrafo a Gs (CG-EM)

Os produtos foram caracterizados por um cromatografo a gs acoplado a
um espectrometro de massas (CG-EM) cromatgrafo HP 5890 srie II, equipado
com uma coluna capilar Ultra HP-5 (30 m, 0,25 mm de dimetro interno). Foi
utilizado um detector de massas HP 5970, fazendo-se comparao com amostras
autnticas.
- 60 -

Condies analticas: Coluna - Foi utilizada a seguinte rampa de
aquecimento: 170
o
C (1 min), 10
o
C/min-270
o
C (35 min), 70
o
C/min-295
o
C (10
min); Presso coluna = 15 psi; Split = 15 mL/min, Volume = 0,5 l; Injetor 290 C;
Gs de arraste Hlio; Volume = 1,0 l.

4.10.2 Anlise do Teor de cidos Graxos (CG-FID).

Na quantificao dos cidos graxos por cromatografia em fase gasosa,
utilizou-se um cromatgrafo a gs CG-Master equipado com uma coluna capilar-
fase: Carbowax 20M (CG FI 547) 50 metros, 0,25 mm de espessura e um
detector por ionizao em chama.
Condies analticas: Coluna - 180C; Tempo de anlise - 30 minutos;
Detector (Fid ) 220 C; Injetor 200 C; Vaporizador 300 C; Split - 50 mL/min;
Purga septo - 20 mL/min; Ar - 300 mL/min; H
2
- 30 mL/min; Make-up (N
2
); - 30
mL/min; vaso 2 mL/min; Presso coluna 15 psi; Gs de arraste Hidrognio;
volume = 1,0 l.
Foi utilizada a tcnica de curva de calibrao, utilizando-se padres
primrios (cido graxo C14, C16, C18, C18:1, C18:2, C18:3) para a quantificao.

4.10.3 Quantificao dos esteris livres e totais por cromatografia em fase
gasosa

Na quantificao dos esteris livres e totais por cromatografia a gs,
utilizou-se um cromatgrafo HP-5890-II equipado com uma coluna capilar-fase:
dimetilpolisiloxano (HP 1) 25 metros, 0,32 mm de espessura e um detector por
ionizao em chama.
Condies analticas: Coluna - 285C; Tempo de anlise - 25 minutos;
Detector (Fid ) 300 C; Vaporizador 300 C; Split - 50 mL/min; Purga septo - 3
a 4 mL/min; Ar - 340 mL/min; H2 - 30 mL/min; Make-up (N
2
); - 14 mL/min; Coluna
2 mL/min; Presso coluna 17 psi; volume = 1,0 l.
Foi utilizada a tcnica do padro interno e curvas de calibrao.
- 61 -

Captulo 5: Resultados e Discusso

5.1 Composio mdia para os cidos graxos, resnicos e substncias
neutras presentes no CTO

A composio e caractersticas principais obtidas para o CTO, esto
descritas na Tabela 12.

Tabela 12: Composio e caractersticas principais para o CTO.
Anlise Crude Tall
Oil
cidos resnicos % 32,9
cidos graxos %* 53,4
Esterol livre % 4,2
Esterol total % 4,7
ndice de acidez mg KOH/g 153,3
ndice de saponificao mg KOH/g 157,2
Matria Insaponificveis % 13,7
ndice de Iodo g I
2
/100g 146,5
gua ( Karl Fischer ) % 1,3
*100-(cidos resnicos + Insaponificveis)

Os resultados obtidos esto de acordo com os dados de literatura para o
CTO proveniente de Pinus elliotti.
(129,130)

A composio mdia encontrada para os cidos graxos (TOFA), os cidos
resnicos (BREU) e os esteris presentes no CTO utilizado neste trabalho esto na
Tabela 13.

129
F.W. Dodge, Tall Oil and Its Uses, New York, N.Y., 1965, p. 12.
130
D.F. Zinkel, Chem. Tech., 5 (1975) 235.
- 62 -

Tabela 13: Composio obtida para as fraes do CTO.
Anlise TOFA BREU ESTEROL
PM
(mdio) g/mol
278,7 302 414
IA
(terico) mgKOH/g
201,4 185,8 -
IOH
(terico) mgKOH/g
- - 135,3
Distribuio Graxa TOFA (%)
C14:0 0,4
C15:0 0,1
C16:0 10,3
C17:0 0,2
C18:0 2,4
C18:1 50,6
C18:2 32,7
C18:3 2,1
C20:0 0,4
C20:2 0,7
C22:0 0,2
cido De-hidroabitico % 16,5
cido Abitico % 34,6
Outros cidos Resnicos % 48,9
campesterol 5,5
campestanol 0,6
stimasta-5,22,dieno-3-ol 0,4
beta-sitosterol 83,6
stigmastanol-3-ol 8,4
fucosterol 0,4
stimast-7-en-3-ol 0,4

Os resultados obtidos para as fraes de cidos graxos (TOFA), os cidos
resnicos (BREU) e os esteris esto de acordo com os dados de literatura para o
CTO proveniente de Pinus elliotti.
(3)

Na frao de cidos graxos (TOFA), pode-se observar um alto teor de
cidos graxos insaturados (C18:1, C18:2 e C18:3), que extremamente desejvel
para um grande nmero de transformaes empregadas na indstria olequmica.
Na frao de cidos resnicos, observamos um alto teor do cido de-
hidroabitico, substncia que apresenta uma estabilidade trmica maior do que os
outros cidos resnicos. Altos teores deste material so desejveis para aplicao
na fabricao de resinas.
Os esteris analisados apresentaram um alto teor de beta-sitoesterol,
principal fitoesterol utilizado para o combate hipercolesterolemia,
(76)
o que
- 63 -

explica o nmero de patentes e o interesse da indstria qumica pelo CTO como
fonte alternativa (ao leo de soja) para este material.

5.2 Esterificao Seletiva para os cidos Graxos Presentes no CTO

Neste trabalho, foram utilizados um catalisador enzimtico e outro qumico
para promover a esterificao seletiva dos cidos carboxlicos graxos presentes
no CTO.
Atravs desta esterificao seletiva foi possvel aumentar a diferena de
volatilidade dos cidos graxos e dos cidos resnicos presentes no CTO, o que
permite uma separao mais eficiente destas substncias, sem a necessidade de
colunas de fracionamento de alta performance e altas temperaturas.
Optamos por trabalhar com o ster mtilico dos cidos graxos em funo
destes apresentarem uma maior diferena de volatilidade em relao aos cidos
resnicos, o mesmo no ocorreria com os steres etlicos destes cidos.

5.2.1 Estudo da Reao de Esterificao Enzimtica Homognea

Em um trabalho anterior realizado pelo grupo com outro substrato (DDOS),
foram efetuados inmeros ensaios para a seleo da melhor enzima para o
processo de esterificao dos cidos graxos presentes neste material, a enzima
que apresentou a melhor performance para o DDOS foi a lipase B (Candida
antartica Novozym CALB L), com base nestes ensaios prvios definimos que
esta seria a lpase utilizada para a esterificao seletiva dos cidos graxos
presentes no CTO.
A reao de esterificao enzimtica foi estudada utilizando-se um
planejamento fatorial 2
5
com um ensaio em triplicata no ponto central.
Os fatores estudados foram o tempo de reao (h), a temperatura da
reao (
o
C), o teor de catalisador (%), o teor de metanol (%) e o teor de gua (%).
Os efeitos encontrados so mostrados na Tabela 14.

