2 RECOMENDACIONES PARA MANIPULACIN DE SUBSTANCIAS, MATERIAL Y EQUIPO EN EL LABORTORIO Y MEDIDAS DE SEGURIDAD
1. Al preparar cualquier solucin de sustancias qumicas se deben seguir las instrucciones de las prcticas o la que se indique en la dosificacin de reactivos de qumica. Una vez preparada e debe envasar y etiquetar indicando de que sustancia se trata, su composicin y el grupo que la va a utilizar, as como la fecha.
2. Antes de usar un reactivo qumico o una solucin se debe de leer la etiqueta para identificarlo, tomar la cantidad exacta y necesaria tapando enseguida el frasco, no debe regresarse jams el exceso al frasco original para no contaminarlo.
3. Cuando se deje de usar un reactivo o una solucin, regrselo a su lugar. Conserve en la mesa de trabajo el mnimo de equipo y materiales necesarios y opere en condiciones de limpieza.
4. Al calentar las sustancias que desprendan gases corrosivos o txicos debe usarse la campana de extraccin, si no se cuenta con una, procurar que haya una buena ventilacin.
5. Si la tcnica indica la forma de calentamiento, bao mara, bao de aceite, parrilla elctrica, mechero, etc., hgalo como se indica no cambie por iniciativa propia la forma de hacerlo.
6. Si al efectuar un calentamiento se encuentra un reactivo inflamable cerca de la fuente de calor RETRELOS!
7. Al hacer un calentamiento en un tubo de ensaye, debe sujetarse con una pinza para tal efecto inclinndolo en un ngulo de 45 apuntando en direccin opuesta a la que se encuentran los compaeros de trabajo y agitando continuamente.
8. Al prender la llama del mechero bunsen, prenda primero el cerillo y colquelo sobre la parte superior del propio mechero, enseguida abra la llave del gas hasta obtener la intensidad de la flama requerida, ajustar en caso necesario el paso de aire para una buena combustin.
9. Al manipular sustancias muy reactivas como el sodio y el potasio, procurar hacer los cortes del lquido con una esptula perfectamente seca. Si se va a hacer reaccionar con agua, tenga la precaucin de no agregarlo al agua que se interponga entre el operador y el recipiente, un vidrio o una rejilla para evitar proyecciones.
10. Al desconectar un aparato elctrico del contacto jale de la clavija, nunca lo haga del alambre. No se exponga a un corto circuito. 3 11. Para preparar cualquier solucin acuosa de cidos minerales y orgnicos, tenga la precaucin de verter sobre el agua el acido en pequeas cantidades y agitando continuamente. Si se calienta demasiado enfre en baos con agua fra o con hielo.
12. Cuando exista una fuga de gas no encienda cerillos ni las luces, abra puertas y ventanas para que se ventile y no provocar una explosin. Una vez ventilada el rea se podr trabajar.
13. En los laboratorios no est permitido comer, beber o fumar ya que por la naturaleza de las substancias que se emplean se puede causar alguna intoxicacin o envenenamiento.
14. Si llegara a ocurrir algn accidente en el laboratorio, informar inmediatamente al profesor o al auxiliar de laboratorio y ayudar en algunos de los siguientes casos:
a) INCENDIOS: Use extinguidor o una manta gruesa para sofocarlo. Si el fuego ha alcanzado a alguna persona se debe conducir inmediatamente a la ducha de seguridad o en casos de no contar con ella, enrollarlo en una manta y darle vueltas en el piso, nunca permita que la persona corra con las ropas encendidas, puesto que aviva la combustin. b) INGESTIN DE PRODUCTOS QUMICOS: Si accidentalmente se ingiere un acido o un lcali fuertes, hacer lo siguiente: Para un cido: suministrar hielo, clara de huevo y conducirlo a servicios mdicos. Para un lcali: suministrar vinagre o jugo de limn, leche, aceite y conducirlo a servicios mdico. c) SALES DE NITRATO DE PLATA: Suministrar agua y sal d) QUEMADURAS EXTERNAS CON CIDOS: Lavar abundantemente con agua corriente, lavar con solucin de bicarbonato de sodio al 1%. e) QEMADURAS EXTERNAS CON LCALIS: Lavar abundantemente con agua corriente, lavar con solucin de cido brico al 2%.
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Formato para la elaboracin de un Reporte de Prcticas de Laboratorio, en todas las asignaturas de la Currcula de Ingeniero Bioqumico en la Escuela de Ciencias Biolgicas.
Aspectos que debe contener el reporte escrito a maquina o computadora.
Nombre de la Institucin UNIVERSIDAD AUTONOMA DE COAHUILA
Nombre de la Dependencia ESCUELA DE CIENCIAS BIOLGICAS
Nmero y nombre de la prctica
Nombre del alumno, grado y seccin
Nombre del maestro
Fecha de realizacin de la prctica
Lugar y fecha de entrega 5
2.- Objetivo Ser elaborado y proporcionado por el maestro y explicar claramente lo que se persigue al realizar la prctica en cada materia.
3.- Introduccin Debe contener la informacin suficiente como antecedente para la prctica a realizar. No debe exceder de 1.5 a 2 cuartillas y se indicar la bibliografa consultada en forma de citar autor-nmero como se observa en el ejemplo. El primer reporte de la habilidad de una enzima (hidrogenasa) de catalizar reacciones en fase gaseosa sugiri en 1969(4). Estudios posteriores demostraron que tal principio se extiende a otras enzimas o clulas deshidratadas (1, 2, 3). El parmetro crtico que determina la velocidad de la reaccin es el contenido de agua.
