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VERIFICACION DEL PROCESO DE LIMPIEZA Y DESINFECCION DE LOS
LABORATORIOS: AGUAS Y LODOS, INMUNOLOGIA ESPECIALIZADA Y

CITOMETRIA DE FLUJO, MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS Y
MICROBIOLOGIA AMBIENTAL Y DE SUELOS

LENA MARCELA CALLEJAS
JULY AMELIA IZQUIERDO

TRABAJO DE GRADO
Presentado como requisito parcial
Para optar al titulo de microbiologa industrial

PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA
FACULTAD DE CIENCIAS
CARRERA DE MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL
Bogot, D.C
2009

NOTA DE ADVERTENCIA

Los conceptos y opiniones emitidos en este trabajo son responsabilidad
del autor y no comprometen en nada a la Pontificia Universidad Javeriana.

Articulo 23 de la resolucin No 13 de Julio de 1996.



APROBADO

____________________
Ana Karina Carrascal
Bacteriloga M. Sc
Directora

____________________ ______________________
Luisa Gutirrez Luz Amparo Maldonado
Bacteriloga Bacteriologa



_____________________ _____________________
Ingrid Schuler Garcia Janeth Arias
Decana Acadmica Directora de Carrera
Facultad de Ciencias Microbiologa Industrial y Agrcola

DEDICATORIA

Le dedico este trabajo de grado, ante todo, a Dios, por otorgarme la sabidura y la
salud para lograrlo. A mis padres por estar ah cuando ms los necesit, por su
ayuda y constante cooperacin. Por ser la fuente de mi inspiracin y motivacin
para superarme cada da ms y as poder luchar para que la vida depare un futuro
mejor. A Alejandro Daz por que sabes lo que esto significa para m. Y para todas
las personas que me acompaaron en todos y cada uno de los momentos de mi
vida.
Lena Marcela Callejas

Agradezco a Dios ante todo quien me ha dado la vida, haberme permitido culminar
esta meta. A mis padres por su apoyo incondicional, a mis hermanas por su
inmensa ayuda, a mi hija Sarita, quien ha sido el motivo para luchar y el motor de
mi vida. A Germn mi esposo, por su gran amor, su sacrificio, su infinita paciencia
y comprensin. A todos, dedico este trabajo de grado y los llevo en mi corazn.

July Amelia Izquierdo

AGRADECIMIENTOS

A Ana Karina Carrascal, Bacteriloga, por su colaboracin, confianza, apoyo y
dedicacin, tambin por brindarnos su amplio conocimiento en la realizacin y
finalizacin de esta investigacin

A Luisa Gutirrez por permitirnos realizar este trabajo de grado en la Universidad
Javeriana.

Al personal encargado de los procesos de limpieza y desinfeccin que con su
disposicin nos ayudaron da tras da para lograr los resultados.

RESUMEN

El presente trabajo se realiz con el fin de verificar los procesos de limpieza y
desinfeccin realizados en las reas de: pisos, mesones y cmara de flujo
ubicadas en seis laboratorios que prestan servicios en el departamento de
microbiologa de la Universidad Javeriana. Se hizo previamente al proceso de
limpieza y desinfeccin un anlisis microbiolgico de las superficies a muestrear
con el fin de determinar la carga microbiana presente, y despus del proceso de
limpieza y desinfeccin para observar la eficacia del detergente y desinfectante
utilizados: alquilaril sulfonato de sodio e Hipoclorito de sodio (100ppm, 14.2 ppm,
12.2 ppm, 1.83 ppm). Cada lugar se analiz 13 veces por un perodo de 2 meses.

Para el anlisis de las superficies se utiliz el mtodo del escobilln de acuerdo a
la metodologa descrita por la A.E.F.I. Se hizo recuento de bacterias mesfilas
aerobias, coliformes y hongo y levaduras. En ninguno de los laboratorios se
encontraron coliformes indicando que las condiciones de higiene en estas reas
son adecuadas. Con relacin a los mesfilos aerobios se demostr que el proceso
de limpieza y desinfeccin fue adecuado en las reas correspondientes a
mesones y pisos y equipo por encontrar reducciones superiores al 90%.

En el caso de hongos y levaduras no se encontraron reducciones superiores al
90% en ninguna rea.

Palabras claves: limpieza, desinfeccin, verificacin, microorganismos.

TABLA DE CONTENIDO
Pg.
1. INTRODUCCION................................................................................................. 1
2. MARCO TEORICO.............................................................................................. 2
2.1. DEFINICION DE CALIDAD .............................................................................. 3
2.1.1. PARAMETROS DE LA CALIDAD ................................................................ 4
2.1.2. IMPORTANCIA DE LA CALIDAD ................................................................ 4
2.1.3. CALIDAD TOTAL ........................................................................................ 5
2.2. SISTEMA DE GESTION DE CALIDAD ........................................................... 5
2.2.1. PLANIFICACION DE LA CALIDAD .............................................................. 6
2.2.2. CONTROL DE LA CALIDAD ....................................................................... 7
2.2.3. ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD .......................................................... 7
2.2.4. MEJORA CONTINUA ................................................................................... 7
2.3. SISTEMAS DE CONTROL DE CALIDAD ....................................................... 7
2.3.1. BUENAS PRACTICAS DE LABORATORIO ................................................ 7
2.4. NORMAS DE CALIDAD .................................................................................. 9
2.4.1. NTC ISO IEC 17025:2000 ........................................................................... 10
2.4.2. NORMA ISO 9000 ....................................................................................... 11
2.5 LIMPIEZA Y DESINFECCION DE LABORATORIO ...................................... 13

2.5.1 PROGRAMA DE LIMPIEZA Y DESINFECCION ......................................... 13
2.6 CARACTERISTICAS DE UN DESINFECTANTE IDEAL ............................... 14
2.6.1 ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA ................................................................. 14
2.6.2 CONCENTRACIN DEL AGENTE.............................................................. 15
2.6.3 SOLUBILIDAD ............................................................................................. 15
2.6.4 ALTA ESTABILIDAD ................................................................................... 15
2.6.5 NO CORROSIVO ......................................................................................... 15
2.6.6 CAPACIDAD DETERGENTE ...................................................................... 15
2.6.7 DISPONIBILIDAD ........................................................................................ 16
2.7 CONTROL DE CRECIMIENTO MICROBIANO .............................................. 16
2.7.1. MICROORGANISMO BLANCO .................................................................. 16
2.7.1.1. ANTIMICROBIANOS ............................................................................... 16
2.7.2. MECANISMOS DE ACCIN DE LOS DESINFECTANTES ....................... 17
2.7.2.1. MEMBRANA EXTERNA .......................................................................... 17
2.7.2.2. MEMBRANA CITOPLASMTICA ........................................................... 18
2.7.2.3. METABOLISMO ENERGTICO .............................................................. 18
2.7.2.4. CITOPLASMA Y NCLEO ...................................................................... 19
2.7.2.5. ESPOROS BACTERIANOS..................................................................... 19
2.7.2.6. SOBRE LOS VIRUS ................................................................................ 20
2.7.3. AGENTES QUMICOS ................................................................................ 20

2.8. CONDICIONES QUE INFLUYEN EN LA ACTIVIDAD MICROBIANA .......... 20
3. DESINFECTANTES USADOS EN LOS LABORATORIOS QUE PRESTAN
SERVICIOS ........................................................................................................... 22
3.1. HIPOCLORITO DE SODIO ............................................................................ 22
3.2 ALQUILARIL SULFONATO ........................................................................... 24
4. JUSTIFICACIN ............................................................................................... 26
5. OBJETIVOS ...................................................................................................... 28
5.1 OBJETIVO GENERAL .................................................................................... 28
5.2. OBJETIVOS ESPECFICOS .......................................................................... 28
6. MATERIALES Y MTODOS ............................................................................. 29
6.1. HIPOTESIS .................................................................................................... 29
6.2. LUGAR DE ESTUDIO .................................................................................... 29
6.3. SITIO DE MUESTREO ................................................................................... 30
6.4. NUMERO DE MUESTRAS ............................................................................ 31
6.5. TOMA DE MUESTRAS .................................................................................. 32
6.5.1. TCNICA DEL HISOPO ............................................................................. 39
6.6. PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS ..................................................... 33
6.7. LECTURA DE RESULTADOS ....................................................................... 34
7. RESULTADOS .................................................................................................. 35
8. DISCUSION DE RESULTADOS ....................................................................... 47

9. CONCLUSIONES.............................................................................................. 54
10. RECOMENDACIONES ................................................................................... 56
11. BIBLIOGRAFIA............................................................................................... 58

LISTA DE FIGURAS
FIGURA # 1 PROCESO DE LIMPIEZA Y DESINFECCIN ................................. 30
FIGURA # 2 TOMA DE MUESTRAS ................................................................... 32
FIGURA # 3 FORMA DE MUESTREO EN LAS SUPERFICIES ANALIZADAS .. 33
FIGURA #4 MICROORGANISMOS FNGICOS AISLADOS DE LAS
SUPERFICIES MUESTREADAS ......................................................................... 37
FIGURA # 5. BACTERIAS, HONGOS Y LEVADURAS AISLADAS DE LAS
SUPERFICIES MUESTREADAS, MUESTREOS ANTES Y DESPUS DEL
PROCESO DE LIMPIEZA Y DESINFECCIN ..................................................... 38
FIGURA # 6 PORCENTAJE DE REDUCCIN MESFILOS AEROBIOS VS
REAS DE MUESTREO DEL LABORATORIO DE MICROBIOLOGA DE
ALIMENTOS ......................................................................................................... 39
FIGURA # 7 PORCENTAJE DE REDUCCIN HONGOS Y LEVADURAS VS
REAS DE MUESTREO DEL LABORATORIO DE MICROBIOLOGA DE
ALIMENTOS ......................................................................................................... 40
REAS DE MUESTREO DEL LABORATORIO DE MICROBIOLOGA
AMBIENTAL Y DE SUELOS ................................................................................ 40
REAS DE MUESTREO DEL LABORATORIO DE MICROBIOLOGA
AMBIENTAL Y DE SUELOS ................................................................................ 41
REAS DE MUESTREO DEL LABORATORIO DE INMUNOLOGA
ESPECIALIZADA Y CITOMETRA DE FLUJO .................................................... 41
REAS DE MUESTREO DEL LABORATORIO DE DE INMUNOLOGA
ESPECIALIZADA Y CITOMETRA DE FLUJO .................................................... 42
REAS DE MUESTREO DEL LABORATORIO 235 BACTERIAS Y VIRUS ....... 42

LISTA DE FIGURAS
Pg.
REAS DE MUESTREO DEL LABORATORIO 235 BACTERIAS Y VIRUS ....... 43
REAS DE MUESTREO DEL LABORATORIO DE PARASITOLOGA ............. 43
REAS DE MUESTREO DEL LABORATORIO DE PARASITOLOGA .............. 44
REAS DE MUESTREO DEL LABORATORIO 124 BIOENSAYOS ................... 44
REAS DE MUESTREO DEL LABORATORIO 124 BIOENSAYOS ................... 45

LISTA DE TABLAS

TABLA # 1 LABORATORIOS DE INVESTIGACIN, SITIOS Y SUPERFICIES DE
MUESTREO .......................................................................................................... 31
TABLA # 2 TEMPERATURA Y TIEMPO DE INCUBACIN DE
MICROORGANISMOS ESTUDIADOS ................................................................. 33
TABLA # 3 PRUEBA T DE LOS LABORATORIOS MUESTREADOS PARA
MESFILOS AEROBIOS Y HONGOS Y LEVADURAS ...................................... 45

1. NTRODUCCION
Desde el inicio las organizaciones han buscado mejorar su competitividad
implantando programas y tcnicas para el mejoramiento de la calidad de sus
productos y servicios, y la productividad de su operacin. En el mundo actual
donde el inters de los laboratorios que prestan servicios es mantener controladas
todas las variables que intervienen en el procesamiento y anlisis de muestras,
toma particular importancia la verificacin como una herramienta importante para
asegurar la calidad y la trazabilidad de cada una de las variables que intervienen
en los procesos de limpieza y desinfeccin, garantizando el cumplimiento de las
buenas prcticas de laboratorio. De ah la importancia de establecer mtodos de
limpieza y desinfeccin adecuados en las reas de trabajo. Por esto se deben
utilizar desinfectantes que cumplan con ciertas caractersticas especficas, siendo
capaces de eliminar diferentes tipos de microorganismos patgenos y no
patgenos a concentraciones adecuadas en intervalos de tiempo determinados.
Para llevar a cabo estos procedimientos de limpieza es necesario tener en cuenta
las condiciones que influyen en la accin antimicrobiana como la clase y estado
fisiolgico de los microorganismos y su ambiente, de igual manera el modo de
accin de los agentes antimicrobianos determinando su dao, alteracin a
estructuras y funciones celulares.

