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ACTIVIDADES EN UNA TESIS

Una vez obtenido y revisado el instructivo que fija las normas de presentacin de tesis (toda Universidad establece uno), la tabla siguiente ofrece un modelo para desagregar las actividades o tareas de la elaboracin de una tesis estndar (un estudio emprico). El detalle de las actividades, la prioridad y su relacin con el Captulo correspondiente permiten planificar el trabajo y elaborar un diagrama PERT o carta Gantt. Obviamente un trabajo planificado facilita mucho la tarea de un tesista.

PRODUCTO FINAL (componente de la tesis) Resumen/Abstract Introduccin CAPTULO 1: PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

ACTIVIDADES PREVIAS

ACTIVIDADES

PRIORIDAD

Redaccin de todos los Captulos. Redaccin de todos los Captulos. Lecturas, revisin de antecedentes

Redactar, traducir Redactar Redactar: 1- Qu se estudia. Con qu: 2- Antecedentes tericos 3- Antecedentes empricos Cmo: 3- Tipo de estudio, metodologa. Para qu: 4- Para qu es un aporte y por qu. 5- Objetivos 6- Hiptesis 3- Indexar (*) 1- Elaborar un plan de temas a desarrollar de acuerdo al planteamiento del problema. -Establecer las prioridades (lo ms importante). 2- Redactar 3- indexar 1- Tipo de investigacin 2- Variables: operacionalizacin e instrumentos de recoleccin de datos si corresponde). 3- confiabilidad y validez 4- Universo y muestra 5- Descripcin de

8/9 7/9 1/9

CAPTULO 2: MARCO TERICO

Redaccin Planteamiento Problema

2/9

CAPTULO 3: METODOLOGA

Redaccin Planteamiento Problema

4/9

CAPTULO 4: RESULTADOS

Redaccin Planteamiento Problema

aspectos relevantes del trabajo de campo realizado 6- indexar 1- Recoleccin de los datos 2- Elab. Del cdigo 3- Codificacin y digitacin 4- Procesamiento (con SPSS o Excel optativo): Anlisis y generacin de tablas y datos finales. 5- Plan de presentacin 6- redaccin apoyada con cifras y tablas 7- indexar 1- Conclusiones en relacin a los objetivos e hiptesis. 2- Fortalezas y debilidades del trabajo realizado 3- Etapas futuras y proyecciones 4- indexar Orden alfabtico Instrumentos, mapas, trascripciones de entrevistas, etc.

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CAPTULO 5: CONCLUSIONES Y SUGERENCIAS

Redaccin Resultados

5/9

Referencias Apndices

Archivo APAstyle (bajar)

6/9 9/9

(*) Indexar: significa numerar consecutivamente ttulos y subttulos, grficos y tablas para disponerlos en el ndice (manualmente o con la funcin ndice de editor de texto, MSWord, por ejemplo)

Microorganismos benficos como biofertilizantes eficientes para el cultivo del tomate (Lycopersicon esculentum, Mill) Beneficial microorganisms as efficient biofertilisers for tomato crops (Lycopersicon esculentum, Mill) * *
Elein Terry Alfonso*, ngel Leyva*, Annia Hernndez
RESUMEN

En el uso y manejo de biofertilizantes en la agricultura, uno de los principales problemas es el desconocimiento de las es agroecosistemas y en la rizosfera de los cultivos, para su posible utilizacin eficiente. Desde el punto de vista ecolgico, es integrantes de la comunidad bacteriana que favorecen su aplicacin como inoculantes y propician un efecto agrobiolgico p agrcolas. Esta investigacin se desarroll con el objetivo de evaluar la efectividad agrobiolgica de Azospirillum sp, en el cr rendimiento en el cultivo del tomate. Para ello, se parti de seleccionar el gnero microbiano predominante en la rizosfera del c se evalu el efecto de su inoculacin a partir de la respuesta del cultivo. Los resultados demostraron que los gneros Ps Azotobacter, Bacillus y Streptomyces,forman parte de la comunidad microbiana de la rizosfera del tomate, en las cond queAzospirillum es el gnero dominante. La inoculacin artificial de esta rizobacteria caus un efecto positivo sobre el crecimie como en el estado nutricional de las plantas, con un rendimiento agrcola superior a un 11 % con respecto a las plantas testigo.

