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AUTOINSTRUCTIVO. TEORA CELULAR Y USO DEL MICROSCOPIO DE LUZ COMO INSTRUMENTO DE OBSERVACIN DE LA CLULA.
INTRODUCCIN La Biologa, como toda ciencia, ha visto surgir a travs de su historia, TEORAS1 para explicar fenmenos de la naturaleza, con el objeto de satisfacer la natural curiosidad del ser humano por entenderse a s mismo y a su entorno. Una de las conceptualizaciones ms importante que surge luego que se formulara la Teora Celular, fue la realizada por H. Preyer, fisilogo alemn, en la que plantea que toda clula necesariamente proviene de una prexistente (omnis cellula e cellula)2 que despus fue generalizada a todos los seres vivos ( para omne vivum e vivo)3. En la actualidad, la formulacin de la Teora Celular incluye fundamentalmente las siguientes afirmaciones: a. Todos los seres vivos estn formados por clulas b. Las clulas son las unidades estructurales y funcionales de los seres vivos c. Toda clula se origina a partir de una clula preexistente. EL MICROSCOPIO DE LUZ Crucial para la formulacin de la Teora Celular fue el contar con el microscopio ya que, con contadas excepciones, las clulas son invisibles para el ojo humano. Con la ayuda de este instrumento y sus diversas versiones en el curso de la historia, se ha logrado tener una nocin de la asombrosa diversidad de clulas existentes y se ha ido construyendo una clasificacin de los seres vivos. Tamao relativo de clulas y algunas estructuras

Microscopio electrnico

Microscopio de luz

ojo humano

Nota: 1 mm= 103 m; 1 m= 103 nm, 1 nm= 10 Ao IDENTIFICACIN DE LOS COMPONENTES MECNICOS Y PTICOS DE UN MICROSCOPIO DE CAMPO CLARO O DE LUZ La figura N1 es una fotografa de un microscopio de luz convencional. Las partes esenciales de este instrumento son comunes a todos los modelos. Busca e identifica en la figura las partes sealadas con flechas y comenta acerca de la funcionalidad de cada una de ellas.

1 INSTRUCCIONES PARA EL USO DEL MICROSCOPIO DE LUZ 1. Examina el microscopio y acostmbrate al uso de los diferentes controles. Comprueba que el tornillo macromtrico, tornillo micromtrico y control de enfoque del condensador funcionen. Manipula los controles para conocer la direccin y extensin de los movimientos del carro.

