Imunitatea este un mecanism de aprare al organismului care i confer protecie mpotriva mbolnvirii acionnd ca o barier n calea agentului patogen

(fie el bacterian, viral, parazitar sau din categoria toxinelor) astfel nct organismul nu va contacta afeciunea pe care o induce agentul patogen respectiv. Sistemul imunitar este reprezentat de totalitatea mecanismelor de aprare mpotriva microorganismelor patogene i a structurilor non-self.

Termeni specifici
Self = structuri proprii ale organismului, recunoscute de ctre sistemul imunitar reprezentate de totalitatea macromoleculelor structurale sau solubile care exist n celulele organismului. n mod normal, sistemul imunitar nu reacioneaz mpotriva structurilor self. Non-self = structuri strine n raport cu organismul respectiv, care nu sunt recunoscute de sistemul imunitar i asupra crora sistemul imunitar acioneaz prin mecanisme specifice de aprare. O funcie esenial a sistemului imunitar este capacitatea de difereniere dintre self(structuri proprii organismului) i non-self (structuri strine organismului) urmrinduse astfel ndeprtarea i neutralizarea structurilor non-self n scopul conservrii homeostaziei (echilibrului structural i funcional al organismului). Antigen = orice tip de substan de origine endogen sau exogen perceput ca structur non-self i capabil de declanarea rspunsului imun. Anticorp = macromolecul de natur proteic produs n organele limfoide cu proprietatea de a recunoate structura strin pentru organism, denumit antigen sau substan nonself i de a declana o reacie imunologic ce are ca scop neutralizarea, degradarea i ndeprtarea substanei antigenice din organism (epurarea antigenului).

Tipuri de imunitate
1. Imunitatea nnscut nespecific este reprezentat de totalitatea structurilor i mecanismelor cu rol protector (tegumente, mucoase, enzime secretate exocrin precum lizozimul din saliv, sucul gastric cu pH acid) precum i de temperatura corpului, concentraia mare a oxigenului n alveolele pulmonare (100 mmHg) care confer protecie mpotriva colonizrii tractului respirator cu organisme anaerobe, nivelul cortizolemiei care controleaz rspunsul inflamator i rezistena la infecii, macrofagele circulante, secreia de mucus i alte structuri. Acest tip de imunitate confer caracterul de barier mpotriva colonizrii tegumentelor, tractului respirator, digestiv, genital, urinar cu ageni patogeni nespecifici. Este o imunitate natural, cu care organismul respectiv se nate i este caracteristic tuturor indivizilor aparinnd respectivei specii. Mecanismele imunitii nnscute nespecifice intervin ptrunderii, supravieuirii i multiplicrii agentului patogen n organism. 2. Imunitatea nnscut specific este reprezentat de rezistena organismului fa de infecia cu anumii ageni patogeni specifici, rezisten cu care organismul respectiv se nate. 3. Imunitatea dobndit este tipul de imunitate care confer organismului o rezisten specific fa de un anumit agent microbian. Exist mai multe tipuri de imunitate

dobndit.

Tipuri de imunitate dobndit Rezistena contra unui agent patogen poate fi cptat activ, fiind numit imunitate dobndit natural n mod activ, organsimul cptnd rezisten fa de un anumit agent microbian dup ce a dezvoltat boala i s-a vindecat prin fabricarea de anticorpi antiagentul microbian respectiv, anticorpi care persist timp ndelungat prevenind o eventual rembolnvire. Un exemplu sunt bolile copilriei, care odat declanate i vindecate nu vor mai fi contactate ulterior din cauza faptului c organismul a dobndit imunitate natural prin fabricarea de anticorpi mpotriva agenilor microbieni respectivi (oreion, varicel, rubeol, rujeol etc.). Acest tip de imunitate poate funciona timp de luni, ani sau toat viaa, deoarece limfocitele devolt o memorie imunologic i la un nou contact cu acelai antigen vor reaciona avnd ca rezultat blocarea dezvoltrii infeciei.
Imunitatea dobndit natural n mod pasiv (imunitate natural pasiv) este cea dezvoltat prin pasajul transplacentar al anticorpilor de la mam la ft n timpul sarcinii, precum i de pasajul imunoglobulinei A secretorii de la mam la ft prin laptele matern n timpul alptrii. Imunitatea dobndit artificial n mod activ se capt prin vaccinare, caz n care organismul primete o doz mic de ageni microbieni inactivai care vor declana un rspuns imun finalizat prin sinteza de anticorpi specifici anti agentul patogen cu care s-a realizat vaccinarea. Imunitatea post-vaccin se realizeaz lent, n 2-3 sptmni i are o durat variabil, n funcie de tipul de vaccin care s-a folosit. Vaccinarea este o metod profilactic de provenire a anumitor infecii mai ales n anotimpurile specifice dezvoltrii afeciunilor respective precum grip sau n zone endemice pentru anumite afeciuni, cum este Romnia pentru tuberculoz. Imunitatea dobndit artificial n mod pasiv se numete i serumizare i const n administrarea unor preparate biologice numite seruri imune, care conin anticorpi specifici unei boli elaborai de un alt organism, anticorpi care vor fi transferai apoi organismului care urmeaz s fie imunizat cu serul respectiv prelevat de la organismul care a fabricat anticorpii. Acest tip de imunitate se instaleaz foarte rapid, n maximum 1-2 ore dar dureaz i foarte puin (30 de zile). Scopul folosirii serurilor imune este profilactic, la organismele cu risc mare de infectare sau terapeutic, la organismele bolnave.

Rspunsul imun
Este modalitatea prin care sistemul imunitar reacioneaz mpotriva agenilor patogeni. Implic obligatoriu stimularea i proliferarea limfocitelor antigen-specifice (celule ale sistemului imunitar care reacioneaz mpotriva unui antigen specific) i sinteza unor molecule prin care este recunoscut antigenul, reprezentate de anticorpi i/sau receptori membranari pentru antigen. O anumit macromolecul sau substan se numete antigenic dac declaneaz un rspuns imun i reacioneaz specific cu anticorpii sau receptorii membranari care apar n timpul rspunsului imun. Rspunsul imun are trei etape de desfurare: 1. Selecia clonal - momentul n care sunt selectate doar limfocitele antigen-specifice, singurele capabile s reacioneze mpotriva antigenului cu care se confrunt organismul la momentul respectiv. Populaia de limfocite capabil s recunoasc numai un anumit tip de antigen datorit receptorilor pentru antigenul respectiv pe care acestea i prezint pe

suprafaa membranei celulare se numete clon limfocitar. 2. Activare clonal - este reprezentat de activarea metabolic a clonei limfocitare selectate n prima etap. 3. Expansiunea clonal - este etapa n care clona de limfocite selectate i activate metabolic se multiplic cu creterea numrului de limfocite antigen-specifice.

Antigenul
Imunogenitatea este capacitatea antigenului de a declana un rspuns imun, aceast proprietate a antigenului mai fiind denumit i caracter imunogen. Specificitatea este a doua proprietate a antigenului i reprezint capacitatea acestuia de a reaciona specific numai cu anticorpii solubili sau cu receptorii membranari care apar ca urmare a stimulrii sistemului imun de ctre substana antigenic. Antigenele sunt de dou tipuri: antigene complete sau imunogene i antigene incomplete sau haptene. Imunogenele sunt antigenele care prezint ambele proprieti specifice unui antigen: imunogenitatea i specificitatea. Se mpart n timodependente i timoindependente. - Antigenele complete timodependente sunt capabile s declaneze fie rspuns imun celular, fie rspuns imun umoral, ambele tipuri de rspuns fiind condiionate de apariia limfocitelor T helper. Majoritatea antigenelor sunt de natur proteic i aparin acestei categorii. - Antigenele complete timoindependente sunt acele antigene care declaneaz numai rspuns imun umoral deoarece au efect stimulator doar asupra limfocitelor B i nu asupra limfocitelor T helper. Limfocitele B stimulate de antigen vor produce ulterior anticorpii care vor distruge antigenul respectiv. Haptenele au o greutate molecular mic sau foarte mic i prezint doar specificitate, nu i imunogenicitate. Ele singure nu vor declana niciodat un rspuns imun. Pentru ca o hapten s declaneze rspunsul imun este necesar ca ea s se cupleze cu o macromolecul complex i cu imunogenicitate pronunat, care se numete purttor (carrier). Un antigen complet este alctuit dintr-o parte haptenic ce confer specificitatea antigenului. Aceast parte haptenic se numete determinant antigenic. A doua component a antigenului complet este partea carrier care se cupleaz cu haptena i determin imunogenicitatea antigenului.

Determinanii antigenici Din punct de vedere structural, determinanii antigenici sunt de dou tipuri: liniari (secveniali) i conformaionali. Determinanii antigenici liniari sunt alctuii din lanuri scurte de 8 pn la 12 aminoacizi dispui succesiv pe o singur caten proteic, acetia fiind recunoscui doar de limfocitele T, dup ce antigenele au fost prelucrate de ctre celulele prezentatoare de antigen. Determinanii antigenici conformaionali sunt alctuii din grupuri de 8 pn la 12 aminoacizi care sunt dispui anarhic, aparinnd fie unor regiuni diferite din catena proteic sau unor catene diferite aflate n apropiere i legate ntre ele prin puni de sulf sau prin legturi necovalente. Sunt recunoscui numai de ctre limfocitele B i de ctre anticorpii produi de limfocitele B. Din punct de vedere conformaional, determinanii antigenici pot fi de tip efector sau e tip imunoreglator. Determinanii antigenici de tip efector pot fi conformaionali fiind recunoscui doar de

ctre limfocitele B, declannd rspunsul imun umoral sau secveniali, acetia fiind recunoscui doar de limfocitele T citotoxice care determin rspuns imun celular. Determinanii antigenici de tip imunoreglator controleaz intensitatea rspunsului imun declanat i sunt recunoscui fie de ctre limfocitele T helper care amplific rspunsul imun, fie de limfocitele T supresoare care limiteaz sau opresc rspunsul imun. Astfel, pe lng imunogenitate i specificitate se mai descrie o a treia proprietate a antigenului care este reprezentat de imunomodulare, proprietate prin care antigenul devine responsabil de decizia asupra tipului de rspuns imun pe care l produce, umoral sau celular precum i de intensitatea rspunsului imun produs. Limfocitele care recunosc determinanii antigenici efectori sunt foarte variate i diverse, existnd zeci de milioane de clone limfocitare diferite care recunosc tot attea tipuri de anticorpi. Pentru a induce rspunsul imun, antigenul trebuie s fie obligatoriu o substan non-self sau strin organismului. Cu ct structura antigenului este mai diferit, cu att mai repede va fi recunoscut de ctre celulele sistemului imun. Cel mai bine sunt recunoscute antigenele care provin din organisme foarte ndeprtate de specia uman din punct de vedere filogenetic. Cu ct antigenul are o structur mai complex, cu att va fi mai imunogen i va fi mai rapid preluat de ctre celulele prezentatoare de antigen care faciliteaz recunoaterea antigenului de ctre limfocitele antigen-specifice. Antigenul intrat n organism va interaciona fie cu receptorii antigenici solubili, care recunosc mai ales antigenele solubile i care vor forma complexe imune cu antigenul cu care se cupleaz, complese care vor fi distruse ulterior de macrofagele din sistemul reticuloendotelial, fie cu receptorii antigenici membranari situai doar n organele limfoide secundare reprezentate de ganglionii limfatici i splin, cuplare n urma crora se vor activa limfocitele antigen-specifice i se va declana fie rspuns imun umoral, fie rspuns imun celular. Marea majoritate a antigenelor sunt exogene fiind bacteriene, virale, parazitare, alergeni (polen, praf, venin de albin etc.), substane toxice sau endogene precum autoantigenele responsabile de declanarea unor boli autoimune datorate apariei unui rspuns imun aberant al organismului mpotriva propriilor structuri (structurile self) sau antigenele tumorale care determin diverse tipuri de cancere.

Traseul antigenului n organism Antigenul care a strbtut toate barierele i a trecut de toate mecanismele naturale cu rol protector antiinfecios ale organismului, va ajunge n organele limfoide secundare reprezentate n principal de splin i ganglioni limfatici. Antigenele timoindependente ajunse ntr-una dintre aceste dou locaii vor activa n mod direct limfocitele B cu declanarea secreiei de anticorpi specifici i activarea rspunsului imun umoral.
Antigenele timodependente sunt captate de ctre celulele prezentatoare de antigen cantonate la nivelul diferitelor esuturi. Celulele prezentatoare de antigen vor transporta apoi antigenul pe cale limfatic spre organele limfoide secundare i vor fi prezentate limfocitelor B sau T sub form de epitopi (fragmente ale determinanilor antigenici). Astfel se va declana fie rspunsul imun umoral prin activarea limfocitelor B, fie rspunsul imun celular prin activarea limfocitelor T, activare care se face n funcie de natura antigenului. Situsul combinativ pentru antigen este acel receptor de pe membrana limfocitelor care recunoate prin complementaritate numai o anumit structur antigenic (epitop). Caracteristicile principale ale situsului combinativ pentru antigen sunt urmtoarele: - Structura unic, nerepetabil pe toate limfocitele aparinnd aceleiai clone limfocitare selectate clonal. O clon limfocitar conine cteva sute de limfocite.

- Situsul combinativ pentru antigen al anticorpilor este identic structural cu cel al limfocitelor care au produs aceti anticorpi. - Are o structur constituit din dou lanuri polipeptidice asociate ntre ele dar diferite din punct de vedere structural. - Sinteza lanurilor polipeptidice din structura situsului combinativ pentru antigen, att ale situsului situat pe limfocite, ct i ale situsului situat pe anticorpi se face prinrecombinare genic, acest lucru asigurnd diversitatea i variabilitatea extrem de mare a receptorilor care vor avea structuri variate fiind capabili s recunoasc tipuri diverse de antigene. Trei tipuri de gene sunt responsabile de sinteza lanurilor unui situs combinativ pentru antigen, acestea suferind procesul de recombinare genic. Sunt gene de variabilitate, gene de diversitate i gene de jonciune. Specificitatea antigenelor este ntotdeauna absolut i este de asemenea determinat genetic.

Organele sistemului imunitar

Se mai numesc i organe limfoide sau sistem limfoid. Sistemul limfoid este definit ca fiind suportul imunitii, fiind alctuit din vase limfatice, organe limfoide, esuturi limfoide i celule izolate, toate avnd potenial imunitar. Organele limfoide sunt reprezentate de aglomerri specifice de celule delimitate de o capsul de esut conjunctiv, n aceste organe aflndu-se sediul n care celulele sistemului imunitar se dezvolt i se matureaz sau sediul n care ele i ndeplinesc funciile imune specifice. estuturile limfoide nu sunt delimitate de o capsul de esut conjunctiv, ele sunt grupri de celule dispersate inegal pe mucoasa tractului respirator, digestiv sau urogenital. Organele limfoide sunt de dou tipuri: 1. Organe limfoide primare 2. Organe limfoide secundare

Organele limfoide primare Sunt sediul n care se genereaz limfocitele. La om sunt n numr de trei: timusul, mduva osoas i ficatul embrionar (este responsabil de sinteza de limfocite numai n timpul vieii intrauterine).
Timusul Este un organ limfoid primar situat n mediastinul anterior (partea anterioar a toracelui), retrosternal. Este acoperit de o capsul de esut conjunctiv care se continu n interiorul organului sub form de travee conjunctive care l structureaz n lobi i lobuli timici. Unitatea funcional a organului este reprezentat de lobulul timic, la nivelul cruia se delimiteaz dou zone distincte: a. Zona cortical sau periferic alctuite din celule limfoide tinere sau timocite care provin din celulele stem b. Zona medular sau central srac n limfocite i bogat n celule epiteliale care reprezint spaiul n care limfocitele T se matureaz. Celulele epiteliale care alctuiesc aceast zon au pe suprafaa lor antigene codificate de ctre sistemul major de histocompatibilitate al organismului. Corpusculii Hassal sunt celule timice specifice situate n zona medular, care au att funcie secretorie ct i funcie de fagocitoz. Mitoza este foarte ridicat la nivelul timusului, astfel c populaia de timocite se nlocuiete total odat la 4-5 zile. Precursorii limfocitelor ajung n timus i se multiplic n zona cortical a lobulului timic urmnd s se matureze apoi n zona medular. Dup ce limfocitele T se matureaz, acestea ptrund n vasele sangvine ale medularei timice i ajung n circulaia sistemic

ndreptndu-se ctre zonele timodependente ale organelor limfoide secundare. Timusul involueaz la pubertate, odat cu nceperea secreiei de hormoni sexuali androgeni i estrogeni i cu creterea nivelului de corticosteroizi din suprarenal. ns involuia nu este complet, ntruct rmn insule de celule timice funcionale toat viaa, insule capabile s genereze noi clone limfocitare de fiecare dat cnd este nevoie. Mduva osoas La nivelul ei exist o cantitate foarte mare de precursori ai limfocitelor B i de plasmocite, capabile s sintetizeze imunoglobuline sau anticorpi. Nu exist limfocite T mature n mduva osoas, deoarece principala funcie a acesteia este s sintetizeze precursori ai celulelor sangvine fiind un organ hematopoietic. esutul hematopoietic activ este cuprins ntr-o reea de vase sanguine i este responsabil de sinteza limfocitelor T imature i sinteza limfocitelor B. Limfocitele T imature nu rmn niciodat n mduv, ele migreaz n timus, fiind precursoare ale limfocitelor T mature. Limfocitele B rmn n mduv unde se i matureaz. La vrsta a treia, funcia de hematopoiez a mduvei hematogene este mult redus.

Organele limfoide secundare Sunt denumite i organe limfoide periferice, fiind reprezentate de splin, ganglioni limfatici i formaiuni limfoide asociate sistemului digestiv, respirator i aparatului urogenital. Aceste formaiuni limfoide asociate se mai numesc i MALT (Mucosa Associated Lymphoid Tissue). Ele reprezint sediul n care se desfoar rspunsul imun, fie el de tip umoral sau celular, fiind populate cu precursorii limfocitari produi n organele limfoide primare. Dup regresia organelor limfoide primare, sinteza de precursori ai limfocitelor mature se va muta n organele limfoide secundare. Pe lng limfocite, aceste organe conin i alte celule precum granulocite (leucocite cu nucleu granular reprezentate de neutrofile, eozinofile i bazofile) plasmocite i macrofage. Exist dou tipuri de limfocite, B i T, n cadrul organelor limfoide secundare delimitnduse arii specifice fiecrui tip limfocitar, ariile rezervate limfocitelor T fiind numite arii Tdependente, iar ariile rezervate limfocitelor B fiind numite arii B-dependente. ntre cele dou arii nu exist delimitare specific, organele limfoide fiind traversate de numeroase vase sanguine care permit schimburile de lichide i recircularea limfocitelor. Dezvoltarea complet a organelor limfoide secundare are loc dup natere, sub influena unor stimului antigenici, stimuli care determin i proliferarea i diferenierea limfocitelor n limfocite efectoare i limfocite de memorie.
Ganglionii limfatici Se mai numesc i limfonoduli si sunt plasai strategic, n anumite zone ale organismului, de-a lungul vaselor limfatice. Filtreaz lichidul limfatic ndeprtnd antigenele coninute de acesta. Fiecare ganglion este delimitat de o capsul de esut conjunctiv din care pornesc trabeculele care reprezint suportul celulelor limfoide ale ganglionului, mpreun cu reeaua format din fibre de reticulin. Ganglionul este delimitat n trei zone diferite i anume: - Zona cortical sau zona extern care conine limfocite grupate n foliculi limfoizi. Aceti foliculi pot fi primari i conin limfocite aflate n stare de repaus sau secundari care conin limfocite care au fost stimulate antigenic i activate. n centrul fiecrui folicul limfoid se afl zona germinativ sau centrul germinativ cu limfocite B aflate n proliferare. Zona cortical a ganglionilor limfatici este o arie B dependent. Dup ce stimulul antigenic nceteaz, foliculii limfoizi secundari se transform n folicului primari. Foliculii limfoizi conin i macrofage i plasmocite. - Zona paracortical este o arie T dependent imprecis delimitat, care este bogat vascularizat. - Zona medular reprezint centrul ganglionului i este definit ca fiind o arie B

dependent deoarece aici predomin limfocitele B. Mai conine i macrofage, plasmocite i limfocite T. n ganglionii limfatici celulele limfoide sunt dispuse n iruri celulare regulate formnd cordoane printre care se rsfir mici vase limfatice numite sinusuri medulare care colecteaz limfa din ganglion i se vars apoi n vasele limfatice eferente care prsesc ganglionul respectiv. Macrofagele pot prelua i prelucra orice antigen care ajunge la ganglion deoarece circulaia limfatic este foarte lent la acest nivel. Funciile ganglionilor limfatici: - Stocheaz numeroase celule limfoide reprezentnd i locul n care acestea prolifereaz - Conin numeroase macrofage care distrug antigenele fr a distruge ns i epitopii care sunt prezentai limfocitelor antigen-specifice - La acest nivel se realizeaz cele mai multe dintre cooperrile celulare ale sistemului imunitar - Ganglionii se modific structural n momentul n care densitatea de antigene depete nivelul de prelucrare al macrofagelor. Prin urmare ganglionii se mresc de volum, i vor crete temperatura local i vor deveni dureroi i/sau adereni la planurile superficiale i/sau profunde. Dup eliminarea infeciei sau dup ce rspunsul imun se finalizeaz, limfonodulii revin la dimensiunile iniiale. Mrirea de volum a ganglionilor limfatici se datoreaz n principal substanelor chimice secretate de limfocite care au efect vasodilatator i de inducere a inflamaiei ca mecanism de protecie mpotriva infeciei. Splina Reprezint organul limfoid care filtreaz antigenele din sistemul sangvin, aa cum ganglionii limfatici filtreaz antigenele din sistemul limfatic. Aproape toate antigenele i toate substanele non-self din snge sunt reinute la nivelul splinei, acest organ fiind n acelai timp un centru important n care se desfoar rspunsul imun. Este acoperit de o capsul conjunctiv care trimite trabecule n interiorul organului. Este, ca i ganglionii limfatici delimitat n trei poriuni diferite: - Pulpa alb alctuit din celule limfoide dispuse sub form de manon n jurul unei arteriole centrale. Astfel se constituie tecile limfoide periarteriolare mprite n dou zone i anume zona intern alctuit din macrofage i celule T fiind o arie T dependent i zona extern bogat n limfocite B fiind o arie Bdependent. n aria B-dependent, limfocitele B dispuse sub form de conglomerate formeaz foliculii splenici saucorpusculii Malpighi. - Pulpa roie este cea mai important parte a splinei alctuit din sinusuri venoase i cordoane de celule splenice numite i cordoane Bilroth. Celulele care alctuiesc pulpa roie sunt macrofagele, limfocitele B, limfocitele T i plasmocitele ns predomin net limfocitele B, prin urmare aceasta este o arie B dependent. Pulpa alb este separat de pulpa roie printr-o zon marginal care este o arie mixt, coninnd n proporii aproximativ egale limfocite B i limfocite T i este foarte bine vascularizat. Aici sunt blocate cele mai multe antigene provenite din snge. Splina este un sediu important de sintez a anticorpilor deoarece n ariile B dependente se afl foarte multe plasmocite care produc imunoglobuline sau anticorpi. Splina este sediul principal n care se reine i se distruge non-selful din circulaia sangvin, principala responsabilitate n acest sens cznd n sarcina macrofagelor care sunt att celule prezentatoare de antigen care prezint epitopii determinanilor antigenici ctre limfocitele antigen-specifice, ct i celule responsabile de fagocitoza i distrugerea antigenului. Sistemul limfoid asociat mucoaselor (MALT) Structurile cele mai expuse i mai vulnerabile la contactul cu antigenii reprezentai n principal de microorganisme sunt poriunile organismului aflate n comunicare cu mediul

extern i anume tractul respirator, tractul digestiv i tractul urogenital. Sistemul limfoid asociat mucoaselor este responsabil de blocarea antigenelor exogene care ncearc s ptrund n mediul intern. Acest sistem limfoid nu trebuie ns s distrug flora microbian saprofit care colonizeaz n mod normal aceste mucoase, aceast flor ndeplinind numeroase funcii biologice. Astfel se formeaz arii T dependente sau B dependente la nivelul mucoaselor, arii ce constituie aglomerri de limfocite T sau B capabile s distrug antigenele care intr n contact cu mucoasa. n funcie de localizare, sistemul limfoid asociat mucoaselor se mparte n: Sistemul limfoid asociat tubului digestiv sau GALT Sistemul limfoid asociat tractului respirator sau BALT Sistemul limfoid asociat tractului urogenital Sistemul GALT GALT sau Gut Associated Lymphoid Tissue reprezint o aglomerare de limfocite T i B dispuse pe mucoasa tubului digestiv de la cavitatea bucal pn la rect, alturi de esuturi limfoide sistematizate reprezentate de amigdale i plcile Peyer. Amigdalele Sunt situate la nivelul faringelui n fosa tonsilar i constituie inelul limfatic al lui Valdeyer. Sunt alctuite din folicului limfoizi n care predomin limfocitele B i din zone dispersate n interiorul organului alctuite din limfocite T i macrofage. De asemena conin i foarte multe plasmocite capabile s secrete anticorpi, amigdalele reprezentnd prima poart de intrare pentru microbi la nivelul tractului digestiv. Se recomand extirparea chirurgical a lor n momentul n care macrofagele se epuizeaz energetic din cauza infeciilor repetate. Plcile Peyer Sunt folicului limfoizi dispui pe ntreaga suprafa a intestinului, concentrate mai mult n zona lui distal. Sunt vizibile macroscopic ca zon de culoare alb pe suprafaa mucoasei, fiind caracterizate de prezena limfocitelor i absena fibrelor musculare. Au dimensiuni ntre 0, 3 i 0, 5 milimetri i form circular sau alungit. Sub epiteliul plcii Peyer exist esut limfoid germinativ n care predomin limfocitele B. n spaiile dintre foliculii limfatici exist arii T dependente cu predominena limfocitelor T. n placa Peyer se sintetizeaz cu precdere molecule de Imunoglobulin A, un anticorp care joac un rol important n reglarea florei intestinale saprofite. n aceste zone nu exist macrofage, deoarece pH-ul nu este potrivit pentru proliferaea lor. Sistemul BALT BALT sau Bronchus Associated Lymphoid Tissue conine structurile limfoide situate sub mucoasele tractului respirator sau n parenchimul pulmonar, care au rol de barare al antigenelor externe. Foliculuii limfoizi sunt aglomerai n principal pe traiectul bronhiilor mari, pe traiectul bronhiolei terminale, la nivelul septurilor interlobulare i la nivelul pleurei. Exist asemnri de structur cu plcile Peyer. Cu excepia limfocitelor, la acest nivel se mai gsesc i macrofage alveolare, interstiiale i pleurale cu o activitate de fagocitoz intens. n bronhii se gsete de asemenea un numr important de neutrofile care ns nu exist n alveole, alveolele coninnd doar macrofage specifice, alveolare.

Compartimentele sistemului imun

Organele limfoide primare i secundare sunt dispuse n compartimente astfel: Compartimentul central este alctuit din mduva hematogen care este locul de producie al limfocitelor T i de producie i maturare al limfocitelor B i din timus unde se matureaz limfocitele T.

Compartimetul periferic este alctuit din esutul limfoid capsulat i esutul limfoid necapsulat. esutul limfoid capsulat este reprezentat de organele limfoide secundare i anume splina i ganglionii limfatici unde se deruleaz i cea mai mare parte din rspunsul imun. esutul limfoid necapsulat este reprezentat de MALT, localizat la nivelul epiteliului digestiv, respirator, urogenital i cutanat. Ariile timodependente ale organelor limfoide secundare capsulate care sunt populate de limfocite T sunt reprezentate de paracortexul ganglionar i stratul limfoid periarteriolar intern al splinei. Ariile bursodependente (timoindependente), populate de limfocite B din organele limfoide secundare sunt reprezentate de cortexul ganglionar i stratul limfoid periarteriolar extern al splinei.

Reacia autoimun
Reacia autoimun este un rspuns imun al organismului fa de structurile self. n cazul reaciei autoimune, organismul i atac propriile structuri prin auto-anticorpi. ...

Toxinele
Toxinele sunt substane antigenice periculoase produse de ctre organismele vii. Structura lor este format din lanuri de aminoacizi, fiind o structur organic proteic ce le confer caracter antigenic de non-self....

Aprarea mpotriva viruilor

mpotriva infeciilor viruilor au aprut numeroase vaccinuri ns, cu toate c avem tratamente eficiente, infeciile virale constituie nc un pericol real ntruct gradul de morbiditate i mortalitate este destul de ridicat....

Aprarea mpotriva bacteriilor

Aprarea organismului fa de infeciile bacteriene se realizeaz prin nsumarea capacitii de pstrare a homeostaziei organismului, rezistenei fa de aderare a germenilor patogeni la esuturi i capacitatea germenilor de colonizare la distan i multiplicare n organism....

Macrofagele
Macrofagele tisulare sunt iniial monocite sangvine care att timp ct circul n snge sunt imature i au capaciti foarte limitate de barare a aciunii antigenelor. Cnd monocitele ajung n esuturi ele i mresc volumul de 2 pn la 5 ori...

Celulele NK
Celula NK sau natural killer este cunoscut ca fiind ucigaul nnscut al sistemului imun. Acest tip de celule provie din celula stem limfoid a mduvei osoase care genereaz celule precursoare ale limfocitelor B, T i ale celulelor Natural Killer. ...

PMN - Polimorfonucleare
ase tipuri de leucocite sunt prezente n snge n mod normal i anume: polimorfonuclearele neutrofile, polimorfonuclearele eozinofile, polimorfonuclearele bazofile, monocitele, limfocitele i plasmocitele derivate din limfocitele B....

Citokinele
Citokine este un termen generic care grupeaz o serie de glicoproteine i proteine cu rol de mediatori n comunicarea intercelular. Ele sunt secretate de celulele activate dup stimulare i se leag de receptori de membran specifici...

Reacia imun
Reacia imun este definita ca fiind un ansamblu de fenomene care se desfoar n cascad, ce apar ca urmare a interaciunii specifice a sistemului imunitar cu antigenul.

Aceast interaciune determin activarea, proliferarea i diferenierea celulelor imunocompetente cu apariia celulelor efectoare i a celulelor cu memorie....

Sistemul complement
Sistemul complement este un sistem enzimatic multifuncional alctuit din proteine i glicoproteine plasmatice (aproximativ 20- 30 de componente) i are un rol esenial n aprarea organismului....

Anticorpii
Anticorpii reprezint proteinele produse de ctre sistemul imun n momentul n care organismul se confrunt cu prezena unui antigen. Anticorpii sunt reprezentai de imunoglobuline - proteine gamaglobulinice din plasm, lichide extracelulare i secreiile organismului....

Limfocitele
Limfocitele sunt celule care aparin familiei leucocitelor i au funcii de baz n cadrul sistemului imunitar, fiind implicate n rspunsul imun umoral i celular. Exist dou clase de limfocite, limfocitele T i limfocitele B. ...

Aprarea mpotriva bacteriilor

Bacteriile care cauzeaz boli infecioase se numesc bacterii patogene, ntruct sunt capabile s colonizeze anumite regiuni structurale ale gazdei i s induc un proces infecios prin invazia i penetrarea barierelor anatomice de aprare i prin ptrunderea ulterioar n circulaia limfatic i vascular producnd septicemia. Gravitatea infeciei depinde de gradul de patogenie i virulen al agentului patogen respectiv. Patogenia i virulena reprezint markeri de agresivitate ai bacteriei care a colonizat gazda.

Agresivitatea bacteriilor
Patogenitatea determin capacitaea unei bacterii de a genera fenomene inflamatorii, modificri locale i generale i incapacitate funcional a segmentului colonizat. Este o caracteristic determinat genetic. Virulena este un atribut care determin gradul diferit de patogenitate al diferitelor tulpini bacteriene. Depinde de condiiile n care bacteria respectiv poate tri i se poate multiplica. Cuantificarea virulenei se face prin determinarea numrului de bacterii necesare pentru a omor 50% dintr-un grup de animale. Rezultatul se exprim printr-un cuantificator denumit doza letal 50 (DL50). Patogenitatea i virulena sunt determinate de anumii factori care sunt: Multiplicarea i invazivitatea germenilor - Multiplicarea i elaborarea de toxine de ctre germenii toxigeni (capabili s fabrice toxine microbiene) Multiplicarea germenilor ncepe la poarta de intrare i apoi se extinde cu invadarea organismului de ctre germeni prin constituirea abceselor i propagarea din aproape n aproape n pat de ulei cu distrugerea esuturilor locale. n afar de capacitatea de a se multiplica local, germenele poate produce infecii la distan prin invazia n circulaia sistemic (bacteriemie). Bacteriemia se produce numai dac germenele rezist

mecanismelor de aprare a gazdei i fagocitozei. De asemenea, el trebuie s fie capabil s adere la celulele mucoaselor i s extravazeze din esuturi n capilarele sangvine prin traversarea peretelui endotelial. Invazivitatea este o caracteristic derivat din capacitatea germenilor de a se multiplica i reprezint capacitatea germenilor de a invada i distruge esuturile n care se multiplic excesiv, cu ptrunderea lor n circulaia sistemic limfatic sau sangvin. Factorii morfologici de structur care permit multiplicarea i invazivitatea sunt: - Pilii sau fimbriile care sunt pseudopode cu ajutorul crora se realizeaz aderarea bacteriei la mucoase i vase de snge - Lecitinele sunt proteine situate pe peretele bacterian care au tropism pentru carbohidrai, carbohidraii reprezentnd sursa de energie bacterian - Liganzii sunt molecule cu ajutorul crora bacteriile realizeaz legturi cu substratul (cu esutul n care se dezvolt) - Glicocalixul - este o component structural de la suprafaa peretelui celulei bacteriene - Capsula bacterian se opune fagocitozei i este implicat n aderarea la esuturi Bacteriile sunt capabile s produc i anumite enzime i factori care mpiedic aciunea rspunsului imun asupra lor: - Producia de catalaz, glutation peroxidaz i superoxid dismutaz care inhib toxicitatea radicalilor activi de oxigen asupra germenelui (Stafilococ auriu) - Producerea de factori care confer rezisten la enzimele lizozomale de liz (Salmonella, Mycobacterium) - Producerea de enzime litice precum colagenaza, hialuronidaza i fibrinolizina produse de streptococ i stafilococ, lecitinaza i fosfolipaza produse de Clostridium Perfigens, neuraminidazele produse de Vibrio Cholerae i Shigella, hemolizinele produse de streptococ, stafilococ i unele clostridii - Substanele care inhib aciunea anticorpilor i citokinelor sunt: IgA proteaza produse de gonococ, meningococ i Hemophillus Influenzae, Protenia A stafilococic care inhib opsonizarea, endotoxinele care cresc sinteza de interleukine i accentueaz inflamaia etc.

Toxinele bacteriene Dup multiplicarea germenilor la poarta de intrare se elibereaz exotoxinele bacteriene care altereaz celulele i distrug esuturile nu numai local, ci i la distan prin inhibarea metabolismului celulei eucariote i prin apariia incapacitii funcionale a esutului colonizat bacterian. Exotoxinele Sunt n general elaborate de germenii gram pozitivi (bacilul difteric, streptococul beta hemolitic de grup A, clostridium botulinum) i de ctre bacilii gram negativi prin mecanism cromozomial (Vibrio Cholerae, Bordetella pertussis, Shigella, pseudomonas aeruginosa). Au structur proteic i afinitatea lor pentru esuturi este diferit n funcie de specia care le-a produs. De exemplu, exotoxina eliberat de bacilul difteric are tropism pentru miocard, rinichi i sistemul nervos central. Manifestrile clinice care succed afectarea esuturilor de ctre toxin nu apar imediat, ci dup o anumit perioad de laten, necesar fixrii toxinei de ctre celulele esutului int.
Antidoturile pentru exotoxine sunt eficace numai cnd toxina este liber n circulaia sistemic, deoarece numai atunci toxina putnd fi neutralizat de ctre anticorpii antitoxin ce apar ca urmare a administrrii serurilor imune.

Toxinele au structur proteic i n momentul cnd ajung n circulaie determin apariia de anticorpi naturali specifici numii anticorpi anti-toxine. Prin prelevarea acestor antitoxine se prepar antidoturi care conin n special seruri extrase de la cal care vor fi utilizate pentru neutralizarea toxinei i n tratament. Anti-toxinele preparate in vitro i-au gsit utilitatea practic n tratamentul difteriei, tetanosului sau botulismului, fiind capable s stimuleze rspunsul imun al organismului infectat.

Endotoxinele Sunt secretate de germenii gram negativi i se pot evidenia la nivelul membranei lor externe, ntruct dup excreie sunt incluse n peretele bacterian. Ct timp germenii sunt viabili, aceste toxine nu sunt periculoase, ele eliberndu-se dup distrugerea i moartea germenilor care le-au produs. Structura lor este lipopolizaharidic, spre deosebire de exotoxine care au structur proteic. Toxicitatea lor este mai mic dect a exotoxinelor dar pot aciona la mai multe nivele i deregleaz homeostazia organismului cu producerea de febr, scderea numrului leucocitelor, hipotensiune arterial, sindrom de coagulare intravascular diseminat i hiperpermeabilitate vascular. Sunt implicate i n apariia ocului endotoxic care apare cnd numrul germenilor distrui de ctre reaciile imunitare este foarte mare i astfel se elibereaz o cantitate mare de toxin, cantitatea de toxin eliberat fiind proporional cu numrul de germeni distrui. Puterea lor antigenic i imunogenic este mai mic dect puterea endotoxinelor.

Mecanismele de aprare
Aprarea organismului fa de infeciile bacteriene se realizeaz prin nsumarea capacitii de pstrare a homeostaziei organismului, rezistenei fa de aderare a germenilor patogeni la esuturi i capacitatea germenilor de colonizare la distan i multiplicare n organism. Aprarea antiinfecioas este realizat de cre urmtoarele structuri: 1. Bariera anatomic reprezentat de mucoase i esutul cutanat care mpiedic ptrunderea germenilor n sistem prin integritatea sa anatomic, prezena de imunoglobuline A secretorii pe suprafaa mucoaselor, existena la nivelul ei a anumitor enzime precum lactoferina, alfa 1 antitripsina i lizozimul, pH-ul acid al sucului gastric i prezena florei saprofite normale al crei microhabitat este nlocuit de ctre germenii patogeni. 2. Barierele reprezentate de organe precum bariera hemato-encefalic i bariera fetoplacentar 3. Ganglionii limfatici care ntrerup traseul vaselor limfatice i care primesc antigenele transportate de circulaia limfatic. n momentul n care antigenele ajung intraganglionar ele sunt prezentate limfocitelor aflate la acel nivel i se declaneaz local rspunsul imun. 4. Sistemul fagocitar microcito-macrofagic i sistemul fagocitar polimorfonuclear cu celule care au un grad ridicat de citotoxicitate i capacitate mare de fagocitare a germenilor cu distrugerea lor. 5. Sistemul complement care pe de o parte realizeaz procesul de opsonizare prin componenta C3b care sensibilizeaz antigenul pentru a facilita fagocitoza i pe de alt parte cascada reprezentat de cile sistemului complement, clasic i alternativ activeaz complexul de atac al membranelor cu perforarea membranelor celulare i liza lor osmotic. 6. Citokinele care sunt reprezentate de interferoni (foarte activi n aprarea antiviral), interleukine, factorii de stimulare ai coloniilor granulocitare, factorul de necroz tumoral i factorii de cretere. 7. Sistemul imun umoral i celular

8. Complexul organismului

major

de histocompatibilitate, respectiv i

imunitatea factorii

natural, nutriia endocrini.

Imunogenicitatea bacteriilor
Imunogenicitatea este capacitatea unei bacterii de a induce fie rspuns imun umoral, fie rspuns imun celular. Ea depinde de urmtorii factori: - Structura chimic a bacteriei implicate trebuie s fie ct mai diferit fa de structurile celulelor proprii ale organismului. Modificarea structurii aminoacizilor din antigen va fi recunoscut instantaneu i va conduce la un rspuns imun din cauza faptului c sunt sesizate diferenele majore dintre structura antigenului i structura selfului. Un rspuns imun va fi cu att mai puternic cu ct structura antigenic provine de la o specie mai ndeprtat din punct de vedere filogenetic. - Structura antigenului trebuie s fie stabil, rigid i s se menin constant n timp. - Antigenul trebuie s persiste suficient de mult timp n organism pentru c dac este rapid ndeprtat nu va duce la apariia unui rspuns imun. De exemplu, vaccinurile care au n componena lor structuri bacteriene inactive sau atenuate i sunt utilizate pentru prevenirea anumitor boli nu vor duce la realizarea unui rspuns imun amplu deoarece sunt epurate rapid din organism. - Greutatea molecular a antigenului trebuie s fie ct mai mare, de preferin s depeasc 5 kiloDaltoni. - Antigenul trebuie s aib o structur ct mai complex din punct de vedere chimic. Din acest punct de vedere proteinele sunt cele mai imunogene antigene, urmate de lipide i acizi nucleici. - Doza de antigen trebuie s fie ct mai mare pentru a declana o reacie imun.