- 64 -

Tabela 14: Efeitos encontrados no estudo da esterificao enzimtica homognea utilizando-se um
planejamento fatorial 2
5
.
A B C D E AB AC AD
8,147 -26,568 1,882 -13,106 31,188 -0,994 -0,610 1,827
AE BC BD BE CD CE DE ABC
-5,693 -0,703 1,508 1,008 -4,033 -3,050 22,546 -1,386
ABD ABE ACD ACE ADE BCD BCE BDE
-9,126 -0,540 -4,834 0,911 -4,575 -2,941 -1,336 1,506
CDE ABCD ABCE ABDE ACDE BCDE ABCDE
4,331 -2,080 -1,519 -3,115 2,432 3,438 3,567

* A = Tempo; B = Temperatura; C = % Enzima; D = % Metanol e E = % gua.
** AB, AC, AD, AE, BC, BD, BE, CD, CE, DE = interao de primeira ordem; ABC, ABD, ABE,
ACD, ACE, ADE, BCD, BCE, BDE, CDE = interao de segunda ordem; ABCD, ABCE, ABDE,
ACDE, BCDE = interao de terceira ordem e ABCDE = interao de quarta ordem.

Na Figura 23, temos o grfico normal dos efeitos obtidos no planejamento
fatorial 2
5
.

DESIGN EXPERT Plot
Converso
A: Tempo
B: Temperatura
C: Enzima
D: Metanol
E: Agua P
r
o
b
a
b
i
l
i
d
a
d
e

N
o
r
m
a
l

%

Grfico Normal dos Efeitos
Efeito
-26.57 -12.13 2.31 16.75 31.19
1
5
10
20
30
50
70
80
90
95
99
A
B
C
D
E
AB
AD
AE
BD
DE
ABD

Figura 23: Grfico normal dos efeitos, obtidos no planejamento fatorial 2
5
.

Podemos observar pelos resultados da Figura 23, que os pontos centrais se
ajustam muito bem a uma reta que cruza a probabilidade acumulada de 50%
praticamente sobre o ponto zero do eixo das abcissas. Faz sentido, portanto,
considerar esses pontos como vindos de uma populao normal de mdia zero.
- 65 -

Ou seja, eles representam efeitos sem nenhum significado fsico. O mesmo j no
podemos dizer dos outros valores, que esto identificados com as letras dos
efeitos que representam. Dificilmente poderamos pensar que esses pontos, to
afastados da reta, perteam mesma populao que produziu os pontos centrais.
Devemos interpret-los, ento, como efeitos realmente significativos, e tanto mais
significativo quanto mais afastados estiverem da regio central, seja para a direita,
seja para a esquerda.
(127)
Neste caso, os valores mais significativos so relativos
aos efeitos principais dos fatores E e B e a interao DE. Podemos considerar o
fator C como inerte, o que transforma o planejamento num fatorial 2
4
em duplicata,
como mostrado na Tabela 15.

Tabela 15: Fatorial em duplicata obtido pela eliminao do fator C.
Tempo (h) Temperatura ( C ) Metanol (%) gua (%) Converso (%) Converso (%) Mdia Varincia
Ensaio X
1
X
2
X
3
X
4 Y Z
1 1(24) 1(60) 1(15) 1(15) 59,94 65,87 62,90 17,588
3 1(24) -1(24) 1(15) -1(0) 55,10 54,00 54,55 0,602
7 1(24) -1(24) -1(5) 1(15) 79,22 87,39 83,31 33,343
9 1(24) 1(60) -1(5) 1(15) 68,28 62,59 65,44 16,193
11 1(24) -1(24) -1(5) -1(0) 80,98 74,73 77,86 19,531
14 1(24) -1(24) 1(15) 1(15) 99,23 99,22 99,23 0,000
16 1(24) 1(60) 1(15) -1(0) 8,84 32,32 20,58 275,633
23 1(24) 1(60) -1(5) -1(0) 71,76 39,92 55,84 506,687
4 -1(6) 1(60) 1(15) -1(0) 4,24 9,36 6,80 13,120
5 -1(6) -1(24) 1(15) -1(0) 30,70 25,12 27,91 15,594
6 -1(6) 1(60) -1(5) 1(15) 48,37 50,69 49,53 2,673
13 -1(6) 1(60) -1(5) -1(0) 47,24 38,45 42,84 38,583
15 -1(6) 1(60) 1(15) 1(15) 76,00 77,53 76,76 1,165
19 -1(6) -1(24) 1(15) 1(15) 85,07 86,42 85,74 0,919
32 -1(6) -1(24) -1(5) 1(15) 85,80 91,82 88,81 18,137
33 -1(6) -1(24) -1(5) -1(0) 79,14 72,82 75,98 19,963

A varincia de um efeito qualquer ser 1/8 do valor da varincia agregada
calculada a partir das dezesseis varincias dos ensaios em duplicata, que 7,65.
O erro-padro do efeito ser a raiz quadrada deste valor, que 2,77.
Multiplicando-se pelo valor do ponto da distribuio de Student com 16 graus de
liberdade, chega-se ao intervalo de 95% de confiana para o valor de um efeito
de: +/-5,87. Isso significa que somente os efeitos principais dos fatores A,B,D e E
e a interao DE e ABD so estatisticamente significativos, o que concorda com a
anlise feita pelo grfico normal dos efeitos (Figura 23) para o planejamento
fatorial 2
5
.
- 66 -

Pode-se observar que, com o aumento da temperatura de 24 para 60
o
C,
houve uma reduo na taxa de converso de 26,6 %. O aumento do teor de
metanol de 5 para 15 %, tambm levou a um efeito negativo na taxa de converso
de 13,1 %. Isso pode indicar uma inativao trmica (com o aumento da
temperatura) e uma inativao do stio ativo da enzima pelo metanol.
O efeito da interao entre a gua e o metanol est apresentado na Figura
24.

Figura 24: Efeito na interao entre a gua e o metanol na converso.

Pelos resultados apresentados na Figura 24, podemos observar que a
reao favorecida pelo o aumento do metanol na presena de altos teores de
gua (converso de 81,16%).
Com o aumento do metanol na presena de baixos teores de gua,
observamos um decrscimo acentuado na converso (27,46%), indicando a
desativao do catalisador enzimtico.
O ciclo cataltico para a catlise enzimtica mostrado na Figura 25.

- 67 -

Figura 25: Ciclo cataltico para a catlise enzimtica.

Podemos observar no ciclo cataltico da Figura 25 que a formao do
intermedirio Acetil-Enzima (substrato-enzima) uma etapa critica para este
sistema cataltico.
O mecanismo proposto para a desativao da enzima pelo metanol
mostrado na Figura 26.

O O
N N H
H
O
H
3
C
Asp
O
H
O
R
1
OR
2
His
Ser
R
2
-OH
-

Figura 26: Mecanismo proposto para a desativao do catalisador enzimtico pelo metanol.
- 68 -

O metanol poderia se ligar ao nitrognio da histidina, o que inviabilizaria a
formao do intermedirio enzima-substrato, o que acarreta estes baixos
rendimentos de converso.
O aumento da porcentagem de gua de 0 para 15 % e do tempo de reao
de 6 para 24 h apresentou um aumento de 31,2 e de 8,1 %, respectivamente, para
a converso. A interao entre a gua e o metanol apresentou um efeito positivo
de 22,5 % no aumento da converso, enquanto que a interao entre o tempo, a
temperatura e o metanol apresentou um efeito negativo de 9,1 % para a
converso dos cidos graxos em steres metlicos.
Atravs dos resultados obtidos para os efeitos, podemos constatar que o
aumento da concentrao da enzima de 0,5 para 1,0 % no apresentou um efeito
estatisticamente significativo para o aumento da converso.
Com base em estudos anteriores realizados pelo grupo, com a mesma
enzima em um outro substrato (DDOS destilado da desodorizao do leo de
soja), constatamos que com um teor mais baixo de enzima (0,05% - 0,1%)
suficiente para esterificao deste substrato, contudo a reao fica mais lenta
(passa de 24 h para aproximadamente 140 h).
Devido ao elevado custo da enzima este teor menor fundamental,
optamos por trabalhar com um teor maior no desenho de experimentos para
acelerar o tempo de execuo dos ensaios.
A Tabela 16 mostra os resultados da anlise dos efeitos estimados das
variveis independentes sobre a taxa de converso dos cidos graxos livres em
steres metlicos para um modelo de 1
a
ordem. A validao terica do modelo
matemtico proposto foi realizada atravs da anlise de varincia (ANOVA) para a
resposta convero.

