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GIULLIANO AIRES ANDERLINI

ASPECTOS EPIDEMIOLGICOS DAS INFECES POR


Toxoplasma gondii, Neospora caninum E Chlamydophila abortus EM
CAPRINOS NO ESTADO DE ALAGOAS









RECIFE
2009
UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DE PERNAMBUCO
PR-REITORIA DE PESQUISA E PS-GRADUAO
PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM CINCIA VETERINRIA





GIULLIANO AIRES ANDERLINI


ASPECTOS EPIDEMIOLGICOS DAS INFECES POR
Toxoplasma gondii, Neospora caninum E Chlamydophila abortus EM
CAPRINOS NO ESTADO DE ALAGOAS

Tese apresentada ao Programa de Ps-
Graduao em Cincia Veterinria do
Departamento de Medicina Veterinria da
Universidade Federal Rural de
Pernambuco, como requisito parcial para
obteno do Grau de Doutor em Cincia
Veterinria.
Orientador:
Prof. Dr. Rinaldo Aparecido Mota




RECIFE
2009








FICHA CATALOGRFICA







CDD 636. 308 944 4

CDD 636 308 xxx

1. Medicina preventiva
2. Doenas parasitrias
3. Fatores de risco
4. Diagnstico
5. Doenas bacterianas
6. Caprinocultura
7. Alagoas (BR)
I. Mota, Rinaldo Aparecido
II. Ttulo


Pxxx Anderlini, Giulliano Aires
Aspectos epidemiolgicos das infeces por Toxoplasma
gondii, Neospora caninum eChlamydophila abortus em caprinos
no estado de alagoas / Giulliano Aires Anderlini.--2009.
Orientador: Rinaldo Aparecido Mota
Tese (Doutorado Em Cincia Veterinria) Universidade
Federal Rural de Pernambuco. Departamento de Medicina
veterinria.
Inclui anexo, apndice e bibliografia.
UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DE PERNAMBUCO
PR-REITORIA DE PESQUISA E PS-GRADUAO
PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM CINCIA VETERINRIA

ASPECTOS EPIDEMIOLGICOS DAS INFECES POR
Toxoplasma gondii, Neospora caninum E Chlamydophila abortus EM
CAPRINOS NO ESTADO DE ALAGOAS

Tese de Doutorado elaborada por
GIULLIANO AIRES ANDERLINI
Aprovada em ........../........../..........

BANCA EXAMINADORA


Prof. Dr. Rinaldo Aparecido Mota
Orientador Departamento de Medicina Veterinria


Dra. Rosa Maria Piatti
Instituto Biolgico de So Paulo


Prof. Dr. Daniel Friguglietti Brandespim
Unidade Acadmica de Garanhuns UFRPE


Prof. Dr. J os Wilton Pinheiro J nior
Unidade Acadmica de Garanhuns UFRPE


Prof. Dr. Leucio Cmara Alves
Departamento de Medicina Veterinria da UFRPE
DEDICATRIA
























s grandes mulheres da minha vida, verdadeiras bnos divinas que iluminam meus
dias e me proporcionam razo e alegria de viver uma maravilhosa vida em famlia:
minha esposa Giovana e minha filha Giullia.






AGRADECIMENTOS

A Deus, Senhor de tudo, que me deu a vida, uma famlia linda e grandes
amigos. Deus, verdadeiramente, amor!
A um grande ser humano, meu orientador, professor Rinaldo Aparecido Mota:
obrigado pela oportunidade, pela confiana e pelo profissionalismo. Eternamente grato!
minha esposa, Giovana, e minha filha, Giullia: vocs foram fundamentais
nesta caminhada. Obrigado por tudo e perdo pelos momentos de sacrifcio.
Aos meus pais, Dulio e Laura: eu amo vocs.
Ao meu irmo, Giovanni, e sua esposa, Ana Igns, pelos momentos
agradveis que passamos juntos sempre que eu e minha famlia estivemos em Recife.
minha irm, Graziella e sua famlia: Emerson (esposo), Pablo e Diego
(filhos) por sempre me apoiarem e alegrarem os momentos em famlia em Recife.
A todos os Aires, todos os Anderlini e os respectivos agregados: um homem
s d valor e sabe o que vida em famlia quando ele foi criado em uma! E graas a
Deus eu fui.
Ao amigo Rmulo Menna, companheiro de Mestrado e agora de Doutorado: a
luta foi grande e os sacrifcios tambm, mas sempre tivemos a certeza de que no fim
tudo daria certo! E deu mesmo!
Aos amigos e conselheiros Roberto Rmulo Ferreira da Silva e Silvio Romero
de Oliveira Abreu: que sorte a minha em t-los no ambiente de trabalho (CESMAC)
como parceiros e mentores.
Aos professores e companheiros de CESMAC, Cludia Alessandra Alves de
Oliveira (meu brao direito, esquerdo, p, mo...), Isaac Manoel Barros Albuquerque
(grande companheiro) e Alice Cristina de Oliveira Azevedo em nome dos quais estendo
minha gratido a todos os demais professores e funcionrios desta casa pelo apoio e
compreenso nos momentos crticos em que precisei me ausentar.
Ao amigo J os Wilton Pinheiro J nior: foi uma Providncia Divina nossos
caminhos se cruzarem no Doutorado. Sua necessidade foi um presente de Deus para
modificao total de minha/nossa Tese e no final das contas foi o melhor e mais vivel
caminho para mim! Em muitos momentos desta jornada voc representou para mim a
pessoa certa, na hora certa e no lugar certo! Deus o abenoe sempre.
Ao CESMAC, na pessoa do Diretor da Faculdade de Cincias Biolgicas e da
Sade, Dr. Mauro Guilherme de Barros Quirino Martins, pelo apoio nos momentos em
que precisei de liberao e confiana nos momentos de minha ausncia.
Dr Rosa Piatti pelos ensinamentos e processamento de amostras no Instituto
Biolgico de So Paulo: obrigado pela oportunidade, pois a experincia no Instituto foi
enriquecedora e mpar.
Ao amigo Eduardo Bento Faria por todo o apoio no Laboratrio de Doenas
Infecto-contagiosas da UFRPE que foi decisivo e providencial por ter sido logo no
incio das leituras das lminas.
Aos estagirios Pedro Paulo e Orestes e ao Residente J os Andreey (hoje
companheiro de trabalho no CESMAC) pela ajuda na mo-de-obra, pelos momentos
descontrados e pelas boas conversas que so to importantes para um trabalho mais
feliz, leve e produtivo.
rika Samico, ex-aluna da primeira turma que ministrei aula na UFRPE
como professor substituto de Anatomia e agora j mestranda, o que me um orgulho, e
que literalmente cansou sua vista junto a mim na leitura das lminas.
Aos alunos do CESMAC que participaram com entusiasmo contagiante das
aventuras de coleta: Aline, Annelise, Diogo Lobo, Leonardo, Linduarte, Nadine,
Rubo, Denival, Wiston, Luiz baiano e J oo Batista.
Aos amigos Anderson Leony o poeta, Ablio Loureno (valeu a fora com os
abstracts), Augusto Durant, Anderson Kleber fio, Tony Edgley e Flvio nego:
vocs so irmos de corao que a vida me deu de presente.
Aos professores Leonildo e Andra Alice pelo prestimoso apoio e sugestes no
momento da qualificao da Tese.
A todos os que fazem o Laboratrio de Reproduo Animal - UFRPE, aos
quais agradeo na pessoa da professora Madalena, pela disponibilizao do microscpio
de imunofluorescncia.
E, finalmente, a todos aqueles que pararam um dia para me ouvir falar dos
meus planos e sonhos de qualquer instncia.































Buscai em primeiro lugar o Reino de Deus e a sua justia e todas as coisas vos
sero dadas de acrscimo. No vos preocupeis, pois, com o dia de amanh: o dia de
amanh ter suas preocupaes prprias. A cada dia basta o seu cuidado.
(Evangelho de Mateus 7; 33s)
RESUMO: Objetivou-se com este estudo determinar a prevalncia e identificar os
fatores de risco associados s infeces por Toxoplasma gondii, Neospora caninum e
Chlamydophila abortus em caprinos do Estado de Alagoas. A pesquisa foi realizada em
10 municpios, sendo analisadas 24 propriedades de produo de caprinos com aptido
mista situadas nas trs Mesorregies do Estado de Alagoas. Foram coletadas amostras
sanguneas de 454 animais para pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e anti-
Neospora caninum atravs da prova sorolgica de Imunofluorescncia Indireta. Para
pesquisa de anticorpos anti-Chlamydophila abortus foram utilizadas amostras
sanguneas de 255 matrizes caprinas sendo utilizada a microtcnica da Reao da
Fixao do Complemento. Para o estudo dos fatores de risco foram aplicados
questionrios com questes referentes ao sistema de produo e manejos nutricional,
reprodutivo e sanitrio. A prevalncia geral de anticorpos anti-Toxoplasma gondii foi de
39% com 95,8% das propriedades apresentando animais positivos. Foi observada
associao significativa para as variveis: Mesorregio (OR =0,23; I.C. 95% =0,09
0,57), idade (OR =0,36; I.C. 95% =0,20 0,64), sistema de criao semi-intensivo
(OR =8,70; I.C. 95% =1,87 40,43), acesso dos gatos gua fornecida aos animais
(OR =3,38; I.C. 95% =1,89 6,02) e gatos se alimentando de restos placentrios (OR
=2,73; I.C. 95% =1,38 5,40). A prevalncia geral de anticorpos anti-Neospora
caninum foi de 5,3% com 62,5% das propriedades apresentando animais positivos no
sendo observada associao significativa para os fatores analisados. Com relao a
anticorpos anti- Clamydophila abortus observou-se prevalncia geral de 1,17%.
Conclui-se que o rebanho caprino do Estado de Alagoas est exposto s infeces por T.
gondii, N. caninum eC. abortus com focos da infeco nas diferentes Mesorregies do
Estado. necessrio intensificar e aprofundar os estudos epidemiolgicos alm de
implementar programas de orientao aos produtores sobre medidas sanitrias e de
manejo dos rebanhos caprinos objetivando reduzir a prevalncia de infeco por estes
agentes patognicos.

ABSTRACT: The objective of this paper was to determine the prevalence and to
identify the risks concernig to Toxoplasma gondii, Neospora caninum and
Chlamidophyla abortus goats infections in the State of Alagoas. The research took place
on 24 farms of goat breeding from 10 municipalities around the three different Alagoas
Mesoregions. A total of 454 goat sera sample were examined for anti-Toxoplasma
gondii and anti-Neospora caninum antibodies studies through out indirect
immunofluorescence antibody test (IFIAT). To detect anti-Chlamidophyla abortus
antibodies 255 goat serum were tested by micro method of complement fixation. The
farms were analyzed by questionnaires considering their production system, nutritional,
reproductive and sanitary management in order to evaluate the risks of toxoplasmosis in
goats. The prevalence of anti-Toxoplasma gondii antibodies was 39% with 95,8% of
farms presenting seropositive animals. Significant association was observed to
mesoregion (OR =0,23; I.C. 95% =0,09 0,57), age (OR =0,36; I.C. 95% =0,20
0,64), semi-intensive herd management (OR =8,70; I.C. 95% =1,87 40,43), cats
accessing to water offered to animals (OR =3,38; I.C. 95% =1,89 6,02) and cats
eating placental remnants (OR =2,73; I.C. 95% =1,38 5,40). The prevalence of anti-
Neospora caninum antibodies was 5,3% with 62,5% of farms presenting seropositive
animals with no significant association observed to variables searched as risk factors in
this study. Concerning to anti-Chlamidophyla abortus antibodies were observed general
prevalence of 1,17%. We conclude that goat herd in the State of Alagoas is exposed to
infections by T. gondii, N. caninum and C. abortus with events in different State
Mesoregions. It is necessary to intensify and go deep on the epidemiological studies in
addition to implementing orientation programs for farmers on sanitary care and goats
management in order to reduce the prevalence of infection by those pathogens.

LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS
CE Corpo elementar infeccioso
CR Corpo reticulado no-infeccioso
DNA cido Desoxirribonuclico
ELISA Imunoadsoro Enzimtica
HA Hemaglutinao Direta
ha Hectare
HD Hospedeiro definitivo
HE Hematoxilina-Eosina
HI Hospedeiro intermedirio
IBGE Instituto Brasileiro de Geografia e Estatstica
IC Intervalo de confiana
IFN Interferon
IHA Hemaglutinao Indireta
OIE World Organisation for Animal Health
OR Odds ratio
PCR Reao em Cadeia de Polimerase
RFC Reao de Fixao do Complemento
RIFI Reao de Imunofluorescncia Indireta
SAS Statitical Analysis System
TE Transferncia de embries
TNF Fator de necrose tumoral






LISTA DE ILUSTRAES

Reviso de Literatura
Figura 1 - Esquema de reproduo de T. gondii por endodiogenia 13
Figura 2 - Desenho esquemtico de bradizoto e taquizoto de T. gondii 14
Figura 3 - Ciclo de vida de T. gondii 16
Figura 4 - Ciclo de vida de N. caninum 26
Figura 5 - Ciclo de vida da famlia Chlamydiaceae 34


Artigos Cientficos
Artigo 1
Figura 1 - Distribuio dos municpios estudados nas trs Mesorregies de
Alagoas
71
















LISTA DE TABELAS

Artigos Cientficos

Artigo 1
Tabela 1 Fatores de risco de acordo com as caractersticas gerais da
propriedade e do rebanho associados ou no infeco por Toxoplasma gondii
em caprinos no Estado de Alagoas, 2008
74
Tabela 2 Fatores de risco de acordo com o manejo alimentar, associados ou
no infeco por Toxoplasma gondii em caprinos no Estado de Alagoas, 2008
75
Tabela 3 Fatores de risco de acordo com o manejo reprodutivo, associados ou
no infeco por Toxoplasma gondii em caprinos no Estado de Alagoas, 2008
76
Tabela 4 Fatores de risco de acordo com o hospedeiro definitivo, associados
ou no infeco por Toxoplasma gondii em caprinos no Estado de Alagoas,
2008
77
Tabela 5 Anlise multivariada para os fatores de risco associados ou no
infeco por Toxoplasma gondii em caprinos no Estado de Alagoas, 2008
78

Artigo 2
Tabela I Anlise univariada dos fatores de risco associados ou no
infeco por Neospora caninum de acordo com as caractersticas gerais dos
rebanhos e das propriedades caprinas no Estado de Alagoas, 2008
108
Tabela II Anlise univariada dos fatores de risco associados ou no
infeco por Neospora caninum de acordo com o manejo alimentar de
caprinos no Estado de Alagoas, 2008
109
Tabela III Anlise univariada dos fatores de risco associados ou no
infeco por Neospora caninum de acordo com o manejo reprodutivo de
caprinos no Estado de Alagoas, 2008
110
Tabela IV Anlise univariada dos fatores de risco associados ou no
infeco por Neospora caninum de acordo com o hospedeiro definitivo em
propriedades caprinas no Estado de Alagoas, 2008
111
APNDICE

Questionrio investigativo 121





























ANEXOS

Normas das revistas (Instrues aos autores)
Artigo 1 - Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical 126
Artigo 2 - Memrias do Instituto Oswaldo Cruz 130
Artigo 3 - Arquivos Brasileiros de Medicina Veterinria e Zootecnia 136





















SUMRIO

INTRODUO 9
OBJETIVOS 11
Geral 11
Especficos 11
REVISO DE LITERATURA 12
Toxoplasmose 12
Neosporose 24
Clamidofilose 33
Referncias 42
ARTIGO 1 - Soroprevalncia e fatores de risco associados infeco por
Toxoplasma gondii em caprinos no Estado de Alagoas
66
Introduo 69
Material e mtodos 70
Resultados 72
Discusso 79
Concluso 83
Referncias 84
ARTIGO 2 - Prevalncia e fatores de risco associados infeco por
Neospora caninum em caprinos no Estado de Alagoas
90
Introduo 93
Material e mtodos 94
Resultados 96
Discusso 97
Concluso 101
Referncias 102
ARTIGO 3 - Anticorpos anti- Chlamydophila abortus em caprinos no
Estado de Alagoas
112
Referncias 118
CONSIDERAES FINAIS 120

INTRODUO
H muito que se ouve falar que a caprinocultura o futuro do Nordeste
brasileiro. Talvez na esperana de que um dia o sertanejo ou o pequeno produtor rural
nordestino se desvencilhe dos grilhes da produo de subsistncia para suprir s
necessidades familiares e passe a adotar a tecnificao nas propriedades visando
produtividade, mercado e lucro. A rusticidade dos animais aliada s melhorias genticas
e condies climticas e ambientais propcias do Nordeste so os pilares que mantm
acesa a chama de um futuro promissor para a caprinocultura.
Embora tenha registrado, por alguns anos, crescimento progressivo chegando a
quase 10,442 milhes de cabeas no ano de 2006, o rebanho caprino nacional sofreu
uma baixa significativa no ano de 2007 para aproximadamente 9,450 milhes de
animais com 91,4% deste efetivo no Nordeste (IBGE, 2007). Contudo, mesmo com o
registro de queda do nmero total de caprinos no pas, este nmero pode ser
considerado expressivo e indicativo de que a atividade promissora e vivel, sendo
dotada de grande potecial econmico e produtivo.
A cadeia produtiva da caprinocultura no Brasil ainda frgil e embrionria,
necessitando que ocorram mudanas culturais importantes no pas para torn-la
competitiva e at consolidada no cenrio nacional para ento, atingir o mercado exterior
com maior solidez (SOUZA, 2007).
Grande parte dos rebanhos caprinos e ovinos do Nordeste explorada em
sistema de manejo extensivo em propriedades com menos de 30 hectares, com prticas
inadequadas de manejo alimentar e sanitrio o que culmina com baixa produtividade
(CONAB, 2006) e contribui para manuteno de altos nveis de mortalidade
principalmente em animais jovens comprometendo o desenvolvimento da
ovinocaprinocultura (PINHEIRO et al., 2000).
Os distrbios reprodutivos, notadamente o aborto, tm sido relatados e
apontados por alguns pesquisadores no Nordeste como a principal queixa clnica depois
da helmintose gastrintestinal (PINHEIRO et al., 2000). Embora se acredite que grande
parte dos casos de aborto nos rebanhos caprinos do semi-rido nordestino seja de ordem
nutricional (SILVA; SILVA, 1983) diversos agentes infecciosos podem estar
envolvidos como causa de aborto nas propriedades e muitas vezes no so
diagnosticados, gerando grandes prejuzos s criaes e limitando o seu
desenvolvimento.
O fato de no haverem estudos voltados para a investigao de aborto infeccioso
no rebanho caprino no Estado de Alagoas torna de extrema relevncia que estudos
epidemimolgicos envolvendo este tema sejam realizados. Da mesma maneira, o estudo
dos fatores de risco associados ocorrncia de doenas devem ser incentivados
tornando possvel o diagnstico da situao e a implementao de medidas de controle e
profilaxia das infeces.

OBJETIVOS

GERAL
Realizar um estudo soroepidemiolgico para as infeces por Toxoplasma
gondii, Neospora caninum e Chlamydophila abortus em caprinos no Estado de Alagoas.

ESPECFICOS
Determinar a prevalncia da infeco por Toxoplasma gondii e identificar os
fatores de risco envolvidos nesta infeco em caprinos;
Determinar a prevalncia da infeco por Neospora caninum e identificar os
fatores de risco envolvidos nesta infeco em caprinos;
Determinar a ocorrncia da infeco por Chlamydophila abortus e identificar
os fatores de risco envolvidos nesta infeco em caprinos.














REVISO DE LITERATURA
Toxoplasmose
A toxoplasmose uma doena parasitria causada por Toxoplasma gondii, um
protozorio parasita intracelular obrigatrio que pertence ao filo Apicomplexa, famlia
Sarcocystidae. Possui uma nica espcie vlida do gnero, embora pesquisas tenham
evidenciado, atravs de tcnicas de biologia molecular, a existncia de trs gentipos
diferentes, fomentando grande discusso sobre a existncia ou no de outras espcies,
no havendo, contudo, diferena estrutural considerada aprecivel mesmo com a
diferena genotpica entre as estirpes (TIBAYRENC, 1993; HOWE; SIBLEY, 1995;
DUBEY et al., 1998; J OHNSON, 1999).
Pesquisadores e especialistas em toxoplasmose reconhecem como primeira
descrio de T. gondii dois estudos distintos, ambos realizados em 1908. Um
desenvolvido na Tunsia pelos pesquisadores franceses Charles J ules Henry Nicolle e
Louis Herbert Manceaux, enquanto que o outro foi realizado no Brasil pelo italiano
Alfonso Splendore. Inicialmente, por estar associado presena de moncitos,
apresentar caractersticas morfolgicas semelhantes Leishmania e pelo fato de os
estudos terem sido realizados com um roedor nativo da frica, o gundi (Ctenodactylus
gundi), o parasita foi denominado Leishmania gondii, porm em 1909, recebeu a
nomenclatura que utilizada atualmente (MORRISSETTE; AJ IOKA, 2009).
Considerado o coccdeo mais estudado no mundo com mais de 15.000 artigos de
pesquisas originais e ultrapassando 500 revises publicadas, T. gondii um dos agentes
mais comuns em infeces parasitrias dos animais homeotrmicos, incluindo o
homem, onde um tero da populao humana mundial pode estar infectada por este
agente (TENTER et al., 2000).
Morfologicamente T. gondii apresenta trs estgios infecciosos: I) taquizotos,
que podem ser encontrados individualmente ou agrupados, II) bradizotos, que so
encontrados englobados nos cistos teciduais, e III) esporozotos que esto contidos nos
oocistos (DUBEY et al., 1998).
Os taquizotos apresentam, por vezes, formato de lua crescente com extremidade
anterior em forma de cone e posterior arredondada, medindo cerca de 2 x 6 m.
Penetram de forma ativa pelo plasmalema das clulas hospedeiras ou por fagocitose
para ento assumirem forma ovide, envolvidos por um vacolo parasitforo
desprovido de envoltrio (DUBEY et al., 1998).
Multiplicam-se rpida e repetidamente por uma forma especializada de
reproduo na qual a prognie representada por dois descendentes que se formam no
interior do organismo me como se estivessem parasitando-o, a chamada endodiogenia
(Figura 1), no interior das clulas parasitadas que posteriormente se rompero liberando
mais taquizotos para parasitarem outras clulas. Em algumas cepas a multiplicao
ocorre por fisso binria, o que raro (DUBEY et al., 1998).

Figura 1: Esquema de reproduo de T. gondii por endodiogenia. A - trofozoto; B inicio com formao
de dois conoides filhos e o ncleo com aspecto um U; C- completa diviso nuclear e individualizao dos
trofozotos filhos, pelo crescimento da membrana em direo posterior; C e D separao dos dois novos
trofozotos, abandonando os restos da clula me que ir degenerar em seguida.
Fonte: Rey (2001).

Assim como os taquizotos, os bradizotos apresentam formato de lua crescente,
porm so mais delgados e alongados, medindo aproximadamente 7 x 1,5 m (Figura
2). So encontrados agrupados formando um cisto tecidual com parede fina (com menos
de 0,5 m) e elstica, que pode conter desde dois a centenas de parasitos. Tambm se
multiplicam por endodiogenia, entretanto de forma mais lenta que os taquizotos
(DUBEY, 1988a; DUBEY et al., 1998).
Os cistos formados so mais comumente encontrados no tecido nervoso e
muscular cardaco e esqueltico, embora j tenham sido identificados em rgos
viscerais como fgado, pulmes e rins. Os cistos teciduais podem permanecer intactos
por toda a vida do animal sem causar doena ou resposta inflamatria (DUBEY, 1988b;
DUBEY et al., 1998).
Figura 2: Desenho esquemtico do bradizoto (direita) e taquizoto (esquerda
so representaes de micrografia eletrnica.
Fonte: Dubey et al. (1998).

