INSTITUTO TECNOLOGICO DE PACHUCA ANLISIS INSTRUMENTAL

GRUPO A CLAVE: 4Y6 Nombre del profesor: ING. MA. JUANA ARRIAGA GMEZ

Cuestionario: Cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC)

INGIENERIA QUIMICA

CUARTO SEMESTRE

Equipo 5: Aldana Hernndez Mara Guadalupe Bautista Rodrguez MaryCruz Legorreta Castaeda Adriana Munguia Martin Jaqueline Tovar Pardo Karen

Fecha de entrega: 15 de Marzo del 2013.

Cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC)

1.- Cuales son los tipos de bombas empleadas en HPLC? Se utilizan tres tipos de bombas: bombas recprocas, bombas de jeringa o de desplazamiento y bombas neumticas o de presin constante. 2.-Cuales son las caractersticas de las bombas reciprocas? Se utilizan en aproximadamente el 90% de los sistemas de HPLC comercializados Consisten, en una pequea cmara en la que el disolvente es impelido por el movimiento de vaivn de un pistn accionado por un motor Dos vlvulas con cierre de bola, que se abren y cierran alternativamente, controlan el flujo del disolvente hacia dentro y hacia afuera de un cilindro.

3.-Cuales son las caractersticas generales de las columnas analticas? Tienen una longitud entre 5 y 30 cm Son rectas y se pueden alargar, si es necesario, acoplando dos o ms columnas El dimetro interno de las columnas es a menudo de 4 a 10 mm y los tamaos de las partculas de los rellenos ms comunes son 3, 5 y 10 m 4.-Cuales son las caractersticas de las columnas que se utilizan con ms frecuencia? La columna ms frecuentemente utilizada es la de 25 cm de longitud y 4.6 mm de dimetro interno, y empaquetada con partculas de 5 m. Estas columnas tienen de 40 000 a 60 000 platos/metro. 5.-Cual es la funcin de la pre columnas? Elimina la materia en suspensin y los contaminantes de los disolventes Sirve para saturar la fase mvil con la fase estacionaria y as minimizar las prdidas de sta en la columna analtica. 6.-Que se debe emplear para controlar la temperatura de la columna para obtener mejores cromatogramas?

Cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC)

7.-Cuales son los tipos de relleno de la columna que se utilizan generalmente? En cromatografa de lquidos se han utilizado dos tipos bsicos de rellenos, pelicular y de partcula porosa.

El primero consiste en bolas de vidrio o de polmero, no porosas y esfricas con unos

dimetros caractersticos de 30 a 40 m. Los tpicos rellenos de partculas porosas de cromatografa de lquidos estn formados por micro partculas porosas con dimetros entre 3 y 10 m y con la menor dispersin posible para un tamao determinado. 8.-Cuales son los detectores empleados en cromatografa de lquidos? Detectores de absorbancia Detectores de fluorescencia Detectores de ndice de refraccin Detector de dispersin de luz Detectores electroqumicos 9.- Los detectores en cromatografa de lquido son de dos tipos bsicos Cuales son estos? Los detectores basados en una propiedad de la disolucin responden a una propiedad de la fase mvil, tal como el ndice de refraccin, la constante dielctrica, o la densidad, que se modifica por la presencia de los analitos. Por contraste, los detectores basados en una propiedad del soluto responden a alguna de las propiedades del soluto, como la absorbancia UV, fluorescencia, o intensidad de difusin, que no son propias de la fase mvil. 10.- Mencione los detectores empleados en HPLC Detectores UV-visible. Detectores de fluorescencia. Detectores electroqumicos amperomtricos. Detectores electroqumicos de conductividad. Detectores de infrarrojo. Detectores diferenciales de ndice de refraccin. Detectores de dispersin luminosa evaporativa.

11.-Describa las propiedades ms importantes de los detectores empleados en HPLC

Detector de absorbancia: dispositivo de doble haz, uno de los haces pasa por la cubeta de flujo y otra atraviesa el filtro reduciendo su intensidad. Detector de absorbancia UV con filtros: los ms simples son los fotmetros de filtros con una lmpara de mercurio, como fuente se utiliza de forma restringida para solutos que absorben longitudes. Detector de absorbancia UV con monocromador: son instrumentos de series de diodos permiten recoger los datos de un espectro en un segundo, la identificacin del espectro consiste en un grafico tridimensional. Detector de absorbancia en infrarrojo: existen dos tipos con banda de longitud de onda que proporciona tres segmentos de filtros semicirculares, la otra se basa en instrumentos de la transformada de Fourier. Detector de fluorescencia: este consiste en analizar la muestra por medio de un detector fotoelctrico. Detector de ndice de refraccin: son detectores universales anlogos a los detectores de llama en cromatografa de gases.