4.- Desarrollo Experimental Se debe hacer mencin de la metodologa o tcnicas que se utilizaron durante la practica, material y reactivos y la preparacin de soluciones. As mismo, indicar si existieron modificaciones durante el desarrollo de la prctica y las observaciones correspondientes. En caso e que lo sugiera e maestro puede incluirse informacin adicional en forma de anexos.
5.- Resultados Sern presentados a travs de Tablas, Grficas, Cuadros, Diagramas o Clculos, con numeracin consecutiva y ttulos correspondientes, adems del anlisis de resultados.
6.- Discusin En caso de requerirlo la prctica o sugerirlo el maestro, debe incluirse discusin de los resultados obtenidos.
7.- Conclusiones Se basa e los resultados obtenidos al finalizar el desarrollo experimental de la prctica.
8.- Bibliografa La bibliografa debe expresarse en orden alfabtico y por citar Autor- nmero para libros, revistas cientficas, manuales, informes, etc., de acuerdo al ejemplo presentado en la parte de introduccin.
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BIBLIOGRAFA
1. Barzana. E, et al 1987.- reacciones catalizadas por enzimas en fase gas slido. 2. Appl. Biochem. Biotechnology, 15 pag. 25-39
3. Cadea. M. m. Waissbluth, 1978.- Actividad enzimtica en interfase gas- slido: Oxidacin de metanol a formaldehdo. Enzime Engincering. Vol. 4, Nueva Yotk, Plenum Press, Pag. 405-407.
4. Hou, Ch. T. 1984.- Produccin de oxido de propileno por clulas de methylosinus sp. Inmovilizadas en biorreactor slido-gas Appl. Microbiology, Biotechnol, 2 Pag. 1
5. Yagi, T., et al, 1969.- Actividad e hidrogenasa en estado seco. Journal AMER. 6. Chem. Soc. 91, Pag. 2801.
Las bibliografas 1, 3 y 4 corresponden a revistas internacionales y como se observa contiene el apellido del autor y la inicia de su nombre (se incluye et al cuando sean mas de dos autores), ao de la edicin, titulo del artculo o reporte, nombre de la revista, numero del volumen de la revista y la pgina consultada. La bibliografa 2 corresponde a libro de texto e incluye apellido del autor e inicial del nombre (se incluye et al cuando sean mas de dos autores), ao de edicin, titulo del libro, volumen, lugar de edicin, editorial y pginas consultadas.
Nota: El valor de la calificacin para cada uno de los puntos sealados en el presente formato ser indicado por el maestro de cada asignatura.
7 PRACTICA N 1
ESTANDARIZACION DE UNA SOLUCIN DE ACIDO CLORHIDRICO
OBJETIVO Preparar y estandarizar una solucin de cido clorhdrico, que despus se usar como solucin patrn en la determinacin de la concentracin de muestras problema.
APOYO TERICO Un mtodo de anlisis volumtrico se basa en una reaccin qumica como:
aA + tT Productos
En donde a representa las molculas de analita A, que reaccionan con t molculas de reactivo T. El reactivo T se adiciona, por lo general con una bureta y su concentracin es conocida. A esta solucin se le conoce como estndar (titulante o solucin patrn) y su concentracin se determina mediante un proceso llamado estandarizacin. La adicin del titulante es continua hasta que se ha aadido una cantidad T equivalente a la de A. Entonces se dice que se ha alcanzado el punto de equivalencia en la titulacin, el cual puede ser determinado con una sustancia qumica llamada indicador, que cambia de color cuando hay un exceso de titulante y nos indica el punto final de la titulacin. Una de las reacciones qumicas que se utilizan en las titulaciones son las cido-base. Existe un gran nmero de cidos y bases que se pueden determinar mediante la volumtrica. Los titulantes son por lo general soluciones estndar de electrolitos fuertes como el hidrxido de sodio y el acido clorhdrico. La estandarizacin del acido clorhdrico se puede realizar utilizando como estndar primario el carbonato de sodio, el cual es un buen estndar y se recomienda en particular si la solucin de cido se va a utilizar para titular muestras de carbonatos.
PROCEDIMIENTO 1. La preparacin de una disolucin 0.1 N de HCl. Mida aproximadamente un litro de agua destilada en un frasco de vidrio limpio y con tapn esmerilado. Adicione al agua cerca de 10 ml aproximadamente de HCl concentrado utilizando una probeta o pipeta graduada. Tape el frasco, y mezcle la solucin agitando e invirtindolo y etiquete. Etiquete de la siguiente manera: Nombre del compuesto qumico Concentracin Fecha de preparacin Datos de quien prepar el reactivo.