Os oocistos so encontrados apenas nos hospedeiros definitivos (os feldeos) e
possuem formato esferide, medindo 10 x 12 m de dimetro antes da esporulao.
Quando esporulados (forma de resistncia no ambiente), os oocistos so elipsides e
possuem 11 x 13 m de dimetro contendo dois esporocistos de 6 x 8 m cada. Um
esporocisto contm quatro esporozotos cada um com aproximadamente 2 m x 6
(DUBEY et al., 1998).
O ciclo biolgico do T. gondii
ocorre nos hospedeiros definitivos (HD), e uma assexuada que ocorre tanto nos HD
quanto nos intermedirios (HI). Os HD so os animais da famlia
o gato domstico, enquanto os HI podem ser qualquer animal homeotrmico, incluindo
a maioria dos animais de produo e o prprio homem (OIE, 2008).
Ao ingerir qualquer das trs formas
infectados desenvolvero e eliminaro oocistos. Porm, menos de 30% dos gatos
liberam oocistos nas fezes aps ingesto de taquizotos ou oocistos, enquanto que quase
todos liberam oocistos quando infectados por cistos te
(DUBEY, 1996a).
uemtico do bradizoto (direita) e taquizoto (esquerda) de T. gondii. Os desenhos
so representaes de micrografia eletrnica.
Os oocistos so encontrados apenas nos hospedeiros definitivos (os feldeos) e
formato esferide, medindo 10 x 12 m de dimetro antes da esporulao.
Quando esporulados (forma de resistncia no ambiente), os oocistos so elipsides e
possuem 11 x 13 m de dimetro contendo dois esporocistos de 6 x 8 m cada. Um
atro esporozotos cada um com aproximadamente 2 m x 6
T. gondii envolve duas fases distintas, uma sexuada que s
ocorre nos hospedeiros definitivos (HD), e uma assexuada que ocorre tanto nos HD
termedirios (HI). Os HD so os animais da famlia Felidae, notadamente
o gato domstico, enquanto os HI podem ser qualquer animal homeotrmico, incluindo
a maioria dos animais de produo e o prprio homem (OIE, 2008).
Ao ingerir qualquer das trs formas morfolgicas do T. gondii, os gatos
infectados desenvolvero e eliminaro oocistos. Porm, menos de 30% dos gatos
liberam oocistos nas fezes aps ingesto de taquizotos ou oocistos, enquanto que quase
todos liberam oocistos quando infectados por cistos teciduais contendo bradizotos

. Os desenhos
Os oocistos so encontrados apenas nos hospedeiros definitivos (os feldeos) e
formato esferide, medindo 10 x 12 m de dimetro antes da esporulao.
Quando esporulados (forma de resistncia no ambiente), os oocistos so elipsides e
possuem 11 x 13 m de dimetro contendo dois esporocistos de 6 x 8 m cada. Um
atro esporozotos cada um com aproximadamente 2 m x 6-8 m
envolve duas fases distintas, uma sexuada que s
ocorre nos hospedeiros definitivos (HD), e uma assexuada que ocorre tanto nos HD
, notadamente
o gato domstico, enquanto os HI podem ser qualquer animal homeotrmico, incluindo
os gatos
infectados desenvolvero e eliminaro oocistos. Porm, menos de 30% dos gatos
liberam oocistos nas fezes aps ingesto de taquizotos ou oocistos, enquanto que quase
ciduais contendo bradizotos
Aps a ingesto pelo gato, a parede do cisto dissolvida por enzimas
proteolticas no estmago e intestino e os bradizotos so liberados. Alguns penetram na
lmina prpria do intestino e se multiplicam como taquizotos sendo posteriormente
disseminados por todo corpo via sangue ou linfa quando alcanam diversos rgos e
formam os cistos teciduais repletos de bradizotos (DUBEY, 2004).
Os outros bradizotos liberados dos cistos teciduais penetram nas clulas do
epitlio intestinal e iniciam o desenvolvimento de inmeros esquizontes (assexuais), que
liberam os merozotos que formam os gametas masculino ou feminino. Aps o gameta
masculino fertilizar o gameta feminino inicia-se a formao do oocisto. Quando os
oocistos amadurecem, rompem o epitlio intestinal e so liberados no lmen para
finalmente serem eliminados no ambiente pela via fecal (DUBEY, 2004).
Na fase de eliminao fecal, o gato contamina o ambiente com cerca de 100.000
oocistos por grama de fezes. Os oocistos so excretados por apenas uma ou duas
semanas, mas podem permanecer viveis por at dois anos quando em condies de
temperatura e umidade favorveis, devido sua resistncia aos agentes fsicos e
qumicos. Ainda no solo, os oocistos podem ser carreados mecanicamente por moscas,
baratas, besouros e minhocas, alm de ficarem viveis em frutas e vegetais por longos
perodos (FREYRE et al., 1993; KNIEL et al., 2002).
Nas fezes frescas, os oocistos encontram-se na forma no-esporulada e no so
infectantes. O perodo de esporulao e conseqente mudana para o estgio infectante
ocorre no ambiente cerca de 1-5 dias aps liberao nas fezes e depende das condies
de temperatura e umidade. Os gatos, em geral, no voltam a excretar oocistos quando
re-infectados, pois desenvolvem imunidade, devido primeira infeco (FREYRE et al.,
1993; DUBEY et al., 1998).
A infeco por T. gondii ocorre principalmente por trs vias sendo elas, ingesto
oral de oocistos infectantes no ambiente (gua e alimentos), ingesto oral de cistos
teciduais nas vsceras e carnes dos HI e transmisso transplacentria de taquizotos
(Figura 3) onde as duas primeiras so consideradas transmisso horizontal e a ltima
vertical. Taquizotos foram encontrados, ainda, em fluidos corpreos como sangue,
urina, smen e leite o que amplia as fontes de infeco pelo agente (DUBEY;
SHARMA, 1980; J ACKSON; HUTCHISON, 1989; DUBEY, 1991).
Para os animais domsticos, a ingesto de oocistos das fezes de gatos uma
importante e fundamental via de infeco. Os gatos so considerados os principais
mantenedores do ciclo da toxoplasmose considerando-se o fato de ser rara ou
inexistente a infeco por T. gondii em ambientes onde no existam gatos (DUBEY et
al., 1997).

Figura 3: Ciclo de vida de T. gondii.
Fonte: Dubey et al. (1998).

A toxoplasmose uma importante zoonose. Em humanos, normalmente, a
infeco por T. gondii crnica e assintomtica, podendo ser severa em indivduos
imunocomprometidos ou recm-nascidos (TENTER et al., 2000).
Nos casos de infeco congnita, quando o feto adquire a infeco durante a
gestao, a enfermidade pode causar morte fetal, cegueira e retardo mental. A infeco
ps-natal nos humanos pode ser localizada ou generalizada sendo a linfadenite o
sintoma mais frequentemente observado, podendo estar associado febre, fadiga, dor
muscular, dor de garganta e cefalia. A principal via de infeco para humanos atravs
da ingesto de oocistos esporulados contaminantes de alimentos (carne crua ou mal
cozida e leite no pasteurizado) e gua (TENTER et al., 2000; DUBEY, 2004).
Diversos estudos de soroprevalncia de anticorpos anti-T. gondii em caprinos
foram desenvolvidos em todo mundo. Na Espanha, ao avaliar soros de 1052 fmeas
pelo teste de Imunoadsoro Enzimtica (ELISA), pesquisadores encontraram 63,3% de
positividade (RODRGUEZ-PONCE et al., 1995).
Em Ghana, soros de 526 caprinos foram testados pelo mtodo ELISA sendo
encontrada positividade de 26,8% para anticorpos anti-T. gondii associada presena de
gatos na maioria das propriedades estudadas. Nas fmeas (30,4%), a soropositividade
foi significativamente maior que nos machos (17%) para aqueles animais que habitavam
em zona florestal, caracteristicamente quente e mida e totalmente favorvel
persistncia dos oocistos no ambiente. Outro dado significativo (p<0,01) foi que 46,8%
dos animais positivos tinham idade acima dos 24 meses (VAN DER PUIJ E et al., 2000).
Simultaneamente, em Uganda, foram testados 784 soros de caprinos de 23
rebanhos pelo teste ELISA. A positividade encontrada foi de 31% nos animais e 100%
das propriedades apresentaram pelo menos um animal soropositivo. Embora neste
estudo tambm tenha sido observada maior prevalncia em fmeas que em machos, este
dado no foi considerado estatisticamente significativo, assim como a positividade em
relao idade dos animais. Propriedades localizadas em reas periurbanas tiveram
maior soroprevalncia (p<0,01; OR=6,84) em relao s propriedades de zona rural, o
que foi relacionado alta densidade populacional de gatos e roedores em ambiente
urbano, ocasionando maior disponibilidade tanto de hospedeiros definitivos quanto de
intermedirios do parasito (BISSON et al., 2000).
Na Itlia, no perodo de 1999-2002, um estudo com soros de 2445 caprinos
provenientes de 964 propriedades leiteiras demonstrou que 12,3% e 5,6% das amostras
foram positivas para IgG e IgM, respectivamente. No mesmo estudo foi realizada
extrao de DNA parasitrio pelo mtodo da reao em Cadeia de Polimerase (PCR)
sendo encontrada positividade em 8,2% das amostras de crebro e de 50% para as de
placenta (MASALA et al., 2003).
No primeiro relato de soroprevalncia na Tailndia foram utilizados 631 soros
de caprinos oriundos de 125 fazendas. Observou-se que, alm de 27,9% de positividade
geral, a soroconverso das fmeas (30,2%) foi significativamente maior (p<0,05;
OR=1,49) que a dos machos (20%). Resultados positivos para animais acima de 24
meses de idade (33,2%; OR=2,70), assim como para os rebanhos de produo leiteira
(33,7%; OR=1,36) foram significativos (p<0,05). Propriedades do Sul do pas
apresentaram os maiores porcentuais de positividade devido ao clima ser favorvel
sobrevivncia dos oocistos no ambiente (J ITTAPALAPONG et al., 2005).
No Iran, estudo de soroprevalncia com 400 caprinos mostrou 30% de
positividade para presena de anticorpos anti-T. gondii ao teste de Imunofluorescncia
Indireta (SHARIF et al., 2007). Avaliao sorolgica com 641 caprinos na Etipia pelo
mtodo da aglutinao direta modificado encontrou 74,8% de positivos, considerando
como fatores de risco para a infeco a idade e o sexo, onde os animais adultos
(OR=2,33) e as fmeas (OR=0,68) apresentaram os maiores porcentuais de positividade
(TESHALE et al., 2007). Na Arbia Saudita, em anlise de soro de 290 caprinos
abatidos, utilizando trs diferentes provas sorolgicas, um estudo observou prevalncia
de at 51,7% (SANAD; AL-GHABBAN, 2007).
Nos Estados Unidos, soros de 123 caprinos foram avaliados encontrando-se
soropositividade de 22,7% (DUBEY, 1985). No ano seguinte, um estudo com 115
caprinos no Texas no detectou anticorpos ou a presena de T. gondii atribuindo este
resultado ausncia de gatos nas propriedades daquela regio (DUBEY;
LIVINGSTON, 1986). Posteriormente, em outra regio do pas, em anlise de soro de
1000 caprinos leiteiros no perodo de 1982-1984 foi encontrada positividade em 22,1%
dos animais (DUBEY; ADAMS, 1990).
Estudo de soroprevalncia na Venezuela com 438 caprinos em 10 fazendas
encontrou positividade em 17,8% das amostras (NIETO; MELNDEZ, 1998).
No Brasil, diversos estudos de soroprevalncia em caprinos para anticorpos anti-
T. gondii foram realizados. Em Gois, anlise sorolgica de 109 caprinos, oriundos de
cinco propriedades, evidenciou 43,1% de positividade pelo mtodo da Hemaglutinao
Direta. Os animais acima de um ano de idade apresentaram maior porcentual de
soropositividade (51,5%) em relao aos mais jovens (30,2%) assim como as fmeas
apresentaram prevalncia maior que nos machos (46,3% e 33,3%), respectivamente
(LINHARES et al., 1990).
Um trabalho com amostras de 153 soros de caprinos de oito propriedades no
Paran encontrou 30,71% positividade pela reao de Imunofluorescncia Indireta
(RIFI), onde todas as propriedades analisadas apresentaram animais soropositivos
(SELLA et al., 1994).
Utilizando trs testes sorolgicos distintos, um estudo em Minas Gerais com 174
caprinos de quatro propriedades situadas em regio periurbana (duas) e em regio rural
(duas) encontrou 19% de soropositividade no teste de Hemaglutinao Indireta, e 19,5%
tanto para o teste de RIFI quanto para o ELISA, havendo correlao positiva entre os
resultados dos testes. O maior porcentual de animais positivos observado entre aqueles
com mais de 36 meses de idade foi considerado estatisticamente significativo
(p<0,0001) para prevalncia de anticorpos anti-T. gondii (FIGUEIREDO et al., 2001).
Em Minas Gerais, estudo com 767 caprinos de 115 fazendas encontrou
soropositividade de 45,8% e 42,8% para os testes de RIFI e ELISA. No foi evidenciada
diferena significativa entre a prevalncia nos sexos, embora o porcentual em fmeas
tenha sido maior que nos machos. No referido estudo, considerou-se que os caprinos so
expostos aos mesmos fatores de risco para infeco por Toxoplasma gondii
independente de raa, idade ou sexo (CARNEIRO et al., 2009).
No Estado de So Paulo, amostras de soro de 442 caprinos foram analisadas
sendo encontrada soroprevalncia de 14,47% pela reao de RIFI, alm de todas as
propriedades avaliadas apresentarem casos de animais positivos (MAINARDI et al.,
2000). Em sequncia, um estudo com 100 soros caprinos encontrou soropositividade de
8% (SILVA et al., 2002).
Posteriormente, 385 caprinos de 19 fazendas no Estado de So Paulo, foram
avaliados pela reao de RIFI. A soropositividade foi de 28,7% com todas as
propriedades apresentando animais reagentes. Neste estudo, embora tenha sido notada a
presena de gatos domsticos e selvagens em dez propriedades, no houve associao
deste fator com a soropositividade. Outro achado, desta vez considerado significativo
(p=0,001), foi que a positividade aumentava com o aumento da idade dos animais
(FIGLIUOLO et al., 2004).
Na Bahia, estudo com soros de 439 caprinos procedentes de 10 fazendas
encontrou 28,93% animais soropositivos. A pesquisa foi realizada em duas regies, uma
populosa em relao a animais de companhia e seres humanos e outra
caracteristicamente seca, cujas prevalncias foram de 41,97% e 7,27%, respectivamente,
sendo atribuda a alta positividade da primeira regio maior contaminao ambiental
por oocistos de T. gondii (GONDIM et al., 1999).
Alguns anos mais tarde, em estudo sorolgico atravs da RIFI realizado com
caprinos leiteiros de oito rebanhos da Bahia, 373 amostras foram analisadas
encontrando-se 16,4% de reaes positivas para anticorpos anti-T. gondii. Todas as
propriedades apresentavam animais soropositivos, no havendo evidncias de
predisposio racial ou de faixa etria para a soroconverso (UZDA et al., 2004).
Posteriormente, em anlise de amostras de crebro, lngua e corao de 102 caprinos
abatidos no Estado, a prevalncia total foi 13,72% para presena de DNA de T. gondii
para anlise da PCR (SILVA et al., 2009).
No Estado de Pernambuco, soros de 213 caprinos de 10 propriedades situadas
nas regies da Zona da Mata e Agreste foram analisados onde foi registrado 40,40% de
soropositividade com 100% das propriedades apresentando animais positivos RIFI. O
porcentual de fmeas reagentes encontrado no estudo (43,88%; OR=2,91) foi
significativamente maior que o dos machos (21,21%), assim como o de raas mestias
(51,92%; OR=2,60) em comparao com raas puras (40,48%) e de animais originrios
da Zona da Mata (51,96%; OR=2,56), rea eminentemente mida, em relao aos do
Agreste (47,9%) de clima mais seco (SILVA et al., 2003).
Uma pesquisa em abatedouro na Paraba analisou 306 amostras de soro de
caprinos encontrando 24,5% de reaes positivas para anticorpos anti-T. gondii na RIFI,
no havendo associao entre a soropositividade e o sexo (FARIA et al., 2007).
No Cear, 2362 soros de caprinos provenientes de 72 rebanhos leiteiros foram
avaliados pelo teste de ELISA encontrando 25,1% de positividade. Diferena
significativa foi observada com relao idade dos animais (OR=2,01), para aqueles
com mais de 36 meses, presena de mais de 10 gatos na propriedade (OR=1,73),
alimentao dos animais em cocho de madeira (OR=7,81) e a ausncia de cocho para
alimentao (OR=5,50), onde todos foram considerados fatores de risco no Estado
(CAVALCANTE, et al., 2008).
Paralelamente, no Rio Grande do Norte, estudo com 366 soros caprinos e 12
rebanhos evidenciou 30,6% de soropositividade RIFI. Associaes positivas foram
mostradas entre soropositividade e presena de gatos nas propriedades (OR=6,56),
manejo extensivo (OR=51,33) e semi-intensivo (OR=7,30) e falta de suplementao
mineral (OR=7,93), sendo todos considerados fatores de risco para infeco (NETO, et
al., 2008).
Dentre os animais domsticos, nos sunos, a manifestao clnica da
enfermidade considerada rara. Estudos demonstraram que em uma criao suna com
taxa de 50% de mortalidade e sintomas como tosse, diarria, incoordenao motora e
tremores musculares, alm da ocorrncia de partos prematuros, natimortos e
neonatalidade, sendo T. gondii isolado do colostro das matrizes. Em estudo da forma
aguda da doena em um leito foram demonstrados histologicamente necrose intestinal,
linfadenite, pneumonia e encefalite (DUBEY; J ONES, 2008).
Nos bovinos, a manifestao clnica da toxoplasmose tambm no frequente e
est associada a distrbios reprodutivos, notadamente o aborto. Recentes estudos sobre
Neospora caninum, para o qual os bovinos so considerados hospedeiros intermedirios
de grande importncia, indicam que estudos anteriores poderiam ter associado de
maneira equivocada o aborto em bovinos toxoplasmose (THILSTED; DUBEY, 1989;
DUBEY; J ONES, 2008).
Um estudo com galinhas que apresentavam torcicolo, dificuldade de repousar e
decbito lateral alm de morte sbita, evidenciou necrose cerebral e gliose alm da
presena de cistos teciduais e taquizotos nas leses. Em cavalos, embora existam
relatos de soroprevalncia, nenhum artigo sobre a manifestao clnica da toxoplasmose
foi publicado (DUBEY; J ONES, 2008).
Os gatos, quando adoecem, tm a pneumonia como manifestao clnica mais
evidente da toxoplasmose. Os animais podem se apresentar deprimidos, anorxicos,
ictricos, dispnicos e com convulses culminando com a morte. Hepatite, necrose
pancretica, miosite, miocardite, uvete, dermatite e encefalite tambm so
manifestaes clnicas comuns. Alm destes sinais clnicos que ocorrem nos felinos, os
ces apresentam intensa manifestao muscular (miosite), fraqueza, marcha rgida e/ou
emaciao muscular. Nos caninos comum, no caso de manifestao neuromuscular,
ocorrer ataxia, convulses, tremores, dficits nervosos cranianos, paresia e paralisia
(LAPPIN, 2004).
Em ovelhas no comum se observar sinais clnicos da toxoplasmose.
Geralmente estes so observados no segundo tero da gestao de uma fmea com
primo infeco e incluem produo de natimortos, cordeiros fracos ou mumificao
fetal, alm de necrose placentria (BUXTON, 1998).
Caprinos so considerados muito sensveis infeco por T. gondii. Quando
infectados durante a gestao, em estudos experimentais, apresentaram parasitemia na
primeira semana ps-infeco; na segunda semana a placenta estava infectada e na
terceira, o feto. A infeco causou morte fetal com subsequente reabsoro, aborto (que
pode ocorrer a qualquer momento a partir do nono dia ps-infeco), mumificao,
natimortalidade ou nascimento de cabritos fracos (DUBEY, 1988b; ENGELAND et al.,
1996).
Macroscopicamente, fetos abortados e natimortos podem apresentar encefalite
no supurativa, meningoencefalite e gliose multifocal (leses consideradas
caractersticas) alm de nefrite e hepatite. Na placenta esto presentes reas de necrose e
mineralizao margeadas por clulas mononucleares inflamatrias (DUBEY, 1980;
PEREIRA-BUENO et al., 2004; PESCADOR et al., 2007).
O diagnstico da toxoplasmose pode ser realizado de diversas maneiras por meio
de vrias tcnicas. Para o isolamento do agente em amostras suspeitas de placenta ou
fetos abortados, a melhor tcnica a inoculao intraperitoneal em camundongos. As
tcnicas de avaliao de cortes histolgicos de placenta ou rgos fetais, por meio da
imunohistoqumica e imunoperoxidase so consideradas boas para a identificao de
cistos teciduais ou taquizotos. A prova de reao em cadeia de polimerase (PCR)
utilizada para deteco do DNA parasitrio. A tcnica de PCR em tempo real permite
quantificar e amplificar o DNA simultaneamente (OIE, 2008).
Dentre os testes sorolgicos, os mais utilizados so a reao de
imunofluorescncia indireta (RIFI), hemaglutinao direta (HA), hemaglutinao
indireta (IHA) e imunoadsoro enzimtica (ELISA) para deteco de anticorpos anti-T.
gondii (OIE, 2008).
Os dados da infeco e da prevalncia de anticorpos em diversos trabalhos
realizados no Brasil evidenciam a necessidade de se incluir T. gondii entre as causas de
perdas reprodutivas em rebanhos caprinos no pas (PESCADOR et al., 2007). Poucos
pases no mundo monitoram de forma regular a toxoplasmose em humanos e menos
ainda em animais (TENTER et al., 2000).
Devido mltipla variedade de vias e fontes de infeco, a preveno contra
toxoplasmose torna-se um item um tanto dificultoso. Embora pesquisas apontem os
gatos como a chave do problema, preciso entender que outros feldeos tem igual
participao no ciclo da enfermidade e que a posse de gatos domsticos no est
diretamente relacionada ao risco de transmisso de T. gondii para a populao humana
(DUBEY; J ONES, 2008).
Contudo, boas prticas de higiene parecem ser a melhor opo de preveno da
transmisso de T. gondii para humanos, uma vez que, embora os oocistos sejam
praticamente indestrutveis, os cistos teciduais podem ser facilmente mortos por
congelamento em freezer domstico ou por coco onde a temperatura da parte mais
interna da carne alcance 66c (DUBEY et al., 1990; KOTULA et al., 1991).
Na cadeia produtiva animal, prticas adequadas de manejo evitando ou
eliminando a presena de feldeos e roedores no ambiente de convvio dos animais,
educao sanitria e vacinao so apontadas como alternativas no controle da
toxoplasmose, que envolve, ainda, vacinao dos feldeos para impedir a eliminao de
oocistos e conseqente contaminao ambiental, dos animais de produo para diminuir
o nmero de cistos teciduais, e das fmeas prenhes para impedir a infeco
transplacentria. Sugere-se, ainda, eliminao de fmeas soropositivas e o isolamento
das suspeitas, incinerao de carcaas de animais infectados, assim como membranas e
restos fetais como medidas a serem adotadas no controle da doena nos rebanhos
(DUBEY, 1996b; BUXTON, 1998).

Neosporose
A neosporose uma enfermidade parasitria provocada por um protozorio
intracelular obrigatrio, Neospora caninum, que pertencente ao filo Apicomplexa,
famlia Sarcocystidae. O agente foi primeiramente reconhecido como um esporozorio
com formao cstica associado a casos de encefalomielite e miosite em ces
(BJ ERKS et al., 1984) para, posteriormente, ser isolado e descrito como um novo
gnero Neospora e tipificado em uma nova espcie N. caninum (DUBEY et al., 1988).
Embora o agente seja estudado e catalogado principalmente em casos de aborto
bovino, onde os prejuzos produtivos tomam maiores propores (THILSTED;
DUBEY, 1989; ANDERSON et al., 1991; BARR et al., 1992; CORBELLINI et al.,
2000), N. caninum tem sido frequentemente isolado em tecidos de ovinos, caprinos,
bovinos (DUBEY et al., 1992), bubalinos (FERROGLIO; ROSSI, 2001; RODRIGUES
et al., 2004), eqinos (DUBEY; PORTERFIELD, 1990) e de animais silvestres
assumindo grande importncia nos aspectos reprodutivos destas espcies (BARR et al.,
1992; WOODS et al., 1994; FERROGLIO et al., 2003; DUBEY; THULLIEZ, 2005).
Uma segunda espcie, isolada de cavalo, foi proposta (Neospora hughesi)
(MARSH et al., 1996) e posteriormente confirmada por anlises com base em suas
caractersticas moleculares e antignicas (MARSH et al., 1998). As infeces por N.
hughesi esto associadas a distrbios neurolgicos em equinos e no a problemas
reprodutivos, o que deixa dvidas em relao ao papel desempenhado por N. caninum,
embora ainda no se tenham resultados consistentes nesse aspecto. Contudo, admite-se
que distrbios reprodutivos em guas possam estar relacionados infeco por
Neospora spp (VILLALOBOS et al., 2006).
O agente foi comparado ao Toxoplasma gondii devido s semelhanas
estruturais, genticas e antignicas entre eles, porm ambos os parasitos induzem a
enfermidades biologicamente distintas (DUBEY, 1999). Enquanto a toxoplasmose
uma enfermidade majoritria de ovinos e humanos e tem como hospedeiro definitivo o
gato e outros feldeos selvagens, a neosporose uma doena que acomete
principalmente os bovinos no havendo evidncias de infeco humana e tendo como
hospedeiro definitivo o co e o coiote (OCHOLI et al., 1989; DREESEN 1990;
DUBEY, 2003; GONDIM et al., 2004).

