UNIVERSIDAD AUTNOMA DEL ESTADO DE MXICO FACULTAD DE QUMICA QUMICO FARMACUTICO BILOGO Laboratorio de hematologa Diana sarahi Trujillo

Bentez

uso de Farmacogenmica en el tratamiento de enfermedades infecciosas

No se nos ha escapado a nuestra atencin que cunto ms exploramos el genoma humano, ms nos queda por explorar. "No cesaremos de explorar. Pues al final de toda exploracin llegaremos donde empezamos, y conoceremos cul es nuestro lugar por primera vez" T. S. Elliot.

Si algo qued marcado en el siglo XIX es sin duda el salto cientfico de haber codificado casi en un total el genoma humano y el genoma de muchos organismos ms, y claro est que quienes desencadenaron este fenmeno fue desde luego el padre de la gentica Gregorio Mendel y posteriormente el gran descubrimiento de la estructura del ADN por Watson y Crick, desde entonces un alto porcentaje de la investigacin se ha direccionado hacia este nuevo mundo de conocimiento por explorar. La velocidad de las investigaciones y la produccin de conocimiento sobre el actuar del ADN de los organismos han sido elevadas porque en menos de un siglo el avance que se ha logrado es claramente de admirar. En algunos mbitos y campos disciplinares ya se est haciendo uso de este conocimiento aplicndolo a tecnologas que permiten incrementar rendimientos de produccin, mejorar la apariencia, resistencia y estabilidad de productos de origen natural y dems, pero en el mbito clnico y farmacolgico an se encuentra en proceso de investigacin los posibles usos tecnolgicos que se puede dar al conocimiento de la estructura y funcionamiento del material gentico en los organismos, dirigido a la prevencin, tratamiento y manipulacin de enfermedades con las que ha lidiado en relativa desventaja el ser humano. Una de las enfermedades que cabe resaltar son las infecciones; ya que la humanidad ha luchado contra ellas por un largo periodo de la historia, con sospecha de que la lucha comenz casi al mismo tiempo de la existencia del hombre, y despus de tantos aos de evolucin an siguen siendo un problema de alto impacto, ya que aunque se ha mejorado la calidad de vida, los hbitos de higiene y se han implementado una serie de productos que pueden eliminar un alto porcentaje de microorganismos, esto s ha reducido a morbilidad de infecciones en humanos, pero el porcentaje de personas que se enferman por infecciones an sigue siendo muy elevado, El total de la poblacin en algn momento de su vida ha sufrido alguna infeccin, esto es por las infecciones son un evento natural de nuestro organismos en adaptacin con el medio ambiente, cada vez que nos exponemos a un microorganismo nuestro sistema inmune lo combate y no busca solo su eliminacin, sino genera la produccin de anticuerpos especficos para que en una futura exposicin, se inhiba de forma inmediata el microorganismo sin permitirle generar dao. En un arma de dos filos en los ltimos dos siglos se ha dado el desarrollo en el rea farmacutica de la produccin de antibiticos, componentes de ndole orgnica, principalmente sintetizados por