Para determinar la actividad desinfectante de un agente qumico es necesario
conocer su eficacia lo cual se logra mediante una verificacin. El proceso de
limpieza y desinfeccin a establecer en seis laboratorios de servicios del
Departamento de Microbiologa ubicados en la Facultad de Ciencias de la
Universidad Javeriana, es especfico para cada uno y depende del tipo de residuo
(azcares, protenas, grasa y sales) y microorganismo a remover.

En cuanto a los laboratorios que prestan servicios de anlisis microbiolgicos a
empresas, en los cuales se manipulan muestras de diferentes orgenes, los datos

obtenidos cumplen un papel importante, estos deben de ser confiables para
asegurar la calidad de los resultados.

Por esto, la finalidad de este estudio fue demostrar la efectividad de los procesos
de limpieza y desinfeccin llevados a cabo en los laboratorios de que prestan
servicios al Departamento de Microbiologa. Este proceso fue evaluado realizando
un anlisis microbiolgico de las superficies de mesones, pisos antes y despus
del proceso de limpieza y desinfeccin mediante la tcnica del hisopo.

2. MARCO TEORICO

2.1 DEFINICION DE CALIDAD

El significado histrico de la palabra calidad es el de aptitud o adecuacin al uso.
Se dice que un producto o servicio es de calidad cuando satisface las necesidades
y expectativas del cliente o usuario, en funcin de parmetros como:
* Seguridad que el producto o servicio confieren al cliente.
* Fiabilidad o capacidad que tiene el producto o servicio para cumplir las
funciones especificadas, sin fallo y por un perodo determinado de tiempo.
* Servicio o medida en que el fabricante y distribuidor responden en caso de
fallo del producto o servicio.

Entre las definiciones se encuentran la de la Sociedad Americana para el Control
de Calidad (A.S.Q.C.) que define la calidad como el conjunto de caractersticas de
un producto, proceso o servicio que le confieren su aptitud para satisfacer las
necesidades del usuario o cliente (JURAN, 1990)
Otras Definiciones formales
Otras definiciones de organizaciones reconocidas y expertos del mundo de la
calidad son:
Definicin de la norma ISO 9000: Calidad: grado en el que un conjunto de
caractersticas inherentes cumple con los requisitos
Real Academia de la Lengua Espaola: Propiedad o conjunto de
propiedades inherentes a una cosa que permiten apreciarla como igual,
mejor o peor que las restantes de su especie
Philip Crosby: Calidad es cumplimiento de requisitos
Joseph Juran: Calidad es adecuacin al uso del cliente.
Armand V. Feigenbaum: Satisfaccin de las expectativas del cliente.

Genichi Taguchi: Calidad es la menor prdida posible para la sociedad.
William Edwards Deming: Calidad es satisfaccin del cliente.
Walter A. Shewhart: La calidad como resultado de la interaccin de dos
dimensiones: dimensin subjetiva (lo que el cliente quiere) y dimensin
objetiva (lo que se ofrece)(BERNILLON, 1999)
Nunca se debe confundir la calidad con niveles superiores de atributos del
producto o servicio, sino con las obtencin regular y permanente de los atributos
del bien ofrecido que satisfaga a los clientes para los que ha sido diseado.
(HARRINGTON, 1992).
2.1.1. PARMETROS DE LA CALIDAD
Calidad de diseo: es el grado en el que un producto o servicio se ve
reflejado en su diseo.
Calidad de conformidad: Es el grado de fidelidad con el que es reproducido
un producto o servicio respecto a su diseo.
Calidad de uso: el producto ha de ser fcil de usar, seguro, fiable, etc.
El cliente es el nuevo objetivo: las nuevas teoras sitan al cliente como
parte activa de la calificacin de la calidad de un servicio intentando crear
un estndar en base al punto subjetivo de un cliente. La calidad de un
producto no se va a determinar solamente por parmetros puramente
objetivos sino incluyendo las opiniones de un cliente que usa determinado
producto o servicio (BERNILLON, 1999).
2.1.2. LA IMPORTANCIA DE LA CALIDAD
La importancia de la calidad en el servicio se puede entender por las siguientes
razones:
Crecimiento de la industria del servicio.
Crecimiento de la competencia.

Mejor conocimiento de los clientes.
Calidad de servicio hacia el cliente, quedando satisfecho segn su
perspectiva.
2.1.3. Calidad Total

La calidad ha experimentado un profundo cambio hasta llegar a lo que hoy.
conocemos como, tambin denominado Excelencia. En el contexto de las
organizaciones industriales desde comienzos de este siglo, y tal vez antes, se
entenda la calidad como: El grado en que un producto cumpla con las
especificaciones tcnicas que se haban establecido cuando fue diseado.
Posteriormente fue evolucionando el concepto de calidad, y la norma europea
66001, la define como: La adecuacin al uso del producto o, ms detalladamente,
el conjunto de propiedades y caractersticas de un producto o servicio que le
confieren su aptitud para satisfacer las necesidades expresadas o implcitas
(BERNILLON, 1999).

Ms recientemente el concepto de calidad ha trascendido hacia todos los mbitos
de la organizacin y as actualmente se define como: Todas las formas a travs de
las cuales la organizacin satisface las necesidades y expectativas de sus clientes,
sus empleados, las entidades implicadas financieramente y toda la sociedad en
general (BERNILLON, 1999).

2.2. SISTEMA DE GESTION DE CALIDAD

Siempre que se presta un servicio las caractersticas de este deben cumplir con
determinadas condiciones o requisitos que conformen al cliente que lo recibe, o a
la sociedad. El sistema de gestin de la calidad es el conjunto de actividades que
se desarrollan para que las caractersticas del servicio cumplan con los requisitos
establecidos.

El planteo inicial antes de elaborar o disear el sistema de calidad es establecer o
averiguar cules son los requisitos que deben cumplir el producto o servicio.
Luego se debe decidir de qu forma se van a cumplir los requisitos usando los
recursos disponibles de la manera ms eficiente. Existen normas o estndar es de
calidad que contienen requisitos de carcter general y que se pueden aplicar a un
caso particular siempre que se determina que los requisitos de dicha norma o
estndar sean equivalentes a los requisitos del propio producto o servicio que se
debe brindar. Tambin es posible utilizar solamente aquellos requisitos de una
Norma que son aplicables al producto o servicio (BERNILLON, 1999).
El sistema de control destinado a eliminar y/o prevenir las fallas del producto o el
servicio que se brinda y cumplir con los requisitos establecidos se denomina
Sistema de Gestin de la Calidad o simplemente Sistema de Calidad. Sistema
de calidad es el conjunto de actividades que se planifican y realizan en una
empresa, durante la fabricacin de un producto o la prestacin de un servicio, para
lograr efectivamente la calidad de ese producto o servicio, tomando todas las
precauciones necesarias a fin de prevenir la aparicin de fallas y desviaciones
durante el proceso productivo.
Las actividades de un sistema de calidad se pueden dividir en cuatro grupos: la
planificacin, el control, el aseguramiento y la mejora de la calidad (BERNILLON,
1999)

2.2.1. PLANIFICACION DE LA CALIDAD

Planificacin de la calidad son las actividades dirigidas a establecer los objetivos y
especificar los procesos y recursos necesarios para cumplir dichos objetivos.

2.2.2. CONTROL DE LA CALIDAD

Son las tcnicas de inspeccin aplicadas a produccin para evitar la salida de
bienes o servicios defectuosos.

2.2.3. ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD

Conjunto de actividades planificadas y organizadas sistemticamente que se
llevan a cabo para demostrar, probar y asegurar que una materia, producto,
servicio o proceso satisface los criterios de calidad y cumple con las
especificaciones previamente establecidas.

2.2.4. MEJORA CONTINUA

Mejora de la calidad son las actividades enfocadas a aumentar la capacidad de la
organizacin para cumplir con los requisitos de calidad mejorando la eficacia y la
eficiencia. El objetivo ms importante de un sistema de calidad es que las
actividades normales en la fabricacin de un producto o en la prestacin de un
servicio se realicen en forma correcta para no tener la necesidad de corregir lo ya
realizado enmendando los errores cometidos por una falta de previsin. Lo ideal
es lograr hacer las cosas bien la primera vez que se hacen (HARRINGTON,
1992).

2.3. SISTEMAS DE CONTROL DE CALIDAD

2.3.1. Buenas Prcticas de Laboratorio

A principios de la dcada de los 60 del Siglo pasado, como parte de la gua
elaborada para las Buenas Prcticas de Produccin (BPP) de la industria, surgi el
concepto de Buenas Prcticas de Laboratorios (BPL). En donde se establecan los
elementos que un laboratorio deba asegurar para lograr que los resultados de sus
ensayos tuvieran una confiabilidad apropiada. Esto fue lo que posteriormente se
denomin BPL. (GUTIERREZ, 2000)
Las BPL son un sistema de calidad que involucra a la organizacin de un
laboratorio. Dicho sistema establece las condiciones bajo las cuales se planifican,
realizan, controlan, registran, archivan e informan los estudios realizados por un
laboratorio. Estas reglas son promulgadas por organismos como la Organization

for Economic Cooperation and Development (OCDE) las define como: "Las BPL es
todo lo relacionado con el proceso de organizacin y las condiciones tcnicas bajo
las cuales los estudios de laboratorio se han planificado, realizado, controlado,
registrado e informado".

El propsito de las BPL es asegurar la calidad de los datos en los estudios
realizados, cuestin de vital importancia ya que constituye la base de su
aceptacin entre distintos organizaciones y pases. Dentro de este contexto las
Buenas Prcticas de Laboratorio son un conjunto de reglas, procedimientos
operativos y prcticas establecidas y promulgadas por un determinado organismo,
que se consideran obligatorias y buscan asegurar la calidad e integridad de los
datos producidos en determinados tipos de investigaciones o estudios.

As para las instalaciones, solo exige que las condiciones sean tales que faciliten
la realizacin correcta de los ensayos, y que las condiciones ambientales no
invaliden los resultados ni comprometan la calidad requerida.
En general, resulta importante asegurar el orden y la limpieza del laboratorio, y en
el caso de los laboratorios de microbiologas es necesario preparar procedimientos
para estas operaciones.

Con el objetivo de reducir el riesgo de contaminacin y facilitar las labores de
limpieza y desinfeccin, se recomiendan algunas de las series de medidas como
las que se presentan a continuacin, sin que stas sean exhaustivas
- uniones cncavas entre suelo, paredes y techos.
- iluminacin empotrada en los techos.
- las reas de trabajo deben estar debidamente ventiladas, lo que puede
conseguirse mediante ventilacin natural o forzada, o mediante el uso de unidades
de aire acondicionado, equipadas con filtros para el polvo en la entrada de aire;
- disponer de suficiente espacio para almacenamiento.
Para mantener las condiciones ambientales que se requiere para los ensayos

microbiolgicos, la limpieza y desinfeccin son cruciales. Por ello se establece un
programa documentado de limpieza y desinfeccin que tenga en cuenta los
resultados de la vigilancia de las condiciones ambientales y la posibilidad de
contaminacin cruzada. La vigilancia tendr en cuenta los niveles de
biocontaminacin tanto el aire como de las superficies de trabajo. Se definirn los
recuentos mximos de microorganismos que se consideren aceptables y estarn
dispuestas las medidas a tomar para corregir las situaciones en que se
sobrepasen estos lmites. Estas medidas incluyen, por ejemplo:

- limpieza y desinfeccin a fondo del laboratorio (incluyendo superficies de
trabajo y filtros del aire acondicionado)
- incremento de la frecuencia de las operaciones de limpieza y desinfeccin.
- modificaciones en los procedimientos de limpieza y desinfeccin.
- Cambio de desinfectantes.
Con relacin a las instalaciones tambin hay que considerar los aspectos de
bioseguridad, y por tanto las mismas se deben adaptar de acuerdo a la
clasificacin de los microorganismos que se trabajen.

2.4. NORMAS DE CALIDAD

Las Normas de Calidad tienen por objetivo ayudar y orientar al responsable de una
actividad en el diseo del sistema de calidad y en brindar herramientas de trabajo
de utilidad para detectar, evaluar y prevenir las fallas que puedan ocurrir
(HARRINGTON, 1992).

