1-1-2014

Microbiologa Ambiental II
Tema: Microorganismos en la industria, prerrequisitos para los procedimientos industriales de las bacterias, levaduras y otros tipos de hongos.

ESCUELA SUPERIOR POLITCNICA AGROPECUARIA DE MANAB MANUEL FLIX LPEZ

CARRERA MEDIO AMBIENTE

SEMESTRE QUINTO A

PERIODO SEP - MARZO/2014

AUTOR: ALAVA CHUMO DIANA GISSEL INTRIAGO GARCIA ANDREA GABRIELA LOOR MORAN GABRIEL ENRIQUE MENDOZA MENDOZA LUIS ESTEBAN MORN MORN DIANA FERNANDA

FACILITADOR(A): Dr. AIDA DE LA CRUZ

1. Objetivos
Establecer los industriales. Destacar las principales caractersticas de los microorganismos empleados para uso industrial. Indicar los prerrequisitos para los procedimientos industriales con microorganismos usos y funciones de los microorganismos en los procesos

2. Marco terico Microorganismos en la industria

Los microorganismos pueden ser considerados en trminos generales con dos criterios que son antagnicos. Uno corresponde a las actividades tiles que tienen algunos para obtener bienes o servicios y otro completamente distinto corresponde a los efectos perjudiciales que ocasionan que estn generalmente asociados a la produccin de enfermedades, tanto en el hombre como en los diversos. La Microbiologa Industrial se ocupa fundamentalmente de las actividades tiles de los microorganismos. (Rodolfo Ertola, 2006) La biotecnologa podra definirse como toda aplicacin tecnolgica que utilice sistemas biolgicos y organismos vivos o sus derivados para la creacin o modificacin de productos o procesos para usos especficos (Morales, 2012) la biotecnologa tradicional, en la que se utilizaban los microorganismos tal como se encuentran en la naturaleza, para hacer, por ejemplo, fermentaciones (pan y bebidas alcohlicas), para fabricar antibiticos y vacunas e incluso para controlar plagas. Es decir, siempre se ha hecho biotecnologa sin saberlo, de manera emprica y sin saber sus fundamentos, sin conocer siquiera la existencia de los microorganismos.

Las aplicaciones de los microorganismos datan de tiempo inmemorial. El hombre hizo uso de ellos sin saber que stos existan desde que invent o descubri al azar la manera de hacer cerveza, vinagre, vino o pan. La cerveza era conocida antes del 6000 a.C. por sumerios y babilonios, y en el antiguo Egipto exista ya verdadera produccin en 1700 a.C.; el vinagre se produca desde antes de esa fecha y el vino es tambin muy antiguo, ya que existe evidencia de su produccin antes del 2000 a.C. en Egipto y China, y finalmente el pan se conoce desde 4000 a.C. aproximadamente. (Rodolfo Ertola, 2006)

Caractersticas de los microorganismos industriales

Existen una serie de caractersticas que comparten todos los microorganismos y que suponen ciertas ventajas para su uso en la industria la ms fundamental, el pequeo tamao

de la clula microbiana y su correspondiente alta relacin de superficie a volumen. Esto facilita el rpido transporte de nutrientes al interior de la clula y permite, por consiguiente, una elevada tasa metablica. As, la tasa de produccin de protena en las levaduras es varios rdenes de magnitud superior que en la planta de soja, que, a su vez, es 10 veces ms alta que en el ganado. Esta velocidad de biosntesis microbiana extremadamente alta permite que algunos microorganismos se reproduzcan en tan solo 20 minutos (Escherichia coli). (Gonzlez) Los ambientes capaces de albergar vida microbiana son muy variados. Se han encontrado especies que viven a temperaturas comprendidas entre el punto de congelacin del agua y el punto de ebullicin, en agua salada y dulce, en presencia y en ausencia de aire. Algunos han desarrollado ciclos de vida que incluyen una fase de latencia en respuesta a la falta de nutrientes: en forma de esporas permanecen inactivos durante aos hasta que el medio ambiente, ms favorable, permita el desarrollo de las clulas. Los microorganismos se hallan capacitados para acometer una extensa gama de reacciones metablicas y adaptarse as a muchas fuentes de nutricin. (Morales, 2012)

