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CURSO DE BIOMEDICINA
HEMATOLOGIA CLNICA
Apostila Terico-Prtica
Belo Horizonte
2011
HEMATOLOGIA CLNICA
CONTEDO:
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p. 11
Hematoscopia
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b) Coleta de material
O xito da coleta sangunea depende de vrios fatores, tais como: colhedor bem treinado;
veias do paciente; instrumental utilizado; identificao correta do material (etapa pr-analtica);
tipos de amostras necessrias; relao sangue-anticoagulante; anti-sepsia; tempo de
garroteamento; estancar o sangramento; homogeneizao da amostra e biossegurana.
c) Confeco e colorao dos esfregaos sanguneos
Cabea
Cauda
Corpo
d) Cmara de Neubauer
Utilizada para contagem de clulas em hematologia. dividida em 9 quadrantes idnticos em
tamanho, rea e profundidade e diferentes de acordo com as subdivises.
A
B
C
D
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2) Procedimento
Pipetar 4,0 mL do lquido diluidor em um tubo de ensaio ou frasco pequeno.
Pipetar 0,02 mL (20L) de sangue e transferir para o tubo contendo o lquido diluidor.
Homogeneizar e aguardar cerca de 5 minutos.
Encher a cmara de Neubauer com a soluo, tendo o cuidado de homogeneizar novamente antes
da pipetagem.
Levar a cmara ao microscpio para efetuar a contagem de hemcias. Focalizar com a objetiva de
10x e fazer a contagem com a objetiva de 40x, utilizando o retculo central da cmara de Neubauer.
Fazer a contagem de pelo menos 5 quadrados (1/5 da rea de contagem) e somar as parcelas.
3) Clculos
n Hm / mm3 = 10.000 x Y*
*Y = soma dos 5 quadrados contados na cmara
4) Valores de Referncia
Homem 4.500.000 a 6.000.000 / mm3
Mulher 4.000.000 a 5.500.000 / mm3
Rn
5) Interpretao
Valores aumentados (policitemias)
Diarrias, desidratao, queimaduras, policitemia Vera, cardiopatia crnica, intoxicaes com
lcool etlico ou outras drogas, vmitos profusos, acidose metablica.
Valores diminudos
Anemias, leucemias, aps hemorragias intensas e nas infeces graves.
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2) Procedimento
Pipetar 5,0 mL do lquido diluidor (Drabkin) em um tubo de ensaio.
Pipetar 0,02 mL (20L) de sangue e transferir para o tubo contendo o lquido diluidor.
Homogeneizar e aguardar cerca de 10 minutos.
Fazer um tubo BRANCO apenas com o lquido diluidor e um tubo PADRO com 5,0 mL do lquido
diluidor e 0,02 mL do padro de hemoglobina.
Fazer a leitura em espectrofotmetro, no comprimento de onda de 540 nm.
3) Clculos
[Hb] g/dL = Abs Teste
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Abs Padro
4) Valores de Referncia
Homem 13,5 a 18,0 g/dL
Mulher 12,0 a 16,0 g/dL
Rn
5) Interpretao
Valores aumentados e valores diminudos esto presentes praticamente em todas as condies
que determinam aumento e diminuio das hemcias, respectivamente.
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Preencher um tubo capilar com sangue total, at cerca de 2/3 do seu comprimento.
Limpar a parede externa do tubo capilar com um papel absorvente.
Vedar a extremidade vazia (limpa) com uma massinha ou fech-la no calor.
Colocar o tubo capilar na centrfuga de microhematcrito com a parte vedada voltada para fora,
equilibrando-o com outro tubo.
Tampar a centrfuga.
Centrifugar durante 5 minutos numa velocidade de 3.500 rpm ou superior.
Fazer a leitura do resultado, utilizando a tabela prpria para microhematcrito.
O menisco inferior (hemcias) deve coincidir com a linha zero e o menisco superior (plasma)
deve coincidir com a linha cem. A leitura feita onde ocorre separao entre as duas fases
(interface).
3) Valores de Referncia
Homem 40 a 54%
Mulher 37 a 47%
Rn
44 a 64%
4) Interpretao
Valores aumentados ocorrem quando h hemoconcentrao como nas policitemias, desidrataes,
queimaduras, diarrias e vmitos intensos. Um hematcrito aumentado sugestivo de
macrocitose.
Valores diminudos ocorrem quando h reduo do nmero de eritrcitos, como nas anemias,
leucemias e infeces. Um hematcrito reduzido d idia de microcitose.
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Pipetar 0,4 mL do lquido diluidor em um tubo de ensaio ou frasco pequeno.
Pipetar 0,02 mL (20L) de sangue e transferir para o tubo contendo o lquido diluidor.
Homogeneizar e aguardar cerca de 20 minutos para que haja destruio das hemcias.
Encher a cmara de Neubauer com a soluo, tendo o cuidado de homogeneizar novamente antes
da pipetagem.
Levar a cmara ao microscpio para efetuar a contagem de leuccitos. Focalizar com a objetiva de
10x e fazer a contagem com a objetiva de 10 ou 40x, utilizando os 4 retculos laterais da cmara de
Neubauer (A, B, C e D).
