Tema 1. Introduccin al metabolismo.

Conceptos
fundamentales y panormica general.

Tema 1: Introduccin al metabolismo.
Conceptos fundamentales y panormica general.
> Qu es el metabolismo?
Conjunto de reacciones qumicas que ocurren en las clulas de los seres vivos (en las
clulas, en los tejidos, en los rganos). Este conjunto de reacciones lleva a cabo procesos que
nos permiten responder a dos preguntas:
- Cmo obtienen las clulas la energa y el poder reductor a partir de su entorno para sus
procesos vitales?
- Cmo sintetizan las clulas los compuestos fundamentales de sus macromolculas y cmo se
sintetizan posteriormente las propias macromollulas?

El metabolismo es universal, todos los seres vivos comparten muchas de las principales rutas
metablicas, al igual que el cdigo gentico lo cual es una prueba irrefutable de que poseemos
un antecesor comn. Hasta los organismos ms sencillos como Escherichia coli posee ms de
un millar de reacciones qumicas.
> Los seres vivos requieren energa.
Todos los seres vivos requieren para su metabolismo una fuente de energa y una fuente de
Carbono.
Los sv necesitan un suministro continuo de energa libre para tres fines principales:
1) Realizacin de trabajo mecnico en la contraccin muscular y otros movimientos celulares.
2) Transporte activo de iones y molculas.
3) Sntesis de macromolculas y otras biomolculas a partir de precursores sencillos.
La E libre que se utiliza y que mantiene a un organismo lejos del estado de equilibrio se extrae
del entorno.
La primera ley de la termodinmica establece que la energa ni se crea ni se destruye por lo que
la cantidad de energa en el universo permanece constante. No obstante, los distintos tipos de
energa se pueden transformar los unos en los otros.
Los organismos vivos se pueden dividir en dos grandes grupos segn la forma qumica a travs
de la que obtienen carbono del medio:
- AUTTROFOS. Fabrican la materia orgnica a partir de molculas inorgnicas. Utilizan
dixido de carbono (CO2) de la atmosfera como nica fuente de carbono a partir de la cual
construyen todas sus molculas carbonadas. Plantas superiores, algas verdes y algunas
bacterias. Las cianobacterias pueden utilizar el N2 atmosfrico para generar sus compuestos
nitrogenados. Segn la forma en que obtienen energa diferenciamos:

- Quimioauttrofos.
- Fotoauttrofos.

- HETERTROFOS. Producen molculas inorgnicas a partir de materia orgnica. Animales,
hongos y varios grupos de bacterias.

- Quimiohetertrofos
- Fotohetertrofos

> Anabolismo & Catabolismo
El metabolismo se puede definir tambin como la suma del catabolismo y del anabolismo. El
anabolismo consiste en la biosntesis de molculas, requiere energa, consta
CATABOLISMO ANABOLISMO
-Proceso degradativo
-Exergnico (libera energa)
-Oxidacin de molculas
-Rutas convergentes
ATP
Energa
qumica
NADPH
-Proceso de sntesis
-Endergnico (requiere
energa)
-Reduccin de molculas
-Rutas divergentes
-Requiere poder reductor

> Bioenergtica
Es la parte de la biologa muy relacionada con la fsica, que se encarga del estudio de
los procesos de absorcin, transformacin y entrega de energa en los sistemas
biolgicos.
Los cambios en la energa libre de Gibbs G nos dan una cuantificacin de la factibilidad
energtica de una reaccin qumica y pueden proveer de una prediccin de si la reaccin podr
suceder o no. Como una caracterstica general de La Bioenergtica, esta solo se interesa por los
estados energticos inicial y final de los componentes de una reaccin qumica, los tiempos
necesarios para que el cambio qumico se lleve a cabo en general se desprecian. Un objetivo
general de la Bioenergtica, es predecir si ciertos procesos son posibles o no; en general, la
cintica cuantifica qu tan rpido ocurre la reaccin qumica.
Los seres vivos son sistemas termodinmicamente abiertos y cumplen las leyes de la
termodinmica.
En conclusin, los seres vivos no pueden encontrarse en equilibrio, son sistemas abiertos y han
de desarrollar trabajo.
Energa libre (G): energa que puede realizar un trabajo
Variacin de Energa libre (G):

Reacciones qumicas:
- Reacciones exergnicas: espontneas, G < 0, liberan energa. Catabolismo.
- Reacciones endergnicas: no espontneas, absorben G. Anabolismo.

G: situacin del sistema aislado.
G = 0 Equilibrio. No lo encontramos en los seres vivos.
G prximo a 0 Reaccin reversible, prxima al equilibrio
G alejado de 0 Reaccin irreversible, alejada del elquilibrio

Reacciones acopladas: reacciones que no son espontneas y necesitaran aporte de Energa
pero que ocurren porque se acoplan a una reaccin que es espontnea, es decir,
termodinmicamente favorable. Ej: reaccin de la glucosa.

> ATP
Es la moneda energtica de las clulas (trabajo mecnico, transporte activo, reacciones
bioqumicas).
Existen tres formas de generar ATP:
- Fotosntesis o fosforilacin ligada al flujo de electrones.
- Cadena respiratoria mitocondrial o fosforilacin oxidativa ligada al transporte electrnico (aadir
P proveniente de las reacciones de oxidacin biolgica)
- Fosforilacin a nivel de sustrato: M~P + ADP ATP + M (aadir P inorgnico)

El ATP cuando se hidroliza tiene una G < 0 por lo que esta molcula tiene tendencia a
hidrolizarse:
ATP ADP + Pi + E
El potencial de transferencia de grupos fosfato se define como -G y mide la tendencia a
transferir un grupo fosfato a otra molcula. El ATP ocupa una posicin intermedia.

> Tipos de rutas metablicas.
- ANABLICAS.- divergen del ciclo de Krebs.
- CATABLICAS.- convergen al ciclo de Krebs.
- ANFIBLICAS.- participan en anabolismo y catabolismo. Ej: ciclo de Krebbs

Las reacciones metablicas estn catalizadas por enzimas o por complejos multienzimticos.
Se organizan en rutas metablicas (RM) con un sustrato/s inicial y producto/s final y entre ambos
estn los metabolitos intermediarios. Las RM se organizan en mapas metablicos.

> Reacciones y Rutas Metablicas.
1.La mayora estn prximas al equilibrio, es decir, son reversibles.
2.Las reacciones prximas al equilibrio comparten las reacciones rutas anablicas y catablicas.
3.Hay al menos una reaccin de no-equilibrio que marca la direccionabilidad de la ruta.
4.Las enzimas que catalizan las reacciones de no-equilibrio son los puntos de control.
5.Las RM estn reguladas a diferentes niveles: interno, extracelular e intracelular.
6.En las clulas eucariotas hay rutas metablicas que estn compartimentalizadas.

Recordemos que la capacidad de un compuesto a ceder el P se llama POTENCIAL DE
TRANSFERENCIA DE GRUPOS P. Cuantitativamente es el valor de -G.

> Tipos de reacciones qumicas.
Slo hay 6 tipos para miles de reacciones metablicas:
- 1) Oxidacin-reduccin. Transferencia de e
-
. Obtencin de la mayor parte de la Energa de la
clula ya que la mayor parte de E de los procesos biolgicos procede de la oxidacin de
sustancias orgnicas reducidas. Formas de transferencia de e
-
:

- Directamente como e
-
: Fe
2+
+ Cu
2+
Fe
3+
+ Cu
+

- En forma de tomos de H: FAD + AH2 FADH2 + A
- En forma de in hidruro [:H
-
]:
NAD(P)
+
+ H
+
+ 2e
-
NAD(P)H
AH2 + NAD(P)
+
A + NAD(P^)H + H
+

- Combinacin directa con el Osgeno: R-CH3 + O2 R-CH2-OH







Oxidacin Reduccin
Prdida e
-

Ganancia O
Prdida H
Liberacin E
Exergnica
Ganacia e
-

Prdida O
Ganancia H
Captacin E
Endergnica
- 2) De ligacin que requieren ATP. Reaccin de la Piruvato carboxilasa.
- 3) Isomerizacin. Reorganizacin intramolecular de los tomos.
- 4) Transferencia de grupo. Transfieren un grupo (fosforilo, acilo, ) de una molcula a otra.
Ej: Fosforilacin de la glucosa.
- 5) Hidrlisis. Roturas de enlaces mediante la adiccin de H2O.
- 6) Formacin o rotura C-C. Reaccin de la aldolasa (glucolisis).


> Transportadores activados en el metabolismo.
Carrier Grupo transportado
ATP Fosfato
NAD, NADPH, FADH2,
FMNH2
Electrones
CoA, Lipoamida Acilo
Pirofosfato de tiamida Aldehido
Biotina CO2
Tetrahidrofosfato 1Carbono
SAM Metilo

> Regulacin del metabolismo.
El metabolismo se regula modelando la actividad de las enzimas y la accesibilidad de los
sustratos.
Niveles de regulacin del metabolismo:
Cantidad de enzima, balance entre:
- Nivel de transcripcin (velocidad de sntesis)
- Nivel de degradacin (velocidad de degradacin) vida enzima
Actividad de enzima
- Concentracin de S/P
- Regulacin alostrica (enzima reguladora)
- Conversin covalente reversible (enzima reguladora). Casi siempre es la fosforilacin, a veces
activa o inhibe el enzima)
Control de seales extracelulares
- Hormonas, neurotransmisores, factores de crecimiento, citoquinas
- Coordinacin a nivel fisiolgico
- Integracin de procesos metablicos
Accesibilidad de S
- Compartimentacin intracelular. Separadas pero no aisladas.
nota:
Las enzimas que fosforilan son QUINASAS.
Las enzimas que defosforilan son FOSFORILASAS.






Tema 2. Metabolismo de carbohidratos. Panormica general y
su digestin.

Tema2: Metabolismo de
carbohidratos.
Panormica general y su digestin.

> Panormica general.
La gluconeognesis y la glucolisis son las rutas de la glucosa. La ruta de las pentosas
fosfato produce ribosas y NADPH. La gluconeognesis fabrica glucosa a partir de compuestos no
carbonados. La fermentacin desintegra el piruvato en lactato o etanol. Otros azcares tambin se
integran en la ruta glucoltica.
GLUCOSA
Gluclisis (va metablica encargada de oxidar la glucosa en dos molculas de piruvato en el citosol)
Gluconeognesis (ruta metablica anablica que permite la biosntesis de glucosa a partir de
precursores no glucdicos)
Degradacin de disacridos
Ruta de las pentosas
Fotosntesis (Ciclo de Calvin)

> Digestin de carbohidratos.
Muchos alimentos que tomamos diariamente (leche, azcar, frutas, verduras, miel, pasta) son muy ricos
en carbohidratos. Como consecuencia de una dieta rica en carbohidratos se producen muchos AcetilCoA
que deben ser derivados a otras rutas metablicas, fundamentalmente a la de cidos grasos y por eso
engordamos.
La digestin convierte estos carbohidratos en compuestos utilizables por el metabolismo. El aparato
digestivo lleva a cabo la digestin que comienza en la boca y en la digestin intervienen una serie de
glndulas (salivares, hgado, pncreas) que segregan enzimas (amilasa salivar,amilasa
pancretica, dextrinasa, disacaridsidas).
La digestin de los carbohidratos comienza en la boca con la accin de la amilasa salivar que rompe los
enlaces (14).
La siguiente fase consiste en formar monosacridos mediante la amilasa pancretica que trabaja junto
con -dextrinasa, glucosidasa y disacaridasa en el intestino delgado.


La absorcin intestinal de la glucosa y galactosa tiene lugar por transporte activo mientras que el de
la fructosa por difusin facilitada.


La entrada de GLUCOSA se considera transporte activo porque para mantener el gradiente de Na
+
est
ligado a una bomba Na
+
/K
+
que consume ATP ya que se absorbe por transporte simporte ligado a Na
+
.
La glucosa entra a favor de gradiente pero para compensar la concentracin de Na
+
, ste sale por la
bomba Na
+
/K
+
. As, de manera indirecta, el transporte de glucosa gasta ATP.
La glucosa se cotransporta con Na
+
a travs de la membrana plasmtica apical al interior del enterocito.
Se desplaza a travs de la clula a la membrana basal, donde pasa a la sangre va GLUT2, un
transportador pasivo simple de la glucosa. La Na
+
/K
+
ATPasa contina bombeando Na
+
hacia el exterior
para mantener el gradiente de Na
+
que impulsa la captacin de glucosa.
La energa de este proceso proviene de dos fuentes:
- La mayor concentracin de Na
+
fuera (potencial qumico).
- El potencial transmembrana que es negativo en el interior y facilita la entrada de Na
+
(potencial
elctrico).

Los enterocitos (clulas epiteliales que revisten el intestino), necesitan traer la glucosa aprovechable de
la digestin dentro del cuerpo y deben prevenir el flujo inverso de la glucosa del cuerpo al intestino.
Se necesita un mecanismo que asegure que la glucosa tambin fluya dentro de las clulas intestinales y
obtener el transporte dentro de la corriente sangunea, no importa cul sea la concentracin de glucosa
en el intestino. Si esto no sucediera y las clulas intestinales usaran los portadores de difusin facilitada
para la glucosa, inmediatamente despus de comer dulces u otro alimento rico en azcar, la
concentracin de glucosa en los intestinos sera muy alta, y la glucosa fluira cuesta abajo del intestino al
resto del cuerpo. Pero una hora despus, cuando los intestinos se vaciaran y la concentracin de glucosa
fuera ms baja que la de la sangre y los tejidos, los portadores de difusin facilitada permitiran a la
glucosa en la sangre y tejidos fluir cuesta abajo dentro del intestino. Esto rpidamente agotara en poco
tiempo las reservas de energa.
Debido a que esta situacin sera biolgicamente un despilfarro y probablemente letal, es que vale la
pena el costo de energa adicional del transporte activo, para asegurar el transporte de la glucosa en un
proceso de un solo sentido.
Por contraste, los eritrocitos (glbulos rojos) y la mayora de los tejidos del cuerpo humano mueven la
glucosa por portadores de difusin y no por transporte activo. La difusin facilitada tiene sentid en este
contexto, debido a que el medio es diferente para los glbulos rojos y el intestino.
Mientras que los intestinos experimentan una constante fluctuacin de la concentracin de glucosa, la
cual puede ser alta o baja que la concentracin de glucosa dentro de las clulas intestinales; la
concentracin en la sangre es cuidadosamente regulada, por lo que es normalmente alta en las
concentraciones intercelulares. La glucosa es transportada a travs de la membrana de los eritrocitos por
un uniportador, un tipo de protena de difusin facilitada. Tan pronto como la glucosa ingresa en la clula,
se convierte en otras sustancias necesarias para la produccin de energa de la clula o biosntesis, por
lo que la concentracin intracelular de glucosa permanece ms bajo que el nivel de glucosa de 5mM que
mantiene la sangre. En esta situacin, la difusin sola asegura el constante flujo de glucosa dentro del
eritrocito, por lo que sera un desperdicio e innecesario para los eritrocitos, el uso de trasporte activo para
la glucosa.

> GLUT
La glucosa pasa a la sangre y llega a los tejidos dnde se capta a travs de GLUT. Dentro de esa familia
de prots hay 5clases:
- - GLUT 1 y GLUT 3: captacin basal de la glucosa.
- - GLUT 2 est presente en el hgado y en las clulas pancreticas. Es muy importante porque la
glucosa es almacenada en el hgado en forma de glucgeno. En el pncreas su importancia est
relacionada con la insulina.
- - GLUT 4 se encuentra en los msculos y clulas adiposas. El musculo capta la glucosa en grasa.
Actividad incrementada por la insulina.
- - GLUT 5 est en el intestino delgado, implicada en el transporte de fructosa.

Podra GLUT expulsar la glucosa de la clula? S porque depende de la concentracin. En general esto
no ocurre porque las clulas fosforilan la glucosa para que no pueda salir.
Cintica:
La cintica de transporte de glucosa a los eritrocitos es de Michaelis-Menten.

En el genoma humano existen 12 genes que codifican GLUT. Se diferencian en su localizacin y su
funcin. El GLUT1 es ubiquo (presente en casi todos los tejidos) pero el GLUT2 est en el hgado y saca
el exceso de glucosa de la sangre. Todos hacen lo mismo pero no son iguales.


> Relacin entre GLUT, insulina y diabetes.
En condiciones normales los transportadores de glucosa de un adipocito o un miocito estn en vesculas.
La entrada de glucosa en el organismo segrega insulina y provoca que las vesculas vayan a la
membrana plasmtica y se incremente la captacin de glucosa.






Tema 3. Gluclisis y su regulacin. Fermentaciones.
Incorporacin de otros monosacridos a la ruta glucoltica.
Metabolismo del etanol.

Tema 3: Gluclisis y su regulacin.
Fermentaciones.
Incorporacin de otros monosacridos a la ruta glucoltica. Metabolismo
del etanol.

> Gluclisis.
La gluclisis es la conversin de glucosa en piruvato en el citosol que incluye dicho conjunto de
reacciones. Su nombre significa romper el dulce. Las caractersticas de esta ruta son:
- Tiene lugar en el citosol.
- Es universal (animales, plantas y microorganismos).
- Tiene un papel central en el metabolismo energtico, est interconectada y es la ruta
metablica mejor conocida.
- Sirve principalmente para producir energa en forma de ATP (es la ruta principal).
Los virus no la realizan porque no son clulas (curiosidad: n mnimo de genes de un virus = 3).
> Destinos metablicos de la glucosa en la clula.



> Breve historia de la glucolisis.
Hans e Ednerr Buchner (1897) conservaron estratos de levaduras libres en clulas con sacarosa. La
sacarosa ferment a etanol. Se obtiene la conclusin de que no son necesarias clulas vivas para llevar
a cabo la fermentacin acabando as con el dogma vitalista. Adems tambin supone el reconocimiento
de la ciencia bioqumica. Hacia 1940 ya estaba aclarada toda la va glucoltica.

> Fases de la glucolisis.
La gluclisis se puede dividir en dos fases:
Fase I: Inversin energtica o preparatoria. Gasta ATP. Desde la glucosa hasta las 2 triosas fosfato.
Fase II: Rentabilidad energtica. Se obtiene ATP y NADH. Desde gliceroaldehido 3P hasta piruvato.

Fase I: Inversin energtica o preparatoria.
C Reaccin de la hexoquinasa (Transferencia de fosforilos):
Glucosa + ATP Glusosa-6P + ADP [Enzima: hexoquinasa]
En el primer paso de la gluclisis, la glucosa se activa para reacciones posteriores mediante
la fosforilacin en el C-6; el ATP es el dador de electrones. Las funciones de la fosforilacin es impedir
que la glucosa salga de la clula y que se active para las siguientes reacciones.
Esta reaccin que es irreversible en condiciones intracelulares est catalizada por
la hexoquinasa[1] (HK). Reaccin de no-equilibrio as que es un punto de control.
Existen 4 isozimas (dos o ms enzimas que catalizan la misma reaccin pero que estn codificados por
genes distintos) de la hexoquinasa. Uno de los isozimas presente en los hepatocitos es
la isoquinasa 4 o glucoquinasa (GK).
La elevada KM de la GK permite su regulacin directa por el nivel de glucosa sangunea porque cuando
la [glucosa] aumenta en la sangre despus de una comida, el exceso es transportado a los hepatocitos en
donde la GK la convierte en glucosa-6P. Esto es as porque la cintica de la GK es sigmoidea por lo que
tarda en saturase, es decir, contina su actividad a medida que la [glucosa] aumenta. En cambio cuando
la [glucosa] en sangre es baja, la GK no la fosforila porque abandona la clula antes (gluconeognesis).
Destacar adems que la GK es especfica de la glucosa encontrndose slo en las clulas del hgado y
en las clulas -pancreticas mientras que la HK tambin cataliza otras hexosas.


C Reaccin de la fosfoglucosa isomerasa:
Glucosa-6P Fructosa-6P [Enzima: fosfoglucosa isomerasa]
Conversin de la glucosa-6P que es una aldosa en fructosa-6P que es una cetosa. Es una isomerizacin
reversible, transcurre fcilmente en cualquiera de las dos direcciones.

C Reaccin de la fosfofructoquinasa-1 (PFK o PFK-1):
Fructosa-6P + ATP Fructosa-1,6P + ADP [Enzima: PFK]
Es la segunda de las dos reacciones activadoras de la gluclisis, se transfiere un grupo fosforilo desde el
ATP a la fructosa-6P para dar la fructosa 1,6-bifosfato. La reaccin de la PFK-1 es prcticamente
irreversible en condiciones celulares y es el principal punto de control de la glucolisis. Es una reaccin
de no-equilibrio.
La PFK-1 est sujeta a una compleja regulacin alostrica; su actividad aumenta siempre que se agota
el suministro de ATP en las clulas o cuando existe un exceso de productos de rotura del ATP (ADP o
AMP). El enzima es inhibido siempre que la clula tenga mucho ATP y disponga de un buen suministro
de otros combustibles como cidos grasos.

Reacciones de la Aldolasa & Triosa fosfato isomerasa:
Ambas reacciones estn prximas al equilibrio por lo que funcionan en base a las concentraciones de
sustratos/productos.

La aldolasa cataliza una condensacin aldlica reversible: la Fructosa-1,6P se rompe dando lugar a
dos triosas fosfato diferentes, el Gliceroaldehido-3P (aldosa), la Dihidroxiacetona fosfato (cetosa).

La triosa fosfato isomerasa cataliza la conversin rpida y reversible de la dihidroxiacetona fosfato
(DHAP) en gliceroaldehido-3P ya que es el nico que puede ser degradado por los siguientes pasos de la
glucolisis.

Fase II: Rentabilidad energtica (x2)
Reaccin de la Gliceroaldehido-3P (G3PDH o GAPDH):
G3PDH + Pi + NAD
+
1,3-Bifosfoglicerato + NADH + H
+

Es una reaccin de xido-reduccin en la que se transfieren e
-
en forma de in hidruro. Es la primera de
las dos reacciones conservadoras de energa de la gluclisis que conduce en ltimo trmino a la
formacin de ATP. Ocurre en dos etapas. Es una reaccin prxima al equilibrio(reversible).
La cantidad de NAD
+
en una clula es muy inferior a la cantidad de glucosa metabolizada. La gluclisis se
detendra si el NADH formado en este paso no se reoxidara y reciclara continuamente.

C Reaccin de la fosfoglicerato quinasa:
1,3-Bifosfoglicerato + ADP 3-Fosfoglicerato + ATP
Reaccin de transferencia del grupo fosforilo de alta energa desde el grupo carboxilo del 1,3-
bifosfoglicerato al ADP.
El resultado final de la reaccin anterior y esta Cacopladas, ambas reversibles en condiciones
celulares, es decir, prximas al equilibrio, es que la energa liberada en la oxidacin se conserva
mediante la formacin acoplada de ATP.
La formacin de ATP por transferencia del grupo fosforilo a partir de un sustrato tal como el 1,3-
bifosfoglicerato se conoce como fosforilacin a nivel de sustrato para distinguir el mecanismo de la
fosforilacin ligada a la respiracin. Implica enzimas solubles e intermediarios qumicos con alto potencial
de transferencia de grupos P mientras que la de la respiracin implica enzimas de membrana y un
gradiente transmembrana de protones.

Reacciones de la fosfoglicerato mutasa (PGM) y de la enolasa:
La PGM cataliza un desplazamiento reversible del grupo fosforilo entre el C-2 y el C-3 del glicerato
mientras que la enolasa promueve la eliminacin reversible de una molcula de agua (deshidratacin)
dando fosfoenolpiruvato (PEP). Al igual que en la reaccin el PEP es uncompuesto con potencial
elevado de transferencia del grupo fosforilo.

1 Reaccin de la Piruvato quinasa (PK):
El ltimo paso de la glucolisis consiste en la transferencia del grupo fosforilo desde el fosfoenolpiruvato al
ADP catalizada por la PK. Es una reaccin alejada del equilibrio por lo que es otro punto de control.

En la gluclisis hay 3 puntos de control: HK, FGK-1 y PK.


> Bioenergtica de la glucolisis. (G y G)
G es negativa en todas las reacciones y las reacciones de no-equilibrio (puntos de control) son las ms
negativas.
G global = -73.3 kJ/mol (condiciones estndar: pH, T,)
Gglobal = -96.2 kJ/mol = -23 kcal/mol (tiene en cuenta la [ ] de P y S en la clula, es el valor real, importante desde
pto de vista bq)

> Balance global de la glucosisis: ganancia neta de ATP.
Balance total
1Glucosa + 2ATP + 2NAD
+
+ 4ADP + 2Pi 2Piruvato + 2ADP + 2NADH + 2H
+
+ 4ATP + 2H2O
Balance neto
1Glucosa + 2NAD
+
+ 2ADP + 2Pi 2Piruvato + 2NADH + 2H
+
+ 2ATP + 2H2O

> Resumen.

> Integracin de otros monosacridos a la gluclisis: galactosa, manosa y fructosa.

- La MANOSA se fosforila a manosa-6P (M6P) por la HK y despus la fosfomanosa isomerasa la
transforma en fructosa-6P (F6P) que es un intermediario de la gluclisis. A continuacin puede seguir dos
caminos para integrarse en la gluclisis:
- - Fosforilndose a fructosa-6P (F6P) gracias a la HK y consumiendo ATP Gluclisis!
- - Transformndose en fructosa-1P (F1P) gracias a la fructoquinasa y consumiendo ATP. sta se rompe
en dos triosas gracias a lafructosa-1-fosfoaldolasa que son una dihidroxiacetonafosfato (DHAP) y un
gliceroaldehido que gracias a la trioquinasa se transforma en gliceroaldehido-3P (G3P) Gluclisis!


- La principal fuente de GALACTASA es la lactosa:
Lactosa D-glucosa + D-galactosa (Enzima: lactasa)
En el intestino la lactosa se convierte en galactosa y glucosa. Tiene un metabolismo un poco complicado.
Primero la galactosa se fosforila a galactosa-1P que reacciona con la UDP-glucosa para dar UDP-
galactosa que se convierte en UDP-glucosa gracias a la UDP-glucoepimerasa; y glucosa-1P (G1P) que
se convierte en G6P gracias a la fosfoglucomutasa (PGM) Gluclisis!
Existen varias patologas asociadas al metabolismo de la lactosa:
Intolerancia a la lactosa debido a la deficiencia de lactasa.
Galactosemias debidas a la deficiencia en enzimas que metabolizan la galactosa. Son mucho ms graves
que la anterior y la ms comn es la deficiencia en galactosa-1P uridiltransferasa.

> Destino del piruvato.


El piruvato puede seguir 2 caminos, fermentacin o oxidacin completa o respiracin, dependiendo
de la presencia de O2, es decir, dependiendo de las condiciones aerbicas o anaerbicas.

