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I!"ICA#$O %"ICA "O E&A%E A determinao da uria em amostras de sangue e urina til na avaliao da funo renal. PRI!C'PIO A uria hidrolisada pela urease a ons amnia e CO 2. Os ons amnia reagem em pH alcalino com salicilato e hipoclorito de s dio! so" a ao catalisadora do nitroprussiato de s dio! para formar a#ul de indofenol. A formao de cor proporcional $ %uantidade de uria na amostra. A%O()RA Preparo do paciente &ecomenda'se (e(um mnimo de ) horas. )ipos de amostra *sar soro ou plasma +fluoreto! heparina! ,-.A/ e urina. 0o usar anticoagulantes contendo amnia. A concentrao de fluoreto na amostra no deve ser maior %ue 1 mg2m3! pois o fluoreto em altas doses ini"idor da urease. O uso do anticoagulante 4lista" +3a"test Cat. 25/ permite a colheita de uma s amostra para as dosagens de uria! glicose e creatinina. A urina de 26 horas deve ser colhida em frasco contendo 2!7 m3 de HCl a 879 +:2:/ e centrifugada antes de usar. Arma*enamento e estabilidade da amostra O analito est;vel no soro ou plasma por <2 horas entre <8 = 28 >C! por 1 dias entre 2 = ) >C e 1 meses a 27 >C negativos. +ol,me m-nimo (Definir o volume mnimo a ser encaminhado para anlise) +ol,me ideal (Definir o volume ideal a ser encaminhado para anlise) Crit.rios para re/ei0o da amostra ?resena de hem lise ou sinais de contaminao "acteriana. Fazer referncia ao manual ou POP de colheita, separao e distri uio de material! PRO"U)O U)ILI1A"O *ria C,! Cat;logo 2@ A0:ABA ' <77757<77<< 3a"test -iagn stica Av. ?aulo Cerreira da Costa! D77 3agoa Banta! E4! 11677'777 Urease2 Arma#enar entre 2' ) >C. Contm tampo fosfato <7 mmol23! ,-.A D mmol23 e urease 2D) F*23. )ampo 3Esto4,e52 Arma#enar entre 2' ) >C. Contm tampo fosfato <77 mmol23 pH D!5! salicilato de s dio 1<2 mmol23! nitroprussiato de s dio <D!) mmol23. O6idante 3Esto4,e52 Arma#enar entre 2' ) >C. Contm hidr Gido de s dio 2!) mol23 e hipoclorito de s dio <2< mmol23. Padro 7 89 mg:dl2 Arma#enar entre 2' ) >C "em vedado para evitar evaporao. Contm a#ida s dica @!@ mmol23. Preparo do )ampo de Uso2 Adicionar o contedo do frasco de tampo +<77 m3/ a 677 m3 de ;gua destilada ou deioni#ada e misturar. ,st;vel <2 meses em frasco Hm"ar! entre 2 = ) >C. Preparo do O6idante de Uso2 Adicionar o contedo do frasco de oGidante +28 m3/ a 6@8 m3 de ;gua destilada ou deioni#ada e misturar. ,st;vel <2 meses em frasco pl;stico! entre 2 = ) >C. Preparo da Urease )amponada2 Adicionar <!7 m3 de urease a 27 m3 do .ampo de *so. ,st;vel 2< dias em frasco de vidro Hm"ar! entre 2 = ) >C. Preca,0;es e c,idados especiais <. Os c,idados <abit,ais de seg,ran0a de=em ser aplicados na manip,la0o do reagente> Fazer referncia ao manual ou POP de se"urana! 2. Os reagentes no abertos? 4,ando arma*enados nas condi0;es indicadas so est=eis at. a data de e6pira0o impressa no rt,lo> ",rante o man,seio? os reagentes esto s,/eitos @ contamina0o de nat,re*a 4,-mica e microbiana 4,e podem pro=ocar red,0o da estabilidade> O la orat#rio deve esta elecer a esta ilidade em suas condi$es operacionais!