Proprietile rspunsului imun

Un antigen ptruns pentru prima oar n organism este ntmpinat de un numr mic de limfocite B sau T specifice i capabile s recunoasc epitopii antigenului respectiv. De asemenea, nu exist la momentul respectiv nicio celul capabil s elimine antigenul, prin urmare se va declana o cascad de reacii care fie vor determina apariia limfocitelor T citotoxice care secret citokine i se va produce rspunsul imun celular, fie apariia plasmocitelor derivate din limfocitele B care secret anticorpi i se va produce rspunsul imun umoral. Rspunsul imun reprezint multitudinea de reacii care au loc dup ce un antigen a intrat n organism. Reaciile constau n activarea limfocitelor, eliberarea de diverse molecule, multiplicarea celulelor specifice imunitii finalizate cu producerea de limfocite T citotoxice sau de anticorpi specifici. Specificitatea este principala caracteristic att a imunitii n general ct i a imunitii anti-bacteriene n special. Antigenul va recunoate anticorpul pe principiul clasic al potrivirii cheii ntr-o broasc. O alt caracteristic foarte important este capacitatea de discriminare ntre self (structurile proprii organismului) i non-self (structurile antigenice). Prin urmare rspunsul imun are capacitatea de a reaciona numai mpotriva moleculelor care ndeplinesc condiiile de imunogenicitate. Rspunsul imun mediat prin anticorpi este rspuns imun umoral, iar cel mediat prin celulele cu capacitate citotoxic este rspunsul imun celular. Ambele tipuri de rspuns pot fi activate sau inhibate de ctre citokine. Fa de antigenele timo-dependente se poate dezvolta fie rspuns imun umoral, fie rspuns imun celular. Fa de antigenele timo-

independente

se

va

dezvolta

doar

rspuns

imun

umoral

prin

anticorpi.

Aprarea contra bacteriilor nu este cu nimic diferit de aprarea mpotriva altor tipuri de antigene care invadeaz organismul precum virusuri, toxine sau celule maligne. Bacteriile sunt capabile, ca oricare alt antigen s declaneze att rspuns imun umoral ct i rspuns imun celular.

Rspunsul imun umoral

Rezultatul final al desfurrii lui este constituit de producerea de anticorpi specifici i intervine n distrugerea bacteriilor i inhibarea aciunii toxinelor bacteriene. El este indus de ctre antigenele timo-dependente a cror varietate este foarte mare: proteine, acizi nucleici, substane sintetice, toxine cu structur proteic. Alergenii sunt un tip de anticorpi care determin rspuns imun umoral cu IgE. O bacterie care penetreaz bariera cutanat i ajunge n esutul subcutatanat va determina un proces inflamator local dup care va migra n circulaia limfatic i va ajunge la nivelul organelor limfoide secundare unde va lua contact cu celulele specializate n fagocitoz. Centrii germinativi ai organelor limfoide secundare sufer numeroase modificri ca urmare a aciunii antigenului cu apariia plasmocitelor productoare de anticorpi i cel mai important, a limfocitelor care posed memorie imunologic i care la un contact ulterior cu acelai antigen vor declana un rspuns imun prompt i eficace.

Rspunsul imun primar

Este rspunsul imun care se produce la primul contact cu antigenul, cnd nu exist limfocite cu memorie sensibilizate pentru antigenul respectiv. Rspunsul imun primar este elaborat de ctre limfocitele naive, din ganglionii limfatici care nu au intrat niciodat n contact cu un anumit antigen, iar etapele prin care acesta se produce sunt urmtoarele: 1. Latena este perioada care ncepe la contactul cu antigenul i se termin n momentul n care antigenul este prezentat n cuplu cu moleculele complexului major de histocompatibilitate, de ctre celulele prezentatoare de antigen ctre limfocitele B naive. Durata ei este variabil depinznd de natura antigenului i de calea pe care acesta a ptruns n organism. n principiu dureaz 3 zile. 2. Creterea logaritmic este reprezentat de sinteza anticorpilor de ctre plasmocite care dureaz tot 3 zile. Anticorpii devin decelabili prin reacii de laborator care detecteaz complexele imune antigen-anticorp. Titrul anticorpilor produi de plasmocite se va menine constant o perioad urmnd faza de stagnare, timp n care se poate pune diagnosticul de infecie. Actualmente se pot pune n eviden anticorpii n urmtoarele 514 zile de la contactul cu antigenul declanator. Ulterior titrul anticorpilor scade treptat i precizia diagnostic nu mai este aceeai. 3. Natura anticorpilor. Primii anticorpi care apar sunt cei de tip IgM iar cteva zile mai trziu apar anticorpii de tip IgG, al cror nivel crete n timp ce nivelul IgM scade ca urmare a fenomenului de comutare izotipic sau switch imunologic. Anticorpii care persist cteva zile, luni sau chiar toat viaa (depinde de tipul infeciei - n bolile copilriei anticorpii persist o perioad foarte lung de timp) sunt cei de tip IgG.

Rspunsul imun secundar

Apare dup un contact ulterior cu acelai antigen responsabil de declanarea rspunsului imun primar i este specific, fiind mediat de limfocitele cu memorie imunologic. Spre deosebire de rspunsul imun primar apare chiar dac doza de antigen care a invadat organismul este foarte mic i are o laten foarte redus, n jur de 24 de ore. Faza de cretere logaritmic este atins foarte rapid i titrul anticorpilor care sunt numai anticorpi de tip IgG crete rapid. i titrul anticorpilor este mult mai ridicatdect n rspunsul imun primar i anticorpii persist un timp mult mai ndelungat. Dac n rspunsul imun primar persistau de la cteva zile pn la dou sptmni, n rspunsul imun secundar ei pot persista de la cteva luni la civa ani. Limfocitele cu memorie sunt limfocitele care apar n urma rspunsului imun primar i sunt recirculate permanent dup ce antigenul care a determinat formarea lor este epurat din organism prin reacia imun primar. Memoria imunitar este specific, limfocitele cu memorie fiind capabile s recunoasc numai antigenul care a sensibilizat limfocitele naive n cursul rspunsului imun primar. Tipul de anticorpi produi n cursul rspunsului imun are o importan covritoare, ntruct anticorpii de tip IgM indic o infecie acut, recent, n timp ce anticorpii de tip IgG indic o infecie veche, cronic. Diagnosticul serologic al unei infecii bacteriene se face n dinamic, prin determinarea succesiv a titrului de anticorpi la intervale regulate de timp pentru a se evidenia dac infecia se cronicizeaz sau nu, fapt stabilit n funcie de apariia anticorpilor de tip IgG. De asemenea, infeciile congenitale care se transmit transplacentar de la mam la ft pot fi recunoscute tot prin analiza anticorpilor, ntruct anticorpii IgM au mas molecular foarte mare i nu pot traversa bariera placentar, ftul primind de la mam anticorpi de tip IgG, cei de tip IgM fiind produi mai trziu, pe msur ce ftul intr n contact cu antigenele din mediul exterior. Dac mama contacteaz o infecie n timpul sarcinii ea va produce anticorpi de tip IgM cnd infecia este acut i anticorpi de tip IgG pe msur ce infecia se cronicizeaz. Anticorpii de tip IgG vor traversa bariera placentar i vor ajunge n circulaia ftului, la natere titrul acestora putnd fi decelabil ns prezena lor nu semnific faptul c infecia s-a transmis de la mam la ft ci doar c ftul a primit anticorpii de la mam. ns, n momentul n care dup natere la ft sunt decelabili anticorpi de tip IgM anti-agentul patogen care a produs infecia la mam nseamn c ftul a contactat infecia cu cale de transmitere transplacentar.

Elaborarea anticorpilor
Antigenul ptruns n organism i recunoscut ca fcnd parte din categoria de molecule nonself este fagocitat i prelucrat de ctre celulele prezentatoare de antigen (macrofage, celule dendritice, limfocite). Ele vor prelucra antigenul i l vor descompune n epitopicare vor fi prezentai mpreun cu moleculele complexului major de histocompatibilitate ctre limfocitele T helper care vor secreta ulterior interleukinele de tip 2, 4, 5 i 6 care activeaz limfocitele B care vor intra n ciclul celular i vor prolifera policlonal. Ulterior clonele limfocitelor B activate se vor transforma n plasmocite care sunt celule productoare de anticorpi.

Rspunsul imun celular

Este acel rspuns imun direcionat ctre celulele purttoare de antigen i anume ctre celulele care sunt infectate cu virusuri i microorganisme cu multiplicare intracelular precum Micobacteriile, Listeria Monocytogenes, Brucella, paraziii intracelulari i celulele tumorale. Aceste microorganisme vor ptrunde n diferite celule printre care i macrofagele care, dup ce au ingerat antigenul vor ncepe s secrete interleukinele 1, 6, 10 i 12, TNF alfa i TNF beta care produc urmtoarele efecte: TNF alfa activeaz macrofagul n care a ptruns antigenul, TNF beta activeaz macrofagele care nu au fost infectate nc, pregtindu-le pentru aciune mpotriva antigenelor care le vor ataca, TNF alfa, interleukina 10 i interleukina 12 vor activa celulele Natural Killer extrem de citotoxice. Antigenul care declaneaz rspunsul imun celular este ncorporat ntr-o celul purttoare. Dac celula purttoare este macrofagul, acesta va degrada antigenul n peptide i le va cupla cu moleculele MHC. Peptidele antigenice sau epitopii vor fi prezentate ctre limfocitele T helper de ctre celulele prezentatoare de antigen i determin astfel activarea limfocitelor T helper care vor sintetiza interleukin 2. Interleukina 2 activeaz limfocitele T citotoxice care vor distruge celula infectat cu antigen.

Imunitatea anti-bacterian
Imunitatea dobndi activ este cea care apare dup contactul cu antigenul bacterian n urma unei infecii (imunitate dobndit activ n mod natural) sau dup vaccinare (imunitate dobndit activ n mod artificial). Caracteristica acestui tip de imunitate este c este de lung durat i protecia este eficient pe perioad lung de timp. ns dezavantajul este acela c rspunsul imun se va instala lent. Imunitatea dobndit pasiv apare n momentul n care n organismul uman ptrund anticorpi produi de o alt gazd. Un exemplu clasic este administrarea de antitoxin difteric, tetanic sau botulinic care va determina introducerea unei cantiti mari de toxin n sistemul circulator al gazdei cu rol n neutralizarea toxinei produs de agentul patogen.

Vaccinurile
Sunt produse imunologice de sintez constituite dintr-o suspensie de microorganisme care pot fi fie vii atenuate sau vii inactivate. Vaccinul nu trebuie s conin ntregul microorganism ci poate conine i fraciuni din acestea cu structuri proteice suficient de bine evideniate astfel nct s stimuleze mecanismele imune. Aceast stimulare pregtete organismul i l imunizeaz mpotriva unei eventuale infecii prin creterea rezitenei specifice a gazdei cu stimularea rspunului umoral sau celular. Vaccinarea este o metod profilactic, niciodat nu trebuie s fie vzut ca o metod curativ deoarece previne, nu vindec o anumit boal. Vaccinurile sunt de un real folos n timpul unei epidemii cum ar fi cea cu virus gripal pentru prevenirea apariiei de cazuri noi. Exist mai multe tipuri de vaccinuri, n funcie de componentele din microorganism care intr n compoziia lor: - Vaccinuri corpusculare bacteriene sau virale care sunt constituite din corpi vii de microorganisme atenuate sau distruse (inactivate) prin aciunea unor factori fizici sau chimici cum ar fi cldura sau anumite substane. De exemplu vaccinul BCG este administrat n maternitate obligatoriu fiecrui nou-nscut, pentru prevenia tuberculozei fiind un vaccin viu atenuat care stimuleaz rspunsul imun celular mpotriva agentului

Mycobacterium Tuberculosis. - Vaccinurile subunitare sunt produse prin inginerie genetic i au un grad de siguran superior, ntruct efectele secundare sunt cu mult diminuate. Exemplu: vacciunul pertusis acelular, vaccinul anti virus hepatitic B. - Vaccinuri care conin anatoxine bacteriene purificate i adsorbite pe suport mineral cum este vaccinul DTP sau diftero-tetano-pertusis care conine antitoxin tetanic i difteric i corpi de Bordetella Pertusis omori. n funcie de numrul de componente bacteriene pe care le conin vaccinurile sunt: 1. Monovalente conin un singur antigen: rujeolos, rubeolos, pertusis acelular, BCG 2. Asociate care conin amestecuri de antigene: DTP, rujeolos-rubeolos.

Celulele NK
Celula NK sau natural killer este cunoscut ca fiind ucigaul nnscut al sistemului imun. Acest tip de celule provie din celula stem limfoid a mduvei osoase care genereaz celule precursoare ale limfocitelor B, T i ale celulelor Natural Killer. Celulele NK reprezin 15 % din totalitatea limfocitelor din snge i sunt celule de talie mare care care prezint n citoplasma lor granulaii celulare azurofile i au o citoplasm mai mare dect a celorlaltor limfocite, motiv pentru care au fost denumite i LGL sau large granular lymphocytes.

Structura celulelor NK
Celulele NK nu au pe membrana lor niciunul dintre receptorii pentru antigen care i prezint limfocitele B i limfocitele T. Prin urmare au fost denumite celule nule, datorit lipsei acestor receptori antigen-specifici, eseniali n aprarea imun. ns, prezint pe suprafaa lor markeri caracteristici pentru limfocite avnd pe membrana lor receptori Fc gamma de mic afinitate, receptori de mic afinitate pentru interleukina 2 ireceptori specifici seriei mieloide. Dezvoltarea celulelor NK, spre deosebire de dezvoltarea limfocitelor, nu depinde de timus. Ca i limfocitele T, ele sintetizeaz interleukin 2 i interferon gamma. Markerii de recunoatere aparinnd claselor de difereniere prezeni pe membrana celulelor natural killer sunt urmtorii: CD 16, CD 53 i CD 3.

Funciile celulelor NK
Viaa acestor celule este foarte scurt ns ele reprezint o linie foarte important care are un rol esenial n imunitatea nnscut a organismului. Sunt specifice pentru rspunsul imun nnscut i bareaz rapid aciunile virusurilor i ale celulelor tumorale fiind active n primele 3 zile de la debutul infeciei sau invaziei antigenice. Ele detecteaz complexele MHC prezente pe suprafaa celulelor infectate cu antigen i stimuleaz eliberarea de citokine cu declanarea lizei celulare i apoptozei (moarte celular programat). Nu necesit activare prealabil i pot recunoate antigene i n lipsa existenei anticorpilor sau a expresiei sistemului major de histocompatibilitate pe suprafaa celulei infectate declannd distrugerea prompt a non-selfului.

Celulele NK sunt celule citotoxice. Granulele azurofile din citoplasma lor conin enzime precum perforinele i proteazele care sunt eliberate cnd celula NK ajunge n proximitatea celulei infectate cu antigen, n esutul inflamat. Perforinele formeaz pori n celula setat pentru distrugere i induc liza osmotic a celulei care a nglobat antigenul, prin balonizarea ei i explozia membranei celulare. Prin receptorul Fc gamma de pe suprafaa lor, celulele NK sunt capabile s recunoasc i celulele opsonizate de ctre imunoglobuline (nu au receptori pentru complement deci nu recunosc celulele opsonizate de fraciunea C3b a complementului) i elibereaz perforine declannd liza osmotic a celulei opsonizate. O alt funcie important a acestor celule este participarea lor activ la rejecia grefelor i a organelor transplantate, fapt care declaneaz reacia de respingere denumit graft versus host disease, motiv pentru care pacienii care sufer transplanturi sunt supui unei terapii intensive cu imunosupresoare. Activarea funcional a celulelor NK se face de ctre interleukina 2 i de ctreinterferon. Se ncearc actualmente dezvoltarea unei terapii antivirale bazate pe acest mecanism, dat fiind faptul c celula natural killer este implicat n prima linie de aprare mpotriva invaziei organismului de ctre virusuri.

Celulele Killer
Sunt o subpopulaie a celulelor natural killer i aparin tot seriei large granular lymphocytes. Ca morfologie sunt foarte greu de difereniat de celulele NK. Cele dou tipuri de celule au receptori membranari comuni dar i receptori diferii. Celula K prezintCD 45 i exprim receptorul Fc gamma de foarte mare afinitate, mult mai mare dect la celulele NK, ceea ce face ca funcia principal a celulelor K s fie citotoxicitatea mediat de anticorpi. i celula NK este o celul citotoxic, ns diferena dintre cele dou clase celulare este faptul c celula K acioneaz numai asupra intelor celulare care au fixat la suprafa molecule de anticorpi, adic au fost opsonizate. Aceasta reprezint citotoxicitatea mediat de anticorpi a celulelor killer, spre deosebire de cea a celulelor NK care este neselectiv, NK putnd ataca orice celul non-self, fie c este opsonizat de anticorpi sau nu. Legarea anticorpilor de celula non-self se face prin intermediul fraciunii Fab care ptrunde n membrana celular, celula K atandu-se la fragmentul Fc al anticorpului, care rmne la exteriorul membranei. Pentru declanarea lizei mediate de celulele K, liz care se face tot prin perforine i enzime litice ca i la celulele NK, este necesar pe celula antigenic s se fixeze cel puin 100 de molecule de imunoglobulin G. Funciile celulelor K sunt inhibate de prezena excesului de anticorpi care se produce n faza a doua a reaciei imune. Din aceast cauz, intervenia lor se face n faza timpurie a sintezei anticorpilor specifici i anume n momentul comutrii sintezei de IgM cu sinteza de IgG. Cnd titrul anticorpilor IgG crete foarte mult, limfocitele T citotoxice preiau activitatea citotoxic a celulelor Killer. i celulele Natural Killer sau proteinele complementului pot prelua activitatea citotoxic a celulelor killer n momentul n care titrul de anticorpi a crescut foarte mult.

Limfocitele
Limfocitele sunt celule care aparin familiei leucocitelor i au funcii de baz n cadrul sistemului imunitar, fiind implicate n rspunsul imun umoral i celular. Exist dou clase de limfocite, limfocitele T i limfocitele B. Microscopic diferenele dintre cele dou tipuri de limfocite nu sunt observabile. Ele au un nucleu foarte voluminos care ocup aproape ntreaga celul, raportul nucleu/ citoplasmfiind supraunitar. Organitele celulare intracitoplasmatice nu sunt vizibile, citoplasma fiind bazofil. Detaliile structurale i organitele se pot vizualiza ns n microscopie electronic unde apar difereniat reticulul endoplasmatic, ribozomii i aparatul Golgi. Diferena ultrastructural dintre limfocitele T i B se observ la microscopul electronic dat fiind de faptul c limfocitele B prezint viloziti, iar limfocitele T au suprafa neted. n momentul n care sunt stimulate antigenic, apar numeroase modificri intracelulare, precum i creterea ratei de sintez proteic.

Proprietile generale ale limfocitelor

Leucocitele reprezint un grup celular mprit n dou categorii: leucocite polimorfonucleare sau granulocite, care au nucleul lobat sau fragmentat fiind reprezentate de neutrofile, eozinofile i bazofile i leucocite mononucleare, cu un nucleu mare care ocup aproape toat celula fiind reprezentate de limfocite i monocite. Limfocitele sunt diferite de celelalte celule sanguine. Ele se difereniaz de monocite (cu care seamn foarte mult din punct de vedere morfologic) prin faptul c prezint enzime din clasa esterazelor i a fosfatazei alcaline. Au densitatea mai mare dect a monocitelor i mai mic dect a polimorfonuclearelor. Limfocitele B, spre deosebire de limfocitele T ader pe suprafee de sticl sau plastic. Limfocitele au proprieti care le difereniaz i de celelalte celule ale sistemului imunitar, proprieti reprezentate de faptul c: sunt celule mobile, nu au capacitate de fagocitoz ca macrofagele, ader foarte uor de alte celule, au receptori de membran i, sub influena anumitor substane mitogene se pot transforma blastic. Au capacitatea de a se deplasa foarte uor printre esuturi datorit plasticitii lor, care le permite s-i modifice forma din celul rotund n celul alungit i s semene cu o rachet de tenis, care are nucleul n partea voluminoas. Aderena la alte celule se face printr-un contact intim de suprafa denumit peripolez, contact n cadrul cruia au loc schimburi informaionale ntre limfocit i celula la care a aderat acesta. Limfocitele au receptori specifici reprezentai de antigenele de suprafa, care le permit s diferenieze self-ul de nonself i de receptorii de membran care sunt receptori de comunicare intercelular. Transformarea blastic a limfocitelor are loc sub aciunea fitohemaglutininei i concanavalinei A care sunt substane mitogene. Transformarea este dat de mrirea de 2-3 ori a dimensiunii limfocitului cu modificarea nucleului i apariia unui numr mare de organite citoplasmatice cu funcie secretorie. Astfel limfocitele sunt capabile s prolifereze la contactul cu anumite antigene specifice.

Localizarea limfocitelor

Att limfocitele T, ct i limfocitele B sufer fenomenul de homing, care reprezint migrarea lor selectiv ctre ariile T-dependente sau B-dependente a organelor limfoide secundare. n organele limfoide secundare are loc recircularea continu a limfocitelor petraseul snge-organ limfoid-snge, proces esenial n recunoaterea antigenului de ctre limfocite pe baza receptorilor de membran. Dac limfocitele nu ar fi recirculate, ele nu ar avea posibilitatea s intre n contact cu antigenele care ajung n circulaia organismului i s declaneze apoi rspunsul imun care va avea ca scop distrugerea i ndeprtarea substanelor strine din organism.

Limfocitele T
Sunt o categorie foarte heterogen de limfocite, deoarece se mpart la rndul lor n 4 subcategorii de limfocite T: helper, citotoxice, supresoare i contrasupresoare. Limfocitele T ca grup, reprezint 60 -80% din totalitatea limfocitelor i au o durat de via foarte crescut (ani, chiar zeci de ani) spre deosebire de a neutrofilelor spre exemplu, care au o durat de via de la cteva ore pn la cteva zile. Limfocitele T prezint pe suprafaa lor membranar 3 categorii de receptori, acetia fiind reprezentai de: a. Receptori pentru recunoaterea antigenic denumii i TCR (T- cell receptor) care cuprind subcategoriile CD3 (CD = Clas de Difereniere sau n englez Cluster of Differentiation) cu rol n recunoaterea antigenului prezentat limfocitului de ctre celula prezentatoare de antigen, CD 4 i CD8 care au rolul de coreceptori implicai n recunoaterea moleculelor sistemului major de histocompatibilitate (MHC = Major Histocompatibility System). b. Receptori cu rol accesor n activarea limfocitelor T reprezentai de CD 25, CD 28 i CD 45 c. Receptori implicai n adeziunea intercelular reprezentai de CD 2, CD 11, CD 18 Limfocitele T recunosc antigenul n funcie de structura primar a determinantului antigenic, mecanism diferit de cel al limfocitelor B i al imunoglobulinelor (anticorpi produi de plasmocite) care recunosc antigenul dup structura sa spaial. Limfocitele T recunosc numai antigenele expuse pe suprafaa celulelor prezentatoare de antigen (CPA). Din punct de vedere fenotipic limfocitele T se difereniaz n 4 categorii care cuprind limfocitele T supresoare, contrasupresoare, helper i citotoxice.

Limfocitele T Helper Prezint receptori CD3+/CD4+/CD28+ i ocup 2/3 din totalul limfocitelor T. Ele secret molecule numite interleukine, care aparin clasei citokinelor, fiind molecule mesager n comunicrile dintre celulele sistemului imunitar. Aceste interleukine permit limfocitelor T helper s execute mai multe funcii: stimuleaz diferenierea limfocitelor B n plasmocite (celule secretatoare de anticorpi), stimuleaz funcia citotoxic a limfocitelor T citotoxice, stimuleaz funcia citotoxic a celulelor Natural Killer i activitatea macrofagelor. Datorit acestor funcii importante pe care le execut prin secreia de interleukine, limfocitele T helper sunt considerate celulele de baz ale sistemului imun. Sunt mprite n 2 categorii n funcie de tipul de interleukine pe care l secret: care
- Limfocite T helper 1 (LTH1) care secret interleukinele 3, 4 i 5 fiind stimulatorul principal al sintezei claselor de imunoglobuline A i E - Limfocite T helper 2 (LTH2) care secret interleukina 2 i interferon gamma avnd rol n declanarea reaciilor inflamatorii din strile de hipersensibilitate ntrziat.

O parte din limfocitele T helper care au avut contact cu antigenul se transform nlimfocite T helper cu memorie, datorit faptului c posed funcia de memorie imunologic, funcie care le permite ca la al doilea contact cu acelai antigen s activeze rspunsul imun prompt i eficient. Ele rezist ani de zile n organism conferind imunitate dobndit n mod natural prin anticorpi care persist timp ndelungat.

Limfocitele T citotoxice Prezint receptori CD 3+/CD8+/CD 28+. Determin moartea celulelor din organism contaminate microbian (infectate de ctre un virus, un parazit sau o bacterie). Pentru a avea efectul letal asupra celulei infectate cu antigen, limfocitele T citotoxice trebuie s fie n contact direct cu celula respectiv, contact care se desfoar de-a lungul a 4 faze:
1. Recunoaterea celulei int infectat antigenic i ataarea limfocitului de ea prin receptori membranari specifici 2. Activarea mecanismelor litice ale limfocitului T citotoxic 3. Trimiterea enzimelor letale reprezentate de perforine i enzime lizozomale ctre celula int 4. Desprinderea de celula int care va intra ntr-un proces de descompunere i liz sub aciunea enzimelor litice Procesul de adeziune la celula infectat antigenic i de distrugere a acesteia de ctre enzimele litice secretate de limfocitele T citotoxice este extrem de important n controlul infeciilor virale de ctre sistemul imun. Tot limfocitele T citotoxice au rol n respingerea grefei de esut sau organ prin liza celulelor grefate n afeciunea numit Graft versus Host Disease.

Limfocitele T supresoare Au ca markeri de suprafa CD3+/CD8+/CD28-. Sunt celule care inhib limfocitele T helper, ducnd la supresia sau oprirea rspunsului imun. Determin stare de toleran fa de unele antigene exogene i de unele molecule self modificate. n momentul n care apar deficiene funcionale ale limfocielor T supresoare apar bolile autoimune, n care organismul reacioneaz mpotriva propriilor celule self. Persistena prelungit n organism a antigenului i dozele mici de antigen activeaz limfocitele T supresoare ducnd la ncetarea sau reducerea intensitii rspunsului imun. Limfocitele T contrasupresoare Ele contracareaz aciunea limfocitelor T supresoare i acioneaz sinergic cu limfocitele T helper. Fie au aciune direct asupra limfocitelor T supresoare inhibndu-le activitatea, fie deblocheaz funcional limfocitelel T helper. Receptorii de suprafa ai limfocitelor T Sunt markeri celulari i receptori de membran. Markerii celulari sunt molecule care confer specificitate i identitate unei anumite categorii de limfocite T. Cei mai importani sunt markerii antigenici care sunt glicoproteine de pe membrana limfocitelor T denumite antigene de membran. Ei reprezint elementele de identificare ale populaiilor i subpopulaiilor de limfocite T. Se numesc Clase de Difereniere (CD), iar pn acum au fost identificate aproximativ 150 de CD pe suprafaa limfocitelor T.
Limfocitele T recunosc un antigen doar dac este prezent pe suprafaa unei celule

prezentatoare de antigen (CPA) din cadrul sistemului major de histocompatibilitate(MHC, care este mprit n dou clase: MHC I i MHC II). CD4 - recunoate antigenul doar dac este asociat cu moleculele MHC clasa II. Markerul este reprezentat de un peptid cu structur monomeric, alctuit din 433 de aminoacizi nlnuii. Se gsete pe suprafaa limfocitelor T helper i T contrasupresoare. Este un coreceptor care particip la recunoaterea antigenic asociativ fiind receptorul de suprafa caracteristic limfocitelor T helper. Are un segment intracitoplasmatic, un segment transmembranar i un segment extracelular. Cu ajutorul segmentului extracelular se leag de MHC II. Segmentul intracitoplasmatic particip la activarea limfocitelor T cu ajutorul unor enzime intracelulare. CD 4 este i receptorul de care se ataeaz virusul HIV, determinnd incapacitatea limfocitelor de a se activa, fapt care duce la imunosupresie sever n cazul bolii SIDA. CD8 - este un marker limfocitar care recunoate antigenul doar dac este asociat cu moleculele MHC clasa I. Ca structur este un heterodimer cu dou lanuri, alfa i beta, a cte 210 aminoacizi fiecare fiind prezent pe suprafaa limfocitelor T supresoare i T citotoxice. Este un marker definitoriu pentru limfocitele T citotoxice i are dou lanuri, alfa i beta. Fiecare lan are cte trei segmente: transmembranar, intracitoplasmatic i extracelular. CD3 - are o structur complex fiind aezat lng TCR. Face transducia semnalului activator dinspre TCR spre interiorul limfocitului. Este format din cinci lanuri scurte (gama, epsilon, delta, eta, zeta) iar toate cele 7 lanuri ale complexului TCR-CD3 (5 ale CD3, 2 ale TCR) se asociaz prin puni disulfurice sau prin legturi necovalente, formnd un complex unitar ce trimite stimulul activator ctre interiorul limfocitului. Receptorii de membran au rol n transmiterea de semnale intercelulare i n recunoaterea intercelular. Receptorul pentru homing este plasat pe membrana limfocitelor cu scop de a le orienta ctre organele limfoide secundare spre ariile T dependente sau B dependente. Recunoaterea i plasarea limfocitelor n aria corespunztoare se bazeaz pe faptul c exist molecule cu receptori complementari limfocitelor, molecule care cptuesc vasele sangvine i limfatice ale organelor limfoide secundare. Receptorii pentru antigen sunt molecule de natur imunologic ce sunt ataate pe membrana limfocitului T fr a ptrunde n dublul strat lipidic al membranei. Au cte dou lanuri polipeptidice, fiecare lan avnd la rndul su 4 domenii diferite: domeniul variabil, domeniul constant, domeniul transmembranar i domeniul intracitoplasmatic. Domeniul variabil este implicat n specificitatea de legare a antigenului de limfocit. Receptorii pentru fragmentul cristalizabil fac contactul dintre limfocit i fragmentul cristalizabil al moleculelor imunoglobulinice, reprezentnd structurile cu ajutorul crora limfocitele T recunosc i leag poriunea terminal a imunoglobulinelor. Receptorii pentru citokine sunt de mai multe feluri: receptori pentru interleukine, receptori pentru hormoni, receptori pentru interferon i receptori pentru factorii de stimulare ai creterii celulare. Sunt capabili s lege citokinele solubile participante la mecanismele de cooperare dintre diferitele celule ale sistemului imunitar.

Activarea limfocitelor T Este realizat numai de ctre antigenele Timodependente ntr-un proces care implic obligatoriu prezena celulelor prezentatoare de antigen. Celulele prezentatoare de antigen coopereaz cu limfocitele ntr-un mod bidirecional care determin activarea reciproc a ambelor celule. Activarea limfocitului T de ctre celula prezentatoare de antigen esteanterograd i se deruleaz n sensul prezentrii antigenului de ctre CPA ctre limfocit, iar activarea celulei prezentatoare de antigen de ctre limfocit se realizeaz n sensretrograd.

Activarea limfocitelor T se realizeaz doar n organele limfoide secundare (ganglioni limfatici, splin) doar n cadrul unei cooperri celulare n care este absolut necesar prezena i activitatea celulelor prezentatoare de antigen, ntruct limfocitele T nu sunt capabile s fixeze antigenul timodependent n stare nativ i nu exprim pe suprafaa lor receptori de captare ai antigenului. De asemenea, limfocitele nu recunosc antigenele native n ntregime, ci recunosc mici fragmente ale antigenului numite epitopi care sunt ca structur determinani antigenici lineari, poziionai n interiorul antigenului nativ. Spre deosebire de limfocitele T, celulele prezentatoare de antigen au pe suprafaa lor receptori de captare astfel nct sunt capabile s capteze antigenul, s-l internalizeze i s-l descompun n epitopi care apoi sunt expui pe suprafaa celulei prezentatoare de antigen n complex cu sistemul major de histocompatibilitate. Epitopul este recunoscut apoi de ctre limfocitul T care prezint TCR (T- cell receptors) sau receptori pentru recunoatere antigenic.

Activarea anterograd a limfocitelor T Se face dinspre celula prezentatoare de antigen spre limfocitul T i se exercit n acelai sens cu prezentarea antigenului de ctre CPA. Rezultatul final l reprezint activarea limfocitelor T aflate n contact cu celulele prezentatoare de antigen.
Se face prin transmiterea ctre limfocit a dou categorii de semnale: 1. Pe calea primar TCR- CD3 care ajunge ctre profunzimea citoplasmei prin intermediul complexului CD3, semnalul lund natere datorit recunoaterii epitopului prezentat de CPA de ctre limfocit. Rolul semnalului este de activare metabolic a limfocitului T contribuind la stimularea diviziunilor mitotice ale acestuia cu creterea numrului de limfocite T per clon limfocitar activat. Toate limfocitele T care rezult n urma mitozelor date de activarea metabolic a clonei limfocitare de ctre celula prezentatoare de antigen sunt activate. Se realizeaz astfel selecia clonal i expansiunea clonal. 2. Calea secundar, accesorie a complexului CD 28 descarc semnalele activatoare n momentul n care face legtura cu CD80 care este contraligandul su aflat pe suprafaa tuturor celulelor prezentatoare de antigen (macrofage, celule dendritice etc.). Are rol nmaturarea funcional a limfocitului T. Dac limfocitele T activate anterograd sunt Limfocite T helper atunci va avea loc stimularea produciei de interleukine. Dac limfocitele T activate sunt limfocite T citotoxice, atunci se va stimula producia de enzime litice cu rol distructiv al antigenului. Prin cele dou tipuri de semnale, pe calea primar i pe calea secundar, vor rezulta trei efecte: activarea clonal, expansiunea clonal i maturarea clonal a limfocitelor T. Activarea anterograd a limfocitelor T are dou subetape: etapa antigen-dependent i etapa antigen-intependent.

Etapa antigen-dependent Se stabilesc contacte extinse i intime ntre membranele CPA i limfocitelor T. Este reprezentat de prezentarea i recunoaterea antigenic. Toi receptorii de pe membrana limfocitar ncep s se ansambleze n jurul TCR, astfel nct la TCR se vor ataa CD3, CD45, CD4 dac limfocitele sunt T helper sau CD 8 dac limfocitele sunt T citotoxice. Se trimit dou semnale, primul este pe calea CD4/CD8 i angajeaz legturile dintre limfocitul T helper/T citotoxic i domeniul monomorf al MHC fiind un semnal inhibitor care determin inhibarea activrii excesive a limfocitelor T n situaia n care ele vin n contact

cu celule prezentatoare de antigen ale cruor MHC sunt ncrcate cu epitopi specifici apare TCR-CD3 i este activator, transmindu-se limfocitului T determinnd

molecule MHC sunt goale. Dac moleculele al doilea semnal care se produce pe calea din aproape n aproape prin membrana activarea clonei limfocitare.

Stimularea antigenic a limfocitelor T determin trecerea acestora din faza 0 a ciclului mitotic n faza G1, dup care vor trece n etapele S i G2. Toate limfocitele care se afl ntr-una din fazele G1/S/G2 se numesc limfoblati. Limfoblatii care ies din faza G2 trec n faza M sau de mitoz, transformndu-se n limfocite T efectorii care se implic rapid n derularea rspunsului imun deja declanat. O parte dintre limfocitele care au luat contact cu antigenul se vor transforma n limfocite de memorie.

Etapa antigen-independent Se stabilesc legturi ntre limfocitele T i celulele prezentatoare de antigen prin intermediul receptorilor de adeziune intercelular. Astfel se creeaz mici legturi n fanta dintre cele dou celule cu efect de fermoar ntre membranele celor dou celule. Aceast etap este independent de prezena antigenului, avnd loc fr ntrerupere n organele limfoide secundare ntruct limfocitele i CPA tranziteaz permanent ganglionii i splina. Astfel se realizeaz supravegherea imunologic a limfocitelor T de cre celulele prezentatoare de antigen, prin prezentarea unui epitop de ctre moleculele MHC ctre limfocitele T, epitop care este recunoscut prin TCR.
Receptorii de adeziune intercelular ai limfocitelor T sunt reprezentai de LFA1, CD2 i VLA. LFA1 se mai numete i antigen asociat funciei limfocitare i face parte din familia integrinelor, care sunt receptori celulari ce permit adeziunea la endoteliu, la proteinele matricei extracelulare i la celulele prezentatoare de antigen. LFA1 se leag de receptorul ICAM de pe membrana CPA care este de dou feluri: ICAM 1 care se afl pe suprafaa tuturor celulelor din organism i ICAM 2 care se afl pe celulele endoteliale. VLA aparin tot familiei integrinelor i sunt receptori de adeziune la endoteliu. Dau posibilitatea limfocitelor s se deplaseze prin esuturi i s se concentreze intratisular n zonele bogate n antigene.

Activarea retrograd a limfocitelor T Se produce dinspre limfocitele T deja activate pe calea anterograd ctre celulele prezentatoare de antigen. Se numete retrograd datorit faptului c se exercit n sens opus prezentrii antigenului, i anume dinspre limfocitul T ctre CPA. n final rezult activarea complet a CPA.
Are loc o stimulare reciproc ntre limfocitele T i celulele prezentatoare de antigen prin intermediul interleukinelor produse de limfocitele T. Interleukina 4 are efecte stimulatoare pentru CPA determinnd stimularea expresiei moleculelor sistemului major de histocompatibilitate pe membrana celulei prezentatoare de antigen. Datorit expresiei MHC pe suprafaa APC, rezult o cretere marcat a prezentabilitii epitopilor, ceea ce determin suprastimularea limfocitelor T.

Limfocitele B
Sunt o populaie minoritar de limfocite, ele reprezentnd aproximativ 20 % din totalul limfocitelor periferice. Ele sunt celule cu durat de via scurt, de ordinul lunilor i sunt puin recirculate fiind distribuite cu predominen n ariile B-dependente din organele

limfoide secundare, la nivelul corticalei ganglionilor limfatici sau n pulpa alb a splinei. Limfocitele B sunt dispuse n aglomerri care se numesc folicului limfoizi i staioneaz n aceast formul timp ndelungat n ateptarea antigenului specific. Receptorii de suprafa ai limfocitelor B sunt de trei tipuri: 1. Receptori de recunoatere antigenic sau Bcell receptors 2. Receptori cu rol n activarea limfocitelor B: CD45, CD25 i CD21/CD19 3. Receptori de adeziune intercelular sau LFA1 Diferenierea limfocitelor B n cursul evoluiei de la stadiul primordial la stadiul de plasmocit este independent de prezena antigenului. Limfocitele B recunosc antigenele solubile dup structura lor spaial i nu necesit prezena Celulelor Prezentatoare de Antigen n declanarea rspunsului imun. Dup stimularea antigenic se comport similar limfocitelor T, parcurgnd toate etapele ciclului celular i devenind limfoblati B care au ca proprietate prezena unui numr mare de molecule MHC clasa II pe suprafaa membranei celulare, ceea ce le confer posibilitatea s acioneze i ca celule prezentatoare de antigen. Plasmocitele sunt celulele rezultate n urma diviziunilor celulare a limfocitelor B, fiind celule efectoare cu implicare direct n derularea i finalizarea rspunsului imun. O parte dintre ele vor deveni limfocite B cu memorie i se vor depozita n anumite sectoare din organele limfoide secudnare.

Evoluia limfocitelor B Prima selecie a precursorilor limfocitelor B se face n mduva osoas, acestei selecii supravieuind doar un numr redus din precursorii implicai. n urma acestei selecii, pe suprafaa limfocitelor B se vor exprima receptori de tip imunoglobuluinic pentru antigen. Celulele selectate prsesc mduva osoas i se angajeaz n circulaia sistemic. Se numesc limfocite B naive (nu au memorie imunologic).
A doua selecie are loc n circulaia sistemic i const n ataarea de limfocitele B areceptorilor pentru homing-ul limfocitar. Limfocitele B ajung apoi n ariile B-dependente din splin i ganglioni limfatici unde supravieuiesc 6-8 sptmni n ateptarea antigenului. Dac nu ntlnesc acest antigen, ele mor i sunt nlocuite cu alte limfocite B care trec din nou prin ambele etape de selecie. Nici celulele care trec de a doua selecie nu au memorie imunologic, fiind tot limfocite B naive. A treia selecie se produce numai n momentul n care limfocitele B recunosc antigenul i au loc mutaii care determin evoluia limfocitelor B selectate ctre plasmocite, sau ctre limfocite B cu memorie. Plasmocitele sunt celule de 1-2 ori mai mari dect limfocitele B din care au provenit prin selecie. Ele i pierd receptorii de membran dar i dezvolt foarte mult organitele intracelulare de sintez proteic i enzime reprezentate de reticulul endoplasmatic rugos i aparatul Golgi. Astfel se declaneaz sinteza de imunoglobuline sau anticorpi. Un plasmocit poate sintetiza numai o singur clas de imunoglobuline (fie ele IgA, IgG, IgM sau IgE). Limfocitele B cu memorie au o via foarte lung, de la cteva luni la civa ani i sunt responsabile de prezena timp ndelungat n organsm a anumitor anticorpi specifici antiageni microbieni care asigur imunitatea dobndit natural post mbolnvire (de exemplu n bolile copilriei, care nu vor mai fi contactate a doua oar datorit existenei anticorpilor datorit limfocitelor cu memorie). Limfocitele B reglatoare sunt celule prezentatoare de antigen, avnd pe membrana lor

molecule MHC clasa II. Ele intervin n procesele de cooperare intercelular.