> Fermentacin.
La fermentacin es una degradacin anaerbica productora de energa de una molcula
orgnica (generalmente glucosa) sin oxidacin neta de la misma, es decir, degradacin anaerbica de la
glucosa. Tiene dos finalidades: obtener energa y reoxidar el NADH citoslico para evitar que se
detenga la gluclisis. Puede ser de dos tipos:
Fermentacin lctica.
Productora de cido lctico o lactato mediante una reaccin prxima al equilibrio catalizada por la
lactato deshidrogenasa (LDH). Adems se regenera el NAD
+
. Ocurre en las clulas animales y en las
bacterias del cido lctico. El lactato no se acumula en las clulas por mucho tiempo as que
debe reciclarse, desaparece transformndose por un lado en piruvato y en
otro precursor gluconeognico(sntesis de glucosa a partir de molculas no carbohidratadas).

Fermentacin alcohlica.
Conversin de la glucosa en etanol, en dos pasos:
- descarboxilacin mediante piruvato descarboxilasa
- deshidrogenacin por la alcohol deshidrogenasa.
Tambin se regenera el NAD
+
para que la gluclisis no pare. Ocurre en levaduras y otros
microorganismos.
El destino del etanol es el ciclo de Krebbs (CO2 + H2O + ATP). El exceso de etanol causa problemas
muy serios.

> Efecto Pasteur (1857).
Es la inhibicin de la gluclisis por la respiracin (presencia O2) o la inhibicin aerbica de la
gluclisis. Las levaduras consumen mucha ms glucosa creciendo en condiciones anaerbicas ya que
en condiciones aerbicas se consigue una mayor productividad gastando menos glucosa. Louis Pasteur
la descubri al estudiar la fermentacin en las levaduras. El principal responsable de este efecto es la
inhibicin de la fosfofructoquinasa por el citrato y el ATP.
1 GLUCOSA
Condiciones aerobias 34, 36 o 38ATP
Condiciones anaerbicas 2ATP

> Reaccin de la G3PDH.
Si no se repone el NAD
+
se detiene la reaccin de la Gliceroaldehido-3P deshidrogenasa (G3PDH) y se
para la gluclisis. En condiciones aerobiasreoxidamos el NADH citoslico (NADH NAD
+
) mediante
un complejo sistema de lanzaderas. Existen porque el NADH no puede atravesar la membrana
mitocondrial y entregar los e
-
directamente al osgeno (aceptor final de electrones). Hay dos tipos de
lanzaderas:
a)Lanzadera Maltato-Aspartato.

En corazn e hgado los electrones del NADH citoslico entran en las mitocondrias
por medio de esta lanzadera en la que intervienen 2 transportadores de membrana y 4
enzimas. Los e
-
se transfieren desde el NADH del citosol al oxalacetato que se
convierte en malato, el cual atraviesa la membrana mitocondrial interna para
posteriormente reoxidarse por el NAD
+
de la matriz para generar NADH en una
reaccin catalizada por la malato deshidrogenasa(enzima del ciclo del cido ctrico).
El oxalacetato resultante no puede atravesar directamente la membrana mitocondrial
interna, de modo que se necesita de una reaccin de transaminacin para formar
aspartato que s puede ser transportado hacia el lado citoslico. El glutamato
mitocondrial aporta el grupo amino y se forma aspartato y -cetoglutarato. En el
citoplasma el aspartato pierde el grupo amino y origina oxalacetato.

b) Lanzadera Glicerol-3P.
Los electrones del NADH pueden introducirse en la cadena transportadora de
electrones mitocondrial una vez que han sido utilizados para reducir la
dihidroxiacetona-P a glicerol-3P (G3P) que se reoxida al transferir sus electrones al
grupo prosttico FAD (flavn adenn dinucletido, redox) ligado covalentemente al
enzima glicerol-3P deshidrogenasa unida a la membrana. Posteriormente, la
transferencia de los electrones a Q para formar QH
2
permite que estos electrones se
introduzcan en la cadena transportadora de electrones.



Desde el punto de vista energtico es mejor la lanzadera malato-aspartato porque:
- Por cada NADH formamos 3ATP
- Por cada FADH2 formamos 2ATP
La lanzadera malato-aspartato es fcilmente reversible. En consecuencia, el NADH puede introducirse
en las mitocondrias por la lanzadera de malato-aspartato nicamente cuando el cociente NADH/NAD
+
es
mayor en el citosol que en la matriz mitocondrial

> Metabolismo del etanol en el Homo sapiens.
La absorcin del etanol ocurre en la mucosa gastrointestinal (aprox. intestino delgado 80% y estmago
20%) mientras que slo se produce laexcrecin del 5-10% a travs de los pulmones y riones, es decir,
entre el 90-95% del alcohol ingerido no es excretado y debe ser metabolizado.
El control de alcoholemia mide el control en sangre (BAC=blood alcohol contento r blood alcohol
concentration) y depende de factores ambientales y genticos.
Metabolismo del Etanol:
Etanol Acetaldehido Acetato Acetil-CoA CICLO DE KREBS
Hay 3 formas de metabolizar el etanol, es decir, hay 3 reacciones oxidativas del metabolismo del etanol
en el hgado (tambin puede metabolizarse en otros tejidos como el cerebro):
1. Catalizada por la alcohol deshidrogenasa en el hgado. (ADH)
CH3CH2OH (etanol) + NAD
+
CH3CHO (acetaldehdo) + NADH + H
+

2. El sistema MEOS. (CYP2E1)
CH3CH2OH (etanol) + NADPH + O2 CH3CHO (acetaldehdo) + NADP
+
+ 2H2O2
3. Catalizada por la catalasa.

CH3CH2OH (etanol) + H2O2 CH3CHO (acetaldehdo) + 2H2O

CH3CH2OH (etanol) + NAD
+
+ H2O CH3COO
-
(acetato) + NADH + 2H
+ (Enzima: ALDH2)

(sale del hgado, va a la sangre que lo lleva al cerebro y msculos)
CH3COO
-
(acetato) + CoA~SH + ATP CH3CO-S-CoA (acetil CoA) + AMP + PPi (Acteil-CoA sintetasa)

Las 4 enzimas implicadas son las siguientes:
ADH (alcohol deshidrogenasa): citoslica, principal implicada en la eliminacin del etanol en condiciones
normales.
CYP2E1 (citocromo P450): est en los microsomas[1] (MEOS=sistema microsimal oxidante) activada a
concentraciones de etanol elevadas y durante el consumo crnico.
Catalasa: peroxixomas.
ALDH2 (aldehdo deshidrogenasa): mitocondrias.

Isozimas & Alozimas de ADH. En el genoma humano hay 7 genes (por lo tanto, 7 isozimas) localizados
en un cromosoma que estn muy prximos. 4:7 isozimas
ADH es un dmero que puede ser un hommero o un heterodmero. Los alozimas son las variantes
allicas de un mismo gen. Se diferencian en la KM (unas muy bajas y otras muy altas) y en la distribucin
en los tejidos.

> Destino del acetato generado del etanol.
KB (cuerpos
cetnicos)
FFA (cidos grasos
libres)
algunos aa
colesterol


Acetil-
CoA
El Acetil-CoA no se puede almacenar y si
hay mucho se satura el ciclo de Krebs.

+

Ciclo de Krebs
El que sobra se recicla en KB, FFA,
aa

+
CO2 + H2O + Energa

> Efectos del etanol.
Directos: producidos por interaccin.
Indirectos:
- Hipoxia en el hgado
- Generacin de compuestos peligrosos para las clulas: acetaldehdo, aductos y especies reactivas de
O2 (ROS). Se producen daos en lpidos, DNA y prots.
- Cambios/aleteracin en la ratio NADH/NAD
+
en el citosol que afectan a muchas reacciones:
Ratio NADH/NAD
+
normal 1000
+oxidacin etanol+
Ratio NADH/NAD
+
alterada 100
NAD
+
+ reactante reducido NADH + reactante oxidado + H
+


La accin de la ADH y CYP2-1 contribuye a un incremento de la cantidad de acetaldehdo que provoca
la formacin de aductos con DNA y prots. El metabolismo del etanol dependiente de CYP2E1 conduce a
un aumento del estrs oxidativo heptico debido a la generacin de ROS. Ataque hgado, cncer
heptico
Como consecuencia de todo esto se produce un dao en los tejidos, enfermedades y problemas de
ndole social y familiar.
Efectos patolgicos del consumo de alcohol:
Disfuncin neuronal
Alteracin del comportamiento
Disfuncin gonadal (por sntesis de testosterona). Impotencia, atrofia testicular, ginecomastia,
esterilidad y cambios en la distribucin del pelo por la modificacin hormonal de los esteroides. Reduccin
de la secrecin de testosterona debido a una alteracin en la ratio NADH/NAD
+
.
[Efectos sobre el hgado] Hgado graso (acumulacin de triglicridos, descenso de la cantidad de
RER, parn mitocondrial que produce daos celulares e incluso la muerte celular), hepatitis (respuesta
inmune, infiltracin y activacin de linfocitos y macrfagos) y cirrosis heptica(formacin de tejido
fibroso, reduccin del hgado funcional, ralentizacin del ciclo de la urea y de la eliminacin del amonio y
retencin de nitrgeno. Coma heptico).
Hipoglucemia (porque inhibe la gluconeognesis)
Tolerancia y dependencia.
Dao fetal.
Riesgo cancergeno (estmago, boca, hgado).
Interferencia en el metabolismo de medicamentos.
Adems afecta a la termorregulacin corporal y crea sensacin de calor. El mito del perro de San
Bernardo por el cual se le da whiskey a alguien en la nieve es un grave error. Debe drsele una bebida
caliente y azcar.

> Gluclisis & Cncer.
La clula cancerosa consume ms glucosa que una clula normal ya que al vivir
en condiciones hipxicas (no llega la red de capilares provocando un suministro limitado de O2)
predomina la gluclisis anaerbica que produce 2ATP en vez de la respiracin que produce 30ATP, es
decir, por varios motivos est favorecida la fermentacin en las clulas tumorales.
Cuando las clulas tumorales tienen hipoxia responden produciendo el factor HIF-1 (Hypoxia-inducible
factor) que es un factor de transcripcin inducible por la hipoxia
que activa la transcripcin de genes que codifican:
- enzimas glucolticos
- GLUT 1 y 3
- protenas implicadas en la angiognesis (formacin de vasos)
- protenas implicadas en la metstasis

HIF-1 es una protena con 2 subunidades ( y ). En normoxia la subunidad es degradada por el
proteosoma (complejo multiprotico que degrada otras protenas) y queda la subunidad inactiva mientras
que en hipoxia no se degrada y HIF-1 es activo activando, as, ciertos genes.
FACTOR DE TRANSCRIPCIN.
Son protenas que intervienen en la regulacin de la transcripcin (activndola o reprimindola). Se unen
a secuencias de DNA especficas o a la RNA polimerasa.

Efectos del HIF-1 sobre el metabolismo de la glucosa:
Mutacin de p53 defectos en el transporte electrnico mitocondrial.
Inhibidores de las enzimas glucolticas y de la ruta de las pentosas como agentes para emplear en
quimioterapia.
En los tumores hay una sobreproduccin de los transportadores de glucosa y de la
mayora de enzimas glucolticos. Los compuestos que inhiben la hexoquinasa, la
G6PDH o la transcetolasa bloquean la produccin de ATP por la gluclisis, privando
as de Energa a la clula cancerosa y matndola.

Una clula cancerosa proliferando tambin podra producir HIF-1. El balance en que la quimioterapia
mata clulas enfermas y sanas es importante. Adems es importante bloquear la ruta de las pentosas
para impedir el crecimiento de la clula tumoral.

> Tomografa de emisin de positrones (PET).
La deteccin de tejido canceroso se puede hacer mediante tomografa de emisin de positrones
(PET) que se basa en la alta velocidad de la gluclisis en las clulas cancerosas. El tratamiento consiste
en que se des da un anlogo radioactivo de la glucosa que es sustrato de la isoquinasa y se acumula por
lo que hay ms radioactividad en ese punto. La desintegracin del
18
F emite positrones que detecta el
aparato.
Escn CT antes de ingerir el anlogo.
Escn PET despus de ingerir
18
F (FdG).
Seal fuerte en el cerebro porque es el mayor consumidor de glucosa y en la vejiga porque se elimina.
Sabiendo esto se superponen el CT y el PET y si aparece una seal elevada en una zona es un indicativo
para estudiar el cncer en dicha zona.


Gluclisis y cncer: EL EFECTO WARBURG (proliferacin celular)
En principio es una paradoja. Los organismos unicelulares o microorganismos con abundante
glucosa la fermentan convirtindola en biomasa y etanol mientras proliferan. Los organismos
multicelulares cuando proliferan convierten la glucosa en lactato y biomasa, es decir, al igual que los
microorganismos no oxidan, fermentan la glucosa. En cambio, una clula diferenciada que no crece
(quiescencia) oxida a ATP, CO2 y H2O.

En oncologa, la denominacin de efecto Warburg hace referencia al hecho de que la mayor
parte de las clulas cancerosas producen energa principalmente en el citosol, por un proceso
de gliclisis anaerbica, es decir, gracias altas tasas de gliclisis seguidas por un proceso de
fermentacin lctica; en vez de producir energa por la va de oxidacin aerbica del piruvato
en las mitocondrias como es lo habitual en la mayor parte de las clulas normales. Este ltimo
proceso hace uso del oxgeno como aceptor final de electrones en la cadena respiratoria. Las
clulas malignas tienen, tpicamente, unas tasas de consumo de glucosa unas 200 veces
mayores que las de las clulas normales que les dieron origen; y esto ocurre an con un aporte
pleno de oxgeno.

Efecto Warburg. A pesar de que la respiracin es mucho ms ventajosa para producir ATP, las clulas
proliferantes normales y cancerosas no oxidan la glucosa.

Las clulas cancerosas convierten la glucosa disponible a lactato con independencia de la disponibilidad
de O2, es decir, prefieren la fermentacin a la respiracin.


Cuando una clula prolifera necesitan fabricar los componentes necesarios para vivir (nucletidos para
replicar el DNA) precisa que no se consuman los intermediarios.
La ruta de las pentosas fosfato (PPP) fabrica: NADPH y ribose-5P (necesaria en la sntesis de lpidos y
cidos nucleicos). No est completamente explicado todava.

> Regulacin de la gluclisis.
La gluclisis se regula en base a:
necesidades energticas de la clula (demanda ATP).
aporte de precursores para otras rutas metablicas.

Se realiza a varios niveles:
1) [S] & [P] en reacciones de casi-equilibrio.
2) Modulacin alostrica: permite un control inmediato del flujo a travs de la va.
3) Unin a protenas moduladas
4) Conversin molecular covalente reversible que es un control ms lento y est desencadenado por
hormonas que provocan que las enzimas se fosforilen/defosforilen.
5) A nivel transcripcional.

La velocidad se regula a nivel de 3 reacciones alejadas del equilibrio (puntos de control):

a. Control de la HK.
G + ATP G6P + ADP
La HK se puede regular tanto en su cantidad como en su actividad:
Control de la cantidad a largo plazo: hormonal
Control de la actividad a corto plazo: alosterismo, modificacin covalente

El control de la HK se realiza en forma de isoenzimas: 4 importantes
HK I, II y III: en todo el organismo
Elevada afinidad por la glucosa, baja Km (0.1mM).
No son especficas para la glucosa, sino que pueden fosforilar a otros monosacridos (galactosa, fructosa,
manosa)
Son alostricas y tienen como inhibidor importante su propio producto: glucosa-6-fosfato (G6P)

HQ IV o glucoquinasa: especfica del hgado
Baja afinidad por la glucosa. Su KM es elevada (10mM) por lo que responde a cambios de [G] en sangre.
Totalmente especfica para la glucosa por eso se la denomina tambin glucoquinasa
No alostrica, sin embargo aumenta su cantidad en presencia de insulina (despus de comer,
especialmente si la dieta es rica en hidratos de carbono porque lleva la glucosa al hgado). Control de su
cantidad por hormonas inducibles por insulina.

La protena reguladora arrastra a la HK-IV al ncleo cuando la [F6P] y la libera al citosol cuando [G]. La
HK-IV est secuestrada en el ncleo por una protena reguladora. Adems de regulacin alostrica por la
Fructosa-6P, la HK-IV tambin es regulada a nivel de la transcripcin: mucha [G] en sangre o poco [ATP]
activan la transcripcin del gen que codifica para la HK-IV (por ejemplo, HIF-1)

b. Control de la PFK-1.
Principal punto de control de la gluclisis. Control coordinado con la gluconeognesis. Es la enzima
reguladora de la glucolisis ms importante por ser la primera especfica para la glucosa. Es alostrica.
- Inhibidores alostricos (-):
Desde el punto de vista energtico: ATP; si hay mucho ATP no hay glucolisis, la enzima se inhibe.
Desde el punto de vista metablico (glucolisis = metabolismo para otras vas), sus sustratos oxidables
son:
Citrato (Ciclo de Krebs)
cidos grasos (especialmente de cadena larga, 16-18 tomos de carbono); indicadores de que el
organismo se encuentra abastecido de energa y de que por tanto no requiere la glucolisis.
- Activadores (+):
ADP, AMP; lgicamente ya que al producirse a partir de ATP sern opuestos
Fructosa-2,6-bisfosfato; activador ms potente
Control de PFK-1 por los niveles de ATP/AMP.
Si hay mucho [ATP] tenemos una cintica sigmoidal mientras que si hay poco [ATP] pasa a ser casi
hiperblica. Inhibir no quiere decir que no funcione, sino que va mas lento. Por lo tanto, la actividad de la
PFK-1 aumenta cuando la relacin ATP/AMP disminuye ([ATP] o[AMP]).
En perodos de demanda intensa de ATP, la clula disminuye [ADP], al mismo tiempo
que adquiere ATP, mediante la reaccin de la adenilato quinasa:
2 ADP <--> ATP + AMP G = 0
Cuando algn proceso (ej: contraccin muscular) consume ATP, el AMP se producen con la hidrlisis del
ATP de la reaccin de la adenilato quinasa. Simultneamente se consume ATP y se aumenta el AMP lo
que activa la PFK-1.
Control de PFK-1 por niveles de citrato.
Niveles elevados de citrato son indicativos de que se van a producir grandes cantidades de ATP porque
el ciclo de Krebs est alimentado.
Si hay muchos citratos no necesitamos activar la gluclisis porque hay mucho ATP y la abundancia de
ATP inhibe las enzimas que degradan el cido ctrico (para que el que se necesita piruvato), por lo que su
concentracin aumenta y se inhibe la gluclisis.
Control de PFK-1 por la fructosa-2,6-bifosfato.
La Fructosa-2,6BP, a pequeas cantidades, activa fuertemente a la PFK-1. Es un mecanismo en el que
se encuentra implicada unaregulacin hormonal a travs de segundos mensajeros, y tambin implica
una modulacin covalente.
La F6P en la gluclisis se transforma en F1,6BP; pero para que esto ocurra de manera ms favorable,
una pequea parte de la F6P se transforma en F2,6BP, que activa fuertemente a la transformacin
anterior, es decir, activa a la PFK-1. Concretamente, la F2,6BP incrementa la afinidad de la PFK-1 por la
F6P cambiando la cintica de una sigmoidal a una hiperblica:
La reaccin de F6P a F2,6BP est catalizada por la PFK-2, la cual puede estar activa
o inactiva. Este enzima presenta en su forma activa un centro activo con un grupo OH
de una Serina, el cual se puede fosforilar obteniendo PFK-2P, que no es ms que
la forma inactiva. Esto quiere decir que la fosforilacin de la PFK-2 inactiva la
gluclisis.
La fosforilacin de este enzima est catalizada por la proten Kinasa A (PKA), la cual est activada por
segundos mensajeros, por el c-AMP, y por tanto por hormonas.
El c-AMP activa a la Kinasa A que fosforila a la PFK-2, la cual no lleva a cabo la transformacin hacia
FBP, y por tanto inhibe la gluclisis.
Por otro lado, la PFK-2 es un enzima bifuncional. En su estructura encontramos claramente dos
dominios (regin con actividad det):
- un dominio Kinasa (PFK-2) aade P
- un dominio Fosfatasa (FBPasa-2) elimina P
El mismo enzima fabrica y degrada a la F2,6BP.
Presenta actividad PFK-2, y tambin actividad contraria, una actividad fosfatasa, una actividad fructosa-
2,6-bisfosfato fosfatasa. Ambos dominios nunca estn activadas a la vez, sino que estn alternados, uno
si y el otro no. Cuando el dominio kinasa presenta un grupo OH de una Serina libre, este dominio kinasa
est activado y el dominio fosfatasa inactivado.
La fosforilacin de ese grupo OH llevada a cabo por la proten kinasa A, da lugar a la prdida de la
actividad kinasa y a la adquisicin de la actividad del dominio fosfatasa, es decir, no solamente se inactiva
la kinasa, sino que se activa la fosfatasa que cataliza la degradacin de la F2,6BP que haba a F6P,
inactivando, podramos decir, an ms la gluclisis.
El enzima es regulado por conversin molecular covalente reversible:
fosforilacin/defosforilacin controlado por dos hormonas:
El glucagn es un factor hiperglucemiante pancretico producido cuando hay poca [G] en sangre.
poca[glucosa]sangre produce [glucagn] activacin segundos mensajeros (c-AMP) activacin
PKA
fosforilacin de PFK-2 (inhibida) actividad fosfatasa disminuye
la [F2,6BP] oioivuc oactividad PFK-1
Resultados:
Inactivacin de la gluclisis.
Activacin de la gluconeognesis.
La insulina se produce cuando hay mucha [G] en sangre.
mucha [glucosa]sangre aumenta [insulina] defosforilacin de PFK-2 (activa) actividad
quinasa oucvto[F2,6BP] aumenta la actividad PFK-1
La insulina se une a los receptores de las membranas celulares, lo que hace que la glucosa entre en las
clulas, activndose as la sntesis de glucgeno y la ruta de sntesis de cidos grasos. Por lo general es
una hormona anabolizante (favorece el anabolismo).
Resultados:
Inactivacin de la gluconeognesis.
Activacin de la gluclisis.
La F2,6BP permite el control simultneo de dos enzimas claves, la PFK-1 y la FBPasa para el control
concertado de la gluclisis y la gluconeognesis.

c. Control de la PK
Fosfoenolpiruvato (PEP) + ADP Piruvato + ATP
Fosforilacin a nivel de sustrato porque PEP tiene gran potencial de transferencia de P. Se regula de
dos formas:
A nivel alostrico mediante Fructosa-1,6BP
Conversin molecular covalente por fosforilacin/defosforilacin (la PK desfosforilada es ms activa que
la fosforilada).
La PK tiene 2 isozimas[3]:
L (hgado = liver), regulada alostricamente y por conversin molecular covalente reversible
(fosforilacin/desfosforilacin) a travs del glucagn.
M (cerebro y msculo), regulada slo alostricamente, en caso de hipoglucemia se favorece el
consumo de glucosa por esta enzima.
Si hay poca [Glucosa], el cuerpo produce glucagn y se activa la PKA que fosforila la PK. Esto detiene la
gluclisis y libera glucgeno del hgado a la sangre.
Ente los inhibidores de la PK encontramos:
[ATP]
Acetil-CoA
cidos grasos de cadena larga (si tengo mucho sustrato de cidos grasos ahorramos glucosa para no
malgastarla).
Adems, un aumento de Acetil-CoA, provoca tambin una mayor actividad del ciclo de krebs, y por tanto
un aumento de concentracin del citrato, que inhibe la gluclisis a nivel de la PFK-1.

Tambin se encuentra inhibida por Alanina, ya que su estructura est relacionada con el propio pirvico,
que por transaminacin con glutamato da lugar a la alanina. La alanina inhibe a la PK porque si tengo
mucha alanina se convierte en piruvato ciclo de Krebs por lo que no necesito gastar ATP.

La nica activacin la produce un aumento de concentracin de FBP, ya que entre el segundo punto de
control y el tercero, todas las reacciones intermedias son reversibles, por lo que cuando llegan a PEP
pueden volver a FBP, el cual activa a la piruvato kinasa para evitar un estancamiento y poder consumir el
PEP.

> Sealizacin celular.
Principios de la transduccin de seales. Inicialmente se recibe una seal del entorno, tal como una
hormona, que interacciona con un componente celular, normalmente un receptor de la superficie celular.
La informacin que porta la seal recibida se transforma en otros compuestos qumicos, se transduce.
Con frecuencia la seal se amplifica antes de provocar una respuesta. La retroalimentacin de las vas
regula por completo el proceso de sealizacin.

Cuatro caractersticas de los sistemas de transduccin de seal.
a) Especificidad.
b) Amplificacin. Partiendo de pocas hormonas dentro de la clula se amplifica la seal:
Hormona 2 Enzimas 4 Enzimas
c) Desensibilizacin/adaptacin. La respuesta debe ser corta. Se activa un sistema que a la vez que
se produce la respuesta se inhibe la seal.
d) Integracin. Respuesta armnica.

6 Tipos generales de transductores de seal.


- Receptor acoplado a protena G. La protena G es heteromrica. GTPasa tiene capacidad para
hidrolizar el ATP.
- Receptor tirosn quinasa. Protenas que fosforilan residuos de tirosina. Para fosforilar una protena esa
prot debe tener OH.
- Receptor guanilil ciclasa.
- Receptor de adhesin (integrina).
- Canales inicos. Como es movimiento de e
-
tiene que ver con el potencial de membrana (ej: liberacin
de insulina).
Hay otros ligandos que entran en la clula y all se unen a su receptor. Slo pueden atravesar la
membrana las hormonas lipdicas. Las que son proteicas no pueden, ejemplos:
Adrenalina = Epinefrina
Glucagn & Insulina
Noradrenalina

Sistemas de sealizacin de la adenilato ciclasa (sntesis de cAMP).
La adrenalina y el glucagn son seales para la degradacin del glucgeno.
La actividad muscular o preparacin inmediata llevan a una liberacin de adrenalina (epinefrina) que
estimula la ruptura de glucgeno en el msculo y en el hgado. El hgado es ms sensible al glucagn
secretado por el pncreas.
Las molculas seal (glucagn & adrenalina) se unen a receptores especficos de la membrana
plasmtica y esto activa a la subunidad de la protena G mediante un cambio estructural.

La forma unida GTP de la subunidad activa a la adenilato ciclasa (protena transmembranal) que
cataliza la formacin del segundo mensajero AMPc.
El AMPc activa a la PKA (protena quinasa A) que activa a la fosforilasa quinasa que, a su vez, activa a la
glucgeno fosforilasa.
Es una seal breve ya que es hormonal. La fosfoadenilasa elimina el estmulo (AMPc).
AMPLIFICACIN. La insulina no est mediada por AMPc pero el glucagn s.