Un microorganismo de uso industrial debe producir la sustancia de inters; debe estar disponible en cultivo puro; debe ser genticamente estable y debe crecer en cultivos a gran escala. Otra caracterstica importante es que el microorganismo industrial crezca rpidamente y produzca el producto deseado en un corto perodo de tiempo. El microorganismo debe tambin crecer en un relativamente barato medio de cultivo disponible en grandes cantidades. Adems, un microorganismo industrial no debe ser patgeno para el hombre o para los animales o plantas. Otro requisito importante es la facilidad de separar las clulas microbianas del medio de cultivo; la centrifugacin es dificultosa o cara a gran escala. Los microorganismos industriales ms favorables para esto son aquellos de mayor tamao celular (hongos filamentosos, levaduras y bacterias filamentosas) ya que estas clulas sedimentan ms fcilmente que las bacterias unicelulares e incluso son ms fciles de filtrar. (Gonzlez)

Tipos de microorganismos industriales

Los microorganismos que sintetizan productos tiles para el hombre representan, como mximo, unos pocos centenares de especies de entre las ms de 100000 descritas en la Naturaleza. Los pocos que se han encontrado con utilidad industrial son apreciados por elaborar alguna sustancia que no se puede obtener de manera fcil o barata por otros mtodos. Levaduras

Las levaduras se vienen utilizando desde hace miles de aos para la fabricacin de pan y bebidas alcohlicas. (Gonzlez) o Saccharomyces cerevisiae Conocida desde la antigedad, la levadura del pan, del vino y de la cerveza, Saccharomyces cerevisiae, se ha convertido en un organismo de estudio comn en el laboratorio. La investigacin biotecnolgica ha

mantenido el uso tradicional que se ha hecho de esta levadura, mejorando e innovando los procesos de panificacin y de produccin de bebidas alcohlicas. A la vez, este organismo ha ganado protagonismo en el
Ilustracin 1 levadura del pan Saccharomyces cerevisiae

laboratorio al convertirse en un potente modelo biolgico de organismos eucariotas. (Ozcoya) o Kluyveromyces fragilis Era conocida anteriormente como S. fragilis y K. fragilis. Ha sido aislada de fruta, queso, yogur, leche, fermentaciones espontneas, y se ha utilizado en el procesamiento del lactosuero; fermenta galactosa, sacarosa, rafinosa, lactosa, crece a temperaturas entre 2030C y pH 4,5-5, y con ella se obtienen etanol, glicerol, enzimas y protena unicelular. Es una de las pocas levaduras que posee la capacidad de hidrolizar la lactosa y fermentar los azcares eficientemente; el alcohol producido puede emplearse en la industria
Ilustracin 2 Kluyveromyces fragilis

farmacutica, de cosmticos y pudiera ser usado potencialmente como combustible alternativo. La lactosa proveniente del lactosuero puede ser directamente fermentable por algunos

microorganismos evitando su presencia en el agua de desecho; as pues podra servir como excelente materia prima para la fermentacin alcohlica, particularmente en procesos de alta productividad. De tal manera que es una buena eleccin como medio de cultivo para llevar a cabo procesos biotecnolgicos (Gouch S, 1996) o Yarrowia lipolytica Es una fuente industrial de cido ctrico. o Trichosporum cutaneum Desempea un importante papel en los sistemas de digestin aerbica de aguas residuales debido a su enorme capacidad de oxidacin de compuestos orgnicos, includos algunos que son txicos para otras levaduras y hongos, como los derivados fenlicos. (Gonzlez) Hongos filamentosos

Los hongos tienen una gran importancia econmica, no tan slo por su utilidad, sino tambin por el dao que pueden causar. Los hongos son responsables de la degradacin de gran parte de la materia orgnica de la Tierra, una actividad enormemente beneficiosa ya que permite el reciclaje de la materia viva. Por otro lado, los hongos causan gran cantidad de enfermedades en plantas y animales y pueden destruir alimentos y materiales de los que depende el hombre.

Los efectos perjudiciales de los hongos estn contrarrestados por su utilizacin industrial. Los hongos son la base de muchas fermentaciones como la combinacin de soja, habichuelas, arroz y cebada que dan lugar a los alimentos orientales miso, shoyu y tempeh.

Los hongos son tambin la fuente de muchos enzimas comerciales (amilasas, proteasas, pectinasas), cidos orgnicos (ctrico, lctico), antibiticos (penicilina), quesos especiales (Camembert, Roquefort) y, evidentemente, de las setas. (Garcia, 2006) o Penicilium Roqueforti Se emplea en los quesos con mohos en su interior por su accin lipoltica y proteoltica poderosa, responsable del aroma tpico del queso Roquefort o del queso de Cabrales, en particular la accin lipoltica. La funcin de este tipo de fermentos en quesera es:

Provoca la desadicificacin de la pasta del queso, mediante la utilizac in del cido lctico.