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1. O padro cont.m a*ida sdica? 4,e . t6ica> "e=e7se tomar c,idado para e=itar a ingesto e? no caso de contato com os ol<os? la=7los imediatamente com grande 4,antidade de g,a e proc,rar a,6-lio m.dico> A a*ida pode Bormar compostos altamente e6plosi=os com t,b,la0;es de c<,mbo e cobre> Utili*ar grandes =ol,mes de g,a para descartar o reagente> Fazer referncia ao manual ou POP de se"urana! 4> !o arma*enar os reagentes nas pro6imidades de sol,0;es de amCnia> EDUIPA%E!)O( !ECE((ERIO( Procedimento man,al <. Cotmetro capa# de medir com eGatido a a"sor"Hncia em D77 nm +8)7 a D<7 nm/. 2. Ianho'maria mantido $ temperatura constante +1@ >C/. 1. ?ipetas para medir amostras e reagentes. 6. Cronmetro Procedimento a,tomati*ado %ndicar o nome, modelo e o local onde se encontra o e&uipamento analtico' fazer referncia ao manual ou POP para utilizao do mesmo! Procedimento alternati=o %ndicar o e&uipamento alternativo e os procedimentos para medio dos ensaios! (numerar as diferenas esperadas &uando procedimentos manuais su stituem procedimentos automatizados! CO!)ROLE "A DUALI"A"E %ateriais %dentificar os materiais para controle interno e e)terno da &ualidade (fa ricante, n*mero de catlo"o), instru$es de preparo e fre&uncia da utilizao dos mesmos! Limites de tolerFncia Descrever o procedimento para definio dos limites de toler+ncia, o sistema adotado para utilizao do mapa de ,eve-./ennin"s e das re"ras de controle e as providncias a serem tomadas diante de valores &ue ultrapassem tais limites! Fazer referncia ao manual ou POP para utilizao dos materiais de controle! +eriBica0o de no=o lote de controles e:o, reagentes Descrever o procedimento de verificao de novos lotes de controles e de rea"entes! Gerenciamento dos dados Definir como os dados relativos ao controle da &ualidade so ar&uivados e "erenciados! Fazer referncia ao manual ou POP de "arantia da &ualidade! PROCE"I%E!)O Procedimento man,al ?ara a dosagem de uria na urina! diluir a amostra <J87 +7!< m3 de urina K 6!5 m3 de ;gua destilada ou deioni#ada/. Eultiplicar o resultado o"tido por 87. <. .omar 1 tu"os de ensaio e proceder como a seguirJ Amostra ?adro +n> 2/ *rease tamponada OGidante de uso Iranco ''''' ''''' <!7 m3 <!7 m3 .este 7!7< m3 ''''' <!7 m3 <!7 m3 ?adro ''''' 7!7< m3 <!7 m3 <!7 m3

2. Eisturar e incu"ar a 1@ >C durante 8 minutos. 1. Eisturar e incu"ar a 1@ >C durante 8 minutos. 6. -eterminar as a"sor"Hncias do teste e padro em D77 nm +8)7 a D<7 nm/! acertando o #ero com o "ranco. A cor est;vel por 2 horas. Procedimento a,tomati*ado Fazer referncia ao manual ou POP para utilizao do e&uipamento analtico! 0ne)ar o "uia de aplicao dos rea"entes para o sistema automtico! Preca,0;es e c,idados especiais 1> Para man,sear e descartar reagentes e material biolgico? aplicar as normas estabelecidas de seg,ran0a> Fazer referncia ao manual ou POP de se"urana!

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A> A limpe*a e secagem ade4,adas do material so Batores B,ndamentais para a estabilidade dos reagentes e obten0o de res,ltados corretos> Fazer referncia ao manual ou POP de limpeza e verificao da &ualidade da limpeza dos materiais! 3. A g,a ,tili*ada no laboratrio de=e ter a 4,alidade ade4,ada a cada aplica0o> Assim? para preparar reagentes e ,sar nas medi0;es? de=e ter resisti=idade 1 megao<m o, cond,ti=idade 1 microsiemens e concentra0o de silicatos < 9?1 mg:L 3g,a tipo II5> Para o en6gIe da =idraria a g,a pode ser do tipo III? com resisti=idade 9?1 megao<ms o, cond,ti=idade 19 microsiemens> !o en6gIe Binal ,tili*ar g,a tipo II> D,ando a col,na deioni*adora est com s,a capacidade sat,rada ocorre a prod,0o de g,a alcalina com libera0o de =rios -ons? silicatos e s,bstFncias com grande poder de o6ida0o o, red,0o 4,e deterioram os