Evolucin de las Normas de calidad

Las primeras normas de calidad fueron diseadas usando el siguiente
razonamiento:
1. En toda empresa se realizan un conjunto de actividades brindar un servicio.
2. Cada una de esas actividades puede ser una fuente de errores y desviaciones.

3. Conviene establecer medidas de control para cada una de estas actividades.

Una norma de calidad establece pautas o criterios para que durante todas estas
actividades que se realizan en el proceso productivo no se produzcan fallas o
desviaciones que afecten la calidad final del servicio en forma significativa. Los
Criterios de Calidad son la forma especial en que se realizan todas estas
actividades para evitar que constituyan una fuente de error.

2.4.1. NTC ISO IEC 17025: 2000

Por la importancia de los resultados de los laboratorios, que participan en la
evaluacin de conformidad de los productos, actualmente se exige la acreditacin
de los laboratorios que es un estadio superior a las BPL. La acreditacin es un
proceso donde los laboratorios deben contratar a una organizacin, independiente
y reconocida, para que los evalen y avale la garanta de sus resultados. Es una
forma de brindar confianza a los clientes, y su costo financiero se justifica cuando
el mbito de accin lo requiera.

La aplicacin de las BPL y el cumplimiento de los requisitos necesarios para la
acreditacin que se estipulan en la norma ISO/IEC 17025:2000 requisitos
generales para la competencia de laboratorios de calibracin y ensayo ayudan a
una correcta organizacin del trabajo con un ahorro de tiempo y recursos, por lo
que siempre resulta beneficioso. (GUTIERREZ, 2000)

Esta norma permite demostrar que un laboratorio tiene la capacidad de generar
resultados validos, que es tcnicamente competente y que opera un sistema de
calidad. Los aspectos que se incluyen en esta norma son:
* Los requisitos de gestin, que abarcan: organizacin, sistema de gestin de la
calidad, control de la documentacin, revisin de solicitudes, licitaciones y
contratos, subcontratacin de ensayos, adquisicin de servicios, reclamos, control

de trabajos no conformes, acciones preventivas y correctivas, control de registro,
auditoras internas y revisiones por la Direccin.
* Los requisitos tcnicos, que tienen en cuenta personal, instalaciones y
condiciones ambientales, mtodos de calibracin y ensayo, validacin de
mtodos, equipos, trazabilidad de las mediciones, manejo de muestras, manejo de
los objetos de ensayo, aseguramiento de la calidad de los resultados e informe de
los resultados.
Todo esto permiti la elaboracin del manual de calidad, los manuales de
procedimientos y las instructivas correspondientes a utilizar en el trabajo diario.
Para los laboratorios que trabajan en el campo de la microbiologa y la
biotecnologa es especialmente importante observar las BPL, dado la multitud de
elementos que interviene en la ejecucin de los ensayos e influyen en el resultado
correcto (GUTIERREZ, 2000)
2.4.2. NORMA ISO 9000

La familia de normas ISO 9000 son normas de "calidad" y "gestin continua de
calidad", establecidas por la Organizacin Internacional para la Estandarizacin
(ISO) que se pueden aplicar en cualquier tipo de organizacin o actividad
sistemtica, que est orientada a la produccin de bienes o servicios. Se
componen de estndares y guas relacionados con sistemas de gestin y de
herramientas especficas como los mtodos de auditora (el proceso de verificar
que los sistemas de gestin cumplen con el estndar) (HARRINGTON, 1992).
Su implantacin en estas organizaciones, aunque supone un duro trabajo, ofrece
una gran cantidad de ventajas para las empresas. Los principales beneficios son:
mejorar la satisfaccin del cliente, mejorar continuamente los procesos
relacionados con la Calidad, reduccin de rechazos e incidencias en la produccin
o prestacin del servicio y aumento de la productividad

La familia de normas apareci por primera vez en 1987 teniendo como base una
norma estndar britnica (BS), y se extendi principalmente a partir de su versin
de 1994, estando actualmente en su versin 2008.
La principal norma de la familia es actualmente la: ISO 9001:2000 - Sistemas de
Gestin de la Calidad - Requisitos.
Otra norma vinculante a la anterior: ISO 9004:2000 - Sistemas de Gestin de la
Calidad - Gua de mejoras del funcionamiento.
Las normas ISO 9000 de 1994 estaban principalmente pensadas para
organizaciones que realizaban proceso productivo y, por tanto, su implantacin en
las empresas de servicios era muy dura y por eso se sigue en la creencia de que
es un sistema bastante burocrtico. Con la revisin de 2000 se ha conseguido una
norma bastante menos burocrtica para organizaciones de todo tipo, y adems se
puede aplicar sin problemas en empresas de servicios e incluso en la
Administracin Pblica (HARRINGTON, 1992).
Para verificar que se cumple con los requisitos de la norma, existen unas
entidades de certificacin que dan sus propios certificados y permiten el sello.
Estas entidades estn vigiladas por organismos nacionales que les dan su
acreditacin. Para la implantacin, es necesario que apoye a la organizacin una
empresa de consultora, que tenga buenas referencias, y el firme compromiso de
la Direccin de que quiere implantar el Sistema, ya que es necesario dedicar
tiempo del personal de la empresa para implantar el Sistema de gestin de la
calidad (HARRINGTON, 1992).
2.5. LIMPIEZA Y DESINFECCION DE LABORATORIOS

Los desinfectantes son sustancias qumicas con propiedades germicidas y
bactericidas, es decir, que eliminan microorganismos patgenos (pero no
necesariamente esporas resistentes). Los desinfectantes deben su accin a los

ingredientes activos que contienen. Entre los principales tenemos: El fenol, cresol,
hipoclorito de sodio, formaldehdo o glutaraldehdo que reaccionan con gran
facilidad con diferentes grupos funcionales de los cidos nucleicos y protenas
alquilando estos radicales esenciales. Los ingredientes activos son
complementados con emulsificantes y otros ingredientes inertes como el agua,
colorantes, fijadores, entre otros (CABALLERO A, 2001).

2.5.1 PROGRAMA DE LIMPIEZA Y DESINFECCIN

Los programas de limpieza y desinfeccin debern asegurar que todas las
partes de las instalaciones estn debidamente limpias, e incluir la limpieza
del equipo de limpieza. Deber vigilarse de manera constante y eficaz y,
cuando sea necesario, documentarse la idoneidad y eficacia de la limpieza y los
programas correspondientes. El Programa de Limpieza y Desinfeccin debe
especificar las distintas labores de limpieza y desinfeccin que se deben realizar
en una organizacin (GUTIERREZ, 2000).
Este programa debe considerar que las labores de limpieza sean realizadas por
los mismos empleados del proceso, por lo que debern ser entrenados y tener
acceso a ese documento. La organizacin debe contar con Procedimientos de
Higiene escritos, que indiquen en forma clara el rea o equipo a limpiar y
desinfectar, la frecuencia, la forma de hacerlo, los instrumentos a utilizar y el
responsable de hacerlo, as mismo debe asegurarse que dichos procedimientos
se apliquen y cumplan (GUTIERREZ, 2000).

Para elaborar un programa de limpieza y desinfeccin se consideran las siguientes
caractersticas:
Antes, durante y despus del proceso
Identificacin de reas y equipos crticos
Procedimientos de limpieza y desinfeccin
Inspeccin y verificacin

Validacin (GUTIERREZ, 2000)

2.6. CARACTERISTICAS DE UN DESINFECTANTE IDEAL

Para los procesos de desinfeccin, un desinfectante ideal es aquel agente qumico
o fsico que asegure una completa destruccin de los microorganismos que
puedan interferir y/o causar contaminacin cruzada que afecte en los resultados
de futuros anlisis como lo es para el caso de los laboratorios que prestan
servicios anteriormente mencionados, de ah la importancia de la seleccin de un
buen desinfectante, que cumpla con caractersticas tales como:

2.6.1. Actividad Antimicrobiana

Debe destruir toda clase y cantidad de microorganismos que puedan permanecer
tanto en el ambiente como en las diferentes superficies y equipos a evaluar, en un
lapso razonable, de modo que deben tener una buena concentracin de
ingredientes activos lo cual garantizar su efectividad y poder residual (MENES
2000).

2.6.2. Concentracin del agente

En las concentraciones requeridas no debe contener sustancias txicas para el
hombre y otros seres vivos, as como tampoco debe tener sabor
(RODRIGUEZ, 2002).

2.6.3. Solubilidad

El agente deber ser soluble en agua y otros disolventes en la medida necesaria
para un uso eficaz (RODRIGUEZ, 2002).

2.6.4. Alta Estabilidad

Excepto en los casos en los que la modificacin sea esencial para su accin, la
estructura qumica del agente debe ser tal que resista diversas condiciones,
especialmente el contacto con diferentes fluidos biolgicos (RODRIGUEZ, 2002).

2.6.5. No Corrosivo
El desinfectante no deber poseer propiedades corrosivas, ni irritantes, as como
tampoco producir manchas u otras alteraciones en los metales (RODRIGUEZ,
2002).

2.6.6. Capacidad Detergente

El desinfectante debe lograr una accin tanto limpiadora (detergente) como
desinfectante para aumentar su eficacia (RODRIGUEZ, 2002).

2.6.7. Disponibilidad

Debe ser aplicable a un costo razonable, seguro, y fcil de almacenar, manipular,
transportar y aplicar (RODRIGUEZ, 2002).

La importancia relativa de estas caractersticas depender de su situacin
individual, ningn desinfectante trabaja instantneamente. Todos requieren una
cantidad determinada de tiempo de contacto para ser efectivos. La temperatura y
la concentracin de desinfectante influyen en el valor de eliminacin de
microorganismos. Se debe usar la concentracin recomendada del fabricante del
desinfectante. Todos los desinfectantes son menos efectivos en presencia de
material orgnico, la materia orgnica s inmiscuye con la accin de
desinfectantes por: el revestimiento del organismo patgeno y su prevencin del
contacto con el desinfectante; formando barreras qumicas con este. Por lo tanto lo
hace inactivo contra los organismos; o reaccionando qumicamente y
neutralizando el desinfectante. Por esto es importante la Realizacin de una buena
limpieza antes de la aplicacin del desinfectante.

2.7. CONTROL DE CRECIMIENTO MICROBIANO

La funcin principal de la desinfeccin es la eliminacin de microorganismos no
deseados en el rea de trabajo. En vista de la gran variedad de agentes que se
pueden utilizar en el proceso de desinfeccin, es importante conocer las
diferencias que se marcan en sus mecanismos de accin y los tipos de clulas
microbianas que pueden ser destruidas.

2.7.1. Microorganismo blanco
2.7.1.1. Antimicrobianos

Sustancias qumicas producidas por microorganismos o por sntesis qumica que a
bajas concentraciones son capaces de inhibir el crecimiento o eliminar otro
microorganismo como lo son los fungicidas y viricidas. Adicionalmente tambin
pueden causar efectos nocivos como impedir que crezcan los microorganismos y
causen enfermedades, estos se denominan como: bacteriostticos, fungistticos y
virustticos (MCDONNELL, 1999).

2.7.2. MECANISMOS DE ACCIN DE LOS DESINFECTANTES

La actuacin de las sustancias qumicas con accin desinfectante, se centra por lo
general en algn punto concreto de la estructura de los microorganismos o ejercen
su accin sobre algn mecanismo vital. Se seleccionan, por lo general, productos
con actividad selectiva (que producen dao al microorganismo, sin alterar las
estructuras celulares del hospedador, circunstancia que obedece a diferencias
entre la fisiologa celular y la microbiana). Brevemente, pueden considerarse las
siguientes "dianas celulares" principales:

2.7.2.1. Membrana Externa

La membrana externa protege la integridad de la bacteria y es por lo tanto esencial
para su supervivencia. En su composicin se incluyen fosfolpidos y

lipopolisacridos estabilizados mediante cationes de Mg
++
y Ca
++
. Hay, adems,
protenas y otros compuestos ms o menos complejos segn el tipo de
microorganismo que se considere. De este modo, segn que las molculas del
desinfectante ionizado sean absorbidas o repelidas por la carga elctrica en el
contacto inicial, puede suceder:
a) que las molculas no polares penetren en el interior y disuelvan la fase lpida de
la bacteria.
b) Caso en el que, como consecuencia de la carga elctrica sean repelidos,
pueden actuar sistemas de transporte especfico que conducen y transportan el
desinfectante a travs de la membrana.
c) Otros casos estn representados por molculas capaces de perturbar la
organizacin de la membrana mediante el establecimiento de puentes con
determinados puntos de la estructura.
La pared bacteriana, compuesta de peptidoglicano o de peptidoglicano ms LPS,
es importante, pues confiere rigidez y forma, siendo causa de la diferencia
fundamental entre microorganismos Gram positivos y Gram negativos. Esta
diversidad conduce a una gran variacin en las afinidades de los desinfectantes
hidroflicos. Los aldehdos, por ejemplo, interaccionan con los grupos -NH
2
de las
protenas y aminocidos (PEA, 2003).

