Chromatographic methods of separation are distinguished by their high selectivity, that is their ability to separate components of closely similar

physical and chemical properties. Many mixtures which are difficult to separate by other methods may be separated by chromatography. The range of materials which can be processed covers the entire spectrum of molecular weights, from hydrogen to proteins. Chromatography plays several roles in the process industries. The design of a new plant begins with a proposed chemical route from starting materials to finished product, already tested at least on a small laboratory scale. In many cases, analytical chromatography will have been used in the laboratory to separate and identify the products in the mixtures produced by the proposed chemical process. In the biotechnology area, for example, the original starting material may be a natural product or a complex synthetic mixture which has been analysed by chromatography. Information on the choice of chromatographic stationary and mobile phases and operating conditions is therefore often already available and provides a basis for initial scale-up to an intermediate laboratory scale, preparative chromatography, and for the subsequent design of the commercial separation process, production or large-scale chromatography, as shown in Figure 19.1. Chromatography also plays two other roles in process engineering. First, the detailed design of each unit operation in a process requires a knowledge of a variety of physical and chemical properties of the materials involved. Chromatographic techniques can provide rapid and accurate methods of measuring a great variety of thermodynamic, kinetic and other physico-chemical properties('). Secondly, chromatography is widely used for routine chemical analysis in quality control and for automated analysis of process streams in process control (process chromat~graphy)(T~h~is~ c)h. apter, however, is concerned mainly with production chromatography as a unit operation whose use is increasing as the demand for high purity materials grows. In chromatography the components of a mixture are separated as they pass through a column. The column contains a stationary phase which may be a packed bed of solid

particles or a liquid with which the packing is impregnated. The mixture is carried through the column dissolved in a gas or liquid stream known as the mobile phase, eluent or carrier. Separation occurs because the differing distribution coefficients of the components of the mixture between the stationary and mobile phases result in differing velocities of travel. Chromatographic methods are classified according to the nature of the mobile and stationary phases used. The terms gas chromatography (GC) and liquid chromatography (LC) refer to the nature of the mobile phase. The different types of stationary phase are described in Section 19.4. Both GC and LC may be operated in one of several modes. The principal modes currently used for large-scale separations are elution, selective adsorption or desorption, and simulated countercurrent chromatography. In addition, reaction and separation can be combined in a single column with unique advantages. Elution is the most used and best developed form of the technique and is described first.

CROMATOGRAFIA DE CAMBIO IONICO (CCI)

La cromatografa de intercambio inico se basa en el equilibrio de los iones de soluto entre el disolvente y los sitios cargados en la fase estacionaria (ver la figura 10.5.c.). Esta consta de una matriz (R) con grupos funcionales cargados (A) y contraiones de carga opuesta (M), susceptibles de intercambiarse con especies de la misma carga contenidas en la fase mvil (X) RA M+ + X+ <> RAX+ + M+ (intercambio catinico) RA+M + Y <> RA+Y + M (intercambio aninico) La competicin entre los iones de la muestra y el contra-in por un determinado sitio es muy similar a la que existe entre el soluto y el disolvente para los sitios de adsorcin en CLS. De hecho, en ocasiones, se hace referencia a la CCI como cromatografa de adsorcin implicando interaccin electrosttica, si bien, la

naturaleza de las fases mvil y estacionaria, as como el tipo de muestras a separar, hace que sea preferible considerarla independientemente de aquella. Fases estacionarias. Existe una gran variedad de materiales, orgnicos e inorgnicos, naturales y sintticos, que presentan propiedades adecuadas para el intercambio inico, si bien, normalmente se prefieren sustancias sintticas conocidas como resinas de intercambio inico. Las resinas se preparan introduciendo grupos ionizables en una matriz constituida por un polmero orgnico, de los cuales el ms comn es el poliestireno, obtenido por copolimerizacin del estireno y del divinil-benceno. La polimerizacin da como resultado una estructura tridimensional de carcter poroso y si se lleva a cabo en suspensin acuosa se obtienen pequeas esferas con dimetros que van de 0.1 a 0.5 mm. El grado de entrecruzamiento vara con la proporcin de divinilbenceno, que oscila entre 1 y 16 %*. Por otra parte, los anillos bencnicos pueden modificarse para producir una resina de intercambio catinico, con grupos SO3H o COOH, o una resina aninica, con grupos CH2N+R3 o CH2NR2 Las resinas de cido sulfnico son intercambiadores de cido fuerte, encontrndose disociados y pudiendo intercambiar protones prcticamente a cualquier valor de pH, mientras que las que contienen grupos COOH el margen de intercambio suele estar limitado entre 5 y 14. En cuanto a las resinas aninicas, las que contienen compuestos de amonio cuaternario son bases fuertes, mientras que las constituidas por aminas se comportan como bases dbiles. Tanto unas como otras suelen emplearse en forma de cloruros, en lugar de hidrxidos, debido a la mayor estabilidad de aquellos. Desde el punto de vista prctico, es importante considerar el grado de accesibilidad de los iones contenidos en la fase mvil a los centros de intercambio. En este sentido, las resinas con bajo nivel de entrecruzamiento hacen posible que el equilibrio de intercambio se establezca rpidamente, mientras que si el nivel de entrecruzamiento es alto, ello significa tamaos pequeos para los poros, con lo que la resina se hace ms selectiva para los iones pequeos. En este caso, la resina presenta mayor capacidad de intercambio y selectividad, pero tiempos de equilibrio ms elevados. Selectividad de las resinas. Considrese una resina catinica con el in intercambiable H+ en contacto con una disolucin conteniendo el in monovalente M+. Se establece el siguiente equilibrio de intercambio: R H+ + M+ <> R M+ + H+ donde R representa la matriz de la resina. La constante de equilibrio, llamada coeficiente de distribucin o coeficiente de selectividad viene expresada por,

