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Recibido: 20 de abril de 2012 Aceptado: 09 de septiembre de 2012 Abstract Microorganisms have a cosmopolitan distribution, they can survive in a wide range of conditions, including extreme environments once considered to be uninhabitable, for example cold deserts, hot springs, hypersaline and radiaoactive environments. The microbial communities inhabit this environments are called extremophiles. The aim of this work is to do a brief description of adaptations present in the extremophiles microorganisms to survive in inhospitable conditions, mentionated some extreme environments in the Earth, and the microbial diversity reported in them. Key words: extremophiles, extreme environments, prokaryote Resumen Los microorganismos tienen una distribuci on cosmopolita, son capaces de sobrevivir en un amplio intervalo de ambientes incluyendo los denominados ambientes extremos que alguna vez se consideraron inhabitados, como desiertos helados, fuentes termales, ambientes hipersalinos y radiactivos. Las comunidades microbianas que habitan en dichos ambientes se denominan extrem olas. El objetivo de este trabajo es hacer una breve descripci on de las adaptaciones que presentan los microorganismos extrem olos y que les permiten sobrevivir en condiciones inh ospitas, as como mencionar algunos de los ambientes extremos en la Tierra y la diversidad microbiana reportada en ellos. Palabras clave: extrem olos, ambientes extremos, procariontes Introducci on En la Tierra existe una gran variedad de formas de vida, entre estas se encuentran los denominados microorganismos enigm aticos, porque vistos desde un punto de vista antropoc entrico, son excepcionales por habitar en condiciones que resultan dif ciles o letales para la mayor a de los dem as organismos y por lo que se denominan extremas o de vida al l mite. Un ambiente considerado normal tiene un pH cercano a la neutralidad, una temperatuon de 1 atm. Por el contrara de 20-24o C y una presi rio, los ambientes extremos son aquellos en los que las variables sicoqu micas como temperatura, salinidad, pH o presi on, est an fuera de las condicio-

nes regulares predenidas bajo las cuales viven preferentemente la mayor parte de los organismos. Los microorganismos que habitan en los ambientes extremos se conocen como extrem olos (literalmente amante de lo extremo), estos son principalmente procariontes de los Dominios Archaea y Bacteria, aunque tambi en algunos organismos del Dominio Eucarya pueden desarrollarse en condiciones extremas. La microbiota de los ambientes extremos se clasica de acuerdo al nicho que requiere para su o ptimo crecimiento. Por ejemplo los extrem olos que est an adaptados a la vida en altas temperaturas se deolos (80nominan term olos (40-80o C) e hiperterm o 110 C), mientras que los que requieren temperaturas bajas (-5 a 5o ) para crecer y reproducirse se denominan psicr olos. Los organismos que aman las condiciones a cidas necesitan de un pH bajo y son llamados acid olos, al contrario de los que viven en un pH alto y son conocidos como alcalolos. Los bar olos son organismos que est an adaptados a vivir con altas presiones. Existen algunos organismos que pueden tolerar m as de una condici on extrema, los llamados poliextrem olos como la arquebacteria Sulfolobus acidocaldarius que se desarrolla a temperaturas superiores a los 80o C y un pH menor a 3. Los microorganismos extrem olos habitan una gran variedad de ambientes naturales como las regiones polares, zonas volc anicas, lagos salinos, salino-s odicos y las fosas marinas profundas; tambi en se desarrollan en ambientes modicados por las actividades humanas como las zonas contaminadas con residuos peligrosos y algunos euentes industriales. Qu e permite que los microorganismos extrem olos puedan vivir y desarrollarse en ambientes inh ospitos para la mayor a de los dem as organismos? La capacidad de los procariontes para soportar condiciones extremas depende de varios factores que se presentan a continuaci on. Adaptaciones a condiciones extremas. Las adaptaciones m as importantes desarrolladas por los extrem olos se reeren a las caracter sticas de su membrana celular, su sensibilidad a las sales y su capacidad para metabolizar una gran variedad de fuentes de energ a (hidr ogeno, compuestos reducidos de hierro y azufre). 1. Membrana celular Las c elulas de todos los organismos presentan una

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membrana celular o citoplasm atica (MC) cuya principal funci on es actuar como una barrera entre el citoplasma y el medio extracelular, por lo cual es esencial para conservar la integridad celular y controlar la composici on del citoplasma, manteniendo as las condiciones internas o ptimas para el metabolismo y la transducci on de energ a. Esta funci on de la MC depende de su complejidad estructural, ya que las membranas celulares usualmente son impermeables para la mayor a de los iones y solutos debido a que est an formadas por una bicapa o por una monocapa de naturaleza lip dica que forma una matriz donde est an embebidas prote nas espec cas de transporte. La composici on lip dica de las membranas celulares es muy compleja y diere entre los distintos tipos de organismos. Los l pidos de la MC en las bacterias y las c elulas eucariontes est an compuestos por dos cadenas de acyl grasos que se encuentran unidas al glicerol mediante un enlace ester. A su vez el tercer grupo hidroxil del glicerol se une a los grupos fosfato de las cabezas hidrof licas. Estos l pidos se encuentran organizados en una bicapa donde las cabezas polares se encuentran orientadas hacia las fases acuosas, mientras que las cadenas hidr ofobas se dirigen hacia el interior de la membrana (Fig. 1-a). Por el contario, la composici on lip dica de la MC en la mayor a de las arqueas que crecen en condiciones ambientales moderadas consiste de dos cadenas de tanil que se unen al glicerol o con otros alcoholes (como el nonitol) por medio de un enlace eter (Fig. 1-b). En el caso de los organismos extrem olos, estos son capaces de ajustar la composici on lip dica de su MC, as como las prote nas de membrana, en respuesta a las condiciones ambientales extremas en las cuales est an creciendo. En las arqueas extrem olas (term olas y acid olas) las cadenas de tanil de dos l pidos di- eter est an fusiopidos llamados tenadas en un n ucleo C40 . Estos l tra eter forman una monocapa, en la cual los l pidos sellan completamente la MC (Fig. 1-c). Las MC compuestas por l pidos con enlaces eter tienen una estabilidad superior en comparaci on con aquellas que poseen enlaces ester; dicha estabilidad es el resultado de una reducci on en la rotaci on de los atomos de carbono. Esta restricci on en la movilidad de la cadena hidrocarbonada tambi en puede reducir la permeabilidad de la MC en las arqueas extrem olas (Konings et al., 2002). Se ha observado que otras adaptaciones relacionadas con la MC de los extrem olos incluyen un aumento de la longi-

tud de la cadena de a cidos grasos y la presencia de una gran proporci on de l pidos saturados, lo que se traduce en una mayor integraci on de la MC con altas temperaturas. 2. Sensibilidad a las sales El cloruro de sodio (NaCl) representa una de las sales m as abundantes en los sistemas costeros y marinos. El sodio es un elemento esencial para la vida, act ua como cofactor para determinadas enzimas y es un quelante de varios ensambles macromoleculares. Sin embargo, un exceso de sodio es t oxico, por lo cual las concentraciones de este i on en las c elulas son signicativamente inferiores a las que se encuentran en el medio externo. Se ha demostrado que los microorganismos que viven en ambientes con un alto contenido de sodio pueden compensar esta diferencia osm otica mediante la acumulaci on intracelular de sustancias no t oxicas de bajo peso molecular como amino acidos libres y iones potasio. A pesar de lo anterior existe la tendencia en las c elulas para incorporar el sodio. Como respuesta a este proceso los procariontes halof licos han desarrollado tres mecanismos de resistencia para el exceso de sodio: a) Transporte activo de los iones sodio fuera de la c elula a trav es de una bomba de Na-K localizada en la MC. b) Reducci on de la permeabilidad de la MC a los iones sodio, esto lo logran gracias a la monocapa de fosfol pidos que es impermeable a los iones. c) Alta tolerancia de las enzimas celulares al exceso de sodio, como es el caso de la citocromo oxidasa (Nakamura, 1999). 3. Capacidad metab olica Los procariontes son metab olicamente vers atiles, los tipos b asicos de metabolismo energ etico y organismos representativos de cada grupo se encuentran en la Tabla 1. En primer t ermino est an los fotoaut otrofos, con las cianobacterias que utilizan agua para rees de dos fotosistemas; sin embarducir el CO2 a trav go, las bacterias fototr ocas m as primitivas que tienen un solo fotosistema (Fig. 2), emplean un donador de electrones con un potencial de o xido-reducci on m as bajo que el agua. En este caso se encuentran las bacterias sulfurosas verdes y p urpuras capaces de utilizar el H2 S, algunas de estas bacterias tambi en son capaces de crecer fotoheterotr ocamente.

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Figura 1: L pidos de la MC en bacterias y arqueas. (A) bicapa lip dica en bacterias, la cadena acil puede estar ramicada. La conexi on de la cadena acil con la cabeza hidrof lica es un ester. (B) bicapa de l pidos di eter en arqueas. La conexi on de la cadena tanil con la cabeza hidrof lica es un enlace eter. La cadena tanil contiene ramicaciones isoprenoides, algunos tetra eteres acidof licos presentan anillos ciclopentanos. (C) monoapa formando l pidos tetra eter en arqueas termoacidof licas (tomado de Konings et al., 2002) Los quimilit otrofos abarcan un grupo de procariontes sumamente diverso, capaces de producir energ a a partir de la oxidaci on de un amplio intervalo de compuestos inorg anicos. Existen microorganismos aut otrofos que asimilan el CO2 , mientras que otros son heter otrofos y requieren de carbono org anico; asimismo se ha observado procariontes que alternan entre estas dos fuentes de carbono y se les denomina mix otrofos. Los quimiolit otrofos tambi en pueden ser aerobios (respiran O2 ) o anaerobios (utilizan nitratos, sulfatos o CO2 ). Por su gran versatilidad metab olica los quimiolit otrofos desempe nan una funci on b asica en el ciclo de los nutrientes y minerales. Finalmente est an los procariontes heter otrofos que crecen a partir de fuentes org anicas de carbono, pero pueden ocasionalmente utilizar CO2 . Un grupo puede crecer con un m aximo del 30 % de CO2 , mientras on 30 % carque el grupo C1 requiere una combinaci ltimo caso se enbono org anico: 90 % CO2 , en este u cuentran las bacterias que oxidan el metano. Ambientes extremos y diversidad microbiana Los ambientes extremos incluyen n ucleos de hielo, ambientes con abundancia de hierro y azufre (g eiseres de alta temperatura, chimeneas hidrotermales, drenajes a cidos de minas), corteza terrestre profunda y ecosistemas radioactivos (Tabla 2). 1. Ambientes de baja temperatura En esta categor a se incluyen las regiones polares, cubiertas de hielo, permafrost, lagos subglaciares (Lago Vostok) y la mayor parte de los oc eanos; a menudo las temperaturas de estos ambientes son infeartida es uno de los ambienriores a -1.8o C. La Ant tes fr os m as extremos, en esta regi on algunos organismos crecen dentro de las rocas para protegerse de las inclemencias del tiempo (endol ticos). Los microorganismos que habitan en estas zonas se caracterizan por un crecimiento lento, presencia de enzimas

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Tabla 1. Clases de metabolismo energ etico microbiano (Barker Metabolismo Fuente de Fuente de Donador de energ a carbono electrones H2 O Fotoautotr ofo CO2 H2 S, S0 , Luz Fe2+ Carbono org anico

Jrgensen, 2000) Microorganismo Cianobacterias Cianobacterias, bacterias sulfurosas p urpuras y verdes (Chromatium, Chlorobium) Bacterias no sulfurosas p urpuras y verdes (Rhodosirillum, Chloroexus) Aerobios: Bacterias sulfurosas incoloras (Thiobacillus, Beggiatoa) Bacterias nitricantes (Nitrobacter) Bacterias del hidr ogeno (Hydrogenomonas) Bacterias del hierro (Ferrobacillus, Shewanella) Anaerobios: Bacterias sulfatorreductoras (Desulfovibrio spp.) Arqueas metanog enicas Bacterias sulfurosas incoloras (algunos Thiobacillus) Bacterias sulfurosas incoloras (algunos Thiobacillus) Algunas bacterias sulfatorreductoras Aerobio: Muchas bacterias Anaerobio: Bacterias reductoras de Mn o Fe Bacterias sulfatorreductoras Bacterias oxidantes del metano

Fotoheter otrofo

H2 S, S0 , FeS2 NH4+ , NO2 H2 Quimiolitoaut otrofo Oxidaci on de compuestos inorg anicos CO2 Fe2+ , Mn2+

H2 + SO2 4

Mixotrofo

CO2 o carbono org anico Carbono org anico

H2 + CO2 H2 S,S0 H2 S,S0

Quimiolitoheter otrofo H2

Heter otrofo

Oxidaci on de compuestos org anicos

Carbono org anico

Carbono org anico

Carbono1 org anico

CH4

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Tabla 2. Ambientes extremos y microorganismos extrem olos (elaborada a partir de Gleeson et al., 2007) Condici on extrema Ambiente Extrem olos comunes Baja temperatura: nieve, Glaciares, lagos polares, Arqueas, bacterias agua congelada, hielo permafrost, cimas de (incluyendo cianobacterias), monta nas algas Agua con temperatura Sistemas geot ermicos de Arqueas, bacterias elevada zonas continentales volc anicas: g eiseres, manantiales de aguas termales, fumarolas, lagos volc anicos. Sistemas geot ermicos del mar profundo: chimeneas hidrotermales asociadas a m argenes divergentes y volcanes submarinos. Aguas acidas Fuentes termales acidas, Arqueas, bacterias, algas drenajes acidos de minas, unicelulares, hongos turberas Aguas alcalinas Lagos alcalinos Arqueas, bacterias, algas unicelulares, protistas Aguas saladas Lagos y lagunas Arqueas, bacterias, algas hipersalobres, salinas unicelulares, protistas Presi on elevada Fondo oce anico, corteza Arqueas, bacterias terrestre profunda Radiaci on elevada Reactores nucleares, Bacterias formaciones naturales radioactivas

resistentes al fr o, aumento de la proporci on de a cidos grasos insaturados (y en algunas bacterias, poliinsaturados, entre 4 y 9 dobles enlaces) en los fosfol pidos de la MC para que esta mantenga su estado semiuido, evit andose su congelaci on; asimismo tienen la capacidad de formar endoesporas que les ayudan a permanecer en un estado latente cuando las condiciones son desfavorables; cuando las condiciones ambientales cambian, las endoesporas germinan y las bacterias se reproducen. Los microorganismos psicr olos pueden utilizar diferentes sustratos org anicos, principalmente carbohidratos que son fabricados por las diatomeas durante la fotos ntesis en los meses de verano; en el invierno metabolizan l pidos y prote nas que se encuentran en el detritus (Atlas y Bartha, 2002). Un ejemplo de procarionte psicr olo es la bacteria Polaromonas vacuolata que crece en las aguas heladas de la Ant artida a 4o C, mientras que un ejemplo no bacteriano muy caracter stico es el alga de las nieves (Chlamydomonas nivalis), que llega a conferir un color rojo a la nieve en algunas zonas de monta na a mitad de la estaci on estival.

2. Ambientes con temperatura elevada a) Fuentes termales de alta temperatura, son ecosistemas con formas de azufre en altas concentraciones. La fuentes termales localizadas en climas templados se originan en rocas de dolomita/gypsum, en estas las bacterias sulfatorreductoras que habitan los 2 ciestratos rocosos reducen el sulfato (SO 4 ) hasta a do sulfh drico (H2 S), el cual se libera en las emanaciones sulfurosas an oxicas. El H2 S posteriormente en una biopel cula microbiana, es utilizado por las bacterias fotosint eticas (bacterias p urpuras y verdes), liberando azufre elemental que se deposita (Fig. 3). Un ejemplo de fuentes termales de aguas sulfurosas se localizan en el Parque Nacional de Yellowstone (Estados Unidos) y en Rotorna (Nueva Zelanda) (Fig. 4a). En el Parque de Yellowstone la abitemperatura oscila de 74 a 93o C, en este h tat, adem as de las bacterias sulfatorreductoras y de las fotosint eticas, se encuentran arqueas como Sulfolobus y Acidianus, que crecen a partir de compuestos de azufre inorg anicos (quimiolitotr ocos) y son capaces de soportar, adem as de las altas temperaturas, condiciones a cidas con valores de pH

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Figura 3: Biopel cula microbiana, la escala corresponde a cm. Las arqueas hiperterm olas suelen ser anaerobias y a menudo quimiolit otrofas, algunas utilizan el H2 disuelto en el uido hidrot ermico para reducir el azueste posteriormente puede ser fre elemental a H2 S, oxidado a sulfato por Sulfolobus acidoaldarius. Methanothermus fervidus es capaz de producir metano en arqueas a partir de CO2 con H2 . Existen tambi anaerobias heter otrofas (Desulfurococcus) que utilizan compuestos org anicos como fuente de carbono y azufre elemental (Takai y Horikoshi, 2001). Figura 2: Fotos ntesis. a) Ac clica con dos fotosistemas. b) c clica con un fotosistema (Mader, 2007) inferiores a 2.0 (Barns et al., 1996). b) Chimeneas hidrotermales, proporcionan un ambiente en el piso oce anico que permite la proliferaci on de los microorganismos. Las chimeneas hidrotermales se forman en las fracturas de las paredes laterales de las cordilleras mesoce anicas y a trav es de ellas emanan diversos minerales en un uido de alcido (pH < 4.5) y reta temperatura (300-400o C), a ducido (sin O2 ), el cual se mezcla con una columna de agua marina fr a (2-4o C), alcalina (pH 8.5) y oxigenada (Fig. 4b); como resultado de esta mezcla precipitan los minerales formando dep ositos de sulfurosulfatos. En estos ecosistemas habitan los procariontes hiperterm olos pertenecientes principalmente al dominio Archaea, las cuales representan del 3350 % de la comunidad microbiana total, su temperatura o ptima de crecimiento est a entre 105-110o C (Pyrodictium brockii y Pyrococcus furiosus). 3. Ecosistemas con salinidades extremas La ecosistemas naturales pueden presentar condiciones dulceacu colas (< 3 g NaCl/L, r os y lagos), salobres (0.1-30 g NaCl/L, estuarios y lagunas costeras) o marinas (33-37 g NaCl/L, grandes oc eanos); sin embargo, existen ecosistemas con altas concentraciones de sales a los que se denominan hipersalobres (200-250 g NaCl/L). Estos ambientes se caracterizan por una fuerza i onica extremadamente elevada (diez veces la de los ambientes marinos), altas temperaturas y altos niveles de radiaci on UV. Estas condiciones dan como resultado una evaporaci on peri odica del agua y la subsecuente concentraci on de sales, factores que en conjunto originan la exposici on de las c elulas a la desecaci on y da no del ADN por los rayos UV. Con estas caracter sticas se pueden desarrollar los procariontes hal olos que necesitan como m nimo una concentraci on de 1.5 M de NaCl como las arqueas de los g eneros Halobacterium, Halococcus, Haloarcula, Haloferax y Haloquadratum. Estos microorganismos se caracterizan por tener una morfolog a inusual, ya que pueden tener forma cuadrada, aunque tambi en se conocen especies con for-

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te halof licas, se han descrito varias especies de bacterias como los heter otrofos Halobacteroides halobius y Sporohalobacter marismortui; as como Ectothiorhodospira marismortuii que puede crecer fotoautotr ocamente con H2 S como donador de electrones o fotoheterotr ocamente con acetato como fuente de carbono (Ventosa y Arahal, 1999).