2.7.2.2. Membrana citoplasmtica.

Una molcula activa, como puede ser por ejemplo un nutriente, puede penetrar a
travs de la membrana citoplasmtica bien mediante difusin pasiva (que es una
forma inespecfica y lenta) o mediante transporte activo (que es un procedimiento
especfico, capaz de permitir la acumulacin de productos en la bacteria o el
traslado se produce con el producto transformado o unido a una protena de
membrana). Muchos de los desinfectantes ms utilizados, incluyendo fenoles,
derivados de amonio cuaternario, biguanidas, entre otras producen fisuras a nivel
de compuestos de bajo peso molecular, siendo causa de desnaturalizacin
proteica y lisis celular. Los derivados de amonio cuaternario interaccionan con los

fosfolpidos de la membrana y producen dao celular generalizado (MCDONNELL,
1999).

2.7.2.3. Metabolismo energtico.

Algunos desinfectantes actan sobre la produccin de ATP. Desde hace ya
muchos aos se conoce que algunos agentes pueden desequilibrar la fosforilacin
oxidativa. Estos agentes inhiben la sntesis de ATP de forma distinta a como lo
hacen los inhibidores de la ATPasa. Entre ellos pueden citarse por ejemplo el 2,4,
dinitrofenol (DPN), la tetraclorsalicilanilida (TCS), que son solubles en lpidos. Se
disuelven en las membranas biolgicas disociando oxidacin de fosforilacin,
creando un cortocircuito en el suministro energtico y causando un bloqueo del
flujo de protones al interior de la clula, colapsando con ello su metabolismo
(PEA, 2003).

2.7.2.4. Citoplasma y ncleo.

Algunos productos desinfectantes interfieren a nivel de enzimas o protenas,
rompiendo los grupos -SH, de las primeras, que pueden estar asociados a las
membranas. Otros productos se combinan con el ADN o el ARN, como sucede
con los agentes alquilantes y oxidantes.

2.7.2.5. Esporos bacterianos.

La presencia de acido dipicolnico hace a estas formas mucho ms resistentes a
los desinfectantes que la forma vegetativa. Algunos desinfectantes activos,
oxidantes como el perxido de hidrgeno y el cloro, son capaces de desestabilizar
este compuesto en los esporos.
Comparativamente, sin embargo, pocos desinfectantes qumicos son esporicidas.
Muchos bactericidas poderosos, como sucede en el caso de los fenoles o los
derivados de amonio cuaternario, poseen sin embargo un escaso efecto sobre la
viabilidad de los esporos bacterianos. No obstante, estos agentes pueden inhibir

determinados estadios del ciclo esporognico, por lo que pueden establecerse tres
reas sobre las cuales tiene lugar el efecto letal o inhibitorio: 1) Durante las
diferentes fases de la esporulacin; 2) Sobre el esporo maduro y 3) Durante la
germinacin y/o crecimiento (PEA, 2003).
El glutaraldehdo, el formaldehdo, el hipoclorito, el yodo, el perxido de hidrgeno
y el xido de etileno, son esporicidas, actuando sobre los esporos maduros,
aunque su modo de accin se conoce poco y mal. Varios estudios han
demostrado, adems, que algunas sustancias que no son esporicidas, pueden
tener un efecto inhibitorio durante la germinacin y/o el crecimiento; en el primer
caso se encuentran por ejemplo los fenoles y cresoles, mientras que los derivados
de amonio cuaternario inhiben el crecimiento.

2.7.2.6. Sobre los virus

Los mecanismos de accin son ms difciles de estudiar y por tanto, conocer,
aunque a este respecto uno de los elementos ms importantes lo constituye la
presencia o ausencia de envoltura lipdica (por ejemplo herpesvirus,
paramyxovirus y orthomyxovirus son virus con envoltura procedente, en parte, de
la membrana de la clula hospedadora). Los desinfectantes con propiedades
lipoflicas (derivados de amonio cuaternario, homlogos del fenol, anfteros,
biguanidas polimricas) son activos frente a los virus envueltos. El cloro y los
derivados de yodo, los agentes oxidantes, algunos aldehdos (el glutaraldehdo) y
los cidos o los lcalis fuertes, son activos frente a la mayora de los virus (PEA,
2003).

2.7.3. Agentes qumicos

Son sustancias que tienen efectos nocivos sobre los microorganismos bien sea
destruyndolos como: Bactericidas, Fungicidas y Viricidas, Inhibindol os o
dificultando su crecimiento: Bacteriostticos, fungistticos y virustticos.

2.8. CONDICIONES QUE INFLUYEN EN LA ACTIVIDAD MICROBIANA

Los factores que se indican a continuacin afectan la eficacia de los
desinfectantes: Inactivacin debida a la suciedad.
La presencia de suciedad y otros materiales sedimentados reducen la eficacia de
todos los desinfectantes qumicos. Cuando no se realiza una limpieza adecuada,
los desinfectantes no surgen ningn efecto. Por lo tanto, la desinfeccin con
sustancias qumicas deber efectuarse despus de un proceso de limpieza o en
combinacin con el mismo (MARTINEZ, 2007).

Temperatura de la solucin.
En general, cuanta ms alta sea la temperatura ms eficaz ser la desinfeccin.
Es preferible usar, por lo tanto, una solucin desinfectante tibia o caliente, que una
fra. Por lo que habr que seguir las instrucciones del fabricante, ya que por
ejemplo a temperaturas superiores de 43o C, los yodforos liberan yodo que
puede manchar los materiales, y la accin corrosiva del cloro aumenta cuando se
usan soluciones calientes de hipoclorito.
Tiempo.
Todos los desinfectantes qumicos necesitan un tiempo mnimo de contacto para
que sean eficaces. Este tipo de contacto mnimo puede variar de acuerdo con la
actividad del desinfectante.
Concentracin.
La concentracin de la solucin de desinfectante necesaria, variar de acuerdo
con las condiciones de uso, adems deber ser adecuada para la finalidad a la
que se destina y el medio ambiente en que haya de emplearse. Las soluciones
debern prepararse, por lo tanto, siguiendo estrictamente las instrucciones del
fabricante (MARTINEZ, 2007).

Estabilidad.
Todas las soluciones desinfectantes debern ser de preparacin reciente, en las
que se hayan utilizado utensilios limpios. El mantenimiento prolongado de

soluciones diluidas listas para ser usadas, puede reducir su eficacia, o convertiste,
tal vez, en un depsito de organismos resistentes. Los desinfectantes pueden
desactivarse si se mezclan con detergentes y otros desinfectantes no adecuados.
Es necesario verificar peridicamente la eficacia de los desinfectantes,
especialmente cuando se han disuelto para usarlos. Existen para tal fin equipos de
ensayo baratos y de fcil uso.

Precauciones.
Los desinfectantes qumicos que pueden envenenar los alimentos, tales como los
fenlicos, no deben usarse en las fbricas de elaboracin de alimentos, ni en
vehculos para su transporte. Se debe tener cuidado que los desinfectantes
qumicos no daen al personal, y de que cuando se usan en lugares donde se
guardan o transportan animales, tales como establos y vehculos, no les
produzcan daos y molestias (MARTINEZ, 2007).

3. Desinfectantes usados en los laboratorios de que prestan servicios

3.1. Hipoclorito de sodio

Los hipocloritos son los desinfectantes ms utilizados de este grupo y estn
disponibles comercialmente en forma lquida (hipoclorito sdico) o slida
(hipoclorito clcico, dicloroisocianurato sdico). El mecanismo de accin sobre los
microorganismos no es bien conocido, pero se postula que actan inhibiendo las
reacciones enzimticas y desnaturalizando protenas. Tienen un extenso espectro
de actividad (bactericida, virucida y esporicida, pero variable frente a las
micobacterias) segn la concentracin de uso. La concentracin habitual del
hipoclorito sdico o leja comercializada es de 50 g de cloro activo por litro
(5,25%). Para la desinfeccin ambiental las diluciones de uso son al 0,1 y 1% (20
y 200 ml de leja en 1 L de agua, respectivamente). Las concentraciones al 1% de
cloro activo se utilizan cuando hay sangre o productos orgnicos en la superficie
que se quiere desinfectar. Diluciones al 1:50, con una concentracin de 1.000 ppm

de cloro, son necesarias para destruir las micobacterias. Las diluciones se deben
realizar con agua del grifo a temperatura ambiente y en 11 recipientes cerrados de
plstico opaco. Se recomienda utilizar soluciones preparadas en el da (MENES,
2000).

Los hipocloritos son de bajo costo y de accin rpida. Sin embargo, se ha de tener
en cuenta que son desinfectantes que deterioran los metales, que se inactivan
fcilmente en presencia de materia orgnica, relativamente inestables y su eficacia
se ve afectada por el pH. Interaccionan con otras sustancias qumicas: soluciones
cidas y de amonio, con produccin de vapores de cloro que son muy irritantes.
No se deben utilizar tampoco en combinacin con formaldehdo, ya que esta
combinacin es altamente carcingena. Se utiliza ampliamente como
desinfectante de rutina de pavimentos, lavabos, aseos y zonas de preparacin de
alimentos, as como en la desinfeccin de los aparatos de dilisis y tratamiento de
aguas. En brotes y epidemias de Legionella spp. La hipercloracin del sistema de
distribucin de agua ha demostrado ser un mtodo muy eficaz (RODRIGUEZ,
2002).

El hipoclorito de sodio es una solucin acuosa que posee una concentracin entre
el 4.4% y el 5.4% (m/m), clara, ligeramente amarilla, olor caracterstico
dependiendo de la presentacin. Por su naturaleza oxidante, es un blanqueador,
desodorizante y desinfectante. De la concentracin de "cloro libre activo" depende
su reactividad en las reacciones de oxidacin, cloracin y accin bioqumica tales
como el control bacteriolgico y microbiolgico. El cloro, los hipocloritos son los
desinfectantes ms frecuentes en los programas de desinfeccin estos actan
sobre protenas y cidos nucleicos de los microorganismos, oxidando los grupos
SH entre otros de la tirosina. Este compuesto es activo sobre todas las bacterias,
incluyendo esporas y adems es efectivo en un amplio rango de temperaturas.

Las concentraciones a usar de Hipoclorito de sodio es de 100ppm, el pH efectivo
es de 8-10 y el tiempo de contacto es de 10 15 minutos. Este compuesto se

rompe en un acido mas germicida. La actividad bactericida del hipoclori to de sodio
se debe al acido hipocloroso y al Cl2 que se forman cuando el hipoclorito es
diluido en agua. La actividad germicida del Ion hipocloroso es reducida debido a
que su carga no puede penetrar fcilmente en la clula a travs de la membrana
citoplasmtica. Pero el acido producido al diluirse en agua es neutro, por lo cual
penetra fcilmente en la clula. Un factor importante en la eficiencia de este
producto es la limpieza previa a su uso debido a que pueden haber en el medio
sustancias capaces de reaccionar con los compuestos clorados que disminuyan la
concentracin efectiva de los mismos.

Este desinfectante es utilizado en los laboratorios de Microbiologa de Alimentos a
una concentracin de 100ppm, Microbiologa Ambiental y de suelos 0.122ppm,
Inmunologa especializada y citometra de flujo al 100ppm, y en el Laboratorio de
Aguas y Lodos: Laboratorio 235 Bacterias y Virus as como para el Laboratorio de
Parasitologa 12.2 ppm, Laboratorio 124 de Bioensayos 1.83 ppm.

