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A replicao do DNA ocorre de forma semiconservativa, iniciada em origens nicas e geralmente ocorre de forma bidirecional, a partir de cada origem

m de replicao. A fidelidade da replicao muito grande, com uma mdia de apenas um erro por bilho de nucleotdeos incorporados aps a sntese e correo de erros durante e imediatamente aps a replicao. A replicao do DNA um processo semiconservativo, pois cada uma das suas molculas recm formadas conserva uma das cadeias da molcula que a originou e forma uma cadeia nova, complementar ao seu molde. A replicao do DNA envolve trs etapas:

Iniciao Ampliao ou alongamento Trmino

Para que a sntese de DNA ocorra, so necessrios dois substratos fundamentais: desoxinucleosdeos trifosfatados e uma juno iniciador: molde. O DNA comea a ser sintetizado pela extenso de extremidade 3 do iniciador. Essa uma caracterstica universal do DNA e do RNA. A fita molde ir orientar qual dos quatro nucleosdeos trifosfatados ser adicionado. As duas fitas possuem uma orientao antiparalela, o que significa que a fita molde para a sntese de DNA tem orientao oposta fita de DNA que est sendo sintetizada. A sntese do DNA catalisada pela enzima DNA-polimerase. Ela utiliza um nico stio ativo para catalisar a sntese do DNA. O pareamento correto das bases necessrio para que a DNA-polimerase catalise a adio do nucleotdeo. Ambas as fitas do DNA so sintetizadas juntas na forquilha de replicao, com orientao antiparalela. Durante o processo de replicao, as pontes de hidrognio so catalizadas e os nucleosdeos livres unem-se a elas, respeitando sempre a regra do emparelhamento: Adenina-Timina, Citosina-Guanina. medida que se encaixam nas cadeias do DNA, vo formando duas novas cadeias, obedecendo a regra da replicao semiconservativa. Atividade autocorretora das polimerases do DNA As polimerases do DNA s adicionam um nucleotdeo cadeia em crescimento se o ltimo estiver corretamente emparelhado ao nucleotdeo correspondente da cadeia molde. Caso isso no ocorra, as polimerases do DNA removem o nucleotdeo da extremidade 3OH livre incorretamente emparelhado. Essa propriedade das polimerases denominada atividade exonucleotdica 3 => 5. Note que ela inversa ao sentido de crescimento da cadeia. A atividade exonucleotdica 3=> 5 das polimerases do DNA um mecanismo autocorretor que permite a elas conferir o ltimo nucleotdeo incorporado, corrigindo seus prprios erros de incorporao medida que se movem ao longo do DNA molde. O que garante s polimerases essa atividade corretora a necessidade de um nucleotdeo corretamente emparelhado cadeia molde para a adio do prximo. Esse

processo de autocorreo importante, uma vez que a taxa de incorporao de nucleotdeos errados alta, da ordem de 1 a cada 10.000 nucleotdeos incorporados. Com a atividade autocorretora, essa taxa de erros cai para 1 a cada 10.000.000. Essa uma das menores taxas de erros conhecida para enzimas. A atividade autocorretora das polimerazes essencial para garantir a alta fidelidade de replicao do DNA e, portanto, a estabilidade gentica no decorrer das geraes, pois um erro de incorporao no corrigido, produz uma mutao. Assim, no fosse o sistema autocorretor das polimerases, a taxa de mutao seria muito maior devido alta frequncia com que nucleotdeos errados so incorporados.
Replicao, Transcrio e Traduo Replicao, transcrio e traduo so processos que ocorrem com os cidos nuclicos e que so essenciais para o funcionamento das nossas clulas. Em tpicos anteriores, j vimos a estrutura geral dos cidos nuclicos, a estrutura do DNA e sua organizao em cromossomos e os diferentes tipos de RNA. Reveja todos esses tpicos para poder compreender melhor os tpicos em seguida.

1) A replicao a duplicao de uma molcula de DNA. Isso ocorre porque nossas clulas esto constantemente em diviso, e como todas as clulas somticas possuem a mesma quantidade de DNA, precisamos sempre duplicar nosso DNA antes da clula se dividir.

O primeiro passo o rompimento das ligaes de hidrognio entre as bases nitrogenadas dos nucleotdeos, permitindo a separao das duas fitas. Esse processo auxiliado pela enzima DNA helicase. E como a DNA helicase sabe onde ela vai comear a abrir o DNA? Ns possumos em cada cromossomo uma regio denominada origem de replicao, composta por uma sequncia de nucleotdeos que a DNA helicase reconhece. Ento, toda vez que a clula duplica seu DNA, ela comea no mesmo local.

