CAPACIDAD BUFFER EN SANGRE SUERO Y PLASMA EVALUADAS CON ACIDO LACTICO E HIDROXIDO DE AMONIO

Juliana Paola Martnez Acua1

RESUMEN Introduccin. La amortiguacin de los aminocidos, es sumamente importante, debido a que de esto depende su efectividad a la hora de aceptar y regular sustancias altamente bsicas o altamente cidas y no se altere considerablemente la relacin y equilibrio del mismo. Objetivo: se busca la demostracin de la capacidad de algunos lquidos biolgicos de amortiguar los cambios en el pH, de igual manera establecer una comparacin y diferencia de la capacidad amortiguadora entre la sangre, suero y plasma. Materiales y mtodos: Fueron necesarios en el proceso, la utilizacin de la bureta, vasos de precipitado, pipetas, agitador magntico, potencimetro y solucin salina. Posteriormente, se procedi a realizar una solucin entre el suero y la solucin salina con el fin de aadir progresivamente el lquido amortiguador, en este caso el cido lctico. Resultado. Al aadir mayor cantidad del lquido amortiguador el pH de la solucin adquiere un carcter cido. Conclusin. La sangre demostr tener ms capacidad de amortiguamiento al entrar en reaccin tanto con cidos y bases. Las tres sustancias demostraron tener capacidad de amortiguamiento frente al Hidrxido de amonio y el suero demostr no tener amortiguamiento frente al cido lctico. Palabras clave: Amortiguadores, bases, cidos, sangre, suero, plasma, pH ABSTRACT Introduction . The damping of the amino acids , is extremely important, because this depends on its effectiveness in accepting and regulate highly basic or highly acidic substances and not the relationship and balance thereof is substantially alters . Objective: searching the demonstration of the ability of some biological fluids dampen pH changes , likewise a comparison and buffering capacity difference between the blood, serum and plasma . Materials and methods : It was necessary in the process, the use of the burette , beakers , pipettes, magnetic stirrer, pot and saline. He later proceeded to a solution between serum and saline in order to gradually add the liquid buffer, in this case the lactic acid. Result . To add larger amount of the buffer the pH of the liquid solution turns acidic . Conclusion . Blood proved to have more buffering capacity to enter into reaction with both acids and bases. All three substances showed to have buffering capacity versus ammonium hydroxide and demonstrated no serum versus lactic acid buffer . Keywords : Cushions , bases, acids , blood, serum , plasma, pH

Introduccin La sangre es un tejido lquido que recorre el organismo transportando clulas, y todos los elementos necesarios para realizar sus funciones vitales (respirar, formar sustancias, defenderse de agresiones) y todo un conjunto de funciones muy complejas y muy importantes para la vida. La cantidad de sangre de una persona est en relacin con su edad, peso, sexo y altura, una persona adulta se puede considerar que tiene entre 4,5 y 6 litros de sangre. Todos los rganos del cuerpo humano funcionan gracias a la sangre que circula por arterias, venas y capilares. Composicin de la sangre Como todo tejido, la sangre se compone de clulas y componentes extracelulares (su matriz extracelular). Estas dos fracciones tisulares vienen representadas por: Los elementos formes tambin llamados elementos figurados: son elementos semislidos (es decir, mitad lquidos y mitad slidos) y articulados (corpsculos) representados por clulas y componentes derivados de clulas. 1 Facultad de ciencias Agropecuarias. Primer semestre. Zootecnia. Capacidad buffer en diferentes sustancias. Grupo11.

 El plasma sanguneo: un fluido traslcido y amarillento que representa la matriz extracelular lquida en la que estn suspendidos los elementos formes. El plasma es una mezcla de protenas, aminocidos, glcidos, lpidos, sales, hormonas, enzimas, anticuerpos, urea, gases en disolucin y sustancias inorgnicas como sodio, potasio, cloruro de calcio, carbonato y bicarbonato. El suero sanguneo o suero hemtico es el componente de la sangre resultante tras permitir la coagulacin de sta y eliminar el cogulo de fibrina y otros componentes. Contiene numerosos efectores biolgicos, como el factor de crecimiento derivado de plaquetas, segregados por los elementos formes al suceder dicha coagulacin. Para obtener el suero, a la sangre no se le aplica anticoagulante. Se deja que se coagule y se centrifuga. Es de un color amarillo, un poco ms intenso que el plasma. El suero es til en la identificacin de algunos analitos en los que no se requiere de la intervencin de un anticoagulante, ya que este podra interferir en el resultado alterndolo. plasma sanguneo es la fraccin lquida y acelular de la sangre. Est compuesto por agua el 90% y mltiples sustancias disueltas en ella. De stas las ms abundantes son las protenas. Tambin contiene glcidos y lpidos, adems de los productos de desecho del metabolismo, como la urea. Es el componente mayoritario de la sangre, puesto que representa aproximadamente el 55% del volumen sanguneo total. El 45% restante corresponde a los elementos formes (tal magnitud est relacionada con el hematocrito). El suero, es el remanente del plasma sanguneo una vez consumidos los factores hemostticos por la coagulacin de la sangre. El plasma es salado arenoso y de color amarillento traslcido. Adems de transportar los elementos formes mantiene diferentes sustancias en solucin, la mayora de los cules son productos del metabolismo celular. La viscosidad del plasma sanguneo es 1,5 veces la del agua. El plasma es una de las reservas lquidas corporales. El total del lquido corporal (60% del peso corporal, 42 L para un adulto de 70 kg) est distribuido en tres reservas principales: el lquido intracelular (21-25 L), el lquido intersticial (10-13 L) y el plasma (3-4 L). El plasma y el lquido intersticial en conjunto hacen al volumen del lquido extracelular (14-17 L). Composicin El plasma es un fluido coloidal de composicin compleja que contiene numerosos componentes. Abarca el 55% del volumen sanguneo. Est compuesto por un 91,5%