8 2. Valoracin de la disolucin de HCl. Desecar poco ms de 1 g de carbonato de sodio tipo primario, durante 2 hrs. a 250 C y deje enfriar en un desecador. Pese con exactitud tres muestras (de 0.20 a 0.25 g cada una) de carbonato de sodio, en tres matraces Erlen Meyer. Disuelva cada muestra con cerca de 50 ml de agua destilada, agregue tres gotas de indicador verde de bromo cresol. Titule cada muestra con la solucin de acido clorhdrico hasta observar un vire del indicador del azul al verde. Hervir la disolucin durante 2 o 3 minutos enfriar a temperatura ambiente, colocando el matraz en un bao de agua fra y prosiga la valoracin. Registre el volumen total de acido agregado. Durante el calentamiento a ebullicin el indicador debe virar otra vez al azul sino es as significa que ha agregado un exceso de cido, valorar entonces por retroceso este exceso con una disolucin de patrn base. Determinar el blanco del indicador valorando un volumen igual de agua que obtenga una cantidad aproximada de cloruro de sodio y de indicador que estn presentes en el punto final de la disolucin que se valora.
PREGUNTAS 1. Escriba la reaccin balanceada que ocurre entre el cido clorhdrico y e carbonato de sodio. 2. Cul es el peso equivalente del carbonato de sodio? 3. Calcule la normalidad real del HCl a partir de los resultados experimentales. 4. Con qu fin se hierve la disolucin durante la valoracin? 5. Para qu se realiza una valoracin del blanco. Cmo se debe utilizar el dato del volumen del HCl en el blanco? 6. Qu otros mtodos de valoracin se conocen para el HCl? 7. Qu utilidad tiene el HCl como reactivo valorante en el rea de su carrera?
9 PRACTICA N 2
DETERMINACION DEL CONTENIDO DE CIDO EN VINAGRE
OBJETIVO Determinar el porcentaje de cido actico presente en una muestra comercial de vinagre.
APOYO TEORICO El principal cido presente en el vinagre es el cido actico y las regulaciones federales especifican 4 g de cido actico por cada 100 g de vinagre. La cantidad total de cido se puede determinar rpidamente por medio de una titulacin con una base estndar utilizando fenoftalena como indicador. Aunque estn presentes otros cidos, el resultado se calcula como cido actico.
PROCEDIMIENTO Preparacin y disolucin de una solucin patrn de NaOH La disolucin de NaOH no se puede preparar pesando una cantidad exacta, puesto que cantidades apreciables de CO 2 del aire. Una base libre de carbonatos se puede preparar pesando 5 g de compuesto en forma rpida y sin mucha exactitud, en un vidrio de reloj o un vaso de precipitado pequeo; se disuelve en 250ml de agua contenidos en un vaso de precipitados de 500ml se calienta y se agrega una disolucin tambin caliente de 2 0 3 g de cloruro de bario en 25 o 30 ml de agua, para precipitar el carbonato. La solucin se deja enfriar y despus se decanta de slido en un frasco limpio y se diluye a un litro de agua hervida y fra. La disolucin as obtenida se almacena en un frasco polietileno.
Titulacin de la disolucin de NaOH Mida con una pipeta volumtrica de 25 ml un volumen correspondiente de NaOH, se coloca en un matraz Erlen Meyer de 250ml. Diluya agregando 50 ml de agua destilada, hervida y fra, y se titula con el HCl patrn, previamente valorado. Se emplea el anaranjado de metilo como indicador (3 gotas). La titulacin se repite hasta que la diferecia en los volmenes no sea mayor a 0.1 ml
Determinacin del cido actico en vinagre Pipetee 25 ml de vinagre dentro de un matraz volumtrico de 250 ml diluya hasta la marca y mezcle bien. Pipetee una alcuota de 50 ml de esta solucin dentro de un matraz Erlen Meyer y adicione 50 ml de agua y 3 gotas de indicador fenoftalena. Titule con NaOH estndar hasta el primer color rosa permanente. Repita la titulacin con dos alcuotas adicionales.
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PREGUNTAS 1. Para qu se aade cloruro de bario a la disolucin de NaOH? Escriba la reaccin 2. Por qu es necesario agua hervida en su preparacin? 3. Por qu se debe evitar el contacto de la disolucin de NaOH con el aire? 4. Por qu no se debe usar tapones de vidrio en los frascos que contengan NaOH? 5. Calcule la concentracin de NaOH co los datos obtenidos durante el experimento 6. Por qu se utiliz el anaranjado de metilo como indicador? 7. Qu otros mtodos de valoracin se conocen para el NaOH? 8. Qu utilidad tiene el NaOH en el rea de su carrera? 9. Considerando que todo el cido es actico, calcule los gramos de cido por 100 ml de solucin de vinagre. Suponiendo que la densidad del vinagre es 1,000 Cul es el porcentaje de cido actico (en peso) en el vinagre?
11 PRACTICA N 3
DETERMINACION DEL PORCENTAJE DE PUREZA
OBJETIVO Analizar una muestra de ftalato cido de potasio para determinar el porcentaje de pureza de la misma.
APOYO TEORICO Para analizar una muestra de pureza desconocida, el analista debe pesar con exactitud una porcin de la muestra, disolverla en forma adecuada y titularla con una solucin estndar. Considerando que: meq titulante= meq analita, lo cual puede expresarse en funcin del volumen (V) en mililitros y la normalidad (N) del titulante.