De uma forma geral o ciclo biolgico do N. caninum determinado por trs
fases morfolgicas distintas: taquizotos, bradizotos (contidos em cistos teciduais) e
esporozotos (contidos nos oocistos), sendo os dois primeiros organismos intracelulares
que parasitam os hospedeiros intermedirios. Os taquizotos tm formato globular e
medem cerca de 7 x 2 m. No interior da clula hospedeira esto inseridos em um
vacolo parasitforo que desprovido de membrana (DUBEY et al., 2002).
Os bradizotos apresentam estrutura alongada medindo cerca de 8 x 2 m; so
encontrados primariamente em tecido nervoso, formando cistos teciduais de tamanho
varivel a depender da quantidade de bradizotos existentes. Em ces, encontrou-se
cistos com at 107 m de dimetro e 4 m de espessura de membrana, enquanto que em
bovinos os cistos no ultrapassam os 50 m de dimetro ou 2,5 m de espessura de
parede (BARR et al., 1992; DUBEY et al., 2002).
Os oocistos so as formas encontradas no hospedeiro definitivo e medem cerca
de 12 x 10 m. Possuem membrana transparente com 0,6-0,8 m de espessura e
englobam dois esporocistos, cada um medindo aproximadamente 8,4-6,1 m. No
interior de cada esporocisto existem quatro esporozotos que so alongados e cada um
mede cerca de 6.5 x 2.0 m (DUBEY et al., 2002).
No ambiente, os oocistos esporulam como forma de resistncia espera da
oportunidade de infectar um hospedeiro intermedirio (LINDSAY et al., 2001).
O co e o coiote so considerados os hospedeiros definitivos, porm tambm
desempenham papel de hospedeiro intermedirio no ciclo de vida do agente, e adquirem
a infeco quando se alimentam de placenta, membranas fetais ou rgos de fetos
abortados e infectados com taquizootos ou bradizotos (MCALLISTER et al., 1998;
LINDSAY et al., 1999, GONDIM et al., 2004).
Entretanto, ainda que placentas de animais domsticos infectados sejam fontes
potenciais de infeco para os ces, este no parece ser o mecanismo naturalmente
encontrado quando se trata da ecologia desta doena. Estudos de reviso sobre o tema
evidenciaram que dentre os pequenos animais que naturalmente so presas dos ces
nenhum deles foi identificado como hospedeiro natural de N. caninum (DUBEY, 2003).
Aps a penetrao, ocorre multiplicao sexuada do agente no intestino do co e
no perodo de cinco a 17 dias ps-infeco oocistos no-esporulados sero eliminados
nas fezes. A produo de oocistos de N. caninum ainda considerada um enigma. Tanto
em estudos de infeco natural quanto de infeco induzida, o nmero de oocistos
liberados e recuperados nas fezes dos ces foi muito baixo, no sendo bem sucedidos os
experimentos que tentaram elucidar o estgio enteroepitelial do agente e
consequentemente sua fase de multiplicao sexuada (LINDSAY et al., 1999; BASSO
et al., 2001; LINDSAY et al., 2001; DUBEY et al., 2004).
Os hospedeiros intermedirios (bovinos, ces, ovinos, caprinos e diversos
animais silvestres) adquirem a infeco por meio da ingesto de gua ou alimento
contaminados com oocistos esporulados, caracterizando a transmisso horizontal ou
ps-natal (Figura 4). Porm, a transmisso transplacentria tambm denominada
transmisso vertical ou congnita, apesar de ser a principal via para os bovinos foi
demonstrada experimentalmente em outras espcies como ces, gatos, ovelhas e
camundongos (DUBEY; LINDSAY, 1989a; DUBEY; LINDSAY, 1989b; COLE et al.,
1995a; COLE et al., 1995b; McALLISTER et al., 1996).


Figura 4: Ciclo de vida de N. caninum.
Fonte: Traduzido de Dubey (1999).

A colonizao da placenta por N. caninum provoca um desequilbrio entre as
citocinas, proporcionando aumento de liberao daquelas que no sero benficas
manuteno da gestao, como interferon gama e interleucina-2 que sero favorveis ao
agente para interrupo da gestao e consequente aborto (QUINN et al., 2002). Sugere-
se, ainda, que a infeco provoca lutelise induzida por liberao de prostaglandina
causando contrao uterina prematura e consequente expulso do feto (ENGELAND et
al., 1996).
A transmisso vertical contribui significativamente para a persistncia da
infeco por N. caninum em um rebanho atravs da propagao da infeco a sucessivas
geraes. As vacas podem permanecer infectadas por toda a vida e transmitirem a
infeco s suas crias em gestaes consecutivas ou intermitentemente (WOUDA et al.,
1998; GUY et al., 2001; FIORETTI et al., 2003).
Infeco via colostro foi demonstrada experimentalmente em bezerros
alimentados com colostro contaminado por taquizotos (UGGLA et al., 1998). Em ces
um estudo semelhante no reproduziu infeco lactognica, no sendo identificados
oocistos sendo eliminados nas fezes (DIJ KSTRA et al., 2001), o que torna a infeco
via transmamria ainda controversa e sem evidncias de que ocorra naturalmente
(DUBEY, 2005).
Em caprinos, infeco natural por N. caninum, assim como em ovinos,
incomum e poucos casos de aborto ou doena congnita foram relatados. Estudos so
necessrios para se determinar o papel do agente como causa natural de aborto em
pequenos ruminantes, uma vez que inoculaes experimentais, durante a gestao,
provocaram condio muito semelhante observada em bovinos (BARR et al., 1992;
LINDSAY et al., 1995; DUBEY et al., 1996a; CORBELLINI et al., 2001; BUXTON et
al., 2002).
Em anlise de dois fetos caprinos abortados, nos Estados Unidos, um estudo
evidenciou autlise fetal, placenta edematosa e mumificao fetal parcial. Os fetos
apresentavam ainda necrose focal do parnquima cerebral alm de cistos do protozorio
no crebro que eram morfologicamente semelhantes ao Neospora (BARR et al., 1992).
Posteriormente, em anlise de um natimorto e de um feto caprino abortado, estudos
demonstraram hidrocefalia, hipoplasia cerebelar e meningoencefalite devido presena
de inmeros cistos e taquizotos que tambm foram encontrados causando miosite em
ambos os casos (DUBEY et al., 1992b; DUBEY et al., 1996b).
Em uma pesquisa sobre inoculao experimental de N. caninum em seis cabras
gestantes foi demonstrado aborto, morte fetal e natimortos. Duas das fmeas foram
inoculadas no incio da gestao (51 dias) e apresentaram morte fetal seguida por aborto
ou reabsoro. As outras quatro fmeas foram igualmente inoculadas, sendo duas na
metade (85 dias) e duas no final da gestao (127 dias) e nenhuma delas abortou.
Entretanto em um caso de inoculao no meio da gestao, o cabrito morreu uma
semana antes do parto e N. caninum foi isolado da placenta de todas as cabras
inoculadas (LINDSAY et al., 1995).
Posteriormente, em necropsia realizada em um feto caprino abortado entre o
terceiro e o quarto ms e gestao, observou-se meningoencefalite no-supurativa
associada necrose multifocal, assim como cistos que eventualmente estavam
associados a leses inflamatrias. Como em outros estudos, taquizotos no foram
encontrados nas amostras analisadas (ELENI et al., 2004).
No Sri Lanka, em estudo de validao de um teste de Imunoadsoro Enzimtica
(ELISA) foram analisadas 468 amostras de cabras encontrando-se uma positividade de
0,6% (NAGULESWARAN et al., 2004). Na Argentina, a avaliao de 1594 amostras
de soro caprino proveniente de 94 rebanhos evidenciou soropositividade de 6,6% nos
animais e de 53,2 % nos rebanhos. Observou-se alta prevalncia entre os machos, o que
foi relacionado transmisso vertical naquela populao estudada, embora os dados no
fossem suficientes para permitir convico nesta concluso (MOORE et al., 2007).
Em estudo epidemiolgico para determinar a prevalncia e os fatores de risco
associados infeco por N. caninum em caprinos e ovinos, na J ordnia, foram
avaliados 300 caprinos de 24 rebanhos observando-se 5,7% de soropositividade nos
animais e 48,7% dos rebanhos positivos para o teste de ELISA. A pesquisa indicou que
a prevalncia foi significativamente maior nos animais com mais de quatro anos de
idade que nos mais jovens, caracterizando a idade como fator de risco indicador da
possibilidade de transmisso horizontal nas propriedades. (AL-MAJ ALI et al., 2008).
Na mesma pesquisa, o tamanho do rebanho (OR=1,9) tambm foi considerado
fator de risco onde pequenos rebanhos apresentaram prevalncia significativamente
maior que grandes rebanhos o que se atribuiu ao fato de que as propriedades de maior
porte apresentavam melhores condies higinico-sanitrias e de manejo. Uma raa
pura de caprinos avaliada, a Damascus, apresentou maior porcentual de soropositividade
(75%) em comparao com animais mestios (43%) ou nativos da regio (33%), o que
surpreendeu os pesquisadores, pois a referida raa era criada tipicamente em
propriedades com melhores nveis de organizao e biossegurana e consequentemente
se esperava uma prevalncia menor. Animais que se alimentavam em pastos comuns
(OR=1,2) e em fazendas com mais de um co presente (OR=2,4) tambm foram
identificados como fatores de risco para infeco por N. caninum (AL-MAJ ALI et al.,
2008).
O tipo de produo tambm est associado ao risco de infeco. Nos rebanhos
leiteiros, devido ao sistema de manejo intensivo, a disseminao do agente no ambiente
potencializada, o que favorece a transmisso horizontal sugerindo ser esta uma
importante via na cadeia epidemiolgica da enfermidade. A presena de ces
soropositivos em rebanhos com vacas soropositivas sugere a relao da presena desses
animais com a positividade em bovinos (CRUZ-VZQUEZ et al., 2008; DUBEY et al.,
2007; RINALDI et al., 2005; DYER et al., 2000).
Em ovinos, raa, idade e sexo no foram considerados fatores de risco
associados soropositividade dos rebanhos, embora tenha sido observada maior
prevalncia para indivduos adultos do sexo feminino. Sistema de criao, manejo
produtivo e reprodutivo alm de presena de outros animais nas propriedades,
incluindo-se ces, no foram considerados fatores relacionados ao risco de infeco por
N. caninum (FIGLIUOLO et al., 2004; ROMANELLI et al., 2007).
No Brasil, os trabalhos com neosporose em caprinos ainda so escassos. No Rio
Grande do Sul, pesquisadores de uma universidade receberam um cabrito de um dia de
idade que apresentava fraqueza, alm de incapacidade para mamar e ficar de p, ataxia e
opisttomo. Aps a intensificao dos sinais neurolgicos, o animal foi eutanasiado e
numerosos cistos foram identificados no crebro associados a leses inflamatrias o que
foi considerado sugestivo para infeco crnica (CORBELLINI et al., 2001).
Em um estudo de prevalncia em So Paulo foram coletadas amostras de 385
cabras em 19 fazendas, encontrando-se 6,4% de soroprevalncia, no havendo
associao entre a soropositividade e a idade dos animais ou presena de ces nas
propriedades (FIGLIUOLO et al., 2004).
Um trabalho realizado com caprinos leiteiros na Bahia avaliou soro de 384
animais de nove fazendas encontrando 15% de soropositividade e 88,88% das
propriedades apresentando animais positivos para anticorpos anti-N. caninum.
Associao entre positividade e idade no foi observada e a presena de ces ou fatores
ambientais propcios foram considerados relevantes na infeco, podendo N. caninum
ser considerado causa de aborto nas propriedades estudadas (UZDA et al., 2007).
Posteriormente, analisando-se 306 soros caprinos em um abatedouro na Paraba,
pesquisadores observaram prevalncia de 3,3% de anticorpos anti-N. caninum pelo
mtodo da RIFI (FARIA et al., 2007). No ano seguinte, em anlise de 381 soros de
caprinos de 14 propriedades no Rio Grande do Norte, um trabalho evidenciou 1,05% de
positividade dentre os animais em 28.6% das propriedades no havendo associao
significativa entre a soropositividade e a presena de problemas reprodutivos ou ces
nas propriedades (LIMA et al., 2008). Em recente estudo na Bahia realizado com
animais de matadouro foram analisados rgos (crebro, lngua e corao) de 102
caprinos, encontrando-se 1,96% de positividade no teste de PCR para amostras de
crebro (SILVA et al., 2009).
Embora tenha sido detectado DNA de N. caninum em smen bovino (ORTEGA-
MORA et al., 2003), considera-se a transmisso venrea ou por transferncia de
embries (TE), atravs das vacas doadoras, improvvel. Alis, a TE tem sido indicada
como medida de controle na preveno da transmisso vertical da neosporose
(BAILLARGEON et al., 2001).
Clinicamente, a neosporose bovina s se faz evidente em animais com idade
inferior a dois meses. De forma geral, manifesta-se nos hospedeiros intermedirios
provocando distrbios reprodutivos, notadamente aborto, que pode ser endmico ou
epidmico quando os casos de aborto entre seis e oito semanas ultrapassam 12,5% das
vacas em risco (WOUDA et al., 1999; SCHARES et al., 2002).
Os fetos bovinos morrem entre trs e oito meses de gestao e ao serem expulsos
podem apresentar autlise, porm, se a morte fetal ocorrer antes dos cinco meses de
gestao o feto pode ser retido no tero e ser mumificado ou reabsorvido (GONZLES
et al., 1999; MORALES et al., 2001; SAGER et al., 2001; MOORE et al., 2002).
Em pequenos ruminantes so poucos os trabalhos que relatam os aspectos
clnicos da neosporose. Em um estudo experimental com ovelhas gestantes e no-
gestantes observou-se como principal alterao clnica o aumento de temperatura retal
dos animais, independente de prenhez. Aps necropsia, exames histopatolgicos das
gestantes evidenciaram focos de necrose nos placentomas com agregados eosinoflicos
alm de aumento da celularidade linfoctica nas vilosidades placentrias evidenciando
resposta inflamatria tanto fetal quanto materna. Os fetos apresentavam meningite
linfide no crebro associada microgliose espordica, miocardite difusa associada
endocardite e pericardite alm de leses inflamatrias focais nos pulmes e necrose de
hepatcitos, sendo tambm observada mumificao fetal (BUXTON et al., 1997).
Inquritos soroepidemiolgicos realizados em todo mundo, principalmente com
bovinos, evidenciaram fatores de risco para infeco por N. caninum em associao
soropositividade dos rebanhos analisados. Histrico de aborto na propriedade e manejo
nutricional intensivo em novilhas para que atinjam precocemente maturidade ao
primeiro parto so fatores predisponentes infeco, no primeiro caso favorecendo a
transmisso vertical e no segundo a ps-natal. A idade relevante considerando-se que
fmeas adultas tm maior probabilidade de se infectarem pelo maior tempo de
exposio (MOORE et al., 2009; DUBEY et al., 2007; RINALDI et al., 2005; DYER et
al., 2000).
Diversos mtodos de diagnstico da neosporose foram relatados. Microscopia
em lminas pelo mtodo Hematoxilina-Eosina (HE), Imunohistoqumica, isolamento do
protozorio atravs de bioensaios em camundongos ou cultura em clulas, testes
sorolgicos de deteco de anticorpos como de Imunofluorescncia Indireta (RIFI),
Aglutinao Direta, Imunoadsoro Enzimtica (ELISA), Imunocromatografia Indireta
e Imunoblot, alm de provas de deteco de DNA parasitrio por tcnicas
biomoleculares atravs da Reao em Cadeia de Polimerase (PCR) tem sido descritos
em alguns estudos de reviso sobre o tema (DUBEY; SCHARES, 2006).
O exame histopatolgico utilizado para a identificao dos cistos e taquizotos
nos tecidos orgnicos como crebro, fgado, corao, placenta ou fluidos corpreos
sendo Imunohistoqumica o melhor mtodo para demonstrar os cistos nestes tecidos
(DUBEY; LINDSAY, 1996).
O exame sorolgico muito utilizado como exame ante-mortem indicativo do
estado da infeco no rebanho. Os ensaios sorolgicos so baseados em antgenos dos
taquizotos, pois ainda no h um com base em antgeno de bradizotos ou esporozotos.
Os testes utilizados com maior frequncia so os de Imunofluorescncia Indireta,
Aglutinao Direta, ELISA, Imunoblot e Imunocromatografia Indireta (OSAWA et al.,
1998; DUBEY; SCHARES, 2006).
O teste da Reao em Cadeia de Polimerase (PCR) tem sido igualmente
utilizado para deteco de DNA de N. caninum em amostras de tecidos orgnicos
(ELLIS , 1998; SILVA et al., 2009).
Para se prevenir a infeco por N. caninum necessrio minimizar a
contaminao da gua e alimento por ces ou outros potenciais hospedeiros definitivos,
remover rapidamente fetos abortados, membranas fetais, placentas ou natimortos,
impedir a entrada de animais infectados no rebanho e abater os que estiverem
infectados, medidas estas que a depender do sistema de criao tornam-se quase que
impraticveis (BARR et al., 1998).
Especialistas em neosporose reforaram a necessidade de se ter informaes
mais detalhadas e definidas sobre a biologia do N. caninum, principalmente quanto
frequncia de eliminao dos oocistos, a sobrevivncia destes no ambiente e a
determinao do ciclo silvestre da enfermidade (DUBEY, 2003; MOORE, 2005).

Clamidofilose
A clamidofilose se caracteriza por ser uma doena que provoca aborto nos
ltimos meses da gestao, natimortalidade ou parto prematuro, resultando em filhotes
debilitados e com baixo peso ao nascimento (RODOLAKIS, 2001).
Taxonomicamente, muito se pesquisou e discutiu para se determinar a
nomenclatura adequada a ser utilizada para o agente patognico. A famlia
Chlamydiaceae composta por bactrias Gram negativas que se apresentam na forma
cocide, so parasitas intracelulares obrigatrios, sendo responsveis por uma grande
variedade de manifestaes clnicas em vrias espcies de aves e mamferos selvagens e
domsticos, alm do homem (LONGBOTTOM; COULTER, 2003). At o fim da
dcada de 70, a famlia Chlamydiaceae da ordem Chlamydiales, possua apenas um
gnero e duas espcies: a Chlamydia trachomatis e a C. psittaci, a primeira causando
conjuntivite crnica e doenas sexualmente transmissveis em humanos e a segunda
responsvel por aborto, artrite, conjuntivite, infertilidade e doenas do trato respiratrio
em animais (PAGE, 1968; SKERMAN et al., 1980).
A partir do desenvolvimento de tcnicas baseadas na anlise do DNA, na dcada
de 80 foram reconhecidas duas novas espcies, um patgeno humano, a C. pneumoniae
(GRAYSTON et al., 1989), e outro animal, a C. pecorum (FUKUSHI; HIRAI, 1992).
Com o advento das tcnicas de biologia molecular tornou-se possvel a partir da anlise
dos genes 16S e 23S do RNAr uma nova classificao para a famlia Chlamydiaceae
em dois gneros: Chlamydia e Chlamydophila (EVERETT et al., 1999) sendo esta
reclassificao considerada apropriada (EVERETT, 2000).
Com a nova classificao, o gnero Chlamydia passou a ser composto por trs
espcies: C. trachomatis (no homem), C. suis (em sunos) e C. muridarum (em
camundongos e hamsters), enquanto passaram a fazer parte do gnero Chlamydophila,
as espcies C. psittaci (aves), C. pneumoniae (humanos, koalas e cavalos), C. pecorum
(bovinos, ovinos, caprinos, sunos e koalas), C. felis (gatos), C. caviae (porco da ndia)
e C. abortus (ovinos, bovinos, caprinos e mamferos de uma forma geral) havendo
acentuado grau de correlao entre as espcies e seus hospedeiros (EVERETT, 2000;
OIE, 2004).
O ciclo de vida das bactrias desta famlia (Figura 5) considerado nico e
bifsico, caracterizado por duas formas morfolgicas distintas do agente: um corpo
elementar infeccioso (CE), extracelular, metabolicamente inerte, com cerca de 0,3m de
dimetro e um corpo reticulado no
dimetro variando entre 0,5-1,6 m, alm de formas intermedirias (WARD, 1988;
MOULDER, 1991).
Figura 5: Ciclo de vida da famlia Chlamydiaceae.
Fonte: Traduzido de Longbottom e Coulter (2003).

Os CE por possurem parede celular rgida, osmotica
permevel so adaptados sobrevivncia por tempo prolongado no ambiente
extracelular, sendo resistentes a fatores fsicos e qumicos. Ao entrarem em contato com
uma clula hospedeira, eucaritica, aderem
atingem o citoplasma alojando-se em um vacolo endossomal. Ainda
CE transformam-se em CR (diferenciao primria
fisso binria (SCIDMORE et al., 1996; LONGBOTTOM
medida que os CR se multiplicam, por um perodo que pode variar de 24 a
horas, o vacolo fica repleto e aumenta de tamanho podendo acumular de 500 a 1000
bactrias. A partir de ento, antes da ruptura da clula hospedeira, inicia
diferenciao secundria, onde os CR se reorganizam em formas intermedirias a
passaro a novos CE infectantes
2005).
elementar infeccioso (CE), extracelular, metabolicamente inerte, com cerca de 0,3m de
dimetro e um corpo reticulado no-infeccioso (CR), metabolicamente ativo e com
1,6 m, alm de formas intermedirias (WARD, 1988;
: Ciclo de vida da famlia Chlamydiaceae.
Fonte: Traduzido de Longbottom e Coulter (2003).
Os CE por possurem parede celular rgida, osmoticamente estvel e pouco
so adaptados sobrevivncia por tempo prolongado no ambiente
racelular, sendo resistentes a fatores fsicos e qumicos. Ao entrarem em contato com
uma clula hospedeira, eucaritica, aderem-se sua membrana e, por endocitose
se em um vacolo endossomal. Ainda, no vacolo
diferenciao primria) para dar incio ao processo de
al., 1996; LONGBOTTOM; COULTER, 2003).
medida que os CR se multiplicam, por um perodo que pode variar de 24 a
horas, o vacolo fica repleto e aumenta de tamanho podendo acumular de 500 a 1000
. A partir de ento, antes da ruptura da clula hospedeira, inicia-se o perodo de
diferenciao secundria, onde os CR se reorganizam em formas intermedirias a
passaro a novos CE infectantes (EVERETT, 2000; ABDELRAHMAN; BELLAND,
elementar infeccioso (CE), extracelular, metabolicamente inerte, com cerca de 0,3m de
infeccioso (CR), metabolicamente ativo e com
1,6 m, alm de formas intermedirias (WARD, 1988;
mente estvel e pouco
so adaptados sobrevivncia por tempo prolongado no ambiente
racelular, sendo resistentes a fatores fsicos e qumicos. Ao entrarem em contato com
por endocitose,
no vacolo, os
o processo de