> Insulina & Glucagn.
Son dos hormonas proteicas que no entran en la clula (slo entran las hormonas esteroideas) cuya
secrecin pancretica depende de la [Glucosa] en sangre.
mucha [Glucosa] en sangre secrecin insulina
poca [Glucosa] en sangre secrecin glucagn
La insulina se produce en las clulas del pcreas (islotes de Langerhans) y afecta a muchos tejidos
(hgado, tej adiposo, SNC, msculo, corazn y vasos sanguneos).

Dianas y acciones de la insulina.
Tiene acciones contrapuestas:








Sntesis de la
insulina.
Se sintetiza en forma de pre-pro-insulina (polipptido). Tiene un pptido terminal que es una seal que
sirve para introducir la protena en el RER. Una proteasa elimina el pptido seal.
Dentro del RER sufre la oxidacin (formacin de 3 puentes disulfuro[5], 2 intercatenarios y 1
intracatenario).
Despus pasa al AG y se elimina el pptido C y se libera. La molcula queda como insulina madura con
dos cadenas a y b. Est codificada por un gen.

Acta a travs de unos receptores especiales, los tirosinaquinasas (Tyr-K), y a travs
de ellos tiene mltiples efectos. Su efecto en el metabolismo del glucgeno que se
produce en hgado es el siguiente:
- Activa a la PP1, con lo que asegura que todas las enzimas estn defosforiladas y por
tanto las degradadoras de glucgeno estarn inactivas, mientras que la
sintetizadora de glucgeno, la glucogenosintasa, estar activa en su forma defosfo.
As la degradacin de glucgeno o glucogenlisis estar inactiva y la sntesis de
glucgeno o glucogenognesis activa.
- Activa la FOSFODIESTERASA, que degrada el AMPc. Aunque los receptores no
estn r/c el AMPc y la PKA, al disminuir los niveles de AMPc, hace un efecto contrario
al del glucagn y adrenalina: inactiva a la PKA con lo que aseguramos que las
enzimas degradantes permanezcan defosforiladas y por tanto inactivas.
INSULIN
STOP GO
Protelisis
Liplisis
Gluconeognesis
Ketognesis[4]

Gluclisis
Lipognesis + glucosa uptake in
muscle
Sntesis de glucgeno
Sntesis de protenas
Captacin de determinados iones
- Adems, la insulina a travs de un mecanismo complejo asegura que la glucgeno-
sintasa-quinasa est inactiva para que no acte, ya que activa su fosforilacin.
En conclusin, al contrario que el glucagn o la adrenalina, la insulina va a asegurar que todas las
enzimas estn defosforiladas y por tanto las enzimas catalizadoras de la degradacin del glucgeno que
son activas en su forma fosfo (glucgeno-fosforilasa y glucgeno-fosforilasa-quinasa), estarn inactivas;
y la enzima catalizadora de la sntesis de glucgeno que es activa en su forma defosfo (glucgeno-
sintasa), estar activa efecto final: se potencia la glucogenognesis o sntesis de glucgeno, por lo
que disminuye el nivel de glucosa en sangre.

> Diabetes.
La diabetes mellitus tipo 1 o tambin conocida como diabetes juvenil o diabetes mellitus insulino
dependiente, es una enfermedad metablicaautoinmune caracterizada por una destruccin selectiva de
las clulas beta del pncreas causando una deficiencia absoluta de insulina. La deficiencia de insulina
provoca un incremento de la glucosa en sangre y orina.
Los sntomas clsicos son la poliuria, polidipsia (sed), polifagia y prdida de peso. Otros sntomas son el
cansancio, la prdida repentina de peso, la mala cicatrizacin de las heridas, problemas sexuales, visin
nublosa e infecciones vaginales.
Gluclisis y diabetes tipo I. Efecto sobre el metabolismo de azcares y grasas en el adipocito.
La cetognesis se produce en el hgado y la cetoacidosis en la sangre.
Como no capta glucosa el adipocito moviliza los triacilglicridos degradndolos con la triacilglicerollipasa
a glicerol y cidos grasos. El cerebro no puede usar cidos grasos, emplea los cuerpos cetnicos que no
los fabrica el.
cidos grasos Hgado Acetil-CoA cuerpos cetnicos
Los cuerpos cetnicos son combustible para el cerebro (positivo) pero tambin bajan el pH de la sangre
que si no se contrarresta rpido con los sistemas tampn se puede llegar a producir la muerte porque
altera procesos de transferencia que hay en la sangre (negativo).

Los cuerpos cetnicos son:
Acetoacetato (puede ser metabolizado).
Dihidroxihidrato (puede ser metabolizado).
Acetona (se expulsa por los pulmones, por eso el aliento de los diabticos huele a acetona).





[1] Quinasa: enzima que cataliza la transferencia del grupo fosforilo terminal del ATP a
algn nuclefilo aceptor, en el caso de la hexoquinasa el aceptor es una hexosa. Tipo
transferasa.
[1] Microsoma: porciones de orgnulos como las membranas mitocondriales, las del
aparato de Golgi y del citoplasma entre otros. Contienen las enzimas del citocromo
(CYP) P
450
de la clula implicadas en el metabolismo oxidativo.
[2] Protoncogen: genes cuyos productos promueven el crecimiento y la divisin de la
clula. Codifican factores de transcripcin que estimulan la expresin de otros genes,
molculas de transduccin de seales que estimulan la divisin celular y reguladores
del ciclo celular que hacen que la clula progrese a travs de este ciclo.
Oncogen: gen anormal o activado que procede de la mutacin de un alelo de un gen
normal llamado protooncogn.
[3] Isozima: enzimas diferentes que regulan la misma reaccin.
Alozima: variantes allicas de un gen que codifican para enzimas.
[4] Ketognesis: sntesis de cuerpos cetnicos
[5] Puente disulfuro: enlace entre dos grupos tioles de los aa sulfurados de la protena
(slo son aa sulfurados la Cistena y la Met)
[6] Mitgeno: factores que actan en el ciclo celular estimulando la divisin celular
[7] Autoinmune: Producimos Ac contra nosotros mismos, es decir, no reconocemos
nuestro propio cuerpo. Lupus, reumatitis


Tema 4. Orgenes metablicos del Acetil-CoA. Regulacin del
complejo de la Piruvato deshidrogenasa.

Tema 4: Orgenes metablicos del
Acetil-CoA.
Regulacin del complejo de la Piruvato deshidrogenasa.

> Etapas en la respiracin celular.
El piruvato procedente de la glucosa y otros azcares a travs de la va glucoltica
se oxida para dar lugar a acetil-CoA y CO2 a consecuencia de la accin sobre l de
una agrupacin de 3 enzimas del complejo de la piruvato deshidrogenasa (PDH).



La reaccin global catalizada por la PDH es una descarboxilacin oxidativa, un
proceso de oxidacin irreversible en el que el piruvato pierde un grupo carboxilo en
forma de molcula de CO2 y los dos carbonos restantes se transforman en el grupo
acetilo del acetil-CoA. El NADH formado en esta reaccin libera un in hidruro (:H
-
) a
la cadena respiratoria, que transporta los dos e
-
hasta el oxgeno o, en los
microorganismos anaerobios, hasta un aceptor de e
-
alternativo (nitrato o sulfato).
Genera en ltima instancia 2.5 molculas de ATP por cada par de e
-
.

> Acetil-CoA.
Es una forma de acetato activado. Transportador de grupos acetilo.


CoA: ADP modificado, vitamina B5 (cido pantotnico), -mercaptoetilamina (-SH) + Grupo acetilo

> Destinos metablicos del Acetil-CoA.
Movilizamos los cidos grasos llegan al hgado -oxidacin Acetil-CoA
El Acetil-CoA tiene su origen en los azcares, protenas cuando se degradan a aa, y en los triglicridos.
Tiene varias salidas posibles: ciclo de Krebs, sntesis de grasas, sntesis colesterol, fosfolpidos,
eicosanoides, cuerpos cetnicos Pero el Acetil-CoA no se puede almacenar.

> Descarboxilacin oxidativa del piruvato.
Tiene lugar en la mitocondria. El complejo PDH cataliza la descarboxilacin oxidativa del piruvato.
G es negativa IRREVERSIBLE
Por eso no podemos fabricar azcares a partir de grasas.

> Complejo PDH.
Est formado por 3 enzimas:
ENZIMA ABREVIATURA
GRUPO
PROSTTICO REACCIN CATALIZADA
Componente piruvato
deshidrogenasa
E
1

TPP
Descarboxilacin oxidativa del
piruvato
Dihidrolipoilo transacetilasa E
2

Lipoamida
Transferencia del grupo acetilo al
CoA
Dihidrolipoilo deshidrogenasa E
3

FAD
Regeneracin de la forma oxidada
de la lipoamida














Es tan grande que se puede visualizar por ME como una partcula grande dentro de las mitocondrias.

Reacciones del complejo PDH.
- 1 reaccin que cataliza el complejo PDH: Piruvato CO2 (descarboxilacin del piruvato para formar
hidroxietil-TPP).
- 2 reaccin: transferencia del grupo al cido lipoico (catalizada por PDH) La rama dihidrolipoilo se sita en
el centro activo de E1.
- 3 reaccin: transferencia del grupo de 2C al grupo dihidrolipolio para formar el complejo acetil-
dihidrolipoilo. Nos queda el enzima (c lipoico) en formar reducida. Catalizado por E1
- 4 reaccin: catalizada por E2 la transferencia del residuo acetilo al CoA para formar acetil-CoA. La rama
disulfhidril-lipoilo se desplaza al centro activo de la E3.
- 5 reaccin: oxidacin del cido dihidrolipoico y transferencia de los hidrgenos al FAD.
- 6 reaccin: transferencia de protones y e
-
al NAD
+
para generar NADH+H
+
.

Regulacin del complejo PDH.
1) Inhibicin por producto ([ATP]/[ADP], [NADH]/[NAD
+
] y [acetil-CoA]/[CoA])
2) Modificacin covalente reversible (fosforilacin/desfosforilacin) de la enzima E1, catalizada por la PDK y
por la FDP.
Piruvato + CoA + NAD
+
Acetil-CoA + NADH + CO2
3 enzimas
E
1
= Piruvato deshidrogenasa
E
2
= Dihidrolipoil transacetilasa
E
3
= Dihidrolipoil deshidrogenasa
+
5 coenzimas
3 CoE grupo prosttico
TPP
Lipoamida
FAD
+


2 CoE no grupo
prosttico
(cofactores solubles)
CoA~SH
NAD
+

La inactivacin es llevada a cabo por una Proteina-Kinasa (PDH-Kinasa o PDK) Mg
+2
-ATP dependiente,
unida al complejo PDH. Esta Kinasa acta fosforilando tres restos de Serina de las subunidades "alfa" del
Enzima 1 del complejo PDH.
La activacin del complejo PDH es llevada a cabo por una Fosfoprotena-fosfatasa (PDH-Fosfatasa o
PDP) que induce desfosforilacin de los restos de serina fosforilados de las subunidades "alfa" del
complejo PDH, conduciendo a la forma activa del complejo PDH.
La kinasa y la fosfatasa estn a su vez reguladas a diferentes sniveles (alostrico, hormonal).

Por qu no podemos los seres humanos convertir el acetil-CoA en azcares?
Los vertebrados no pueden convertir acetil-CoA en azcares pero las plantas y microorganismos s (ciclo
glioxilato). Un azcar lo podemos convertir en una grasa pero una grasa en azcar no porque la PDH es
irreversible.



Tema 5. El ciclo de Krebs y su regulacin. Naturaleza anfiblica
del ciclo del cido ctrico.

Tema 5: El CICLO de KREBS y su
regulacin.
Naturaleza anfiblica del ciclo de Krebs.

> Ciclo de Krebs.
El ciclo del cido ctrico o ciclo de Krebs o ciclo de los cidos tricarboxlicos (TCA) es el ltimo
paso del catabolismo oxidativo de la glucosa (las 2 molculas de Acetil-CoA resultantes de la
descarboxilacin oxidativa de la gluclisis aerobia ingresan en l) y en general de todos los principios
inmediatos. Es una va final comn para la oxidacin de las molculas energticas.
- Es una ruta cclica.
- A diferencia de la gluclisis transcurre con intermediarios libres no fosforilados (en la gluclisis sus
intermediarios no se podan mover porque estaban fosforilados).
- Es intramitocondrial (todas las enzimas estn en el interior de la mitocondria, a diferencia de la gluclisis
anaerobia, que se suceda en el citosol).
- Totalmente dependiente de oxgeno.
- Muchas de sus reacciones necesitan tambin magnesio (presente en todo el metabolismo).
Consiste en resumen en la conversin del Acetil-CoA (oxidacin) hasta 2 molculas de CO2.
Su finalidad principal es producir energa (va catablica), pero tambin, aporta metabolitos para otras
rutas metablicas de una manera mucho ms llamativa que otra va catablica, por tanto tambin es una
va anablica. De aqu que se le conozca como una va anfiblica (va que posee principalmente una
funcin catablica pero tambin anablica, aunque sea en un segundo plano).

Se oxidan unidades de 2C y se generan 4CO
2
, 3NADH (6e
-
), 1FADH
2
y 1GTP.
> Reacciones.
Consta de 8 reacciones.
C Formacin de citrato:
Oxalacetato + Acetil-CoA citrato [Enzima: citrato sintasa]
Partimos de oxalacetato que reacciona con Acetil-CoA de forma irreversible, formando citrato (que da
nombre al ciclo) y liberando el CoA 1 reaccin irreversible del ciclo.
La enzima que cataliza la reaccin: citrato sintasa (no gasta ATP) 1 enzima irreversible. Es un punto
de control.
El CoA liberado en esta reaccin se recicla para participar en la descarboxilacin oxidativa de otra
molcula de piruvato a cargo del complejo PDH.

C Formacin de isocitrato va cis-aconitato:
Citrato Cis-aconitato Isocitrato [Enzima: aconitato hidratasa]
Las siguientes 2 reacciones se producen en su conjunto la isomerizacin del citrato a isocitrato y estarn
catalizadas por la misma enzima, producindose ambas de manera sucesiva:
El citrato pierde 1 molcula de H2O dando lugar a un cido intermediario de poca importancia, el
cisaconitato.
El cis-aconitato reincorpora la molcula de H2O en una posicin distinta a la original, dando lugar al
isocitrato.
La enzima que cataliza ambas reacciones (de isomerizacin): aconitasa hidratasa.

C Oxidacin del isocitrato a -cetoglutarato y CO2:
Isocitrato -cetoglutarato [Enzima: isocitrato deshidrogranasa]
Las siguientes 2 reacciones estn destinadas a la oxidacin y descarboxilacin del isocitrato para obtener
-cetoglutarato y estarn catalizadas por la misma enzima, aunque no se producen a la vez:
El isocitrato se oxida a oxal-succinato (intermediario poco importante), empleando como CoE al NAD+,
que se reduce a NADH + H
+
.
El oxal-succinato se descarboxila, perdiendo la 1 molcula de CO2 y dando lugar al -cetoglutarato 2
reaccin irreversible (punto de control).
La enzima que cataliza ambas reacciones: isocitrato deshidrogenasa (DH) 2 enzima irreversible

C Oxidacin del -cetoglutarato a succinil-CoA y CO2:
El -cetoglutarato se descarboxila a succinil CoA (similar a la descarboxilacin oxidativa del piruvato),
reducindose una molcula de NAD
+
y liberndose la 2 molcula de CO2 3
reaccin irreversible (punto de control).
La enzima que cataliza la reaccin:
complejo multienzimtico -cetoglutarato-deshidrogenasa 3 enzima irreversible


A partir de aqu el resto de reacciones van a cerrar el ciclo porque ya hemos perdido las 2 molculas de
CO2, es decir, ya hemos descarboxilado.
C Conversin de succinil-CoA en succinato:
El succinil CoA es un compuesto rico energticamente, por lo que se rompe el enlace que une el
succinato con la CoA, liberndose CoA-SH y formndose GTP y dando lugar a succinato. Cuando
hacemos el clculo del balance este GTP se contabiliza como si fuera un ATP porque lanuclesido
difsforo quinasa lo transforma en ATP (fosforilacin a nivel de sustrato).
La enzima que cataliza la reaccin: succinil CoA sintetasa.
Antes de este paso podamos distinguir los carbonos procedentes del Acetil-CoA hasta el succinil
CoA incluido pero a partir de ste paso ya no nos es posible hacerlo.
Oxidacin del succinato a fumarato:
El succinato da lugar al fumarato por deshidrogenacin, empleando como CoE al FAD que se reduce a
FADH2.
La enzima que cataliza la reaccin: succinato deshidrogenasa. nica enzima no soluble, ligada a la
membrana. Forma parte de la cadena respiratoria.
Es una reaccin prxima al equilibrio.
C Hidratacin del fumarato a malato:
El fumarato da lugar al malato mediante la incorporacin de 1 molcula de H2O. La enzima que cataliza la
reaccin: fumarasa.
Oxidacin del malato a oxalacetato:
La ltima reaccin: el malato da lugar al compuesto inicial del ciclo, el oxalacetato, por oxidacin y
empleando la CoE NAD
+
que se reduce a NADH + H
+
.
La enzima que cataliza la reaccin: malato deshidrogenasa

> Tipos de reacciones.

Tipo de reaccin Enzima
1 Condensacin Citrato sintasa
2 Deshidratacin e hidratacin Aconitasa
3 Descarboxilacin oxidativa Isocitrato deshidrogenasa
4 Descarboxilacin oxidativa Complejo -cetoglutarato DH
5 Fosforilacin a nivel de substrato Succinil-CoA sintetasa
6 Oxidacin Succinato deshidrogenasa
7 Hidratacin Fumarasa
8 Oxidacin Malato deshidrogenasa

> Funciones.
Principal funcin del Ciclo: producir energa (GTP = ATP) combinado con la cadena respiratoria
Funcin secundaria: producir metabolitos secundarios para otras vas

> Balance.
Material: 1Acetil-CoA 2CO2 (Todo lo dems se recicla)
Energtico:
- Por fosforilacin a nivel de sustrato: 1GTP/ATP
Por fosforilacin oxidativa: 3NADH + 3H
+
y 1FADH2
REACCIN GLOBAL:
Acetil-CoA + 3NAD
+
+ FAD + GDP + Pi + 2H2O 2CO2 + 3NADH+H
+
+ FADH2 + GTP + CoA

> Variacin G y G.
La G de la reaccin de malato a oxalacetato es muy positiva (+29.7) por lo que tiene tendencia a ir
hacia la formacin de malato. Esto no es as porque la clula est consumiendo el oxalacetato,
obteniendo una concentracin lo suficientemente baja como para vencer a la tendencia de una G tan
positiva.
Las G de las reacciones punto de control son muy negativas y las del resto 0 (equilibrio).
Es lo mismo una sintetasa que una sintasa?
Ej: citrato sintasa y succinil-CoA sintetasa. La diferencia es sencilla: la sintetasa usa un nuclesido
trifosfato de alta energa como el ATP o el GTP mientras que la sintasa no lo usa.

> Regulacin de la velocidad del flujo del ciclo de Krebs.
El Ciclo de Krebs estar regulado en base a sus 2 funciones (produccin de energa y de metabolitos
para otras vas), es decir, cuando haga falta energa o metabolitos se producir.
Hay que tener en cuenta que el Ciclo es totalmente dependiente del O2 (totalmente aerobio). Aunque no
veamos al O2 en el Ciclo, ste depende totalmente de l, porque si no tenemos un nivel adecuado de
NAD y FAD, y por tanto un buen funcionamiento de la cadena respiratoria, el Ciclo no se podr producir.
Por qu el O2 es importante para el Ciclo de Krebs? Porque el oxgeno permite la regeneracin de las
CoE de poder reductor mediante fosforilacin oxidativa.


Por tanto, tendr 3 puntos de control: CS, IDH, -CDH
Factores de regulacin:
- Disponibilidad de sustratos (oxalacetato acetil-CoA)
- La inhibicin de los productos acumulados porque la mayora son reacciones prximas al equilibrio
- La retroinhibicin alostrica de las enzimas reguladoras (CS, IDH, -CDH: puntos de regulacin alostrica)
El NADH inhibe el ciclo de Krebs. Entre los activadores tenemos el Ca
2+
y el ATP.
El Ca
2+
tambin es un regulador en vertebrados porque es una seal para la contraccin muscular, la cual
requiere un gasto de energa. Esta energa proviene del ATP por el que si hay contraccin muscular, la
clula activa el ciclo de Krebs.
Cmo afectara a la velocidad de flujo del ciclo de Krebs una ratio NADH/NAD
+
alta?
Inhibe las 3 enzimas y adems afectara al equilibrio de oxalacetato-malato tirando hacia el malato por lo
que el ciclo de Krebs no tendra oxalacetato. Se reducira la velocidad.

Es una ruta anfiblica: anablica y catablica. Por ejemplo, el oxalacetato se origina a partir de algunos
aa y se puede usar para otras sntesis. Es tambin un precursor gluconeognico. El fumarato se obtiene
de algunos aa. El succinil-CoA es el precursor de la sntesis de porfirinas y se obtiene del isoleucina,
metionina y valina, adems de cidos grasos de cadena impar. El -cetoglutarato y el fumarato son
tambin precursores de aa. Citrato es importante en la sntesis de cidos grasos y colesterol.

> Reacciones anaplerticas.
Reponen los intermediarios del ciclo de Krebs y sobre todo reponen el Oxaa (oxalacetato) que es ms
importante por ser el primero y el ltimo.
Piruvato carboxilasa, fosfoenol piruvato carboxilasa, fosfoenol piruvato carboxikinasa, enzima mlico

> El ciclo del GLIOXILATO.
Variante del ciclo de Krebs que excluye las descarboxilaciones y permite la sntesis de succinato a partir
de acetato (acetil-CoA).
Ocurre en plantas, ciertos invertebrados, hongos y determinados microorganismos (levaduras, bacterias).


Balance:
2Acetil-CoA (2C+2C) + NAD
+
+ 2H2O
+
Succinato (4C) + 2CoA + NADH+H
+


2 enzimas nuevas: Isocitrato liasa & malato sintasa
No hay descarboxilaciones.

> Regulacin coordinada de los ciclos de Krebs y del glioxilato.
El isocitrato es el metabolito clave en la regulacin coordinada de ambos ciclos:
La inhibicin de la IDH desva el isocitrato hacia el ciclo del glioxilato y la biosntesis de glucosa.




[1] Reaccin anaplertica: reacciones que reponen los intermediarios del ciclo de
Krebs.

Tema 6. Transporte electrnico en mitocondrias y bacterias

Tema 6: Transporte electrnico en
mitocondrias (TEM) y bacterias
Las mitocondrias son las factoras de energa de la clula.
Fuel + O2 ==combustin == ATP + calor
El destino final de los e
-
es el oxgeno para dar H2O.

> Transporte electrnico mitocondrial vs transporte electrnico cloroplasmtico.
Transporte electrnico mitocondrial transporte electrnico cloroplasmtico
Mitocondria
Dador de e
-
: NADH & FADH2
Se forma H2O y ATP
Tiene lugar tanto en luz como en oscuridad
Cloroplasto
Aceptor e
-
: NADP
+

Se forma NADPH, ATP y O2
Tiene lugar en presencia de luz

> Las reacciones de transferencia de e
-
son reacciones redox.
Reductor (cede e
-
) + oxidante (acepta e
-
) oxidante (acepta e
-
) + reductor (cede e
-
)
Son la principal fuente de energa metablica en los seres vivos. Las reacciones redox se descomponen
en dos semirreacciones.
Ej: Fe
2+
+ Cu
2+
Fe
3+
+ Cu
+
En esta reaccin redox (direccionada hacia la derecha) el Fe
2+
acta
como reductor porque cede e
-
al Cu
2+
que es el oxidante porque capta e
-
y se reduce.
> Potencial redox. (E)
Mide la afinidad de los e
-
por una sustancia o potencial de transferencia electrnico. Se toma como
referencia el H:
H
+
+ e
-
H2 E = 0V
- Cuanto ms negativo sea E menor afinidad por los e
-
y por ello ms reductor (cede e
-
).
- Cuanto ms positivo sea E mayor afinidad por los e
-
y por ello ms oxidante (acepta e
-
).
Los electrones fluyen desde el reductor hasta el oxidante.
El E (potencial de reduccin real) viene dado por la ecuacin de Nerst que tiene en cuenta las
concentraciones a diferencia del E.

> Transporte electrnico mitocondrial (TEM).
Los electrones fluyen desde el reductor (NADH / FADH2 < E) hasta el oxidante (O2 > E)
G del TEM: NADH + H
+
+ O2 NAD
+
+ H2O
Semirreacciones:
O2 + 2e
-
+ 2H
+
H2O E = +0.82V
NAD
+
+ 2e
-
+ H
+
NADH E= -0.32V
E = 1.14V

> Complejos de la cadena respiratoria (TEM) y fuente de energa.
El NADH tiene 3 orgenes:
- Ciclo de Krebs (3NADH) al complejo I.
- Gluclisis en condiciones aerobias con las lanzaderas:
Malato aspartato al complejo I
GlicerolP al complejo II
- Enzima nucletido nicotinamida transhidrogenasa

Los electrones de alta energa en forma de NADH y FADH2 se generan en el ciclo del cido ctrico. Estos
electrones fluyen a travs de la cadena respiratoria, que potencia el bombeo de protones y produce la
reduccin de O2.

C COMPLEJO I NADH-Q oxidorreductasa NADH deshidrogenasa
C COMPLEJO II succinato-Q oxidorreductasa succinato deshidrogenasa
C COMPLEJO III Q-citocromo C oxidorreductasa Ubiquinona
C COMPLEJO IV citocromo C oxidasa
Slo los complejos I, III y IV bombean protones, el II no contribuye. Hay 2 elementos mviles que se
mueven en el espacio intermembrana: elcoenzima Q y el citocromo c (CytC).

COMPLEJO I NADH-Q oxidorreductasa NADH deshidrogenasa
Es una reaccin de transferencia acoplada electrn-protn a travs de la NADH-Q oxirreductasa. Los
electrones fluyen en el complejo I desde el NADH a travs del FMN y una serie de complejos hierro-
azufre hasta la ubiquinona. El flujo electrnico produce el bombeo de cuatro protones y la toma de dos
protones de la matriz mitocondrial.
FMN & Centros FeS
FMN: Flavn mononucletido (es un grupo prosttico). CoE deriva de la rivoflavina (vitamina B2 que tiene
funcin de coenzima).
Centros Ferrosulfurados: complejos de Fe y S que son grupos prostticos. El Fe se une a Cys que
aportan S. Tipos de complejos Fe-S:
Fe-S
2Fe-2S
4Fe-4S
Balance:
NADH + Q (ubiquinona) + 5H
+
matriz mitocondrial NAD
+
+ QH2 (ubiquinol) + 4H
+
espacio intermembrana
E = 0.36V G = -0.69 KJ/mol Se genera energa libre suficiente para la sntesis de ATP.