reagentes em po,cos dias o, mesmo <oras? alterando os res,ltados de modo impre=is-=el> Assim? . B,ndamental estabelecer ,m programa de controle da 4,alidade da g,a> Fazer referncia ao manual ou POP de "ua rea"ente! CELCULO( :er linearidade. A"sor"Hncia do teste *ria +mg2d3/ L A"sor"Hncia do padro -evido a grande reproduti"ilidade %ue pode ser o"tida com a metodologia! o mtodo do fator pode ser empregado. @7 Cator de cali"rao L A"sor"Hncia do padro Ur.ia 3mg:dL5 J AbsorbFncia do teste 6 Kator RE(UL)A"O( Unidade de medida mg2d3 Converso de mg2d3 para *nidade BAJ mmol23 L mg2d3 G 7!<DD +alores de reBerLncia Boro ou ?lasmaJ <8 a 67 mg2d3. *rinaJ 2D a 61 g226 horas. +alores cr-ticos M <77 mg2d3 %ncluir o procedimento a ser adotado diante de um resultado crtico! LI%I)A#ME( "O PROCE"I%E!)O Linearidade O resultado da medio linear at 177 mg2d3. Nuando a a"sor"Hncia do teste for maior %ue <!7! diluir o produto corado e o "ranco <J8 com ;gua destilada ou deioni#ada! fa#er nova leitura e multiplicar o resultado o"tido por 8. Be ap s a diluio for o"tido um valor igual ou maior %ue 177 mg2d3! diluir a amostra com 0aCl 7!)89! reali#ar nova determinao e multiplicar o resultado o"tido pelo fator de diluio. -iluir a amostra de tal modo %ue o valor encontrado se situe entre 87 e <77 mg2d3. InterBerLncias <' Contaminao da ;gua! vidraria e am"iente com amnia! podem produ#ir resultados falsamente elevados. -eve'se evitar fumar pr Gimo ao local das dosagens. 2' :alores de Iilirru"ina at 12 mg2d3no produ#em interferOncias significativas! :alores de Hemoglo"ina maiores %ue )7 mg2d3 e .riglicrides maiores %ue 577 mg2d3 produ#em interferOncias positivas. 1' Certas drogas e outras su"stHncias podem produ#ir interferOncias in vivo e in vitro. Bugerimos consultar Clin Chem <5@8P 2<J<-'612-. (IG!IKICA"O CL'!ICO Cisiologicamente a uria se eleva devido a dieta hiperprotica ou com a idade! particularmente ap s 67 anos. Bua diminuio ocorre na gravide# normal e nos indivduos em dietas com "aiGo valor protico e alto contedo glucdico. G @7g:dl

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,levaQes da uria por defeitos de eGcreo se devem a causas pr'renais +insuficiOncia cardaca congestiva/! causas renais +nefrites! pielonefrites! e insuficiOncia renal aguda ou crnica/ e p s'renais +o"struQes do trato urin;rio por c;lculos! carcinomas ou p lipos/. ,levaQes da uria ocorrem tam"m por cata"olismo elevado +fe"re! septicemia! uso de corticosteroides/ e hemorragia internam! principalmente do trato grastointestinal. A diminuio da uria! %ue no tem eGpresso clnica! pode ocorrer em conse%uOncia $ infuso endovenosa de soluQes com car"ohidratos! reduo do cata"olismo protico e aumento da diurese. A dosagem srica de creatinina considerada mais especfica para a avaliao da funo glomerular! mas pode ser menos sensvel em algumas doenas renais precoces. A disfuno renal melhor avaliada atravs das dosagens de uria e creatinina associadas. REKERN!CIA( I LIOGREKICA( <. IergmeRer H*. Eethods of ,n#Rmatic Analisis! :olume 5! pag 665'681! :CH ?u"lishers! Clorida! <5)8. 2. Iollet S.! Iushman CT! .idUell ?.. Anal Chem <5D<P11J852'856. 1. Seather"urn ES. Anal Chem <5D@P15J5@<'5@6. 6. Sestgard TO! 4roth .. Clin Chem <5)<P 2@J 651'87<. 8. .onVs -I. NualitR Control in Clinical 3a"oratories! Sarner'Chilcott 3a"oratories! -iagnostic &eagents -ivision! Bcar"orough! Canada! <5@2. D. Anmetro = Ioas ?r;ticas de 3a"orat rio Clnico e 3istas de :erificao para Avaliao! NualitRmarV ed.! &io de Taneiro! <55@. @. *ria C,! AnstruQes de *so! 3a"test -iagn stica !ome Elaborado por2 Apro=ado por2 Implantado por2 (,bstit,i POP2 Re=isado por2 Re=isado por2 Re=isado por2 "esati=ado por2 Ra*o2 !Pmero Cpias "estino Assinat,ra "ata OOO:OOO:OOO OOO:OOO:OOO OOO:OOO:OOO OOO:OOO:OOO OOO:OOO:OOO OOO:OOO:OOO OOO:OOO:OOO