Receptorii de recunoatere antigenic ai limfocitelor B Recunoaterea antigenic n cazul limfocitelor B se produce diferit fad e limfocitele T. Spre deosebire de limfocitele T, limfocitele B recunosc antigenele aflate n stare nativ n faz fluid (n lichidul interstiial) i nu necesit prezena celulelor prezentatoare de antigen i nici prelucrarea sau procesarea antigenelor cu evidenierea epitopilor. Limfocitele B pot capta astfel direct antigenul declanator, fr a trece prin procesul de recunoatere antigenic i prin activarea CPA.
n cazul limfocitelor B recunoaterea antigenic poate fi dubl, lucru care nu se ntpl la limfocitele T. Astfel au loc: - Recunoaterea specific, realizat prin receptorul BCR care recunoate determinanii antigenici conformaionali situai la suprafaa antigenelor native, indiferent dac sunt corpusculare sau solubile - Recunoaterea nespecific realizat prin heterodimerul CD21/CD19 care este un receptor opsoninic, el recunoate opsonina C3b care este o fracie a sistemului complement. Opsonina C3b este dispus pe suprafaa antigenelor corpusculate. Sistemul complement este compus dintr-un set de proteine i glicoproteine plasmatice care au rol esenial n aprarea organismului.

B- cell receptor Este receptorul de recunoatere antigenic al limfocitelor B i este reprezentat de o imunoglobulin sau anticorp transmembranar, cel mai frecvent IgM care este o form pentameric. Celelalte imunoglobuline, A, G sau E ndeplinesc mult mai rar funcia de BCR.
Structura acestui receptor este reprezentatd e asocierea a dou perechi de lanuri i anume: - 2 lanuri grele transmembranare (H- Heavy) situate cu capetele carboxil terminale n interiorul celulei i cu capetele aminoterminale n afara celulei - 2 lanuri uoare (L- Light) situate exclusiv transmembranar care se asociaz prin puni disulfurice la lanurile grele. Lanurile heavy i light se asociaz ntre ele la capetele amino terminale i constituie dou caviti de dimensiuni mici care poart de numirea de situs combinativ pentru antigen cu proprietatea de a recunoate determinanii antigenici conformaionali situai la suprafaa antigenului nativ. BCR are dou situsuri combinative pentru antigen care au aceeai structur i care pot recunoate doar un singur tip de determinant antigenic conformaional, deci un singur antigen, prin urmare BCR este unr eceptor monospecific. Funciile BCR sunt reprezentate de responsabilitatea recunoaterii antigenice i de declanarea unor semnale activatoare transmise din aproape n aproape strict prin lanurile heavy pe dou ci: 1. Calea scurt de la lanurile H ale BCR ctre o protein-tirozin-kinaz 2. Calea lung prin intermediul unor molecule asociate la BCR. Aceste molecule se sunt reprezentate de Ig alfa i Ig beta asociate de lanurile H ale BCR prin puni disulfurice. Ig alfa i Ig beta se leag la rndul lor de CD 45, tot prin puni disulfurice.

Activarea limfocitelor B

Se realizeaz numai dup recunoaterea antigenelor solubile sau corpusculate de ctre situsurile combinative pentru antigen ale BCR. Activarea se realizeaz diferit n funcie de natura antigenului. Activarea limfocitelor B se poate face att de ctre antigenele timodependente ct i de ctre antigenele timoindependente. a. n cazul antigenelor solubile, recunoaterea determinanilor antigenici conformaionali de la suprafaa antigenului de ctre situsurile combinative pentru antigenale BCR determin declanarea de semnale activatorii care se transmit din aproape n aproape pe calea lanurilor heavy ctre Ig alfa i Ig beta care se vor fosforila i se vor modifica conformaional determinnd trimiterea unui semnal ctre CD 45 care este asociat prin puni disulfurice la Ig alfa i Ig beta. CD 45 funcioneaz ca o protein tirozin fosfataz care defosforileaz Ig alfa i beta i preia fosforul ncrcndu-se cu el. Fosforul de pe CD45 este preluat de ctre kinaza SYK care l transmite spre fosfolipaza C ataat la membrana limfocitului B. Fosfolipaza C se activeaz i declaneaz cascada fosfatidilinozitolilor, n urma unei succesiuni de reacii catalizate enzimatic rezultnd inozitol trifosfat i diacilglicerol. Inozitoltrifosfatul activeaz factorii transcripionali din citoplasma limfocitului B care trec n nucleu i stimuleaz genele pentru interleukine, genele pentru imunoglobuline i genele pentru sistemul major de histocompatibilitate. n urma activrii acestor 3 tipuri de gene de ctre inozitoltrifosfat, limfocitele B ncep s funcioneze ca celule prezentatoare de antigen. b. n cazul antigenelor corpusculare are loc opsonizarea (pregtirea antigenului pentru a fi fagocitat) lor prin aciunea imunoglobulinelor. Antigenul va fi cunoscut de limfocitul B cu ajutorul BCR care recunoate determinanii antigenici conformaionali de la suprafaa antigenului corpuscular. Se declaneaz apoi stimuli activatori care se transmit prin lanurile Heavy cu activarea cascadei kinazelor. n final, antigenul va fi fagocitat. Limfocitele B sunt celule efectoare ale rspunsului imun mediat umoral, datorit diferenierii lor n plasmocite care secret anticorpi sau imunoglobuluine. Limfocitele T citotoxice sunt implicate n rspunsul imun celular care are ca rezultat liza celulei infectat cu antigen.

Cooperarea celular
Un antigen este o structur non-self care, n momentul n care vine n contact cu sistemul imun declaneaz o succesiune de reacii care vor conduce la neutralizarea lui i ndeprtarea lui din organism. Celulele prezentatoare de antigen au rolul de recunoatere a antigenului strin, captare a lui i prezentare ctre alte celule ale sistemului imun. Ele fie fagociteaz antigenul i l scindeaz n epitopi care vor fi prezentai apoi limfocitelor T, fie rein antigenul nedescompus la nivelul membranei celulare i l prezint limfocitelor B care au situs combinativ pentru antigen. Limfocitul T helper este celula responsabil cooperarea celular prin intermediul citokinelor pe care le secret. Avnd n vedere cooperrile dintre celule, procesul de aprare imun poate fi mprit n urmtoarele etape: 1. Un microb care traverseaz i depete barierele mecanice i chimice ale organismului va fi atacat de ctre neutrofile care l distrug cu ajutorul radicalilor de oxigen i al enzimelor lizozomale 2. Macrofagele intr n aciune concomitent cu neutrofilele i fagociteaz parial antigenul conservnd poriuni din acesta numite epitopi, pe care le prezint limfocitelor T care se vor activa 3. Dac microbul supravieuiete primelor dou secvene de atac i ajunge n interiorul celulelor organismului gazd, va intra n aciune celula natural killer (NK) care ncearc s

distrug microbul prin mecanisme citotoxice. Aceste trei reacii sunt reprezentate de prima linie de aprare nespecific i neselectiv, intrnd n aciune n momentul n care un antigen de orice tip ncearc s infecteze organismul. A doua linie de aprare const n: 1. Limfocitele B sunt informate i activate n timp ce se produce prima linie de aprare, i astfel vor ncepe s sintetizeze anticorpi iniial n numr mic, deoarece nc este activ rspunsul imun celular prin celule natural killer 2. Dac nu funcioneaz aprarea dat de celulele NK, se produce creterea titrului de anticorpi apoi acionarea limfocitelor T citotoxice care n tot acest timp au avut timp s se activeze i s prolifereze clonal 3. Apare memoria imunologic.

Tipuri de rspuns imun

Rspuns imun mediat umoral, care se declaneaz cnd antigenul s-a rspndit n organism i se desfoar departe de locul de ptrundere a antigenului, urmrindu-l n circulaia sistemic i n celulele unde s-a depozitat. Acest tip de rspuns imun este mediat de ctre anticorpii secretai de plasmocite, aceti anticorpi fiind capabili s neutralizeze toxinele, s opsonizeze bacteriile i s inactiveze virusurile. Rspunsul imun umoral este predominant n infeciile bacteriene i reinfeciile virale. Rspunsul imun mediat celular este declanat cnd antigenul se afl nc la poarta de intrare i nu a reuit s invadeze organismul sau cnd este un antigen cu specificitate pentru anumite celule ale gazdei, cum sunt virusurile sau bacteriile care se inclaveaz intracelular. Este realizat numai la poarta de intrare, este mai lent i orientat numai pe celulele care sunt infectate. Are ca mecanisme principale de aciune fagocitoza realizat de macrofage i citoliza realizat de limfocitele T citotoxice.
AUTOR: Alexandra Dolfi, 16-10-2012, Vizite 514
BIBLIOGRAFIE / RESURSE:

COPYRIGHT ROMEDIC: Articolul se afla sub protectia drepturilor de autor. Reproducerea, chiar si partiala, este interzisa!

PMN - Polimorfonucleare
Leucocitele sau celulele albe ale sngelui periferic sunt unitile mobile ale sistemului de aprare al organismului. Se formeaz att n mduva osoas hematogen unde rezult din celulele stem hematopoietice granulocitele, monocitele i o parte din limfocite i parial n esutul limfatic unde rezult limfocitele i plasmocitele. Dup ce se formeaz, leucocitele sunt transportate pe cale sangvin n regiunile organismului unde aciunea lor este necesar. ase tipuri de leucocite sunt prezente n snge n mod normal i anume:polimorfonuclearele neutrofile, polimorfonuclearele eozinofile, polimorfonuclearele bazofile, monocitele, limfocitele i plasmocitele derivate din limfocitele B. Primele trei tipuri de celule, cele polimorfonucleare au un aspect granular i sunt numite i granulocite sau, polimorfonucleare datorit nucleilor polilobulai sau multipli. Fagocitoza este principalul mecanism prin care leucocitele protejeaz organismul

mpotriva

microorganismelor

antigenice.

Polimorfonuclearele
Se mai numesc i granulocite i sunt o categorie a leucocitelor care cuprindeneutrofilele, eozinofilele i bazofilele. Restul leucocitelor, reprezentate de limfocite i monocite se numesc mononucleare. Polimorfonuclearele sau granulocitele alctuiescsistemul fagocitar polimorfonuclear avnd rol n eliminarea microorganismelor antigenice cu localizare extracelular. Sistemul fagocitar polimorfonuclear se mai numete i sistem fagocitar microfagic, funcia lui suprapunndu-se parial cu cea a sistemului fagocitar macrofagic, care este capabil s lupte i asupra antigenelor situate intracelular. Polimorfonuclearele sunt astfel celule fagocitare profesionale de tip microfag. Au o durat de via scurt, de cteva zeci de ore ns sunt n numr constant n sngele circulant deoarece producia medular de leucocite este constant. Un om obinuit are n mod normal n snge ntre 5.000 i 8.000 sau chiar 10.000 de leucocite. Formula leucocitar este o analiz de laborator care mparte leucocitele n subcategorii i evideniaz n ce procent din total este reprezentat fiecare categorie. O formul leucocitar normal arat n felul urmtor: - Neutrofile 2.000- 8.000/ milimetru cub sau 54- 62% din totalul leucocitelor din sngele circulant Eozinofile 0700/ milimetru cub sau 0-7% din leucocite Bazofile 0200/ milimetru cub sau 02% din leucocite - Limfocite 1.000- 4.000/ milimetru cub sau 20 -55% din leucocite Monocite 01.000/ milimetru cub sau 0-15% din leucocite Numrul polimorfonuclearelor din snge este un indicator al strii de aprare a organismului. Cnd numrul lor crete nseamn c organismul se lupt cu un proces infecios dar creterea este i un indiciu bun, deoarece nseamn c mduva este capabil s mobilizeze suficiente celule de aprare imun care s lupte cu infecia. n momentul cnd concentraia polimorfonuclearelor din snge este sczut, prognosticul este n general nefavorabil, deoarece acest lucru poate indica incapacitatea organismului de a lupta cu infecia.

Leucocitoza
Reprezint creterea numrului de leucocite prin creterea produciei leucocitare n mduva osoas i creterea descrcrii acestora n sngele circulant. n leucocitoza care apare n inflamaiile acute cresc n general polimorfonuclearele cu predominana creterii neutrofilelor (neutrocitoz), polimorfonuclearele putnd ajunge chiar i la 50.000 pe milimetru cub de snge (polinucleoz). Cazurile n care cresc leucocitele sunt determinate de: septicemii, pneumonii, abcese piogene, flegmoane, apendicite (forme uoare 10.000- 15 000 de leucocite, forme severe cu peritonit - 50.000 de leucocite), reumatism, distrugeri tisulare (infarct miocardic, arterit obliterant, infarct splenic sau mezenteric etc.) n infeciile amigdaliene (faringit acut streptococic, herpangin, mononucleoz infecioas etc), dentare (gingivite, carii dentare) i n infeciile de tract urinar creterea este moderat. i n neoplazii apar creteri ale leucocitelor, determinate de moartea celulelor maligne cu necroza esutului tumoral n momentul n care tumora este de mari proporii. Cel mai frecvent polimorfonuclearele cresc atunci infecia are localizare periferic aprnd att o hiperfuncie medular cu producere n exces de leucocite ct i

odescrcare crescut a leucocitelor din depozite. Creterea datorat hiperfunciei medulare se face pe seama leucocitelor imature, tinere, nesegmentate. Pentru fiecare neutrofil matur circulant descrcat din depozitele medulare, din mduva osoas rezult i 50 -100 neutrofile imature care ajung n sngele periferic urmnd s se matureze i s se activeze ulterior, ca urmare a mediatorilor descrcai n procesul de inflamaie. Predominana elementelor tinere n sngele periferic se numete deplasare ctre stnga a formulei leucocitare. Acesta este un semn al hiperfunciei medulare cu producere n exces de elemente celulare imature i inactive. n infeciile cronice, numrul de neutrofile este redus, leucocitoza meninndu-se pe baza creterii treptate a limfocitelor circulante productoare de anticorpi, pe msur ce neutrofilele se reduc ca numr. Leucocitoza cu creterea numrului de eozinofile apare n bolile alergice (oc anafilactic, astm bronic alergic, eczeme cutanate, rinite alergice) i parazitare (n special parazii intestinali). Leucocitoza cu predominena elementelor tinere i deplasare ctre stnga a formulei leucocitare apare n leucemii.

Leucopenia
Reprezint scderea numrului de leucocite din sngele periferic i apare atunci cnd mduva osoas hematogen produce un numr foarte mic de leucocite. Astfel, imunitatea organismului este compromis, nemaiputnd-use realiza aprarea mpotriva agenilor patogeni. Organismul uman nu este steril ci dimpotriv, colonizarea mucoaselor cu bacterii saprofite (nepatogene pentru organism n condiii normale) este obinuit. Cavitatea bucal conine pneumococi, streptococi i spirochete iar tractul gastro-intestinal este colonizat cu bacili colonici precum E-Colli i bifidobacterii. Exist bacterii permanent i pe suprafeele oculare, n uretr i n vagin. Cnd numrul de leucocite scade, are loc invazia esuturilor adiacente de ctre bacteriile saprofite care se transform n bacterii parazite cu efect patogen asupra organismului. Se produc astfel ulceraii bucale, colonice, infecii vaginale frecvente cu Candida Albicans sau infecii respiratorii severe. Bacteriile ptrund rapid n circulaia sistemic i decesul va surveni n mai puin de o sptmn de la instalarea leucompeniei acute, n cazul n care nu se efectueaz un tratament corespunztor. Iradierea organismului cu raze gamma sau raze X, drogurile i substanele chimice care conin hidrocarburi aromatice precum benzenul i antracenul, cloramfenicolul (antibiotic), thiouracilul (medicament pentru tratamentul crizei tireotoxice), hipnoticelei barbituricele pot produce leucopenie ocazional i se va declana astfel o cascad infecioas. Dac mduva osoas este moderat afectat de iradiere, unele celule stem, mieloblatii i hematocitoblatii pot rmne intaci i sunt capabili s regenereze mduva. Dup tratament cu transfuzii i antibiotice pentru combaterea infeciei se va produce mduv o soas nou i concentraia leucocitelor va reveni la normal dup cteva sptmni. Leucopenia caracterizeaz i: infecia gripal, febra tifoid sau infeciile grave n care capacitatea de aprare a organismului a fost paralizat din cauza suprasolicitrii producerii de elemente figurate n cadrul mduvei osoase hematogene.

Agranulocitoza este un caz extrem de leucopenie, n care mduva osoas nu mai poate produce leucocite datorit unui fenomen denumit aplazie medular. n acest moment, numrul de polimorfonucleare poate scdea la sub 200 pe milimetru cub de snge uneori chiar la zero elemente leucocitare pe milimetru cub. Cele mai frecvente cauze ale aplaziei sunt toxice sau infecioase i datorate n principal expunerii la hidrocarburile aromatice din pesticide, droguri ilegale i cloramfenicol, antibiotic retras de pe pia n unele ri i folosit n alte ri doar n cazul n care nu exist alternativ.

Leucemiile
Mutaia neoplazic a unei celule stem din mduva hematogen poate determina producerea necontrolat de leucocite. Apare astfel leucemia caracterizat prin creterea anormal de leucocite din sngele circulant. Leucemiile pot fi de dou felulri: limfocitare i mielocitare. Leucemiile limfocitare sunt determinate de producia de celule limfoide neoplazice n exces. Producia ncepe de obicei n ganglionii limfatici i se rspndete ulterior n alte zone ale organismului Leucemia mielocitar este cauzat de producia neoplazic n mduva osoas a unor celule tinere mielogene care se rspndesc n organism i determin producia de leucocite i n celelalte celule extramedulare precum ganglioni limfatici, splin i ficat. Procesul neoplazic din leucemia mielocitar produce celule leucocitare cu forme bizare i nedifereniate care nu pot fi ncadrate n niciuna dintre categoriile normale de leucocite. Cu ct celulele sunt mai nedifereniate cu att leucemia este mai acut i conduce la deces n cteva luni n lipsa tratamentului. Cnd celulele au grad mai mare de difereniere leucemia este cronic i se poate dezvolta lent, n 10- 20 de ani. Celulele leucemice nu pot asigura protecie mpotriva infeciilor fiind tinere i nefuncionale. Proliferarea elementelor celulare tinere, nedifereniate n leucemie va determina invazia oaselor din vecintate rezultnd durere, incapacitate funcional i ulterior fracturi spontane. Leucemiile disemineaz n splin, ganglioni limfatici, ficat i alte zone vascularizate,indiferent dac originea lor este n mduva hematogen sau n ganglioni. Efectele leucemiei sunt: infeciile, anemia sever i tendina la sngerare cauzat de producia sczut de tromobocite, efecte care au loc datorit nlocuirii mduvei osoase normale i a celulelor limfoide capabile s apere organismul cu celule leucemice nedifereniate i nefuncionale. n leucemie rezervele metabolice ale organismului sunt utilizate n exces de ctre celulele neoplazice deoarece producia de celule leucemice este foarte rapid i n cantitate mare i necesit muli aminoacizi specifici, factori nutritivi i vitamine care sunt preluate din rezervele organismului. Prin urmare sursele de energie ale bolnavului sunt rapid utilizate i proteinele tisulare normale din organism se degradeaz datorit prelurii aminoacizilor eseniali n producia de celule leucemice. Prin urmare pe msur ce esuturile invadate de celulele leucemice se dezvolt n exces, celelalte esuturi vor fi foarte slbite, iar dac epuizarea metabolic este constant i continu timp ndelungat, ea poate cauza decesul organismului afectat.

Neutrofilele
Sunt polimorfonuclearele care predomin n procesul de inflamaie acut fiind cele care determin leucocitoza care apare n faza acut a unei infecii. Se numesc i celule granulare deoarece au n citoplasm granulaii fine care se coloreaz cu colorani neutri. Nucleul lor este multilobat i de aici denumirea de polimorfonucleare.

Formarea neutrofilelor 2/3 din leucocitele circulante care provin din mduva osoas hematogen sunt neutrofile. Primul precursor al seriei neutrofilelor este mieloblastul care are dimensiune dubl fa de neutrofilul matur. Urmtorul precursor este promielocitul care este de 2, 5 ori mai mare dect neutrofilul matur fiind cel mai mare dintre precursori. Granulaiile primare azurofile specifice neutrofilelor se matureaz din cisternele Golgi ale promielocitului. Caracterul azurofil sau uor bazic al granulaiilor este dat de faptul c se coloreaz albastru cu colorantul Wright. Odat cu diviziunea promielocitului nceteaz producerea granulelor i ele se distribuie n citoplasma celulelor fiice.
Din diviziunea promielocitului rezult mielocitul care are aceleai dimensiuni ca i mieloblastul. Granulaiile secundare sunt specifice pentru mielocit. Aceste granulaii sunt specifice pentru neutrofile. Granulaiile primare conin mieloperoxidaz, hidrolaze acide i substane bactericideprecum lactoferina i lizozimul. Granulaiile secundare sunt mai mici i mai puin dense i nu conin mieloperoxidaz dar au n structura lor fosfataz alcalin i lizozim. Din maturarea mielocitului rezult neutrofilul. Aceast maturare nu se face cu diviziune celular, ci se realizeaz prin diferenierea i maturarea componentelor mielocitului care ajung la structura i morfologia matur a neutrofilului. Neutrofilul matur conine microfilamente de actin i miozin adiacente membranei plasmatice care se contract i faciliteaz procesul de locomoie i diapedez al neutrofilelor. Neutrofilul nu are nucleol i cromatina sa este segmentat, fapt pentru care el nu se divide. Dup ce neutrofilul se matureaz, gradul de plasticitate al membranei sale va crete, deoarece sarcina negativ de pe suprafaa membranei plasmatice scade. 90% dintre neutrofilele care s-au maturat se depoziteaz n mduva osoas. n momentul n care se produce procesul inflamator, majoritatea ajung n circulaia sistemic.

Funciile neutrofilelor 1. Sunt primele care ajung n zona lezat n cadrul procesului inflamator. Chemotaxia este mecanismul prin care ele sunt direcionate ctre procesul lezional, iar deplasarea neutrofilelor se face prin diapedez.
2. Fagocitoza este principala funcie a neutrofilelor ntruct ele nglobeaz bacteriile n vezicula de fagocitoz supunndu-le apoi aciunii enzimelor litice lizozomale. Vor fagocita cantiti de bacterii mult mai mici dect macrofagele, pot ngloba particule bacteriene de dimensiuni reduse i nu pot fagocita virusuri i parazii, acestea fiind fagocitate de ctre macrofage care au capacitate mai mare de liz.

Eozinofilele

Reprezint aproximativ 2% din totalul leucocitelor fiind fagocite slabe care manifest chemotactism ns, spre deosebire de neutrofile ele nu ofer protecie mpotriva infeciilor obinuite cu care se lupt organismul. Ca structur, nucleul lor este bilobat sau n desag i se coloreaz portocaliu n coloraia Romanofsky, avnd granulaii acidofile. Apar n numr foarte crescut n infeciile parazitare migrnd ctre esuturile infectate cu parazii. Dei majoritatea paraziilor au dimensiuni foarte mari, neputnd fi fagocitai nici de eozinofile nici de celelalte fagocite, eozinofilele se prind pe suprafaa lor prin molecule de suprafa speciale i elibereaz substane litice capabile s distrug foarte multe categorii de parazii. De exemplu, n schistosomiaz, o parazitoz frecvent n rile tropicale i subdezvoltate eozinofilele se leag de formele tinere ale parazitului i le distrug n mare majoritate. Distrugerea se face prin eliberarea din granulele eozinofilelor care conin lizozomi a unor enzime hidrolitice, prin eliberarea unor forme foarte reactive de oxigen, i anume peroxizi care sunt letali pentru parazii i prin eliberarea din granule a unui polipeptid cu specificitate foarte mare pentru larvele de parazit pe care le distruge, numit protein bazic major. n cazul altei parazitoze numit trichineloz, care apare prin invazia muchilor striai de ctre parazitul Trhichinella dup consumul de carne de porc infestat i insuficient preparat termic eozinofilele cresc foarte mult ca numr i distrug larvele prin enzimele litice lizozomale. Alt rol al eozinofilelor este acela de a se acumula n esuturile n care apar reaciile alergice precum esuturile peribronice din plmnii persoanelor care sufer de astm bronic sau subcutanat, dup o reacie alergic tegumentar. Eozinofilele au n granulaiile lor substane ce mediaz procesul de anafilaxie precum histamin, heparini SRSA (Slow releasing substance of anaphylaxis) precum i leucotrienele C4, D4 i E4care rezult din degradarea acidului arahidonic pe calea lipooxigenazei. n alergii se dezvolt hipersensibilitatea de tip I i anume hipersensibilitatea imediat mediat de imunoglobulina E, i n momentul cnd se elibereaz histamin mpreun cu alte substane vasoactive din granulele bazofilelor se va produce chemotactismul eozinofilelor care vor migra ctre esuturile fcu inflamaie alergic. Dac eozinofilele nu pot mpiedica extinderea excesiv a procesului inflamator se va produce ocul anafilactic care necesit intervenie rapid n camera de urgene cu adrenalin i hemisuccinat de hidrocortizon intravenos.

Bazofilele
Bazofilele circulante mobile sunt similare ca structur i funcii mastocitelor staionare aflate n esuturi. Att mastocitele, ct i bazofilele elibereaz bradikinin i serotonindin granulaiile lor care sunt bazofile (albastre) n coloraia Wright. Joac unr rol important n anumite categorii de reacii alergice determinate de imunoglobulina E care are proprietatea de a se ataa de mastocite i bazofile. Cnd un antigen specific anticorpului IgE reacioneaz cu IgE, se va produce legarea antigen-anticorp care va determina distrugerea mastocitelor sau bazofilelor i eliberarea de histamin, bradikinin, serotonin, heparin, substan lent reactiv a anafilaxiei i enzime lizozomale. Rezult astfel reacii vasculare i tisulare locale care determin o mare parte dintre reaciile alergice, bazofilele avnd rol att n hipersensibilitatea de tip I sau imediat mediat de IgE, ct i n hipersensibilitatea de tip IV sau ntrziat precum dermatita de contact.

Sistemele bactericide ale polimorfonuclearelor

Dup ce un polimorfonuclear fagociteaz un microorganism n vezicula de fagocitoz, sunt activate mecanismele responsabile de liza celulei ingerate. Aceste mecanisme sunt reprezentate de sistemul bactericid independent de oxigen i sistemul bactericid dependent de oxigen.

Sistemul bactericid independent de oxigen Cuprinde ca enzime proteazele acide, proteazele neutre i lizozimul. Lor li se adaugmediul acid existent n vezicula de fagocitoz i lipsa substanelor nutritive, condiii incompatibile cu viaa bacteriei ingerate. Mediul acid al vacuolei de fagocitoz are efect bactericid datorit metabolizrii anaerobe a glucozei cu producere de acid lactic. Ca rezultat, pH-ul va scdea n cteva minute i celula bacterian va fi distrus.
Granulaiile neutrofilelor denumite fagocitine.Acestea conin proteine au bazice bogate activitate n lizin litic.

Proteazele neutre sunt enzime care se gsesc tot n granulaiile neutrofilelor i au un pH optim al activitii cu valoarea 7. Elastaza aparine acestei categorii i este o enzim care cliveaz proteine ale esutului conjunctiv precum colagen, reticulin, elastin dar i fibrinogen. Hidrolazele acide sunt reprezentate de catepsinele B, D i E i sunt situate n granulaiile azurofile realiznd digestia final a proteinelor. Lizozimul este o enzim bactericid localizat n granulaiile primare i secundare ale neutrofilelor. Ca structur este o muraminidaz cationic ce atac mureina, protein din alctuirea peretelui bacterian care reprezint structura de rezisten a peretelui celular. Dup distrugerea mureinei celula bacterian se lizeaz deoarece nu mai este protejat osmotic. Pe lng acest efect bactericid, lizozimul are i un efect bacteriostatic deoarece perturb procesele de oxido-reducere bacterian i blocheaz procesele de cretere i diviziune. Lactoferina este o enzim bazic, funcionnd la un pH de 8, 7 avnd funcia de sechestrare a fierului, prin urmare inhib activitile vitale bacteriene dependente de ionul de fier. Are efect bacteriostatic. Defensinele sunt enzime proteice cu greutate molecular mic bogate n cistein care formeaz 30 -50 % din structura granulaiilor azurofile ale polimorfonuclearelor. Au spectru larg de aciune fiind linie de aprare mpotriva bacteriilor gram pozitive, gram negative, fungi, celule maligne, virusuri. Acioneaz prin formarea de canale n membrana acestor microorganisme. Oxidul nitric rezult n urma aciunii oxid-sintetazei ce se formeaz n urma dezaminrii aminoacidului L-arginin. Acioneaz asupra agenilor patogeni intracelulari, ns spectrul su de aciune este larg cuprinznd aprarea mpotriva: Mycobacterium Tuberculosis, Leishmania, Toxoplasma gondii, Mycobacterium Leprae i Chlamydia Trachomatis.

Sistemul bactericid dependent de oxigen

Este esenial pentru funcionarea polimorfonuclearelor. Intensificarea brusc a respiraiei celulare se produce n neutrofil imediat dup ce acesta a ingerat o bacterie. Metabolismul oxidativ mitocondrial este mult intensificat i o parte din oxigen este folosit pentru producerea radicalilor liberi de oxigen, toxici pentru microorganismul fagocitat n vezicula de fagocitoz. Prin acceptarea unui electron, ionul de oxigen fie se transform n anionul superoxid, fie n radical peroxi (OH) . Aceti doi radicali ai oxigenului acioneaz ntr-o reacie de dismutaie n care unul se reduce i cellalt se oxideaz i rezult oxigen i peroxid de hidrogen (ap oxigenat) care sunt toxici. O enzim toxic ce acioneaz pe cale aerob este mieloperoxidaza lizozomal care are efect litic asupra bacteriilor, fungilor, protozoarelor, helminilor, celulelor normale i celulelor maligne.

Deficitele sistemului fagocitar polimorfonuclear n momentul n care polimorfonuclearele sunt incapabile s participe n reacia imun, rezistena organismului contra infeciilor este mult sczut.
Neutropeniile sunt cele mai frecvente deficite ale sistemului polimorfonuclear. Cnd acestea scad sub 1000 pe milimetru cub de snge riscul de infecii crete foarte mult, iar cnd acestea scad accentuat ajungnd la sub 200 pe milimetru cub, aprarea antiinfecioas este aproape inexistent decesul putnd surveni chiar dup infecii banale cu saprofii. Neutropenia are ca i cauz fie producia medular insuficient fiesuprasolicitarea mduvei cu incapacitatea funcional de a mai produce polimorfonucleare neutrofile. Incapacitatea funcional a mduvei se constat n sepsis, acesta fiind o infecie sistemic, generalizat a organismului caracterizat prin bacteriemie. n prim faz se activeaz toate mecanismele de aprare cu leucocitoz ns, dac infecia nu este nvins i se ajunge la septicemie, mduva este suprasolicitat i nu mai produce neutrofile ajungndu-se la neutropenie sever care este factor de prognostic prost n sepsis, uneori chiar cauza decesului. n afar de deficitele de numr ale neutrofilelor exist i deficite funcionale ale acestora precum: Deficitele de aderen care se datoreaz absenei unei glicoproteine membranare fapt care mpiedic migrarea extravascular a polimorfonuclearelor. Infeciile bacteriene i fungice recurente sunt frecvente la aceti pacieni. Metabolismul oxidativ deficitar este un alt deficit funcional, ingestia bacteriei nefiind urmat de activarea metabolismului oxidativ, prin urmare nu se vor produce radicali letali de oxigen precum ionul hidroxil i anionul superoxid. Crete incidena infeciilor cu bacterii catalazo-pozitive aerobe i pacientul va suferi infecii trenante i recidivante cu levuri (Candida), fungi (Asperigillus fumigatus) i bacterii. Reaciile inflamatorii vor fi ample i vor rezulta granuloame datorit incapacitii de a activa agenii chemoatractani i de a degrada antigenul.

Reacia imun
Mecanismele de aprare ale organismului rspund ntotdeauna cnd acesta se confrunt cu invazia unor antigene care au structur diferit fa de structurile celulare normale ale organismului. Cu ct structura antigenului este mai diferit fa de structurile organismului, cu att reacia mpotriva sa va fi mai agresiv. Aprarea mpotriva antigenelor care sunt denumite structuri non-self deoarece difer mult de structurile self normale este realizat de ctre sistemul imunitar.

Rspunsul imun este definit ca fiind un ansamblu de fenomene care se desfoar n cascad, ce apar ca urmare a interaciunii specifice a sistemului imunitar cu antigenul. Aceast interaciune determin activarea, proliferarea i diferenierea celulelor imunocompetente cu apariia celulelor efectoare i a celulelor cu memorie.

Caractere generale ale rspunsului imun

Exist dou tipuri de rspuns imun i anume rspuns imun umoral i rspuns imun celular, cu diferene n ce privete modul de declanare i cascada de reacii imune, ns ambele tipuri au anumite caracteristici comune: - Caracter adaptativ - reprezint proprietatea rspunsului imun de a se orienta specific fa de substanele non-self. Implic i recunoaterea antigen-specific, conform creia celulele imune sunt programate s recunoasc anumite antigene. - Caracter economic - n momentul n care rspunsul imun se declaneaz, nu vor prolifera toate celulele sale ci numai clonele de limfocite care au recunoscut specific epitopii antigenului, recunoaterea fiind astfel antigen-specifice i se formeaz complexe imune antigen-anticorp. - Caracter eficient - reacia imun, odat declanat se autoamplific prin proliferarea celulelor imune implicate n rspunsul imunitar, proliferare care este de dou tipuri: proliferare masiv a celulelor cu realizarea de pn la 8 generaii de clone limfocitare specializate i producerea de cantiti mari de molecule de recunoatere antigenic i de citokine - Caracter de reea - celulele rspunsului imun nu acioneaz independent ci sunt conectate permanent ntre ele prin legturile intercelulare i prin aciunea autocrin, paracrin sau endocrin a interleukinelor i a celorlaltor clase de citokine.

Rspunsul imun umoral

Este declanat de ctre antigenele timo-dependente i are la baz o cooperare celular la care particip urmtoarele celule: 1. Celulele prezentatoare de antigen (CPA) care prezint substana non-self ctre limfocite. Majoritatea CPA (macrofage, celule dendritice, limfocite) pot participa la rspunsul imun umoral. 2. Limfocitele cu rol imunoregulator care sunt limfocitele T helper ce amplific cascada de reacii din desfurarea rspunsului imun umoral i limfocitele T supresoare care diminu intensitatea cu care se produce cascada de reacii imune. 3. Limfocitele B care sunt celulele efectorii finale ale rspunsului imun umoral deoarece produc anticorpi sau imunoglobuline. Antigenele native sunt prelucrate n celulele prezentatoare de antigen i sunt procesate cu rezultarea de epitopi care sunt fragmente antigenice care vor fi prezentate ulterior pe membrana CPA mpreun cu Complexul Major de Histocompatibilitate ctre limfocitele cu rol imunoregulator (Limfocite T helper sau T supresoare).

Cooperarea celule prezentatoare de antigen - limfocite Este bidirecional fiind alctuit din

dou

etape:

1. Etapa efectorie sau de activare n cadrul creia semnalele se produc dinspre celula prezentatoare de antigen ctre limfocitul T helper care va trimite mai departe semnalul ctre limfocitul B efector. Aceast secven cuprinde totalitatea influenelor stimulatorii care se produc dinspre CPA nspre limfocitele B, influene care au ca rezultat final

activarea limfocitelor B. Prin urmare sunt ndeplinite 3 procese majore de baz n reacia imun umoral i anume: selecia clonal a limfocitelor T helper i a limfocitelor B, activarea i expansiunea clonal a limfocitelor B i T helper i n final este generat o cantitate adecvat de anticorpi care va neutraliza, ndeprta i distruge antigenul. 2. Etapa inhibitorie sau retrocontrol este declanat mai trziu i este constituit de activarea limfocitelor T supresoare care produc i elibereaz factori inhibitorii care inhib limfocitele B, limfocitele T helper i celulele prezentatoare de antigen. Etapa inhibitorie a rspunsului imun umoral este vital deoarece este un mecanism de protecie care reduce intensitatea rspunsului imun la un minim necesar pentru a evita expansiunea exagerat a clonelor de limfocite B i T helper i de asemenea de a evita generarea unei cantiti mult prea mari de anticorpi, att expansiunea exagerat a clonelor limfocitare, ct i producia excesiv de anticorpi fiind procese care ar putea sta la baza unor reacii autoimune. Homeostazia reaciei imune umorale este dat de echilibrul care exist ntre cele dou secvene, efectorie i retrocontrol. Cooperarea dintre cele trei tipuri celulare care particip la rspunsul imun umoral nu se realizeaz ntr-o singur etap ntruct cele trei celule sunt distribuite n zone tisulare diferite din organism i anume: CPA sunt distribuite intratisular, limfocitele T helper se afl n ariile timodependente ale organelor limfoide secundare, iar limfocitele B se afl n ariile bursodependente din organele limfoide secundare. Pentru ca cooperarea intercelular s se realizeze este obligatorie migrarea celulelor ditnr-o arie n alta prin urmare: CPA migreaz din esuturi n ariile timodependente ale organelor limfoide secundare i se produce cooperarea CPA- limfocite T helper. Apoi limfocitele T helper vor migra n ariile bursodependente ale acelorai organe limfoide secundare i se produce cooperarea dintre limfocitele T helper i limfocitele B care n final se transform n plasmocite i ncep s produc anticorpi specifici.

Etapele cooperrii celulare Cooperarea celular ncepe cu preluarea antigenelor timo-dependente de ctre celulele prezentatoare de antigen reprezentate de macrofage i celulele dendritice. Apoi, CPA vor prelucra antigenele respective, vor extrage epitopii i i vor prezenta mpreun cu moleculele MHC II ctre limfocitele T helper care posed pe suprafaa lor T cell Receptor.Aceasta este cooperarea cognitiv. Celulele prezentatoare de antigen produc interleukina 1 care va activa parial limfocitele T helper care vor migra n ariile burso-dependente din organele limfoide secundare i se vor transforma n limfoblati T helper. Aceasta este cooperarea non-cognitiv. Unele antigene timo-dependente nu sunt preluate de ctre CPA astfel nct ele vor ajunge n circulaia limfatic a organismului care le va transporta pn la ariile burso-dependente din organele limfoide secundare (splin i ganglioni limfatici). Aici, antigenele vor fi recunoscute de ctre limfocitele B antigen-specifice care se vor activa parial i se vor transforma n limfoblati B. Limfoblatii B nu vor migra din ariile bursodependente. Dup ce se produce activarea limfocitelor B se va produce cooperarea dintre limfoblatii T helper i limfoblatii B i va avea loc recunoaterea i prezentarea antigenului. 1. Cooperarea CPA- Limfocit T helper Are loc n ariile timodependente ale organelor limfoide secundare i dup cum a fost specificat mai sus, este de dou tipuri, cognitiv i non-cognitiv, tipuri care vor fi detaliate mai jos. Cooperarea cognitiv ncepe cu realizarea primelor contacte ntre celulele prezentatoare de antigen i limfocitele T helper prin receptorii de adeziune intercelular care sunt

mprii n dou categorii: - Culplu de adeziune intercelular de linia 1 reprezentat de contactele dintre CD2 de pe limfocitele T helper i LFA 3, receptor de pe membrana celulei prezentatoare de antigen. Se produc contacte ferme i n numr mare ntre cele dou celule prin aceti 2 receptori membranari. - Cuplu de adeziune intercelular de linia 2 care se produce ntre receptorii LFA 1 aflat pe limfocitele T helper i ICAM aflat pe celula prezentatoare de antigen. Aceti doi receptori au afinitate reciproc mult mai mic unul pentru altul, dect au receptorii din cuplul de adeziune intercelular de linia 1 Cele dou cupluri de adeziune intercelular realizeaz contacte strnse i pe suprafee foarte mari ntre CPA i limfocitele T helper, contacte care favorizeaz foarte mult prezentarea i recunoaterea antigenelor sau substanelor non-self. Cooperarea non-cognitiv se produce prin intermediul interleukinei 1 fr de care ar fi imposibil activarea limfocitului T helper la un nivel suficient pragului de declanare al rspunsului imun umoral. Astfel, interleukina 1 produs de celula prezentatoare de antigen este receptat de ctre IL 1 receptor aflat pe suprafaa membranei limfocitului T helper. Se declaneaz astfel stimul activatori care determin creterea mitozelor limfocitului T helper i activarea a dou gene nucleare ale limfocitului, gena pentru interleukina 2 i gena pentru receptorul interleukinei 2 care este receptorul CD 25. Prin urmare, datorit activrii acestor gene limfocitele T helper ncep s produc interleukin 2 care se poate activa printr-o bucl autocrin astfel nct, pe toat durata rspunsului imun umoral se produc cantiti suficiente i constante de Interleukin 2 pe seama mecanismului modulat de bucla autocrin. Rezultatul final al cooperrii non-cognitive este activarea limfocitului T helper care se matureaz i se difereniaz rezultnd diverse clase de limfocite T helper care vor participa la rspunsul imun umoral.