Figura 4: Ambientes extremos con elevada temperatura y abundancia de hierro y azufre. a) Fuente termal en el Parque Nacional de Yellowstone (Estados Unidos). b) Chimenea hidrotermal en el fondo marino. (Referencias de Internet [2] y [3]). ma triangular y romboide (Fig. 5a); algunos presentan ves culas gaseosas y hay especies capaces de resistir las radiaciones UV. El Mar Muerto (Israel) y las salinas de la laguna de Guerrero Negro (Baja California, M exico) son ambientes hipersalinos. El Mar Muerto es uno de los lagos m as grandes y salados del mundo (Fig. 5b). Se considera un lago terminal porque la u nica salida de agua se da a trav es de la evaporaci on, mientras que el inujo proviene principalmente del R o Jord an. La mayor parte del tiempo se encuentra estraticado, su fondo es an oxico, con presencia de H2 S. En este ecosistema se ha reportado la presencia de diferentes arqueas, entre ellas Halobacterium marismortui, Halorubrum sodomese y Halobaculum gomorrense, las cuales crecen a partir de glucosa y otros az ucares sencillos. Aunado a las arqueas extremadamenFigura 5: Ambientes extremos hipersalinos. a) Bacterias halof licas. b) Mar Muerto (Israel) (Referencias de Internet [4] y [5]). 4. Ambientes acidos Los drenajes a cidos de minas (DAM), son ambientes seminaturales que se originan como resultado de las actividades mineras que favorecen la expogeno atmosf erico, forsici on de la pirita (FeS2 ) al ox mando a cido sulf urico. Estas reacciones generan acidez y liberan grandes cantidades de sulfatos, hierro y otros metales que contienen sulfuros, produciendo un lixiviado t oxico, el cual reacciona con las rocas del entorno produciendo la hidr olisis de diversos minerales y haciendo que se disuelvan otros elementos (Fig. 6a). El hierro y el azufre son los elementos importantes para las diferentes reacciones metab olicas de los microorganismos que habitan

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en estos ecosistemas. En los DAM existe un ciclo continuo entre las diferentes formas qu micas del azufre, las cuales tienen un papel central en la producci on de energ a y en el mantenimiento de la comunidad microbiana. Por ejemplo bajo condiciones an oxicas se lleva a cabo la sulfatorreducci on, proceso que libera a cido sulfh drico (H2 S), el cual puede conducir a la formaci on de minerales secundarios; asimismo el H2 S representa una v a productora de energ a para las bacterias quimiosint eticas que lo transforman a sulfato. En el caso del hierro, este tiene dos estados de oxidaerrico (Fe3+ ), los cuales ci on: el ferroso (Fe2+ ) y el f tambi en se est an reciclando continuamente como resultado de los procesos geoqu micos y de la actividad de los microorganismos. Algunas bacterias en condiciones an oxicas reducen el Fe3+ a Fe2+ , mientras que el proceso inverso puede realizarse por la bacteria Acidithiobacillus ferrooxidans y arqueas del g enero Metallosphaera en presencia de ox geno. La variaci on de las condiciones ambientales determina que los DAM tengan numerosos nichos microbianos restringidos a pocas especies microbianas (Gleeson et al., 2007). El R o Tinto (Espa na) por su origen y manantiales, es un ambiente extremo con un pH entre 1.7-2.5, con un alto contenido de metales pesados y una importante actividad minera. Representa un ambiente sumamente acido donde proliferan microorganismos extrem olos como la bacteria Leptospirillum sp y la arquea Solfolobus sp (Fig. 6b). 5. Ambientes alcalinos Los lagos alcalinos pueden alcanzar valores de pH superiores a 10, ocasionalmente llegan hasta 12. La naturaleza alcalina de estos lagos obedece a la presencia de niveles elevados de carbonato de sodio y un requisito para su formaci on son los climas tropicales aridos y semi- aridos donde se favorece la concentraci on de evaporitas. En estos ambientes se han aislado bacterias alcal olas como Bacillus alcalophillus y B. cohnii; as como las arqueas de los g eneros Natrobacterium, Natronococcus y Methanobacterium alcaliphilum. Los lagos del Valle del Rift, entre Kenia y Tanzania, est an entre los ambientes acu aticos alcalinos m as productivos de la Tierra debido a la presencia de densas poblaciones de cianobacterias alcal olas, principalmente Spirulina sp., de la cual se alimentan una gran cantidad de amingos (Fig. 7a-b) (Oren, 2002).

Figura 6: a) Drenaje a cido de minas en Villamayor de Calatrava, Espa na. b) R o Tinto y Lesptospirillum spp. (imagen tomada de Sand et al, 1992) www.panoramio.com.

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Figura 7: Lagos alcalinos. a) Cianobacteria (Spirulina sp.). b) Flamingos en el lago alcalino Bogoria (Valle del Rift) (Referencia de Internet [1]). 6. Corteza terrestre profunda Es el area localizada debajo de la supercie terrestre, abarca tanto zonas continentales como marinas. En estas regiones se ha sugerido que la actividad microbiana podr a abarcar desde varios cientos de metros de profundidad y extenderse hasta los 3-4 km debajo de la supercie. Al respecto, se ha demostrado la existencia del proceso de sulfatorreducci on en suelos y sedimentos que se depositaron durante el per odo Cret acico, as como la presencia de comunidades microbianas semejantes a Desulfotomaculum spp en las profundas minas de oro de Sud africa (Head et al., 2003). 7. Ambientes radioactivos La radiaci on es energ a en tr ansito que viaja a trav es de part culas (neutrones de alta energ a, protones, electrones, part culas ) o de longitudes de onda (rayos x, rayos o rayos UV), esta energ a puede da nar las mol eculas del ADN al modicar la secuencia de sus bases nitrogenadas induciendo mutaciones en los seres vivos. A pesar de lo anterior, se ha establecido que algunos procariontes extrem olos pueden presentar dos mecanismos que permiten la reparaci on del ADN, uno es la reparaci on por excisi on, donde los nucle otidos da nados son removidos de la cadena del ADN y este es resintetizado a partir de la cadena no da nada que act ua como molde. La fotoreactivaci on es el segundo mecanismo empleado para reparar particularmente los d meros de pirimidina. Al respecto se determin o que Halobacterium sp es capaz de reparar las lesiones de su ADN ocasionadas por la radiaci on UV a trav es de la fotoreactivaci on de la fotoliasa codicada por el gen phr2 (Kottemann et al., 2005). Los microorganismos que se desarrollan en ambientes radioactivos, como los que se presentan en los auentes de minas y en los dep ositos de desechos radioactivos, son capaces de reparar el da no de su ADN. En estos ambientes pueden desarrollarse bacterias como Deinococcus radiodurans que soporta altas dosis de radiaci on o bacterias reductoras de metales de la clase Geobacteraceae (Geothrix fermentans), las cuales pueden catalizar la reducci on de uranio soluble [U(VI)] a una forma menos soluble [U(IV)], este mecanismo podr a ser utilizado como una estrategia de remediaci on para la contaminaci on por uranio (Holmes et al., 2002). Aunado a los ambientes descritos anteriormente, las cuevas tambi en se consideran ambientes extremos, en donde la vida est a basada en comunidades no fotosint eticas. Las cuevas se caracterizan por bajas concentraciones de materia org anica y varias interfases redox que permiten el crecimiento y desarrollo de bacterias quimiolitoaut otrofas: oxidantes de amonio, nitrato, azufre, manganeso o hierro. Estas comunidades microbianas pueden utilizar los compuestos reducidos existentes en las paredes rocosas de las cuevas para producir energ a en un ambiente limitado por nutrientes. Como resultado de

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su actividad metab olica se forman dep ositos minerales secundarios que se acumulan sobre la supercie de la biopel cula microbiana, disolviendo la matriz rocosa que se ubica debajo de ellos y acidicando el agua. La formaci on de a cido sulf urico a partir de H2 S por una bacteria similar a las especies de Thiobacillus es una reacci on com un en las cuevas, este acido a menudo disuelve los carbonatos presentes y contribuye a la erosi on de los pasajes de las cuevas, liberando al mismo tiempo diversos elementos como calcio, magnesio, hierro y manganeso que son transportados y concentrados en otras areas donde son susceptibles de ser utilizados por otros grupos bacterianos (Northup y Lavoie, 2001). Comentarios nales El estudio de los microorganismos que habitan ambientes extremos ha cobrado mayor auge en los u ltimos a nos debido a su importancia evolutiva y de aplicaciones biotecnol ogicas. Desde el punto de vista evolutivo destaca la capacidad para sobrevivir de algunos extrem olos, por ejemplo los microorganismos que se han aislado del permafrost en Siberia y que han permanecido congelados por m as de tres millones de a nos. Asimismo es tambi en impresionante las bacterias que han germinado a partir de endoesporas preservadas en el a mbar Dominicano con m as de 30 millones de a nos de antig uedad. En el caso de las arqueas hiperterm olas debido a que tienen una temperatura o ptima de crecimiento entre 80-110o C, se les considera que representan el fenotipo m as antiguo de organismos vivos y por consiguiente su metabolismo podr a considerarse una etapa temprana de la evoluci on. Aunado a lo anterior, la capacidad de algunos extrem olos para sobrevivir en condiciones dif ciles similares a las que se encuentran en otros planetas ha incrementado la posibilidad de que pueda existir vida en el espacio exterior. Al respecto la NASA seleccion o el R o Tinto como h abitat a estudiar por su posible similitud con el ambiente del planeta Marte. Un experimento con participaci on del Consejo Superior de Investigaciones Cient cas (CSIC), y desarrollado en el r o Tinto, ha conrmado la posibilidad de que determinados tipos de organismos puedan sobrevivir bajo las restrictivas condiciones del planeta Marte. Desde el punto de vista biotecnol ogico las enzimas que se extraen de los extrem olos tienen diversas aplicaciones m edicas e industriales, este es el caso del term olo Thermophillus aquaticus, que se aisl o de un manantial termal del Parque Nacional de Yellowstone, el cual es la fuente de la que se extrae la

Taq-polimerasa, enzima utilizada en la reacci on de la PCR. Asimismo se han incrementado las investigaciones con extrem olos para la bio-remediaci on de la contaminaci on por hidrocarburos en ambientes fr os y en el tratamiento de aguas residuales de la industria petroqu mica. Bibliograf a 1. Atlas, R. M. y Bartha, R. Ecolog a Microbiana on. Pearson y Microbiolog a Ambiental. 2a . Edici Educaci on. Madrid, Espa na. 696 p, 2002 2. Barker Jrgensen, B. Bacteria and Marine Biogeochemistry. En: H. D. Schulz and M. Zabel (Eds.). Marine Geochemistry. Spriger. Alemania. pp: 173-208, 2000 3. Barns, S. M., C. F. Delwihe, J. D. Palmer and N. R. Pace. Perspectives on archaeal diversity, thermophily, and monophyly from environmental RNA sequences. Proced. Nat. Academic of Sci. 93: 9188-9193, 1996 4. Gleeson, D., McDermott, F., and Clipson, N. Undestanding microbially active biogeochemical environments. Adv. Appl. Microbiol, 62, pp. 81-102, 2007. 5. Head, I. M., Jones, D. M. and Larter, S. R. Biological activity in the deep subsurface and the origin of heavy oil. Nature, 426, pp. 344-352, 2003 6. Holmes, D. E., Finneran, K. T., ONeil, R. A., and Lovley, D. R. Enrichment of members of the family Geobacteraceae associated with stimulation of dissimilatory metal reduction in uraniumcontaminated aquifer sediments. Appl. Environ. Microbiol, 68, pp. 2300-2306, 2002 7. Konings, W. N., Albers, S-V., Koning, S. And Driessen, A. J. M. The cell membrane plays a crucialrole in survival of bacteria and archaea in extreme environments. Antonie van Leeuwenhoek. 81: 61-72, 2002 8. Kottemann, M., Kish, A., Iloanusi, C., Bjork, S., and DiRuggiero, J. Physiological responses of the halophilic archaeon Halobacterium sp. Strain NRC1 to dissication and gamma irradiation. Extremophiles. 9: 219-227, 2005. 9. Mader, S. Biolog a. McGraw Hill. M exico, Pp. 120-121, 2007 10. Nakamura, H. Salt sensitivity of cells. In: J. Seckbach (Ed.). Enigmatic Microorganisms and Life in Extreme Environments. Kluwer Academic Publishers. Netherlands. pp: 369-386, 1999. 11. Northup, D. E., and Lavoie, K. H. Geomicrobiology of caves: A review. Geomicrobiol. J, 18, pp. 199-222, 2001

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12. Oren, A. Molecular ecology of extremely halophilic Archaea and Bacteria, FEMS Microbiol, Ecol, 39: 1-7, 2002 13. Sand, W., Rhode, K., Subotke, B. and Zenneck, C. Evaluation of Leptospirillum ferrooxidans for leaching, Appl. Environ. Microbiol. 58(1): 85-92, 1992 14. Takai, K., and Horikoshi, K. Genetic diversity of archaea in deep-sea hydrothermal vent environments. Genetics, 152, pp. 1285-1297, 2001 15. Ventosa, A. and Arahal, D. R. Microbial life in the Dead Sea. In: J. Seckbach (Ed.). Enigmatic Microorganisms and Life in Extreme Environments. Kluwer Academic Publishers. Netherlands. pp: 337-356, 1999. P aginas de Internet 1. http://www.earthzine.org/water-availabilitytheme/

2. http://www.hsd3.org/HighSchool/Teachers/ MATTIXS/Mattix %20homepage/studentwork/ Laura %20Cornelisses %20Web %20Page/ Yellowstone %20National %20Park.htm 3. http://faculty.cascadia.edu/jvanleer/astro\ %20sum01/Hyrothremal\%20Vent\%20Final/ hydrothermal vents.htm 4. http://www.nuestromar.org/noticias/ ecologia y medioambiente 04 2008 el mar muerto en una lenta agonia 15356 5. http://www.nextnature.net/2006/11/ square-bacteria/ 6. http://www.panoramio.com 7. http://agrupacionastronomicamagallanes. wordpress.com/2009/02/03/350/riotinto1/
cs

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Recibido: 21 de abril de 2012 Aceptado: 17 de mayo de 2012 Abstract In the last century it has been demonstrated that milk has a lot of compounds that exhibit specic biological activities in addition to their established nutritional value when it was consumed. Some of these bioactive compounds are milk proteins and peptides, oligosaccharides, lipids and minerals. Casein is the main protein in the milk constituting about 80 % of the total milk protein. Whey proteins comprised about 20 % of total milk proteins. Many whey proteins are claimed to possess physiological functions. The main biological activities exerted by whey proteins are metal binding, immunomodulating, anticancer, antioxidant and antimicrobial activities. Also it has been obtained bioactive peptides from enzymatic hydrolysis of whey proteins. This review provides an overview of bioactive compounds in milk, their activities and the human health benet. Key words: caseins, whey proteins, bioactivity, bioactive peptides. Resumen En el u ltimo siglo se ha demostrado que en la leche existen una gran cantidad de compuestos que ejercen actividades biol ogicas espec cas adem as de su papel nutricional. Algunos de estos compuestos son las prote nas de la leche, los oligosac aridos y los minerales. La case na es la principal prote na de la leche y constituye alrededor del 80 % del total de las prote nas, mientras que las prote nas del suero representan alrededor del 20 %. Algunas prote nas del suero tienen la capacidad de ejercer una funci on biol ogica entre las que destacan la jadora de minerales, la inmunomoduladora, la anticancer gena, la antioxidante y la antimicrobiana. Adem as, se han podido obtener p eptidos con diferentes efectos ben ecos en la salud a partir de la hidrolisis enzim atica de las prote nas. Este art culo de revisi on provee un panorama acerca de los componentes bioactivos de la leche con enfasis en las prote nas de la leche as como de los benecios de estas en la salud humana. Palabras claves: case nas, prote nas del suero, bioactividad, p eptidos bioactivos. La leche La leche es producida por la gl andula mamaria, contiene aproximadamente 5 % de lactosa, 3.2 % de pro-

te nas, 4 % de l pidos y 0.7 % de sales minerales. Adem as de estos compuestos principales, la leche contiene sustancias que brindan protecci on inmunol ogica o que presentan alguna actividad siol ogica en los neonatos y adultos (S everin y Wenshui, 2005). Desde hace cientos de a nos, la leche era utilizada para prevenir infecciones, por esta raz on en un texto antiguo de origen isl amico, se citaba: Bebe leche porque quita r apidamente el calor del coraz on, fortalece a la espalda, incrementa al cerebro y aumenta la inteligencia. Aunque estas palabras no est an un fundamentadas cient camente, demuestran que a en esos tiempos se sab a que la leche proporcionaba benecios a la salud de quien la consum a. A partir del siglo XX y gracias al gran auge de la nutrici on, se logr o estudiar y reconocer el valor y la cantidad de nutrientes, de la leche. Especialmente, en las u ltimas tres d ecadas se ha demostrado que la leche y los productos l acteos pueden ayudar a prevenir o reducir cierto tipo de des ordenes cr onicos, como la osteoporosis, la hipertensi on, la obesidad, el sobrepeso y el c ancer de colon. La prevenci on de estos des ordenes, se debe en gran parte, a que la leche y los productos l acteos contienen entre otras cosas, componentes que presentan alg un tipo de actividad en el organismo (bioactividad). Se ha visto que la leche es un sistema integral de compuestos bioactivos, entre los que se destacan las prote nas y p eptidos derivados de ellas, los l pidos y carbohidratos, los cuales pueden actuar de forma sin ergica o bien de manera independiente, y proveen de benecios m as all a de su contenido nutricional (Meisel, 1997). Los principales compuestos bioactivos de la leche se muestran en la tabla 1. Las diferentes fracciones de la case na (s1 ,s2 , , ), no presentan ninguna bioactividad, pero se ha demostrado que los p eptidos derivados de estas, si presentan algunas propiedades biol ogicas en el organismo. Estos p eptidos con actividad biol ogica se encuentran encriptados dentro de las secuencias polipept dicas de estas prote nas. Algunas prote nas del suero de leche poseen propiedades siol ogicas, principalmente como las prote nas jadoras de metales, reguladores del sistema inmune y factores del crecimiento. En estudios realizados con animales de laboratorio se ha demostrado que algunas prote nas del suero tienen propiedades inmunoestimulatorias y anticancer genas (Shah, 2000).

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Tabla 1. Componentes bioactivos de la leche de Componentes Bioactividad Prote nas del suero Fijan minerales Regulan el sistema inmune Propiedades anticancer genas P eptidos derivados Disminuyen la presi on arterial de la case na Propiedades anticoagulantes Fijan calcio y erro Regulan el sistema inmune Efecto antimicrobiano P eptidos derivados Disminuyen la presi on arterial del suero Modulan el sistema inmune Efecto antimicrobiano Calcio biodisponible Regulan la presi on sangu nea Previenen el c ancer de colon Oligosac aridos Inhiben el crecimiento de Campylobacter jejuni, Streptococcus pneumoniae y Escherichia coli enteropat ogeno Componentes grasos Protegen contra algunos como: acido linol eico tipos de c ancer y conjugado, esngomielina, la arterioesclerosis acido but rico y acido mir stico Enzimas Efecto antimicrobiano Modulan el sistema inmune

vaca. Referencia Shah, 2000

Meisel, 1997

Meisel, 1997

S everin y Wenshui, 2005 Shah, 2000

S everin y Wenshui, 2005; Shah, 2000,

S everin y Wenshui, 2005

La lactosa promueve la absorci on del calcio, adem as de que es el precursor de la lactulosa y otros galactoligosac aridos, los cuales promueven el crecimiento de las bacterias probi oticas. Tambi en se ha observado que algunos oligosac aridos presentes en la leche inhiben el crecimiento de Campylobacter jejuni, Streptococcus pneumoniae y Escherichia coli enteropat ogena (Shah, 2000). El calcio presente en la leche juega un papel en la regulaci on de la presi on sangu nea, ya que existe una evidencia entre la disminuci on de la presi on arterial y el consumo de cantidades elevadas de calcio proveniente de productos l acteos. Adem as, se est a estudiando el posible papel protector del calcio en la prevenci on del c ancer de colon, debido a la capacidad de jar las sales biliares, las cuales se sabe que promueven este tipo de c ancer (S everin y Wenshui, 2005). En lo que corresponde a los componentes grasos con actividad biol ogica podemos destacar el papel del acido linol eico conjugado, la esngomielina, el a cido but rico y el mir stico, los cuales act uan como protectores contra ciertas enfermedades cr onicas como algunos tipos de c ancer y la arteriosclerosis (S everin y Wenshui, 2005; Shah, 2000).