Segregan un conjunto de enzimas que le confiere un poder proteoltico importante.

Desarrolla

una

gran

actividad

lipoltica, Ilustracin 3 Hongo filamentoso

Roqueforti Se emplea en produciendo el aroma tpico de los quesos de pasta Penicilium los quesos.

azul. En quesos los ms empleados son:

Penicillium camenberti Penicillium roqueforti Geotrichum candidum

Para poder ser empleados, los fermentos fngicos requieren de unas caractersticas:

No ser patgenos ni toxignicos Ser capaces de crecer y desarrollarse en las condiciones del alimento No producir sustancias que afecten a otros microorganismos o al desarrollo normal del proceso fermentador

Los mohos tienen un papel importante a lo largo del afinado o maduracin de los quesos llamados de pasta blanda y los quesos con mohos en su interior (Faras, 2008) o Penicillium chrysogenum Es el hongo del que se obtuvo el antibitico penicilina, descubierto por Alexander Fleming en 1928. La cepa de Penicillium notatum aislada por Fleming produca 2 mg de penicilina por cada litro de cultivo, posteriormente se encontr que otros Penicillium eran mejores productores de penicilina y se eligi a Penicillium chrysogenum como cepa superproductora de este antibitico. Finalmente, la
Ilustracin 4 Penicillium chrysogenum se obtuvo el antibitico penicilina

seleccin de sucesivos mutantes superproductores y la mejora en las tcnicas de fermentacin realizadas por la industria biotecnolgica han hecho que actualmente se obtengan 60 g/L de penicilina. (Samson RA, 1997) o Aspergillus niger A pesar de su reputacin de producir reacciones alrgicas y enfermedades, es utilizado comnmente en la industria alimentaria para producir enzimas. Segn epa.gov, este hongo es fermentado en recipientes increblemente grandes (a veces de un tamao que llega a los 100.000 litros, o

aproximadamente 26.000 galones) y luego es procesado para obtener celulasa, invertasa, amiloglucosidasa, amilasa, lactasa, proteasa cida y pectinasa. El Aspergillus niger tambin es utilizado para preparar Pu-erh, un t de hoja chino. A industria alimentaria tambin fermenta Aspergillus niger para producir cido ctrico (utilizado comnmente en bebidas y en la cocina) y cido glucnico (que es utilizado en productos de limpieza y como aditivo alimentario). En 2006, en la Organizacin Mundial
Ilustracin 5 Aspergillus niger

de la Salud hallaron que los cidos orgnicos derivados del Aspergillus niger no son seguros para el consumo, pero tambin demostraron sus propiedades anticancergenas (prevencin del cncer) y antigioegnicas (reduccin de tumores). (Devaney, 2009) Bacterias

Entre las especies bacterianas de inters industrial estn las bacterias del cido actico, Gluconobacter y Acetobacter que pueden convertir el etanol en cido actico. El gnero Bacilluses productor de antibiticos (gramicidina, bacitracina, polimixina), proteasas e insecticidas. Del gnero Clostridium cabe destacar Clostridium

acetobutylicum que puede fermentar los azcares originando acetona y butanol. Las bacterias del cido lctico incluyen, entre otras, las especies de los gneros Streptococcus y Lactobacillus que producen yogur.Corynebacterium glutamicum es una importante fuente industrial de lisina. El olor caracterstico a tierra mojada se debe a compuestos voltiles (geosmina) producido por Streptomyces aunque su principal importancia radica en la produccin de antibiticos como anfotericina B, kanamicina, neomicina, estreptomicina, tetraciclina, etc. o Lactobacillus delbrueckii

Lactobacillus delbrueckii subespecie bulgaricus es una de las varias bacterias utilizadas para la produccin de yogur. Tambin se encuentra en otros productos fermentados naturalmente. Identificado por primera vez en 1905 por el mdico blgara Estambre Grigorov, la bacteria se alimenta de la lactosa para producir cido lctico, que se usa para conservar la leche. Es un bacilo Gram-positiva que puede aparecer a largo y filamentosas. Es no mvil y no forma esporas. Es considerado
Ilustracin 6 Lactobacillus delbrueckii bacterias utilizadas para la produccin de yogur

como acidricos o acidfilo, ya que requiere un pH bajo para crecer con eficacia. La bacteria tiene requerimientos nutricionales complejos.

Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus se utiliza comnmente junto Streptococcus thermophilus como titular para hacer yogur. Las dos especies de trabajar en sinergia con L.D. bulgaricus producir aminocidos a partir de protenas de la leche, que luego son utilizados por S. thermophilus. Ambas especies producen cido lctico, que da al yogur su sabor agrio y acta como un conservante. La disminucin resultante en el pH tambin se coagula parcialmente las protenas de la leche, tales como la casena, lo que resulta en el espesor de yogur. Mientras que la fermentacin de la leche, L. D. bulgaricus produce acetaldehdo, uno de los principales componentes de aroma de yogur. Algunas cepas de L. D. bulgaricus tambin producen bacteriocinas, que matan las bacterias no deseadas in vitro. (Kilic, 1996) o Streptococcus thermophilus

Streptococcus thermophilus, como su nombre lo indica, se parece a una cadena de esferas. Es un microbio grampositivos y es un anaerobio facultativo. No forma esporas y no se mueve por s sola. Como el nombre de la especie regala, el microbio que le gusta las temperaturas ms clidas. Su tasa de crecimiento ptimo se produce en la
Ilustracin 7 Streptococcus thermophilus es una bacteria de cido lctico

parte inferior del espectro termfilo, alrededor de 45 C. La parte ms interesante de este microbio es que S.

thermophilus es una bacteria de cido lctico. Esto significa que se descompone el piruvato en cido lctico y acetaldehdo. Se considera un homofermentativo, lo que significa que a medida que se rompe la bacteria abajo piruvato mayor parte de los productos formados habr lactato. Otra propiedad importante de S. thermophilus es que es una bacteria probitica. La bacteria es saludable para el organismo husped que lo consume, y combina este microbio con el resto de su flora internos. Estas dos caractersticas son importantes para los muchos usos de S. thermophilus. ( MicrobeWik, 2010) Este microbio tambin es til en la produccin y el aislamiento de enzimas. Debido a que S. thermophilus genoma 'es ms corto que la mayora, 1,8 Mb, el microbio que ha sido el tema

de varios estudios de investigacin para mejorar el organismo. Uno de estos estudios implicaba la produccin de beta-galactosidasa de la microbio. Beta-galactosidasa hidroliza la lactosa y se descompone en galactosa y glucosa. Beta-galactosidasa es una de las enzimas ms estudiadas y se utiliza como un marcador para los ensayos de senescencia, as como para las pruebas en el metabolismo y cintica de las enzimas. La ltima caracterstica mencionada fue que S. thermophilus es un probitico. Los probiticos son consumidos comnmente como parte de los alimentos fermentados. A veces, especialmente aadido cultivos vivos activos se incluyen, como en el yogur. S. thermophilus se ha sabido para ayudar a la floral interna de un ser humano. Como consumir el microbio ha ayudado a aliviar los sntomas de la intolerancia a la lactosa y otros problemas gastrointestinales. Debido a esta caracterstica nica del microbio, se ha aadido a varios suplementos para la salud junto con otra bacteria probitica. Dos de estos suplementos incluyen Colon y Probitico iFlora mltiples probiticos. Creo que un tercer suplemento es REFLORA por Vaxa. El Vaxa empresa nunca sale a la derecha y dice que el microbio se encuentra en su producto. Sin embargo, pasaron una buena parte del tiempo que describe el microbio y sus beneficios. S. thermophilus es una parte importante de nuestro mundo. No slo es un jugador importante en el proceso industrial de produccin de alimentos lcteos, pero tambin es una adicin saludable y til para el sistema digestivo de los seres humanos ( MicrobeWik, 2010) o Lactobacillus delbrueckii ssp. Bulgaricus y Streptococcus Thermophilus

La fermentacin cida lctica del yogurt Blgaro es un proceso biolgico nico en el cual los cultivos simbiticos del Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus y el Streptococcus thermophilus estn involucrados. Ambos microorganismos cooperan entre si durante la fermentacin y el crecimiento asociado que dan como resultado una acidificacin acelerada; pero el mecanismo excato todava no esta del todo entendido. Estudios moleculares y genmicos indican que el Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus est en proceso de reduccin continua impulsada por la evolucin humana. La edad de la seleccin

de cepas adaptadas a la protena en el medio rico de la leche llevo a la creacin de cultivos naturales simbiticos como los del Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus y el Streptococcus thermophilus que se estimulan unos a otros para el crecimiento, cooperando y compensandose unos a otros metablicamente Hoy en da varios rasgos genticos y bioqumicos son conocidos por ser responsable de la compleja interaccin positiva entre estas dos especies bacterianas: S. thermophilusdegrada la urea en la leche y por consiguiente excreta CO2 para de esta manera estimular el crecimiento del Lactobacillus, lo que se ve dificultado por la baja concentracin de CO2 en la leche despus del tratamiento trmico. S. thermophilus estimula el crecimiento del L. bulgaricus a travez de la formacin de cido frmico, que es la limitacin de paso en la biosntesis de purinas. La mezcla de fermentos de yogurt pueden estimular la produccin de algunos metabolitos, como el acetaldehdo. El L. bulgaricus, a diferencia del S. thermophilus, posee una pared extracelular y, por tanto, obliga a la proteasa a suministra petidos y aminocidos al S. thermophilus.

reas de aplicacin de los microorganismos en la industria.

