CONTENIDO

INDICE DE
PROTOCOLO..
INDICE DE FIGURAS.
I

INTRODUCCION..

II

OBJETIVOS..

III

HIPOTESIS

IV

REVISION DE LITERATURA.
4.1. Origen del petrleo
4.2. Localizacin del petrleo
4.3. Composicin del petrleo
4.4. Caractersticas fsicas y qumicas del petrleo
4.1. Color

4.2.
Olor..
4.3. Densidad
4.4.
Sabor
4.5. Punto de ebullicin..
4.6. Punto de congelacin..
4.7. Punto de deflagracin
4.8. Punto de quema
4.9. Poder
calorfico..
4.10. Calor
especfico
4.11. Calor latente de vaporizacin.

4.12.
Viscosidad..
4.12.1. Viscosidad relativa.
...
4.12.2. Viscosidad cinemtica..
4.12.3. Viscosidad universal saybolt
4.5. Qu es la biorremediacin?..........................................................
4.5.1. Tipos de biorremediacin.
4.5.1.1. Degradacin enzimtica.
4.5.1.2. Remediacin microbiana
4.5.1.3. Remediacin con plantas (fitorremediacin)..
4.5.1.3.1. Tipos de fitorremediacin..
4.5.1.3.1.1.
Fitorrecoleccin..
4.5.1.3.1.1.1. Fitodegradacin..
4.5.1.3.1.1.2. Degradacin intensificada.
4.5.1.3.1.1.3. Fitovolatizacin..
4.5.1.3.1.2. Fitoextraccin
4.5.1.3.1.3. Rizofiltracin.
4.5.2. Tecnologas de biorremediacin.
4.5.3. Tecnologas de biorremediacin en Mxico
4.6. El reino de los hongos..
4.6.1. Caractersticas de los hongos..
4.6.2. Tipos de hongos.
4.6.2.1. Aspergillus..
4.6.2.2. Trichoderma sp...

V.
MATERIALES Y
METODOS
5.1. Localizacin del rea de estudio.
5.2. Anlisis de
laboratorio
5.2.1. Preparacin de suelos y unidades experimentales..
5.2.2. Tamao de la poblacin.
5.2.3. Porcentaje de degradacin de HTP.
5.2.4. Porcentaje de humedad.
5.2.5. Cuantificacin del metabolismo aerbico del suelo.
VI.
CONCLUSIONES.
VII.
CRONOGRAMA.
VIII.
BIBLIOGRAFIA..
IX.
GLOSARIO
INDICE DE PROTOCOLO
1. ANTECEDENTES.
2. JUSTIFICACIN.
3. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA.
4. MARCO TERICO.
5. METODOLOGA..
INDICE DE FIGURAS
Figura. 1

Ave contaminada.

Figura.2

Yacimientos Estratigrfico.

Figura.3

Yacimientos Anticlinal.

Figura.4

Yacimientos en Falla..

Figura. 5

Diferentes modos de biorremediacin

Figura.6

Procesos de incorporacion de sustancias a las plantas.

Figura.7

Tecnicas de fitorrecoleccin.

Figura.8

Destruccin de contaminantes orgnicos por fitodegradacin......

Figura.9

Fitoextraccin.

Figura.10

Rizofiltracin..

Figura.11

Rizofiltracin de semillas de girasol..

Figura.12 Tecnologas de remediacin para suelos utilizadas en Mxico por

empresas autorizadas. SF: separacin fsica; EV: extraccin de vapores; DT: desorcin
trmica; C: centrifugacin (Fuente: SEMARNAT 2002)..
Figura.13

Mitospora de Aspergillus flavus..

Figura.14

Mitospora de Trichoderma sp..

INTRODUCCION
En el estado de Tabasco se encuentran un sinnmero de sitios con diferentes niveles
de impacto ambiental, resultado de la actividad petrolera de aproximadamente cincuenta
aos. Se debe buscar soluciones tecnolgicas apropiadas para las condiciones
caractersticas de esta zona tropical. En este contexto se debe recalcar el valor de
desarrollar tecnologas de biorremediacin como alternativas para la recuperacin de
ecosistemas y agro-ecosistemas impactados. Es importante que dichas tecnologas
tomen en cuenta las propiedades del trpico, sobre todo las temperaturas elevadas y la
alta precipitacin.
La misma industria petrolera ha empezado investigaciones en esta rea en los
ltimos aos. Petrleos Mexicanos (PEMEX), con ayuda del Instituto Mexicano del
Petrleo (IMP), ha empezado a buscar medidas efectivas en trminos de costo-beneficio
para recuperar algunos de los sitios contaminados ms problemticos en el sureste
mexicano, incluyendo al estado de Tabasco. La biorremediacin es una de las
tecnologas que se estn investigando y est resultando una de las ms prometedoras y
menos costosas. Debido a los datos obtenidos en una evaluacin reciente realizada por
PEMEX y el IMP en Tabasco occidental, actualmente se considera a la biorremediacin
como uno de los medios ms apropiados para la restauracin de muchos sitios
contaminados.

Esta tcnica de biorremediacin consiste en acelerar el proceso natural, para mitigar

la contaminacin ambiental. En otras palabras, se trata del proceso en el que se emplean
organismos biolgicos para resolver problemas especficos medioambientales, como la
contaminacin de suelos y aguas.
En ello juega un papel importante la investigacin cientfica, especialmente en el
descubrimiento de nuevos organismos con mejores capacidades para descontaminar, el
conocimiento profundo de su metabolismo y de las delicadas interacciones que se
producen entre los distintos microorganismos participantes, el agente contaminante y su
entorno.
La biorremediacin se puede utilizar para atacar algunos contaminantes especficos,
como los pesticidas clorados que son degradados por bacterias, o bien, de forma ms
general como el caso de los derrames de petrleo, que se tratan empleando varias
tcnicas, incluyendo la adicin de fertilizantes para facilitar la descomposicin del
crudo ya sea por las bacterias, o por otra clase de organismos como los hongos.
En este caso, nos enfocaremos a la utilizacin de los hongos Aspergilus y
Trichoderma para la biorremediacion de suelos contaminados por hidrocarburos totales
de petrleo (HTP) en el ejido Jos Narciso Rovisora localizado en el municipio de
Huimanguillo, Tabasco, Mxico. Para ello se realizar un anlisis en laboratorio, en el
cual se estudiar y se obtendr el tamao de la poblacin de hongos, el porcentaje de
degradacin de hidrocarburos totales de petrleo, el porcentaje de humedad y la
cuantificacin del metabolismo aerbico del suelo; todo ello para conocer que tan
eficiente son estos hongos al momento de la biorremediacin de dichos suelos.
ANTECEDENTES
En Tabasco es difcil determinar con exactitud la extensin de terreno contaminado
debido a los intereses polticos y econmicos en la regin, la exageracin y confusin
en que se encuentran. En los ltimos aos se ha ido politizando el tema de la
contaminacin y existe toda una industria de la reclamacin. Beltrn en su
investigacin LOS IMPACTOS DEL PETROLEO EN TABASCO (1993), reporta
que hay aproximadamente 7200 ha afectadas, de ellas ms de 90 % est en pantanos o
zonas inundables. Ms recientemente, PEMEX, con apoyo del IMP, ha identificado
aproximadamente 300 ha contaminadas en el estado y 178 presas contaminadas con
desechos aceitosos que estn proyectadas para restauracin. Mucha de esta diferencia se
podra atribuir a la definicin de reas contaminadas, y a los criterios usados para
determinarla. Segn Adams y Olan en su investigaciones EVALUACION DE
PRODUCTOS PARA LA BIORREMEDIACION DE SITIOS IMPACTADOS POR
HIDROCARBUROS DE PETROLEO y la tesis de Lic. En biologa de la Universidad
Jurez Autnoma de Tabasco, ESTIMACION DE CONCENTRACIONES
BENIGNAS DE HIDROCARBUROS ALIFATICOS Y POLIAROMATICOS nos
dicen que la segunda estimacin se acerca ms a la realidad. Con respecto a
contaminacin de acuferos, ha sido poca la preocupacin hasta la fecha. Esto
probablemente se debe a la abundancia de agua que recibe la regin [de aprox. 1600 a
2000 mm precipitacin anual] y al uso de agua superficial para consumo domstico en
muchos municipios.
Por ejemplo, en 1979, en el Golfo de Mxico ocurri el mayor escape de petrleo al
mar del pozo petrolero Ixtoc-1 cuando tardaron 8 meses en tapar la fuga y se
derramaron cerca de 700 millones de Fig. 1 ave contaminada
litros de petrleo en
las aguas del golfo, de lo cual se hizo gran propaganda. Algunos investigadores