Prote nas de la leche En la leche se distinguen dos grupos principales de prote nas: las case nas, las cuales son prote nas fosforiladas e insolubles a un valor de pH de 4.6, y las prote nas del suero las cuales se encuentran solubles a este valor de pH. Las case nas constituyen el 80 % de la fracci on proteica de la leche y las prote nas del suero el 20 % restante. Durante el proceso de elaboraci on de quesos, las case nas se separan de la leche entera quedando el suero, el cual contiene lactosa, prote nas y l pidos. Los avances en las t ecnicas de procesamiento de alimentos han permitido la producci on industrial de concentrados proteicos (WPC) del suero, los cuales var an en el contenido de prote nas. Debido a su alta calidad nutricional y a sus propiedades funcionales los productos del suero son vendidos como suplementos nutricionales, siendo particularmente populares entre los deportistas y sicoculturistas (S everin y Wenshui, 2005). Adem as de las prote nas del suero y las case nas, existen otros dos grupos de naturaleza proteica o sustancias nitrogenadas, como es el caso de la proteosa peptona y del nitr ogeno no proteico (NNP). La proteosa peptona se precipita al agregarse a cido tricloro

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ac etico al 12 %, mientras que el NNP es soluble en esta soluci on. Las sustancias nitrogenadas no prote nicas (NNP) constituyen una peque na parte que comprende un gran n umero de sustancias con un peso molecular inferior 500 Da (Alais, 1991). En la tabla 2 se muestran las principales prote nas que se encuentran en la leche de vaca as como sus funciones biol ogicas reportadas. Case nas Las case nas se encuentran formando complejos macromoleculares que contienen minerales (principalmente fosfato de calcio), cuya concentraci on llega a representar hasta el 8 % de su composici on. A estos complejos se les conoce como micelas. Existen cuatro fracciones principales la s1 (38 %), la s2 (10 %), la (36 %) y la -case na (13 %). El peso molecular de cada una de las fracciones antes mencionadas va desde 20 a 25 kDa. Estas fracciones presentan una baja solubilidad a un valor de pH de 4.6. Las case nas comparten una estructura similar, son prote nas conjugadas, la mayor a con grupos fosfatos, los cuales se encuentran estericados a sus residuos de serina, y estos son importantes para la formaci on de la micela de case na. La uni on del calcio a cada una de las case nas individuales, es proporcional al contenido de fosfato. La conformaci on de las case nas se asemeja a las prote nas globulares desnaturalizadas. Tienen un gran n umero de residuos de prolina, lo cual, causa un doblamiento en la estructura e inhibe la formaci on de estructuras secundarias altamente ordenadas (Cheftel y col., 1989). Prote nas del suero l acteo El suero representa una rica y variada mezcla de prote nas, que poseen un amplio rango de propiedades sicoqu micas y funcionales. Las principales prote nas del suero en la leche de vaca son: la lactoglobulina (50 %), la -lactoalb umina (20 %), la seroalb umina (10 %) y las inmunoglobulinas (10 %). Son prote nas globulares t picas, que no se encuentran fosforiladas, pero algunas son glicosiladas, son insensibles al calcio y en contraste con las case nas, la mayor a de estas poseen estructura terciaria y cuaternaria. Contienen una menor cantidad de a cido glut amico y prolina que las case nas, pero son ricas en amino acidos azufrados (Cys, Met) y ramicados (Leu, Val, Ile) (Cheftel y col., 1989). Las prote nas del suero al ser digeridas permanecen solubles al pH a cido del est omago, esto provoca que su paso por el est omago sea muy r apido y que lleguen al intestino pr acticamente intactas, permitiendo que

su absorci on sea a trav es de un sector m as largo del intestino. Su paso por el intestino facilita una gran variedad de funciones, por ejemplo, las interacciones con la ora intestinal o con los minerales presentes en el bolo alimenticio favorecen su absorci on (Jim enez y Garc a, 2006). Existe un creciente inter es por el suero como una fuente rica de compuestos bioactivos que pueden reducir el riesgo o bien prevenir el desarrollo de algunas enfermedades. Se han utilizado una gran cantidad de tecnolog as para separar y concentrar las prote nas del suero, algunas de ellas son la microltraci on, ultraltraci on, y el intercambio i onico. La prote na de suero obtenida por cualquiera de estas metodolog as se seca para poder obtener concentrados de prote na de suero (WPC) o aislados de prote na de suero (WPI). Los cuales son muy solubles y contienen entre 80 a 95 % de prote na. Estos productos tienen una amplia gama de aplicaciones en la industria alimentaria debido a su alto contenido de prote nas, las cuales pueden funcionar como ligadores de agua, agentes gelicantes, emulsicantes y espesantes. Los tratamientos utilizados parta la obtenci on de los WPI y WPC pueden algunas veces causar la desnaturalizaci on de las prote nas y por lo tanto afectar su funcionalidad (Pihlanto, 2011). Bioactividad de las prote nas del suero Las prote nas del suero no s olo juegan un papel importante en la nutrici on al ser una fuente balanceada de amino acidos, sino que adem as, en muchos casos, pueden ejercer determinados efectos biol ogicos y siol ogicos. Entre las prote nas bioactivas del suero de leche se pueden mencionar a la -lactoalb umina, la -lactoglobulina, la lactoferrina, la lactoperoxidasa, las inmunoglobulinas y una gran variedad de factores de crecimiento, las cuales est an implicadas en un gran n umero de efectos siol ogicos que han sido observados en animales y humanos. Adem as estas mismas prote nas parcialmente hidrolizadas pueden producir numerosos p eptidos que poseen actividades biol ogicas (Jim enez y Garc a, 2006). Se ha demostrado que algunas prote nas del suero como la lactoferrina y la -lactoglobulina presentan actividades antimicrobianas y antivirales capaces de inhibir pat ogenos a nivel gastrointestinal, de promover la respuesta inmune del organismo, o bien de regular el desarrollo celular (Meisel, 1997). Algunos estudios han demostrado el efecto que presentan las prote nas del suero sobre el control del apetito, el metabolismo de los l pidos y la conserva-

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Tabla 2. Funci on biol ogica de las principales prote nas de la leche de vaca. Prote na Funci on biol ogica Case nas (, ,) Precursoras de p eptidos bioactivos -Lactoglobulina Acarreador de retinol Fijaci on de a cidos grasos Precursor de p eptidos bioactivos -Lactoalb umina S ntesis de lactosa Acarreador de calcio Precursor de p eptidos bioactivos Inmunoglobulinas Protecci on inmunoespec ca IgGT IgG2 IgM IgA Lactoferrina Acci on antimicrobiana, Transportador de hierro Precursor de p eptidos bioactivos Lactoperoxidasa Acci on antimicrobiana con efecto sin ergico con las inmunoglobulinas y la lactoferrina Lisozima Acci on antimicrobiana con efecto sin ergico con las inmunoglobulinas y la lactoferrina Seroalb umina Precursor de p eptidos bioactivos Fijaci on a cidos grasos Proteosa peptona Acarreador de minerales (Shah, 2000)

ci on del tejido muscular en humanos. Tambi en las prote nas del suero han mostrado tener efectos inhibidores sobre la dipeptidil-peptidasa IV, la cual es una enzima natural que degrada a las hormonas incretinicas, y causan un aumento en la concentraci on de la insulina liberada por las c elulas beta de los islotes de Langerhans despu es de ingerir un alimento; tambi en disminuyen la tasa de absorci on de los nutrientes hacia el ujo sangu neo debido a que reducen el vaciado g astrico y pueden por lo tanto reducir la ingesta de alimentos. En otros estudios se encontr o que la suplementaci on de la dieta con prote na de suero en pacientes con sobrepeso y obesos por 12 semanas disminu a los niveles del colesterol total y colesterol de alta densidad al ser comparado con dietas suplementadas con case na, adem as de disminuir los triglic eridos y la insulina en sangre. Estos resultados muestran que el consumo de las prote nas del suero de la leche en la dieta puede disminuir signicativamente los factores de riesgo asociados con enfermedades cr onicas en individuos obesos y con sobrepeso. Las prote nas del suero es una fuente rica de amino acidos de cadena ramicada y leucina. Los ami-

no acidos de cadena ramicada son importantes para los deportistas ya que estos se metabolizan directamente en el tejido muscular y son los primeros que se utilizan durante periodos de ejercicio prolongados. La leucina juega un papel distinto en el metabolismo proteico y se ha visto que puede actuar como una se nal clave para iniciar la s ntesis de prote na en los m usculos. En estudios recientes se ha observado que las prote nas del suero estimulan el aumento de prote na en el tejido muscular de forma m as efectiva que las case nas, en hombres mayores. Esto se debe a que las prote nas del suero se digieren y absorben m as f acilmente, adem as de que su contenido de leucina es m as elevado (Pihlanto, 2011). Se ha reportado que las prote nas del suero tambi en pueden incrementar la respuesta inmune, tanto la humoral como la celular. Esta posible acci on parece estar relacionada con el aumento de la concentraci on de glutati on mediada por las prote nas del suero, esto se debe a que estas prote nas tienen una gran cantidad de amino acidos azufrados. La presencia de altas cantidades de glutati on en los tejidos tumorosos detiene el desarrollo del tumor, posiblemente por la disminuci on de los radicales libres y por la reducci on del da no en el DNA inducido por la oxi-

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daci on. Adem as se sabe que el glutati on es necesario para la actividad y proliferaci on linfocitaria, particularmente de las c elulas T (Wong y Watson, 1995). - Lactoglobulina ( -LG) Es la prote na que se encuentra en una mayor proporci on en el suero de la leche, representa alrededor del 60 % del total de las prote nas del suero de leche de vaca (Fox, 1992). Es una prote na globular compacta de estructura desordenada con distribuci on uniforme de residuos no polares, polares e ionizados. Su secuencia consiste en una cadena de 162 amino acidos con un peso molecular aproximado de 18 kDa, rica en amino acidos azufrados ya que contiene dos moles de cistina y una de ciste na por cada mon omero de 18 kDa. Adem as de la funci on nutricional se ha visto que puede participar en la digesti on de los l pidos de la leche en el neonato debido a que aumenta la actividad de la lipasa pre-g astrica. Tambi en se ha asociado la LG con actividades antivirales, anticarcinog enicas e hipocolesterol emicas. Se sabe que la -LG liga minerales, ya que posee regiones con una gran cantidad de amino acidos cargados, los cuales permiten jarlos y acarrearlos durante su paso a trav es de la pared intestinal. Adem as de la funci on de unirse con los minerales, la -LG posee un dominio ligeramente hidrof obico, por lo que facilita la absorci on de vitaminas liposolubles como el retinol. Su alto contenido de amino acidos azufrados favorece la s ntesis de glutati on lo cual tiene un efecto positivo sobre el sistema inmunol ogico (Jim enez y Garc a, 2006). - Lactoalb umina (-LA) En la leche de vaca, la concentraci on de la -LA es de 1-1.5 g/L, lo cual representa el 3.4 % de la prote na total o el 20 % del total de las prote nas del suero. Est a constituida por 123 amino acidos y cuatro enlaces disulfuro. Esta prote na se caracteriza por su bajo peso molecular 14.4 kDa y su elevado contenido de tript ofano (alrededor del 7.2 %). La -LA es una metalo-prote na, ja el calcio en un espacio que contiene cuatro residuos de aspartato. Estos residuos son altamente conservados en la - LA y en as terla lisozima. Esta es la prote na del suero m moestable. Cuando el pH se reduce hasta 5, los residuos de aspartato empiezan a protonarse y pierden su habilidad de jar calcio. En estudios recientes se ha sugerido que la -LA provee benecios en la salud humana cuando es consumida, los cuales pueden ser ejercidos por la prote na

intacta, por p eptidos derivados de la prote na parcialmente hidrolizada o por los amino acidos obtenidos de una degradaci on completa de la prote na. La -LA es una buena fuente de amino acidos esenciales, como el tript ofano y la ciste na, los cuales a su vez son precursores de la serotonina y el glutati on. Se ha visto que la ingesta de -LA por la tarde en humanos aument o la biodisponibilidad del tript ofano as como el estado de alerta al despertarse. Tambi en se ha demostrado que las dietas ricas en ciste na pueden ayudar a controlar el ndice gluc emico y pueden ayudar a mitigar el estr es oxidativo inducido por la sacarosa as como el desarrollo de la resistencia a la insulina en ratas alimentadas con una dieta alta en sacarosa (Pihlanto, 2011). Debido a su alto contenido de amino acidos ramicados, se utiliza para disminuir el da no al tejido muscular provocado por el ejercicio o la falta de ox geno en los tejidos (anoxia). Algunos estudios sugieren adem as que esta prote na podr a tener aplicaciones en la prevenci on del c ancer, pues puede inducir la apopt osis celular (muerte celular programada), funci on que se pierde en las c elulas tumorales (Jim enez y Garc a, 2006). Lactoferrina (Lf ) Es una glicoprote na con un peso molecular de 80 kDa que pertenece a la familia de las prote nas transportadoras de hierro, tambi en denominadas como transferrinas. La mol ecula de lactoferrina se encuentra integrada por una cadena polipept dica simple, la cual se encuentra plegada en dos l obulos globulares sim etricos (l obulos N y C) que se interconectan por una regi on bisagra. Cada l obulo tiene la capacidad de unir un a tomo de Fe2+ o Fe3+ , aunque tambi en pueden unirse iones Cu2+ , Zn2+ y Mn2+ . Esta glicoprote na presenta una carga neta positiva con un punto isoel ectrico entre 8 y 8.5. La habilidad de la lactoferrina de inhibir el crecimiento microbiano en condiciones in vitro fue una de las primeras funciones descritas para esta prote na, y esto se le atribuye a que posee la propiedad de secuestrar el hierro del medio, requerido para el metabolismo microbiano. Sin embargo, en los u ltimos a nos, se ha descrito un segundo mecanismo antibacteriano, el cual es independiente del hierro y que involucra a la regi on b asica cercana al extremo Nterminal de esta prote na. Este mecanismo fue elucidado a partir de estudios que muestran que la lactoferrina puede romper o incluso penetrar la membra-

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na celular de las bacterias; se han aislado los p eptidos correspondientes a la regi on N-terminal, llamados lactoferricinas, que han mostrado ser m as potentes que la misma lactoferrina. Por otra parte, se ha demostrado que la lactoferrina puede favorecer la respuesta inmune del organismo ya que promueve la proliferaci on de linfocitos y la diferenciaci on celular, lo cual ayuda a la reparaci on de los tejidos da nados, adem as se ha reportado que puede ayudar al tratamiento de algunos tipos de c ancer e incluso se ha llegado a proponer varios mecanismos por los cuales podr a ejercer esa actividad. Algunos de los mecanismos m as simples provienen de su capacidad antioxidante, pues esta prote na podr a actuar como agente reductor de la formaci on de radicales libres, que son algunos de los agentes que promueven la formaci on de tumores. Por otro lado tambi en se ha demostrado que el efecto bactericida de esta prote na contra Helicobacter pylori puede ayudar a prevenir el c ancer de est omago, ya que esta bacteria ha sido asociada con este tipo de c ancer (Pihlanto, 2011). Inmunoglobulinas (Ig) Existen cinco clases de inmunoglobulinas (Ig G, Ig M, Ig A, Ig D e Ig E), de las cuales la Ig G es la que se encuentra en mayor concentraci on, representando alrededor del 80 % de las inmunoglobulinas presentes en la leche. Su actividad como anticuerpo favorece las transferencias de inmunidad pasiva al neonato. Todas las inmunoglobulinas presentan una estructura similar, la cual est a compuesta por cuatro subunidades de peso molecular pr oximo a los 160 kDa unidas a su vez por puentes disulfuro. La cantidad de inmunoglobulinas presentes en el calostro var a del 70 % al 80 % de la prote na total mientras que en la leche s olo var a del 1 al 2 %. Entre las m ultiples funciones de las inmunoglobulinas se encuentran la activaci on de complementos, la opsonizaci on bacteriana (la cual hace que las c elulas bacterianas sean susceptibles a la repuesta inmune) y la aglutinaci on. Las inmunoglobulinas inactivan a las bacterias por la uni on a sitios espec cos de la supercie bacteriana, inhibiendo la adhesi on bacteriana a las c elulas epiteliales. Las Ig tambi en pueden inhibir o reducir la producci on de toxinas y otros compuestos perjudiciales ya que inhibe el metabolismo de las bacterias (Pihlanto, 2011). Otras fracciones proteicas minoritarias La lactoperoxidasa es una peroxidasa con porrina andula ma(grupo hemo Fe3+ ), secretada por la gl maria. El grupo hemo esta unido a la cadena po-

lipept dica por un puente disulfuro. Tiene un peso molecular aproximado de 77 kDa. Esta enzima forma parte de un complejo conocido como sistema lactoperoxidasa en el cual act ua como catalizador de la oxidaci on del i on tiocianato (SCN ) a hipotiooxido de hidr ogecianato (OSCN ), gracias al per no producido por las bacterias contaminantes. La oxidaci on del grupo sulhidrilo (-SH) de enzimas y prote nas bacterianas debido al i on hipotiocianato (OSCN ) es de vital importancia para el efecto bacteriost atico o bactericida de este sistema. Este sistema causa un da no estructural a los microorganismos, permitiendo la salida de los iones potasio, amino acidos y polip eptidos al medio circundante, e impide la toma de nutrientes del microorganismo, inhibiendo la s ntesis de prote nas y DNA. La concentraci on de lactoperoxidasa en el calostro y la leche se encuentra en un rango de de 11 a 45 mg/L a 13-30 mg/L respectivamente (S everin y Wenshui, 2005). La lisozima es una enzima antimicrobiana que se encuentra en el calostro y en la leche humana. Esta enzima hidroliza los enlaces 1-4 entre el acido N-acetil-neur amico y la 2-deoxi-D-glucosa de la pared celular de las bacterias, lo cual provoca la lisis bacteriana. La concentraci on de la lisozima en el calostro y en la leche se encuentra en los rangos de 0.14 a 0.7 y de 0.07 a 0.6 mg/L respectivamente. La lisozima es una prote na con peso molecular aproximado de 15 kDa, que presenta actividad antimicrobiana contra un gran n umero de bacterias Gram positiva y algunas Gram negativas. Se ha visto que puede ejercer un efecto sin ergico con la lactoferrina contra Escherichia coli y Micrococcus luteus (S everin y Wenshui, 2005). Se encuentra bien documentado el hecho de que la leche y el calostro contienen varios factores que promueven o inhiben el crecimiento de diferentes tipos de c elulas. Los factores de crecimiento mejor caracterizados son la betacelulina (BTC), el factor de crecimiento epid ermico (EGF), los factores de crecimiento de broblastos (FGF1 y FGF2), los factores de crecimiento tipo insulina (IGF-I y IGF-II), los factores de crecimiento transformados (TGF- 1 y TGF- 2) y el factor de crecimiento derivado de las plaquetas (PDGF). La concentraci on de los factores de crecimiento es mayor en el calostro y va disminuyendo sustancialmente. Los factores de crecimiento han sido asociados con varias funciones siol ogicas que pueden afectar la salud de la piel, tracto intestinal y huesos (Gauthier y col., 2006; Pihlan-

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to, 2011). Conclusiones Con los estudios reportados hasta el momento, se ha demostrado que el consumo de leche y productos l acteos tiene grandes benecios en la salud debido a que aporta diversos compuestos con actividades biol ogicas que permiten controlar o disminuir algunas enfermedades cr onicas como hipertensi on y c ancer de colon entre otras. Referencias 1. Alais, C. (1991). Ciencia de la leche. Principios de T ecnica Lechera, CECSA, M exico, pp. 103204. 2. Cheftel, J. Cuq, J. y Lorient, D. 1989. Prote nas alimentarias. Bioqu mica. Propiedades funcionales. Valor nutritivo. Modicaciones qu micas, Acribia, Espa na, pp. 179-205. 3. Fox, P. (1992). Advanced dairy chemistry. Proteins. Elsevier Science Publishing Co., INC, Essex, Reino Unido. vol. 1. cap 2, 4 y 5. 4. Gauthier, S. Pouliot, Y. y Maubois, J. 2006. Growth factors from bovine milk and colostrum: composition, extraction and biological activities, Lait, 86, pp. 99-125.

5. Jim enez J. y Garc a, M. 2006. Propiedades Nutrace uticas de las Prote nas del Suero de Leche, Carnilac, pp. 22-27. 6. Meisel, H. 1997. Biochemical properties of regulatory peptides derived from milk proteins, Biopolymers, 43, pp. 119-128. 7. Pihlanto, A. 2011. Whey proteins and peptides, Nutrafoods, 10, [2-3] pp. 29-42. 8. S everin, S. y Wenshui, X. 2005. Milk Biologically Active Components as Nutraceuticals: Review, Crit. Rev. Food Sci., 45, pp. 645-656. 9. Shah, N. 2000. Eects of milk-derived bioactive: an overview, Brit. J. Nutr., 84, [Suppl. 1] pp.S3S10. 10. Wong, C. y Watson, D., Immunomodulatory effects of dietary whey proteins in mice, J. Dairy Res., 62, pp. 359-368, 1995.
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Recibido: 21 de abril de 2012 Aceptado: 30 de mayo de 2012 Abstract The liver has the unique capacity to regulate its growth. Liver regeneration is a compensatory hyperplasia produced by several stimuli that promotes proliferation in order to provide recovery of the liver mass and architecture. Liver regeneration is a very well-studied response to the loss of hepatic tissue, which may occur as a result of toxic injury, virus infection, trauma or surgical resection. The process is associated with signaling cascades involving growth factors, cytokines, matrix remodeling, and several feedbacks of stimulation and inhibition of growth related signals. Since hepatocytes are the major functional cells of the liver, typically a regenerative response is triggered when there is loss of hepatocytes at a large scale. In contrast to the regenerative process after partial hepatectomy, liver repopulation after acute liver failure depends on the differentiation of progenitor cells. Nowadays the dynamic role of lipids in biological processes is widely recognized. Key words: Liver regeneration, tes, HGF/c-Met, cholesterol. Hepatocy-

Palabras Clave: Regeneraci on hep atica, Hepatocitos, HGF/c-Met, colesterol. Introducci on El h gado es uno de los o rgano m as importantes para el ser humano, llevando a cabo m as de 500 funciones, incluyendo el metabolismo de carbohidratos, el almacenamiento y movilizaci on de gluc ogeno, la micos, inbios ntesis de diversos componentes bioqu cluyendo amino acidos y nucle otidos; el metabolismo de l pidos, la desintoxicaci on de drogas, como el alcohol, la producci on de prote nas plasm aticas y hormonas, entre muchas otras m as. Este organo est a dividido en dos l obulos, cada uno consta de placas de hepatocitos revestidos por capilares sinusoidales (espacios entre hepatocitos) que irradian hacia la vena central. El h gado est a conformado por diversos tipos celulares, hepatocitos, c elulas estelares hep aticas (HSC, por sus siglas en ingles), macr ofagos residentes del h gado (c elulas Kuper) y c elulas epiteliales como se observa en la gura 1.