3.2. Alquilaril sulfonato de sodio

Este Detergente posee una composicin de tensoactivos que comprende al menos
dos ismeros de un tensoactivo de **frmula** en la que: L es un hidrocarbilo
aliftico acclico de 6 a 18 tomos de carbono en total; M es un catin o una
mezcla de cationes y q es su valencia; a y b son nmeros seleccionados para que
dicha composicin sea elctricamente neutra (MARTINEZ, 2007).
Los tensoactivos son sustancias qumicas que presentan en su molcula tanto
grupos polares como no polares y cuando se disuelven en un lquido en una
concentracin tal que se favorezca la formacin de micelas, actan dndole
caractersticas fisicoqumicas especiales. Existen cuatro grupos de tensioactivos:
aninicos, catinicos, no inicos y anfteros.
Asimismo, los tensioactivos para ser considerados detergentes deben cumplir con
las siguientes propiedades: disminucin de la tensin superficial, alto poder de

humectacin, detergencia, poder de espuma y alta biodegradabilidad (resultado
de la accin de las bacterias sobre el tensoactivo).
Los tensioactivos aninicos presentan ventajas respecto al resto de los grupos en
lo referente a: detergencia, humectancia y poder espumante, por lo cual se utilizan
como porcentaje mayoritario en las formulaciones de detergentes. Entre ellos se
encuentran los alquil aril sulfonatos, alquil sulfatos, alquil etoxi sulfatos, etc
(MARTINEZ, 2007).
Mecanismo: Provocan una gran disrupcin de membranas, con efectos de lisis.
Son activos sobre todo a pH cido, preferentemente sobre bacterias Gram-
positivas, pero poco sobre Gram-negativas, ya que stas quedan ms protegidas
por la barrera del lipopolisacrido de la membrana externa (MARTINEZ, 2007).
Usos: Cuando los detergentes aninicos se combinan con cidos, se logran
desinfectantes sanitarios muy potentes (debido al efecto sinrgico de ambos
componentes) y de rpida actuacin (unos 30 segundos) (MARTINEZ, 2007).

Este detergente, es utilizado en el laboratorio de inmunologa especializada y
citometra de flujo en una concentracin de 200 g por litro de agua. Segn el
manual se recomienda que sean 50g por 500 ml, sin embargo esta cantidad es
reducida a 10g por 2L de agua en el laboratorio de 235 de Bacterias y Virus y en el
Laboratorio de Parasitologa, mientras que en el laboratorio 124 de Bioensayos y
Microbiologa de Alimentos se utilizan 5g/2L.

4. JUSTIFICACIN

De acuerdo a la importancia que posee la calidad y confiabilidad de los resultados
en un laboratorio que presta servicios, es necesario realizar procesos de limpieza
y desinfeccin que garanticen la antisepsia en el momento de llevar a cabo un
anlisis para evitar y controlar la presencia de microorganismos contaminantes en
la muestra. Adems de los procesos de limpieza esto depender de los agentes
qumicos empleados en las diferentes reas de muestreo tales como las
superficies y equipos. Ya que estos determinarn por su efecto inhibitorio si
realmente son efectivos en el proceso de desinfeccin, de ah que es de gran
importancia realizarse rutinariamente estos procesos.

Realizar el control microbiolgico en los laboratorios que prestan servicios en
especial de las superficies es importante ya que contribuye a mantener un sistema
de verificacin que permita confiabilidad y aseguramiento de la calidad. As mismo
nos proporciona informacin sobre la cantidad de microorganismos presentes
sobre mesones, pisos y equipos.

Los distintos procedimientos y agentes desinfectantes, manifiestan su forma de
accin de varias maneras. Por esto es importante realizar una limpieza y
desinfeccin adecuada, as como se debe considerar el tipo de accin del agente
utilizado (remocin mecnica, disolucin o detergente), las condiciones requeridas
para aplicar la solucin y las caractersticas de las superficies que influyen en la
adherencia de las bacterias.

La limpieza es el primer paso del proceso de desinfeccin, constituyndose en
prioritaria, ya que una falla en esta fase puede afectar las dems. El personal
responsable del proceso de limpieza y desinfeccin, actualmente se enfrenta a la
disponibilidad de mltiples alternativas (desinfectantes) para el desarrollo de estos
procedimientos, por ello se considera relevante la revisin y verificacin del
proceso de Limpieza y Desinfeccin como estrategias para el control de la carga

microbiana presente en seis laboratorios que prestan servicios externos, revisando
los principios que rigen el desarrollo de este proceso y verificando el cumplimiento
de las recomendaciones de uso de los procedimientos que se manejan
actualmente.

5. OBJETIVOS

5.1. Objetivo General

Verificacin del proceso de limpieza y desinfeccin realizado en las superficies de
los laboratorios de servicios de aguas y lodos, inmunologa especializada y
citometra de flujo, microbiologa de alimentos y microbiologa ambiental y de
suelos.

5.2. Objetivos Especficos

Determinar la reduccin de la carga microbiana presente en las superficies de
mesones, pisos y equipo de los laboratorios de servicios de aguas y lodos,
inmunologa especializada y citometra de flujo, microbiologa de alimentos y
microbiologa ambiental y de suelos.

Verificar la efectividad de los detergentes y desinfectantes utilizados en el proceso
de limpieza y desinfeccin de los laboratorios.

Determinar que el proceso de limpieza y desinfeccin sea realizado correctamente
por parte del personal de aseo en los laboratorios de servicios.

6. MATERIALES Y MTODOS

6.1. HIPOTESIS

De acuerdo a la metodologa a utilizar se plantea un anlisis de varianza de un
solo factor con dos hiptesis en donde:

Ho: No existe una reduccin del 90% de la carga microbiana despus de realizar
el procedimiento de limpieza y desinfeccin en cada una de las reas de trabajo
de los laboratorios

Hi: Existe una reduccin del 90% de la carga microbiana despus de realizar el
procedimiento de limpieza y desinfeccin en cada una de las reas de trabajo de
laboratorios

6.2. LUGAR DE ESTUDIO
El estudio se realiz en seis laboratorios de servicios de la Facultad de Ciencias
de la Universidad Javeriana:
Laboratorio de Microbiologa de Alimentos
Laboratorio de Microbiologa Ambiental y de suelos
Laboratorio de Indicadores biolgicos de contaminacin de aguas y lodos
o Laboratorio de Bioensayos (124/50)
o Laboratorio de Bacterias y Virus (235/51)
o Laboratorio de Parasitologa
Laboratorio de Inmunologa Especializada y Citometra de Flujo
El proceso de limpieza y desinfeccin de cada laboratorio fue realizado por el
personal de aseo el cual cuenta con una indumentaria apropiada para el proceso,
con elementos adecuados de proteccin y bioseguridad, inicialmente con el
detergente (alquilaril sulfonato de sodio) la materia orgnica presente en todas las
reas. Finalmente se aplico el desinfectante (Hipoclorito de sodio) con la ayuda de
toallas absorbentes sobre todas las superficies. De igual manera cada laboratorio

cuenta con su respectivos utensilios de aseo tales como: escobas, trapos, cepillos
y traperos. Previamente los conserjes haban recibido capacitacin en la
elaboracin y preparacin de los detergentes (alquilaril sulfonato de sodio) y
desinfectantes (Hipoclorito de sodio) con cada coordinador de laboratorio. (Ver
figura #1).

Figura # 1 Proceso de limpieza y desinfeccin

6.3. SITIO DE MUESTREO
Los sitios de muestreo se escogieron con los coordinadores de los laboratorios de
acuerdo a las necesidades propias de cada lugar (Ver tabla#1)

Tabla # 1 Laboratorios de servicios, sitios y superficies de muestreo
LABORATORIOS AREAS DE MUESTREO

Laboratorio de
Microbiologa de
Alimentos

Mesn 1: Mesn donde se preparan medios de cultivo.
Mesn 2: Mesn central.
Mesn 3: Mesn del cuarto de siembra
Mesn 4: Mesn cuarto de aislamiento
Piso 1: Piso que se encuentra entre el Mesn 1 y
Mesn 2
Piso 2: Piso del cuarto de siembra
Laboratorio de
Microbiologa
Ambiental y de
suelos
Mesn 1: Mesn ubicado a la entrada del laboratorio.
Mesn 2: Mesn central.
Mesn 3: Mesn del cuarto biologa molecular
Piso 1: Piso que se encuentra entre el Mesn 1 y
Mesn 2
Piso 2: Piso ubicado al frente del cuarto donde se
encuentra la cmara de flujo laminar
Cmara de Flujo Laminar
Laboratorio de Indicadores biolgicos de contaminacin de aguas y lodos
o Laboratorio de
Bioensayos
(124/50).

Mesn 1: Mesn de Mantenimiento de organismos
Mesn 2: Mesn de pruebas
Mesn 3: Mesn de pases de algas (Interno)
Piso 1: Piso del laboratorio
o Laboratorio de
Bacterias y
Virus (235/51).

AREA1: Laboratorio Bacteriano

Mesn: Mesn de anlisis Bacteriano
Piso: Piso correspondiente a esta rea
AREA2:Laboratorio viral

Mesn: Mesn de anlisis de indicadores virales
Piso: Piso correspondiente a esta rea
o Laboratorio de
Parasitologa
Mesn 1: Mesn donde de pesaje y lecturas
Mesn 2: Mesn Central de trabajo
Mesn 3: Mesn de Agitacin
Piso 1: Piso ubicado entre el Mesn 1 y Mesn 2
Laboratorio de
Inmunologa
Especializada y
Citometra de Flujo
Mesn 1: Mesn de lecturas
Mesn 2: Mesn de procesamiento de muestras
Piso: Piso ubicado en el cuarto de citometra
.

6.4. NUMERO DE MUESTRAS
El n para cada lugar de muestreo fue de 13, las muestras se tomaron antes del
procedimiento de limpieza y desinfeccin y despus de terminado el
procedimiento.

6.5. TOMA DE MUESTRAS
6.5.1. Tcnica del hisopo:
La toma de muestra de la superficie se realiz por medio de una cartulina estril
para un rea de 20 cm
2
(Ver Figura #2). La cartulina se coloc en el centro y con
un escobilln humedecido previamente en 9 ml de Caldo TAT durante dos
minutos, se frot en forma horizontal y vertical por toda la superficie de 10 X 10
cm
2
(Ver Figura # 3). Este procedimiento se repiti en 4 extremos del mesn y
piso para completar un rea de 100 cm
2

Figura# 2 Toma de Muestras

Figura# 3 Forma de muestreo en las superficies analizadas

6.7. PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS

Para evaluar la eficacia de los desinfectantes se procedi a realizar el recuento de
hongos y levaduras, coliformes y bacterias mesfilas aerobias. Para ello se
sembraron 0.1ml, 1ml, 2ml de la muestra en profundidad, los medios que se
utilizaron fueron: Agar Plate Count para recuento de microorganismos mesfilos
aerobios, Agar VRB para recuento de coliformes totales y Agar OGY para
recuento de hongos y levaduras (RUSSEL, 1997). Las condiciones de incubacin
fueron las siguientes:

Tabla # 2 Temperatura y Tiempo de incubacin de microorganismos
estudiados.

Microorganismo Temperatura
(C)
Tiempo de
incubacin
Hongos y Levaduras 20 24 5 das.
Mesfilos Aerobios 35 24 a 48 horas
Coliformes Totales 35 37 24 a 48 horas

Para tener una mayor certeza en los resultados obtenidos en este estudio se
realizaron los respectivos controles a cada medio de cultivo, garantizando la
esterilidad de los medios utilizados y evitando una contaminacin cruzada por
parte de estos, para garantizar que despus de la incubacin no se obtenga
crecimiento alguno.

6.8. LECTURA DE RESULTADOS

Despus de la incubacin, la lectura se realiz teniendo en cuenta las colonias
representativas de cada microorganismo en sus respectivos medios de siembra.
Se escogieron las cajas de petri que presentaron entre 30 y 300 colonias y se les
realizo caracterizacin microscpica para descartar contaminacin. En el caso de
seleccionar la caja en la cual se sembr 0,1 ml de muestra se realiz la respectiva
multiplicacin por 10, al seleccionar la caja sembrada con 2 ml de muestra se
dividi por 2 los resultados obtenidos de los respectivos recuentos. Adicionalmente
el resultado final se expres en UFC/ 20 cm
2
.

A partir de los resultados obtenidos de los muestreos de cada rea de los
laboratorios analizados se calcularon los porcentajes de reduccin esperando
encontrar porcentajes que cumplan con la hiptesis que plantea la reduccin del
90% de la carga microbiana despus de realizar el procedimiento de limpieza y
desinfeccin.

7. RESULTADOS

El presente estudio se realiz en los laboratorios de servicios de la Pontificia
Universidad Javeriana tales como: Laboratorio de Microbiologa de Alimentos,
Laboratorio de Microbiologa Ambiental y de suelos, Laboratorios de Indicadores
biolgicos de contaminacin de aguas y lodos: Laboratorio de Bioensayos
(124/50), Laboratorio de Bacterias y Virus (235/51) y Laboratorio de Parasitologa
y por ltimo Laboratorio de Inmunologa Especializada y Citometra de Flujo, estos
laboratorios fueron seleccionados debido a que prestan sus servicios a empresas
de la comunidad, de ah que es importante garantizar las condiciones de limpieza
para ofrecer calidad en los resultados de sus anlisis.

