Qumica Orgnica aplicada al estudio de los sistemas biolgicos (Fundamentos de la Biologa qumica), cdigo: 25606 Prof. Vladmir V.

Kouznetsov (LQOBio), escuela de Qumica

Gustavo Adolfo Rodrguez Carreo, cdigo: 2071747

Introduccin

Las Topoisomerasas son enzimas isomerasas que actan sobre la topologa del ADN. La configuracin de doble hlice del ADN les hace "difcil" su separacin, imprescindible si las enzimas estn trascribiendo la secuencia que codifica las protenas, o si los cromosomas se estn replicando. As en el llamado ADN circular en el que los segmentos de ADN son enrollados y juntados en un crculo, los dos "brazos" estn topolgicamente unidos, no pudiendo ser separados por ningn proceso que no incluya la rotura. La topoisomerasa gua y cataliza este proceso. Esta protena endereza la molcula de ADN evitando el superenrollamiento. Tipos de topoisomerasas La Topoisomerasa tipo I corta una hebra y pasa la otra a travs de la primera. La topoimerasa tipo I no necesita ATP. La Topoisomerasa tipo II corta las dos hebras y pasa una doble hebra a travs de este agujero. La topoimerasa tipo II necesita ATP. (Gellert, M. 1981. DNA topoisomerases. Annu. Rev. Biochem. 50:879-910)

La topoisomerasa II es una enzima esencial para la replicacin y transcripcin del ADN, as como para la recombinacin y segregacin cromosmica. Esta enzima hace posible el acceso al ADN mediante rotura y reparacin de la doble cadena. Es la protena homloga a la ADN girasa bacteriana y est constituida por un homodmero de 170 kDa. La

topoisomerasa I acta de forma similar sobre el ADN monocatenario. La topoisomerasa II acta produciendo roturas en la cadena de ADN bicatenario, unindose covalentemente al extremo 5' de la rotura. Las roturas estn sujetas por 4 pares de bases en la cadena opuesta y la protena se une como un dmero. Posteriormente, se produce el paso de la cadena de ADN por la rotura, con cambios en el superenrollamiento y relajacin de la hebra, (este estado se conoce como complejo hendible). Seguidamente, se produce la liberacin parcial de la cadena.

Modos de accin de los frmacos.

Las drogas estabilizan el complejo hendible atrapando a la topoisomerasa II sobre el ADN y matando la clula. Cada tipo de frmaco produce un espectro diferente de complejos hendibles en zonas diferentes del ADN. Casi todos los agentes que inhiben la topoisomerasa aumentan el nmero de enzima asociado a las roturas de la cadena de ADN, aunque esto no siempre se correlaciona con la citotoxicidad ya que las drogas pueden tener otros mecanismos de accin. Parece ser que un mecanismo comn de accin puede ser la inhibicin de la capacidad de la enzima para unir la cadena de ADN cortada.

La muerte celular inducida por la droga antineoplsica es proporcional al nivel de topoisomerasa II; mientras ms enzima hay mayor es la toxicidad. No es sorprendente que la resistencia en algunos modelos experimentales se deba a unos niveles muy reducidos de topoisomerasa II y/o I. La mayor actividad topoisomerasa II en tejidos normales se ha encontrado en timo y bazo. En tumores los valores ms altos se han detectado en cncer de mama y leiomiosarcoma. (Miguel J. Ruiz Gmez, Antonio Souviron y Manuel Martnez Murillo. Resistencia a citostticos mediada por topoisomerasas, Encuentros en la Biologa, ISSN 1134-8496, N. 68, 2001 )

Los frmacos actan de diferente forma sobre la enzima:

1. Existen cuatro familias de frmacos que se conocen como venenos de la topoisomerasa II (epipodopodofilotoxinas, antraciclinas, antraquinonas, acridinas), ya que estos interrumpen el ciclo cataltico de la enzima, mediante la estabilizacin del completo enzima-ADN, esto conlleva al agotamiento de la topoisomerasa, aumentando la duracin del ciclo celular y la mitosis, tambin interfiere con la condensacin de cromosomas y la segregacin de cromtidas hermanas y conduce al fracaso de la divisin celular, ya sea terminando en la muerte celular o la restitucin de las clulas poliploides.

Estos venenos tambin pueden o impedir el rompimiento del ADN o aumentar el mismo e impedir la reparacin de estos, siendo los mismos txicos para la clula cuando hace la replicacin del ADN. Estos daos conducen en la mayora de los casos a la apoptosis o la detencin del ciclo celular en la transicin de las fases G1, S y G2.

2. Uno de los modo de accin de los frmacos, es la funcin de agente alquilante, el cual adhiere grupos alquilos (compuestos pequeos de carbono-ilustrados como tringulos rosados) a las bases del ADN. Esta alteracin resulta en que el ADN sea fragmentado por las enzimas de reparo cuando stas tratan de reemplazar las bases alquiladas. Las bases alquiladas previenen el sntesis del ADN y la transcripcin del ARN- del ADN afectado. (http://www.cancerquest.org/index.cfm?page=486&lang=spanish)

3. la energa con la cual realiza su funcin la topoisomerasa, proviene de la hidrlisis del ATP por parte de la misma, por lo cual algunos frmacos se han diseo teniendo como diana la detencin de dicha hidrolisis.

4. En el momento de la relajacin de la cadena de ADN, se da el proceso de escisin, en el cual la enzima se une al ADN formando un complejo enzima sustrato, catalizando el rompimiento de la cadena, algunos frmacos ayudan a estabilizar el complejo, llevando a una disminucin de la topoisomerasa y posteriormente a la detencin del ciclo celular en la etapa S y G2, en las cuales se lleva a cabo la divisin y replicacin del ADN.

5. Los procesos apoptticos pueden ser activados bien por una induccin negativa como son los daos en el ADN causado por la topoisomerasa, que promueve la escisin de la cadenas de ADN pero no la restauracin de la misma, lo cual genera una acumulacin de fragmento visto por la clula como una alteracin de su ciclo normal; o por una induccin positiva como es el resultado de la unin de un ligando a un receptor, los cuales se encuentran localizados preferentemente en la membrana citoplasmtica, los receptores establecen conexiones con el espacio extracelular y

reciben continuamente seales desde el exterior y de las clulas vecinas, entre los frmacos que generan el proceso apoptticos esta los siguientes:

( JORDN, J. Apoptosis: muerte celular programada. OFFARM, VOL 22 NM 6 JUNIO 2003)