Las reas de aplicacin de la Microbiologa industrial son muy variadas y de ellas surge la importancia y el impacto que tiene esta disciplina en la actualidad. Las reas principales son: salud, alimentos, produccin vegetal y animal, insumos industriales, minera y servicios. Los microorganismos en la industria farmacutica

En primer lugar se debe destacar la importancia de la Microbiologa Industrial en el mantenimiento de la salud y tratamiento de enfermedades, fundamentalmente por su aplicacin en la produccin de compuestos de actividad farmacolgica y vacunas.

Los medicamentos ms importantes producidos por microorganismos son los antibiticos, sustancias qumicas que matan o inhiben el crecimiento de otros microorganismos y que han reducido la peligrosidad de muchas enfermedades infecciosas. Los antibiticos comercialmente tiles estn producidos, sobre todo, por hongos filamentosos y por algunas bacterias. Algunos antibiticos inhiben la sntesis de la pared celular de las bacterias: es el grupo de las penicilinas. Otros interfieren en la sntesis de protenas de las bacterias; entre ellos destacan la estreptomicina y las tetraciclinas. La investigacin de los antibiticos se centra ahora en comprender su mecanismo de accin para construir derivados artificiales que sean ms eficaces. Este tipo de antibiticos se denominan antibiticos semisintticos. En esta tarea de disear medicamentos se utilizan mtodos de simulacin por ordenador que permiten predecir la eficacia de una determinada molcula. Una vez identificado un compuesto prometedor, hay que sintetizarlo y ensayarlo clnicamente.

La produccin de vitaminas ocupa un segundo puesto en las ventas totales de las industrias farmacuticas. Algunas vitaminas se sintetizan artificialmente; sin embargo, otras (B12, riboflavina) son demasiado complicadas para su sntesis qumica y se obtienen a partir de cultivos de microorganismos.

En la actualidad comienza a utilizarse un gran nmero de bacterias obtenidas por ingeniera gentica para producir protenas de utilidad farmacutica. Por ejemplo, antes las personas diabticas deban inyectarse insulina procedente de animales, lo que provocaba algunos casos de alergia. Hoy se transfiere el gen humano de la insulina a cepas de bacterias para que la produzcan en gran cantidad en fermentadores. Anlogamente se fabrican hemoglobina, factores de coagulacin sangunea, hormona de crecimiento o interferones; y se insertan en bacterias genes de virus para que produzcan grandes cantidades de protenas vricas que luego sirven como vacunas. En investigacin bsica, utilizando estas tcnicas podemos estudiar, incluso, las protenas minoritarias de las clulas. La enorme cantidad de dinero que se mueve en el mbito de los medicamentos y la farmacia ha desarrollado un gran inters por este campo de la biotecnologa. Con ello se ha popularizado el concepto de patente gnica por el que los investigadores o corporaciones

biomdicas registran sus descubrimientos para poder comercializarlos en exclusiva durante un tiempo y as amortizar sus enormes tambin inversiones. Ms all de la lgica del proceso econmico, esta prctica puede llevar a incrementar las desigualdades entre pases ms desarrollados y otros ms pobres, que no podran acceder a todos los recursos farmacuticos. (Morales, 2012)

Los microorganismos en la industria alimentaria

En la industria de alimentos es tambin significativa la aplicacin de la Microbiologa Industrial en la produccin de bebidas, enzimas, saborizantes, productos lcteos, etc En contra de la idea de que todos los microorganismos son dainos, los yogures y los quesos son ejemplos de alimentos a los que se aaden stos para, por ejemplo, agriar la leche y producir yogur, u obtener la cubierta blanca caracterstica del queso Brie o el color azul del queso Roquefort. De un tamao ms o menos similar es el sector de frutas y verduras, en el que los productos pueden no haber sufrido ninguna alteracin o estar enlatados, congelados, refrigerados o fritos.tetraciclina, etc.

Su uso, se debe a que los microorganismos, al realizar procesos de fermentacin.