de agua, adems de numerosas sustancias inorgnicas y orgnicas (solutos del plasma). El mantener un constante pH algo vital para poder obtener un correcto desarrollo de las reacciones bioqumicas y qumicas que se tienen a nivel experimental en el laboratorio; los amortiguadores (llamados tambin disoluciones amortiguadoras o buffers) se dice que son aquellas disoluciones cuya concentracin de protones apenas vara al aadrsele cidos o bases fuertes. Los ms sencillos de estos esta formados por unas mezclas binarias de un cido dbil y sal del mismo acido con una base fuerte; tambin por una base dbil y una sal de esta base con un cido fuerte, ejemplo de estos podemos encontrar al amoniaco y cloruro amoniaco. En cuanto a la concentracin de los protones del agua experimenta una elevacin inmediata cuando s ele aade una cantidad pequea de cualquier acido. El comportamiento del pH vara dependiendo de cada una de las sustancias aadidas ya sea suero, plasma o sangre ya que cada uno tiene diferente capacidad de amortiguamiento debido a sus componentes; adems de esto hay que tener muy en cuenta lo importante que debe ser el mantener el pH adecuado para cada organismo. Estos 3 (sangre, suero y plasma) tienen diferentes composiciones y comportamientos amortiguadores. Siendo esta ltima capacidad una resistencia, a los cambios de iones de hidrogeno por la adicin de bases y cidos, siendo esta la mejor llamada escala de pH, en la sangre, podemos encontrar un pH de 7.35-7.45, y en este rango deben funcionar los amortiguadores. El pH es una medida de la acidez o alcalinidad de una solucin, el pH indica la concentracin de iones hidronio [H3O+] presentes en determinadas sustancias, el valor del pH se puede medir de forma precisa mediante un potencimetro, tambin conocido como pH-metro, un instrumento que mide la diferencia de potencial entre dos electrodos: un electrodo de referencia (generalmente de plata/cloruro de plata) y un electrodo de vidrio que es sensible al in hidrgeno.. La capacidad amortiguadora de la sangre es muy alta y se debe a la presencia de sales que se encuentran disueltas como carbonato/bicarbonato en similares concentraciones. Para lograr mantener un rango de pH ms o menos constante y acotado, la sangre tiene una serie de mecanismos de regulacin cido-base, y por lo tanto posee las caractersticas de un sistema buffer. El mecanismo ms importante de regulacin es el del bicarbonato. Como producto del metabolismo se produce CO2, xido cido que genera H2CO3. En la sangre se encuentra disuelto bicarbonato de sodio, NaHCO3. Con el H2CO3 conforman un sistema regulador. Dependiendo de la cantidad de CO2 producido, o de otras causas de variaciones de pH, enzimas en la sangre favorecen la reaccin hacia un lado u otro. En los pulmones, el H2CO3 es convertido de nuevo en CO2 para aumentar el pH de la sangre, y el CO2 es excretado como gas. Tambin protenas con grupos que capturen o liberen H+, en especial la hemoglobina, actan regulando la

cantidad de H+ en solucin. Cuando estos mecanismos no alcanzan a amortiguar los excesos de cido o base, se pueden excretan los grupos cidos o bsicos por la orina. Metodologa

sangre, suero y plasma

tubo con anticuagulante

sangre 0,2mL

suero 0,2mL

plasma 0,2mL

completar con 20mL NaCl

completar con 20mL NaCl

completar con 20mL NaCl

Titular con base o con acido (segun)

Titular con base o con acido (segun)

Titular con base o con acido (segun)

anotar pH despues de cada adicion

anotar pH despues de cada adicion

anotar pH despes de cada adicion

Resultados Materiales Potencimetro Bureta Agitador magntico Matraces volumtricas Vasos precipitados

1. Tabla de resultados del pH de la sangre en sustancia acido base.

pH inicial: 7.7 pH con cido lctico Volumen pH con cido Volumen lctico 2ml 4ml 6ml 8ml 10ml 12ml 14ml 16ml 7.5 7.4 7.3 7.2 7.0 6.9 6.8 6.7 2ml 4ml 6ml 8ml 10ml 12ml 14ml 16-18ml 7.5 7.3 7.1 7.7 7.1 7.7 7.8 7.9 20ml 22-24ml 26-30ml 32-36ml 38-42ml 44-58ml 60-112ml 114ml 8 8.1 8.2 8.3 8.4 8.5 8.6 8.7 pH pH con NH4OH Volumen pH

