INSTITUTO TECNOLGICO SUPERIOR DE CALKINI EN EL

ESTADO DE CAMPECHE ASIGNATURA: INGENIERA EN BIRREACTORES CLAVE: BQC- 051 7 CARRERA : INGENIERA BIOQUM ICA SPTIMO SEMESTRE ING. OS DOLORES LIRA MAAS. 1.!.1 E"#$%&'() $ # * ' + ,$ -*$-')'$. #( )'-*(/'+.( 0 1(*)+-'2. ,$ 3*(,&-#(". Cuando se siembran microorganismos en un medio de cultivo apropiado, estos comienzan a multiplicarse a expensas de los nutrientes hasta que, finalmente, el crecimiento se detiene por agotamiento de alguno de los componentes del medio de cultivo (sustrato limitante) o bien por acumlacin de inhibidores. Un cultivo de esta naturaleza, en el cual una cierta cantidad de microorganismos es sembrada en un volumen dado de medio de cultivo, se conoce como Cultivo en batch , su empleo es muy frecuente peso no es el nico, ya que existen otros m!todos para cultivar microorganismos, por e". el #atch alimentado y el Cultivo continuo . Cultivo en #atch $a evolucin del cultivo en el tiempo, sigue una curva t%pica la cual recibe el nombre de &curva de crecimiento en batch'. $os sucesos que tienen lugar durante la misma pueden separarse en cuatro fases perfectamente diferenciables. (n primer lugar existe una fase donde pr)cticamente no hay divisin celular pero s% aumento de la masa individual de los microorganismos ( fase &lag ' o fase de retardo). $e sigue una etapa donde el crecimiento ocurre a velocidad espec%fica ( ) m)xima y constante * m (fase exponencial ). +l final de esta fase se alcanza la m)xima concentracin microbiana. ,osteriormente hay un r)pido per%odo de desaceleracin donde - y se entra en la fase estacionaria la cual es causada por agotamiento de alg n nutriente (el sustrato limitante) o bien por acumulacin de inhibidores. .urante esta fase la concentracin microbiana (o de biomasa) permanece constante. /inalmente se llega a una ltima etapa donde la concentracin de biomasa disminuye por autolisis o como consecuencia del metabolismo endgeno ( fase de decaimiento ). $a duracin de cada una de estas fases es funcin del microorganismo en estudio y de la composicin del medio de cultivo. (n particular la fase lag depende adem)s de la fase de crecimiento en que se encuentran las c!lulas en el momento de ser sembradas y de la composicin del medio de cultivo en que fueron crecidas. 0i !ste es igual a la composicin del medio en que se van a sembrar y las c!lulas est)n en fase exponencial, la duracin de la fase lag, en general se acorta y

puede llegar a desaparecer, lo cual es deseable ya que constituye tiempo perdido. $a descripcin matem)tica (modelado) de las cuatro fases descriptas es sumamente comple"a y escapa a los fines de esta gu%a, por lo que slo veremos una m)s simple que slo contempla la fase exponencial y la estacionaria. .e la definicin de obtenemos rx * . x (12)

donde x * concentracin de biomasa. 3emos visto que var%a durante el cultivo, siendo un valor constante y m)ximo en la fase exponencial ( m ) y nulo en la estacionaria. 4onod ha propuesto una relacin muy simple entre el valor de y la concentracin de sustrato limitante, 0, entendi!ndose por !ste al componente del medio de cultivo que est! en menor proporcin respecto de las necesidades del microorganismo. ,or tanto 0 puede ser la fuente de 5, de C, alg n amino)cido, etc. $a ecuacin es6 * m
S KS + S

(17)

+ 80 se la conoce como Constante de 0aturacin, y da una idea de la afinidad que tiene el microorganismo por el sustrato en cuestin. + menor 80 mayor afinidad. 5ormalmente 80 tiene valores muy peque9os (1- :2 : 1- : 7 g;l) por lo que concentraciones relativamente peque9as de 0 son suficientes para hacer que6 * m =eemplazando la ec. (17) en (12) queda6 r x * m
S .x KS + S

(1<)

(1>)

+l principio del cultivo todos los nutrientes estar)n en exceso, y en particular el sustrato limitante tambi!n, por lo que la ex. (1>) se reduce a (fase exponencial) r x * m x ? o bien6
dx * m . x dt

(1@)

$a ec. (1@) es f)cilmente integrable y si hacemos a t * -? x * x o (concentracin inicial de microorganismos) queda6 ln x * ln x o A m t (1B)

o bien x * x o e m t (1C)

,or tanto en esta fase la concentracin de biomasa aumenta exponencialmente, y tambi!n lo hace r x ya que reemplazando6 r x * m x o e m t + partir de la ec. (1B) se puede calcular el tiempo de generacin del microorganimos (per%odo de tiempo en que la biomasa se duplica) $n Ff haciendo x * 2 x o y nos queda t g *
ln 2