Clase de limfocite T helper Sunt clasele celulare care apar numai n timpul cooperrii dintre limfocitul T helper i celula prezentatoare de antigen. Toate clasele de limfocite T helper sunt identice ntre ele morfologic i fenotipic deoarece au aceeai structur celular i prezint aceiai recepori specifici de membran i anume CD4 i CD28. Singura diferen dintre clasele limfocitare T helper este dat de faptul c produc tipuri diferite de interleukine. Clasele sunt urmtoarele: a. Limfocitele T helper imature sau naive (LTHp) care nu au venit niciodat n contact cu antigenul specific, ele coninnd toate genele pentru interleukina 2 care sunt inhibate n acest stadiu. b. Limfocitele T helper de tip zero (LTH0) apar n momentul n care genele pentru interleukin 2 ale limfocitelor T helper naive sunt dezihibate i devin active i ncepe producerea interleukinei 2, ns n cantiti reduse, ele nu pot contribui la realizarea rspunsului imun. Dac n organele limfoide secundare exist limfocite B activate i capabile s produc anticorpi, atunci LTH0 se vor activa i ele i se vor transforma n limfocite T helper mature. c. Limfocitele T helper de tip 1 (LTH1) sunt celulele care amplific rspunsul imun celular, nu au rol n reacia imun umoral. Produc cantiti foarte mari de interleukin 2, interferon gamma, TNF alfa i interleukin 3. d. Limfocitele T helper de tip 2 (LTH 2) sunt celulele care amplific rspunsul imun umoral i produc cantiti foarte mari de Interleukin 4, 5, 6 i 10.
Transformarea limfocitelor T helper 0 n limfocite T helper 1 sau T helper 2 se realizeaz i n funcie de mecanismul de excludere reciproc care const n dou procese foarte importante:

- Inhibarea formrii de Limfocite T helper 1 de ctre formarea de limfocite T helper 2 - Inhibarea formrii de limfocite T helper 2 de ctre formarea de limfocite T helper 1. Limfocitele T helper 1 inhib formarea limfocitelor T helper 2 prin secreia de interferon Gamma care are efect distructiv asupra limfocitelor T helper 2. Limfocitele T helper 2 inhib formarea de limfocite T helper 1 prin secreia de interleukin 10 care are efect apoptotic asupra limfocitelor T helper 1.

Interleukinele implicate n reacia imun umoral Interleukina 2 este produs de ctre limfocitele T helper p, T helper 1 i T helper 0 care vor produce interleukin 2 doar dac sunt stimulate complet fie de ctre antigen(stimulare cognitiv) fie de ctre interleukina 1 (stimulare non-cognitiv) . Interleukina 2 are att efect autocrin prin activarea buclei autocrine de autoproducere a interleukinei 2 de ctre aceeai celul care a nceput producia iniial de interleukin 2 i efect paracrin prin stimularea produciei de interleukin 2 i de ctre alte celule precum limfocitele B, limfocitele T citotoxice i celulele Natural Killer. Interleukina 2 va stimula receptorii CD 25 i are efecte diferite n funcie de celulele care o produc prin urmare dac este produs de ctre limfocitele T helper 1 ea va stimula rspunsul imun celular i dac este produs de ctre limfocitele T helper p va stimula rspunsul imun umoral.
Interleukina 4 stimuleaz rspunsurile imune secundare care se produc la un contact ulterior cu antigenul i n care sunt implicare limfocitele cu memorie. Aceast interleukin stimuleaz mduva hematogen pentru creterea produciei de limfocite B, crete expresia moleculelor MHC II pe suprafaa celulelor prezentatoare de antigen i stimuleaz producia de imunoglobulin G de ctre limfocitele B, producie carea pare ca urmare a inhibiiei produciei de imunoglobuline M prin mecanismul de switch imunologic. Reiese faptul c interleukina 4 joac un rol vital n reacia imun fiind responsabil de comutarea izotipic a anticorpilor de tip imunoglobulin M n anticorpi de tip IgG. Se comuteaz astfel producia de anticorpi de tip IgM n producie de anticorpi de tip IgG. Interleukina 5 este produs de ctre limfocitele T helper 2 i are rol in stimularea reaciei imune ce se desfoar la nivelul mucoaselor. Ea crete producia medular de limfocite B i eozinofile, i crete producia de anticorpi de tip IgM i IgA de ctre limfocitele B. Interleukina 5 are funcii similare cu interleukina 4, fiind responsabil decomutarea izotipic (mecanismul de switch imunologic) dintre IgM i IgA cu comutarea produciei de anticorpi tip IgM de ctre limfocitele B n producie de anticorpi tip IgA.

2. Cooperarea dintre limfoblatii B i limfoblatii T helper Se face la nivelul ariilor burso-dependente din organele limfoide secundare i este ocooperare de tip cognitiv care ncepe cu recunoaterea i prezentarea antigenic. Limfoblatii B produc i expun moleculele sistemului major de histocompatibilitate II (MHC II) care intr n contact cu T Cell Receptor al limfoblatilor T helper iar ca urmare a cooperrii rezult semnale activatoare care ajung la nivelul materialului genetic al limfocitului care activeaz genele pentru interleukine. Rezultatul final al rspunsului imun umoral Este reprezentat de activarea complet a limfoblatilor B care devin plasmocite,activare datorat cooperrilor celulare i producerii de interleukine. Plasmocitele sunt celule specializate productoare de anticorpi, tipul anticorpilor depinznd de tipul de limfoblati T helper care particip la cooperare i de tipul de interleukine eliberate de aceti limfoblati.

Prin urmare dac particip limfoblatii T helper de tip p va crete producia de interleukin 2 cu sinteza de anticorpi din clasa imunoglobulinelor M. Dac particip limfoblatii T helper de tip 2 se va produce fie interleukina 4 care determin sinteza de anticorpi din clasa imunoglobulinelor G, fie interleukina 5 care determin producia de anticorpi din clasa imunoglobulinelor A. Primul contact cu un anumit antigen este caracterizat de rspunsul imun umoral cu producere de anticorpi din clasa imunoglobulinelor M. Un contact ulterior cu acelai antigen va determina un rspuns imun umoral specific, cu producere de anticorpi din clasa imunoglobulilelor G.

Rspunsul imun celular

Este tipul de rspuns imun care apare n urmtoarele condiii: - Infecia cu antigene reprezentate de microorganisme cu habitat intracelular care se inclaveaz n citoplasma celulelor somatice normale ale organismului uman. Aceste antigene pot fi reprezentate de: majoritatea virusurilor i de bacterii precum Legionella, Mycobacterium Tuberculosis i Mycobacterium Leprae, Brucella, Lysteria monocytogenes. Aprarea anticanceroas i anti-celule tumorale - Reaciile de respingere a grefelor transplantate de ctre organismul gazd Dou tipuri de celule sunt recunoscute i distruse n cadrul rspunsului imun umoral i anume: celulele self care devin celule non-self fie prin transformare malign fie prin infectarea cu microorganisme care s-au inclavat intracelular i le-au modificat genomul i celulele allogenice care apar post-transplant de gref sau organ care sunt celule non-self ce prezint pe suprafaa lor alt tip de molecule ale sistemului major de histocompatibilitate de tip I dect moleculele pe care le prezint celulele organismului gazd. Celulele care particip la rspunsul imun umoral sunt: 1. Limfocitele T citotoxice care sunt celule ce prezint citotoxicitate extracelulardatorit creia sunt capabile s distrug celulele non-self. Ele realizeaz o recunoatere imunologic specific deoarece ntrein un contact direct cu antigenul care este expus pe membrana celulelor infectate. Se produc clone specifice de limfocite T citotoxice, fiecare clon limfocitar fiind capabil s recunoasc numai un anumit tip de antigen specific. Limfocitele T citotoxice au o capacitate foarte mare de recunoatere a antigenelor deoarece populaia lor este foarte diversificat din punct de vedere clonotipic. Ele recunosc antigenele prezentate n compelx cu sistemul major de histocompatibilitate de tip 1 (MHC I) i au pe suprafaa embranei lor receptori specifici care sunt T Cell Receptori CD8. 2. Celulele Natural Killer. Spre deosebire de limfocitele T citotoxice care realizeaz o recunoatere imunologic specific prin apariia de clone limfocitare tip pentru fiecare antigen, celulele natural killer realizeaz o recunoatere imunologic de tip nespecific ntruct au contact direct cu celulele care sunt inta distrugerii fr ns a recunoate antigenele de pe suprafaa membranelor lor. Celulele natural killer nu recunosc antigenele n complex cu MHC I i nici nu prezint pe suprafaa lor receptorii necesari pentru aceast recunoatere, ntruct ele sunt T Cell Receptor negative i CD8 negative. Singurii receptori de pe suprafaa celulelor NK responsabili de recunoaterea antigenic sunt receptorii NK-R (Natural Killer- receptors) care recunosc numai celula int sau purttoare de antigen, nu i antigenul propriu-zis. Celulele natural killer reprezint prima linie de aprare mpotriva infeciilor virale i a celulelor canceroase. Fac parte din categoria de limfocite numit Large Granular Lymphocytes (sunt limfocite cu greutate molecular mare care reprezint procentual 20% din totalul limfocitelor).

3. Celulele Killer reprezint 5 % din totalul limfocitelor fiind o subclas a celulelor Natural Killer care aparine tot clasei Large Granular Lymphocytes. Realizeaz tot o recunoatere imunologic nespecific prin faptul c recunosc complexele imune membranare numai n cazul n care densitatea acestora pe membrane este foarte mic. Dac densitatea lor este mic, cascada cii clasice a complementului nu se activeaz i nu se va produce perforina, enzim litic ce perforeaz membrana celulelor int i determin moartea celular a acesteia prin mecanismul de liz osmotic.

Receptorii limfocitelor T citotoxice Sunt mprii n

categorii

anume:

1. Receptori de recunoatere antigenic reprezentai de TCR/CD3 i de CD8 i care realizeaz recunoaterea antigenic asociativ. Calea receptorului TCR/CD3 est principala cale de activare a limfocitelor T citotoxice care este ns parial, devenind total numai dup creterea secreiei de interelukin 2. Activarea total rezult numai n urma cooperrii celulare dintre limfocitele T citotoxice, limfocitele T helper de tip 1 i celulele prezentatoare de antigen. 2. Receptorii accesori n activarea limfocitelor T citotoxice care sunt CD25, CD 28 i CD45. 3. Receptorii de adeziune celular. Adeziunea celular este de dou tipuri i anume adeziune la proteinele extracelulare ale esutului conjunctiv, care este esenial pentru migrarea limfocitelor T citotoxice din vaze i pentru a ajunge la esuturile unde se desfoar rspunsul iun i adeziune intercelular care determin contacte intercelulare dintre limfocitele T citotoxice i celulele int Limfocitele T citotoxice sunt de dou tipuri i anume T citotoxice tip CD8+ sau efectorii, responsabile de distrugerea celulelor int purttoare de antigen i T citotoxice tip CD4+care sunt n numr mic i nu au funcie efectorie, ele fiind implicate n maturarea limfocitelor T helper de tip p n limfocite T helper de tip 1.

Desfurarea rspunsului imun celular Rspunsul imun celular ncepe n ganglionii loco-regionali iar fazele sale finale se desfoar n esutul care conine celulele int ncrcate cu antigen, esuturi n care se va produce acumularea intrafocal de limfocite T care sunt celule intens recirculate i nu exprim pe membrana lor receptori pentru anafilotoxinele sistemului complement. Limfocitele T prsesc circulaia sistemic numai atunci cnd n anumite esuturi exist un focar antigenic. Ca urmare a stimulilor antigenici se va produce acumularea limfocitelor T n focar. Limfocitele T naive sunt cele care nu au realizat niciodat un contact cu antigenul, primul contact al acestora cu antigenul fcndu-se la nivelul ganglionilor limfatici. Al doilea contact cu antigenul se va face la nivelul focarului tisular, moment n care limfocitele T sunt deja sensibilizate i devin din limfocite T naive limfocite T cu memorie imunologic. Cele cu memorie sunt capabile s recunoasc focarele antigenice n care exist antigene specifice, care au sensibilizat iniial limfocitele T naive. Limfocitul T ader la endoteliul vascular i ptrunde n focarul antigenic cutnd antigenul specific pentru a-l distruge. Dac ns limfocitul nu reuete s realizeze contact cu antigenul va prsi focarul i va reveni n sistemul vascular. Acesta este procesul de recirculare permanent a limfocitelor T.
Exist o difereiere funcional a limfocitelor T cu mprirea acestora n mai multe

categorii datorit faptului c ele au circuite diferite n organism, au distribuii diferite (homing diferit) i au receptori diferii (caractere fenotipice diferite). Prin urmare exist: a. Limfocite T naive care pot fi att limfocite T citotoxice ct i limfocite T helper. Ele nu au ntlnit niciodat un antigen i nu au memorie imunologic. b. Limfocite T cu memorie imunologic care pot fi tot limfocite T citotoxice i limfocite T helper care au avut contact cu antigenul specific de una sau de nenumrate ori.

Circulaia limfocitelor T naive Ele se gsesc numai n circulaia sistemic, niciodat nu vor fi depistate intratisular. Vor trece din vasele de snge n ganglionii loco-regionali prin arteriolele aferente. Trecerea din vas n mediul extravascular se face prin realizarea marginaiei cu depunerea limfocitelor T naive pe pereii vasului i stabilesc contacte cu celulele endoteliale cuboidale care protruzioneaz n lumenul capilar. n urma acestor contacte se va produce trecerea limfocitului naiv din vas n ganglionul limfatic unde staioneaz timp ndelungat pn cnd va aprea un antigen specific cu care va lua contact. Dac antigenul specific nu apare i nu i se prezint limfocitului T, atunci limfocitul va prsi ganglionul prin vasele limfatice eferente i va reveni n circulaia sistemic deplasndu-se ctre alte grupe loco-regionale de ganglioni pn cnd li se va prezenta antigenul specific. Prin recircularea limfocitelor T naive se realizeaz procesul de supraveghere imunologic a ganglionilor limfatici. Circulaia limfocitelor T cu memorie Ele se gsesc att intravascular ct i intratisular fiind singurele care sunt capabile s ptrund n esuturi. Ajunse n esuturi caut antigenul specific i dac l gsesc staioneaz foarte mult n esutul respectiv pn cnd reuesc s distrug antigenul respectiv. Prsirea focarului tisular se va face pe calea vaselor limfatice aferente cu ptrunderea limfocitelor T cu memorie n ganglionii loco-regionali unde nu staioneaz deloc ci i vor prsi pe calea limfaticelor eferente. Revin astfel n circulaie ca limfocite T cu memorie capabile oricnd s ptrund n alt focar antigenic tisular. Fazele rspunsului imun celular 1. Inducia care cuprinde toate fenomenele care au loc de la momentul n care antigenul ajunge n esutul gazd pn la generarea intraganglionar a limfocitelor T cu memorie imunologic. 2. Desfurarea propriu-zis a rspunsului imun celular care se face intratisular. Antigenele corpusculare reprezentate de bacterii, virusuri sau celule tumorale vor ajunge n esuturi unde vor fi captate de ctre celulele prezentatoare de antigen care sunt macrofagele i celulele dendritice. Celulele prezentatoare de antigen se vor activa ca urmare a contactului cu substana non-self.
Celulele prezentatoare de antigen care activeaz n cadrul rspunsului imun umoral sunt de dou tipuri: - Non-migratorii, celule care rmn n focarul antigenic intratisular n contact continuu cu antigenele declanatoare ale rspunsului imun i se activeaz complet. Au capacitate foarte mare de fagocitoz i sunt foarte citotoxice ntruct elibereaz radicali liberi de oxigen precum gruparea hidroxil i anionul superoxid. Elibereaz de asemenea o cantitate faorte crescut de interleukine proinflamatorii. - Migratorii, celule care preiau antigenul i ajung cu el n ganglionii limfatici traversnd vasele limfatice aferente ganglionare. n ganglioni ele vor ptrunde n zona paracortical unde vor prezenta antigenele ctre limfocitele T naive care devin limfocite T cu memorie

i vor ptrunde n vasele limfatice eferente ale ganglionilor respectivi ajungnd apoi n circulaia sistemic i lund drumul ctre focarul tisular antigenic. n focarul antigenic tisular are loc activarea complet a limfocitelor T cu memorie cu creterea intensitii cii clasice a complementului, eliberarea de enzime litice din clasa perforinelor i liza osmotic a celulei purttoare de antigen.

Concluzii
O niruire general a etapelor rspunsului imun, indiferent dac este umoral sau celular ar arta n felul urmtor: 1. Ptrunderea antigenului n organism care se poate realiza pe mai multe ci i anume cutanat, sangvin sau pe calea mucoaselor n special gastro-intestinale i uro-genitale. 2. Prelularea antigenului de ctre celulele prezentatoare de antigen i prezentarea lui ctre limfocite 3. Activarea limfocitelor efectoare ale rspunsului imun 4. Producerea efectorilor rspunsului imun care pentru rspunsul imun umoral sunt reprezentai de anticorpi, iar pentru rspunsul imun celular sunt reprezentai de perforine care distrug celula antigenic prin mecanismul de liz osmotic. Celulele accesorii ale rspunsului imun sunt celulele prezentatoare de antigen iar celulele efectoare sunt limfocitele B pentru rspunsul imun umoral i limfocitele T citotoxice, celulele natural killer i celulele killer pentru rspunsul imun celular. Moleculele sistemului major de histocompatibilitate au un rol esenial n prezentarea antigenului de ctre CPA ctre limfocite, ntruct limfocitele nu sunt capabile s reacioneze cu antigenele n stare nativ ci numai dup ce acestea au fost prelucrate. Moleculele MHC sunt ns recunoscute de ctre limfocite i formeaz complexe cu epitopii rezultai din prelucrarea antigenelor de ctre CPA, complexul MHC- epitopi fiind recunoscut de ctre limfocite. Activarea limfocitelor determinat de recunoaterea antigenului va declana o cascad imunologic ce are ca rezultat fie producerea de anticorpi cu distrugerea antigenelor int n cadrul rspunsului imun umoral, fie activarea unor celule efectoare cu efect citotoxic i litic care distrug celula purttoare de antigen n cadrul rspunsului imun celular.

Toxinele
Termenul de toxine este foarte larg utilizat n mass-media, fiind legat de o mulime de substane i factori din mediu precum: aditivi alimentari, substane poluante, substane iritante i ali ageni. Aceast utilizare larg a termenului de toxin este ns incorect, n lumea tiinific toxinele fiind substane secretate doar de ctre organismele vii, substane care, prin structura lor antigenic declaneaz o reacie imun. n continuare vor fi prezentate cele mai frecvente toxine i afeciunile determinate de acestea. Toxinele sunt substane antigenice periculoase produse de ctre organismele vii. Structura lor este format din lanuri de aminoacizi, fiind o structur organic proteic ce le confer caracter antigenic de non-self. Toxinele sunt produse de foarte multe microorganisme precum bacterii, fungi, alge i diverse specii de plante. Majoritatea toxinelor sunt extrem de periculoase, chiar i o cantitate mic putnd determina decesul organismului cu care au intrat n contact. Acest lucru a strnit un mare interes n folosirea lor ca arme biologice. Toxinele bacteriene Capacitatea unei bacterii de a produce toxine se numete toxinogenez. Toxinele

bacteriene se mpart n dou mari categorii n funcie de structura lor chimic: - Lipopolizaharidele produse de bacteriile gram negative, aceste toxine depozitndu-se n peretele bacterian. Proteinele produse de majoritatea bacteriilor. n funcie de locul de aciune al toxinelor exist: 1. Endotoxine care sunt practic componente structurale ale bacteriei respective i sunt localizate intracelular sau intraparietal. Lipopolizaharidele i lipooligozaharidele fac parte din aceast categorie, ambele tipuri de toxine fiind depozitate n peretele lipidic al bacteriilor gram negative (ex. E-Coli, Klebsiella, Shigella, Salmonella). Dup ce bacteriile sunt distruse, fie prin moarte celular programat, fie prin tratament cu antibiotice, endotoxinele sunt eliberate. 2. Exotoxinele sunt secretate de ctre bacterie i trimise n exterior n permanen, nu doar dup moartea bacteriei respective. Structura lor este proteic, au aciune de tip enzimatic, sunt foarte active i au o toxicitate extrem de ridicat. Structura proteic le confer caracter antigenic, ele fiind capabile s declaneze o reacie imun puternic din partea organismului gazd. Prin prelevara bacteriilor care le secret i expunerea la formol, exotoxinele se transform n anatoxine care sunt netoxice, ns capabile s declaneze rspunsul imun. Anatoxinele sunt baza vaccinurilor mpotriva infeciei cu bacterii care secret exotoxine (ex. Clostridium Tetani, Clostridium Botulinum, Bacil Difteric). Toxinogeneza reprezint un factor important de patogenitate al bacteriilor care secret exotoxine, moartea organismului expus putnd surveni rapid, dac nu se intervine cu tratament antibiotic. Riscul de oc toxic este foarte mare.

Tipuri de exotoxine
- Exotoxine care blocheaz sinteza proteic n celul - Toxina bacilului difteric. Omoar celula n care au ptruns. Neurotoxine - Toxina tetanic i Toxina botuluinic - Exotoxine modificatoare ale metabolismului celular - Toxina bacilului Holeric, Toxina Termolabil a E-Coli, toxina Pertusis. Nu omoar celula n care au ptruns, dar i modific funciile i metabolismul, fcnd-o inactiv. - Exotoxine care distrug substana fundamental a esutului conjunctiv - Clostridium Perfigens care determin gangrena gazoas.

Toxina tetanic Este produs de ctre Clostridium Tetani, o bacterie care este patogen att prin multiplicarea necontrolat la poarta de intrare n organism, ct i prin procesul detoxinogenez. Determin boala numit tetanos. Toxina tetanic este neurotrop, fiind toxic pentru celulele neuronale. Se tie c activitatea neuronilor motori spinali este inhibat de ctre glicin i acidul gama-aminobutiric, astfel nct micrile sunt controlate i tonusul muscular este constant. Toxina tetanic inhib eliberarea acestor 2 neuromediatori, fapt ce determin excitarea neuronilor motori spinali, a cror activitate nu mai poate fi inhibat. Rezult micri necontrolate sub form de spasme severe i dureroase ale musculaturii striate, ce poart denumirea de paralizie spastic.Starea de contien este ns pstrat.
Cnd toxina ajunge la sistemul nervos central prin propagare pe cale axonal se vor produce spasme ale muchilor masticatori denumite trismus (gura nu se mai poate deschide din cauza ncletrii maxilarelor de ctre contraciile musculare) i risus sardonicus (facies caracteristic tetanosului) prin spasme ale musculaturii faciale. Moartea se produce prin asfixia cauzat de paralizia spastic a muchilor respiratori(diafragm,

muchi intercostali). Poziia pe care o adopt pacientul n timpul contraciilor tetanice spastice este caracteristic i se numete opistotonus (spasm generalizat a musculaturii striate a ntregului corp care determin arcuirea trunchiului, care devine curbat, sprijinul realizndu-se pe ceaf i clcie). Simptomatologia apare n general la 4-5 zile de la contaminare ncepnd cu spasme ale musculaturii din zona contaminat care se extind ctre mucii masticatori i faciali apoi ctre ntregul corp cu declanarea opistotonusului. Atacul de tetanos este declaat de orice stimul extern. Sursa de bacili tetanici este reprezentat de intestinul omului i al animalelor care sporuleaz o dat ajuni pe sol genernd spori foarte rezisteni la condiiile de mediu extern. Poarta de intrare a bacililor tetanici n organism este de obicei o plag contaminat cu pmnt. Rspunsul imun este de tip umoral cu anticorpi specifici anti-toxin tetanic ns este slab i ineficient. Prevenia tetanosului se face prin tratarea imediat a plgilor cu risc tetanigen i eventual toaleta chirurgical a acestora cu dezinfectare n profunzime. Se face un rapel cu ATPA (anatoxin tetanic purificat i adsorbit) cu apariia anticorpilor specifici n aproximativ 2 zile. Administrarea de anatoxin tetanic este indicat o dat la 10 ani. Cazurile de tetanos propriu-zis sunt destul de rare, ns n cazul confruntrii cu un astfel de caz atitudinea este similar celei din profilaxie, cu toaleta plgii i vaccinarea ATPA dar evoluia spre deces este frecvent.

Toxina botulinic Este tot o toxin neurotrop, cu afinitate ctre sistemul nervos periferic. Este secretat de ctre Clostridium Botulinum, o bacterie care, spre deosebire de Clostridium Tetani nu se multiplic la poarta de intrare n organism ci se multiplic n alimente producnd o exotoxin. Fierberea alimentelor la 100 grade celsius timp de 20 de minute distruge exotoxina. Botulismul este practic o toxiinfecie alimentar ntruct organismul este contaminat de exotoxinele din alimente, contaminarea fcndu-se strict pe cale digestiv.
Alimentele susceptibile la infecia cu Clostridium Botulinium sunt n principal conservele pregtite n gospodria proprie neambalate i nedepozitate corect. Condiiile de anaerobioz determin multiplicarea bacteriei cu producere de spori, unul din semne fiind capacul conservei care bombeaz, care semnific multiplicarea i producerea de gaz de ctre microorganismele respective. Acestea conserve nu vor fi sub nicio form consumate. Toxina botulinic este cea mai otrvitoare toxin cunoscut pn n momentul actual. Doza letal pentru om este de 2 micrograme. Spre deosebire de tetanos care este o paralizie spastic, toxina botuluinic inhib eliberarea de acetilcolin de la nivelul plcilor neuromotorii i cauzeaz paralizia flasc.Aceasta ncepe de la extremitatea celfalic (paralizia muchilor globilor oculari, imposibilitatea de a vorbi sau a nghii) i se extinde apoi la ntregul corp. Moartea se produce tot prin paralizia muchilor respiratori ce determin asfixie. Contiena este pstrat. Tratamentul se face cu ser antibotulinic.

Toxina perfigens Este secretat de un grup de clostridii denumit Clostridiile Gangrenei Gazoase sauClostridium Perfigens. Acetia sporuleaz n condiii de anaerobioz i

elaboreaz enzime toxice care prezint tropism pentru esuturi pe care le distrug i le necrozeaz producnd gaz. Germenul se multiplic la poarta de intrare i invadeaz esuturile naintnd din aproape n aproape avnd efecte necrolitice i hemolitice cu caracter letalpe esuturi. Starea general este grav alterat. Boala produs de aceti germeni se numete gangrena gazoas iar leziunile specifice sunt caracterizate de edeme dure, crepitante (bacteriile au un metabolism anaerob producnd gaz prin fermentarea zaharurilor din esuturi) necroz i gangren.Ptrunderea clostridiilor se face ca i n cazul tetanosului, tot pe calea unei plgi contaminate. Datorit multiplicrii bacteriei i apariiei de gaz se va produce distensia esuturilor, obstrucia mecanic a capilarelor i creterea sintezei de hialuronidaz care determin diseminarea infeciei. Necroza tisular se extinde treptat odat cu creterea multiplicrii bacteriene i rezult anemie hemolitic, toxemie cu evoluie spre deces n pn la 80% din cazuri. Tratamentul trebuie fcut de urgen i const n toaleta chirurgical a plgii, administrarea de ser antigangrenos, penicilin i oxigen hiperbar care distruge bacteriile fiind letal pentru ele deoarece bacilii au metabolism anaerob.

Toxina difteric Este produs de ctre Corynebacterium Diphteriae, agent patogen identificat n secreii din tractul respirator uman. Este patogen att prin multiplicarea la poarta de intrarect i prin toxinogenez. Poarta de intrare este reprezentat de tractul respirator, leziunile tegumentare sau mucoasa genital. Inflamaia local se produce post-multiplicare apoi ncepe sinteza toxinei difterice care poate afecta orice celul din organism. Are ns tropism special pentru celulele cardiace determinnd miocardit, celulele neuronale determinnd demielinizare, celulele renale determinnd necroz tubular cu insuficien renal, celulele suprarenaliene, musculare i hepatice. Toxina are ca efect major oprirea brusc a sintezei proteice cu efecte necrotice asupra celulelor din esutul pentru care are tropism.
n cteva zile de la debutul infeciei, bacteria va sintetiza o structura tip membran alctuit din fibrin, leucocite, eritrocite i celule epiteliale respiratorii distruse, la care se adaug bacteriile moarte. Aceast structur are caracter de fals membran.(diphtera = membran). Dac se ncearc ndeprtarea acestei membrane, rezult sngerri ale mucoasei din cauza ruperii capilarelor. Falsa membran se poate forma amigdalian, faringian, nazal sau genital i se va extinde cu obstrucionarea arborelui traheo-bronic i asfixie mecanic, determinnd crupul difteric. Sub falsa membran are loc multiplicarea bacilului cu sinteza de toxin i producerea de tulburri la distan (miocardit, demielinizri, insuficien renal). Mortalitatea crete cu ct diagnosticul este mai tardiv. n ultimii 17 ani nu au mai fost nregistrate cazuri n Romnia. Tratamentul const n administrarea de ser antiddifteric (anatoxin difteric), ns aceast anatoxin va neutraliza numai toxina difteric circulant. Se adaug deci antibiotice precum eritromicina sau penicilina G pentru neutralizarea organismului care nu va mai produce astfel toxin. Tratamentul dureaz 2 sptmni. Vaccinarea DTP (diftero- tetano- pertusis) este obligatorie la orice nou-nscut n ara noastr.

Endotoxinele

Sunt trimise n organismul gazd doar dup moartea bacteriei care le-a produs, ntruct sunt parte a structurii peretelui celular lipidic al bacililor gram negativi. Structura primar a endotoxinelor acestor bacili const n lipidul A care este un glicofosfolipid ce nconjoar miezul (core) alctuit din zaharuri, etanolamin i acid fosforic. O alt component este Antigenul O care este specific fiecrei specii de bacil, fiind un lan lung de zaharide. Lipidul A este partea activ a tuturor endotoxinelor. Celelalte componente joac rol decarrier (purttor), fapt dovedit de aceea c lipidul A este inactiv cnd este separat de antigenul O i de miez. Spre deosebire de exotoxine, care au efecte specifice n funcie de specia de bacterie care le sintetizeaz, endotoxinele au aceleai aciuni asupra gazdei, indiferent de bacilul gram negativ care le secret. Dup liza bacteriilor secretante, endotoxinele produc diverse efecte n organismul gazd, n funcie de cantitatea lor care depinde de numrul de bacili distrui. Cantitile mici de endotoxine rezultate n urma distrugerii unui numr mic de bacterii declaneaz reacii de alarm precum febra. Experimental s-a determinat c febra se produce la injectarea a 100 nanograme de endotoxin intravenos, aceast cantitate corespunznd distrugerii a 10 milioane de bacterii. Macrofagele detecteaz imediat emisia de endotoxin i declaneaz sinteza de substane pirogene endogene reprezentate de Interleukina 1 i Tumor Necrosis Factor alfa care vor declana rspunsul inflamator. Reacia imun dup eliberarea de endotoxine are loc ca urmare a urmtorilor factori: - Activarea sistemului complement, att pe cale clasic ct i pe cale alternativ, fapt care va determina chemotaxia celulelor citotoxice ctre esutul inflamat i depozitant de bacili mori care au eliberat endotoxina. Se activeaz complexul de atac al membranelor cu liza osmotic a bacteriilor moarte ce elibereaz endotoxine. Se producechemotactismul neutrofilelor sub aciunea fraciunii C5a, iar fraciunea C3b va determina opsonizarea bacteriilor moarte cu ndeprtarea lor din sistem de ctre fagocite i celulele citotoxice. Creterea cantitii fraciunilor C3a i C5a cu rol de anafilatoxine determin creterea permeabilitii capilarelor din microcirculaia esutului afectat cu degranularea mastocitelor i apariia rspunsului inflamator. - Activarea macrofagelor se va produce imediat, acestea avnd o mare capacitate de fagocitoz determinat de creterea titrului de enzime lizozomale. Endotoxina activeaz direct macrofagele fiind puternic antigenic, macrofagele fiind primele celule care ajung n esutul ce conine bacterii moarte. - Activarea limfocitelor B se face de ctre interleukina 1 secretat de macrofagele activate de endotoxin. Proliferarea limfocitelor B i diferenierea lor n plasmocite va avea ca rezultat final producerea de anticorpi specifici anti-toxin. Prin urmare endotoxina poate fi considerat un imunomodulator.

ocul endotoxic Se produce n momentul n care cantitatea de toxin secretat i numrul de bacterii moarte sunt foarte mari i depesc cu mult capacitatea de aprare i de rspuns imun prin citotoxicitate i anticorpi al organismului. Septicemiile cu bacili gram negativi au ca rezultat ocul endotoxic caracterizat prin hipotensiune, tahicardie, acidoz metabolic (creterea potasemiei i amoniemiei) i coagulare intravascular diseminat cu evoluie grav. Hemoleucograma exprim iniial leucocitoz cu creterea alarmant a numrului de neutrofile, apoi, n fazele avansate se va produce pancitopenia cu neutropenie, scderea numrului de eritrocite i scderea numrului de tromobocite. Se

ajunge

la

insuficien

circulatorie

acut

la

prbuirea

tensiunii

arteriale.

ocul endotoxic sau septic debuteaz brusc cu febr foarte ridicat (depete 39 de grade Celsius), frison, creterea frecvenei respiratorii, hipotensiune cu extremiti reci i paloare a tegumentelor ce evolueaz apoi spre cianoz datorit scderii aportului vascular ctre esuturile periferice, oligurie sau anurie, confuzie i chiar com. Riscul de deces este foarte mare. Internarea este obligatorie i se ncepe imediat tratamentul medical care cuprinde stabilizarea hemodinamic i hidroelectrolitc a pacientului cu cantiti mari de lichide administrate prin perfuzie endovenoas, tratamentul insuficienelor de organ i a tensiunii sczute i antibiotice n doze mari.

Aflatoxinele
n afar de toxinele bacteriene, care sunt cele mai rspndite i dau cel mai frecvent afeciuni infecioase, exist i toxine secretate de ctre alte microorganisme precum fungii. Una dintre cele mai importante toxine fungice este aflatoxina, o exotoxin secretat de mucegaiurile din clasa Aspergillus. Exist mai multe tipuri de aflatoxin, cea mai periculoas fiind aflatoxina B1 care este toxic i cu un rol important n carcinogenez. Aflatoxinele fac parte din grupa micotoxinelor i sunt un subiect de mare actualitate ntruct sunt ageni puternic implicai n declanarea anumitor tipuri de cancere precum carcinomul hepatic. Se gsesc n alimente i sunt foarte greu de detectat biochimic, sunt termostabile (nu se descompun nici la temperaturi ridicate, nici la temperaturi sczute) i nu se degradeaz biochimic uor. Aflatoxina B1 este considerat ucigaul tcut din alimente. Exist 4 tipuri majore de aflatoxine: B1, B2, G1 i G2 care prin metabolizare dau dihidroxiderivai toxici. Exist mai multe tipuri de aspergillus care produc aflatoxine dintre care cei mai cunoscui sunt Aspergillus flavus care produce aflatoxinele din categoria B i Aspergillus parasiticus care produce aflatoxinele din categoria G i B.

Alimente purttoare de aflatoxine Aflatoxinele contamineaz alimentele depozitate n condiii improprii sau inute ndelungat ntr-un mediu umed. Recoltele de gru i porumb sunt susceptibile la infecia cu aspergillus mai ales dac sunt cultivate ntr-un mediu cald i umed care favorizeaz dezvoltarea germenului n sol.
Cel mai frecvent gsim aflatoxine n alune i produse din alune, porumb i produse asociate, gru, ovz, orez, nuci, arahide i chiar n produsele lactate animaliere. Ingestia alimentelor ce conin aceste toxine determin metabolizarea aflatoxinelor cu eliberarea de metabolii activi toxici, cu rol foarte important n producerea anumitor afeciuni precum: cancer hepatic, sindrom Reye (apare i ca efect secundar la aspirin avnd ca manifestri: steatoz hepatic, hipoglicemie, edem cerebral, acidoz respiratorie i hiperamoniemie fiind frecvent fatal), hepatit acut, ciroz hepatic, colangiocarcinom (carcinom de ducte biliare) i hemoragii importante. Aflatoxina este considerat un agent carcinogen de clasa I, foarte periculos. Aflatoxinele nu ajung n organism doar prin ingestia alimentelor infectate cu aspergillus, ci pot fi contactate i pe cale inhalatorie, mai ales de ctre muncitorii care lucreaz n hambarele unde sunt depozitate recoltele de cereale. Aflatoxinele care intr n organism

prin

inhalaie

declaneaz

cancer

bronhopulmonar

sau

cancer

esofagian.

Efectele biologice ale aflatoxinelor alimentare O dat ce micotoxinele au intrat n organism, dac sunt n cantitate mare, ele nu vor putea fi ndeprtate de ctre sistemul imunitar. Astfel se declaneaz aflatoxicoza, al crei tablou clinic este constituit din: vrsturi, dureri abdominale cu caracter colicativ, edem pulmonar, convulsii, edem cerebral care conduce la com i frecvent la deces, steatoz hepatic i afectare renal. Aflatoxicoza este declanat de expunerea acut la aflatoxine, caracterizat prin contactul cu o cantitate foarte mare de toxin ntr-un timp foarte scurt.
Expunerea cronic, ndelungat la aflatoxine este un factor major de risc pentrucarcinomul hepatocelular (hepatom), acestea fiind puternici ageni carcinogeni. Tot n expunerea cronic, aflatoxinele sunt ageni teratogeni, mutageni, imunosupresani i inhibitori ai sintezei proteice. Cele mai susceptibile la contaminarea cu aflatoxine sunt porumbul, alunele, seminele de bumbac i cocosul, contaminarea fiind mai frecvent n Asia i Africa ns n ntreaga lume s-au raportat recolte contaminate cu aflatoxine. Prin urmare este necesar testarea acestora nainte de procesare, limita inferioar a cantitii de aflatoxin din alimente fiind stabilit la 20 ppb (parts per bilion) n Statele Unite i 5 ppb n Europa. Testarea recoltelor de cereale nainte de procesare i supravegherea alimentelor este foarte important, ntruct exist o legtur cert i demonstrat tiinific ntre expunerea cronic la aflatoxina B1 i carcinomul hepatocelular.

Inhalarea aflatoxinelor Tutunul este o surs important de aflatoxin, deoarece poate fi contaminat uor cu micotoxine dac este depozitat n condiii improprii. Prin urmare fumul de igar poate conine aflatoxine n cantitate mare, ntruct acestea sunt extrem de stabile termic, ncepnd s se descompun la temperaturi foarte ridicate, de 269 grade Celsius. Un alt carcinogen din fumul de igar este gudronul (conine hidrocarburi aromatice printre care i benzopireni), a crui legtur cu cancerul bronhopulmonar de tip scuamos a fost certificat, ns aflatoxina B1 este un carcinogen de 200 de ori mai puternic dect gudronul. Aflatoxina a fost incriminat i n declanarea cancerelor de mucoas orofaringian la fumtori ce au fumat tutun infectat cu aspergillus.
Aflatoxina B1 determin cancer bronhopulmonar. Ea ptrunde n organism inhalator, fiind purtat de fumul produs de tutunul infectat i determin supresia genei P53 imutaii ale genelor din familia ras cu inducerea modificrilor genetice cauzate de malignitate, rezultnd astfel proliferarea clonal, anarhic i continu a celulelor maligne. Nu numai cancerul bronhopulmonar poate fi produs prin acest tip de mutaii genetice, ntruct s-au observat corelaii ntre aflatoxina inhalatorie i cancerele de esofag, sn, ficat, ovar, prostat i piele, toate acestea fiind datorate supresiei genei P53 care este o gen reglatoare ce oprete multiplicarea anarhic a celulelor. n momentul n care activitatea genei supresoare P53 este blocat, are loc proliferarea clonal necontrolat a celulelor maligne i nceperea procesului de carcinogenez. Nu numai la fumtori s-a detectat cancer bronhopulmonar produs de aflatoxine, ci i la muncitorii din agricultur, care inhaleaz aflatoxina produs de culturile infectate cu aspergillus, depozitate impropriu n hambare cu temperatur i umiditate crescut.

Cea mai important cale prin care aflatoxinele ptrund n organismul uman este ns cea digestiv, dar efectele expunerii cronice la aflatoxine sunt similare, indiferent de calea de contaminare i de proveniena aflatoxinei.

Detoxifierea
Discordana dintre sensul termenului de toxin folosit n mass-media i termenul tiinific de toxin este foarte mare. Detoxifierea organismului este un termen de mare actualitate ns utilizarea lui este de cele mai multe ori eronat. Substane toxice sunt i substanele chimice toxice precum metalele grele, unii aditivi alimentari sau citostaticele ns acestea nu au caracterul tiinific propriu-zis de toxine. Tratamentele de detoxifiere propuse de medicina alternativ care se refer la indeprtarea toxinelor din organism prin diverse tratamente naturiste sau prin Yoga, nu au nicio baz tiinific, ntruct substanele toxice produse prin metabolism (uree, acid uric, resturi metabolice) sunt eliminate cu succes de ctre rinichi sau prin neutralizarea lor de ctre ficat. Dac rinichiul nu mai funcioneaz din cauza insuficienei renale de diverse etiologii, eliminarea toxinelor se va face prin dializ. Cnd ficatul este afectat de o anumit patologie i devine nefuncional, singurul tratament este transplantul hepatic. Singurele procese de detoxifiere cu baz tiinific cert sunt reprezentate de dezintoxicarea organismului n cazul dependenei de droguri, alcool, substane halucinogene sau diverse tipuri de medicamente, terapia de chelare n cazul intoxicaiei cu metale grele i antidoturile diverselor otrvuri (antidot contra veninului de arpe, scorpion etc), n clasa antidoturilor intrnd i anatoxinele tetanic i botulinic.