Estudios previos como el realizado por Delgado 2006 en el que se propusieron
unas concentraciones de detergente que en el momento de ser aplicados fueron
imposibles de usar, debido a la generacin continua de espuma y empleo de
abundante agua. Con relacin al hipoclorito de sodio las altas concentraciones que
se propusieron resultaron irritantes para las personas que trabajaban en el
laboratorio. Por lo tanto, se llev a cabo una modificacin de las concentraciones
de detergente y desinfectante para la limpieza y desinfeccin de los laboratorios
con el fin de determinar su efectividad sin afectar al personal y de igual manera
lograr la verificacin del proceso en estos seis laboratorios que era el objetivo de
este estudio.

Antes de llevar a cabo la verificacin misma del proceso de limpieza y
desinfeccin se realiz un anlisis inicial de la carga microbiana de los mesones y
pisos para poder establecer si era necesaria alguna modificacin en el
procedimiento realizado por el personal de aseo y determinar si cumplen con los
requerimientos de limpieza. La lectura de las cajas dej ver la alta incidencia de
diferentes colonias de microorganismos. Cada colonia fue sometida a
caracterizacin microscpica basada en coloraciones de Gram para bacterias y
azul de lactofenol para hongos, como resultado de dicha caracterizacin se

encontraron bacterias mesfilas aerobias y hongos ambientales que se presentan
en la figura # 4.

En cuanto al anlisis microbiolgico de coliformes totales al realizarse el estudio
se observ despus de los cinco primeros muestreos que no se encontraron
colonias respectivas en los medios de siembra tanto antes como despus del
proceso de limpieza y desinfeccin. Por lo cual se decidi reducir los volmenes
de siembra a 1ml, haciendo que la siembra de 0.1 y 2 ml no fuera necesaria.

Figura # 4 Microorganismos fngicos aislados de las superficies muestreadas

GENEROS
FUNGICOS
CARACTERISTICAS
MACROSCOPICAS
CARACTERISTICAS
MICROSCOPICAS
Aspergillus
spp.

Colonias aterciopeladas, de
crecimiento, en cultivo joven
presentan un color blanco y en
el transcurso se vuelve verde

Hifas hialinas, septadas,
conidiforos largos que se
originan en la parte basal
donde se ubican las hifas y
termina la formacin de la
vescula en el pice.

Penicillium
spp.
Colonias pulverulentas con
centro verde debido a la
produccin de esporas y borde
blanco regular, reverso amarillo
plido

Hifas hialinas septadas,
conidios esfricos, filides
ramificadas

Levaduras
Colonias cremosas redondas
grandes

Levaduras de forma ovalada

Tabla # 5. Bacterias, hongos y levaduras aisladas de las superficies muestreadas,
muestreos antes y despus del proceso de limpieza y desinfeccin

MORFOLOGIA CARACTERISTICAS MACROSCOPICAS
ANTES DESPUES
Bacilos Gram Positivos
Esporulados

Bacilos Gram positivos

Hongos y Levaduras

Los datos obtenidos de los recuentos de mesfilos aerobios y de hongos y
levaduras correspondientes al antes y al despus del proceso de limpieza y
desinfeccin en cada una de las superficies as como tambin el porcentaje de
reduccin de cada uno de los laboratorios muestreados fueron graficados y se
presentan a continuacin.

Como se mencion anteriormente al no encontrar coliformes antes y despus del
proceso de limpieza y desinfeccin, no fue necesario elaborar graficas.

Figura # 6 Porcentaje de reduccin Mesfilos Aerobios VS reas de muestreo del
laboratorio de Microbiologa de Alimentos.

0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
MESOFILOS
AEROBIOS
UFC/ 20 CM 2
AREAS DE MUESTREO
MUESTREO LAB. MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS
ANTES
34 34 32 35 47 37
DESPUES
3 2 1 2 5 5
%REDUCCION
92 93 97 93 90 83
MESON
1
MESON
2
MESON
3
MESON
4
PISO 1 PISO 2

Porcentaje mnimo (90%) de la carga microbiana despus de realizar el
procedimiento de limpieza y desinfeccin

Figura # 7 Porcentaje de Reduccin Hongos y Levaduras VS reas de muestreo
el Laboratorio de Microbiologa de Alimentos.

0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
HONGOS Y
LEVADURAS
UFC/ 20 CM 2
AREAS DE MUESTREO
MUESTREO LAB. MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS
ANTES
25 30 27 30 28 26
DESPUES
3 3 2 3 3 5
%REDUCCION
87 88 91 90 89 80
MESON 1 MESON 2 MESON 3 MESON 4 PISO 1 PISO 2

procedimiento de limpieza y desinfeccin.

Figura # 8 Porcentaje de reduccin Mesfilos Aerobios VS reas de muestreo del
laboratorio de microbiologa de Ambiental y de Suelos

0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
MESOFILOS
AEROBIOS
UFC/20 CM 2
AREAS DE M UESTREO
MUESTREO LAB. MICROBIOLOGIA AMBIENTAL Y DE SUELOS
ANTES 39 28 33 54 49 11
DESP UES 3 3 4 3 3 0
%REDUCCION 90 92 90 94 92 92
M ESON
1
M ESON
2
M ESON
3
P ISO 1 P ISO 2
CAM AR
A


Figura # 9 Porcentaje de reduccin Hongos y Levaduras VS reas de muestreo
del laboratorio de Microbiologa de Ambiental Y de Suelos.


0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
HONGOS Y LEV
UFC/ 20CM2
AREAS DE MUESTREO
M UESTREO LAB. M ICROBIOLOGIA AM BIENTAL Y DE SUELOS
ANTES 24 26 25 29 28 9
DESPUES 2 3 3 3 3 1
%REDUCCION 92 90 83 93 89 95
MESON 1 MESON 2 MESON 3 PISO 1 PISO 2 CAMARA

Figura # 10 Porcentaje de reduccin Mesfilos aerobios VS reas de muestreo
del laboratorio de Inmunologa Especializada y Citometra de Flujo.


Figura # 11 Porcentaje de reduccin Hongos y Levaduras VS reas de muestreo
del laboratorio de Inmunologa Especializada y Citometra de Flujo.

0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
MESOFILOS
AEROBIOS UFC/
20 CM2
AREAS DE MUESTREO
M UESTREO LAB. INM UNOLOGIA ESP ECIALIZADA Y CITOM ETRIA DE
FLUJO
ANTES 30 29 62
DESP UES 2 2 5
%REDUCCION 84 92 94
M ESON 1 M ESON 2 P ISO 1
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
HONGOS Y
LEVADURAS
UFC/20CM2
AREAS DE MUESTREO
MUESTREO LAB. INMUNOLOGIA ESPECIALIZADA Y CITOMETRIA DE
FLUJO
ANTES 24 23 30
DESP UES 3 3 4
%REDUCCION 91 87 88
M ESON 1 M ESON 2 P ISO 1

Figura # 12 Porcentaje de reduccin Mesfilos Aerobios VS reas de muestreo
del laboratorio 235 Bacterias y Virus.

procedimiento de limpieza y desinfeccin-

Figura # 13. Porcentaje de Reduccin Hongos y Levaduras VS reas de muestreo
del Laboratorio de 235 Bacterias y Virus.

0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
MESOFILOS
AEROBIOS UFC/
20CM2
AREAS DE MUESTREO
MUESTREO LAB. 235 BACTERIAS Y VIRUS
ANTES 33 37 34 36
DESP UES 2 3 2 2
%REDUCCION 94 90 93 91
A1. M ESON A1 P ISO A2 M ESON A2 P ISO
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
HONGOS Y
LEVADURAS
UFC/ 20 CM2
AREAS DE MUESTREO
MUESTREO LAB 235 BACTERIAS Y VIRUS
ANTES 25 24 18 20
DESPUES 3 2 1 2
A1. MESON A1 PISO A2 MESON A2 PISO

Figura #14. Porcentaje de reduccin Mesfilos Aerobios VS reas de muestreo
del Laboratorio de Parasitologa.


Figura # 15. Porcentaje de reduccin Hongos y Levaduras VS reas de muestreo
del Laboratorio de Parasitologa.

0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
MESOFILOS
AEROBIOS UFC/
20 CM2
AREAS DE MUESTREO
MUESTREO LAB. PARASITOLOGIA
ANTES 31 50 47 34
DESP UES 2 3 5 3
M ESON1 M ESON2 M ESON3 P ISO
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
HONGOS Y
LEVADURAS
UFC/ 20 CM2
AREAS DE MUESTREO
MUESTREO LAB PARASITOLOGIA
ANTES 22 29 31 35
DESPUES 2 4 3 5
MESON 1 MESON 2 MESON 3 PISO 1

Figura #16. Porcentaje de reduccin Mesfilos Aerobios VS reas de muestreo
del Laboratorio 124 de Bioensayos.


Figura # 17. Porcentaje de Reduccin Hongos y Levaduras VS reas de muestreo
del Laboratorio 124 de Bioensayos.

0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
MESOFILOS
AEROFILOS UFC/
20 CM2
AREAS DE MUESTREO
MUESTREO LAB. 124 BIOENSAYOS
ANTES 25 33 64 69
DESPUES 2 3 4 5
MESON 1 MESON 2 MESON 3 PISO 1
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
HONGOS Y
LEVADURAS
UFC/ 20CM2
AREAS DE MUESTREOS
MUESTREO LAB. 124 BIOENSAYOS
ANTES 33 33 28 38
DESP UES 4 4 4 5
M ESON 1 M ESON 2 M ESON 3 P ISO 1

Los resultados obtenidos al final fueron tabulados, se calcularon las medias de las
rplicas, se realiz un anlisis de varianza, se realiz la prueba T student y con
relacin a la hiptesis finalmente se graficaron.

Tabla #3 Prueba T de los laboratorios muestreados para mesfilos aerobios
y hongos y levaduras.

AREAS DE MUESTREO
MESOFILOS
AEROBIOS
HONGOS Y
LEVADURAS
LAB 235 AREA 1 MESON 1,80713E-08 6,1912E-10
LAB 235 AREA 1 PISO 1,633E-07 2,48545E-09
LAB 235 AREA 2 MESON 5,02061E-08 3,88357E-10
LAB 235 AREA 2 PISO 6,12062E-07 4,21536E-12
LAB 124 MESON 1 1,20384E-14 1,70946E-06
LAB 124 MESON 2 1,76012E-10 4,99624E-07
LAB 124 MESON 3 0,086491998 2,13919E-08
LAB 124 PISO 0,224068366 8,93049E-05
LAB PARASITOLOGIA MESON 1 2,00326E-06 1,65222E-10
LAB PARASITOLOGIA MESON 2 0,029836754 8,17545E-08
LAB PARASITOLOGIA MESON 3 0,000446626 2,72204E-07
LAB PARASITOLOGIA PISO 2,05321E-09 2,87474E-06
LAB ALIMENTOS MESON 1 3,29462E-08 1,65785E-10
LAB ALIMENTOS PISO 1 1,68037E-06 1,81837E-09
LAB ALIMENTOS PISO 2 1,10566E-08 2,92082E-10
LAB AMBIENTAL MESON 1 4,9229E-08 1,02143E-07
LAB AMBIENTAL PISO 1 0,003081058 3,22205E-07
LAB AMBIENTAL PISO 2 0,00662456 2,52883E-08
LAB AMBIENTAL CAMARA 4,37927E-12 1,72032E-18
LAB CITOMETRIA MESON 1 3,6851E-08 2,76418E-10
LAB CITOMETRIA MESON 2 7,7866E-10 1,20341E-09
LAB CITOMETRIA PISO 0,17974527 4,3608E-08

Segn los datos estadsticos obtenidos con la prueba de T student, se puede decir
que existen diferencias estadsticamente significativas para decir que el proceso
es aceptable, teniendo en cuenta que la mayora de resultados de las diferentes

reas muestreadas redujeron sus concentraciones, sin embargo al compararlo con
la hiptesis planteada (inhibicin del 90%) algunas reas no superan la prueba.

8. DISCUSION DE RESULTADOS

Los sistemas de limpieza y desinfeccin en los laboratorios que prestan servicios
cumplen un papel importante en la calidad y confiabilidad de los resultados ya que
garantizan la antisepsia en el momento de llevar a cabo un anlisis para evitar y
controlar la presencia de microorganismos contaminantes en las muestras. De ah
la importancia de realizar el control microbiolgico para que este proporcione
informacin sobre la cantidad de microorganismos presentes sobre las reas de
trabajo y determinar por su efecto inhibitorio si realmente es efectivo.

