Sei sulla pagina 1di 8

1

NORMAS PARA UTILIZAO DE UM LABORATRIO DE MICROSCOPIA


Utilizao de jalecos.
No fumar.
No fazer uso de alimentos ou bebidas.
Recolocar os bancos e material didtico nos seus respectivos locais aps o uso.
Utilizar as lixeiras.
No remover os microscpios do lugar, e caso isso seja estritamente necessrio, segurar
no brao (com uma mo) e no p do aparelho (com a outra). Nunca carregue- o somente
pelo brao.
No remover as objetivas do revlver ou as oculares. A limpeza das mesmas deve ser feita
com leno de papel, delicadamente, na superfcie externa das mesmas.
Ao utilizar leo de imerso limpar as lentes. SEMPRE!
No provocar vibraes nas bancadas, pois pode provocar desalinhamentos do sistema
tico do microscpio.
No forar qualquer parafuso ou pea do microscpio.
Qualquer dvida sobre manuseio e limpeza do aparelho, chame o professor.
Iniciar o uso de um microscpio utilizando-se sempre objetivas de menor aumento, foco
com o parafuso macromtrico, depois micromtrico. Aps o primeiro ajuste com o parafuso
macromtrico, todos os outros ajustes de foco devem ser feitos SOMENTE com o parafuso
micromtrico.
Desligar os aparelhos e mant-los permanentemente cobertos com capas aps a
utilizao.









2

AULA PRTICA 1
INSTRUMENTAO EM MICROSCOPIA I - USO DO MICROSCPIO E EXAME A
FRESCO
Objetivo: - manusear o microscpio de luz
A clula pode ser estudada sob diversos aspectos: sua forma, a natureza e forma de seus
constituintes de seus constituintes, e o seu modo de funcionamento. Ou seja, realizar
investigaes morfolgicas, qumicas, bioqumicas e fisiolgicas.
De uma forma geral, um estudo detalhado da clula e de seus constituintes com a vista
desarmada virtualmente impossvel, devido s suas pequenas dimenses. Para se ter uma
idia, as dimenses mais comumente observadas entre as clulas de animais e vegetais
superiores situam-se na faixa de 10 a 20 m (1 m = 10
-3
mm; 1 nm = 10
-6
mm). Por isso, o
citologista obrigado utilizar instrumentos de aumento para a observao conveniente da clula.
Os estudos morfolgicos ou morfo-fisiolgicos da clula comeam normalmente com o
emprego do microscpio de luz (microscpio fotnico utiliza a iuz como fonte de formao de
imagens ou microscpio composto constitudo por dois sistemas de lentes sobrepostas: a objetiva
e a ocular). Este instrumento pode ser considerado como a ferramenta bsica e indispensvel de
todo biologista celular.
A observao da clula ao microscpio de luz feita por luz transmitida, que exige que o
objeto a ser estudado responda a certas condies. Para que a luz possa atravess- lo, o objeto
deve ser suficientemente fino. Como raramente uma clula apresenta uma espessura na ordem
necessria (5 m), torna-se necessrio fazer cortes da clula para atingir a espessura desejada.
Alm da espessura, a observao da clula por luz transmitida requer que certas regies
do objeto absorvam mais iuz do que outras, ou seja, que esse objeto apresente contrastes. Como
os constituintes celulares tm pouco contraste, necessrio se utilizar de coloraes artificiais,
usando-se corantes. Os corantes so substncias que absorvem certos comprimentos de onda
da luz visvel e tm afinidade por determinados constituintes celulares. Outra maneira possvel de
se criar contrastes artificialmente utilizar certas montagens ticas especiais que ampliam as
diferenas de contraste existentes nas diversas regies da clula: microscpio de fase, por
exemplo.
O microscpio de luz composto fundamentalmente das seguintes partes:
A. Partes mecnicas
P: base do aparelho, suporta todas as outras partes.
Brao: preso ao p, rgido ou articulado, suporta o canho, a platina, o condensador e o espelho
ou fonte luminosa.
Canho: o tubo onde se dispem as partes ticas de ampliao, pode ser fixo ao brao ou
possuir movimento vertical.
Revlver: uma pea giratria onde se conectam as objetivas e que permite a instantnea
mudana das mesmas.
Platina: a mesa de trabalho, onde se coloca a preparao para exame, possui uma abertura
central que d passagem luz proveniente da fonte, pode ser fixa ao brao, ou possuir movimento
vertical.
Charriot: um dispositivo preso platina, dotado de movimento antero-posterior e lateral,
destinado a movimentar a preparao.
Parafuso macromtrico: um dispositivo destinado a dar grandes e rpidos deslocamentos
verticais ao canho ou platina, serve para focalizao grosseira.
Parafuso micromtrico: um dispositivo destinado a dar pequenos e lentos deslocamentos ao
canho ou platina, serve para focalizao fina.