COMPLEJO II succinato-Q oxidorreductasa succinato deshidrogenasa
Es el nico enzima del ciclo de Krebs ligado a membrana. Aunque ms pequeo y ms sencillo que el
complejo I, tiene 5 grupos prostticos de dos tipos y cuatro subunidades proteicas diferentes. Contiene un
grupo hemo y un sitio de unin para la ubiquinona que es el aceptor final de e
-
en la reaccin catalizada
por el complejo II.
El grupo hemo b del complejo II no se encuentra, aparentemente en la ruta directa de transferencia
electrnica, en su lugar podra servir para reducir la frecuencia con la que los electrones se pierden fuera
del sistema, desplazndose del succinato al oxgeno molecular para producir especies reactivas de
oxgeno (ROS), perxido de hidrgeno y el radical superxido.
FADH2 + Q FAD + QH2
E= 0.031V & G = -2.7KJ/mol = Energa libre suficiente para la sntesis de ATP
Otras deshidrogenasas que ceden sus e
-
al coQ sin pasar por el complejo II:
Acil-CoA DH (-oxidacin)
Glicerol 3P DH (lanzadera G3P & hidrlisis de los TAG = triacilglicridos)

El coenzima Q (CoQ o Q)
El CoQ acepta los e
-
procedentes de los complejos I y II y se reduce a QH2.

COMPLEJO III Q-citocromo C oxidorreductasa Ubiquinona
Transfiere los electrones desde el QH2 hasta el cyt c.
QH2 + 2Cit coxidados + 2H
+
matriz mitocondrial Q + 2Cit creducidos + 4H
+
espacio intermembrana
E= 0.190V & G = -36.7KJ/mol
= Energa libre suficiente para la sntesis de ATP
Trasnportadores de electrones:
Citocromo b con sus 2 hemos bH y bL[1]
Protena Fe-S con 2 centros de Rieske[2] tipo 2Fe-2S (ISP)
Citocromo c1
El complejo III es un dmero
Qp y QN son lugares de unin para la ubiquinona.
La interfase entre los monmeros forma 2 cavernas por donde se mueve el CoQ e intermediarios
Qu es un citocromo? Protena que transporta electrones y tiene como grupo prosttico un grupo
hemo.
Cmo pasan los e
-
desde el QH2 hasta el Cit c? El ciclo Q es el mecanismo que explica el paso de
H
+
y e
-
a travs del CIII.
Balance del ciclo Q:
Balance ciclo 1:
QH2 + cit c1 (ox) Q
-
+ cit c1 (red) + 2H
+
(espacio intermembrana)
Balance ciclo 2:
QH2 + Q
-
+ cit c1 (ox) + 2H
+
(matriz) QH2 + Q + cit c1 (red) + 2H
+
(espacio intermembrana)
Ecuacin neta del ciclo Q:
QH2 + 2cit c1 (ox) + 2H
+
N (matriz) Q + 2cit c1 (red) + 4H
+
P (espacio intermembrana)

COMPLEJO IV citocromo C oxidasa
Transfiere los electrones desde el cit c hasta el O2. Cataliza la reduccin de O2 a H2O.
4cit cred + 8H
+
matriz mitocondrial + O2 4cit cox + 2H2O + 4H
+
espacio intermembrana
La necesidad de O2 para esta reaccin es lo que nos hace dependientes de oxgeno a los organismos
aerbicos.
El citocromo C oxidasa tiene 13 subunidades y 4 centros redox:
- Citocromo a (hemo a)
- Citocromo a3 (hemo a3)
- 2 centros de Cu:
Con 2 iones Cu (CuA / CuA )
Con 1 ion Cu (CuB)
- CuB y hemo a3 forman un centro Fe-Cu
E= 0.58V & G = -112KJ/mol = Energa libre suficiente para la sntesis de ATP


> Inhibitor of Electronic Transport & Reactive Oxygen Species.
Los inhibidores son sustancias que bloquean la cadena respiratoria porque se unen a components a
diferentes niveles (a diferentes complejos).
El bloqueo de la cadena respiratoria tiene un efecto letal!



Por qu es tan peligroso el bloqueo de la cadena respiratoria?
No hay reoxidacin de los coenzimas: se detiene el metabolismo.
No hay gradiente protnico: no hay sntesis suficiente de ATP y se detienen procesos anablicos y de
transporte activo.



Cul de los 3 inhibidores sersa menos letal?
La menos letal sera la de protenona (primera) porque el bloqueo ah permite que llegue electrons de
FAD, solo bloquean el NADH.

La intoxicacin por cianuro es uno de los venenos ms potentes que existen y adems es de efecto
rpido. Puede entrar por diversas vas (contacto con piel, tragndolo, inhalando en forma de vapor por
incendios, accidentes industrials, operaciones militares). La antimicina se emplea en las cromatografas
de columna para evitar que crezcan bacterias.
La rotenona es un compuesto inodoro, incoloro. Se encuentra en las semillas de muchas races de la
familia de las fabceas. Se usa como herbicida, pesticida (escarabajos, gusanos) y piscidida de amplio
espectro y para el control de plagas y sarna en humanos. Los indios amaznicos la usaban para pescar
peces porque se absorve mal a travs del epitelio intestinal.
> Ruta respiratoria alternativa en plantas.
Existe, adems de la convencional, una va respiratoria alternativa que no genera gradiente protnico y la
energa del transporte se disipa en forma de calor.
Generacin de olores en las plantas: el calor producido en la cadena respiratoria alternativa
(termognesis) ayuda a derretir el hielo o a la evaporacin de sustancias olorosas para atraer insectos
polinizadores.

> ROS.
La reduccin del O2 no est exento de riesgos!
La reduccin parcial del O2 genera radicales reactivos!
Los ROS son derivados txicos del O molecular. Se forman por la reduccin parcial del O. Son muy
peligrosos.
En general son cuatro:
Anin superxido O
Perxido O2
-

Perxido de hidrgeno H2O2
Radical Hidroxilo OH
-

Se producen por:
fallos en la cadena respiratoria
luz UV
radioactividad
contaminacin atmosfrica o fumar
proceso inflamatorio
Dismutacin: una reaccin en la que un nico reactivo O2
-
se convierte en 2 productos distintos
Dianas sobre las que inciden los ROS:
- Centros Fe-S
- DNA
- Grupos SH
- Protenas
- Lpidos
ROS effects: apoptosis, necrosis, muerte


[1] Respiracin: proceso generador de ATP en el que un compuesto inorgnico (como
el oxgeno molecular) acta como aceptor final de electrones. El dador electrnico
puede ser o bien un compuesto orgnico o uno inorgnico.




Tema 7. Fosforilacin oxidativa. Especies reactivas del oxgeno
y sistemas antioxidantes.

Tema 7: Fosforilacin oxidativa.
Especies reactivas del oxgeno y sistemas
antioxidantes.

> Definicin.
La fosforilacin oxidativa es la sntesis de ATP acoplada a un gradiente de protones generado en el
transporte electrnico y, por lo tanto, el acoplamiento de un proceso exergnico (respiracin) a un
proceso endergnico (sntesis ATP).
El complejo V o ATP sintasa o F1F0 ATPasa o ATPasa mitocondrial es la enzima que fabrica ATP.
Adems tambin realiza el proceso contrario, la hidrlisis de ATP, cuando no hay suficiente ADP + Pi.
> Cmo se acopla?
Se postularon varias hiptesis.
La primera hiptesis sobre la sntesis de ATP fue que el transporte electrnico generara un compuesto
con alto potencial de transferencia del grupo fosfato como en la gluclisis.
La segunda hiptesis deca que se introduca un cambio conformacional en una protena con capacidad
para sintetizar ATP.
No se encontraron estos compuestos.
La tercera hiptesis fue que la sntesis de ATP y el transporte electrnico se acoplan mediante la
formacin de un gradiente protnico a travs de la membrana mitocondrial interna. Es la hiptesis
quimiosmtica.
> Hiptesis quimiosmtica.
La Hiptesis Quimiosmtica de Mitchell (1961) explica la sntesis de ATP acoplada al gradiente
protnico generado por el TEM.
Evidencias & Observaciones.
1) Fosforilacin oxidativa requiere de una mmi intacta.
2) La mmi es impermeable a iones como H
+
, OH
-
, K
+
, Cl
-
.
3) El TEM promueve el transporte de H
+
al espacio intermembrana o fuera de las mitocondrias intactas,
creando un gradiente electrnico medible a travs de la mmi.
4) Los compuestos que aumentan la permeabilidad de la mmi a los H
+
disipan el gradiente electroqumico
inhibiendo la sntesis de ATP: se desacopla el TEM de la fosforilacin oxidativa.
Demostracin Hiptesis Quimiosmtica.
La bacteriorodopsina es una bomba dependiente de la luz que se encuentra en las halobacterias. En
un lado de esta vescula pusieron una ATP sintasa mitocondrial purificada del hgado de buey. Cuando se
iluminaba, la bacteriorodopsina bombeaba protones y pasado un tiempo sintetizaba ATP. Conclusin: en
la fuerza protn-motriz est contenida la energa necesaria para fabricar ATP.
> Fuerza protn-motriz.
El gradiente protnico genera la fuerza responsable de la sntesis de ATP. El movimiento de H
+
genera un
doble gradiente: de pH y de carga elctrica. Cul es la energa libre inherente al gradiente de pH
(qumico) y al de carga (elctrico)?
Fuerza protn-motriz (p) = gradiente qumico (pH) + gradiente elctrico ()


> La ATP sintasa o ATPASA-F1F0.


La ATP sintasa es una macromolcula que est situada en la mmi y tiene dos partes con diferentes
funciones:
F0: canal protnico
F1: actividad cataltica.
Puede catalizar la reaccin en ambas direcciones:
ADP + Pi + n(H
+
)espacio intermembrana ATP + H2O + n(H
+
)matriz mitocondrial
F0 y F1 estn conectados mediante un tallo central y una columna externa. La unidad mvil o rotor est
formada por el anillo c ms el tallo y la estacionaria por el resto.
F1: formada por 5 tipos de cadenas polipeptdicas

3
une NT (nucletidos)

3
une NT & sintetiza ATP
parte del tallo central (rota)
parte del tallo central (rota)
parte de la columna externa
F0:
Anillo c: conducto protnico que toma parte del rotor junto con &
Subunidad a & 2 subunidades b: forman parte de la columna externa
> Mecanismos de sntesis de ATP por la ATP sintasa.
Inicialmente se crey que el gradiente de H
+
sera necesario para la sntesis de ATP por la ATP sintasa
pero el complejo enzima-ATP se forma sin necesidad de la fuerza protn-motriz, es decir, en la superficie
de la enzima la reaccin:
Enz-ATP Enz (ADP + Pi) La G es muy prxima a 0.
El gradiente de protones es necesario para que el ATP abandone el centro cataltico.
Mecanismo cataltico de la F
1
.
La subunidad F1 es capaz de sintetizar ATP en ausencia de gradiente protnico.
Mecanismo de sntesis de ATP.
El gradiente protnico no es necesario para sintetizar ATP sino para que el ATP abandone el entro
cataltico de la ATP sintasa.
La subunidad puede unir ADP y Pi para formar y liberar ATP y en cada paso va variando su
conformacin. La subunidad puede tener las siguientes conformaciones:
L (loose): une ADP + Pi
T (tight): une ADP + Pi y forma ATP
O (open): permite liberar al nucletido
El cambio de una conformacin a otra est mediado por la rotacin de (LTOLT), es decir, la
interconversin de las 3 formas se realiza gracias a la rotacin de la subunidad que es asimtrica.
Catlisis rotacional: modelo de cambio de la unin de la ATP sintasa
Los cambios conformacionales estn impulsados por el paso de protones a travs de la F1. Las
alteraciones progresivas de las formas de los centros activos (subunidades ) estn promovidas por el
movimiento de la subunidad impulsado por el flujo protnico.
La ATP sintasa es el motor molecular ms pequeo del mundo.
La demostracin de la rotacin se llev a cabo mediante la adicin y posterior hidrlisis del ATP que
promueve la rotacin unidireccional del filamento de actina en sentido contrario a las agujas del reloj
(saltos de 120).
Los transportadores mitocondriales son necesarios para meter ADP+Pi en la mitocondria porque no est
permitido el paso libre a travs de la membrana, en este caso se llama translocasa. Cuando est abierto
al citoplasma coge ADP se da la vuelta y lo suelta, al quedar libre el lugar de unin, coge ATP se da la
vuelta y lo suelta en el citosol. Hay dos sistemas de transporte del Pi:
Simporte ligado a H
+

Antiporte ligado a OH
-


> Regulacin de la fosforilacin oxidativa.
La fosforilacin oxidativa se regula en base a las necesidades energticas celulares, es decir, por los
niveles de [ATP] / [ADP] [P]. Un aumento de ADP estimula la formacin de ATP, adems si la clula no
precisa ATP se ralentizan los procesos metablicos.
El gradiente protnico se utiliza tambin en la sntesis de NADPH de la fotosntesis, en la produccin de
calor, en el potencial elctrico que controla muchos procesos celulares, en el transporte activo y en la
rotacin flagelar.
> Estequiometra de la sntesis de AMP.
NADPH + 11H
+
mmi + O2 NAD
+
+ 10H
+
espacio intermembrana + H2O
> Balance de la oxidacin completa de la glucosa a CO2 y H2O.
C6H12O6 + 6O2 6CO2 + 6H2O
Debemos tener en cuenta:
la estequiometria NADH/ATP & FADH2/ATP
la lanzadera empleada para reoxidar el NADH
Balances tradicionales: 1NADH = 3ATP; 1FADH2 = 2ATP
Lanzadera malato-aspartato: 38ATP
Lanzadera glicerol3P: 36ATP

Balances actuales: 1NADH = 2.5ATP; 1FADH2 = 1.5ATP
Lanzadera malato-aspartato: 32ATP
Lanzadera glicerol3P: 30ATP

> Desacoplantes del transporte electrnico y la fosforilacin oxidativa.
Los inhibidores bloquean el transporte a diferentes niveles o complejos de la cadena de TEM. De la
misma manera tambin existen inhibidores de la ATP sintasa, como el DCCD oligomicina. Muchos de
ellos estn presentes en hongos y otros microorganismos.
Los desacoplantes son agentes que evitan que el flujo de electrones genere un gradiente protnico y ello
produce los siguientes efectos:
No hay sntesis de ATP.
La energa se disipa como calor.
Incremento del consumo de O2.
Incremento de la oxidacin de NADH.
Hay dos tipos:
1. Desacoplantes ionforos, como el 2,4-DNP (dinitrofenol), son molculas transportadoras de protones
situadas en el lado de la matriz y que cogen los protones difundindolos hacia el otro lado de la
membrana, evitando as el que se forme el gradiente.
2. Protenas que forman parte de la mmi. Son canales a travs de los cuales se cuelan los protones, como
no pueden volver a travs del mismo canal se forma un gradiente. Estas protenas son las UCP
(uncoupling protein) y en concreto la UCP-1 o termogenina.
Algunos doctores recetaron desacoplantes como adelgazantes pero, pese a tener buenos resultados, su
consumo conduca a la muerte. Esto es debido a que el organismo si no tiene ATP moviliza las reservas
energticas contenidas en las grasas. Con esto no se forma ATP y muchos procesos imprescindibles
para la vida no tienen lugar.

> La termognesis.
Desacoplar el TEM produce calor: si la energa no se emplea para fabricar ATP, se transforma en calor y
esta transformacin tiene lugar en el tejido adiposo pardo o BAT; es el proceso de la termognesis.
Los bebs acabados de nacer presentan BAT en la espalda y pecho para producir calor y poder
sobrevivir. El BAT es un tejido muy rico en mitocondrias cuyos citocromos le dan color pardo.
Lo que desencadena este proceso es una respuesta hormonal a travs de la noradrenalina la cual
interacta con su receptor. Esto activa la adenilatociclasa que provoca la fabricacin de AMPc que activa
la PKA que fosforila la triacilgliceroldolipasa que moviliza las reservas de grasa. Forma cidos grasos que
son sustrato de la cadena respiratoria transformndose en acetil-CoA. Adems abren un canal, la
termogenina, por el que los protones se cuelan a la matriz mitocontrial disipndose el gradiente y parando
la sntesis de ATP.
La termognesis est muy relacionada con la hibernacin. En los 7 meses que hiberna un oso pardo, este
conserva su temperatura corporal entre los 32-35C. Esto lo consigue mediante la oxidacin de la grasa
parda y obtiene energa para otras reacciones. La oxidacin de las grasas tambin repone el agua
perdida en la respiracin. El glicerol que proviene de la degradacin de las grasas es un precursor
gluconeognico por el que se forma glucosa para abastecer al cerebro. La urea es reciclada para formar
aa y prots.


Tema 8. Gluconeognesis y su regulacin.


Tema 8: Gluconeognesis y su
regulacin.


> Definicin.
Es la sntesis de glucosa a partir de precursores no carbohidratos, es decir, sntesis de
azcares a partir de no azcares. Los principales precursores sonlactato, aminocidos,
oxalacetato y glicerol.

No se puede formar glucosa a partir de cidos grasos porque se convierten en Acetil-CoA y los
carbonos se pierden en forma de CO2.

Ocurre en animales, plantas, hongos y microorganismos; es una ruta universal. La
gluconeognesis es la principal fuente de glucosa en ayuno para evitar un shock
hipoglucmico. En humanos esta ruta tiene lugar mayoritariamente en el hgado pero tambin
en los riones. Comparte reacciones con la gluclisis con la excepcin de las catalizadas por
HK, PFK y PK (reacciones de no equilibrio). Como todo proceso anablico requiere un aporte
de energa.


> Reacciones de la gluconeognesis.
= Conversin de piruvato en fosfoenolpiruvato: piruvato carboxilasa & PEPCK
Necesitamos dos enzimas para pasar de piruvato a fosfoenolpiruvato (2 de las reacciones anaplerticas
que reponen los intermediarios del ciclo de Krebs), estas dos reacciones son exergnicas:
Fosfoenolpiruvatocarboxilasa (necesita biotina). Ocurre en la mitocondria.
Fosfoenolpiruvatocarboxiquinasa (PEPCK). Ocurre en el citosol.
RECUERDA! Para formar glucosa me hacen falta 2 piruvatos.

> Rutas alternativas desde el piruvato a fosfoenolpiruvato.
En funcin del precursor gluconeognico (lactato o piruvato) predomina una ruta u otra. La importancia de
las rutas est determinada por la disponibilidad de lactato y las necesidades citoslicas de NADH en la
gluconeognesis.
El PEP sale de la mitocondria a travs de transportadores.

> Balance de la conversin de piruvato en PEP:
Piruvato + ATP + GTP PEP + ADP + GDP + Pi

= Conversin de fructosa 1,6-bifosfato en fructosa 6P: fructosa bifosfatasa
La FBPasa-1 promueve la hidrlisis prcticamente irreversible del fosfato en C-1, en este casos no la
transferencia de grupo fosforilo al ADP.
Fructosa 1,6-bifosfato + H2O fructosa 6P + Pi

= Conversin de glucosa 6P en glucosa: glucosa 6-fosfatasa
Se necesitan 5 protenas para transformar la G6P citoslica en glucosa libre. Varias protenas del RE
(retculo endoplasmtico) juegan su papel en la generacin de glucosa; T1 transporta la G6P al lumen del
RE, mientras que T2 y T3 transportan Pi y glucosa de vuelta al citoplasma. La G6P se estabiliza gracias a
una protena que une Ca
2+
.
La G6Pasa est slo en las clulas del hgado, rin e intestino delgado. Qu
implicaciones tiene el hecho de que la G6Pasa est slo en esos rganos?
Que slo en estos rganos se va a liberar glucosa al torrente sanguneo, por lo tanto, no van a
consumir la glucosa generada por gluconeognesis. En los dems se va a consumir en algn
paso anterior ya que al no tener esta enzima y fosforilar la glucosa segn entra se aseguran de
que no pueda escapar.

> Balance de la gluconeognesis.

2Piruvato + 2ATP + 2CO2 + 2GTP + 2H2O + 2ATP + 2NADH + 2H
+
+ 2H2O
1
Glucosa + 2ADP + 2Pi + 2GDP + 2CO2 + 2ADP + 2Pi + 2NAD
+
+ 2Pi

2Piruvato + 4ATP + 2GTP + 4H2O + 2NADH + 2H
+
Glucosa + 4ADP + 2GDP + 6Pi + 2NAD
+


La gluconeognesis no es el proceso inverso de la gluclisis ya que la clula tiene que gastar 6 enlaces
fosfato ricos en energa, por lo tanto es caro energticamente fabricar glucosa a partir de compuestos no
carbohidratados.

> Regulacin coordinada de gluclisis & gluconeognesis.
Para evitar trabajo innecesario es necesaria la regulacin coordinada. La gluclisis y la gluconeognesis
comparten 7 enzimas que catalizan las reacciones reversibles de las rutas. En los tres pasos restantes,
las reacciones directa e inversa estn catalizadas por enzimas diferentes, siendo stos los puntos de
regulacin de las dos rutas.
1. Nivel celular: necesidades energticas.
Se trata de una regulacin alostrica:
AMP, ADP, ATP, citrato[1], acetil-CoA
La gluconeognesis se regula a nivel de la PK, de la PEP carboxikinasa y de la fructosa 1,6biPasa
mientras que la gluclisis dependa fundamentalmente de la necesidad energtica, si hay mucho ATP se
ralentiza la ruta a nivel de la PFK y si hay mucho AMP se acelera.

2. Nivel fisiolgico: niveles de glucosa en sangre. Se trata de una regulacin hormonal (insulina &
glucagn) que se realiza a nivel:
a) Alostrico
b) Conversin Molecular Covalente (CMC)
c) Transcripcin
a) Alostrico (mediante metabolitos).
Regulacin gluclisis:
- La hexoquinasa IV (glucoquinasa) tiene propiedades cinticas relacionadas con su papel especial en el
hgado: libera glucosa a la sangre cuando la glucosa sangunea es baja y capta y metaboliza la glucosa
cuando la glucosa sangunea es elevada.
- La PFK-1 se inhibe alostricamente por el ATP y el citrato. En la mayora de los tejidos de mamfero,
hgado incluido, la PFK-1 se activa alostricamente por la fructosa 2,6biP.
- La piruvato quinasa se inhibe alostricamente por el ATP y el isozima heptico es tambin inhibido por
fosforilacin dependiente de cAMP.
Regulacin gluconeognesis:
Est regulada a nivel de la piruvato carboxilasa & fosfoenolpiruvatocarboxiquinasa (que es activada
por acetil-CoA) y de la FBPasa-1 (que es inhibida por la fructosa 2,6biP y por el AMP).

Regulacin coordinada:
~El acetil-CoA (originado en la gluclisis y en la -oxidacin) coordina los 2 metabolismos:
Activa piruvato carboxilasa (activa la gluconeognesis)
Inhibe la PDH (inhibe la gluclisis)
~Para limitar el ciclado intil entre la gluclisis y la gluconeognesis, las dos rutas estn bajo control
alostrico recproco que se consigue mayoritariamente por los efectos opuestos de la fructosa
2,6biP sobre la PFK-1 y la FBPasa-1.
La regulacin de la F2,6biP en hgado como respuesta a las variantes de la [glucosa] en sangre:
- PFK-2: fabrica la F2,6biP
- FBPasa-2: elimina la F2,6biP
Los niveles de glucosa en sangre regulan esta enzima que regula la gluclisis/gluconeognesis.
~La xiulosa 5P o Xu 5P (intermediario de la ruta de las PPP) activa la fosfoprotena fosfatasa PP2A, que
defosforila varias protenas diana, entre ellas PFK-2 / FBPasa-2, inclinando el equilibrio hacia la captacin
de glucosa, sntesis de glucgeno y sntesis de lpidos en el hgado.
El glucagn o la adrenalina 1[cAMP] + fosforilar enzima bifuncional PFK-2/FBPasa-2 1[fructosa
2,6biP]
La insulina activa una prot fosfatasa que defosforila enzima bifuncional PFK-2/FBPasa-2 1[fructosa
2,6biP]
El nivel de fructosa 2,6bP es alto en el estado alimentado y bajo en ayuno. Durante el ayuno la inhibicin
de la PK por fosforilacin es otro control importante.
F2,6biPasa estimula la gluclisis & inhibe la gluconeognesis

c) Transcripcional (genes implicados en la ruta). Actan en el ncleo regulando la expresin de genes
especficos que codifican enzimas de las rutas glucoltica y gluconeognica. La insulina y glucagn
actan de manera antagonista en la activacin de estos factores de transcripcin, con lo que activan e
inhiben gran nmero de genes. La insulina est regulada a nivel de la transcripcin por ms de 150
genes.
Regulacin del factor de transcripcin ChREBP (Carbohydrate Response Element Binding Protein).
Activa la transcripcin de genes implicados en el metabolismo de glcidos y grasas y as coordina la
sntesis de algunos enzimas implicados en la sntesis de glcidos y grasas.
Se expresa en hgado, tejido adiposo y rin.
Genes activados por ChREBP:
- Piruvato kinasa
- cido graso sintasa
- Acetil-CoA carboxilasa
La xilulosa 5P regula a 2 niveles.
Regulacin del factor de transcripcin FOXO1. FOXO1 estimula la transcripcin de los genes que
codifican para PEPCK y G6Pasa (enzimas gluconeognicos). La insulina inactiva a FOXO1 por lo que
impide la gluconeognesis:
Insulina fosforilacin FOXO1 ubiquitina proteasoma no transcripcin de los genes

> Gluconeognesis: interacciones fisiolgicas.

En los seres humanos los rganos gluconeognicos son el hgado y los riones. Las clulas inmunes
producen lactato, aspartato y glutamato que van al hgado para la gluconeognesis. Tambin interviene el
tejido adiposo que produce glicerol mediante degradacin de grasas.


Ciclo de Cori.
Relaciona la gluclisis, gluconeognesis y el metabolismo del glucgeno con el metabolismo del msculo
y el hgado. El lactato sale a la sangre en direccin al hgado donde se transforma en glucosa y vuelve a
la sangre en direccin al msculo. Cori fue la primera mujer en recibir el premio Nobel de Medicina y
Fisiologa.
El lactato que se forma por la actividad muscular se convierte en glucosa en el hgado. Este ciclo
desplaza al hgado parte de la carga metablica del msculo activo.

