Clulas madre: generalidades, Eventos biolgicos y moleculares Paola Andrea Acevedo Toro , Mnica Mara Corts Mrquez RESUMEN

Las autorrenovacin y la diferenciacin son caractersticas de las clulas madre que varan entre los diferentes tipos celulares segn el tejido en el que se encuentren y el microambiente que las rodee. En ambos procesos intervienen inhibidores del ciclo celular, genes implicados en rearreglos cromosmicos, protenas del desarrollo esencial y vas de sealizacin especficas. La autorrenovacin est regulada por diversos mecanismos, entre los cuales se destacan las vas Wnt, Notch y Hedgehog, y los factores BMI-1, p16 SOX2, HOXB4 y sus pralogos. Los adelantos en el conocimiento de la biologa de las clulas madre y de los mecanismos moleculares que regulan la autorrenovacin y la diferenciacin han convertido a estas clulas en una importante promesa para la investigacin bsica y aplicada. DEFINICIN Y CARACTERSTICAS El estudio de la biologa de las clulas madre naci en 1916 cuando Danchakoff describi la presencia en la mdula sea de ciertas clulas precursoras de otras; posteriormente Maximow confirm sus hallazgos. En general se define una clula madre, tambin denominada clula troncal, como la que tiene capacidad de autorreplicarse indefinidamente por divisin celular (autorrenovacin) y que, cuando se encuentra bajo condiciones microambientales adecuadas, puede

diferenciarse a otros tipos de clulas especializadas, no solo morfolgica sino tambin funcionalmente; es as como una poblacin pequea de clulas madre puede en unos meses proliferar hasta dar origen a millones de ejemplares con las mismas caractersticas de sus predecesoras. En aos recientes la transdiferenciacin o plasticidad, caracterstica especial de dichas clulas, las ha convertido en un recurso extraordinariamente prometedor tanto para la investigacin bsica como para las aplicaciones clnicas. El trmino plasticidad co rresponde a la capacidad de estas clulas de generar

grupos celulares diferentes de los de su tejido de origen; tal es el caso de las clulas madre hematopoyticas (CMH) (hematopoietic stem cells, HSC) y

mesenquimales, que bajo condiciones experimentales e incluso in vivo pueden diferenciarse hacia diversos linajes celulares: las CMH puedan dar lugar a

clulas hepticas, nerviosas y musculares, mientras

de acuerdo con su potencial de diferenciacin en que las clulas mesenquimales han demostrado,

clulas totipotenciales, pluripotenciales y multipotenciales. 2) Segn el tejido de origen, en clulas cuando se las expone a los estmulos apropiados, la

madre embrionarias y del adulto. capacidad de transdiferenciarse hacia osteoblastos

Son totipotenciales las clulas capaces de generar y adipocitos. TIPOS DE CLULAS MADRE

un embrin completo, es decir, de dar origen a tejidos embrionarios y extraembrionarios; tal es el caso Hay dos maneras de clasificar las clulas madre: 1)

de la fecundacin, proceso por el cual se genera una

capaces de generar cualquier linaje celular, pero no un embrin

clula, el zigoto, paradigma de clula totipotencial,

completo. Esta diferenciacin resulta de cambios en

que dar lugar a todas las clulas del embrin y posteriormente a las del adulto; por lo tanto, este tipo de

la expresin gnica; por ello las clulas extradas y

clulas solo se puede obtener durante las primeras

cultivadas entre los 7 y 14 das posfecundacin, cuando el embrin se encuentra en la fase de blastocisto,

fases de formacin del embrin, pues a medida que

nunca darn lugar a un embrin completo sino a

este evoluciona dichas clulas se especializan y transforman en otras, las pluripotenciales,

estirpes celulares especficas determinadas por los

genes que se expresen en el momento.

marca de un tejido concreto, es decir, solo pueden

Una vez que el embrin se implanta en el tero y

dar lugar a tipos celulares del tejido al que pertenecen; un ejemplo de ellas son las CMH que dan origen

contina su desarrollo, sus clulas se van especializando cada vez ms, transformndose en clulas

a todas las clulas sanguneas: glbulos rojos, glbulos blancos y plaquetas.

5,6 madre comprometidas, las multipotenciales, con

De acuerdo con el origen, las clulas madre pueden

proceder de tejido embrionario o de un organismo mayor grado de diferenciacin puesto que llevan la

adulto; de ah que se las denomine Clulas madre han centrado en la produccin de distintos tipos de

embrionarias (CME) (Embryonic stem cells, ESC) y tejidos e incluso de rganos simples, as como en la

Clulas madre adultas (CMA), respectivamente. Las incorporacin de genes forneos, lo que convierte a

primeras corresponden a precursores totipotenciales este tipo de clulas en un vehculo idneo para la

con capacidad de proliferar indefinidamente in terapia gnica paliativa y en una firme promesa para

vitro, por lo que gran parte de las investigaciones se

la medicina futura.