- 69 -

Tabela 16: Efeitos estimados das variveis independentes para um modelo de 1
a
ordem.
Fator Efeito Erro Padro* Estimativa do Coeficiente Prob > |t|
Mdia 63,40 7,82 60,90
A-Tempo 8,15 2,70 4,07 0.0054
B-Temperatura -26,57 2,70 -13,28 < 0.0001
C-Enzima 1,88 2,70 0,94 0.4833
D-Metanol -13,11 2,70 -6,55 < 0.0001
E-gua 31,19 2,70 15,59 < 0.0001
DE 22,55 2,70 11,27 < 0.0001
ABD -9,13 2,70 -4,56 0.0022

*O erro-padro foi obtido atravs dos dados da Tabela 15.

A porcentagem de variao explicada em torno da mdia foi alta (R
2
=93,4),
indicando uma baixa variabilidade (R
2
>70%)
(127)
, fornecendo um coeficiente de
correlao entre as respostas observadas e as previstas pelo modelo de
R=0,9339, o que indica uma excelente correlao entre os resultados
experimentais previstos pelo modelo de 1
a
ordem. A equao polinomial de
primeira ordem obtida dos resultados dos coeficientes de regresso est descrita
a seguir (Equao 6):

Converso = 60,9+4,07A-13,28B+0,94C-6,55D+15,59-0,5AB+0,91AD-2,85AE+0,75BD+11,27DE-
4,56ABD
(Equao 6)

Podemos observar tambm que, com exceo da porcentagem de enzima,
todas as variveis so estatisticamente significativas (p>0,05).
Atravs da anlise do grfico cbico das respostas (Figura 27) e dos
grficos de superfcie de resposta (Figuras 28 e 29), podemos observar que os
aumentos da quantidade de metanol e da temperatura diminuram a converso.
Contudo, quando utilizamos gua no sistema, o teor mais alto de metanol tem um
efeito positivo no aumento da converso, isto ocorre devido ao efeito de proteo
que a gua exerce no stio ativo da enzima.
- 70 -

Figura 27: Grfico das respostas mdias em funo dos fatores metanol, gua e temperatura.

Figura 28: Grfico da superfcie de resposta para o metanol x gua.

- 71 -

Figura 29: Grfico da superfcie de resposta para o temperatura x metanol.

A melhor condio para altos teores de converso seria efetuar a reao a
baixa temperatura com altos teores de gua (5 a 15 %) e metanol (10 a 15 %). O
limitante, neste caso, seria a diminuio da produtividade devido diluio do
sistema.
Foram efetuadas as cinticas de reao para todos os 35 experimentos,
atravez da retirada de amostras a cada hora para a medida do ndice de acidez.
Na Figura 30, podemos observar o efeito da gua na esterificao do CTO com
metanol.
- 72 -

0
20
40
60
80
100
120
140
160
0 5 10 15 20 25
Tempo (h)
I
A

m
g
K
O
H
/
g
0,5/15/0 0,5/5/15 1/5/0 0,5/5/0
0,5/15/15 1/5/15 1/15/0 1/15/15

Figura 30: Esterificao do CTO a 24
o
C em 24h com diferentes teores (%) de
enzima/metanol/gua.

Pelos dados da Figura 30, podemos observar que a adio de gua ao
sistema diminui significativamente o ndice de acidez com o tempo, o que indica
uma maior converso dos cidos graxos a steres metlicos. Este efeito mais
forte quando o teor de metanol maior.
Atravs do planejamento de experimentos, foi constatado que a adio de
gua ao sistema reacional favorece o aumento da converso. Isto se deve
capacidade da gua de estabilizar o intermedirio acetil-enzima (Figura 18, pg.
35), atravs da formao de um microambiente propcio reao de esterificao
dos cidos graxos com metanol.
(131)

Foram efetuados ensaios em laboratrio com diferentes teores de gua; o
resultado apresentado na Figura 31.

131
J.P.M. Ferreira, Ensino em Biotecnologia Segredos da Catlise Enximtica, Escola Superior de
Biotecnologia Universidade Catlica Portuguesa Porto.
- 73 -

0
20
40
60
80
100
C
o
n
v
e
r
s
o

(
%
)
0 1 5 10 15 20 25 50
Agua (%)

Figura 31: CTO esterificado com 10 % de metanol, 0,05 % de enzima a 45
o
C, com diferentes
teores de gua.

Podemos observar, pelos dados da Figura 31, que a adio de gua
aumenta a esterificao seletiva dos cidos graxos presentes no CTO. Contudo, a
partir de 20 % ocorre uma diminuio na produtividade, em funo dos altos
teores de gua presentes na reao. Tambm constatamos que a partir de 20 %
de gua h uma tendncia de diminuio da converso em funo da competio
entre a gua e o metanol presentes no meio reacional. Constatamos que os teores
timos de gua esto entre 5 e 15 %.
Foi estudado o efeito da adio parcial do metanol ao sistema reacional. Os
resultados esto descritos na Figura 32.

- 74 -

0
20
40
60
80
100
120
140
160
0 10 20 30 40 50 60 70 80
tempo (h)
I
A

[
m
g

K
O
H
/
g
]
2*10% MeOH 20% MeOH
2*7,5% MeOH 15% MeOH

Figura 32: Esterificao do CTO com 15 a 20 % de metanol, 0,05 % de enzima, 45
o
C e 10 % de gua.

Quando se faz uma adio de 20 % de metanol tem-se um IA de 110
mgKOH/g aps 48 h, contra 82 mgKOH/g ao se adicionar o reagente em duas
pores de 10 %. Da mesma forma, para a adio de 15 % de metanol, tem-se um
IA de 90 mgKOH/g aps 48 h, contra 78 mgKOH/g ao se adicionar o reagente em
duas pores de 7,5 %.
Pelos resultados da Figura 32, podemos observar que a adio do metanol
em duas etapas favorece a reao, devido ao menor efeito de desativao que o
metanol tem, nesta condio, sobre a enzima.

5.2.2 Esterificao homognea em larga escala para o CTO

Foram utilizadas as condies timas obtidas do planejamento de
experimentos para um teste industrial em um tanque de 25 m
3
, onde o CTO foi
esterificado utilizando-se o catalisador enzimtico homogneo (lipase Novozym
CALB L), em funo do custo elevado da enzima optamos por trabalhar com um
teor menor da mesma (0,05%) e no 0,5% como descrito no planejamento de
experimentos.
- 75 -

Foram retiradas alquotas a cada duas horas para a anlise do ndice de
acidez e os resultados esto descritos na Figura 33.

0
20
40
60
80
100
120
140
160
180
0 50 100 150
tempo (h)
I
A

m
g
K
O
H
/
g

Figura 33: Esterificao contnua do CTO em um tanque de 25 m
3
com 0,05 % de enzima, 15 %
de metanol, 15 % de gua a 24
o
C.