consideran que los accidentes de los buque-tanques son responsables solamente del 10
al 15 % del ingreso anual de petrleo al ocano, pero los derrames concentrados pueden
causar grandes impactos ecolgicos y econmicos sobre las reas costeras.
En 1983 ocurri el mayor accidente en un buque-tanque, el Castillo de Beliver se
incendi y derram cerca de 300 millones de litros de petrleo en el ocano, frente a las
costas de Ciudad del Cabo, en Sudfrica.
En marzo de 1989, el buque-tanque Exxon Valdez derram a las aguas del golfo del
Prncipe Guillermo, en Alaska, 41 millones de litros de petrleo crudo. Pero este tipo de
tragedias son mucho ms comunes de lo que nos imaginamos, pues cada semana
ocurren derrames de petrleo o de otras sustancias contaminantes.
En trabajos anteriores se ha demostrado que la biorremediacion es uno de los mtodos
mas eficientes para la recuperacin de los suelos como por ejemplo:
Tenemos como referencia las siguientes tesis:
Potencial de la biorremediacion de suelo y agua impactados por petroleo en el tropico
mexicano (Randy H. Adams Schroeder1, Vernica I. Domnguez Rodrguez y
Leonardo Garca Hernndez, 1999), obteniendo los siguientes resultados:
La biorremediacin, como una tecnologa, tiene un gran potencial en la recuperacin de
sitios contaminados por hidrocarburos de petrleo en el alimento, y adems pertenecen
a los mismos gneros cientficos que las bacterias oleoflicas de regiones templadas.
Estas se estimulan considerablemente en presencia de hidrocarburos. Los estudios
recientes, realizados en el trpico petrolero mexicano, indican la existencia de bacterias
nativas degradadoras de petrleo en suelos regionales y recortes de perforacin, las
cuales se adaptan a las condiciones climticas del trpico. Adems, la contaminacin
por petrleo tiende a estimular las poblaciones microbianas de esta regin. La
aplicacin de estos resultados tiene un gran potencial para la remediacin de los sitios
impactados por hidrocarburos en la regin. Propiamente aplicada, la utilizacin de
microorganismos nativos en la biorremediacin debe resultar en un aumento de la
eficiencia en la remediacin a un costo significativamente bajo.
Adaptacin y pruebas de biorregeneracion del petrleo crudo in vitro por los hongos
filamentosos trichoderma y penicillium (Flor Maria Garcia Avalos, Isabel Cristina
Gonzalez Quiroz, 2007), obteniendo los siguientes resultados:
Con respecto a la tasa de degradacin de los hidrocarburos por el consorcio de hongos
filamentoso (Trichoderma y Penicillium), se encontr que el mayor porcentaje de
biodegradacin se dio en el tratamiento con 50000 mg kg-1 de HTP con 51.03% de
degradacin, en comparacin con resto de los tratamientos evaluados.
JUSTIFICACIN
Como se sabe la contaminacin se debe al mal uso de los recursos naturales que el
mundo ofrece, debido a esto en la actualidad hay algunas empresas que se estn
haciendo responsables de sus actos y estn buscando tcnicas o medidas (econmicas)

que disminuyan el impacto ambiental que han causado, de acuerdo a las normas
ambientales.
Es por eso que en este proyecto se utilizar la biorremediacin para el tratamiento de
suelos contaminados por hidrocarburos en el ejido Jos Narciso Rovirosa, que se
encuentra en el municipio de Huimanguillo Tabasco. Ya que en dicho lugar ocurri una
fuga de aceite de una tubera de 24 pulg. Debido a que no se tomo en cuenta la vida til
de ese oleoducto y esto trajo consigo la corrosividad de dicha tubera y su desgaste,
provocando una ruptura en ella.
La tcnica a utilizar es la de biorremediacin ex -situ que es cuando el contaminante se
extrae y se degrada en otro sitio en condiciones controladas de laboratorio. Para ello se
empleara tambin la tcnica de estudio in vitro, que es una tcnica para realizar
determinados experimentos en tubos de ensaye o bien, en un ambiente controlado.
Con esto, conoceremos lo necesario para evaluar el comportamiento de los hongos
Aspergillus y Trichoderma en la biorremediacin de suelos contaminados con petrleo,
y con ello contribuir al desarrollo de esta tecnologa para hacer de nuestro planeta un
lugar mejor para vivir.
Este proyecto se realizar con la finalidad de conocer y comprender la importancia de
poder aplicar la biorremediacin para reducir la contaminacin ambiental ya que hoy en
da es uno de los temas de mayor relevancia debido a las consecuencias que a trado
consigo el contaminar el medio ambiente donde vivimos (suelo ,agua, aire).
En el caso de que el derrame sea en el suelo el proceso es diferente, la oxidacin es
llevada a cabo por hongos y bacterias y el movimiento del hidrocarburo es ms vertical,
adems el proceso de humificacin tiende a atrapar el residuo hacindolo ms
persistente. En este caso el factor limitante no est en la disponibilidad de nutrientes
sino que la disponibilidad de oxigeno es baja, por lo que se debe aerear el suelo o
agregar perxido de hidrogeno (H2O2) para mejora el proceso.
Algunas bacterias y hongos producen melanina para impedir que los metales pesados
(sus cationes) provenientes de desechos industriales: fbricas metalrgicas, curtiembres,
fbricas de pintura, etc., ingresen al interior de la clula.
La degradacin microbiana de las molculas organicas es un proceso natural donde los
microorganismos alteran y destruyen las molculas organicas en diversos metabolismos
y en el mejor de los casos a CO2 + H2 O.
Esta investigacin ser de gran importancia para conocer mejor como actan dichos
hongos en la biorremediacin de suelos contaminados y con ello poder aplicarlos para
regenerar el suelo del ejido Jos Narciso Rovirosa y as ser aprovechados nuevamente
en beneficio de la comunidad.
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
Esta investigacin se har con el objetivo de subsanar el suelo contaminado por
hidrocarburos totales de petrleo (HTP) en el ejido Jos Narciso Rovirosa, que se
encuentra en el municipio de Huimanguillo, Tabasco.

Esta problemtica surge debido a las altas concentraciones de HTP en los suelos de esta
zona, y ala necesidad de poder devolver a la naturaleza, un suelo en optimas
condiciones para que la vida en el pueda crecer y desarrollarse de manera normal y con
ello, hacer de nuestro estado y de nuestro planeta en general, un lugar mas limpio para
las generaciones futuras.
Adems, con esta investigacin se pretende evaluar que tan efectivos son los hongos
Aspergillius y Trichoderma en el proceso de degradacin de HTP en estos suelos
contaminados y de esta forma saber si son favorables para su utilizacin de nueva
cuenta en la agricultura.
MARCO TERICO
Se aplic la tcnica de Biorremediacin a un rea impactada (20m3) con 58 barriles de
petrleo crudo de 14 API (petrleo pesado) de viscosidad aledaa a un pozo de
petrolero situado en Lima Per. El seguimiento de los tratamientos se realiz mediante
anlisis qumicos y microbiolgicos utilizando tcnicas valorimtricas, gravimtricas y
espetrofotomtricas, mensualmente durante 369 das. El rea fue humectada y aireada
peridicamente mediante un tractor con arado de disco.
Se observ una disminucin en la concentracin de hidrocarburos totales del petrleo
hasta obtener valores inferiores al 1% recomendado por las normas internacionales, Se
logr recuperar el suelo impactado en un periodo de un ao. Se identificaron especies de
microorganismos degradadores de hidrocarburos en el suelo tratado. No se encontr
toxicidad por ninguno de los mtodos empleados en el suelo tratado. Se sembraron
plantas en el rea tratada (Pion de jardn), que esto no fue efectivo, ya que las plantas
autctonas de la zona resultaron ms efectivas, de acuerdo con las condiciones
existentes en el suelo. El anlisis econmico del proceso de Biorremediacin arroj
valores dentro del rango internacional estipulado para este tratamiento. (Escalante,2002)
METODOLOGA
OBJETIVO GENERAL
Evaluar el potencial que presentan los hongos Aspergillus y Trichoderma de los
suelos contaminados por hidrocarburos totales de petrleo (HTP) en el ejido Jos
Narciso Rovirosa, que se encuentra en el municipio de Huimanguillo Tabasco.
OBJETIVOS PARTICULARES
Conocer el comportamiento de los hongos del gnero Aspergillus y Trichoderma
en suelo contaminado con petrleo, a travs del tamao de la poblacin y la tasa de
respiracin.
Analizar el porcentaje de degradacin de hidrocarburos totales del petrleo crudo;
realizado por la bioestimulacin a travs de los hongos Aspergillus y Trichoderma con y
sin petrleo.
HIPTESIS