2. Coloca el objetivo de menor aumento o lupa en el eje ptico. Comprueba el sonido metlico que indica que ste est en su sitio. Coloca la preparacin sobre la platina y desplzala para que la parte coloreada quede ubicada en el eje ptico del instrumento. Asegrate de que colocaste la preparacin de manera correcta, con el cubreobjetos hacia arriba. 3. Enciende la lmpara de tu microscopio. Lleva la lente frontal del condensador hasta una distancia de 1 a 2 mm de la preparacin. Comprueba mirando a travs del ocular que est abierto el diafragma iris y muvelo hasta obtener una iluminacin adecuada (campo claro, con iluminacin homognea). Mirando lateralmente, utiliza el tornillo macromtrico para acercar el objetivo hasta casi tocar la preparacin (3mm) Mira a travs del ocular y con el tornillo macromtrico aleja lentamente el objetivo de la preparacin. En una determinada posicin, el espcimen aparecer en foco. Con movimientos finos del micromtrico ajusta el foco a tu ojo. Utiliza para tu observacin la parte central del campo visual. 4. Gira el revlver, hasta colocar el objetivo de 10x en el eje ptico. Realiza nuevamente el enfoque fino con el micromtrico. Gira nuevamente el revlver y coloca el objetivo de 40x en el eje ptico del instrumento. Realiza nuevamente el enfoque fino. 5. Iluminacin. Verifica el efecto en la imagen de cambios de la iluminacin con desplazamientos del condensador, abriendo y cerrando el diafragma, con y sin lentilla (esta es una segunda lente condensadora que se emplea con aumento superiores a 45X). Observa las caractersticas de la iluminacin a utilizar de acuerdo con el tipo de preparado a observar. 6. Enfoque con el objetivo de inmersin. La distancia til de trabajo de estos objetivos es muy pequea (0.1 0.16 mm), por lo tanto, deben extremarse los cuidados para no daar la lente con la preparacin. PARA OBSERVAR UNA PREPARACION CON OBJETIVO DE INMERSION, COMIENZA SIEMPRE ENFOCANDO CON LOS OBJETIVOS MENORES (10X - 40X) Y ASEGRATE QUE EL CUBREOBJETOS EST HACIA ARRIBA, DE OTRA FORMA EXISTE RIESGO DE DAAR EL OBJETIVO Y QUEBRAR LA PREPARACIN. - Para colocar la gota de aceite de inmersin, gira el revlver a una posicin intermedia entre el objetivo de 40X y el de inmersin. Coloca una pequea gota de aceite (de ms o menos 5 mm de dimetro) sobre el crculo iluminado de la preparacin. Evita que se formen burbujas. - Lleva el objetivo de inmersin al eje ptico, asegrate que la lente frontal del objetivo quede inmersa en el aceite. Mira a travs del ocular, el especimen deber estar aproximadamente enfocado. Si es necesario, corrige el enfoque con el micromtrico. 7. Posicin de reposo del microscopio. a) Al finalizar tus observaciones apaga la luz del microscopio, remueve el aceite de tu preparacin y del objetivo con un pao suave, sin pelusas, al que le has agregado unas gotas de xilol. Nota: Si el objetivo queda con aceite, ste se secar formando una pelcula opaca, difcil de eliminar. Cuida dejar el microscopio : a) en el centro de la mesa b) con el objetivo de menor aumento en el eje ptico. c) el condensador en la posicin ms alta. d) la lentilla fuera del eje ptico. e) el diafragma iris abierto. f) la platina en su posicin ms baja g) carro atrs centrado y apegado a la columna del microscopio.

b)

AVANCES RELEVANTES EN LA HISTORIA DE LA BIOLOGA CELULAR 1. La siguiente figura representa una lnea de tiempo que resume algunos hitos en el conocimiento en Biologa, con especial nfasis en los relacionados a la Biologa Celular.

Robert Hooke observa clulas de un rbol de corcho con un microscopio primitivo Leewenhoek descubre las bacterias

Koch usa pigmento de anilina para identificar las bacterias causantes de la TBC y el clera Kolliker describe las mitocondrias en el msculo

Ruska construye el primer microscopio electrnico de transmisin

Clonacin de la Oveja Dolly

1655

1683

1857

1882

1931

1997

1674

1838
Shleiden y Schwann proponen la Teora Celular

1898

1965

Leewenhoek descubre los protozoos

Golgi impregna clulas con nitrato de plata, descubriendo el aparato de Golgi

1er microscopio electrnico de barrido comercial

a) En relacin a la informacin que proporciona la figura anterior, investiga la importancia histrica que se le atribuye a la formulacin de la Teora Celular . b) Investiga cul es la trascendencia cientfica de la Teora Celular. c) Es posible para ti demostrar que la Teora Celular es correcta en sus afirmaciones? Fundamenta. d) Qu significa que en los seres vivos la clula sea la unidad?: 1. morfolgica 2. metablica 3. de reproduccin 4. de evolucin 2. El estudio de la mayor parte de las caractersticas estructurales de las clulas es imposible hacerlo sin la ayuda de instrumentos pticos, debido al pequeo tamao de ellas. Investiga cmo actan estos instrumentos y el significado del Poder de Resolucin de un instrumento ptico. 3. En la observacin del mundo biolgico, reconocemos la existencia de una variedad de formas, tamaos y funciones de los seres vivos. Esta gran diversidad tambin es observable con relacin a las clulas que los estructuran. A continuacin te presentamos una serie de microfotografas de distintos tipos celulares, analiza cada una y al respecto: Describe las formas de los tipos celulares representados. Con la informacin disponible respecto al aumento de la fotografa, determina los tamaos aproximados de las clulas. b. Qu clasificacin propones para incluir a las clulas que has observado en esta serie? c. Qu otros tipos celulares mencionaras que forman parte de los grupos definidos por t? d.- Averiga como es la estructura celular de las archebacterias y de las eubacterias, relacinalas con su forma de vida. a.