Na Figura 33, podemos observar que, aps 166 h, o ndice de acidez caiu
de 153,5 para 57,4 mgKOH/g, indicando a esterificao seletiva dos cidos graxos
presentes no CTO. Este ndice de acidez residual (57,4 mgKOH/g ) referente
aos cidos resnicos presentes no CTO. Esta esterificao seletiva foi comprovada
pela anlise do teor de cidos resnicos presentes no CTO aps a esterificao
enzimtica, que indicou que somente os cidos graxos foram esterificados durante
a reao.
Este processo possibilita a separao entre os cidos graxos e os cidos
resnicos livres presentes no CTO, j que com a esterificao seletiva,
aumentamos a diferena de ponto de ebulio entre os dois compostos, facilitando
a separao de ambos por destilao.
- 76 -

O processo tambm se mostrou muito eficaz do ponto de vista econmico,
pois foram utilizados um tanque e uma bomba convencional para a execuo do
mesmo, sendo que para a implementao do processo em produo os
investimentos em novos equipamentos seriam mnimos.

5.2.3 Catlise enzimtica heterognea

A heterogeneizao da lipase facilita a sua aplicao industrial, visto que o
catalisador poderia ser facilmente separado e recuperado ao trmino da reao,
permitindo a obteno de uma maior quantidade de produtos por mol de
catalisador.
A enzima (lpase B Candida Antartica) foi imobilizada em polipropileno, e
foram produzidos dois catalisadores com 0,2 g/g e 0,5 g/g (relao entre a enzima
e o polipropileno). O catalisador heterogneo foi utilizado em vrias reaes de
esterificao em batelada. Os resultados dos vrios ciclos reacionais esto
descritos na Figura 34.

Figura 34: Ciclos reacionais consecutivos para a enzima imobilizada (cada ciclo = 1 dia), com
diferentes teores de gua e catalisador (a - 5% de catalisador 0,5g/g e 0% de gua; b - 5% de
catalisador 0,5g/g e 5% gua; c - 5% de catalisador 0,5g/g e 10% gua; d - 5% de catalisador
0,5g/g e 15% gua; e 5% de catalisador 0,5 g/g e 10% gua/etanol; f 10% de catalisador 0,2
g/g e 10% gua), 10% de metanol, 24h de reao a 30
o
C.

- 77 -

Para o primeiro ciclo reacional, a adio de gua tem um pequeno efeito na
queda do ndice de acidez (aps 24 h de reao), com 0 % de gua, IA = 69,2;
com 5 % de gua, IA = 71,3; com 10 % de gua, IA = 72,5; e com 15 % de gua,
IA = 73,9 mgKOH/g. Contudo, observa-se que sem a adio de gua ao sistema o
catalisador perde a atividade aps 10 ciclos reacionais (curva a). A adio de 5-
15% de gua protege o catalisador heterogeneizado da desativao pelo metanol,
sendo que a faixa tima de gua est entre 10 e 15 %. Com a adio da gua ao
sistema reacional, possvel a utilizao do catalisador por 23 ciclos reacionais
sem perda de atividade. A adio da mistura etanol/gua (curva e) no apresentou
uma queda significativa para o IA do CTO. O catalisador produzido com a relao
0,2 g/g (gramas de catalisador por gramas de polmero), apresentado na curva f,
foi o que apresentou a melhor relao custo-benefcio, j que o custo deste
catalisador menor.
O catalisador heterogneo foi empacotado em uma coluna, e essa foi
utilizada para os experimentos de esterificao contnua. Foram retiradas
alquotas durante a reao para a anlise do ndice de acidez. Os resultados esto
descritos na Figura 35.
0,0
20,0
40,0
60,0
80,0
100,0
120,0
140,0
0 10 20 30 40 50 60
Uso (ciclos)
I
A

[
m
g

K
O
H
/
g
]

Figura 35: Esterificao contnua do CTO a 35
o
C com 10 % de gua e 10 % de metanol (cada
ciclo = 1 dia).
- 78 -

Pode-se observar que no houve perda de atividade do catalisador com o
tempo, com o IA oscilando entre 78 e 84 na maioria dos casos. O catalisador se
mostrou estvel por mais de 50 dias. A produtividade do catalisador suportado foi
de aproximadamente 1.500 g de produto para cada 1 g de catalisador.

5.2.4 Catlise qumica homognea

Comparamos a performance do processo enzimtico (10 % de metanol/0,05
% de enzima/10 % de gua/24
o
C/72 h), com a do processo qumico (25 % de
metanol/0,5 % de cido metanosulfnico/140
o
C/6 bar/2 h). Os resultados so
apresentados na Tabela 17.

Tabela 17: Comparao entre a esterificao qumica e enzimtica para o CTO.
Anlise Crude Tall Oil cto-ee* cto-ech**
ndice de Acidez mgKOH/g 149,5 74,0 67,9
ndice de Saponificao mgKOH/g 160,1 161,5 155,4
cidos Resnicos % 29,6 29,4 29,2
Esteris livres % 2,8 2,6 0,2
Esteris totais % 4,5 4,3 4,7
*cto-ee = cto esterificado enzimtico (lote HN3E195899)
**cto-ech = cto esterificado quimico (lote HN3G278868)

Observou-se que ambos os processo so seletivos para a esterificao dos
cidos graxos presentes no CTO, pois tanto para o processo enzimtico como o
qumico, o teor de cidos resnicos no sofreu alterao (cto-ee cidos resnicos =
29,4 e cto-ech cidos resnicos = 29,2), indicando que os mesmos no foram
esterificados.
Constatamos tambm que a esterificao enzimtica foi mais seletiva do
que a qumica em relao esterificao dos esteris livres, pois na esterificao
enzimtica (cto-ee) o teor de esteris livres obtido foi de 2,6 %. J na esterificao
qumica (cto-ech), o teor de esteris livres obtido foi de 0,2 %, indicando que
ocorreu a esterificao dos esteris livres, o que no desejvel, pois isto dificulta
o processo de purificao.
- 79 -

Com base nos ensaios qumicos e enzimticos, possvel estipularmos
que, o processamento via catlise enzimtica de 400 tons de CTO, so
necessrias 168 h, o que nos d uma relao de 2,38 ton/h. J por catlise
qumica para o processamento de 16 tons, so necessrias 8 h, o que acarreta
uma relao de 2,0 ton/h de CTO esterificado.
A produtividade do catalisador enzimtico tambm foi melhor em relao ao
qumico (0,5 kg/ton e 5 kg/ton, respectivamente).
Uma outra vantagem do processo enzimtico a possibilidade de se
trabalhar em condies mais brandas de temperatura e presso, com um menor
excesso de metanol.

5.3 Reao dos Esteris Presentes no CTO com cido Brico

Nesta etapa do projeto, foi realizada a reao dos esteris presentes no
CTO com cido brico, para promover a sntese de organoboranos com alta
massa molecular, como mostrado na Figura 36.

3 R-OH + B(OH)
3 B(OR)
3
+
3 H
2
O
esterol
cido brico gua tri-esterol ster de boro

Figura 36: Sntese do tri-esterol ster de boro.

Atravs desta reao foi possvel aumentar a diferena de volatilidade dos
cidos resnicos e dos esteris presentes no CTO, obtendo-se uma separao
melhor e mais eficiente destas substncias, sem a necessidade de colunas de
fracionamento de alta performance e altas temperaturas. Com este processo
tambm foi possvel minimizarmos a degradao trmica dos esteris.
Na Tabela 18 so mostrados os resultados referentes reao dos esteris
presentes no CTOMe (onde os cidos graxos presentes no CTO foram
esterificados com metanol) com cido brico.