2. Tabla de resultados del pH del suero en sustancia acido base pH inicial suero vs NaOH: 7.52 pH con NaOH Volumen 0.2ml 0.4ml 0.6ml 0.8ml 1ml 1.2ml 1.4-1.6ml 1.8 2ml 2.2ml 2.4ml 2.6ml pH con NaOH Volumen 2.8ml pH 7.40 Volumen 2.6ml pH 8.32 pH 7.52 7.51 7.50 7.49 7.48 7.47 7.46 7.45 7.44 7.43 7.42 7.41 Volumen 0.2ml 0.4ml 0.6ml 0.8ml 1ml 1.2ml 1.4ml 1.6ml 1.8ml 2ml 2.2ml 2.4ml pH 8.04 8.08 8.11 8.14 8.16 8.18 8.20 8.22 8.24 8.26 8.28 8.30 pH inicial suero vs NH4OH: 7.89 pH con NH4OH Volumen 4.4ml 4.6ml 4.8ml 5ml 5.2ml 5.4ml 5.6ml 5.8ml 6ml 6.2ml 6.4ml 6.6ml pH 8.5 8.52 8.54 8.56 8.58 8.60 8.62 8.64 8.66 8.68 8.70 8.72

pH con NH4OH Volumen 6.8ml pH 8.74

3ml 3.2ml 3.4ml 3.6ml 3.8ml 4ml

7.40 7.40 7.40 7.39 7.39 7.37

2.8ml 3ml 3.2ml 3.4ml 3.6ml 3.8ml 4ml 4.2ml

8.34 8.36 8.38 8.40 8.42 8.44 8.46 8.48

7ml 7.2ml 7.4ml 7.6ml 7.8mll 8ml 8.2ml 8.4ml

8.76 8.78 8.80 8.81 8.83 8.85 8.87 8.89

3. Tabla de resultados del pH del plasma en sustancia acido base pH inicial plasma vs cido lctico: 8.10 pH inicial plasma vs NH4OH: 6.9 Volumen pH con cido Volumen lctico 1ml 2ml 3ml 4ml 5ml 6ml 7ml 8.07 7.85 7.69 7.51 736 7.23 7.11 1ml 2ml 3ml 4ml 5ml 6ml pH NH4OH 7.3 7.4 7.5 7.7 7.8 7.9 con

Discusin de resultados Segn los resultados analizados y arrojados en la prctica se pudo concluir y determinar la capacidad amortiguadora de cada una de las sustancias, dando como resultado que la sangre es el mejor amortiguador entre las tres analizadas, esto se dice por su capacidad de mantener el pH sin volverse acido con facilidad, pese a la cantidad de cido lctico se mantuvo de igual manera sin descender brusca o rpidamente, esto demuestra y corrobora la efectividad de la sangre para mantener su pH estable, ya que si se presentara una leve fluctuacin en el pH o un cambio demasiado brusco llega a ser mortal. El plasma presenta una menor resistencia en cuanto al cambio del pH, este por ser un producto extrado de la sangre, se encuentra en concentracin del 55% en sangre y

posee la misma cualidad amortiguadora de la sangre pero no la misma calidad de estabilizacin. El suero en cambio muestra una muy poca capacidad como sustancia tampn o amortiguadora ya que presenta cambios bruscos de pH y ninguna regresin que demuestre una breve estabilizacin o resistencia a un cambio de pH. El suero tuvo un dficit de amortiguacin frente al Hidrxido de sodio.

Conclusiones Segn los resultados analizados y arrojados en la prctica se pudo concluir y determinar la capacidad amortiguadora de cada una de las sustancias, dando como resultado que la sangre es el mejor amortiguador entre las tres analizadas, esto se dice por su capacidad de mantener el pH sin volverse acido con facilidad, pese a la cantidad de cido lctico se mantuvo de igual manera sin descender brusca o rpidamente. El plasma presenta una menor resistencia en cuanto al cambio del pH, este por ser un producto extrado de la sangre, se encuentra en concentracin del 55% en sangre y posee la misma cualidad amortiguadora de la sangre pero no la misma calidad de estabilizacin. Las sustancias buffer o amortiguadoras prestan un importante papel, en el desarrollo de los procesos metablicos y protenicos, claramente en este experimento se evalu la manera en la que los amortiguadores influyen en el mantenimiento y equilibrio del potencial de hidrogenacin. Bibliografa http://www.quimitube.com/soluciones-amortiguadoras-biologicas-sangre/ http://books.google.com.co/books?id=FXDiqLK6GmAC&pg=PA37&lpg=PA37&dq=cap acidad+buffer+de+la+sangre&source=bl&ots=UqNxyn1ZMJ&sig=Y1SnZZjOyZ9Wq8G SbqaKgWXuUlA&hl=es-419&sa=X&ei=ALA5U6CpLe1sAT75IGACg&sqi=2&ved=0CFoQ6AEwBw#v=onepage&q=capacidad%20buffer%20d e%20la%20sangre&f=false Gua de Laboratorios de Bioqumica. Universidad de Lasalle