Gluconeognesis desde glicerol:
El glicerol proviene de la hidrlisis de triacilglicridos de los adipocitos que llegan al hgado dnde se
transforma en glucosa mediante la siguiente va:

Gluconeognesis desde alanina y otros aa:
Sistema de transporte del nitrgeno desde el msculo hasta el hgado. La alanina proviene de la
transaminacin del piruvato con glutamato lo que forma alanina y -cetoglutarato. Cuando la alanina llega
al hgado participa en una reaccin semejante pero en sentido contrario produciendo piruvato y
glutamato. El piruvato ya puede entrar en la ruta gluconeognica.
Durante un sprint las clulas musculares transforman el glucgeno en glucosa y la consumen
inmediatamente, produciendo piruvato y lactato (porque no hay O2 suficiente). El lactato tambin va al
hgado dnde se transforma en piruvato para transformarse en glucosa como la hace el glicerol,
glucgeno y aa.
El msculo cardiaco necesita un aporte continuo de glucosa y la consume siempre en condiciones
aerobias.

> Ciclos de sustrato o ciclos ftiles.
Son reacciones que suponen aparentemente un gasto intil de ATP.
Interconversin del reactante y producto de 2 enzimas, una de ellas cataliza la reaccin en una direccin
mientras que el segundo enzima cataliza la reaccin opuesta. Ejemplo de un ciclo aparentemente ftil:
Se defosforila/hidroliza el ATP sin trabajo metablico aunque ambas reacciones no son plenamente
activas al misma tiempo gracias a la coordinacin de gluclisis/gluconeognesis. Gracias a la actividad
alostrica de los enzimas en la clula en la prctica este ciclo no puede ocurrir.

Funciones de los ciclos de sustrato:
Generar energa en forma de calor debido a la hidrlisis del ATP (ejemplo: el abejorro mantiene la T
para poder volar).
Amplificar las seales metablicas que es la funcin ms importante.




[1] El citrato es un indicador para la formacin de ATP porque indica la presencia de mucho sustrato
para el ciclo de Krebs.



Tema 9. La ruta de las pentosas fosfato (PPP).

Tema 9: La ruta de las pentosas fosfato
(PPP).

La ruta de las pentosas fosfato, del fosfogluconato o de las hexosas fosfato ocurre en el
citoplasma. Es fuente de NADPH y ribosa5P para biosntesis de cidos nucleicos. Tiene una
fase oxidativa (generacin de NADPH) y otra no oxidativa (interconversin no oxidativa de
azcares).


> Fase oxidativa de la RPF.
Se pasa de una hexosa a una pentosa. Consiste en dos oxidaciones que convierten la glucosa
6P en ribulosa 5P y reducen el NADP
+
a NADPH.
E La principal y primera enzima es la G6PDH o G6PD (glucosa 6P deshidrogenasa).
E La segunda enzima es la fosfoglucolactonasa que forma el 6-fosfogluconato que es un
metabolito exclusivo de esta ruta y por eso da nombre a la misma.
E La tercera enzima y ltima de esta fase es la 6-fosfogluconato deshidrogenasa que forma la
ribulosa5P.
> Balance de la fase oxidativa.
Glucosa6P + 2NADP
+
+ H2O Ribulosa5P + 2NADPH + 2H
+
+ CO2

> Fase no oxidativa.
Comprende pasos que convierten pentosas fosfato en glucosa6P, la cual inicia el ciclo de nuevo.
En esta rama existen 4 tipos de reacciones:
C Fosfopentosa isomerasa: convierte una cetosa (ribulosa) en aldosa (ribosa).
C Fosfopentosa epimerasa: epimeriza[1] el C3 (convierte ribulosa en xilulosa).
C Transaldolasa: transfiere unidades de 3C.
C Transcetolasa: transfiere unidades de 2C.
En esta fase se utilizan 3 ribulosas5P para formar 2 fructosas6P y un gliceroaldehido3P.
Todas las reacciones de la rama no oxidativa pueden ocurrir en sentido contrario ya que son
prximas al equilibrio.
> Balance de la fase no oxidativa.
3Ribulosa5P (3x5C) 2Fructosa6P (2x6C) + gliceroaldehido3P (3C)
> Balance global.
3Glucosa6P + 6NADP
+
+ 3H2O 3Ribulosa5P + 6NADPH + 6H
+
+ 3CO2

> Relacin de la ruta PPP con otros procesos metablicos.
Procesos que requieren NADPH:
Sntesis
Detoxificacin


> Regulacin de la ruta PPP.
La entrada de glucosa6P en la ruta de las pentosas fosfato (RPF) es controlada por la
concentracin celular de NADPH que es un fuerte inhibidor de la G6PDH. Como el NADPH es
utilizado en varias rutas metablicas la inhibicin se suaviza y la enzima se acelera para producir
ms NADPH.
La sntesis de G6PDH se induce por el incremento de la ratio insulina/glucagn despus de una
comida con alto contenido en carbohidratos. Esto es fundamental para la sntesis de cidos
grasos.

> Funcionamiento de la RPF en 4 situaciones metablicas.
1) Variaciones del flujo de la RPF (supuesto 1): las necesidades de NADPH y ribosa5P son
iguales.
La reaccin predominante en estas condiciones es la formacin de dos NADPH y una ribosa5P a
partir de la glucosa 6P utilizando la fase oxidativa de la va de las PPP.

2) Variaciones del flujo de la RPF (supuesto 2): la clula necesita ms ribosa5P que NADPH.
Las clulas en divisin rpida necesitan ribosa5P para la sntesis de nucletidos precursores del
DNA.
La glucosa6P se convierte en F6P y G3P por la gluclisis y estos dos intermediarios se
convierten en ribosa5P por las reacciones de la fase no oxidativa.

3) Variaciones del flujo de la RPF (supuesto 3): se requiere mucho ms NADPH que ribosa5P.
El tejido adiposo requiere un elevado nivel de NADPH para la sntesis de cidos grasos. La
glucosa6P se oxida completamente a CO2 generando NADPH.
Se emplea la gluconeognesis para que vuelva a repetirse la fase oxidativa.

4) Variaciones del flujo de la RPF (supuesto 4): se requiere NADPH y ATP pero no se necesita
ribosa5P.
G6P se convierte en ribulosa5P que se convierte en F6P y G3P (fase no oxidativa) que siguen a
la gluclisis hasta piruvato en lugar de revertir a G6P. Se generan simultneamente ATP,
NADPH y 5/6 C de la glucosa6P aparecen en el piruvato.

> El glutatin.
Es un tripptido formado por glutamato, cistena y glicina que combate el estrs oxidativo que
se produce en las clulas al combatir los ROS por lo que es muy importante en el estrs
oxidativo mitocondrial. Es muy importante en los glbulos rojos. Existe en dos formas:
- GSH: reducido
- GSSH: oxidado
Cuando se forman ROS como H2O2 son eliminados por la glutatin peroxidasa. El GSH cede su
H al H2O2 resultando GSSH y dos molculas de agua. El glutatin reductasa pasa GSSH a GSH
con aporte de NADPH y para regenerar el NADPH se emplea la ruta de las pentosas fosfato.
> Deficiencia en G6PDH o G6PD.
La deficiencia en G6PDH es el defecto enzimtico hereditario ms comn en nuestra especie. Se
calcula que est presente en ms de 400 millones de personas en todo el mundo. Es
un desorden gentico ligado al cromosoma X que provoca una anemia hemoltica (glbulos
rojos se destruyen) como respuesta a una infeccin o al consumo de determinados alimentos
(habas) o medicamentos que generan ROS y producen dao celular en los hemates.
Las molculas de Hb no pueden permanecer en estado reducido y se entrelazan unas con otras
formando corpsculos de Heinz en las membranas lesionadas se deforman y la clula acaba
lisindose. Primaquina (frmaco antipaldico) & divicina (compuesto de las habas).
Por qu la deficiencia en G6PD afecta especialmente a los glbulos rojos?
Los glbulos rojos tienen mitocondrias por lo que la nica fuente de G6PDH es la ruta de las
PPP, las que tienen mitocondrias son el sistema de la reaccin de la nicotinamida nucletido
transhidrogenasa que mantiene el glutatin reducido:
NADH + NADP
+
NAD
+
+ NADPH
El favismo es una enfermedad producida por el consumo de habas. La mayor parte de la
poblacin con mutaciones en el gen de la G6PDH es asintomtica hasta que come habas o
sustancias antipaldicas porque tienen una sustancia que se llama divacina y provoca la
formacin de ROS e la incapacidad de reducir el GSSH a GSH.

> Malaria & deficiencia en G6PDH.
El paludismo o malaria es producida por Plasmodium falciparum y tiene una fase del ciclo en los
glbulos rojos. Este plasmodio es sensible al estrs oxidativo y requiere GSH en su ciclo. Esto
explica por qu hay una frecuencia tan elevada del gen de la G6PDH mutado en ciertas
poblaciones en dnde la malaria es endmica. El mosquito vector de la enfermedad muere en el
norte.

[1] Epmero: estereoismero del que cambia la configuracin de 1C asimtrico.



Tema 10. Metabolismo del glucgeno y otros polisacridos.

Tema 10: Metabolismo del glucgeno y
otros polisacridos.


> Estructura del glucgeno.


El glucgeno es un polisacrido de reserva animal formado por uniones de glucosa (1,4) con
ramificaciones (1,6). Es una molcula muy ramificada para permitir una rpida movilizacin de la
glucosa.
Existe en el hgado y en el msculo y la diferencia entre ambos est en su uso:
- en el hgado se emplea para generar glucosa que es liberada a la sangre
- en el msculo se emplea para generar glucosa que es consumida localmente
> Digestin del glucgeno.
La digestin del glucgeno es llevada a cabo por las amilasas. Como estas no pueden digerir los
enlaces (1,6) , cuando llega a estos puntos acta la enzima desramificante que convierte las
ramificaciones en polisacridos lineales de glucosa. Tiene por tanto una actividad(1,6)glicosidasa.

> Metabolismo del glucgeno.



> Glucogenolisis.
El glucgeno se degrada gracias a 3 enzimas: glucgeno fosforilasa, enzima desramificante, la cual
produce G1P que se transforma en G6P por la fosfoglucomutasa (PGM).
La enzima desramificante es bifuncional con 2 actividades:
Transferasa: traslada un bloque de 3 residuos de una rama a otra.
-1,6-glucosidasa: hidroliza el enlace 1,6 y vuelve a ser sustrato de glucgeno fosforilasa

La primera reaccin es catalizada por la glucgeno fosforilasa que rompe enlaces 1,4 a partir de los
extremos no reductores del glucgeno. Libera unidades de G1P hasta el punto en el que la enzima no
puede continuar (a 4 restos de la ramificacin). Aqu acta la enzima desramificante (bifuncional) que
transfiere 3 glucosas a una cadena lineal y libera el cuarto residuo (1,6 glucosidasa).
La reaccin que convierte la G1P en G6P es catalizada por la fosfoglucomutasa y es una
reaccin prxima al equilibrio. En el hgado esta G6P pasa a ser glucose por la G6Pasa en la luz del
retculo. Estaa glucose sale a la sangre y una parte puede ir a la RPF mientras que en el msculo dar
piruvato.

> Destino de la G6P.
La G6P procedente del glucgeno puede:
1. Utilizarse como combustible para el metabolismo aerobio o anaerobio como sucede, por ejemplo, en el
msculo.
2. Convertirse en glucosa libre en el hgado y seguidamente liberarse a la sangre.
3. Procesarse por la va de las pentosas fosfato para producir NADPH o ribosa en diversos tejidos.
> Glucogenosntesis o glucgenognesis.
En la sntesis de glucgeno la glucosa se transporta unida a UDP en una reaccin catalizada por la UDP-
glucosa pirofosfatasa:
UDP + G1P PPi + UDP-glucosa
Esta reaccin est desplazada hacia la derecha porque el PP
i
se hidroliza muy rpido a dos fosfatos.
En la sntesis de glucgeno actan la glucgeno sintasa que es la que libera unidades de glucosa, y
tambin es necesaria la enzima ramificante.
La glucogenina es una proteina dimrica con actividad glucosiltransferasa con capacidad de fabricar
el cebador para la sntesis de glucgeno.
> Coste de la incorporacin de 1G6P al glucgeno: balance.
Suma: G6P + ATP + Glucgenon + H2O Glucgenon+1 + ADP + 2Pi
ENTRADAS SALIDAS
G6P
G1P
UTP
PPi
H2O
UDP-G
Glucgenon
UDP
ATP
G1P
UDP-G
PPi
2Pi
UDP
Glucgenon+1
UTP
ADP
Se gasta un ATP para incorporar una G6P y se obtienen 31 ATP en su degradacin completa a CO2 y
H2O lo que supone una gran eficiencia de almacenamiento de glucgeno.
> Regulacin del metabolismo del glucgeno.
Las enzimas reguladoras son la glucgeno fosforilasa (GF) y la glucgeno sintasa (GS). La
glucogenognesis y la glucogenolisis estn reguladas coordinadamente.
RECUERDA! Formacin del AMPC
La hormona interacta con el receptor de la familia 7TM el cual est unido a una protena
G que une GTP o GDP. Produce un intercambio de GDP por GTP. Esta protena G
interacta con la enzima adenilatociclasa la cual convierte el ATP en AMPc que activa la
PKA (protena kinasa A). Los estmulos duran poco y una de las formas de eliminar el
estmulo es la destruccin del AMPc por la poliesterasa.
Hay tres niveles de regulacin:
C Regulacin alostrica a travs de efectores alostricos que reflejan el estado energtico de la clula.
Activador: AMP
Inhibidor: ATP y G6P
C Regulacin por conversin molecular covalente.
C Regulacin hormonal en respuesta a necesidades fisiolgicas (ayuno o estrs/ejercicio).
Glucagn, adrenalina, insulina
> Glucgeno fosforilasa (GF).
Regulacin alostrica GF.
La glucgeno fosforilasa (GF) se comporta acorde al modelo concertado de MWC de interacciones
alostricas:
estado R (activado) ~ estado T (inactivado)
Modelo de MWC (Monod, Wyman & Changeux).
La alostera (de griego allos: otro y steres: forma) es un modo de regulacin de las enzimas por
el que la unin de una molcula en una ubicacin (sitio alostrico) modifica las condiciones de
unin de otra molcula, en otra ubicacin distante (sitio cataltico) de la enzima.
La unin de la molecula induce un cambio de conformacin espacial de la protena enzimtica,
de tal modo que se modifica la ubicacin del enlace de por lo menos uno de los reactivos
implicados en el proceso de catlisis. En el modelo de MWC las enzimas alostricas deben
presentar varias propiedades:
Son multimricas, cada monmero fija una molcula de ligando.
Poseen al menos un eje de simetra.
Existen bajo dos conformaciones diferentes: una llamada T (tensa), que por convenio designa la
forma de menor afinidad por el sustrato, y la otra R (relajada), con mayor afinidad por
elsustrato.
En una misma molcula de protena, todas las subunidades adoptan la misma configuracin, R
o T (transicin concertada). Dicho de otro modo, no existe hbrido R/T en el modelo MWC.

La GF existe en 2 formas: GFa (generalmente activa) ~ GFb (generalmente inactiva)
El paso de GFb a GFa se hace por fosforilacin y el contrario por defosforilacin. Ambas formas existen
en equilibrio entre dos estados. Los efectores alostricos alteran el equilibrio entre ambos estados.
Reguladores alostricos:
ATP y G6P inactivan. Son efectores heterotrpicos[1] negativos ya que favorecen el estado T (niveles
altos de ATP o G6P indican un estado energtico alto).
AMP activa. Es un efector heterotrpico positivo porque cuando las reservas energticas son bajas y
hay 1[AMP] se activa la degradacin del glucgeno.
La conversin de la GFb a GFa (forma ms activa) est desencadenada por adrenalina o epinefrina
(secretada por las glndulas adrenalinas y actan en msculos e hgado) y glucagn (secretada por el
pncreas y acta en hgado y adiposo).

Regulacin de la GF por conversin molecular covalente:
Fosforilacin: GFK
Estructura: ()4
> Subunidad : actividad cataltica
> Subunidad & : funcin reguladora (fosforilacin)
> Subunidad : interviene en la unin de Ca
2+
(calmodulina)
Doble control:
Se activa por fosforilacin (PKA)
Se activa por un aumento de los niveles de Ca
2+
.
La GFK alcanza su mxima actividad cuando se activa por fossforilacin y unin de Ca
2+.


Defosforilacin: PP1 (fosfoproten fosfatasa)
Despus de una comida o del cese de ejercicio, finaliza el estmulo hormonal, no se forma AMPc,
inactivacin de la protena G y se degrada el existente por la fosfodiesterasa y se activa la PP1.
PP1 invierte el efecto de la cascada de fosforilaciones: desactiva glucogenolisis & activa
glucogenosintesis.
Durante el ejercicio o el ayuno se debe inhibir la actividad PP1 para que se puedan movilizar las reservas
de glucgeno.
> Glucgeno sintasa (GS).
La GS cataliza la reaccin: UDP-G + Glucgenon UDP + Glucgenon+1
Est regulada a tres niveles:
1. Regulacin hormonal: PKA a travs del AMPc
2. PP1
3. Glucgeno sintasa kinasa 3 (GSK3) influda por la insulina
La insulina estimula la sntesis de glucgeno actuando sobre GSK3 y PP1.
La GS tiene dos formas: GSa (activa) ~ GSb (inactiva) y el paso de una forma a otra es por
fosforilacin/defosforilacin. La fosforilacin la realiza la GSK3 y la defosforilacin la PP1. La GS puede
ser fosforilada por al menos 11 kinasas diferentes siendo la principal GSK3.
GSa + 3ATP + GSK3 ~ GSb + 3ADP + PP1

Este ciclo est regulado por insulina, glucagn, epinefrina
Para que GSK3 fosforile tiene que fosforilarse por la CK2 (casen kinasa 2) y el aa que se fosforila es la
serina. La insulina inactiva a GSK3 promoviendo la sntesis de glucgeno. A la vez acta sobre la PP1
activndola. El glucagn y la adrenalina tienen el efecto contrario. G6P y glucosa son reguladores
alostricos de PP1 ya que si en la clula entra mucha glucosa quiere decir que hay mucho sustrato para
fabricar glucgeno lo que ayuda a la glucogenognesis.
La insulina es una hormona proteica que no entra en la clula. Su receptor tiene actividad tirosn kinasa
en su parte citoplasmtica: fosforila restos de tirosina. Fosforila los IRS (Sustratos Receptores de
Insulina) que activan las PK que fosforilan a la GSK3 que defosforila la GS.
La PK se llama PI-3K y convierte el PIP2 en PIP3 (fosfatidil inositol fosfato) que es el segundo mensajero
que activa a la PDK1 que activa la PKB que fosforila la GSK3.

> Metabolismo del glucgeno: respuesta al ayuno y/o ejercicio.
En ayuno el glucgeno estimula la glucogenolisis heptica cuando hay poca glucosa. Las glucosas que
se obtienen del glucgeno son liberadas a la sangre. En el hgado tambin se activa la gluconeognesiss.
La adrenalina estimula la degradacin de glucgeno en el hgado ante una situacin de estrs.
-El glucagn estimula la glucogenolisis heptica cuando la glucemia es baja.
-La adrenalina estimula la degradacin de glucgeno en msculo e hgado ante una situacin de estrs.
El glucgeno no puede salir del msculo porque no se puede defosforilar (ciclo de Cori) ya que no existe
la G6Pasa.
La PKA tambin inhibe a la glucgeno sintasa, a la vez que activa la degradacin se inhibe la sntesis.

> Enfermedades hereditarias relacionadas con el almacenamiento del glucgeno.
Enfermedad de von Gierke, causada por una deficiencia en G6Pasa, fue la primera demostracin de
una enfermedad congnita de deficiencia en un enzima heptico. El hgado est dilatado y
presentan hipoglucemia pronunciada entre comidas ya que se moviliza el glucgeno pero la glucosa no
puede salir a la sangre. Esto provoca una elevada [lactato] en sangre. Estos pacientes presentan una
mayor dependencia del metabolismo graso.
Enfermedad de McArdle, es un defecto gentico en la enzima glucgeno fosforilasa muscular[2].
Presentan dolor muscular y fatiga en los primeros minutes de ejercicio ya que no movilizan glucgeno ni
glucose para generar ATP en el momento del sprint. Al pasar el tiempo los msculos se irrigan de sangre
por lo que en condiciones aerobias pueden hacer ejercicio de forma normal.
Enfermedad de Pompe, causada por un defecto gentico en -glucosidasa (GAA) que es un enzima
lisosmico o maltasa cida. Captan glucgeno que en condiciones normales es degradado por la GAA ya
que degrada el glucgeno ingerido por los lisosomas. En los enfermos se acumula glucgeno en los
lisosomas, los cuales revientan y matan a la clula por autodigestin. Esto es muy frecuente en tejido
cardiaco y respiratorio. Es una herencia recesiva autosmica. No pueden degradar glucgeno en la va
lisosomal; se est probando una terapia de reemplazo de la enzima.





[1] Heterotrpico: efecto de un ligando sobre otro distinto. Tienen otros sitios
especficos distintos para unir ligandos distintos llamados moduladores o efectores.
[2] Afecta a la enzima muscular y no a la enzima heptica porque son isozimas.






Tema 11. Fotosntesis. Transporte electrnico, fotofosforilacin
oxidativa y ciclo de Calvin.

Tema 11: Fotosntesis.
Transporte electrnico, fotofosforilacin oxidativa y ciclo de Calvin

> Definicin.
Es la utilizacin de la energa luminosa para producir carbohidratos y O2 a partir de CO2 y H2O.
A) FASE LUMINOSA DE LA FOTOSNTESIS.
Las reacciones de la fase luminosa generan NADPH y ATP ricos en energa a expensas de la energa
solar. Estos productos se utilizan en las reacciones de asimilacin de carbono, que tienen lugar con luz o
en la oscuridad, para reducir CO2 y formar triosas y otros compuestos ms complejos (tales como la
glucosa) derivados de las triosas.

Energa luminosa O2 + NADPH + ATP

> Espectro de radiacin electromagntico.
La luz visible es radiacin electromagntica de una longitud de onda de entre 400 y 700nm. La energa
de un fotn individual (un cuanto de luz) es mayor en el extremo violeta del espectro que en el
rojo; longitudes de onda menores (y de mayor frecuencia) corresponden a una mayor energa.
Cuando se absorbe un fotn se eleva un e
-
a un nivel energtico superior en la molcula que lo absorbe
(cromforo). Esto sucede segn un proceso de todo o nada; para ser absorbido, el fotn ha de contener
una cantidad de energa (un cuanto) que iguale exactamente la energa de la transicin electrnica.
Una molcula que ha absorbido un fotn se encuentra en un estado excitado que, en general, es
inestable. Los e
-
elevados a orbitales de energa superior habitualmente se vuelven rpidamente a sus
orbitales normales de menor energa; la molcula excitada vuelve (decae) al estado basalestable,
liberando el cuanto absorbido en forma de luz o calor o utilizndolo para realizar trabajo qumico.
La luz emitida durante el decaimiento de las molculas excitadas (fluorescencia) es siempre de una
longitud de onda superior (menor energa) que la de la luz absorbida. Un modo alternativo de decaimiento
importante en la fotosntesis implica la transferencia directa de la energa de excitacin de una molcula
excitada a una molcula vecina.

> Clorofilas.
Son los principales pigmentos que absorben luz en las membranas de los tilacoides. Son verdes con
estructuras policclicas plantas que se parecen a la protoporfirina de la hemoglobina excepto en que la
posicin central est ocupada por Mg
2+
en lugar de Fe
2+
. Todas las clorofilas tienen una cadena lateral
larga de fitol, esterificado a un grupo carboxilo sustituyente del anillo IV.


Los cloroplastos contienen tanto clorofila a como b. Aunque las dos son verdes, sus espectros de
absorcin son diferentes y se complementan sus gamas de absorcin de la luz en la regin visible. La
mayora de las plantas contiene el doble de clorofila a que b. Los pigmentos de las algas y de las
bacterias fotosintticas contienen clorofilas que slo difieren ligeramente de los pigmentos de las plantas.

> Centro de reaccin fotosinttico.
Las clorofilas estn invariablemente asociadas a protenas de unin especficas, formando los complejos
de captacin de luz (LHC, light-harvesting complexes), en los que las molculas de clorofila estn en
posiciones fijas en relacin con ellas mismas, con otros complejos proteicos y con la membrana.
La energa de los fotones es captada por los pigmentos fotosintticos (LHC) y migran por las molculas
del complejo sistema hasta alcanzar el centro de reaccin.

> Transferencia de energa por resonancia.
La molcula que ha absorbido un cuanto de luz (fotn) puede volver a su estado original liberando luz
(fluorescencia) o calor, o convertirse en un excitn y transferir energa a otra molcula hasta que el
excitn alcanza el centro de reaccin de otra clorofila.

> Fase luminosa.
Se transforma energa luminosa en energa qumica. Se forma ATP, NADPH y O2.
Actan dos centros de reaccin en tndem: el fotosistema II y el fotosistema I.

> Cooperacin de PSI y PSII: el esquema en Z.
Tiene dos rutas: cclica y no cclica.
Para elevar un electrn se requiere un fotn. Se transfiere un electrn desde el H2O al NADP
+
por cada 2
fotones absorbidos.



Balance del flujo de e
-
no cclico: 2H2O + 2NADP
+
+ 8fotones O2 + 2NADPH + 2H
+

Balance del flujo de e
-
cclico: no se produce O2 ni poder reductor, slo se produce ATP.

> El fotosistema II (PSII).
Transfiere electrones desde el H2O a la plastoquinona (PQ PQH2) y genera un gradiente protnico. El
PSII tiene dos protenas transmembrana: D1 y D2.
Reaccin global del PSII:
Se encuentra el complejo que tiene la capacidad de romper la molcula de H2O: the oxygen-envolving
complex (OEC) or Water Splitting Enzyme of PSII
Flujo de los electrones a travs del PSII: la absorcin de la luz induce la trnasferencia electrnica desde el
P680 hacia la plastoquinona intercambiable por una va de transferecia de electrones. La carga positiva de
P680 queda neutralizada por el flujo electronic desde las molculas de agua unidas al centro de
manganeso.
Contribucin al gradient protnico:
- La reduccin de la plastoquinona
- La rotura de la molcula de H2O

El citocromo bf es la conexin entre PSII con PSI. Este complejo cataliza la transferencia de electrones
del plastoquinol (QH2) a la plastocianina (PC) una protena del lumen tilacoidal pequea y soluble que
contiene cobre. Reaccin global:
PQH2 + 2PC (Cu
2+
) PQ + 2PC (Cu
+
) + 2H
+
en el lumen tilacoidal
> El fotosistema I (PSI).
El PSI, un complejo transmembrana constituido por 14 cadenas polipeptdicas, mltiples protenas
asociadas y cofactores, cataliza la etapa final de las reacciones de la fase luminosa.
PC (Cu
+
) + Fdox PC (Cu
2+
) + Fdred
La cooperacin entre el PSI y el PSII genera el flujo electrnico desde el H2O al NADP
+
. Esta va de flujo
electrnico se denomina esquema en Z de la fotosntesis ya que el diagrama redox se parece a la letra Z.
La ferredoxina-NADP
+
reductasa es una flavoprotena[1] que convierte el NADP
+
en NADPH. Aunque la
ferredoxina es reducida es un potente reductor que porta un electrn, en cambio el NADPH es un
reductor con dos electrones que se utiliza ampliamente en los procesos biosintticos.
Sntesis de NADPH: 2Fdred + 2H
+
+ NADP
+
2Fdox + NADPH + H
+

> Sntesis de ATP por fotofosforilacin no cclica.