- 80 -

Tabela 18: Resultados para a esterificao dos esteris presentes no CTO.
Anlise cto-r cto-r Boro
Indice de Acidez mgKOH/g 107,82 89,85
Esterol Livre % 8,11 0,17
Esterol Total % 11,40 -
cto-r = resduo da destilao do steres metlicos presentes no CTO

Foi observado que a reao com o cido brico ocorreu com sucesso, pois o
teor de esterol livre inicial caiu de 8,11 % para 0,17 %, indicando uma esterificao
com o cido brico de 97,9% dos esteris livres iniciais.

5.4 Fracionamento do CTO

5.4.1 Diagrama proposto para o processo de fracionamento do CTO

Com a otimizao do processo enzimtico, foi iniciado a otimizao do
processo de separao dos steres metlicos dos cidos resnicos e dos materiais
insaponificveis.
O diagrama proposto para o processo de fracionamento do CTO est
descrito na Figura 37.

- 81 -

Esterol
Cristalizao
Esterol + Outros
H
2
O/Etanol
cidos Resnicos
Tri-Esterol ster de Boro + Outros
steres Metlicos + cidos Resnicos
H
3
BO
3
/220
o
C/4h
MeOH/Cat/24-140C
Esterol
cidos Graxos
cidos Resnicos
+ Outros
cido Oleico
C
19
H
36
O
2
HO
O
O
HO
cido Abitico
C
20
H
30
O
2
HO
beta - Sitosterol
C
29
H
50
O
MeOH + H
2
O
Destilao
cidos Resnicos + steres Metlicos + Esterol + Outros
cidos Resnicos + steres Metlicos + Tri-Esterol ster de Boro + Outros
steres Metlicos
Destilao

Figura 37: Descrio do processo de separao.
- 82 -

Este processo se baseia no aumento da volatilidade do material graxo
(onde os cidos graxos presentes no CTO foram esterificados seletivamente via
catlise qumica ou enzimtica) e na diminuio da volatilidade dos esteris
(atravs da reao dos esteris presentes no CTO com cido brico, promovendo
a sntese de organoboranos com alta massa molecular), em relao aos cidos
resnicos.
Temperaturas moderadas minimizam as reaes indesejveis como a
degradao dos esteris e a decomposio e descarboxilao dos cidos
resnicos. Para a separao dos steres metlicos dos cidos resnicos e das
substncias neutras, utilizam-se colunas de fracionamento. Obtm-se no topo os
steres metlicos e os cidos resnicos, e um fundo que rico em esteris.

5.4.2 Estudo do efeito da temperatura no teor dos esteris livres e na
degradao trmica desses em uma amostra de CTO

Nesta etapa do projeto, foi estudado o efeito da temperatura na degradao
trmica e no teor dos esteris livres. Os resultados esto mostrados na Figura 38.

Figura 38: Efeito da temperatura no teor de esterol livre em uma amostra de CTO, aquecida em
um balo volumtrico de 2 L por 3h.

- 83 -

Neste experimento, as amostras de CTO foram aquecidas sob agitao em
diversas temperaturas.
Pode-se observar pelos resultados que, a partir de 100
o
C, ocorre a
esterificao dos esteris livres, j que o teor de esteris totais no se alterou,
ficando em torno de 5 %.
Esse efeito foi mais acentuado a uma temperatura superior a 200
o
C, onde
os esteris livres que estavam a 2,8 % inicialmente caram para 1,8 % e mais uma
vez no observamos queda significativa no teor de esteris totais, indicando que
no ocorreu degradao trmica dos mesmos.
Aps 3 h de reao, ocorreu uma degradao trmica de 0,4 % dos
esteris, pois o teor de esteris totais caiu de 4,90 % para 4,88 %.

5.4.3 Fracionamento dos steres mtilicos do CTO em um evaporador do
tipo thin film

Para a anlise e caracterizao dos teores de cidos resnicos presentes
nos steres metlicos destilados por CG-EM, foi necessrio efetuarmos a
metilao dos cidos resnicos com diazometano. Na Figura 39, apresentamos um
cromatograma tpico para o CTO metilado.

- 84 -

Figura 39: Cromatograma tpico para o CTO metilado.

No cormatograma da Figura 39, podemos observar os steres metlicos dos
cidos graxos entre os tempos de reteno de 10,95 e 19,02 min, os steres
metlicos dos cidos resnicos em 20,92 a 32,65 min e os esteris em 55,83 a
55,96 min.
Atravs da metilao dos materiais graxos foi possvel caracterizarmos
todos os compostos por CG-EM.
Na Tabela 19, apresentamos os resultados (rea %) para os compostos
presentes no CTO caracterizados por CG-EM:

- 85 -

Tabela 19: Resultados (rea %) para os compostos presentes no CTO, caracterizados por CG-EM.
Pico Tempo de Reteno (min.) Composto % rea
1 10,95 Palmitato de Metila 4,16
2 12,92 Hepitato de Metila 0,66
3 14,99 Composto no Identificado 0,78
4 15,74 Linoleato de Metila 13,12
5 16,12 Oleato de Metila 21,09
6 16,22 Oleato de Metila* 0,57
7 17,04 Estearato de Metila 1,20
8 17,26 Linoleato de Metila* 0,45
13 20,92 Metil Pimarato 3,82
14 21,65 Metil Sandaracopimarato 1,06
16 23,63 Metil Isopimarato 4,89
17 24,27 Metil Levopimarato 8,02
18 25,66 Metil Dehidroabietato 7,87
19 29,05 Metil Abietato 16,52
20 32,65 Metil Neoabietato 5,32
22 46,93 Tetracosanoato de Metila 0,36
23 55,83 beta-Sitoesterol 3,40
24 55,96 Estigmaesterol 0,50
* Compostos isomerizados.

Na Figura 40, apresentamos as estruturas para os compostos presentes no
CTO caracterizados por CG-EM:

- 86 -

O
O
O
O
13
C
21
H
32
O
2
17
C
21
H
32
O
2
HO
HO
24
C
29
H
48
O
23
C
29
H
50
O
16
C
21
H
32
O
2
14
C
21
H
32
O
2
O
O
O
O
20
C
21
H
32
O
2
18
C
21
H
30
O
2
O
O
O
O
O
O
19
C
21
H
32
O
2
O
O
O
O
O
O
O
O
O
O
O
O
22
C
25
H
50
O
2
5
C
19
H
36
O
2
4
C
19
H
34
O
2
2
C
18
H
36
O
2
7
C
19
H
38
O
2
1
C
17
H
34
O
2

Figura 40: Estruturas para os compostos presentes no CTO caracterizados por CG-EM

O CTO foi destilado a diferentes temperaturas em um evaporador do tipo
Thin film. Os cromatogramas obtidos para os produtos das destilaes esto no
Anexo 1.
Os teores para os cidos resnicos, sitoesteris e a porcentagem da frao
destilada nas diversas temperaturas esto descritos na Figura 41.
- 87 -

0
10
20
30
40
50
60
70
80
%
MP 140 150 160 170 190
Temperatura
o
C
% Frao Destilada
% Rendimento Esteres Metlicos
% cidos Resnicos
% Esteris

Figura 41: Destilao do CTO esterificado (CTO-Me) em um evaporador do tipo thin film sob vcuo
a diferentes temperaturas. MP = Matria Prima, CTO-Me antes da destilao.

Pode-se observar que a melhor condio para a destilao do CTO
esterificado foi a 140
o
C, quando se obteve uma baixa contaminao pelos cidos
resnicos (6,7 %). Contudo, nesta temperatura, foi obtido apenas 28,24 % de
rendimento para os steres metlicos destilados.
Neste experimento, aps a destilao dos steres metlicos, constatou-se
que uma faixa de 6 a 40 % do material destilado era constituda por cidos
resnicos, o que demonstrou que esse no o melhor processo para a separao
dos steres metlicos do CTO.
Atualmente a metodologia utilizada pela indstria para a anlise do teor de
cidos resnicos a volumetria de neutralizao (titulao de cidos fracos com
bases fortes,) ou metodologia O-67, descrita na parte experimental.
Na Figura 42, mostrada a comparao entre esta metodologia e uma
metodologia por cromatografia de fase gasosa.