V * N = meq titulante = meq analita
Para expresar el resultado en porcentaje los meq de analita se convierten en peso y se dividen entre el peso de la muestra:
% = V(ml) * N(meq/ml) * PE(mg/meq) * 100 Peso de la Muestra (mg)
PROCEDIMIENTO Seque la muestra desconocida a 110 C durante una hora por lo menos, enfre en un desecador. En tres matraces Erlen Meyer limpios pese con exactitud muestras de 0.5 a 0.7 g y disulvalos en 75 ml de agua hervida y fra. A cada matraz adicinele 2 gotas de indicador fenoftalena. A continuacin titule el contenido del primer matraz con solucin estndar de hidrxido de hidrxido de sodio hasta el primer color rosa permanente. Registre la lectura de la bureta y titule las otras dos muestras de la misma manera. Calcule el porcentaje de pureza del ftalato de potasio en cada muestra y obtenga la pureza promedio.
PREGUNTAS 1. Reaccin que ocurre en la titulacin 2. con la pureza determinada para cada muestra calcule la pureza y la desviacin promedio.
12 PRACTICA N 4
TITULACIONES POTENCIOMTRICAS
OBJETIVO Que el alumno a partir de titulaciones potenciomtricas trace una curva de titulacin de un cido fuerte con una base fuerte y determine el punto de equivalencia.
APOYO TEORICO En una titulacin potenciomtrica se realiza la medicin de una diferencia de potencias entre un electrodo indicador y un electrodo de referencia. La diferencia de potencial se puede medir con un potencimetro o con un pH metro. La mayora de las mediciones de pH que realizan los qumicos analistas y los bioqumicos son mediante un electrodo de vidrio conectado a un electrodo de calomel como referencia por medio de un puente de cloruro de potasio. Los datos de pH obtenidos de una titulacin potenciomtrica pueden ser utilizadas para estandarizar una solucin a analizar una muestra determinar la constante de disociacin de un cido dbil.
PROCEDIMIENTO Utilice las soluciones de HCL y NaOH prepara dos en los experimentos 1 y 2. Pipetee una alcuota de 25 ml de cido en un vaso de precipitado de 250 ml y diluya la solucin a 100 ml con agua destilada. Inserte los electrodos en una solucin y asegrese que estn colocados media pulgada debajo de la superficie. Ajuste el agitador mecnico o magntico y monte una bureta que contenga la solucin alcalina como se muestra en la figura. Mida y registre el pH de la solucin antes de comenzar a adicionar el titulante. Despus agregue desde la bureta cerca de 5 ml de base y de nuevo mida el pH. Registre este valor as como el volumen que descarg la bureta. Siga el mismo procedimiento para registrar el valor del pH y las lecturas de la bureta despus de adicionar 10, 15 y 20 ml de titulante. Agregue el titulante a intervalos de 1 ml hasta casi alcanzar el punto de equivalencia. Contine adicionando el titulante a intervalos de 0.1 ml hasta sobrepasar el punto de equivalencia. Es evidente cuando se alcanza este punto porque un cambio brusco en el pH. Por ltimo, registre dos lecturas adicionales con 5 y 10 ml de titulante en exceso. Repita la titulacin con dos alcuotas ms del cido; a la primera agrguele 2 gotas de indicador rojo de metilo y a la segunda 2 gotas de fenoftalena. Ponga atencin a los valores de pH en os que estos indicadores cambian de color y comprelos con los datos de la tabla. Promedie los valores obtenidos para la proporcin de volmenes y calcule la precisin de la medicin.
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PREGUNTAS 1. Grafique los datos de pH contra volumen (ml) de NaOH y determine el volumen de NaOH en el punto de equivalencia. 2. Grafique de a pH/aV contra ml de NaOH y determine el volumen de NaOH en el punto de equivalencia. 3. Compare el pH experimental al que los indicadores cambian de color con los datos de vire reportados en la literatura.
14 PRACTICA N 5
DETERMINACIN DE pKa DE UN CIDO DESCONOCIDO
OBJETIVO Determinar el valor de pKa de un cido desconocido mediante una titulacin potenciomtrica.
APOYO TEORICO En una titulacin potenciomtrica el punto final se detecta determinando el volumen en el cual ocurre el cambio de potencial pH relativamente grande cuado se adiciona el titulante. La titulacin se puede realizar manual automatizar el procedimiento. En las titulaciones manuales, el pH se mide despus de cada adicin sucesiva de titulante para dar una curva a partir de la cual puede determinarse el punto de equivalencia y el pKa.
PROCEDIMIENTO Disuelva los gramos de las sustancias que le indique el maestro y afore en un matraz a 100 ml. A continuacin tome una alcuota de 25 ml con una pipeta volumtrica, virtala en un vaso de precipitado de 250 ml y aada 50 ml de agua destilada. En la bureta coloque la solucin patrn de NaOH ( o HCl segn sea la muestra problema). Finalmente repita la titulacin potenciomtrica con el mismo procedimiento que en la prctica N 4. Repita la titulacin si es necesario.
PREGUNTAS 1. Grafique los datos de pH contra volumen (ml) de NaOH y determine el volumen en e punto de equivalencia. 2. Lea en la curva el pH a la mitad del volumen que se necesita para el punto pH=pKa. 3. Determine el valor de pKa 4. Calcule la concentracin de la muestra problema 5. Investigue el cido probable de acuerdo al valor de pKa.
15 PRACTICA N 6
SOLUCIONES AMORTIGUADORAS
OBJETIVO Preparas soluciones amortiguadoras con determinado pH, calculando la concentracin del par cido-base conjugado.