> Balance global de la fotofosforilacin no cclica.
2H2O + 2NADP
+
+ 8fotones + 3ATP + 3Pi O2 + 2NADPH + 2H
+
+ 3ATP

> El fotosistema I (PSI).
La planta si tiene suficiente poder reductor hace la fotofosforilacin cclica para producir ATP ya que el
O2 es residual.




B) FASE OSCURA DE LA FOTOSNTESIS. (fijacin de CO2 = ciclo de Calvin)
> Definicin.
Las reacciones de la fase luminosa transforman la energa de la luz en ATP y poder reductor para la
biosntesis. Las reacciones de la fase oscura, que forman el ciclo de Calvin, reducen los tomos de
carbono totalmente oxidados (CO2) a un estado ms reducido (hexosa).
Adems de ATP las reacciones de la fase oscura precisan de poder reductor en forma de NADPH[2].
> Ciclo de Calvin: reduccin fotosinttica del C
a) Fase 1: fijacin del CO2 sobre la ribulosa 1,5-biP
b) Fase 2: reduccin del 3-fosfoglicerato
c) Fase 3: regeneracin de la ribulosa 1,5-biP
Se fijan 3CO2 para la sntesis neta de una molcula de gliceroaldehido 3P.



a) Fase 1: fijacin del CO2 sobre la ribulosa 1,5-biP
La enzima fijadora del CO2 es la rubisco (ribulosa 1,5-biP carboxilasa/oxigenasa).
3-fosfolicerato 1,3-bifosfoglicerato gliceroaldehido 3P

b) Fase 2: reduccin del 3-fosfoglicerato
Empleamos el NADPH de la fase luminosa. El 3-fosfolglicerato que se ha formado en el primer paso se
convierte en gliceroaldehido 3P en dos pasos que son, bsicamente, el inverso de los pasos
correspondientes de la gluclisis, con una excepcin: el cofactor nucleotdico para la reduccin es el
NADPH y no el NADH.
El estroma del cloroplasto contiene todos los enzimas glucolticos con la excepcin de la fosfoglicerato
mutasa. Los enzimas del estroma son isozimas citoslicos; ambos catalizan las mismas reacciones pero
son el producto de diferentes genes.

Destinos del gliceroaldehido 3P (G3P):
El G3P, adems de servir para:
La produccin de energa por oxidacin va glicolisis. (fuente energa)
Obtencin de almidn en el interior del cloroplasto y celulosa en la pared celular.
Produccin de sacarosa en el citosol.
Regeneracin de la ribulosa 1,5-biP.

c) Fase 3: regeneracin de la ribulosa 1,5-biP
Los materiales de partida son el gliceroaldehido 3P y la dihidroxiacetonaP. Las actividades catalticas son:
Transcetolasa
Transaldolasa
Epinerasa
Isomerasa
Fosfatasa
Kinasa

> Estequiometra del Ciclo de Calvin.
Sntesis de una molcula de Gliceroaldehido 3P (3C)
Se requieren 3 vueltas del ciclo de Calvin para fijar 2CO2 (3C). Por cada 3 molculas fijadas de CO2 se
produce una molcula de gliceroaldehido 3P. Convertir una molcula de 3-fosfoglicerato en una molcula
de gliceroaldehido 3P gasta 1ATP y 1NADPH. Por cada CO2 necesito una ribulosa-1,5-biP, por lo tanto,
necesito 3 ribulosas-1,5biP. Se gastan 3ATP en la regeneracin de la ribulosa-1,5biP.
3CO2 + 3H2O + 9ATP + 6NADPH + 6H
+
Gliceroaldehido3P + 6Pi + 9ADP + 6NADP
+


> Balance de la sntesis de glucosa.
6CO2 + 6H2O + 18ATP + 12NADPH + 12H
+
C6H12O6 + 18Pi + 18ADP + 12NADP
+


> Regulacin del Ciclo de Calvin.
De dos formas:
E La rubisco se activa mediante los cambios en las concentraciones de protones e ion magnesio inducidos
por la luz.
Las reacciones de la fase luminosa de la fotosntesis transfieren electrones desde el interior del tilacoide
al estroma y en este proceso se traspasan protones desde el estroma hacia el interior del tilacoide. Como
consecuencia, las concentraciones de NADPH, ferredoxina reducida y Mg
2+
en el estroma son mayores
con la luz que en la oscuridad, en tanto que la concentracin de H
+
es menor en la oscuridad. Cada uno
de estos cambios en las concentraciones colabora en el acoplamiento de las reacciones del ciclo de
Calvin con las reacciones de la fase luminosa.
La luz hace el pH del estroma ms alcalino y favorece un aumento en [Mg
2+
] en el estroma porque en la
fase luminosa se produce un gradiente protnico. Estos cambios activan la RUBISCO y otras enzimas de
la fase oscura armonizando ambas partes.

E La tiorredoxina desempea un papel clave en la regulacin del ciclo de Calvin.
Las reacciones debidas a la luz conducen a la transferencia de electrones desde el agua a la ferredoxina
y, ocasionalmente, al NADPH. Los enzimas del ciclo de Calvin estn regulados por la ferredoxina
reducida y el NADPH. Enzimas activados por la luz mediante tioredoxina que reduce otros 4enzimas que
las activa.
La forma reducida de la tiorredoxina (enzima) activa muchos enzimas biosintticos al reducir los puentes
disulfuro que controlan la actividad de dichos enzimas y, mediante el mismo mecanismo, inhibe enzimas
degradativos.
En los cloroplastos la ferredoxina reduce a la tiorredoxina en una reaccin catalizada por la ferredoxina-
tiorredoxina reductasa. La actividad de las reacciones de la fase luminosa y la fase oscura de la
fotosntesis est coordinada mediante la transferencia de electrones entre la ferredoxina reducida a la
tiorredoxina y luego a los componentes enzimticos que contienen puentes disulfuro reguladores.

> Sntesis de sacarosa y almidn.
La sntesis de sacarosa en el citosol y la sntesis de almidn en el cloroplasto son las rutas principales
de recoleccin del exceso de triosas fosfato de la fotosntesis.
La sntesis de sacarosa libera 4molculas de Pi de las 4triosas fosfato requeridas para producir sacarosa.
Antiporte Pi-triosa-P de la membrana interna del cloroplasto.




[1] Flavoprotena: protenas que contienen un nucletido derivado de la vitamina B2:
la flavn adenn dinucletido (FAD) o flavn mononucletido (FMN)
[2] La diferencia entre el NADPH y el NADH reside en el grupo foforilo del 2 hidroxilo
de una de las unidades de ribosa pero en biosntesis existe una diferencia
fundamental: el NADH se oxida en la cadena respiratoria para generar ATP, en tanto
que el NADPH sirve como reductor en los procesos de biosntesis.


Tema 12. Fotorrespiracin. Plantas C4. Ciclo del Glioxilato.

Tema 12: Fotorrespiracin.
Plantas C4. Ciclo del Glioxilato.

> Fotorrespiracin.
La fotorrespiracin (metabolismo del fosfoglicolato) es un proceso mediante el cual las plantas
iluminadas consumen oxgeno y desprenden CO2.
Posiblemente se trate de un mecanismo de proteccin del aparato fotosinttico frente a la fotoxidacin en
condiciones de alta iluminacin, bajas concentraciones de CO2 y elevadas de O2. En estas condiciones la
actividad oxigenasa de la rubisco se hace efectiva (fotorrespiracin).
Es la actividad oxigenasa de la rubisco. Es un proceso impulsado por la luz que consume O2 y libera CO2.
> Actividades de la RUBISCO:
CARBOXILASA: sigue el Ciclo de Calvin.
OXIGENASA: produce la fotorrespiracin.
Se llama fotorrespiracin porque es impulsado por la luz y consume O2 generando CO2. Parece no
productivo para la planta.
La Rubisco es una enzima que surgi muy pronto en la evolucin, cuando la atmsfera era rica en CO2 y
pobre en O2, lo contrario de lo que ocurre ahora. La enzima no ha sido pues diseada para operar en las
condiciones actuales. La Fotorrespiracin lleg a ser importante hace 60 millones de aos cuando la
concentracin de CO2 cay a los niveles actuales. Se piensa que la versin C4 de la fase oscura surgi
como respuesta evolutiva a la presin ambiental (elevadas concentraciones de O2) hace 30 millones de
aos o incluso ms recientemente (7 millones de aos). Desde entonces la enzima, debido quizs a su
importancia, ha cambiado muy poco a lo largo del tiempo.
El fosfoglicolato se desfoforila en el cloroplasto y es transportado a los peroxisomas. Es oxidado para
generar glioxilato y perxido de hidrgeno. El H2O2 (txico) se degrada y el glioxilato se amida para
producir glicina. La Glicina entra las mitocondrias donde 2 molculas se convierten en serina, CO2 y
NH3 . La serina retorna al peroxisoma en donde se transforma en glicerato, que se transporta al
cloroplasto donde es transformado en 3PG con consumo de ATP.
Proceso con prdidas:
Se pierde Ribulosa 1,5BP en el ciclo de Calvin
Se invierte la fijacin de CO
2
: se consume O
2
y se libera CO
2

Slo una parte del carbono vuelve al cloroplasto
Se gasta ATP
Una (posible) explicacin: La fotosntesis en condiciones de bajo CO2 y mucha luz en donde se consume
el CO2 conducira a la produccin de especies oxigenadas muy reactivas, (O2
-
) que puede producir dao
celular. La fotorrespiracin disminuye la concentracin de O2 e inhibe las reacciones luminosas.

> Plantas C4.
Algunas plantas han establecido una ruta fotosinttica que ayuda a conservar el CO2 liberado por la
fotorrespiracin que implica la incorporacin de CO2 a un intermediario de 4 carbonos (oxalacetato). Est
presente en varias especies cultivadas (maz, caa de azcar) y en plantas tropicales expuestas a luz
intensa y altas temperaturas. Se da en clulas especializadas expuestas al CO2.
La fosfoenolpiruvato carboxilasa es capaz, en condiciones de alta O2 y baja CO2 de seguir bombeando
CO2 hacia las clulas que hacen la fotosntesis (C3). Cuando se da la fotorrespiracin el CO2 que se
libera puede recuperarse en las clulas mesfilas circundantes (C4) y devolverse al ciclo de Calvin. Se
consumen 2 ATP por cada CO2 fijado.
Para evitar la fotorrespiracin fijan el CO2 en forma de Oxaa sobre fosfoenolpiruvato carboxilato (PEP).
Emplean el enzima mlico.



> Plantas CAM.
CAM (Crasulcea acid metabolism): adaptacin metablica de las plantas del gnero Crassulacea
(plantas suculentas) a las condiciones de sequedad y calor. En las plantas CAM los estomas de las hojas
estn cerrados durante el da, para prevenir la prdida de agua cuando las temperaturas son muy
elevadas. Por ello el CO2 o puede ser absorbido durante el da, y por tanto ser utilizado en las sntesis de
glucosa. Durante la noche, a temperaturas ms bajas los estomas se abren y el CO2 es fijado por la ruta
C4 y almacenado como malato en vacuolas. Durante el da el malato es descarboxilado y el CO2 queda
disponible para el ciclo de Calvin.




Tema 13. Biosntesis de carbohidratos en las clulas vegetales.

Tema 13: Biosntesis de carbohidratos
en las clulas vegetales.


> Carbohidratos: almidn y sacarosa.
La almidn sintasa de los cloroplastos y amiloplastos cataliza la adicin de residuos de glucosa, donados
por la ADP-glucosa, al extremo reductor de una molcula de almidn mediante unmecanismo de
insercin en dos pasos. Un segundo enzima introduce las ramas de la amilopectina.
La sacarosa se sintetiza en el cisol en dos pasos a partir de UDP-glucosa y fructosa 1P.
La distribucin de las triosas fosfato entre la sntesis de sacarosa y la de almidn est regulada por la
F23BP (fructosa 2,6biP), un efector alostrico de los enzimas que determinan el nivel de fructosa 6P. La
concentracin de F26BP vara inversamente con la velocidad de fotosntesis y el F26BP inhibe la sntesis
de fructosa 6P, el precursor de la sacarosa.




Tema 14. Metabolismo de lpidos. Digestin y transporte de
lpidos en sangre.

Tema 14: Metabolismo de lpidos.
Digestin y transporte de lpidos en sangre.

> Panormica general.



> Los cidos y las sales biliares.
Son molculas anfipticas y actan como detergentes emulsionando los lpidos en el intestino,
hacindolos accesibles a las lipasas.
Los cidos biliares derivan del colesterol. Son muy abundantes en la bilis. Los ms caractersticos son
el cido clico, elquenodesoxiclico y el litoclico. Con frecuencia, el cido clico aparece conjugado con
los aa glicina y taurina formando los cidostauroclico y glicoclico.
Las sales biliares son las sales sdicas o potsicas de los cidos tauroclicos y glicoclicos.
Todas proceden del colesterol, en ltima instancia del acetil-CoA.
> Quilomicrn.
Un quilomicrn es un agregado lipoproteico que se forma en el epitelio intestinal. La superficie est
constituida por una capa de fossfolpidos, con los grupos de cabeza encarados hacia la fase acuosa. Los
TAG secuestrados en el interior. Varias apolipoprotenas que sobresalen de la superficie actan como
seales para la absorcin y metabolismo del contenido de los quilomicrones.

> Vas del transporte de lpidos en sangre.
a) VA EXGENA DEL TRANSPORTE DE LPIDOS EN SANGRE. (lpidos procedentes de la dieta)
Sobre los quilomicrones actan las lipoproten lipasas de las paredes de los capilares que hidrolizan y los
lpidos son captados por las clulas.
Msculo catalizar Adipocito almacenar
Los remanentes de quilomicrones son retirados por el hgado.


b) VA ENDGENA DEL TRANSPORTE DE LPIDOS EN SANGRE.




> Lipoprotenas.
Cada lipoprotena tiene una funcin especfica que depende de tres factores:
Lugar de sntesis
Composicin lipdica
Contenido en apoprotenas
Varan en funcin de: %contenido lpidos y %contenido apoprotenas

> Estructura de la LDL.
ster de colesterol
Fosfolpido
Colesterol no esterificado
Apoprotenas B-100
El ms hidrofbico es el ster de colesterol porque tiene el OH estefificado con 1 cido graso y en el
centro estn los ms hidrofbicos.

> Funciones del colesterol.
1. Precursor de algunas vitaminas liposolubles.
2. Componente estructural de la membrana plasmtica.
3. Precursor de las hormonas esteroideas.
4. Precursor de las sales biliares.

> Acciones para reducir los niveles de colesterol.
1) Inhibir la circulacin enteroheptica (secuestradores de cidos biliares: resinas con carga +)
En el hgado se fabrican las sales biliares a partir del colesterol almacn en vescula
(prescindible) intestino.
Cuando acaba la digestin, las sales biliares vuelven al hgado porque se reciclan (por eso entero) y el
5% se elimina con las heces. Si las secuestran y se pierden por las heces el hgado debe fabricar ms
gastando colesterol para ello, concretamente LDL.

2) Inhibir la absorcin del colesterol (bloqueo del transporte de membrana)
Hay ciertos productos que tienen esteroles vegetales (danacol, benecol) que impiden la absorcin del
colesterol proveniente de la dieta.

3) Inhibir la sntesis endgena del colesterol (estatinas: inhiben la Hmg-CoA reductasa)


Tema 15. Degradacin de cidos grasos. La -oxidacin.
Metabolismo de cuerpos cetnicos.

Tema 15: Degradacin de cidos
grasos. La -oxidacin.
Metabolismo de cuerpos cetnicos.

> Localizacin intracelular de las principales rutas del metabolismo de lpidos.


> Orgenes AG.
Exgeno:
TAG presentes en alimentos. Degradacin en el intestino.
Endgeno:
TAG presentes en el tejido adiposo (reserva).
Sntesis a partir de Acetil-CoA

> Movilizacin de los TAG del tejido adiposo.
Se regula con dos hormonas: adrenalina (estrs) & glucagn (ayuno).
Perilipinas: familia de protenas que recubren las gotculas lipdicas impidiendo la miovilizacin
inoportuna de las reservas de TAG, es decir, que no se degradan los TAG cuando no es necesario.
> Fases de la oxidacin completa de AG.
1. -oxidacin: AG Acetil-CoA
2. Ciclo de Krebs
3. Cadena respiratoria
> -oxidacin.
1) Activacin de los AG: formacin del acetil-CoA graso. Tiene lugar en el citosol. La enzima es
la acetil-CoA sintetasa o AG tioquinasa. La situacin de casi equilibrio desaparece por la hidrlisis del
PPi:
2) Transporte al interior de la mitocondria.
Con carnitina (AG de cadena larga)
Sin transportador (AG cadena corta 12C)
3) Reacciones de la -oxidacin. Formacin del Acetil-CoA o propionil-CoA.
> Balance.
R-COO
-
+ CoA + ATP RCO~SCoA + AMP + 2Pi
La activacin de un AG consume 2 enlaces fosfato ricos en energa: cuando se rompe el ATP y cuando
se rompe el PPi.
> Transporte interior mitocondrial por carnitina.
Enzima: carnitina acetil transferasa I (mme) y la II (isozimas)
Acetil-CoA graso citoslico matriz mitocondrial
El proceso de entrada del acil-CoA a la mitocondria es el paso limitante en la -oxidacin y es
un punto de control. La carnitina es un alcohol zwitterinico[1] y le llaman la molcula devora-grasa.

> Degradacin mitocondrial de los AG: -oxidacin.
Se llama -oxidacin porque se rompe en el C3 (). Tambin se llama hlice de Lynen.
- AG saturados[2] (cadena par e impar).
- AG insaturados (mono y poliinsaturados)
En la -oxidacin ocurre la eliminacin oxidativa de unidades sucesivas de 2C en forma de acetil-CoA,
generndose NADH & FADH2. Ocurre en 4 pasos generales que se repiten:
1.- Oxidacin: acetil-CoA deshidrogenasa
2.- Hidratacin: enoil-CoA hidratasa
3.- Oxidacin: L-3-hidroxiacil-CoA deshidrogenasa
4.- Tiolisis: -cetoacil-CoA tiolasa o acil-CoA acetiltransferasa o -cetotiolasa

> -oxidacin: AG saturado / cadena par.
Acaban en la cadena respiratoria porque transfieren los electrones al ETF (electron trasnferente
flavoprotena) que reduce al QH2 que cede electrones al complejo III.
Balance de la oxidacin del Palmitoil CoA (16C 7vueltas):
1Acetil-CoA 10ATP
1NADH 2.5ATP 108ATP
1FADH2 1.5ATP
Pero la activacin de palmitato a palmitoil-CoA consume dos enlaces ricos en energa equivalentes a
2ATP.
Balance final de la oxidacin completa: 106ATP

> -oxidacin: AG saturado / cadena impar.
AG de cadena impar penltima vuelta 5AG
2C (Acetil-CoA) + 3C (Propionil-CoA)
El propionil-CoA sufre una carboxilacin para acabar dando succinil-CoA que ingresa en el ciclo de Krebs.

> -oxidacin: AG insaturados.
Se necesitan hasta 2 enzimas adicionales (isomerasa y reductasa) por la presencia de los dobles enlaces
cis.
Monoinsaturado: enoil-CoA isomerasa (conversin de un enlace cis en trans)
Poliinsaturado: 2,4-dienoil-CoA reductasa + enoil-CoA isomerasa
El compuesto cis- acil-CoA no es sustrato de la enoil-CoA hidratasa y por ello es necesaria una nueva
enzima: la enoil-CoA isomerasa que convierte el enlace cis en trans. Si hay ms de un doble enlace para
reducir el doble enlace hace falta la otra nzima.

> -oxidacin en peroxisomas.
Difiere de la mitocondrial en la deshidrogenacin inicial. En plantas los peroxisomas son el lugar principal
donde ocurre la -oxidacin mitocondrial. En animales sirve para acortar los AG de cadena muy larga
(>22C) para facilitar su posterior -oxidacin mitocondrial.
Acil-CoA + O2 Trans--enoil-CoA + H2O2
Diferencias:
- El perxido de H se convierte en H2O y O2 por lo que no hay transferencia de ATP.
- Transporte a la mitocondria para la respiracin y el ciclo de Krebs debido a que son orgnulos
diferentes.

> -oxidacin de AG.
Es la oxidacin de AG ramificados y ocurre en peroxisomas. La oxidacin inicial se produce en un C

. La
alteracin de esta ruta produce la enfermedad de Retsum.

> -oxidacin de AG.
Ocurre en el RER de clulas animales. Comienza en el C

. Tiene importancia cuando la -oxidacin est

afectada.

> Cuerpos cetnicos.
No son AG y se fabrican en el hgado. Se producen a partir del Acetil-CoA de la degradacin de AG.
Son tres: acetona, acetoacetato y D--hidroxibutirato.
Los dos ltimos sirven como molculas de combustible en tejidos extrahepticos a travs de la oxidacin
a acetil-CoA y entrada en el ciclo de Krebs.
La sobreproduccin de cuerpos cetnicos en la diabetes incontrolada o en la reduccin drstica de
caloras puede provocar acidosis o cetosis.
Cetognesis. (sntesis)
Ocurre en las mitocondrias hepticas. El hgado los fabrica pero no los puede consumir.
Cuando se produce una acumulacin de acetil-CoA (inanicin o diabetes) la tiolasa cataliza la
condensacin de dos molculas de acetil-CoA a acetoacetil-CoA, precursor de los tres cuerpos cetnicos
por deshidrogenacin. El compuesto de 6tomos de C -hidroxi--metilglutaril-CoA(HMG-CoA) es
tambin un intermediario de la biosntesis de esteroles, pero la enzima que forma HMG-CoA es citoslica.
Cetolisis. (degradacin)

Por qu se forman los cuerpos cetnicos?
1[Oxaa] debido a la ausencia de glucosa + 1gluconeognesis (estamos empleando el Oxaa para fabricar
glucosa) + 1[Acetil-CoA] debido a1[AG] debido a 1lpidos = desborde del ciclo de krebs (porque no
hay Oxaa suficiente) = CETOGNESIS

> Ayuno & diabetes.
La cetosis aumenta en el ayuno: 1[KBsangre]
Cetosis diabtica: gran produccin de KB porque no se puede usar la glucosa 1pHsangre lesiona
tejidos coma diabtico

[1] Es un alcohol zwitternico porque tiene un tomo con carga + y otro con carga
(COO
-
).
[2] Sin enlaces dobles o triples.



Tema 16. Sntesis de cidos grasos y derivados. Regulacin
del metabolismo de cidos grasos.

Tema 16: Sntesis de cidos grasos y
derivados.
Regulacin del metabolismo de cidos
grasos.

> Comparacin entre sntesis y degradacin de AG.
SNTESIS DEGRADACIN
Citosol
Intermediarios unidos a ACP (Acyl Carrier
Protein)
Enzimas unidos formando el complejo
Mitocondrias
Intermediarios unidos a CoA
Enzimas sueltos
> Biosntesis de AG.

Cules son las fuentes de Acetil-CoA y NADPH para la biosntesis de AG?
Fuentes de NADPH en una clula: RPF, enzima mlico de la lanzadera, fase luminosa de la fotosntesis.
Fuentes de Acetil-CoA en una clula: degradacin de azcares, degradacin AG,
> Transporte del acetil-CoA al citosol: la lanzadera citrato.
El acetil-CoA sale camuflado en forma de citrato y en el citosol sufre la accin de la ATP citrato liasa.



> Sntesis de AG: formacin del maloil-CoA.
Reaccin de no-equilibrio: principal punto de control de la ruta de biosntesis de AG.
La reaccin que cataliza esta enzima tiene lugar en dos etapas:
- Actividad biotina carboxilasa.
- Actividad transcarboxilasa.
Para que est activa debe estar polimerizada.
> Complejo AGsintasa.
En todos los organismos las cadenas carbonadas largas de los AG se forman mediante una secuencia
repetida de reacciones con cuatro etapas, catalizadas por la cido grado sintasa. Es diferente
dependiendo del organismo:
FAS I (vertebrados y hongos): consta de 1 cadena polipeptdica funcional.
FAS II (plantas y bacterias): consta de 2 cadenas polipetdicas funcionales.
La AGsintasa (FAS) tipo 1:
KS: -cetoacil-ACP sintasa; MAT: malonil/acetil-CoA-ACP transferasa; DH: -hidroxiacil-ACP
deshidratasa; ER: enoil-ACP reductasa; KR: -cetoacil-ACP
reductasa; TE: tioesterasa; ACP: Acyl Carrier Protein (no enzima!)
Los intermediarios en la sntesis de AG estn unidos a una protena transportadora de grupos acilos.
Tiene el CoA tambin.
> Biosntesis de AG.
1C y 2 Formacin de acetil-ACP y malonil-ACP. Lo cataliza la enzima MAT que forma parte del
complejo de la AG sintasa.
11ELONGACIN11
3 Condensacin. Catalizada por KS. Se forma acetoacetilo-ACP.
C4 Reduccin. El agente reductor es el NADPH. Catalizada por KR.
5C Deshidratacin. Catalizada por DH.
6 Reduccin.