ATIVIDADE 1
Material: palito de dente (ou palito de picol), lmina e lamnula
Metodologia:
Com um palito de dente (ou palito de picol) raspe a mucosa bucal. Coloque o material obtido em
uma lmina contendo uma gota de gua. Cubra com lamnula, examine, esquematize e coloque as
devidas legendas.
Atividade 2: Clulas vivas - clula vegetal
Material: folha de Elodea, leo de imerso, papel filtro, leho de papel, lmina,
lamnula, cebola, tesoura, bisturi ou gilete, azul de metileno.
Metodologia:
- Destacar a folha bem fina e transparente de um ramo e Elodea.
- Colocar uma folha sobre uma lmina.
- Colocar algumas gotas de gua na qual a planta est mergulhada sobre
a folha.
- Cobrir com uma lamnula.
- Levar ao microscpio e observar. Usar objetivas de pequeno aumento
primeiro.
- Desenhar no espao abaixo e colocar legenda adequada.
AULA PRTICA 3 MECANISMO DE TRANSPORTE
Objetivo:
- Observar e comparar o material em diferentes concentraes
- Identificar as concentraes de cada soluo ,
- Esquematizar o material observado
Material:
- Lminas e lamnulas
- Seringa descartvel de 5 ml
- Agulhas descartveis
- Garrote
- Algodo
- Papel toalha
- Depsito com gua para descartar material
- Pipeta de 5 mL
- Tubos de ensaio
- Suporte para tubos de ensaio
- Pipeta Pasteur
- Tetina
- Solues de NaCI em diferentes concentraes
Metodologia
- Coletar 5 mL de sangue com seringa e agulha descartveis.
- Colocar uma gota de sangue em lmina limpa e observar ao microscpio.
- Colocar uma gota de sangue em cada soluo de NaCI e guardar cerca de 5 minutos.
- Com pipeta Pasteur, pingar uma gota de cada soluo em lmina limpa e observar ao
microscpio.
OBS: Deve-se observar uma soluo de cada vez e tomar o cuidado para no trocar as
pipetas de Pasteur.
- Fazer um resumo do observado em cada lmina e comparar os resultados.
- Colocar uma gota de sangue em lmina limpa e observar ao microscpio.
- Colocar uma gota de sangue em cada soluo de NaCI e guardar cerca de 5 minutos.
- Com pipeta Pasteur, pingar uma gota de cada soluo em lmina limpa e observar ao
microscpio.
33S Deve-se observar uma soluo de cada vez e tomar o cuidado para no Tocar as p
Apostila de Biologia Celular
Profa. Dra. Silvia Tamie Matsumoto


sers de Pasteur.
r
az&- es_.no do observado em cada lmina e comparar os resultados.
Apostila de Biologia Celuia-
Profa. Dra. Silvia Tame Matsumoic
26


Atividades: /
1 - Faa um esquema das clulas de sangue em lmina limpa observadas ao microscpio.
2 - Esquematizar as clulas observadas ao microscpio com uma gota da soluo A.
3 - Esquematizar as clulas observadas ao microscpio com uma gota da soluo B.
4 - Esquematizar as clulas observadas ao microscpio com uma gota da soluo C.
Apostila de Biologia Celular
Profa. Dra. Silvia Tamie Matsumoto


AULA PRTICA 6 MITOSE (Meristema de Aflium cepa)
Objetivo:
- Observar a mitose em clula vegetal
- Observar e identificar as fases da diviso celular mittica
- Esquematizar o material observado
Material:
Lamparina
Fsforo
Placa de petri pequena
lcool
Pincel
Raiz de cebola
Pipeta Pasteur
Estilete
Orcena actica ou carmim actico
Lminas e lamnulas Pina de ponta
fina Gilete
Papel de filtro
Reativo de Schiff
HCI1N
Metodologia:
- Lavar as razes fixadas em gua destila, em uma placa de petri.
- Hidrolise das razes com HCI 1N a 60 por 8 minutos.
- Lavar as razes, em uma placa de petri, em gua destilada por 5 minutos.
- Transferir as razes em um vidro escuro com reativo de schiff. Deixar agir por
aproximadamente 40 minutos isolado de luz.
- Lavar as razes, em uma placa de petri, com gua destilada at a retirada total de
corante.
- Cortar a regio meristemtica das razes com auxlio de uma gilete.
- Colocar uma gota de carmim actico 2% sobre o meristema.
- Colocar a lamnula sobre o material macerado.
- Espalhar bem o material (por aquecimento ou mecnico).
- Tirar o excesso de corante com papel filtro
- Observar em microscpio
Apostila de Biologia Celular
Profa. Dra. Silvia Tamie Matsumoto


Prfase
Anfase
Atividade 1 - Esquematizar todas as fases da diviso mittica, observada na objetiva de 40,
identificando suas estruturas.
, 'iW-
Interfase

Metfase




: _____________ -
Telfase

Potrebbero piacerti anche