La fermentacin es un proceso catablico, mediante el que se oxida materia rica en glcidos (a veces prtidos), produciendo molculas ms pequeas y generando energa para el organismo que la realiza. Se pueden destacar varios tipos de fermentaciones, como son la fermentacin alcohlica, la fermentacin lctica y la, mal llamada, fermentacin actica, pues desde el punto de vista bioqumico, no es una autntica fermentacin, sino una oxidacin incompleta de materia orgnica (interviene oxgenoen el proceso) (Camayo, 2005) Estas liberan molculas orgnicas al medio donde se desarrollan, algunas de las cuales tienen utilidad para el hombre; es el caso del cido lctico (fermentacin lctica) y el alcohol etlico y CO2 (fermentacin alcohlica).

Los microorganismos que realizan fermentacin lctica ( bacterias y algunos hongos) son utilizados industrialmente para la obtencin del queso y otros productos lcteos; los que realizan fermentacin alcohlica (levaduras) son utilizados para la obtencin del vino, cerveza y otras bebidas alcohlicas. Fermentaciones lcticas:

Fabricacin del queso: La elaboracin del queso y otros productos lcteos, como yogurth, cuajada y requesn, se debe fundamentalmente a las bacterias lcticas (Lactobacillus, Streptococus y Leuconostoc) , que se desarrollan en la leche. Hidrolizan el azcar de la leche, la lactosa, en glucosa; por fermentacin, la glucosa se degrada liberando energa (los 2 ATP de la glucolisis) y como producto final se obtiene cido lctico.Las tcnicas de fabricacin del queso y de las leches fermentadas son muy antiguas y se cree que nacieron como un medio de conservar la leche, ya que el cido lctico acta como un conservante natural, evitando, por el pH cido que origina en la leche, que se desarrollen en ella microorganismos patgenos. La elaboracin del queso se lleva a cabo en tres etapas: Adicin a la leche de renina, tambin llamada cuajo, una enzima que se extrae del estmago de los rumiantes. En combinacin con el cido lctico producido por las bacterias lcticas, la renina provoca la precipitacin de las protenas lcticas formando un producto slido, la cuajada, que se separa posteriormente del componente lquido, el suero lcteo. Separacin de la cuajada del suero mediante un proceso de filtracin. La filtracin se realiza haciendo pasar el suero a travs de telas limpias. A continuacin, se aade sal a la cuajada. Maduracin del queso. Segn el tipo de queso, en esta etapa final intervienen otras bacterias responsables del sabor y el olor propios de cada variedad de queso. En algunas variedades de queso tambin intervienen hongos, como el Penicilliurn roquefort responsable del color, olor y sabor caractersticos del queso de roquefort. Fermentaciones alcohlicas:

Se basan en la accin de levaduras (hongos unicelulares) sobre materiales ricos en glucosa. Estas levaduras degradan la glucosa a alcohol etlico, liberando CO2. Esta degradacin proporciona a las levaduras energa (los 2 ATP de la glucosilis) Fabricacin del vino

El vino es un producto que se obtiene de la fermentacin alcohlica del zumo de uva, realizada por levaduras (Sacharomyces ellipsoideus) que estn en la superficie de las uvas. La elaboracin del vino implica los siguientes procesos: Se inicia triturando las uvas en una mquina hasta obtener un zumo rico en glucosa y fructosa llamado mosto. El mosto se trasvasa a grandes cubas, que pueden ser de madera , de acero o de cemento y se espera unos das a que las levaduras degraden la glucosa de la uva en alcohol etlico. El CO2 liberado en la fermentacin se evapora o se elimina artificialmente, excepto en el caso de algunos vinos espumosos. Posteriormente, el vino se traslada a cubas de sedimentacin donde precipita un residuo orgnico (orujo). El vino decantado contina la fermentacin algn tiempo ms; para aclararlo, es decir, para eliminar la turbidez que puede tener debido a ciertos componentes, se provoca su precipitacin y luego se filtra el vino. A continuacin el vino se trasvasa a cubas de roble para su envejecimiento, que tiene como finalidad que el vino adquiera ciertas caractersticas de color, aroma y sabor; este proceso puede durar aos, como es el caso de algunos tipos de vinos.