medida que os CR se multiplicam, por um perodo que pode variar de 24 a 48
horas, o vacolo fica repleto e aumenta de tamanho podendo acumular de 500 a 1000
se o perodo de
diferenciao secundria, onde os CR se reorganizam em formas intermedirias as quais
BELLAND,
Aps 48 horas, os CR so liberados por lise da parede da clula hospedeira ou
por processo de liberao direta da incluso bacteriana pela membrana celular, o que
pode deixar a clula hospedeira intacta. Este segundo mecanismo possibilita s
clamdias causar infeco crnica e inaparente (HACKSTADT, 1999; HATCH, 1999).
A enfermidade j foi diagnosticada em diversas partes do mundo. Estudo
soroepidemiolgico realizado em seis rebanhos caprinos na regio de Mrcia, Espanha,
evidenciou atravs da reao microtcnica de Fixao do Complemento (RFC) 14,31%
de positividade (CUELLO et al., 1992).
Posteriormente, comparando os testes de RFC e dspELISA na Itlia, um estudo
utilizando 17 rebanhos caprinos e ovinos com histrico de aborto encontrou 70,5% dos
rebanhos soropositivos para infeco por Chlamydophila (DONN et al., 1997). Neste
mesmo pas, no perodo de 1999-2003, uma investigao em 1815 amostras de soros de
130 propriedades foi realizada pelo teste de Imunoadsoro Enzimtica (ELISA) para se
determinar o papel da C. abortus nos casos de aborto em caprinos. Encontrou-se mdia
de 5,8% de soropositividade nos animais e 19,2% de propriedades positivas (MASALA
et al., 2005).
Em anlise de 211 amostras de abortos caprinos (fetos e placentas), enviados a
um laboratrio na Califrnia no perodo de 1991 a 1998, C. psittaci foi o agente mais
comumente encontrado, estando presente em 14,2% das amostras (MOELLER, 2001).
Na Repblica Eslovaca analisaram-se soros de 1162 caprinos no perodo de 2001-2005,
obtendo mdia anual de 7,7% de positividade pelo teste de RFC, caracterizando assim a
ocorrncia de anticorpos anti-C. abortus (ISLKOV et al., 2007).
Um estudo de soroprevalncia na J ordnia, ao analisar 721 amostras de 20
rebanhos caprinos encontrou 11,4% dos animais soropositivos RFC (AL-QUDAH et
al., 2004). Na Tunsia foram analisadas 53 amostras procedentes de cinco rebanhos
caprinos com problemas reprodutivos. Os resultados evidenciaram soropositividade de
15% para o teste de RFC e 11,3% para o ELISA (REKIKI et al., 2006). Na Nambia,
avaliao sorolgica realizada em 1076 caprinos de 24 propriedades demonstrou
positividade em 8% dos animais e em 25% das propriedades estudadas pelo ELISA
(SAMKANGE, 2007).
No Brasil, o primeiro relato sobre clamdias foi realizado a partir de um estudo
que isolou o agente de rgos de bfalos abatidos para consumo no Estado do Par.
(FREITAS; MACHADO, 1988). Em seguida, o agente foi isolado no Rio de J aneiro, a
partir de pulmo e traquia de bezerros (ROMJ IN; LIBERAL, 1990). Uma dcada aps,
o agente foi novamente isolado no pas, desta vez no Rio Grande do Sul, a partir de
fluido seminal de touros com vesiculite (GOMES et al., 2001).
Posteriormente, pela tcnica da RFC no Estado de So Paulo, um estudo
analisou evidncia de infeco por Chlamydophila sp. em 417 soros de bovinos
pertencentes a 27 rebanhos, encontrando 5,3% de animais positivos e 51,9% das
propriedades positivas para ocorrncia da infeco (IGAYARA-SOUZA et al., 2004).
Dois anos mais tarde, ainda no Estado de So Paulo foi demonstrada a ocorrncia de
anticorpos anti- Chlamydophila sp. em 12% dos caprinos avaliados pela RFC (PIATTI
et al., 2006).
No Paran, 3104 amostras de soros de bovinos procedentes de propriedades com
casos de aborto foram analisadas, sendo registrada a ocorrncia de 1,42% de anticorpos
anti-Chlamydophila spp. Propriedades com menos de 35 animais (OR=3,339), rebanho
confinado ou semi-confinado (OR=3,339), produtos de abortamento na pastagem
(OR=2,372) e aluguel de pasto (OR=3,398) foram consideradas variveis associadas
condio da existncia de foco da doena. Contudo, os pesquisadores relacionaram a
baixa prevalncia encontrada pouca ou nenhuma importncia da clamidofilose nos
casos de aborto bovino na regio estudada. (SILVA-ZACHARIAS et al., 2009).
Em Pernambuco, aps anlise de amostras sricas de 123 ovinos e 167 caprinos
de 12 propriedades rurais, a ocorrncia de anticorpos anti-Chlamydophila sp. foi
registrada em 12% dos caprinos e 8,1% dos ovinos, com 91,6% das propriedades
apresentando pelo menos um animal soropositivo RFC. Fatores como raa pura,
manejo intensivo, explorao leiteira e regime de monta natural foram considerados
positivos para associao soropositividade dos rebanhos caprinos, embora apenas os
fatores raa (OR=9,10) e manejo intensivo (OR=6,41) tenham sido confirmados na
anlise estatstica multivariada. Para os ovinos estudados no foram observadas
associaes significativas entre as variveis epidemiolgicas (raa, manejo, tipo de
explorao, procedncia dos animais, limpeza das instalaes, assistncia mdico-
veterinria, manejo reprodutivo e compartilhamento de reprodutor) e a soropositividade
(PEREIRA et al., 2009).
Recentemente, estudo realizado em Alagoas com soros de 274 matrizes ovinas
de 27 rebanhos, observou-se 21,5% de positividade e 77,77% das propriedades
apresentavam animais sororreagentes RFC. A existncia de bebedouros comuns para
jovens e adultos, a regio onde se localizavam as propriedades, aquisio de reprodutor
nos ltimos cinco anos, sistema de manejo intensivo e ocorrncia de aborto nas
propriedades foram considerados fatores relevantes soropositividade. A varivel
regio onde se localizavam as propriedades foi o nico fator que apresentou associao
significativa pela anlise estatstica multivariada, sendo o Serto (OR=3,48) e o Agreste
(OR=2,13) as mesorregies de maior risco para a infeco (PINHEIRO J NIOR,
2008).
C. abortus (anteriormente denominada Chlamydia psittaci sorotipo-1) est
frequentemente relacionada ao aborto enzotico ovino e caprino e ainda ao aborto
epizotico bovino, alm de ter sido associada a casos de abortos em cavalos, coelhos,
porcos da ndia, camundongos e sunos (EVERETT, 2000). No obstante, a C. abortus
pode levar a quadros de pneumonia, conjuntivite, artrite e ainda a infeces intestinais,
muitas vezes sem sinais clnicos evidentes (RODOLASKIS, 2001).
Em humanos, a infeco por C. abortus particularmente preocupante quando
acomete mulheres gestantes devido colonizao da placenta. Inicialmente os sintomas
podem ser confundidos com os da gripe comum culminando em aborto no primeiro
trimestre da gestao (LONGBOTTOM; COULTER, 2003). Casos humanos foram
relatados em diversos pases como Reino Unido (HELM et al., 1989), Frana
(VILLEMONTEIX et al., 1990), Estados Unidos (J ORGENSEN, 1997), Holanda
(KAMPINGA et al., 2000) e Sua (POSPISCHIL et al., 2002), confirmando seu
potencial zoontico e a necessidade de se conhecer a origem e o estado de sade dos
animais potencialmente transmissores do agente para diminuir os riscos de infeco
humana (VLAHOVI et al., 2006; RODOLASKIS; MOHAMAD, 2009).
A principal via de infeco para homens e animais atravs da ingesto do CE,
tendo sido igualmente relatadas a vias aergena (aerossol), contato direto com mucosas
e transmisso venrea, embora esta ltima ainda no tenha sido devidamente
comprovada (APPLEYARD et al., 1985; WILSMORE, 1986; J ONES; ANDERSON,
1988; TEAKUN, 2007). Aps a ocorrncia do aborto ou parto, um grande nmero de
clamdias pode ser encontrado nos fluidos e descargas vaginais ou uterinas, na placenta
e na pele dos fetos ou filhotes, sendo estas consideradas as principais fontes de
contaminao ambiental (LONGBOTTOM; COULTER, 2003). O agente pode ser
encontrado ainda em fezes e urina de ruminantes assim como no leite de cabras
(RODOLASKIS, 2001).
Considerando a via de infeco oral por ingesto dos CE, acredita-se que as
tonsilas representem o primeiro ambiente de multiplicao bacteriana, posteriormente
ocorre bacteremia quando as clamidfilas se disseminam pelo sistema linftico a outros
rgos (J ONES; ANDERSON, 1988). Nos casos de a infeco ocorrer em um animal
no gestante, essas bactrias permanecem no tecido linfide, em estado de latncia,
sendo difcil o seu diagnstico por mtodos laboratoriais (ENTRICAN et al., 2001;
NAVARRO et al., 2004).
Acredita-se que o comportamento epidemiolgico padro de disseminao do
agente em um rebanho livre seja, no primeiro ano, o de causar pequeno nmero de
abortos, resultado da introduo de animais infectados no plantel. No ano seguinte,
ocorre um boom de casos que varia de 30 a 90% de ocorrncia, seguido por uma fase
final enzotica, no terceiro ano, na qual as fmeas jovens so as principais afetadas;
estas geralmente esto em seu segundo ano de pario tendo sido infectadas no primeiro
ano. A partir de ento, a incidncia do aborto passa a ser cclica anual de 5 a 10%, a
menos que medidas de controle no sejam adotadas (RODOLASKIS, 2001;
LONGBOTTOM; COULTER, 2003).
Estudos mostraram que fmeas infectadas, na fase aguda da doena ou em
estado de latncia podem albergar C. abortus em seu trato reprodutivo por at trs anos
ps-infeco (MORGAN et al., 1988).
Quando ocorre a manifestao dos sinais clnicos, as fmeas gestantes podem
apresentar anorexia, febre e descarga vaginal sanguinolenta antecedendo o aborto,
enquanto as conseqncias podem ir alm do aborto como a ocorrncia de natimortos,
parto prematuro, nascimento de filhotes fracos e abaixo do peso, que na maioria das
vezes morrero, alm de pneumonia neonatal (RODOLASKIS et al., 1984).
Os mecanismos que provocam o aborto na clamidofilose ainda no foram bem
esclarecidos, mas acredita-se ser resultado da associao das leses epitlio corinicas
placentrias, que levam ao comprometimento da troca de oxignio e de nutrientes entre
me e feto, e das alteraes patolgicas fetais, principalmente necrose focal de fgado e
com menor freqncia, nos pulmes, bao, crebro e linfonodos (BUXTON et al., 1990;
2002). Um estudo de reviso sobre a imunopatogenia da clamidofilose em ovinos e
camundongos elenca que a infeco por C. abortus estimula resposta inflamatria
intensa no animal, principalmente pela ativao de interferons (IFN-) e fator de
necrose tumoral (TNF-), que pode tanto controlar o processo infeccioso como agravar
as alteraes patognicas. Alteraes nas concentraes plasmticas dos hormnios
progesterona e 17 estradiol e de prostaglandina E
2
no lquido aminitico e alantideo,
so conseqncias da infeco placentria pela C. abortus que tambm podem
desencadear um parto prematuro (KEER et al., 2005).
Porm, no mbito geral, as fmeas apresentam boa recuperao ps-aborto sem
apresentarem sinais de doena. Nas cabras, assim como nas vacas, pode ocorrer
reteno de placenta (fato incomum nas ovelhas) o que predispe metrite que, em
raros casos, poder causar a morte do animal por infeco bacteriana secundria
(RODOLASKIS & MOHAMAD, 2009).
O desenvolvimento dos sinais clnicos da clamidofilose depende do perodo em
que ocorreu a infeco. Geralmente, ovelhas e cabras que adquirem a infeco no
perodo de 5 a 6 semanas que antecedem o parto apresentaro sinais clnicos ainda na
gestao corrente, ao passo que, se os animais forem infectados durante as quatro
semanas antecedentes ao parto, provavelmente desenvolvero infeco latente com
manifestao clnica na gestao subseqente (MORGAN et al., 1988; WILSMORE et
al., 1990).
Em ovelhas, um estudo experimental evidenciou que fetos podem ser infectados
antes dos 60 dias de gestao, porm as alteraes patognicas como a multiplicao da
C. abortus nos trofoblastos levando necrose de placentomas, disseminao da infeco
pela placenta e endomtrio culminando com aborto, no se desenvolveram antes dos 90
dias de vida fetal (BUXTON et al., 1990).
Estudos tm demonstrado, com frequncia, alteraes de placenta como
placentite necrtica supurativa e necrose de epitlio corinico, evidenciados devido
infiltrao de clulas inflamatrias e incluses bacterianas nos trofoblastos, porm nos
fetos abortados a alterao mais significativa relatada foi a leucomalcia (BUXTON et
al., 2002; NAVARRO et al., 2004; SAMMIN et al., 2006).
Nos machos, as clamidfilas podem alcanar as vesculas seminais e testculos
causando vesiculite e epididimite em touros e carneiros (LOZANO, 1986). Um estudo
de prevalncia em reprodutores ruminantes, na Sua, evidenciou que 60% dos bodes,
47,1% dos touros e 34,8% dos carneiros avaliados eram sorologicamente positivos para
C. abortus, alm de ter sido detectado DNA bacteriano no smem fresco (touro) e
crioprerservado (touro e carneiro), o que sustenta a possibilidade de transmisso venrea
(TEANKUM, 2007).
A imunidade adquirida pelas fmeas infectadas por C. abortus foi considerada
eficiente e duradoura, dificilmente ocorrendo um segundo aborto, embora o contrrio
tenha sido demonstrado na infeco experimental (ENTRICAN et al., 2001;
LIVINGSTONE et al., 2005).
Acredita-se que prevenir a infeco placentria a chave para impedir os
distrbios reprodutivos, pois, uma vez que a bactria alcana a placenta, a resposta
imune no ocorre e acontece o aborto. Estudos tm buscado o desenvolvimento de
vacinas que mimetizem a resposta imune gerada aps o aborto, preferencialmente
aquela que se desenvolve aps a primeira infeco, para que sejam minimizadas as
perdas produtivas e econmicas alm do direcionamento de programas de controle e
profilaxia (ROCCHI et al., 2009).
O diagnstico de clamidofilose pode se feito por diversos mtodos. Vrias
tcnicas de colorao como as do Giemsa e Machiavello ou Ziehl-Neelsen modificadas,
para anlise direta em lminas com esfregao de material placentrio, produtos do
aborto, tecidos fetais ou swabs vaginais, constituem ferramentas teis, porm deve-se
considerar que nem sempre estar disponvel material placentrio e de aborto ou uma
fmea que tenha abortado nas ltimas 24 horas (DAGNALL; WILSMORE, 1990; OIE,
2004). Alm do mais uma srie de fatores podem interferir na acurcia destes testes
como I) tipo de amostra a ser analisada, II) viabilidade dos organismos nestes tecidos
que depende do transporte e do estado de conservao da amostra, III) possibilidade de
se ter uma suspeita diagnstica baseada em dados como sinais clnicos, alteraes
patognicas nas fmeas ou fetos e IV) histrico clnico do rebanho (SACHSE et al.,
2009).
Alguns testes padronizados para deteco de antgenos (lipopolissacardeos ou
principais protenas de membrana exterior do agente patognico) tambm so utilizados
como ELISA e Imunohistoqumica, porm de uma forma geral, as anlises diretas
fornecem resultados que apenas permitem a identificao dos antgenos como
pertencentes famlia Chlamydiaceae no identificando as espcies (OIE, 2004).
Pesquisa de anticorpos, atravs dos testes de Fixao do Complemento (RFC),
recomendado pela Organizao Internacional de Epizootias, ELISA,
Microimunofluorescncia e Imunofluorescncia Indireta podem ser utilizados. Mesmo
diante das dificuldades de padronizao e produo dos antgenos, as provas sorolgicas
so consideradas de fcil exequibilidade e adequadas para uso como testes de rotina
(MARKEY et al., 1993; OIE, 2004).
Para controle da enfermidade, fmeas ruminantes que abortaram assim como
gatos doentes e outros animais com clamidofilose devem ser isolados (por cerca de trs
semanas) ou eliminados da propriedade. Medidas de higiene pessoal, como lavagem das
mos e limpeza e desinfeco de calados, so teis para prevenir a disseminao da
infeco entre os animais. Da mesma maneira, limpeza e desinfeco das instalaes
aps casos de aborto e remoo de cama contaminada, placenta, fetos abortados ou
natimortos auxiliam a impedir a propagao da infeco. Quando possvel os animais do
rebanho que no estejam infectados devem ser mantidos em instalaes limpas e livres
das condies que propiciem a instalao e desenvolvimento da enfermidade. Embora
no confiram proteo completa e no sejam disponveis em muitos pases no mundo,
vacinas so recomendadas para os ruminantes, principalmente para programas de
erradicao em reas enzoticas, reduzindo a incidncia e a severidade dos abortos
(OIE, 2004).


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ARTIGO 1



PREVALNCIA E FATORES DE RISCO ASSOCIADOS INFECO POR
Toxoplasma gondii EM CAPRINOS NO ESTADO DE ALAGOAS
(Formatado para ser encaminhado para o peridico Revista da Sociedade
Brasileira de Medicina Tropical)







Prevalncia e fatores de risco associados infeco por Toxoplasma gondii em 1
caprinos no Estado de Alagoas 2
3
RESUMO: Objetivou-se com este estudo determinar a prevalncia e identificar os 4
fatores de risco associados infeco por Toxoplasma gondii em caprinos nas diferentes 5
Mesorregies do Estado de Alagoas. A pesquisa foi realizada em 10 municpios, sendo 6
analisadas 24 propriedades de produo caprina com aptido mista. Foram coletadas 7
amostras sanguneas de 454 animais para realizao da pesquisa de anticorpos anti- 8
Toxoplasma gondii atravs da prova sorolgica de Imunofluorescncia Indireta. Para o 9
estudo dos fatores de risco foram aplicados questionrios com questes referentes ao 10
sistema de produo e manejos nutricional, reprodutivo e sanitrio. A prevalncia 11
encontrada foi de 39% com 95,8% das propriedades apresentando animais positivos. Foi 12
observada associao significativa para as variveis: Mesorregio (OR =0,23; I.C. 95% 13
=0,09 0,57), idade (OR =0,36; I.C. 95% =0,20 0,64), sistema de criao semi- 14
intensivo (OR =8,70; I.C. 95% =1,87 40,43), acesso dos gatos gua fornecida aos 15
animais (OR = 3,38; I.C. 95% = 1,89 6,02) e gatos se alimentando de restos 16
placentrios (OR =2,73; I.C. 95% =1,38 5,40). Conclui-se que a infeco por T. 17
gondii est disseminada no Estado de Alagoas, sendo necessria a realizao de um 18
programa de monitoramento dos focos da infeco no Estado com objetivo de reduzir os 19
riscos da infeco por esse parasito. 20
Palavras-chave: Imunofluorescncia indireta, protozorio, epidemiologia. 21
22
23
Prevalence and risk factors associated to Toxoplasma gondii infection in goats in 24
Alagoas State. 25
ABSTRACT: Objective of this work was to determine the prevalence and the risk 26
factors concerning to Toxoplasma gondii infection in caprine in different Mesoregions 27
in the State of Alagoas. The research took place on 24 farms of goat breending from 10 28
municipalities. A total of 454 goat sera sample were examined for anti-T. gondii 29
antibodies by indirect immunofluorescence antibody test (IFIAT). The prevalence was 30
39% with 95,8% of farms presenting seropositive animals. The farms were analyzed by 31
questionnaires considering their production system, nutritional, reproductive and 32
sanitary management to evaluate the risks of toxoplasmosis in goats. Significant 33
association was observed to mesoregion (OR =0,23; I.C. 95% =0,09 0,57), age (OR 34
=0,36; I.C. 95% =0,20 0,64), semi-intensive herd management (OR =8,70; I.C. 95% 35
=1,87 40,43), cats accessing to water offered to animals (OR =3,38; I.C. 95% =1,89 36
6,02) and cats eating placental remnants (OR =2,73; I.C. 95% =1,38 5,40). It was 37
concluded that T. gondii infection is spread in the State of Alagoas and adoption of 38
monitoring program to infection focus is necessary to reduce the risks of infection to 39
this parasite. 40
Key words: Indirect immunofluorescence, protozoan, epidemiology. 41
42
43
44
45
46
INTRODUO 47
Toxoplasma gondii o coccdeo mais estudado no mundo com mais de 15.000 48
artigos de pesquisas originais, ultrapassando 500 revises publicadas, sendo um dos 49
agentes mais comuns em infeces parasitrias dos animais homeotrmicos, incluindo o 50
homem (TENTER et al., 2000). 51
Para os animais domsticos, a ingesto de oocistos esporulados provenientes das 52
fezes de gatos a mais importante via de infeco. Os gatos so considerados os 53
principais mantenedores do ciclo da toxoplasmose que pode ser considerada rara ou 54
inexistente em ambientes onde no existam gatos (DUBEY et al., 1997). 55
Caprinos so considerados muito sensveis infeco por T. gondii e quando 56
infectados durante a gestao apresentam parasitemia na primeira semana ps-infeco 57
e, em sequncia, na segunda e terceira semana a placenta e o feto estaro infectados, 58
respectivamente (DUBEY, 1988). A infeco causa morte fetal com subseqente 59
reabsoro, aborto, mumificao, natimortos ou nascimento de cabritos fracos 60
(ENGELAND et al., 1996). 61
Diversos estudos de prevalncia de anticorpos anti-T. gondii em caprinos foram 62
desenvolvidos em diversos pases pelo mundo destacando-se aqueles realizados nos 63
Estados Unidos (DUBEY; ADAMS, 1990), Venezuela (NIETO; MELNDEZ, 1998), 64
Brasil (CARNEIRO et al., 2009), Espanha (RODRGUEZ-PONCE et al., 1995), Ghana 65
(VAN DER PUIJ E et al., 2000), Uganda (BISSON et al., 2000) e Tailndia 66
(J ITTAPALAPONG et al., 2005). 67
Dados da infeco e prevalncia de anticorpos anti-T. gondii em trabalhos 68
realizados no Brasil evidenciaram a necessidade de se incluir o protozorio entre as 69
causas de perdas reprodutivas em rebanhos caprinos no pas (PESCADOR et al., 2007). 70
Contudo, ainda considera-se que poucos pases no mundo monitoram de forma regular a 71
toxoplasmose em humanos e menos ainda em animais (TENTER et al., 2000). 72
Dentre os principais fatores de risco para infeco por T. gondii em caprinos 73
demonstrados por diversos estudos esto o sexo e a idade, principalmente representados 74
por fmeas adultas, ndice pluviomtrico e de umidade elevados alm de temperaturas 75
amenas nas regies de criao, (VAN DER PUIJ E et al., 2000; J ITTAPALAPONG et 76
al., 2005), sistema de manejo (NETO et al., 2008), comedouros e bebedouros comuns a 77
jovens e adultos e presena de gatos e animais com distrbios reprodutivos nas 78
propriedades (ENGELAND et al., 1996; FIGLIUOLO et al., 2004; CAVALCANTE et 79
al., 2008;). 80
Objetivou-se com este trabalho determinar a prevalncia da infeco por T. 81
gondii em caprinos no Estado de Alagoas e identificar os fatores de risco associados 82
infeco. 83
84
MATERIAL E MTODOS 85
rea de estudo 86
O Estado de Alagoas est localizado na Macrorregio Nordeste do Brasil entre 87
os paralelos 84812 e 1030'12" de latitude sul e os meridianos 3509'36" e 3813'54" 88
de longitude oeste, cobrindo uma rea territorial de 27.767,661 km o que corresponde a 89
0,3% do territrio nacional. Situa-se na faixa intertropical, recebendo desta forma 90
grande quantidade de energia solar durante todo o ano, com variao de 2200 a 2600 91
horas de sol, o que determina a existncia de climas quentes com temperaturas anuais 92
em torno de 22C a 28C (UFAL-GEM, 1994). O Estado de Alagoas dividido em trs 93
Mesorregies: Leste Alagoano, Agreste Alagoano e Serto Alagoano e em 13 94
Microrregies Geogrficas (IBGE, 2009). 95
Amostragem 96
Para efeito de clculo da amostra, considerou 97
que maximiza o tamanho da amostra. Trabalhou 98
95% e erro estatstico de 5%. Desta forma, o tamanho amostral (n) a se trabalhar seria 99
de 385 animais (Thrusfield, 2004), porm optou 100
machos e 414 fmeas) procedentes de 24 propriedades em 10 munic 101
102
Figura 1: Distribuio dos municpios estudados nas trs Mesorregies de Alagoas 103
Os animais foram includos 104
24 meses. Quanto regio de origem, 105
propriedades situadas nas trs Mesorregies alagoanas: 106
Deteco de anticorpos anti-T. gondii 107
Para o exame sorolgico empregou 108
(RIFI), utilizando-se anticorpos anti 109
fluorescena da marca Sigma-Chemical 110
Doenas Infecciosas da UFRPE segundo o mtodo descrito por Camargo (1974). As 111

1
Anti-corpo anti-igG de cabra (molec int). Sigma
de clculo da amostra, considerou-se prevalncia esperada de 50% o
o tamanho da amostra. Trabalhou-se ainda com confiana mnima de
95% e erro estatstico de 5%. Desta forma, o tamanho amostral (n) a se trabalhar seria
de 385 animais (Thrusfield, 2004), porm optou-se por trabalhar com 454 amostras (40
machos e 414 fmeas) procedentes de 24 propriedades em 10 municpios (figura 1)
Figura 1: Distribuio dos municpios estudados nas trs Mesorregies de Alagoas
includos em trs grupos etrios: 12 meses, 13-24 meses
. Quanto regio de origem, trabalhou-se com rebanhos oriundos de
propriedades situadas nas trs Mesorregies alagoanas: Leste, Agreste e Serto.
T. gondii
exame sorolgico empregou-se a tcnica de Imunofluorescncia Indireta
nticorpos anti-IgG-caprina conjugado ao isotiocianato de
Chemical
1
. Os testes foram realizados no Laboratrio de
Doenas Infecciosas da UFRPE segundo o mtodo descrito por Camargo (1974). As
Sigma-Aldrich Brasil Ltda. CGC No. 68.337.658/0001-27
prevalncia esperada de 50% o
confiana mnima de
95% e erro estatstico de 5%. Desta forma, o tamanho amostral (n) a se trabalhar seria
se por trabalhar com 454 amostras (40
(figura 1).