Los hongos Aspergillus y Trichoderma tienen la capacidad de regenerar suelos

impactados con petrleo y poseen el potencial para descontaminar suelos contaminados
por HTP en la zona de la Venta, Tabasco.
REVISIN DE LITERATURA
Los niveles de contaminacin varan mucho segn las fuentes de hidrocarburos y la
antigedad de las instalaciones petroleras. En el extremo occidente del estado de
Tabasco, donde la mayora de las instalaciones son ms antiguas (algunas alrededor de
50 aos), es ms comn tener derrames de hidrocarburos de tubos corrodos. Por lo
general la extensin de un derrame es una mancha de aproximadamente 5 ha, en la cual
la concentracin de hidrocarburos puede ser hasta de 30 %. Alrededor de estas reas se
extiende la contaminacin, pero en concentraciones mucho menores y presentan una
toxicidad muy baja hasta ser casi nula. En la zona norte y noreste del estado con
actividad petrolera ms reciente, las tcnicas usadas para cuidar el medio ambiente
fueron mejorando a travs de los aos. En esta zona de Tabasco los ductos son ms
nuevos, y muchos tienen recubrimientos para reducir la corrosin. Debido a esto, los
derrames por corrosin de lneas son mucho menores. Adems, el diseo, construccin
y manejo de presas de desechos fueron mejorando y se encuentran mucho menos
problemas por filtraciones y escurrimientos. En esta parte del estado es raro encontrar
zonas con manchas obvias de aceite. Cerca de pozos petroleros la extensin de
hidrocarburos es normalmente mucho menos de 1 ha y con concentraciones menores
que 1000 ppm (muchas veces menores que 200 ppm), y que presentan una toxicidad
casi nula. Cabe mencionar que la nueva poltica de PEMEX es no dejar desechos
aceitosos en presas durante la perforacin de pozos. Cuando entra a la fase de
perforacin que requiere lodos de tipo inverso, stos se reciclan todo lo posible, y los ya
gastados, as como los recortes contaminados, se depositan en una presa de concreto con
techo de lmina. (El techo es para prevenir desbordes que resultan de los aguaceros, o
lluvias fuertes de la regin.) Peridicamente estos desechos son recolectados para
tratamiento en un sitio que es cntrico para varios pozos.
ORIGEN DEL PETRLEO
Factores para su formacin:
Ausencia de aire
Restos de plantas y animales (sobre todo, plancton marino)
Gran presin de las capas de tierra
Altas temperaturas
Accin de bacterias
Los restos de animales y plantas, cubiertos por arcilla y tierra durante muchos millones
de aos sometidos por tanto a grandes presiones y altas temperaturas, junto con la
accin de bacterias anaerobias (es decir, que viven en ausencia de aire) provocan la
formacin del petrleo.
El hecho de que su origen sea muy diverso, dependiendo de la combinacin de los
factores anteriormente citados, provoca que su presencia sea tambin muy variada:
lquido, dentro de rocas porosas y entre los huecos de las piedras; voltil, es decir, un
lquido que se vuelve gas al contacto con el aire; semislido, con textura de ceras. En

cualquier caso, el petrleo, de por s, es un lquido y se encuentra mezclado con gases y

con agua.
LOCALIZACIN DEL PETRLEO
|[pic]
|
|Fig.2 Yacimientos Estratigrfico
|
Al ser un compuesto lquido, su presencia no se localiza habitualmente en el lugar en el
que se gener, sino que ha sufrido previamente un movimiento vertical o lateral,
filtrndose a travs de rocas porosas, a veces una distancia considerable, hasta encontrar
una salida al exterior, en cuyo caso parte se evapora y parte se oxida al contactar con el
aire, con lo cual el petrleo en s desaparece o hasta encontrar una roca no porosa que le
impide la salida. Entonces se habla de un yacimiento.
|[pic]
|[pic]
|Fig.3 Yacimientos Anticlinal

|
|Fig. 4 Yacimientos en Falla

Estratigrficos: En forma de cua alargada que se inserta entre dos estratos.

Anticlinal: En un repliegue del subsuelo, que almacena el petrleo en el arqueamiento
del terreno.
Falla: Cuando el terreno se fractura, los estratos que antes coincidan se separan. Si el
estrato que contena petrleo encuentra entonces una roca no porosa, se forma la bolsa o
yacimiento.
En las ltimas dcadas se ha desarrollado enormemente la bsqueda de yacimientos
bajo el mar, los cuales, si bien tienen similares caractersticas que los terrestres en
cuanto a estructura de las bolsas, presentan muchas mayores dificultades a la hora de su
localizacin y, por aadidura, de su explotacin.
COMPOSICIN DEL PETRLEO
El petrleo es un compuesto de origen orgnico, ms denso que el agua y de un olor
fuerte y caracterstico. Se extrae de la superficie terrestre y despus es almacenado en
grandes depsitos y enviado mediante oleoductos (va terrestre) o por los grandes barcos
petrolferos (va martima) a las partes del mundo donde es necesario.
En numerosas ocasiones se utiliza la palabra crudo para denominar al petrleo sin
refinar.
Los hidrocarburos estn formados por carbono, hidrgeno, oxgeno, nitrgeno y azufre.
La composicin media del petrleo sera 85%C, 12%H y 3% S+O+N, adems de varios
elementos metlicos. La composicin de los crudos vara dependiendo del lugar donde
se han formado. Las diferencias entre unos y otros se deben, a las distintas proporciones
de las diferentes fracciones de hidrocarburos, y a la variacin en la concentracin de
azufre, nitrgeno y metales.
En las refineras el crudo pasa a convertirse en un derivado del petrleo. El proceso de
refinado pretende:
Separar el crudo en fracciones diferentes mediante destilacin fraccionada o
fraccionamiento del crudo.
Convertir las fracciones que tienen una menor demanda en el mercado en otras de
mayor demanda. Esto se realiza gracias a la tcnica de ruptura trmica o cataltica
(craqueo).

 Craqueo trmico: Consiste en la ruptura de las cadenas carbonadas y accin de calor