APOYO TEORICO A una solucin que se opone a grandes cambios de pH cuando se le adicionan iones H + o hidrxido o cuando se diluye, se le llama solucin amortiguadora. En general, una solucin amortiguadora contiene un par cido- base conjugado. La capacidad de un amortiguador es la medida de su efectividad para resistir los cambios de pH con la adicin de cido o base. Mientras mas grandes sean las concentraciones del cido y la base conjugada, mayor ser la capacidad del amortiguador. Al preparar un amortiguador para un pH deseado, el analista debe seleccionar un sistema cido-sal ( o base-sal) en el cual el pKa del cido est lo ms cerca posible al pH que se desea amortiguar. Con esta seleccin, la proporcin cido-sal es el incremento decremento del pH. La concentracin rea del cido y la sal utilizados depende de la resistencia al cambio de pH que se desea obtener. Los sistemas (cido-base) que por lo comn se emplean en laboratorio para preparar soluciones amortiguadoras incluyen: 1. Para pH de 2-10 cido ftlico-ftalato cido de potasio, fosfato dicido de potasio-fosfato cido de potasio y cido brico. 2. Para pH de 2-8 cido ctrico-fosfato cido de sodio, conocidos como amortiguadores de McIlvame. 3. Para pH de 6-11 carbonato de sodio-bicarbonato de sodio. 4. Para pH de 10.9-12 fosfato cido de sodio-hidrxido de sodio
PROCEDIMIENTO Preparacin de buffer de fosfatos con pH de 7.5 (0.1m) Prepare la solucin buffer de fosfatos como sigue: pese con exactitud ----- ---- g de fosfato dicido de potasio (KH 2 PO 4 ) y ------- g de fosfato cido de sodio (Na 2 HPO 4 ) transfiralos a un matraz de aforacin de 100 ml. Diluya con agua y mezcle perfectamente. Mida el pH de la solucin, comprelo con el pH que desea obtener y registre el valor. Preparacin de buffer de acetatos con pH 4.5 (0.1m) Prepare la solucin como sigue: pese con exactitud ----- g de cido actico (CH 2 COOH) y ------g de acetato de sodio (CH 3 COONa), transfiralos a un 16 matraz de aforacin de 100 ml, diluya con agua y mezcle perfectamente. Mida el pH de la solucin, comprelo con el pH que deseaba y registre la valoracin.
Preparacin de buffer de fosfatos con pH ---- (vare 0.1 M por un mol de H + o OH aadido) Prepare la solucin como sigue: pese con exactitud ----- g de cido y ------ g de la base, transfiralos a un matraz de aforacin de 100ml, diluya con agua y mezcle perfectamente. Mida el pH de la solucin, comprelo con el pH que deseaba obtener y registre la valoracin. AJUSTE EN CASO DE SER NECESARIO.
17 PRACTICA N 7
PREPARACIN Y ESTANDARIZACION DE SOLUCION DISODICA DE ACIDO ETILEDIAMINOTETRAACETICO (AEDT)
OBJETIVO Preparar una solucin de AEDT 0.01 M y estandarizarla con cloruro de calcio (titulacin con formacin de complejos).
APOYO TEORICO Uno de los tipos de reacciones qumicas que pueden servir como base de una determinacin volumtrica es aquella implica la formacin de un complejo de in complejo, el cual se forma por medio de la reaccin de un in metlico (catin) con un anin o una molcula neutra. Por lo general stas son reacciones que 1:1 en las que se forma un complejo soluble, podemos representarla de manera general como:
M + L ML
Donde: M=metal, L=ligando y ML=complejo.
Ciertos agentes quelantes (ligados) que contienen oxgeno y nitrgeno son particularmente eficaces para formar complejos estables con una amplia variedad de metales, de ellos el que mejor se conoce es el cido etilendiaminotetraactico (AEDT) que forma con los iones metlicos complejos solubles en una preparacin 1:1 y adems la velocidad de formacin es muy alta en la mayora de los casos, por lo que tiene una amplia aplicacin en la titulacin de metales.
PROCEDIMIENTO Preparacin de a solucin estndar de calcio Pese cerca de 4g de sal di sdica a dihidatada del AEDT y 0.1g de MgCl 2
* 6 H 2 O en un vaso de precipitados limpio de 400 ml disuelva los slidos en agua, transfiera la solucin a un frasco limpio de 1 litro y dilyala de 1 litro. Mezcle la solucin y etiquete el frasco. Prepare la solucin estndar de carbonato de calcio como sigue: Pese con exactitud cerca de 0.4g del estndar primario de carbonato de calcio, secado previamente a 100 C Transfiera el slido a un matraz volumtrico de 500ml utilizando unos 100 ml de agua. Adicione gota a gota cido clorhdrico 1:1 hasta que ya no aparezca la efervescencia y la solucin sea clara. Diluya con agua hasta la marca y mezcle bien la solucin.
18 Estandarizacin de la solucin de AEDT Prepare una porcin de 50 ml de la solucin de cloruro de calcio en un matraz Erlen Meyer de 250 ml y adicione 5 ml de solucin amortiguadora de amonio-cloruro de amonio 2 . Luego agregue 5 gotas del indicador negro heril romo T. titule con cuidado empleando la solucin de AEDT hasta el punto donde el color cambia de rojo vino a azul puro. En la solucin no debe aparecer ningn tinte rojo. Repita la titulacin con las otras dos alcuotas de solucin de calcio. Calcule la molaridad de la solucin de AEDT y la del carbonato de calcio que titulo.