donde [M+]R y [H+]R representan las concentraciones de M+ y de H+ en la resina*. La constante Kd representa la afinidad de la resina por los iones M+, respecto a los iones H+ (en este caso), de forma que cuanto mayor sea el valor de Kd, mayor ser la tendencia a retener los iones M+. Mecanismo de las separaciones. Cuando una pequea cantidad de disolucin conteniendo iones M+ se pone en contacto con una resina como la mencionada anteriormente y se lava con agua, todos los iones M+ reemplazarn a los iones H+ y quedarn fijados en la parte superior de la columna formando una banda adsorbida sobre la fase estacionaria. Si Kd es grande, la banda ser estrecha y concentrada, mientras que si es pequea, la banda ser amplia y difusa. Para desplazar la banda de iones M+ adsorbidos a lo largo de la columna, es evidente que no puede utilizarse agua, pero s puede hacerse con un cido o con una disolucin que contenga otro catin. La velocidad a la que se desplazar la banda de iones M+ depende del pH del eluyente y del valor de Kd, de forma que dos iones con diferentes afinidades para la resina (diferentes valores de Kd) se desplazarn a diferente velocidad y podr tener lugar la separacin correspondiente. En solucin acuosa diluida, la afinidad de los cationes para la resina aumenta con la carga, y, a igualdad de carga, la afinidad es inversamente proporcional al radio del in hidratado, de forma que puede escribirse la siguiente secuencia: Na+(ac) < Ca2+(ac) < Al3+(ac) < Th4+(ac) Li+(ac) < Na+(ac) < K+(ac) Mg2+(ac) < Ca2+(ac) < Sr2+(ac) < Ba2+(ac) En el caso de las resinas aninicas, en soluciones acuosas diluidas la afinidad de los aniones depende de su grado de polarizacin. En general, los aniones polivalentes tienen mayor afinidad que los monovalentes y entre aniones de la misma carga, los de mayor tamao presentan mayor afinidad, Cl < CN < Br < NO3 < I << SO42 Aplicaciones. Dentro del campo de la qumica inorgnica es posible la separacin de iones metlicos ordinarios por cromatografa de intercambio inico. Asimismo, el desarrollo de mtodos de cambio inico para separaciones de lantnidos y otras especies fisionables fue fundamental para el desarrollo de los reactores nucleares. Por otra parte, la CCI se ha aplicado a una gran variedad de sistemas orgnicos y bioqumicos, incluyendo drogas y sus metabolitos, conservantes alimentarios, azcares y preparaciones farmacuticas, as como a la elucidacin de la estructura de protenas y cidos nucleicos. http://ocw.usal.es/ciencias-experimentales/analisis-aplicado-a-la-ingenieriaquimica/contenidos/course_files/Tema_12.pdf