Cada fita de DNA servir como molde para a sntese de uma nova fita de DNA. Esse o segundo passo, quando atuam as DNA polimerases. Essas enzimas ligam nucleotdeos que estavam dispersos no ncleo aos nucleotdeos das fitas de DNA, obedecendo s regras de pareamento entre as bases nitrogenadas. Com isso cada dupla fita de DNA nova formada ser metade antiga e metade nova, e por isso que se diz que a duplicao do DNA semiconservativa. Existem outras enzimas que atuam nesse processo, como as DNA primases que adicionam os primeiros nucleotdeos antes da DNA polimerase, alm de existirem diversos tipos de DNA polimerases. O interessante que as polimerases, alm de adicionarem os nucleotdeos, possuem a capacidade de verificar se acabaram de cometer erros, a chamada atividade revisora. Mesmo com todo esse cuidado, as polimerases erram e causam muitas das nossas mutaes no genoma.

A replicao sempre ocorre em um sentido: 5- 3, isso quer dizer que vai do grupo fosfato de um nucleotdeo (que est ligado ao carbono 5 do acar) para o grupo hidroxila de outro (que est ligado ao carbono 3 do acar). Com isso, a polimerase consegue sintetizar uma cadeia de maneira contnua, mas a outra no (as fitas ficam em sentidos antiparalelos). Esta fita retardada formada aos pouquinhos, e cada fragmento que formado dado o nome de fragmento de Okazaki, que foi o pesquisador que os descobriu.

2) A transcrio um processo onde a informao sai do genoma de DNA para a formao de mRNAs, que comandam toda a maquinaria celular. Como o idioma do DNA e do RNA o mesmo, os nucleotdeos, a informao transcrita, ou seja, copiada.

No caso da transcrio, a enzima que atua a RNA polimerase, que tambm atua no sentido 5-3, mas que no precisa da enzima primase para iniciar a polimerizao. Essa enzima no possui atividade revisora, mas isso no um grande problema, pois um erro em uma molcula de RNA produzir algumas protenas defeituosas, ao contrrio de um erro no DNA. Uma das fitas de DNA aberta serve de molde para a sntese de uma cadeira de RNA mensageiro complementar a fita molde, e que codifica pra um gene que ser expresso na forma de protena. E como a RNA polimerase sabe onde comear? A maioria dos nossos genes possuem regies que controlam sua prpria expresso, os promotores. Os promotores so sequncias de nucleotdeos onde se ligam molculas que inibem ou ativam a transcrio. Serve tambm, como ponto de ligao de um complexo de protenas que auxiliam a RNA polimerase a se ligar e agir.

Um fenmeno interessante o splicing alternativo que ocorre no processamento do mRNA ainda no ncleo. Nesse processo algumas partes no importantes para a protena a ser formada so retiradas (ntrons), bem como permitida a combinao entre o restante do mRNA (xons), formando vrias protenas diferentes a partir de uma mesma molcula de mRNA.

3) A Traduo o processo final de cascata, que ocorre nos ribossomos, livres ou no retculo endoplasmtico. As molculas de RNA so crticas nesse momento, pois so elas que fazem a ponte entre a sequncia dos nucleotdeos no DNA e o idioma das protenas, os aminocidos.

Uma molcula de mRNA j processada exportada para o citoplasma, onde se liga aos ribossomos. Lembre-se que os ribossomos, alm de protenas, so formados por molculas de rRNA. Nos ribossomos, alm do stio para a ligao do mRNA, existem stios para a ligao dos tRNAs, que se ligam aos nucleotdeos do mRNA. No ribossomo ocorre ento a ligao entre os aminocidos de vrios tRNAs diferentes at a formao da cadeia polipeptdica, ou seja, da protena.

Cada trs letras (nucleotdeos) no DNA correspondem a uma letra (aminocido) na protena final, e algumas combinaes diferentes de letras do DNA resultam na mesma letra da protena, como se fossem palavras sinnimas. Por causa desse fenmeno dito que o cdigo gentico degenerado.

As protenas ento seguiro suas funes na clula at serem degradadas. Quando so necessrias novas enzimas, a clula novamente transcreve e traduz.