PREGUNTAS 1. Reaccin que ocurre en la titulacin. Complementa con la formula de AEDT. 2. Por qu se adiciona solucin amortiguadoras en las titulaciones con AEDT? 3. consulta que otros indicadores pueden utilizarse para indicar el punto final en titulaciones con AEDT. 4. calcula la concentracin de la solucin di sdica del AEDT 5. aplicaciones del AEDT como titulante
1 Si la solucin s turbia, adicione unas cuantas gotas de solucin de NaOH 0.1M hasta aclararla. 2 Prepare esta solucin disolviendo 6.75 g de cloruro de amonio en 57 ml de amoniaco concentrado y diluyendo a 100 ml. El pH del amortiguador est ligeramente arriba de 10.
19 PRACTICA N 8
DETERMINACION DE LA DUREZA TOTAL DEL AGUA
OBJETIVO Determinar la dureza total del agua con una solucin estndar de AEDT
APOYO TEORICO La dureza total de agua, calcio y magnesio, se pueden determinar por medio de una titulacin directa con AEDT utilizando como indicador el negro de her cromo T o la calmagita. El complejo entre el Ca +2 y el indicador es demasiado dbil para que ocurra el cambio de color adecuado, sin embargo, el magnesio forma un complejo ms estable que el calcio y se obtiene un punto final apropiado en un amortiguador de amoniaco a pH 10. El cambio de color del indicador (ln) de azul a rojo (Mgln) indica a el trmino de la titulacin.
PROCEDIMIENTO Pipetee tres porciones de agua de grifo, cisterna, pozo de agua, etc (menos destilada) de 50 ml en matraces Erlen Meyer de 250 ml. A la primera muestra agrguele 1.0 ml de solucin amortiguadora y 5 gotas de solucin del indicador. Titule con solucin estndar de AEDT hasta el cambio de color de rojo vino a azul puro. Repita el procedimiento con las otras dos porciones de agua. Calcule la dureza total del agua expresada en partes por milln (ppm) de carbonato de calcio.
1 Prepare esta solucin de la misma manera que en la practica N 7
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PRACTICA N 9
DETERMINACION DE CALCIO EN GLUCONATO DE CALCIO
OBJETIVO Determinar e porcentaje de calcio en tabletas de gluconato de calcio.
APOYO TEORICO De todos los minerales que tenemos en el cuerpo, el calcio es el ms abundante. El noventa y ocho por ciento del calcio corporal est en los huesos y el 1% en los dientes. El otro 1% se encuentra en todos los dems tejidos como parte esencial de ciertas reacciones metablicas, como la contraccin de los msculos. El suero sanguneo contiene de 4.5 a 5.5 mmol de calcio/litro. Un aumento o una disminucin significativa produce sntomas patolgicos lamentables. La hipocalcemia es el resultado de una deficiencia de la hormona paratiroides, de la resistencia de la hormona o de una deficiencia de vitamina D. cuando la concentracin de calcio cae hasta 3.5 mmol/litro, ocurre ttanos severo. El tratamiento para un paciente hipocalcmico consiste en inyecciones intravenosas de gluconato de calcio, junto con extracto de paratiroides y vitamina D. en casos menos agudos se puede suministrar en forma oral de 1 a 5 g de gluconato de calcio tres veces al da. El gluconato e calcio tiene un sabor agradable, es un compuesto blanco que podemos encontrar en tabletas o en solucin. Es el anin de un cido orgnico dbil y no causa acidosis como el in cloruro. Por esto, el gluconato de calcio es el prototipo de calcio para las preparaciones medicinales.
PROCEDIMIENTO El calcio presente en el gluconato de calcio se va a determinar por medio de una titulacin con una solucin estndar de AEDT, es recomendable que la concentracin de AEDT sea alrededor de 0.025M, siguiendo el procedimiento para preparar la solucin como sigue: se utilizan 10 g de Na 2 H 2 Y * 2 H 2 O (EDTA), y 0.1 g MgCl 2 * 6 H 2 O Si algo de slido no se disuelve, se agregan perlas de NaOH una a la vez y se agita la solucin hasta disolver todo el slido. Se ajusta a 1 lt. Prepare la solucin estndar de cloruro de calcio. Se pesa con exactitud 1.0 g de carbonato de calcio grado estndar primario y desecado previamente a 100 C por 1 hr. , en caso de verse turbia, se disu elve con la ayuda de ac. Clorhidrico 1:1. Una vez disuelta, afore a 500 ml. Titule tres alcuotas de 50 ml de esta solucin con solucin estndar de AEDT como se indica en la prctica N 7. Obtenga de su instructor las tabletas de gluconato de calcio 1. Tritrelas con la hoja de acero inoxidable de una esptula y mezcle el polvo. Seque el polvo a 100 C durante una hora. Pese en forma exacta una muestra de 0.4 g en tres matraces Erlen Meyer de 250 ml y disulvalas con 50 ml 21 de agua destilada. Se puede necesitar calentamiento. A la primera muestra agrguele 5 ml de amortiguador amoniaco-cloruro de amoniaco y 5 gotas de indicador negro her cromo T. titule con solucin estndar de AEDT hasta que el color cambie de rojo vino a azul puro. Repita el procedimiento con las otras dos muestras. Finalmente, calcule el porcentaje de calcio en el medicamento.