Resumen El h gado tiene la capacidad de regular su crecimiento. La regeneraci on hep atica es una hiperplasia compensatoria producida por diversos est mulos que promueve la proliferaci on a n de proporcionar la recuperaci on de la masa del h gado y la arquitectura. La regeneraci on hep atica es una respuesta muy bien estudiada a la p erdida de tejido hep atico, que puede ocurrir como resultado de una lesi on t oxica, infecci on por virus, trauma o la resecci on quir urgica. Este proceso est a asociado a las cascadas de se nalizaci on que interviniendo factores de crecimiento, citocinas, la remodelaci on de la matriz, y reacciones diversas a la estimulaci on y la inhibici on de las se nales de crecimiento relacionadas. Dado que los hepatocitos son las principales c elulas funcionales del h gado, se activa una respuesta regenerativa cuando se produce una p erdida de hepatocitos a gran escala. En contraste con el proceso de regeneraci on despu es de una hepatectom a parcial, la repoblaci on del h gado despu es de una falla hep atica aguda, depende de la diferenciaci on de c elulas progenitoras. En la actualidad el papel din amico de los l pidos en los procesos biol ogicos es ampliamente reconocido.

Figura 1: Tipos celulares en el h gado. C elulas estelares (c elulas Ito), macr ofagos residentes (c elulas de Kupffer), c elulas endoteliales y hepatocitos, los cuales forman cordones.

Da no, reparaci on y regeneraci on hep atica En general, cuando hablamos de regeneraci on, nos referimos a un proceso en el cual se restituyen los componentes que han sido perdidos o da nados en un ser vivo. La regeneraci on del tejido da nado comienza con la formaci on, en la supercie del a rea perjudicada, de un blastema o aglomeraci on de c elulas indiferenciadas, involucradas en los procesos de proliferaci on y rediferenciaci on celular de nuevas estructuras (Fausto, 2006). Se especula que la regeneraci on hep atica se desarroll o para proteger a los animales de los resultados catastr ocos de la p erdida

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del tejido causados por la ingesta de sustancias t oxicas. El proceso ha sido reconocido por los cient cos durante mucho tiempo y fue po eticamente referido por Esquilo en la tragedia griega Prometeo encadenado, Prometeo, despu es de haber robado el fuego a los dioses del Olimpo atrajo sobre s la ira de Zeus, quien orden o se encadenar a el semidi os, presuntamente, al monte C aucaso, donde d a a d a un aguila devoraba su h gado el cu al era regenerado tan r apido como era consumido. La reparaci on y regeneraci on hep atica despu es de un da no son parte de un proceso de hiperplasia (aumento en el n umero de c elulas) compensatoria, que involucra a todos los tipos celulares y depende de varias v as regulatorias interrelacionadas que controlan directa o indirectamente la restauraci on de la masa hep atica, es decir, la hiperplasia compensatoria se inicia en las c elulas que han quedado vivas o con da no m nimo permitiendo la proliferaci on para compensar la ausencia de aquellas que han muerto o han sido eliminadas por alg un proceso quir urgico, como la resecci on parcial de un fragmento hep atico conocida como hepatectom a parcial. El proceso de regeneraci on se considera como una serie de pasos que comprenden una se nal de inicio, una fase de preparaci on, seguida de las etapas de progresi on; de ciclo celular y la nal de frenado. Las c elulas que normalmente se encuentran arrestadas en una etapa quiescente o en estado latente (etapa G0), tras un da no severo, hacen una transici on a la fase G1 o de crecimiento 1, que es la primera fase del ciclo celular, en la que existe un desarrollo celular con s ntesis de prote nas y de ARN. Posteriormente prosigue la fase S, donde se produce la replicaci on del ADN, como resultado cada cromosoma se duplica. En la fase G2 (crecimiento 2), contin ua la s ntesis de prote nas y de ARN, terminando cuando la cromatina empieza a condensarse y sede el paso a la mitosis (M), resultando en una divisi on celular. Las c elulas repetir an este ciclo celular hasta que la masa hep atica se restablezca acorde a las necesidades y el tama no del organismo. Se sabe que las cinasas dependientes de ciclinas, (cdk) y sus reguladores asociados (ciclinas) son las que juegan un papel central en el control de la progresi on del ciclo a trav es de puntos de control durante el proceso. Se ha demostrado que las ciclinas tipo D en asociaci on con las cdk2, cdk4 o cdk6, jueon de gan un papel fundamental durante la progresi la etapa G1, siendo la ciclina D1(CD1) el marcador m as conable de hepatocitos en proliferaci on tan-

to in vivo como in vitro. Se he reportado ampliamente que los hepatocitos que expresan el complejo CD1/cdk4 han pasado el punto de restricci on G1 y han pasado a la transici on G1/S, por lo que una correcta expresi on de esta ciclina y las correspondientes unidades catal ticas indican una progresi on en el ciclo celular. La actividad de los complejos ciclina/cdk est a regulada negativamente por las prote nas inhibitorias de cdk (CKI), dentro de las cuales, p21 y p27 han sido las m as estudiadas (Fausto, 2006), as pues estos inhibidores son capaces de detener el ciclo celular cuando ya no se requiere de m as c elulas (Figura 2).

Figura 2: Ciclo celular. Conjunto ordenado de sucesos que conducen a la divisi on celular. Las etapas, mostradas son G0 (arresto celular), G1 (crecimiento 1), S (s ntesis de ADN), G2 (crecimiento 2) y M (mitosis). Est a regulado por la ciclina D1, las cinasas dependientes de ciclina de ciclina (cdk).

Molecularmente hablando la restauraci on del h gado se inicia desde la activaci on de genes de respuesta temprana, impulsados principalmente por el factor de necrosis tumoral- (TNF-) y la interleucina 6 (IL-6), los cuales son producidos localmente por las c elulas de Kuper y los hepatocitos quiescentes, estas prote nas inducen la activaci on de v as de se nalizaci on en los hepatocitos que impactan en la activaci on de factores de transcripci on como el factor nu-

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clear B (NF-B) y el transductor de se nales y activador de la transcripci on 3 (STAT3). Adem as, las c elulas HSC y las c elulas inamatorias inician la producci on del factor de crecimiento de hepatocitos (HGF), factor de crecimiento multifuncional que desencadena sus actividades a trav es de su receptor c-Met. HGF/c-Met desempe nan diversas funciones, incluyendo la regulaci on de la mitog enesis, la motilidad celular, la morfog enesis, la protecci on antiapopt otica y regulador importante del estado redox celular y del estr es oxidante, por lo que es colocado como un regulador maestro de la regeneraci on y reparaci on hep atica, como se muestra en la gura 3 (Factor, 2010; G omez-Quiroz, 2011).

vulnerables a una hepatectom a parcial, se nalando que la mayor a de los animales se encontraban moribundos o muertos despu es de 48 horas de la cirug a. Morfol ogicamente, los h gados en regeneraci on con la eliminaci on de c-Met mostraron numerosas areas con necrosis, signos de ictericia, y esteatosis macro y micro vesicular difusa, adem as de una reorganizaci on del citoesqueleto de actina deciente. Estos estudios proporcionan evidencia gen etica que apoya el papel central que juega la se nalizaci on de HGF/c-Met en la regeneraci on y reparaci on hep atica (Huh, 2004). Investigaciones previas en los animales METLivKO conrman el papel central de c-Met en la iniciaci on del ciclo celular y su progresi on. La ausencia de la se nalizaci on de este factor de crecimiento en hepatocitos da como resultado el arresto celular en la fase G2/M, y la desregulaci on de redes moleculares de transducci on de se nales en esta fase del ciclo. Se ha observado tambi en que la supresi on de c-Met no afecta la activaci on de rutas can onicas que controlan el proceso de reparaci on como la ruta de la prote na ERK, lo cual sugiere que si bien HGF es importante para el proceso, la ausencia en su se nalizaci on puede estar compensada por otras v as de se nalizaci on que pueden eventualmente activar tempranamente a ERK, tampoco se ve afectada la inducci on de la ronda inicial de replicaci on de ADN, sin embargo, se abroga una segunda respuesta en la activaci on de ERK a tiempos por arriba de las 36 h, adem as de existir un retraso en la progresi on del ciclo celular de la fase G2 a la fase M, lo cual indica que la se nalizaci on de c-Met en los hepatocitos es esencial e indispensable para la activaci on a largo plazo de ERK y sustancial para una apropiada regeatica. Se sugiere que el entrecruzamienneraci on hep to en la se nalizaci on de los receptores con actividad de cinasa de tirosina como c-Met y EGFR, puede inuir en la actividad de ambos afectando las v as de se nalizaci on que tienen en com un (Factor, 2010). Entre los fen omenos moleculares que tienen en com un pr acticamente todos los tipos de da no al h gado y que afectan notablemente al ciclo celular, se encuentra la producci on desmesurada de especies reactivas de ox geno (ROS) las cuales da nan a macromol eculas como el ADN o las prote nas llevando a la disfunci on y muerte celular. Para controlar el da no oxidante, los hepatocitos expresan varias prote nas antioxidantes y factores de supervi-

Figura 3: Respuesta hepatocelular ante una agresi on. La restauraci on del h gado depende de la activaci on de factores de transcripci on como STAT-3 y NFB, que a su vez son activados por factores de crecimiento y citocinas, generando reacciones de supervivencia, respuestas antioxidantes, proliferaci on, morfog enesis y motilidad.

La principal evidencia de la importancia del HGF en la restauraci on del h gado y la reparaci on vino con la creaci on de los ratones que tienen eliminada, en el h gado, la se nalizaci on de Met, (ratones METLivKO), esta ablaci on selectiva en hepatocitos de rat on adulto no parece ser perjudicial, pero la respuesta reparadora ante una lesi on aguda est a seriamente afectada. Estudios realizados por nuestros colaboradores muestran que los ratones MetLivKO son m as

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vencia que son inducidos por los cambios en el estado redox. Es bien sabido que HGF/c-Met puede regular la activaci on de factores de transcripci on como NF-kB, el Factor 2 Relacionado con NF-E2 (Nrf2) y la prote na activadora 1 (AP-1), que son responsables de la expresi on del sistema antioxidante, agonista de las ROS. Al mismo tiempo existe una expresi on creciente de enzimas antioxidantes tales como la catalasa, la super oxido dismutasa (SOD), la gama-glutamil cistein sintetasa ( -GCS) y el trip eptido glutati on (GSH), este u ltimo considerado el m as importante, debido a que mantiene el estado redox intracelular. La inhibici on de NF-kB, o los activadores principales de este factor de transcripci on (fosfoinositol 3-cinasa (PI3K) y Akt), abrogan de manera signicativa el papel protector del HGF (Gomez-Quiroz, 2008; Vald es-Arzate, 2009). Por otro lado se sabe que los hepatocitos derivados de ratones METLivKO exhiben sensibilizaci on a la apoptosis a trav es de mecanismos que implican un aument o en la generaci on de ROS v a la NADPH oxidasa y el agotamiento de GSH, alterando la motilidad y la fagocitosis, actividades que se requieren para una reparaci on adecuada (Huh, 2004; Gomez-Quiroz, 2008). Nuestro grupo de investigaci on ha venido caracterizando intensamente el papel protector del HGF en el estr es oxidante, ya sea por un mecanismo dependiente en la elevaci on de las defensas antioxidantes, mediadas por NF-kB o Nrf2, o por la desregulaci on transcripcional de productores de ROS como la NADPH oxidasa, todo esto teniendo impacto en el proceso de regeneraci on. La falla en la replicaci on de hepatocitos conduce a la diferenciaci on de las c elulas ovales Como regla general la replicaci on de los hepatocitos existentes es la forma m as r apida y m as eciente para la regeneraci on y reparaci on del h gado, sin embargo las c elulas progenitoras o c elulas ovales se replican y diferencian a hepatocitos cuando la capacidad de proliferaci on de estos se encuentra comprometida debido a un da no severo o generalizado. El principio que subyace a la activaci on de c elulas progenitoras se basa en la combinaci on de una lesi on hep atica permanente y la incapacidad de los hepatocitos para proliferar en respuesta a diferentes est mulos. Estas c elulas son fenot picamente similares a hepatoblastos fetales, representando del 0,3 al 0,7 % de los tipos celulares del h ga-

do, se caracterizan por su habilidad para auto renovarse, adem as de que tienen una eventual diferenciaci on bipotente para convertirse en hepatocitos, pero tambi en en colangiocitos (Tolosa, 2011), c elulas epiteliales de los conductos biliares. Las c elulas ovales se replican y diferencian cuando el estr es oxidante inhibe la capacidad regenerativa de los hepatocitos maduros. Tras su activaci on, estas c elulas se expanden en el par enquima hep atico desde el area portal hacia la zona da nada apoyando la teor a de que las c elulas ovales son derivadas de la regi on periportal, en particular de los canales de Hering que conectan los canales biliares con el a rbol biliar. Mientras las c elulas ovales han sido estudiadas m as extensamente en roedores, c elulas similares se han encontrado en varias enfermedades del h gado humano, tales como, hepatitis cr onica, enfermedad del h gado alcoh olico, enfermedad del h gado graso no alcoh olica, hepatitis fulminante, as como en la tumorog enesis (Roskams, 2003), lo cual apoya fuertemente la idea de que son necesarias para la regeneraci on del o rgano tras un insulto importante o enfermedad. La regeneraci on hep atica y el h gado graso Para las c elulas en general los l pidos no s olo son una fuente importante de energ a, sino que tambi en representan la materia prima para la s ntesis de membranas celulares. Los acidos grasos, ya sea que provengan de la dieta o sean neosintetizados en la c elula son componentes centrales de l pidos m as complejos como los fosfol pidos, triglic eridos o los gangli osidos. Particular importancia cobra para siolog a celular el colesterol, el cual es un l pido polic clico y que es un regulador central en la uidez de la membrana plasm atica, teniendo menor importancia en las endomembranas como la de la mitocondria siendo un precursor de otras mol eculas importantes para el organismo, como son las hormonas esteroideas y los acidos biliares. Los l pidos han demostrado tener un papel activo en las v as de se nalizaci on que regulan diversos procesos celulares como la proliferaci on, la apoptosis, la movilidad y el reconocimiento c elula-c elula. Durante la regeneraci on del h gado, varias mol eculas de naturaleza lip dica funcionan como segundos mensajeros que llevan la se nal de la membrana plasm atica hasta el n ucleo para iniciar la transcripci on de genes que regulan los cambios en la homeostasis celular. La esteatosis no alcoh olica o enfermedad del h ga-

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do graso no-alcoh olico (NAFLD por sus siglas en ingl es) es la m as com un de las enfermedades hep aticas cr onicas en el mundo occidental tanto en adultos como en ni nos, teniendo una prevalencia superior al 30 % en poblaci on adulta en general. La NAFLD se dene como la inltraci on de grasa en m as del 5 % de los hepatocitos en ausencia de una ingesta cr onica de alcohol y se caracteriza predominantemente por la presencia de esteatosis hep atica macro vesicular (Keating, 2012). Se sabe que en realidad no es tanto la cantidad de l pidos lo que afecta al h gado en una esteatosis, si no del tipo que m as abunde (Mari, 2006), siendo el colesterol el que mostr o m as efectos lipot oxicos que los triglic eridos, por ejemplo. El mecanismo que se propone para dicho efecto es la acumulaci on excesiva de colesterol en la membrana mitocondrial lo cual genera cambios en su permeabilidad permitiendo la sensibilizaci on al da no por una segunda agresi on, que puede ser llevada a cabo por factores proapopt oticos como el ligando FAS o el TNF-, esto en gran medida se favorece por la disminuci on de los niveles de GSH mitocondriales, lo cual deja sin protecci on al organelo amplicando la respuesta citot oxica. La sobrecarga de colesterol afecta la regeneraci on hep atica Lo que se ha venido investigando en el laboratorio de siolog a celular del departamento de ciencias de la salud, de la Universidad Aut onoma Metropolitana Iztapalapa es la inuencia de una sobrecarga lip dica, particularmente en colesterol, en el proceso de regeneraci on y reparaci on hep atica mediada por el HGF. Se ha venido utilizando un modelo en ratones a los cuales se les alimenta con una dieta aterog enica (HC) compuesta por 2 % de colesterol y 0.5 % de colato de sodio, este u ltimo sustancia inocua que favorece la absorci on del l pido. La informaci on que ha arrojado la investigaci on ha mostrado que la dieta HC, en comparaci on con la dieta normal (chow) induce un incremento signicativo en el contenido de este l pido en el tejido hep atico, particularmente en el hepatocito, adem as aumentan la cantidad de a cidos grasos, posiblemente como un proceso compensatorio ante el aumento del colesterol. En los ratones chow se comprob o que las prote nas relacionadas con el ciclo celular como la ciclina D1, las cdk4 y cdk6 se encuentran expresadas durante el proceso de reparaci on, a diferencia de los ratones alimentados con la dieta HC que presentan una disminuci on importante de la ciclina D1 y cdk6. Por otro

o a la prote na inhibitoria p27, la cual lado se analiz se mostr o reducida en los ratones chow durante la regeneraci on hep atica, lo cual apunta que puede estar interactuando con varios complejos ciclina/cdk durante la progresi on del ciclo celular. No obstante, en los ratones HC, p27 disminuye de manera dependiente al tiempo, por lo tanto no existe una inhibici on del complejo ciclina A/CDK2. La proliferaci on de c elulas ovales fue demostrada mediante inmunodeteccciones de prote nas marcadores de este tipo celular como la citoqueratina 19 (CK19) o EpCam, encontr andose una se nal positiva de CK19 para los ratones HC, por otro lado, EpCam mostr o cambio al d a 10 elev andose notablemente, posiblemente por la necesidad de generar m as c elulas ductales como respuesta a la sobrecarga de colesterol el cual puede ser eliminado como a cidos biliares v a ductos biliares. Muchos de los efectos que se han encontrado puede deberse a retrasos en la activaci on del receptor c-MET, los datos muestran que existe una respuesta tard a o retrasada en la fosforilaci on del receptor, lo cual sugiere una respuesta an omala de reparaci on, tal y como lo sugiere tambi en el an alisis en las prote nas del ciclo celular estudiadas. Parte de la explicaci on de ello puede estar en que cMET es un receptor de membrana que es sumamente dependiente de la funcionalidad de su balsa lip dica, siendo estas afectadas por el contenido de colesterol que pueda existir. Conclusi on Los datos que han arrojado nuestra investigaci on est an sugiriendo mecanismos moleculares que explican la raz on de la deciente regeneraci on y reparaci on el tejido hep atico en pacientes obesos los cuales reciben una segunda agresi on, como por ejemplo el consumo de alcohol o la infecci on con virus como el de la hepatitis B o C. No cabe duda que la sobrecarga de l pidos particularmente del colesterol, en el h gado, est a poniendo con mayor susceptibilidad a la disfunci on hep atica, e incluso a la falla del organo, a las personas con sobrepeso, obesa, diab etica o con s ndrome metab olico, que son las que presentan una sobre carga de l pidos en el h gado. Es importante tomar medidas de prevenci on en estas patolog as que puedan evitar llegar al da no hep atico, es bien sabido que una vez que se compromete el h gado en un paciente tiende a tener mal pron ostico en las enfermedades cr onicas como la diabetes.

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Agradecimientos El trabajo ha sido apoyado parcialmente por el CONACYT #131707, por FUNDHEPA est mulo Antonio Ariza Ca nadilla y por la UAM-I Referencias 1. Factor, V. M., D. Seo, et al. Loss of c-Met disrupts gene expression program required for G2/M progression during liver regeneration in mice. PLoS One 5(9), 2010. 2. Fausto, N., J. S. Campbell, et al. Liver regeneration. Hepatology 43(2 Suppl 1): S45-53, 2006. 3. Gomez-Quiroz, L. E., V. M. Factor, et al. Hepatocyte-specic c-Met deletion disrupts redox homeostasis and sensitizes to Fas-mediated apoptosis. J. Biol Chem 283(21): 14581-9, 2008. 4. G omez-Quiroz Luis E., Cuevas-Bahena Deidry B., Souza Veronica, Bucio Leticia, Gutierrez Ru z Mar a Concepci on., Alcoholic Liver Disease and the Survival Response of Hepatocyte Growth Factor. Trends in Alcoholic Liver Disease ResearchClinical and Scientic Aspects. I. Shimizu. Rijeka, Croatia, InTech: 113-128, 2011.