a una
temperatura de entre 400 650C. De esta ruptura se obtienen
parafinas cortas, olefinas, naftalenos o aromticos.
Craqueo cataltico: Mejoras en el craqueo trmico mediante el empleo de
catalizadores.
Modificar las cadenas de carbono de las gasolinas para aumentar la calidad del
carburante (reformado) y elevando el poder antidetonante de la gasolina.
Los catalizadores de reformado tienen dos funciones qumicas diferentes:
Funcin metlica: Las reacciones que catalizan los metales (Pt, Re, Ir) en este
proceso son las de hidrogenacin y deshidrogenacin.
Funcin cida: Esta funcin la realiza el cloro, y tiene como misin llevar a cabo las
reacciones de isomerizacin de n-parafinas, as como catalizar algunas etapas del
proceso de reformado.
Realizar un refinado adicional para eliminar los componentes no deseados, como el
azufre.
CARACTERSTICAS FSICAS Y QUMICAS DEL PETRLEO.
Color:
Generalmente se piensa que todos los crudos son de color negro, lo cual ha dado origen
a cierta sinonimia y calificativos: "oro negro", "ms negro que el petrleo crudo". Sin
embargo por transmisin de la luz, los crudos pueden tener color amarillo plido, tonos
de rojo y marrn hasta llegar a negro. Por reflexin de la luz pueden aparecer verdes,
amarillos con tonos azules, rojo, marrn y negro. Los crudos pesados y extrapesados
son negro casi en su totalidad. Crudos con altsimo contenido de cera son livianos y de
color amarillo; por la noche al bajar bastante la temperatura tienden a solidificarse
notablemente y durante el da, cuando arrecia el sol, muestra cierto hervor en el tanque.
El crudo ms liviano o condensado llega a tener un color blanquecino, lechoso y a veces
se usa en el campo como gasolina cruda.
Olor:
El olor de los crudos es aromtico como el de la gasolina, del querosene u otros
derivados. Si el crudo contiene azufre tiene un olor fuerte y hasta repugnante, como el
de huevo podrido. Si contiene sulfuro de hidrogeno, los vapores son irritantes, txicos y
hasta mortferos. Para atestiguar la buena o rancia calidad de los crudos es comn que la
industria los designe como dulces o agrios.
Densidad:
Los crudos pueden pesar menos que el agua (livianos y medianos) o tanto o ms que el
agua (pesados y extrapesados). De all que la densidad pueda tener un valor de 0,75 a
1,1. Estos dos rangos equivalen a 57,2 y -3 API.
La densidad, la gravedad especifica o los grados API (API es la abreviatura de
American Petroleum Institute). Denota la relacin correspondiente de peso especfico y
de fluidez de los crudos con respecto al agua.
Gravedad Especifica = 140 / 130 + n.
Gravedad Especifica = 145 / 145 n.
N = representa la lectura en grados indicada por el hidrmetro Baum inmerso en el
liquido.
La ecuacin general de API es la siguiente:
Gravedad especifica = 141,5 / 131,5 + API.
(A 60 F 15,5 C).
API = 141,5 / gravedad especifica 131,5

La clasificacin de los crudos por rango de gravedad API utilizada en la industria

venezolana de los hidrocarburos, a 15,5 C (60 F) es como sigue:
Extrapesados, menos de 16 .
Pesados, menos de 21,9 .
Medianos 22,0 29,9 .
Livianos 30 y ms.
Superlivianos 40 en adelante.
Sabor:
El sabor de un crudo es una propiedad que se torna importante cuando el contenido de
sal es bastante alto. Esta circunstancia requiere que el crudo sea tratado adecuadamente
en las instalaciones de produccin del campo para ajustarle la sal al mnimo (gramos por
metro cbico) aceptable por compradores y refineras.
Punto de ebullicin:
No es constante, Debido a sus constituyentes vara algo menos que la temperatura
atmosfrica hasta la temperatura igual o por encima de 300 C.
Punto de congelacin:
Vara desde 15,5 C hasta la temperatura de -45 C. Depende de las propiedades y
caractersticas de cada crudo o derivado. Este factor es de importancia al considerar el
transporte de los hidrocarburos y las estaciones, principalmente el invierno y las tierras
glidas.
Punto de deflagracin:
Vara desde -12 C hasta 110 C. Reaccin vigorosa que produce calor acompaado de
llamas y/o chispas.
Punto de quema:
Vara desde 2 C hasta 155 C.
Poder calorfico:
Puede ser entre 8.500 a 11.350 caloras/gramo. Entre BTU/libra puede ser de 15.350 a
22.000. (BTU es la unidad trmica britnica).
Calor especifico:
Vara entre 0,40 y 0,52. El promedio de la mayora de los crudos es de 0,45. Es la
relacin de cantidad de calor requerida para elevar su temperatura un grado respecto a la
requerida para elevar un grado la temperatura de igual volumen o masa de agua.
Calor latente de vaporizacin:
Para la mayora de los hidrocarburos parafnicos y metilenos acusa entre 70 a 90
kilocaloras/kilogramo 130 a 160 BTU/libra.
Viscosidad:
La viscosidad es una de las caractersticas ms importantes de los hidrocarburos en los
aspectos operacionales de produccin, transporte, refinacin y petroqumica. La
viscosidad, que indica la resistencia que opone el crudo al flujo interno, se obtiene por
varios mtodos y se le designa por varios valores de medicin. El poise o centipoise
(0,01 poise) se define como la fuerza requerida en dinas para mover un plano de un
centmetro cuadrado de rea, sobre otro de igual rea y separado un centmetro de
distancia entre s y con el espacio relleno del lquido investigado, para obtener un
desplazamiento de un centmetro en un segundo. La viscosidad de los crudos en el
yacimiento puede tener 0,2 hasta ms de 1.000 centipoise. Es muy importante el efecto
de la temperatura sobre la viscosidad de los crudos, en el yacimiento o en la superficie,
especialmente concerniente a crudos pesados y extrapesados.
o Viscosidad relativa: es la relacin de la viscosidad del fluido respecto a la del
agua. A 20 C la viscosidad del agua pura es de 1.002 centipoise.

o Viscosidad cinemtica: es equivalente a la viscosidad expresada en centipoises

dividida por la gravedad especfica, a la misma temperatura. Se designa en stokes o
centistokes.
o Viscosidad Universal Saybolt: representa el tiempo en segundos para que un
flujo de 60 centmetros cbicos salga de un recipiente tubular por medio de un orificio,
debidamente calibrado y dispuesto en el fondo del recipiente, el cual se ha mantenido a
temperatura constante.
QU ES LA BIORREMEDIACIN?
El concepto de biorremediacin se utiliza para describir una variedad de sistemas que
utilizan organismos vivos (plantas, hongos, bacterias, entre otros), para remover
(extraer), degradar (biodegradar) o transformar (biotransformar) compuestos orgnicos
txicos en productos metablicos menos txicos o inocuos. Los procesos biolgicos que
involucran enzimas como catalizadores, pueden modificar molculas orgnicas
produciendo cambios en su estructura as como en sus propiedades toxicolgicas
incluso, dar como resultado la completa conversin de dichos compuestos en productos
inorgnicos como agua, CO2 o formas inorgnicas de N, P y S; adems de componentes
celulares y productos de las rutas metablicas (mineralizacin).
La biorremediacin puede emplear organismos propios del sitio (autctonos) o ajenos a
ste (exgenos), y llevarse a cabo en condiciones aerobias (en presencia de oxgeno) o
anaerobias (sin oxgeno). Al igual que otras tecnologas de remediacin, la
biorremediacin puede realizarse en el mismo sitio sin necesidad de excavar el material
contaminado (in situ), o bien excavando el material para tratarlo en el sitio (on site) o
fuera de l (ex situ). Aunque no todos los compuestos orgnicos son susceptibles a la
biodegradacin, los procesos de biorremediacin se han usado con xito para tratar
suelos, lodos y sedimentos contaminados por hidrocarburos totales del petrleo (HTP),
solventes, explosivos, clorofenoles, pesticidas e hidrocarburos aromticos policclicos
(HAP).
Tipos de biorremediacin
En los procesos de biorremediacin generalmente se emplean mezclas de ciertos
microorganismos o plantas capaces de degradar o acumular sustancias contaminantes
tales como metales pesados y compuestos orgnicos derivados de petrleo o sintticos.
Bsicamente, los procesos de biorremediacin pueden ser de tres tipos:
[pic]
FIG 5. Diferentes modos de biorremediacin.
1. Degradacin enzimtica
Este tipo de degradacin consiste en el empleo de enzimas en el sitio contaminado con
el fin de degradar las sustancias nocivas. Estas enzimas se obtienen en cantidades
industriales por bacterias que las producen naturalmente, o por bacterias modificadas
genticamente que son comercializadas por las empresas biotecnolgicas.
Por ejemplo, existe un amplio nmero de industrias de procesamiento de alimentos que
producen residuos que necesariamente deben ser posteriormente tratados.