poblacional en la rizosfera de las plantas inoculadas. Palabras clave: rizosfera, inoculante, crecimiento, rendimiento.
ABSTRACT

One of the main problems regarding the efficient use and management of biofertilizers in agriculture lies in the unknown s ecosystems and crop rhizospheres. From the ecological point of view, it is important to know the members of the bacterial popu be applied as inoculants and enable a positive agro-biological effect on agricultural crops. This investigation was aimed biological effectiveness of Azospirillum sp. on tomato growth, development and yield. The predominating microbial genus in th thus selected and the effect of inoculating it was then evaluated, judging by the crop's response. Results showed that Pseu Azotobacter, Bacillus and Streptomyces belonged to the microbial population of the tomato rhizosphere conditions, Azospirillum being the most prominent genus. Artificial inoculation of this rhizobacteria caused a positive effect on as on plant nutritional stage, the agricultural yield being higher in 11% compared to control plants. A high microbial populatio the rhizosphere of the inoculated plants. Key words: rhizosphere, inoculant, growth, yield.
* Investigadores, Instituto Nacional de Ciencias Agrcolas (INCA). La Habana, Cuba. Correo electrnico: terry@inca.edu.cu Profesor auxiliar, Facultad de La Habana, Cuba. Recibido: Enero 10 de 2004 Aceptado: Junio 30 de 2005

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INTRODUCCIN utilizacin eficiente, el presente trabajo tuvo c Uno de los elementos ms valiosos que puede utilizar la agriculturaconocer el gnero microbianopredominante en la ecolgica es el uso de biofertilizan-tes, lo cual en los sistemascomo evaluar su efectividad agrobiolgica a pa productivos es una alternativa viable y sumamente importante paracrecimiento, desarrollo y rendimiento del cultivo lograr un desarrollo agrcola ecolgicamente sostenible, ya que MATERIALES Y MTODOS permite una produccin a bajo costo, no contamina el ambiente yPara el aislamiento de los microorganismos, se mantiene la conservacin del suelo desde el punto de vista de la localidad donde se desarroll el experiment fertilidad y biodiversidad. las reas experimentales del Instituto Nacional La sostenibilidad de los sistemas agrcolas a largo plazo debe (INCA), en la provincia de La Habana, San Jos fomentar el uso y manejo efectivo de los recursos internos de los el tipo de suelo es ferraltico rojo lixiviado qu agroecosistemas. En este sentido, los biofertilizantes constituyen Udic Rhodustalf, permitiendo aislar las cepas un componente vital de los sistemas sostenibles, ya que son un exudados radicales del cultivo. Se realizaron cin medio econmicamente atractivo y aceptable de reducir los mtodo de modelo microcosmo (Kabiry Faure insumos externos y de mejorar la cantidad y calidad de los recursosrizosfera de plantas de tomate con 15 das de g internos (Meja, 1995). La variedad de tomate empleado fue 'Am Entre los beneficios del uso de microorganismos en laPrograma de Mejoramiento Gentico del IN agricultura estn su capacidad de fijar nitrgeno atmosfrico, laculturales se realizaron segn el Instructivo tc descomposicin de residuos orgnicos, la desintoxicacin con Mina-gri, 1990). La fuente de nitrgeno que se u plaguicidas, la supresin de enfermedades en las plantas, el aporte El bioproducto AzoFert, elaborado de nutrientes al suelo y la produccin de compuestos bioactivosRPCV Azospirillum brasilense cepa Sp-7, el como vitaminas y hormonas que estimulan el crecimiento de laspredominante en la rizosfera del cultivo, plantas (Martnez, 2002). La efectividad en el uso de microorganismostecnologa de recubrimiento de las semillas e 8 se logra cuando se dan las condiciones ptimas para me-tabolizar los(1995), contando con un ttulo de 10 UFC sustratos, como disponibilidad de agua, oxgeno (dependiendo de tratamientos estudiados fueron los siguientes: si son aerobios obligados o anaerobios facultativos), pH y temperatura,1. Testigo absoluto (sin inocular y sin fertilizar) as como ladisponibilidad de fuentes energticas. 2. Testigo de produccin (sin inocular) y 30 -1 En el grupo de rizobacterias promotoras del crecimiento120 kg N.ha (trasplante) -1 vegetal (RPCV), Azospirillum sp. es considerado un sistema 3. AzoFert + 30 kg N.ha (semillero) y 60 k -1 modelo para el estudio de la asociacin entre bacterias y plantas que 4. AzoFert + 25 kg N.ha (semillero) y 95 k no nodulan (Bashan y Holgun, 1997). Las bacterias pertenecientes a La fase de semillero cont con una su este gnero son muy promisorias como inoculantes para las tratamiento y la fase de trasplante se trabaj 2 plantas; pues tienen un nmero de caractersticas interesantes que clculo de 25 m , sembrado a una distancia d las hace adaptables para establecerse ellas mismas en el0.30 m. Se utiliz un diseo completamente ale extremadamente complejo medio competitivo de la rizosfera (Burdman, Jurkevitch y Okon, 2000). Partiendo de que uno de los principales problemas con el uso y manejo de biofertilizantes en la agricultura es el desconocimiento de las especies presentes en los agroecosistemas para su posible