Figura 1: Distribuio dos municpios estudados nas trs Mesorregies de Alagoas
24 meses e >
se com rebanhos oriundos de

se a tcnica de Imunofluorescncia Indireta
conjugado ao isotiocianato de
. Os testes foram realizados no Laboratrio de
Doenas Infecciosas da UFRPE segundo o mtodo descrito por Camargo (1974). As
reaes sorolgicas foram consideradas positivas quando apresentaram fluorescncia 112
total na diluio 1:64 conforme Garcia et al. (1999). 113
Anlise estatstica 114
Para o estudo dos fatores de risco foram aplicados questionrios constitudos de 115
perguntas objetivas, relativas a informaes sobre o criador, caractersticas gerais da 116
propriedade e do rebanho, sistema de manejo, situao sanitria do rebanho e manejo 117
reprodutivo. A partir dos dados coletados, a identificao dos fatores de risco 118
associados infeco por T. gondii foi realizada por meio da anlise univariada das 119
variveis de interesse atravs do teste qui-quadrado de Pearson ou Exato de Fisher 120
quando necessrio (ZAR, 1999) e quando encontrada associao positiva na anlise 121
univariada foi realizada anlise multivariada atravs do modelo de regresso logstica 122
considerando como varivel dependente o status sorolgico do animal (positivo ou 123
negativo) para T. gondii. Utilizou-se o programa SAS - Statistical Analysis System para 124
a execuo dos clculos estatsticos com nvel de significncia de p<0,05. 125
126
RESULTADOS 127
Das 454 amostras analisadas observou-se que 177 (39,0%) foram positivas para 128
pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e 277 (61,0%) negativas. Em relao 129
titulao observou-se que 24 (13,6%) animais apresentaram ttulo 64; 31 (17,5%) 128; 130
73 (41,3%) 256; 40 (22,5%) 512 e 9 (5,1%) 1024. 131
Das 24 propriedades utilizadas nesse estudo, 95,8% apresentaram animais 132
positivos enquanto que dos dez municpios analisados, nove (90,0%) apresentaram 133
animais positivos. Quanto ao sexo houve predominncia de fmeas que apresentaram 134
40,0% de positividade contra 25,0% para machos. 135
As Mesorregies Leste e Agreste apresentaram as maiores prevalncias, sendo 136
estas de 66,2% e 41,2%, respectivamente. O sistema de manejo extensivo foi o que 137
apresentou maior prevalncia (83,3%) dentre os soropositivos, assim como os rebanhos 138
com mais de 100 cabeas (80,0%) e as propriedades com menos de 30 hectares (48,1%). 139
Quanto aos fatores de risco, as variveis sexo, idade, regio, tamanho da 140
propriedade, nmero de animais e sistema de criao, associadas ou no infeco por 141
T. gondii determinadas pela anlise univariada e multivariada encontram-se nas tabelas 142
1 e 5. No se observou associao significativa para a varivel sexo, embora a 143
prevalncia nas fmeas tenha sido consideravelmente maior que nos machos. 144
De acordo com a distribuio da idade, observou-se maior prevalncia nos 145
animais adultos (27,6% naqueles entre 12-24 meses e 50,4% para os de idade >24 146
meses). Entretanto, no houve associao significativa para este fator. As 147
soroprevalncias observadas nas Mesorregies Leste (66,2%) e Agreste (41,2%) 148
tambm no apresentaram associao com a infeco por T. gondii na anlise 149
multivariada. 150
Quanto ao tamanho das propriedades observou-se que animais mantidos 151
naquelas de tamanho entre 30-200 ha tm chance significativamente maior de se 152
infectarem (OR=3,46) em relao queles criados em propriedades acima de 200 ha. 153
Considerando o tamanho do rebanho observou-se alta prevalncia naqueles com 154
mais de 100 animais (80%), comparado com aqueles formados por menos de 50 (48%) 155
e entre 50-100 (15,4%) caprinos. Em relao ao sistema de criao, os animais mantidos 156
sob manejo do tipo semi-intensivo apresentaram maior risco de infeco por T. gondii 157
(OR=8,7) quando comparado ao manejo extensivo. 158
159
160
Tabela 1 Fatores de risco de acordo com as caractersticas gerais da propriedade e do 161
rebanho associados ou no infeco por Toxoplasma gondii em caprinos no Estado de 162
Alagoas, 2008 163
Varivel N
RIFI
n (%)
Anlise Univariada
OR (I.C.95%) p
Idade (meses)
12
Entre 12 e 24
24
83
105
266
14 (16,9)
29 (27,6)
134 (50,4)
1,0
1,88 (0,87 ; 4,14)
2,66 (1,59 ; 4,48)
<0,001*


Sexo
Macho
Fmea
40
414
10 (25,0)
167 (40,4)
1,0
2,03 (0,93 ; 4,77)
0,057

Regio
Serto
Agreste
Leste
121
268
65
22 (18,2)
112 (41,2)
43 (66,2)
1,0
3,23 (1,88 ; 5,72)
2,72 (1,49 ; 5,05)
<0,001*


Tamanho da Propriedade (ha)
<30
Entre 30 e 200
Acima de 200
256
65
133
123 (48,1)
10 (15,4)
44 (33,1)
1,0
0,20 (0,09 ; 0,41)
2,72 (1,22 ; 6,54)
<0,001*


N de animais (cabeas)
<50
Entre 50 e 100
Acima de 100
284
165
5
149 (52,5)
24 (14,5)
4 (80,0)
1,0
0,15 (0,09 ; 0,26)
23,50 (2,14; 1164,97)
<0,001*


Sistema de criao
Intensivo
Extensivo
Semi-intensivo
34
18
402
12 (35,3)
15 (83,3)
150 (37,3)
1,0
9,17 (1,94 ; 56,61)
0,12 (0,02 ; 0,43)
<0,001*


N: nmero de animais; RIFI: reao de imunofluorescncia indireta; OR: odds ratio; IC: intervalo de 164
confiana.
+
Base =381 caprinosBase =432 caprinos; *estatisticamente significante 165
166
Os resultados da anlise univariada e multivariada para as variveis fonte de 167
gua, alimentao, bebedouro comum para jovens e adultos e comedouros comuns para 168
jovens e adultos encontram-se nas tabelas 2 e 5. Embora pela anlise univariada as 169
variveis fonte de gua, bebedouros comuns para jovens e adultos e comedouros 170
comuns para jovens e adultos tenham apresentado associao significativa isso no foi 171
confirmado na anlise multivariada. 172
Em relao ao manejo reprodutivo e higinico-sanitrio, a presena de animais 173
com distrbios reprodutivos, a idade dos que apresentavam os distrbios e o tipo de 174
manejo reprodutivo adotado foram significativos na anlise univariada (Tabela 3). 175
Tabela 2 Fatores de risco de acordo com o manejo alimentar, associados ou no 176
infeco por Toxoplasma gondii em caprinos no Estado de Alagoas, 2008 177
Varivel N
RIFI
n (%)
Anlise Univariada
OR (I.C.95%) P
Fonte de gua
Parada
Corrente
Parada +Corrente
194
142
118
68 (35,1)
49 (34,5)
60 (50,8)
1,0
0,98 (0,60 ; 1,58)
1,96 (1,16 ; 3,34)
<0,001*


Bebedouros comuns para jovens
e adultos
No
Sim
86
368
49 (57,0)
128 (34,8)
1,0
2,48 (1,50 ; 4,13)
<0,001*

Alimentao
Sem suplementao
Com suplementao
125
329
50 (40,0)
127 (38,6)
1,0
0,94 (0,61 ; 1,47)

0,785

Comedouros comuns para jovens
e adultos
No
Sim
56
398
40 (71,4)
137 (34,4)
1,0
4,76 (2,49 ; 9,43)

<0,001*

N: nmero de animais; RIFI: reao de imunofluorescncia indireta; OR: odds ratio; IC: intervalo de 178
confiana.
*
estatisticamente significativa. 179
180
Tabela 3 Fatores de risco de acordo com o manejo reprodutivo, associados ou no 181
infeco por Toxoplasma gondii em caprinos no Estado de Alagoas, 2008 182
Varivel N
RIFI
n (%)
Anlise Univariada
OR (I.C.95%) p
Presena de animais com distrbios
reprodutivos na propriedade
No
Sim
126
328
31 (24,6)
146 (44,5)
1,0
0,41 (0,25 ; 0,66)
<0,001*

Problemas observados
+
Repetio do cio
Reteno de placenta
Aborto associado
7
16
305
5 (71,4)
10 (62,5)
131 (43,5)
1,0
0,67 (0,05 ; 6,04)
0,45 (0,13 ; 1,42)
0,108


Idade dos que apresentaram distrbio
reprodutivo
+
<1 ano
Entre 1 e 3 anos
>3 anos
37
130
161
20 (54,1)
70 (53,8)
56 (34,8)
1,0
0,99 (0,44 ; 2,20)
0,46 (0,28 ; 0,75)
0,002*

Manejo reprodutivo
Monta natural
Monta natural +outras biotcnicas

391
63

168 (42,3)
9 (14,3)

1,0
0,22 (0,09 ; 0,47)

<0,001*


Aquisio de fmeas reprodutoras de
reposio nos ltimos cinco anos
No
Sim
235
219
90 (38,3)
87 (39,7)
1,0
0,94 (0,63 ; 1,40)
0,755

Aquisio de machos reprodutores de
reposio nos ltimos cinco anos
No
Sim
174
280
71 (40,8)
106 (37,9)
1,0
1,13 (0,75 ; 1,70)


0,531
N: nmero de animais; RIFI: reao de imunofluorescncia indireta; OR: odds ratio; IC: intervalo de 183
confiana. Base =328 caprinos; * estatisticamente significativa 184
185
Contudo, apenas a varivel tipo de manejo reprodutivo apresentou associao 186
significativa na anlise multivariada. A condio de a propriedade adotar o sistema de 187
monta natural aumenta a chance de infeco (OR=6,49). Das 24 propriedades, 17 188
(70,8%) apresentaram distrbios reprodutivos sendo aborto o mais observado (88,2%), 189
seguido por reteno de placenta (5,9%) e repetio de cio (5,9%). 190
Tabela 4 Fatores de risco de acordo com o hospedeiro definitivo, associados ou no 191
infeco por Toxoplasma gondii em caprinos no Estado de Alagoas, 2008 192
Varivel N
RIFI
n (%)
Anlise Univariada
OR (I.C.95%) p
Presena de gatos na
propriedade
No
Sim
79
375
35 (44,3)
142 (37,9)
1,0
1,31 (0,77 ; 2,19)
0,286

Circulao de gatos das
propriedades vizinhas
No
Sim
29
425
7 (24,1)
170 (40,0)
1,0
0,48 (0,17 ; 1,19)
0,090

Circulao de animais silvestres

No
Sim
126
328
58 (46,0)
119 (36,3)
1,0
1,50 (0,97 ; 2,32)

0,056

Acesso dos gatos a gua
fornecida aos animais

No
Sim
310
144
92 (29,7)
85 (59,0)
1,0
0,29 (0,19 ; 0,45)
<0,001*

Acesso dos gatos em locais que
estocam alimentos fornecidos aos
animais
+

No
Sim
252
129
110 (43,7)
56 (43,4)
1,0
1,01 (0,64 ; 1,59)
0,964

Gatos se alimentam de restos
placentrios
No 346 109 (31,5) 1 <0,001*
Sim 95 61 (64,2) 0,26 (0,15 ; 0,42)
N: nmero de animais; RIFI: reao de imunofluorescncia indireta; OR: odds ratio; IC: intervalo de 193
confiana. Base =381 caprinos, *estatisticamente significativa. 194
195
Quando da anlise dos fatores de risco envolvendo o hospedeiro definitivo do 196
agente, o acesso dos gatos a gua fornecida aos animais (OR=3,38) e o fato de se 197
alimentarem de restos placentrios (OR=2,73) foram variveis significativas e 198
associadas ao risco de infeco por T. gondii conforme demonstrado nas tabelas 4 e 5. 199
Tabela 5 Anlise multivariada para os fatores de risco associados ou no infeco 200
por Toxoplasma gondii em caprinos no Estado de Alagoas, 2008 201
Varivel Coeficiente p-value
Odds
Ratio
I.C 95% p/ o odds
ratio
Regio 0,006
Agreste -0,75 0,044 0,15 [ 0,03 ; 0,63 ]
Leste -0,36 0,070 0,23 [ 0,09 ; 0,57]
Idade (meses)
Entre 12 e 24
>=24 meses

-1,01
-0,00
<0,001
<0,0010
0,990

0,13
0,36

[ 0,06 ; 0,26 ]
[ 0,20 ; 0,64 ]
rea (ha) 0,001
Entre 30 e 200 0,85 <0,001 3,46 [ 1,58 ; 7,56 ]
Acima de 200 -0,46 0,196 0,92 [ 0,28 ; 3,04 ]
Sistema de criao
Extensivo
Semi-intensivo

-0,60
1,38
0,021
0,164
0,010

1,18
8,70

[ 0,40 ; 3,45 ]
[ 1,87; 40,43 ]
Suplementao alimentar
(sim/no)

-034

0,019

0,50

[ 0,28 ; 0,89 ]
Comedouros comum
(sim/no) -0,87 <0,001 0,17 [ 0,06 ; 0,44 ]
Manejo reprodutivo
(Monta natural/ Monta natural +outras
biotcnicas) 0,93 <0,001 6,49 [ 2,54 ; 16,55]
Circulao de animais silvestres

(sim/no) -,062 <0,001 0,28 [ 0,16 ; 0,50]
Acesso dos gatos a gua fornecida aos
animais

(sim/no) 0,60 <0,001 3,38 [ 1,89 ; 6,02]
Gatos se alimentam de restos
placentrios
(sim/no) 0,50 0,003 2,73 [ 1,38 ; 5,40]
202
203
DISCUSSO 204
A prevalncia mdia encontrada neste estudo (39%) est acima das mdias 205
nacional e regional que so de 29,3% e 27,65%, respectivamente. semelhante s 206
encontradas por Linhares et al. (1990) no municpio de Goinia (43,1%), Sella et al. 207
(1994) na Microrregio de Londrina (30,71%), Gondim et al. (1999) na Bahia (28,93%), 208
Silva et al. (2003) em Pernambuco (40,4%), Neto et al. (2008) no Rio Grande do Norte 209
(30,6%) e Carneiro et al. (2009) em Minas Gerais (45,8%). Diverge, entretanto, de 210
outros trabalhos como os realizados por Mainardi et al. (2000) em So Paulo (14,47%), 211
Figueiredo et al. (2001) em Uberlndia (19%), Uzda et al. (2004) na Bahia (16,4%), 212
Figliuolo et al. (2004) em So Paulo (28,7%), Faria et al. (2007) na Paraba (24,5%) e 213
Cavalcante et al. (2008) no Cear (25,1%). 214
A dimenso geogrfica do Brasil com toda sua diversidade climtica pode ser 215
um fator de influncia na variao das prevalncias assim como o teste utilizado e o 216
respectivo ponto de corte adotado. Alm disto, para alguns autores como Figliuolo et al. 217
(2004), animais mantidos em reas suburbanas com precrias condies de higiene e em 218
contato com pessoas e seus animais domsticos so fatores que podem explicar o 219
aumento da soropositividade do rebanho. 220
Embora no tenha sido estatisticamente significativa na anlise multivariada, a 221
maior prevalncia observada nas fmeas (40,4%) corrobora com outros estudos como o 222
de Bisson et al. (2000) e Carneiro et al. (2009). Discordando, no entanto, de Silva et al. 223
(2003) e J ittapalapong et al. (2005) onde a varivel sexo foi um fator significativo 224
(OR=2,91 e OR=1,73, respectivamente) como determinante da infeco por T. gondii. 225
Van der Puije et al. (2000) tambm reforaram a hiptese de que as fmeas so 226
mais suscetveis infeco, forma severa da doena e a maiores taxas de mortalidade 227
por T. gondii, principalmente se os rebanhos estiverem em zonas florestais 228
caracteristicamente quentes e midas, o que coincide com os resultados dessa 229
investigao. Alm do mais, Roberts et al. (2001) afirmaram que sob condies 230
controladas de laboratrio, evidente uma dicotomia na suscetibilidade entre machos e 231
fmeas, evidenciando que as diferenas fisiolgicas entre estes, principalmente de 232
carter hormonal, desempenham papel importante na determinao da suscetibilidade s 233
infeces parasitrias. 234
Os resultados na anlise univariada demonstraram associao positiva para os 235
adultos em relao aos jovens apesar de no ter sido significativa na anlise 236
multivariada. Resultados semelhantes foram descritos por Linhares et al. (1990) e 237
J ittapalapong et al. (2005) que tambm encontraram animais acima de um ano de idade 238
apresentando maior porcentual de soropositividade em relao aos de idade inferior a 12 239
meses. Figliuolo et al. (2004) demonstraram ainda que a soropositividade esteve 240
diretamente relacionada idade enquanto que Van der Puije et al. (2000) e Figueiredo et 241
al. (2001) relataram que o fator idade foi significativo para a ocorrncia de infeco por 242
T.gondii em animais com idade acima dos 24 meses e 36 meses, respectivamente. 243
provvel que os animais adultos dos rebanhos avaliados, pelo tempo de vida que 244
alcanam nas criaes caprinas de subsistncia no Estado de Alagoas, exponham-se 245
mais frequentemente a variados fatores predisponentes ou fontes de infeco no 246
ambiente e, portanto, apresentem maior ndice de infeco. 247
Dentre as Mesorregies estudadas, embora no se tenha observado significncia 248
na anlise multivariada, as Mesorregies Leste e Agreste apresentaram associao 249
significativa para a infeco por T. gondii na anlise univariada. No Agreste alagoano, 250
embora seja uma zona climtica de transio por estar entre o Leste e o Serto, o clima 251
semi-rido no to marcante havendo considervel umidade na regio, e segundo Di 252
Pace e Di Pace (1999) o volume de precipitao de chuvas e o perodo em que a 253
umidade na regio do Agreste alagoano se mantm cerca de 2,5 vezes maior que no 254
Serto. Isto pode ser um fator relevante para altas taxas de infeco encontradas neste 255
estudo, corroborando com Gondim et al. (1999) na Bahia, Rodrguez-Ponce et al. 256
(1995) na Espanha e J ittapalapong et al. (2005) na Tailndia que mostraram que regies 257
de alta umidade e temperatura mais amena favorecem as altas prevalncias. Entretanto, 258
de acordo com Bisson et al. (2000), na frica, pode ser um equvoco atribuir-se 259
diferenas de prevalncias a altos ndices pluviomtricos, devendo-se voltar a ateno 260
para o tipo de solo e sua cobertura vegetal que afetam a umidade local proporcionando 261
existncia de micro climas favorveis a manuteno dos oocistos. 262
No Leste alagoano, o clima tropical litorneo mido e de temperatura mdia 263
anual em torno dos 25C, tpico da Mata Atlntica, propcio manuteno dos 264
oocistos de T. gondii o que condiz com os resultados encontrados por Silva et al. (2003) 265
no Estado de Pernambuco, Brasil, cujo clima semelhante ao de Alagoas, notadamente 266
entre a Zona da Mata pernambucana e o Leste alagoano, onde foram registradas maiores 267
positividades. 268
Com relao ao tamanho das propriedades estudadas, observou-se que aquelas 269
entre 30-200 hectares apresentaram associao significativa em relao infeco 270
(OR=3,46) na anlise multivariada. Em propriedades desta natureza os animais 271
geralmente pastam mais ao longe, favorecendo o contato com reas que possam ser 272
frequentadas por feldeos domsticos ou silvestres e estejam contaminadas com oocistos 273
esporulados. 274
O manejo em uma propriedade voltada para a produo animal constitui pea 275
fundamental na profilaxia ou como fator favorecedor ou potencializador da 276
disseminao de enfermidades em um rebanho. Neste estudo, o sistema de manejo 277
semi-intensivo apresentou-se como fator de risco significativamente associado 278
infeco por T. gondii (OR=8,7). Este sistema de criao permite que os caprinos 279
entrem em contato com oocistos excretados nas fezes de feldeos silvestres ou 280
domsticos aumentando a probabilidade de infeco como observado por Neto et al. 281
(2008) no Rio Grande do Norte. Ainda, neste estudo foi observado que o sistema de 282
manejo extensivo (OR=1,18) est associado infeco conforme demonstrado 283
anteriormente por Cavalcante et al. (2008) no Cear que afirmaram que neste sistema de 284
manejo, naquelas regies de baixas condies scio-econmicas onde a caprinocultura 285
de subsistncia comum que noite os animais sejam confinados. 286
A existncia de comedouros e bebedouros comuns para jovens e adultos no foi 287
confirmada como fator de risco no presente trabalho apesar de ter sido significativo na 288
anlise univariada. Cavalcante et al. (2008) afirmaram que caprinos de rebanhos 289
alimentados em cocho de madeira tm 7,81 vezes mais chances de se infectarem com T. 290
gondii em comparao com os animais sem acesso a estes cochos. Segundo os autores, 291
a porosidade e ranhuras do material utilizado na fabricao dos cochos e sua capacidade 292
de reter umidade favorecem a persistncia dos oocistos fornecendo-lhes abrigo e 293
aumentando os riscos de infeco. 294
A presena de animais com distrbios reprodutivos e com idade entre um e trs 295
anos nas propriedades apresentou associao significativa na anlise univariada embora 296
no tenha sido confirmado na anlise multivariada. De acordo com os estudos de Van 297
der Puije et al. (2000) e Figueiredo et al. (2001) sabe-se que as fmeas nesta idade so 298
mais suscetveis e que os distrbios reprodutivos nesta fase tornam-se mais evidentes no 299
rebanho. Engeland et al. (1996) afirmaram que na maioria dos rebanhos as perdas fetais 300
ocorrem em fmeas com idade igual ou superior a trs anos. 301
A condio de a propriedade adotar o sistema de monta natural aumenta o risco 302
de infeco (OR=6,49) por T. gondii. Mesmo diante de tal resultado, no possvel 303
concluir que possa haver transmisso venrea neste estudo embora Dubey e Sharma 304
(1980) trabalhando com caprinos experimentalmente infectados tenham demonstrado 305
que os machos podem excretar o parasito no smem por at 52 dias. 306
Apesar de a simples presena de gatos na propriedade no ter constitudo fator 307
de risco neste estudo, algumas caractersticas associadas aos hbitos destes animais 308
foram significativas como o acesso gua de bebida do rebanho (OR=3,38) e o fato de 309
alimentarem-se de restos placentrios (OR=2,73). Cavalcante et al. (2008) concluram 310
que a presena de gatos se constitui em fator de risco para a toxoplasmose caprina. 311
Dubey e Livingston (1986), em estudo com a espcie caprina no Texas, Estados Unidos, 312
atriburam a no deteco de anticorpos anti-T. gondii ausncia de gatos nas 313
propriedades daquela regio. Gondim et al. (1999), Bisson et al. (2000) e Cavalcante et 314
al. (2008), em estudos semelhantes associaram as maiores prevalncias encontradas nos 315
rebanhos caprinos presena de alta densidade populacional de gatos, animais de 316
companhia, roedores e seres humanos nas propriedades o que ocasionou maior 317
disponibilidade tanto de hospedeiros definitivos quanto de intermedirios do parasito 318
aumentando as chances de infeco. 319
320
CONCLUSO 321
Relata-se pela primeira vez a prevalncia de anticorpos contra T. gondii em 322
caprinos no Estado de Alagoas. De acordo com os fatores de risco identificados 323
necessria a realizao de um programa de monitoramento dos focos da infeco no 324
Estado atravs do acompanhamento do status sorolgico tanto dos rebanhos estudados 325
como daqueles ainda no avaliados para esta e outras enfermidades, assim como o 326
desenvolvimento de trabalhos educativos que instruam e orientem os produtores de 327
caprinos com relao a esta enfermidade, no intuito de controlar os fatores de risco 328
identificados neste estudo e promover melhor sanidade dos rebanhos. 329
330
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459




ARTIGO 2



PREVALNCIA DE ANTICORPOS ANTI-Neospora caninum EM CAPRINOS
NO ESTADO DE ALAGOAS, BRASIL
(Formatado para ser encaminhado para o preidico Memrias do Instituto
Oswaldo Cruz)