1 Las tabletas se pueden comprar sin receta medica en la farmacia.
22 PRACTICA N 10
PREPARACION Y ESTANDARIZACION DE AgNO 3
OBJETIVO Estandarizar una solucin de AgNO 3 con el mtodo de Mohor (titulacin con reacciones de precipitacin)
APOYO TEORICO Las titulaciones donde ocurren reacciones de precipitacin no son tan numerosas en anlisis volumtricos, una de las razones de su uso limitado es la falta de indicadores adecuados para detectar el punto final. Adems, en algunos casos la velocidad de reaccin es demasiado lenta. Lo que limita su aplicacin. De as titulaciones por precipitacin que tiene gran aplicacin estn aquellas donde se utilizan sales de plata, para las que existen tres indicadores que se ha empleado con xito: en el mtodo de Volhard utiliza in Fe+3 para formar un complejo colundo con el in tiocianato y el mtodo de Fajans emplea indicadores de adsorcin. La presente prctica ser realizada aplicando el mtodo de Mohor, donde se emplea como estndar primario cloruro de sodio o de potasio.
PROCEDIMIENTO Preparacin de las soluciones Solucin de AgNO 3 . Pese alrededor de 8 g de Nitrato de Plata, disuelva la sal con agua destilada en un vaso de precipitado y transfiera la solucin a un frasco limpio. Dilyala solucin hasta 500 ml con agua destilada, mezcle bien y etiquete. Proteja la solucin de la luz solar lo mximo que sea posible (se recomienda frasco mbar). Estndar primario (NaCl). Seque la sal a 120C por lo menos durante dos horas. Pese con exactitud 1.1 a 1.2 g de NaCl, disuelva y afore en un matraz volumtrico de 250 ml. Saque alcuotas de 50 ml para la titulacin. Otra alternativa espesar con exactitud tres muestras de 0.20 a 0.25 g de NaCl puro, disuelva cada muestra en 50 ml de agua destilada. Estandarizacin de una solucin de AgNO3 A 50 ml de solucin de NaCl agregue 2 ml de solucin de cromato de potasio 0.1 M. Titule con nitrato de plata, agitando la solucin en forma constante hasta que el color rojizo del cromato e plata comience a dispersarse a travs de la solucin, lo que seala que est por alcanzarse el punto final. La formacin de grumos de cloruro de plata tambin es una indicacin de que se acerca al punto final. La adicin de nitrato de plata se contina gota a gota hasta lograr el cambio de color permanente de amarillo de in cromato al rojizo de precipitado del cromato de plata. 23 Titule otras dos muestras de la misma forma.
PREGUNTAS 1. Reacciones que ocurren durante la titulacin. 2. Por qu es necesario proteger de la luz solar las soluciones de AgNO 3 ? 3. Qu otros mtodos se pueden utilizar para estandarizar el AgNO 3 ? Explica el fundamento de cada uno de ellos. 4. Calcula la concentracin de AgNO 3
24 PRACTICA N 11
DETERMINACIN DE CLORUROS EN AGUA
OBJETIVO Determinar los cloruros en agua mediante el mtodo de Mohor.
APOYO TEORICO El cloruro se puede determinar por medio de una titulacin estndar de nitrato de plata. Se puede emplear una titulacin directa utilizando como indicador ya sea in cromato diclorofluorescena. Como una alternativa se puede aadir un exceso con un tiocianato de potasio estndar. Durante el desarrollo de la presente prctica se llevar a cabo nicamente uno de estos tres procedimientos: el mtodo de Mohor.
PROCEDIMIENTO Pese en forma exacta tres muestras del material seco en tres matraces Erlen Meyer de 250 ml. Disuelva cada una en cerca de 50 ml de agua destilada y agregue 2 ml de solucin de cromato de potasio 0.1 M. titule la primera muestra con nitrato de plata estndar como se indica en la practica N 9. Titule otras dos muestras de la misma forma.
PREGUNTAS 1. Calcule el porcentaje de cloruros en la muestra
25 PRACTICA N 12
VALORACION DE TIOSULFATO DE SODIO
OBJETIVO Valorar una solucin de tiosulfato de sodio por el mtodo iodomtrico para emplearlo en otras determinaciones.
APOYO TEORICO El tiosulfato de sodio es la solucin estndar que se utiliza en la mayora de los procesos iodomtricos. Por lo general, esta sal se compra como penta hidrato Na 2 S 2 O 3 * 5 H 2 O. Las soluciones no se deben estandarizar pesando directamente, deben estandarizarse con un estndar primario. Las reacciones entre el yodo y el tiosulfato son rpidas, cuantitativas y no presenta reacciones colaterales, por lo cual el estndar ms obvio es el yodo puro, pero rara vez se utiliza porque resulta difcil e manejarlo y pesarlo. Lo ms comn es emplear un proceso iodomtrico, un agente oxidante que liberar yodo a partir del yoduro.