microorganismos que tiene la propiedad de inhibir algn mecanismos de desarrollo de otro microorganismo; que al momento de su descubrimiento y comercializacin han sido muy usados por pacientes que presentan infecciones principalmente de ndole bacteriana, micotica, y parasitaria, pero la desventaja que tienen estos frmacos que de no ser administrados en las dosis y tiempo adecuado, los microorganismos a los cuales atacan generan mecanismos de resistencia, que hacen resistentes a los efectos, y los ltimos aos se han documentado cada vez ms cepas de microorganismos con un amplio espectro de resistencia a casi el total de la gama de antibiticos que existen. Por esta razn los tratamientos farmacolgicos a base de antibiticos parecen ser cada vez ms ineficaces en el ataque a los microorganismos, y es aqu donde se ha generado un enfoque de las investigaciones genticas para crear nuevas formas teraputicas en base al genoma tanto de los microorganismos como en especfico de cada ser humano que padece la enfermedad para generar tratamientos especficos que eviten la desventaja de las innumerables reacciones adversas y lo ms importante que puedan garantizar una respuesta benfica del paciente. Uno de los principales objetivos que se plantea la farmacogenmica en el tratamiento de las infecciones es consiste en crear un mapa que permita predecir cul es la mejor alternativa teraputica y la dosis ms adecuada de un frmaco en un determinado paciente segn sus caractersticas genticas, lo que se dice de forma muy comn recetar frmacos a la carta. El planteamiento de tratamiento especfico se debe que en una reaccin infecciosa donde el encuentro no equilibrado entre el agente (bacteria, virus, protozoario, hongos) y el potencial hospedador, siendo dicho potencial el que determina la manifestacin o no del cuadro clnico que llamamos enfermedad o patencia y la manera como responder a esta invasin, los cuales son mecanismos complejos y est determinada por mltiples factores; como la presentacin de antgenos, la respuesta tisular y humoral, y los cuadros inflamatorios dependientes en s del fenotipo del hospedador; de igual forma no todas las personas metabolizan los frmacos con la misma eficiencia, algunos muestran cuadros de rpida respuesta, mientras que en otros no hay respuesta. En una poblacin humana dada, la reaccin de los individuos a un patgeno puede variar, y como ejemplos extremos de esta variacin tenemos al virus Epstein-Barr el cual puede pasar totalmente asintomtico, o en ocasiones producir severas erupciones o muerte, o el virus HIV, el cual es letal o produce enfermedad en el 90 % de los casos. Como un ejemplo paradigmtico de esta variacin est la Sra. Berenice Soares de Moura en quien Carlos Chagas aisl por primera vez en 1909 el Trypanosoma cruzi cuando esta tena solo dos aos de edad. A Berenice se le someti a un riguroso anlisis en el ao 1961 y a pesar de presentar un xenodiagnstico positivo no mostraba ningn otro signo de la enfermedad. A pesar de albergar en su sangre al temido protozoario Berenice muri de causas naturales a los 92 aos. Un tipo de enfoque de las investigaciones en farmacogenmica en infecciones es el anlisis de las modificaciones genmicas en los casos particulares antes mencionados de los individuos que logran resistencia a determinadas infecciones y no son susceptibles a dao del microorganismo, que tienen una tendencia de causar patogenecidad cada vez que infecta, ejemplo de ello es la resistencia a malaria que

muestran los individuos heterocigticos a la anemia falciforme, o los portadores de una mutacin del gen para el receptor la citosina CCR5 que los hace inmune a las infecciones por el virus HIV. sin embargo este tipo de asociaciones monognicas son raras, por lo tanto el nmero de enfermedades infecciosas para las cuales se han descrito altas correlaciones con marcadores genticos de susceptibilidad o resistencia es limitada. Estas limitaciones al anlisis de mltiples genes en una poblacin hacen sumamente difcil el descubrir dichas correlaciones. Sin embargo la aparicin de tecnologas de gran formato (high-output) derivadas de los estudios de la genmica est permitiendo realizar estudios comparativos que agrupan a un alto nmero de marcadores genticos. Dentro de estas tcnicas la ms ampliamente usada es la llamada SNP y es la abreviacin para Single Nucleotide Polymorphisms. El trmino SNP se refiere al hecho de que todos los humanos presentamos variantes nucletidicas, muchas de ellas no asociadas con mutaciones que ocurren tanto en regiones codantes como no codantes. Para que un cambio nucletido pueda ser considerado con un SNP necesita tener una frecuencia de al menos 1% dentro de la poblacin humana. Hasta la fecha se han registrado abundantes SNPs, aproximadamente en promedio un SNP por 1000 pares de bases del genoma humano. Esto hace de los SNP importantes marcadores que sirven de referencia para establecer correlaciones entre una regin gentica y un posible sndrome o enfermedad. En la actualidad existe una gran bsqueda de marcadores genticos de susceptibilidad, pero esta tarea no es fcil, muchas de las asociaciones reportadas por algunos investigadores no han sido verificadas por otros. Una aproximacin para orientar esta bsqueda consiste en examinar genes de susceptibilidad a otras enfermedades con correlaciones firmes y que compartan vas bioqumicas o inmunolgicas con la nueva enfermedad que se quiere estudiar. Otra forma de orientar las investigaciones farmacogenmicas es estudiando genes que estn involucrados en procesos inflamatorios, enfermedades auto-inmunes o de inmunodeficiencia; ya que las enfermedades infecciosas est relacionadas con estos fenmenos. Por ejemplo se encuentra reportado en referencia de artculos que han logrado determinar que una variante del gen para la tiroxina fosfatasa linfocitaria (PTPN22) est correlacionada con enfermedades auto-inmunes tales como diabetes mellitus tipo 1, artritis reumatoides, y enfermedad tiroidea auto-inmune, parece tambin conferir susceptibilidad a infecciones bacterianas, infecciones muy invasivas por neumococos y enfisema. Tambin se reportan estudios donde establecen asociaciones generadas en modelos animales como el ratn, para luego extrapolarla a humanos. Uno de los genes identificados de esta manera ha sido Nramp1 o SCL11A1 el cual codifica para un transportador de iones divalente de la membrana fagolisosomal del macrfago, y han asociado este gen ha con susceptibilidad a Mycobacterium bovis en el ratn pero tambin est asociado a susceptibilidad a infecciones por Salmonella y Leishmania. En estos estudios de igual manera nos comentan que estas asociaciones han sido parcialmente confirmadas en humanos. Obviamente esta estrategia que ha sido productiva principalmente para genes asociados a la susceptibilidad a tuberculosis, enfermedad que afecta a ambos organismos, podra no ser til para otros agentes infecciosos como el HIV.