- 88 -

0
10
20
30
40
50
60
70
80
%
MP 140 150 160 170 190
Temperatura
o
C
O-67 a Titulao %
CG %
% Frao Destilado

Figura 42: Comparao entre metodologias analticas para o clculo do teor relativo de cidos
resnicos por cromatografia de fase gasosa (CG-FID) e por titulao (mtodo O-67a Cognis)

Para amostra produzida a 190
o
C, foi obtido um valor de 43,8 % por CG-FID
e 41,4 % por anlise volumtrica, para a amostra produzida a 170
o
C, os valores
obtidos foram 43,6 % por CG-FID e 38,2 % volumetria. Isto indica a viabilidade da
metodologia por cromatografia de fase gasosa.
Estes desvios podem ser minimizados utilizando-se a metodologia por
padronizao interna e a construo de curvas de calibrao para a anlise por
cromatografia de fase gasosa.

5.4.4 - Fracionamento dos steres metlicos do CTO em uma coluna de
destilao

Foram enviados 500 kg de CTO esterificado enzimaticamente para a
fbrica da Cognis em Duesseldorf na Alemanha, onde o processo de destilao foi
otimizado utilizando-se uma coluna de destilao piloto, com aproximadamente 18
pratos tericos, sem refluxo e sob vcuo de 1 mbar. A temperatura do reator que
- 89 -

alimentou a coluna foi de 220
o
C e a temperatura do topo da coluna foi de 140 a
150
o
C. Os resultados desse fracionamento esto na Tabela 20.

Tabela 20: Resultado do fracionamento do CTO em uma coluna de destilao piloto.
Amostra cidos Resnicos
Totais por CG/EM
ndice de Acidez
mgKOH/g
Amostra 1: CTO - Esterificado 47,4 % 73,3 %
Amostra 2: CTO - Segunda Frao 72,3 % 90,4 %
Amostra 3: CTO - ster Mtilico 0 3,9 %

A amostra 1 referente ao material de partida, as amostras 2 e 3 so
referentes aos steres metlicos e cidos resnicos destilados.
Na Figura 43, tem se o cromatograma obtidos para as amostras 1.

Figura 43: Cromatograma para a destilao dos cidos resnicos do CTO - amostra 1.

Na Figura 43, temos o cromatograma para a amostra de partida (CTO
esterificado). Neste cromatograma os steres metlicos esto no tempo de
reteno de 4,35 a 17,76 min, os cidos resnicos metilados por diazometano
- 90 -

esto no tempo de reteno de 18,2 a 34,27 min, j os esteris esto no tempo de
reteno de 58,25 min.
Na Figura 44, tem-se o cromatograma obtido para a amostra 2.

Figura 44: Cromatograma para a destilao dos cidos resnicos do CTO - amostra 2.

Nesse cromatograma, foi observado um alto teor de cidos resnicos;
contudo, foi constatada a presena de steres metlicos dos cidos graxos (no
tempo de reteno de 4,37 a 17,70 min) como contaminante.
Na Figura 45, apresentamos o cromatograma obtido para a amostras 3.

- 91 -

Figura 45: Cromatograma para a destilao dos steres metlicos do CTO - amostra 3.

Foi observado no cromatograma apresentado na Figura 45, que com este
processo, foi possvel obter um ster metlico isento de contaminao por cidos
resnicos.
Na Tabela 21 temos os resultados analticos obtidos para a amostra 3,
proveniente do fracionamento do CTO em uma coluna de destilao.

Tabela 21: Resultados analticos obtidos para a amostra 3, proveniente do fracionamento do CTO
em uma coluna de destilao.
Anlise Amostra 3
Distribuio Graxa (%)
C14:0 0,1
C14:1 0,1
C15:0 0,1
C16:0 4,9
C16:1 0,3
C17:0 0,2
C18:0 2,0
C18:1 58,6
C18:2 29,4
ndice de Saponificao
mgKOH/g
174,6
Matria Insaponificvel (%) 4,3
ndice de Iodo gI2/100g 112,2
ndice de cidez mgKOH/g 3,9

- 92 -

Com este novo processo, foi obtido um ster metlico com alto grau de
pureza (Tabela 21) isento de contaminao por cidos resnicos. Com esse grau
de pureza, os steres metlicos provenientes do CTO podem ser utilizados como
plastificantes para PVC, na produo de amidas graxas, na produo de
surfactantes aninicos, na produo de steres dimricos, etc.
(29)

5.4.5 Caracterizao dos cidos Resnicos concentrados (amostra 2),

Os resultados das anlises por CG-EM para os steres metlicos dos cidos
resnicos caracterizados nas amostras de CTO so mostrados no Anexo 2, e
esto de acordo com os dados de literatura.
(3)
Os altos teores de cido de-
hidroabitico encontrados so desejveis para a aplicao dos cidos resnicos na
fabricao de resinas, pois este apresenta uma estabilidade trmica maior do que
os outros cidos resnicos.
No processo de purificao por destilao foi obtido um cido resnico com
72,3 % de pureza (dados amostra 2 Tabela 20). Para a sua aplicao industrial,
necessrio um produto com um teor mais alto de pureza (min. 98 %) e isso pode
ser obtido atravs de um processo de purificao por cristalizao, o que ser
objeto de um trabalho futuro do grupo de pesquisa da Cognis Brasil.
Os cidos resnicos puros podem ser utilizados na fabricao de steres de
cidos resnicos com glicerina ou pentaeritritol. Esses steres so utilizados na
fabricao de resinas e adesivos industriais.
(56,57)

5.4.6 Concentrao dos fitoesteris aps reao com cido brico
utilizando-se um evaporador do tipo Thin film

Nesta etapa do processo, promovemos a concentrao dos esteris
presentes no CTO aps a esterificao enzimtica. Os resultados analticos para
esta a esterificao enzimtica so apresentados na Tabela 22.

- 93 -

Tabela 22: Resultados analticos para a esterificao enzimtica do CTO.
Anlise CTO CTO-Me
ndice de Saponificao mgKOH/g 157,17 -
Insaponificveis % 13,70 -
Esterol Total % 4,70 4,42
cidos Resnicos % 32,92 32,30
ndice de Iodo gI
2
/100g 146,55 -
Agua % 1,26 -

CTO-Me = CTO esterificado com metanol. (15 % metanol/10 % gua/0,05 % enzima/72 h).

O ndice de acidez caiu de 153,32 mgKOH/g para 71,18 mgKOH/g aps a
esterificao enzimtica com metanol; contudo, o teor de cidos resnicos livres
no sofreu uma alterao significativa, j que o teor inicial foi de 32,92 % e aps a
esterificao enzimtica, este ficou em 32,2 %, indicando que o processo foi
seletivo para a estericao dos cidos graxos presentes no CTO.
O CTO esterificado foi inicialmente fracionado a 190
o
C (Etapa 1).
Utilizamos o resduo da primeira destilao para a reao com o cido brico
sendo o mesmo posteriormente fracionado a 240
o
C (Etapa 2).

5.4.6.1 Etapa 1 Destilao Thin film a 190
o
C.

Os resultados analticos para o fracionamento do CTO-Me em um
evaporador do tipo Thin film a 190
o
C esto na Tabela 23.