En estos casos, se aplican grupos de enzimas que hidrolizar (rompen) polmeros

complejos para luego terminar de degradarlos con el uso de microorganismos. Un
ejemplo lo constituyen las enzimas lipasas (que degradan lpidos) que se usan junto a
cultivos bacterianos para eliminar los depsitos de grasa procedentes de las paredes de
las tuberas que transportan los efluentes.
Otras enzimas que rompen polmeros utilizados de forma similar son las celulosas,
proteinasas y amilasas, que degradan celulosa, protenas y almidn, respectivamente.
Adems de hidrolizar estos polmeros, existen enzimas capaces de degradar compuestos
altamente txicos. Estas enzimas son utilizadas en tratamientos en donde los
microorganismos no pueden desarrollarse debido a la alta toxicidad de los
contaminantes. Por ejemplo, se emplea la enzima peroxidasa para iniciar la degradacin
de fenoles y aminas aromticas presentes en aguas residuales de muchas industrias.
2. Remediacin microbiana
En este tipo de remediacin se usan microorganismos directamente en el foco de la
contaminacin. Los microorganismos utilizados en biorremediacin pueden ser los ya
existentes (autctonos) en el sitio contaminado o pueden provenir de otros ecosistemas,
en cuyo caso deben ser agregados o inoculados
La descontaminacin se produce debido a la capacidad natural que tienen ciertos
organismos de transformar molculas orgnicas en sustancias ms pequeas, que
resultan menos txicas. El hombre ha aprendido a aprovechar estos procesos
metablicos de los microorganismos. De esta forma, los microorganismos que pueden
degradar compuestos txicos para el ambiente y convertirlos en compuestos inocuos o
menos txicos, se aprovechan en el proceso de biorremediacin. De esta forma, reducen
la polucin de los sistemas acuticos y terrestres.
La gran diversidad de microorganismos existente ofrece muchos recursos para limpiar
el medio ambiente y, en la actualidad, esta rea est siendo objeto de intensa
investigacin.
Existen, por ejemplo, bacterias y hongos que pueden degradar con relativa facilidad
petrleo y sus derivados, benceno, tolueno, acetona, pesticidas, herbicidas, teres,
alcoholes simples, entre otros. Los metales pesados como uranio, cadmio y mercurio no
son biodegradables, pero las bacterias pueden concentrarlos de tal manera de aislarlos
para que sean eliminados ms fcilmente.
3. Remediacin con plantas (fitorremediacin)
La fitorremediacin es el uso de plantas para limpiar ambientes contaminados. Aunque
se encuentra en desarrollo, constituye una estrategia muy interesante, debido a la
capacidad que tienen algunas especies vegetales de absorber, acumular y/o tolerar altas
concentraciones de contaminantes como metales pesados, compuestos orgnicos y
radioactivos. La fitorremediacin ofrece algunas ventajas y desventajas frente a los
otros tipos de biorremediacin:
Ventajas:

 Las plantas pueden ser utilizadas como bombas extractoras de bajo costo para
depurar suelos y aguas contaminadas.
Algunos procesos degradativos ocurren en forma ms rpida con plantas que con
microorganismos.
Es un mtodo apropiado para descontaminar superficies grandes o para finalizar la
descontaminacin de reas restringidas en plazos largos.
Limitaciones:
El proceso se limita a la profundidad de penetracin de las races o aguas poco
profundas.
Los tiempos del proceso pueden ser muy prolongados.
La biodisponibilidad de los compuestos o metales es un factor limitante de la
captacin.
Las plantas pueden incorporar las sustancias contaminantes mediante distintos procesos
que se representan en la siguiente ilustracin y se explican en la tabla que contina:
[pic]
Fig. 6. Procesos de incorporacion de
sustancias a las plantas
Tipos de fitorremediacin
Tipos de fitorremediacin, en donde se indica la zona de la planta en donde ocurre el
proceso.
Fitocorreccin
La fitocorreccin es un trmino general que hace referencia a varios usos de las plantas
y rboles para descontaminar suelos contaminados mediante la extraccin de los
contaminantes del suelo y del agua. Las plantas actan como filtros biolgicos que
pueden descomponer o estabilizar metales pesados o bien degradar componentes
orgnicos. La fitocorreccin se combina con otros mtodos de limpieza en la etapa de
"acabado."
Se usa especialmente para emplazamientos que hayan sido contaminados con metales,
plaguicidas, solventes, explosivos, petrleo, hidrocarburos aromticos policclicos y
lixiviados en vertederos.
Por tanto, sus caractersticas principales son:
- Es una tcnica de limpieza pasiva, estticamente agradable y dependiente de la energa
solar.
- Se emplean en zonas no muy extensas y donde la contaminacin no est a mucha
profundidad.
- Es una tcnica empleada para un amplio rango de contaminantes.
Aunque las medidas fitocorrectoras son mucho ms lentas que los mtodos mecnicos
y llegan solamente a la profundidad hasta la cual llegan las races, pueden eliminar los
ltimos restos de contaminantes atrapados en el suelo que a veces quedan con las
tcnicas mecnicas de tratamiento.

Parece ser que cuando se emplean rboles en vez de plantas ms pequeas la

contaminacin se puede tratar a mayor profundidad porque las races de los rboles
penetran a mayor profundidad en el suelo.
Los contaminantes orgnicos estn presentes en gran cantidad de emplazamientos
contaminados.
Existen varias tcnicas de fitocorreccin para tratar estos contaminantes, entre las que se
encuentran:
- Fitodegradacin
- Biodegradacin mejorada de la rizosfera
- Bombeo orgnico
- Fitovolatilizacin
[pic]
Fig. 7. Tecnicas de fitorrecoleccin.
Fitodegradacin
Consiste en la degradacin de los contaminantes orgnicos llevada a cabo por las
plantas. En determinadas ocasiones, los contaminantes degradados en molculas ms
simples le van a servir a la planta para acelerar su crecimiento. Algunas de las enzimas
presentes en la planta descomponen estos contaminantes en productos utilizables para el
metabolismo de la planta. Algunos tipos de enzimas de la planta pueden degradar
solventes clorados, tales como tricloroetileno (TCE), otras pueden descomponer
herbicidas.
|
|
|Fig.8 Destruccin de contaminantes orgnicos por fitodegradacin.

Degradacin intensificada
Este proceso se produce en la parte de la tierra del emplazamiento que rodea las races
de las plantas (rizosfera). Los microorganismos presentes en el emplazamiento
consumen y digieren sustancias orgnicas de las que obtienen energa. Algunas de estas
sustancias pueden ser combustibles o solventes.
Las sustancias naturales liberadas al medio por las races de las plantas (azcar, alcohol
y cidos) contienen carbono orgnico, del cual se alimentan los microorganismos del
suelo. Los nutrientes adicionales aumentan la actividad de los microorganismos,
acelerando el proceso de descontaminacin.
Las plantas tambin van a mejorar la biodegradacin porque aflojan la tierra y
transportan agua al sitio contaminado.
Bombeo orgnico Bombeo orgnico mediante las races de los rboles

Cuando las races de los rboles profundizan hacia el nivel fretica forman una densa
masa de races que puede absorber gran cantidad de agua. Un excelente rbol es el
lamo (Populus alba) que observe del orden de 113 litros agua/da existiendo una
variedad del mismo (Populus deltoides) que puede absorber hasta 1.325 l/da.
La accin de bombeo de las races disminuye la tendencia de los contaminantes
superficiales a descender hacia el agua subterrnea. En zonas agrcolas los lamos
plantados a lo largo de los cursos de agua reducen el excedente de fertilizantes y
herbicidas que pudieran dirigirse a los cursos de agua o al agua subterrnea. Por otro
lado, los rboles plantados en vertederos ejercen de sustitutos orgnicos de la tradicional
capa de arcilla o de plstico al absorber agua de lluvia que, de otro modo, se podra
filtrar por el vertedero en forma de lixiviado contaminado.
|

Fitovolatilizacin
Se produce a medida que los rboles y otras plantas en crecimiento absorben agua junto
con contaminantes orgnicos. Algunos de los contaminantes pueden llegar hasta las
hojas y evaporarse o volatilizarse en la atmsfera. Los lamos, por ejemplo, volatilizan
el 90% del TCE que absorben.
Fitoextraccin
En lugares contaminados con metales, se usan plantas para estabilizar o retirar los
metales del suelo y del agua subterrnea por medio de dos mecanismos: fitoextraccin y
rizofiltracin.
La fitoextraccin o fitoacumulacin: Consiste en la absorcin de metales contaminantes
mediante las races de las plantas y su acumulacin en tallos y hojas.
Existen variedades de plantas muy adecuadas para este uso debido a que absorben gran
cantidad de metales, en comparacin con otras especies.
El primer paso para la aplicacin de la tcnica es la seleccin de las especies de planta
ms adecuada para los metales presentes y las caractersticas del emplazamiento. Una
vez completado el crecimiento vegetativo de la planta el siguiente paso es cortarlas y
proceder a su incineracin, procedindose al traslado de las cenizas a un vertedero de
seguridad. Tambin se pueden transformar las plantas en abono vegetal para reciclar los
metales. El proceso se puede repetir ilimitadamente hasta que la concentracin
remanente de metales en el suelo est dentro de los lmites considerados aceptables.
La utilidad del mtodo reside en que las cenizas apenas ocuparn el 10% del volumen
que ocuparan los desechos en el caso de que el suelo fuese excavado para tratarlo.
Los mejores candidatos para la fitoextraccin son el nquel, el cinc y el cobre porque
son los preferidos de las 400 plantas, aproximadamente que se sabe que absorben
cantidades extraordinarias de metales. Se estn estudiando y probando plantas que
absorben plomo y cromo.

