Benemrita Universidad Autnoma de Puebla

Colegio de Ingeniera en Alimentos Laboratorio de Microbiologa General

Ttulo: Curva de crecimiento de hongos. M.C. Hernndez Carranza Paola

Integrantes 1. Rivera Hernndez Mitchel 2. Garca Zaldvar Miriam Guadalupe 3. Quirino Jimnez Griselda 4. Velzquez Garca Jos Axel

Fecha de Entrega: 03 de Abril de 2014

Cintica de crecimiento de un hongo. Introduccin

La mayora de las personas ha observado el crecimiento de los hongos sobre diversos objetos, que se caracterizan por su aspecto algodonoso, aterciopelado o pulverulento y de diversos colores. La caracterstica fundamental de todos ellos es que estn constituidos por muchos filamentos microscpicos capaces de crecer longitudinalmente y ramificarse, los cuales se organizan para dar origen a las estructuras microscpicas que observamos. La gran diversidad de hongos se clasifica tomando como base, su morfologa macro y microscpica. El cuerpo de los hongos est constituido por filamentos tubulares microscpicos que se ramifican y se entrecruzan. Cada filamento se denomina hifa, y un conjunto de hifas forma lo que se conoce con el nombre de micelio. Crecimiento: El crecimiento de los hongos se produce en los extremos de las hifas, y se denomina, por esto, crecimiento distal o apical. En este proceso, la hifa se va extendiendo y el citoplasma fluye hacia la nueva parte. Al crecer tambin se va ramificando y cada ramificacin, a su vez, contina el crecimiento apical y as sucesivamente, hasta que se forma una maraa visible de filamentos. Mientras existan nutrimentos disponibles, el crecimiento por elongacin de las hifas puede continuar, aunque, a la vez, las partes ms viejas del micelio pierden poco a poco su contenido citoplasmtico y mueren. Requerimientos nutricionales: Los hongos poseen la capacidad de utilizar una gran variedad de materiales orgnicos, tanto sencillos como complejos, como el almidn y la celulosa. Para poder degradar y luego asimilar los compuestos orgnicos, los hongos, generalmente pueden elaborar gran cantidad de enzimas hidrolticas, como lipasas, proteinasas y pectinasas. En cuanto al requerimiento de agua de los hongos, se puede decir que, en general, la mayora necesita menos humedad que las bacterias; y en cuanto a sus requerimientos de oxgeno, se puede decir que la mayora son aerobios estrictos. pH: Los hongos, en general, tienen un rango muy amplio de tolerancia al pH. Pueden crecer en concentraciones relativamente altas de cido, as como en medios bastante alcalinos. El rango de pH para una gran mayora es de 2.0 a 9.0, pero casi todos crecen mejor en un pH cido. El pH ptimo se encuentra alrededor de 5.6. Estudio morfolgico de los hongos. El aspecto general de un hongo en un medio de cultivo es muchas veces suficiente para un especialista para indicar su gnero. Para el estudio microscpico, se toma una pequea porcin del micelio con un asa micolgica y se coloca sobre un portaobjetos, al cual se le agrega una gota de azul de lactofenol y luego se sobrepone el

cubreobjetos, posteriormente se pasa ligeramente sobre la llama del mechero para favorecer la penetracin del colorante y se observa al microscopio. Curva de crecimiento de hongos El crecimiento del hongo puede ser dividido cualitativamente en tres fases: la primera es una fase de no crecimiento evidente, seguida de una fase de rpido crecimiento y finalmente una fase sin crecimiento neto o de autolisis y de disminucin en peso seco. Sin embargo, no todos los hongos cumplen este esquema, se observan curvas de dos fases, en la que el crecimiento inicial es seguido de una segunda fase en la que se detiene el crecimiento; la cul puede representar una fase de sntesis de polisacridos o agotamiento de la fuente de nitrgeno. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Metodologa Se preparan los sistemas mostrados en la tabla 1. en agar PDA Ajustar el pH con 5 ml. de cido tartrico o hidrxido de sodio Realizar un lavado de esporas (agitando el asa microbiolgica de punta con una muestra del hongo), en un tubo con 10 ml. de agua destilada Inocular con 5 L del lavado de esporas en cada caja petri, por duplicado Monitorear el dimetro diariamente durante 7 das. Cuadricular con un bistur el agar saboraud y cortar un cuadro pequeo, se coloca sobre el portaobjetos Inocular con 5 L del lavado de esporas en cada caja petri, por duplicado Incubar durante 3 das, y realizar tincin con azul algodn lactofenol y observar al microscopio

Cuestionario

1._ En qu consisten las distintas fases que componen la curva de crecimiento microbiano? R= Fase de retardo, Fase de Adaptacin o fase lag: no hay divisin celular y estn sintetizando nuevos componentes, Fase de Crecimiento Exponencial o Fase Log: los microorganismos se dividen por fisin binaria, Fase Estacionaria: el crecimiento disminuye debido al agotamiento de nutrientes y por ltimo Fase de Declinacin o muerte. 2._ De acuerdo con los resultados obtenidos en la VCR Cules son las condiciones de crecimiento que favorecen a Aspergilus parasiticus? R= Humedad y agua disponible (aw) 0.70 La cantidad de agua existente en el ambiente y en los sustratos es uno de los factores importantes para el desarrollo de los hongos y para la produccin de micotoxinas. Sin

embargo no slo influye la cantidad de agua sino tambin la forma de presentacin de la misma, as pues, el agua se encuentra en forma libre y en forma combinada. 3._ De acuerdo con los resultados obtenidos en las fases lag Cules son las condiciones de crecimiento que retardan el desarrollo de Aspergilus parasiticus? R= Un ambiente seco impide el crecimiento de este hongo, un medio cido y el exceso de agua. 4._ Menciona las tcnicas utilizadas para la medicin del crecimiento microbiano Mtodos directos: 1._ Cuenta total microscpica 2._ Cuenta Viable 3._Medicin lineal o radial Mtodos Indirectos: 1._ Nmero ms probable (NMP) 2._ Turbidimetra 3._Nefelometra

Resultados:

Tabla 1. Preparacin de los sistemas

Sistema 1

Sacarosa 0

Ajuste de pH pH 3.5, agregar 14 mL/L de cido Tartrico 10% en el agar PDA. pH 3.5, agregar 14 mL/L de cido Tartrico 10% en el agar PDA. ------------------pH 7, agregar 2.25 mL/100 mL de NaOH 1N en el agar PDA. pH 7, agregar 2.25 mL/100 mL de NaOH 1N en el agar PDA.

3 4 5

0 4 0

Resultados:

Bibliografa Prescott, Harley, Klein. 2004. Microbiologa General. Editorial McGraw-HillInteramericana K. Piatkin. 1968. Microbiologa. Editorial Mir P.R. Murray, K.S. Rosenthal & M.A. Pealler. 2006. Microbiologa Mdica. Elsevier Espaa