- 94 -

Tabela 23: Destilao do CTO-Me em um evaporador do tipo Thin film a 190
o
C
Anlise tofa-me 1 cto-r
ndice de Saponificao mgKOH/g 168,6 148,8
Insaponificveis % 5,2 16,0
ndice de Iodo gI
2
/100g 133,2 -
Destilado (TOPO) % 46,7 -
Resduo (FUNDO) % - 53,3
Esterol Terico Esperado % 0,0 8,8
Perda de Esterol % 1,4 0,0

tofa-me 1 = Frao destilado (topo) CTO-Me via thin film (temperatura = 190
o
C; vcuo = 1 mmHg;
agitao = 50 rpm; vazo = 900 mL/h).
cto-r = Frao resduo (fundo) CTO-Me via thin film (temperatura = 190
o
C; vcuo = 1 mmHg;
agitao = 50 rpm; vazo = 900 mL/h).

Foi observado pelos dados da Tabela 23, que no ocorreu perda
significativa de esteris nesta etapa do processo (Etapa 1: destilao a 190
o
C);
observou-se uma perda de 1,4 % do esterol para o destilado TOFA-Me 1.
Foi obtido um ligeiro aumento da relao entre esterol livre e total, o que
indica que durante a destilao ocorreu a esterificao parcial do esterol livre.
Pode-se observar que o ster metlico destilado (TOFA-Me 1) apresentou
contaminao com os cidos rosnicos (10,7 %) e materiais insaponificveis (5,2
%).

5.4.6.2 Etapa 2 Destilao Thin film a 240
o
C.

O CTO-R foi esterificado com cido brico (3 h/ 220
o
C/ 600 mmHg), sendo
posteriormente fracionado em um evaporador do tipo Thin film.
Os resultados analticos para o fracionamento do CTO-R em um
evaporador do tipo Thin film a 240
o
C esto na Tabela 24.

- 95 -

Tabela 24: Destilao do CTO-R em um evaporador do tipo Thin film a 240
o
C
Anlise tofa-me 2 cto-rr
ndice de Saponificao mgKOH/g 164,8 95,1
Insaponificveis % 6,8 14,5
ndice de Iodo gI
2
/100g 150,4 -
Destilado (TOPO) % 65,0 -
Resduo (FUNDO) % - 35,0
Esterol Terico Esperado % 0,0 25,2
Perda de Esterol % 3,4 11,5

tofa-me 2 = Frao resduo (topo) cto-r boro via thin film (temperatura = 240
o
C; vcuo = 1 mmHg;
agitao = 50-60 rpm; vazo = 800 mL/h).
cto-rr = Frao resduo (fundo) cto-r boro via thin film (temperatura = 240
o
C; vcuo = 1 mmHg;
agitao = 50-60 rpm; vazo = 800 mL/h).

Atravs dos dados da Tabela 24 pode-se observar que ocorreu um
pequeno arraste de esteris nos cidos resnicos destilados (aprox. 3,4 %).
Com este processo obteve-se um resduo com aproximadamente 22,3 % de
esteris totais.
A degradao e perda de esterol nos destilados no processo todo ficou em
cerca de 11,5 %.

5.4.6.3 Caracterizao dos esteris concentrados, obtidos do processo de
fracionamento do CTO

O resduo de destilao dos cidos graxos e dos cidos resnicos, obtido
atravs do processo enzimtico, apresentou um alto teor de esteris livres (1,8 %)
e esteris esterificados (22,3 %). Foi desenvolvido um novo processo para a
purificao destes esteris que est sendo patenteado pela Cognis Brasil.
Na Figura 46, apresentado um cromatograma para o esterol cru
proveniente do pitch purificado do Tall Oil antes da cristalizao.

- 96 -

Figura 46: Cromatograma para o pitch purificado do CTO.

Na Figura 47, apresentado um cromatograma para os fitoesteris
purificados (98% de pureza) obtido aps a cristalizao dos esteris provenientes
do CTO.

Figura 47: Cromatograma fitoesterol cristalizado.

Pode-se observar pelos resultados apresentados na Figura 47, que o
processo de cristalizao para a purificao dos esteris foi bem sucedida, j que
os picos dos contaminantes (nos tempos de reteno de 4,0 a 11,0 min)
- 97 -

desapareceram, restando apenas dois picos em 12,5 e 14,0 min referentes aos
esteris.
Obteve-se uma amostra com 98% de pureza em relao aos esteris
(dados obtidos por CG-FID utilizando a metodologia analtica descrita no item
4.9.3).
Os resultados das anlises por CG-EM para os esteris caracterizados nas
amostras de CTO cristalizado, so mostrados no Anexo 3, e estes esto de
acordo com os dados de literatura.
(3)

Os esteris analisados apresentaram um alto teor de beta-sitoesterol, que
o principal fitoesterol utilizado para o combate hipercolesterolemia.
(76)

O processo de cristalizao para a purificao dos fitoesteris presentes no
CTO e no pitch foi patenteado pela Cognis na Alemanha.
O processo de esterificaao seletiva e de fracionamento do CTO foi
patenteado pela Cognis do Brasil, as patentes esto anexadas no Anexo 4.

- 98 -

Captulo 6: Concluses

A transformao seletiva da matria graxa do CTO em steres metlicos,
atravs da catlise homognea enzimtica ou qumica foi efetuada com sucesso,
pois todo o material graxo foi esterificado. Constatou-se atravs do teor de cidos
resnicos livres que no ocorreu a esterificao dos mesmos, indicando que tanto
o processo enzimtico como o processo qumico so seletivos para a esterificao
dos cidos graxos.
A reao de esterificao enzimtica homognea foi estudada utilizando-se
um planejamento fatorial 2
5
com um ensaio em triplicata no ponto central. Os
fatores estudados foram o tempo de reao (h), a temperatura da reao (
o
C), o
teor de catalisador (%), o teor de metanol (%) e o teor de gua (%). Com o
aumento da temperatura de 24 para 60
o
C, houve uma reduo na taxa de
converso de 26,6 % e o aumento da percentagem de metanol de 5 para 15 %
tambm apresentou um efeito negativo na taxa de converso, de 13,1 %. Isso
indicou uma inativao trmica (com o aumento da temperatura) e uma inativao
do stio ativo da enzima pelo metanol. O aumento da porcentagem de gua de 0
para 15 % e do tempo de reao de 6 para 24 h apresentou um aumento de 31,2
e de 8,1 %, respectivamente, para a converso. A interao entre a gua e o
metanol apresentou um efeito positivo de 22,5 % no aumento da converso, e a
interao entre o tempo, a temperatura e o metanol apresentou um efeito negativo
de 9,1 % para a converso dos cidos graxos em steres metlicos.
Observou-se que a adio do metanol em duas etapas favorece a reao.
Isso se deve ao efeito de desativao que o metanol tem sobre a enzima.
A melhor condio para altos teores de converso seria efetuar a reao
baixa temperatura (24
o
C) com altos teores de gua (10 a 15 %) e metanol (10 a
15 %). O limitante neste caso seria a diminuio da produtividade devido diluio
do sistema.
O catalisador enzimtico foi imobilizado em polipropileno. Foram produzidos
dois catalisadores heterogneos com 0,2 g/g e 0,5 g/g, sendo que a relao 0,2
g/g foi a que apresentou a melhor relao custo-benefcio para as reaes em
- 99 -

batelada. O catalisador heterogneo foi empacotado em uma coluna, e essa foi
utilizada para os experimentos de esterificao contnua. O catalisador se mostrou
estvel por mais de 50 dias. A produtividade do catalisador suportado foi de
aproximadamente 1500 g de produto para cada 1 g de catalisador. Contudo, o
processo de esterificao enzimtica homognea requer um menor investimento
para a sua implementao em produo, j que para a implementao do
processo heterogneo contnuo, seria necessria a construo de uma coluna (em
escala industrial), empacotada com a enzima suportada.
O CTO esterificado sofreu posterior reao com cido brico, sendo
inicialmente fracionado em um evaporador do tipo thin film. O resduo obtido
apresentou um alto teor de esteris livres (1,83 %) e esteris esterificados (22,31
%).
A frao leve do CTO esterificado foi fracionada em uma coluna de
destilao piloto, e com este novo processo, obtivemos um ster metlico com alto
grau de pureza, isento de contaminao por cidos resnicos. No processo de
purificao por destilao, obtivemos um cido resnico com 72,3 % de pureza.
O processo de esterificao seletiva e de fracionamento do CTO foi
patenteado pela Cognis do Brasil.