Fazer a contagem de todos os quadrados e somar as parcelas.
3) Clculo
n leuccitos / mm3 de sangue = Y* x 50
*Y= nmero de leuccitos contados na cmara
4) Valores de Referncia
Adultos 4.000 a 10.000 / mm3
Rn 10.000 a 26.000 / mm3
5) Interpretao
Valores aumentados (Leucocitose): ocorrem em associao aos processos inflamatrios,
infecciosos e leucemias. Fisiologicamente temos leucocitose na infncia, gravidez, durante o parto,
durante a digesto, variaes circadianas e aps exerccios fsicos extenuantes.
Valores diminudos (Leucopenia): ocorrem quando h reduo na produo dos leuccitos
(deficincia de vitamina A; depresso dos tecidos leucopoiticos por infeco ou intoxicao; uso
de medicamentos) ou no caso de aumento da destruio celular, provavelmente por anticorpos.
Algumas infeces podem cursar com leucopenia, principalmente de um nico tipo de leuccito:
febre tifide, dengue, rubola, caxumba e tripanossomose.
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A) CONFECO DO ESFREGAO SANGUNEO
Colocar uma gotcula de sangue em uma lmina limpa e seca.
Com o auxlio de outra lmina, colocar a gota de sangue em contato com sua borda, formando um
ngulo de 45, esfregar uma lmina sobre a outra rapidamente, antes que o sangue seque ou
coagule.
Esperar o esfregao secar.
Identificar a lmina pela cabea do esfregao com o auxilio de outra lmina ou lpis.
Fazer a colorao.
B) COLORAO DO ESFREGAO SANGUNEO
Colocar a lmina sobre um suporte de colorao com o esfregao voltado para cima.
Cobrir todo o esfregao com o corante May-Grnwald. Aguardar 2 a 3 minutos.
Aps este tempo, gotejar sobre o corante gua de torneira ou tampo fosfato (pH 7,2). Aguardar 2
minutos.
Desprezar o corante e o tampo.
Cobrir a lmina com o corante Giemsa diludo (Giemsa de uso). Aguardar 12 minutos.
Desprezar o corante e enxaguar a lmina com gua de torneira.
Esperar secar e limpar o verso da lmina com lcool.
Examinar com objetiva de imerso, fazendo a contagem diferencial de 100 leuccitos.
3) Resultado
Expresso em nmero relativo (%) e absoluto (/mm3)
4) Valores de Referncia
Neutrfilos bastonetes (b)
3 a 5%
150 a 400 / mm 3
55 a 65%
Eosinfilos (E)
2 a 4%
100 a 300 / mm 3
Basfilos (B)
0 a 1%
50 a 80 / mm 3
Moncitos (M)
4 a 8%
Linfcitos (L)
20 a 30%
1.500 a 2.500 / mm 3
5) Interpretao
Neutrofilia: frequente nas infeces bacterianas, leucemias, processos inflamatrios.
Eosinofilia: frequente nas parasitoses, processos imunoalrgicos e leucemias.
Basofilia: processos imunoalrgicos e leucemias.
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Monocitose: infeces (septicemia, mononucleose e tuberculose).
Linfocitose: infeces virais agudas e infeces crnicas (tuberculose e sfilis), leucemias,
amigdalites e processos ganglionares.
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AULA PRTICA 06: CONTAGEM DE RETICULCITOS
1) Fundamento
Sangue + corante supravital (Azul de Cresil Brilhante ACB)
2) Procedimento
Pipetar 0,2 mL (200 L) do corante ACB em um tubo de hemlise ou tubo de ensaio pequeno.
Adicionar 0,2 mL (200 L) de sangue total e homogeneizar.
Levar ao banho-maria 37C durante 20 minutos.
Homogeneizar e fazer um esfregao em lmina limpa e seca.
Fazer a contagem de 1.000 hemcias com objetiva de imerso, anotando os reticulcitos
encontrados em cada campo.
3) Resultado
Expresso em % e /mm3
4) Valores de Referncia
Rn at 6%
Adultos 0,5 a 1,5%
5) Interpretao
Reduo da porcentagem: anemias carenciais, aplasias medulares, anemias no-hemolticas.
Aumento da porcentagem: anemias hemolticas, hiperplasia medular, doena hemoltica do recmnascido, hemorragias intensas aps acidentes ou cirurgias.
Impotncia clnica: discriminar entre as anemias hemolticas e no-hemolticas. Verificar a eficcia
do tratamento nas anemias carenciais (crise reticulocitria).
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REFERNCIAS
CARVALHO, M. G.; SILVA, M. B. S. Hematologia Tcnicas laboratoriais e
Interpretao. Belo Horizonte, 1988.
Manual de Exames do Laboratrio Clnico.
LORENZI, T.F. Manual de Hematologia Propedutica e clnica. Rio de Janeiro: Medsi,
2003. 655 p.
ZAGO, M. A. et al. Hematologia Fundamentos e Prtica. So Paulo: Atheneu, 2001.
1081p.