O por qu de uma das fitas ser chamada de lagging (lenta) e a outra de leading (rpida): pelo fato da molcula de DNA ser formada por duas fitas que correm em sentido antiparalelo, durante a abertura da forquilha de replicao, um dos filamentos vai sendo aberto no sentido 5' 3' e o outro no sentido 3' 5'. Assim, embora a progresso da sntese dessas duas fitas acontea simultaneamente, a medida em que a forquilha de replicao extendida, em uma delas a DNA polimerase sempre ter uma extremidade 3-OH livre para colocar o prximo nucleotdeo (a fita leading). Na outra, de tempos em tempos, ser necessria a sntese de um novo primer, para que ela possa continuar esse processo (a fita lagging) Resposta da 2 Tirar dos textos acima da um e da dois Resposta da 3 T = 26%; A = 26%; G = 24%; C = 24%. Resposta da 4 Letra c transcrio e traduo Resposta da 5

5 ATAAGCGTTAG 3 3 TATTCGCAATC 5 Na transciao a constituio do mRna : Resposta da 6 1.

PROCARIONTES Replicao Realizada no nucleoplasma; Desenrolamento do DNA por atuao de enzimas em uma ponta. Transcrio A molcula de RNA se constitui mo mRNA propriamente dito, sendo em seguida utilizada na sntese de protenas e posteriormente degradada. Traduo Enzimas especficas de iniciao, enlongamento e terminao prprios de procariotos.

EUCARIONTES Realizada no ncleo; Incio em vrios pontos no mesmo momento;

bem mais complexo, ocorrendo uma srie de modificaes do RNA antes que ele possa servir no incio do processo (introns e exons). Enzimas especficas de iniciao, enlongamento e terminao prprios de eucariotos.

Resposta da 7
O cdigo gentico considerado degenerado; isso po rque, para quase todos aminocidos, h uma ou mais trincas que os codifica m. Portanto, a mudana de uma nica base nitrogenada no necessariamente r esulta em substituio do aminocido na protena. Resposta da 8

a) 5 UUU UUU CUU GCU ACU AAA GCC UAA 3 b) 8


c) 3 AAA AAA GAA CGA UGA UUU CGG AUU 5 d) 8 que so tais aminoacidos LIS - LIS - GLU - ARG - FIM - FEN - ARG ILE resposta da 9

a) 5 UUU UUA AAC CA 3 b) 3 ou 4 c) 3 AAA AAU UUG 5 d) 3 ou 4 tal aminoacidos LIS - ASN LEU resposta da 10

O mRNA produzido pela transio em eucariotos uma molcula com muito mais ribonucleotdeos que o necessrio para a sntese de uma protena ou enzima. O hnRNA, aps sua sntese sofre um processamento no qual sero cortadas as sequncias que no estaro no mRNA final (introns). Os segmentos de DNA transcritos que estaro efetivamente presentes no mRNA final so denominados exons. Resposta da 11 Resposta da 12 Resposta da 13 Resposta da 14

Resposta da 15

Como temos apenas a sequncia do RNA mensageiro, podemos comear determinando a sequncia da fita de DNA que lhe serviu de molde (A). Tendo em vista que o mRNA desse exemplo corre no sentido 53, a fita de DNA que lhe serviu de molde tem que ser aquela que corre no sentido 35.

Tambm devemos nos lembrar sobre a necessidade de complementariedade entre as bases do DNA/RNA. Ou seja, para termos uma adenina no mRNA, o DNA precisa ter uma timina, e assim por diante. Lembrando que nos RNAs a timina substituda pela uracila. Nesse ltimo caso, se no mRNA foi incorporada uma uracila, por que no DNA molde havia uma adenina. Nesse exemplo tambm j podemos determinar a sequncia de

aminoacidos do peptdeo (B). Lembrando que a sequncia de nucleotdeos do mRNA (os cdons deste) quem determina a sequncia peptdica.

Feito isso, podemos determinar a sequncia da fita complementar da molcula de DNA (C) e da sequncia do anticdon do tRNA (D), que a regio do tRNA que permite o seu pareamento com o cdon do mRNA. Novamente, sempre pensando no fato que essas bases precisam ser complementares (G=C e A=T se for DNA, ou G=C e A=U se for entre RNAs, conforme mostrado pelas setas verdes):

Resposta da 16
o

O stio promotor a regio da molcula de DNA que informa o local em que um determinado gene se origina. O stio promotor composto por sequncias especficas de nucleotdeos que so reconhecidas pelas enzimas responsveis pela sntese de RNA. depois dessa sequncia que uma molcula de RNA comea a ser sintetizada. Por outro lado, a regio finalizadora contm uma sequncia nucleotdica tambm especfica, que indica onde a transcrio da molcula de RNA dever ser encerrada.

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