- 100 -

Anexo 1:

Cromatogramas dos steres metlicos provenientes da destilao do
CTO a diferentes temperaturas

- 101 -

Figura 48: Cromatograma dos steres metlicos provenientes da destilao do CTO a 140
o
C.

- 102 -

o
C

- 103 -

o
C

- 104 -

o
C

- 105 -

o
C

- 106 -

Anexo 2:

Caracterizao por CG-EM dos cidos Resnicos concentrados,

- 107 -

Na figura abaixo, apreentado o cromatograma para uma amostra
com alto teor de cidos resnicos (72,3 %), obtidos aps a esterificao
enzimtica e o posterior fracionamento do CTO, amostra 2 da Tabela 19.

Figura 53: Cromatograma para uma amostra com alto teor de cidos resnicos.

- 108 -

O
O
A - Metl Pimarato
C
21
H
32
O
2
316.48
a
b
c
d
e
f

M = on Molecular
1 = fragmento m/z = 301, resultado da fragmentao da molcula na posio (a)
ocorrendo a perda de uma metila.
2 = fragmento m/z = 288, correspondente fragmentao da molcula na posio (b).
3 = fragmento m/z = 274, correspondente fragmentao da molcula em (a) e (b).
4 = fragmento m/z = 257, correspondente fragmentao da molcula em (c).
5 = fragmento m/z = 241, correspondente fragmentao da molcula em (c) e (d).
6 = fragmento m/z = 121, correspondente fragmentao da molcula em (e), (f) e
(b).
Figura 54: Espectro de massa do metil pimarato proveniente do fracionamento e posterior
metilao dos cidos resnicos presentes no CTO.
- 109 -

f
e
d
c
b
B - Metl Sandaracopimarato
C
21
H
32
O
2
316.48
O
O

M = on Molecular
(g).
Figura 55: Espectro de massa do metil sandaracopimarato proveniente do fracionamento e
posterior metilao dos cidos resnicos presentes no CTO.
- 110 -

O
O
C - Metl Isopimrato
C
21
H
32
O
2
316.48
d
f
a
c
e

M = on Molecular
(g).
Figura 56: Espectro de massa do metil isopimarato proveniente do fracionamento e posterior

- 111 -

f
d
b
D - Metil Levopimarato
C
21
H
32
O
2
316.48
O
O
a
c
e

M = on Molecular
(g).
Figura 57: Espectro de massa do C
21
H
32
0
2
proveniente do fracionamento e posterior metilao dos
cidos resnicos presentes no CTO.
- 112 -

O
O
E - Metil Dehidroabietato
C
21
H
30
O
2
314.46
a
b
c
d

M = on Molecular
5 = fragmento m/z = 211, correspondente fragmentao da molcula em (b) e (c).
6 = fragmento m/z = 197, correspondente fragmentao da molcula em (c), (b) e
(d).
Figura 58: Espectro de massa do metil dehidroabietato proveniente do fracionamento e posterior
- 113 -

F - Metil Abietato
C
21
H
32
O
2
316.48
d
d
c
b
a
O
O

M = on Molecular
(d).
Figura 59: Espectro de massa do metil abietato proveniente do fracionamento e posterior
- 114 -

G - Metil Neoabietato
C
21
H
32
O
2
316.48
O
O
a
b
c
d
d

M = on Molecular
(d).
Figura 60: Espectro de massa do metil neoabietato proveniente do fracionamento e posterior
- 115 -

Anexo 3:

Caracterizao por CG-EM dos Esteris concentrados, obtidos do
processo de fracionamento do CTO

- 116 -

Na figura abaixo, o cromatograma apresentado na Figura 47, foi
ampliado para facilitar a anlise dos esteris obtidos do processo de
cristalizao.

Figura 61: Cromatograma ampliado dos fitoesteris obtidos por cristalizao.

- 117 -

e
d
c
a
HO
A - Campes te rol
C
28
H
48
O
400.68

M = on Molecular
gerando uma molcula de gua.
2 = fragmento m/z = 367, correspondente fragmentao da molcula na posio
(a) perda de uma molcula de gua e (b) perda de uma metila.
4 = fragmento m/z = 273, correspondente fragmentao da molcula em (d).
5 = fragmento m/z = 255, correspondente fragmentao da molcula em (d) e (a).
6 = fragmento m/z = 43, correspondente fragmentao da molcula em (e).
Figura 62: Espectro de massa do campesterol proveniente da cristalizao dos esteris presentes
no CTO.
- 118 -

HO
a
c
d
e
B - Campe s tanol
C
28
H
50
O
402.70

M = on Molecular
5 = fragmento m/z = 257, correspondente fragmentao da molcula em (d) e
(a).
Figura 63: Espectro de massa do campestanol proveniente da cristalizao dos esteris presentes
no CTO.
- 119 -

HO
C - Es tigmae s te rol
C
29
H
48
O
412.69
a
b
c
d
e

M = on Molecular
2 = fragmento m/z = 379, correspondente fragmentao da molcula em (a) perde
de uma molcula de gua e (b) perda de uma metila.
3 = fragmento m/z = 351, correspondente fragmentao da molcula em (a) e (c).
6 = fragmento m/z = 255, correspondente fragmentao da molcula em (e) e (a).
Figura 64: Espectro de massa do estigmaesterol proveniente da cristalizao dos esteris
presentes no CTO.
- 120 -

HO
a
b
e
f
g
D - Be ta Sitoe s te rol
C
29
H
50
O
414.71

M = on Molecular
2 = fragmento m/z = 381, correspondente fragmentao da molcula na posio (a)
perda de uma molcula de gua e (b) perda de uma metila.
3 = fragmento m/z = 372, correspondente fragmentao da molcula em (c) e (a).
6 = fragmento m/z = 303, correspondente fragmentao da molcula em (f).
7 = fragmento m/z = 273, correspondente fragmentao da molcula em (g).
8 = fragmento m/z = 255, correspondente fragmentao da molcula em (g) e (a).
Figura 65: Espectro de massa do sitoesterol proveniente da cristalizao dos esteris presentes
no CTO.
- 121 -

f
b
a
HO
E - Be ta Sitoe s tanol
C
29
H
52
O
416.73

M = on Molecular
6 = fragmento m/z = 314, correspondente fragmentao da molcula em (a) e (e).
7 = fragmento m/z = 257, correspondente fragmentao da molcula em (a) e (f).
Figura 66: Espectro de massa do sitoestenol proveniente da cristalizao dos esteris presentes
no CTO.
- 122 -

HO
F - Fucos te rol
C
29
H
48
O
412.69
a
b
d

M = on Molecular
Figura 67: Espectro de massa do fucosterol proveniente da cristalizao dos esteris presentes no
CTO.
- 123 -

HO
G - Stigmas t-7-en-3-ol
C
29
H
50
O
414.71
a
b
c
d e

M = on Molecular
Figura 68: Espectro de massa do stigmast-7-en-3-ol proveniente da cristalizao dos esteris
presentes no CTO.

- 124 -

Anexo 4:

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