Prevalncia de Neospora caninum em caprinos 1
2
RESUMO: Objetivou-se com este estudo determinar a prevalncia de anticorpos anti- 3
Neospora caninum em caprinos no Estado de Alagoas alm de identificar os fatores de 4
risco associados infeco por este parasito. A pesquisa foi realizada em 10 municpios, 5
sendo analisadas 24 propriedades de produo caprina com aptido mista. Foram 6
coletadas amostras sanguneas de 454 animais para realizao da pesquisa de anticorpos 7
anti-N. caninum atravs da tcnica de Imunofluorescncia Indireta. Em cada 8
propriedade foi aplicado questionrio investigativo com questes referentes ao sistema 9
de produo e manejos nutricional, reprodutivo e sanitrio. A prevalncia encontrada foi 10
de 5,3% com 62,5% das propriedades apresentando pelo menos um animal positivo. 11
No foi observada associao significativa para as variveis referentes aos fatores de 12
risco pesquisados. A existncia de focos de infeco nas diferentes Mesorregies do 13
Estado indica que N. caninum est disseminado e pode representar um importante 14
agente infeccioso envolvido em distrbios reprodutivos nos rebanhos caprinos na regio 15
estudada. 16
Palavras-chave: Neosporose, protozorio, epidemiologia. 17
18
19
20
21
Prevalence of Neospora caninum in goats 22
23
ABSTRACT: The objective of this work was to determine the prevalence and identify 24
the risks concerning to Neospora caninum infection in goats in the State of Alagoas. 25
The research was made on 24 farms of goat breeding from 10 municipalities. A total of 26
454 goat sera sample were examined for anti-N. caninum antibodies through out indirect 27
immunofluorescence antibody test (IFAT). Each farm was investigated by 28
questionnaires about system of production, nutritional, reproductive and sanitary 29
management. The prevalence was 5,3% with 62,5% of farms presenting at least one 30
seropositive animal. No significant association was observed to variables of risck 31
factors searched in this study. The existence of infection foci in different mesoregions of 32
the State evidence that N. caninum is disseminated and can be turning an important 33
agent involved in reproductive infectious on goat herds on the studied region. 34
Key words: Neosporosis, protozoan, epidemiology. 35
36
37
38
39
INTRODUO 40
A neosporose uma protozoose provocada por um parasito intracelular 41
obrigatrio, Neospora caninum, que pertence ao filo Apicomplexa, famlia 42
Sarcocystidae. A enfermidade descrita principalmente associada a casos de aborto e 43
mortalidade neonatal em bovinos, sendo o agente um dos mais eficientemente 44
transmitidos pela via transplacentria nesta espcie (Dubey, 2003). Entretanto, diversos 45
trabalhos relataram o isolamento do agente em tecidos de ovinos (Woods et al. 1994), 46
caprinos (Barr et al. 1992), bfalos (Rodrigues et al. 2004) e animais silvestres 47
(Ferroglio et al. 2003; Dubey & Thulliez 2005) assumindo importncia nos aspectos 48
reprodutivos destas espcies. 49
Os hospedeiros intermedirios (bovinos, ces, ovinos, caprinos e diversos 50
animais silvestres) adquirem a infeco por meio da ingesto de gua ou alimento 51
contaminados com oocistos esporulados, caracterizando a transmisso horizontal ou 52
ps-natal. Porm, a transmisso transplacentria tambm denominada transmisso 53
vertical ou congnita, apesar de ser a principal via para os bovinos foi demonstrada 54
experimentalmente em outras espcies como ces (Dubey & Lindsay 1989b; Cole et al. 55
1995b) gatos (Dubey & Lindsay 1989a), ovelhas (Mcallister et al. 1996) e 56
camundongos (Cole et al. 1995a). 57
Estudos de prevalncia de anticorpos anti-N. caninum em caprinos foram 58
realizados na Amrica do Sul (Figliuolo et al. 2004; Moore et al. 2007) e ainda em 59
alguns pases do mundo como o Sri Lanka (Naguleswaran et al. 2004) e J ordnia (Al- 60
Majali et al. 2008), porm ainda em nmero discreto e pouco expressivo quando 61
comparado ao nmero de artigos publicados na espcie bovina. 62
Dentre os principais fatores de risco para infeco por N. caninum em caprinos 63
demonstrados em alguns estudos esto o sexo (Moore et al. 2007) e a idade, 64
principalmente representados por animais adultos, presena de ces (Al-Majali et al. 65
2008) e sistema de manejo nas propriedades (Uzda et al. 2007). 66
Poucos casos de aborto ou doena congnita foram relatados e relacionados 67
infeco natural por N. caninum em caprinos. Estudos so necessrios para determinar o 68
papel do agente como causa natural de aborto em pequenos ruminantes, notadamente os 69
caprinos, uma vez que alm do isolamento do agente em produtos de aborto e 70
identificao de leses placentrias em animais naturalmente infectados, inoculaes 71
experimentais durante a gestao provocaram condio muito semelhante observada 72
em bovinos (Lindsay et al. 1995; Dubey et al. 1996a; Corbellini et al. 2001; Buxton et 73
al. 2002). 74
Objetivou-se com este estudo determinar a prevalncia de anticorpos anti-N. 75
caninum em caprinos no Estado de Alagoas e identificar os fatores de risco associados 76
infeco por este parasito. 77
78
MATERIAL E MTODOS 79
rea de estudo 80
O estudo foi realizado no estado de Alagoas que localiza-se na Macrorregio 81
Nordeste do Brasil entre os paralelos 84812 e 1030'12" de latitude sul e os 82
meridianos 3509'36" e 3813'54" de longitude oeste, cobrindo uma rea territorial de 83
27.767,661 km o que corresponde a 0,3% do territrio nacional. Situa-se na faixa 84
intertropical, recebendo desta forma grande quantidade de energia solar durante todo o 85
ano, com variao de 2200 a 2600 horas de sol, o que determina a existncia de climas 86
quentes com temperaturas anuais em torno de 22C a 28C. O Estado de Alagoas 87
dividido em trs Mesorregies: Leste Alagoano, Agreste Alagoano e Serto Alagoano e 88
em 13 Microrregies Geogrficas (IBGE 2009). 89
Amostragem 90
Para efeito de clculo da amostra, considerou-se uma prevalncia esperada de 91
50% o que maximiza o tamanho da amostra. Trabalhou-se ainda com confiana mnima 92
de 95% e erro estatstico de 5%. Desta forma, o tamanho amostral (n) a se trabalhar 93
seria de 385 animais (Thrusfield 2004), porm optou-se por trabalhar com 454 amostras 94
(40 machos e 414 fmeas) procedentes de 24 propriedades em 10 municpios. 95
Os animais foram includos em trs grupos etrios: 12 meses, 13-24 meses e > 96
24 meses. Quanto regio de origem, trabalhou-se com rebanhos oriundos de 97
propriedades situadas nas trs Mesorregies alagoanas: Leste, Agreste e Serto. 98
Deteco de anticorpos anti-N. caninum 99
Para exame sorolgico empregou-se a tcnica de Imunofluorescncia Indireta 100
(RIFI), utilizando-se anticorpos anti-IgG-caprina conjugado ao isotiocianato de 101
fluorescena da marca Sigma-Chemical
2
. Os testes foram realizados no Laboratrio de 102
Doenas Infecciosas da UFRPE segundo o mtodo descrito por Camargo (1974). As 103
reaes sorolgicas foram consideradas positivas quando apresentaram fluorescncia 104
total na diluio 1:50 conforme Helmick et al. (2002). 105
Anlise estatstica 106
Para o estudo dos fatores de risco foram aplicados questionrios constitudos por 107
perguntas objetivas, relativas a caractersticas gerais da propriedade e do rebanho, 108
sistema de manejo, situao sanitria do rebanho e manejo reprodutivo. Para identificar 109

2
Anti-corpo anti-igG de cabra (molec int). Sigma-Aldrich Brasil Ltda. CGC No. 68.337.658/0001-27
os fatores de risco associados infeco por N. caninum foi empregada a anlise 110
univariada para as variveis de interesse atravs do teste qui-quadrado de Pearson ou 111
Exato de Fisher quando necessrio (Zar 1999). Utilizou-se o programa Epi-Info (Dean 112
et al. 1994) para a execuo dos clculos estatsticos com nvel de significncia de 113
p<0,05. 114
115
RESULTADOS 116
Das 454 amostras analisadas pela RIFI observou-se que 24 (5,3%) foram 117
positivas e 430 (61,0%) negativas. Em relao titulao observou-se que nove (37,5%) 118
animais apresentaram ttulo 50; dez (41,7%) 100; quatro (16,7%) 200 e um (4,1%) 400. 119
Embora no tenha sido objeto de estudo no presente trabalho, os animais positivos para 120
anticorpos anti-N. caninum foram negativos para anticorpos anti-Toxoplasma gondii 121
indicando no haver reao cruzada entre os dois parasitos. 122
Das 24 propriedades utilizadas nesse estudo, 62,5% apresentaram pelo menos 123
um animal positivo enquanto que dos dez municpios analisados, seis (60,0%) 124
apresentaram animais soropositivos. Quanto ao sexo, as fmeas apresentaram 5,3% de 125
positividade enquanto que os machos 5,0%. Quanto s Mesorregies, as prevalncias 126
foram de 4,6% no Leste, 6,0% no Agreste e 4,1% no Serto. 127
O sistema de manejo extensivo foi o que apresentou maior prevalncia (16,7%), 128
seguido pelos sistemas semi-intensivo (5,0%) e intensivo (2,9%). Os rebanhos 129
compostos por menos de 50 animais apresentaram 6,0% de positivos enquanto que 130
aqueles entre 50-100 cabeas apresentaram 4,2% no sendo observados animais 131
positivos nos rebanhos com mais de 100 de cabeas. Nas propriedades com menos de 132
30 hectares (ha) observou-se 5,5% de positividade seguida por aquelas entre 30-200 ha 133
(9,2%) e acima de 200 ha (3,0%). 134
No foram observadas associaes significativas na anlise univariada para 135
nenhuma das variveis analisadas neste estudo como idade, sexo, regio, tamanho da 136
propriedade, nmero de animais, sistema de criao, presena de ces nas propriedades, 137
circulao de ces de propriedades vizinhas, acesso de ces aos locais de armazenagem 138
de alimentos e presena de animais silvestres nas propriedades. 139
As variveis relacionadas ao manejo reprodutivo e higinico-sanitrio tambm 140
no foram significativas na anlise univariada. Porm, das 24 propriedades, 15 (62,5%) 141
apresentavam distrbios reprodutivos, sendo aborto o mais observado (66,66%), 142
seguido por reteno de placenta (6,66%). 143
As variveis relacionadas ao hospedeiro definitivo como presena de ces nas 144
propriedades, circulao de ces de propriedades vizinhas, circulao de animais 145
silvestres nas fazendas alm do acesso de ces aos locais de estocagem de alimentos no 146
foram significativas na anlise univariada. 147
148
DISCUSSO 149
A baixa prevalncia encontrada neste estudo (5,3%) corrobora com quelas 150
encontradas em outros estudos realizados no Brasil como os trabalhos realizados por 151
Figliuolo et al. (2004) em So Paulo (6,4%), Faria et al. (2007) na Paraba (3,3%), Lima 152
et al. (2007) no Rio Grande do Norte (1,05%) e Silva et al. (2009) na Bahia (1,96%) 153
embora Uzda et al. (2007) em estudo com caprino leiteiro na Bahia tenham 154
evidenciado expressivos 15% de soropositividade. A prevalncia deste estudo 155
assemelha-se ainda encontrada em outros pases como relatado por Naguleswaran et 156
al. (2004) no Sri Lanka (0,6%), Moore et al. (2007) na Argentina (6,6%) e Al-Majali et 157
al. (2008) na J ordnia (5,7%). 158
Sharif et al. (2007) realizaram estudo de soroprevalncia em ovinos e caprinos 159
para T. gondii no Iran e justificaram a baixa prevalncia encontrada na espcie caprina 160
ao fato desses animais pastejarem a parte mais alta de gramneas e pequenos arbustos, 161
mantendo-se com a boca longe do solo e portanto com menor risco de ingesto de 162
oocistos. Acredita-se que esse evento contribuiu para baixa prevalncia observada neste 163
estudo, uma vez que os animais das propriedades estudadas eram criados em regime 164
extensivo e sem suplementao alimentar em comedouros. Este fato propicia o pastejo 165
em gramneas mais altas e dificulta o acesso aos oocistos do parasito. 166
Apesar de a prevalncia geral neste estudo ter sido baixa, um grande nmero de 167
propriedades (62,5%) apresentava pelo menos um animal soropositivo o que indica a 168
circulao deste coccdeo nos rebanhos caprinos estudados. Para Al-Majali et al. (2008) 169
pequenos rebanhos apresentaram prevalncia significativamente maior quando 170
comparados a grandes rebanhos o que foi atribudo ao fato das propriedades de maior 171
porte apresentarem melhores condies higinico-sanitrias e de manejo e, portanto, 172
maiores condies de promover sanidade do rebanho. A realidade observada nas 173
propriedades, em sua maioria composta por rebanhos com menos de 50 animais (62%), 174
evidencia que uma vez instalada, a cadeia de transmisso da infeco poder acarretar 175
prejuzos reprodutivos aos rebanhos caprinos. 176
Embora no tenha sido significativa na anlise univariada, observou-se maior 177
prevalncia (16,7%) de animais positivos criados em sistema de manejo extensivo. Em 178
propriedades desta natureza os animais geralmente percorrem maiores distncias na 179
busca por alimentos, favorecendo o contato com reas que possam ser frequentadas por 180
candeos (domsticos e selvagens) e estejam contaminadas com oocistos esporulados. 181
A varivel sexo neste estudo tambm no apresentou associao significativa em 182
relao infeco na anlise univariada. Roberts et al. (2001) afirmaram que sob 183
condies controladas de laboratrio evidente uma dicotomia na suscetibilidade entre 184
machos e fmeas, demonstrando que as diferenas fisiolgicas existentes entre estes, 185
principalmente de carter hormonal, desempenham papel importante na determinao 186
da suscetibilidade s infeces parasitrias. Esse fato no foi verificado em condies 187
de campo, alm disso, no sistema de manejo extensivo, outros fatores devem ser mais 188
decisivos na infeco que no sejam as diferenas fisiolgicas entre machos e fmeas. 189
No foi observada associao significativa para a infeco em relao s 190
diferentes faixas etrias, confirmando os achados de Figliuolo et al. (2004), Uzda et al. 191
(2007) e Moore et al. (2007) o que sugere que a transmisso vertical pode ser mais 192
frequente que a horizontal na espcie caprina. Entretanto, Al-Majali et al. (2007) 193
indicaram que a prevalncia foi significativamente maior nos animais com mais de 194
quatro anos de idade que nos jovens, caracterizando a idade como fator de risco. Alm 195
disso, o tempo de vida que geralmente os caprinos alcanam nas criaes de 196
subsistncia facilita a exposio desses animais s fontes de infeco. 197
Embora no tenha sido observada diferena significativa entre as prevalncias 198
das regies estudadas, Dubey et al. (2007) indicaram que o clima pode ser considerado 199
como fator de risco para esporulao e sobrevivncia dos oocistos, principalmente nos 200
casos de temperatura elevada onde a esporulao dos oocistos pode ocorrer de forma 201
mais rpida. Considerando o clima do Nordeste brasileiro que de uma forma geral 202
quente e mido, pode-se supor que existe a tendncia de que a transmisso da infeco 203
nos rebanhos nordestinos pode alcanar propores indesejveis. 204
A variveis relacionadas ao hospedeiro definitivo no foram significativas neste 205
estudo para risco de infeco por N. caninum. Sabe-se, entretanto, que a presena de 206
ces considerada relevante para a infeco principalmente pelo fato destes serem 207
responsveis por surtos epidmicos de abortos por N. caninum no rebanho por meio da 208
transmisso horizontal atravs da contaminao do alimento dos animais com fezes 209
contendo oocistos como demonstrado em estudos realizados por Uzda et al. (2007) e 210
Al Majali et al. (2008). 211
A existncia de propriedades com casos de aborto e animais positivos para 212
anticorpos anti-N. caninum verificada neste estudo indicam a possibilidade de 213
envolvimeto desse agente nesses casos de aborto. Contudo esse evento deve ser melhor 214
investigado por meio da utilizao de tcnicas diretas de diagnstico para demonstrar a 215
presena desse parasito nos fetos abortados com a finalidade de confirmar a etiologia 216
para que se possa implementar medidas de controle possibilitando, assim, reduzir os 217
prejuzos econmicos causados por esse agente. 218
Estudos anteriores realizados por Lindsay et al. (1995) com infeco 219
experimental em cabras gestantes observaram aborto, morte fetal e natimortos 220
semelhante ao que ocorre em bovinos naturalmente infectados. importante que outras 221
pesquisas, seja de avaliao sorolgica para outras enfermidades ou isolamento de 222
agentes patognicos em caprinos no Estado de Alagoas, sejam incentivadas para 223
elucidar as causas infecciosas de abortos. 224
225
226
227
CONCLUSO 228
Relata-se o primeiro estudo de anticorpos anti-Neospora caninum em caprinos 229
no Estado de Alagoas. Embora no tenham sido identificados fatores de risco 230
associados infeco, a existncia de focos de infeco nas diferentes Mesorregies do 231
Estado indica que o agente est disseminado e pode representar um importante agente 232
infeccioso envolvido em distrbios reprodutivos nos rebanhos caprinos na regio 233
estudada. 234
235
REFERNCIAS 236
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Tabela I Anlise univariada dos fatores de risco associados ou no infeco por
Neospora caninum de acordo com as caractersticas gerais dos rebanhos e das
propriedades caprinas no Estado de Alagoas, 2008
Varivel N
RIFI
n (%)
Anlise Univariada
OR (I.C.95%) p
Idade (meses)
12
Entre 12 e 24
24
83
105
266
2 (2,41)
3 (2,9)
19 (7,1)
1,0
1,19 (0,13 ; 14,56)
2,62 (0,74 ; 14,07)
0,609


Sexo
Macho
Fmea
40
414
2 (5,0)
22 (5,3)
1,0
1,07 (0,25 ; 9,70)
0,644

Regio
Serto
Agreste
Leste
121
268
65
5 (4,1)
16 (6,0)
3 (4,6)
1,0
1,47 (0,50 ; 5,26)
0,90 (0,14 ; 2,79)
0,729


Tamanho da Propriedade (ha)
<30
Entre 30 e 200
Acima de 200
256
65
133
14 (5,5)
6 (9,2)
4 (3,0)
1,0
1,76 (0,53 ; 5,12)
0,30 (0,06 ; 1,35)
0,181


N de animais (cabeas)
<50
Entre 50 e 100
Acima de 100
284
165
5
17 (6,0)
7 (4,2)
0 (0,0)
1,0
0,70 (0,24 ; 1,81)
0,00 (0,00 ; 29,40)
0,632


Sistema de criao
Intensivo
Extensivo
Semi-intensivo
34
18
402
1 (2,9)
3 (16,7)
20 (5,0)
1,0
6,60 (0,47 ; 356,68)
0,26 (0,07 ; 1,53)
0,077


N: nmero de animais; RIFI: reao de imunofluorescncia indireta; OR: odds ratio; IC: intervalo de
confiana. Base =432 caprinos; *estatisticamente significante


Tabela II Anlise univariada dos fatores de risco associados ou no infeco por
Neospora caninum de acordo com o manejo alimentar de caprinos no Estado de
Alagoas, 2008
Varivel N
RIFI
n (%)
Anlise Univariada
OR (I.C.95%) p
Fonte de gua
Parada
Corrente
Parada +Corrente
194
142
118
8 (4,1)
11 (7,7)
5 (4,2)
1,0
1,95 (0,69 ; 5,74)
0,53 (0,14 ; 1,71)
0,156


Bebedouros comuns para jovens
e adultos
No
Sim
125
329
6 (4,8)
18 (5,5)
1,0
0,37 (0,04 ; 1,58)
0,133

Alimentao
Sem suplementao
Com suplementao
86
368
2 (2,3)
22 (6,0)
1,0
1,15 (0,42 ; 3,62)
0,775

Comedouros comuns para jovens
e adultos
No
Sim
56
398
3 (5,4)
21 (5,3)
1,0
1,02 (0,19 ; 3,58)

0,587

N: nmero de animais; RIFI: reao de imunofluorescncia indireta; OR: odds ratio; IC: intervalo de
confiana.










Tabela III Anlise univariada dos fatores de risco associados ou no infeco por
Neospora caninum de acordo com o manejo reprodutivo de caprinos no Estado de
Alagoas, 2008
Varivel N
RIFI
n (%)
Anlise Univariada
OR (I.C.95%) p
Presena de animais com
distrbios reprodutivos na
propriedade
No
Sim
126
328
5 (4,0)
19 (5,8)
1,0
0,67 (0,19 ; 1,92)
0,437

Problemas observados
+
Repetio do cio
Reteno de placenta
Aborto associado
7
16
305
0 (0,0)
1 (6,3)
18 (5,9)
1,0
-
0,94 (0,13 ; 41,78)
0,801


Idade dos que apresentaram
distrbio reprodutivo
+
<1 ano
Entre 1 e 3 anos
>3 anos
37
130
161
1 (2,7)
5 (3,8)
13 (8,1)
1,0
1,44 (0,15 ; 69,97)
2,20 (0,71 ; 8,07)
0,213

Manejo reprodutivo
Monta natural
Monta natural +outras biotcnicas
391
63
19 (4,9)
5 (7,9)
1,0
1,69 (0,47 ; 4,91)
0,228
Aquisio de fmeas reprodutoras
de reposio nos ltimos cinco
anos
No
Sim
235
219
12 (5,1)
12 (5,5)
1,0
0,93 (0,37 ; 2,31)
0,859

Aquisio de machos reprodutores
de reposio nos ltimos cinco
anos
No
Sim
174
280
12 (6,9)
12 (4,3)
1,0
1,65 (0,66 ; 4,13)




0,227
N: nmero de animais; RIFI: reao de imunofluorescncia indireta; OR: odds ratio; IC: intervalo de
confiana.
+
Base =328 caprinos; * estatisticamente significante
Tabela IV Anlise univariada dos fatores de risco associados ou no infeco por
Neospora caninum de acordo com o hospedeiro definitivo em propriedades caprinas no
Estado de Alagoas, 2008
Varivel N
RIFI
n (%)
Anlise Univariada
OR (I.C.95%) p
Presena de ces na propriedade
No
Sim
35
419
2 (5,7)
22 (5,3)
1,0
1,09 (0,12 ; 4,78)
0,568

Circulao de ces das
propriedades vizinhas
No
Sim
29
425
1 (3,5)
23 (5,4)
1,0
0,62 (0,01 ; 4,15)
0,536

Circulao de animais silvestres

No
Sim
126
328
7 (5,6)
17 (5,2)
1,0
1,08 (0,37 ; 2,82)

0,873

Acesso dos ces em locais que
estocam alimentos

No
Sim
172
282
9 (5,2)
15 (5,3)
1,0
0,98 (0,37 ; 2,46)
0,968

N: nmero de animais; RIFI: reao de imunofluorescncia indireta; OR: odds ratio; IC: intervalo de
confiana.











