OBJETIVOS:

Comprobar el carcter anfotrico de los aminocidos por medio de la

titulacin potenciomtrica de la glicina.
RESULTADOS:

Tit ular con
HCl
Tit ular con
NaOH
0.00 5.85 5.98 5.94 7.41 2.55 2.62
2.00 4.44 8.32 2.55 8.00 3.08 3.02
3.00 4.11 8.85 2.33 8.63 3.55 3.48
5.00 3.54 9.32 1.93 9.35 4.08 3.88
5.00 3.60 9.70 1.73 10.47 4.36 4.21
5.00 3.51 10.10 1.58 11.79 4.80 4.59
1.00 3.61 10.20 1.56 11.85 5.02 4.65
1.00 3.66 10.15 1.55 11.96 5.15 4.75
1.00 3.63 10.21 1.55 11.97 5.39 4.86
1.00 3.61 10.31 1.54 12.13 5.53 4.99
0.50 3.60 10.41 1.51 12.04 5.60 5.11
0.50 3.63 10.41 1.50 12.08 5.67 5.12
15 mL GLI CI NA +15 mL
FORMOL NEUTRO
Volumen
solucin
t it ulant e
30 mL
GLI CI NA
Tit ular con
HCl
30 mL
GLI CI NA
Tit ular con
NaOH
30 mL
ACI DO
ACETI CO
Tit ular con
NaOH
30 mL ACI DO
ACETI CO +15
mL FORMOL
NEUTRO
Tit ular con
NaOH
PRCTICA 3:
PROPIEDADES ANFOTRICAS DE LOS AMINOCIDOS.
EQUIPO 1
JOANA LPEZ ARIAS
RAMIRO ABISAY MEDINA SALGUERO
11 DE MARZO DE 2014
Con la ecuacin anterior calculamos los miliequivalentes aadidos en cada etapa.
Para cada titulacin tenemos los siguientes miliequivalentes:

-3 -2 -1 0
3
4
5
6
Gly con HCl
meq de HCl
p
H
TITULACION DE GLICINA CON HCl
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
-3 -2 -1 0
2
4
6
Gly + formol con HCl
meq de HCl
p
H
TITULACION DE GLICINA + FORMOL CON HCL
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n

Miliequivalentes
de
-
OH
0.00 0.20 0.50 1.00 1.50 2.00 2.10 2.20 2.30 2.40 2.45 2.50
Miliequivalentes
de HCl
0.00 0.20 0.50 1.00 1.50 2.00 2.10 2.20 2.30 2.40 2.45 2.50
0 1 2 3
6
8
10
Gly con NaOH
meq de NaOH
p
H
GLICINA CON NaOH
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
0 1 2 3
8
10
12
Gly + formol con NaOH
meq de NaOH
p
H
GLICINA + FORMOL CON NaOH
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n

0 1 2 3
2
3
4
5
6
AcOH con NaOH
meq de NaOH
p
H
AcOH CON NaOH
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n


0 1 2 3
2
3
4
5
AcOH + formol con NaOH
meq de NaOH
p
H
AcOH + FORMOL CON NaOH
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n
O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n O r i g i n P r o 8 E v a l u a t i o n




Con los valores de pH medidos con el potencimetro durante la prctica y los meq
calculados para cada etapa de la titulacin potenciomtrica de la glicina,
graficamos pH vs meq de NaOH y HCl aadidos a la solucin de Gly, obtenemos
as la siguiente grfica:










En ella observamos cmo se comporta el pH a lo largo de cada una de las
titulaciones, sabemos entonces que a partir de esta grafica podemos obtener los
valores de pKa para los grupos funcionales de la glicina, dicho valor lo
encontramos en los puntos medios de la curva de titulacin. La siguiente figura
muestra los pKa localizados para cada titulacin:








PRIMERA Y SEGUNDA DERIVADA















1ra
Derivada

2da
Derivada

-0.705 0.238
-0.11 -0.001
-0.114 0.0252
0.012 -0.006
-0.018 0.03933333
0.1 -0.09
0.01 -4.4409E-16
0.01 -0.03
-0.02 5.9212E-16
-0.02 0.16
0.06 -0.0069551
0.1452 -

















1ra
Derivada

2da
Derivada

1.17 -0.39733333
0.1766666 -0.02066667
0.094 -0.0036
0.076 0.0008
0.08 0.00666667
0.1 -0.12
-0.02 0.05
0.03 0.07
0.1 0.13333333
0.2 -0.4
0 -0.03399184
0.4164 -
















1ra
Derivada

2da
Derivada

-1.695 0.64866667
-0.073333 -0.00166667
-0.08 0.008
-0.04 0.002
-0.03 0.00333333
-0.02 0.01
-0.01 0.01
0 -0.01
-0.01 -0.06666667
-0.06 0.08
-0.02 -0.00653061
0.06 -















1ra
Derivada

2da
Derivada

0.295 -0.034
0.21 -0.0165
0.144 0.016
0.224 0.008
0.264 -0.068
0.06 0.05
0.11 -0.1
0.01 0.15
0.16 -0.45333333
-0.18 0.52
0.08 -0.03291429
0.4832 -
En resumen, los valores de pKa obtenidos de las titulaciones realizadas son los
siguientes:
Para la primera grfica:


CONCLUSIONES:
Con la realizacin de esta prctica comprobamos que efectivamente los
aminocidos tienen carcter anfotrico ya que, dependiendo del valor de pH del
medio en el que se encuentre, estos pueden encontrarse como acido (forma
completamente protonada) o como base (forma completamente desprotonada),
as mismo, podemos encontrarlos en su forma de ion dipolar o zwitterion en el pH
conocido como punto isoelctrico (pI).
Haciendo uso de una titulacin potenciomtrica, titulamos un solucin de Glicina
0.1N, primeramente con HCl 0.1N y despus con NaOH 0.1N, se registraron los
datos de pH obtenidos, la misma operacin se realiz con una mezcla de la
solucin de glicina y formol neutro y por ultimo titulamos AcOH con NaOH 0.1N sin
y con presencia de formol. Con los datos obtenidos graficamos pH vs meq de
NaOH y de HCl agregados. En dicha grafica localizamos los pKa experimentales
que presenta cada grupo funcional del compuesto, dichos valores de pKa son muy
cercanos a los reportados en la bibliografa para la glicina y el cido actico ambos
sin presencia de formol.
Los pKa de los compuestos mezclados con formol no aparecen en la literatura.
Observamos que cuando se agrega formol a la solucin el valor del pKa
1

disminuye y el pKa
2
aumenta. Esto se debe a la estructura qumica del formol ya
que al poseer electrones libres por parte del tomo de oxgeno, al entrar en
contacto con la glicina, comienza una reaccin acido-base. Por otro lado, el formol
es polar, y sabemos que en medio polar los valores de pKa para el carboxilo
disminuyen y para el grupo amino aumentan.
Las diferencias en el pKa obtenidos y los reportados en la literatura se deben a
que dichos pKa estn determinados a condiciones estndar y nosotros realizamos
la practica a las condiciones de Toluca, por otro lado, atribuimos este error en
Titulacin pKa
1
pKa
2
pI
Glicina 3.60 9.70 5.80
Glicina + formol 1.80 10.50 6.50
AcOH 4.40
AcOH + formol 4.15
cierta parte a los potencimetros ya que el potencimetro con el que se realiz la
medicin de pH de la primera titulacin no funcionaba adecuadamente y
precisamente este valor es el que se encuentra ms alejado del reportado en la
literatura.
En conclusin, la titulacin potenciomtrica de un aminocido es una buena
herramienta para determinar los pKa de los aminocidos as como el punto
isoelctrico, con ello podemos comprobar que lo que en los libros se nos muestra
sobre la estructura de los aminocidos es real y que estos poseen un carcter
anfotrico indispensable para la vida.

CUESTIONARIO
1. Escriba las frmulas del cido Actico, Formol y Glicina

cido Actico Formol Glicina




2. Esquematice la disociacin en medio cido y medio bsico de un aminocido
Cuando el AA contiene otros grupos cidos o bsicos, el poder amortiguador gana
posibilidades. As, el cido glutmico tiene tres grupos disociables, cuyos pK son:
pK
1
=2,1; pK
2
=3,9 y pK
3
=9,8:



En el caso del AA arginina existen dos grupos bsicos y uno cido. La disociacin de
la arginina se esquematiza del siguiente modo, donde pK
1
=2,2; pK
2
=9,2 y pK
3
=12,5:

3. Explique que es el pk de un aminocido

El pk de un aminocido ser el pH al cual encontramos concentraciones
equimolares de dos formas con diferente carga". Entonces tendremos la misma
concentracin de grupos NH
3
que de COO
-
.

4. Qu funcin tiene el formol en la prctica?

El formol reacciona con glicina, formando dos compuestos, en funcin de las
condiciones de reaccin:
CH
2
O+2NH
2
CH
2
COOH-----> HOOC-CH
2
-NH-CH
2
-NH-CH
2
-COOH+ H
2
O
(Una simple reaccin de condensacin) y la reaccin Eschweiler-Clarke que
consiste en la permetilacin de los grupos amino:
3CH
2
O+NH
2
CH
2
COOH-----> Me
2
N-CH
2
-COOH+CO
2
+H
2
O

5. Cul es el objetivo de titular con cido actico?

Para que ocurra una reaccin acido-base para que fcilmente gane o pierda el
protn segn sea el caso.

6. Grficamente cmo se representa la propiedad anfotrica de los aminocidos?

EJERCICIOS DE INTEGRACIN:

1. Investigue las estructuras y punto isoelctrico de los veinte aminocidos que conforman
las protenas.
Glicina P.I. = 5.97 Alanina P.I. = 6.07 Valina P.I.= 5.97 Leucina P.I. = 5.98






Isoleucina P.I. = 6.02 Fenilanina P.I. = 5.48 Tirosina P.I.= 5.66 Triptfano P.I.= 5.89


Serina P.I. = 5.68 Treonina P.I.= 5.87 Cistena P.I.= 5.07 Metionina P.I.= 5.47






cido Asprtico P.I.= 2.77 cido Glutmico P.I.= 3.22 Histidina P.I= 7.59








Lisina P.I.= 9.74 Arginina P.I.= 10.76 Asparagina P.I.= 5.71






Glutamina P.I. = 5.65 Prolina P.I.= 6.48




2. El pH de la sangre es 7.4. Formlese las estructuras predominantes de cada uno de los
siguientes aminocidos a dicho pH: Prolina, Triptfano, Acido Glutmico e Histidina

Prolina

Triptfano


cido Glutmico

Histidina








REFERENCIAS:
1. Harper, H. A. Bioqumica ilustrada de Harper. (2007) 17 edicin. Mxico:
Editorial El Manual Moderno.
2. Daz Z, Juan C., Jurez, M. A. Bioqumica: un enfoque bsico aplicado a las
ciencias de la vida. (2007). Mxico: McGraw-Hill. pp. 722.
3. Voet, D., Voet, J. G., Pratt, C. Fundamentos de bioqumica: la vida a nivel
molecular. (2007) 2 edicin. Buenos Aires: Mdica Panamericana. pp.
1130.