[pic]
Fig. 9. Fitoextraccin
Rizofiltracin
Es una tcnica, an en proceso de investigacin, para descontaminar agua con
presencia de metales.
Aunque la rizofiltracin es una tcnica parecida a la fitoextraccin en esta las plantas
que se utilizan para descontaminar se cultivan en invernaderos con las races sumergidas
en agua, en vez de en tierra.
Cuando el sistema radicular de la planta est bien desarrollado se recoge el agua
contaminada del emplazamiento a restaurar, se transporta hasta el lugar de crecimiento
de las plantas (invernadero) y se colocan las plantas en esa agua.
[pic]
Fig. 10. Rizofiltracin.
Las races van a absorber los contaminantes del agua. A medida que las races se van
saturando en agua se van cortando y eliminando.
Por ejemplo se utilizaron semillas de girasol para descontaminar residuos radiactivos en
una laguna en un experimento piloto en Chernobyl (Ucrania).
[pic]
Fig. 11. Rizofiltracin de semillas de girasol
Adems de extraer metales del agua esta tcnica puede ser utilizada para eliminar
residuos industriales, escorrenta de tierras agrcolas, drenaje de minas de cidos y
contaminantes radiactivos.
TECNOLOGAS DE BIORREMEDIACIN
El uso de tecnologas de biorremediacin para el tratamiento de sitios contaminados, es
relativamente reciente y presenta varias ventajas respecto de los mtodos fsicoqumicos tradicionales. Algunas de estas ventajas son: (i) bajos costos de instalacin y
operacin; (ii) es una tecnologa simple y de fcil aplicacin; (iii) es un tratamiento
seguro con un mnimo de riesgos a la salud y (iv) es un tratamiento tecnolgicamente
efectivo.
De acuerdo con estudios realizados en los Estados Unidos de Amrica y el Reino
Unido, el mercado de la biorremediacin para el tratamiento de suelos contaminados se
ha incrementado debido a que los costos pueden reducirse entre 65% y 80%, respecto de
los mtodos fsico-qumicos. La aceptacin de la biorremediacin como una estrategia
de limpieza viable, en muchos casos, depende de sus costos. Es decir, cuando el mtodo
biolgico propuesto es menos costoso que los tratamientos fsicos y qumicos viables
para el tratamiento de un sitio y de un contaminante en particular. Asimismo, muchas de
las estrategias de biorremediacin son competitivas en trminos de costos y eficiencia
sobre una matriz contaminada. Entre las tecnologas de biorremediacin ms comunes,
se encuentran las siguientes:

1. Bioestimulacin. Implica la adicin de oxgeno y/o nutrientes en el suelo

contaminado con el fin de estimular la actividad de los microorganismos autctonos y
con ello la biodegradacin de los contaminantes.
2. Bioaumentacin. Consiste en la adicin de microorganismos vivos que tienen la
capacidad de degradar el contaminante en cuestin y as promover su biodegradacin o
biotransformacin.
3. Biolabranza. El suelo contaminado se mezcla con agentes de volumen y nutrientes, y
se remueve (labra) peridicamente para favorecer su aireacin. Durante la biolabranza,
el suelo contaminado se mezcla con suelo limpio.
4. Bioventeo. Consiste en estimular la biodegradacin aerobia de un contaminante por
medio del suministro de aire en el sitio contaminado.
5. Fitorremediacin. Es un proceso que utiliza plantas para remover, transferir,
estabilizar, concentrar y/o destruir contaminantes (orgnicos e inorgnicos) en suelos o
sedimentos.
6. Biorreactores. Es la tecnologa ms adecuada para casos en que los peligros
potenciales de descargas y emisiones sean serios. Permite la combinacin controlada y
eficiente de procesos qumicos, fsicos y biolgicos, que mejoran y aceleran la
biodegradacin.
7. Biodegradacin en fase slida. Este tipo de tecnologa generalmente se lleva a cabo
ex situ, e incluye el composteo, las pilas estticas y las pilas alargadas que se describe
con detalle ms adelante.
LAS TECNOLOGAS DE BIORREMEDIACIN EN MXICO
En el mercado ambiental de nuestro pas, actualmente existe una cantidad considerable
de empresas nacionales e internacionales que ofrecen diferentes tipos de tecnologas
para la remediacin de sitios contaminados. Asimismo, con el propsito de establecer
un control acerca de las tecnologas que se ofrecen y conocer sus posibilidades reales de
xito, se inici en la Zona Metropolitana de la Ciudad de Mxico el 18 de agosto de
1997. La aplicacin obligatoria de la Licencia Ambiental nica (LAU), para todas
aquellas empresas que realizan trabajos de remediacin de suelos. Ello de conformidad
con el acuerdo sectorial publicado en el Diario Oficial de la Federacin (DOF) del 11 de
abril de 1997. Posteriormente, se public el acuerdo delegatorio respectivo en el DOF
del 3 de diciembre de 1998, y a partir del 4 de enero de 1999 la LAU es emitida por las
delegaciones federales de la SEMARNAT en los estados de Aguascalientes, Baja
California, Coahuila, Chihuahua, Mxico, Guanajuato, Hidalgo, Jalisco, Nuevo Len,
Puebla, Quertaro, San Luis Potos, Sonora, Tamaulipas, Tlaxcala y Veracruz. Para el
resto de los estados, el trmite de la licencia est centralizado.
De las tecnologas que ofrecen las empresas que cuentan con permisos para remediar
suelos contaminados, todas estn enfocadas exclusivamente a la remediacin de sitios
contaminados por compuestos orgnicos. Dentro de los contaminantes tratados con
mayor frecuencia, se encuentran los HTP y los HAP, lodos aceitosos, lodos de
perforacin y recortes de perforacin. De un total de 57 empresas autorizadas, ninguna
ofrece servicios para la restauracin de suelos contaminados por metales (segn
informes de la SEMARNAT en el 2002).
De acuerdo con datos proporcionados por 40 empresas autorizadas para remediar suelos
contaminados por diferentes tipos de contaminantes, dentro de las tecnologas ms
comnmente empleadas se encuentran las biolgicas (biorremediacin, con 48%),
siendo las ms utilizadas el composteo y la biolabranza. El lavado de suelos, la
oxidacin qumica y la separacin fsica constituyen otra parte importante de las
tecnologas ms empleadas en Mxico (figura 12).
[pic]