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fase de semillero as como bloques al azar con 4 rplicas para la fase de utiliz el Sistema Statistica versin 5.0, s

RESULTADOS Y DISCUSIN campo. A los 30 das de germinadas las semillas, a una muestra de 15Poblaciones bacterianas presentes en plantas por tratamiento se les evalu el crecimiento considerando En la tabla 1 se presentan las pob variables como la altura y la longitud del sistema radical de las plntulas. presentes en la rizosfera de plantas de t En la fase de floracin del cultivo se escogi un total de 10 muestras por suelo estudiado. Los resultados demos tratamientos para las evaluaciones del contenido de NPK foliares segn la diferencias significativas en los niveles p tcnica descrita en el manual de tcnicas analticas para laboratorio de suelos estudiados para p<0.05. Este c suelo y planta (INCA, 1999). explicarse por el hecho de que en Una vez se finaliz el ciclo biolgico del cultivo, se determin elcondiciones favorables para el c rendimiento agrcola y algunos de sus componentes, correspondiente al microorganismos. porcentaje de fructificacin y la masa promedio de los frutos. Al realizar las pruebas micromo -1 Igualmente se determin la colonizacin bacteriana (UFC.g ) a losfisiolgico-bioqumicas en los diferentes los gneros bacte 30, 60 y 120 das despus de la inoculacin, segn metodologa descrita encontraron Azospirillum, Azotobacter, Bacillus y por Bashan etl. (1996). Los procesamientos biomtricos empleados fueron: para el anlisis rizosfera del cultivo en las condiciones ev -1 de la microbiota total (datos transformados a log UFC.g ) y la evaluacin Estudios realizados en condiciones de crecimiento en plntulas, se realiz un anlisis de va-rianza dediferentes demostraron la presencia clasificacin simple y de clasificacin doble para las evaluaciones del gneros microbianos; as se obtuvo en rendimiento y sus componentes; para docimar diferencias entre desarrollados en el cultivo del maz (Hern tratamientos, se utiliz la Prueba de Rangos Mltiples de Duncan. Se Determinacin de la frecuencia de 2 aplic la prueba de % para comparar los porcentajes de las poblaciones gneros presentes en la rizosfera microbianas obtenidas, as como para la frecuencia de aparicin de los La figura 1 muestra la estructura de la c gneros microbianos estudiados. En todos los casos se presente en la rizosfera del cultivo; se ob de suelo (ferraltico rojo), el gnero Azo Tabla 1. Nmero de bacterias presentes en la rizosfera como predominante con relacin a los del tomate (Lycopersicon esculentum, Mill) 1 existen diferencias significativas entre e Tipo de suelo Microbiota LogUFC.g1 resultado puede deberse a la amplia total(UFC.g- ) vegetales que estas bacterias exudan 7 Ferraltico rojo lixiviado 1.65 x10 7.01 permite adaptarse y colonizar el amb mayor facilidad.
Tabla 2. Gneros microbianos presentes en la rizosfera (UFC.g- ) Tipo de suelo Pseudomonas Azospirillum Azotobacter Bacillus 6 6 6 6 Ferraltico rojo lixiviado 5.7x10 6.8x10 6.4x10 1.5 x10
1