Terapia de chelare Este tratamentul efectuat n cazul intoxicaiei cu metale grele. Se adminstreaz intravenos, oral sau intramuscular un agent care se va lega de metalul respectiv i va facilita eliminarea acestuia din organism. Exemple de ageni chelatori: - Dmercaprolul i acidul dimercaptosuccinic, utilizai n intoxicaia cu arsen, mercur i plumb Penicilamina - intoxicaia cu cupru, aur, plumb i arsen - Deferoxamina - intoxicaia cu fier.

Anticorpii
Anticorpii reprezint proteinele produse de ctre sistemul imun n momentul n care organismul se confrunt cu prezena unui antigen. Integritatea i sntatea sistemului imun sunt vitale pentru organism, deoarece numai un sistem imun sntos poate reprezenta o barier eficace mpotriva antigenelor endogene sau exogene (virale, bacteriene, parazitare sau toxine). Anticorpii sunt reprezentai de imunoglobuline, care sunt proteine gamaglobulinice care se gsesc n plasm, lichidele extracelulare i secreiile organismului. Ele se combin specific cu antigenele (substanele non-self) care declaneaz rspunsul imun. Ca structur, sunt glicoproteine transmembranare cu proprietate de anticorpi fiind capabile de a se lega specific de un epitop sau de un determinant antigenic. Sunt produse de plasmocite, celule derivate din limfocitele B. Regula de baz este aceea c dintr-un limfocit B va rezulta o imunoglobulin (anticorp) care va recunoate un singur determinant

antigenic (anticorp specific). Numrul de imunoglobuline pe care le are un adult n mod normal este foarte mare, ajungnd la 10 la puterea 20, imunoglobuline ce sunt mprite n mai mult de 109 specii moleculare diferite. Imunoglobulinele au astfel o heterogenitate extrem de mare, specia molecular creia aparin nefiind una omogen ci, din contr, ele formeaz o mare familie biologic cu proprieti diverse, printre care i aceea de anticorpi. Imunoglobulinele au un rol foarte important att n finalizarea rspunsului imun umoral, ct i n iniierea rspunsului imun celular, avnd n acest caz calitatea de opsonine (se combin specific cu antigenul fcndu-l susceptibil la fagocitoz, prin favorizarea captrii antigenelor corpusculare de ctre celulele fagocitare). Opsonizarea declaneaz rspunsul imun celular.

Structura imunoglobulinelor
Structural, ele sunt alctuite din dou categorii de lanuri: - lanuri grele H (heavy) care sunt lungi, au un numr foarte mare de aminoacizi i sunt asociate ntre ele prin puni disulfurice. Sunt de tip alfa, gamma, delta, miu i epsilon. - lanuri uoare L (light) care sunt scurte, avnd un numr mai mic de aminoacizi. Sunt asociate la lanurile Heavy prin puni disulfurice. Sunt de tip lambda i kappa. Caracterele lanurilor heavy i light: 1. Sunt unidirecionale 2. Sunt paralele, ns paralelismul lor nu este liniar ci helicoidal (lanurile se dispun sub form de spirale unul n jurul altuia, direciile spiralelor fiind paralele ntre ele). Fiecare dintre lanurile Heavy i Light se spiralizeaz n jurul lanului cu care este asociat prin puni disulfurice. Astfel, lanurile Light execut o semitur pe distana de 180 de grade n jurul lanurilor Heavy la care se ataeaz prin puni disulfurice. Lanurile Heavy se spiralizeaz reciproc unul n jurul celuilalt, efectund tot o semitur de 180 de grade. 3. Sunt constituite din dou categorii de secvene, variabile i constante. Secvenele variabile sau hipervariabile sunt diferite de la anticorp la anticorp, ocup primii 110 aminoacizi ai lanurilor Heavy i Light i difer ntre cele dou lanuri (niciunul din lanuri nu va avea o secven variabil care s semene cu alt lan). Aceste secvene variabile, notate cu VH i VL realizeaz dou caviti care se numesc situsuri combinatve pentru antigen. n aceste situsuri se va inclava determinantul antigenic conformaional. Situsul combinativ pentru antigen se mai numete i paratop. O imunoglobulin va avea dou situsuri de legare a antigenului identice ntre ele, care vor recunoate o structur non-self unic, sau un singur determinant antigenic conformaional. Astfel imunoglobulinele au cptat denumirea de anticorpi monospecifici. Prin urmare, secvenele variabile sunt responsabile de funcia imunologic a imunoglobulinelor, i anume aceea de a recunoate antigenul. Secvenele constante ale lanurilor L sunt identice la toate clasele de imunoglobuline, n timp ce secvenele constante ale lanurilor H sunt dispuse mai ales la capetele COOH terminale. Sunt identice doar n cadrul unei clase de imunoglobuline. Aceste secvene constante sunt responsabile de celelalte funcii ale imunoglobulinelor: activarea cii clasice a complementului, realizarea contactelor cu celulele sistemului imunitar itraversarea barierei feto-placentare (Imunoglobulinele M nu traverseaz bariera datorit greutii lor moleculare mari, n timp ce Imunoglobulinele G o traverseaz).

Clase de imunoglobuline
n funcie de secvenele constante ale lanurilor H, s-au determinat 5 clase de imunoglobuline (Ig) i anume: IgM (lanuri grele miu), IgG (lanuri grele gamma), IgA(lanuri grele alfa), IgD (lanuri grele delta) i IgE (lanuri grele epsilon). Lanurile L sunt identice, fiind aceleai pentru toate clasele de imunoglobuline, n timp ce lanurile H sunt identice doar n cadrul aceleiai clase. O clon de limfocite B formeaz plasmocite care elaboreaz imunoglobuline ce conin n structura lor un singur tip de situs combinativ pentru antigen, care deriv din combinaia secvenelor variabile ale lanurilor H i L. Anticorpii produi de o singur clon de limfocite B au urmtoarele particulariti reprezentate de: Specificitatea clonal - situsul combinativ pentru antigen este caracteristic clonei limfocitare care a produs anticorpul respectiv (situs combinativ antigen-specific). Diversitatea izotipic a anticorpilor. Dac antigenul ptrunde n organism pe cale tisular este recunoscut de anticorpii din clasa Ig M sau Ig G, mai bine reprezentai n esuturi, n timp ce dac ptrunde pe calea mucoaselor va fi atacat de ctre anticorpii din clasa Ig A sau Ig E.

Imunoglobulinele G
Sunt cele mai numeroase, reprezentnd 75% din totalul anticorpilor plasmatici. Au concentraii plasmatice mari, de 1000-1500mg/dl fiind dispuse n concentraii aproximativ egale n plasm i n lichidele extravasculare. Structura lor este simpl, monomeric, au greutate mic i de aceea trec foarte uor prin bariera feto-placentar i prin bariera endotelial (traverseaz peretele vascular sangvin). Au o durat de via mare, ce poate ajunge pn la 4 sptmni. Ca structur sunt similare cu celelalte clase de imunoglobuline fiind alctuite dintr-o pereche de lanuri H i una de lanuri L. Prin urmare, imunoglobulinele G sunt forme tetramerice, avnd o structur alctuit din 4 lanuri, 2 H i 2 L. Lanurile H sunt formate din 450 de aminoacizi, au lungimea de 130 angstromi i greutatea molecular de 45 de kilodaltoni. Nu sunt liniare, ci organizate n bucle datorit punilor disulfurice dintre catene. Un lan H este alctuit din 4 bucle, denumite i domenii. La punctul de asociere al celor dou lanuri H prin puni disulfurice se afl o zon foarte flexibil numit zon balama care confer capacitate de micare att corpului, ct i braelor anticorpului. De asemenea favorizeaz contactul cu antigenul i particip la recunoaterea antigenic. n funcie de numrul de puni disulfurice i de poziia lor pe lanul H, clasa imunoglobulinelor G a fost mprit la rndul ei n 4 subclase diferite, i anume: IgG1 - alctuit din 2 puni disulfurice, situate ntre punctele de intersecie ale lanurilor H. Reprezint cel mai mare procent dintre toate subclasele de imunoglobuline G, avnd rol n activarea complementului pe cale clasic i n transferul imunitii n mod pasiv, prin bariera feto-placentar, de la mam la ft. IgG2 - alctuit din 4 puni disulfurice, situate dou cte dou de o parte i de alta a punctelor de intersecie ale lanurilor H. Activeaz slab complementul. IgG3 - este alctuit din 15 puni disulfurice situate ntre punctele de intersecie ale lanurilor H. Este cel mai puternic activator al cii clasice a complementului.

IgG4 - alctuit din 2 puni disulfurice situate fiecare de o parte i de alta a punctelor de intersecie. Nu activeaz deloc complementul. Lanurile L sunt alctuite din 214 aminoacizi i au lungimea de 60 de angstromi, avnd o greutate molecular mai mic dect H, de 22 de kilodaltoni. Nu sunt liniare, ci sunt i ele organizate n bucle sau domenii. Pe fiecare lan light exist 2 bucle, fiecare lan L avnd doar 2 puni disulfurice intracatenare, sper deosebire de lanurile H care au numeroase puni disulfurice ntre catenele lor. Imunoglobulinele G sunt alctuite din punct de vedere funcional din dou zone: - Fab care este implicat numai n recunoaterea antigenic, reprezentnd situsul combinativ pentru antigen al imunoglobulinei. Este responsabil de funcia imunologic a anticorpului, fr implicare n funciile biologice. - Fc numit fragment constant sau fragment cristalizabil nu are funcie imunologic fiind implicat doar n funciie biologice ale moleculei imunoglobulinice precum activarea complementului pe calea clasic, medierea fagocitozei (caracterul de opsonine al anticorpilor) i traversarea barierei feto-placentare de ctre imunoglobulinele G. La limita dintre zonele constante (Fc) i zonele variabile (Fab) se gsete zona balama, care conine punile disulfurice. La microscopul electronic, pentamerii de IgG apar sub forma literei Y, fiind alctuii din dou lanuri H care reprezint cele dou brae ale literei Y i 2 lanuri L reprezentate de zona situat sub cele dou brae. ntre cele dou zone exist regiunea balama, cu flexibilitate maxim.

Situsul combinativ pentru antigen Structura i funciile situsului combinativ pentru antigen sunt eseniale pentru ca imunoglobulinele s-i poat ndeplini funcia imunologic.
Este o depresiune de dimensiuni mici, ntre 6 i 30 de angstromi care rezult din plicaturarea tridimensional a lanurilor H i L din structura imunoglobulinelor G. Estecomplementar cu determinantul antigenic conformaional i astfel determin stabilirea contactelor dintre anticorp i antigen. Plicaturarea tridimenisonal este datorat existenei unor puni disulfurice n domeniile lanurilor H i L, fiecare domeniu coninnd cte 3 puni disulfurice, astfel are loc plicaturarea 3D. Secvenele peptidice ale situsului combinativ pentru antigen, care realizeaz legturile anticorp- determinant antigenic conformaional sunt alctuite din 8 -12 aminoacizi. Paratopul este seciunea din cadrul situsului combinativ pentru antigen care este responsabil de recunoaterea antigenului. Specificitatea absolut a legturii antigenanticorp este dat de faptul c un singur paratop va recunoate un singur tip de determinant antigenic conformaional. Specificitatea depinde i de numrul i natura aminoacizilor ce alctuiesc regiunile determinante ale complementaritii aflate n situsul combinativ pentru antigen. Suma regiunilor determinante ale complementaritiiconstituite n cadrul unui singur situs combinativ pentru antigen formeaz paratopul.Poziionarea n spaiu a plicaturrilor situsului combinativ i a regiunilor determinante ale complementaritii depinde de nite regiuni numite secvene Frame-Work. Plicaturarea situsului combinatv pentru antigen este esenial, ntruct ea favorizeaz recunoaterea antigenic i dup contactul cu antigenul va transforma situsul combinativ

pentru antigen dintr-o sttructur de recunoatere ntr-o structur antigenic propriu-zis. Recunoaterea antigenic i transformarea situsului combinativ pentru antigen ntr-o structur antigenic propriu-zis se face prin contactul i alturarea a dou sau mai multe regiuni determinante ale complementaritii rezultnd astfel o secven peptidic unic, nerepetabil n organism care se numete idiotp. Idiotopul reprezint componenta antigenic a oricrui situs combinativ pentru antigen. Idiotopii pot fi interni, alctuii numai din regiuni determinante ale complementaritii i externi, alctuii din secvene de aminoacizi situai la vrful extern al plicaturilor.Idiotipul reprezint totalitatea idiotopilor dintr-un situs combinativ pentru antigen. Idiotipul confer specificitatea antigenic a situsului. Astfel se constituie un paradox ntruct situsul combinativ pentru antigen are att capacitatea de recunoatere antigenic, ct i capacitatea de a deveni o structur antigenic n sine. Acest paradox este responsabil de controlul retrospectiv al rspunsului imun i anume de reglarea rspunsului imun. Dac idiotopii sunt structuri intens imunogene, rspunsul fa de un antigen va fi ntotdeauna repetitiv, i nu unic. Rezultatul interaciunii dintre antigen i anticorp este reprezentat de formareacomplexelor imune care sunt solubile, precipit, produc aglutinarea antigenelor i neutralizarea antigenelor.

Funciile biologice ale imunoglobulinelor 1. Declanarea cascadei complementului pe calea clasic prin factorul C1q al complementului. Se realizeaz doar n momentul n care anticorpul a recunoscut un determinant antigenic conformaional. Implic modificri n conformaia lanurilor H care se transmit ortodromic (de la captul carboxi-terminal ctre captul amino-terminal) i presupune exteriorizarea unei secvene de aminoacid care este capabil s lege fraciunea C1q a complementului.
2. Facilitarea fagocitozei se face prin ataarea anticorpilor (imunoglobulinelor) care au opsonizat antigenul corpuscular de suprafaa macrofagelor care vor realiza apoi captarea i endocitarea antigenelor respective urmat de fagocitarea lor. 3. Transferul placentar al anticorpilor din clasa IgG de la mam la ft prin traversarea de ctre acetia a barierei placentare. Astfel se face imunizarea pasiv a nou-nscutului. Cei care trec sunt din subcategoria IgG1. Imunoglobulinele G sunt anticorpii care intervin n mod caracteristic n rspunsurile imune umorale secundare, ce survin dup al 2-lea sau al 3-lea contact cu acelai antigen. Dup primul contact cu un antigen se poate activa memoria imunologic a limfocitelor, cu producia de anticorpi contra antigenului respectiv care vor reaciona prompt i rapid la urmtorul contact cu acelai antigen. Sunt caracteristice rspunsurilor imune umorale secundare. Interleukina 4 este cea care favorizeaz sinteza imunoglobulineor G i n acelai timp este responsabil de activarea mecanismului de switch imunologic sau comutare izotipic, mecanism ce determin transformarea imunoglobulinelor M n imunoglobuline G i dezvoltarea de anticorpi specifici mpotriva unui anumit agent patogen.

Elemente de patologie Scderile semnificative ale titrului de IgG, fie c sunt de cauz congenital fie de cauz dobndit, cresc susceptibilitatea individului ctre infecii. Niveluri crescute de IgG sunt ntlnite la persoanele imunocompetente, constituind rspunsul imun ctre procesele infecioase. Este important determinarea titrului de anticorpi IgM specifici pentru infeciile acute i IgG specifici pentru infeciile cronice, pentru orientarea diagnosticului i stabilirea tratamentului.
Creterea policlonal a IgG apare n sindromul imunodeficienei dobndite (SIDA), scleroz multipl sau hepatite cronice. Creterea monoclonal apare n mielomul multiplu, un criteriu major de diagnostic fiind reprezentat de creterea cu > 3g/dl a IgG adugat electroforezei proteinelor serice care demonstreaz creterea fraciunii gamaglobulinelor. Determinarea n laborator a IgG se face n scopul evalurii imunitii umorale a unui individ, diagnosticul i monitorizarea mielomului multiplu precum i estimarea riscului de infecie la pacienii cu limfoame. Pentru adult, valoarea normal a IgG este cuprins ntre700 -1600 mg/dL. Creterea IgG seric este asociat cu numeroase boli precum: sarcoidoz, hepatit cronic, boli autoimune, parazitoze, infecii cronice fie ele virale, parazitare sau bacteriene, malnutriie sever, disproteinemie i mielom IgG. Scderea IgG seric este asociat cu sindroame de pierdere de proteine (sindrom nefritic i sindrom nefrotic), sarcin, mielom non-IgG, agamaglobulinemie, leucemie limfatic cronic, macroglobulinemie Waldenstrom.

Imunoglobulinele M
Sunt forme pentamerice, alctuite din 5 lanuri i o pies de jonciune (zon balama) . Au lanuri H mai lungi i cu o mas molecular mai mare dect lanurile H ale IgG, lanurile H ale IgM coninnd un domeniu n plus. Concentraia seric normal a IgM este de 40 -230 mg/dl pentru un adult, mult mai mic dect concentraia seric normal a IgG. Sunt anticorpi cu o durat de via mai mic dect IgG, fiind viabili doar 7 -10 zile datorit faptului c sunt distribuii predominant n circulaie deoarece sunt caracteristici rspunsurilor imune umorale primare, fiind prima clas de anticorpi lansai n aprare care realizeaz primul contact cu antigenul. Au o structur foarte complex i o mas molecular mare, prin urmare nu pot trece dect foarte puin prin endoteliu i nu traverseaz deloc bariera feto-placentar. Imunoglobulinele M sunt cei mai activatori anticorpi ai complementului, avnd pe lanurile lor H 2 secvene activatoare pentru complement. Aglutineaz foarte bine bacteriile i virusurile. Sinteza lor este favorizat de aciunea interleukinei 2, care nu este implicat n mecanismul de swich imunologic.

Elemente de patologie Factorul reumatoid i aglutininele alfa i beta ale sistemului ABO aparin acestei clase de imunoglobuline. IgM sunt primii anticorpi produi n rspunsul imun umoral primar, la contactul cu un antigen necunoscut pentru organism. Sunt primii anticorpi sintetizai de

nou-nscut dup natere, cnd acesta vine n contact cu agenii infecioi din mediul nconjurtor, ntruct IgM nu traverseaz bariera feto-placentar, la natere ftul prezentnd n ser doar IgG de la mam. Titrarea anticorpilor IgM specifici este extrem de util pentru aprecierea stadiului unei infecii. Ei sunt crescui i predomin ntr-o infecie acut, n timp ce IgG sunt crescui i predomin ntr-o infecie cronic. Trecerea de la acut la cronic se caracterizeaz prin switch-ul imunologic cu scderea titrului de anticorpi din clasa IgM i cu creterea titrului Ig G. Titruri crescute de IgM la nou-nscut caracterizeaz infecia congenital, transmis de la mam la ft antepartum sau n timpul naterii. Un nou-nscut care are IgM specifici crescui este infectat, iar un nou-nscut care are IgG crescut i IgM abseni a dobndit anticorpii pasiv, de la mam, i nu este infectat. O valoare a IgM mai mare de 20 mg/dl la nou-nscut sugereaz solicitarea sistemului imunitar de ctre o infecie dobndit de la mam, n viaa intrauterin prin pasaj feto-placentar: boala incluziilor citomegalice, rujeol, toxoplasmoz sau sifilis. IgM crete n ciroza biliar primitiv (tipic), macroglobulinemia Waldenstrom, lupus, tripanosomiaz, malarie, poliartrit reumatoid. IgM scade n: sindroame cu pierdere de proteine, disgamaglobulinemie, mielom non IgM, leucemie limfatic cronic, aplazie limfoid, la sugar i n prima copilrie. Desigur, afeciunile n care titrul de IgM crete este mult mai larg, deoarece acest anticorp va avea titru ridicat n toate infeciile acute i n multe alte boli, lucru valabil i pentru IgG care crete n majoritatea infeciilor cronice. Mai sus sunt doar cteva exemple de afeciuni n care s-a constatat creterea constant a titrului acestor anticorpi. De fiecare dat cnd suspicionm o infecie, mai ales n cazul nou-nscutului, dozarea anticorpilor specifici antivirali, antibacterieni sau antiparazitari poate fi de mare ajutor n stabilirea diagnosticului etiologic i n orientarea tratamentului.

Imunoglobulinele A
Sunt de dou tipuri, IgA seric (IgA1) i IgA secretorie (IgA2). Reprezint 10-15% din totalul imunoglobulinelor. Titrul normal pentru adult este ntre 70 400 mg/dl. IgA seric se gsete n ser sub form de monomer, fiind sintetizat de plasmocitele provenite prin transformarea clonal a limfocitelor B. Monomerul este alctuit din dou lanuri H i dou lanuri L, respectnd structura de baz a imunoglobulinelor. Nu are funcii bine precizate din cauza faptului c este foarte greu de obinut n form pur. Se consider c ndeprteaz cantiti mici de antigene provenite din alimente, sau antigene solubile ale microorganismelor. IgA secretorie se gsete n secreiile sero-mucoase precum saliva, mucusul aparatului digestiv i respirator, colostru i lapte matern, lacrimi. Are un rol foarte important n aprarea antiinfecioas deoarece neutralizeaz toxinele care ncearc s depeasc barierele mucosale, aglutineaz microorganisme precum bacterii i fungi i modific aderena la mucoase a anumitor germeni mpiedicndu-i s ajung n circulaia sistemic n urma perforrii mucoaselor. Are form de dimer. Singur, nu activeaz complementul dar complexele antigen- IgA secretorie pot activa complementul pe cale alternativ. IgA secretorie este responsabil de formarea sistemelor imune ale mucoasei tubului digestiv,

respirator i urogenital, fiind incluse n MALT (mucosa associated lymphoid tissue), GALT(gut associated lymphoid tissue), BALT (bronchus associated lymphoid tissue) i nplcile Peyer ale intestinului.

Elemente de patologie Pacienii care au deficit congenital de IgA pot dezvolta reacii autoimune datorit fabricrii de anticorpi anti IgA avnd risc mare de anafilaxie. Prin urmare, dac aceti pacieni necesit transfuzii, ei vor fi transfuzai cu snge din care a fost epurat componenta IgA.
IgA crete n alcoolism, icter obstructiv, ciroz hepatic, mielom IgA, sarcoidoz, lupus eritematos sistemic, unele infecii subacute i cronice, sindrom Wiskott- Aldrich. IgA scade n malabsorbie, ciroz hepatic, boala Still, lupus eritematos sistemic, disgamaglobulinemie, dup un an de abstinen de la alcool, macroglobulinemie Waldenstrom, mielom non IgA, otit medie recurent.

Imunoglobulinele D
IgD se gsete n cantitate foarte mic n snge, reprezentnd 0, 2 % din totalul imunoglobulinelor. Este monomeric. Rolul lui este s recepteze antigenul mpreun cu IgM. Sursa de IgD o reprezint plasmocitele splenice i tonsilare. Concentraia lui seric normal la adult este 3-40 mg/dl. Nu activeaz complementul i nu se fixeaz pe celulele fagocitare. IgD poate crete n mielom multiplu, lepr, tuberculoz, salmoneloz, hepatita infecioas, infecii virale, imunodeficiene, infecii stafilococice recurente, dar relevana creterii acestor anticorpi IgD nu este cunoscut. n bolile autoimune crete alturi de titrurile tuturor celorlaltor clase de imunoglobuline. Mai pot crete i la pacienii cu lupus eritematos sistemic, sindrom Sjogren, tiroidit autoimun. Anticorpi anti IgD s-au evideniat n sclerodermie i dermatit atopic.

Imunoglobulinele E
Denumirea de IgE provine de la termenul eritem, deoarece aceti anticorpi mediaz reaciile vasculare eritematoase. Este sintetizat n mucoasa tractului respirator, a tractului gastro-intestinal i n ganglioni. Nu fixeaz deloc complementul. Concentraia sa seric este foarte sczut i are form de monomer. Se leag n ser de mastocite i bazofile fr s necesite prezena antigenului. Concentraia sa crete foarte mult n strile alergice i n astm bronic alergic, cnd poate ajunge la 1500 micrograme/ml, n condiiile n care la adult valoare normal estemai mic de 100 micrograme/ml. Ig E crete n majoritaatea bolilor alergice care presupun aciunea mastocitelor i bazofilelor precum astm alergic, boalafnului, anafilaxie i eczeme atopice. Crete i n parazitoze precum ascaridioz, echinococoz (hidatidoz), tenioz deoarece se leag de eozinofile care cresc caracteristic n aceste infecii. Eozinofilele cresc i n reaciile alergice. Pot crete i post-administrare de medicamente precum penicilin G i

aztreonam

scad

dup

administrarea

de

fenitoin.

Rspunsul imun umoral primar Este caracterizat prin producia de ctre plasmocite strict a anticorpilor din clasa IgM.Durata n care se pstreaz titrul crescut al acestor anticorpi este destul de scurt, nu depete 3 sptmni. La primul contact cu antigenul i la cooperarea cu celulele prezentatoare de antigen particip doar limfocitele T helper care produc interleukina 2care nu este capabil s activeze mecanismul de switch imunologic IgM/ IgG. La primul contact cu antigenul nu se produce nici expansionarea foarte ridicat cantitativ a clonelor limfocitare B i T helper. Durata de via a anticorpilor este redus i nu exist clone limfocitare cu memorie imunologic. Rspunsul imun umoral secundar Este caracterizat prin producerea unui titru ridicat de anticorpi din clasa IgG cu concentraii foarte crescute i cu durata de via lung i persistena anticorpilor de la cteva luni la civa ani, uneori i toat viaa.
Acest fapt se datoreaz faptului c la contactul cu acelai antigen, la cooperarea cu celulele prezentatoare de antigen particip limfocitele T helper 2 care secretinterleukin 4, aceasta activnd mecanismul de switch imunologic. Ca urmare a contactelor anterioare cu antigenul, clonele limfocitare T i B sunt deja expansionate mult mai mult dect n cazul rspunului imun umoral primar. Acest tip de imunitate este caracterizat prin memoria imunologic.

Anticorpii monoclonali Sunt anticorpi care recunosc un singur tip de epitop al unui antigen specific. Sunt identici i produi de o singur clon de plasmocite.
Sunt produi n laborator i utilizai frecvent n medicin n diagnostic i terapie, medicamentele care conin anticorpi monoclonali (cel mai frecvent imunosupresoarele i citostaticele) avnd denumirea terminat ntotdeauna cu sufixul mab (mono clonal anti body). Ex. Rituximab, Tanezumab, omalizumab (anticorp monoclonal anti IgE folosit n tratamentul astmului bronic alergic). Sunt utilizai de numeroase domenii medicale, mai frecvent n diagnosticul bolilor infecioase deoarece permit tipizarea rapid a microorganismelor din esuturi sau lichide biologice, depistarea unor molecule circulante (de exemplu antigenul viral HbS n hepatita B), izolarea i caracterizarea antigenelor bacteriene, virale i parazitare. Sunt de asemenea utilizai n tipizarea hematiilor din sistemele ABO i Rh, diagnosticul leucemiilor, chirurgia transplantelor de organ, n caracterizarea infarctului miocardic (anticorpi anti-proteine din muchiul cardiac precum anticorpii anti tripsin sau antimiozin), diagnosticul diverselor forme de cancer (sarcom, melanom, carcinom, limfom) precum i n efectuarea de analize imunologice ca ELISA pentru dozarea de hormoni, proteine, enzime sau factori ai coagulrii. Sunt folosii i n tratamente deoarece cu ajutorul lor se pot inactiva i/sau neutraliza anumite toxine, se poate face imunizarea pasiv cu ajutorul lor n rabie i tetanos, n tratamentul cancerelor sunt cuplai cu citostatice sau izotopi radioactivi, n transplantele medulare i n boli autoimune au efect imunosupresor.

n concluzie, anticorpii sunt mediatorii rspunsului imun umoral, fr implicare n rspunsul imun celular. Ei acioneaz prin: neutralizarea microorganismelor i toxinelor produse de microorganisme, realizeaz opsonizarea cu facilitarea fagocitrii microorganismului de ctre celulele specializate i determin activarea complementului att pe cale clasic ct i pe cale alternativ conducnd la opsonizarea i/sau liza microorganismelor sau antigenelor. In vivo, interaciunile antigen-anticorp sunt ntotdeauna reversibile, la un moment dat antigenul prsind situsul combinativ pentru antigen al anticorpului. Interaciunea antigenanticorp este condiionat de complementaritatea structural dintre situsul combinativ pentru antigen al anticorpului care funcioneaz dup principiul cheie- broasc, potrivirea fiind perfect. Consecina complementaritii structurale estecomplementaritatea electrochimic cu apariia unor fore care determin legturi intermoleculare dintre cele dou entiti.

Aprarea mpotriva viruilor

mpotriva infeciilor virale au aprut numeroase vaccinuri precum vaccinul antipoliomielit, vaccinul anti-rubeol, vaccinul anti-virus hepatitic B, vaccinul anti-rujeol etc. Variola este singura infecie viral despre care se cunoate c a fost eradicat prin folosirea vaccinului anti-variolic, ultimul caz fiind raportat n octombrie 1977. Cu toate c avem vaccinuri i tratamente eficiente, infeciile virale constituie nc un pericol real ntruct gradul de morbiditate i mortalitate este destul de ridicat. Ca i bacteriile, pentru a produce o infecie persistent n organism virusurile trebuie s fie caracterizate prin patogenitate i virulen. Cele dou caracteristici sunt strns legate i depind una de cealalt. Un virus foarte puin virulent va fi eradicat de ctre rspunsul imun al gazdei i ndeprtat din organism, iar un virus foarte virulent depi posibilitile de aprare ale rspunsului imun i prognosticul gazdei va fi nefavorabil, putnd surveni chiar decesul. Virulena poate fi modificat prin mutaiile care apar n materialul genetic viral. Ca i la bacterii, pentru a putea declana un rspuns imun din partea gazdei, virusurile trebuie s fie caracterizate prin imunogenicitate. Aceasta este dat de proteinele virale componente ale capsidei virusului (nveliul protector viral). Rspunsul imun anti viral se produce att mpotriva antigenelor exprimate pe suprafaa capsidei virusuluirespectiv, ct i mpotriva antigenelor prezentate pe membrana celulei care a fost infectat de ctre virus.

Caracteristicile virusurilor
Virusurile sunt microorganisme procariote deoarece nu au nucleu propriu, materialul lor genetic fiind dispus liber n citoplasm sub forma ADN viral sau ARN viral. Un virus nu va conine niciodat ambele tipuri de acizi nucleici. n funcie de tipul de acid, dezoxiribonucleic sau ribonucleic se deosebesc dou mari grupuri de virusuri:dezoxiribovirusuri care conin numai ADN (Virus herpetic, virusuri hepatitice) iribovirusuri care conin numai ARN (virusul gripal, virusul HIV). Virusurile au aprut consecutiv evoluiei celulelor, dup apariia bacteriilor. Exist chiar i virusuri care atac

bacteriile,

denumii bacteriofagi.

Diferenele dintre virusuri i bacterii sunt urmtoarele: - Virusurile sunt parazii exclusiv intracelulari i sunt dependeni de energia furnizat de ctre celula gazd ntruct, spre deosebire de bacterii virusurile nu au mitocondriicare s le asigure respiraia i potenialul energetic. - Virusurile nu au ribozomi deci nu pot realiza sinteza proteic i nu se pot replica independent, prin urmare replicarea lor se face dependent de mecanismul de replicare al celulei gazd i o dat cu diviziunea celulei gazd se va realiza i replicarea viral. Prin urmare, invazia gazdei de ctre virusuri se face prin nmulirea excesiv a celulelor gazd care vor avea materialul genetic modificat i nlocuit cu materialul genetic viral. n momentul n care o celul este infectat de ctre un virus, ea nu nceteaz s i ndeplineasc funciile obinuite, fiind folosit numai ca gazd cu ajutorul creia virusul se nmulete i devine patogen. - Virusurile, spre deoseobire de bacterii care pot fi cultivate pe diverse medii nutritive care nu conin celule vii, pot fi cultivate numai pe medii celulare vii, deoarece ele nu pot crete n afara celulelor. De aceea sunt mult mai greu de cultivat dect bacteriile i cultivarea lor nu este o metod curent de diagnostic. - Virusurile au o organizare structural simpl, deoarece informaia lor genetic este depozitat de un singur tip de acid nucleic, fie ADN, fie ARN. - Spre deosebire de bacteriile care se divid, virusurile nu au ca mecanism de multiplicare diviziunea ci multiplicarea lor este un proces mult mai complex, care include i celula gazd, proces denumit replicare viral. - Dimensiunile virusurilor sunt mult mai mici dect ale bacteriilor, unele virusuri fiind chiar de 1.000 de ori mai mici dect bacteriile, de aceea unitatea de msur pentru stabilirea dimensiunilor unui virus nu este micrometrul ci nanometrul, care este egal cu 10 la puterea -9 metri. Acidul nucleic reprezentat fie de ADN, fie de ARN este cea mai important component a virusului. n afar de material genetic, virusul este alctuit dintr-o capsid care protejeaz acidul nucleic. Unele virusuri au n afar de capsid i o anvelop, care constituie un al doilea nveli viral. Att capsida, ct i anvelopa au structur proteic sau glicoproteic, aceste proteine constituind antigenele virale de suprafa. nmulirea virusurilor se face deci numai n interiorul celulelor vii deoarece ele sunt dependente de enzimele celulare, de ribozomii celulari i de sursele celulare de energie. Prin urmare s-a stabilit faptul c virusurile sunt parazii intracelulari obligatorii i prin faptul c modific expresia materialului genetic al celulei gazde sunt implicit parazii la nivel genetic, care posed atributele vieii reprezentate de autoreproducere (replicare) iereditate (transmiterea caracterelor de virulen ctre toate copiile rezultate prin replicarea viral). Genomul viral codific proteinele structurale care alctuiesc capsida i anvelopa (nveliurile genomului) i proteinele reglatorii care au funcie enzimatic

Relaia dintre virus i celula gazd

Permisivitatea este un concept definit ca fiind suma de modaliti prin care virusurile sunt capabile s influeneze, s modifice i s controleze metabolismul celulei gazd. Unele virusuri nu sunt permisive deloc ntruct ele sunt incapabile s se replice n celula care le-a gzduit i astfel sunt eliminate o dat cu moartea acestei celule n procesul numit infecie abortiv, alte virusuri sunt capabile de un grad nalt de replicare i determin infecia productiv sau litic ce va duce la moartea celulei gazd i la

rspndirea virusului. Infecia abortiv i infecia productiv sunt dou situaii extreme ntre care se regsesc trei situaii intermediare: infecia aparent, infecia persistent i infecia latent. Infecia inaparent este infecia n care cantitile de virusuri produse sunt limitate. Aceste virusuri pot persista n focare virale inaparente care nu determin niciun fel de semne i simptome. Multiplicarea viral se face limitat n aceste focare. Un organism sntos va eradica infecia cu ajutorul sistemului su imunitar, ns organismele imunodeprimate vor transforma infeciile inaparente n infecii productive. Infecia persisent este infecia n care exist un echilibru ntre replicarea viral i diviziunea celulelor infectate de ctre virus. Persistena virusului n organism este produs de existena unor factori extracelulari care protetejeaz celulele nc neinfectate interferon, anticorpi non-neutralizani) i de selectarea unor tulpini virale cu multplicare lent. Astfel se produce o infecie cronic cum este de exemplu hepatita B sau hepatita C. Infecia latent este infecia n care ciclul replicativ viral (nmulirea virusurilor) se oprete timpuriu. Herpes-virusurile sunt exemplu caracteristic pentru c ele produc o astfel de infecie ntruct pot rmne latente n organism timp ndelungat. De exemplu alfaherpesvirusurile sunt responsabile de veziculele herpetice de la nivelul dermului (la nivelul buzelor - virus herpes simplex 1 sau la nivel genital - virus herpes simplex 2) dup care rmn latente la nivelul ganglionilor de pe calea rdcinilor posterioare ale nervului spinal care inerveaz zona cutanat afectat de veziculele herpetice. Latena infeciei nu rspunde la aciunea medicamentelor antiherpetice care scurteaz evoluia veziculelor cutanate dar nu vindec bolnavul ntruct nu au aciune asupra virusurilor depozitate n sediile de laten.

Transmiterea infeciilor virale

Patogenitatea este capacitatea virusurilor i a tuturor microorganismelor de a induce boala. n funcie de patogenitatea lor, tulpinile virale pot fi slbatice (virulente) sauatenuate. Factorii care influeneaz patogenitatea in de caracteristicile organismului gazd i de mecanismele sale de aprare precum i de mediul ambiant, de factorii demografici i socio-economici n care organismul gazd i desfoar viaa. Evoluia virozelor este diferit i n funcie de calea lor de transmitere (pe orizontal sau pe vertical) i de poarta de intrare n organism (cale aerian, alimentar sau parenteral - prin ace infectate, injecii, manevre chirurgicale, tatuaje, nepturi cu diverse obiecte care penetreaz bariera cutanat de aprare). Transmiterea vertical este acel tip de transmitere a infeciei virale care se face de la mam la ft fie transplacentar, fine n timpul naterii, fie postpartum. Cu ct infecia se produce mai timpuriu n timpul dezvoltrii ftului sau chiar n faza de embrion (n primele 4 luni de gestaie) efectele ei sunt mai devastatoare. Virusul rubeolei i virusul citomegalic sunt cele mai incriminate pentru potenialul lor teratogen care reprezint capacitatea lor de a produce malformaii congenitale. Cu ct depistarea infeciei la mam este mai timpurie, cu att ea poate fi eradicat nainte s produc consecine devastatoare asupra embrionului sau ftului. Transmiterea vertical se poate produce antepartum transplacentar prin penetrarea barierei placentare n timpul perioadei de gestaie, intrapartum sau peripartum, adic n

cursul naterii prin ruperea capilarelor circulaiei placentare i ptrunderea antigenelor materne n circulaia fetal sau postpartum prin laptele matern la sugarul alimentat natural. Transmiterea orizontal este aceea care se produce de la om la om pornind de la un caz infectat care prin contactul cu ali indivizi rspndete viroza n populaie i genereaz numeroase cazuri secundare. Propagarea infeciei se poate face pe cale aerogen, pe cale alimentar sau prin contact direct cu subiectul infectat. Virusurile, similar bacteriilor se multiplic iniial la poarta de intrare nainte ca infecia s se generalizeze pe calea circulaiei sistemice sanguine sau limfatice. Propagarea virozei se poate face i septinevritic, prin tecile nervilor, un exemplu clasic este acela al rabiei care se propag pe cale nervoas de la locul mucturii pn la sistemul nervos central. n urma replicrii virusului la poarta de intrare poate aprea simptomatologia precum rinofaringit, guturai sau gastroenterit. Generalizarea infeciei determin simptome nespecifice precum febr i stare general alterat apoi poate aprea simptomatologia specific de organ ca n cazul hepatitelor sau encefalitelor virale. De cele mai multe ori sistemul imunitar este capabil s lupte mpotriva infeciei datorit activrii imunitii naturale sau dobndite i se produce astfel limitarea simptomatologic pn la starea de convalescen i vindecare. ntr-o infecie viral exist civa parametri care se urmresc obligatoriu i anume:perioada de incubaie, perioada de debut, perioada de stare i perioada de convalescen. La nceputul bolii predomin anticorpii de tip IgM apoi apare seroconversia cu generarea anticorpilor de tip IgG prin fenomenul de switch imunologic sau comutare izotipic.

Imunitatea nespecific
Rezistena nnscut este determinat de acel tip de imunitate care, pentru a se declana nu presupune existena unui contact anterior ntre gazd i virusul declanator al infeciei fiind numit i imunitate nespecific sau imunitate natural. Rezistena nnscut sau imunitatea natural este asigurat prin anumite mecanisme care sunt reprezentate pe de o parte de barierele naturale ale organismului (esutul cutanat, saliva, sucul gastric) i de anumite mecanisme umorale precum lizozimul, sistemul complement, interferonii i citokinele proinflamatorii i de mecanisme celulareprecum macrofagele i celulele Natural Killer. n imunitatea nnscut exist anumii receptori numii Toll Like Receptors capabili s recunoasc componentele structurale ale agenilor patogeni (proteniele de suprafa virale i bacteriene) i s iniieze reacii de aprare nc din primele minute, prin activarea rspunsului imun. Astfel se produc intermediari activi de oxigen reprezentai de radicalii liberi cu rol litic i citokine proinflamatorii precum interleukina 1, factorul de necroz tumoral alfa i interferonul gamma. Celulele care intervin n imunitatea nespecific sunt:

Macrofagele

Macrofagele din sistemul fagocitar mononuclear sunt unul din primele celule care rspund n momentul n care se iniiaz o infecie. Ele au o capacitate foarte mare de fagocitoz i secret factori care ucid virusurile, astfel asigur controlul infeciei nc din primele ore de la debutul acesteia. Macrofagele genereaz citokine proinflamatoriica TNF alfa, IL-1 i IL-12 care induc rspunsul inflamator necesar pentru ndeprtarea agenilor patogeni. ns acest rspuns inflamator induce daune n esuturile n care se produce deoarece apar leziuni celulare importante i n esutul neinfectat viral. Limitarea efectelor litice pe care inflamaia le are i asupra esuturilor sntoase se face princitokinele antiinflamatorii reprezentate de IL 4 i 10 i Tumor Growing Factor beta (TGF beta). Citokinele antiinflamatorii sunt produse de alte celule dect macrofagele i anume celulele natural killer, limfocitele T sau limfocitele B i contribuie la atenuarea activitii macrofagelor. Prin urmare, stimularea exercitat de citokinele proinflamatorii asupra macrofagelor este barat i citokinele antiinflamatorii astfel nct efectele de distrugere asupra esutului neinfectat sunt limitate.