Figura 12. Tecnologas de remediacin para suelos utilizadas en Mxico por empresas
autorizadas. SF: separacin fsica; EV: extraccin de vapores; DT: desorcin trmica;
C: centrifugacin (Fuente: SEMARNAT 2002).
A pesar de que existe informacin acerca de las tecnologas de biorremediacin que se
emplean en Mxico, se aprecian ciertas deficiencias en el manejo y conocimiento de
estos procesos por algunas de las empresas dedicadas a esta actividad. Este hecho se
debe, en parte, a que muchas de estas empresas no cuentan con profesionales en
microbiologa y/o biotecnologa, debido a que su principal actividad para realizar los
trabajos de biorremediacin consiste en importar formulaciones (concentrados
bacterianos o enzimticos, agentes tenso activos y mezclas de nutrientes, entre otros)
para venderlas en Mxico. Muchos de estos productos, adems, carecen de informacin
acerca del contenido y su eficiencia no se ha demostrado para las condiciones climticas
de nuestro pas.
Algunas empresas venden el servicio de biorremediacin completo, en el que se incluye
la excavacin del suelo contaminado, el suministro de productos y su aplicacin. En
estos casos, los contratistas siguen las instrucciones del fabricante para la aplicacin de
los productos, sin entender las bondades y limitaciones de estos procesos a los que
llaman tecnologa. Afortunadamente, no todo el panorama es negativo, ya que
tambin existen empresas responsables que cuentan con personal calificado y
capacitado para realizar trabajos de biorremediacin.
En este artculo se pretende dar a conocer algunos aspectos generales, as como las
bondades y limitaciones de una de las alternativas tecnolgicas de biorremediacin que
se ha aplicado con gran xito a nivel mundial para la restauracin de suelos
contaminados por hidrocarburos: la biodegradacin en fase slida, especficamente el
composteo. Se presentan los principales aspectos tcnicos, as como las caractersticas
generales del composteo, el cual puede tener un amplio campo de aplicacin en nuestro
pas, debido a sus condiciones climticas especficas.
EL COMPOSTEO COMO ESTRATEGIA DE BIORREMEDIACIN
El composteo es un proceso biolgico mediante el cual es posible convertir residuos
orgnicos en materia orgnica estable (composta madura), gracias a la accin de
diversos microorganismos. Las aplicaciones ms comunes del composteo incluyen el
tratamiento de residuos agrcolas, de desechos de jardinera y cocina, de residuos
slidos municipales y de lodos. Sin embargo, desde hace unos 5 aos, investigaciones a
nivel laboratorio, piloto y a gran escala, han demostrado que el proceso de composteo,
as como el uso de composta madura, es una solucin de bajo costo y tecnolgicamente
efectiva para remediar suelos contaminados por residuos orgnicos peligrosos como los
HTP, solventes, explosivos, pesticidas e HAP.
Los principios bsicos del composteo de residuos peligrosos o contaminantes orgnicos,
son los mismos que para el composteo de desechos no peligrosos. En ambos casos, es
necesario optimizar cinco parmetros: la aireacin, la temperatura, el contenido de
humedad, la relacin carbono/nitrgeno (C/N) y el pH. Debido a que los contaminantes
orgnicos comnmente no se encuentran en concentraciones suficientes para soportar un
proceso de composteo, el material contaminado debe mezclarse con sustancias
orgnicas slidas biodegradables como aserrn, paja, bagazo, estircol, composta
madura y desechos agrcolas. Estos materiales son conocidos como agentes de volumen
y se utilizan en el proceso de composteo con tres finalidades bsicas: a) asegurar la
generacin del calor necesario para el proceso; b) mejorar el balance y disponibilidad de
nutrientes (C/N) para la actividad microbiana y c) aumentar la porosidad de la composta
y con esto la aireacin y capacidad de retencin de agua.

Las estrategias de biorremediacin por composteo, se basan en la adicin y mezclado de

los componentes primarios de una composta (agentes de volumen) con el suelo
contaminado, de manera que conforme la composta madura, los contaminantes son
degradados por la microflora activa dentro de la mezcla. Los sistemas de composteo
incluyen fosas en el suelo, reactores cerrados (tambores rotatorios, tanques circulares),
recipientes abiertos, silos, biopilas alargadas y biopilas estticas.
EL REINO DE LOS HONGOS
Los hongos son organismos eucariontes uni o pluricelulares que se desarrollan en
sitios hmedos y con poca luz. Las clulas de los segundos se agrupan en filamentos
llamados hfas que en conjunto recibe el nombre de micelio.
Antiguamente, los hongos se incluan en el reino Plantae, pero por carecer de clorofila y
tener una composicin qumica diferente en la pared celular, se clasificaron en reinos
diferentes.
La nutricin de los hongos es hetertrofa, es decir, que no pueden producir sus propios
alimentos como lo hacen las plantas. Descomponen la materia orgnica por medio de
enzimas, absorbiendo las sustancias nutritivas. La reproduccin puede ser asexual o
sexual, principalmente por esporas.
La mayor parte de los hongos son saprofitos; algunos se consideran parsitos; otros
mutualistas (que se asocian con otros seres en beneficio mutuo, como ocurre con los
lquenes).
Caractersticas de los hongos
! Eucariontes (con pared celular)
! Sin tejido vascular
! Se reproducen principalmente por medio de esporas, que son diseminadas por el
viento y pueden ser sexuadas o asexuadas.
! No tienen movimiento
! Pueden ser uni o multicelulares
! La pared celular esta formada de quitina; en las plantas es celulosa.
! Son heterotrficos, se alimentan de materia orgnica. Los organismos autotrficos,
producen sus alimentos por medio de la fotosntesis
! Los animales, tambin heterotrficos, primero ingieren y despus digieren. Los
hongos primero digieren y despus ingieren.
Tipos de hongos
Los dos tipo de hongos q vamos a utilizar en esta investigacin son el hongo
Aspergillus y el hongo Trichoderma.

El Aspergillus es un gnero de alrededor de 200 hongos (mohos), y es ubicuo. Los

hongos se pueden clasificar en dos formas morfolgicas bsicas: las levaduras y las
hifas. El Aspergillus es un hongo filamentoso (compuesto de cadenas de clulas,
llamadas hifas), el tipo de hongos opuesto a las levaduras, stas ltimas compuestas de
una sola clula redondeada. El hbitat natural del Aspergillus son el heno y el
compostaje.
En 1729 el Aspergillus fue catalogado por primera vez por el bilogo italiano Pier
Antonio Micheli. Micheli us el nombre "Aspergillum" por parecerse el hongo al
instrumento usado para dispersar agua bendita.[1] La descripcin hecha por Micheli de
este gnero de hongo en su obra Nova Plantarum Genera tiene importancia histrica, al
ser reconocido como el punto inicial de la ciencia de la micologa.
La estructura microscpica del Aspergillus es nica. Tienen hifas tabiculares y
conidioforas cuya cabeza est localizada en el extremo de un hifa, compuesta por una
vescula rodeada por una corona de filides en forma de botella directamente insertadas
sobre la vescula.[8] De las filides se desprenden las esporas (conidios). Otras
estructuras se encuentran en ciertas especies y no en otras, por ejemplo, las clulas de
Hle
[pic]
Fig. 13. Mitospora de Aspergillus flavus
Trichoderma sp. es un hongo saprofito, antagonista de patgenos vegetales que se
encuentra presente en la mayora de los suelos. Activa el crecimiento radicular de las
plantas, es capaz de colonizar y crecer en las races a medida que stas se desarrollan y
aumenta la resistencia del cultivo frente al ataque de posibles patgenos.
[pic]
Fig. 14. Mitospora de Trichoderma sp.
MATERIALES Y METODOS
MATERIALES
1 Mazo
1 Mortero
1 Maya (tamiz) de 1 mm de dimetro
1 balanza granataria
1 Vaso de precipitado de 500 ml
1 Matraz erlenmeyer de 500 ml
33 vasos de precipitado de 250 ml

1 Soporte universal con pinzas

1 Matraz de bola aforado
1 Bureta para titular
2 frascos de vidrio con tapa de 250 ml
1 Frasco de dilucin
3 Tubos de ensayo
1 Varilla de vidrio para rastrillar
1 Soporte para el rastrilleo
3 Pipetas de 0.5 ml
1 Probeta de 100 ml
1 Rejilla para tubos de ensayo
3 cajas de petri
3 Agitadores
1 Mechero de bunsen
Equipo soxhlet
Papel filtro
Papel aluminio
Pinza de diseccin
Lentes de proteccin
Batas
Cubre bocas
Franela
Algodn
Cerillos
Alcohol