5. Huh, C. G., V. M. Factor, et al. Hepatocyte growth factor/c-met signaling pathway is required for ecient liver regeneration and repair. Proc Natl Acad Sci USA 101(13): 4477-82, 2004. 6. Nu no L. N. Estudio de la regeneraci on hep atica bajo una dieta hipercolesterol emica. M exico D.F, Universidad Aut onoma Metropolitana. Maestr a: 53, 2011. 7. Mari, M., F. Caballero, et al. Mitochondrial free cholesterol loading sensitizes to TNF- and Fasmediated steatohepatitis. Cell Metab 4(3): 18598, 2006. 8. Tolosa, L., A. Bonora-Centelles, et al. Steatotic liver: a suitable source for the isolation of hepatic progenitor cells. Liver Int 31(8): 1231-8, 2011. 9. Valdes-Arzate, A., A. Luna, et al. Hepatocyte growth factor protects hepatocytes against oxidative injury induced by ethanol metabolism. Free Radic Biol Med 47(4): 424-30, 2009.
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La cocina regional espa nola del norte. Escancio Kansho Almazara. Chef pragm atico.

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Espa na es una monarqu a parlamentaria que funciona como una federaci on de Comunidades Aut onomas con distintos niveles de independencia. Dichas comunidades son Andaluc a, Arag on, Cantabria, Castilla y Le on, Castilla-La Mancha, Catalu na, Comunidad de Madrid, Comunidad Valenciana, Extremadura, Galicia, Islas Baleares, Islas Canarias, La Rioja, Navarra, Pa s Vasco, Principado de Asturias y Regi on de Murcia, a las que hay que agregar las ciuas, aundades aut onomas de Ceuta y Melilla1 . Adem que el idioma ocial es el espa nol o castellano, se reconocen como ociales el catal an (hablado en Catalu na y Baleares), el euskera (en el Pa s Vasco) y el gallego (en Galicia). Sin embargo, la autonom a ha permitido que otras lenguas permanezcan en forma ocial aunque s olo en determinadas regiones. Por ejemplo, el valenciano (en la Comunidad Valenciana) y el aran es (en el Val dAr an). Pero tambi en existen otras no ociales como el andaluz (en Andaluc a), el extreme no (en Extremadura), el murciano (en Murcia), el canario (en las Islas Canarias) y el cal o de los gitanos (zincal o o roman espa nol) que es una variante espa nola del roman , utilizado por el pueblo gitano, el cual no tiene una ubicaci on territorial ja. Como es natural, estas divisiones contribuyen a darle al pa s un car acter especial, debido a las particularidades de sus distintas regiones lo cual nalmente se reeja en su variada gastronom a. La historia de la cocina espa nola se remonta varios siglos en el pasado, por lo que ha sufrido importantes cambios en tan largo tiempo. De ser una cocina m as bien sencilla, esp ritu que actualmente se conserva en muchos de sus platillos, ha ido imponi endose paulatinamente hasta llegar a ser considerada como una de las m as importantes del mundo. La fusi on de las costumbres de varias culturas ha incorporado ingredientes, t ecnicas, platillos y tradiciones desde los tiempos romanos, quienes probablemente llevaron a la pen nsula el aceite de oliva y el ajo. Por otra parte, la ocupaci on a rabe introdujo no s olo nuevos modos de guisar, sino tambi en ingredientes y condimentos procedentes del oriente que se desconoc an, como la ca na de az ucar, los c tricos, el azafr an, la nuez moscada y la pimienta negra. Posteriormente, con el descubrimiento de Am erica, la cocina espa nola se enriquece con el cacao, los chiles, el ma z, la papa, el tomate y el piment on.
1 Son dos ciudades espa nolas situadas en el continente africano, que son lim trofes con Marruecos. Escancio Kansho Almazara, De viandas y brebajes. La cocina de Marruecos. ContactoS No. 85, P ags. 51-55 (2012).

Por estas razones, es muy dif cil resumir en pocas palabras la cocina espa nola, ya que presenta un sinf n de platillos y variantes de estos en cada una de sus comunidades, lo que puede deberse a sus diversidades regionales y a sus autonom as, las que no s olo alcanzan a las cuestiones c vicas y ling u sticas, sino tambi en a la gastronom a. Tal vez por eso, hay pocos platillos que son compartidos por todo el pa s pero, aunque algunos de ellos tienen un origen conocido, supuesto o probable, se han difundido en muy distintas versiones m as o menos importantes las cuales han ido adquiriendo un car acter local. Sin embargo, ciertas costumbres son comunes en el pa s, como las muy conocidas tapas que, como se sabe, son bocadillos muy populares que se consumen acompa nados de vino o jerez a casi toda hora. Y entre los modos de preparaci on, abundan los platos a base de legumbres (alubias, frijoles, garbanzos y lente como los sofrijas), los cocidos2 y los potajes3 , as tos4 como base de muchos platillos. Por ello, la cocina se basa en el aceite de oliva como grasa vegetal, tanto en frituras como en ensaladas, y en la manteca de cerdo, como grasa animal, sin olvidar el ajo, la canela, la cebolla, el piment on y la pimienta, como sus principales condimentos. Tambi en se acostumbran las ensaladas y se usa el pan en las comidas en distintas variedades que dependen de cada regi on, en tanto que el vino siempre juega un papel importante entre las costumbres locales. Finalmente, en las distintas comunidades se preparan postres y dulces, algunos muy conocidos por nosotros (lo que reeja claramente la inuencia de la conquista espa nola en M exico), como el arroz con leche, los churros, el an, las natillas, las magdalenas y las torrijas (pan mojado en leche o vino, rebozado en huevo y frito). Sin embargo, varios de ellos tambi en reejan la inuencia de la extensa reposter a a rabe que es legado de la etapa en que Espa na fue ocupada por los a rabes. En esta ocasi on echaremos un vistazo a la cocina del
2 Los cocidos son platillos que constan de carnes (cerdo, ternera, pollo o cordero), garbanzos, embutidos, verduras, legumbres y otros ingredientes cocidos en agua. Al servirlos se suelen dividir en tres: sopa, garbanzos y carnes. 3 Los potajes son sopas poco caldosas hechas con diversas verduras y legumbres cocidas en un caldo. De cocidos y potajes hay muchas versiones regionales, ya que dependen casi siempre de los ingredientes disponibles. 4 Los sofritos son preparaciones t picas que tradicionalmente constan de cebolla, ajo y diversos vegetales los cuales se fr en en aceite de oliva. Se usan en muy variadas formas, como salsa sobre alguna preparaci on, como guarnici on, como elemento integrante de un platillo o, incluso como saborizante de una sopa u otro guiso.

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norte de Espa na, para regresar posteriormente a revisar el centro y el sur. Y por cierto, es del norte, m as com unmente del Pa s Vasco, de donde muchos chefs han salido a conquistar el mundo fundando restaurantes que se destacan por su originalidad y que recuerdan la variada cocina espa nola, ya que es su fuente de inspiraci on. Entrando en materia, veremos algunos de los platillos m as emblem aticos de las Comunidades del Norte de Espa na aunque, posiblemente, algunos de ellos son desconocidos fuera de sus regiones. Como de costumbre, no son recetas, sino descripciones generales de sus principales ingredientes. Arag on. Los asados de ternasco (cordero joven), el bacalao ajoarriero (rehogado en tomate, ajo y otras verduras), las chiretas (tripa de cordero hervida rellena de mollejas de cordero y arroz), los cardos a la aragonesa (cardo cynara cardunculus con almendras en caldo y un sofrito), la ensalada de borrajas con muslos de pich on (muslos y diversas verduras con borraja: borago ocinalis), las migas de pastor (pan duro sofrito con ajos y aceite de oliva), la pepitoria (salsa de yema de huevo duro con almendras molidas), el pollo al chilindr on (estofado en salsa de tomate y verduras), los rega naos (masa de pan horneado con jam on, sardina, o arenque en medio) y las sopas canas (sopa de mediana consistencia de frito de manteca, ajo y piment on, con pan y leche).

das y crema), las fabes con almejas (guiso de alubias y almejas), los frixuelos (especie de crepas dulces muy delgadas), el pote asturiano (cocido de alubias, berzas5 , papas, embutidos y cebolla con champi nones), el repollo relleno (hojas de col rellenas de salsa a base de jam on, harina y leche, las que se hornean) y el solomillo al Cabrales (solomillo de ternera frito y ameado con co nac en una salsa de este queso).

Figura 2. Frixuelos.

Cantabria. El cocido monta n es (alubias, berza, chorizo, costilla, morcilla y tocino) y el cocido lebaas con garbanzos, papas, carne de terniego6 (adem nera, hueso de jam on y relleno de migaj on de pan, huevo, chorizo y perejil), la leche frita (masa de leche hecha con yemas de huevo, harina y az ucar que se fr e, pero se sirve fr a), la marmita de bonito (at un empanizado cocido en un sofrito de verduras y papas con un fondo de pescado), la quesada (masa horneada de harina, huevos, queso fresco de vaca, az ucar y canela), los sobaos (masa horneada de harina, mantequilla, huevos, az ucar y ron) y el sorropot un (at un que se cuece en un rehogado de verduras, caldo y vino). Tambi en hay diferentes quesos, aguardiente de orujo y tostadillo (vino envejecido, dulce, oloroso y suave). Castilla y Le on. Los boletus al ajillo (sofrito de hongos boletus edulis y ajo), el bollo maim on (de masa esponjosa horneada de claras y yemas batidas con az ucar y f ecula de almid on), el botillo del Bierzo7 (embutido de cerdo ahumado y semicura5 Variedad de brassica oleracea, verdura de hojas verdes similar a la col, tambi en llamada repollo verdi-blanco. 6 Platillo t pico de la comarca hist orica de Li ebana, localizada al suroeste de Cantabria. 7 Embutido t pico de la comarca de la provincia de Le on,

Figura 1. Bacalao ajoarriero.

Asturias. El bacalao a la sidra (letes con champi nones y tomates horneados con sidra), el bonito del norte en rollo (at un thunnus alalunga desmenuzado hecho pasta con huevos conformado en rollos y cocido con salsa), la crema de n ecoras (carne de cangrejo peque no necora puber con verduras trocea-

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do), el cocido maragato8 (muy diversas carnes, embutidos y verduras), el codillo hervido al enebro (codillo de cerdo con hortalizas y especias), la lebrada (liebre marinada y cocida en adobo con vino, almendras y pi nones), el lim on serrano (carne asada de cerdo o ternera con salsa de vino con lim on y naranja) y el tocinillo de cielo (especie de an de huevos, az ucar y vainilla). Sin olvidar las yemas, el queso de oveja y los tintos de la Ribera del Duero, los blancos de Rueda y los claretes de Cigales. Catalu na. Los bunyols (rosquillas fritas de masa con levadura, leche y huevos), los caracoles a la llauna (en una placa al horno, con salsa romesco9 ), el empedrat (ensalada de bacalao con alubias, verduras y aceitunas verdes y negras con huevo duro), la escalibada (especie de ensalada de pimientos, berenjenas, tomates, cebolla y papas, todo horneado), la escudella (cocido de carne con especias, butifarras, garbanzos, papas y col), el fuet de Vic (embutido curado de Vic, municipio de Barcelona), los variados mar i muntanya (platillos mar y monta na, como el pollo con langostinos o los camarones con hongos) y el suquet (salsa de almendras tostadas, ajo, perejil, pan frito machacados, tomates maduros y papas fritas). Y los vinos de Priorat y Pened` es.

jam on y ternera, con nabos), la ensalada de angulas (brevemente marinadas en una mezcla de aceite, lim on, perejil, r abano, ajo y pepinillos picados), el pulpo a feira (cocido meti endolo y sac andolo de agua hirviendo, servido con papas y pimientos), la sopa de ostras (ostiones escalfados en un caldo de pescado, yemas y crema), el xarrete con pasta (osobuco pre frito y cocido en caldo con verduras, vino y hongos, con espagueti) y la zorza con huevos fritos (carne de cerdo picada y marinada, frita con huevos). Adem as de los vinos Albari no y Ribeiro, as como el aguardiente de orujo y el queso de tetilla. Navarra. Las alcachofas de Tudela10 (fondos de alcachofa, cebolla y carne de tomate en dados con jam on serrano), los cogollos de Tudela (lechugas con anchoas, pimientos y vinagreta), el conejo a la Navarra (en trozos, cocido en vino con ajo, cebollas, tomates y hierbas de olor con papas), la cuajada de Ultzama (postre de leche cuajada), los esp arragos a la Navarra (esp arragos cocidos, con un sofrito de jam on, ajo y huevos), los pimientos del piquillo de Lodosa (pimientos rellenos de picadillo de carne, pescado o mariscos, enharinados y fritos) y la trucha a la Navarra (letes enharinados fritos y con una salsa de jam on y almendras). Y, por cierto, su variada hortaliza, los quesos de oveja de Roncal e Idiaz abal, el chorizo de Pamplona, el vino clarete y el pachar an11 .

Figura 3. Empedrat.

Galicia. La caldeirada (diversos pescados en rodajas cocidos con papas, tomates y especias), el caldo gallego (habas y papas cocidas con huesos de
que dispone de I.G.P. (Indicaci on Geogr aca Protegida). 8 Platillo t pico de la Comarca de la Maragater a, que se dice que se come al rev es, porque invierte el orden de los tres platos (se sirve as : carnes, garbanzos y sopa), por eso tambi en se dice de el que de sobrar, que sobre la sopa. 9 Salsa de tomate, ajo, pan, almendras tostadas molidas y sazonada con romero, aceite de oliva, vinagre y pimienta.

Figura 4. Bacalao a la Navarra.

La Rioja. El aderezo de mostaza (sazonada y batida con crema), los aguacates rellenos (mitades cubiertas con una salsa de crema y queso ahumado
10 Tudela, Ultzama y Lodosa son ciudades ubicadas respectivamente a 94 y 74 km al sur y a 22 km al norte de Pamplona. 11 Aguardiente anisado con los frutos macerados (drupas) de un arbusto conocido como endrino (prunus spinosa).

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Idiaz abal), la cachelada leonesa (papas cocidas con chorizo en rebanadas), el codo nate con membrillo (ate con membrillos cocidos), la ensalada de txanatsup), gurro (centollo12 hervido con mayonesa y c la piperada (sofrito con pimientos, cebollas, tomates y ajo con huevos revueltos y jam on), las pochas (caldo con pur e de alubias frescas cocidas con hortalizas y chorizo), la sopa de mojojones (caldo de ave con mejillones mytilus edulis y pur e de tomate y cebolla) y el zancarr on de cordero (pierna guisada en un caldo de carne y brandy). Y sus famosos vinos Crianza, Reserva y Gran Reserva. Pa s Vasco. Las angulas guipuzcoanas (en cazuela de barro con ajo y chile), el arroz a los cuatro quesos (cocido en caldo con quesos cremoso, gallego, emmental y parmesano), la becada asada en salsa (especie de perdiz scolopax rusticola en una salsa especial), el marmitako (bonito del norte con papas, cebolla, pimiento y tomate), la piperrada de conejo (trozos asados en un sofrito de pimientos), la porrusalda (bacalao desmenuzado con papas, puerros y zanahoria), los San Jacobos de cerdo (letes sobre rodajas de pi na empanizados y fritos con manzanas), la sopa de eskalus (pescado de r o cocido con pan picado y huevos) y la terrina de txangurro (pasta de salm on, claras de huevo y centollo que se hornea en capas de espinaca y salm on ahumado). La receta f acil En esta ocasi on veremos una receta familiar de sopa muy antigua y t pica del norte de Espa na. Es un plato de invierno que se consum a en el campo para dar m as energ a en el trabajo, pero que tiene un agradable aroma y un sabor muy delicado, apto para cualquier mesa y celebraci on. Tambi en, el recao de Bin efar13 es un antiguo y sencillo plato rural, hecho con ingredientes naturales y f acilmente disponibles. Obviamente, esta receta acepta m as ingredientes como jam on serrano picado, chorizo cortado en rodajas o tocino, lo que contribuye a darle m as sabor al plato.

Sopa de casta nas Ingredientes 250 gr. de casta nas 50 gr. de queso blanco fresco 1 litro de caldo de ave 1 cucharada de crema 1 cebolla peque na picada Hinojo fresco, an s en grano, sal y pimienta Preparaci on Las casta nas se pelan y se hierven brevemente en agua con sal para quitarles la piel na que las recubre. Luego se ponen a cocer picadas en el caldo de ave con la cebolla, el hinojo fresco, el queso desmenuzado y los anises. Se necesita cerca de una hora o hasta que las casta nas queden muy suaves. Posteriormente se retira el hinojo y los anises y se procesa en la licuadora con un poco del caldo y la crema, procurando que la sopa no quede muy l quida, ni muy espesa. Se presenta adornando con una casta na entera cocida y unas ramitas de hinojo. Recao de Bin efar Ingredientes 250 gr. de alubias 100 grs. de arroz 2 papas 1 cabeza de ajos 1 cebolla peque na 1 cuchar on de aceite de oliva 1 hoja de laurel y sal Opcional: 1 piment on, jam on serrano o carne picada. Preparaci on Remojar las alubias la noche anterior con agua y sal. Cambiar el agua, se pone a cocer y cuando hierva, se cambia el agua del cocimiento por suciente agua fr a, agregando tambi en la cebolla picada, la cabeza de ajos, la hoja de laurel, las papas cortadas en dados y el aceite. En unos 10 minutos, agregar el arroz y cocer con la olla tapada hasta que el arroz est e cocido. Se sirve algo caldoso.
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12 Cangrejo de gran tama no maja squinado de aspecto similar al cangrejo de Alaska (chaceon anis). 13 Bin efar es una poblaci on de la Comarca de la Litera, Comunidad Aut onoma de Arag on.

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Recibido: 17 de mayo de 2012 Aceptado: 12 de julio de 2012 Abstract Plasticity in plants is the extent of diversity of phenotypic responses to the continuous variation of the physical environment. The leaves of xerophytic woody plants are models for the study of phenotypic plasticity because of their physiological, morphological and anatomical responses. Values of photosynthetic rates, hydraulic conductivity, as well as leaf movement and the surface/volume index, coupled to anatomical changes, are phenotypic expressions that result from experience with high solar radiation, contrasting temperatures, very low relative humidities and decit soil water. The importance of phenotypic plasticity in woody plants is that it can increase the likelihood of persistence of a population over time as it allows immediate adjustments according to environmental variation. This implies that species can extend the geographic range where they live because of the increased number of tolerable habitats. Key words: Plasticity, phenotype, leaf, anatomy, xerophytes Resumen La plasticidad en plantas es la medida de la diversidad de respuestas fenot picas ante la variaci on continua del medio f sico. Las hojas de las plantas xer otas le nosas son modelo para el estudio de la plasticidad fenot pica por sus respuestas siol ogicas, morfol ogicas y anat omicas. Los valores de las tasas fotosint eticas, de la conductividad hidr aulica, as como el movimiento foliar y la relaci on supercie/volumen acoplada a modicaciones anat omicas, son expresiones fenot picas que experimentan ante la alta radiaci on solar, las temperaturas contrastantes, humedades relativas muy bajas y el d ecit h drico del suelo. La importancia de la plasticidad fenot pica en las plantas le nosas radica en que puede incrementar la probabilidad de la persistencia de una poblaci on a trav es del tiempo pues permite ajustes inmediatos de acuerdo con la variaci on ambiental. Esto implica que las especies pueden extender el rango geogr aco donde habitan debido al incremento del n umero de h abitats tolerables. Palabras clave: Plasticidad, fenotipo, hoja, anatom a, xer otas.