$n F

+ medida que transcurre el tiempo de cultivo, 0 va disminuyendo (y por tanto r x ) hasta que finalmente 0 * - (fase estacionaria ), y rx * lo que implica6 x * $n F cte * x f (2-) x f * concentracin final de biomasa. 0i graficamos ln x vs. t se obtiene un gr)fico como el de la fig.
t$ tiempo E max

(1D)

.e la fase exponencial se calcula m mediante la ecuacin (1B). $a duracin de la fase lag, t $, se puede calcular del gr)fico, o bien haciendo una correccin en la ec. (1B). ln x * ln x o A m (t : t $) 0i tomamos un valor cualquiera de x que corresponda a la fase exponencial, x e , podemos calcular t $. l x ln e t$ * te : m xo Consumo de 0ustrato 3emos visto dx dx / dt rx = = = ds ds / dt rs q s por tanto rs *
rx yx

que

el

rendimiento

se

defin%a

como

yx

(22)

reemplazando en la ec. (22) la ec. (1>) queda6 rs *

m S . . x yx k S + S

(27)

+ medida que 0 tiende a cero, r s tambi!n. (n fase exponencial ser) 0>> G s y adem)s x estar) dado por la ec. (1C), por tanto6 ds x e = m o dt yx 0i a t * - es 0 * 0o implica6 0 * 0o :
xo m t e 1 yx

mt

(2<)

(2>)

$a ec. (2>) da la variacin de 0 en funcin de t durante la fase exponencial. 0i se conoce de antemano el rendimiento y x (o Hx ) y las concentraciones iniciales de sustrato y biomasa, es f)cil estimar el valor de x f ya que6

x * :Hx . 0 x : x o * Hx (0 : 0o )

(2@) (2B)

0i 0 es el sustrato limitante, se tendr) que para x * x f ser) 0f * -, por tanto6 x f * x o A Hx. 0o (2C)

$a ec. (2B) permite calcular 0 para un x dado (o viceversa) en cualquier parte de la curva de crecimiento, siempre y cuando Hx (o y x ) se mantenga constante. +lternativamente la ec. (2B) puede emplearse para verificar si tal supuesto se cumple ya que la gr)fica de (x : x o ) en funcin de (0 o : 0) deber) a"ustarse a una recta. .e todos modos siempre es posible calcular un rendimiento global , independientemente de las variaciones que pueda tener durante el cultivo, empleando slo valores iniciales y finales6 Hx * : Consumo de I2 3emos visto que realizando un balance entre la composicin de los gases que ingresan y salen del biorreactor se puede calcular r O 2 . Con este valor y el de la concentracin de biomasa, x, se puede calcular a r distintos tiempos el valor de q O 2 = O 2 , con lo cual tendremos una idea de x lo que ocurre con la capacidad respiratoria de los microorganismos durante el cultivo. +l respecto es til estudiar cu)les son las posibles causas de variacin de q O 2 .

( xf xo ) ( S f So )

(2D)

1) 0ea y x;o * consumido

rO 2 dt

(7-)

y x;o * rendimiento de biomasa base a I 2

+l igual que en la ec. (21) podemos hacer6 y x;o * rx = rO 2 q O 2 (71)

de donde reemplazando por la ec. (17)

q O2 =

m S yx / o k s + S

(72)

(n fase exponencial es 0>> G s y

m = q O2m y x/ o

q O2 =

(77)

es decir que en esta fase q O 2 se mantiene constante y con un valor m)ximo. + medida que 0 disminuye, q O 2 tambi!n hasta que virtualmente se hace nulo en la fase estacionaria. (sto es particularmente v)lido cuando el sustrato limitante es la fuente de carbono y energ%a, ya que al agotarse !sta, los microorganismos se quedan sin &combustible ' y por tanto el consumo de I2 cesa. 5o ocurre lo mismo cuando el sustrato limitante es por e". la fuente de nitrgeno, pues si bien cuando !sta se agote se detendr) el crecimiento, nada impide que los microorganismos sigan respirando ya que cuentan con &combustible ' en exceso. 2) Itra causa que afecta el valor de q O 2 es la concentracin de I 2 disuelto. ,or analog%a con la ecuacin de 4onod, se ha propuesto la ecuacin6
q O2 = q O2 m C ko + C

(7<)

donde C * concentracin de Is disuelto. +l igual que G s, se encuentra que G o es peque9o, y en general valores de C del orden de -,C mg;l (1-J de saturacin) son normalmente suficientes para que q O 2 * q O 2 m. + la concentracin de I 2 disuelto por encima de la cual el valor de q O 2 se mantiene constante, se la conoce como concentracin cr%tica (C c ).