Streptomyces 6 1.0x10

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Influencia de Azospirillum sp. en el crecimie tomate En la figura 2 se muestra el efecto de los crecimiento de las posturas, obtenindose vigorosas en cuanto a la altura y la longitud tratamientos donde se inocul el biofertilizante -1 con dosis de 30 y 25 kg N.ha respe estadsticamente del testigo absoluto y del t Este resultado pone de manifiesto la eficiencia permitir disminuir la dosis de fertilizante nitro Figura 1. Frecuencia de aparicin de los gneros microbianos en estudio. Con relacin al gnero Azotobacter, que es el que continacalidad de las plantas. Se demuestra, por otra macro-nutriente nitrgeno en su efecto sobre con mayor frecuencia de aparicin, Martnez (1998) ha obtenido un plantas, ya que la no aplicacin del mismo (tes efecto positivo sobre el crecimiento y desarrollo del cultivo de un efecto negativo en las variables evaluadas. tomate que se siembra en suelo ferraltico rojo, demostrndose la Con relacin al efecto de diferentes rizoba importancia de establecer altas poblaciones de esta bacteria en la del crecimiento vegetal sobre el crecimiento rizosfera de las plantas a travs de la aplicacin de productos de plantas, en Cuba varios autores obtuvieron re origen bacteriano con el fin de obtener un mayor efecto este sentido pueden citarse los trabajos realiza agrobiolgico positivo. Pulido (2002) con la utilizacin de Azotobact Muy baja frecuencia de aparicin se obtuvo para los gneros Bacillus y Streptomyces, lo que representara una altacultivo de la cebolla y tambin Martnez (2002 este microorganismo en el cultivo del tomate. inoculacin artificial para lograr un efecto positivo en las plantas inoculadas con estos gneros microbianos.
PseudomonaB Q Azospirillum Q Azotobacter \2 Budllus B Streptomyces

Tratamientos: T1: Testigo absoluto. T2: Testigo de produccin. T3: AzoFert+30 kg N.ha-1. T4: AzoFert+25 kg N.ha Figura 2. Influencia de Azospirillum en el crecimiento de plntulas de tomate.

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En la figura 3 se corrobora el efecto encontrado en la evaluacin del refleja los cambios observados en e crecimiento, donde se destaca la influencia positiva de la inoculacin plantas, cuando son inducidos bajo co conAzospirillum que origin un mayor vigor de las plntulas. propicias. Entre estos mecanismos se en de compuestos promotores del crecimie inducen un incremento en el nmero y radicales (Bacilio-Jimnez, 2001), a lo q buciones al aumento de la masa seca d de la enzima nitrato reductasa, para una los nitratos presentes en el suelo, o por de la fertilizacin inorgnica (Fallik et l., Diferentes autores encontraron res crecimiento de las plantas al inocularA literatura existen trabajos publicados por experimentos realizados con A. brasile Figura 3. Influencia de Azospirillum (AzoFert) en el vigor de plntulas de tomate. incremento de la masa fresca y seca de Bashan y Levanony (1990) atribuyen el efecto de estas rizobacterias en la elongacin de las races en otros c a lo que ellos denominan "hiptesis aditiva" en la que ms de un expresa la especificidad entre los exuda mecanismo est involucrado en la asociacin planta-rizobacte-ria, loscultivo y la rizobacteria A. brasilense (c cuales operan simultneamente o en asociacin. estmulo provocado sobre el crecimient En cuanto al mecanismo de accin mediante el cual Azospirillum sp.cual constituye un importante resultado d promueve el crecimiento vegetal, Bashan (1999) plantea que prctico para el manejo agronmico de e posiblemente ms de un mecanismo de accin est involucrado en la Influencia de los tratamientos en los c asociacin y que estos operan simultneamente o en sucesin; la suma foliar de los diferentes mecanismos En la tabla 3 se indican los contenidos fsforo y potasio presentes en las con Azospirillum brasilense y suplemenfertilizacin nitrogenada, respecto al tes anlisis estadstico arroj diferencias a entre los tratamientos para cada uno de l
Tabla 3. Contenidos de N, P, K foliar de plantas de tomate