ARTIGO 3



ANTICORPOS ANTI- Chlamydophila abortus EM CAPRINOS NO ESTADO DE
ALAGOAS, BRASIL
(Formatado para ser encaminhado para o peridico Arquivos Brasileiros de
Medicina Veterinria e Zootecnia)










Anticorpos anti- Chlamydophila abortus em caprinos no Estado de Alagoas, Brasil 1
2
RESUMO: Objetivou-se com este estudo determinar a ocorrncia e identificar os 3
fatores de risco associados infeco por Chlamydophila abortus (C. abortus) no 4
Estado de Alagoas. O estudo foi realizado em 24 propriedades em 10 municpios 5
situados nas trs Mesorregies do Estado de Alagoas. A amostra foi composta por soro 6
sanguneo de 255 matrizes caprinas com idade igual ou acima dos 24 meses. Para o 7
estudo dos fatores de risco foram aplicados questionrios com questes referentes ao 8
sistema de produo, manejo nutricional, reprodutivo e sanitrio. A pesquisa de 9
anticorpos anti-C. abortus foi realizada utilizando a microtcnica da Reao da Fixao 10
do Complemento. Das 255 amostras analisadas observou-se que trs (1,17%) foram 11
positivas para anticorpos anti- C. abortus e 8,33% das propriedades apresentaram 12
animais positivos. Relata-se a primeira ocorrncia de anticorpos anti-Chlamydophila 13
abortus em caprinos no Estado de Alagoas. A existncia de focos em duas 14
Mesorregies do Estado indica que C. abortus est disseminado nas propriedades 15
estudadas e pode ser um dos agentes infecciosos que causam distrbios reprodutivos nas 16
criaes de caprinos estudadas. 17
Palavras-chave: Doena Infecciosa, Fixao do Complemento, Clamidofilose 18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
Antibodies to Chlamydophila abortus in goats in Alagoas State. 29
30
ABSTRACT: The objective of this work was to determine the occurrence and identify 31
risk factors associated to Chlamydophila abortus (C. abortus) infection in goats from 32
Alagoas State. The research was developed on 24 farms of goat production from 10 33
municipalities of the three different Alagoas Mesoregions. The sample consisted in 34
blood serum of 255 females over then 24 months. To analysis of risk factors the farm 35
was investigated by questionnaires about system of production, nutritional, reproductive 36
and sanitary management. The search of antibodies against C. abortus was made by 37
micromethod of complement fixation. From 255 samples that were examined, three 38
(1,17%) were positive to antibodies against C. abortus with 8,33% of the farms showing 39
positive animals. This was the first report on antibodies to C.a abortus in Alagoas State. 40
The existence of infection foci in two regions indicates that C. abortus is present in the 41
studied farms and could be assume significance in reproduction of goat in the studied 42
region. 43
Key words: Infectious Disease, Complement Fixation, Chlamydophilosis 44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
A clamidofilose uma doena bacteriana que provoca aborto nos ltimos meses 54
da gestao, natimortalidade ou parto prematuro, resultando em crias debilitadas e com 55
baixo peso ao nascimento (Rodolakis, 2001). C. abortus o agente causador da 56
enfermidade e est frequentemente relacionado ao aborto enzotico ovino e caprino e 57
ainda ao aborto epizotico bovino, alm de ter sido associado a casos de abortos em 58
cavalos, coelhos, porcos da ndia, camundongos e sunos (Everett, 2000). 59
Aps a ocorrncia do aborto ou parto, um grande nmero de clamdias pode ser 60
encontrado nos fludos e descargas vaginais ou uterinas, na placenta e na pele dos fetos 61
ou filhotes, sendo estas consideradas as principais fontes de contaminao ambiental 62
(Longbottom e Coulter, 2003). O agente pode ser encontrado ainda em fezes e urina de 63
ruminantes assim como no leite de cabras (Rodolaskis, 2001). 64
Dentre os principais fatores de risco para infeco por C. abortus em caprinos 65
incluem-se a raa, manejo, tipo de explorao e regime de monta natural (Pereira et al., 66
2009), embora propriedades com menos de 35 animais, produtos de abortamento na 67
pastagem e aluguel de pasto tenham sido consideradas variveis associadas condio 68
da existncia de foco da doena para bovinos (Silva-Zacharias et al., 2009) 69
Objetivou-se com este estudo determinar a ocorrncia e identificar os fatores de 70
risco associados infeco por Chlamidophyla abortus em caprinos no Estado de 71
Alagoas. 72
O Estado de Alagoas est localizado na Macrorregio Nordeste do Brasil 73
cobrindo uma rea territorial de 27.767,661 km o que corresponde a 0,3% do territrio 74
nacional. Situa-se na faixa intertropical possuindo climas quentes com temperaturas 75
anuais em torno de 22C a 28C. dividido em trs Mesorregies: Leste Alagoano, 76
Agreste Alagoano e Serto Alagoano e em 13 Microrregies Geogrficas (IBGE 2009). 77
A amostra foi composta de forma no probabilstica e por convenincia por soro 78
sanguneo de 255 matrizes caprinas com idade igual ou acima dos 24 meses procedentes 79
de 23 propriedades situadas em 10 municpios. 80
A pesquisa de anticorpos anti-Clamydophila abortus foi realizada no 81
Laboratrio de Doenas Bacterianas da Reproduo do Instituto Biolgico de So 82
Paulo, utilizando a microtcnica da Reao da Fixao do Complemento (RFC) (Donn 83
et al., 1997). A reao foi realizada em microplacas utilizando-se soro teste nas 84
diluies de 1:16 a 1:512, antgeno C. abortus cepa S26/3 na diluio 1:50 e 85
complemento na diluio correspondente a duas unidades fixadoras de complemento. 86
Como controle positivo foi utilizado soro bovino positivo cedido pelo Instituto 87
Zooprofiltico Sperimentale delle Venezia, Padova Itlia e como controle negativo 88
soro fetal bovino. O ttulo de anticorpos foi considerado como a recproca da maior 89
diluio de soro apresentando 50% de fixao do complemento. Amostras com ttulo 90
igual ou superior a 32 foram consideradas positivas e com ttulo igual ou superior a 16 91
foram consideradas suspeitas. 92
Em todas as propriedades foram aplicados questionrios constitudos de 93
perguntas objetivas, relativas a informaes sobre caractersticas gerais da propriedade e 94
do rebanho, sistema de manejo, situao sanitria do rebanho e manejo reprodutivo. 95
Para o estudo dos fatores de risco associados infeco por C. abortus foi 96
utilizada a anlise univariada das variveis de interesse atravs do teste qui-quadrado de 97
Pearson ou Exato de Fisher quando necessrio (Zar, 1999). Utilizou-se o programa Epi- 98
Info (Dean et al. 1994) para a execuo dos clculos estatsticos com nvel de 99
significncia de p<0,05. 100
Das 255 amostras analisadas observou-se que trs (1,17%) foram positivas para 101
anticorpos anti- C. abortus na titulao 32, 246 (96,47%) negativas e seis (2,35%) 102
suspeitas com ttulos 16. Estudos sobre a prevalncia de anticorpos anti-C. abortus em 103
caprinos no mundo mostraram envolvimento da Chlamydophila nos casos de aborto 104
como demonstrado por Cuello et al. (1992) na Espanha (14,31%), Masala et al. (2005) 105
na Itlia (5,8%), Moeller (2001) nos Estados Unidos (14,2%), islkov et al. (2007) na 106
Repblica Eslovaca (7,7%), Al-Qudah et al. (2004) na J ordnia (11,4%), Rekiki et al. 107
(2006) na Tunsia (11,3%) e Samkange (2007) na Nambia (8,0%). 108
Em relao aos estudos de prevalncia em caprinos realizados no Brasil fica 109
evidente que a prevalncia encontrada neste trabalho foi baixa quando comparada aos 110
dois nicos trabalhos nacionais nessa espcie. Piatti et al. (2006) em So Paulo e Pereira 111
et al. (2009) em Pernambuco demonstraram a ocorrncia de anticorpos anti- 112
Chlamydophila spp. em 12% dos animais estudados em cada pesquisa, evidenciando a 113
disseminao da infeco e a necessidade de implantao de medidas de controle nas 114
propriedades. 115
Das 24 propriedades utilizadas nesse estudo, 8,33% apresentaram animais 116
positivos enquanto que dos dez municpios analisados, dois (20,0%) apresentaram 117
animais soropositivos. Na Itlia, Donn et al. (1997) observaram que 70,5% dos 118
rebanhos avaliados eram soropositivos para infeco por Chlamydophila. 119
Posteriormente, no mesmo pas, Masala et al. (2005) identificaram 19,2% de 120
propriedades positivas. Em estudo realizado no Estado de Pernambuco, Pereira et al. 121
(2009) relataram que mais de 90% das propriedades caprinas estudadas apresentaram 122
animais positivos, contudo o no isolamento do agente, no possibilita a determinao 123
da participao dessa bactria em casos de abortos em caprinos e ovinos no estudo. 124
Os animais soropositivos deste estudo pertenciam a duas Mesorregies: Serto e 125
Agreste, o que significa que apesar da baixa frequncia de animais positivos que a 126
infeco encontra-se distribuda no Estado. De forma semelhante, Pinheiro J nior 127
(2008) em estudo sobre fatores de risco associados infeco por C. abortus em ovinos 128
do Estado de Alagoas, demonstrou que os animais de propriedades situadas nas 129
Mesorregies Serto e Agreste apresentaram maior risco de infeco. 130
Todos os caprinos soropositivos nesse estudo eram mantidos em regime de 131
criao semi-intensivo, com suplementao mineral, comedouros e bebedouros comuns 132
a jovens e adultos. Dois dos animais positivos (66,6%) eram oriundos de propriedades 133
de tamanho entre 30-200 hectares (ha), o que foi estatisticamente significativo (p<0,05) 134
e pertenciam a rebanhos entre 50-100 cabeas, enquanto o terceiro animal positivo 135
(33,4%) era procedente de propriedade com menos de 30ha e com rebanho menor que 136
50 animais. Silva-Zacharias et al. (2009), no Paran, em anlise de amostras de soro de 137
bovinos procedentes de propriedades com casos de aborto, observaram que 138
propriedades com menos de 35 animais em regime intensivo ou semi-intensivo eram 139
consideradas fatores associados condio da existncia de foco da doena, alm de 140
relacionarem a baixa prevalncia encontrada pouca ou nenhuma importncia da 141
clamidofilose nos casos de aborto bovino na regio estudada. 142
Distrbios reprodutivos estavam presentes nas trs propriedades estudadas onde 143
foram detectados animais soropositivos, sendo o aborto presente em duas delas 144
enquanto a reteno de placenta observada em uma delas. O aborto nessas propriedades 145
tambm pode ser consequncia de outros agentes como bactrias, vrus e protozorios 146
como demonstrado por Moeller (2001). 147
Relata-se a ocorrncia de anticorpos anti-C. abortus em caprinos no Estado de 148
Alagoas. A existncia de focos em duas Mesorregies do Estado indica que C. abortus 149
est disseminado nas propriedades estudadas e pode ser um dos agentes infecciosos 150
responsveis por distrbios reprodutivos nas criaes de caprinos estudadas. Contudo, 151
outros estudos so necessrios para que se possa estabelecer o carter endmico desta 152
infeco assim como o isolamento do agente. 153
154
155
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157
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bovino no estado do Paran. Pesq. Vet. Bras., v.29, n.3, p.215-219, 2009. 211
212
213
CONSIDERAES FINAIS 214
215
Relatou-se a ocorrncia de focos de infeco por Toxoplasma gondii, Neospora 216
caninum e Chlamydophila abortus em caprinos no Estado de Alagoas; 217
De acordo com os fatores de risco identificados quanto infeco por 218
Toxoplasma gondii necessria a realizao de um programa de monitoramento dos 219
focos de infeco deste agente no Estado atravs do acompanhamento do status 220
sorolgico tanto dos rebanhos estudados como daqueles ainda no avaliados para esta e 221
outras enfermidades, assim como o desenvolvimento de trabalhos educativos que 222
instruam e orientem os produtores de caprinos com relao toxoplasmose, no intuito 223
de controlar os fatores de risco e promover melhor sanidade dos rebanhos; 224
Apesar da baixa prevalncia das infeces por N. caninum e C. abortus nos 225
rebanhos estudados, a participao ou excluso desses agentes nos casos de aborto e 226
mortalidade neonatal deve ser confirmada por meio de tcnicas de diagnstico que 227
permitam a identificao desses agentes em material biolgico de fetos e placentas; 228
Outros estudos devem ser realizados para se aprofundar os conhecimentos nos 229
aspectos epidemiolgicos relacionados dinmica destas infeces nos rebanhos 230
estudados atravs de novos mapeamentos sorolgicos ou de fatores de risco alm de 231
monitoramento da evoluo das infeces e orientaes aos produtores com a finalidade 232
de reduzir ou eliminar os problemas inerentes a tais agentes patognicos, dando-se igual 233
importncia para a pesquisa de outros agentes infecciosos de relevncia na reproduo 234
dessa espcie para elucidar as causas dos distrbios reprodutivos em caprinos no Estado 235
de Alagoas. 236
237
238
239
APNDICE

PROJETO DE DOUTORADO
FATORES DE RISCOS RELACIONADOS A ABORTOS EM PEQUENOS
RUMINANTES E SUNOS

Nome da Propriedade:_________________ Municpio:_______________ Data:
Proprietrio: _________________________ Estado: __________________
Endereo: ____________________________ Telefone: _________________
Questionrio n: _________ Investigador: _______________


DADOS DO CRIADOR

1) Idade do criador: anos

2) Estado civil:
a) Solteiro
b) Casado
c) Separado
d) Vivo
e) Concubinato

3) Escolaridade
a) Analfabeto
b) Ensino fundamental incompleto
c) Ensino fundamental completo
d) Ensino mdio incompleto
e) Ensino mdio completo
f) Superior incompleto
g) Superior
h) Profissionalizante

4) J realizou algum curso ou
treinamento em caprino-ovinocultura?
a) Sim
b) No

5) Pertence a algum tipo de
associao?
a) Sim
b) No

6) Esta sua ocupao principal?
a) Sim
b) No







7) Tempo na atividade?
a) <1 ano
b) Entre 1 e 2 anos
c) Entre 2,1 e 3 anos
d) Entre 3,1 e 5 anos
e) Acima de 5 anos

8) Voc ou outra pessoa da famlia
ou trabalhadores j sofreram alguma
doena relacionada criao de
animais?
a) Sim
b) No

DADOS GERAIS DA
PROPRIEDADE

1) rea:

2) Tamanho do rebanho:
Borregos (<1 ano):
Cabritos (<1 ano):
Ovelhas:
Cabras:
Carneiros - Reprodutores:
Bodes - Reprodutores:
Sunos Matrizes:
- Cria:
- Recria:

3) Raa:
________________/_______________
________________/_______________


4) A propriedade possui eletricidade?
a) Sim
b) No

5) Tipo do terreno?
a) Plano
b) Alagado
c) Acidentado

6) Tipo de produo? (Caso carne ir
para a questo 9)
a) Carne
b) Leite
c) Mista

7) O leite produzido na propriedade
comercializado?
a) Sim
b) No

8) Qual o destino do leite
comercializado?
a) Fabricao de queijos in natura
b) Fabricao de iogurtes/achocolatados
c) Venda
d) Fabricao de queijo aps tratamento
e) Consumo do leite in natura
f) Consume do leite fervido

9) Qual o sistema de criao?
a) Intensivo
b) Extensivo
c) Semi-Intensivo

10) Qual a fonte de gua?
a) Parada
b) Corrente
c) Parada +corrente

11) Qual o tipo de alimentao?
a) Capim
b) Feno
c) Rao
d) Palma
d) Outra

12) Utiliza rotao de pastagens?
a) Sim
b) No

13) Os animais recebem
mineralizao?
a) Sim
b) No
14) Existe criao consorciada?
a) No
b) Cavalo
c) Porco
d) Galinha
e) Outros ruminantes
f) Animais silvestres

15) Dispe de servio veterinrio?
(Caso no ir para questo 17)
a) Sim
b) No

16) Qual a freqncia?
b) Esporadicamente/quando precisa
c) Mensalmente
d) Semestralmente
d) Anualmente

17) Quem trabalha na propriedade?
a) Familiares
b) Contratados
c) ambos

MANEJO SANITRIO

1) Realiza vermifugao? (Caso no ir
para a questo 3)
a) Sim
a) No

2) De que forma a vermifugao
realizada?
a) Estratgica
b) Ttica
c) Supressiva
d) Curativa

3) Realiza vacinao? (Caso no ir
para a questo 5)
a) Sim
b) No




4) Quais vacinas so
administradas?
a) Clostridioses
b) Raiva
c) Leptospirose

5) Os bebedouros so comuns para
jovens e adultos?
a) Sim
b) No

6) A gua oferecida em:
a) Vasilhames dentro das instalaes
b) Vasilhames fora das instalaes
c) Bebem direto na fonte Aude,
barragem

7) Os comedouros so comuns para
jovens e adultos?
a) Sim
b) No

8) Quando importa animais realiza
quarentena? (Caso no ir para a questo
10)
a) Sim
b) No

9) Qual o perodo?
a) 1 semana
b) 15 dias
c) 30 dias
d) Acima de 30 dias

10) Na aquisio de animais realiza
exames?
a) Sim
b) No

11) Realiza limpeza das instalaes?
(Caso no ir para a questo 13)
a) Sim
a) No

12) Qual a freqncia?
a) Diariamente
b) Semanalmente
c) Mensalmente
d) Anualmente
13) Desinfeta as instalaes? (Caso no
ir para a questo 15)
a) Sim
b) No

14) De que forma realizada a
desinfeco?
a) Caiao
b) Vassoura de fogo
c) Produtos qumicos

15) Utiliza esterqueira? (Caso no ir
para questo 17)
a) Sim
b) No

16) Qual o destino das fezes?
a) Comercializao
b) Utilizao na prpria propriedade

17) Existe piquete maternidade?
(Caso no ir para questo 19)
a) Sim
b) No

18) O piquete maternidade
utilizado para abrigo e/ou tratamento de
animais doentes?
a) Sim
b) No

19) Existe contaminao de fezes
nos alimentos fornecidos aos animais
independente da idade?
a) Sim
b) No

20) Qual a taxa anual de reposies
dentro do rebanho?
a) Abaixo de 50 animais
b) Entre 51 e 100 animais
c) Entre 101 e 200 animais
d) Acima de 200 animais







21) Os animais para reposio so
provenientes da propriedade?
a) Sim
b) Propriedades vizinhas
c) Feiras ou exposies
d) Outros Municpios
e) Outros Estados

22) Qual o destino dos animais
comercializados nesta propriedade?
a) Propriedades vizinhas
b) Municpios vizinhos
c) Outros estados
d) Abate

23) Taxa de mortalidade por ano
a) No sabe
b) Abaixo de 10,0%
c) Entre 10,1 e 20,0%
d) Entre 20,1 50,0%
e) Acima de 50,0%

24) J foram observados distrbios
reprodutivos nos animais? (Caso no ir
para a questo 27)
a) Sim
b) No

25) Quais dos problemas j foram
observados?
a) Repetio de cio
b) Reteno de placenta
c) Natimortos
d) Mumificao fetal

26) Qual a idade dos animais que
apresentaram algum tipo de distrbio
reprodutivo?
a)<1 ano
b) Entre 1 e 3 anos
c) >3 anos

27) Houve casos de aborto? (Caso
no pular para questo 30)
a) No
b) Entre 1 a 10 casos
c) Entre 11 a 20 casos
d) Acima de 20 casos


28) Em qual perodo da gestao
ocorre os abortos?
a) 1/3
b) 2/3
c) 3/3


29) Qual o destino dos produtos do
aborto?
a) Consumido por outros animais
b) Queimado
c) Enterrado
d) Outros

30) Qual o destino dos restos
placentrios?
a) Consumido por outros animais
b) Queimado
c) Enterrado
d) Outros

31) Qual o destino dos animais que
apresentam distrbios reprodutivos?
a) Abate
b) Comrcio
c) Tratamento com antibiticos

32) Os animais que so suspeitos da
doena ficam junto com outros animais?
a) Sim
b) No

33) Os tratadores que lidam com
esses animais doentes lidam com o
restante do rebanho?
a) Sim
b) No

34) Nmero de animais vendidos ao
ano?

MANEJO REPRODUTIVO

1) Qual o tipo de manejo
reprodutivo do rebanho?
a) Monta natural
b) Monta controlada
c) Inseminao artificial
d) Transferncia de embries

2) Utiliza animais de outras
propriedades para reproduo?
a) Sim
b) No


3) Empresta reprodutores para
outras propriedades?
a) Sim
b) No

4) Qual a poca da
pario/reproduo?
a) O ano todo
b) Controlada

5) Adquiriu fmeas reprodutoras de
reposio nos ltimos cinco anos?
a) Sim
b) No

6) Adquiriu machos reprodutores de
reposio nos ltimos cinco anos?
a) Sim
b) No

7) As crias so alimentadas com
colostro?
a) Sim
b) No

8) O colostro sofre algum
tratamento trmico antes de ser
fornecido a cria?
a) No
b) Congelamento
c) Aquecimento trmico
d) Refrigerao

DADOS REFERENTES
AUSNCIA OU PRESENA DE
FELINOS E CANINOS NA
PROPRIEDADE

1) Quantos gatos domsticos
existem na propriedade ? ______

2) Qual a idade dos animais?

3) H circulao de gatos das
propriedades vizinhas?
a) Sim
b) No

4) Onde os animais circulam?
a) rea de confinamento
b) Piquete dos animais

5) H circulao de animais
silvestres?
a) Sim
b) No
c) Qual

6) De que os gatos se alimentam?
a) Rao
b) Caa
c) Sobra de alimentos
d) Vsceras de animais abatidos na
propriedade

7) Os gatos tm acesso gua
oferecida aos animais
a) Sim
b) No

8) Na propriedade existe alguma
instalao utilizada para estocar
alimentos destinados suplementao
dos animais?
a) Sim
b) No

9) Gatos tm acesso a estas
instalaes?
a) Sim
b) No

10) J se observou gatos se
alimentando de restos placentrios?
a) Sim
b) No



ANEXOS

Normas das revistas (Instrues aos autores)
Artigo 1 - Soroprevalncia e fatores de risco associados infeco por Toxoplasma
gondii em caprinos no Estado de Alagoas
INSTRUES AOS AUTORES
Objetivo e poltica editorial
Preparao de originais
Objetivo e poltica editorial

A Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical destina-se
publicao de trabalhos cientficos relacionados s doenas infecciosas e
parasitrias, medicina preventiva, sade pblica e assuntos correlatos.
A revista tem periodicidade bimestral e aceitar trabalhos de
pesquisadores brasileiros ou estrangeiros desde que obedeam s
normas e que sejam aprovados pelos relatores indicados pelos Editores.
1. Alm de Artigos, a revista publica Comunicaes para a divulgao
de resultados de ensaios teraputicos, notas prvias, relatrios tcnicos,
relatos de casos, cartas ao editor, fatos histricos, resenhas bibliogrficas
e resumos de teses. Artigos de reviso e editoriais sero publicados por
solicitao do Corpo Editorial.
2. Os trabalhos devem ser originais e inditos, digitados em espao
duplo, deixando margem de 3 cm esquerda e remetidos em trs vias
ao endereo abaixo, sendo uma a original. Aps reviso, pede-se que os
trabalhos sejam enviados em disquete, devidamente acompanhados de
uma cpia impressa da verso revisada.


Preparao de originais

3. Normas para enviar trabalhos, aps reviso, em meio eletrnico;
obedecer os seguintes requisitos:
a) podem ser utilizados disquetes MS-DOS compatveis nos formatos 3
1/2" ou 5 1/4". Disquetes de Macintosh no formato 3 1/2" tambm sero
aceitos. Elimine dos disquetes todos os arquivos no pertinentes ao
artigo enviado. Escreva na etiqueta do disquete: ttulo do artigo, nome
do autor, nome do arquivo, editor de texto utilizado e nome dos arquivos
acessrios (folhas de estilos, grficos, tabelas etc);
b) envie artigos compatveis com os seguintes processadores de texto:
Word para Windows (verso 6.0 ou anterior), Word para Mac (verso 6.0
ou anterior), outros formatos podem ser aceitos mediante consulta

prvia. Nunca envie artigos em formato ASCII (s texto/"text only");
c) ao redigir o texto, o comando de retorno de linha ("Enter") deve ser
utilizado exclusivamente no final dos pargrafos. No adicione espaos
extras ou "tabs" ao texto para obter recuo da primeira linha ou
centralizao de ttulos na pgina. Tampouco retornos ("enters")
adicionais para espaar os pargrafos. Para obter esses efeitos, utilize
apenas os comandos de formatao de pargrafo, disponveis em todos
os editores de texto acima;
d) podem ser includas tabelas, desde que montadas no prprio editor de
texto. Observaes e notas de rodap devem ser, preferencialmente,
colocadas aps o final do artigo, devidamente numeradas e
referenciadas;
e) ilustraes, tabelas e grficos produzidos em outros programas e
"importados" para incluso no texto devem ser enviados em arquivos
anexos, em formatos universais de fcil compatibilidade (TIFF, BMP,
PICT, GIF etc). Evite formatos no-padronizados (EPS, WMF etc) e
arquivos que s podem ser abertos por programas especficos. De
qualquer forma, envie sempre uma cpia bem impressa do grfico,
tabela ou ilustrao para eventual reproduo.
4. Os trabalhos devem ser redigidos preferencialmente em portugus,
embora sejam tambm aceitos trabalhos em ingls e espanhol. A
linguagem deve ser clara e precisa, e o texto conciso normalmente no
ultrapassando 12 pginas digitadas para Artigos e 6 para
Comunicaes.
5. A seguinte seqncia deve ser observada:
a) ttulo original e traduzido e nome dos autores em letras minsculas.
No rodap, instituio onde foi realizado o trabalho, filiao dos autores,
quando for o caso, rgo financiador e o endereo completo para
correspondncia, inclusive telefone, fax e e-mail;
b) resumo: mximo de 150 palavras para os artigos e 50 para as
comunicaes e relatos de casos. Deve ser informativo e no indicativo,
apresentando o objetivo do trabalho, como foi realizado, os resultados
alcanados e a concluso. No usar abreviaturas ou citaes
bibliogrficas. Citar 4 ou 5 palavras-chave, que expressem com preciso
o contedo do trabalho;
c) abstract: inserido logo aps o resumo, deve ser a traduo fiel do mesmo, seguido
pelas key-words;
d) introduo: clara, objetiva, contendo informaes que justifiquem o
trabalho, restringindo as citaes ao necessrio;
e) material e mtodos: descrio concisa, sem omitir o essencial para
a compreenso e reproduo do trabalho. Mtodos e tcnicas j
estabelecidos devem ser referidos por citao;
f) resultados: sempre que necessrio devem ser acompanhados por
tabelas, figuras ou outras ilustraes, auto-explicativas. Texto e
documentao devem ser complementares. Quando aplicveis, os dados
devero ser submetidos anlise estatstica. O contedo deve ser
informativo, no interpretativo;
g) discusso: limitar aos resultados obtidos e conter somente as
referncias necessrias. O contedo deve ser interpretativo e as
hipteses e especulaes formuladas com base nos achados;
h) agradecimentos: limitados ao indispensvel;
i) referncias bibliogrficas: digitadas em minsculas, sem ponto
entre as abreviaturas, em espao duplo, numeradas e organizadas em
ordem alfabtica pelo ltimo sobrenome do autor; citar todos os autores
de cada referncia. Quando houver mais de uma citao do mesmo
autor, seguir a ordem cronolgica. As citaes devem ser referidas no
texto pelos respectivos nmeros, acima da palavra correspondente, sem
vrgula e sem parnteses; na lista de referncias, deve seguir o seguinte
estilo e pontuao:
Artigos em peridicos (os ttulos dos peridicos devem aparecer por
extenso):
Coura JR, Conceio MJ. Estudo comparativo dos mtodos de Lutz, Kato
e Simes Baarbosa no diagnstico da esquistossomose mansoni. Revista
da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical 8:153-158, 1974.
Livros:
Chandra RK, Newberne PM. Nutrition, immunity and infection:
machanisms of interactions. Plenum, New York, 1977.
Captulos de livros:
Fulton JD. Diagnosis of protozoal diseases. In: Gell PGH, Coombs RRA
(ed) Clinical aspects of immunology, 2nd edtition, Blackwell, Oxford,
p.133-136, 1968.
Resumos de congressos:
Daher RH, Almeida Netto JC, Pereira LIA. Disfuno heptica na malria
grave. Estudo de 161 casos. In: Resumos do XXXI Congresso da
Sociedade Brasileira de Medicina Tropical, Braslia p.16, 1995 .
Teses:
Tavares W. Contaminao do solo do Estado do Rio de Janeiro pelo
Clostridium tetani. Contribuio ao conhecimento da distribuio natural
do bacilo tetnico. Tese de Doutorado, Universidade Federal do Rio de
Janeiro, Rio de Janeiro, RJ, 1975.
Somente devero ser citados os trabalhos publicados. Dados no
publicados ou comunicaes pessoais devem ser referidos no texto da
seguinte forma: (AB Figueiredo: comunicao pessoal, 1980) e (CD Dias,
EF Oliveira: dados no publicados).
6. Tabelas: numeradas em algarismos arbicos e dotadas de ttulo
descritivo conciso. Manter seu nmero ao mnimo necessrio e lembrar
que tabelas muito grandes so difceis de serem lidas. Devem ser
digitadas em espao duplo em folhas separadas, sem linhas verticais e as
unidades referidas no ttulo de cada coluna. Todos os dados das tabelas,
inclusive o ttulo, devem ser em minsculas, exceto as siglas.
7. Ilustraes: de boa qualidade e numeradas consecutivamente em
algarismos arbicos. Alm das fotografias, os grficos, quadros etc.
devem ser referidos no texto como Figuras. Anotar no verso com lpis o
nmero da figura e o nome do autor e trabalho. Listar as legendas
numeradas com os respectivos smbolos e convenes em folha separada
e em espao duplo. O nmero de ilustraes deve ser restrito ao mnimo
necessrio.
8. Comit de tica: no trabalho de pesquisa envolvendo seres humanos,
dever constar o nome do Comit de tica que o aprovou.
9. Permisso dos autores: anexar carta com o ciente de todos os autores
concordando com a publicao.
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2009 SBMT
Praa Thomaz Ulha, 706
Caixa Postal 118
38001-970 Uberaba MG Brasil
Tel.: +55 34 3318-5287
Fax: +55 34 3318-5279