3 Las clulas madre adultas (CMA), por su parte, corresponden a progenitores multipotenciales, que

pueden renovarse constantemente y dar lugar a c7

lulas especializadas capaces de reparar lesiones CLULAS MADRE PRESENTES EN LA MDULA SEA

tisulares y de renovar clulas seniles; as mismo presentan una gran versatilidad biolgica, fundamentada en su capacidad de alterar drsticamente el

La mdula sea ha demostrado ser la mejor fuente

fenotipo en respuesta a los cambios del microambiente en donde se desarrollan.

de clulas madre del organismo adulto; entre las ms

estudiadas se destacan las clulas madre hematopoyticas (CMH) que se caracterizan por su capacidad

la proporcin de clulas madre entre los mononucleares del cordn umbilical disminuye con la edad

de proliferacin y diferenciacin en progenitores

gestacional, as: de 11% a las 17 semanas desciende a

hematopoyticos comprometidos; se pueden hallar

1% a las 38 semanas; sin embargo, presentan una ventaja competitiva sobre las CMH de la mdula sea,

tanto en la mdula sea (1-3% de los mononucleares),

pues se injertan 10 a 50 veces mejor en huspedes

como en la sangre del cordn umbilical (0,21%) y en la sangre perifrica (0,001-0,025%).

xengenos.

Los estudios sobre la ontogenia de las CMH indican 9

que aparecen en el embrin entre la tercera y cuarta 8

semanas de la gestacin; luego migran a travs de la

Cabe resaltar que En la mdula sea se pueden reconocer dos tipos de

circulacin fetal, primero hacia el saco vitelino, luego al bazo y al hgado, para finalizar en el rgano CMH: en primer lugar las de largo plazo (CMH-LP)

hematopoytico por excelencia del adulto: la m(long-term hematopoietic stem cells, LTHSC), que

dula sea.

participan en el mantenimiento del sistema hematopoytico durante toda la vida; as, en los modelos

CMH se han convertido en la base biolgica de los

murinos, las CMH-LP cumplen un papel importante

trasplantes de mdula sea para las personas que

en el xito del trasplante hematopoytico. El otro

padecen leucemia o aplasia medular; adems, se

tipo de CMH son las denominadas de corto plazo

usan teraputicamente en pacientes con enfermedades no hematolgicas como los infartos e isquemias del miocardio. (CMH-CP) (short term hematopoietic stem cells, STHSC), que originan los progenitores comprometidos

10 Se reconocen en la mdula sea otros tipos de clulas madre, a saber: clulas madre mesenquimales,

en el proceso de la hematopoyesis; en conjunto, las

condroblastos, adipocitos y mioblastos; su aislamiento se basa en ciertos marcadores que han hecho posible clulas progenitoras multipotenciales adultas (CPMA) por un espacio especfico en la mdula, denominado nicho, en el cual confluyen elementos del

(multipotent adult progenitor cells, MAPC) y las denominadas clulas madre SP (side population cells).

identificarlas: SH2, SH3, CD29, CD44, CD71 y CD90;

Las primeras, tambin conocidas como clulas

sin embargo, no expresan antgenos de superficie t-

estromales, son capaces de diferenciarse a tejidos

picos de las CMH como CD34 y CD45.

mesodrmicos funcionales, como osteoblastos,

las CPMA poseen capacidades de proliferacin y diferenciacin similares a las de las clulas madre

embrionarias, porque presentan gran actividad de la

proliferativo de la clula. A diferencia de la mayora

telomerasa durante el tiempo de cultivo, lo que les

de las clulas madre, las CPMA no expresan el CD34,

permite dividirse ms de 120 veces sin envejecimiento aparente; incluso de manera similar a las clulas

pero s, aunque en niveles muy bajos, Flk-1, Sca-1,

Thy-1, y en niveles elevados marcadores como CD13, del embrin se ha detectado activacin de los factores de transcripcin Oct-4 Nanog y Rex-1, que son

SSEA-1 (ratn/rata) y SSEA-4 (humano).

necesarios para mantener el estado indiferenciado y 8

Por su parte,

Hoechst que emite fluorescencia azul a 450 nm y un

11 por un espacio especfico en la mdula, denominado nicho, en el cual confluyen elementos del color rojo a 650 nm; mediante esta tcnica dual se

Por ltimo, se encuentran las clulas madre SP observadas por primera vez en la mdula sea del ratn utilizando un nuevo mtodo para identificar

reconoci un pequeo subgrupo de clulas (menos

del 0,1%) que revelaban fluorescencias roja y azul

CMH, basado en el anlisis por citometra de flujo de

bajas; posteriormente se demostr que estas clulas

doble longitud de onda, utilizando el colorante

expresaban el Sca-1, antgeno encontrado en las

en CMH tanto en humanos como en roedores; este es CMH, pero no se tean con el cctel de anticuerpos

un campo poco explorado pero promisorio para diversas aplicaciones teraputicas. dirigidos contra otros marcadores encontrados en

las CMH maduras, lo cual demostr una gran actividad de repoblacin hematopoytica a largo plazo

en la mdula sea del ratn. Hasta el momento se

sabe que estas clulas son capaces de diferenciarse