3 A. Organismos Procariontes 1. Microfotografas de bacterias del dominio Archea (Woesse, C). Si cada barra representa 5 m, calcula y anota el tamao real de cada una de las cuatro especies de bacterias representadas en las fotografas.

Investiga sobre las caractersticas de los ambientes donde se desarrollan estos seres vivos.

(Microscopio electrnico de trasmisin)

2.

Microfotografas de bacterias del dominio Eubacteria

(Woesse, C.)

Escherichia coli 2 m (Microscopio electrnico de barrido)

2 m

(Microscopio electrnico de barrido)

Staphylococcus sp.

Bacteria aerbica Bacillus anthracis (Microscopio de luz)

Bacteria fotosintetizadora del genero Nostoc (Microscopio de luz)

4 B. Organismos eucariontes unicelulares

10 m Giardia sp en intestino de vertebrado

(Microscopio electrnico de transmisin)

10 m

Euglena sp.

(Microscopa de Nomarsky)

esta informacin?

Averiga qu organelos se encuentran presentes en estas clulas. Qu concluyes a partir de

20 m

Alga gnero Oedogonium (Microscopio de luz)

10 m

S. cerevisiae en corte transversal (Microcopio electrnico de trasmisin)

microfotografas previas.

Averiga a qu grupo de organismos corresponden los dos que se muestran en las

C. Organismos Eucariontes precursores de los pluricelulares

0.1 mm

Volvox sp

Organismo multicelular (Microscopio de luz)

Esponja. Organismo multicelular.

(Ojo desnudo)

volvox y la esponja. Averiga como se reparten las funciones las clulas en ambos casos.

Compara la forma en que se organizan las clulas para conformar la estructura que presentan el

D. Clulas de organismos pluricelulares

10 m Frotis de sangre de vertebrado teido con Giemsa ( Microscopio de luz )

10 m Corte de mdula espinal de mamfero, impregnacin argntica (sales de plata) (Microscopio de luz)

cada uno de ellos

Qu diferencia de asociacin celular presentan ambos tejidos. Indica las funciones principales de

5 m Espermatozoides de mamferos (Microscopio electrnico de barrido)

5 m Clulas de epidermis vegetal de cebolla (Microscopio de luz)

Qu funciones cumplen las clulas representadas? Relaciona forma y funcin en cada caso.

5 m

Corte de epitelio animal, teido con hematoxilina y eosina (Microscopio de luz)

6 E. Las mitocondrias y los cloroplastos Ambas son estructuras subcelulares de organismos eucariontes que tienen caractersticas estructurales y funcionales similares a los organismos procariontes.

0.5 m Microfotografa en microcopio electrnico de trasmisin de un cloroplasto de clula epidrmica de un vegetal.

0.5 m Microfotografa en microscopio electrnico de trasmisin de mitocondrias de clulas de hgado de mamfero

Investiga sobre los fundamentos de la Teora Simbitica del origen de cloroplastos y mitocondrias en la clula eucarionte y seala cules son los antecedentes disponibles en la actualidad que respaldan esta teora.

BIBLIOGRAFA 1. Alberts, B.; Bray, D. Lewis, J. Raff, M.; Keiths, R.; Watson, J.D.: "Molecular Biology of the Cell Third Edition New York, Scientific American Books, W.H. Freeman and Company, (1994). Lodish, H. ; Baltimore, D. ; Berk, R. ; Zipursky, S.L. ; Matsudaria, P. ; and Darnell, P. : "Molecular Cell Biology" Fourth Edition, New York (2000). Sobota-Hammersen, F. Histologa. Captulo Citologa. Salvat Ed. (1982). Elementos de Biologa Celular y Gentica. Spotorno y Hecker (Eds.) Captulo 1, Segunda edicin. Departamento de Biologa Celular y Gentica. Facultad de Medicina. Universidad de Chile. (1993).

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