> Balance de sntesis de palmitato.
Acetil-CoA + 7Malonil-CoA + 14NADPH + 14H
+
Palmitato + 14NADP
+
+ 7CO2 + 8CoA~SH + 6H2O
7Acetil-CoA + 7CO2 + 7ATP 7Malonil-CoA + 7ADP + 7Pi
Final:
8Acetil-CoA + 7ATP + 14NADPH + 14H
+
1Palmitato (16C) + 14NADP
+
+ 8CoA~SH + 6H2O + 7ADP +
7Pi

> Triclosn: potente agente antibacteriano
Inhibe la enoil-ACP reductasa y por tanto interfiere en el metabolismo lipdico. Uso con moderacin
porque se seleccionaran las bacterias resistentes.
> Regulacin alostrica/hormonal/conversin molecular covalente (CMC) de la sntesis de AG: la acetil-
CoA carboxilasa.
Hormonal: glucagn & adrenalina & insulina.
Conversin molecular covalente (CMC): fosforilacin / defosforilacin
Alostrico: citrato & malonil-CoA & palmitato-CoA
El principal punto de regulacin es la acetil-CoA carboxilasa que cataliza la formacin de malonil-CoA. La
regulacin se hace a tres niveles: alostrico, conversin molecular covalente (CMC) y hormonal.
1[Acetil-CoA] & 1[ATP]mitocondrial
1
Transporte del citrato al citosol (acetil-CoA)
1
El citrato citoslico activa la acetil-CoA carboxilasa y promueve el acetil-CoA para la sntesis de AG
El acetil-CoA es un feedback porque inhibe la ruta. Si hay mucho citrato en el citosol (lanzadera citrato) es
indicador de que hay mucho acetil-CoA por eso el citrato activa la ruta. La insulina es una hormona
anabolizante que por lo general favorece la biosntesis mientras que glucagn&adrenalina la inhiben.
La acetil-CoA carboxilasas existe en dos formas diferentes: fosforilada o inactiva / desfosforilada o activa.
La forma ms activa es la enzima polimerizada (visible al ME).
La fosforilacin la hace una kinasa dependiente de AMP[1], la AMPK, que es activada
por glucagn y adrenalina.
La desfosforilacin la hace una protenfosfatasa (protenfosfatasa 2A) que es activada por la insulina.
Poca energa 1AMP promovemos procesos catablicos
Mucha energa 1AMP promovemos procesos anablicos
El citrato facilita la polimerizacin. El 1[palmatoil-CoA] inhibe la sntesis de AG. La coordinacin de la
sntesis y degradacin de AG evitando que los AG entren en la mitocondria tiene lugar mediante el
malonil-CoA que inhibe a la CAT (carnitine acetil transferasa) y a la -oxidacin. La CAT impide la
entrada del acetil-CoA en la mitocondria, por eso inhibe la -oxidacin. Por eso si se lleva a cabo la
biosntesis de AG, habr una concentracin de malonil-CoA suficiente para inhibir la -oxidacin.

> Sntesis de AG: elongacin e insaturacin.
Mediante enzimas situadas en la mitocondria y en la membrana del REL se cataliza la elongacin
(donante de C es el malonil-CoA) e insaturacin de AG: elongasas y desaturasas.
Nuestra especie no puede elongar ms de 9C pero el linoleato y otro si. AG esenciales que fabrican las
plantas. A partir del linoleico fabricamos el cido araquidnico que es un AG poliinsaturado.
Los AG que no podemos sintetizar son los llamados esenciales y tienen que ser ingeridos por la dieta.
Estos a su vez son necesarios para la sntesis de otros. Por ejemplo el cido araquidnico es precursor
de leucotrienos, prostaglandinas, tromboxanos, prostaciclinas Son eicosanoides (de 20C) y hormonas
locales que regulan el dolor, inflamacin, flujo sanguneo...
Aspirina e ibuprofeno inhiben la ciclooxigenasa (COX) o prostaglandinsintasa y por lo tanto la sntesis de
prostaglandinas.




[1] No confundir con la PK1 que es dependiente de AMP cclico.


Tema 17. Metabolismo de triacilglicridos y su regulacin.

Tema 17: Metabolismo de
triacilglicridos (TAG) y su regulacin.

> Va exgena de transporte de lpidos en sangre: degradacin en la mucosa intestinal.
Los cidos grasos de los TAG proporcionan una fraccin importante de la energa oxidativa en los
animales. Los TAG ingeridos con la dieta se emulsionan en el intestino delgado con las sales biliares,
son hidrolizados por las lipasas pancreticas intestinales, absorbidos por las clulas epiteliales del
intestino, reconvertidos en TAG y a continuacin incorporados a los quilomicrones por combinacin con
apolipoprotenas especficas (resntesis). Los quilomicrones suministran TAG a los tejidos, donde la
lipoprotena lipasa libera los cidos grasos para que entren en las clulas.
AG se degradan en el intestino se absorben se resintetizan TAG + otros lpidos
+prots quilomicrones linfa sangre tejidos
> Degradacin TAG en tejido adiposo.
Los TAG almacenados en el tejido adiposo se movilizan por accin de una triacilglicerol lipasa sensible a
hormonas dando lugar a glicerol y AG.
El glicerol heptico puede seguir dos vas principales:
- Integrarse en la gluclisis y formar piruvato (gluclisis)
- Integrarse en la RPF y formar glucosa.
- Tambin se puede utilizar para resintetizar TAG.
Los AG liberados se unen a la albmina srica y son transportados a travs de la sangre al corazn,
msculo esqueltico y otros tejidos que utilizan los AG como combustible, es decir, se oxidan en otros
tejidos que no es el hgado. Una vez en el interior de las clulas, los AG se activan en la membrana
mitocondrial externa por conversin a tiosteres acil graso-CoA. Los acil graso-CoA que se han de oxidar
entran en la mitocondria en tres pasos por la va de la lanzadera de carnitina.
> PKA & TAGlipasa & Perilipina.
La movilizacin de los TAG se inicia por la accin del glucagn y la adrenalina. La proten kinasa
A fosforila a triacilglicerol lipasa o lipasa sensible a hormonas activndola. El TAG se transforma en
diacilglicerol que pasa a la sangre.
La perilipina es una protena fundamental en la degradacin de TAG. En el adipocito los granos de TAG
estn rodeados de perilipina, evitando que la lipasa los degrade pero cuando llega la seal hormonal la
protenkinasa A tambin fosforila la perilipina permitiendo el acceso de la lipasa a las gotas de grasa.
> Biosntesis de TAG y lpidos de membrana.
Para sintetizar los TAG y los PL (fosfolpidos) se parte de un precursor comn: el fosfatidato. Este se
sintetiza a partir del glicerol3P que se esterifica con un AG activado (en el carbono 1) dando lugar
al lisofosfatidato que se esterifica en el carbono 2 con otro AG activado formando un diacilglicerol
llamado fosfatidato. La enzima que cataliza las esterificaciones es la glicerolfosfato aciltransferasa.
Glicerol3P + AGactivado (en C1) lisofosfatidato + AGactivado (en C2) fosfatidato (diacilglicrido)
> Gliceroneognesis.



Glyceroneogenesis is de novo synthesis of glyceride-glycerol from precursors other
than glycerol or glucose. Gnesis de glycerol 3P a partir de piruvato.
> Sntesis de TAG.
El fosfatidato est formado por dos steres de AG por lo que para formar TAG hay que retirar el grupo
fosfato y esterificarse una vez ms. El fosfato es retirado por la cido fosfatdico fosfatasa y despus
una aciltransferasa aade otro AG.
En mamferos, durante la inanicin, un total del 75% de los TAG se degradan y se vuelven a sintetizar, es
el llamado ciclo del triacilglicerol en el que interviene el tejido adiposo, el heptico y el sanguneo. Es
para que el hgado ahorre.
En el tejido adiposo puede tener lugar una gliceroneognesis o gluconeognesis parcial desde piruvato a
glicerol3P, necesario para la sntesis de TAG.

> Sntesis de fosfolpidos.
Un fosfolpido es una molcula formada por glicerol, un AG y un grupo cabeza (etanolamina, colina,
serina).
Tienen como precursor el fosfatidato. La molcula precursora de todos los fosfolpidos (cardiolipina,
fosfatidil glicerol, fosfatidilserina) es el CDP-diacilglicerol que se forma a partir del fosfatidato cuando
reacciona con CTP.

> Sntesis de TAG: ingesta.
Al comer azcar se produce una descarga de insulina (hormona anabolizante) que activa la conversin de
azcar en grasa.


Tema 18. Metabolismo de lpidos complejos. Esfingolpidos,
terpenos y esteroides.

Tema 18: Metabolismo de lpidos
complejos.
Esfingolpidos, terpenos y esteroides.

> Clasificacin.





> Glicerollpidos y esfingolpidos.



> Sntesis de esfingolpidos.
Se sintetizan a partir de palmitoil-CoA y serina que forman la unidad bsica o ceramida. A partir de la
ceramida se forman los ganglisidos, cerebrsidos, globsidos
Existen muchas enfermedades ligadas a defectos en la degradacin de esfingolpidos, como la
enfermedad de Tay-Sachs que supone una incapacidad para degradar ganglisidos debido a un defecto
en N-acetil.hexosaminidasa por lo que los lisosomas de las neuronas se inchan.


Tema 19. Metabolismo del colesterol.

Tema 19: Metabolismo del colesterol.

> Estructura.

Fuentes de colesterol:
Va exgena: absorcin intestinal del colesterol y AG de la dieta.
Va endgena: sntesis a partir de su precursor el acetato en su forma activada (acetil-CoA).
El colesterol es un esteroide.













> Funciones.
Adems de aportar dureza a las membranas celulares, da lugar a las hormonas estereoideas, sales
biliares y vitamina D. Por lo tanto, desde el punto de vista bioqumico no es una grasa.
- Componente membranas celulares
- Precursor de: hormonas esteroideas, sales biliares, vitamina D.

> Bioqumica popular.
El colesterol no es una grasa, es un esteroide.
Hacer ejercicio no reduce el colesterol porque no es una molcula combustible. Incrementa las HDL que
retiran el colesterol de la sangre y en el hgado es convertido en sales biliares que se eliminan del cuerpo.
No hay tipos de colesterol (bueno&malo) sino que se refiere a la lipoprotena en la que est el colesterol.

> Sntesis de colesterol.
En 3 etapas:




1. Sntesis del isopentenilpirofosfato (unidad de isopreno activado) a partir de Acetil-CoA. Citosol.
Se condensan 2Acetil-CoA para formar acetoacetil-CoA gracias a la enzima tiolasa. El acetoacetil-CoA se
condensa con Acetil-CoA y formar HMG-CoA mediante la HMG-CoA sintasa.
El HMG-CoA puede seguir dos caminos:
- Formacin de cuerpos cetnicos por la HMG-CoA liasa.
- Formacin de mevalonato por la HMG-CoA reductasa usando NADPH. Esta reaccin es el principal
punto de control de la sntesis de colesterol. Muchos tratamientos para reducir el colesterol inciden en
esta enzima.
El mevalonato se convierte en fosfomevalonato al cual se le aade otro grupo fosfato obteniendo
pirofosfomevalonato que se convierte eniPPP (isopentil pirofosfato) que es precursor de sustancias muy
importantes en los seres vivos como el caucho, la cadena fitol de la clorofila, ubiquinona, vitaminas A, E y
K, carotenoides, hormona juvenil de los insectos
En la sntesis de isopentenilpirofosfato se consumen 3ATP y se libera 1CO2. Esta molcula se isomeriza y
da isopentilpirfosfato.

2. Condensacin de 6molculas de isopentilpirofosfato para formar el escualeno. RE.
Se forma una molcula de 30 carbonos que se llama escualeno. La enzima es la escualeno sintasa.

3. El esculaeno se cicla y se convierte en colesterol. RE.
Son muchas reacciones.
> ster de colesterol.
Muchas veces el colesterol se esterifica con un AG dando lugar a steres de colesterol que son las
molculas ms hidrofbicas que existen.

> Regulacin de la sntesis de colesterol.
Resumen de la biosntesis del colesterol:
Acetato Intermediariso isoprenoides (Mevalonato Isopreno
activado) Escualeno Colesterol





La regulacin de la biosntesis del colesterol equilibra la sntesis con la ingestin. El glucagn promueve la fosforilacin
(inactivacin) de la HMG-CoA reductasa; la insulina promueve la desfosforilacin (activacin). X representa metabolitos
sin identificar del colesterol que estimulan la protelisis de la HMG-CoA reductasa.







La regulacin se realiza a nivel de la HMG-CoA reductasa:
1) A nivel de la transcripcin del gen de la HMG-CoA reductasa: el factor SREBP es el que controla su
transcripcin.
El SREBP (sterol regulatory element binding protein) tiene 3 dominios (uno transmembrana en el RE, un
de unin con el DNA que activa la transcripcin y un dominio regulado unido a la protena SCAP (SREBP
cleavage activating protein).
Cuando bajan los niveles de colesterol intracelulares, SCAP y SREBP migran en vesculas al aparato de
Golgi, all actan sobre ellos las proteasas Su activacin libera el dominio de unin al DNA que va al
ncleo donde se une al SRE y activa la transcripcin del gen de la HMG-CoA reductasa.
El SREBP est en el RE para que no se sintetice continuamente colesterol.
El viaje SREBP:
1esteroles: secuestro del TrF; SREBP-SCAP-INSIG en RE.
1esteroles: SREBP-SCAP migra al AG y SREBP migra al ncleo
2) A nivel de la traduccin.
La velocidad de traduccin se inhibe por metabolitos derivados del mevalonato y por colesterol de la
dieta. Si tenemos colesterol de la dieta no necesitamos sintetizarlo.
3) A nivel de la degradacin.
La elevacin de los niveles de colesterol provoca que la HMG-CoA reductasa sea ms susceptible a la
protelisis.
4)A nivel de la actividad enzimtica: alostrica, conversin molecular covalente (fosfo/defosforilacin),
hormonal, inhibicin competitiva.
La insulina (hormona anabolizante) activa la sntesis de colesterol activando la desfosforilacin, es decir,
la HMG-CoA reductasa fosfatasas. Mientras que el glucagn activa la HMG-CoA reductasa kinasa. Estas
enzimas tambin estn reguladas por la AMPK (kinasa dependiente de AMP) que a su vez est regulada
por homonas.
El colesterol intracelular:
Estimula la degradacin del HMG-CoA reductasa
Se almacena en forma de ster de colesterol.
Inhibe la captacin de colesterol externo, es decir, la endocitosis mediada por receptor. J



> Colesterol: transporte en sangre.
El colesterol se transporta en el plasma predominante como steres del colesterol asociados a
las lipoprotenas.
El colesterol de la dieta se transporta desde el intestino delgado al hgado dentro de losquilomicrones.
El colesterol sintetizado por el hgado, as como tambin el colesterol de la dieta que se encuentra en
exceso en el hgado, se transportan en el suero dentro de las LDLs. El hgado sintetiza VLDLs y stas se
convierten a LDLs por accin de la lipoprotena lipasa asociada con las clulas endoteliales.
El colesterol que se encuentra en membranas de las clulas puede ser extrado por las HDLs por la
enzima LCAT asociada al HDL. El colesterol adquirido desde los tejidos perifricos por la HDLs puede
entonces transferirse a las VLDLs y a las LDLs por accin de la protena de transferencia de esteres de
colesterol (apo-D) que est asociada con las HDLs.

El transporte reverso del colesterol permite que el colesterol perifrico sea devuelto al hgado por las
HDLs.
En ltima instancia, el colesterol se excreta en la bilis como colesterol libre o como sales de biliares
despus de la conversin a cidos biliares en el hgado.

> Autorregulacin del metabolismo del colesterol.
La captacin de colesterol tiene lugar mediante endocitosis mediada por receptor. Las LDL llegan a su
receptor, se internalizan, forman un endosoma y se fusiona con un lisosoma. El receptor se recicla en la
membrana. El contenido de las lipoprotenas se degrada a aa y los lpidos y AG a colesterol.
Cuando en la clula tenemos un exceso de colesterol pueden tener lugar 4 procesos:
Inhibicin de la HMG-CoA reductasa (inhibicin de la sntesis endgena del colesterol).
Inhibicin de la transcripcin del gen que codifica para el receptor de las LDL, es decir, que capta menos
colesterol y hay ms probabilidad de que haya taponamientos.
Estimulacin del almacn de colesterol convirtindose ste en steres de colesterol mediante ACAT
(gotculas de colesterol).

> Riesgos del colesterol en sangre.
Por qu las HDL llevan el colesterol bueno?
Las HDL captan el colesterol de los quilomicrones y las VLDL residuales, lo esterifican y lo retornan al
hgado.
Las HDL llevan colesterol a tejidos esteroidognicos (cpsulas suprarrenales)
Las HDL pueden captar colesterol de los tejidos y retornarlo al hgado para su eliminacin.

> HDL y el transporte inverso de colesterol.
Proceso por el cual el exceso de colesterol en los tejidos perifricos es retornado al hgado para su
conversin y excrecin. Implica a las HDL.
> Hipercolesterolemia familiar.
Enfermedad gentica caracterizada por 1niveles de LDL-C en sangre que provoca xantomas y
enfermedades cardiacas. Est mutado el gen que codifica para el receptor de las LDL. Tratamiento:
- homocigotos: transplante heptico
- heterocigotos y otros enfermos con1niveles de colesterol:
- dieta 1colesterol
- inhibir la reabsorcin de sales biliares
- sntesis de novo de C
Las estatinas son inhibidores competitivos de la HMG-CoA reductasa (es una forma de controlar el
colesterol del interior).
> Sntesis derivados del colesterol.




Tema 20. Metabolismo de aa y protenas.
Tema 20: Metabolismo de aminocidos
y protenas.
Digestin de protenas y transporte de aa. Recambio y degradacin intracelular
de prots.


> Panormica del catabolismo de aminocidos.
Los aa tienen dos orgenes: dieta & protenas intracelulares que se degradan.
En el catabolismo hay dos elementos de los aa a considerar:
E El destino del esqueleto carbonado, que se convertir en un cetocido, entrando en el ciclo de Krebs
y oxidndose para producir ATP o en oxalacetato para formar glucosa.
E El destino del grupo amino, que puede dar lugar a compuestos nitrogenados (biosntesis aa,
nucletidos o aminas biolgicas) o excretarse mediante su conversin en el ciclo de la urea.



> Digestin de protenas.
La digestin de las prots comienza en el estmago donde las clulas de la mucosa gstrica
segregan gastrina que estimula la produccin de HCl ypepsingeno.
Debido al pH cido del estmago, el pepsingeno se convierte en pepsina y las prots se desnaturalizan
(autodigestin). La pepsina rompe las prots en pptidos ms pequeos, es decir, lleva a cabo una primera
hidrlisis de las prots.
Esto pasa al intestino delgado donde la secretina estimula la produccin de bicarbonato que neutraliza la
acidez, es decir, en el intestino delgado el pH es bsico (alcalino) para la correcta actuacin de
la colecistoquina (hormona) que estimula las clulas del pncreas a producir zimgenoscomo
tripsingeno, quimotripsingeno, procarboxipepsidasas A y B y proelastasas.
Los zimgenos son los precursores inactivos de las enzimas digestivas e impiden la destruccin de las
clulas intestinales por autodigestin.
Las carboxipeptidasas cortan por el extremo C terminal; el resto de los zimgenos por dentro de la prot.
En la membrana de la clula del epitelio intestinal estn las amilopeptidasas que cortan por el grupo
amino terminal.
As los aa resultantes pasan a la sangre por lo que son distribuidos a los tejidos y captados por las
clulas.


> Degradacin intracelular de protenas.
En las clulas ocurre un recambio (turnover) proteico continuo. Unas prots son muy estables y otras muy
inestables. El recambio es necesario por 3 razones:
Para eliminar las prots reguladoras pues son encargadas de un estmulo.
En prots defectuosas, por traduccin o plegamiento.
Prots daadas por agentes oxidantes.
Las prots tienen una seal dada por determinados aa del amino terminal la cual determina la vida media
de una prot.
La ubiquitina (Ub) es una prot pequea que marca las prots destinadas a degradarse. Est presente en
todas las clulas eucariotas y est muy conservada en la evolucin. Se une a la prot que quiere marcar, a
un resto de lisina a travs de un enlace isopeptdico (grupo amino que participa es del carbono psilon).
Enlace isopeptdico: se unen la Gly del extremo C-T de la Ub y el grupo del E-amino de Lys de la prot que
va a ser degradada.
> Ubiquitinacin.
Participan 3 enzimas: E1, E2 y Enzima ligasa Ub-prot.

1. Adenilacin (se libera PPi). Catalizada por el enzima activador de la Ub y que tambin cataliza el
siguiente paso.
2. Transferencia de un grupo SH de una Cys de E1.
3. Transferencia a un grupo SH de enzima conjungador de Ub. La Ub se transfiere de E1 a E2.
4. Transferencia de la Ub a una Lys de la protena diana. Enzima ligasa Ub-prot. Unin de la Ub a la
prot.
Una prot diana puede estar pluriubiquitinada.

El proteasoma es un complejo multiproteico con actividad proteoltica, se llama 26S y
tiene dos partes:
- Proteasoma 20S, la unidad cataltica con forma cilndrica.
- Proteasoma 19S, la unidad reguladora que reconoce las prots ubiquitinadas controlando su acceso a la
unidad 20S.
Las protenas ubiquitinadas o multiubiquitinadas se introducen en el proteasoma, dentro del cual la
actividad cataltica rompe la prot en pptidos. La ubiquitina liberada puede reutilizarse y los pptidos
rompen en aa.
La ubiquitina no se destruye a su paso por el proteasoma, se reutiliza.

Procesos regulados por la degradacin de protenas:
Transcripcin de genes
Progresin (avance) del ciclo celular
Formacin de orgnulos
Ritmos circadianos (floracin, despertarse) o ciclos biolgicos
Respuesta inflamatoria
Supresin de tumores
Metabolismo del colesterol

Procesamiento de antgenos


Tema 21. Metabolismo de aa
Tema 21: Metabolismo de aminocidos.
Rutas generales de degradacin y biosntesis. La transdesaminacin.
> Catabolismo de aa: destino del grupo aa y del esqueleto carbonado.


> La transaminacin.
Un aa se transforma en un cetocido y un cetocido en un aa. Las reacciones de transaminacin
son fundamentales en el metabolismo de aa.
Son cercanas al equilibrio. Hay dos transaminasas muy importantes:
E GOT o aspartato aminotransferasa, que cataliza:
E GPT o alanina aminotransferasa, que cataliza:
No debe haber transaminasas en sangre; si las hay es indicador de lesin heptica porque el
tejido muere y las libera.
Es un mecanismo del tipo bimolecular ping pong porque en la primera reaccin se transfiere el
grupo amino al coenzima y el aa se convierte en un cetocido y el coenzima en PLP (piridoxal
fosfato). El amino es transferido al cetocido para formar otro aa.

> Desaminacin oxidativa.
Es la prdida del grupo amino. La ms importante es catalizada por la glutamato deshidrogenasa
(GDH). El glutamato se desamina reaccionando con NAD
+
o NADP
+
formando NADH+H
+
o
NADPH+H
+
y liberando NH4
+
y cetoglutarato. El in entra en el ciclo de la urea.
Es muy importante porque en el hgado esta reaccin est acoplada a la transaminacin. La
combinacin de la transaminacin y desaminacin nos permite obtener el N para expulasarlo. Se
denomina transdesaminacin.


Otros sistemas de desaminacin menos importantes:
- Sistemas catalizados por la L y D-aa oxidasas.
- Serina deshidratasa.
- Treonina deshidratasa.
> Degradacin de aa.
Todos los esqueletos carbonados se convierten en uno de los 7 metabolitos siguientes:
Piruvato
Acetil-CoA
Acetoacetato
-cetoglutarato
Succinil-CoA
Fumarato
Oxalacetato
Slo Leu y Lys son exclusivamente cetognicos.
Trp, Phe, Tyr, Thr y Ile son cetognicos y glucognicos, es decir, se pueden convertir en
cuerpos cetnicos o en glucosa ya que un mismo metabolito se puede convertir en diferentes
intermediarios.



> Transtornos genticos del catabolismo de aa.

A Garrod (1902) descubri que la alcaptonuria es una enfermedad hereditaria que se debe a la
ausencia de una enzima. Fue el primero en establecer la correlacin entre enfermedad
hereditaria y defecto enzimtico.

Tema 22. Metabolismo del amonio. Ciclo de la urea.
Tema 22: Metabolismo del amonio. El
ciclo de la
Urea.
> Clasificacin de la excrecin de animales.
Amonotlicos
Ureotlicos
Uricotlicos


> Eliminacin del nitrgeno procedente de los aa.
En mamferos la eliminacin del grupo amino ocurre principalmente en el hgado. Combinacin de la
transaminacin con la desaminacin oxidativa: la transdesaminacin.


El grupo amino del aa acaba libre para integrarse en el ciclo de la Urea.
SDH (serina deshidratasa): Piruvato + NH4
+

TDH (treonina deshidratasa): cetobutirato + NH4
+


> Transporte de NH
4
+
al hgado.
Gln: El NH4
+
se forma en muchos tejidos pero es txico por lo que se transporta en sangre fabricando
glutamina gracias a la glutamina sintetasa. La glutamina sale a la sangre y va al hgado donde sufre la
accin de la glutaminasa que la convierte en cido glutmico y NH4
+
, que va al ciclo de la Urea. El
glutamato se desamina originando otro NH4
+
.
Otros tejidos pueden degradar aa pero no eliminar el NH4
+
que se genera.

Ala: En el msculo el transporte se hace mediante la alanina en situaciones de ayuno prolongado. La
enzima es la alanina transferasa. La alanina va al hgado donde tiene lugar la reaccin contraria
formndose tambin piruvato que est destinado a la gluconeognesis. La glucosa resultante vuelve al
msculo donde se transforma en piruvato y es utilizado para la formacin de ms alanina. Este es el ciclo
alanina-glucosa.
La alanina acta como transportador de amonaco y del esqueleto carbonado del piruvato desde el
msculo esqueltico al hgado. El amonaco se excreta y el piruvato se utiliza para producir glucosa, que
vuelve al msculo.

> Ciclo de la Urea.
Ocurre en las mitocondrias y citosol de las clulas hepticas (hgado). Fue descubierto por Krebs. La urea
es una molcula muy pequea enriquecida en Nitrgeno. No es txica y es muy soluble por lo que se
puede eliminar en la orina.
Este ciclo est compartimentalizado: Se inicia en la mitocondria y otra parte es en el citoplasma.
1) Carbamil P sintetasa 1.
2) Ornitina transcarbamilasa
3) Arginina succinato sintetasa
4) Argininsuccinasa
5) Arginasa
Las fuentes de nitrgeno para el ciclo son: alanina y glutamina procedente del msculo.