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Artigo 2 - Prevalncia de anticorpos anti-Neospora caninum em caprinos no estado
de Alagoas, Brasil
INSTRUES AOS AUTORES
Objetivos e poltica editorial
Formato e estilo

Objetivos e poltica editorial

As Memrias do Instituto Oswaldo Cruz so uma
revista multidisciplinar que publica pesquisas originais
relativas aos campos da medicina tropical (incluindo
patologia, epidemiologia de campo e estudos clnicos),
parasitologia mdica e veterinria (protozoologia,
helmintologia, entomologia e malacologia) e microbiologia
mdica (virologia, bacteriologia e micologia). A revista
aceita, especialmente, pesquisas bsicas e aplicadas em
bioqumica, imunologia, biologia molecular e celular,
fisiologia, farmacologia e gentica relacionada a essas
reas. Comunicaes breves so tambm consideradas.
Artigos de reviso s quando solicitados. A revista publica
oito nmeros regulares, constitutindo um por ano.
Ocasionalmente, trabalhos apresentados em simpsios ou
congressos so publicados como suplementos.
Os artigos apresentados devem ser escritos
preferencialmente em ingls. Quando neste idioma, para
no causar atrasos na publicao sugerimos que sejam
checados por algum que tenha o ingls como primeira
lngua e que, preferencialmente, seja um cientista da
rea.
A submisso de um manuscrito s Memrias requer que
este no tenha sido publicado anteriormente (exceto na
forma de resumo) e que no esteja sendo considerado
para publicao por outra revista. A veracidade das
informaes e das citaes bibliogrficas de
responsabilidade exclusiva dos autores.
Os manuscritos sero analisados por pelo menos dois
pareceristas; a aprovao dos trabalhos ser baseada no
contedo cientfico e na apresentao.
Somente sero aceitas submisses eletrnicas dos
artigos, no seguinte endereo:
http://submission.scielo.br/index.php/mioc/login.
Por meio desse servio voc pode submeter o artigo e
acompanhar o status do mesmo durante todo o processo
editorial. Garantindo rapidez e seguranas na submisso

do seu manuscrito e agilizando o processo de avaliao.
O manuscrito dever ser preparado de acordo com as
Orientaes aos Autores.
Ao encaminhar um manuscrito para a revista, os autores
devem estar cientes de que, se aprovado para publicao,
o copyright do artigo, incluindo os direitos de reproduo
em todas as mdias e formatos, dever ser concedido
exclusivamente para as Memrias. A revista no recusar
as solicitaes legtimas dos autores para reproduzir seus
trabalhos.
Para maiores informaes sobre o formato e o estilo da
revista, favor consultar um nmero recente da Revista ou
entrar em contato com a Editoria Cientfica pelos
telefones (+55-21-2598.4335/2561-1442), fax (+55-21-
2280-5048), ou e-mail (memorias@fiocruz.br /
memorias@ioc.fiocruz.br).

Formato e estilo
O manuscrito (incluindo tabelas e referncias) deve ser preparado em
um software para edio de textos, em espao duplo, fonte 12,
paginado. As margens devem ser de pelo menos 3 cm. As figuras
devero vir na extenso tiff, com resoluo mnima de 300 dpi. Tabelas
e figuras devero vir em documentos separados.
Deve ser organizado de acordo com a seguinte ordem:
Ttulo resumido: com at 40 caracteres (letras e espaos)
Ttulo: com at 250 caracteres
Autores: sem ttulos ou graduaes
Afiliao institucional: endereo completo somente do autor
correspondente
Resumo: com at 200 palavras (100 palavras no caso de comunicaes
breves). Deve enfatizar novos e importantes aspectos do estudo ou
observaes.
Palavras-chave: devem ser fornecidos de 3 a 6 termos, de acordo com
a lista Medical Subject Headings (Mesh) do Index Medicus.
Notas de rodap: indicando a fonte de financiamento e mudana de
endereo
Introduo: deve determinar o propsito do estudo, oferecer um breve
resumo (e no uma reviso de literatura) dos trabalhos anteriores
relevantes, e especificar quais novos avanos foram alcanados atravs

da pesquisa. A introduo no deve incluir dados ou concluses do
trabalho em referncia.
Materiais e Mtodos: deve oferecer, de forma breve e clara,
informaes suficientes para permitir que o estudo seja repetido por
outros pesquisadores. Tcnicas padronizadas bastam ser referenciadas.
tica: ao descrever experimentos relacionados a temas humanos,
indicar se os procedimentos seguidos estiveram de acordo com os
padres ticos do comit responsvel por experimentos humanos
(institucional ou regional) e de acordo com a Declarao de Helsinki de
1975, revisada em 1983. Ao relatar experimentos em animais, indicar
se diretrizes de conselhos de pesquisa institucionais ou nacionais, ou
qualquer lei nacional relativa aos cuidados e ao uso de animais de
laboratrio foram seguidas.
Resultados: devem oferecer uma descrio concisa das novas
informaes descobertas, com o mnimo julgamento pessoal. No
repetir no texto todos os dados contidos em tabelas e ilustraes.
Discusso: deve limitar-se ao significado de novas informaes e
relacionar as novas descobertas ao conhecimento existente. Somente as
citaes indispensveis devem ser includas.
Agradecimentos: devem ser breves e concisos e se restringir ao
absolutamente necessrio.
Referncias: devem ser precisas. Somente as citaes que aparecem
no texto devem ser referenciadas. Trabalhos no publicados, a no ser
os j aceitos para publicao, no devem ser citados. Trabalhos aceitos
para publicao devem ser citados como " in press "; nesse caso, uma
carta de aceitao da revista dever ser fornecida. Dados no
publicados devem ser citados somente no texto como " unpublished
observations "; nesse caso, uma carta com a permisso do autor deve
ser fornecida. As referncias ao final do manuscrito devem ser
organizadas em ordem alfabtica de acordo com o sobrenome do
primeiro autor.

Os ttulos de revistas devem ser abreviados de acordo com o estilo
usado no Index Medicus. Consultar:
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez?db=journals&TabCmd=Limits.
No texto, usar o sobrenome do autor e a data:
Lutz (1910) ou (Lutz 1910).

Com dois autores, a forma :
(Lutz & Neiva 1912) ou Lutz and Neiva (1912).
Quando h mais que dois autores, somente o primeiro mencionado:
Lutz et al. (1910) ou (Lutz et al. 1910).
Nas referncias, usar os seguintes estilos:
Artigo de revista
Chagas C, Villela E 1922. Forma cardaca da tripanosomiase americana.
Mem Inst Oswaldo Cruz 14: 15-61.
Livro ou Tese
Forattini OP 1973. Entomologia Mdica. Psychodidae, Phlebotominae,
Leishmaniose, Bartonelose, Vol. IV, Edgard Blucher, So Paulo, 658 pp.
Morel CM 1983. Genes and Antigens of Parasites. A Laboratory Manual,
2nd ed., Fundao Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, xxii + 580 pp.
Mello-Silva CC 2005. Controle alternativo e alteraes fisiolgicas em
Biomphalaria glabrata (Say, 1818), hospedeiro intermedirio de
Schistosoma mansoni Sambom, 1907 pela ao do ltex de Euphorbia
splendens var. hislopii N.E.B (Euphorbiaceae), PhD Thesis, Universidade
Federal Rural do Rio de Janeiro, Seropdica, 85 pp.
Captulo de livro
Cruz OG 1911. The prophylaxis of malaria in central and southern
Brasil. In R Ross, The Prevention of Malaria, John Murray, London, p.
390-398.
Artigo de revista na Internet
Abood S. Quality improvement initiative in nursing homes: the ANA acts
in an advisory role. Am J Nurs [serial on the Internet]. 2002 Jun [cited
2002 Aug 12];102(6):[about 3 p.]. Available from:
http://www.nursingworld.org/AJN/2002/june/Wawatch.htm
Monografia na Internet
Foley KM, Gelband H, editors. Improving palliative care for cancer
[monograph on the Internet]. Washington: National Academy Press;
2001 [cited 2002 Jul 9]. Available from:
http://www.nap.edu/books/0309074029/html/.
Homepage/Web site
Cancer-Pain.org [homepage on the Internet]. New York: Association of
Cancer Online Resources, Inc.; c2000-01 [updated 2002 May 16; cited
2002 Jul 9]. Available from: http://www.cancer-pain.org/.
Parte de uma homepage/Web site
American Medical Association [homepage on the Internet]. Chicago: The
Association; c1995-2002 [updated 2001 Aug 23; cited 2002 Aug 12].
AMA Office of Group Practice Liaison; [about 2 screens]. Available from:
http://www.ama-assn.org/ama/pub/category/1736.html
BASE DE DADOS NA INTERNET
Acesso aberto:
Who's Certified [database on the Internet]. Evanston (IL): The
American Board of Medical Specialists. c2000 - [cited 2001 Mar 8].
Available from: http://www.abms.org/newsearch.asp
Acesso fechado:
Jablonski S. Online Multiple Congenital Anomaly/Mental Retardation
(MCA/MR) Syndromes [database on the Internet]. Bethesda (MD):
National Library of Medicine (US). c1999 [updated 2001 Nov 20; cited
2002 Aug 12]. Available from:
http://www.nlm.nih.gov/mesh/jablonski/syndrome_title.html
Parte de uma base de dados na Internet
MeSH Browser [database on the Internet]. Bethesda (MD): National
Library of Medicine (US); 2002 - [cited 2003 Jun 10]. Meta-analysis;
unique ID: D015201; [about 3 p.]. Available from:
http://www.nlm.nih.gov/mesh/MBrowser.html Files updated weekly.
Updated June 15, 2005
Ilustraes: figuras e tabelas devem ser compreensveis sem a
necessidade de referncia ao texto.
- Figuras: as fotografias devem ser bem ntidas, com alto contraste,
ampliadas em preto e branco em papel brilhante, se apresentadas
lminas, as figuras devem ser numeradas consecutivamente em
algarismos arbicos. As escalas devem ser indicadas por uma linha ou
barra na figura, e referenciadas, se necessrio, na legenda (por
exemplo, bar = 1 mm etc.). Lminas e grficos devem ajustar-se tanto
em uma coluna (8 cm) ou na largura completa (16.5 cm) da pgina, e
devem ser menores que a pgina para permitir a incluso da legenda.
As letras e nmeros nas figuras devem ter tamanho legvel aps a
reduo ou a impresso. Ilustraes coloridas somente podem ser
aceitas se os autores assumirem os custos. Por outro lado, uma
fotografia colorida ilustra a capa de cada fascculo de Memrias, e os
autores so convidados a submeter para considerao da revista
ilustraes com legendas de seus manuscritos que podero vir a ilustrar
a capa.
- Tabelas: devem complementar, e no duplicar, o texto. Elas devem
ser numeradas em algarismos romanos. Um ttulo breve e descritivo
deve constar no alto de cada tabela, com quaisquer explicaes ou
notas de rodap (identificadas com letras a, b, c etc.) colocadas abaixo.
Comunicaes breves: devem ser breves e diretas. Seu objetivo
comunicar com rapidez resultados ou tcnicas particulares. As
comunicaes no devem ocupar mais do que trs pginas impressas,
incluindo figuras e/ou tabelas. No devem conter referncias em
excesso. As referncias devem ser citadas no final do texto, usando o
mesmo formato para artigos originais. Um resumo breve e trs
palavras-chave devem ser apresentados.
Formato alternativo: Os manuscritos podem ser submetidos
seguindo os "Uniform Requirements for Manuscripts Submitted to
Biomedical Journals" produzidos pelo International Committee of Medial
Journal Editors, tambm conhecidos como Vancouver Style. Nesse caso,
os autores devem seguir as diretrizes da quinta edio (Annals of
Internal Medicine 1997; 126: 36-47, ou no website
http://www.acponline.org/journals/resource/unifreqr/htm), sendo
responsveis por modificar o manuscrito onde diferir das instrues aqui
apresentadas, se o manuscrito for aceito para publicao. Os autores
tambm devero seguir os Uniform Requirements para quaisquer outras
diretrizes omitidas nestas instrues.
Uma vez que um trabalho seja aceito para publicao, os autores
devem enviar:

uma declarao de affidavit fornecida pela produo editorial da
revista, assinada por todos os autores. Autores de diferentes pases ou
instituies podem assinar em diferentes folhas que contenham a
mesma declarao.
uma declarao de copyright fornecida pela produo editorial da
revista, assinada pelo autor responsvel pela correspondncia.
Taxas: a revista no cobra taxas para publicao.
Provas: sero enviadas provas tipogrficas aos autores para a
correo de erros de impresso. As provas devem retornar para a
Produo Editorial na data estipulada. Outras mudanas no manuscrito
original no sero aceitas nesta fase.

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1997- 2009 Fundao Oswaldo Cruz
Av. Brasil, 4365
21040-900 Rio de Janeiro RJ Brazil
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Fax: +55 21 2562-1220

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Artigo 3 - Anticorpos anti- Chlamydophila abortus em caprinos no Estado de
Alagoas, Brasil
INSTRUES AOS AUTORES

Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinria e Zootecnia
(Brazilian Journal of Veterinary and Animal Sciences)

Poltica Editorial

O peridico Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinria e Zootecnia (Brazilian Journal
of Veterinary and Animal Science), ISSN 0102-0935 (impresso) e 1678-4162 (on-line),
editado pela FEPMVZ Editora, CNPJ : 16.629.388/0001-24, e destina-se publicao
de trabalhos cientficos sobre temas de medicina veterinria, zootecnia, tecnologia e
inspeo de produtos de origem animal e reas afins.

Os trabalhos encaminhados para publicao so submetidos aprovao do Corpo
Editorial, com assessoria de especialistas da rea (relatores). Os trabalhos cujos textos
necessitarem de revises ou correes sero devolvidos aos autores. Os aceitos para
publicao tornam-se propriedade do Arq. Bras. Med. Vet. Zootec. Os autores so
responsveis pelos conceitos e informaes neles contidos. So imprescindveis
originalidade, ineditismo e destinao exclusiva Revista.

Reproduo de artigos publicados: A reproduo de qualquer artigo publicado
permitida desde que seja corretamente referenciado. No permitido o uso comercial
dos resultados.

A submisso dos trabalhos feita exclusivamente on-line, no endereo eletrnico
<www.abmvz.org.br>.


Tipos de artigos aceitos para publicao

Artigo cientfico. o relato completo de um trabalho experimental. Baseia-se na
premissa de que os resultados so posteriores ao planejamento da pesquisa. Sees do
texto: Introduo, Material e Mtodos, Resultados e Discusso e Concluses. O nmero
total de pginas no deve exceder a 15.

Relato de caso. Contempla principalmente as reas mdicas, em que o resultado
anterior ao interesse de sua divulgao ou a ocorrncia dos resultados no planejada.
Sees do texto: Introduo, Casustica, Discusso e Concluses (quando pertinentes).
O nmero total de pginas no deve exceder a 10.

Comunicao. o relato sucinto de resultados parciais de um trabalho experimental,
dignos de publicao, embora insuficientes ou inconsistentes para constiturem um
artigo cientfico. Levantamentos de dados (ocorrncia, diagnsticos, etc.) tambm se
enquadram aqui. Deve ser compacto, com no mximo seis pginas impressas, sem
distino das sees do texto especificadas para Artigo cientfico, embora seguindo
aquela ordem. Quando a comunicao for redigida em portugus deve conter um
Abstract e quando redigida em ingls deve conter um Resumo.

Preparao dos manuscritos para publicao

Os trabalhos devem ser redigidos em portugus ou ingls, na forma impessoal. Para
ortografia em ingls recomenda-se o Websters Third New International Dictionary.
Para ortografia em portugus adota-se o Vocabulrio Ortogrfico da Lngua
Portuguesa, da Academia Brasileira de Letras. Os trabalhos submetidos em ingls
devero conter resumo em portugus e vice-versa.

Os trabalhos e ilustraes devero ser apresentados em Microsoft Word, folha no
formato A4, fonte Times New Roman tamanho 12, espao entre linhas 1,5, margens de
3cm, com pginas e linhas numeradas (numerao contnua).

Sees de um trabalho

Ttulo. Em portugus e em ingls. Deve ser o resumo do resumo e no ultrapassar 100
dgitos.

Autores. Os nomes dos autores viro abaixo do ttulo, com identificao da instituio a
que pertencem. Deve estar indicado o autor para correspondncia com endereo
completo, telefone, fax e e-mail.

Resumo e Abstract. Devem conter no mximo 200 palavras em um s pargrafo. No
repetir o ttulo. Cada frase uma informao. Ateno especial s concluses.

Palavras-chave e Keywords. No mximo cinco.

Introduo. Explanao concisa, na qual so estabelecidos brevemente o problema, sua
pertinncia, relevncia e os objetivos do trabalho.

Material e Mtodos. Citar o desenho experimental, o material envolvido, a descrio
dos mtodos usados ou referenciar corretamente os mtodos j publicados. No usar
subttulos.
Nos trabalhos que envolvam animais ou organismos geneticamente modificados dever
constar o nmero do protocolo de aprovao do Comit de Biotica e/ou de
Biossegurana.

Resultados. Apresentar clara e objetivamente os principais resultados encontrados.

Discusso. Discutir somente os resultados obtidos no trabalho.

Obs.: As sees Resultados e Discusso podero ser apresentadas em conjunto.

Concluses. As concluses devem estar apoiadas nos dados da pesquisa executada.

Ilustraes. So tabelas e figuras. Toda ilustrao que j tenha sido publicada deve
conter, abaixo da legenda, dados sobre a fonte (autor, data) e a correspondente
referncia deve figurar na lista bibliogrfica final.

Tabela. Conjunto de dados alfanumricos ordenados em linhas e colunas. Usar linhas
horizontais na separao do cabealho e no final da tabela. A legenda recebe
inicialmente a palavra Tabela, seguida pelo nmero de ordem em algarismo arbico e
referida no texto como Tab., mesmo quando se referir a vrias tabelas.

Figura. Qualquer ilustrao constituda ou que apresente linhas e pontos: desenho,
fotografia, grfico, fluxograma, esquema etc. As legendas recebem inicialmente a
palavra Figura, seguida do nmero de ordem em algarismo arbico e referida no texto
como Fig., mesmo se referir a mais de uma figura. As figuras devem ser enviadas em
arquivo separado, extenso.jpg.

Agradecimentos. Devem ser concisamente expressados.

Referncias bibliogrficas. As referncias devem ser relacionadas em ordem
alfabtica.

Citaes bibliogrficas

Citaes no texto devero ser feitas de acordo com ABNT/NBR 10520 de 2002. A
indicao da fonte entre parnteses sucede citao para evitar interrupo na sequncia
do texto, conforme exemplos:
autoria nica: (Silva, 1971) ou Silva (1971); (Anurio..., 1987/88) ou Anurio...
(1987/88)
dois autores: (Lopes e Moreno, 1974) ou Lopes e Moreno (1974)
mais de dois autores: (Ferguson et al., 1979) ou Ferguson et al. (1979)
mais de um trabalho citado: Dunne (1967); Silva (1971); Ferguson et al. (1979) ou
(Dunne, 1967; Silva, 1971; Ferguson et al., 1979), sempre em ordem cronolgica
ascendente e alfabtica de autores para trabalhos do mesmo ano.

Citao de citao. Todo esforo deve ser empreendido para se consultar o documento
original. Em situaes excepcionais pode-se reproduzir a informao j citada por
outros autores. No texto, citar o sobrenome do autor do documento no consultado com
o ano de publicao, seguido da expresso citado por e o sobrenome do autor e ano do
documento consultado. Na listagem dereferncia, deve-se incluir apenas a fonte
consultada.

Comunicao pessoal. No fazem parte da lista de referncias. Na citao coloca-se o
sobrenome do autor, a data da comunicao, nome da Instituio qual o autor
vinculado.

Referncias bibliogrficas

So adotadas as normas ABNT/NBR-6023 de 2002, simplificadas conforme exemplos:

Peridicos

ANURIO ESTATSTICO DO BRASIL. v.48, p.351, 1987-88.

FERGUSON, J .A.; REEVES, W.C.; HARDY, J .L. Studies on immunity to alphaviruses
in foals. Am. J. Vet. Res., v.40, p.5-10, 1979.

HOLENWEGER, J .A.; TAGLE, R.; WASERMAN, A. et al. Anestesia general del
canino. Not. Med. Vet., n.1, p.13-20, 1984.

Publicao avulsa

DUNNE, H.W. (Ed). Enfermedades del cerdo. Mxico: UTEHA, 1967. 981p.

LOPES, C.A.M.; MORENO, G. Aspectos bacteriolgicos de ostras, mariscos e
mexilhes. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE MEDICINA VETERINRIA, 14.,
1974, So Paulo. Anais... So Paulo: [s.n.] 1974. p.97. (Resumo).

MORRIL, C.C. Infecciones por clostridios. In: DUNNE, H.W. (Ed). Enfermedades del
cerdo. Mxico: UTEHA, 1967. p.400-415.

NUTRIENT requirements of swine. 6.ed. Washington: National Academy of Sciences,
1968. 69p.

SOUZA, C.F.A. Produtividade, qualidade e rendimentos de carcaa e de carne em
bovinos de corte. 1999. 44f. Dissertao (Mestrado em Medicina Veterinria) Escola
de Veterinria, Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte.

Documentos eletrnicos

QUALITY food from animals for a global market. Washington: Association of
American Veterinary Medical College, 1995. Disponvel em: <http://www.
org/critca16.htm>. Acessado em: 27 abr. 2000.

J ONHNSON, T. Indigenous people are now more cambative, organized. Miami Herald,
1994. Disponvel em: <http://www.summit.fiu.edu/MiamiHerld-Summit-Related
Articles/>. Acessado em: 5 dez. 1994.


Taxas de publicao

Taxa de submisso. A taxa de submisso de R$30,00 dever ser paga por meio de
boleto bancrio emitido pelo sistema eletrnico de submisso de artigos. Ao solicitar o
boleto bancrio, o autor informar os dados para emisso da nota fiscal. Somente
trabalhos com taxa paga de submisso sero avaliados.

Taxa de publicao. A taxa de publicao de R$55,00, por pgina impressa, ser
cobrada do autor indicado para correspondncia, por ocasio da prova final do artigo. Se
houver necessidade de impresso em cores, as despesas correro por conta dos autores.
A taxa de publicao dever ser paga por meio de boleto bancrio emitido pelo sistema
eletrnico de submisso de artigos. Ao solicitar o boleto bancrio, o autor informar os
dados para emisso da nota fiscal.