Fabricacin de la cerveza: Requiere un proceso ms complicado desde el punto de vista tecnolgico, ya que implica la obtencin previa de la malta: se llama as a los granos de cebada germinados, que se tuestan y a continuacin se muelen. A este material, rico en glucosa, se le aaden levaduras (Sacharomyces cerevisiae), que desarrollarn una fermentacin alcohlica. El sabor amargo de la cerveza se obtiene aadindole las flores de lpulo y el color que caracteriza a cada tipo de cerveza se obtiene tostando ms o menos la malta. Fabricacin del pan: Es un proceso que se realiza desde la antigedad. Los microorganismos que intervienen en la fabricacin del pan son las mismas levaduras que se usan en la obtencin de la cerveza (Saccharomyces cerevisiae); de hecho, se obtienen industrialmente como un subproducto en la fabricacin de la cerveza. La elaboracin del pan consiste en mezclar, en un primer paso, harina, agua, sal y levadura. Al entrar en contacto con el agua, las enzimas amilasas presentes en la harina se activan e hidrolizan el almidn liberando glucosa que es

fermentada por la levadura. El CO2 resultante queda atrapado en el interior de la masa y forma un gran nmero de pequeas burbujas que determinan el aspecto esponjoso de la misma. La coccin de la masa elimina el etanol producido en la fermentacin y destruye las clulas de levadura. As mismo, tiene lugar una reduccin importante en el contenido de agua. (Morales, 2012) Los microorganismos en la produccin agropecuaria

Se ve tambin favorecida en sus aspectos de produccin vegetal y animal por un conjunto variado de procesos microbiolgicos que se han enriquecido notablemente en los ltimos aos con la utilizacin de tcnicas de ingeniera gentica. Los microorganismos en el rea de aplicacin en minera

Est relacionada con la biolixiviacin es decir con la aplicacin de microorganismos en la extraccin de metales de minerales de baja ley. Los microorganismos en el rea de servicios

Se refiere fundamentalmente a la aplicacin de microorganismos en la purificacin de efluentes, aspecto fundamental para el mantenimiento de la calidad de vida. (Rodolfo Ertola, 2006)

Prerrequisitos para los procedimientos industriales de los microorganismos Seleccin

Debido a que el xito o fracaso de un proceso fermentativo comienza con el microorganismo utilizado, en la eleccin del mismo se deberan tener en cuenta ciertos criterios generales que se indican a continuacin: La cepa a utilizar debe ser genticamente estable. Su velocidad de crecimiento debera ser alta. La cepa debe estar libre de contaminantes, includos fagos. Sus requerimientos nutricionales deberan ser satisfechos a partir de medios de cultivo de costo reducido. Debe-ser de fcil conservacin por largos perodos de tiempo, sin prdida de sus caractersticas particulares.

Debera llevar a cabo el proceso fermentativo completo en un tiempo corto. Si el objetivo del proceso es un producto, ste debera ser de alto rendimiento y de fcil extraccin del medio de cultivo.

Los microorganismos que se utilizan en un proceso, pueden ser obtenidos por aislamiento a partir de fuentes naturales o de una coleccin de cultivos. A nivel industrial, en general, cada firma posee su propia coleccin de organismos, muchos de los cuales han sido mejorados a travs de tcnicas clsicas de mutacin o de ingeniera gentica. Sin embargo, estas cepas slo son empleadas por la industria que las posee, debido al gran valor comercial de las mismas. En algunos casos se dispone de organismos modificados genticamente para llevar a cabo reacciones especficas de biosntesis, degradacin o biocatlisis, los cuales estn protegidos por patentes. Esto significa que un gran porcentaje de organismos. Una vez efectuado el muestreo y seleccin (screening) para el aislamiento de una cepa de inters, la misma deber ser caracterizada. En este procedimiento se debe tener en cuenta que la composicin qumica del material a partir del cual se va a realizar el aislamiento comienza a variar a partir del momento en que es tomada la muestra, por lo tanto sta se debe procesar rpidamente, tratando de evitar alteraciones que afecten a la poblacin de inters.

Aislamiento directo:

En este caso es deseable que el medio que se utiliza para el aislamiento permita la mxima expresin del material gentico del organismo. Si se busca por ejemplo un organismo con accin antimicrobiana, se puede crecer al potencial productor, en una caja de petri en presencia del o los organismos contra los cuales se requiere la accin antimicrobiana, observndose la produccin del inhibidor por las zonas de inhibicin de crecimiento.