Recientemente se ha desarrollado un gran inters en los genes que intervienen en los procesos de inmunidad innata, este tipo de inmunidad involucra: el reconocimiento de molculas de la superficie que

definen lo que es propio de lo que es ajeno; la activacin de mecanismos rpidos de destruccin de los agentes patgenos. Existen receptores en la superficie de las clulas humanas que juegan un papel fundamental en la iniciacin de la respuesta inmune innata, entre ellos lectinas que al entrar en contacto con el microbio disparan respuestas rpidas, como lo es la activacin del complemento. Existen estudios donde nos muestran que individuos que tienen mutaciones en el gen que codifica estas lectinas muestran mayor susceptibilidad a sufrir infecciones por neumococos, tambin nos mencionan que de igual forma se genera en ellos mayores efectos colaterales en el tratamiento con frmacos. El artculo A variant in the CD209 promoter is associated with severity of dengue disease de Sakuntabhai A, Turbpaiboon C, Casadmont I, Chuansumrit A, Lowhnoo T, Kajaste-Rudnitski A, et al, nos menciona que una lectina especifica de las clulas dentriticas no-integrina ICAM-3 que sirve como receptor a varios patgenos como HIV, dengue y Mycobacterium tuberculosis, al sufrir mutaciones en el promotor del gen CD209 causan disminucin en su expresin, lo cual viene acompaado de una mayor resistencia a estos patgenos. El campo de investigacin de los genes que codifican los receptores celulares se ha convertido en un punto clave para el estudio de los procesos moleculares que intervienen en la interaccin de los microorganismos y el organismo de cada ser humano, debido a que estn directamente relacionas en el rumbo que toma la respuesta ya sea de resistencia o de sensibilidad, y no tan solo para procesos infecciosos sino tambin de homeostasis en los procesos carcinognicos; los receptores de membrana son la forma en como las clulas se comunican con su entorno, por lo tanto si uno de estos cambia por mutaciones genticas, dicha interaccin tambin se ver afectada ya sea a favor o en contra, la labor ahora consiste en como manipular este tipo de modificaciones genticas a nuestra conveniencia y dirigirlas a aplicaciones en tratamientos. Puesto que generar modificaciones genticas en los seres humanos resulta ser un camino algo complicado, ms no imposible porque ltimas investigaciones estn haciendo uso de estos receptores especficos justo para inducir el efecto farmacolgico, un ejemplo de hecho es lo anlogo a las vacunas inyectar el agente patgeno atenuado o muerto, para que se genere inmunidad sin daar, entonces porque utilizar metodologas similares cuando se presente una infeccin, es porque el microorganismo esta interaccionando con el hospedero, porque no mandar agentes patgenos que interacciones con las clulas, pero solo la estructura proteica y anexo a este se encuentre el frmaco. Otra ruta que se ha optado por tomar que es menos polmica que interferir con el ADN humano es conocer y manipular el ADN de los microorganismos que generan las infecciones labor que tampoco ha sido fcil, pero sin duda se torna bastante interesante y es inevitable que su complejidad y los datos que arrogan sean cautivantes al grado de solo generar motivacin para seguir investigando. Existen varias tcnicas para reconocer las partculas de ADN de un microorganismo patgeno de forma muy especfica la ms conocida y de econmico uso, en comparacin con otras tcnicas es la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) permite identificar fracciones de ADN de micobacterias como M. tuberculosis. Otras nuevas tcnicas las cuales se encuentran en su mayor esplender por su reciente aparicin son igualmente rpidas y sensibles, son denominadas como la de las huellas digitales, basada

