UNIVERSIDAD AUTNOMA DE BAJA CALIFORNIA

BIOQUIMICA

BIOINGENIERO
MANUAL DE EXPERIMENTOS PARA EL LABORATORIO

FACULTAD DE INGENIERA MEXICALI

M.I. Susana Norzagaray Plasencia,

PRCTICA 3
APRECIACIN DEL PODER REGULADOR DE LAS SOLUCIONES BUFFER Y EL EFECTO DE LA CONCENTRACIN
Competencia.
Habilidad en el manejo del material, equipo y sustancias del laboratorio de biotecnologa, para evaluar el comportamiento de las
soluciones amortiguadoras frente a agentes cidos y agentes bsicos, mediante la aplicacin de los fundamentos tericos del equilibrio
cido-base atendiendo las normas de seguridad y los lineamientos para asegurar la sustentabilidad de las actividades experimentales
requeridas.
Fundamentos tericos.
Captulo 3, Conceptos en bioqumica, Rodney Boyer, ed. Thompson,
Capitulo 7, Qumica analtica. Gary D. Christian. 6ed, Mc Graw Hill
Material y equipo
12 tubos de ensayo
2 Pipetas de 10 de 5 mL
1 Pipeta de 1 mL
Reactivos

2 vasos de precipitados de 100 mL

1 Probeta de 50 mL
Potencimetro

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.

Cloruro de potasio 0.5M, (KCl 0.5M)

KH2PO4 0.1M
KH2PO4 0.01M
Na2HPO4 0.1M
Na2HPO4 0.01M
HCl 0.1N
HCl 0.01N

NaOH 0.1N
NaOH 0.01N
Fenolftalena
Indicador de Rojo de Fenol
Indicador de Verde de Bromocresol
Indicador de Azul de Timol
Agua destilada.

Desarrollo de la prctica
a. Prepare 3 series de cuatro tubos cada una con la composicin que se indica en la siguiente tabla.
SERIE
TUBO
I
II
III
1
2.5 mL H2O hervida y fra
2.5 mL H2O hervida y fra
2.5 mL H2O hervida y fra
2
5 mL KCl 0.5M
5 mL KCl 0.5M
5 mL KCl 0.5M
3
1 mL KH2PO4 0.01M
1 mL KH2PO4 0.01M
1 mL KH2PO4 0.01M
+
+
+
1.5 mL Na2 HPO4 0.01M
1.5 mL Na2 HPO4 0.01M
1.5 mL Na2 HPO4 0.01M
4
1 mL KH2PO4 0.1M
1 mL KH2PO4 0.1M
1 mL KH2PO4 0.1M
+
+
+
1.5 mL Na2 HPO4 0.1M
1.5 mL Na2 HPO4 0.1M
1.5 mL Na2 HPO4 0.1M
INDICADOR
Rojo de Metilo
Verde de Bromocresol
Fenolftaleina
b. Ahora trate cada serie segn se detalla a continuacin.
1

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BIOINGENIERO

BIOQUIMICA

FACULTAD DE INGENIERA MEXICALI

MANUAL DE EXPERIMENTOS PARA EL LABORATORIO

M.I. Susana Norzagaray Plasencia,

Serie I.
1) Mida el pH de cada solucin utilizando las tiras reactivas para pH
2) Agregue a cada tubo 5 gotas de Rojo de Fenol. Este indicador vira de amarillo a rojo en el rango de pH de 6.4 a 8.0. A pH
neutro es rosa plido.
Serie II.
1) Aada a cada uno de los tubos, 3 gotas de Verde de Bromocresol. Este indicador vira de amarillo a verde en el rango de pH
de 3.8 a 5.4, y a azul a pH mayor.
2) Aada al tubo 1, 5 gotas de HCl 0.01N, y observe el cambio de color. Cuente el nmero de gotas, de HCl 0.01N que debe
agregar al tubo 2 para igualar el color del tubo 1.
3) Para los tubos 3 y 4 cuente las gotas de HCl 0.1N que debe agregar para igualar el color del tubo 1.
4) Anote sus resultados en la tabla siguiente, multiplicando el nmero de gotas del HCl 0.1N por diez para poder comparar con
los tubos 1 y 2 (debido a que en el paso 3 se tiene HCl diez veces ms concentrado que en el paso2).
Serie III.
1) Agregue a los cuatro tubos, 3 gotas de Azul de Timol. Este indicador vira incoloro a rosa en el rango de pH de 8.0 a 9.6.
2) Agregue al tubo 1, 5 gotas de NaOH 0.01N. Cuente el nmero de gotas de NaOH 0.01N que debe agregar al tubo 2 para igualar
el color del tubo 1.
3) Para los tubos 3 y 4 cuente las gotas de NaOH 0.1N que debe agregar para igualar el color del tubo 1.
4) Anote sus resultados en la tabla siguiente, multiplicando el nmero de gotas del NaOH 0.1N por diez, para poder comparar
con los tubos 1 y 2. (debido a que en el paso 3 se tiene NaOH diez veces ms concentrado que en el paso2).
TUBO
SERIE
II
III

4
Volumen requerido de HCl 0.01N (gotas)
Volumen requerido de NaOH0.01N (gotas)

Cuestionario
1. Escriba qu indica el cambio de color en cada una de las series y la razn de la diferencia, en las cantidades cido y base que
hay que agregar a los tubos 2, 3 y 4 de cada serie, para igualar la coloracin con el tubo 1.
2. Escriba las reacciones que ocurren al aadir, el cido y la base fuertes al sistema amortiguador de fosfatos de las series II y III.
Bibliografa.
Rodney Boyer . Conceptos en bioqumica, , ed. Thompson,
Gary D. Christian. Qumica analtica.6ed, Mc Graw Hill