> Balance del ciclo de la Urea.
NH3 + HCO3
-
+ H2O + aspartato + 3ATP urea + fumarato + 2ADP + 2Pi + AMP + 2PPi


> Regulacin del ciclo de la Urea.
1velocidad de sntesis: 1traduccin & 1genes
Activacin de carbamoilP sintetasa por N-acetilglutamato: Si hay 1aa &
transaminaciones 1[glutamato] N-acetilglutamato reacciona con glutamato activacin cabamoilP
sintetasa
Altos niveles de glutamato son indicativos de que hay muchos aa.
Este ciclo tiene que aumentar su velocidad cuando estamos en una situacin de ingesta elevada de prots
o ayuno prolongado (degradacin de prot muscular), lo que incrementa la concentracin de NH3. Aumenta
as la velocidad de sntesis de los enzimas del Ciclo de la Urea que es de regulacin lenta.
Existe otro sistema ms inmediato y de carcter alostrico: la activacin de carbamoilfosfato sintetasa
(primera enzima del Ciclo de la Urea). Esta activacin se realiza mediante la sntesis del N-acetil-
glutamato, activador alostrico de la carbamoilfosfato sintetasa. Se forma a partir de glutamato y Acetil-
CoA. Los niveles de glutamato se incrementan en el catabolismoi de aa por lo que se activa la
carbamoilfosfato sintetasa.

> Conexin del ciclo de la Urea y el ciclo de Krebs: la conexin aspartato-arginosuccinato.
El ciclo de la urea es en el citosol y en la mitocondria mientras que el de krebs es en las mitocondrias. En
el ciclo de la Urea se forma arginina yfumarato. El fumarato vuelve al ciclo de Krebs para reciclarlo y
formar aspartato



> Conexin del ciclo de la Urea y la gluconeognesis.
El fumarato citoslico a travs de isozimas (fumarasa y malato DH) puede dar oxalacetato que es un
precursor gluconeognico para formar glucosa. Por lo tanto convertimos el esqueleto carbonado del aa en
glucosa.

> Defectos hereditarios del ciclo de la Urea.
Cuando hay defectos genticos en las enzimas del ciclo de la Urea se acumula amonio en las clulas que
es muy txico. Esto conlleva unahiperamonemia en sangre y posibles lesiones cerebrales irreversibles.
Un posible tratamiento es una dieta carente de prots pero no sera beneficioso porque los aa esenciales
son fundamentales para la supervivencia de los organismos.
Como la deficiencia ms comn es en carbamoilP sintetasa y OTS los enfermos se tratan con benzoato y
fenilacetato que bajan los niveles de NH3.


> Rutas degradativas de aa: destino del esqueleto carbonado.
El esqueleto carbonado puede oxidarse a CO2 y H2O, formar glucosa, Acetil-CoA, cuerpos cetnicos
Los aa van a confluir al Ciclo de Krebs. Algunos generan acetacetato, a partir del cual forman acetil-CoA,
que entra en el ciclo de Krebs para degradarse a CO2. Otros pueden formar directamente acetil-CoA,
piruvato


Segn que aa generan uno u otro intermediario por lo que hablamos de familias catablicas. Existen
muchas enfermedades ligadas al catabolismo de aa y mediante su estudio se identificaron los errores
congnicos del metabolismo.


Tema 23. Fijacin de nitrgeno e incorporacin en compuestos
orgnicos.
Tema 23: Fijacin de nitrgeno e
incorporacin en compuestos
orgnicos.
> Nitrgeno, amonaco y aa.
Prcticamente todos los compuestos biolgicos contienen N reducido.
Las bacterias reducen el N2 que se encuentra en la naturaleza y as pueden incorporarlo a las
estructuras. La fijacin de nitrgeno es llevada a cabo por bacterias simbiticas con leguminosas que
poseen el complejo de la nitrogenasa:
N2 NH3 Glutamato

> Reacciones de N.

Fijacin del N: N2 NH3

Nitrificacin: NH3 NO2 NO3
Desnitrificacin: NH3 ~ NO2 ~ NO3

Asimilacin: NH3 biomolculas
Descomposicin: NH3 ~ biomolculas

> Estabilidad del N2.
El triple enlace del N2 es muy estable por lo que reducirlo es complicado. Es una reaccin
termodinmicamente muy favorable pero tiene que vencer una energa de activacin muy elevada que se
puede disminuir gracias al aporte de ATP.

La sntesis de Haver es el proceso industrial de fabricacin de amonaco.

> Complejo nitrogenasa: N2 + 3H2 2NH3
La reaccin de la nitrogenasa es:
N2 + 10H
+
+ 8e
-
+ 16ATP 2NH4
+
+ 16 ADP + 16Pi + H2
El complejo de la nitrogenasa est compuesto por dos protenas:
1) La reductasa o dinitrogenasa reductasa. Es un homodmero con un centro redox del tipo 4Fe-4S que
puede ser oxidado o reducido y dos lugares de unin al ATP/ADP.
2) La nitrogenasa o dinitrogensasa. Es un tetrmero que tiene centros redox del tipo Fe-Mo.
Los electrones entran en la reductasa, pasan a la nitrogenasa donde reducen el N2 a NH3 con consumo
de ATP. La unin del ATP y su hidrlisis provocan cambios en el enzima que permiten la transferencia de
electrones de la reductasa a la nitrogenasa y al nitrgeno.
Los electrones proceden del piruvato, el cual proviene de la degradacin de azcares. Los cede de uno
en uno hasta un total de 8 a la ferredoxina que a su vez se los cede a la reductasa. La reductasa capta
16ATP y pasa los electrones a la nitrogenasa.
Las bacterias pueden estar libres o en simbiosis con leguminosas. La bacteria se beneficia obteniendo
carbohidratos de la planta y protegiendo el complejo de la dinitrogenasa. Para evitar la inactivacin del
complejo las plantas tienen una hemoglobina especial que capta el oxgeno. La planta obtiene NH3 de la
bacteria para la biosntesis de molculas.
La hidrlisis del ATP es necesaria para reducir la energa de activacin haciendo posible la reaccin en
condiciones normales de P y T. Pero la reaccin biolgica genera siempre, adems, 2 NH
3
, 1 mol de H
2
.
N2 + 8 H
+
+ 8 e- + 16 ATP + 16 H2O 2 NH3 + 16 ADP + 16 Pi + H2
> Reaccin de fijacin realizada por la nitrogenasa.
La unin del ATP y su hidrlisis provocan cambios en la conformacin de la reductasa que hacen posible
la transferencia de e- a la dinitrogenasa. 2 ATP se unen a la reductasa y se hidrolizan a la vez que 1 e-
pasa de la reductasa a dinitrogenasa.



> Ndulos fijadores de N2.
Es la leghemoglobina
La relacin de simbiosis entre bacterias fijadoras de N2 y plantas leguminosas resuelve las necesidades
energticas y la habilidad del complejo de la nitrogenasa al oxgeno.
Las plantas leguminosas proveen de reservas de glcidos e intermediarios del Ciclo de Krebs a las
bacterias y las protegen del oxgeno mediante la leghemoglobina.

> Incorporacin del in amonio (NH4
+
) en las biomolculas.
El NH4
+
se incorpora en las biomolculas que contienen N, primero en los aa Glu y Gln, despus en el
resto de compuestos nitrogenados. Las reacciones son tres:
1. Reaccin de la glutamato deshidrogenasa (GDH)
2. Reaccin de la glutamina sintetasa (GS)
3. Reaccin de la glutamato sintasa
GS & GDH estn en todos los organismos y la glutamato sintasa slo en bacterias y plantas. La glutamina
es un precursor metablico de muchas sustancias como el carbamoilP, la alanina, la glicina, la histidina,
el triptfano, la urea
> Regulacin de la GS: la glutamina como donante de grupos NH2

Cada inhibidor (productos finales del metabolismo de la Gln) inactiva radicalmente el GE.
1. Alostrico por retroinhibicin
2. Conversin Molecular Covalente mediante adenilacin (no por fosforilacin/desfosforilacin). Adicin
de un grupo adenilo o 1AMP a la enzima adeniltransferasa (AT)
La AT cataliza por un lado la adenilacin a partir de un ATP e inactive a la GS pero tambin cataliza la
reaccin contraria. Adems es una aminotransferasa.
Las protenas PII (PA o PD) regulan la actividad de la AT. Estn a su vez reguladas por la uridiltransferasa
que adiciona un UDP. Cuando se forma PA y se une al NRII se hidroliza el P y desaparece la activacin
de la transcripcin.
Una clara diferencia entre la CMC por adenilacin y la de fosfo/desfosfo es que en sta inactiva y activa la
misma enzima y otra lo hacen otras dos.
3. Expresin gnica: transcripcin & traduccin
Se hace a nivel de la expresin del gen que codifica para la GS a travs de un intensificador de la
transcripcin que active la transcripcin del gen de la GlnS, es decir, la transcripcin es activada tambin
por la proteina anterior (PA y PD).


> Biosntesis aa.
Las plantas y microorganismos son capaces de sintetizar los 20 aa que forman las prots mientras que los
mamferos slo fabrican 10/20aa y los restantes son los aa esenciales.
E El esqueleto carbonado de los aa procede de intermediarios de la gluclisis, ciclo de Krebs y RPF.
E La parte nitrogenada procede de glutamato o glutamina.

Los precursores metablicos de los aa son ribosa5P y eritrosa4P, metabolitos de la RPF. El
fosfoglicerato, PEP y el piruvato son metabolitos de la gluclisis. El oxalacetato y -cetoglutarato son
metabolitos del ciclo de Krebs.


> Esquema general y principales tipos de reacciones.
En la biosntesis de aa hay una serie de reacciones comunes:
1) Transaminacin y otros reordenamientos catalizados por enzimas que emplean el pirodoxal fosfato
(PLP).
2) Transferencia de grupos monocarbonados catalizados por enzimas que
emplean tetrahidrofolato o SAM (S-adenosilmetionina = donante universal de grupos metilos). SAM tb
es precursor del etileno (hormona responsable de la maduracin de la fruta.
3) Transferencia de grupos amino procedentes del nitrgeno del grupo amida de la glutamina.

> 6 familias de biosntesis de aa.


> Regulacin de la biosntesis de aa: inhibicin feedback.
Las rutas de biosntesis de aa estn sujetas a inhibicin alostrica por el producto final, es decir, algunos
de los productos de las rutas pueden ser activadores del enzima y a su vez ste puede estar inhibido por
otro producto. Esto es debido a la multiplicidad enzimtica o a que la primera reaccin de la ruta est
catalizada por dos o ms isoenzimas. El enzima regulador habitualmente es el primero.

> Regulacin de la biosntesis de aa: multiplicidad enzimtica.
La multiplicidad enzimtica impide que un producto final obstaculice pasos clave en una ruta metablica
cuando se necesitan otros productos de la misma va. El caso del aspartato.
> Biosntesis de biomolculas derivadas de aa.
De los aa se pueden sintetizar:


Adems de otras molculas como el glutatin, el NO, la melanina, las histaminas, la creatina, antibiticos,
esfingosina
A partir de Tyr y Phe tambin se forman sustancias como taninos, alcaloides (morfina) y los sabores de
las esencias (cianatos) de canela, nuez moscada, vainilla El triptfano es el precursor de las auxinas
(hormonas de crecimiento vegetal).

> Sntesis de aminas bigenas.
a) Dopamina, noradrenalina y adrenalina.
Son productos de la descarboxilacin, oxidacin y otras de aa.
La dopamina est relacionada con la enfermedad de Parkinson y su sobreproduccin con la
esquizofrenia.
b) GABA, serotonina e histamina.
El glutamato es el precursor del GABA y su deficiencia est relacionada con los ataques epilpticos.


> Metabolismo del grupo hemo: biosntesis.
La sntesis del grupo hemo que ocurre en la mitocondria comienza a partir del succinil-CoA y de la glicina.
Estas molculas forman el -aminovulinato que sufrir una serie de reacciones hasta llegar al grupo
hemo. Para saber de dnde vienen los tomos que lo forman se utiliza el marcaje isotpico (radioactivo
con N y C).


Transtornos congnicos da lugar a un grupo de enfermedades llamadas porfirinas.
> Degradacin del grupo hemo.
El grupo hemo se degrada a los pigmentos biliares gracias a la enzima hemooxigenasa, primero a
la biliverdina que se convierte en bilirrubinaque se une a la seroalbmina porque es muy insoluble
(como los AG) para ir por la sangre hasta el hgado. En el hgado la bilirrubina se transforma en bilirrubina
diglucornida que es secretado con la bilis.
En un hematoma los glbulos rojos se destruyen y la Hb empieza a degradarse:
- negro (liberacin de Hb)
- verde (sntesis de biliverdina)
- amarillo (bilirrubina)
Un mal funcionamiento heptico o un bloqueo en la secrecin biliar provocan que la bilirrubina del hgado
llegue a la sangre, lo que produce un color amarillo en la piel que se denomina icteria.
> Biosntesis de xido ntrico (NO).
El NO es un gas mensajero que participa en la transduccin de seales activandoa la guanilato
ciclasa que fabrica cGMP. Se forma NO a partir de la arginina por la NO sintasa.
NO 1Guanilato ciclasa (el NO la activa) 1sntesis de cGMP relajacin msculo cardiaco

Las funciones del NO son:
- Neurotransmisor
- Vasodilatador
- Coagulante sanguneo
Tiene el mismo efecto que la nitroglicerina para aliviar la angina de pecho.
La viagra (nombre comercial del sildenafil) es un frmaco que inhibe la 5fosfodiesterasa que convierte el
cGMP en GMP, es decir, es una enzima que elimina el cGMP o cAMP para que estos segundos
mensajeros dejen de actuar. Esto eleva la concentracin de cGMP e impide la relajacin muscular.


Tema 24. Metabolismo de nucletidos.
Tema 24: Metabolismo de nucletidos.
Sntesis y degradacin de cidos nucleicos.
> Funciones.
Los nucletidos tienen una amplia variedad de funciones en todas las clulas:
- Precursores de DNA & RNA
- Intermediarios biosintticos
- Componenetes de los cofactores NAD, FAD, CoA y SAM
- Transportadores de energa (ATP)
- Segundo mensajero (cAMP, cGMP)
> Estructura.



> Panormica del metabolismo de nucletidos.
Hay dos rutas metablicas que conducen a la formacin de los nucletidos:
E Rutas de novo a partir de precursores metablicos simples activados. Empieza a partir de sus precursores
metablicos: aa, ribosa 5P, CO2 y NH3
E Salvaje pathways o rutas de recuperacin en las que se recuperan las bases para sintetizar los
nucletidos.
Algunas enzimas de este metabolismo son las dianas de los tratamientos de quimioterapia (cncer).
Tanto las vas de sntesis de novo como de recuperacin de purina y de pirimidina conducen a la
produccin de nuclesido-5'-P a travs de la utilizacin de un azcar intermediario activado y de una
clase de enzimas llamadas fosforibosiltransferasas. El azcar activado que se utiliza es el 5-fosforibosil-1-
pirofosfato, PRPP. El PRPP es generado por la accin de la PRPP sintetasa y requiere de energa en
forma de ATP.
Ribosa5P + ATP PRPP + AMP
> Sntesis de novo de pirimidinas.
La sntesis de las Pirimidinas es menos compleja que la de las purinas puesto que la estructura es ms
simple. El anillo se forma a partir de glutamina, CO2 o HCO3
-
y del aspartato. La primera reaccin es la
formacin del carbamoilP mediante la carbamoilfosfato sintetasa II en el citosol. La glutamina es la que
cede el N.
Gln + HCO3
-
+ 2ATP CarbamoilP + Glu + 2ADP + Pi


El carbamoilP reacciona con el aspartato mediante la enzima aspartato
transcarbamoilasa o ATCasa formando N-carbamoil-aspartato que se convierte, por deshidratacin, en
dihidroorotato (DHO) por la dihidrooratasa que a su vez se tranforma en orotato por la DHO DH.
El azcar del nucletido proviene de la ribosa5P procedente de la RPF y reacciona con el ATP formando
5fosforribosilpirofosfato o PRPP mediante la PRPP sintetasa. El PRPP reacciona con el orotato y da lugar
al OMP o orotidilato que se descarboxila y da lugar al UMP gracias a la OMP descarboxilasa.
Para formar UTP se utilizan la nuclesido mono y difosfato kinasa (ver Interconversin de nucletidos).
Son reacciones prximas al equilibrio:


A partir del UTP se forma el CTP por la citidilato sintetasa:
Glutamina + ATP + H2O + UTP Glutamato + ADP + Pi + CTP Enzima: CTPsintetasa
Regulacin feedback de la sntesis de nucletidos de pirimidina:
Hay dos enzimas clave:
La ACTasa es inhibida por el CTP y activada por el ATP-purina. Esto es as porque la clula necesita
balancear los dos tipos de nucletidos, es decir, 1PRPP le dice a la enzima que active la ruta de
formacin de nucletidos. En ausencia de CTP funciona a pleno rendimiento.
En animales el principal punto de control es la carbamoilP sintetasa II (CPS II) que se activa por ATP y
PRPP y se inhibe por UDP u UTP.


> Sntesis de novo de purinas.
Los precursores metablicos son aspartato (N), CO2 (C), glicina o Gly (C&N), tetrahidrofolato (C)
glutamina o Gln (N). La primera reaccin es la sntesis de PRPP a partir del cual se forma PARA. El IMP
es el precursor de los nucletidos de purina (AMP y GMP).



La sntesis de AMP comienza con el IMP que se convierte en adenilosuccinato a partir de aspartato y
GTP. ste forma fumarato y AMP gracias a la adenilosuccinato liasa.
La sntesis de GMP se forma mediante la oxidacin del IMP a xantilato o XMP seguida de la
incorporacin de un grupo amino. El NAD
+
es el aceptor de hidrgeno durante la oxidacin del IMP.
Esta ruta se regula en 4 puntos:
- PRPP sintetasa. Regulacin por feedback en la que son inhibidores el AMP y el GMP.
- Glutamina PRPP aminotransferasa
- Adenilosuccinato sintetasa, inhibida por GMP
- IMP deshidrogenasa, inhibida por GMP

> Interconversin de nucletidos mono, di y triP.



> Sntesis de desoxirribonucletidos.
La enzima que reduce un ribonucletido a un desoxirribonucletido es la ribonucletido
reductasa o RNP. Los sustratos son las ribosas diP: ADP, CDP, GDP & UDP.

La reaccin que cataliza es la conversin de OH en un H. La enzima tiene dos grupos SH en el centro
activo que son los que reducen a la ribosa. Cuando se oxidan forman un puente disulfuro y para que la
enzima siga funcionando debe volver a reducirse mediante el NADPH de forma indirecta.
La tiorredoxina y la glutarredoxina son los agentes reductores primarios de RNP; el reductor final es el
NADPH.
La enzima RNP tiene dos dmeros (R1 y R2), un regulador y un cataltico. En el cataltico tiene los grupos
SH. Adems tiene una tirosina con 1e
-
desemparejado, por lo que es un radical muy reactivo. El radical se
genera por un grupo Fe-O-Fe.
Gracias a la tiorredoxina o a la glutarredoxina se transfieren e
-
desde el NADPH hacia grupos sulfhidrilo
de los centros activos de esta enzima. Un radical libre tirosilo generado por un centro de la reductasa que
contiene hierro inicia una reaccin radical sobre el azcar que da lugar a lasustitucin del OH del C2 por
un H.
Estos compuestos junto con el fluorouracilo (inhibidor de la timidilato sintasa) se utilizan como frmacos
anticancergenos.
En la parte reguladora hay dos zonas diferentes: una donde se unen el ATP y dATP (reguladores
alostricos; activador e inhibidor respectivamente) y otra que determina la especificidad de la enzima. Son
dos lugares de regulacin.
Cuando se une ATP o dATP al centro de especificidad se reduce CDP y UDP, respectivamente.
Cuando se une dTTP o dGTP se estimula la reduccindel GDP y del ADP, respectivamente.
El dATP inhibe a la ribonucletido reductasa por retroinhibicin. Adems si hay mucho ATP por la
adenilato kinasa hay mucho sustrato para fabricar, por ello slo inhibe el dATP.
Unos nucletidos activan la formacin de otros porque as la clula se asegura de que haya un balance
equitativo de los 4 nucletidos.
Los efectores alostricos no slo regulan la actividad del enzima (ATP activador y dATP inhibidor) sino
tambin su especificidad por el sustrato.
Centros reguladores de cada subunidad:
-Actividad de la enzima
-Especificidad del sustrato
Origen del dTMP (timidilato). El TMP se forma por metilacin de dUMP. Hay dos caminos para
fabricarlo:


En esta reaccin el dador tanto del grupo metileno como del in hidruro es
el metilentetrahidrofolato que se convierte en dihidrofolato. El tetrahidrofolato se regenera mediante la
reduccin del dihidrofolato por el NADPH. La dihidrofolato reductasa se inhibe por anlogos del folato.
La hidrlisis del dUTP parece un gasto innecesario, por qu las clulas no van de dUTP a dTTP
directamente? La clula no convierte el dUTP en dTTP directamente para evitar que haya elevados
niveles de dUTP y as evitar que se incorpore el uracilo al DNA ya que la DNApolimerasa no distingue entre
dTTP y dUTP.


El dihidrofolato se reduce con NADPH por la dihidrofolato reductasa (DHFR). TS y DHFR son muy
importantes porque son dianas en quimioterapia.
Inhibicin suicida. Cuando una molcula reacciona con la enzima forma un complejo covalente que
inactiva la enzima permanentemente.

> Rutas de recuperacin de purinas.
Recuperan las bases para resintetizar los nucletidos. Estn implicadas las enzimas HGPRT
(hipoxantina-guanina fosforribosiltransferasa) y la APRT (adenina fosforribosiltransferasa).
- Adenina + PRPP AMP + PPi Enzima: APRT
- Hipoxantina + PRPP IMP + PPi Enzima: HGPRT
- Guanina + PRPP GMP + PPi Enzima: HGPRT
HGPRT recupera hipoxantina y guanina, formando IMP y GMP, respectivamente. La APRT recupera
adenina para forma ATP.
La deficiencia de HGPRT causa el sndrome de Lesh-Nyham.

> Catabolismo de purinas.
Las purinas ms importantes son: AMP, IMP, XMP y GMP. En el catabolismo el AMP se puede coger dos
caminos: convertirse en IMP por la AMP desaminasa o convertirse en adenosina y sta en inosina por la
adenosina desaminasa. Los grupos amino son eliminados por el ciclo de la urea.
- GMP Guanosina Guanina Xantina
- Inosina Hipoxantina Xantina
La xantina se convierte en cido rico por la xantina oxidasa.
- La ribosa1P se convierte en ribosa5P por la fosfomutasa. La ribosa 5P se convierte en PRPP que se
utiliza en el metabolismo de aa y NT.
Reptiles, primates, aves & insectos: excretan cido rico
Otros mamferos: convierten el cido rico en alantoina.
Telesteos: convierten la alantoina en cido alantoico
Peces carilaginosos & anfibios: convierte el cido alantoico en urea
Invertebrados marinos: convierte la urea en amonaco
Ciclo de nucletidos de purina (CNP).


Las actividades de los 3 enzimas implicados en el CNP son ms elevadas que en otros tejidos.
La deficiencia en ADA (adenosina desaminasa) provoca el sndrome de la inmunodeficiencia
combinada grave (SCID) que afecta a las clulas T. Fue la primera enfermedad tratada con la terapia
gnica. Produce un incremento de los anillos de dATP que inhibe a la RR. Esto inhibe la sntesis de DNA.
Aun no se sabe por qu esta deficiencia afecta a las clulas T.
cido rico & gota. La gota es una enfermedad caracterizada por elevados niveles de cido rico en los
fluidos corporales, es decir, altos niveles de urato en sangre. Las articulaciones acumulan cristales de
urato sdico que provocan inflamacin. El tratamiento para bajar los niveles de cido rico es incidir sobre
la xantina oxidasa mediante un inhibidor suicida (alopurinol).

> Catabolismo de pirimidinas.
Se forma ribosa1P que puede seguir el camino del PRPP o entrar en las rutas catablicas.
La base nitrogenada se convierte en intermediario del metabolismo como metilmalonil-CoA (de la
degradacin de valina para dar succinil-CoA).

1) Definicin vitamina.
Molculas orgnicas necesarias en pequeas cantidades en la dieta de algunos animales.

2) Definicin hormona.
Sustancias o compuestos sintetizados en pequeas cantidades por un tejido endocrino
que se transportan por la sangre a otros tejidos en donde actan como mensajera para
regular algunas de las funciones de ese tejido u rgano.

3) Definicin gen.
Segmento del DNA (o de un cromosoma) que codifica para una o varias protenas o un
RNA. Es una unidad de transcripcin.

4) Definicin alosterismo.
Protena a la cual la unin de un ligando afecta a las propiedades de unin de otro sitio de
la protena. Afecta a esa unin porque cambia la estructura o forma. (Alo=otro;
stereo=forma)

5) Funcin NADH, AMPC, glucgeno, ARNt y FAD.
-NADH (dinucletido de nicotinamida y adenina) es la forma reducida. Es una
coenzima cuya funcin es el intercambio de electrones e hidrogeniones en la produccin
de energa.
-AMPC (adenosn monofosfato cclico) es un nucletido que funciona como segundo
mensajero de algunas hormonas que no entran en la clula (suele estar relacionado con la
activacin de protenas quinasas)
-glucgeno es un polisacrido de reserva energtica (almacenamiento) formado por
cadenas remificadas de glucosa. Es insoluble en agua. Abunda en el hgado.
-ARNt es un tipo de cido nucleico encargado de transportar los aa a los ribosomas para
incorporarlos a las futuras prots durante el proceso de sntesis proteica.
-FAD (flavn adenn dinucletido) es la forma oxidada. Es un coenzima que interviene como
dador o aceptor de electrones y protones (poder reductor) en reacciones metablicas
redox.

6) Diferencia entre desnaturalizacin y degradacin del DNA.
La desnaturalizacin del DNA es la prdida de la estructura secundaria del ADN y por lo
tanto de su funcin mientras que la degradacin es la rotura de la cadena en cidos
nucleicos.

7) Qu es una aloenzima y una isoenzima?
Las alozimas son formas alternativas de una enzima codificadas por diferentes alelos de
un mismo locus gentico mientras que isozima seran todas las enzimas con una misma
actividad en un mismo organismo con independencia de su origen.

8) Qu ocurre si aumenta o disminuye la KM?
La Constante de Michaelis-Menten (KM) es la concentracin de sustrato a la cual la mitad
de los centros activos estn ocupados, es decir, es la concentracin de S a la que V es
de Vmx. Es una medida de la afinidad por el sustrato.
>> Cuanto menor es KM, mayor es la afinidad del enzima por S.
>> Cuanto mayor es KM, menor es la afinidad del enzima por S.

9) El colesterol es una grasa?
No. Es un esteroide.

10) Definicin intrn.
Es una regin del ADN que debe ser eliminada de la transcripcin primaria de ARN que, a
diferencia de los exones, no son regiones que codifiquen para una protena.

11) Las sales biliares derivan del colesterol? Si