REACTIVOS
500 gr de suelo contaminado con HTP
500 gr de suelo limpio
100 ml de agua destilada
2 ml de cloruro de bario al 2 %
2 gotas de fenolftalena al 1 %
5 ml de hidrxido de potasio estril a 1 N
Acido clorhdrico a 0.1 N
90 ml de solvente diclometano
LOCALIZACION DEL REA DE ESTUDIO.
Los criterios para seleccionar los suelos a utilizar en esta investigacin sern que
presenten algunas similitudes en sus propiedades fsico-qumicas y presencia de niveles
de contaminacin. Se utilizarn, suelos provenientes del ejido Jos Narciso Robirosa del
municipio de Huimanguillo, Tabasco, localizado en las coordenadas 1804'54N y
9402'31O ubicado al sureste de la petroqumica la Venta Tabasco (contaminado con
petrleo) y suelo proveniente del ejido Arroyo Hondo Santa Teresa en Crdenas,
Tabasco. (Sin contaminacin) localizada en las coordenadas 180'0N y 9325'0W.
ANALISIS EN LABORATORIO.
Esta investigacin se desarrollar en condiciones in-vitro en el laboratorio de la
Universidad Popular de la Chontalpa. Se utilizaran suelos de 25000 a 50000 mgkg-1 de
HTP (Hidrocarburos Totales de Petrleo) y 78000 mgkg-1 de HTP de petrleo
intemperizado. Se necesitar de un consorcio de hogos aspergillus y trichoderma
tomados del cepario del laboratorio de microbiologa del suelo del colegio de
posgraduados campus tabasco, y se aislarn en suelo contaminado con 78000 mgkg-1
de HTP provenientes de la Venta Tabasco.
PREPARACION DE SUELO Y UNIDADES EXPERIMENTALES
Los suelos ser secados bajo sombra, se moleran con mazo y mortero, se tamizaran con
una maya de 1 mm de dimetro. Se pesarn 100 gr de suelo para cada unidad
experimental.
La unidad experimental consistir en un frasco de vidrio con tapa, con una capacidad de
250 ml. El suelo del sitio 1 (suelo limpio) ser utilizado para unidades experimentales
testigo y tambin para las unidades experimentales que se requerirn contaminar con
25000 mgkg-1 y 50000 mgkg-1 de HTP. Para las unidades experimentales con 78000
mgkg-1 de HTP de petrleo intemperizado se utilizar el suelo del sitio 2 (suelo

intemperizado). Se incorporar un consorcio de hongos aspergillus y trichoderma

adicionando 30 ml de inculo de este consorcio a las unidades experimentales segn los
tratamientos.
TAMAO DE LA POBLACIN DE HONGOS
El tamao de la poblacin de hongos se evaluar a las 96, 720 y 1440 horas. Se
cuantificar a travs del mtodo de dilucin seriada en agar slido (Magidagan, 1998);
que consiste en tomar 10 gr de suelo (homogneo) de cada tratamiento, el cual se
colocara en el frasco de 90 ml de H2O estril. Este se agitar en el agitador mecnico a
124 revoluciones por minuto (rpm) con movimiento lineal durante 10 min y se
realizaran diluciones seriadas de 102, 103 y 104. Se tomaran alcuotas de 0.1 ml de cada
dilucin, sta se colorar sobre la superficie del medio de cultivo, con tres repeticiones
por dilucin. El medio de cultivo ser de patata dextrosa agar (PDA). El 0.1 ml de la
dilucin colocado sobre el medio de cultivo en la caja de petri, se rastrillar con una
varilla de vidrio, una vez terminado se proceder a incubar a 30 C por 98 horas, para
posteriormente realizar la evaluacin de las unidades formadoras de colonias por el tipo
de hongo.
Una vez obtenidos los resultados se aplicar la siguiente formula para saber las unidades
formadoras de colonias del consorcio y el tipo de hongos.
UFC = # de colonias x diluc x 10 g
PSS
Donde:
UFC = unidades formadoras de colonias
Diluc = dilucin
PPS = peso de suelo seco
PORCENTAJE DE DEGRADACIN DE HTP.
Esta variable se evaluar al inicio y a la 1400 horas. Los hidrocarburos de cada muestra
se extraern mediante el equipo Soxhlet por el mtodo de la EPA (agencia de proteccin
ambiental de Estados Unidos) 3540C que consiste en pesar 10 gr de muestra de suelo
(para cada uno de los diferentes tratamientos), estas muestras se colocan en el equipo
soxhlet con 90 ml de solvente diclorometano a una temperatura constante de 45 C
durante 8 horas que es el tiempo de duracin para llevar a cabo de extraccin de dichas
muestras.
Las muestras obtenidas se pesaran en una balanza y se sacaran los resultados por
diferencia de peso (Escalante, 2002).
PORCENTAJE DE HUMEDAD.
Esta variable se evaluar al inicio y cada 30 das. Se utilizar el mtodo gravimtrico
(Botello y Villanueva. 1978) que consiste en medir el contenido de humedad por
diferencia en peso, se toma 10 gr de muestra (material hmedo) se realiza peso inicial
en una balanza granataria, posteriormente, porteriormente se mete a secar en la estufa a
105 C por 78 horas. Para ralizar el calculo de humedad de porcentaje de humedad se

tomarn los resultados obtenidos de los tratamientos y se transformaran conforme a la

siguiente formula:
% Hum = P.Sh P.S.S X 100
P.Sh
Donde:
% Hum = porciento de humedad
P.Sh = peso de suelo hmedo
P.S.S = peso de suelo seco
CUANTIFICACION DEL METABOLISMO AERBICO DEL SUELO
Esta variable se cuantificar utilizando una tcnica volumtrica en donde se determinar
la cantidad de CO2 producido (Garca, 1981). Para ello se utilizarn las unidades
experimentales de los tratamientos a utilizar para evaluar las variables de porciento de
degradacin, poblacin de consorcio de hongos y porcentaje de humedad.
A cada unidad experimental se le introducir un frasco de vidrio de 5 ml de hidrxido
de potasio y una tira de papel filtro, los frascos se taparn y se cubrirn con papel
aluminio para asegurar las unidades experimentales.
A las 96, 720 y 1440 horas se evaluarn la produccin de CO2. Para esta evaluacin se
colocarn todos los frascos en la mesa y con una pinza estril se retirar el frasco con
hidrxido de potasio, colocando este en un vaso de precitado y se le adicionarn 5 ml de
agua estril, 2 ml de cloruro de bario y 2 gotas de fenolftalena, para posteriormente
proceder a su titulacin con cido clorhdrico.
CRONOGRAMA
BIBLIOGRAFIA
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GLOSARIO
Alcuota: Es el volumen o cantidad de masa que se va a emplear en una prueba de
plataforma o de laboratorio. Normalmente las alcuotas son el resultado de repartir un
volumen inicial en varias partes iguales. Se suele medir en mililtros (mL) o gramos
diluidos (g).
Biopilas: Las biopilas constituyen una tecnologa de biorremediacin ex situ en la cual
el suelo contaminado con hidrocarburos es extrado y dispuesto en un rea de
tratamiento o piscina previamente excavada para su descontaminacin con
microorganismos.
Composteo: es un proceso por medio del cual materia biodegradable se mezcla para
convertirse en un abono humfero estabilizado gracias al trabajo de organismos
biolgicos que viven bajo condiciones controladas.
Cuantificacin: es el proceso de convertir un objeto a un grupo de valores discretos,
como por ejemplo un nmero entero. Dependiendo del campo de estudio, el trmino
cuantificacin puede tomar diferentes definiciones.
Humfero: rico en humus.
Humus: es la sustancia compuesta por productos orgnicos, de naturaleza coloidal, que
proviene de la descomposicin de los restos orgnicos (hongos y bacterias). Se
caracteriza por su color negruzco debido a la gran cantidad de carbono que contiene. Se
encuentra principalmente en las partes altas de los suelos con actividad orgnica.
Inculo: Dispora de los hongos que forman simbiosis mutualstica con las races de las
plantas.
Microflora: Representada por hongos, algas unicelulares y vegetales microscpicos que
se encuentran en un suelo.
Patata Dextrosa Agar (PDA): es un medio de cultivo selectivo aprovechando las
condiciones acidas del medio una vez reconstituido, y que alcanza el ph 5,6 aunque en

condiciones de excesiva contaminacin bacteriana se puede potenciar el efecto del ph

acidifican.
Rizosfera: es una parte del suelo inmediata a las races donde tiene lugar una interaccin
dinmica con los microorganismos.
Tamizar: es pasar por el tamiz, es decir filtrar una mezcla para que caigan al plato slo
las partes ms finas