Antecedentes La ventaja potencial de la plasticidad en los organismos ante la heterogeneidad ambiental se ha descrito desde los a nos 40s. La plasticidad es denida como una variaci on en la expresi on fenot pica del genotipo de un individuo, que ocurre en respuesta a condiciones ambientales particulares y que desarrolla la capacidad de reproducci on y sobrevivencia del individuo dentro de estas condiciones, por lo que puede exhibir un rango de fenotipos a trav es de un gradiente ambiental (Sultan, 2010). La plasticidad fenot pica es expresada en h abitos de crecimiento y tama no, morfolog a y anatom a de estructuras vegetativas y reproductivas, en asignaci on de biomasa absoluta y relativa, en tasas fotosint eticas y de crecimiento y en la fenolog a. Tambi en se expresa en la variaci on estacional, por ejemplo, de la latencia, el h abito caducifolio y/o la presencia de tallos dim orcos, lo que puede ser facultativo en especies perennes, mientras que las anuales frecuentemente tienen fenolog as relativamente estables (Sultan, 2010). En este sentido, el o rgano que m as expresa este fen omeno es la hoja, que puede presentar una amplia plasticidad fenot pica en relaci on con su siolog a y anatom a. Las modicaciones que presentan las hojas de plantas xer otas le nosas son notables, por los ajustes que realizan para no perder agua; estos pueden ser: 1) tasa fotosint etica diferencial en sombra y sol, 2) movimiento foliar y orientaci on, 3) conductividad hidr aulica, 4) modicaciones anat omicas; dichos ajustes est an ordenados de acuerdo al grado de complejidad que involucra una mayor inversi on de recursos por parte de la planta. Por lo que el objetivo de este escrito es dar a conocer la importancia de la plasticidad fenot pica en las plantas le nosas, muy particularmente el papel de las hojas y sus ajustes ante diferentes condiciones y factores ambientales. 1) Plasticidad en la tasa fotosint etica en sombra y sol Dentro de los ajustes siol ogicos que realizan las plantas existen fen omenos que han sido ampliamente reconocidos como el control estom atico, la producci on de hojas de sombra y de sol, y ajustes metab olicos a las diferentes condiciones del medio f sico por las estaciones del a no. Las plantas realizan ajustes del control estom atico bajo condiciones ambientales extremas y uctuantes. La exibilidad de

Plasticidad fenot pica. . . N. Flores H., A. Quintanar I., A. Jaramillo P. y C. P erez O.

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la respuesta fotosint etica de acuerdo a las condiciones de luz y temperatura ocurre en muchas especies e individuos (Gianoli, 2004). En las sucesiones ecol ogicas las especies pioneras son particularmente pl asticas en sus respuestas siol ogicas, ya que cuando crecen bajo la sombra presentan puntos de compensaci on a la luz y tasas fotosint eticas bajos; asimismo son capaces de responder r apidamente a un incremento de los recursos disponibles presentando altas tasas fotosint eticas y de crecimiento dentro de condiciones o ptimas. En este sentido, las plantas debajo de doseles abiertos producen hojas de sol que se caracterizan por presentar tasas fotosint eticas altas, as como puntos de saturaci on y compensaci on a la luz elevados; as mismo las plantas debajo de doseles cerrados producen hojas de sombra que compensan la luz en puntos muy bajos, la saturaci on ocurre a una tercera parte de la intensidad luminosa de la saturaci on que presentan las hojas de sol, y la tasa fotosint etica es muy baja. 2) Plasticidad en el movimiento foliar y orientaci on En Australia muchas especies del g enero Eucalyptus producen hojas que muestran cambios en el mes olo y modicaci on de los a ngulos de hoja hacia la vertical que son producidos a trav es del desarrollo ontogen etico bajo la inuencia de ambientes estresantes. Estos cambios en la anatom a y morfolog a de las hojas en diferentes estados de vida de los eucaliptos muestran la plasticidad de la especie y puede llegar a ser una adaptaci on ante el incremento del d ecit h drico que experimentan estas especies desde los estados de pl antulas hasta adultos. Por otro lado, Smith et al. (1998), estudiaron una asociaci on entre la orientaci on de las hojas y su estructura en plantas perennifolias de comunidades vegetales distribuidas a lo largo de gradientes de humedad y radiaci on en comunidades Australianas. Ellos observaron que conforme se incrementa el estr es h drico y la radiaci on, la orientaci on de las hojas tiende a ser vertical, y la anatom a corresponde a un tipo equifaciado de c elulas en empalizada en ambas caras. Esta situaci on es vital para entender como estas plantas se allegan de recursos h dricos, como los conservan y producen biomasa. El movimiento foliar se clasica en dos tipos: diaheliotr opicas y paraheliotr opicas. Las hojas diaheliotr opicas realizan movimientos que permiten a la l amina foliar estar orientada perpendicularmente a

los rayos del sol, por lo que reciben una alta radiaci on relativamente constante a lo largo del d a etiinuyendo en el incremento de la tasa fotosint ca, pues al t ermino de un d a pueden recibir hasta 50 % m as radiaci on que cualquier otra hoja horizontal que no presente este movimiento y 35 % m as radiaci on que las hojas paraheliotr opicas (Ehleringer y Werk, 1986) (gura 1). Un claro ejemplo del movimiento diahelitr opico es el Cascabelillo (Crotalaria juncea), especie tropical originaria de la India y estudiada por Ferrarotto y J auregui (2008). Las autoras mencionan que las hojas simples de esta especie presentan un movimiento que las orienta en posici on horizontal durante el d a y por la noche hacia una posici on vertical exhibiendo su supercie abaxial. Tambi en este tipo de movimiento es muy importante en plantas anuales, ya que estas deben completar su ciclo de vida antes de que las condiciones h dricas se vuelvan desfavorables. En este sentido, el 75 % de las especies anuales de verano del desierto sonorense presentan movimiento diahelitr opico (Ehleringer y Werk, 1986). En las hojas paraheliotr opicas la l amina foliar se orienta paralelamente a los rayos del sol, se minimiza la intercepci on de la radiaci on solar, este movimiento foliar evita da nos en la l amina causados por la intensa radiaci on incidente a lo largo del d a, sobre todo en aquellas hojas de tama no peque no o lobuladas (Ehleringer y Werk, 1986) (gura 1). Un ejemplo claro es el caso del Soc on (Alvaradoa amorphoides) (Jaramillo-P erez, 2011). Alvaradoa amorphoides es una especie tropical de hojas compuestas que se distribuye generalmente en ambientes de selva baja caducifolia, utiliza el movimiento paraheliotr opico como una estrategia que le permite disminuir considerablemente la incidencia de luz por unidad de a rea foliar, pues con ello se regula la temperatura de la hoja y se retrasa la p erdida excesiva de agua por evapotranspiraci on (JaramilloP erez, 2011). Adem as de los movimientos foliares ya citados, existen modicaciones de los a ngulos de las hojas a la vertical y orientaciones no aleatorias de la l amina de la hoja. Estas modicaciones de los a ngulos a la vertical evitan la radiaci on directa y la orientaci on espec ca inuye sobre la cantidad de radiaci on, donde el pico de radiaci on est a relacionado con los efectos en la temperatura de la hoja, fotos ntesis y p erdida de agua. El principal efecto de una

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orientaci on Este-Oeste es que la mayor a de la radiaci on solar que capta la l amina es recibida temprano en la ma nana y al atardecer, aunque la radiaci on al medio d a es marcadamente reducida. Por lo tanto las plantas pueden estar m as activas durante los periodos del d a cuando el gradiente de vapor de agua es bajo, esto puede reducir signicativamente la p erdida de agua y a la vez no se limita severamente la fotos ntesis (Ehleringer y Werk, 1986) (gura 1).

ta el riesgo a la cavitaci on por embolismos por d ecit nteh drico. La jaci on de CO2 en plantas con fotos a estrechamente relacionada con la disposis C3 est nibilidad h drica y la temperatura, ya que existe una erdirelaci on directa entre la jaci on de CO2 y la p da de agua por transpiraci on. De esta forma, cuando la p erdida del agua en las hojas es mayor a la absorbida por las ra ces se crea un d ecit h drico en la planta (Pallardy y Kozlowski, 2008). En condiciones de d ecit h drico, la plasticidad fenot pica se puede manifestar a nivel de la arquitectura hidr aulica del sistema conductor de agua, que inuye en la cantidad de ujo m asico de agua que llega a las hojas, lo que afecta los potenciales h dricos en la hoja, el comportamiento estom atico y el intercambio gaseoso, por lo que un par ametro eciente para describir la arquitectura hidr aulica es la conductividad hidr aulica. La conductividad hidr aulica (Kh ) se dene como la raz on entre el ujo a trav es del segmento de tallo y el gradiente de presi on causante del ujo expresado como: kh = F ( dP dx )

Figura 1: Radiaci on fotosint eticamente activa entre 400 y 700 nm incidente sobre cuatro tipos de hoja a lo largo del d a (Ehleringer y Werk, 1986). Como ya se mencion o, estas modicaciones de las hojas a la vertical y las orientaciones de las l aminas foliares est an asociados a modicaciones estructurales de la hoja. 3) Plasticidad en la conductividad hidr aulica La fuerza motora del ascenso del agua en las plantas es la diferencia de presiones que se establece entre el agua del suelo y la de la atm osfera. Dentro de la planta, tambi en existe un gradiente de presi on de agua de las ra ces y de las hojas, lo que conlleva un ujo m asico desde la parte basal a la distal. Las plantas aumentan la conductividad de los tallos por unidad de gradiente de presi on aumentando la porosidad del xilema que a su vez se reeja en el aumento del n umero y di ametro de los elementos de vaso, sin embargo al aumentar los di ametros de los elementos de vaso tambi en se incremen-

Donde F = ujo y (dP/dx) = gradiente de presi on que ocurre dentro de un segmento de tallo de longitud determinada a trav es del cual uye el agua. an denidos por la disponiLos valores de Kh estar bilidad de agua en el suelo, por la humedad relativa de la atm osfera y por la condici on de apertura-cierre de los estomas. En Alvaradoa amorphoides, una especie de selva baja seca, se ha visto que en un mosaico de diversos tipos de suelos y pendientes dentro de la misma ladera, los individuos pueden ajustar sus valores hidr aulicos, incrementando la Kh hacia los m as arcillosos con pendientes de menor inclinaci on y decrement andolo hacia los m as pedregosos y m as inclinados. El sistema radicular se expande m as en el primero y el segundo caso profundiza (Jaramillo-P erez, 2011). 4) Plasticidad en las modicaciones anat omicas Las hojas de las plantas le nosas son vitales para su crecimiento y desarrollo puesto que es el u nico lugar donde se lleva a cabo la fotos ntesis. La hoja t pica de las dicotiled oneas est a compuesta por una l amina soportada por un peciolo y en el interior de la l amina se encuentran b asicamente tejidos

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Figura 2: Corte transversal de una hoja de Rosa Laurel (Nerium oleander). fotosint eticos, de conducci on y espacios intercelulares en los que se forma la interfase l quido-vapor de agua, lo que constituye el mes olo, que se encuentra limitado por la epidermis superior e inferior (Pallardy y Kozlowski, 2008) (gura 2). Las c elulas epid ermicas de la hoja est an arregladas de manera compacta y cubiertas hacia el exterior por una cut cula, constituida por ceras y cutina, que ayudan a reducir la p erdida de agua. En la epidermis se presentan los estomas que pueden localizarse a ambos lados de la hoja y en general son m as abundantes en la parte inferior, los estomas est an rodeados por c elulas especializadas denominadas c elulas guarda (Pallardy y Kozlowski, 2008). El mes olo est a formado por tejido parenquimatoso fotosint etico de tipo empalizada y esponjoso que contiene abundantes cloroplastos. Generalmente el par enquima en empalizada se localiza en la parte superior de la hoja y el esponjoso en la inferior. Entre estos tipos celulares principalmente en el esponjoso, se aprecia un gran volumen de espacios intercelulares, los que se conectan con la atm osfera al abrirse los estomas. De esta manera se facilita el r apido intercambio de gases, que se traduce en cierta eciencia fotosint etica. Las c elulas del par enquima en empalizada tienen forma columnar donde sus ejes m as largos son orientados en a ngulo recto respecto a la epidermis y las c elulas del par enquima esponjoso tienen forma irregular. Aunque el par enquima en empalizada aparece m as compacto que el tejido esponjoso la mayor a de las paredes verticales de estas c elulas est an expuestas al espacio a ereo intercelular. En algunas hojas los pisos de empalizada pueden presentarse multiestraticados, lo que resulta en mayor densidad de cloroplastos comparado con la zona esponjosa. La mayor parte del mes olo est a irrigado por tejido vascular conformado por haces vasculares de oema y xilema, que vienen del sistema vascular del tallo que es un continuo con el sistema vascular de la ra z. En la mayor a de las hojas de dicotiled oneas la irrigaci on vascular ocurre desde un eje longitudinal a trav es de una vena central (nervadura central) que se ramica en venas de menor calibre, dispuestas peridermalmente en forma de red de manera reticulada. La variaci on en la estructura de la hoja de las angiospermas, espec camente de dicotiled oneas, est a estrechamente relacionada al h abitat y en especial con la disponibilidad de agua, que es un factor determinante en la expresi on de la forma y la funci on. En este sentido y considerando tanto los requerimientos h dricos y las adaptaciones de las plantas, los tipos de hojas se clasican en: 1) hidr otas cuando las plantas dependen de grandes cantidades de agua o crecen parcial o completamente

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Figura 3: Corte transversal de una hoja de Ambros a (Ambrosia salsola). sumergidas en ella, 2) mes otas cuando el requerimiento de agua es abundante y la humedad relativa del ambiente es alta, 3) xer otas que corresponde a plantas que est an adaptadas a un clima seco y la mayor parte del tiempo est an expuestas a radiaciones altas, es decir, condiciones t picas de ambientes aridos. Bajo las condiciones antes descritas, las hojas presentan considerables modicaciones en las caracter sticas morfol ogicas y anat omicas (Tabla 1). Un caso interesante que puede considerarse como extremo debido al d ecit h drico que ocurre entre el suelo y la atm osfera es el de las plantas xer otas ya que las mayores modicaciones se presentan en la hoja, como la reducci on de su supercie y un incremento proporcional de su volumen foliar. Un ejemplo de esto es Ambros a (Ambrosia salsola), especie de fenolog a caducifolia, t pica de los lechos secos de los arroyos en Baja California (Peinado et al., 1994), que presenta hojas monofaciadas, es decir, s olo expone una supercie foliar. La gura 3 representa este tipo de hoja, en la que se que se aprecia la distribuci on de los estomas en dicha supercie. Por otro lado tambi en puede ocurrir que la epidermis e hipodermis presenten paredes gruesas, cubiertas por una densa cut cula cerosa, derivados epid ermicos (gura 4) y par enquima fotosint etico u nicamente de tipo empalizada. Existe un tipo de hoja con modicaciones extremas para evitar al m aximo la p erdida de agua y considerando su persistencia en el tallo, se caracteriza en especies pertenecientes a tipos de vegetaci on como los matorrales xer olos. Las hojas escler olas son com unmente descritas como hojas duras, en cambio las suaves son denominadas malac olas. Las primeras, son resistentes a las fracturas y su consistencia se debe a la presencia de una cut cula gruesa, con c elulas epid ermicas de paredes engrosadas, fuerte lignicaci on o esclericaci on de las paredes de las c elulas del xilema y de los m argenes de la hoja. Esta deposici on de lignina, involucra un incremento en la proporci on del grosor de la pared celular vs. Citoplasma que se traduce en un incremento de masa por a rea foliar (Onoda et al., 2011). Existen diferencias anat omicas distintivas de las hojas dentro de comunidades de plantas de hojas escler olas. Por una parte se encuentran las especies de ambientes mediterr aneos con mes olo compacto forolo por par enquima en empalizada y por otra mado s parte las especies escler olas de los tr opicos h umedos que presentan mes olo con zona esponjosa consistente y frecuentemente con presencia de hipodermis (Onoda et al., 2011). Las hojas escler olas son generalmente peque nas, y relativamente gruesas, por la presencia de cut cula gruesa, hipodermis o epidermis multiestraticada que puede contener cristales de diversos tipos; mes olo de par enquima empalizada formado por varios estratos que contienen a los haces vasculares. Esta esclerolia esta frecuentemente asociada con otras caracter sticas morfol ogicas, qu micas y siol ogicas de la planta; como son las tallas peque nas, bajas concentraciones en el contenido de algunos nutrien-

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Tabla 1. Caracter sticas anat omicas de las hojas bajo condiciones de disponibilidad h drica. Caracter sticas estructurales/Ejemplos Hidr otas Mes otas Xer otas Grosor de la l amina Delgada Mediana Gruesa Supercies foliar Grande Mediana Peque na Epidermis superior a) N umero de capas 1 1 >2 b) Cut cula Delgada Mediana Gruesa Grosor de las paredes celulares del Delgada Regular Gruesa mes olo Hipodermis inferior Ausente Ausente Presente Epidermis inferior a) Grosor de las paredes celulares Delgada Mediana Gruesa b) Tama no de las c elulas superciales Grandes Mediana Peque nas Densidad estom atica Baja Mediana Alta Tama no del estoma Grande Mediano Peque no

Figura 4: Corte transversal de una hoja de Jojoba (Simmondsia chinensis)

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Figura 5: Cortes transversales de hojas de Eucalyptus globulus, E. grandis y E. camaldulensis de diferentes condiciones de disponibilidad lum nica (Guarnaschelli et al., 2009). tes y generalmente son de vida prolongada, es decir perennifolias. La gura 4 muestra la anatom a de la hoja equifaciada de Jojoba (Simmondsia chinensis) con cut cula muy gruesa, epidermis multiestraticada conteniendo drusas en las c elulas m as superciales, estomas hundidos y par enquima en empalizada relativamente compacto en la cara adaxial y abaxial. Esta especie forma parte de los taxones xerof tico-mexicanos registrados en la vegetaci on de Baja California (Peinado et al., 1994). Las especies escler olas de las vegetaciones de zonas mediterr aneas, son sometidas a estr es h drico severo por lo que la esclerolia es interpretada como una adaptaci on a la sequ a. En estas especies las hojas se caracterizan por ser perennifolias, compactas, peque nas y fuertemente cutinizadas (guras 3 y 4). Las hojas escler olas pueden soportar grandes modicaciones en el estatus h drico interno o bien en el potencial h drico y a su vez manifestar peque nos cambios en el volumen celular, generando as un gradiente de movimiento de agua del suelo hasta la hoja. Aunque se han expuesto claros ejemplos de la variaci on anat omica de la hoja que algunas especies expresan de acuerdo a las condiciones h dricas en la cual se desarrollan, tambi en es importante mencionar las modicaciones anat omicas de las hojas que ocurren entre individuos de la misma especie, como parte de la manifestaci on de esta plasticidad fenot pica. Tal es el caso del trabajo de Guarnaschelli et al. (2009), quienes describen que al disminuir la disponibilidad lum nica, las plantas de la misma especie mostraron cambios asociados a la aclimataci on a la sombra. Registraron incremento en el a rea foliar y decrementos en el espesor de las hojas, de la epidermis, del par enquima en empalizada y en la densidad de estomas. La biomasa foliar y la biomasa total disminuyeron signicativamente en la condici on de sombra al 75 % (gura 5). Importancia de la plasticidad fenot pica La importancia de la plasticidad fenot pica en las plantas le nosas radica en que puede incrementar la probabilidad de la persistencia de una poblaci on a trav es del tiempo y permite que se realicen ajustes inmediatos cuando ocurre alg un cambio a corto plazo en el ambiente. Esto implica que las especies pueden extenderse en un rango geogr aco amplio e incrementar su tolerancia a otros h abitats (Gianoli, 2004). Esta tolerancia que da origen a una amplia distribuci on ecol ogica, como resultado de la exibilidad siol ogica y morfol ogica, indica que la plasticidad fenot pica puede ser un importante componente en la adecuaci on de la poblaci on, as como en su persistencia (Sultan, 2010). La plasticidad fenot pica que puede ser considerada como adaptativa, es una forma alternativa para que los organismos se adapten a sus ambientes, esta adaptaci on ocurre a trav es del desarrollo y siolog a del individuo as como en el cambio de las frecuencias g enicas de la poblaci on, dando como resul-

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tado adem as de la distribuci on ecol ogica, una diversidad de genotipos individuales y por lo tanto patrones de diversicaci on en las especies (Sultan, 2010). La plasticidad fenot pica permite entender el valor adaptativo de los caracteres morfol ogicos, anat omicos y siol ogicos para explicar la presencia de especies en rangos geogr acos amplios o reducidos. Bibliograf a 1. Ehleringer, J. R. y Werk, K. S. Modications of solar-radiation absorption patterns and implications for carbon gain at the leaf level. En On the economy of plant form and function; Givnish, T. J. Ed.; Cambridge University Press, USA. 1986. 2. Ferrarotto, M. y D. J auregui. Relaci on entre aspectos anat omicos del pec olo de Crotalaria juncea L. (Fabaceae) y el movimiento n astico foliar. Polibot anica, 26, pp. 127-136, 2008. 3. Gianoli, E. Plasticidad fenot pica adaptativa en plantas. En: H. M. Cabrera, Ed.; Fisiolog a Ecol ogica en Plantas. Editorial de la Universidad Cat olica de Valpara so, Chile. pp. 13-26, 2004. 4. Guarnaschelli1, A. B., Mantese, A. I. y Battaglia, A. Cambios anat omicos y morfol ogicos en pl antulas de Eucalyptus sp. en respuesta a diferentes niveles de luz. Bol. Soc. Argent. Bot. 44[3-4] pp. 273-285, 2009. 5. Jaramillo-P erez, A. T. Anatom a foliar funcional de Alvaradoa amorphoides Liebm. (Picramniaceae) del Estado de Morelos. Tesis de Maestr a. Universidad Aut onoma Metropolitana. 129 pp., 2011. 6. Onoda, Y., Westoby, M., Adler, P. B., Choong, A. M. F., Clissold, F. J., Cornelissen, J. H. C. et al. Global patterns of leaf mechanical properties. Ecol. Lett., 14, pp. 301-312, 2011. 7. Pallardy, S. G., y Kozlowski, T. T. Physiology of woody plants, 3rd ed. Elsevier. Amsterdam. 2008. 8. Peinado, M. C. Bartolome, J., Delgadillo y Aguado I. Pisos de vegetaci on de la sierra de San Pedro M artir, Baja California, M exico. Acta Bot anica Mexicana, 29, pp. 1-20, 1994. 9. Smith, W. K., Bell, D. T. y Shepherd, K. A. Associations between leaf structure, orientation, and sunlight exposure in ve western australian communities. American journal of Botany, 85[1], pp.56-63, 1998. 10. Sultan, S. E. Plant developmental responses to the environment: eco-devo insights. Current Opinion in Plant Biology, 13, pp. 96-101, 2010.

