Profa.

Lvia Caroline
O que calibrao?
Calibrao, de acordo com o INMETRO, o conjunto de
operaes que estabelece, sob condies especificadas, a
relao entre os valores indicados por um instrumento de
medio ou sistemas de medio ou valores representados por
uma medida materializada ou material de referncia, e os
valores correspondentes das grandezas estabelecidas por
padres.
O que calibrao?
Calibrao:
Calibrar significa colocar um instrumento de medio em condies de
utilizao, por meio da comparao dos valores das medies fornecidos
pelo instrumento, com os valores padro, aplicando-se quando necessrio, o
ajuste ou regulagem
um processo que visa verificar se a medida obtida por um instrumento
compatvel com o esperado e se ele est adequado ao uso;
Mtodos de calibrao
Envolve a calibrao da vidraria e de algum instrumento.

Calibrao passo a passo: a resposta ser diretamente
proporcional medida de analito de interesse.

Calibrao com uso de padro: o uso de uma quantidade
conhecida de um analito em relao a uma amostra a ser
analisada.
uma amostra de referncia que contm o analito de interesse.

Calibrao passo a passo
o mtodo mais confivel para calibrar um sistema analtico.
A calibrao feita analisando-se sequencialmente vrias amostras
preparadas ao longo da faixa de concentrao desejada.
Construo de curva de calibrao
Desvantagens:
(i) o processo poder consumir muito tempo;
(ii) as amostras preparadas no representam as amostras reais e,
portanto, podem no apresentar interferncias.
Curva de Calibrao
A forma mais usual de se executar a calibrao de um
instrumento atravs da curva analtica (ou curva de
calibrao),
Consiste em preparar padres com concentraes conhecidas
do analito o mais prximo da realidade da amostra em estudo.
Na maioria das vezes, existir uma relao linear entre
concentrao do analito e sinal de resposta do equipamento.
Curva de Calibrao

Calibrao com uso de padro
Para muitos tipos de anlises, a resposta para o procedimento
analtico deve ser avaliado para quantidades conhecidas de
constituintes (chamados padres), de forma que a resposta
para uma quantidade desconhecida possa ser interpretada.

Mtodos de calibrao
Amostra padro uma amostra de referncia que contm o analito de
interesse.
Soluo padro o analito purificado, ou seja, a substncia que ser testada,
dissolvida em gua ou lcool Ele geralmente acompanha o kit que o
laboratrio compra. As propriedades fsico-qumicas so muito diferentes da
amostra humana.
Soro calibrador - Ao contrrio da soluo padro, que tem as propriedades
fsico-qumicas bem diferentes do soro/plasma humano, o soro calibrador
provm de materiais biolgicos estabilizados com conservantes.
Utilizado quando for preciso indicar o efeito de interferncias.

Mtodos de calibrao
Branco Os brancos indicam a interferncia de outras
espcies na amostra e os traos de analito encontrados nos
reagentes usados na preservao, preparao e anlise.

Permite detectar se analitos provenientes de amostras previamente
analisadas esto contaminando as novas anlises, por estarem
aderidos aos recipientes ou aos instrumentos.
Mtodos de Calibrao
Exemplo
Vamos supor que voc est fazendo a dosagem de uma glicemia de jejum em
aparelho manual (espectrofotmetro).
A soluo padro que veio com o kit, nesse caso, j est dissolvida em gua
contento 100 mg/dL de glicose.
Voc ter que pipetar em trs tubos: um para o branco (B), um para o teste (T) e um
para o padro (P).

Mtodos de calibrao
Ento, faz-se a incubao e leitura no aparelho, anotando os resultados em um
papel. Agora precisamos calcular o resultado.
A frmula da glicose, para esse kit, a seguinte:


O nmero 100 no veio do alm. Ele o valor da concentrao da soluo padro.
Calibrao de equipamentos volumtricos
A vidraria volumtrica calibrada medindo-se a massa de um
lquido que pode preencher o equipamento volumtrico
(geralmente gua destilada). O lquido usado deve ter
densidade conhecida na temperatura ambiente. Seu volume
corrigido resultado da diviso da massa de gua obtida por
sua densidade na referida temperatura.
d =m/V
Conduta geral nos procedimentos de
calibrao
Antes da calibrao:
Toda a vidraria volumtrica deve estar rigorosamente limpa;
Buretas e pipetas no precisam estar secas;
Os bales volumtricos devem ser drenados e secos
temperatura ambiente;
A gua usada para a calibrao em equilbrio trmico com o
ambiente;
Frascos comuns de pesagem ou mesmo
pequenos erlenmeyers podem ser
usados como receptores para o lquido
de calibrao.
Conduta geral nos procedimentos de
calibrao
Calibrao de uma pipeta volumtrica
1 passo: determinar a massa do recipiente vazio at a casa de
miligramas (o recipiente pode ser um erlenmeyer);
2 passo: transfira uma poro de gua (equilibrada com a
temperatura ambiente) para o frasco receptor (erlenmeyer)
com a pipeta;
3 passo: pese novamente com preciso em miligramas;
4 passo: calcule a massa de gua por diferena entre duas
massas obtidas
Calibrao de uma pipeta volumtrica
5 passo: determinar o volume dispensado da pipeta usando
sua densidade em funo da temperatura em que se encontra.
Repita a calibrao vrias vezes. Calcule o volume mdio.
Calibrao de uma balo volumtrico
Procedimentos recomendados:
1. Pesar o balo seco at a preciso de miligrama;
2. Preench-lo at a sua marca de calibrao com gua
equilibrada termicamente com o ambiente e repese-o.
3. Calcular novamente o volume do balo;
4. O ideal no ter contato manual direto com o balo durante
as pesagens para que a gordura das mos no interfira.

Exerccio
1) Um balo volumtrico de 250 mL apresentou os seguintes resultados de calibrao.
Calcule o volume real obtido na temperatura de 24

C, e avalie a qualidade desta

vidraria

Medida Balo vazio
(g)
Balo +
gua (g)
T (

C) Densidade
da gua
Volume
(mL)
1 110,56 359,98 24 1g/mL
2 110,59 359,97 24 1g/mL
3 110,53 359,98 24 1g/mL
Exerccio
2) Uma pipeta volumtrica de 50mL apresentou os seguintes resultados de
calibrao. Calcule o volume real obtido na temperatura de 25C, e
avalie a qualidade desta vidraria:

Medida Recipiente
vazio (g)
Recipiente +
gua (g)
T (

C) Densidade
da gua
Volume
(mL)
1 33,2136 83,0033 25 1g/mL
2 33,2186 83,0178 25 1g/mL
3 33,2153 83,0077 25 1g/mL
3) O certificado de calibrao de um balo volumtrico de 1,0 l
apresentou os seguintes resultados:
Volume = 999,98 ml Incerteza = 0,05 ml
Sabendo-se que a especificao para o balo de 1,0 l tem uma
tolerncia mxima de 0,30 ml, qual seria a sua avaliao a
respeito desta vidraria? Explique sua resposta.
Exerccio
4) O certificado de calibrao de uma pipeta volumtrica de 25,0
ml apresentou os seguintes resultados:
Volume = 25,03 ml Incerteza = 0,02 ml
Sabendo-se que a especificao para pipeta volumtrica de 25,0
ml tem uma tolerncia mxima de 0,03 ml, qual seria a sua
avaliao a respeito desta vidraria? Explique sua resposta.
Exerccio
Exerccio
5) Diferencie calibrao passo a passo de calibrao com o uso de
padro.

6) Diferencie soluo padro de soro calibrador.

7) Qual a funo do branco na calibrao?