Celulele Natural Killer

Sunt celule mari aparinnd categoriei de Large Granular Lymphocytes. Au aciune citolitic asupra celulelor infectate viral i asupra celulelor tumorale prin capacitatea lor de a secreta enzime litice din categoria proteazelor numite perforine i granzime. Interferonii activeaz celulele natural killer. Inhibarea lor se face de ctre interleukina 10 care inhib interferonul gamma.

Rspunsul imun umoral

Rspunsul imun umoral are ca rezultat final sinteza anticorpilor specifici. El este de dou tipuri, primar i secundar. Rspunsul imun primar apare n primele zile post-infecie i atinge vrful dup 2-3 sptmni apoi scade fiind nlocuit de rspunsul imun secundar. Rspunsul primar este timpuriu, pasager i este caracterizat prin sinteza anticorpilor de tip IgM care au afinitate redus pentru celulele infectate i sunt relativ puin specifici. Rspunsul imun secundar este tardiv i persistent fiind caracterizat prin sinteza de anticorpi de tip IgG sau IgA. Cei de tip IgG sunt anticorpi cu specificitate mare care recunosc un anumit tip sau subtip de virus. Virusurile sunt substane imunogene i intr n categoria antigenelor avnd o greutate molecular peste 1.000 de daltoni i avnd structur proteic sau glicoproteic. Anticorpii acioneaz att asupra virusurilor libere n circulaie ct i asupra celulelor care au fost infectate de ctre virusuri. Aciunea anticorpilor asupra virusurilor libere este aceea de neutralizare. Ei se leag de structurile superficiale reprezentate de anvelop i capsid i determin modificri conformaionale care opresc adsorbia i internalizarea virusului ntr-o celul gazd. IgG sunt anticorpi circulani i IgA asigur aprarea antiviral la nivelul mucoaselor. Anticorpii nu sunt numai de tip neutralizant, unii sunt capabili s lege structuri virale care s-au inserat n membrana celulei gazd participnd la liza acestor structuri. Limfocitele B care se activeaz i se difereniaz n plasmocite sunt celulele productoare de anticorpi. Limfocitele B recunosc antigenele virale i prolifereaz clonal n urma

recunoaterii,

apoi

se

transform

plasmocite

secret

anticorpi.

Limfocitele cu memorie sunt fracia limfocitelor B care se rennoiesc foarte rar avnd un timp de njumtire mare i o via lung. Ele apr prompt organismul la contactele ulterioare cu acelai virus. Ele se expansioneaz clonal rapid i produc concentraii mari de anticorpi care contribuie la asigurarea proteciei eficiente anti-infecioase. Anticorpii cresc i eficiena rspunsului imun celular.

Rspunsul imun celular

Celulele care particip sunt reprezentate de celulele foliculare dendritice, de macrofagele circulante i intratisulare, de limfocitele T helper CD 4+ i de limfocitele citotoxice i supresoare CD 8+. n viroze acest tip de rspuns imun este preponderent, fapt dovedit n cazul anumitor boli n care este prezent agamaglobulinemia (incapacitatea de sintez a imunoglobulinelor), bolnavii respectivi putnd lupta mpotriva virozelor deoarece i pstreaz aciunea celulelor imunocompetene participante la rspunsul imun celular. Pacienii care ns au deficiene ale rspunsului imun celular dezvolt infecii virale letale, dei sunt capabili s produc anticorpi. Proteinele virale sunt clivate n peptidele componente de ctre celulele prezentatoare de antigen i peptidele respective sunt aduse la suprafaa acestor celule i prezentate ctre limfocite cu ajutorul complexului major de histocompatibilitate. Sistemul major de histocompatibilitate (CMH) este mprit n dou clase i anume CMH clasa 1 prezent pe macrofage i pe toate celulele somatice posesoare de nucleu din organism. CMH clasa 2 este prezent numai pe macrofage i pe limfocitele B i T activate. Celulele dendritice foliculare deriv din mduva osoas i sunt capabile s captureze i s proceseze antigenele. Contactul cu virusul le activeaz i vor migra n organele limfoide secundare unde vor ncepe secreia de interferon gamma. Limfocitele T recunosc epitopii virali cu ajutorul T Cell Receptor care are o structur similar imunoglobulinelor fiind alctuit din structuri variabile i structuri constante.Limfocitele T helper CD 4+ recunosc peptidele prezentate pe CMH clasa 2, iar limfocitele T citotoxice CD 8+ recunosc peptidele prezentate pe CMH clasa 2. Limfocitele T CD 8+ lizeaz celulele infectate cu virus. i limfocitele T citotoxice i supresoare (care diminueaz intensitatea rspunsului imun cnd este necear) au capacitatea de a deveni limfocite cu memorie imunologic.

Interferonii
Sunt glicoproteine care sunt codificate de genomul celulei gazd. Interferonii sunt de mai multe tipuri ntruct difer ntre ei prin numrul i secvenele de aminoacizi i prin proprietile lor fizico-chimice i biologice. - Interferonul alfa este secretat de limfocite i are proprieti n special antivirale - Interferonul beta este sintetizat de fibroblaste i este utilizat n tratamentul unor boli neurologice - Interferonul gamma sintetizat e macrofagele activate are aciune de imunomodulator fiind util n tratamentul anumitor cancere.

Interferonii au aciune antiviral specific de specie dar nespecific de virus, fapt tradus prin capacitatea interferonului de a inhiba orice virus care infecteaz o anumit specie. Interferonii au efecte biologice foarte importante care sunt reprezentate de aciunea deinhibare a diseminrii virale n organism (mai intens pe virusurile ARN), aciuneanticelular de inhibiie a diviziunii celulelor normale i canceroase i aciune imunomodulatoare ntruct pot stimula sau inhiba sinteza anumitor citokine. Efectele biologice ale interferonilor nu sunt dependente de internalizarea lor n celul ci extracelular exist receptori pentru interferon care o dat ce au recunoscut interferonul delaneaz o cascad de semnalizare ce are ca rezultat final activarea genelor inductibile de interferon. Prin expresia acestor gene relaia ARN viral - ribozomi ai celulei gazd se fragilizeaz i se destram iar ARN viral se va fragmenta. Aciunea imunomodulatoare se refer la stimularea de ctre interferon a creterii expresiei moleculelor sistemului major de histocompatibilitate i activarea celulelor natural killer.

Vaccinurile anti-virale
Au ca principiu imunizarea anti-viral a organismului fr a provoca ns o viroz. Astfel se formeaz limfocite cu memorie i organismul vaccinat va rspunde imediat la contactele ulterioare cu antigenul mpotriva cruia a fost vaccinat. Pentru ca vaccinarea s aib succes titrul anticorpilor post-vaccinare trebuie s fie suficient de mare pentru a avea aciune neutralizant anti-viral. Un vaccin ideal are o eficacitate peste 90% i s fie activ dup o singur doz (fr rapeluri ulterioare). Imunitatea post-vaccinare trebuie s fie persistent, rspunsul imun produs este att umoral i celular, ct i al mucoaselor. De asemena nu trebuie s aib reacii adverse. Sunt foarte puine vaccinuri care au toate aceste atribute. Vaccinurile anti-virale sunt de trei tipui i anume: vii atenuate, inactivate i sintetice. Vaccinurile vii atenuate sunt suspensii de microroganism obinute n urma cultivrii in vitro n culturi de celule a unor tulpini virale selecionate. Acestea, ntr-o singur doz produc imunitate att celular ct i umoral pe toat durata vieii organismului vaccinat. ns, dei extrem de eficiente, vaccinurile vii au anumite reacii secundare ntruct produc simtpome severe de infecie la imunodeprimai i stabilitatea lor este relativ precar. Exemplu: vaccinul anti-polio. Vaccinurile inactivate sunt suspensii preparate prin inactivarea preparatelor virulente la care genomul a fost anihilat dar imunogenitatea a fost prezervat. Astfel genele virale au fost distruse dar proteinele de suprafa cu proprieti de antigenicitate au fost pstrate. Au capacitate de a genera rspuns imun mai mic dect a celor vii i de asemenea sunt necesare doze multiple de vaccin (rapeluri) pentru ca acesta s fie eficient. Exemplu: vaccinul anti hepatit B. Vaccinurile sintetice sunt fabricate cu ajutorul ingineriei genetice prin tehnologia ADN recombinant.

Citokinele
Termenul de citokine este un termen generic care grupeaz o serie de glicoproteine i proteine cu rol de mediatori n comunicarea intercelular. Ele sunt secretate de celulele activate dup stimulare i se leag de receptori de membran specifici, prezeni fie pe alt celul fie pe celula care le-a secretat. Au mas molecular cuprins ntre 15 i 30 de kilodaltoni. Sunt mediatori ai imunitii, inflamaiei, proliferrii i diferenierii unor linii celulare. Din acest grup de proteine fac parte: interleukinele, interferonii, factorii de cretere hematopoietici, factorii de necroz tumoral i chemokinele. Citockinele sunt proteine inductibile care pot fi secretat de orice celul din organism cu excepia eritrocitelor, indiferent c aparine sau nu sistemului imunitar. Au activitate biologic n concentraii foarte mici, dar suficiente pentru a induce un rspuns specific al celulelor sensibile la aciunea citokinelor, celule care au receptori de mare afinitate pentru citokine i rspund la stimulare prin modificarea ratei de sintez a ARN i implicit a proteinelor. Citokinele au fost denumite i imunohormoni sau hormoni reglatori ai rspunsului imun,ntruct sunt foarte active la concentraii foarte mici, fapt dovedit att in vivo ct i in vitro. Diferena fa de hormoni este aceea c citokinele acioneaz la nivel local, n timp ce hormonii acioneaz la distan. Citokinele secretate de limfocite se numesc limfokine iar cele secretate de monocite se numesc monokine. Alturi de limfokine i monokine vin prostaglandinele produse pe calea ciclooxigenazei care degradeaz acidul arahidonic i interferonii.

Proprietile citokinelor
Dei au structuri proteice diferite i acioneaz diferit n procesul imun, citokinele ca grup au anumite proprieti comune precum: 1. Pleiotropia - fiecare citokin are activiti biologice multiple 2. Redundana - citokine din grupuri diferite pot avea efecte biologice i biochimice asemntoare 3. Sunt active n concentraii foarte mici i secreia lor este de scurt durat 4. Reaciile modulate de citokine sunt produse n cascad 5. Au receptori specifici de mare afinitate 6. Aciunea lor se poate produce autocrin, paracrin sau endocrin Proprietatea citokinelor de a aciona autocrin se refer la faptul c ele au efect numai asupra celulei care le-a produs. Aciunea paracrin este aciunea asupra celulelor aflate n imediata proximitate i aciunea endocrin este aciunea la distan care se produce nu numai asupra celulelor aparinnd sistemului imun, ct i asupra altor tipuri de celule cum ar fi cele epiteliale. Termenul de interleukin se refer la faptul c citokinele aparinnd acestei categorii mediaz comunicarea dintre limfocite, care sunt celule ale sistemului imunitar. Termenul de interferoni se refer la abilitatea acestui grup de citokine de a interfera cu o infecie viral produs n organism, reprezentnd un mecanism de aprare antiviral. Se cunosc momentan peste 50 de specii moleculare de citokine dar numrul de citokine care se descoper este n continu cretere, actualmente s-au descoperit peste 20 de interferoni i peste 18 tipuri de interleukine, funcia unora dintre ele nefiind nc pe deplin cunoscut.

n uz se afl deja medicamente bazate pe citokine, un exemplu relevant este reprezentat de interferonii care constituie terapia antiviral n hepatite, i numeroase substane medicamentoase pe baz de citokine sunt nc n studiu. Spectrul de aciune al citokinelor este foarte larg, ele sunt implicate n numeroase aspecte patologice. Citokinele nu au activitate enzimatic, ele sunt active numai dup ce se leag de receptorii specifici, de mare afinitate pentru citokine ai celulelor sensibile la aciunea lor. Pentru ca rezultatul stimulrii citokinice s fie maxim, un anumit procent din receptorii pentru citokine ai unei celule trebuie s se lege de moleculele citokinice specifice. Rezult astfel activarea cilor de semnalizare intercelular i/sau intracelular i are loc comutarea unui set de gene cu rol n codificarea diferitelor proteine, molecule de aderen intercelular, proteaze, enzime de faz acut, proteine ale catabolismului lipidic, NO-sintaza (enzima care produce oxidul nitric) i alte citokine. Aciunea citokinelor este n general limitat, autocrin, paracrin sau intracrin, foarte rar acioneaz endocrin, dei n timpul infeciilor generalizate unele dintre ele se gsesc n snge.

Interleukinele
Ca structur sunt glicoproteine sau proteine solubile produse n principal de ctre limfocite. Denumirea veche era cea de limfokine la care se aduga cea de monokine ns actualmente cele dou tipuri sunt nglobate sub denumirea de interleukine deoarece aceast denumire sintetizeaz activitatea lor esenial, i anume aceea de a realiza cooperarea intercelular ntre diferitele celule ale sistemului imunitar. Prin urmare ele iniiaz, ntrein, amplific sau blocheaz activitatea, creterea, multiplicarea i funciile celulelor sistemului imun, deci sunt practic imunomodulatori. Sunt produse n principal de limfocitele T, limfocitele B, macrofage i celule endoteliale. Pot aciona asupra celulelor sistemului imun dar i asupra a numeroase celule ale organismului care nu sunt responsabile de imunitate precum celule sangvine, osoase, hepatice sau precursori medulari. Principalele caracteristici ale interleukinelor: - Interacioneaz cu receptori de mare afinitate pentru interleukine prezeni pe membranele celulare Pot aciona autocrin, paracrin sau endocrin (rareori) Sunt molecule proteice glicozilate, hidrosolubile cu rol reglator Au greutate molecular mic, sub 80 de kilodaltoni. n funcie de efectul pe care l produc asupra altor celule, interleukinele se grupeaz n felul urmtor: Chemokine sau interleukine care stimuleaz mobilitatea orientat a celulelor sistemului imun ctre anumite locaii unde are loc inflamaia, proces care se numete chemotactism. De exemplu chemotactismul neutrofilelor i macrofagelor activate ctre zona de inflamaie activ pe care le recruteaz i le atrag ctre procesul inflamator Interleukine stimulatoare sau inhibitoare, care modific rata de diviziune i de difereniere a celulelor stimulate Interleukine stimulatoare sau inhibitoare ale funciilor specifice ale unor celule Interleukine care induc apoptoza prin capacitatea de a modifica viabilitatea anumitor celule Aciunea interleukinelor poate fi sinergic sau antagonic, ele putndu-se stimula sau inhiba reciproc. Aciunea lor este n relaie specific cu cea a interferonilor, a factorilor

de cretere sau a altor biomolecule. Prin studierea acestor procese de sinergism i antagonism se va putea nelege mai bine rspunsul organismului la stress-ul cauzat de inflamaie i realizarea de medicamente specifice. Cele mai importante interleukine, cu rol definitor n realizarea reaciei imune n organismul atacat de antigene endogene sau exogene sunt urmtoarele:

Interleukina 1
Este produs n principal de celulele din seria fagocitelor mononucleare reprezentate de monocite i macrofage, ns orice celul nucleat matur din organism o poate sintetiza. Anumii stimuli biologici declaneaz sinteza acestei interleukine, stimuli reprezentai de: endotoxinele bacteriilor Gram-negative, exotoxinele, mureina care este proteina din peretele celular al bacteriilor Gram pozitive, zimosanul din peretele celular al levurilor, complexele imune antigen-anticorp, fraciunea C3a cu rol de anafilotoxin din cadrul sistemului complement i citokinele limfocitelor activate. i stimuli non-biologici pot declana sinteza de interleukin 1, printre ei numrndu-se particulele de siliciu icristalele de urai. Dou gene distincte codific sinteza a dou tipuri distincte de interleukin 1, rezult astfel interleukina 1 de tip alfa i interleukina 1 de tip beta. IL-1 este produs local de ctre celulele stimulate avnd un spectru larg de aciune cu efect fie autocrin fie paracrin, aciune care stimuleaz rspunsul inflamator i rspunsul imun specific. Astfel IL-1 este un mediator pleiotropic, adic are efecte multiple n cadrul rspunsului imun al gazdei la infecii sau leziuni. IL-1 stimuleaz activitatea citotoxic a celulelor Natural Killer, activeaz metabolismul celulelor leucocitare polimorfonucleare i chemotactismul leucocitelor ctre locul inflamaiei, induce expresia moleclelor de aderen a leucocitelor la endoteliu i crete permeabilitatea endotelial cu favorizarea procesului de diapedez i de asemenea, stimuleaz chemotactismul i funcia citotoxic a macrofagelor cu favorizarea fagocitozei. Alte funcii, pe scurt ale interleukinei 1 sunt: - Inducerea sintezei proteinei C reactive de faz acut de ctre ficat, nivelul seric crescut al acestei proteine fiind un indicator al faptului c organismul se lupt cu un proces inflamator. Un nivel al proteinei C reactive mai mare de 20 miligrame pe decilitru ar trebui s dea de bnuit faptul c infecia este de natur bacterian. - Stimularea diferenierii i activrii limfocitelor B i stimularea proliferrii limfocitelor T - Creterea sintezei de interleukin 2 i exprimarea receptorilor pentru interleukin 2 de pe limfocitele T - Induce exprimarea moleculelor MHC II ale sistemului major de histocompatibilitate pe suprafaa membranei celulelor prezentatoare de antigen - Activeaz bucla autocrin de cretere a produciei de interleukin 1 prin stimularea produciei acesteia de ctre monocite - Induce sinteza moleculelor de aderen ale leucocitelor la endoteliu cu favorizarea diapedezei i a chemotactismului leucocitar i macrofagic la situsul de declanare al procesului inflamator Regleaz hematopoieza n mduva osoas hematogen - Induce sinteza de hormoni glucocorticoizi de ctre glanda suprarenal, hormoni care au rol inhibitor asupra aciunii interleukinei 1 dar care produc creterea exprimrii receptorilor membranari pentru interleukin 1 pe membranele celulelor sistemului imun - Are rol de factor pirogen endogen, declannd procesul de febr prin stimularea sintezei prostaglandinelor de tip 3 care sunt active asupra centrului hipotalamic al termogenezei care determin creterea temperaturii centrale - Stimuleaz producia altor citokine precum: G- CSF (factorul de cretere al coloniilor granulocitare), TNF- alfa (Tumoral Necrosis Factor alfa), Interleukinele 6, 8 i 11 i PDGF

(factorul de cretere derivat din trombocite). - Prin inhibarea aciunii limfocitelor T supresoare are rol de factor contrasupresor.

Interleukina 2
Denumirea mai veche a acestei interleukine era aceea de TDGF (factorul de cretere derivat din celulele limfocitele T). Este citokina principal implicat n declanarea unui rspuns imun eficient, fiind i factorul esenial al reglrii rspunsului imun.Responsabile de producia ei sunt limfocitele T CD 4 activate. T CD 4 aflate n repaus nu sunt capabile s produc IL-2, dar n momentul n care se produce activarea limfocitelor T helper de tip 1 dup recunoaterea antigenului cuplat cu moleculele MHC II, acestea vor produce interleukin 2 i interferon gamma. Limfocitele T helper de tip 2 produc dup activare interleukinele 4, 5 i 6. Interleukina 2 are o conformaie tridimensional fiind structurat sub forma unui alfa-helix alctuit din 4 catene polipeptidice. Receptorul pentru IL-2 este format din trei catene polipeptidice codificate de o gen specific. Receptorii pentru interleukina 2 se mpart n trei clase: Receptor de mic afinitate format dintr-o caten alfa - Receptor de afinitate medie format din dou catene, alfa i beta - Receptor de mare afinitate format din trei catene, alfa, beta i gamma. Limfocitele care nu sunt stimulate antigenic prezint numai receptorul de mic afinitate pentru IL-2, dup stimularea antigenic primar exprimndu-se i receptorul de afinitate medie n timp ce receptorul de mare afinitate se exprim numai dup stimularea antigenic secundar. Prin urmare, intensitatea rspunsului imun este condiionat de disponibilitatea receptorilor pentru IL-2.

Efectele interleukinei 2 Realizeaz o bucl autocrin prin stimularea limfocitelor care au produs-o iniial cu creterea continu a concentraiei de interleukin 2 din sistem, precum i o bucl paracrin stimulnd producerea de IL-2 i de ctre alte limfocite aflate local, n contact cu limfocitul primar care a declanat producia iniial de IL-2.
Expansiunea clonal a limfocitelor este efectul principal al acestei interleukine, ntruct limfocitele stimulate prolifereaz i exprim pe suprafaa lor receptori pentru IL-2 n cantitate foarte mare. Prin urmare toate limfocitele care au recunoscut un anumit antigen (antigen-specifice) se expansioneaz clonal (prolifereaz i numrul lor crete foarte mult) deoarece interaciunea IL-2 cu receptorul su specific de pe membrana limfocitar declaneaz activarea i proliferarea celular a limfocitelor stimulate de ctre respectiva interleukin. Se produce astfel expansiunea clonal a limfocitelor T din categoriile CD 4 i CD 8 deoarece numai expansiunea lor depinde de aciunea IL-2. Un alt rol de baz al IL-2 n cadrul rspunsului imun este dat de faptul c ea determin diferenierea limfocitelor T helper n limfocite T helper de tip 1 i T helper de tip 2.IL-2 acioneaz autocrin asupra limfocitelor T helper 1 i paracrin asupra limfocitelor T helper 2. Activitatea citotoxic a limfocitelor T din clasa CD8 este stimulat de ctre IL -2. Activarea limfocitelor B se produce datorit aciunii IL-2 deoarece i limfocitele B posed receptori de mare afinitate pentru acest tip de citokin. Prin urmare ele prolifereaz, se transform n plasmocite i determin secreia de anticorpi din clasele IgG, IgA i IgM. Tot

interleukina 2 determin comutarea izotipic cu transformarea anticorpilor de tip IgM n anticorpi de tip IgG cu transformarea rspunsului imun nespecific n rspuns imun specific cu anticorpi specifici pentru antigenul declanator. Celulele Natural Killer sunt stimulate de ctre IL-2 care determin creterea aciunii lor citotoxice, ns nu i proliferarea lor. i macrofagele sunt stimulate de ctre IL- 2 prin faptul c activitatea lor citotoxic fa de celulele tumorale i bacteriile intracelulare este mult amplificat. Crete de asemenea i activitatea antifungic a granulocitelor. Interleukina 1 stimuleaz sinteza IL-2 i la rndul ei IL-2 stimuleaz sinteza interleukinelor 4, 5 i 6. Se intensific de asemenea producia de lactoferin i TNF alfa.

Relevan n patologie IL-2 a fost intens studiat cu privire la implicaiile sale n patologia unor boli imunologice umane. n anumite boli cu component imunologic precum artrita reumatoid, scleroza multipl, diabetul juvenil, lupusul eritematos sistemic sau hepatita cronic reactiv se produc cantiti excesive de IL-2. Tot o cantitate excesiv de interleukin 2 este responsabil de declanarea reaciei de respingere a grefei post-transplant.
Aplicaiile IL-2 sunt n principal bazate pe terapia antitumoral n cancerele care au o component imunologic important precum carcinomul renal cu celule clare i melanomul malign n care s-au obinut rezultate semnificative din punct de vedere al remisiunii. ns utilizarea IL-2 n practica medical are efecte adverse extrem de suprtoare i toxice date de tulburri gastro-intestinale (grea, vom, diaree), mialgii, febr ridicat, hipotensiune, aritmii i tulburri neurologice din categoria crizelor comiiale.

Interleukina 3
Este format din 133 de aminoacizi i produs de limfocitele T i celulele natural killer. n timpul reaciilor alergice este produs i de ctre eozinofile. Efectele ei se produc n general autocrin i paracrin, iar efectele endocrine sau sistemice pot aprea n cadrul infeciilor n care se produce o activare masiv a limfocitelor, cum este infecia gripal.Are funcii de aprare i reparare n focarul inflamator i stimuleaz activarea celulelor inflamaiei i anume granulocitele, fagocitele i trombocitele. Este responsabil i de repararea mduvei osoase consecutiv tratamentului cu citostatice care sunt toxice asupra mduvei hematogene determinnd inhibarea formrii de celule sangvine i scderea accentuat a numrului acestora n snge, proces numit pancitopenie. Efectul reparator al interleukinei 3 se produce prin stimularea diferenierii celulelor stem hematopoietice din mduva osoas hematogen.

Interleukina 4
Este produs n majoritate de ctre limfocitele T helper 2 i are aciune autocrin activnd bucla autocrin i stimuleaz exprimarea moleculelor MHC II pe suprafaa limfocitelor B precum i secreia de IgE i IgG. Se mai numete astfel i factorul stimulator al limfocitelor B. Este o citokin antiinflamatorie deoarece inhib producia de citokine inflamatorii precum IL-1, TNF alfa i a prostaglandinelor produse pe calea ciclooxigenazei care acioneaz asupra acidului arahidonic. Induce i diferenierea limfocitelor T CD4 ctre limfocite T helper 2 care vor secreta la rndul lor interleukinele 5 i 10.

TNF alfa
Sau factorul alfa al necrozei tumorale este o glicoprotein format din 156 de aminoacizi produs n cea mai mare parte de macrofage dar i de ctre adipocite, limfocite B, fibroblaste, granulocite, monocite, celule natural Killer, celule musculare netede i limfocite T. Este o citokin pro-inflamatorie. Factorii care induc producia de factor de necroz tumoral sunt reprezentai de bacterii, peptidoglicanii din peretele bacterian, complexele imune antigen-anticorp, celulele maligne, virusuri, zimosanul din peretele levurilor i ionii de zinc. Efectele sale sunt date de inhibarea replicrii virale i stimularea diferenierii monocitelor n macrofage active capablie de fagocitoz, sinteza moleculelor MHC I i MHC II, creterea proliferrii fibroblastelor, creterea activitii fagocitare. De asemenea determin pirogenie (stimularea centrilor termogenezei din hipotalamus cu apariia febrei), determin hipotensiune, stimuleaz regenerarea ficatului, induce sinteza proteinelor de faz acut precum proteina C reactiv, induce apoptoza celulelor int i activeaz celulele endoteliale, stimuleaz limfocitele B i T i mrete aderena acestora la endoteliul vascular. Se mai numete i caectin datorit efectului su stimulator asupra catabolismului care determin slbirea exagerat a organismului cu epuizarea rezervelor energetice aducndul n stare de caexie cu predominena sindromului de epuizare care se manifest clinic prin scdere excesiv n greutate fapt evident la uni pacieni neoplazici i la cei cu infecii cronice precum tuberculoza. Este cauzat de faptul c trigliceridele sunt mobilizate din depozite i sinteza enzimelor lipogene este inhibat.

Interferonii
Sunt glicoproteine alctuite din 146- 166 de aminoacizi, care fac parte din familia citokinelor, avnd rol principal n aprarea antiviral, n modificarea rspunsului imun i n controlul proliferrii i diferenierii celulare. Exist mai multe forme de inteferoni datorit difernelor legate de gradul de antigenicitate, masa molecular i gradul de glicozilare. Exist la om cinci tipuri de interferoni: alfa, beta, gamma, tau i omega, toi interferonii fiind codificai de gene situate pe cromozomul 9, cu excepia interferonului gamma care este codificat de gene situate pe cromozomul 12. Secvena aminoacizilor din diferitele tipuri de IFN este diferit, ns unele pri sunt comune tuturor interferonilor.

Sinteza interferonilor Celulele obinuite nu sintetizeaz cantiti detectabile de interferoni n mod normal, deoarece genele care codific sinteza lor nu sunt transcrise. Inducerea sintezei interferonilor are loc sub aciunea anumitor ageni precum: virusurile infecioase sau inactivate, endotoxinele produse de bacteriile gram negative, infecia cu micoplasme, rickettsii sau chlamidii, polimeri sintetici din clasa polizaharidelor, sau moleculele de ARN dublu catenar. i agenii non-microbieni din clasa hidrocarburilor aromatice policiclice precum antrachinonele pot stimula sinteza de interferoni.
Cel mai bun i mai puternic stimulator al produciei interferonilor este ARN dublu catenar, indiferent dac originea sa este natural sau sintetic, prin urmare n cazul virusurilor cu genom ARN dublu catenar, genomul viral este el nsui stimulatorul produciei de interferon. Virusurile cu genom ADN sunt slab inductoare ale produciei de interferon,

sinteza lui fiind stimulat i de virusurile inactivate din vaccinuri. Actinomicina D care este un inhibitor al sintezei proteinelor inhib i producia de interferon.

Efectele biologice ale interferonilor Activitatea antiviral Interferonii sunt prima linie de aprare mpotriva infeciilor virale, sinteza lor fiind declanat de ARN dublu catenar care constituie genomul majoritii virusurilor. Interferonul produs de ctre o celul infectat de un virus nu are niciodat aciune autocrin, adic asupra celulei care l-a produs ci acionez pe celulele nc neinfectate inducndu-le o stare antiviral care determin inhibarea sintezei proteinelor virale cu imposibilitatea de multiplicare a virusului. Aceast aciune antiviral este foarte puternic, rapid i nespecific (acioneaz asupra tuturor virusurilor, nu numai asupra anumitor categorii de virusuri) ns este tranzitorie i dependent de doz ntruct starea de protecie indus de interferon dureaz doar cteva zile i apoi dispare putnd fi indus din nou dup cteva zile de absen. Aciunea viral a interferonilor nu este direct, ntruct acetia induc o stare de protecie antiviral asupra celulelor neinfectate de ctre virus. Interferonul este produs de ctre celulele infectate n acelai timp n care se desfoar ciclul de replicare al virusului care a infectat oganismul. Imediat dup ce a fost sintetizat, este eliberat de ctre celulele infectate i ajunge paracrin la celulele nvecinate care nu au fost infectate de virus, inducndu-le o stare de protecie antiviral prin urmare virusul va ntlni o barier n momentul n care va ncerca s le invadeze i pe acestea. Nivelul activitii antivirale este dependent de concentraia extracelular a interferonului, prin urmare cele mai rezistente celule la infecia viral vor fi cele imediat nvecinate celulei secretoare de interferon. Celulele ndeprtate sunt mai puin protejate sau nu au protecie deloc.
Efectul imunomodulator Interferonii sunt implicai n rspunsul imun umoral i n rspunsul imun celular, fapt dovedit prin experimente realizate att in vivo ct i in vitro. Sunt responsabili de diminuarea reaciilor de hipersensibilitate i diminuarea fenomenului de respingere a grefelor post-transplant. Efectul antiproliferativ i antitumoral Aciunea antiproliferativ are efect att asupra celulelor tumorale ct i asupra ceulelor normale ale organismului. Acest efect este cel mai bine evideniat n cadrul terapiei cu interferon, cnd s-a constatat reversibilitatea aciunii antiproliferative la ntreruperea tratamentului precum i dependena sa de doz, tipul tumoral i tipul de interferon utilizat. Efectul asupra celulelor normale a fost dovedit de evidenierea mielosupresiei indus de tratamentele anticanceroase cu interferon, care se produce prin aciunea asupra celulelor stem hematopoietice cu inhibarea formrii de elemente figurate sanguine i intrarea mduvei n aplazie. Interferonul Gamma are cea mai puternic activitate antiproliferativ. Efectul antitumoral a fost pus n eviden de aciunea interferonilor asupra tumorilor cu cretere lent. S-a dovedit c celulele tumorale cele mai sensibile la interferoni sunt de asemenea i cele mai sensibile la aciunea altor ageni citotoxici precum citostaticele anticanceroase.

Terapia cu interferoni Producia artificial de interferoni se face prin biotehnologii moderne de ctre celule manipulate genetic prin izolarea genelor codificatoare ale structurilor proteice ale

interferonilor i inserarea lor n vectori de clonare astfel au fost obinui interferoni utilizabili n terapie care sunt sintetizai prin manipularea genetic a unor celule bacteriene, celule de levuri i celule de mamifere. Terapia cu interferon se utilizeaz pe scar larg n tratamentul hepatitelor cu virus B i C, n care i-au dovedit extraordinara utilitate inducnd remisiuni pe termen lung ale bolii. Sunt utilizai i n infeciile cu virus rabic i cu virusurile care determin encefalite. S-a observat ameliorarea sau chiar vindecarea infeciilor n cazul infectrii organismului cu virusurile hepatiei B i C, virusuri herpes-zoster sau citomegalovirus. Datorit proprietilor lor antiproliferative i antitumorale interferonii sunt folosii ntratamentul unor neoplazii, cele mai sensibile la tratament fiind tumorile originare n limfocitele B i n plasmocite. Interferonul alfa are cea mai eficient activitate antiproliferativ dovedit clinic, iar interferonul Gamma are o activitate antiproliferativ foarte crescut n limfoamele Hodgkin. Reaciile adverse sunt ns numeroase, printre reaciile adverse ale interferonului alfa numrndu-se: anorexie, grea, vom, diaree, sindrom pseudogripal, reacii la nivelul sistemului nervos central cu tulburri senzoriale auditive, vizuale i tactile, palpitaii, aritmii, dureri toracice, alopecie, uscciunea pielii i a mucoaselor, exacerbarea herpesului labial, leucopenie i trombocitopenie, sindrom nefrotic, proteinurie, steatoz hepatic, creterea ureei i creatininei i creterea transaminazelor. Interferonul gamma determin sindrom pseudogripal a crui gravitate este proporional cu doza administrat. De asemenea deprim mduva hematogen producnd leucopenie i trombocitopenie. Injeciile cu interferon se administreaz intramuscular.

Macrofagele
Bacteriile, virusurile, paraziii i antigenele n general, fie ele exogene sau endogene sunt distruse n principal de ctre neutrofilele i macrofagele din esuturi. Neutrofilele distrug bacteriile aflate chiar n sngele circulant, deoarece au o mare capacitate de a le recunoate i a le ataca. Macrofagele tisulare sunt iniial monocite sangvine care att timp ct circul n snge sunt imature i au capaciti foarte limitate de barare a aciunii antigenelor. Cnd monocitele ajung n esuturi ele i mresc volumul de 2 pn la 5 ori, pn la dimensiunea de 60- 80 de microni. Aceste celule mari se numesc macrofage i sunt foarte eficiente i capabile s combat antigenele care ajung n esuturi.

Fagocitoza
Este cea mai important funcie a macrofagelor i constituie ingerarea agentului invadator de ctre celul. Din acest motiv, macrofagele se mai numesc i fagocite i ele prezint selectivitate fa de antigenul care este fagocitat. Dac nu ar exista aceast selectivitate atunci macrofagele ar putea ingera celule normale sau elemente structurale ale organismului. Fagocitoza este influenat de trei factori: 1. Rezistena la fagocitoz a celulelor normale ale organismului. Majoritatea structurilor naturale ale esuturilor au suprafee netede. Netezimea suprafeelor confer rezistena lor la fagocitoz. Celulele anormale i microorganismele au suprafa rugoas, ceea ce face ca acestea s fie sensibile la fagocitoz fiind recunoscute de ctre macrofage i ingerate. 2. nveliul protector cu structur proteic pe care l dein majoritatea substanelor naturale ale organismului. Acest nveli respinge macrofagele. Majoritatea esuturilor

moarte, precum i particulele strine nu au nveli protector i acest lucru le confer sensibilitate la fagocitoz. 3. Anticorpii produi de ctre sistemul imunitar al organismului. Aceti anticorpi ader la membrana celulelor bacteriene, virale i parazitare i le confer susceptibilitate la fagocitoz. Astfel molecula de anticorp se combin cu complementa C3 produs pe ambele ci ale complementului, clasic i alternativ i realizeaz opsonizarea prin depunerea pe membrana celulei antigenice. Moleculele de C3 se leag la rndul lor de receptorii membranari ai fagocitelor i iniiaz fagocitoza. Opsonizarea selecteaz celulele pentru fagocitoz i le face sensibile la aciunea fagocitelor putnd fi mult mai uor ingerate i eliminate din organism. Macrofagele sunt capabile s fagociteze pn la 100 de bacterii simultan, n timp ce neutrofilul poate ngloba ntre 3 i 20 de bacterii. Macrofagele sunt de asemenea capabile s nglobeze particule mari, precum hematii sau parazii (de exemplu paraziii malariei), pe cnd neutrofilele nu pot fagocita particule mai mari dect bacteriile. Macrofagele, dup digerarea antigenului vor trimite produsele reziduale n afara celulei. Majoritatea fagocitelor supravieuiesc acestui proces de expulzie i i pstreaz funcionalitatea pentru nc cteva sptmni sau luni. Dup ce sunt nglobate n macrofag, majoritatea particulelor sunt digerate de ctreenzimele intracelulare ale fagocitului. Dup fagocitarea unui antigen, lizozomii i granulaiile citoplasmatice ale macrofagului intr n contact cu veziculele de fagocitoz n care se afl antigenul i fuzioneaz cu membrana lor elibernd astfel n vezicula de fagocitoz enzime digestive i ageni bactericizi. Vezicula de fagocitoz se transform astfel n vezicul de digestie, n care ncepe distrugerea particulei de antigen. Att neutrofilele ct i macrofagele conin enzime proteolitice care sunt produse de ctre lizozomi, ele fiind specializate n distrugerea bacteriilor i a corpusculilor strini de natur proteic. Lizozomii macrofagelor conin cantiti mari de lipaze care diger membranele lipidice groase din structura unor bacterii precum bacilul Koch care provoac tuberculoza. Macrofagele conin de asemenea ageni bactericizi care intr n aciune atunci cnd enzimele lizozomale nu reuesc s digere anumite bacterii care au nveliuri protectoare. Efectul letal este datorat agenilor antioxidani puternici care sunt produi de enzimele din membrana unor organite numite fagozomi sau de organite speciale numiteperoxizomi. Agenii oxidani conin cantiti mari de ion superoxid, peroxid de hidrogen i ion hidroxil, acestea cauznd moartea majoritii bacteriilor deoarece au efect letal asupra lor. Mieloperoxidaza este o enzim lizozomal care catalizeaz reacia dintre apa oxigenat i ionul de clor cu formarea hipocloritului, acesta fiind un produs cu efect intens bactericid. ns, exist bacterii precum bacilul Koch care sunt rezistente la digestia lizozomal i secret enzime care rezist parial efectului bactericid al neutrofilelor i macrofagelor. Ele sunt responsabile astfel de boli cronice, crora sistemul imun nu le poate face fa i vindecarea este imposibil fr un tratament adecvat.

Sistemul reticulo-endotelial
Dup ce monocitele se transform n macrofage i ptrund n esuturi, un numr mare de monocite rmn fixate intratisular cteva luni sau ani pn cnd ntlnesc un antigen i trebuie s nceap fagocitoza. Funcional, aceste celule staionare sunt similare macrofagelor care sunt mobile. Monocitele staionare au i ele capacitatea de a fagocita

cantiti mari de bacterii, virusuri, esuturi moarte i alte particule strine aflate intratisular. Cnd sunt stimulate suficient, ele pot ptrunde n circulaie i redevin macrofage mobile, rspunznd la chemotactism prin iniierea procesului de inflamaie. Sistemul reticulo-endotelial reprezint totalitatea monocitelor, a macrofagelor mobile, a macrofagelor tisulare fixe, la care se adaug celulele endoteliale specializate din mduva osoas, splin i ganglionii limfatici. Aproape toate dintre aceste celule au originea n celulele stem monocitare, de aceea acest sistem a primit i denumirea de sistem monocito-macrofagic. El este un sistem generalizat de fagocitoz, care exist n toate esuturile dar mai ales n cele n care exist cantiti mari de particule, toxine i substane strine care trebuie distruse i ndeprtate din organism. n componena sistemului reticulo-endotelial intr urmtoarele celule:

Histiocitele Sunt macrofagele tisulare din tegument i din esuturile subcutanate. Tegumentele intacte sunt impermeabile i impenetrabile pentru agenii infecioi. Atunci cnd exist leziuni cutanate ns, acest lucru nu mai este posibil. Macrofagele tisulare locale aflate n esutul subcutanat i multiplic numrul prin diviziune in situ n momentul n care n esutul respectiv se dezvolt un proces infecios urmat de inflamaie local, ca urmare a invadrii acestuia de ctre bacteriie care ptrund prin leziunile cutanate preexistente. Dup multiplicarea macrofagelor din esutul subcutanat, acestea ncep fagocitoza i distrugerea agenilor infecioi. Macrofagele din ganglionii limfatici Orice particul care ajunge n esuturi datorit unor leziuni cutanate nu va putea ptrunde niciodat n circulaia sangvin direct prin traversarea membranei capilarelor. Dac histiocitele din esutul subcutanat nu reuesc s distrug agentul infecios respectiv, antigenele ptrund n limf i ajung n ganglionii limfatici care sunt staii pe traiectul circulaiei limfatice. Particulele antigenice sunt blocate practic la nivelul acestor staii ganglionare, la nivelul unei reele de capilare mrginite de ctre macrofagele tisulare. Limfa mpreun cu antigenele ptrunde n ganglionii limfatici pe calea vaselor limfatice aferente, strbate apoi sinusurile medulare ganglionare i prsete ganglionul prin hil prin vasele limfatice eferente care se vars n circulaia venoas. Sinusurile limfatice sunt tapetate de un numr foarte mare de macrofage, orice particul care ptrunde n sinusuri pe cale limfatic urmnd a fi fagocitat de ctre acestea, oprindu-se astfel diseminarea antigenului n organism. Macrofagele alveolare pulmonare Microorganismele agresoare ptrund foarte frecvent n organism pe cale pulmonar, mai ales n cazul infeciilor respiratorii provocate prin contactul cu particulele aeriene expulzate de ctre un organism bolnav sau purttor al agentului infecios, particule care ajung pe cale aerian la organismul ce intr n contact cu ele.
Pereii alveolari prezint n structura lor un numr mare de macrofage tisulare care fagociteaz particulele care se fixeaz la nivel alveolar. Dac particulele respective pot fi digerate, macrofagele realizeaz digestia prin enzimele lor lizozomale sau prin agenii oxidani i elibereaz produii de digestie n limf. ns exist i situaia n care particulele nu pot fi digerate, atunci macrofagele le nglobeaz ntr-o capsul intracelular n care antigenul se va dizolva lent, dac este posibil. Dac nu se produce digestia antigenului, atunci acesta va distruge macrofagul care l-a nglobat i va continua procesul de invazie n

organism.