Tratamientos Testigo absoluto Testigo de produccin 1 AzoFert + 90 kg N.ha1 AzoFert + 120 kg N.haES

N (%)

P (%)

0.36 c 2.57 b 3.37 a 3.41 a


0.41***0.05*

0.36 c 0.43 b 05 a 0.52 a 0.05***

K(%) 1.18c 1.92 b 2.05 a 2.06 a 0.17***

Medias con letras comunes no difieren significativamente para p<0.001.

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determinados; los porcentajes de NPK fueron superiores en lasmenos de la cantidad que se aplica segn plantas inoculadas en la siembra con respecto al testigo de cultivo.

produccin. Se demuestra la eficiencia de Azospirillum al no existir El efecto de la inoculacin de Azospirillum s -1 diferencias entre las dosis de 90 y 120 kg N.ha . total aumenta generalmente con elcrecimiento de Con este resultado se demuestra que las plantas inoculadasun rango de 10-30% (Bashan y Vzquez, 2000). E con algn microorganismo que estimule su crecimiento y desarrollo,un incremento del rendimiento con respecto altesti presentan una mayor capacidad para absorber ms eficientemente 11%. el agua y los nutrientes del suelo a travs del estmulo provocado Dos variables bsicas que contribuyen en el sistema radical, que se evidencia en el estado nutricional de rendimiento a la inoculacin son los cultivares las plantas. respuestas diferentes a la inoculacin- y al Segn Bashan (1998), Azospirillum sp. provoca una absorcinnitrogenada; por lo tanto, la inoculacin de Azos ms efectiva de los nutrientes, lo que explica la acumulacin de derarse un sustituto parcial de la fertilizacin n compuestos nitrogenados en las plantas sin existir una aparenteHartmann, 1998). fijacin biolgica de nitrgeno. La posibilidad de utilizar microorganis Efectos de los tratamientos en el rendimiento agrcola y sus favorezcan la nutricin y desarrollo de las p componentes alternativas para incrementar el rendimiento y En la tabla 4 se muestra el efecto de los tratamientos en eldel uso de los fertilizantes minerales; algunos rendimiento agrcola y algunos de sus componentes; se aprecia nismos se vinculan con la fijacin biolgica de que en el tratamiento 4, en el cual se inocul el producto AzoFert, al suelo cantidades variables de nitrgeno. combinado con 120 kg de nitrgeno, se produjo un estmulo Efectos en la colonizacin rizosfrica de pla positivo en cada uno de los indicadores evaluados. Este resultado En la figura 4 se puede apreciar la dinmica 1 permite adems la disminucin de 30 kg de N.ha- en el cultivo,rizobacteria en la evaluacin realizada en el m demostrndose as la eficiencia de esta rizobacteria, a partir de una (0DDT); se muestra sustitucin del fertilizante, que representa un 20%
Tabla 4. Efectos de los tratamientos en el rendimiento y sus componentes

Tratamientos Testigo absoluto Testigo produccin 1 AzoFert + 90 kg N.ha1 AzoFert + 120 kg N.haES

Flores/planta (No.)