En los anlisis realizados de las reas tomadas en los seis laboratorios se
encontr que todos presentaron microorganismos contaminantes similares
correspondientes a: bacterias mesfilas aerobias Gram positivas y esporuladas y
hongos como Penicillium spp y Aspergillus spp y levaduras, los cuales son
microorganismos caractersticos que se encuentran presentes en el ambiente
(MARTINEZ, 2007).

Teniendo en cuenta los resultados obtenidos en el laboratorio de microbiologa de
alimentos, se puede afirmar que el hipoclorito de sodio es un excelente
desinfectante de bacterias mesfilas aerobias para la concentracin sugerida por
el proveedor. Estos resultados confirman lo establecido en estudios anteriores
tales como Guevara 1997 y Delgado 2006 los cuales sustentan que el hipoclorito
de sodio en la exposicin frente a bacilos Gram positivos presenta una total accin
inhibitoria. Estos resultados son evidentes en las reas muestreadas
correspondientes a los 4 mesones y el piso 1 donde se obtuvieron porcentajes de
reduccin superiores al 90%. Sin embargo en la superficie correspondiente al piso
2, se obtuvo un 83 % en la reduccin de mesfilos aerobios, esta disminucin se
present como resultado de un corto tiempo de accin del desinfectante ya que
por literatura este debe actuar entre 5 y 10 minutos para una total efectividad.

En lo que concierne a hongos y levaduras, este desinfectante no es 100% efectivo
ya que observando la figura 5, es notorio que los porcentajes de reduccin en los
mesones 1 y 2 y en los 2 pisos muestreados son inferiores a lo que plantea
nuestra hiptesis. Estos resultados se deben presuntivamente a que la actividad
del hipoclorito se ve reducida en presencia de materiales orgnicos que pueden
estar presentes en las superficies antes del proceso de desinfeccin por lo cual se
ve afectada la accin del desinfectante, adicionalmente el hipoclorito es letal para
varios microorganismos, virus y bacterias vegetativas, pero es menos efectivo
contra esporas bacterianas, hongos y protozoarios (RUTALA, 1997).

Para el laboratorio de microbiologa ambiental, se observa claramente que los
porcentajes de reduccin arrojados para las seis reas muestreadas
correspondiente al anlisis de mesfilos aerobios superan el 90% de lo cual se
puede inferir que el hipoclorito de sodio, es eficaz frente a estos microorganismos
y que adems su tiempo de contacto es el apropiado para que ejerza su accin.

En cuanto a los resultados de hongos y levaduras, no fue posible obtener en todas
sus reas de muestreo un porcentaje superior al 90%. En las reas
correspondientes al mesn 3 y al piso 2 se obtuvo un resultado del 83 y 89%
respectivamente. De ello se pudo deducir que la concentracin empleada de este
desinfectante no inhibe el crecimiento de contaminantes fngicos ambientales
especialmente algunas especies de Penicillium (ZOFFOLI, 1996), estos
resultados son similares a los obtenidos en el laboratorio de alimentos.

En el laboratorio de inmunologa especializada y citometra de flujo se demostr
que el desinfectante a la concentracin 100 ppm no fue efectiva en el rea del
mesn 1 para mesfilos aerobios mientras que para el mesn 2 y el piso si
cumpli con el objetivo esperado debido que en este mesn se encuentra ubicado
el citmetro en donde se lleva a acabo la lectura de resultados por lo cual no se
realiza procesamiento de muestras que permitan una alta contaminacin
microbiolgica. El desinfectante no acto completamente en las reas ya

mencionadas probablemente porque al usar los materiales de aseo no se enjuago
con suficiente agua quedando residuos de jabn y materia orgnica, adicional a
esto pudo ser que no se hayan manejado los utensilios de aseo correctamente
cuando en el manual de limpieza y desinfeccin de materiales de aseo se
especifica que se deben enjuagar, colgar y dejar secar (DELGADO, 2006).

Al observar la figura # 11 correspondiente al anlisis de hongos y levaduras en el
laboratorio de inmunologa especializada y citometra de flujo se encontr un 91%
en el Mesn 1, mientras que para el Mesn 2 y el Piso la concentracin no supero
el 88%, esto debido a contaminacin generada por parte del personal que al
ingresar al cuarto de depsito el cual presenta hongos en el piso y al salir de este
arrastra la contaminacin a las distintas reas del laboratorio lo cual facilita la
proliferacin de esporas fngicas.

El aire adems de partculas en suspensin es portador de bacterias en forma
vegetativa o esporuladas, esporas de hongos y virus, De ah la importancia de
realizar un control microbiolgico del ambiente. Aunque en los laboratorios no se
encontr la presencia de microorganismos coliformes se pudo observar la
presencia de bacilos Gram positivos esporulados y esporas, debido a la corriente
de aire al no estar controlado con extractores (filtros, o sistemas de aspersin)
(Ver figura #5). Por esto sera de gran importancia lograr estandarizar una
desinfeccin del aire por medio de un mtodo en donde pueda emplearse una
bomba de aspersin de modo que la solucin desinfectante se asperja sobre la
superficie obtenindose una distribucin homognea de la solucin.
En cuanto al laboratorio de Aguas y lodos (Lab235) el cual comprende dos reas,
como se observa en la Figura # 12 se obtuvieron porcentajes de reduccin para
Mesfilos aerobios en mesones y pisos tanto para el rea 1 como para el rea 2
superiores al 90%, al igual que para hongos y levaduras en el piso del rea 1 y las
dos superficies del rea 2 esto debido a que el hipoclorito de sodio es capaz de
ejercer su accin desinfectante que se debe en parte a la combinacin directa del
cloro con las protenas de las membranas y/o paredes celulares, y las enzimas, de

bacterias y hongos (ESTRELA, 2002). Mientras que para hongos y levaduras se
obtuvo un porcentaje de reduccin del 84% en el mesn del rea 1 (Figura # 13).
A pesar que para mesfilos aerobios la limpieza y desinfeccin fue efectiva, no se
presento de igual manera en cuanto a la reduccin de hongos y levaduras.

En el Laboratorio de Inmunologa Especializada y Citometra de Flujo los
resultados obtenidos en cuanto al porcentaje de reduccin de la carga microbiana
estudiada correspondiente a bacterias mesfilas aerobias fueron superiores al
90% en el Mesn 1 y Piso, esto como resultado a que en este mesn no se
procesan muestras por lo tanto no presenta una contaminacin alta en
comparacin con los dems mesones, adems la concentracin de hipoclorito
empleada la cual corresponde al 12.2 ppm es efectiva frente a estos
microorganismos tanto para este mesn como para el piso, tambin se pudo
obtener como resultado de una limpieza adecuada antes del proceso de
desinfeccin la cual segn (DELGADO, 2006) tiene como objetivo eliminar o
disminuir a un mximo aceptable la carga microbiana presente en la superficie
donde se realizan los diversos procesos. Tal eliminacin o reduccin est
determinada por factores como: la remocin por accin mecnica de los restos de
material orgnico adherido a la superficie.

En cualquier tipo de clula microbiana (o entidad), es probable que haya una
secuencia comn de eventos. Esta puede encararse como una interaccin del
desinfectante con la superficie de la clula seguida por la penetracin a ella y la
accin en los sitios objetivos. La naturaleza y composicin de la superficie vara de
un tipo de clula (o entidad) a otro. La interaccin en la superficie de la clula
puede producir un efecto significativo en la viabilidad (ejemplo, con el hipoclorito
de sodio), pero la mayora de los agentes antimicrobianos parecen ser activos
intracelularmente. Las capas ms externas de las clulas microbianas pueden
tener tambin un efecto significativo en su susceptibilidad (o falta de
susceptibilidad) a los antispticos y desinfectantes de ah que en los resultados
arrojados para el Mesn 2 y Mesn 3 (%Reduccin: 87 y 88) aunque tienden a

acercarse al 90% no se logr obtener el resultado esperado. La concentracin
empleada no fue efectiva debido a la alta carga orgnica y la incorrecta remocin
de esta impidiendo la accin total del desinfectante.

La concentracin del desinfectante utilizada para la inhibicin de hongos y
levaduras en este laboratorio solo fue efectiva para el Mesn 1 al igual que se
mencion anteriormente se debe a la baja contaminacin presente ya que no se
procesan muestras microbiolgicas en este. Para el Mesn 2, Mesn 3 y el Piso
al obtener una concentracin alta en los recuentos, el porcentaje de reduccin fue
bajo haciendo imposible alcanzar los porcentajes deseados en cuanto al
procedimiento en este laboratorio.

La mayora de procesos de desinfeccin se realizan con la intencin de inactivar
los microorganismos mediante procesos fsicos, qumicos o biolgicos. Por esto
para lograr una accin eficaz del desinfectante es importante tener en cuenta
como se mencion con anterioridad, una correcta limpieza por parte del personal
de aseo ya que esto puede inducir diferencias en la inhibicin de los
microorganismos. Como se muestra en la figura # 16 la concentracin del
hipoclorito al 1.83 ppm permiti reducir ms del 90% la carga presente de
bacterias mesfilas aerobias en todas las reas analizadas del laboratorio de
bioensayos, lo cual permiti definir la concentracin y el desinfectante como
efectivo y apto para la limpieza y desinfeccin de las mismas.

Por el contrario, los resultados obtenidos para hongos y levaduras en esta
concentracin fueron tan solo efectivos para el Mesn 1 en el cual se encuentran
los bioensayos y no se realiza ningn tipo de manipulacin de muestras y
procedimientos haciendo que la carga microbiana presente en esta rea sea baja
correspondiente a un porcentaje de reduccin del 90%. En el caso de los Mesones
2 y 3 y el piso se encontraron porcentajes de reduccin inferiores al 90% esto
como consecuencia al constante trabajo realizado en estas reas como manejo de
muestras con alta carga microbiana, de igual manera la concentracin empleada

no es la suficiente para eliminarla en especial en pisos la cual debera ser superior
para obtener mejores resultados y lograr as una mayor inhibicin. Sin embargo
para este aumento se debe tener en cuenta que en este laboratorio se manejan
organismos como las pulgas de agua, los cuales son susceptibles a olores fuertes,
ruidos y a concentraciones de desinfectantes.

De acuerdo con un estudio acerca del mecanismo de accin del hipoclorito de
sodio sobre los microorganismos, ste compuesto acta como un solvente de
materia orgnica, especficamente de cidos grasos, a quienes transforma en
sales de cidos grasos (jabones) y glicerol (C
3
H
8
O
3
), reduciendo la tensin
superficial de la solucin remanente. Adems, el hipoclorito de sodio neutraliza los
aminocidos, formando agua y sales. Con la disminucin de iones Hidroxilo (OH-)
mediante la formacin de agua, se reduce el pH, estimulando la presencia de
acido hipocloroso que en contacto con componentes orgnicos acta como
solvente, libera cloro que se combina con el grupo amino de las protenas,
formando cloroaminas. El acido hipocloroso y los iones hipoclorito (OCl-) llevan a
la degradacin e hidrlisis de aminocidos (ESTRELA, 2002).

Los valores muestran que el proceso de limpieza y desinfeccin no fue uniforme y
no se llevo a cabo en todos los casos, tal como se describe en el manual de
limpieza y desinfeccin correspondiente. Al inicio y durante el desarrollo de este
estudio, algunos de los valores en el recuento microbiolgico disminuyeron, debido
a que los operarios intensificaron la limpieza como respuesta a la labor de
inspeccin, sin significar en general una disminucin considerable de la
contaminacin presente en las distintas superficies.

9. CONCLUSIONES

Se logr verificar el proceso de limpieza y desinfeccin el cual se realizaba
de acuerdo como se establece en el manual sin embargo, fue necesario
modificar sus concentraciones ya que el detergente fue difcil de disolver y
el hipoclorito de sodio resultaba irritante en el momento de emplearlas.

El procedimiento de limpieza y desinfeccin realizado por los conserjes es
adecuado y llevado a cabo correctamente contribuyendo a una disminucin
de microorganismos en las superficies.

Los implementos de aseo utilizados para el procedimiento de limpieza y
desinfeccin de los laboratorios se limpian de forma adecuada impidiendo
la proliferacin de microorganismos cada vez que se inicia el proceso.

Fu necesario modificar las concentraciones del detergente y desinfectante
de los propuestos en el protocolo inicial ya que no resultaron adecuados
durante su aplicacin.

Se encontraron diferencias entre los laboratorios, relacionados con la
concentracin del detergente y desinfectante de acuerdo a las condiciones
propias de cada laboratorio.

La concentracin inicial de microorganismos vari de laboratorio en
laboratorio en funcin de las actividades de cada laboratorio.