Glosario Abaxial. La supercie m as alejada del eje principal u orientada hacia la base de la planta: el env es. Adaxial. La supercie m as cercana al eje principal u orientada hacia el a pice de la planta: el haz. Ontog enesis. El estudio del desarrollo de un organismo individual, desde el cigoto hasta su muerte. Diaheliotropismo. Respuesta de la l amina foliar a deponerse perpendicularmente a la direcci on de los rayos solares. Eciencia fotosint etica. Es la eciencia con la que se usan los electrones en la fotos ntesis por cantidad de luz absorbida. Equifaciado. Hoja cuyo mes olo presenta una estructura especular. Fenotipo. Rasgos observables de un organismo que resultan de las interacciones entre el genotipo y el ambiente. Fotos ntesis C3 . Proceso que tiene lugar durante el d a en las plantas verdes, que da como resultado la construcci on de compuestos org anicos a partir de compuestos inorg anicos usando luz solar, H2 O y CO2 e involucrando al a cido 3 fosfoglic erico que es un compuesto de tres carbonos. Monofaciado. Hoja cuyo mes olo no presentan diferencia clara entre el haz y el env es. Paraheliotropismo. Respuesta de la l amina foliar a disponerse paralela a la direcci on de los rayos solares. Plantas xer otas. Vegetal adaptado a vivir en climas secos. Plasticidad adaptativa. Plasticidad fenot pica que incrementa la adecuaci on del genotipo. Plasticidad fenot pica. Intervalo de fenotipos que un solo genotipo puede expresar como una funci on de su entorno. Punto de compensaci on. Compensaci on de la intensidad lum nica o de la concentraci on de di oxido de carbono para igualar la velocidad de fotos ntesis vs. la de respiraci on. Punto de saturaci on. Es el valor m aximo de la fotos ntesis.
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Recibido: 24 de mayo de 2012. Aceptado: 31 de octubre de 2012. Abstract In an anecdotic manner in this article, the scholastic and familiar life of Agnes Pockels in related. During the second half of the 19o century , Agnes studied surface phenomena of common liquids and solutions found in her kitchen area . Without a formal research training, never been in an investigation environment, only with her brothers advise, she was able to design a rudimentary instrument to measure the surface tension of water. Resumen En este art culo se presentan aspectos de la vida y ambiente en el que vivi o su juventud y vida adulta en Alemania, la notable investigadora Agnes Pockels. Su vida transcurri o entre los siglos XIX y XX. Su curiosidad cient ca se centr o en los fen omenos naturales, especialmente aquellos que vio d a con d a alrededor de sus actividades dom esticas. Su inter es por la F sica, la Qu mica y las Matem aticas siempre fue estimulada por su padre y su hermano. Su trabajo la llev o a estudiar los fen omenos de supercie en sistemas como el agua, las disoluciones de jabones, aceites y otros l quidos que usaba en su cocina, a la que convirti o en su Laboratorio. Palabras clave: tensi on, supercial, liquidos, balanza. Agnes Pockels dise no y prob o en su laboratoriococina un instrumento con el cual se pudo medir por primera vez la tensi on supercial del agua. A edad avanzada fue reconocida en el mundo acad emico de la Europa de las primeras d ecadas del siglo XX, aunque nunca pas o por la Universidad. Agnes es un chica inteligente y responsable, pasa la ma nana y parte de la tarde en la escuela secundaria para ni nas y j ovenes a la que asiste. Despu es de sus clases regresa a casa, se prepara para las m ultiples tareas que le esperan, la mayor a de estas actividades tienen relaci on con los cuidados que ella tiene que prodigar a sus familiares. Una madre enferma nerviosa y d ebil, un padre de car acter rme muy disciplinado, educado al severo estilo militar y un hermano menor que ella por tres a nos, el chico es propenso a contraer enfermedades respiratorias, de h gado, tambi en sufre de carbunclo, pero tambi en sufre de frecuentes achaques y resfriados.

En estas circunstancias el apoyo de Agnes a la persona enferma en turno es siempre necesario, se dir a que es indispensable ya que solo ella sabe como tratar a cada miembro de la familia. Cuidarlos y curarlos para que la recuperaci on llegue pronto y as pueda la familia seguir adelante con sus actividades en la comunidad de la ciudad de Brunswick, Sajonia, donde viven a gusto, pues tienen un buen nivel econ omico. Hace casi dos a nos que la familia lleg o a la ciudad, en ella se han acomodado bastante bien, pues la vida es tranquila, estimulante, con una vida social moderada, la ciudad est a bien organizada as que la vida uye de manera regular casi predecible, sin llegar a la monoton a, en pocas palabras el ambiente es muy al estilo germano. Los dos hijos de esta familia, Agnes y Fritz siempre han destacado en sus clases, pues son alumnos de car acter, vivaces, tienen los dos una clara inteligencia, as como la constancia y disciplina que su padre ha sabido inculcar en ellos desde los primeros a nos de la infancia. Las calicaciones de ambos adolescentes siempre son buenas, esas notas altas los colocan entre los primeros lugares de sus grupos. Agnes se interesa por las Ciencias Naturales, la F sica es su primera elecci on, sin embargo la Quimica tambi en le atrae mucho, pues como ella dice a sus padres y amigos de la familia, los conceptos de mol eculas, compuestos y mezclas de esta ciencia los puedo identicar en las actividades dom esticas, en los paseos y en viajes cortos de vacaciones de verano, en las tareas diarias alrededor de su casa, en la escuela tambi en descubre a la Ciencia Quimica. En cambio, su hermano Fritz siempre ha mostrado una inclinaci on clara por las Matem aticas y la F sica. Los dos j ovenes se comunican muy bien, les gusta resolver problemas dif ciles de Algebra, hacer operaciones aritm eticas mentales. En sus reuniones vespertinas, el c alculo diferencial e integral los tiene muy ocupados, es su pasi on matem atica de todos los d as. Como vemos los dos hermanos tienen mucho en com un, pues platican mucho. Cada tarde informan las peripecias del d a ocurridas en sus colegios, para terminar siempre con la pregunta cl asica, Cu al es la tarea para ma nana? Cu antos problemas deben resolver para la clase de a lgebra? Los podr an discutir juntos cuando terminen los quehaceres de la co-

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Figura 1: Escuela preparatoria municipal para mujeres Brunswick.

cina, despu es subir an para acompa nar a mam a, pues dice Agnes que se siente muy agotada hoy. Muchas son las medicinas que Agnes tiene que administrar a sus padres, como las p ldoras para la tos, estas son para pap a pues esta molestia no lo deja en paz durante las estaciones fr as. Los accesos de tos lo secuestran de tiempo en tiempo, los eventos son prolongados y ruidosos, lo cual preocupan mucho a los otros miembros de la familia. La condici on bronquial del padre fue adquirida en Venecia, donde pasaron varios a nos, siempre protegidos bajo los cuidados del Capit an Pockels, qui en fu e ocial de la Armada Austriaca, su batall on estuvo estacionado en Italia. En esa regi on nacieron sus dos hijos Agnes y Fritz. Por aquellos a nos la enfermedad conocida como Malaria azot o la regi on del norte de Italia donde ellos viv an y dej o muchos enfermos cr onicos, que con dicultad se recuperaban a lo largo de sus vidas. Agnes est a siempre alegre, ella es el u nico miembro sano de su familia, su condici on f sica es la de una joven fuerte, con una clara conciencia de sus deberes como hija y estudiante. Adem as se ha convertido en la segunda y muy joven ama de casa. A ella acuden todos cuando se trata de solucionar o decidir algo sobre las compras de la semana, los asuntos pendientes, como el mantenimiento de la casona de la familia, especialmente se ocupa de lo que tiene que ver con consultas m edicas, ordenar recetas, as como la puntual dosicaci on de los f arma-

cos a todos los miembros de la familia que los necesitan, ya que como hemos dicho, desafortunadamente siempre hay enfermo en casa. Por esta raz on Agnes se ha acostumbrado a hacerse cargo de muchos asuntos en la casa, dejando de lado sus intereses cient cos y su proyecto de asistir a la Universidad. Su curiosidad por los fen omenos naturales, como los que se ven todos los d as en casa, va m as all a de lo ordinario entre las j ovenes de su edad. Ella es una cient ca en potencia. Para Agnes sus momentos felices del d a los encuentra cuando su jornada de ama de casa termina. Cuando todo queda en calma entonces se re une con Fritz para revisar su tarea escolar y discutir los temas matem aticos y de ciencias naturales que a los dos les cautivan. Hacia las primeras horas de la noche, en el inclemente invierno alem an los dos hermanos-amigos, sentados uno frente al otro en una mesa de trabajo que se encuentra en el estudio del segundo piso, la cercan a a la chimenea los mantiene en un ambiente grato. Ellos bromean, se comunican bien, discuten largamente sobre los problemas de matem aticas, que tanto les gustan, especialmente a Fritz. Los a nos han pasado, las labores dom esticas para Agnes parece que nunca terminan. En estos d as siente que nunca habr a tiempo para hacer las medidas de las tensiones superciales de los l quidos m as comunes en su cocina.

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Piensa que los experimentos necesarios para conocer el comportamiento de los uidos, que siempre ha querido realizar, se posponen una y otra vez por falta de tiempo o de un ambiente cient co propicio para llevarlos acabo. Algo que ocurre cotidianamente, pero que la chica cient ca en ciernes hace con gran cuidado es el lavado de la vajilla y los utensilios que se usan para cocinar como: platos, cucharas, cuchillos, cacerolas y ollas, est an todos como cada noche semicubiertos por grasa as como por algunos residuos de comida, crema y otros l quidos dif ciles de eliminar. La joven se pregunta C omo es que al contacto con el agua jabonosa los platos otra vez se ven brillantes? C omo act ua la lej a en este fen omeno de limpieza? Pues de pronto los vasos lucen brillantes muy limpios, al salir de las palanganas donde preparan las disoluciones jabonosas que hacen desaparecer todas la manchas escurridizas de grasas comestibles. Al meditar sobre este fen omeno, Agnes piensa y planea la manera c omo se podr an medir las fuerzas sobre las supercies l quidas. Ella desea conocer, desea entender con claridad que pasa con esas fuerzas cohesivas en la supercie del agua pura, al a nadir un poco de jab on. Tambi en le ha cautivado el entender el efecto que tiene un poco de az ucar en las membranas muy nas, delgad simas que ella imagina y que casi puede captar sobre el a rea supercial del agua contenida en un recipiente que se usa para preparar bebidas calientes. La curiosidad de Agnes por los fen omenos naturales aumenta, muy especialmente por los que ella ve que ocurren en su ambiente cercano, en el jard n como, en los alrededores y su cocina. Algunas tardes de verano cuando el sol empieza a bajar, se le ve caminar a la orilla del tranquilo r o que corre por su vecindario. Al pasear sola, despu es de la cena, ella va observando con detenimiento lo que ocurre sobre la corriente suave, clara y cristalina. Sentada sobre el c esped en un peque no claro, de pronto se acerca mucho hasta casi tocar con la nariz el agua de la orilla, pues desea asomarse sin perturbar los movimientos de los insectos que visitan la poza. Los peque nos voladores se mueven alegres sobre la intercara liquido-aire del charco, apenas sumergidos sin mojar sus peque nas extremidades como otando sobre el agua. Se pueden ver tambi en muchas plantas. Sus hojitas y ores, no parecen retener las gotas de agua que Agnes salpica con cuida-

do para no perturbar la dulce paz que envuelve la escena. As pasa largos ratos muy gratos, en los que parece ausente, sus pensamientos son muchos pues trata de hallar una explicaci on, el por qu e de esas gotitas esf ericas inm oviles adheridas sobre las hojas, en los p etalos de las ores otantes y el follaje. Aparecen varios visitantes voladores, ahora caminan con seguridad, rmes sobre la supercie del agua sin sumergirse en ella, solo empujando sin dicultad a la materia uida que se curva, pero soporta rmemente a varios danzantes de la tarde. La supercie acuosa parece resistirse a la entrada a su interior de objetos min usculos ajenos y animales silvestres. La supercie se puede sentir como una membrana suave y fr agil que envuelve al uido escurridizo. En esos momentos en la mente de Agnes hay interrogantes claras, ser a posible medir aquellas fuerzas diminutas que act uan sobre las mol ecuculas m nimas que forman la corriente de las y part agua. En su camino a casa cuando la oscuridad se nota, va cavilando sobre algunos posibles experimentos caseros. Primero tendr a que dise nar un instrumento con el que pueda medir con buena precisi on lo que ella ha visto que ocurre sobre las supercies l quidas de los estanques y los cuerpos l quidos de su cocina. De regreso en casa, ya instalada en el estudio del segundo piso, se pregunta Cu al ser a la explicaci on f sico-qu mica de lo que observa en su cocina? Al paso de los d as estos cuestionamientos le parecen poco importantes, sin embargo al comentar con Fritz, qui en ahora ya es un avanzado estudiante de matem aticas en la cercana Universidad de Guttimhem, a el esos fen omenos de supercies l quidas le parecen dignos de investigar a fondo. En los nes de semana, Fritz se presenta en la casa familiar, convive con sus padres, su hermana Agnes disfruta mucho de largas conversaciones sobre ciencias naturales. Ella siempre atenta a la charla, va captando lo que su hermano dice, estos nuevos conocimientos los elabora, ordena sus ideas as acumula todo en su mente anal tica. Todo esto le interesa tanto, lo valora, lo integra a sus nuevos conocimientos de la F sica, pero lo m as importante ella va buscando alguna relaci on matem atica que le ayude y permita describir por medio de un modelo, lo que ha observado todos los d as en su laboratorio-cocina.

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Figura 2: Agnes Pockels.

La tensi on supercial ( ) es proporcional al trabajo necesario ( ) para aumentar el a rea(A), = /A As vienen a su memoria los comentarios que Fritz hiciera dos semanas atr as. Los fen omenos de supercies son temas muy poco entendidos ya que los cient cos alemanes no los consideran importantes. Estudiar los problemas de la limpieza de trastos y ropa en el hogar son cosas de mujeres. As las cosas, Agnes Pockels ya se ha propuesto conocer a fondo y poder explicar cient camente los fen omenos relacionados con la limpieza de la casa, as como la formaci on de capas delgadas de l quidos o s olidos que se forman sobre otros l quidos. Un d a de Octubre, cuando el fr o de Oto no se deja sentir, la cient ca dom estica empieza a reunir sus materiales; r usticos instrumentos, sustancias de la alacena todo para el proyecto de supercies e intercaras. El agua muy pura fue obtenida por doble destilaci on bajo sus cuidados, lentejas de lej a, con las que se preparan soluciones jabonosas, que ella puede dosicar con peque nas probetas improvisadas, otras pipetas que consigui o por pedido directo a un taller de vidrio cercano a la Universidad. La muestra de az ucar es muy pura, se consigui o en el almac en de la calle principal de la ciudad, varias sales pur simas de la farmacia local. Tambi en tiene otros l quidos y disoluciones de gran pureza que Fritz

logr o conseguir en los laboratorios de Qu mica con sus amigos de la Universidad. Para iniciar su tarea experimental, Agnes se sienta en la mesa de la cocina aprovechando la luz de la amplia ventana rectangular que mira al jard n trasero de la casa. Con papel, l apiz y sus escuadras de madera, ella empieza los trazos de lo que ser a el dise no de un r ustico y simple instrumento con el que podr an medir las fuerzas invisibles que act uan sobre las supercies de los l quidos y las disoluciones. Est a decidida a registrar esas fuerzas que sostienen a ote a los objetos met alicos que con gran cuidado ha colocado sobre la supercie del agua y de otros l quidos como la glicerina y el benceno. Despu es de un corto tiempo de reexi on, en su mente se dibujan las formas de una balanza peque nita no m nimo. con delicadas pesas met alicas de tama Aunque Agnes sabe que un paquete de pesas estandarizado es u til en los laboratorios de investigaci on, su costo es elevado as que los experimentos planeados tendr an que esperar mejores d as, tal vez algunas semanas, hasta que Fritz regrese a casa con ese marco de pesas que logr o comprar a buen precio, en el barrio universitario. Para medir las tensiones superciales cohesivas, tambi en se necesitar an reglas met alicas bien graduadas, as como una tina poco profunda donde sus muestras liquidas y sus disoluciones en reposo, puedan ser estudiadas con mucha limpieza y precisi on con amoro-

Sobre supercies e Intercaras. Agnes Pockels, Investigadora Dom estica. Joaquin Palacios A.

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so cuidado para lograr repetir las mediciones de la fuerza supercial. Muy a menudo la joven investigadora piensa que su ambiente dom estico, no es el m as propicio para hacer una investigaci on seria, sobre los fen omenos de supercie de los l quidos y s olidos, sin embargo para ella ser a la u nica posibilidad para satisfacer sus anhelos de nuevos conocimientos cient cos. Esa curiosidad que bulle en su mente, la tiene muy entusiasmada. Por otro lado su imposibilidad de asistir a la Universidad por sus deberes familiares hace que al mismo tiempo muchas ideas originales uyan. As recuerda al alegre visitante volador de los jardines, como se acerc o con seguridad a la masa liquida, con un vuelo corto lleg o a la supercie y empez o a moverse, en una especie de danza cl asica, sus peque nas patas delgadas, como astas, no se hunden en el agua y forman una huella poco profunda cada vez que una extremidad se mueve ligeramente, parece que las mol eculas pegajosas se estiran y otras se encogen, y se acomodan, se ordenan, obedecen a las fuerzas intermoleculares de cohesi on que las mantienen ligadas, formando una quasimembrana. Esas son las fuerzas que nuestra investigadora desea cuanticar y que son la causa de fen omenos que por ser tan aparentemente sencillos, de todos los d as, no se antojan como objetos de estudio para los cient cos de verdad. Sin embargo cuanta importancia tendr an las mediciones y los trabajos de Agnes Wilhelmine Louise Pockels despu es de varias d ecadas, cuando las poblaciones de los pa ses crezcan tanto, entonces los conceptos de aseo y limpieza ir an de la mano con la necesidad de mantener tanto la higiene personal como la de los espacios que habitamos, en niveles semejantes a los que piden los m edicos en sus hospitales y cl nicas.