Cromatografa de reparto de fase enlazada: Grficamente el empaquetamiento de la columna para ste tipo de cromatografas es de slice fundida. Lasuperficie de las partculas de slice se hidroliza fcilmente en medio HCl, dando lugar a grupos silanol:"SiOH, que son qumicamente muy reactivos.Estos grupos "SiOH pueden reaccionar con organoclorosilanos para dar lugar a organosilanos:[P1]R suelen ser hidrocarburos o radicales del tipo octil (C8H17) u octoclorocilo (c18H37). Otros gruposfuncionales orgnicos se pueden unir a la superficie de las partculas como son aminas alifticas, teres,nitrilos e hidrocarburos cromticos, disponiendo as de una amplia gama de fases estacionarias enlazadas dedistinta polaridad.Se distinguen dos tipos dentro de este tipo de cromatografa: de fase inversa y de fase normal. En la faseinversa el recubrimiento de las partculas tiene carcter apolar, mientras que en la de fase normal los gruposfuncionales unidos al empaquetamiento son de carcter polar, es decir, en la cromatografa lquida en faseinversa. La fase estacionaria es apolar y la fase mvil es polar. Por lo tanto, los primeros en eluir sern loscompuestos ms polares.Al aumentar la polaridad de la fase mvil aumentamos el tiempo de retencin. Del mismo modo, en lacromatografa en fase normal la fase estacionaria es polar y la fase mvil es apolar. Actualmente mas de las tres cuartas partes de las separaciones son realizadas por cromatografa lquida dereparto en fase inversa utilizando como empaquetamiento el octil o el octoclocilsilosano. En estosempaquetamientos los hidrocarburos de cadena lineal se alinean unos junto a otros, y en perpendicular a lasuperficie de la partcula, dando lugar a estructuras parecidas a una brocha. La longitud de estas cadenas va ainfluir en la resolucin, de forma que grficamente a mayor longitud de la cadena mayor es el tiempo deretencin y grficamente mejor es la resolucin. La longitud de estas cadenas se puede optimizar.Para la separacin de compuestos polares es ms adecuado utilizar fases estacionarias de cadena corta, y paralos apolares son mas adecuados las fases largas.La fase mvil utilizada es este tipo de cromatografa suele consistir en una disolucin acuosa con uncontenido variable de un disolvente, como puede ser el metanol, el acetonitrilo o el tetrahidrofurano.Grficamente debemos adaptar la polaridad de la fase estacionaria con la polaridad de la muestra y utilizaruna fase mvil que presenta una polaridad considerablemente diferente a la de la muestra.Las caractersticas de la fase mvil es un parmetro muy importante en este tipo de cromatografa y adems esfcil de modificar para conseguir mejores separaciones. La aplicacin de esta cromatografa es muy amplia.

http://www4.ujaen.es/~mjayora/docencia_archivos/Quimica%20analitica%20ambiental/Tema6.pdf

Bonded-phase chromatography (BPC) is an improved form of the now virtually extinct liquid-liquid chromatography. The problem of mutual dissolution of the two liquid phases, and hence progressive loss of stationary phase during service, is solved by chemically bonding the stationary liquid as a monomolecular layer to the surface of a solid support. The support is usually silica gel, a porous, amorphous, rigid solid form of silica. Surface areas are 200-800 m2/g and average pore diameters are 5-25 nm. BPC exists in two forms. In nonnal-phase BPC the mobile phase is less polar than the stationary phase. The stationary phase is a polar-bonded organic which brings about retention of moderately to strongly polar solutes. In reverse-phase BPC, the mobile phase is more polar than the stationary phase, which retains a great variety of solutes less polar than in the normal phase mode. Because of the cheapness and versatility of the often water-based mobile phase, the reverse-phase technique is now dominant amongst analytical and preparative LC methods. In larger scale separations, the superior and milder surface chemistry of reversephase BPC may need to be balanced against the even cheaper liquid-solid (adsorption) chromatography (LSC) packings. Ion-exchange chromatography (IEC) is carried out with packings that possess chargebearing functional groups. The most common retention mechanism is simple ionexchange of solute ions X and mobile phase ions Y with the charged groups R of the stationary phase:

Solute ions X that compete weakly with mobile phase eluent ions Y for ion exchanger sites R will be retained only slightly on the column. Solute ions that interact strongly with the ion-exchanger elute later in the chromatogram. The ion-exchangers used in LC consist either of an organic polymer with ionic functional groups, or silica coated with an organic polymer with ionic functional groups. The types of functional groups used are the same as described in Chapter 18. Since IEC can be carried out with an aqueous mobile phase near physiological conditions, it is an important technique in the purification of sensitive biomolecules such as proteins.

Coulson and Richardson's

CHEMICAL ENGINEERING
Particle Technology and Separation Processes
VOLUME 2 FIFTH EDITION

J. F. RICHARDSON
University of Wales Swansea
and

J. H. HARKER
University of Newcastle upon Tyne
with

J. R. BACKHURST
Univetsity of Newcastle upon Tyne
Butterworth-Heinemann 2002

p.1084-1087