Celulele Kupffer Sunt macrofagele aflate n capilarele sinusoide ale ficatului. Tractul gastro-intestinal este o cale preferenial pentru intrarea bacteriilor n organism deoarece acestea ajung n organism pe cale alimentar, traverseaz mucoasa gastro-intestinal i ajung n sngele portal. nainte ca sngele din vena port a ficatului s ajung n circulaia general venoas el trece prin capilarele sinusoide hepatice care sunt tapetate cu macrofage tisulare ce poart numele de celule Kupffer. Aceste macrofage constituie un sistem foarte eficient de filtrare a particulelor, astfel aproape nicio bacterie care invadeaz tractul gastro-intestinal nu va putea s treac din sngele venos al sistemului port hepatic n circulaia venoas sistemic. Macrofagele din splin i din mduva osoas Microorganismele pot trece uneori de toate barierele reprezentate de sistemul macrofagic tisular, macrofagele alveolare i celulele Kupffer i vor ajunge n circulaia sistemic. Linia de aprare a organismului mpotriva antigenelor din circulaia sistemic este reprezentat n principal de macrofagele splenice i macrofagele din mduva osoas. Ambele esuturi conin macrofage tisulare fixate ntr-o structur reticulat care au rolul de a fagocita particulele strine.
Splina este similar ca structur ganglionilor limfatici, singura diferen fiind aceea c prin spaiile tisulare ale splinei curge snge n loc de limf. O arter de dimensiuni reduse ptrunde prin capsula splenic n parenchimul splenic i se ramific n capilare mici. Capilarele sunt foarte poroase permind difuzarea sngelui n cordoanele din pulpa roie splenic. Sngele va strbate reeaua trabecular a acestor cordoane i este supus treptat unui proces de filtrare, rentorcndu-se n final n circulaie prin pereii endoteliali ai sinusurilor venoase. Trabeculele pulpei roii a splinei sunt tapetate de un numr foarte mare de macrofage care sunt gata s fagociteze reziduurile nedorite din snge, precum hematiile anormale sau btrne.

Celulele prezentatoare de antigen

O funcie extrem de important a macrofagelor este reprezentat de prezentarea antigenului. Celulele prezentatoare de antigen sunt celule care joac un rol crucial n declanarea sau iniierea rspunsului imun fa de antigenele timo-dependente. Declanarea acestui rspuns imun se face n organele limfoide secundare precum splina i ganglionii limfatici. Antigenele timo-dependente implicate sunt majoritare i ajung intratisular fiind captate de ctre macrofagele aflate deja acolo. Fr existena celulelor prezentatoare de antigen declanarea rspunsului imun nu poate fi posibil. Aceste celule capteaz cantiti foarte mari de antigene, transport aceste antigene pn n organele limfoide secundare i prezint antigenele ctre celulele sistemului imun determinnd o cooperare celular local fie cu limfocitele T helper i cu limfocitele B declanndrspunsul imun umoral, fie cu limfocitele T helper i cu limfocitele T citotoxicedeclannd rspunsul imun celular. Rspunsul imun poate fi declanat doar n ganglionii limfatici loco-regionali, care dreneaz limfa esutului n care au ptruns antigenele.

Rolul macrofagelor n prezentarea antigenului

Macrofagele sunt produse de ctre mduva hematogen care lanseaz n circulaie elementele tinere nematurate numite monocite care, dup ce tranziteaz scurt circulaia sistemic timp de 24- 36 de ore vor trece din vasele locale n esuturi unde sunt atrase. Monocitele sunt activate de factori chemoatractani tisulari i trec prin trei etape i anume: macrofage rezidente sau responsive, macrofage iniiate sau parial activate i macrofage activate. Singurele care ndeplinesc funcia de celule prezentatoare de antigen sunt macrofagele activate.

Etapele prezentrii antigenului de ctre macrofage

1. Captarea antigenului Macrofagele capteaz numai antigenele corpusculate reprezentate de bacterii, virusuri, parazii mici, celule tumorale sau canceroase precum i celule sangvine sau somatice proprii organismului care au devenit antigene. Macrofagele nu sunt capabile s capteze antigenele solubile.
Captarea antigenelor corpusculare reprezentat de macrofage este att un proces mediat receptorial ct i un proces imunologic nespecific. Macrofagele capteaz eficient antigenele opsonizate de ctre componentele C3b ale sistemului complement i de ctre imunoglobulinele G. Opsoninele sunt factori imunologici solubili care sensibilizeaz antigenul favoriznd captarea lui de ctre macrofage. Componenta C3b a complementului este fragmentul mai mare care rezult prin liza enzimatic (proteoliza limitat) a factorului C3 din care rezult 2 fragmente, C3a, fragment mai mic cu rol de anafilotoxin care mediaz procesul inflamator i C3b, fragment proteic mare cu rol de opsonin. C3b este prezent n permanen n circulaie datorit funcionrii continue a cii alternative a complementului. C3b rezult i pe cale clasic, dar aceasta funcioneaz intermitent, la un nivel de intensitate mult mai ridicat dect calea alternativ. C3b se ataeaz numai de membranele non-self i se dispune sub forma unui strat molecular continuu pe suprafaa antigenului. Numai celulele non-self au receptori pentru complement. Celulele self resping fixarea complementului pe suprafaa lor prin anumii factori membranari. Astfel numai celulele non-self pot fi opsonizate de ctre componenta C3b a complementului i pregtite pentru fagocitoz prin facilitarea captrii lor de ctre macrofagele tisulare. Macrofagele se prind de componenta C3b prin receptorii CR (complement receptors) aflai pe membrana tuturor macrofagelor. Imunoglobulina G este un anticorp proteic produs de plasmocitele derivate din limfocitele B. Are o greutate molecular foarte mic i structur monomeric, ceea ce i faciliteaz trecerea prin pereii vaselor de snge i extravazarea din microcirculaie n esuturi. Formele monomere intratisulare de imunoglobulin G sunt n aceeai concentraie ca i cele plasmatice. Ele recunosc determinantul de suprafa al antigenului deoarece au situsuri combinative pentru antigen pe suprafaa lor i se depun pe antigen formnd legturi prin captul Fab flexibil i rmnnd n exterior cu captul constant Fc al lanului imunoglobulinic. nvelesc n totalitate bacteria astfel nct macrofagele vor capta foarte uor moleculele nvelite cu imunoglobuline G deoarece au receptori care angajeaz legturi cu captul Fc al lanului imunoglobulinei G, capt care a rmas n exteriorul celulei antigenice, la suprafaa membranei acesteia. Receptorii macrofagelor pentru captul Fc constant al imunoglobulinelor G se numesc Fc gamma receptori. Macrofagele pot capta bacterii neionizate n condiii excepionale, atunci cnd recunosc

pe suprafaa membranei bacteriene resturi zaharidice de fructoz i manoz prinreceptorul de manoz aflat pe macrofage. Nu toate bacteriile prezint pe suprafaa lor resturi de zaharid, acest tip de fagocitoz prin manoz-receptori fiind rezervat mai ales pentru levuri i protozoare parazite. Cei mai importani receptori de pe membrana macrofagelor sunt CR i Fc gamma receptor, care se numesc receptori opsoninici deoarece cu ajutorul lor macrofagul se prinde de opsoninele C3b i IgG. Captarea antigenului pe care o realizeaz macrofagele este imunologic nespecific, deoarece macrofagele, prin receptorii lor de suprafa nu au niciodat contact cu determinanii antigenici ai bacteriilor, deci nu recunosc antigenul n sine, recunosc numai opsoninele reprezentate de fraciunea C3b a complementului i de imunoglobulinele G.

2. Endocitarea particulei de antigen Macrofagul emite pseudopode, se leag de antigen prin receptorii opsoninici sau prin receptorii de manoz i internalizeaz antigenul ntr-o vezicul de endocitoz. Rezult astfel fagozomi sau endozomi. 3. Procesarea antigenului internalizat Dup ce antigenul a fost preluat n vezicula de endocitoz el este procesat n compartimentul endozomal al macrofagului sub aciunea enzimelor lizozomale cu efect litic care scindeaz antigenul n numeroase fragmente mici numite epitopi. Epitopii imuno-dominani (epitopii cei mai activi i capabili s declaneze rspunsul imun) sunt selecionai de ctre macrofage, urmtoarele dou etape ale prezentrii antigenului depinznd de aceti epitopi. 4. Conservarea unei mici cantiti din epitopii imuno-dominani O parte dintre epitopii selectai de ctre macrofage vor fi conservai n citoplasma acestuia i eliberai la suprafa treptat, n cantiti mici i pe o perioad lung de timp. Acesta este procesul prin care rspunsul imun se ntreine i se amplific n timp, facilitnd recunoaterea tuturor antigenelor circulante de acelai tip i distrugerea lor. 5. Formarea de complexe epitopi-MHC Cea mai mare parte din epitopi sunt cuplate cu molecule ale sistemului major de histocompatibilitate i se formeaz complexe epitopi-MHC. Moleculele MHC (major compatibility system) sunt molecule exprimate pe suprafaa celulelor prezentatoare de antigen numite histocompatibility human leucocyte antigen. Exist dou tipuri de molecule MHC, MHC I (prezent ubicuitar pe membrana oricrei celule nucleate din organism) i MHC II (exprimat doar pe membrana celulelor care particip la rspunsul imun i anume celule prezentatoare de antigen precum macrofagele i celulele dentridice, limfocitele B i limfocitele T). La rspunsul imun particip numai macrofagele care elaboreaz MHC II. Macrofagele care elaboreaz MHC I particip la rspunsul inflamator. Complexele MHC IIepitopi se vor forma pe membrana macrofagelor care elaboreaz MHC II i vor fi prezentate limfocitelor T helper urmat de declanarea rspunsului imun, fie el umoral sau celular. Aceasta este etapa final a prezentrii antigenului.
Eseniale pentru prezentarea antigenului sunt etapa de captare a antigenului i etapa de formare a complexelor epitopiMHC, adic etapele 1 i 5.

Funcia de ansamblu a macrofagelor este aceea de transport al antigenelor timodependente de la nivel tisular ctre ariile timo-dependente ale organelor limfoide secundare unde vor prezenta antigenele respective ctre limfocitele T helper care vor declana reacia imun, fie ea de tip umoral sau de tip celular.

Inflamaia
Cnd se produce o leziune tisular, indiferent dac ea este provocat de bacterii, traumatisme, substane necrozante sau orice alt agent fizic precum cldur, curent electric sau factori mecanici, la nivelul zonei care a fost afectat se elibereaz foarte multe substane care induc modificri secundare foarte importante n esuturile nconjurtoare neafectate. Complexul acesta de transformri tisulare se numete inflamai i este caracterizat de: 1. Vasodilataia local cu amplificarea fluxului sangvin care ajunge la nivel local n esutul afectat 2. Creterea permeabilitii capilare cu extravazarea unei cantiti mari de lichid n spaiul interstiial 3. Coagularea lichidului din spaiile interstiiale datorit cantitilor excesive de fibrinogen existente local 4. Migrarea unui numr mare de granulocite (leucocite polimorfonucleare) i monocite n esuturi 5. Tumefierea celulelor tisulare Substanele eliberate la nivel tisular, responsabile de inducerea acestor reacii sunt: histamina, bradikinina, serotonina, prostaglandinele, produii de reacie ai sistemului complement, produii de reacie ai sistemului de coagulare sangvin i limfokinele eliberate de ctre celulele T sensibilizate. O parte dintre substanele enumerate activeaz puternic macrofagele i acestea vor ngloba esuturile atacate de antigen i le vor distruge n cteva ore. Foarte important este delimitarea regiunii inflamate de esuturile sntoase din jur. Cheagurile de fibrinogen blocheaz spaiile tisulare i limfaticele din zonele inflamate, astfel nct va nceta aproape complet fluxul lichidian dintre zona inflamat i zona sntoas i se va ntrzia rspndirea bacteriilor i toxinelor ctre zonele sntoase. Intensitatea procesului inflamator este proporional cu gradul de afectare tisular. De exemplu, stafilococul care invadeaz esuturile elibereaz toxine toxice letale i inflamaia se dezvolt cu o vitez foarte mare, ns infecia stafilococic este delimitat rapid, i rspndirea toxinelor n prile sntoase este blocat, dei distrugerile tisulare locale sunt foarte mari. Streptococul, pe de alt parte nu distruge esuturile la fel de mult. De aceea procesul de delimitare al inflamaiei se produce foarte lent, pe durata a mai multor ore, timp n care muli streptococi se divid i mibreaz n zonele sntoase i riscul ca infecia s disemineze sistemic i s produc decesul este mult mai mare dect n cazul stafilococului, dei distrugerile tisulare locale sunt mult mai mici.

Liniile de aprare mpotriva infeciilor

1. Macrofagele tisulare

Macrofagele prezente n esuturi, indiferent dac este vorba despre histiocitele subcutanate, macrofagele alveolare din plmni sau microgliile sistemului nervos central i ncep activitatea fagocitar n cteva minute de la debutul inflamaiei. Ele sunt activate dectre produii generai de infecie i de inflamaie i dimensiunile lor cresc n urma acestei activri. n prima or de la debutul procesului de inflamaie multe din macrofagele anterior staionare vor deveni mobile, prin ruperea legturilor lor cu esutul de origine. Aceste macrofage mobile formeaz prima linie de aprare mpotriva infeciei. Ele nu sunt n numr foarte mare dar faptul c se mobilizeaz precoce poate salva viaa pacientului supus aciunii antigenice.

2. Invazia neutrofilelor n zona de inflamaie Neutrofilele care invadeaz zona de inflamaie n cursul primei ore de la declanarea procesului inflamator reprezint a doua linie de aprare mpotriva invaziei sistemice a infeciei tisulare. Invazia zonei inflamate de ctre neutrofilele sangvine este controlat de produii generai n esutul inflamat care genereaz anumite modificri propice acestei invazii precum inducerea unor modificri ale suprafeei interne a endoteliului capilar cu fixarea neutrofilelor n pereii vaselor din microcirculaia esutului inflamat. Acest proces se numete marginaie.
Produii generai de inflamaie acioneaz i asupralegturilor intercelulare dintre celulele endoteliale ale capilarelor i venulelor inducnd astfel o laxitate a acestora cu apariia unor pori care permit traversarea membranei vasculare de ctre neutrofilele din snge i trecerea lor direct n spaiile tisulare. Acest proces se numete diapedez. Un alt proces este reprezentat de chemotactismul neutrofilelor ctre esuturile inflamate, termen care se refer la atragerea specific a neutrofilelor ctre esutul inflamat, nu ctre esuturile sntoase, atracie care are loc tot datorit secreiei de produi specifici ai inflamaiei n esutul afectat de antigene. Un mare numr de neutrofile se acumuleaz n cteva ore de la producerea leziunii tisulare. Ele sunt celule mature care vor cura zona respectiv prin distrugerea bacteriilor i ndeprtarea substanelor strine.

3. Neutrofilia Reprezint creterea numrului de neutrofile din snge dup cteva ore de la debutul inflamaiei. Ele pot crete uneori de 4-5 ori fa de valoarea normal care este de 50008000 de neutrofile pe milimetru cub de snge. Astfel ele pot ajunge la 15.000- 25.000 de neutrofile pe milimetru cub. Neutrofilia este provocat tot de produii inflamaiei care ajung n circulaia sistemic fiind transportai ctre mduva osoas, prin urmare vor aciona asupra neutrofilelor depozitate aici i le vor mobiliza n circulaie. Datorit neutrofiliei, numeroase neutrofile vor fi disponibile la locul inflamaiei. 4. A doua mobilizare a macrofagelor A doua mobilizare a macrofagelor ctre esutul inflamat constituie a treia linie de aprare mpotriva infeciei. Dup invazia neutrofilelor n circulaie, monocitele sangvine i vor mri volumul i vor deveni macrofage. Acumularea macrofagelor n esutul inflamat este mult mai lent deoarece rezervele de monocite din mduva osoas sunt mai reduse dect rezervele de neutrofile. Prin urmare sunt necesare cteva zile pn cnd macrofagele activate n acest fel devin eficiente. Chiar i dup ce monocitele se acumuleaz n esutul inflamat, ele sunt nc imature i necesit 8 sau mai multe ore pentru a-i mri dimensiunile i a deveni macrofage disulare. Cantitile mari de lizozomi i de enzime bactericide necesare distrugerii antigenelor se formeaz ntr-un timp mai

ndelungat, ns, dup cteva zile sau sptmni macrofagele devin predominante n rndul celulelor fagocitare din zona inflamat datorit creterii imortante a producerii medulare de monocite. Macrofagele ns pot fagocita un numr mult mai mare de bacterii dect neutrofilele (aproximativ de 5 ori mai mare) i fagociteaz i particule mult mai mari, inclusiv neutrofile i cantiti mari de esut necrotic. Joac de asemenea un rol important n medierea sintezei de anticorpi de ctre plasmocitele derivate din limfocitele B.

5. Amplificarea formrii de granulocite i monocite Creterea numrului de granulocite i monocite care se formeaz n mduva osoas constituie a patra linie de aprare. Producia crescut de celule ale sistemului imun este datorat stimulrii celulelor stem din seria granulocitar i monocitar din mduv.Sunt necesare 3-4 zile nainte ca granulocitele i monocitele nou-formate s prseasc mduva osoas i s ajung la esutul inflamat ns dac esutul inflamat i menine producia de substane stimulatoare, mduva osoas va produce n continuare un numr mare de granulocite i monocite, timp de cteva luni sau chiar ani de zile, cu o rat de 20 -50 de ori mai mare dect cea normal, n cazul anumitor tipuri de inflamaie.
Controlul rspunsului macrofagelor i neutrofilelor la substanele stimulatoare eliberate de esutul inflamat se face prin mecanism de feed-back. Mai mult de 24 de factori sunt implicai n controlul rspunsului macrofagic la inflamaie ns numai 5 dintre aceti factori au un rol predominant. Ei sunt: factorul de necroz tumoral TNF (Tumoral Necrosis Factor), interleukina 1 (IL-1), factorul de stimulare a coloniilor de granulocite i monocite (GM- CSF), factorul de stimulare al coloniilor de granulocite(G- CSF), i factorul de stimulare a coloniilor de monocite (M- CSF). Factorii acetia sunt produi de ctre macrofagele activate n esuturile inflamate. Cauza creterii de granulocite i monocite n mduva osoas este reprezentat de aciunea celor trei factori stimulatori ai coloniilor: GM-CSF stimuleaz att formarea granulocitelor ct i a monocitelor, n timp ce ceilali doi, G-CSF i M-CSF stimuleaz formarea granulocitelor, respectiv formarea monocitelor. Adugarea TNF i IL-1 reprezint un puternic mecanism de feed-back care ncepe cu inflamaia tisular i continu cu formarea unui numr mare de leucocite implicate n aprare, leucocite care contribuie la ndeprtarea antigenului tisular care constituie cauza inflamaiei.

6. Formarea puroiului Neutrofilele i macrofagele care au fagocitat un numr mare de bacterii i de esut necrozat (detritus) vor sfri n majoritate prin moarte celular. Prin urmare, dup cteva zile de la startul inflamaiei, n esutul inflamat se va forma o cavitate care conine esut necrotic, neutrofile moarte, macrofage moarte i lichid tisular, produs care este denumit puroi. Dup ce infecia a fost suprimat de ctre sistemul imunitar, celulele moarte i esutul necrotic din materialul purulent se vor autoliza treptat, ntr-un interval de cteva zile i produii finali vor fi absorbii n esuturile nconjurtoare i limf i ndeprtai. ntr-un final, aproape toate urmele leziunii iniiale vor disprea, iar rezultatul final va fi vindecarea esutului respectiv.

Reacia autoimun
Reacia autoimun este un rspuns imun al organismului fa de structurile self. n mod normal, celulele sistemului imunitar trebuie s acioneze numai asupra structurilor nonself cu caracter de antigene, care nu aparin organismului respectiv. ns, n cazul reaciei

autoimune,

organismul

atac

propriile

structuri

prin auto-anticorpi.

O condiie obligatorie n funcionarea sistemului imunitar o reprezint tolerana fa de structurile self. ns, n momentul n care se formeaz auto-anticorpi sau se difereniaz limfocite autoreactive care nu mai recunosc self-ul, tolerana dispare i rspunsul imun este direcionat mpotriva structurilor normale care devin auto-antigene sau selfantigene. Dei exist o tendin general de a considera reactivitatea fa de self ca fiind cauza declanatoare a bolilor autoimune, acest lucru nu s-a demonstrat niciodat practic. Se tie ns c self-reactivitatea amplific manifestrile patologice ale bolilor autoimune a cror etiologie primar ns nu se cunoate.

Mecanismele reaciei autoimune

1. Eliberarea antigenului sechestrat. nc din timpul dezvoltrii embrionare, n primele 4 sptmni de via intrauterin este ncepe inducerea toleranei fa de self. Antigenele sechestrate sunt acele substane/structuri/celule ale organismului care nu sunt prezentate ctre celulele limfoide n perioada embrionar. Ele scap de controlul limfocitar deoarece sunt situate fie intracelular, fie sunt delimitate de bariere anatomice. ntr-un organism integru structural i funcional, antigenele sechestrate vor fi n continuare delimitate de bariere i nu vor veni niciodat n contact cu celulele sistemului imunitar. ns, n momentul producerii unui traumatism, proces infecios sau intervenie chirurgical are loc penetrarea barierelor naturale cu distrugerea integritii acestora i eliberarea antigenelor sechestrate. Ele devin accesibile celulelor sistemului imunitar i determin o reacie imun. Dintre maladiile autoimune declanate de aceste antigene fac parte anumite afeciuni demielinizante ale sistemului nervos central i tiroidita Hashimoto. 2. Pierderea strii de toleran fa de self. Prin anumite mutaii necunoscute pn la momentul actual, se produce proliferarea unei clone limfocitare intolerante fa de self. Limfocitele B i T produse astfel se numesc limfocite autoreactive ntruct ele nu sunt capabile s recunoasc structurile normale i le consider structuri non-self, declannd rspuns imun mpotriva acestora. Un mecanism probabil este scderea activitii limfocitelor T supresoare cu creterea activitii limfocitelor T helper. 3. Teoria selfului alterat ia n considerare ca mecanism al autoimunitii modificarea structurii chimice a proteinelor proprii ale organismului care devin antigene. Factorii fizici precum arsurile i radiaiile, factorii chimici din clasa medicamentelor citostatice precum i aciunea bacteriilor, virusurilor sau fungilor modific i altereaz conformaia molecular i structura biochimic a proteinelor proprii sau a proteinelor self. Ele devin astfel autoantigene. 4. Asemnarea de structur dintre antigenele exogene i proteinele self este destul de frecvent ntlnit, ntruct unii ageni microbieni conin n structura lor proteine identice cu proteinele self. Anticorpii care se selecteaz vor recunoate att microbul, ct i structurile sale componente, astfel se vor forma anticorpi anti-structurile microbiene care seamn structural cu self-ul, deci anticorpi anti structurile self. De exemplu microorganismul bacterian Streptococus Haemolyticus conine n structura peretelui su o protenin specific numit protein M. Aceasta este similar ca structur cu proteinele muchiului cardiac, astfel nct se vor forma auto-anticorpi anti miocard cu producerea de leziuni structurale cardiace. 5. Stimularea policlonal a limfocitelor B este produs n special de virusul Epstein-

Barr, cunoscut pentru declanarea bolii numit mononucleoz infecioas. Acest virus determin activarea policlonal a limfocitelor B care se difereniaz n plasmocite i ncep s produc serii multiple de anticorpi, unii dintre ei fiind auto-anticorpi. Leziunile structurale care apar n urma reaciei autoimune apar atunci cnd autoanticorpii citotoxici, limfocitele T citotoxice i complexele imune declaneaz procesele de inflamaie i de reparare modulate de citokine.

Leziunile produse de autoanticorpi

Autoanticorpii pot fi fie mpotriva unor structuri specifice dintr-un anumit organ sau mpotriva unei anumite celule (anticorpi anti-celul miocardic, anticorpi anti-tiroidieni, anticorpi anti-eritrocitari) fie nespecifici, mpotriva unor ageni ubicuitari (anticorpi anti ADN, anticorpi anti-ARN, anticorpi anti-Fosfolipidici, anticorpi Anti-Nucleari). Mecanismele prin care autoanticorpii produc leziuni sunt urmtoarele: 1. Liza celulelor cu ajutorul complementului- Se produce legarea auto-anticorpilor de structura self mpotriva creia acetia s-au format, cu activarea cilor clasic i alternativ ale sistemului complement i cu liza osmotic a celulei int de ctre complexul de atac al membranelor (MACMembrane Attack Complex). 2. Fagocitoza i citotoxicitatea prin activarea macrofagelor de ctre autoanticorpi,macrofage care vor ingera celulele int. Prin activarea celulelor citotoxice cum ar fi celulele Natural Killer i limfocitele T citotoxice se va produce distrugerea celulelor self. 3. Formarea complexelor imune. Apar complexe imune ntre anticorpi i autoantigenii din organul int sau din snge. Aceste complexe imune circulante se vor distribui ubicuitar n organism i pot afecta diferite organe cu activarea sistemului complement, a leucocitelor polimorfonucleare i a macrofagelor. Este un mecanism observat n declanarea lupusului eritematos sistemic. 4. Inhibarea sau activarea receptorilor prin reaciile dintre auto-anticorpi i receptorii endogeni. De exemplu n diabetul zaharat insulino-rezistent (diabetul de maturitate sau diabetul de tip II) se formeaz auto-anticorpi care se cupleaz cu receptorii pentru insulin, blocnd cuplarea insulinei de receptori, prin urmare insulina nu va mai fi capabil s-i exercite aciunea de hormon hipoglicemiant. 5. Interaciunea dintre autoanticorpi i proteinele self cu modificarea activitii fiziologice a anumitor elemente nutritive sau enzime, cum este n cazul anemiei pernicioase unde este inhibat absorbia vitaminei B 12 prin apariia de anticorpi antifactor intrinsec gastric, cu rol n absorbia acestei vitamine.

Definirea bolilor autoimune

Pentru sintetizarea caracteristicilor comune prezente n bolile autoimune au fost elaborate nite criterii pe care fiecare dintre bolile autoimune le ndeplinete, denumitecriteriile Mackay. Prin urmare n orice boal autoimun, alturi de simptomele i semnele specifice bolii respective, sunt prezente urmtoarele particulariti: 1. Prezena de anticorpi specifici (autoanticorpi) 2. Hiperglobulinemia datorit supraproduciei de anticorpi de ctre plasmocitele activate 3. Depozitarea n interstiii a imunoglobulinelor denaturate 4. Proliferarea limfocitelor i plasmocitelor activate 5. Rspunsul bun al pacienilor la corticoterapie, cortizonul fiind un imunosupresor

Declanarea bolilor autoimune

Actualmente se cunosc peste 30 de boli autoimune sau cu mecanism de declanare autoimun. Se constat creterea incidenei diabetului zaharat de tip I insulino-dependent. Se crede c factorul declanator al majoritatea bolilor de acest tip este o infecie viral sau bacterian ns ele sunt condiionate de numeroi factori genetici, rasiali sau hormonali. ns indiferent de mecanismul care le-a declanat, toate bolile autoimune sunt caracterizate fie prin sinteza de autoanticorpi, fie prin generarea de limfocite T autoreactive. O particularitate a acestor boli apare la pacienii care prezint sintez de autoanticorpii const n existena unei stri de inflamaie cronic, fr o cauz infecioas determinat. Autoanticorpii au un rol foarte important n patogenez i sunt utili pentru diagnostic. Exist boli autoimune sistemice i boli autoimune localizate. n cazul celor localizate, autoanticorpii sunt orientai strict fa de antigenele self localizate ntr-un anumit organ sau ntr-un anumit esut. De exemplu n cazul diabetului zaharat insulino-dependent se formeaz autoanticorpi numai mpotriva celulelor B secretoare de insulin din insulele Langerhans ale pancreasului endocrin. Un alt exemplu este tiroidita Hashimoto, boal n care autoanticorpii sunt orientai strict mpotriva celulei epiteliale tiroidiene. Exist i boli caracterizate prin leziuni specifice ale unui anumit organ care sunt declanate de anticorpi care nu au specificitate fa de organul respectiv. Un exemplu sugestiv este ciroza biliar primitiv, cu afectare inflamatorie a canalelor i canaliculelor biliare i a vezicii biliare, ns autoanticorpii care se formeaz sunt anticorpi antimitocondriali care nu sunt specifici fa de mitocondriile hepatice. Ei nu au specificitate de organ i cu toate acestea, declaneaz o boal cu manifestri localizate strict pe un singur organ. n cazul bolilor autoimune sistemice sau diseminate lucrurile se schimb, ntructautoanticorpii sunt nespecifici i ndreptai mpotriva unei palete foarte largi de esuturi i organe. Bolile autoimune sistemice sunt lupusul eritematos diseminat, vasculitele, artrita reumatoid, dermatomiozita i scleroza sistemic. Un exemplu de anticorpi suntanticorpii anti-nucleari din lupusul eritematos diseminat. Autoanticorpii sunt specifici fa de moleculele self, iar determinarea titrului lor seric este un indiciu important al faptului c avem de a face cu o maladie autoimun. Titrul seric al autoanticorpilor se coreleaz n general cu leziunile provocate de boal. Determinarea autoanticorpilor n serul unui pacient ne poate confirma faptul c acesta sufer de o boal autoimun dar nu reprezint un diagnostic de certitudine. Uneori autoanticorpii nu pot fi determinai. Faptul c nu gsim autoanticorpi n ser nu ne garanteaz lipsa afeciunii autoimune, mai ales dac pacientul prezint anumite simptome care ne duc cu gndul la o astfel de boal. n continuare vor fi prezentate trei boli autoimune cu caracter sistemic: lupusul eritematos diseminat, artrita/poliartrita reumatoid i reumatismul articular acut.

Lupusul eritematos diseminat

Este o boal autoimun caracterizat prin producerea de anticorpi anti-Nucleari, anticorpi anti-fosfolipidici i anticorpi anti- ADN. Este mai frecvent la femei i apare ca rezultat al interaciunii dintre materialul genetic al individului i factorii de mediu. n

urma acestei interaciuni va rezulta o reacie imun anormal, caracterizat prin hiperactivitatea limfocitelor B i T, care nu poate fi barat de ctre mecanismele imunoreglatorii i de homeostazie. Aceast hiperreactivitate va genera producerea de autoanticorpi. Exist i anumite medicamente care declaneaz lupusul precumizoniazida folosit n tratamentul tuberculozei, procainamida folosit n tratamentul aritmiilor cardiace i hidralazina folosit n tratamentul hipertensiunii arteriale. Nu toi cei aflai sub tratament cu aceste medicamente dezvolt lupus. O caracteristic de difereniere a lupusului medicamentos de cel sistemic este aceea c lupusul medicamentos dispare dup maxim 6 luni de la ntreruperea medicamentului declanator.

Tabloul clinic Debuteaz n general cu semne nespecifice precum astenie, fatigabilitate, febr, anorexie, scdere ponderal.
Denumirea de lupus reflect efectul distructiv al bolii asupra esuturilor, iar termenuleritematos desemneaz aspectul leziunilor tegumentare care se accentueaz mai ales n fazele acute. Manifestrile din lupus sunt plurifocale i tabloul clinic este extrem de diversificat, boala afectnd diverse organe i sisteme de organe: tegument, articulaii, rinichi, miocard, plmni etc.

Simptomatologia depinde de organele afectate i de gradul de afectare al acestora. Lupusul eritematos sistemic este o boal cronic cu caracter ondulant, prezentnd perioade de acutizare i perioade de acalmie. Simptomele n perioada de acalmie se diminueaz semnificativ i pot chiar disprea complet, cu revenire la intensitate mare n perioadele de acutizare. Cele mai comune simptome i semne sunt urmtoarele: - Oboseala, apare la peste 90% din pacieni, fiind ns un simptom extrem de subiectiv, care nu poate fi cuantificat concret. Unii pacieni ns prezint dificulti n exercitarea activitilor zilnice, gradul foarte ridicat de oboseal fiind specific perioadei de acutizare a bolii. - Durerile articulare sunt un simptom extrem de frecvent, fiind raportate de 95% dintre pacienii cu lupus. Debutul bolii la majoritatea pacienilor se face prin apariia durerilor articulare nsoite de oboseal i dureri musculare. Articulaiile pot fi tumefiate, cu eritem cutanat i redoare matinal (articulaii nepenite dimineaa la trezire, care i recapt mobilitatea odat cu renceperea activitii fizice). Afectarea articular se numete artrit lupic i se localizeaz cel mai frecvent la articulaile coatelor, minilor, genunchilor i gleznelor. - Leziunile specifice sunt cele cutanate cu aspect eritematos situate n principal pe nas i pe obraji, cu respectarea anurilor nazogeniene i a pleoapelor. Este caracteristicforma de fluture a erupiei i fotosensibilitatea ei, cu accentuarea culorii la expunerea la soare. Se face diagnosticul diferenial al erupiei cu rozaceea, dermatomiozita i cu eczemele alergice.
n afar de leziunile eritematoase fotosensibile, n lupus exist i leziuni cu aspect discoidal, ns ele apar mai rar, fiind prezente n 25% din cazuri fiind prezente la nivelul feei, braelor, gtului i toracelui. Expunerea la raze solare, n special la ultravioletele de tip B agraveaz rash-ul cutanat (erupia fotosensibil) i poate determina agravarea lupusului. Pacienii cu piele mai deschis la culoare pot fi sensibili i la ultravioletele de tip A. - Pericardita - acumularea de lichid n sacul pericardic care nconjoar cordul se

manifest prin durere brusc, sever retrosternal cu iradiere ctre umeri, brae sau mandibul, nsoit de hipotensiune i turgescena jugularelor dac lichidul este n cantitate mare. - Febra este prezent la aproximativ 80% din bolnavi care raporteaz episoade prelungite de subfebrilitate, fr ca acestea s fie corelate cu o infecie intercurent. n unele cazuri febra poate fi semnul de debut al bolii. - Alopecia difuz poate aprea la 50 % din bolnavi, cu cderea accentuat a prului n perioadele de acutizare ale bolii, ns ea nu este permanent, prul regenerndu-se n perioadele de acalmie. - Fenomenul Raynaud afecteaz un sfert din pacieni i este caracterizat prin vasoconstricia persistent a vaselor periferice ale extremitilor n urma expunerii la frig. Degetele devin palide sau capt o nuan cianotic, sensibilitatea pielii este redus, pielea este rece la atingere, iar n momentul nclzirii extremitilor apar paresteziile (furnicturi) cu revenirea la normal a culorii pielii datorit vasodilataiei produse de expunerea la cldur. Din punct de vedere histopatologic, specifice pentru lupus sunt celulele lupiceevideniate iniial pe biopsia de mduv osoas. Celula lupic este practic o celul polimorfonuclear care a ingerat nucleul altei celule. Se pot observa i pe frotiul de snge periferic ns nu apar la toi pacienii, de aceea nu sunt incluse n criteriile de diagnostic pentru lupus i absena lor din sngele periferic nu infirm diagnosticul de lupus.

Diagnostic diferenial Lupusul este o boal destul de greu de diagnosticat ntruct simptomatologia de debut poate fi extrem de nespecific, mimnd numeroase afeciuni. Chiar i simptomatologia din perioada de stare poate pune dificulti n diagnostic deoarece se poate asemna cu cea din alte boli reumatice. Prin urmare diagnosticul diferenial n lupus se face n primul rnd cu: - Artrita reumatoid ce debuteaz cu dureri i tumefacie articular, care poate prezenta i anticorpi antinucleari cu titru crescut - Fibromialgia poate avea debut asemntor artritei reumatoide cu dureri articulare, tumefacie i oboseal, la care se supraadaug rash-ul cutanat. - Reumatismul articular acut post-streptococic este o complicaie a anginei (faringitei) streptococice, infecie a tractului respirator superior cu streptococ beta hemolitic de grup B. - Sclerodermia- boal a esutului conjunctiv, autoimun, care determin ngroarea i pierderea elasticitii pielii nsoit de afectare cardiac, pulmonar, renal i gastrointestinal Sindromul de oboseal cronic - Sindromul Sjogren, asociat frecvent cu artrita reumatoid, determin uscciunea gurii i uscciunea ochilor prin atacarea glandelor salivare i lacrimale de ctre limfocite activate.
Datorit similitudinii sale cu numeroase boli autoimune i nu numai, s-au propus 11 criterii de diagnostic pentru lupusul eritematos sistemic, iar prezena a 4 criterii din cele 11 stabilete diagnosticul de lupus.

Criterii de diagnostic n lupusul eritematos sistemic 1. Rash malar n form de fluture al pomeilor i rdcinii nasului 2. Rash discoidal localizat la nivelul feei, braelor, toracelui i gtului 3. Fotosensibilitatea erupiei cutanate la expunerea la raze ultraviolete 4. Poliserozit (acumulare de lichid n seroase) caracterizat prin pleurezie, pericardit i

mai rar ascit 5. Artrita lupic caracterizat prin durere, tumefacie i redoare la nivelul a 2 sau mai multe articulaii 6. Sumar de urin anormal (prezen de proteine n urin, eritrocite sau cilindri eritrocitari, celule epiteliale n exces). 7. Afectare neurologic fr o cauz aparent (convulsii sau psihoz). 8. Afectare hematologic cu anemie (scderea numrului de eritrocite circulante care determin scderea cantitii de hemoglobin), trombocitopenie (scderea numrului de trombocite), leucopenie (scderea numrului de leucocite). 9. Anticorpi antinucleari prezeni care ns nu sunt specifici pentru lupus, trebuie corelai cu ndeplinirea celorlaltor criterii de diagnostic i cu celelalte examene clinice i paraclinice. 10. Ulceraii bucale sau nazale frecvent nedureroase 11. Teste imunologice care indic creterea activitii autoimune (complement sczut, imunoglobuline crescute etc.)

Mecanism fiziopatologic n sngele pacienilor cu lupus s-a gsit nivel seric ridicat de IgG cu specificitate antinuclear. Producerea de autoanticorpi este responsabil de manifestrile clinice, identificndu-se pn acum aproximativ 28 de tipuri de autoanticorpi care pot s apar n aceast boal. Cel mai frecvent apar ns: anticorpii antinucleari, anticorpii anti leucocitari, anti muchi neted, anti-plachetari i anti ribozomali. Un test folosit n diagnosticarea lupusului este punerea n eviden a titrului crescut de anticorpi anti-ADN dublu catenar mpreun cu nivelul sczut de activitate al complementului.
Anticorpii anti ADN din sngele pacienilor cu lupus aparin clasei de anticorpi IgG i sunt responsabili de reacii ncruciate cu polizaharidele din pereii bacteriilor, cu proteinele fibrilare ale scheletului i cu cardiolipina. Formeaz complexe imune cu ADN circulant i se depoziteaz n esuturi afectndu-le n mod direct. Complexele imune se depun n special la nivelul membranei bazale a glomerulului renal i la nivelul pereilor vasculari producnd leziuni caracteristice: glomerulonefrita lupic ce are ca efect proteinuria, artrit, vasculit autoimun, rash, anemie hemolitic, tromobcitopenie sau leziuni ale sistemului nervos central. Se produce activarea cascadei complementului de ctre complexele imune, prin urmare cantitatea de C3 i C4 va scdea, cu creterea titrului de anafilotoxin care declaneaz procesul inflamator. Este declanat sinteza crescut de autoanticorpi prin urmare pacienii vor prezenta hipergamaglobulinemie. Cei mai caracteristici i cu titrul cel mai crescut sunt anticorpii antinucleari. Detectarea lor este foarte util pentru diagnostic ns ei nu sunt specifici numai pentru lupus, ntruct apar i n artrit reumatoid, sindrom Sjogren, myastenia gravis, hepatit cronic activ. Ei se evideniaz n serul pacienilor prin imunofluorescen indirect. Baza genetic este i ea important n declanarea bolii, ntruct s-au identificat gene care codific elemente ale sistemului major de histocompatibilitate precum i gene pentru complement ca fiind implicate n mecanismul fiziopatogenic. Maladia este ns caracterizat prin penetran incomplet i nu se manifest ntotdeauna, chiar dac individul prezint un set de alele susceptibile.