en el polimorfismo de las enzimas de restriccin de algunas bacterias con patrones de nucletidos caractersticos. Otro aspecto fundamental en relacin con el patgeno es reconocer la carga gentica viral, algo ampliamente estudiado en portadores de SIDA y sus variadas respuestas a los tratamientos. Mediante electroforesis se amplifican enzimas de los cidos nucleicos o de sus seales de transmisin, donde se han observado de 200 a 10 mil copias de ARN del virus en un milmetro cbico de plasma. Esto tambin sirve para determinar la resistencia de ciertos frmacos en pacientes no inmunocomprometidos pero con grandes cargas virales no identificadas. Un ejemplo de esto son algunas formas de pnfigo relacionado con partculas virales, como el fogo selvagem (fuego fatuo en portugus) o el pnfigo vulgar, resiste nte a prednisona. Un detalle interesante es el estudio de los procesos por los cuales las bacterias se pasan informacin gentica mediante plsmidos que son segmentos de ADN que tienen en el citoplasma; cuando una bacteria esta por decirlo de cierto modo muriendo a causa de algn frmaco, variacin en la temperatura o por accin del sistema inmune, esta bacteria no tuvo el tiempo de sintetizar componentes que le pudieran ayudar a sobrevivir, pero si genero informacin gentica que transmite a otra bacteria mediante proceso de conjugacin haciendo uso de pillis. Este detalle es bastante interesante porque si se estudian los receptores a pillis que tienen las bacterias se puede hacer uso de microorganismos genticamente modificados con plsmidos que ms que hacer ms resistente a la bacteria la haga ms sensible, lo cual tiene como desventaja e momento adecuado en inducir la formacin de dichos plsmidos para que no inhiba el crecimiento del mismo microorganismo, para con esto dar tratamiento con el mismo microorganismo, o simplemente utilizar los receptores de pillis como sitos dianas de los frmacos, es donde se tiene que disminuir la distancia entre genmica y desarrollo farmacutico, puesto que el tratamiento a la carta es lo que marca el estilo que tomara el cuidado de la salud en un futuro cercano o presente un poco lejano. Todava tenemos sitios desconocidos en este nuevo mundo que comenzamos a descubrir que es el ncleo de las clulas, no falta camino por recorrer, pero vamos con velocidad y entusiasmo, lo cual da esperanza de poder utilizar dicho conocimiento para generar un mundo mejor a las futuras generaciones, y a pesar de que el tema de gentica aun genera controversia con factores religiosos, no podemos olvidar que en algn momento la astronoma, y la medicina, que ahora vemos de forma convencional tambin generaron la misma controversia. La clave es actuar siempre con el objetivo central de investigar y realizar tecnologas que mantengan un equilibrio entre mejorar la calidad de vida de los seres humanos pero sin afectar el entorno ecolgico y social. Hacer ciencia es fcil, utilizar adecuadamente los conocimientos de la ciencia, es donde se genera el verdadero problema, puesto que desgraciadamente por cada uso bueno que se le encuentra a dicho conocimiento, tambin se encuentran hasta 3 malos usos. REFERENCIAS:

Castillejos, L. M., Garcia S. M. C., Torres E. L., Perez P. J. Aspectos Metodolgicos y ticos d e la farmacogenmica en los ensayos clnicos aleatorizados RIC Etica y Medicina. 2006. 58(5):512 -524. Frias A. G., Sagrario H.O., Jimenez A. J., Moreno D. L., Ruiz C. R. Farmacogenmica y sus aplicaciones clnicas Mxico. Dermatlogia. 2007. 51(3): 99-111 Ramires J.L. Farmacognomica en enfermedades infeccionsas Revista de a facutad de cientcias de la salud. Univesidad de Carabobo. 2007. 11(1): 77-81. Sakuntabhai A, Turbpaiboon C, Casadmont I, Chuansumrit A, Lowhnoo T, Kajaste-Rudnitski A, et al. A variant in theCD209 promoter is associated with severity of denguedisease. Nat Genet. 2005, 37:507-513.