Los microorganismos presentes en los laboratorios analizados incluyen
bacterias mesfilas aerobias Gram positivas y esporuladas y hongos como
Aspergillus spp y Penicillium spp y levaduras.

En ninguno de los laboratorios en estudio se encontr la presencia de
coliformes antes ni despus del proceso de limpieza y desinfeccin,

indicando que estos microorganismos no son residentes permanentes de
estos laboratorios.

La concentracin del 100ppm de hipoclorito de sodio fu efectiva frente a
bacterias, sin embargo no present igual efectividad frente a hongos y
levaduras.

Teniendo en cuenta los resultados obtenidos en el presente estudio se
pudo observar fallas en cuanto a la reduccin de Hongos y Levaduras esto
se debe a la falta de desinfeccin en el aire.

El laboratorio donde el mtodo de limpieza y desinfeccin no logr cumplir
con los porcentajes de reduccin exigida fue el laboratorio de bioensayos,
dentro de las razones que explican este factor, est el tipo de muestras
procesadas (aguas residuales y lodos), as como la ausencia de hipoclorito
por la sensibilidad de las pulgas de agua a este componente.

Segn los resultados obtenidos se observ que la mayora de las reas
muestreadas cumplen con un porcentaje de reduccin mayor al 90% en
cuanto al recuento de Mesfilos Aerobios.

10. RECOMENDACIONES

Revisar el programa de limpieza y desinfeccin y cambiar los protocolos de
concentraciones detergentes y desinfectantes con los obtenidos durante este
trabajo.

Establecer la frecuencia de limpieza de acuerdo al volumen de trabajo,
personal y material que se utiliza.

Para cada rea se debe establecer la frecuencia de limpieza requerida de
acuerdo al volumen de trabajo, personal y material que se utiliza.

Los cepillos y escobas no deben mantenerse directamente sobre el piso, stos
y otros artculos que se utilicen en labores de limpieza deben tenerse
suspendidos en el aire o sobre una superficie limpia cuando no estn en uso.

Utilizar los datos actuales para observar la relacin que existe entre otras
variables de inters que pudieron no tenerse en cuenta en el presente estudio,
como por ejemplo: la variedad de detergentes y desinfectantes utilizados, las
reas de muestreo hmedas o secas, la calidad de las muestras de
investigacin procesadas.

Las concentraciones de desinfectantes empleadas en los laboratorios de
Microbiologa ambiental y de suelos, Bacterias y virus y Parasitologa pueden
modificarse a 100 ppm.

Segn los resultados es necesario incluir dentro de los procesos de limpieza y
desinfeccin de cada laboratorio, la implementacin de un procedimiento de
desinfeccin ambiental, como la aspersin de un agente qumico que puede
ser Tego 51 al 0.1% para la correcta desinfeccin de los ambientes con el fin
de evitar la proliferacin de hongos y levaduras por medio de sus esporos.

Utilizar cuestionarios para evaluar los conocimientos y las prcticas
empleadas por el personal que labora en estos lugares para verificar si hay
relacin entre la efectividad de los programas de limpieza con el conocimiento
de los empleados.

Realizar la dilucin correspondiente del desinfectante el da y en el momento
de iniciar con la limpieza y desinfeccin del laboratorio.

Esparcir sobre la superficie el hipoclorito de sodio utilizando un atomizador, de
modo que esta quede completamente cubierta, para as evitar el empleo de las
manos para esparcir la solucin del agente desinfectante, dejando la capa de
solucin desinfectante sobre la superficie por un tiempo mnimo de 10 minutos.

11 BIBLIOGRAFIA

ALBARRACIN, F, CARRASCAL A, 2005, Manual de buenas prcticas de
manufactura para las microempresas lcteas, Bogot D.C, Ed. Pontificia
universidad Javeriana, 176 p.

BELLON F, 2002, Manual tcnico de higiene, limpieza y desinfeccin, Madrid,
Espaa, Mundi prensa, 63 p.

BERNILLON, A., CERUTTI, 1999, Implantar y gestionar la Calidad total. Editions
Gestin 2000. Barcelona, 208 p.

BLOCK SS. 2001, Disinfection, sterilization and preservation, 5 edi cin, Lippincott
Williams & Wilkins.

BROPHY, P., COULLING K, 1996, Quality Management for Information and
Library Managers. Aldershot: Aslib-Gower 122p,

CABALLERO A, 2001, Gua para la confeccin de programas de limpieza y
desinfeccin en establecimientos de alimentos, Cuidad de la
Habana, Cuba.

CARIBEG, D (1995), Cleanroom microbiology for the non microbiologist,
interpharm press, Inc, Buffalo Grove hills 168pp

CARRASCAL Ana Karina, Burbano Rosero Mariela, Paez Morales Adriana. 2003,
Manual de laboratorio, microbiologa de alimentos, 1 edicin, Pontificia
Universidad Javeriana, facultad de ciencias, departamento de microbiologa,
Bogot D.C.

DELGADO Erika, 2006, Elaboracin y Documentacin del programa de limpieza y
desinfeccin de los laboratorios del departamento de microbiologa de la Pontificia
Universidad Javeriana, Facultad de ciencias, Bogota, 81pp.
FDA, 2001, Bioanalytical Method Validation. Guidance for Industry. U.S.
Department of Health and Human Services. Food and Drug Administration.

GUARNIZO, J, 2005, Elaboracin y documentacin Del programa de gestin y
control documental, en los laboratorios del departamento de microbiologa que
prestan servicios de la facultad de ciencias en la Pontificia Universidad Javeriana,
de acuerdo con los requisitos de la norma NTC- ISO-IEC 170251999, Facultad de
ciencias, Bogot, 149 pp.

GUEVARA, A. 1997, validacin de desinfectantes en una empresa de productos
farmacuticos en Cali. Bacteriloga. Pontificia Universidad Javeriana. Facultad de
Ciencias Bsicas. Departamento de Bacteriologa. Bogot, D.C. 252 pp.

GUTIERREZ, Pilar, (2000), Plan de limpieza y desinfeccin, Escuela de Ingeniera
Tcnica Agrcola, C.E.S.T.E I.N.E.A, 14 pp.

HARRINGTON, H JM, 1992, Mejoramiento de los procesos de la empresa.
Ediciones Daz Santos. Madrid

JAIME, C, 2002, validacin de desinfectantes usados en las reas de produccin
en una industria farmacutica en Bogot, Microbiologa Industrial, Pontificia
Universidad Javeriana, Facultad de Ciencias, Bogot

JURAN, J.M, 1990, Manual de Control de Calidad. 2 ed. Editorial Revert.
Barcelona, 1509 p.

JURAN, J.M. 1990, Jurn y la planificacin para la calidad. Ediciones Daz de
Santos. Madrid, 302 p.

MARIS P, 1995, Modes of action of disinfectants, rev, sci. tech, Offi, int, Epiz, 14:1,
47-55 pp.

MARTINEZ, J, 2007, accin de desinfectantes y antispticos, Universidad
autnoma de chihuahua, Facultad de ciencias Agrotecnolgicas, 20pp

MCDONNELL G, 1999, Antiseptics and disinfectants: activity, action and
resistance, clinical microbiology Reviews 12,147,179 pp.

MONTOYA, E, 2001, optimizacin y validacin de un proceso de fabricacin de
comprimidos. Desarrollo de una aplicacin interactiva multimedia, Universidad de
Barcelona, facultad de farmacia, Barcelona, 165 pp.

PASTEELNICK L. 2000. Analytical methods validation. En: Berry IR y Nash R,
editores. Pharmaceutical Process Validation. New York: Marcel Dekker; p.411-428

PEA, D, 2003, Evaluacin de alternativas de desinfeccin sobre material
fotogrfico, contaminado con hongos, elaborado a base de emulsiones de gelatina
y plata, microbiloga industrial, Universidad Javeriana, Facultad de Ciencias,
Bogot, 112pp.

REDDISH G, 1997, Antiseptics disinfectants, fungicides and Chemicals and
physical sterilization, Philadelphia: Lea& Febiger, 957pp.

RAMPAZOO P, 1990, Standarization and validation of analytical methods in the
pharmaceutical industry. Il Farmaco; 45:807-15pp.

RODRGUEZ, A, 2005, Validacin microbiolgica del Proceso de Sanitizacin en
el rea de Lquidos, UNIVERSIDAD DE CHILE, Facultad de Ciencias Qumicas y
Farmacuticas, Departamento de Qumica Farmacolgica y Toxicolgica, Instituto
Sanitas S.A. 58pp.

RODRIGUEZ, C, 2002, validacin de desinfectantes usados en las reas de
produccin de una industria farmacutica en Bogot, microbiloga industrial,
Universidad Javeriana, facultad de Ciencias, Bogot, 89 pp.

ROMAN, E. 1995, Validacin de mtodos analticos en el entorno de control de
calidad. Industria Farmacutica; 137-142.pp

RUSSELL AD, FURR JR, MAILLARD JY. 1997, Microbial susceptibility and
resistance to biocides. ASM News; 63 (9):481-487.

RUTALA, WA. 1996, Apic guideline for selection and use of disinfectants. Am J
Infect Control; 24:313-342.

RUTALA WA and Weber DJ.1997 Uses of Inorganic Hypochlorite (Bleach) in
Health-Care Facilities. Clinical Microbiological Reviews; 10(4):597-610.

TORTORA G.J., B.R. Funke and C.L. Case. 2001. Microbiology An Introduction
Seventh Edition. The Benjamin/Cummings Publishing Company, Inc.

ULLOA, C, 2000, Evaluacin y Validacin de Tres desinfectantes para uso en
superficies, un jabn liquido desinfectantes para manos y un gel desinfectantes
para manos en una empresa farmacutica, microbilogo industrial, Universidad
Javeriana, facultad de ciencias, Bogot, 95pp.

WILBRETT.G, 2000. Limpieza y Desinfeccin en la Industria Alimentara. Editorial
Acribia ,S.A. Zaragoza, Espaa. 349 p.

WILSON G, Bacterial resistance, disinfection and sterilization, In topley and
Wilson, principles of bacteriology, vol I 70-91 p.

ZOFFOLI, J.P. 1996, Respuesta de Botrytis cineres, Penicillium expansum y
Rhizopus stolonifer al cloro, empleado en la desinfeccin de fruta en postcosecha.
VI Congreso Nacional de Fitopatologa, Resmenes. Universidad de Talca. Talca.

RECURSO ELECTRONICO:

1. Pontificia Universidad Javeriana, Facultad de Ciencias, departamento de
microbiologa industrial:
:<http://www.javeriana.edu.co/Facultades/Ciencias/dep_micro/servicios/lab_indica
dores.htm> [Consulta: 7 Abril 2008].

2. ESTRELA C, (2002), Mechanism of Action of Sodium Hypochlorite
.http://www.forp.usp.br/bdj/bdj13(2)/v13n2a07/v13n2a07.html [Consulta: Agosto 22
de 2008].

3. FAGESA, (Mxico) [en lnea]: catalogo de productos para la sanitizacin por
contacto directo< http://www.promase.com.mx/fagesa.htm > [Consulta: 14 Abril
2008]

4 GERLI, Work Storming, Soluciones de Calidad para las Empresas Bruselas 856,
B1823AIL, Buenos Aires, Rep. Argentina
<http://209.85.165.104/search?q=cache:K7e24gxpeGIJ:www.workstorming.com/V
alProc..htm+validaciones+proceso+desinfeccion&hl=es&ct=clnk&cd=16&gl=co>
[Consul ta: 2 Abri l 2008].

5. GMEZ, Alberto, 2005, Evaluacin de alergenos presentes en polvo y en el
medio ambiente de Bogot, D.C., UNIVERSITAS MDICA VOL. 46 N 1, 20 pp:
http://med.javeriana.edu.co/publi/vniversitas/serial/v46n1/evaluaci%F3n%202.pdf(c
onsulta: 28 de Agosto 2008).

6. GRUPO BRAZERI, Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca - Facultad de
Ciencias de la Salud (Bogot) Programa de Bacteriologa y Laboratorio Clnico
DESINFECCION Y SANEAMIENTO
http://usuarios.lycos.es/bazericol/DESINFECC.htm [Consulta: 28 Marzo 2008].

7. REPRAZ, F.; Arina, P.; Artajo, P.; Snchez, M.T.; Escobar, E. Octubre 2001.
Higiene y Desinfeccin en el Hospital. Anales. Suplemento 2.URL:
http://www.cfnavarra.es/salud/anales/textos/suple11/suple8.html (Consulta 2 de
Agosto 2008)

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