Frutos/planta Masa promedio/ (No.) frutos (g)


86.5 c 93.3 a 90.8 b 93.4 a 0.10***

Rendimiento (t.ha-1) 17.41 c 31.53 b 35.12 a 30.64 b 0.19***

11.3c 6.5 c 11.6 b 11.6b 19.3 a 13.4 a 15.5 b 30.64 b 0.12*** 0.10***

Medias con letras comunes no difieren significativamente para p<0.001.

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radicales, existir quimiotaxis positiva o n Se demuestra la eficiencia de Azospir rizobacteria que estimula positivame desarrollo y rendimiento en el cultivo del alta colonizacin. Este resultado apoya e de esta especie como una alternati produccin del cultivo del tomate. CONCLUSIONES De acuerdo con los resultados obtenidos siguientes conclusiones: El gnero Azospirillum se destac Figura 4. Influencia de la inoculacin con Azospirillum en la colonizacin rizosfrica (DDT: frecuencia de aparicin en la rizosfera de das despus del trasplante). Se demuestra la efectividad agrobi que la mayor colonizacin se obtuvo en los tratamientos inoculados y brasilense a partir del estmulo pos -1 suplementados con 30 kg N.ha , lo que difiri estadsticamente (p<0.001) crecimiento y estado nutricional de las p de los tratamientos donde se encuentra la poblacin nativa del suelo (T1 rendimiento agrcola del cultivo; y se e y T2). A partir de los 30 DDT, y correspondiendo con la etapa de nivel poblacional en la rizosfera de las pla floracin-fructificacin del cultivo, se obtuvo que la inoculacin con esta BIBLIOGRAFA 1 especie suplementada con 120 kg N.ha- (T4) fue la que mostr mayor Bacilio-Jimnez, F. J. 2001. Endophytic bacteria in colonizacin radical, con diferencias altamente significativas de los colonization of roots by Azospirillum brasile 7 1 restantes tratamientos, alcanzando una poblacin de 10 UFC.g- de Biochemistry. 33(2):167-172. suelo, lo cual puede considerarse un valor ptimo, en un momento Bashan, Y. 1989. Nonespecific responses in plant growth importante del desarrollo del cultivo en que son altas las necesidades of noncereal crops plants to inoc nutricio-nales de las plantas para la formacin de la produccin final. brasilense Cd. Canadian Journal of Botany. 67(5): 1 En la evaluacin realizada a los 60 das (DDT) la poblacin de esta
Bashan, Y.; Levanony, H. 1990. Current

status

rizobacteria comienza a declinar, coincidiendo con la muerte de las technology: Azospirillum as a challenge for agricul plantas y de su sistema radical, el cual constantemente le aporta a estas 591-608. bacterias gran nmero de sustancias orgnicas (azcares y aminocidos) Bashan, Y.; Holgun, G.; Ferrera-Cerrato, R. 1996. Int en forma de exudados necesarios para su metabolismo. La alta poblacin microorganismos benficos. II. Bacterias 7 encontrada (10 ) indica el grado positivo de quimio-taxis entre losrizosfera. Terra. 14(2): 195-209 exudados radicales y la bacteria. Al respecto, Velazco (2001) plantea que Y.; Holgun, G. 1997. Azospirillum-plantrelati Bashan, la presencia o no en la rizosfera de un cultivo conformando un ecosistemaphysiological advances. Canadian Journal of Microb dado, est influida por diferentes factores abiticos como son el tipo de Y. 1998. Inoculants of plant growth - prom Bashan, suelo, el grado de humedad, la fertilizacin aplicada y la temperatura. agriculture. Biotechnology Advances. 16: 729-770. Tambin influyen marcadamente la composicin del hbitat comoBashan, una Y. 1999. Interaction of Azospirillum spp. in soil: a unidad biolgica de las relaciones microbianas que se establecen, ya que 246-256 puede existir afinidad o no, y, dependiendo de los exudados Bashan, Y.; Vzquez, P. 2000. Effect of calcium carbona

levels on mortality of five spe-cies of Azospirillum soils.Biol. Fertil. Soil. 30: 450-459. Burdman, S.; Jurkevitch, E.; Okon, Y. 2000. Recent adv growth promoting rhizobacteria

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