PROCEDIMIENTO Preparacin de la solucin de tiosulfato 0.1 N Pesar cerca de 25 g en un litro de agua recientemente hervida y fra preparar 250 ml. Valoracin de la solucin de Na 2 S 2 O 3
La solucin debe valorarse el da del experimento. Enjuagar varias veces la bureta de 50 ml con porciones pequeas de solucin de tiosulfato y llenarla con dicha solucin. Ajustar el cero y anotar la lectura del volumen con exactitud de 0.01 M. Aadir con una pipeta una alcuota de 25 ml de la solucin de yodato a un matraz Erlen Meyer limpio de 250 ml y boca ancha. Aadir aproximadamente 2 g de yoduro de potasio slido y agitar para disolverlo. Aadir mezclando con rapidez 5 ml de H 2 SO 4 diluido. Mezclar perfectamente. Titular de inmediato con la solucin de tiosulfato. En solucin fuertemente acida, el yoduro se oxida con rapidez en contacto con el aire y por lo tanto es necesaria la titulacin con rapidez). Es fundamental mezclar a la perfeccin en forma continua durante la titulacin, no debe permitirse que el tiosulfato se acumule en excesos locales en solucin cida, de lo contrario puede descomponerse en H 2 SO 4 y S. titular hasta que el color amarillo (debido al I 3 ) casi desaparezca. Se transformar en amarillo claro. Despus aadir de 2 a 3 ml de solucin de almidn y titular hasta que el color azul desaparezca (idealmente debera aadirse medio mililitro antes de alcanzar el punto final).
26 PREGUNTAS 1. Por qu se usa el agua hervida en la preparacin del tiosulfato de sodio? 2. Por qu debe guardarse la solucin en un frasco mbar al abrigo de la luz? 3. Escriba la reaccin entre el yodato y el yoduro de potasio 4. Por qu se le adiciona cido sulfrico a la disolucin de yodatos-yoduros? 5. Anota la reaccin que ocurre entre el yodato y el tiosulfato 6. Cul es el peso equivalente del yodato y el del tiosulfato? 7. Explica la igualdad: 0.03567 KIO 3 = 1 ml Na 2 S 2 O 3
8. Calcula la normalidad en la regin anterior 9. Explica porque se aade indicador hasta el momento de tener poco yodo en la solucin (amarillo claro) y no al inicio. 10. En las preguntas 3 y 5 cuales son los cambios en los nmeros de oxidacin, cuales sustancias actan como agentes reductores y cuales como agentes oxidantes. 11. Consulta otros mtodos de valoracin para el tiosulfato.
27 PRACTICA N 13
ESTANDARIZACIN DE UNA SOLUCIN DE KMnO 4
OBJETIVO Estandarizar una solucin de permanganato de potasio mediante el mtodo de McBride.
APOYO TEORICO El permanganato de potasio se ha utilizado mucho como agente antioxidante por ms de 100 aos. Es un reactivo que est disponible con facilidad, no es aro y no requiere indicador a menos que se utilice en solucin muy diluida. Una gota de permanganato de 0.1 N imparte color rosa perceptible al volumen de solucin que por lo general se una titulacin. Este color se emplea para indicar el exceso de reactivo. El permanganato participa en varias reacciones qumicas ya que el manganeso puede existir en los estados de oxidacin +3, +4, +6 y +7.
La reaccin ms comn con la que lo encontramos en el laboratorio es: MnO 4 -1 + 8H + + 5e - Mn +2 + 4H 2 O E 0 = +1.51 V
Qu sucede en solucin ms cida? El permanganato de potasio reacciona rpidamente con muchos agentes reductores de acuerdo con esta reaccin, pero algunas sustancias requieren calentamiento o el uso de un catalizador para aumentar la velocidad en la reaccin. Un buen estndar primario para el permanganato de potasio en solucin cida es el oxalato de sodio, Na 2 C 2 O 4 . Durante muchos aos los analistas utilizaron el procedimiento recomendado por McBride, en el cual la titulacin se realizaba lentamente a temperatura elevada con agitacin vigorosa. Mas tarde Fowler y Bright hicieron una investigacin completa de los posibles errores en la titulacin y encontraron evidencia de la formacin de perxido, por lo que recomendaron adicionar casi todo el permanganato con rapidez a la solucin cida a temperatura ambiente al terminar la reaccin, calentar la solucin a 60 C y completar la titulacin a esta temperatura.
PROCEDIMIENTO Pese con exactitud tres muestras, de 0.25 a 0.30 g cada una de oxalato de sodio seco en matraces Erlen Meyer limpios de 250 ml. Disuelva cada muestra en 75 ml de cido sulfrico 1.5 N (20 ml de cido sulfrico concentrado adicionados a 400 ml de agua). Luego calienta la primera solucin casi a ebullicin (de 80 a 90 C) y titule lentamente con permanganato agitando con movimientos circulares constantes. El punto final lo determina la aparicin de un color rosa tenue que persiste por lo menos 30 segundos. Durante la titulacin, la temperatura 28 de la solucin no debe de bajar de los 60 C. Titule las otras dos soluciones siguiendo el mismo procedimiento. A 100 ml de cido sulfrico 1.5 N agregue gota a gota la solucin de permanganato hasta que el color rosa sea igual al de la solucin que se titul. Reste este volumen del que se gasto en la titulacin.
PREGUNTAS 1. Calcule la normalidad de la solucin de permanganato de potasio. La desviacin promedio debe de ser de 2 ppmil.