Enriquecimiento del cultivo:

Esta tcnica consiste en incrementar en una poblacin mixta el nmero de organismos de inters en relacin al resto. De esta forma se busca favorecer el crecimiento de un tipo dado de microorganismos mediante condiciones de cultivo adecuadas al mismo, o de condiciones

inapropiadas para el desarrollo de los otros. Esto se logra mediante el empleo de sustratos espe-cficos o ciertos inhibidores. Para mantener la fuerza selectiva del medio, el cual se modifica por el crecimiento del organismo buscado, se realizan subcultivos peridicos en medio fresco. (Rodolfo Ertola, 2006)

Mantenimiento o conservacin de los cultivos

Los objetivos de la conservacin de los cultivos se podran resumir en los siguientes aspectos: a) preservar la pureza gentica del cultivo sin prdida de ninguna de sus propiedades bioqumicas. b) preservar los niveles de su productividad inicial. c) lograr que el cultivo pueda ser transportado y manejado con facilidad. Esto ltimo puede ser un factor esencial en la seleccin de un mtodo de preservacin. En todo trabajo de Microbiologa se deben conocer las caractersticas de la poblacin con la cual se va a trabajar (propiedades morfolgicas y bioqumicas). En este sentido, tanto en la conservacin como en el desarrollo del cultivo, ya sea el que suministra o el que recibe la cepa, deberan usar las mismas tcnicas metodolgicas. Tanto para el mantenimiento, preparacin y propagacin de inculos se deben usar mtodos reproducibles que no produzcan variaciones o prdidas de las caractersticas de la cepa empleada. No hay mtodos de mantenimiento en procesos industriales que sean comunes a todas las industrias, emplendose en algunos casos mtodos especficos secretos. El conocimiento de las caractersticas del cultivo es esencial en la eleccin de un mtodo de preservacin. La identidad del cultivo puede conocerse en base a sus caractersticas de crecimiento en uno o ms medios especficos, tomando en consideracin propiedades macro y microscpicas exhibidas, o en base a una evaluacin ms exhaustiva empleando muchos ensayos bioqumicos, biolgicos, inmunolgicos y genticos. (Rodolfo Ertola, 2006)

 Subcultivos
Es un mtodo comn de conservacin, que consiste en el repique peridicodel cultivo en un medio nutritivo fresco. El intervalo de transferencia vara con el microorganismo, debiendo considerarse el medio adecuado para cada especie. Una vez desarrollados los cultivos se mantienen a 4 C durante lapsos que oscilan entre 15 das y 2 meses. Los inconvenientes que presenta son varios: a) incremento de la posibilidad de mutacin con cada transferencia, con prdida de las} caractersticas del organismo; b) riesgo de contaminacin; c) alteraciones en el medio de cultivo, durante la estada en fro, en la cual se produce una desecacin gradual del mismo. (Rodolfo Ertola, 2006)

Mantenimiento bajo capa de aceite

Es una tcnica simple y efectiva para prolongar la conservacin de muchos organismos y consiste en cubrir completamente el cultivo despus de su desarrollo en medio slido, con una capa de aceite mineral o vaselina estril. Los cultivos en esta forma se pueden conservar a temperatura ambiente o an mejor en heladera por perodos de varios aos. Algunos autores sostienen que en estas condiciones los microorganismos pueden continuar reproducindose, con posibilidades de aparicin de mutantes; sin embargo se acepta que estas alteraciones no se observan hasta los tres aos de mantenimiento. (Rodolfo Ertola, 2006)

Congelacin
Debido a que la actividad metablica de una clula se reduce considerablemente por mantenimiento a muy baja temperatura, la congelacin es una tcnica de eleccin, ya sea para cortos o largos perodos de tiempo. A esto ha contribuido tambin la mayor disponibilidad de nitrgeno lquido (-196 C) y el mejoramiento de los equipos de refrigeracin. La tcnica involucra el crecimiento del cultivo hasta la fase estacionaria, ya que en general en esta etapa las clulas son ms resistentes a los daos por congelacin y descongelacin, que las de fase exponencial. Tambin es aconsejable utilizar una densidad celular elevada en la congelacin, debido a que, cuando parte de las clulas se lisan se liberaran sustancias crioprotectoras que aumentaran el porcentaje de sobrevivientes. (Rodolfo Ertola, 2006) clulas

 Liofilizacin
La liofilizacin est considerada como el mtodo ms adecuado para la preservacin de

microorganismos. La tcnica involucra el congelamiento de un cultivo seguido por un secado bajo vaco, lo cual resulta en la sublimacin de agua de la suspensin celular. La ventaja es que la mayora de los organismos sobreviven al secado y el cultivo es fcilmente mantenido an a temperatura ambiente sin prdida significativa de viabilidad. La liofilizacin es apropiada para la conservacin de la mayora de las bacterias, encontrndose que las Gram-positivas sobreviven mejor que las Gram-negativas cuando se las liofiliza y mantiene en condiciones similares. Tambin se emplea en la conservacin de esporos, actinomycetes y muchos hongos incluidas levaduras. (Rodolfo Ertola, 2006)

3. Anexos

Bibliografa
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