Tratament

Nu exist actualmente un tratament care s vindece boala, ns simptomatologia poate fi controlat cu un regim de via adecvat i cu tratament medicamentos eficient. Se impune evitarea expunerii la soare, iar n cazul n care aceasta se efectueaz se va utiliza o crem de protecie solar cu factor crescut (mai mare de 40), administrarea de unguente cu cortizon pentru rash, antiinflamatoare non-steroidiene pentru calmarea durerilor articulare n combinaie cu tratament medicamentos cu cortocosteroizi pe cale oral, iar dac boala este sever se imune introducerea n schem a medicamentelor imunosupresoare precum ciclosporina, ciclofosfamida sau metotrexatul.

Artrita reumatoid
Este o boal inflamatorie sistemic ce are caracter autoimun, de etiologie nedeterminat, caracterizat prin artrit cronic ce evolueaz progresiv cu deformarea distructiv a articulaiilor i impoten funcional, fiind asociat cu manifestri sistemice multiple. Incidena este mai crescut la femeile ntre 30 i 50 de ani, etiologia fiind ns necunoscut dar au fost identificai unii factori favorizani: 1. Infecia, cu declanarea reaciei autoimune post infecios dup o infecie cu mycoplasma sau cu virusuri precum Epstein- Barr, Citomegalovirus sau retrovirusuri, care au epitopi asemntori cu autoantigenele. i infeciile cu Shigella, Salmonella sau Yersinia pot activa unele artrite. 2. Proteinele de rspuns la ocul termic ar putea juca i ele un rol important n patogenia artritei reumatoide, aceste proteine fiind implicate n adaptarea i supravieuirea bacteriilor patogene n condiii diverse de mediu i la schimbarea de mediu n momentul colonizrii unui organism gazd. 3. Complexele imune circulante care se fixeaz n articulaii i sunt recunoscute specific de ctre limfocitele B joac i ele un rol important. Prin urmare etiologia artritei reumatoide este o combinaie ntre predispoziia genetic i stimularea antigenic determinat de o posibil infecie cu anumite microorganisme patogene. Declanarea bolii este determinat practic de un rspuns imun aberant determinat de un anumit factor din mediu (cel mai frecvent un microorganism) la un individ cu predispoziie genetic. Autoanticorpii formai determin inflamaie sinovial cronic progresiv ce duce n final la distrucia articulaiei cu impotena funcional a segmentului respectiv. Procesele inflamatorii distructive se desfoar simultan att n structura membranei sinoviale, ct i n cavitatea articular.

Reacia imun n artrita reumatoid Sunt implicate numeroase elemente celulare ale rspunsului imun precum: macrofagele i celulele dendritice sinoviale care determin iniierea i ntreinerea rspunsului imun,limfocitele T CD4+ cu memorie, limfocitele T supresoare, limfocitele T citotoxice, limfocitele B i plasmocitele cu rol n sinteza anticorpilor: antinucleari, anti-perinucleari, anti citrulin i anti filagrin i sinteza de factor reumatoid.
Polimorfonuclearele neutrofile sunt prezente n special la nivelul cavitii articulare i elibereaz enzime lizozomale mpreun cu radicali liberi de oxigen implicai n distrugerea cartilajului articular i liza osului subcondral. Celulele endoteliale au rol major n extravazarea celulelor inflamatorii n esutul sinovial. Celulele cartilaginoase: fibroblatii, osteoblatii, osteoclatii i condrocitele au rol n iniierea i progresia leziunilor articulare caracteristice poliartritei reumatoide. Sunt implicate i citokinele, imunoglobulinele, sistemul complement, sistemele coagulrii sangvine i fibrinolizei, prostaglandinele, leucotrienele i tromboxanii derivate din acidul

arahidonic pe calea ciclooxigenazei i lipooxigenazei, factorul alfa al necrozei tumorale i factorii de cretere celular. Indiferent de stimulul declanator, la nivelul articulaiei se va produce reacia inflamatorie care determin progresia bolii. Limfocitele T helper 1 recunosc un antigen self n lichidul sau n esutul sinovial, se activeaz i ncep s produc citokine: Interleukinele 2, 4, 5 i 6 precum i interferon gama. Astfel se activeaz limfocitele B care ncep s produc plasmocite cu secreie de IgG. IgG formeaz complexe imune care activeaz cascada complementului cu formare de anafilotoxine C3a i C5a care au efect chemotactic fa de leucocite i amplific astfel reacia inflamatorie. Interleukina 1 eliberat de macrofage determin eliberarea de molecule proteolitice cu stimularea osteoclastelor i condroclastelor care atac i lizeaz cartilajul i amplific i ele reacia inflamatorie intra-articular. Factorii de cretere stimuleaz angiogeneza (proliferarea vascular din jurul articulaiei). Prin urmare, toate celulele i toi factorii pro-inflamatori activai sau secretai de acestea iniiaz i amplific un proces inflamator intra-articular care are ca rezultat final degradarea articulaiei respective.

Tablou clinic Debutul poate s fie insidios, pe o durat mai lung de timp cu afectarea progresiv a uneia sau mai multor articulaii. Apare tumefierea articular nsoit de durere articular cu caracter inflamator, redoare matinal ce persist pentru 30 de minute de la trezire, articulaia mobilizndu-se ulterior n urma micrii. Simptomele locale sunt nsoite desimptome nespecifice precum astenie, inapeten, fatigabilitate, subfebrilitate sau stare febril.
Sunt afectate n general articulaiile mici i simetrice, clinic cel mai frecvent evideniinduse mna reumatoid ce prezint deformare radial a oaselor carpiene i a policelui i devierea cubital a celorlaltor 4 degete. Policele se deformeaz putnd aprea policele n baionet. Degetele se deformeaz i ele aprnd n stadiile finalemna n gt de lebd i/sau degetele in ciocan".

Genunchiul reumatoid prezint tumefiere articular, chist popliteu Baker (umplerea cu lichid a bursei poplitee i creterea ei n volum) i deformare n genu valgum (picioare n X), genu varum(picioare n parantez) sau genu flexum ireversibil.
Nodulii reumatoizi sunt modificri tegumentare care apar n poliartrita reumatoid n formele agresive de boal sau n faza acut a bolii. Sunt noduli subcutanai de consisten variabil localizai n zona coatelor, genunchilor, pe faa dorsal a minii i degetelor sau chiar n organele viscerale (cord, rinichi, plmni). Ca i lupusul eritematos diseminat, i artrita reumatoid este o boal sistemic, afectnd numeroase organe i sisteme. Cel mai frecvent sunt atinse: - Aparatul cardiovascular aprnd pericardite, endocardite i miocardite nsoite de stenoze sau insuficiene valvulare ce afecteaz cel mai frecvent valva aortic, urmat de valva mitral. Sunt prezente i procese de vasculit coronarian cu proces inflamator la nivelul arterelor coronare ce poate determina infarct miocardic. - Aparatul respirator cu apariia pleureziei, fibrozei pulmonare difuze datorat complexelor imune, noduli pulmonari periferici dispui cel mai frecvent n lobii superiori, pneumotorax, broniolit i arterit de vase pulmonare ce determin n timp hipertensiune pulmonar. - Aparatul renal cu apariia vasculitei, amiloidozei i nodulilor reumatoizi localizai renal

- Afectarea ochiului cu apariia cheratoconjunctivitei, iritei sau iridociclitei, scleritei sau episcleritei i a vasculitei retiniene ce poate duce n final la orbire.

Examene paraclinice n artrita reumatoid se evideniaz titruri crescute de anticorpi antinucleari, antifosfolipidici i anticardiolipin cu evidenierea factorului reumatoid care este un marker de diagnostic, avnd i valoare prognostic.
Este prezent sindromul inflamator cu creterea VSH-ului, proteinei C reactive i fibrinogenului. Titrul globulinelor este crescut. Se va face bilanul hematologic (este frecvent sindromul anemic la aceti bolnavi), cu efectuarea testelor funcionale hepatice i renale (transaminaze, uree, creatinin, acid uric, sumar de urin cu urocultur), ionograma, profilul lipidic, examenul lichidului sinovial, markerii de formare i resorbie osoas, precum i examene imagistice incluznd: radiografii de membre superioare i inferioare (mn, picior, genunchi), radiografie toracic, ecografie articular i RMN articular.

Criterii de diagnostic n artrita reumatoid Exist 7 criterii majore de diagnostic i se consider c prezena a minim 4 dintre ele la un pacient examinat va pune diagnosticul de artrit reumatoid. Criteriile sunt urmtoarele: 1. Redoare matinal a uneia/ mai multor articulaii, cu durata de cel puin 60 de minute, debutat cu cel puin 6 sptmni n urm. 2. Artrit simultan la cel puin 3 articulaii debutat de cel puin 6 sptmni 3. Artrit simetric de cel puin 6 sptmni 4. Artrita articulaiilor minilor debutat cu cel puin 6 sptmni n urm 5. Prezena nodulilor reumatoizi la examenul clinic 6. Prezena n ser a factorului reumatoid 7. Modificri radiologice tipice constnd n eroziuni juxta-articulare Tratament Remisiunea complet este posibil n stadiile precoce ale bolii mai ales dac se ncepe tratamentul intensiv cu antiinflamatoare non-steroidiene i corticoterapie sistemic. n formele agresive de boal se adaug imunosupresoare precum metotrexat i ciclofosfamid.
Terapia biologic cu anticorpi monoclonali care au aciune inhibitoare asupra TNF alfa este foarte util n stoparea evoluiei bolii i chiar n inducerea remisiunii.

Reumatismul articular acut

Se mai numete i febr reumatismal i este o complicaie a faringitei acute cu streptococ Beta hemolitic. Apare la 2-4 sptmni post-infecie bacterian i este determinat de complexele imune circulante care se depun n articulaii. S-a demonstrat c boala se declaneaz din cauza mimetismului molecular ntruct proteinele streptococice prezint asemnri structurale cu miozina muchiului cardiac, astfel explicndu-se afectarea cordului cu declanarea carditei reumatismale (endocardit cu valvulopatie mitral sau aortic, miocardit sau pericardit, cele trei entiti putnd i coexista).

Coreea este o manifestare a reumatismului articular acut la nivelul sistemului nervos central datorat mimetismului molecular al antigenilor streptococici cu anumite proteine neuronale.

Tablou clinic Boala este ntotdeauna precedat de o faringit streptococic. La 2-4 sptmni dup aceasta apare o artrit migratorie care intereseaz mai multe articulaii n acelai timp i se mut de la o articulaie la alta. Pot aprea i afectarea muchiului cardiac i episoade coreice. La fiecare nou atingere articular sau viceral apar pusee febrile nsoite de tahicardie, diaforez, paloare, epistaxis, pleurezie, congestii pulmonare, dureri abdominale sau chiar nefrite.
Formele uoare de boal dureaz maxim o lun, formele severe putnd dura mai mult. Exist i forme maligne cu pancardit (endocardit + miocardit + pericardit) care evoluez spre exitus n lipsa tratamentului adecvat. Bolnavii cu titru anticorpilor anti-streptolizin ridicat (ASLO) post-tratament fac recidive frecvente, ca i cei cu afectare cardiac sau la nivelul sistemului nervos central. Cu fiecare recidiv a bolii crete fie riscul atingerii cardiace, fie riscul agravrii leziunilor preexistente.

Tratament Este bine ca dup o faringo-amigdalit post-streptococic s se fac profilaxia reumatismului articular acut cu penicilin sau moldamin, o injecie la 14 zile. Tratamentul curativ se face tot cu penicilin, iar n cazul alergiei la penicilin se va administra eritromicin.

Sistemul complement
Sistemul complement este un sistem enzimatic multifuncional alctuit din proteine i glicoproteine plasmatice (aproximativ 20- 30 de componente) i are un rol esenial n aprarea organismului. Setul de proteine care l alctuiete reprezint 10 % din proteinele serului normal uman, fiind reprezentate n majoritate de enzime numite proteaze.Concentraia plasmatic a proteinelor complementului nu se modific dup imunizare, ele neaparinnd clasei imunoglobulinelor. Complementul joac un rol auxiliar n cadrul rspunului iimun umoral ndeplinind dou funcii i anume: Ajut la finalizarea aciunii anticorpului asupra antigenului - Are capacitatea de a recunoate imunologic nespecific structurile non-self. Aceste dou funcii se exercit fie separat, fie integrate n rspunsul imun umoral. Nu se cunosc toate proteinele care alctuiesc sistemul complement. Pn acum s-au detectat 11 proteine ale cii clasice, 3 proteine ale cii alternative i 6 proteine cu rol reglator (inhibitor). Componentele proteice ale complementului sunt prezente printre proteinele plasmatice sangvine n circulaia sistemic, dar pot extravaza i n afara capliarelor ajungnd n spaiile interstiiale. Proteinele cii clasice sunt notate cu cifre arabe precedat de litera C de la complement

i astfel secvena cii clasice este alctuit din 9 proteine, de la C1 la C9, majoritatea fiind beta-globuline. Sunt alctuite din 1 sau 2 catene peptidice legate prin puni disulfurice, exceptnd C4 care este alctuit din 3 catene proteice i C1q care este o protein cu structur particular. Calea alternativ are componentele notate cu litere mari: B, P i D.

Calea clasic i calea alternativ reprezint cele dou cascade enzimatice prin care se activeaz sistemul complement. Intersectarea lor se face ntr-un singur punct, reprezentat de fraciunea C3, acest component proteic fiind elementul cheie al activrii sistemului complement. Proteinele C1-. . . C9 sunt precursorii cii clasice de activare a complementului, dar sunt inactivi. Activarea lor se face prin proteoliz, fragmentele peptidice rezultate din reacia enzimatic avnd denumirea fragmentului principal care a fost proteolizat, la care se adaug sufixul a, b, c, etc. (de exemplu fraciunea C3 este lizat n fraciunile proteice C3a i C3b). Fragmentele b sunt mai mari i se combin direct cu membrana unei celule, iar fragmentele a sunt mai mici, nu se fixeaz de celule, fiind responsabile de declanarea rspunsului inflamator prin eliberarea lor n soluie.

Funciile sistemului complement

1. Finalizarea aciunii anticorpului asupra antigenului Este o funcie foarte important, ntruct anticorpul este capabil doar s recunoasc antigenul, fr s aib un efect decisiv asupra lui. Efectul decisiv const n distrugerea antigenului recunoscut de ctre anticorp (valabil n cazul bacteriilor, virusurilor i altor microorganisme complexe care au structur corpuscular) sau n ndeprtarea antigenuluin cazul antigenelor care au structur simpl (antigene solubile).
a. Distrugerea antigenelor corpusculare Bacteriile sunt recunoscute rapid de ctre diverse categorii de anticorpi. n cazul n care intr n aciune anticorpii reprezentai de imunolgobulinele G, ei se vor lega de antigen prin poriunile variabile ale lanurilor H denumite Fab (antigen-binding fragments) i vor determina opsonizarea antigenului respectiv (bacterie, virus sau parazit). Opsonizareareprezint nvelirea celulelor non-self cu molecule derivate din proteoliza fraciunilor proteice ale complementului, fapt care uureaz ingerarea antigenului de ctre celulele fagocitare. n opsoinzare sunt implicate complexele imune membranare i complexul de atac al membranelor (MAC- membrane attack complex). MAC este o structur alctuit din microtubuli care inhib bacteria i o perforeaz. Prin perforarea peretelui bacterian, mediul intracelular i cel extracelular al bacteriei vor ncepe s comunice i va avea loc alterarea sever a gradientelor ionice de o parte i de alta a membranei bacteriene cu intrarea masiv a sodiului urmat de ap la nivel intracelular i extravazarea ionilor de potasiu i clor n afara celulei, astfel se va produce dilatarea i elongarea exagerat a membranei bacteriene, urmat de ruperea acesteia i distrugerea microorganismului respectiv. Procesul se numete liz celular sau citoliz. a. ndeprtarea antigenelor solubile Antigenele solubile declaneaz rspunsul imun umoral local, ceea ce stimuleaz lansarea n circulaie a anticorpilor specifici care difuzeaz sistemic n tot organismul i ajung n esutul n care se afl antigenele respective. Anticorpii vor recunoate antigenele i vor rezulta legturi antigen- anticorp cu formarea unei reele de complexe imune solubile n ochiurile creia se fixeaz componentele C3b ale sistemului complement. C3b provin din

reaciile enzimatice ale cii alterne a complementului, care este permanent activ. Macrofagele au receptori pentru fraciunea C3b a complementului i astfel recunosc complexele imune solubile i le endociteaz pentru a le distruge complet n compartimentul lizozomal.

2. Recunoaterea imunologic nespecific a structurilor non-self Componenta C3b a complementului, odat ce a fost generat nu va rmne niciodat n faz fluid, ci se va ataa de membranele celulare. Membrana self este protejat mpotriva aciunii complementului prin urmare C3b nu se va fixa niciodat de ea, fiindc are receptori membranari care i se opun. Membrana non-self ns nu are receptori anticomplement, fixarea C3b fiind astfel posibil, astfel va rezulta opsonizarea membranei non-self prin aciunea C3b cu fagocitarea ulterioar a antigenului. Prin urmare, n acest proces este implicat recunoaterea imunologic de ctre complement a structurii non-self pentru c C3b se leag de antigen i recunoaterea nespecific a structurii non-self pentru c fraciunea C3b este capabil s se depoziteze pe orice membran non-self, indiferent de felul antigenului reprezentat de aceast membran.
n cadrul rspunsului imun umoral, complementul are urmtoarele funcii: favorizeaz captarea antigenului de ctre celulele prezentatoare de antigen n timpul etapei de iniiere a rspunsului imun i are aciune decisiv asupra antigenului n ultima faz a rspunsului imun cnd se formeaz anticorpii specifici care ader la determinanii antigenici conformaionali, rezultnd complexe imune membranare care activeaz fraciunea C1q cu implicarea cii clasice i distrugerea antigenului de ctre complexul de atac al membranelor. Complementul nu acioneaz n faza intermediar a rspunsului imun, fiind activ doar n faza de iniiere i n faza terminal a acestuia.

Particularitile complementului
Funcionarea complementului se face pe baza a 4 principii de baz:

1. Principiul cascadei care presupune desfurarea reaciilor enzimatice ntr-o succesiune continu i nentrerupt (n cascad). 2. Principiul proteolizei limitate: activarea proteinelor care compun complementul se realizeaz prin proteoliza fiecruia dintre ele, reacie din care rezult dou fragmente, a i b care au structuri i funcii total diferite. Unele fragmente mari, din categoria celor de tip b pot deveni enzime active n proteoliz i se vor implica la rndul lor n cascada enzimatic de activare a complementului. 3. Principiul membranei non-self. Reaciile de activare a complementului nu se desfoar niciodat pe membranele self, deoarece acestea au receptori de respingere a fraciunilor proteice ale sistemului complement. Membranele non-self sunt singurele pe care se desfoar aciunea complementului, ele numindu-se i membrane acceptoare de complement deoarece nu au receptori de respingere a sistemului complement. Reaciile se realizeaz ca urmare a depozitrii fragmentelor mari rezultate din proteoliza limitat pe membranele non-self care vor aciona la rndul lor ca enzime i vor realiza proteoliza parial a altor fraciuni din complement. De exemplu Cxb este o enzim care a rezultat din proteoliza limitat a Cx din care au rezultat 2 fragmente: Cxa i Cxb. Cxb va proteoliza la rndul lui o alt protein a complementului, Cy rezultnd alte dou fragmente: Cya i Cyb Fragmentul yb va veni n contact cu xb i se va constitui uncomplex hidroelectrolitic activ notat xbyb.

4. Principiul comutrii specifice de substrat guverneaz desfurarea reaciilor complementului pe suprafaa celulelor non-self. De exemplu, ca urmare a contactului enzimei Cxb cu membrana non-self, enzima va suferi modificri conformaionale care se vor solda cu comutarea specific de substrat, adic va aciona asupra unui alt factor al complementului i va efectua alt proces de proteoliz cu rezultarea altor dou fragmente: Cya i Cyb. Cyb va deveni la rndul lui enzim, se va ataa de membran i va realiza proteoliza altui fragment, rezultnd Cza i Czb. Complexul format va fi xbybzb. O enzim poate fi comutat specific de substrat o singur dat.

Organizarea sistemului complement

Proteinele care alctuiesc sistemul complement se activeaz n dou ci sau cascade enzimatice legate ntre ele i anume calea clasic i calea altern sau alternativ. Aceste dou ci se intersecteaz ntr-un punct reprezentat de clivajul enzimatic al factorului C3, C3 fiind elementul cheie al activrii complementului. Calea clasic a complementului este cel mai frecvent iniiat i pornete n urmarea recunoaterii antigenului de ctre anticorp. Apare enzima numit C3 convertaz care va cliva C3 n C3a i C3b. Din punct de vedere filogenetic este cea mai recent i se desfoar cu intensitate maxim ns are o funcie episodic, nu acioneaz tot timpul. Calea alternativ a complementului este iniiat ca urmare a opsonizrii membranei nonself cu ajutorul fragmentelor C3b. C3b activeaz la rndul lui factorii din secvena terminal a cascadei de reacii avnd ca rezultat final constituirea pe membrana non-self a unor structuri tubuliforme ce formeaz complexul de atac al membranelor care va determina liza osmotic a particulei antigenice cu distrugerea antigenului. Este veche din punct de vedere filogenetic i are o activitate permanent dar de intensitate mic. Activitatea cii clasice a complementului declanat de prezena membranelor non-self n circulaia sistemic poate amplifica foarte mult reaciile enzimatice ale cii alternative.

Calea clasic a complementului

Este iniiat de complexele antigen-anticorp care conin fie o molecul de IgM, fie dou molecule de IgG (IgG i IgG3) fixate pe epitopi foarte apropiai. Comp lementul nu este fixat nici de IgA, nici de IgE. Determinanii antigenici trebuie s aib o anumit densitate pentru ca apropierea moleculelor IgG s se realizeze pentru c, dac epitopii sunt prea ndeprtai complementul nu va fi activat, indiferent de cte molecule IgG se afl n complexul antigen-anticorp respectiv. Componentele proteice ale cii clasice a complementului i secvena lor de activare:

Componenta C1 C1 este un complex trimolecular foarte mare, cu o mas molecular de aproximativ 700 kilodaltoni. Este alctuit din C1q care este unitatea de recunoatere, care va detecta prezena complexelor imune membranare sau solubile, C1r i C1s, ambele fiind complexe enzimatice i au denumirea de serinestereaze. C1s este cea mai activ. C1q depisteaz prezena complexelor imune. Este alctuit din 6 subuniti identice care se ansambleaz dou cte dou formnd trei uniti, de asemenea identice care sunt constituite din cte 3 lanuri polipeptidice A, B i C foarte lungi. n poriunea liniar a unitilor organizarea se face sub form de triplu helix, aprnd ca o structur similar moleculei de colagen, n timp ce n poriunea terminal organizarea este sub form de poriuni globuloase direct responsabile de realizarea legturilor cu secvenele activatoare

de complement ale imunoglobulinelor (anticorpi). Secvenele activatoare de complement ale IgG se numesc CH2, iar secvenele activatoare de complement ale IgM sunt CH2 i CH3. C1q se cupleaz cu complexele imune membranare, cuplare ce determin apariia unor cureni dinspre captul carboxi-terminal spre captul amino-terminal cu expunerea unei secvene de aminoacizi ce va cupla C1r. C1r va fixa C1s i rezult un complex C1qC1rC1s. C1s este componenta cea mai activ care va cliva n dou etape succesive fraciunea C4 a complementului, apoi va cliva fraciunea C2. C4 i C2 vor activa calea clasic a complementului.

Componenta C3 Este componenta central a activrii sistemului complement. Acioneaz pe ambele ci i se afl n concentraia cea mai mare n organism. Are o structur heterodimeric i este o molecul uoar, cu greutatea molecular de 200 de kilodaltoni. Fraciunea C3 n stare inactiv se numete zimogen i este constituit din dou lanuri, alfa i beta care sunt antiparalele i asociate ntre ele printr-o punte disulfuric. Lanul alfa este foarte mare i prezint la captul carbon-terminal un buzunar hidrofob care va ngloba o grupare tiol-esteric. Lanul beta prezint spre captul amino-terminal o secven de aminoacizi capabil s fixeze componenta C5 ac omplementului, component care este internalizat i neexpus att timp ct fraciunea C3 este inactiv. Activarea componentei C3 se poate face att enzimatic (ceea ce permite funcionarea ambelor ci ale complementului) ct i non-enzimatic (ceea ce permite doar funcioarea cii alternative a complementului). Activarea enzimatic a C3 Are loc pe baza aciunii C3 convertazelor, enzime care sunt generate att pe calea clasic, ct i pe calea alternativ. C3 convertaza va cliva daor lanul alfa la captul azotterminal, clivare din care rezult C3a, ce odat activat rmne n faz fluid, nu se va fixa pe membrane. C3a are funcie de anafilatoxin. Acolo unde este eliberat declaneaz procesul de inflamaie ce const n creterea vasodilataiei la nivel local cu creterea permeabilitii vasculare i efect chemoatractant (atragerea leucocitelor ctre locul inflamaiei) cu activarea leucocitelor. C3b nu va rmne niciodat n faz fluid, odat ce a fost generat se va depune pe membranele non-self, care se numesc i membrane acceptoare de complement. Depozitarea C3 pe membrane se realizeaz prin intermediul gruprilor tiol-estericeastfel: C3 convertaza cliveaz lanul alfa rezultnd astfel modificri conformaionale ce se propag n direcie ortodromic, dinspre captul amino-terminal spre captul carboxiterminal al lanului alfa ce au ca rezultat lrgirea buzunarului cu externalizarea gruprii tiol-esterice depozitat n buzunarul respectiv. Gruparea va accepta electronii cedai de gruprile nucleofile donatoare de electroni aflate pe membraneel non-self i astfel rezult legturi ntre gruparea tiol-esteric a lanului alfa din structura C3b i gruprile nucleofile ale membranei non-self. Rezultatul final este ataarea C3b pe suprafaa membranei nonself cu realizarea recunoaterii imunologice nespecifice i opsonizarea membranei nonself. ntreaga structur a C3b sufer modificri conformaionale (nu doar lanul alfa). Aceste modificri se transmit dinspre lanul alfa spre lanul beta i vor avea ca rezultat externalizarea secvenelor de aminoacizi ale lanului beta. Aceste secvene pot fixa componenta C5 a complementului

Activarea non-enzimatic a C3 Permite numai funcionarea cii alternative a complementului. Se bazeaz pe faptul c buzunarul hidrofob al lanului alfa al C3 are o deschidere relativ larg prin care moleculele de ap pot ptrunde lent, dei buzunarul este hidrofob. Moleculele de ap care ptrund prin deschiderea buzunarului interacioneaz cu gruparea tiol-esteric depozitat acolo i o cliveaz. n urma clivrii gruprii tiol-esterice apar modificri confornaionale ce se propag n sens antidromic, dinspre captul carbon terminal al lanului spre captul aminoterminal cu expunerea unei secvene de aminoacizi ce se vor ataa de factorul B al cii alternative a complementului, astfel calea alternativ va fi declanat. Componenta C4 Este un heterodimer cu aciune strict n cadrul cii clasice a complementului. Are trei lanuri diferite (alfa, beta i gama) i o greutate molecular de 200 de kilodaltoni. Lanurile sunt paralele, unidirecionate i asociate ntre ele prin puni disulfurice situate la capetele amino-terminale. Lanul alfa are un buzunar hidrofob spre captul carboxi-terminal, buzunar similar cu cel al componentei C3 i care realizeaz tot internalizarea unei grupri tiol-esterice. Lanul beta este axul moleculei, are doar funcie structural de susinere. Lanul gama are ctre captul carboxi-terminal o secven e aminoacizi specific, aminoacizi ce vor fixa factorul C2 al complementului. Externalizarea secvenei de aminoacizi are loc doar n momentul activrii componentei C4. Cnd C4 este inactiv secvena va fi internalizat. Activarea lui C4 se va face doar prin mecanism enzimatic deoarece C4 nu se poate activa niciodat prin intermediul internalizrii unei molecule de ap n buzunarul hidrofob al lanului alfa, aa cum se ntmpl n cazul C3, care se paote activa i non-enzimatic. Apa nu are acces la buzunarul hidrofob al C4 deoarece deschiderea acestuia este mult mai mic dect deschiderea buzunarului lui C3. Activarea C4 C1s este serin-esteraza cea mai activ a componentei C1 i ea va activa C4 prin clivarea lanului alfa foartea aproape de captul amino-terminal. Puntea disulfuric dintre lanurile alfa i beta va fi ns conservat. n urma clivrii, captul amino-terminal al lanului alfa va fi eliberat de pe C4 i va rezulta componenta C4a care rmne n lichidul interstiial fiind incapabil s se ataeze de membranele non-self. Ea nu are funcie biologic i nu este implicat n procesul inflamator. C4b este fragmentul mai mare care rezult din clivarea lui C4 i nu va rmne n faz fluid. El se depoziteaz ntotdeauna pe membranele non-self care sunt membrane acceptoare de complement, la fel cum face i C3b. Depozitarea C4b de membrana non-self se face prin intermediul gruprilor tiol-esterice ntruct clivarea determin modificri conformaionale transmise n direcie ortodromic dinspre captul aminoterminal spre captul carboxi-terminal care vor determina relaxarea buzunarului hidrofob al lanului alfa cu externalizarea gruprii tiol-esterice depozitat n interiorul su. Aceast grupare este electronofil acceptnd electronii cedai de gruprile nucleofile ale membranelor non-self prin urmare, legarea C4 de membranele celulare non-self se va face similar legrii C3. Spre deosebire de legarea C3 de membranele non-self, care reprezint o opsonizare cu facilitarea fagocitrii celulei non-self de ctre macrofage, legarea C4b de membranele non-self nu reprezint o opsonizare deoarece macrofagele nu prezint receptori pentru C4b, deci nu vor fagocita celulele care au pe suprafaa lor depozitate fraciunile C4b. Rezultatul contactelor C4b- membrane non-self este reprezentat de apariia modificrilor conformaionale ale C4b realizate dinspre lanul alfa ctre lanul beta apoi dinspre lanul beta ctre lanul gama cu aducerea la suprafa a secvenei de aminoacizi de pe lanul gama, secven care poate fixa fraciunea C2 a complementului. Acest lucru faciliteaz

depozitarea C2 de membranele non-self prin intermediul activrii C4b. Gruprile nucleofile ale membranelor non-self sunt de dou tipuri: amino i hidroxil.

Componenta C2 Este un factor enzimatic alctuit dintr-un singur lan polipeptidic. Intr n principalelor complexe enzimatice ale cii clasice a comlementului, reprezentate de enzimele C3 convertaz i C5 convertaz. C2 poate funciona numai dup ce factorul C2 a fost activat de ctre C1s, enzim care transform C2 n enzim

alctuirea complexe ca enzim proenzima activ.

Celelalte componente ale cii clasice C5, C6 i C7 activeaz C8. Ele reprezint secvena terminal a cii clasice a complementului. C8 este alctuit din trei lanuri proteice i acioneaz ca o polimeraz care activeaz factorul C9. Este pentultimul factor din calea clasic avnd rol n polimerizarea factorului C9. Factorul C9 are doar un singur lan polipeptidic i are o conformaie similar cu un patrulater n momentul cnd se afl n lichidele interstiiale. Sub aciunea polimerazei reprezentat de factorul C8 i n prezena ionilor bivaleni de calciu, patrulaterele C9 se ansambleaz i formeaz o structur tubular numit complexul de atac al membranelorsau MAC care perforeaz membrana non-self i o distruge prin liz osmotic. Evenimentele cii clasice Are trei etape: 1. Etapa generrii C3 - convertazei; 2. Etapa generrii C5 - convertazei i 3. Etapa generrii complexului de atac al membranelor.
1. Etapa generrii C3convertazei Prin activarea C1 de ctre complexele imune membranare se va forma complexul enzimatic C1qC1rC1s care va cliva componenta C4 n C4a i C4b. Fraciunea C4b se depoziteaz pe membranele non-self i afinitatea ei pentru factorul C2 al complementului va crete, astfel C2 va fi fixat la C4b i va lua contact cu lanul gama al C4b rezultnd modificri conformaionale la nivelul C2 cu aducerea la suprafa a unei mici secvene de aminoacizi de la nivelul captului amino-terminal al C2, secven de aminoacizi care va deveni inta atacului litic al C1s. Rezult astfel clivarea componentei C2 n C2a i C2b iar singura care va rmne n sistem va fi C2b, C2a fiind inactiv. Din cuplarea C4b cu C2b va rezulta un complex dimolecular denumit C3-convertaza cii clasice sau C4bC2b. 2. Etapa generrii C5-convertazei C3 convertaza sau complexul C4bC2b va efectua proteoliza limitat a factorului C3 i vor rezulta 2 fragmente: C3a care rmne n faz fluid i i va exercitaf uncia de anafilotoxin cu generarea unui proces inflamator local cu determinarea vasodilataiei i cretereii permeabilitii vasculare i efect chemoatractant i activator pentru leucocite. Fragmentul C3b rezultat din proteoliza limitat a C3 se va ataa de C4bC2b deja existent pe membran i se va forma astfel complexul C4bC2bC3b denumit i C5-convertaz. C2b are funcie enzimatic dar n contact cu fragmentul C3b i va schimba specificitatea de substrat i va rezulta modificarea conformaional a C2b care va aciona asupra factorului C5. Prin urmare complexul C4bC2bC3b (cu C4b- cofactor i C2b- enzim activ) va constitui C5-convertaza care va cliva factorul C5 i vor rezulta C5a care rmne n faz lichid avnd funcie de anafilatoxin similar cu C3a i va genera un proces inflamator local i C5b care se va cupla cu factorii C6 i C7.

3. Etapa generrii MAC C5b fixeaz C6 i C7 rezultnd n faz fluid complexul C5bC6C7 care va fi n continu micare brownian realiznd coliziuni cu orice membran din jur, indiferent dac este self sau non-self. Complexul se va depozita n final doar pe membranele non-self deoarece numai acestea au receptori pentru complement i va activa enzimatic factorul C8 care va aciona ca o polimeraz ce va polimeriza plcuele patrulatere sub forma crora este dispus factorul C9. Reacia de polimerizare are loc n prezena ionilor bivaleni de calciu i va avea ca rezultat final formarea unor structuri tubuliforme ce for alctui complexul de atac al membranelor sau MAC. Structurile tubuliforme ale MAC vor perfora membrana celular crend pori prin care va ptrunde apa iar excesul de ap intracelular va determina o hiperhidratare superacut a celulei non-self cu elongarea membranei i explozia celulei. Calea clasic a complementului se termin astfel cu distrugerea antigenului i ndeprtarea lui din sistem.

Calea alternativ a complementului

Factorii complementului care alctuiesc calea alternativ sunt factori specifici sau activatori reprezentai de fraciunile B, C i D i factori comuni ai ambelor ci, clasic i alternativ reprezentai de factorul C3 i factorii C5, C6, C7, C8 i C9. Factorul B este omologul C2 din calea clasic i se afl n lichidele interstiiale fiind alctuit dintr-un singur lan polipeptidic. Intr n alctuirea C3-convertazelor cii alternative. Exist 3 tipuri de C3 convertaze n calea alternativ a complementului i anume C3-convertaza iniial, intermediar i adevrat. Factorul B intr de asemenea i n alctuirea C5-convertazei cii alterne. Factorul D este prezent n lichidul interstiial sub form de proteaz activ i are o specificitate de substrat foarte redus, acionnd asupra factorului B numai dup ce acesta a intrat ntr-o combinaie cu factorul C3. Factorul P sau properdina are rol n stabilizarea C3 convertazelor generate pe cale altern fiind responsabil de constituirea C3 convertazei adevrate.

Particularitile cii alternative Calea alternativ funcioneaz permanent cu un nivel de activitate foarte sczut, numit inivel bazal. Acest nivel de activitate poate fi crescut la un nivel de funcionalitate echivalent cu al cii clasice n momentul n care n lichidul interstiial sunt prezente membrane non-self, moment n care se activeaz bucla de amplificare a cii alternative.
Nivelul bazal de funcionare al cii alternative este activ permanent. Activarea sa este non-enzimatic, prin intermediul moleculelor de ap i se face astfel: factorul C3 prezint un buzunar hidrofob care realizeaz o internalizare relativ a unei grupri tiol-esterice. Internalizarea este relativ deoarece deschiderea buzunarului este suficient de mare nct moleculele de ap pot ptrunde prin buzunar i vor veni n contact cu gruparea tiolesteric pe care o vor scinda non-enzimatic rezultnd astfel modificri conformaionale ce se vor transmite antidromic pe lanul alfa avnd ca rezultat externalizarea unei secvene de aminoacizi situat proximal de buzunarul hidrofob. Aceast secven de aminoacizi va cupla factorul Bal cii alternative cu declanarea cii alternative a complementului. Bucla de amplificare a cii alternative este activat de prezena n lichidul interstiial a unor membrane non-self care pot fi opsonizate de ctre factorul C3b. C3-convertaza se

formeaz permanent n lichidul interstiial i cliveaz factorul C3 rezultnd cantiti mici de C3a i C3b. C3a este responsabil de activarea leucocitar i rmne permanent n faz fluid nefiind capabil s se fixeze de membranele non-self. Are efect chemoatractant pentru leucocite i le atrage dinspre axul central al fluxului circulator sangvin ctre marginea vasului (ctre endoteliu) cu trimiterea lor ctre focarul de inflamaie. C3b nu rmne niciodat n faz fluid ci se ataeaz de membranele celulare non-self angajnd cu ele legturi tiol-esterice. Imediat dup fixarea C3b de membranele non-self rezult amplificarea cii clasice, recunoaterea imunologic nespecific a structurilor nonself i opsonizarea membranelor non-self cu ndeprtarea lor prin fagocitoz.

Evenimentele cii alternative C3b fixeaz pe suprafaa membranelor non-self factorul B rezultnd astfel un complex bimolecular C3bB care este inactiv enzimatic. Factorul B este inta atacului litic al enzimei reprezentat de factorul D, care realizeaz proteoliza limitat a factorului B rezultnd fragmentele Ba i Bb. Bb se cupleaz cu C3b rezultnd complexul C3bBb care este activ enzimatic, poriunea activ fiind Bb, C3b avnd rol de cofactor. C3bBb este denumit i C3 convertaza intermediar a cii alternative. Ea se distribuie doar pe membranele non-self i acioneaz episodic avnd o funcie redus, deoarece C3b i Bb au tendina permanent de disociere i de asociere ulterioar.
Properdina sau factorul P se asociaz de C3bBb i rezult un complex trimolecular C3bBbP denumit i C3 convertaza adevrat a cii alternative care se formeaz doar pe membranele non-self, acioneaz episodic dar, spre deosebire de C3 convertaza intermediar a cii alternative are un nivel de funcionalitare foarte crescut, echivalent cu nivelul pe care l are C3 convertaza din calea clasic a complementului. C3bBbP acioneaz asupra factorului C3 pe care l cliveaz prin proteoliz limitat cu fabricarea unei cantiti foarte mari de C3a ce va determina atracia intens a leucocitelor din circulaia sangvin cu migrarea lor intratisular i constituirea procesului inflamator acut intens. Cantitatea foarte mare de C3b care rezult i ea din aceast proteoliz limitat are tendina s se depoziteze pe membranele self dar nu o va face deoarece membrana self este protejat anti-complement astfel c va ajunge s se depoziteze pe membranele non-self determinnd reluarea reaciilor cu o intensitate foarte mare i fabricarea unor cantiti enorme de C3 convertaz intermediar i C3 convertaz adevrat. Reaciile se reiau rezultnd astfel amplificarea exponenial a cii alternative a complementului sub forma unei bucle de amplificare. n momentul cnd concentraia plasmatic a factorului P atinge valoarea zero, are loc blocarea transformrii C3 convertazei inermediare n C3 convertaz adevrat cu acumularea unor cantiti mari de C3 convertaz intermediar i C3b. C3 convertaza intermediar va veni n contact cu C3b i se va crea local un complex trimolecular activ C3bBbC3b numit C5 convertaza cii alternative. Aceasta va aciona asupra lui C5 cu clivarea lui n C5a cu funcie de anafilatoxin i C5b care genereaz complexul de atac al membranelor (MAC) cu inserarea de structuri tubuliforme n membrnana celulelor non-self i alterarea gradienilor ionici. Sodiul i apa ptrund intensiv n celul, o balonizeaz, celula devine hipoosmolar i rezult astfel liza osmotic. Liza osmotic a celulei non-self este rezultatul final al aciunii complementului pe cale clasic i pe cale alternativ. Liza pornete de la recunoaterea imunologic nespecific a membranelor non-self prin intermediul C3b care le opsonizeaz i le pregtete de

fagocitoz. Liza membranelor self este mpiedicat de factorii de protecie anticomplement specifici celulelor self.