Ha pasado mucho tiempo desde aquel a no de 1891 cuando apareci o en la prestigiada revista cient ca Nature, el primer trabajo de la investigadora dom estica. Esta publicaci on fue apoyada por John William Strutt, Lord Rayleigh. La industria farmac eutica, la de los cosm eticos, y en general la de los productos de limpieza. Los productores de jabones, detergentes, limpiadores, han tomado de las ciencias sicoqu micas explicaciones y leyes para mejorar los procesos de limpieza en el hogar. Algo tan cotidiano y sencillo alcanz o en la mente de Agnes Pockels una racionalizaci on profunda, basada en los modelos sicoqu micos moleculares y leyes f sicas que los rigen. Bibliograf a 1. Derrick, M. Elizabeth., Journal of Chemical Education, 59[12], pp.1030-1031, 1982. 2. Giles, C. H., y Forrester, S. D., Chemistry and Industry. 1971, 43, 1991. 3. Ostwald, W., Koll. Zeit, 58, 1, 1932. 4. Pockels, Elisabeth, Bericht der Oberherssischen Gesellschaft f ur Natur-und Heilkunde, 24, 303, 1949. 5. Rayleigh and Pockels, Nature, 43, 437, 1891.
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Recibido: 14 de junio de 2012 Aceptado: 19 de septiembre de 2012 Abstract Population genetics is a biological discipline that is interested in understanding the mechanisms of evolution and explains patterns of genetic diversity found within and among populations. It tries to formulate mathematical models that explain how the evolutionary forces such as mutation, inbreeding, genetic drift, natural selection and gene ow operate on wild populations. It is supported on ideals populations and the principle of Hardy-Weinberg genetic equilibrium. Through this discipline we can understand the diversity of forms and populations within a species and gives us the basis for developing strategies to promote the conservation of biodiversity Keywords: Hardy-Weinberg equilibrium, genetic variation, Wrights F-statistics. Resumen La gen etica de poblaciones es una disciplina biol ogica que se interesa por comprender los mecanismos de la evoluci on y explicar los patrones de diversidad gen etica que se encuentran dentro y entre las poblaciones. Trata de formular modelos matem aticos que nos expliquen como act uan las fuerzas evolutivas como son la mutaci on, la endogamia, la deriva g enica, la selecci on natural y el ujo g enico sobre las poblaciones naturales. Se basa en poblaciones ideales y en el principio de equilibrio gen etico de Hardy-Weinberg. A trav es de esta disciplina podemos entender la diversidad de formas y poblaciones dentro de una especie y nos ofrece las bases para desarrollar estrategias que promuevan la conservaci on de la biodiversidad. Palabras clave: Equilibro de Hardy-Weinberg, diversidad gen etica, estad sticos F de Wright. Introducci on La diversidad biol ogica o biodiversidad es, en t erminos generales, toda la extraordinaria variabilidad que presenta la vida. Incluye a todos los ecosistemas presentes en la Tierra con la totalidad de los procesos naturales que ocurren en ellos, a las comunidades, a las especies, a las poblaciones que conforman a cada especie, a los individuos dentro de la poblaci on y las diferencias a nivel molecular que se presentan en las mismas. Las variaciones y cambios a nivel molecular se presentan como el produc-

to de los procesos evolutivos que operan sobre la diversidad gen etica a lo largo del tiempo y de ella se deriva el resto de la biodiversidad, por lo que su estudio es de especial importancia (Pi nero et al., 2008). La gen etica de poblaciones es la rama de la biolog a que se encarga de estudiar la cantidad y naturaleza de la variaci on gen etica en y entre las poblaciones que conforman a una especie, los procesos por los cuales se origina y los factores que alteran los patrones de esta variaci on. El conocimiento de la diversidad gen etica tiene aplicaciones de gran relevancia, entre las que se encuentran, evaluar la capacidad de respuesta de las poblaciones y especies ante los cambios ambientales; los riesgos de la p erdida de la diversidad; conocer la riqueza gen etica y su distribuci on geogr aca; planear las estrategias de aprovechaon de poblaciones, especies y remiento y conservaci cursos gen eticos y evaluar los riesgos de introducci on de especies, variedades mejoradas y modicadas gen eticamente sobre las especies nativas (Eguiarte et al., 2007; Pi nero et al., 2008). Como en otras a reas de investigaci on, la gen etica de poblaciones hace uso de un amplio rango de conceptos para poder explicar aquellos procesos que operan sobre la diversidad gen etica y sus consecuencias. Este trabajo tiene como objetivo denir los t erminos m as utilizados en la gen etica de poblaciones de una manera sencilla para que se logre una mejor comprensi on del tema. T erminos b asicos de gen etica La diversidad de caracter sticas morfol ogicas, siol ogicas, bioqu micas y de comportamiento que observamos en los organismos constituyen el fenotipo. Este es el resultado de la expresi on de la informaci on gen etica particular contenida en un individuo, es decir el genotipo y su interacci on con el ambiente. El genotipo se presenta como secuencias de bases nitrogenadas (adenina A, timina T, citosina C y guanina G) que se encuentran de manera alineada en las mol eculas de acido desoxirribonucleico (ADN). Un porcentaje de estas secuencias ordenadas en el ADN (en humanos aproximadamente el 1.5 %) conforman los genes, los cuales contienen la informaci on necesaria para la formaci on de las mol eculas como las prote nas. Cuando el ADN se encuentra asociado a ciertas prote nas (histonas) forma la cromatina, la cual constituye cuerpos liformes llamados cromosomas localizados en el n ucleo de la c elula (N un ez-Farf an y Eguiarte, 1999; Futuyma, 2004).

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La regi on espec ca en los cromosomas ocupada por un gen o un segmento de ADN se denomina locus (cuyo plural es loci). Cada una de las diferentes formas que puede tener un locus se llama alelo. A la combinaci on de alelos de diferentes loci que son transmitidos juntos y que no constituyen secuencias hom ologas (es decir que no presentan un mismo origen) en uno o m as sitios, se le denomina haplotipo. Cuando no existe variaci on al elica en un locus se dice que este es monom orco, y cuando se presentan diversas formas en un locus se dice que este es polim orco (Futuyma, 2004). La existencia de diferentes alelos puede presentarse como resultado de la mutaci on o recombinaci on en el ADN. La recombinaci on es un proceso en el cual se obtiene un nuevo genotipo a trav es del intercambio de informaci on gen etica entre cromosomas y secuencias hom ologas de ADN con dos or genes diferentes. Los procesos evolutivos como la selecci on natural y la deriva g enica, determinar an si estas variaciones pueden persistir o si los individuos que las portan morir an dejando poca o ninguna descendencia y de este modo las poblaciones de una misma especie empiezan a diferenciarse unas de otras (Futuyma, 2004). La mayor a de los animales y muchas plantas presentan dos juegos de cromosomas (uno de origen paterno y otro de origen materno), por lo que son llamados organismos diploides (2n). Organismos como los z anganos de abejas, platelmintos, rot feros, tard grados y anbios, entre otros, que se reproducen por partenog enesis (forma de reproducci on basada en el desarrollo de c elulas sexuales femeninas no fecundadas), as como las algas (en alg un estad o de su ciclo de vida) y las c elulas sexuales (o gametos) solo contienen un juego de cromosomas, es decir, son haploides (n). Sin embargo, existen organismos como algunas plantas y algas, que presentan m as de dos juegos completos de cromosomas, a estos se les conoce como poliploides (Conner y Hartl, 2004). Aunque pueden existir muchos alelos o morfos para un locus, los organismos diploides solo presentan dos alelos. Cuando los alelos son id enticos paocira un locus, se dice que el organismo es hom go para dicho caracter y cuando los alelos en un locus determinado son diferentes, se dice que el organismo es heter ocigo. Existen alelos que s olo pueden expresarse en condici on hom ociga, es decir que si est an presentes en organismos heter ocigos no pue-

den expresarse, a estos alelos se les conoce como recesivos y generalmente se les representa con una letra min uscula (i.e., a, b, c) y aquellos alelos que se expresan tanto en condici on hom ociga como heter ociga se les denomina alelos dominantes y se les representa con una letra may uscula (i.e., A, B, C). A la proporci on de organismos hom ocigos o heter ocigos presentes dentro de una poblaci on, se le conoce como frecuencia genot pica. Mientras que la proporci on de un alelo espec co con respecto al conjunto de alelos totales en una poblaci on se conoce como frecuencia al elica (Conner y Hartl, 2004; Futuyma, 2004). La microevoluci on La microevoluci on es el cambio en las frecuencias g enicas o al elicas que se presenta en las poblaciones a trav es del tiempo. Se han dise nado modelos matem aticos que nos ayudan a entender los proceso evolutivos que ocurren a nivel de las poblaciones (Conner y Hartl, 2004). Un concepto muy utilizado en estos modelos es el de poblaci on mendeliana, la cual se reere a un conjunto de individuos de una misma especie, que presentan altas probabilidades de entrecruzamiento y que por lo tanto comparten una poza o reservorio (pool) g enico. Esta poza g enica es el conjunto de todos los alelos presentes en la totalidad de individuos de una poblaci on (Frankham et al., 2002). La gen etica de poblaciones, se basa en el comportamiento de poblaciones ideales con la nalidad de comprender los mecanismos que pueden producir cambios en las pozas g enicas de una poblaci on. Las poblaciones ideales se caracterizan por ser de gran tama no, estar conformadas por organismos diploides cuya reproducci on se lleva a cabo v a sexual, presentar apareamientos de los individuos al azar y tener generaciones discretas, es decir que no se presenta solapamiento de generaciones por lo cual la progenie no se puede entrecruzar con sus progenitores. Adem as, se establece que todos los alelos tienen la misma oportunidad de pasar a la siguiente generaci on y que no hay entrada ni salida de alelos (Conner y Hartl, 2004; Hedrick, 2005). El Equilibrio de Hardy-Weinberg El Equilibrio de Hardy-Weinberg es un modelo matem atico sencillo que constituye la base de los estudios de la gen etica de poblaciones. Este modelo es muy sencillo, ya que explica la relaci on que existe entre las frecuencias al elicas y las genot picas de una poblaci on ideal considerando tan solo un locus

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con dos alelos (Gillespie, 1998). Este modelo predice a partir de las frecuencias al elicas (p y q), las frecuencias genot picas presentes en una poblaci on; es decir la proporci on de organismos hom ocigos dominantes (D), heter ocigos (H) y hom ocigos recesivos (R). Esta relaci on se representa por la siguiente funci on binomial (Eguiarte, 1986): (p + q )2 = p2 (AA) + 2pq (Aa) + q 2 (aa) Donde p y q representan la proporci on de los alelos en un locus determinado. Siendo p2 la frecuencia del genotipo dominante (AA); 2pq la frecuencia del heterocigo (Aa) y q 2 la frecuencia del recesivo (aa) (Eguiarte, 1986). Seg un este modelo las frecuencias al elicas de una poblaci on ideal se mantendr an constantes a trav es de las generaciones, principio de Hardy-Weinberg, por lo tanto, en estas poblaciones no habr a evoluci on (Conner y Hartl, 2004). Fuerzas evolutivas En las poblaciones naturales a diferencia de las ideales, las frecuencias al elicas no se mantienen constantes o en equilibrio debido a que existen procesos o fuerzas evolutivas que no permiten esta estabilidad. Estas fuerzas evolutivas son: la mutaci on, la endogamia, la deriva g enica, el ujo g enico y la selecci on natural (Conner y Hartl, 2004). La mutaci on, es una fuerza evolutiva muy importante debido a que es la u nica fuente de variaci on gen etica. Es un proceso que ocurre al azar y produce cambios en las cadenas de ADN. Estos cambios pueden deberse a sustituciones (cambios de un nucle otido por otro); inserciones (ganancia de nucle otidos en un locus) y a deleciones (p erdidas de nucle otidos en un locus). Las mutaciones pueden ser neutras (que no tienen ning un efecto en el fenotipo) o producir cambios grandes o sutiles que proveen ventajas o desventajas a los organismos (Conner y Hartl, 2004) (Fig. 1). Las mutaciones s olo tienen consecuencias evolutivas cuando se transmiten a las generaciones posteriores. Por lo general, las mutaciones en la naturaleza son eventos poco frecuentes ya que se presentan en un orden de magnitud entre 106 y 105 mutaciones por gameto por generaci on. Por esta raz on se requiere de mucho tiempo antes de que se puedan detectar cambios en las frecuencias al elicas de una poblaci on debidos a este proceso (Frankham et al, 2002).

Figura 1: Mutaci on al azar, partiendo de una generaci on parental (F0 ) donde solo existen individuos verdes, en su descendencia (F1 ) puede aparecer un nuevo morfo, que se presenta.

La endogamia es consecuencia de la cruza entre individuos emparentados, es un proceso muy frecuente en poblaciones peque nas. No produce un cambio en las frecuencias al elicas pero si lo hace en las frecuencias genot picas, incrementando la frecuencia de los homocigotos y disminuyendo la frecuencia de los heterocigotos de la poblaci on con respecto a las frecuencias esperadas en el equilibrio de HardyWeinberg. Como consecuencia de la endogamia, los organismos pueden presentar reducci on de su sobrevivencia, crecimiento y fertilidad. Adem as se incrementa la mortalidad en los organismos hom ocigos debido a la expresi on de genes delet ereos o letales (Conner y Hartl, 2004; Eguiarte et al., 2007). La deriva g enica es una fuerza evolutiva que genera cambios en las frecuencias al elicas solo por azar. Sus efectos son mayores en poblaciones peque nas, debido a que, por eventos al azar (sin intervenci on de otras fuerzas evolutivas) (Fig. 2), se puede producir cambios en las frecuencias de los alelos, llegando a la p erdida de los alelos menos frecuentes y la jaci on de los m as frecuentes (Fig. 3), lo que da por resultado cambios en el acervo gen etico entre generaciones sucesivas de una misma poblaci on (Frankham et al., 2002). La selecci on natural, es la fuerza evolutiva que m as atenci on ha recibido y es la u nica que produce adaptaciones. Se genera cuando los genotipos presentes en una poblaci on tienen una eciencia o adecuaci on diferencia. La adecuaci on (w), es una medida de la eciencia de un genotipo para dejar descendencia en relaci on a la cantidad de descendencia producida por otros genotipos presentes en la poblaci on (Futuyma, 2004) (Fig. 4). El ujo g enico es el movimiento de genes ya sean nucleares o de genomas uniparentales (como el de la mitocondria o el cloroplasto) entre distintas poblaciones de una especie. Este proceso tiene fuertes efectos homogeneizadores entre las distintas pobla-

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Figura 2: Deriva g enica. Los escarabajos de una poenica de blaci on inicial (F0 ) con una frecuencia g A= 0.75 y B = 0.25, al aparearse al azar produelicen una descendencia (F1 ), con frecuencias al cas diferentes a la original debido a eventos al azar, donde A = 0.71 y B = 0.29. (Tomado de: http://www.sesbe.org/evosite/evo101/IVBMechanisms. shtml.html).

Figura 3: Efecto de la deriva g enica. En la poblaci on inicial de escarabajos, est an presentes dos alelos, los cuales son responsables de la coloraci on verde o coloraci on caf e de los individuos. Eventos al azar, pueden ocasionar que los escarabajos con informaci on verde que eran poco frecuentes se pierdan, dando como resultado una poblaci on con tan s olo individuos con informaci on caf e (Tomado de: http://www.sesbe.org/evosite/evo101/IVBMechanisms. shtml.html).

ciones (Fig. 5). Las poblaciones subdivididas y relativamente aisladas tienden a incrementar la frecuencia de hom ocigos y a disminuir la de heter ocigos, produci endose lo que se conoce como efecto Wahlund. El ujo g enico es un componente esencial para determinar la estructura gen etica de las poblaciones, as como la distancia gen etica entre ellas (Sinnock, 1975; Conner y Hartl, 2004). La estructura gen etica de las poblaciones se dene como la cantidad de variaci on gen etica y su distribuci on dentro y entre las poblaciones de una especie. Cuando existe una gran cantidad de ujo g enico entre poblaciones locales, estas tender an a compartir la misma informaci on gen etica y por lo tanto evolucionar an de manera conjunta. Sin embargo, cuando el ujo g enico est a restringido, las poblaciones tender an a evolucionar de manera casi independiente y su composici on gen etica se ir a diferenciando con el paso del tiempo (Slatkin, 1994). Sewall Wright desarroll o un modelo para cuanticar la estructura gen etica dentro y entre las poblaciones de una especie, utilizando para ello los estad sticos F de Wright: FIS , FST y FIT (Conner y Hartl, 2004) El coeciente de endogamia (FIS ) es la medida de endogamia de los individuos (I) con relaci on a la subpoblaci on a la que pertenecen (S).

El ndice de jaci on poblacional (FST ) mide la reducci on de heterocigosidad originada por la subdivisi on de la poblaci on S con relaci on a la poblaci on total T. El coeciente de endogamia total (FIT ) es la medida de endogamia en los individuos (I), en relaci on con todas las poblaciones o la poblaci on total (T). Weir y Cockerham (1984) desarrollaron un m etodo que no presenta limitaciones en relaci on con el n umero de poblaciones, tama nos de la muestras o frecuencia de heter ocigos y permite hacer comparaciones entre grupos con diferentes estructuras al elicas, a diferencia de los estad sticos F de Wright. A trav es de este modelo se determinan los estad sticos: , equivalente a la FIS ; f , equivalente a FST y F equivalente a FIT . La distancia gen etica, est a determinada por las diferencias en el tipo, cantidad y patr on de variaci on gen etica entre pares de poblaciones de una misma especie. Mediante esta medida se pueden evaluar la divergencia gen etica entre las poblaciones. La distancia gen etica de Nei es el algoritmo m as utilizado para calcular este par ametro (Hedrick, 2005). Medidas de la variaci on gen etica Los par ametros m as utilizados para medir la variaci on gen etica presente en las poblaciones son (Hedrick, 2005; Frankham et al., 2002):

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Figura 4: Selecci on natural ejercida por un ave depredadora sobre una poblaci on de escarabajos. Aquellos individuos de coloraci on caf e que se asemejan al tronco en el que habitan presentan mayor sobrevivencia y reproducci on que aquellos individuos con coloraciones contrastantes con el sustrato, los cuales suelen ser depredados (Modicada de: http://www.sesbe.org/evosite/evo101/IVBMechanisms. shtml.html).

Figura 5: Flujo g enico. Representaci on esquem atica de la llegada de escarabajos de otra poblaci on en la que son m as frecuentes aquellos que portan el alelo caf e, lo que produce un aumento en la frecuencia de alelos caf e dentro de la poblaci on original (Modicada de: http://www.sesbe.org/evosite/evo101/IVBMechanisms. shtml.html).

1. La proporci on de loci polim orcos (P), que es la proporci on de loci que poseen m as de un alelo. Tomando en cuenta varios loci, la proporci on de loci polim orcos, se determina como: = x P m Donde x es el n umero de loci polim orcos en una muestra de m loci. 2. La diversidad al elica (A) est a determinada por el n umero de alelos presentes en cada locus si se trabaja con varios locus, puede determinarse la diversidad al elica promedio. 3. La proporci on de organismos heterocigos presentes en una poblaci on constituye la heterocigosis observada (Ho). Esta heterocigosis se comparada con la heterocigosis esperada en el equilibrio de Hardy-Weinberg (He), con lo cual puede determinarse si las fuerzas evolutivas act uan sobre una poblaci on. La heterocigosis esperada para varios loci se calcula mediante la f ormula:
n

Consideraciones nales En este art culo hemos presentado las bases para el entendimiento de la variaci on gen etica encontrada dentro y entre las poblaciones. Los estudios en este campo de las ciencias biol ogica han sido de gran trascendencia para entender la evoluci on de la vida a nivel intraespec co. A partir de los conocimientos adquiridos a trav es de ella, es posible evaluar la capacidad de respuesta de las poblaciones y especies ante los cambios ambientales y determinar la manera como podemos tratar de conservar la biodiversidad que hemos heredado y la cual es producto de millones de a nos de evoluci on. Bibliograf a 1. Conner K. Jerey, Daniel L. Hartl, 2004. A primer of ecological genetics. Sinnauer, Masachuset, USA. 2. Eguiarte, L.E. 1986. Una gu a para principiantes a la gen etica de poblaciones. Ciencias. N umero especial 1: 30-39. 3. Eguiarte L., LE., V. Souza y X. Aguirre (Compiladores). 2007. Ecolog a Molecular. SEMARNAP, CONABIO, INE, UNAM. M exico D.F. 4986; 251-277; 541-566; 4. Frankham R., J. D Ballou y D. A. Biscoe. 2002. Introduction to Conservation Genetics. Cambridge University Press. England. 5. Futuyma, D. J. 2004. Annual Review of Ecology and Systematics: (Annual Review of Ecology, Evolution, and Systematics). Sinauer Associates, Sunderland, Massachusetts.

HE = 1
1=1

P i2

Donde Pi es cada una de las frecuencias al elicas observadas en cada locus.

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6. Gillespie, J. H. 1998. Population Genetics: A Concise Guide. Johns Hopkins University Press, Baltimore, MD. 7. Hedrick, P. W. 2005. Genetics of populations. Jones and Bartlett Publishers, Boston, MA. 8. N un ez-Farf an, J. & L.E. Eguiarte (editores). 1999. La Evoluci on Biol ogica. CONABIOUNAM. M exico D.F. 9. Pi nero, D., et al. (2008). La diversidad gen etica como instrumento para la conservaci on y el aprovechamiento de la biodiversidad: estudios en especies mexicanas, en Capital natural de M exico, vol. I: Conocimiento actual de la biodiversidad. Conabio, M exico.

10. Slatkin M, 1994. Gene ow and population structure. In: Ecological genetics (Real LA, ed). Princeton, NJ: Princeton University Press. 11. Weir, BS, Cockerham, CC (1984). Estimating FStatistics for the analysis of population structure. Evolution, 38: 1358-1370.

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